Изучение функциональных свойств макрофагов человека и влияние на них компонентов клеточной стенки бактерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Ильинская, Анна Николаевна

• Ильинская, Анна Николаевна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Ильинская, Анна Николаевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Макрофаги.

Происхождение и дифференцировка.

Морфологические и функциональные свойства.

Поверхностные молекулы.

Активация макрофагов.

Врожденный и адаптивный иммунитет.

Классический путь активации.

Альтернативный путь активации.

Инактивация макрофагов.

Пептидогликан.

Строение пептидогликана.

Ферментативное расщепление пептидогликана.

Распознавание пептидогликана.

PGRP.

Биологическая активность пептидогликана.

Биологическая активность мурамил-пептидов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Реактивы и оборудование.

Реактивы.

Оборудование.

Выделение лейкоцитов.

Оценка фагоцитарной активности клеток.

Оценка бактерицидной способности клеток.

Получение макрофагов и дендритных клеток.

Индукция созревания дендритных клеток.

Стимуляция макрофагов.

Фенотипический анализ.

Определение цитокинов.

Статистическая обработка результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности макрофагов, нейтрофилов и незрелых дендритных клеток.

Изучение фенотипических и некоторых функциональных изменений макрофагов под действием компонента пептидогликана.

Воздействие ГМПП на процесс созревания дендритных клеток.

Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности макрофагов.

Оценка фенотипических изменений.

Продукция цитокинов.

Сравнительный анализ фенотипических и функциональных изменений под действием мурамил-пептидных препаратов.

Влияние ГМДП и ГМПП на фагоцитарную и бактерицидную активность гуткрофагов.

Влияние ГМДП и ГМПП на экспрессию молекул на поверхности макрофагов.

Влияние ГМПП и ГМДП на продукцию цитокинов.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение функциональных свойств макрофагов человека и влияние на них компонентов клеточной стенки бактерий»

Макрофагам принадлежит одна из ключевых ролей в формировании защитных механизмов организма. Способность макрофагов распознавать, поглощать, элиминировать и представлять на своей поверхности в составе главного комплекса гистосовместимости антигенный материал позволяет этим клеткам быть связующим звеном врожденного и адаптивного иммунных ответов. Среди микроорганизмов, узнаваемых макрофагами, бактерии являются одним из самых многообразных классов патогенов [Nau et al., 2002]. Многие из них приобрели способность ускользать от иммунного надзора. Изучение процесса формирования ответа иммунной системы и изменений, происходящих в иммуннокомпетентных клетках, поможет распознать тактику микроорганизмов, позволяющую обойти защитные механизмы. Макрофаги и нейтрофилы относятся к фагоцитам и участвуют в формировании первой линии защиты организма, однако, благодаря способности представлять антиген на своей поверхности, макрофаги относят к классу антиген-презентирующих клеток.

Тот факт, что для дендритных клеток (ДК), являющихся антиген-презептирующими, описан процесс созревания после взаимодействия с микробными структурами, что находит отражение в функциональных и феиотипических изменениях, позволил предположить, что подобным изменениям, возможно, подвергаются и макрофаги.

Макрофаги обладают ограниченным набором рецепторов, позволяющим распознавать консервативные микробные паттерны. Пептидогликан, образующий клеточную. стенку бактерий, представляет собой подобную структуру. Было показано, что биологической активностью обладает и компонент муреина - мурамил-дипептид (МДП). Было синтезировано огромное количество аналогов на базе данного соединения, некоторые, благодаря своим иммуностимулирующим свойствам, нашлиприменение в клинической практике. Однако существует мнение, что возможности получения высоко активных иммуностимулирующих веществ из клеточной стенки бактерий, содержащих различные аналоги МДП, не является исчерпанными. Можно предположить, что МДП-содержащие структуры, имеющие разветвленный и более богатый по аминокислотному составу олигопептид, являющийся более близким к естественной биологической структуре, будут обладать и более сильной иммуностимулирующей активностью, чем МДП и другие дипептидные соединения.

