Изучение макромолекулярных комплексов хроматина животных и растений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Шеваль, Евгений Валерьевич
- Специальность ВАК РФ03.00.25
- Количество страниц 124
Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шеваль, Евгений Валерьевич
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Высшие уровни организации хроматина
1.1 Хромонемы - элементарные субструктуры митотических хромосом
1.2 Судьба хромонемных элементов в интерфазе
1.3 Структурная организация хромонемы
1.4 "Хромомерно-хромонемнаямодель"
2. Радиально-петельная модель
2.1 "Скелетные структуры " митотических хромосом
2.2 Петлевые домены интерфазных хромосом
2.3 "Скелетные" структуры интерфазного ядра
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Гистология, цитология, клеточная биология», 03.00.25 шифр ВАК
Исследование компонентов соматических ядер инфузорий: ультраструктура и пространственная организация2007 год, кандидат биологических наук Леонова, Ольга Геннадьевна
Электронномикроскопическое исследование структуры хроматина разных уровней организации1999 год, доктор биологических наук Попенко, Владимир Иванович
Высшие уровни организации генетического аппарата эукариот и регуляция функциональной активности генома2011 год, доктор биологических наук Киреев, Игорь Игоревич
Молекулярно-биологические аспекты взаимодействия ДНК и ядерного ламина D.melanogaster1998 год, доктор биологических наук Богачев, Сергей Станиславович
Структурная организация субдоменов интерфазных ядер и митотических хромосом2013 год, кандидат наук Шеваль, Евгений Валерьевич
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение макромолекулярных комплексов хроматина животных и растений»
Проблема структурной организации генетических систем (в частности, интерфазных и митотических хромосом эукариот) является одной из наиболее горячих точек современной науки. Связано это в первую очередь с колоссальными успехами генетики и молекулярной биологии по расшифровке структуры генетического аппарата клетки на молекулярном уровне, что позволило произвести революцию в таких прикладных дисциплинах как селекция, медицина, биотехнология. Тем не менее, до сих пор существует недопустимый разрыв между большим объемом сведений о молекулярной организации и функционировании генов и геномов и ограниченным количеством данных о надмолекулярной организации хромосом.
В настоящее время в качестве основного надмолекулярного образования хромосомы рассматривается элементарная хромосомная фибрилла. Такие представления восходят к классическим работам Риса (Ris, 1957), описавшего эти фибриллы в качестве единственных визуализируемых структурных единиц митотических хромосом. В последнее время наибольшее распространение получила радиально-петельная модель, в рамках которой структурной единицей хромосомы также является элементарная хромосомная фибрилла, которая периодически взаимодействует с осевой скелетной структурой, образуя петли (Laemmli et al., 1978; Cook, 1995; Stack, Anderson, 2001). Тем не менее, существует точка зрения, согласно которой в составе хромосом можно обнаружить структурные элементы более высокого уровня организации, а именно, толстые фибриллы - хромонемы (Sparvoli et al., 1965; Ченцов, Поляков, 1974; Zatsepina et al., 1983; Belmont et al., 1989).
Противоречивы представления и относительно общей организации хромосом. Здесь накоплен большой объем данных, касающийся продольной неоднородности хромосомы и различных свойств ее отдельных локусов (см. обзоры: Прокофьева-Бельговская, 1986; Babu, Verma, 1987). Во многих современных вариантах радиально-петельной модели факт продольной неоднородности хромосомы попросту игнорируется (см. напр.: Stack, Anderson, 2001). Отчасти это оправдано, т .к. ультраструктурные и биохимические данные о структуре различных доменов хромосомы фрагментарны и недостаточны для построения каких-либо схем. Другая сторона проблемы общей организации хромосомы связана с обособленностью преимущественно электронномикроскопических наблюдений над тонкой организацией хроматина и огромным массивом преимущественно светомикроскопических данных об организации хромосомы, накопленных цитогенетикой.
Таким образом, можно утверждать, что несмотря на более чем столетнюю историю изучения, сведения относительно надмолекулярной организации хроматина и хромосом, которыми мы располагаем на настоящее время, являются противоречивыми и фрагментарными.
Однако проблема надмолекулярной организации хроматина не ограничена рамками чисто морфологических задач. Очевидно, что понимание того, как организована хромосома не исчерпывается каталогизацией морфологических субструктур и описанием их переходов и взаимосвязей в ходе различных клеточных процессов. Важно знать и природу факторов, организующих и поддерживающих хромосому, как целостную структуру.
