Характеристика естественных регуляторных Т лимфоцитов и их молекулярного маркера FOXP3 у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.08, кандидат наук Ветрова, Анна Дмитриевна

• Ветрова, Анна Дмитриевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Ветрова, Анна Дмитриевна

ОГЛАВЛЕНИЕ..............................................................................................................2

ВВЕДЕНИЕ.....................................................................................................................4

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Экология и иммунитет часто болеющих детей.............................10

1.2. Естественные регуляторные Т клетки: происхождение, свойства и функции......................................................................................................14

1.3. Участие естественных регуляторных клеток в нормальных иммунных процессах:

1.3.1. формирование иммунного ответа......................................20

1.3.2. развитие иммунологической толерантности........................21

1.4. Роль естественных регуляторных Т-клеток в патогенезе заболеваний..........................................................................22

1.5. Перспективы практического применения исследования регуляторных Т клеток в педиатрии............................................................25

Глава 2. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика пациентов, включенных в

обследование........................................................................................................29

2.2. Материалы и методы исследования:

2.2.1. Реактивы, расходные материалы и

оборудование.............................................................................................40

2.2.2. Фенотипический анализ клеток на проточном цитофлуориметре......................................................................................41

2.2.3. Фракционирование лимфоцитов при помощи иммуномагнитных микробус....................................................................................................42

2.2.4. Оценка пролиферативного ответа.................................................43

2.2.5.0ценка экспрессии мРНК БОХРЗ методом полимеразной цепной реакции.......................................................................................................43

2.3. Программное обеспечение..........................................................................46

2.4. Методы статистической обработки...........................................................46

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ НАБЛЮДЕНИЙ

3.1. Результаты обследования детей, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки...............................................................................................47

3.2. Результаты обследования детей, проживающих на экологически чистой

территории.....................................................................................................................61

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ............................................................75

Глава 5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ:

5.1. ВЫВОДЫ...............................................................................................................92

5.2. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ...........................................................94

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ........................................................................................95

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.........................................................................................97

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика естественных регуляторных Т лимфоцитов и их молекулярного маркера FOXP3 у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования

Опасные факторы окружающей среды ответственны за целую четверть всего бремени болезней в мире и более чем за треть бремени болезней среди детей. Факторы риска, связанные с окружающей средой, часто взаимодействуют, а их последствия усугубляются неблагоприятными социальными и экономическими условиями. Надлежащим образом ориентированные исследования в этом направлении могут в значительной мере способствовать предотвращению рисков, связанных с окружающей средой в деле сохранения здоровья детей [ВОЗ, 2011].

На примере многих регионов Российской Федерации показано, что сочетанные антропогенные нагрузки на детский организм проявляются увеличением частоты аллергических болезней [Д. А. Безрукова, А. А. Баранов, Л. С. Намазова-Баранова, А. А. Джумагазиев, 2010, 2011], высокой частотой повторяющихся респираторных инфекций и иммунопатологических синдромов. Проблема частых респираторных инфекций у детей, непосредственно связанная с состоянием окружающей среды, продолжает оставаться в центре внимания педиатров [А. А. Баранов и др., 2004; СоЬег Я. е1 а1, 2005; Р. М. Торшхоева, Л. С. Намазова-Баранова, 2006, 2010, 2011, 2012].

Важнейшая особенность детского возраста состоит в существовании критических периодов роста и развития, когда влияние патогенных внешних воздействий на детский организм особенно высоко. К этим периодам, прежде всего, относятся дети до года, дети раннего и дошкольного возраста [Ю. Е. Вельтищев, 1996, 2001; Аксенов И. А., 2008].

С современных позиций, иммунная система является наиболее чувствительной к действию экологических неоднородностей в связи с тем, что в основе развития иммунного ответа лежит интенсивная пролиферация антигенспецифических клеток-предшественников. Такая экологическая восприимчивость делает возможным использовать показатели иммунной системы

как индикаторы воздействия этих факторов на организм ребенка. Сегодня создана стандартная и унифицированная методика оценки иммунологического статуса у взрослого населения, позволяющая установить нормативные параметры основных компонентов иммунной системы в исследуемом регионе [Р. М. Хаитов, А. И. Мартынов, Б. В. Пинегин, А. А. Ярилин, 2009, 2010, 2011]. В педиатрии такого инструмента до настоящего времени не разработано. Прежде всего, не определены нормативные параметры значимых компонентов иммунитета с учетом возрастных периодов дифференцировки и их роли в стабилизации гомеостаза иммунной системы у детей.

Важную роль в предотвращении патологических форм иммунного ответа на воздействие факторов окружающей среды играют регуляторные Т клетки. Наиболее полно изучены естественные регуляторные Т лимфоциты (Treg), маркерами которых служат мембранные молекулы CD4+, CD25+ и внутриклеточный транскрипционный фактор FOXP3. Основной мишенью Treg служат хелперные Т лимфоциты [Sakaguchi S. et al., 1995; А. А. Ярилин, 2006, 2007, 2010, 2011; Yisong Y. Wan, 2010]. Эти Т клеточные подмножества при аллергии у детей исследованы в работах А. Д. Донецковой, А. А. Ярилина [2007, 2009].

Однако в настоящее время нет единых данных о методике проведения иммунологического мониторинга у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки.

Все вышеизложенное определило актуальность настоящего исследования.

Цель исследования:

Определить содержание естественных регуляторных Т лимфоцитов, экспрессию их молекулярного маркера РОХРЗ у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки, и оценить эффективность иммунологического мониторинга.

Задачи исследования:

1. Дать сравнительную характеристику вариабельности значений естественных регуляторных Т лимфоцитов и экспрессии их молекулярного маркера РОХРЗ у часто болеющих детей дошкольного возраста без сопутствующих заболеваний, а также в сочетании с аллергией, проживающих условиях воздействия антропогенной нагрузки и на экологически чистой территории.

2. Изучить влияние медикаментозного лечения (местных и интраназальных глюкокортикостероидов) на содержание С04+СБ25+Р0ХРЗ+ у часто болеющих детей с аллергией в исследуемом регионе.

3. Обосновать использование содержания естественных регуляторных Т лимфоцитов и экспрессию их молекулярного маркера БОХРЗ в качестве показателей для иммунологического мониторинга состояния здоровья детей, проживающих на территориях с различными экологическими характеристиками.

Научная новизна

Впервые исследована структура гематологических показателей у детей дошкольного возраста - часто болеющих и часто болеющих детей с аллергией, проживающих в условиях антропогенной нагрузки.

Впервые определено содержание регуляторных Т лимфоцитов и экспрессия их молекулярного маркера РОХРЗ в норме у детей дошкольного возраста,

проживающих в экологически чистом регионе и в условиях антропогенной нагрузки.

Кроме того, определено содержание регуляторных Т лимфоцитов и их молекулярного маркера БОХРЗ у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих как в экологически чисто регионе, так и в условиях антропогенной нагрузки.

Выявлены корреляции между гематологическими изменениями и содержанием регуляторных Т лимфоцитов и их молекулярного маркера БОХРЗ у часто болеющих детей дошкольного возраста без сопутствующих заболеваний, а также в сочетании с аллергией, проживающих в условиях антропогенной нагрузки.

Практическая значимость

Полученные данные позволили разработать программу проведения иммунологического мониторинга часто болеющих детей дошкольного возраста и часто болеющих с аллергией, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки.

Клиническим критерием риска развития регуляторной иммунологической недостаточности у часто болеющих детей дошкольного возраста без сопутствующих заболеваний, а также в сочетании с аллергией, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки, является возникновение на фоне аллергических заболеваний гипертрофии лимфоэпителиальной глоточной системы. Лабораторным критерием риска развития иммунологической недостаточности является содружественный лимфоцитоз и увеличение числа регуляторных С04+СВ25Ь1 Т клеток без усиления экспрессии их молекулярного маркера БОХРЗ в группе часто болеющих детей с аллергией.