Цель работыЦелью работы явилась оценка функциональных изменений, происходящих в макрофагах, полученных из моноцитов периферической крови человека, при действии мурамил-пептидпых препаратов.

Задачи исследования1. Сравнить фагоцитарную и бактерицидную активность трех типов клеток: истинно фагоцитов - нейтрофилов, истинно антиген-презентирующих клеток - ДК и макрофагов, относящихся как к фагоцитам, так и к антигеп-презентирующим клеткам.

2. Оценить некоторые функциональные изменения макрофагов (фагоцитарную и бактерицидную активность, продукцию цитокинов) при действии мурамил-пептидного препарата.

3. Оценить фенотипические изменения макрофагов при действии мурамил-пептидного препарата.

4. Сравнить фенотипические и некоторые функциональные изменения, возникающие при действии мурамил-пептидов, отличных по структуре и аминокислотному составу.

Научная новизнаВпервые проведено сравнение способности к киллингу поглощенного стафилококка трех типов фагоцитирующих клеток: нейтрофилов, макрофагов и незрелых ДК. Причем наибольшей бактерицидной активностью обладают нейтрофилы, наименьшей — незрелые ДК, макрофаги по этому свойству занимают промежуточное положение.

Было показано впервые, что макрофаги, полученные из моноцитов периферической крови человека, in vitro претерпевают процесс созревания после воздействия мурамил-пептидпого препарата, схожий с процессом, наблюдаемым у ДК, что находит отражение в изменении спектра синтезируемых цитокинов, уменьшении фагоцитарной активности, что сопровождается усилением бактерицидности. Фенотипические изменения характеризуются уменьшением экспрессии рецепторов, опосредующих взаимодействие с бактериальными паттернами, и усиление экспрессии молекул, участвующих в презентации антигена.

Впервые было показано, что из двух препаратов, в основе которых лежит мурамил-пептидное основание, большей активностью обладает более разветвленная и богатая по аминокислотному составу структура, что характеризуется более выраженной индукцией процесса созревания макрофагов, полученных из моноцитов периферической крови человека.

Практическая значимостьИзучение комплекса изменений, возникающих в макрофагах при действии бактериальных продуктов, может дать возможность распознать способы, позволяющие патогенам ускользать от защитных механизмов организма.

Оценка биологической активности различных структур на мурамил-нентидной основе поможет найти вещества, обладающие большей иммуностимулирующей активностью.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Ильинская, Анна Николаевна

выводы

1. При сравнении фагоцитарной и бактерицидной активности нейтрофилов периферической крови человека, макрофагов и ДК, полученных из моноцитов периферической крови человека, было показано, что наибольшей фагоцитарной и бактерицидной способностью обладают нейтрофилы, причем максимальной нарастание киллерной активности развивается в первые часы после поглощения бактерий. Для макрофагов и ДК характерно постепенное, в течение суток, нарастание бактерицидной активности, и способность уничтожать бактерии, более выражена у макрофагов.

2. При действии на макрофаги, полученные из моноцитов периферической крови человека, бактериального препарата, в основе которого находится мурамил-пептидная структура, отмечаются некоторые функциональные изменения, похожие на изменения, возникающие при созревании ДК. После воздействия препарата отмечается снижение фагоцитоза и нарастание бактерицидной активности. Изменения затрагивают и спектр синтезируемых цитокинов: макрофаги начинают продуцировать ИЛ-12 р70, ФНО-а, ИЛ-1р.

3. При действии на макрофаги, полученные из моноцитов периферической крови человека, бактериального препарата, в основе которого находится мурамил-нептидная структура, отмечаются некоторые фенотипические изменения, сходные с таковыми при созревании ДК. Это выражается в уменьшении экспрессии рецепторов, взаимодействующих с бактериальными паттернами и структур, опосредующих фагоцитоз. При этом увеличивается экспрессия структур, участвующих в представлении антигена на поверхности клеток.