В рамках радиально-петельной модели эта проблема решена, по крайней мере, теоретически. Постулируется, что за поддержание надмолекулярной структурной организации хромосом отвечает особая скелетная структура (скэффолд в митозе, ядерный матрикс в интерфазе), которая строго упорядоченно укладывает элементарную хромосомную фибриллу. Однако исчерпывающего экспериментального обоснования эта модель до сих пор не получила. Более того, есть определенные сомнения в том, что ядерный матрикс и скэффолд существуют in vivo, а не являются артефактами, возникающими в ходе манипулирования с ядрами и хромосомами in vitro (Hancock, 2000; Pederson, 2000; Tan et al., 2000).
Для высших уровней компактизации ДНК ситуация еще более неясная. Иногда высшие уровни организации трактуются как результат неспецифической агрегации ДНП-фибрилл в "физиологических" условиях (Davie, 1995). Высказывалось также предположение, что в поддержание структурной целостности хромонем могут быть вовлечены компоненты ядерного матрикса (Belmont, Bruce, 1994). Также заслуживает внимания гипотеза, по которой в организацию высших уровней компактизации хроматина вовлечены специальные структурные негистоновые белки ("скрепочные" белки) (Prusov et al., 1983).
Данные литературы позволяют предполагать, что в интерфазных ядрах имеется система неидентифицированных структурных белков, которые не являются компонентами собственно ядерного матрикса и которые играют важную роль в компактизации макромолекулярных комплексов хроматина. Таким образом, теоретически в интерфазном ядре могут сосуществовать различные системы, обеспечивающие структуризацию хромосом. Одна, включающая в себя белки ядерного матрикса, обеспечивает в ядре иммобилизацию структурно-функциональных локусов хромосом (оснований петлевых доменов и активных генов), тогда как другая, в состав которой входят гипотетические структурные белки, участвует только в компактизации ДНК.
Таким образом, в проблеме структурной организации хроматина и хромосом тесно переплетаются цитологические и биохимические задачи, что делает невозможным ее решение методами одного какого-либо подхода. Проблема требует разработки новых методов, которые могли бы позволить стабилизировать структурный и химический состав хроматина в процессе его изоляции, избежав при этом использования химических агентов, вызывающих модификацию белков и/или ДНК. Одним из таких методов является фотостабилизация хроматина (Ямшанов и др., 1998). Показано, что облучение видимым светом в присутствии фотосенсибилизирующего агента (бромистого этидия) не стабилизирует гистоны, но сохраняет в составе хроматина негистоновые белки (Ямшанов и др., 1998). В настоящей работе этот подход использован с целью дискриминации систем 9 ядерных структурных белков и изучения их роли в организации структурных и функциональных субдоменов хромосом. В работе использованы микроскопические методики, что представляется оправданным, т. к. позволяет анализировать не ядра или хромосомы "вообще", а их отдельные субструктуры.
В связи со всем выше означенным в работе были поставлены следующие задачи:
1) Определить роль компонентов ядерного матрикса в организации конденсированного хроматина животных и растительных ядер.
2) Изучить роль компонентов ядерного матрикса в организации различных функциональных субдоменов интерфазных ядер.
3) Изучить роль нематриксных негистоновых белков в организации макромолекулярных комплексов интерфазных и митотических хромосом.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
За многолетнюю историю изучения строения хромосом было предложено большое число различных моделей, часто кардинально отличающихся по принципам, положенным в их основу. Тем не менее, всё разнообразие этих моделей можно свести в две группы. К первой группе относятся модели, в которых заложен принцип иерархичности, т.е. наличия нескольких последовательно формирующихся уровней компактизации ДНК. В качестве примера можно упомянуть скрепочную модель, предложенную Зацепиной с соавт. (1985). В этой модели постулируется существование уровней компактизации, промежуточных между элементарной хромосомной фибриллой и целой хромосомой. Однако в большинстве моделей в качестве конечного уровня организации расматривается соленоидная элементарная фибрилла. Процесс ее дальнейшей укладки может быть либо случайным и неупорядоченным, как это предполагал ДюПро (DuPraw, 1966), либо подчиняться принципу петельной укладки, как это постулируется в радиально-петельной модели (Laemmli et al., 1978). Радиально-петельная модель получила в настоящее время наибольшее распространение, хотя в ней и не признается существование высших уровней организации хроматина.
Похожие диссертационные работы по специальности «Гистология, цитология, клеточная биология», 03.00.25 шифр ВАК
Архитектура хромосом в ядре сперматозоида человека2006 год, кандидат биологических наук Мудрак, Ольга Станиславовна
Сравнительный анализ некоторых характеристик высших структурных уровней хромосом1984 год, кандидат биологических наук Соколова, Татьяна Владимировна
Молекулярно-генетическая организация междисков политенных хромосом Drosophila melanogaster2007 год, доктор биологических наук Демаков, Сергей Анатольевич
Белки ядерного матрикса, специфически связывающиеся с сателлитными ДНК1999 год, кандидат биологических наук Лобов, Иван Борисович
Топология компонентов конденсинового комплекса в оогенезе шпорцевой лягушки Xenopus Laevis и морского ежа Paracentrotus Lividus2006 год, кандидат биологических наук Картавенко, Татьяна Владимировна
Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Шеваль, Евгений Валерьевич
выводы
1) Компоненты ядерного матрикса не играют существенной роли в поддержании структурной целостности высших уровней организации ДНК. Ядерный матрикс является структурно модифицированным в ходе изоляции и солевой экстракции интерхроматиновым материалом.