Выявление детей из группы риска и разработка профилактических программ позволит предотвратить развитие клинически манифестных форм

иммунологической недостаточности у часто болеющих детей дошкольного возраста, проживающих в условиях воздействия антропогенной нагрузки.

Апробация и внедрение результатов работы

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на 3-ем Съезде токсикологов России (Москва, декабрь 2008 г.), XVI Съезде педиатров России «Актуальные проблемы в педиатрии» (Москва, февраль 2009 г.), 4-м Европейском педиатрическом Конгрессе EUROPAEDIATRICS-2009 (Москва, июль 2009 г.), VIII Российском Конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (Москва, октябрь 2009 г.), юбилейной научно-практической конференции «Актуальные вопросы педиатрии и детской хирургии» (Москва, май 2010 г.), Всероссийской научно-практической конференции «Химическая безопасность Российской Федерации в современных условиях» (Санкт-Петербург, май 2010), 5-ой научно-практической конференции «Научно-технические аспекты обеспечения безопасности при уничтожении, хранении и транспортировке химического оружия» (Москва, октябрь 2010 г.), научно-практической конференции «Актуальные вопросы промышленной токсикологии» (Москва, октябрь 2010 г.); XVI Конгрессе педиатров России с международным участием «Актуальные проблемы в педиатрии» (Москва, февраль 2012 г.), XVII Конгрессе педиатров России с международным участием «Актуальные проблемы в педиатрии» (Москва, февраль 2013 г.), 6-м Европейском педиатрическом Конгрессе EUROPAEDIATRICS-2013 (Глазго, июнь 2013 г.).

По теме диссертации опубликовано 17 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура диссертации

Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, главы результатов собственных наблюдений, обсуждения результатов исследования, выводов и практических рекомендаций.

Список литературы включает в себя 181 источник, из них 68 работ отечественных авторов и 113 работ зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 33 таблицами и 16 рисунками.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Экология и иммунитет часто болеющих детей

Дети представляют будущее, и обеспечение их здорового роста и развития должно быть одной из важнейших задач общества во всех странах.

В силу своих возрастных особенностей, они являются наиболее уязвимыми в отношении негативного воздействия антропогенной нагрузки [5, 6, 7].

В последние десятилетия, несмотря на значительные достижения в совершенствовании методов диагностики и лечения, отмечается снижение уровня здоровья детей, проживающих в условиях антропогенной нагрузки (мегаполисы, промышленные города) [31, 38, 40, 48, 49]. Это обусловлено влиянием экзопатогенных факторов и высоким уровнем стрессов, приводящих к снижению резистентности детского организма. В условиях развития технического прогресса и урбанизации это влияние возрастает в связи с увеличивающимся загрязнением воздуха, воды, почвы и других объектов внешней среды выбросами транспорта, промышленных предприятий [36, 52, 63, 64]. По мере повышения концентраций загрязняющих веществ в окружающей среде, закономерно возрастает число детей в популяции, реагирующих на их присутствие. Экологически неблагополучные территории характеризуются высокой частотой рецидивирующих респираторных инфекций, аллергических заболеваний, хроническими соматическими заболеваниями, соматоформными расстройствами вегетативной нервной систем, отставанием детей в физическом развитии [9, 10, 19, 24, 26, 61].

Проблема частых респираторных заболеваний у детей продолжает оставаться в центре внимания педиатров. До настоящего времени сохраняют актуальность и практическую значимость ключевые положения научно-практической программы Союза педиатров России «Острые респираторные заболевания у детей: лечение и профилактика» [2]:

• Часто болеющие дети (ЧБД) - это не нозологическая форма и не диагноз, а группа диспансерного наблюдения, включающая детей с

частыми респираторными инфекциями, возникающими из-за транзиторных, корригируемых отклонений в защитных системах организма, и не имеющих стойких органических нарушений.

• Программа реабилитации ЧБД в каждом конкретном случае должна быть составлена с учетом этиологических и патогенетических особенностей, а также провоцирующих факторов.

• Комплекс медицинской реабилитации ЧБД включает рациональный режим дня и питания, закаливание, общеукрепляющую и лечебную физкультуру, медикаментозную терапию.

• Медикаментозная иммунокоррекция - только одна из составляющих программы оздоровления часто и длительно болеющих детей, используемая в комплексе с другими реабилитационными мероприятиями.

Опыт отечественных и зарубежных педиатров подтвердил неизменность этиологических факторов [4, 44] и патогенетических основ частых респираторных заболеваний у детей, изложенных в действующем варианте программы Союза педиатров России [14-16, 23, 54].

Базисом развития хронического воспаления - частых респираторных инфекций - у детей является изменение иммунологических механизмов защиты организма. Эти изменения разнонаправлены и могут затрагивать все звенья иммунитета [12, 13].

Изучение иммунного статуса у большинства ЧБД выявили значимые изменения противоинфекционной защиты [27, 29]. Наиболее часто отмечаются сдвиги в системе врожденного иммунитета, представляющего первую линию защиты от патогенов. Так, например, у ЧБД выявлено снижение уровня лизоцима в слюне [4, 105]. Почти у 87% ЧБД отмечается нарушение фагоцитарной функции клеток крови: лейкоциты способны к фагоцитозу, но их мобилизация в ответ на

воспалительные стимулы снижена в 2-3 раза. При этом фагоцит не способен разрушать патоген (незавершенный фагоцитоз), активные формы кислорода и ферменты выделяются во внеклеточную среду, вызывая местное повреждение тканей [107]. У большинства ЧБД также отмечается высокий уровень СЗ-компонента комплемента, что является результатом постоянной антигенной нагрузки на иммунную систему ребенка в условиях незавершенного фагоцитоза [37, 148]. Даже в период клинического благополучия и при отсутствии острой респираторной инфекции (ОРИ) у детей из этой диспансерной группы отмечаются снижение уровня иммуноглобулинов классов G и А (менее 800 мг% и 70 мг% соответственно), достоверно повышенное содержание интерлейкинов, участвующих в хронизации процессов воспаления (ИЛ-6, ИЛ-8), и сниженное содержание интерферонов (ИФН), особенно ИФН-у [17, 158]. Кроме этого, продукция интерферонов лейкоцитами снижается в соответствии с циркадными ритмами в осенне-зимний период, определяя сезонные подъемы респираторной заболеваемости [53, 148].

В исследованиях разных лет у ЧБД выявлялись изменения в адаптивном иммунитете: нарушения функциональной активности Т-лимфоцитов, изменение количественного соотношения субпопуляций Т-лимфоцитов [32, 57, 58]. Исследование иммунного статуса ЧБД позволило выявить отличия этой группы от группы детей, болеющих эпизодически, и констатировать наличие у ЧБД парциальной иммунологической недостаточности [18, 22, 28, 45].

Иммунный дисбаланс поддерживается дисбиотическими нарушениями слизистых оболочек верхних дыхательных путей и кишечника. Развитие дисбиоза кишечника у детей раннего возраста сопровождается истощением резервных возможностей незрелой системы иммунитета детского организма, дестабилизацией гомеостаза. В свою очередь, дисбиоз ротоглотки приводит к нарушению иммунной функции небных миндалин, снижению колонизационной резистентности биотопа, что предопределяет возникновение воспалительных

процессов в слизистой оболочке респираторного тракта и небных миндалинах, способствуя формированию гиперреактивности дыхательных путей и возникновению повторных респираторных заболеваний [25, 159].

Описанные выше сдвиги в иммунном ответе у ЧБД следует трактовать как зависящие от преморбидного фона, от фазы воспалительного процесса, сопутствующей патологии и других факторов, а не как проявления первичного иммунодефицита [43, 46, 47, 89].