4. При сравнении действия ГМДП и ГМПП на макрофаги, полученные из моноцитов периферической крови человека, оказалось, что структура, более разветвленная и богатая по аминокислотному составу способна в

большей степени вызывать созревание макрофагов, в сравнении с ГМДП. Это отражается в более выраженных фенотипических и функциональных изменениях, возникающих в макрофагах, подвергшимся воздействию

препаратов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Ильинская, Анна Николаевна, 2005 год

1. Андронова Т.М., Дозморов И.М., Мустафаев М.И. Синтетические иммуномодуляторы. М., "Наука", 1991.

2. Мазуров Д.В., Пинегин Б.В. Применение проточной цитометрии для оценки поглотительной и бактерицидной функции гранулоцитов и моноцитов периферической крови. Иммунология, 1999, №9, с.154-156.

3. Мазуров Д.В., Дамбаева С.В., Пинегин Б.В. Оценка внутриклеточного киллинга стаффилококка фагоцитами периферической крови с помощью проточной цитометрии. Иммунология, 2000, № 2, с.57-59.

4. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Рубакова Э.И. Система цитокинов. М., 1999.

5. Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Основные свойства дендритных клеток. Иммунология, 2001, №4, с.7-16.

6. Пинегин Б.В., Андронова Т.М., Карсонова М.И. Препараты мурамилдипептидного ряда - иммунотропные лекарственные средства нового поколения. Int. J. Immunoreh., 1997, №6, p. 1-11.

7. Покровский В.И., Поздеев O.K., Байчурина А.Ф., Гильманова Г.Ф., Григорьев В.Е., Ершов Ф.И., Ильинская О.Н., Мальцева Е.С., Прозоровский В.И., Халилов Э.М., Черепнёв Г.В. Медицинская микробиология. М., "ГЭОТАР Медицина", 1999.

8. Чкадуа Г.З., Заботина Т.Н., Буркова А.А. и соавт. Адаптирование методики культивирования дендритных клеток человека из моноцитов периферической крови для клинического применения. Российский биотерапевтический журнал, 2002, №3, с.56-62.

9. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы и некоторые аспекты их клинического применения. Клиническая медицина, 1996, №8, с.7-12.

10. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М., "Медицина", 1999.

11. Aderem A., Underhill D. Mechanism of phagocytosis in macrophages. Annu. Rev. Immunol., 1999, v. 17, p.593-622.

12. Aderem A., Ulevitch R. Toll-like receptors in induction of innate responses. Nature, 2000, v.406, p.782-787.

13. Akagawa K. Differentiation and function of human monocytes. Hum.Cell., 1994, v.7, p. 116-120.

14. Akagawa K. Functional heterogeneity of colony-stimulating factor-induced human monocyte-derived macrophages. Int. J. Hematol., 2002, v.76, p.27-34.

15. Athman R., Philpott D. Innate immunity via Toll-like receptors and Nod proteins. Curr. Opin. Microbiol., 2004, v.7, p.25-32.

16. Audibert F., Lise L. Adjuvants: current status, clinical perspectives and future prospects. Immunology today, 1993, v.14, p.281-284.

17. Azuma I. Review: inducer of cytokine in vivo: overview of field and Romurtide experience. Int. J. Immunopharmac., 1992, v.14, № 3, p.487-496.

18. Banchereau J. Immunobiology of dendritic cells. Annu. Rev. Immunol., 2000, v,18,p.767-811.

19. Berrebi D., Maudinas R., Hugot J.P., Chamaillard M., Chareyre F., De Lagausie P. Card 15 gene overexpression in mononuclear and epithelial cells of the inflamed Crohn's desease colon. Gut, 2003, v.52, p.840-846.

20. Boyum A. Isolation of leucocytes from human blood. Futher observations. Methylcellulose, dextran and ficoll as erythrocyteaggregating agents. Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl., 1968, v.97, p.31-50. '

21. Chamaillard M., Girardin S.E., Viala J., Philpott D.J. Nods, Nalps and Naip: intracellular regulators of bacterial-induced inflamation. Cell. Microbiol., 2003, v.5, №9, p.581-592.

22. Chloe K.-M., Werner Т., Stoven S., Hultmark D., Anderson K.V. Requirement for peptidoglycan recognition protein in relish activation and antibacterial immune response in Drosophila. Science, 2002, v.296, p.359-362.