2) Не все свободные нуклеоплазматические белки интерхроматинового материала способны ассоциировать с ядерным матриксом в процессе его получения. Это может также определяться состоянием самого белка, его структурно-функциональным статусом.
3) Облучение в присутствии бромистого этидия стабилизирует структурные и структурно-функциональные субдомены интерфазного ядра, но не приводит к стабилизации внутриядерной сети ядерного матрикса.
4) Петлевые домены в составе конденсированного хроматина интерфазных ядер и митотических хромосом компактизируются в дискретные упорядоченные комплексы, по-видимому, соответствующие хромомерам.
5) Центромерный гетерохроматин в фотостабилизированных хромосомах имеет повышенную плотность, по сравнению как с G-, так и с R-сегментами.
6) На основании полученных данных выдвинута гипотеза о сосуществовании в интерфазном ядре двух систем белков, одна из которых включает в себя белки ядерного матрикса, обеспечивающие иммобилизацию структурно-функциональных локусов (оснований петлевых доменов и активных генов), а другая, в состав которой входят гипотетические структурные белки, участвует только в компактизации ДНК (петлевых доменов) в хромомерно-хромонемные комплексы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Основой представленной работы являются наблюдения о наличии высших уровней компактизации ДНК в интерфазных ядрах и митотических хромосомах. В работе удалось визуализовать в интерфазных ядрах гепатоцитов крысы блоки конденсированного хроматина и составляющие их хромомерно-хромонемные комплексы. В интерфазных ядрах Allium сера этим образованиям соответствуют "хромонемы" и "субхромонемы". В митотических хромосомах свиньи удается визуализировать хромонемы. Важно отметить, что эти наблюдения являются не только необходимой предпосылкой для проведения дальнейших исследований по дискриминации систем белков, вовлеченных в организацию структурных и функциональных субдоменов хромосом. В настоящее время идея о существовании высших уровней компактизации не вошла в число представлений, учитываемых при обсуждении структурной организации хроматина и хромосом. В представленной работе были исследованы несколько систем, причем, во всех случаях удавалось визуализировать высшие уровни компактизации ДНК. Важно учитывать и филогенетическую удаленность использованных объектов (млекопитающие и цветковые растения).
Структурная целостность выявляемых в интерфазных ядрах гепатоцитов крысы высших уровней организации хроматина не зависит от состояния ядерного матрикса. Более того, удаление нематриксных белков с помощью 2 М NaCl полностью разрушает структуру конденсированного хроматина (это верно и для интерфазных ядер Allium сера, и для митотических хромосом клеток культуры СПЭВ). Т.к. известно, что такая экстракция не затрагивает компоненты ядерного матрикса, можно предположить что ядерный матрикс не играет существенной роли в поддержании структурной целостности хромомерно-хромонемных комплексов. Основываясь же на сходстве в локализации ядерного матрикса и интерхроматинового материала можно рассматиривать ядерный матрикс как структурно модифицированный интерхроматиновый материал.
Парадоксальным образом химическая основа процессов приводящих к выявлению ядерного матрикса остается слабоизученной. В ходе изоляции ядер с нестабилизированным матриксом часть материала интерхроматинового пространства экстрагируется. Основываясь на экспериментах с PCNA можно предполагать, что в ходе процедуры дестабилизации происходит изменение свойств компонентов ядерного матрикса, но для их экстракции необходима последующая солевая обработка. Одновременно, экстракция нематриксных белков может происходить уже в ходе процедуры дестабилизации. По видимому, судьба белка в ходе выделения и экстракции определяется не только условиями выделения и экстракции, но и структурно-функциональным статусом белка.
Основываясь на экспериментах с фотостабилизированным хроматином высказывается гипотеза, о существовании в составе конденсированного хроматина особой группы структурных негистоновых белков - "скрепочных". При ультраструктурном анализе в составе стабилизированного конденсированного хроматина выявлялись агрегаты, имеющие розеточную организацию и, возможно, соответствующие стабилизированным хромомерам. Это позволило предположить, что роль "скрепочных" белков состоит в организации хромомеров.
Применение того же подхода к митотическим хромосомам позволило предположить, что и в митотических хромосомах основная структурная роль принадлежит экстрагируемым солью белкам. Более того, не удается визуализовать скэффолд как морфологически выраженное образование.