Совсем иная картина в патогенезе частых острых респираторных инфекций (ОРИ) развивается у детей, страдающих аллергией [1, 20, 30, 33]. Последняя, как известно, характеризуется поляризацией иммунного ответа в сторону Т112-типа: у таких детей недостаточно выделяется ИФН-у и ИЛ-2, усилен синтез 1§Е и снижен ^в-антительный ответ [35, 39]. Отсюда следует, что физиологические Независимые механизмы борьбы с респираторными инфекциями, как правило, нарушаются [62]. Дети с аллергическими заболеваниями (атопическим дерматитом, респираторной аллергией) часто болеют ОРИ в грудном и раннем возрасте и могут быть отнесены в группу ЧБД [3, 42, 44, 51]. О.ОргапсН в презентативной выборке изучил частоту и длительность респираторных инфекций у детей с аллергическими заболеваниями и без таковых. Было показано, что у детей, страдающих аллергическими заболеваниями, статистически значимо увеличивалось количество эпизодов ОРИ (в 1,5-2 раза), длительность течения ОРИ (более чем в 1,5 раза) и тяжесть респираторных инфекций в сравнении с группой детей без аллергии [46, 99].

Известно, что заболеваемость респираторными инфекциями наиболее высока у детей раннего возраста. Вирусные инфекции у детей с атопией являются как индукторами формирования бронхиальной астмы, так и одним из наиболее частых инициаторов обострений уже развившегося хронического иммунного воспаления [3, 88, 96]. Так, у детей с респираторно-синтициальным вирусным бронхиолитом доказано снижение функции ТЫ-клеток и увеличение активности

ТЬ2-клеток, что объясняет высокую частоту инфекций и развитие сенсибилизации.

С другой стороны, в ряде эпидемиологических исследований последних лет продемонстрирован протективный эффект легких рецидивирующих инфекций верхних дыхательных путей в отношении развития бронхиальной астмы и атопии у детей первых лет жизни, даже из семей с атопическим анамнезом [171].

Результаты этих многолетних клинических наблюдений, отмеченные независимо друг от друга разными авторами, сохраняют актуальность изучения регуляции иммунного ответа при рецидивирующем течении инфекционного процесса для практической педиатрии [21, 52].

1.2. Естественные регуляторные Т клетки: происхождение, свойства и функции

В начале 70-х годов прошлого столетия был описан феномен супрессии иммунного ответа, опосредованной Т клетками. В качестве супрессоров рассматривались С08+-клетки [11, 113]. Исследования в этой области велись очень интенсивно в течение почти двух десятилетий. Однако за это время накопилось много неразрешимых проблем, касающихся маркеров, развития Т супрессоров, генетической рестрикции их реакций, получения стабильных клонов супрессорных СЭ8+- Т клеток. К концу 80-х годов сообщество иммунологов пришло к выводу о необоснованности сложившихся представлений о природе супрессорных Т клеток, и их изучение практически прервалось.

В то же время несколько групп исследователей осуществляли поиск истинных супрессорных клеток. В результате в 90-е гг. было описано сразу несколько субпопуляций Т лимфоцитов, обладающих супрессорной активностью. На этот раз вновь обнаруженные супрессоры были обозначены как регуляторные Т клетки. Большая часть «новых» субпопуляций Т супрессоров индуцируется под влиянием стимуляции активирующими агентами, в частности антигеном, и

образуются в ходе иммунного ответа; эти клетки обозначают как адаптивные регуляторные клетки [21, 34, 70, 73, 133, 155]. К ним относятся ТЬЗ-клетки -продуценты TGFß, Tri-клетки - продуценты IL-10 (те и другие регуляторные клетки экспрессируют корецептор CD4), а также СБ8+С028"-клетки; супрессорная активность показана также для NKT-клеток, CD4+CD8+-KrieTOK и т.д. Функциональное назначение некоторых регуляторных Т клеток представлено на рисунке 1 [11].

Наиболее серьезно обосновано наличие регуляторных функций у субпопуляции CD4+ Т клеток, экспрессирующих а-цепь рецептора IL-2 (CD25). Эта субпопуляция регуляторных Т клеток описана в середине 90-х гг., когда Sakaguchi S. и соавт. установили, что субпопуляция CD4+CD25+ Т лимфоцитов предотвращает развитие аутоиммунных заболеваний у мышей [11, 135, 160, 163]. Эти клетки формируются в процессе нормальной дифференцировки в тимусе, а не под действием антигенной стимуляции. Поэтому они получили название естественных (в отличие от адаптивных) регуляторных Т клеток (далее Treg).

Регуляторные Т-клетки

Естественные

Treg (CD4+CD25W)

Толерантность к аутоантигенам

Аутоиммунные процессы

Толерантность к антигенам плода

Привычное невынашивание плода

Индуцибельные

Th3 Tri Treg

Ограничение ответа на антигены пищи и симбионтов

Непереносимость пищевых белков

Ограничение ответа на чужеродные антигены

Аллергия

Рисунок 1. Функциональное назначение разновидностей регуляторных Т клеток

У человека функции Treg выполняют не все CD4+CD25+ лимфоциты, а только их фракция с высоким уровнем экспрессии CD25 (CD4+CD25hl клетки); на их долю приходится 2-3% от общего содержания периферических С04+-клеток [72, 73]. Содержание CD4+CD25+ Treg в тимусе составляет около 5% [74, 110, 162]. Уровень Treg в крови несколько повышается с возрастом без существенных изменений их функциональной активности [65, 68, 120]. Численность и активность Treg контролируется генетически [34, 50, 140].

От появляющихся в ходе иммунного ответа активированных CD4+T клеток, также экспрессирующих CD4+CD25l0, Treg отличаются не только по функции (супрессорная, а не хелперная), но и по мембранному фенотипу [72].

Наибольшее значение придается присутствию на поверхности Treg ингибитора костимуляции - супрессорной молекулы CTLA-4 (CD 152) [86], поскольку с этой молекулой связывают реализацию супрессорной функции Treg [90]. В качестве маркера Treg рассматривается также индуцируемый глюкокортикоидами TNF-подобный рецептор (GITR) [151].

Однако ни одна из названных молекул не может служить абсолютным маркером этой функциональной субпопуляции Т-клеток. Однозначная связь с супрессорной активностью CD4+ Treg показана только для одной молекулы -транскрипционного фактора FOXP3, локализующегося внутриклеточно [41, 56, 67, 76, 77, 90, 108].

FOXP3 — это ген, кодирующий транскрипционный фактор, который обладает ДНК-связывающим доменом winged helix, или forkhead box ("FOX"). Впервые ген этого семейства описан у Drosophila melanogaster, у которой обнаружена мутация fkh (fork head; в переводе с английского это означает «вильчатая шпинделевая головка», что отражает морфологическое проявление мутации у дрозофилы), проявляющаяся в нарушении формирования концевого паттерна у эмбрионов дрозофилы [173]. В дальнейшем группа генов,

гомологичных fkh, описана у различных животных. У хордовых гены этого семейства обозначаются как FOX [11].

В 1982 г. у человека был описан XLAAD-синдром (X-linked autoimmunity-allergic dysregulation syndrome), в настоящее время обозначаемый как IPEX-синдром (Immune disregulation, Polyendocrinopathy, Enteropathy X-linked syndrome; см. далее) [81, 82, 111, 157]. В 2000 г. причиной этого синдрома были признаны мутации (миссенс-мутации, мутации стоп-кодона) гена, локализованного на хромосоме X (pi 1.23), который получил обозначение FOXP3 [94, 97, 109, 121].

У человека ген FOXP3 располагается в сегменте pi 1.23-ql3.3 X хромосомы. Помимо этого гена в семейство FOX-генов человека входит еще 42 члена, из которых 15 причастно к развитию или регуляции иммунной системы. Ген FOXP3 имеет 11 экзонов [179]. Его гомология с соответствующим геном мыши составляет 86%. Ген FOXP3 экспрессируется в клетках тимуса, селезенки и лимфатических узлов. Исследования показали, что FOXP3, который кодирует фактор транскрипции скурфин (scurfin), является главным регулирующим геном для развития и функционирования CD4+CD25hlgh регуляторных Т клеток [59, 117]. Около 10 лет назад к белку FOXP3 (скурфину) получены моноклональные антитела [11, 119].