23. Clarke A.J., Dupont C. O-acetylated peptidoglycan: its occurance, a pathobiological significance, and biosynthetesis. Can. J. Microbiol., 1992, v.38, p.85-91.

24. Cummings N.P., Pabst M.J., Johnson R.B. Activation of macrophages for enchanccd release of superoxide anion and greater killing of Candida albicans by injection of muramyl di peptide. J. Exp. Med., 1980, v. 152, p.1659-1669.

25. Domeika K., Berg M., Eloranta M.L., Aim G.V. Porcine interleukin-12 fusion protein and interleikin-18 in combination induce interferon-gamma production in porcine natural killer and T cells. Vet. Immunol. Immunopathol., 2002, v.86, p.l 1-21.

26. Dziarski R. Recognition of bacterial peptidoglycan by innate immunesystem. CMLS, 2003, v.60, p. 1793-1804.

27. Dziarski R. Peptidoglycan recognition protein (PGRPs). Mol. Immunol., 2004, v.40, p.877-886.

28. Ellouz F., Adam A., Ciorbaru R., Lederer E. Minimal structural requirement for adjvant activity of bacterial peptidoglycan derivatives. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1974, v.59, p.1317-1325.

29. Freud J. The mode of action of immunological adjuvants. Adv. Tuber. Res., 1956, v.l, p.30-148.

30. Fujihara M., Muroi M., Tanamoto K., Suzuki Т., Azuma H., Ikeda H. Molecular mechanisms of macrophage activation and deactivation by lipopolysaccharide: roles of the receptor complex. Pharm. Therap., 2003, v.100, p.171-194.

31. Girardin S., Boneca I., Carneiro L., Antignac A., Jehanno M., Viala J., Tedin K., Taha M., Labigne A., Zathringer U. Nodi detect a unique muropeptide from Gram-negative bacterial peptidiglycan. Science, 2003, v.300, p. 1584-1587.

32. Gordon S. Fundamental Immunology, 1999.

33. Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat. Rev. Immunol., 2003, v.3,p.23-35.

34. Gutierrez O., Pipaon C., Inohara N., Fontalba A., Ogura Y., Prosper F., Nunez G., Fernandez-Luna J.L. Induction of Nod 2 in myelomonocytic and intestinal epithelial cells via nuclear factor NF-кВ activation. J. Biol. Chem., 2002, v.277, p.41701-41705.

35. Hadden J. Immunostimulants. Immunology today, 1993, v. 14, p.275-280.

36. Halassy В., Krstanovic M., Frkanec R., Tomasic J. Adjuvant activity ofpeptidoglycan monomer and its metabolic products. Vaccine, 2003, v.21, p.971-976.

37. Hamerman J., Aderem A. Functional transitions in macrophages during in vivo infection with Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin. J. Immunol., 2001, v. 167, p.2227-2233.

38. Hashimoto S., Suzuki Т., Dong H., Yamazaki N., Matsushima K. Serial analysis of gene expression in human monocytes and macrophages. Blood, 1999, v.94, p.837-844.

39. Heinzelmann M., Polk H.C. Jr.,Chernobelsky A., Stites T.P., Gordon L.E. Endotoxin and muramyl dipeptide modulate surface receptor expression on human mononuclear cells. Immunopharmacology, 2000, v.48, p. 117128.

40. Hoffman J.A., Reichhart J.-M. Drosophila innate immunity: an evolutionary perspective. Nature Immunol., 2002, v.3, p.121-126.

41. Janeway C. Immunobiology. Garland, 2001.

42. Janeway C., Medzhitov R. Innate immune recognition. Annu. Rev. Immunol., 2002, v.20, p. 197-216.

43. Jolles P. A possible physiological function of lysozyme. Biomedicine, 1976, v.25, p.275-276.

44. Imeri L., Opp M.R., Krueger J.M. An IL-1 receptor and an IL-1 receptor antagonist attenuate muramyl dipeptide- and IL-1-induced sleep and fever. Am. J. Physiol., 1993, v.265, p.907-913.