В составе фотостабилизированных митотических хромосом удается выявить районы повышенной плотности, соответствующие центромерному гетерохроматину, что позволяет утверждать, что центромерный гетерохроматин содержит повышенную плотность материала по сравнению с плечами хроматид. Одновременно, в составе плеч не выявлены районы G- и R-сегментов, что говорит о том, что плотность материала in situ в этих районах одинакова.
Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шеваль, Евгений Валерьевич, 2001 год
1. Бураков В.В., Онищенко Г.Е., Ченцов Ю.С. Структурные особенности прицентромерного гетерохроматина мышей. //Цитология. 1980. Т. 22. Стр. 514-520.
2. Вильсон Э. Клетка и ее роль в развитии и наследственности. // М.; Л.: Биомедгиз, 1936.
3. Галактионов И.В., Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Ультраструктура и некоторые свойства прицентромерного гетерохроматина в культивируемых клетках трахеи быка. //Цитология. Т. 33. Стр. 28-35.
4. Георгиев Г.П , Ченцов Ю.С. О структуре клеточного ядра. Экспериментальное электронно-микроскопическое исследование изолированных ядер. // Докл. АН СССР. 1960. Т. 132. Стр. 199-202.
5. Глазков М.В. Организация транскрипционно-неактивных участков интерфазных хромосом. // Докл. АН СССР. 1990. Т. 312. Стр. 978-980.
6. Данжар П. Цитология растений и общая цитология. // М.: Ин. Лит., 1950.
7. Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Различия в структурной организации G- и R-сегментов, выявляемые в процессе дифференциальной деконденсации хромосом. // Цитология. 1985. Т. 27. Стр. 865-871.
8. Зацепина О.В., Стефанова В.Н. Особенности ультраструктуры некоторых районов метафазных хромосом свиньи (теломера, центромера, ядрышковый организатор). // Цитология. 1993. Т. 35. Стр. 17-23.
9. Збарский И.Б., Дебов С.С. О белках клеточных ядер. // Докл. АН СССР. 1948. Т. 62. Стр. 795798.
10. Збарский И.Б., Дебов С.С. Белковые фракции клеточных ядер. // Биохимия. 1951. Т. 16. Стр. 390-395.
11. Збарский И.Б., Кузьмина С.Н. Скелетные структуры клеточного ядра. // М.: Наука, 1991.
12. Киреев И.И., Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Ультраструктура митотических хромосом клеток СПЭВ при их обратимой искусственной деконденсации in vivo. II Цитология. 1988. Т. 30. Стр.926-932.
13. Киреев И.И., Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Динамика структурной реконструкции митотических хромосом после их искусственной деконденсации in vitro. //Цитология. 1990. Т. 32. Стр. 449-543.
14. Левитский Г.А. 1931. Цит. по Левитский Г.А. Морфология хромосом (История. Методика. Факты. Теория), в сб. "Цитология растений" // М.: Наука, 1976. 350 с.
15. Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Электронномикроскопическое выявление матрикса хромосом в связи с их естественным и экспериментальным разрыхлением. // ДАН СССР. 1968. Т. 182. Стр. 205-207.
16. Прокофьева-Бельговская А. А. Гетерохроматические районы хромосом. -М.: Наука, 1986.
17. Фролова Е.И., Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Ченцов Ю.С. Особенности структурной организации прицентромерного гетерохроматина мыши, выявляемые в процессе дифференциальной деконденсации хромосом. //Цитология. 1989. Т. 31. Стр. 380-385.
18. Ченцов Ю.С., Поляков В.Ю. Ультраструктура клеточного ядра. М.: Наука, 1974.
19. Элленгорн Я.Е Хромомеры как показатели морфологических особенностей митотических хромосом. //Биол. журн. 1937. Т. 6. Стр. 633-644.
20. Adolph K.W. Isolation and structural organization of human mitotic chromosomes. // Chromosoma. 1980b. Vol. 76. P. 23-33.
21. Adolph K.W., Cheng S.M., Laemmli U.K. Role of nonhistone proteins in metaphase chromosomestructure. // Cell. 1977a. Vol. 12. P. 805-816. Adolph K.W., Cheng S.M., Paulson J.R., Laemmli U.K. Isolation of a protein scaffold from mitotic
22. Baranetzky J. Die Kernteilung in den pollen Mutterzellen einiger Tradescantien. // Bot. Zeit. 1880. 38. 281-295.
23. Belmont A.S., Braunfeld M.B., Sedat J.W., Agard D.A. Large-scale chromatin structural domains within mitotic and interphase chromosomes in vivo and in vitro. II Chromosoma. 1989. Vol. 98. P. 129-143.
24. Belmont A.S., Вшсе К. Visualization of G1 chromosomes: a folded, twisted, supercoiled chromonema model of interphase chromatid structure. // J. Cell Biol. 1994. Vol. 127. P. 287-302.