В настоящее время доказано, что экспрессия FOXP3 является основным маркером Treg [129, 137, 178], а его продукт ответственен за реализацию иммунорегулирующей функции Treg [8, 75, 112, 113, 172, 174]. У человека FOXP3 экспрессируется периферическими CD4+CD8"CD25+ лимфоцитами в тимусе и на периферии [98, 116]. Наличие продукта гена foxp3 сопряжено преимущественно с высоким уровнем экспрессии CD25: FOXP3 экспрессируется практически на всех CD25hl клетках и лишь на половине CD2510 клеток. Однако экспрессия FOXP3 в большей степени коррелирует с наличием супрессорной активности, чем с присутствием молекулы CD25 на поверхности клетки [108]. Мутации гена foxp3 сопровождаются утратой Treg фенотипа CD4+CD25+ и супрессорной активности

[123]. Наоборот, трансдукция гена foxp3 в Т-клетки (в том числе в СБ25"-клетки), приводит к экспрессии CD25, CTLA-4, GITR, CD 103 и проявлению супрессорной активности, определяемой по подавлению пролиферации Т-клеток, а также in vivo по индукции толерантности к несингенному трансплантату [66, 71, 118].

FOXP3 экспрессируется не только СБ4+С025+-клетками, но и небольшой фракцией СВ25"-клеток человека (клеток фенотипа FOXP3+CD4+CD25"CTLA-4+GITR+) [177]. В связи с этим численность FOXP3+ клеток несколько выше, чем CD4+CD25+-KneTOK. Важно подчеркнуть, что FOXP3 не экспрессируется в активированных С04+С025+-хелперах - клетках, фенотипических сходных с Treg, но функционально отличных от них [11, 176].

Развитие Treg происходит преимущественно в тимусе. Особенности их дифференцировки по сравнению с другими субпопуляциями Т клеток в настоящее время не выяснены.

Treg появляются в тимусе человека на 13 нед. развития; тогда на их долю приходится 6-7% тимоцитов, а на 14 нед. они выявляются в периферических лимфоидных органах плода и уже проявляют супрессорную активность [106]. Treg присутствуют в циркуляции новорожденных детей [120, 131, 143]. В пуповинной крови человека присутствуют клетки фенотипа CD4+CD25+CTLA-4+CD38+, которые приобретают супрессорную активность при аллостимуляции в смешанной культуре лейкоцитов [116].

Хотя не вызывает сомнений происхождение большей части Treg из тимуса, имеются многочисленные свидетельства возможности их развития на периферии иммунной системы из CD4+CD25~KneTOK [11, 100]. Генерация Treg на периферии иммунной системы de novo не зависит от тимуса, но, очевидно, нуждается в межклеточных взаимодействиях с участием костимулирующих молекул.

Среди факторов, причастных к генерации и/или поддержанию уровня Treg, прежде всего должен быть назван TGFß [146]. У мышей с нокаутом гена TGFßl наблюдается снижение содержания CD4+CD25+foxp3+-KneTOK, обладающих

супрессорной активностью, в периферическом отделе иммунной системы, но не в тимусе.

Образование в периферическом отделе иммунной системы Treg, вероятнее всего, может быть результатом двух различных процессов. С одной стороны, это может служить завершением дифференцировки Treg, индуцированной в тимусе, когда Т клетки фенотипа CD4+CD25"FOXP3+, представляющие собой одну из промежуточных стадий развития Treg, под влиянием неких факторов, проявляющих свое действие в периферическом отделе иммунной системы, экспрессируют CD25 [161, 168]. С другой стороны, появление Treg на периферии de novo можно поставить в один ряд с аналогичным превращением CD4+CD25" РОХРЗ'-тимоцитов в CD4+CD25+FOXP3+-KneTKH под влиянием медуллярных дендритных клеток тимуса [169]. Можно предположить, что основным стимулом для осуществления по крайней мере второго процесса является распознавание (на основе перекрестной реактивности TCR) аутоантигенов, отсутствующих или слабо представленных в тимусе.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Ветрова, Анна Дмитриевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Аллергия у детей: от теории — к практике: монография. Под ред. Л. С. Намазовой-Барановой. М.: Союз педиатров России. 2010-2011. - 668 с.

2. Баранов A.A., Горелов A.B., Каганов Б.С. и др. Острые респираторные заболевания у детей: лечение и профилактика. Научно-практическая программа / Союз педиатров России, Международный фонд охраны здоровья матери и ребенка. М., 2004. 68 с.

3. Белан Э. Б. Th-фенотип иммунного ответа как фактор риска развития бронхиальной астмы у детей раннего возраста // Циток. и воспал. - 2004. -Т. 3, № 4. - С. 50-52.

4. Вельтищев Ю. Е. Местный иммунитет и его нарушения у детей. БМЭ, изд. 3-е. - 1988. - Т. 29. - С. 249 - 254.

5. Вельтищев Ю. Е. Становление и развитие иммунной системы у детей. Иммунная недостаточность. Иммунодиатезы. Лекция № 21. Российский вестник перинаталогии и педиатрии. Прилож. к журн. / под ред. Ю. Е. Вельтищева. - М., 1996. - 69 с.

6. Вельтищев Ю. Е., Фокеева В. В. Экология и здоровье детей. Химическая экопатология. Лекция № 9. Российский вестник перинаталогии и педиатрии. Прилож. к журн. / под ред. Ю. Е. Вельтищева. -М., 1996. - 57 с.

7. Влияние окружающей среды на состояние здоровья женщин и детей. Сб. научн. тр. - Казань, 1994. - 62 с.

8. Воробьев А. А., Быковская С. Н., Пашков Е. П., Быков А. С. Роль клеток-регуляторов CD4+CD25+ в развитии хронических инфекционных заболеваний // Вестник РАМН. - 2006. - № 9 - 10. - С. 24 - 30.

9. Гервазиева В. Б., Петрова Т. И Экология и аллергические заболевания у детей // Аллергол. и иммунол. - 2000. - Т. 1, № 1. - С. 101-109.

10. Дизрегуляционная патология / Под ред. Г.Н. Крыжановского. - М.: Медицина. - 2002. - 629 с.

11. Донецкова, А. Д. Изучение естественных регуляторных Т-клеток и их молекулярного маркера БОХРЗ в норме и при аллергии у детей : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.36 / Донецкова Альмира Дмитриевна. - М., 2007. -119 с.

12. Доскин В. А., Келлер X., Мураенко Н. М., Тонкова-Ямпольская Р. В. Морфофункциональные константы детского организма / Справочник.- М.: Медицина, 1997.-289 с.

13. Ершов Ф. И., Наровлянский А. Н., Мезенцева М. В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях // Циток. и воспал. - 2004. - Т. 3, № 1. -С. 3-7.

14. Заплатников А. Л., Коровина Н. А., Гирина А. А. и др. Профилактика рекуррентных респираторных инфекций у часто болеющих детей // Вопросы практической педиатрии. - 2010. - Т. 5, № 6. - С. 55-60.

15. Заплатников А. Л. Часто болеющие дети: современные возможности иммунопрофилактики и иммунотерапии острых респираторных инфекций // Вопросы практической педиатрии. - 2010. - Т. 5, № 1. - С. 76-80.

16. Заплатников А. Л., Коровина Н. А. Часто болеющие дети: современное состояние проблемы // Вопросы практической педиатрии. - 2008. - Т. 3, №5. - С. 103-109.

17. Захарова И. Н., Чебуркин А. В., Малиновская В. В. Значение системы интерферонов в формировании иммунного ответа у детей с острыми респираторными вирусными инфекциями // Вопросы практической педиатрии. - 2009. - Т. 4, № 5, С. 38-45

18. Ильина Н. И., Латышева Т. В., Пинегин Б. В., Сетдикова Н. X. Синдром вторичной иммунной недостаточности (протоколы диагностики и лечения) // Иммунол. - 2000. - № 5. - С. 8 - 9.

19. Иммунология детского возраста / под ред. проф. А. Ю. Щербины и проф. Е. Д. Пашанова. - М. : ИД МЕДПРАКТИКА-М, 2006. - 432 с.

20. Кемилева 3. Вилочковая железа. М.: Медицина. - 1984. - 253 с.