45. Inohara N., Nunez G. The NOD: a signalling model that regulate apoptosis and host defence against pathogens. Oncogene, 2001, v.20, p.6473-6481.

46. Inohara N., Ogura Y., Nunez G. Nods: a family of cytosolic proteins that regulate the host response to pathogens. Curr. Opin. Microbiol., 2002, v.5, p.76-80.

47. Inohara N., Ogura Y., Fontalba A., Guttierrez O., Pons F., Crespo J. Host recognition of bacterial muramyl dipeptide mediated through NOD2: implication for Crohn's disease. J. Biol. Chem., 2003, v.278, p.5509-5512.

48. Inohara N., Nunez G. NOD: intracellular proteins involved in inflammation and apoptosis. Nature Reviews, 2003, v.3, p.371-382.

49. Kang D., Liu G., Lundstrom A., Gelius E., Steiner H. A peptidoglycan recognition protein in innate immunity conserved from insects to mammals. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, v.95, p. 10078-10082.

50. Kierszenbaum F., Ferraresi R.W. Enhancement of host resistance against Trypanosoma cruzi infection by the immunoregulatory agent muramyl dipeptide. Infect. Immun., 1979, v.25, p.273-278.

51. Klimp A., de Vries E., Scherphof G., Daemen T. Apotential role of macrophage activation in the treatment of cancer. Hematology, 2002, v.44, p.143-161.

52. Koch A.L. Bacterial wall as target for attack: past, present, and future research. Clin. Microbiol. Rev., 2003, v.16, №4, p.673-687.

53. Ladesic В., Tomasic J., Kveder S., Hrsak I. The metabolic fate of 14C-labeled immunoadjuvant peptidoglycan monomer. In vitro studies. Biochim. Biophys. Acta, 1981, v.678, p.12-17.

54. Lui C., Xu Z., Gupta D., Dziarski R. Peptidoglycan recognition protein: a novel family of four human innate immunity pattern recognition molecules. J. Biol. Chem., 2001, v.276, p.34686-34694.

55. Ma J., Chen Т., Mandelin J., Ceponis A., Miller N.E., Hukkanen M., Ma G.F., Konttinen Y.T. Regulation of macrophage activation. CMLS, 2003, v.60, p.2334-2346.

56. Mcinnes A., Rennick D.M. Interleukin-4 induces cultured monocytes/macrophages to form giant multinucleated cells. J. Exp. Med., 1988, v.167, p.598-611.

57. Medzhitov R. Toll-like receptors and innate immunity. Nat. Rev. Immunol, 2001, v. 1,р.135-145.

58. Meldrum D.R., Cleveland J.C., Moore E.E., Partrick D.A., Banerjee A., Harken A.H. Adaptive and maladaptive mechanisms of cellular priming. Ann. Surg., 1997, v.226, p.587-598.

59. Michel Т., Reichhart J.M., Royet J. Drosophila Toll is activated by Gram-positive bacteria through a circulating peptidoglycan recognition protein. Nature, 2001, v.414, p.756-759.

60. Mokoena Т., Gordon S. Activation of human macrophages. Modulation of mannosyl, fucosyl receptors for endocytosis by lymphokine, a and у interferons and dexamethasone. J. Clin. Invest., 1985, v.75, p.624-631.

61. Moreillon P., Majcherczyk P.A. Proinflammatory activity of cell wall constituents from gram-positive bacteria. Scand. J. Infect. Dis., 2003, v.35, p.632-641.

62. Murata J., Kitamoto Т., Ohya Y., Ouchi T. Effect of dimerization of the D-glucose analogue of muramyl dipeptide on stimulation of macrophage-like cells. Carbohyd. Res., 1997, v.297, p.127-133.

63. Nanninga N. Morphogenesis of Escherichia coli. Microbiol. Mol. Biol. Rev., 1998, v.62, p.l 10-129.

64. Nathan C., Shiloh M. Reactive oxygen and nitrogen intermediates in the relationship between mammalian hosts and microbial pathogens. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, v.97, p.8841-8850.