25. Berezney R., Buchholtz L.A. Dynamic association of replicating DNA fragments with the nuclear matrix of regenerating liver. // Exp. Cell Biol. 1981a. Vol. 182. P. 1-13.
26. Berezney R., Coffey D.S. (1975) Nuclear protein matrix: association with newly synthesized DNA. Science 189:291-293
27. Berezney R., Coffey D.S. The nuclear protein matrix: Isolation and characterization of a framework structure from rat liver nuclei. // J. Cell Biol. 1977. Vol. 73. P. 616-637.
28. Berezney R., Mortillaro M.J., Ma H., Wei X., Samarabandu J. The nuclear matrix: a structural milieu for genomic function. //Int. Rev. Cytol. 1995. Vol. 162A. P. 1-65.
29. Bladon Т., Brasch H., Brown D.L., Setterfield G. Changes in structure and protein composition of bovine lymphocyte nuclear matrix during concanavalin A-induced mitogenesis. // Biochem. and Cell. Biol. 1988. Vol. 66. P. 40-53.
30. Boy de la Tour, Laemmli U.K. The metaphase scaffold is helicalli folded: sister chromatids have predominantli opposite helical handedness. // Cell. 1988. Vol. 55. P. 937-944.
31. Bravo R., Macdonald-Bravo H. Existence of two populations of cyclin/proliferating cell nuclear antigen during the cell cycle: association with DNA replication sites. // J. Cell Biol. 1987. Vol. 105. P. 1549-1554.
32. Celis J.E., Celis A. Cell cycle-dependent variations in the distribution of the nuclear protein cyclin proliferating cell nuclear antigen in cultured cells: subdivision of S phase. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. Vol. 82. P. 3262-3266.
33. Cockerill P.N., Garrard W.T. Chromosomal loop anchorage of the kappa immunoglobulin gene occurs next to the enhancer in a region containing topoisomerase II sites. // Cell. 1986. Vol. 44. P. 273-282.
34. Comings D.E., Okada Т.A. Nuclear proteins. III. The fibrillar nature of the nuclear matrix. // Exp.
35. Cell Res. 1976. Vol. 103. P. 341-360. Comings D.E., Wallack A.S. DNA-binding properties of nuclear matrix proteins. // J. Cell Sci. 1978. Vol. 34. P. 233-246.
36. Cook P.R. A chromomeric model for nuclear and chromosome structure. // J. Cell Sci. 1995. Vol. 108. P. 2927-2935.
37. Cook P.R. The organization of replication and transcription. // Science. 1999. Vol. 284. P. 17901795.
38. Cytol. 1995. Vol. 165A. P. 191-250. Dijkwel P.A., Mullenders L.H.F., Wanka F. Analysis of the attachment of replicating DNA to a nuclear matrix in mammalian interphase nuclei. // Nucl. Acids. Res. 1979. Vol. 6. P. 219230.
39. DuPraw E.J. Evidence for a "folded-fibre" organization in human chromosomes. // Nature. 1966. Vol. 209. P. 577-581.
40. Earnshaw W.C., Laemmli U.K. Siver staining the chromosome scaffold. // Chromosoma. 1984. Vol. 89. P. 186-192.
41. Earnshaw W.C., Halligan В., Cooke С.A., Heck M.M.S., Liu L.F. Topoisomerase II is a structural component of mitotic chromosome scaffold. // J. Cell Biol. 1985. Vol. 100. P. 1706-1715.
42. Earnshaw W.C., Heck M.M.S. Localization of topoisomerase II in mitotic chromosomes. // J. Cell Biol. 1985. Vol. 100. P. 1716-1725.
43. Fais D., Prusov A.N., Polyakov V.Yu. The anchorosome, a special chromatin granule for theanchorage of the interphase chromosome to the nuclear envelope. // Cell Biol. Int. Rep. 1989. Vol. 13. P. 747-58.
44. Fernandes D.J., Danks M.K., Beck W.T. Decreased nuclear matrix DNA topoisomerase II in human leukemia cells resistant to VM-26 and m-AMSA. // Biochemistry. 1990. Vol. 29. P. 42354241.
45. Gasser S.M., Laemmli U.K. Cohabitation of scaffold binding regions with upstream/enhancer elementa of three developmentally regulated genes of D. melanogaster. // Cell. 1986. Vol. 46. P.521-530.
46. GeitlerL. Chromosomenban.//Protoplasma monographien. 1938. 14. 1-190.
47. Georgiev G.P., Vassetzky Y.S., Luchnik A.N., Chernokhvostov V.V., Razin S.V. Nuclear skeleton, DNA domains and control of replication and transcription. // Eur. J. Biochem. 1991. Vol. 200. P.613-624.