21. Клиническая иммунология. Руководство для врачей / Под ред. Е.И. Соколова. - М.: Медицина. - 1998. - 272 с.

22. Кондратенко В.И., Болотов A.A. Первичные иммунодефициты. - М.: Медпрактика - М. - 2005. - 231 с.

23. Коровина H.A., Заплатников A.JL, Чебуркин A.B., Захарова И.Н. Часто и длительно болеющие дети; современные возможности иммунореабилитации. Руководство для врачей. М.: Континед, 2001.

24. Кучма В. Р. Гигиена детей и подростков / Учебник. - М.: ГЭОТАР -МЕДИА, 2008.-480 с.

25. Лутовина О.В., Шовкун В.А., Васильева Л.И. Роль дисбиозов кишечника и ротоглотки в формировании контингента часто и длительно болеющих респираторными заболеваниями детей раннего возраста // International Journal on Immunorehabilitation (Международный журнал по иммунореабилитации). - 2010. - Т. 12, №2. - С.209Ь.

26. Лисяный Н. И. Нервные клетки и их иммунные функции // Аллергол. и иммунол. — 2004. — Т. 5, № 1.-С. 193- 194.

27. Лебедев К. Л., Понякина И. О. Нормативы параметров иммунной системы _ при инфекционных воспалительных заболеваниях отличаются от

иммунологических показателей здорового человека // Мед. иммунол. -2002. - Т. 4, № з. _ с. 483 - 489.

28. Мазуров Д. В., Дамбаев С. В., Климова С. В., Бахус Г. О., Ярилин А. А., Пинегин Б. В. Применение проточной цитометрии в иммунодиагностике // Мед. иммунол. - 2002. - Т. 4, № 4 - 5. - С. 507 - 514.

29. Маркова Т. П., Чувиров Д. Г. Длительно и часто болеющие дети // Ремедиум. - 2006. - № 6. - С. 26-28.

30. Маркова Т. П., Ярилина Л. Г. Острые респираторные инфекции. Профилактика и лечение // Русский медицинский журнал. - 2012. - Т. 20., № 12.-С. 628-632.

31. Намазова-Баранова Л. С., Харит С. М., Тузанкина И. А. и др. Результаты многоцентрового исследования применения препарата пидотимод для профилактики острых респираторных инфекций у часто болеющих детей. Вопросы современной педиатрии. - 2010. - Т. 9, №2. - С. 40-44.

32. Наследникова И. О., Рязанцева Н. В., Новицкий В. В., Ткаченко С. Б., Зима А. П. Дисбаланс иммунорегуляторных ТЬ-1 и ТЬ-2 цитокинов при персистенционных вирусных инфекциях // Мед. иммунол. - 2007. - Т. 9, № 1.-С. 53-61.

33. Нестерова И.В. Проблемы лечения вирусных инфекций у часто и длительно болеющих детей и взрослых. Лекции для практикующих врачей. М., 2008; 1:227-244.

34. Никонова М. Ф., Литвина М. М., Варфоломеева М. И., Ярилин А. А. Апоптоз и пролиферация как альтернативные механизмы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунол. - 1999. - № 2. - С. 20-23.

35. Никонова М. Ф., Ярилин А. А. Пролиферативный статус ТЫ- ТЬ2-клеток человека // Иммунол. - 2006. - № 4. - С. 203 - 209.

36. Общая токсикология / Под ред. Б.А. Курляндского, В.А. Филова. - М.: Медицина. - 2002.-607 с.

37. Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Физиология клеток врожденной иммунной системы: дендритные клетки // Иммунол. - 2006. - № 6. - С. 368 - 378.

38. Пинигин М. А., Мольков Ю. Н., Бударина О. В., Баева И. В. Перспективы применения методов определения иммунного статуса у населения при массовых гигиенических исследованиях // Вестник РАМН. - 2006. - № 5. -С. 37-39.

39. Просекова Е. В., Деркач В. В., Шестовская Т. Н., Нетесова С. Ю., Иванова Ю. В. Аллергические заболевания у детей: особенности цитокинового и иммунного статуса // Иммунол. - 2007. - Т. 28, № 3. - С. 157-162.

40. Рахманин Ю. А., Демин В. Ф., Иванов С. И. Общий подход к оценке, сравнению и нормированию риска для здоровья человека в зависимости от различных факторов среды обитания // Вестник РАМН. - 2006. - № 4. - С. 5 -9.

41. Робин А., Ройт А., Делвз П. Основы медицинской иммунологии: Пер. с анг. - М.: Мир, 2006. - 320 е., ил.

42. Романцов М.Г., Ершов Ф.И. Часто болеющие дети: современная фармакотерапия. М.: Гэотар-Медиа, 2006.

43. Розенберг В. Я., Бутыльский А. Н. Возрастные особенности иммунного статуса здоровых жителей Забайкалья // Иммунол. - 2007. - № 3. - С. 177 — 181.

44. Самсыгина Г. А. Часто болеющие дети: проблемы патогенеза, диагностики и терапии // Педиатрия. - 2005. - Т. 1. - С. 66-73

45. Самсыгина Г. А., Казюкова Т. В. Часто болеющие дети: современные возможности снижения респираторной заболеваемости // Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. - 2012. - Т. 91, № 5. - С. 42-48.

46. Самсыгина Г. А., Коваль Г. С. Проблемы диагностики и лечения часто болеющих детей на современном этапе // Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. - 2010. - Т. 89, № 2. - С. 137-147.

47. Самсыгина Г. А., Коваль Г. С. Часто болеющие дети: проблемы диагностика, патогенеза и терапии // Лечащий врач. - 2009. - № 1. - С. 10-15.

48. Сидоренко Г. И., Захарченко Г. И., Морозов М. П., Кошелев Н. Ф. эколого-гигиенические проблемы исследования иммунного статуса человека в популяции. -М.: Промедэк, 1992. - 103 с.

49. Стефании Д. В., Вельтищев Ю. Е. Иммунология и иммунопатология детского возраста. -М.: Медицина, 1996.

50. Талаев В. Ю., Ломунова М. А., Заиченко И. Е., Бабайкина О. Н., Талаева Е. Б., Никонова М. Ф. Действие клеток цитотрофобласта на созревание и функцию Т-лимфоцитов, продуцирующих цитокины // Иммунол. - 2006. -№2.-С. 68-73.

51. Титов Л. П., Кирильчик Е. Ю. Особенности иммунного статуса у часто и длительно болеющих детей с сопутствующей аллергической патологией // Иммунол. - 2000. - № 3. - С. 29 - 32.

52. Торшхоева Р. М., Ботвиньева В. В., Таги-заде Т. Г., Намазова Л. С., Таранушенко Т. Е. Часто болеющие дети мегаполисов: лечение и профилактика острых респираторных инфекций. Педиатрическая фармакология. - 2006. - Т. 3, №1. - С. 13-17.

53. Труфакин В. А., Шурлыгина А. В. Проблемы центральной регуляции биоритмов иммунной системы. Роль экзогенного и эндогенного мелатонина // Вестник РАМН. - 2006. - № 9 - 10. - С. 121 - 128

54. Тузанкина И.А. Клинико-иммунологические подходы к формированию групп часто болеющих детей и эффективность иммуномодулирующей терапии в комплексе группоспецифических реабилитационных мероприятий: Автореф. дисс. ... канд.мед. наук. Екатеринбург, 1992.

55. Основы доказательной медицины / пер. с англ. - М.: Медиа Сфера. - 2004. -48с.

56. Фрейдлин И. С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функция // Мед. Иммунол. - 2005. - Т. 7, № 4. - С. 347 - 354.

57. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Оценка иммунного статуса человека в норме и патологии // Иммунол. - 2001. - № 4. - С. 4 - 7.

58. Хайдуков С. В., Зурочка А. В. Расширение возможностей метода проточной цитометрии для клинико-иммунологической практики // Мед. иммунол. -2008.-Т. 10, № 1.-С. 5- 13.

59. Чередеев А. Н., Горлина Н. К., Козлов И. Г. СБ-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий // Клин, лабор. диагност. - 1999. - № 6.-С. 25-31.

60. Черешев В. А., Кеворков Н. Н., Бахметьев Б. А., и др. Физиология иммунной системы и экология // Иммунол. - 2001. - № 3. - С. 12-16.

61. Шатихин А. И., Литвицкий П. Ф., Сурнакова Н. Е., Игонин А. А., Борисова А. М., Санина Н. П. Влияние факторов среды на состояние системы иммунобиологического надзора // Аллергол. и иммунол. - 2004. - Т. 5, № 2. -С. 285-288.

62. Щербина А. Ю. Общие вопросы формирования иммунного ответа. Клинико-лабораторная оценка иммунологических нарушений. Программа ОЛИМП (Основы клинической иммунологии для педиатров). Рос. аллерголог, журнал. - 2010. - Т. 3. - С. 58-66.

63. Экология и здоровье детей / под ред. М. Я. Студеникина, А. А. Ефимовой. -М.: Медицина, 1998. - 384 с.

64. Экопатология детского возраста. Сборник лекций и статей / под ред. В. Н. Ярыгина, Ю. П. Пивоварова, В. Ф. Демина. - М., 1995. - 375 с.

65. Ярилин А. А. Возрастные изменения тимуса и Т-лимфоцитов // Иммунол. -2003,-№2.-С. 118-131.

66. Ярилин А. А. Гомеостатические процессы в иммунной системе. Контроль численности лимфоцитов // Иммунол. - 2004. -№ 5.-С. 312-319.

67. Ярилин А. А., Донецкова А. Д. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор Рохр3+ // Иммунол. - 2006. - Т. 27, № 3. - С. 176 - 188.

68. Ярилин А. А., Донецкова А. Д. Регуляторные Рохр3+ Т-клетки и их роль при аллергии // Рос. аллерг. журн. - 2005. - № 2. - С. 22 - 26.

69. Awasthi A. et al. Interplay between effector Thl7 and regulatory T cells // J Clin Immunol. - 2008. - 28(6):660-70.

70. Athanassakis I., Vassiliadis S. T-regulatory cells: are we re-discovering T suppressors? Immunol. Lett., 2002, v. 84, p. 179-183.

71. Baan C.C., et al. Differential effect of calcineurin inhibitors, anti-CD25 antibodies and rapamycin on the induction of FOXP3 in human T cells. Transplantation, 2005, v.80, p. 110-117.

72. Baecher-Allan C., Wolf E., Hafler D.A. Functional analysis of highly defined, FACS-isolated populations of human regulatory CD4+CD25+ T cells. Clin. Immunol., 2005, v. 115, p. 10-18.

73. Baecher-Allan C., Brown J.A., Freeman G.J. et al. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood. J. Immunol., 2001, v. 167, p. 1245-1253.

74. Baecher-Allan C., Viglietta V., Hafler D.A. Human CD4+CD25+ regulatory T cells. Semin. Immunol., 2004, v. 16, p. 89-97.

75. Balandina A., Lecart S., Dartevelle P. et al. Functional defect of regulatory CD4+CD25+ T cells in the thymus of patients with autoimmune myasthenia gravis. Blood, 2005, v. 105, p. 735-741.

76. Banham A.H. Cell-surface IL-7 receptor expression facilitates the purification of FOXP3+ regulatory T cells. Trends Immunol., 2006, vol. 27, p. 541-544.

77. Baratelli F., Lin Y., Zhu L. et al. Prostaglandin E2 induces FOXP3 gene expression and T regulatory cell function in human CD4+ T cells. J. Immunol., 2005, v. 175, p. 1483-1491.

78. Battaglia M., Stabilini A., Roncarolo M.G. Rapamycin selectively expands CD4+CD25+foxp3+ regulatory T cells. Blood, 2005, v. 105, p. 4743-4748.

79. Belladonna M.L., Puccetti P., Orabona C. et al. Immunosuppression via tryptophan catabolism: the role of kynurenine pathway enzymes. Transplantation, 2007, vol. 84, p. S17-20.

80. Bellinghausen I., Klostermann B., Knop J., Saloga J. Human CD4+CD25+ T cells derived from the majority of atopic donors are able to suppress Thl and Th2 cytokine production. J. Allergy Clin. Immunol., 2003, v. 111, p. 862-868.

81. Bennett C. L., Brunkow M. E., Ramsdell F. et al. A rare polyadenylation signal mutation of the FOXP3 gene (AAUAAA AAUGAA) leads to the IPEX syndrome. Immunogenetics, 2001, v. 53, p. 435-439.

82. Bennett C. L., Ochs H. D. IPEX is a unique X-linked syndrome characterized by immune dysfunction, polyendocrinopathy, enteropathy, and a variety of autoimmune phenomena. Curr. Opin. Pediatr., 2001, v. 13, p. 533-538.

83. Bensinger S.J., Walsh P.T., Zhang J. et al. Distinct IL-2 receptor signaling pattern in CD4+CD25+ regulatory T cells. J. Immunol., 2004, v. 172, p. 5287-5296.

84. Berger C.L., Tigelaar R., Cohen J. et al. Cutaneous T-cell lymphoma: malignant proliferation of T-regulatory cells. Blood, 2005, v. 105, p. 1640-1647.

85. Beyer M., Kochanek M., Darabi K. et al. Reduced frequencies and suppressive

• hi

function of CD4 CD25 regulatory T cells in patients with chronic lymphocytic leukemia after therapy with fludarabine. Blood, 2005, v. 106, p. 2018-2025.

86. Birebent B., Lorho R., Lechartier H. et al. Suppressive properties of human CD4 CD25 regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression. Eur. J. Immunol., 2004, v. 34, p. 3485-3496.

87. Bluestone J.A. Regulatory T-cell therapy: is it ready for the clinic? Nat. Rev. Immunol., 2005, v. 5, p. 343-349.

88. Bolhaar S.T., Tiemessen M.M., Zuidmeer L. et al. Efficacy of birch-pollen immunotherapy on cross-reactive food allergy confirmed by skin tests and double-blind food challenge. Clin. Exp. Allergy, 2004, v. 34, p. 761-769.

89. Bossuyt X., Moens L., Van Hoeyveld E. Coexistence of (Partial) Immune Defects and Risk of Recurrent Respiratory Infections. //Clinical Chemistry. - 2007. - T. 53.- C. 124-130

90. Brunkow M., Jeffery E., Hjerrild K. et al. Disruption of a new forkhead/winged-helix protein, scurfin, results in the fatal lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse. Nat. Genet., 2001, v. 27, p. 68-73.

91. Bucchetta R et al. Role of regulatory T cells and FOXP3 in human diseases // J Allergy Clin Immunol. - 2007. - 120(2):227-35.

92. Burnes PJ. Role of GATA-3 in allergic diseases // Curr Mol Med. - 2008. -8(5):330-4.

93. Burnsen RM. et al. Does paternal antigen-induced secretion of interleukin-10 by T regulatory cells mediate the birth order effect? // Med Hypotheses. - 2006. -67(4):740-3.

94. Buckner JH et al. Functional analysis of FOXP3 // Ann N Y Acad Sci. - 2008. -1143:151-69.

95. Burchell JT. et al. Attenuation of allergen-induced airway hyperresponsiveness is mediated by airway regulatory T cells // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. -2009. - 296(3):L307-19.

96. Callard RE et al. Decision-making by the immune response // Immunol Cell Biol. -2007. - 85(4):300-5.

97. Caramalho I., Lopez-CatvalhoT., Ostler T. et al. Regulatory T cells selectively express toll-like receptors and are activated by lipopolysaccharide. J. Exp. Med., 2003, v. 197, p. 403-411.

98. Cao W et al. Human T helper (Th) cell lineage commitment is not directly linked to the secretion of IFN-gamma or IL-4: characterization of Th cells isolated by FACS based on IFN-gamma and IL-4 secretion // Eur J Immunol. - 2005. -35(9):2709-17.