48. Gerdes M.G., Carter КС, Moen jr P.Т., Lawrence J.B. Dynamic changes in the higher-level chromatin organization of specific sequences revealed by in situ hybridization to nuclear halos. // J. Cell Biol. 1994. Vol. 126. P. 289-304.
49. Hancock R. A new look at the nuclear matrix. // Chromosoma. 2000. Vol. 109. P. 219-225.
50. Hancock R., Hughes M.E. Organisation of DNA in the interphase nucleus. // Biol. Cell. 1982. Vol. 44. P. 201-212.
51. Hao S., Jiao M., Huang B. Chromosome organization revealed upon the decondensation of telophase chromosomes in Allium. Chromosoma. 1990. Vol. 99. P. 371-378.
52. Hao S., Jiao M., Zhao J., Huang B. Reorganization and condensation of chromatin in mitotic prophase nuclei of Allium сера. Chromosoma. 1994. Vol. 103. P. 432-440.
53. Heck MMS, Earnshaw WC (1988) Topoisomerase II: a specific marker for cell proliferation. J Cell Biol 103:2569-2581
54. Heidenhain M. Plazma und Zelle. 1907. Jena, G. Fischer
55. Hernandez-Verdun D., Hubert J., Bourgeois C. A., Bouteille M. Ultrastructural localization of Ag-NOR stained proteins in the nucleolus during the cell cycle and in other nucleolar structures. // Chromosoma. 1980. Vol. 79. P. 349-362.
56. Howell W. M., Black D.A. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protractive colloidal developer: a 1-step method. // Experientia. 1980. Vol. 36. P. 10141015.
57. Howell W.M., Hsu T.C. Chromosome core structure revealed by silver staining. Chromosoma. 1979. Vol. 73. P. 61-66.
58. Hozak P., Zatsepina O., Vasilyeva I., Chentsov Yu. An electron microscopic study of nucleolus-organizing regions at some stages of the cell cycle (Go period, G2 period, mitosis). // Biol. Cell. 1986. Vol. 57. P. 197-206.
59. Hozak P., Hassan A.B., Jackson D.A., Cook P.R. Visualization of replication factories attached to a nucleoskeleton. // Cell. 1993. Vol. 73. P. 361-373.
60. Kaufmann B.P. Chromonemata in somatic and meiotic mitosis. // Amer Naturalist. 1931. Vol. 65. P. 280-283.
61. Kaufmann B.P. Chromosome structure in relation to the chromosome cycle.// Bot. Rev. 1948. Vol. 14. P. 57-126.
62. Kaufmann S.H., Coffey D.S., Shaper J.H. Consideration in the isolation of rat liver nuclear matrix, nuclear envelope and pore complex lamina. //Exp. Cell Res. 1981. Vol. 132. P. 105-123.
63. Kaufmann S.H., Shaper J.H. A subset of non-histone nuclear proteins reversibly stabilized by the sulfhydryl crosslinking reagent tetrathionate. Polypeptides of the internal nuclear matrix. // Exp. Cell Res. 1984. Vol. 155. P. 477-495.
64. Marsden M.P.F., Laemmli U.K. Metaphase chromosomes structure: evidence for a radial loop model. // Cell. 1979. Vol. 17. P. 849-828.
65. Matsukuma S., Utakoji T. Non-histone protein associated with centromere heterochromatin in the mouse chromosomes. //Exp. Cell Res. 1977. Vol. 105. P. 217-222.
66. McCready S.J., Godwin J., Mason D.W., Brazell I.A., Cook P.R. DNA is replicated at the nuclear cage. //J. Cell Sci. 1980. Vol. 46. P. 365-386.
67. Metzner R. Beitrage zur Granulalehre. I. Kern und Kerteilung. // Arch. Anat. Und Physiol., Physiol. Abt.
68. Meyer K.N., Kjeldsen E., Straub Т., Knudsen B.R., Hickson I.D., Kikuchi A., Kreipe H., Boege F. Cell cycle-coupled relocation of types I and II topoisomerases and modulation of catalytic enzyme activities. // J. Cell Biol. 1997. Vol. 136. P. 775-788.
69. Minguez A., Moreno Diaz de la Espina S. In situ localization of nucleolin in plant nucleolar matrix. //Exp. Cell Res. 1996. Vol. 222. P. 171-178.
70. Mirkovich J., Mirauit M.-E., Laemmli U.K. Organization of the higher order chromatin loop: specific attachment sites on nuclear scaffold. // Cell. 1984. Vol. 39. P. 223-232.
71. Moreno Diaz de la Espina S.M. Nuclear matrix isolated from plant cells. // Int. Rev. Cytol. 1995. Vol. 162B. P. 75-139.