99. Ciprandi G. Allergic children have more numerous and severe respiratory infections than non-allergic children// Pediatr. Allergy Immunol. - 2006. - 17 (5): 389-391

100. Chatila TA et al. Molecular mechanisms of regulatory T-cell development // Chem Immunol Allergy. - 2008. - 94:16-28.

101. Chatila TA et al. Role of regulatory T cells in human diseases // J Allergy Clin Immunol. - 2005. - 116(5):949-59.

102. Chatila TA. Regulatory T cells: key players in tolerance and autoimmunity // Endocrinol Metab Clin North Am. - 2009. - 38(2):265-72.

103. Cheng X et al. The Thl7/Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome // Clin Immunol. - 2008. - 127(l):89-97.

104. Chi LJ. et al. Impairment of circulating CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with chronic inflammatory demyelinating polyradiculoneuropathy // J Peripher Nerv Syst. - 2008. - 13(l):54-63.

105. Cohen R., Just J., Koskas M. et al. Gaudelus Infections respiratoires recidivantes: quel bilan, quels traitements? Archives de pediatrie. - 2005. - T. 12. - C. 183190.

106. Darrasse-Jeze G., Marodon G , Salomon B.L. et al. Ontogeny of CD4+CD25+ regulatory/suppressor T cells in human fetuses. Blood, 2005, v. 105, p. 47154721.

107. Don M., Fasoli L., Gregorutti V. et al. Recurrent respiratory infections and phagocytosis in childhood // Pediatr Int. 2007. V.49 (1). P.40-47.

108. Fontenot J. D., Gavin M. A., Rudensky A. Y. FOXP3 programs the development and function of CD4+CD25+ regulatory T cells // Nat. Immunol. - 2003; 4: 330336.

109. Fuchizawa T. et al. Developmental changes of FOXP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells and their impairment in patients with FOXP3 gene mutations // Clin. Immunol. -2007. - 125(3):237-46.

110. Fujimaki W. et al. Comparative study of regulatory T cell function of human CD25CD4 T cells from thymocytes, cord blood, and adult peripheral blood. // Clin Dev Immunol. - 2008. - 2008:305859.

111. Gambineri E., Torgerson R.T., Ochs H.D. Immune dysregulation, polyendocrinopathy, enteropathy, and X-linked inheritance (IPEX), a syndrome of systemic autoimmunity caused by mutations of FOXP3, a critical regulator of T-cell homeostasis. Curr. Opin. Rheumatol., 2003, v. 15, p. 430-435.

112. Gardner L.M. Thien F.C., Douglass J.A. et al. Induction of T regulatory cells by standardized house dust immunotherapy: an increase in CD4+CD25+IL-10+ cells expressing peripheral tissue trafficking markers. Clin. Exp. Allergy, 2004, v. 34, p. 1209-1219.

113. Gershon R.K., Kondo K. Infectious immunological tolerance. Immunology, 1970, v. 18, p. 723-735

114. Ghoreishi M. et al. Expansion of antigen-specific regulatory T cells with the topical vitamin d analog calcipotriol // J Immunol. - 2009. - 182(10):6071-8.

115. Gondek D.C., Lu L.F., Quezada S.A. et al. Cutting edge: contact-mediated suppression by CD4+CD25+ regulatory cells involves a granzyme B-dependent, perforin-independent mechanism, J. Immunol., 2005, v. 174, p. 1783-1786.

116. Godfrey W.R., Spoden D.J., Ge Y.G. et al. Cord blood CD4+CD25+-derived T regulatory cell lines express FoxP3 protein and manifest potent suppressor function. Blood, 2005, v. 105, p. 750-758.

117. Godfrey V.L., Wilkinson J.E., Russel L.B. X-linked lymphoreticular disease in the scurfy (sf) mutant mouse. Am. J. Pathol., 1991, v. 138, p. 1379-1387.

118. Golgher D., Jones E., Powrie F., Elliott T., Gallimore A. Depletion of CD25+ regulatory cells uncovers immune responses to shared murine tumor rejection antigens. Eur. J Immunol., 2002, v. 32, p. 3267-3275.

119. Gorczynski R.M., Lee L., Boudakov I. Augmented Induction of CD4+CD25+ Treg using monoclonal antibodies to CD200R. Transplantation, 2005, v. 79, p. 1180-1183.

120. Gregg R., Smith C.M., Clark F.J. et al. The number of human peripheral blood CD4+CD25high regulatory T cells increases with age. Clin. Exp. Immunol., 2005, v. 140, p. 540-546.

121. Halabi-Tawil M. et al. Cutaneous manifestations of immune dysregulation, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked (IPEX) syndrome. // Br J Dermatol. -2009.- 160(3):645-51.

122. Haribhai D et al. A central role for induced regulatory T cells in tolerance induction in experimental colitis // J Immunol. - 2009. - 182(6):3461-8.

123. Haribhai D et al. Regulatory T cells dynamically control the primary immune response to foreign antigen // J Immunol. - 2007. - 178(5):2961-72.

124. Harris PR et al. Helicobacter pylori gastritis in children is associated with a regulatory T-cell response // Gastroenterology. - 2008. - 134(2):491-9.

125. Hayashi Y., Tsukumo S., Shiota H. et al. Antigen-specific T cell repertoire modification of CD4+CD25+ regulatory T cells. J. Immunol., 2004, v. 172, p. 5240-5248.

126. Heikkinen J., Motionen M., Alanen A., Lassila O. Phenotypic characterization of regulatory T cells in the human deciduas. Clin. Exp. Immunol., 2004, v. 136, p. 373-378.

127. Heier I. et al. Bronchial response pattern of antigen presenting cells and regulatory T cells in children less than 2 years of age // Thorax. - 2008. -63(8):703-9.

128. Herberth G et al. Association of neuropeptides with Thl/Th2 balance and allergic sensitization in children // Clin Exp Allergy. - 2006. - 36(11): 1408-16.

129. Hori S., Nomura T., Sakaguchi S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor foxp3. Science, 2004, v. 299, p. 1057-1061.

130. Huan J., Culberston N., Spencer L. et al. Decreased FOXP3 levels in multiple sclerosis patients. J. Neyrosci. Res., 2005, v. 81, p. 45-52.

131. Hwang KA et al. Aging and human CD4(+) regulatory T cells // Mech Ageing Dev. - 2009. - 130(8):509-17.

132. Jartti T. et al. Association between CD4(+)CD25(high) T cells and atopy in children // J Allergy Clin Immunol. - 2007. - 120(1): 177-83.

133. Jetten AM et al. Retinoid-related Orphan Receptors (RORs): Roles in Cellular Differentiation and Development // Adv Dev Biol. - 2006. - 16:313-355.

134. Jung YJ et al. Feedback loop of immune regulation by CD4+CD25+ Treg // Immunology. - 2009. - 214(4):291-302.

135. Kaiko GE et al. Immunological decision-making: how does the immune system decide to mount a helper T-cell response? // Immunology. - 2008. - 123(3):326-38.

136. Kawashima M et al. Effect of treatment of rheumatoid arthritis with infliximab on IFN gamma, IL4, T-bet, and GATA-3 expression: link with improvement of systemic inflammation and disease activity // Ann Rheum Dis. - 2005. -64(3):415-8.

137. Kim JM et al. The role of the transcription factor Foxp3 in the development of regulatory T cells // Immunol Rev. - 2006. - 212:86-98.

138. Korn T et al. Thl7 cells: effector T cells with inflammatory properties // Semin Immunol. - 2007. - 19(6):362-71.

139. Lederer JA et al. Cytokine transcriptional events during helper T cell subset differentiation // J Exp Med. - 1996. - 184(2):397-406.

140. Liu Y et al. A critical function for TGF-beta signaling in the development of natural CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells // Nat Immunol. - 2008. - 9(6): 632-40.

141. Londei M. et al. Role of regulatory T cells in experimental arthritis and implications for clinical use // Arthritis Res Ther. - 2005. - 7(3):118-20.

142. Longhi MS et al. Expansion and de novo generation of potentially therapeutic regulatory T cells in patients with autoimmune hepatitis // Hepatology. - 2008. -47(2):581-91.

143. Ly NP et al. Characterization of regulatory T cells in urban newborns // Clin Mol Allergy. - 2009. - 8; 7-8.

144. Mahendra A. et al. Thl and Thl7 Predominance in the Enthesitis-related Arthritis Form of Juvenile Idiopathic Arthritis. // J. Rheumatol. - 2009. - 36(8): 1730-6.

145. Mamessier E., Botturi K., Vervloet D., Magnan A. T regulatory lymphocytes, atopy and asthma: a new concept in three dimensions. Rev. Mai. Respir., 2005, v. 22, p. 305-311.

146. Marie J.C., Letterio J.J., Gavin M., Rudensky A.Y. TGF-betal maintains suppressor function and Foxp3 expression in CD4+CD25+ regulatory T cells. J. Exp. Med., 2005, v. 201, p. 1061-1067.

147. Martin B., Banz A., Bienvenu B. et al. Suppression of CD4+ T lymphocyte effector functions by CD4+CD25+ cells in vivo. J. Immunol., 2004, v. 172, p. 3391-3398.

148. Martino M., Ballotti S. The child with recurrent respiratory infections: normal or not? // Pediatr Allergy Immunol. - 2007. - T. 18. - p. 13-8.

149. Marschan E et al. Increased activation of GATA-3, IL-2 and IL-5 of cord blood mononuclear cells in infants with IgE sensitization // Pediatr Allergy Immunol. -2008. - 19(2):132-9.

150. McGeachy M.J., Stephens L.A., Anderton S.M. Natural recovery and protection from autoimmune encephalomyelitis: contribution of CD4+CD25+ regulatory cells within the central nervous system. J. Immunol., 2005, v. 175, p. 3025-3032.

151. McHugh R.S., Whitters M.J., Piccirillo C.A. et al. CD4+CD25+ immunoregulatory T cells: gene expression analysis reveals a functional role for the glucocorticoid-induced TBF receptor. Immunity, 2002, v. 16, p. 311-323.

152. Miura Y., Thoburn С. J., Bright E. C. et al. Association of foxp3 regulatory gene expression with graft-versus-host disease. Blood, 2004, v. 104, p. 2187-2193.

153. Motta M., Rassenti L., Shelvin B.J. et al. Increased expression of CD152 (CTLA-4) by normal T lymphocytes in untreated patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia. Leukemia, 2005, v. 19, p. 1788-1793.

154. Morinobu A et al. Discrete roles for histone acetylation in human T helper 1 cell-specific gene expression // J Biol Chem. - 2004. - 279(39):40640-6.

155. Nel A. E., Slaughter N. Активация T-лимфоцитов, опосредованная рецептором антигена. Часть II. Роль сигнальных каскадов в дифференцировке Т-лимфоцитов, анергии, иммунологическом старении; их значение для иммунотерапии // Аллергол. и иммунол. - 2004. - Т. 5, Jvfe 2. -С. 233-248.

156. Nistala К. et al.Thl7 and regulatory T cells: rebalancing pro- and antiinflammatory forces in autoimmune arthritis // Rheumatology (Oxford). - 2009. -48(6):602-6.

157. Powell B.R., Buist N.R., Stenzel P. An X-linked syndrome of diarrhea, polyendocrinopathy, and fatal infection in infancy // J Pediatr. 1982. V.100 (3). P.731-737.

158. Ozkan H., Atlihan F., Genel F., Targan S., Gunvar T. IgA and/or IgG subclass deficiency in children with recurrent respiratory infections and its relationship with chronic pulmonary damage.// J Investig. Allergol. Clin. Immunol. - 2005. -T. 15, № l.-C. 69-74.

159. Raman V et al. Increased prevalence of mutations in the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator in children with chronic rhinosinusitis // Pediatrics. - 2002. - 109(1):E13.

160. Sakaguchi S., Sakaguchi N., Asano M. et al. Immunologic sell-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receplor a-chains (CD25). J. Immunol., 1995, v. 155, p. 1151-1164.

161. Sakaguchi S., Hori S., Fukui Y. et al. Thymic generation and selection of CD4+CD25+ regulatory T cells: implications of their broad repertoire and high self-reactivity for the maintenance of immunological self-tolerance. Novartis Found. Symp., 2003, v. 252, p. 6-16.

162. Sakaguchi S. Control of immune responses by naturally arising CD4+ regulatory T cells that express toll-like receptors. J. Exp. Med., 2003, v. 197, p. 397-401.

163. Sakaguchi S. Naturally arising CD4+ regulatory T cells for immunologic self-tolerance and negative control of immune responses. Annu. Rev. Immunol., 2004, v. 22, p. 531-562.

164. Shao XS et al. The prevalence of Thl7 cells and FOXP3 regulate T cells (Treg) in children with primary nephrotic syndrome // Pediatr. Nephrol. - 2009. -24(9):1683-90.

165. Strickland DH et al. Mucosal regulatory T cells in airway hyperresponsiveness // Chem. Immunol. Allergy. - 2008. - 94:40-7.

166. Szegedi A. et al. Regulatory T cells in atopic dermatitis: epidermal dendritic cell clusters may contribute to their local expansion // Br J Dermatol. - 2009. -160(5):984-93.

167. Tantibhaedhyangkul U. et al. Increased esophageal regulatory T cells and eosinophil characteristics in children with eosinophilic esophagitis and gastroesophageal reflux disease // Ann Clin Lab Sci. - 2009. - 39(2):99-107.

168. Tuovinen H. et al. The FOXP3+ subset of human CD4+CD8+ thymocytes is immature and subject to intrathymic selection // Immunol. Cell Biol. - 2008. -86(6):523-9.

169. Tuovinen H. et al. Thymic production of human FOXP3(+) regulatory T cells is stable but does not correlate with peripheral FOXP3 expression // Immunol. Lett. -2008.- 117(2):146-53.

170. Voo KS et al. Identification of IL-17-producing FOXP3+ regulatory T cells in humans // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2009. - 106(12):4793-8.

171. Wahn V. What drives the allergic march? // Allergy. - 2000. - Vol. 55. - p. 591 -599.

172. Wan YY et al. Regulatory T-cell functions are subverted and converted owing to attenuated Foxp3 expression // Nature. - 2007. - 445(7129):766-70.

173. Weigel D., Jurgens G., Kuttner F. et al. The homeotic gene fork head encodes a nuclear protein and is expressed in the terminal regions of the Drosophila embryo. Cell, 1989, v. 57, p. 645-658

174. Wing K. CD4+ CD25+ FOXP3+ regulatory T cells from human thymus and cord blood suppress antigen-specific T cell responses // Immunology. - 2005. -115(4):516-25.

175. Yu QT et al. Expression and functional characterization of FOXP3+ CD4+ regulatory T cells in ulcerative colitis // Inflamm. Bowel. Dis. - 2007. -13(2): 191-9.

176. Yagi H., Nomura T., Nakamura K. et al. Crucial role of FOXP3 in the development and function of human CD4+CD25+ regulatory T cells. Int. Immunol., 2004, v. 16, p. 1643-1656.

177. Zelenay S., Lopes-Carvalho T., Caramalho I. et al. Foxp3+CD25"CD4+ T cells constitute a reservoir of committed regulatory cells that regain CD25 expression upon homeostatic expansion. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2005, v. 102., p. 40914096.

178. Zheng Y., Rudensky A.Y. Foxp3 in control of the regulatory T cell lineage. Nat. Immunol., 2007, v. 8, p. 457-462.

179. Ziegler S.F. FOXP3: of mice and men. Annu. Rev. Immunol., 2006, v. 24, p. 209226.

180. Ziegler SF et al. FOXP3 and the regulation of Treg/Thl7 differentiation // Microbes Infect. - 2009. - 11(5):594-8.

181. Zheng Y et al. Foxp3 in control of the regulatory T cell lineage // Nat. Immunol. -2007. - 8(5):457-62.