72. Nebel B.R. Chromosome structure in Tradescantia. I. Methods and Morphology. // Zeitschr. f. Zellf. u. Mikr. Anat. 1932. Vol. 16. P. 251-284.
73. Neri L.M., Fackelmayer F.O., Zweyer M., Kohwi-Shigematsu Т., Martelli A.N. Subnuclear localization of S/MAR-binding proteins is differently affected by in vitro stabilization with heat or Cu2+. //Chromosoma. 1997. Vol. 106. P. 81-93.
74. Neri L.M., Raymond Y., Giordano A., Borgatti P., Marchisio M., Capitani S., Martelli A.N. spatial distribution of lamin A and B1 in the K562 cell nuclear matrix stabilized with metal ions. // J. Cell. Biochem. 1999. Vol. 75. P. 36-45.
75. Nickerson J.A., Krochmalnic G., Wan K.M., Penman S. Chromatin architecture and nuclear RNA. //
76. Okada T.A., Comings D.E. Higher order structure of chromosomes. // Chromosoma. 1979. Vol. 72. P. 1-14.
77. Okada T.A., Comings D.E. A search for protein cores in chromosomes: is the scaffold an artefact. //
78. Phair R.D., Mistelli Т. High mobility of proteins in the mammalian cell nucleus. // Nature. 2000. Vol. 404. P. 604-609.
79. Pienta K.J., Coffey D.S. A structural analysis of the role of the nuclear matrix and DNA loops in the organization of the nucleus and chromosome. // J. Cell Sci. 1984. Suppl 1. P. 123-135.
80. Politz J.C., Tuft R.A., Pederson Т., Singer R.H. Movement of nuclear poly(A) RNA throughout the interchromatin space in living cells. // Curr. Biol. 1999. Vol. 9. P. 285-91.
81. Politz J.C., Pederson T. Review: movement of mRNA from transcription site to nuclear pores. J. Struct. Biol. 2000. Vol. 129. P. 252-257.
82. Pombo A., Jackson D.A., Hollinshead M., Wang Z., Roeder R.G., Cook P.R. Regional specialization in human nuclei: visualisation of discrete sites of transcription by RNA polymerase III. // EMBO J. 1999. Vol. 18. P. 2241-2253.
83. Raska I., Koberna K., Jarnik M., Petrasovicova V., Bednar J., Raska K. Jr, Bravo R. Ultrastructural immunolocalization of cyclin/PCNA in synchronized 3T3 cells. // Exp. Cell Res. 1989. Vol. 184. P. 81-9.
84. Rattner J.B., Branch A., Hamkalo B.A. Electron microscopy of whole-mount metaphase chromosomes. // Chromosoma. 1975. Vol. 52. P. 329-338.
85. Razin S.V., Kekelidze M.G., Lukanidin E.M., Scherrer K., Georgiev G.P. Replication origins are attached to the nuclear skeleton. //Nucl. Acids Res. 1986. Vol. 14. P. 8189-8207.
86. Razin C.V., Gromova 1.1., Iarovaia O.V. Specificity and functional significance of DNA interaction with the nuclear matrix: new approaches to clarify the old questions. // Int. Rev. Cytol. 1995. Vol. 162B. P. 404-448.
87. Resende F. Uber die Chromosomenstruktur in der Mitose der Wurzelspitzen. II. Sat-differenzierungen, Spiralbau und Chromonemata. // Chromosoma. 1940. 1. 486.
88. Reznik N.A., Yampol G.P., Kiseleva E.V., Khristolyubova N.B., Gruzdev A.D. Functional and structural units in the chromomere. // Genetica. 1991. Vol. 83. P. 293-299.
89. Ris H. Chromosome structure. // A simposium on the chemical basis of heredity. Baltimore. 1957. P. 23-62.
90. Roussel P., Hernandez-Verdun D. Identification of Ag-NOR proteins, markers of proliferation related to ribosomal gene activity. //Exp. Cell Res. 1994. Vol. 214. P. 465-472.
91. Setterfield G., Hall R., Bladon J., Little J., Kaplan J.G. Changes in structure and composition of lymphocyte nuclei during mitogenic stimulation. // J. Ultrastruct. Res. 1983. Vol. 82. P. 264-282.
92. Singh O.P., Bjorkroth В., Masich S., Wielander L., Daneholt В., The intranuclear movement of Balbiani ring premessenger ribonucleoprotein particles. Exp. Cell Res. 1999. Vol. 251. P. 135-146.
93. Sonnenbichler J. Nucleoprotein complexes: possible subunits of chromosomes. // Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur Physiologische Chemie. 1969a. Vol. 350. P. 761-766.
94. Sonnenbichler J. Substructures of chromosomes. // Nature. 1969b. Vol. 223. P. 205-206.
95. Sparvoli E., Gay H., Kaufmann P. Number and pattern of association of chromonemata in the chromosomes of Tpadescantia. // Chromosoma. 1965. Vol. 16. P. 415-435.
96. Stack S.M., Amderson L.K. A model for chromosome structure during the mitotic and meiotic cell cycle. // Chromosome Res. 2001. Vol. 9. P. 175-198.
97. Strissel P.L., Espinosa III R., Rowley J.D., Swift H. Scaffold attachment regions in centromere-associated DNA. //Chromosoma. 1996. Vol. 105. P. 122-133.
98. Tan J., Wooley J.C., LeStourgeon W.M. Nuclear matrix-like filaments and fibrogranular complexes form through the rearrangement of specific nuclear ribonucleoproteins. // Mol. Biol. Cell. 2000. Vol. 11. P. 1547-1554.
99. Tikhonenko A.S., Bespalova I.A., Martinkina L.P., Popenko V.I., Sergejeva G.I. Structural organization of macronuclear chromatin of the ciliate Bursaria truncatella in resting cysts and at excysting. // Eur. J. Cell Biol. 1984. Vol. 33 P. 37-42.
100. Van der Velden H.M.W., Willigen G., Wetzels R.H.W., Wanka F. Attachment of origins of replication to the nuclear matrix and the chromosomal scaffold. // FEBS Lett. 1984. Vol. 171.P. 13-16.
101. Veidovsky F. Zum Problem der Vererbungstrager. // Prag., Bohmische Ges. Wissenschaften. 1912.
102. Vogelstein В., Pardoll D.M., Coffey D.S. Supercoiled loops and eucaryotic DNA replication. // Cell. 1980. Vol. 22. P. 79-85.
103. Widom J. Phisicochemical studies of the folding of the 100 A nucleosome filament into the 300 A filament. // J. Mol. Biol. 1986. Vol. 190. P. 411-424.
104. Yang X., Zhang Z. In situ induction of G-bands and macrocoils in plant chromosomes. // Hereditas. 1988. V. 109. P. 45-51.
105. Zachar Z., Kramer J., Mims I.P., Bingham P.M. Evidence for channeled diffusion of pre-mRNAs during nuclear RNA transport in metazoans. // J. Cell Biol. 1993. Vol. 121. P. 729-742.
106. Zatsepina O.V., Polyakov V.Yu., Chentsov Yu.S. Chromonema and chromomere: structural units of mitotic and interphase chromosomes. // Chromosoma. 1983. Vol. 88. P. 91-97.
107. Zatsepina O.V., Polyakov V.Yu., Chentsov Yu.S. Differential decondensation of mitotic chromosomes during hypotonic treatment of living cells as a possible cause of G-banding: anultrastructural study. //Chromosoma. 1989. Vol. 98. P. 109-116.
108. Zhao J., Hao S., Xing M. The fine structure of the mitotic chromosome core (scaffold) of Trilophidia annulata. // Chromosoma. 1991. Vol. 100. P. 323-329.
109. Zini N., Santi., Ognibene A., Bavelloni A., Neri L.M., Valmori A., Mariani E., Negri C. Discrete localization of different DNA topoisomerases in HeLa and K562 cell nuclei and subnuclear fractions. //Exp. Cell Res. 1994. Vol. 210. P. 336-348.
110. Рис. 1. Структурная организация ядер гепатоцитов крысы, изолированных в условиях, стабилизирующих (а) и дестабилизирующих (б) ядерный матрикс. и структура полученных из них нуклеоидов 1-го (в) и 2-го (г) типов.
111. Полутонкие срезы, окраска толуидиновым синим.
112. Рис. 2. Структура нуклеоидов со стабилизированным (а, в) и нестабилизированным матриксом (б, г) Пары изображений (а-в и б-г) соответствуют одной структуре, сфотографированной с различной экспозицией.
113. Рис. 3. Структура ядер гепатоцитов крысы, изолированных в условиях стабилизации ядерного матрикса. Стрелками обозначены блоки конденсированного хроматина, треугольными стрелками кластеры интерхроматиновых гранул.> /
114. Рис. 6. Пермеабилизированные (а, в) и экстрагированные (б, г) клетки HeLa; а, б, ядерный матрикс стабилизирован, в, г - ядерный матрикс нестабилизирован.
115. Полутонкие срезы, окраска толуидиновым синим; время окрашивания пермеабилизированных клеток 3 мин, экстрагированных клеток -10 мин.
116. Рис. 8. Распределение PCNA в клетках HeLa, пермеабилизированных (а, б) и экстрагированных (в,г) в условиях "стабилизации" ядерного матрикса; а, в антитела к PCNA, б, г - DAPI.
117. В пермеабилизированных клетках с гомогенным распределением метки (стрелка) наблюдается "кластеризация" окрашивания. Клетки, не содержащие метки, отмечены треугольными стрелками.в
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.