65. Nau G., Richmond J., Schlesinder A., Jennings E., Lander E., Young R. Human macrophage activation programs induced by bacterial pathogens. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, v.99, p.1503-1508.

66. Ogura Y., Inohara N., Benito A., Chen F.F., Yamaoka S., Nunez G. Nod2, a Nodl/Apaf-1 family member that is restricted to monocytes andactivates NF-кВ. J. Biol. Chem., 2001, v.276, p.4812-4818.

67. Ogura Y., Bonen D.K., Inohara N., Nicolae D.L., Chen F.F., Ramos R. A frameshift mutation in NOD2 associated with susceptibility to Crohn's disease. Nature, 2001, v.411, p.603-606.

68. Oppenheim J.J., Togawa A., Chedid L., Mizel S. Component of mycobacteria and muramyl dipeptide with adjuvant activity induce lymphocyte activating factor. Cell. Immun., 1980, v.50, p. 71-81.

69. Pabst M.J., Beranova-Giorgianni S., Krueger J.M. Effect of muramyl peptides on macrophages, monokines, and sleep. Neuroimmunomodulation, 1999, v.6, p.261-283.

70. Parant M., Parant F., Chedid L. Enhancement of neonate's non-specific immunity to Klebsiella infection by muramyl peptide, a synthetic immunoadjuvant. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, p.3395-3399.

71. Pu Z., Carrero J.A., Unanue E.R. Distinct recognition by two subsets of T cells of an MHC class II-peptide complex. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, v.99, p.8844-8849.

72. Randolph G., Beaulieu J., Lebecque S., Steinman R., Muller W. Differentiation of monocytes into dendritic cells in a model of transendothelial trafficking. Science, 1998, v.282, p.480-485.

73. Randolph G., Inaba D., Robbiani D., Steinman R., Muller W. Differentiation of phagocytic monocytes into lymph node dendritic cells in vivo. Immunity, 1999, v.ll,p.753-759.

74. Ravetch J., Clynes R. Divergent roles for Fc receptors and complement in vivo. Annu. Rev. Immunol., 1998, v.16, p.421-458.

75. Rehman A., Taishi P., Fang J., Majde J.A., Krueger J.M. The cloning of rat peptidoglycan recognition protein (PGRP) and its induction by sleep deprivation. Cytokine, 2000, v.13, p.8-17.

76. Schumann R.R., Leong S.R., Flaggs G.W., Gray P.W., Wright S.D., Mathison J.C., Tobias P.S., Ulevitch R.J. Structure and function oflipopolysaccharide binding protein. Science, 1990, v.249, p. 1429-1431.

77. Schwandner R., Dziarsky R, Wesche H., Rothe M., Kirschning C.J. Peptidoglycan- and lipoteichoic acid-induced cell activation is mediated by Toll-like receptor 2. J. Biol.Chem., 1999, v.274, p. 17406-17409.

78. Shimazu R., Akashi S., Ogata H., Nagai Y., Fukudome K., Miyake K., Kimoto M. MD-2, a molecule that confers lipopolysaccharide responsiveness on Toll-like receptor 4. J. Exp. Med., 1999, v. 189, p. 17771782.

79. Shimoda K. Lack of IL-4 induced Th2 response and IgE class switching in mice with disrupted Stat6 gene. Nature, 1996, v.380, p.630-633.

80. Takada H., Tsujimoto M., Kotani S., Kusumoto S., Inage M., Shiba Т., et al. Mitogenic effect of bacterial cell wall, their fragments, and related synthetic compounds on thymocytes and splenocytes of guinea pigs. Infect. Immun., 1979, v.25, p.645-652.

81. Takashi S., Kapas L., Fang J., Seyer J.M., Wang Y., Krueger J.M. An interleukin-1 receptor fragment inhibits spontaneous sleep and muramyl dipeptide induced sleep in rabbits. Am. J. Physiol., 1996, v.271, p. 101108.

82. Takeda K., Kamanaka M., Tanaka Т., Kishimoto Т., Akira S. Impaired IL-13-mediated function of macrophages in STAT6 deficient mice. J.1.munol., 1996, v. 157, p.3220-3222

83. Takeda K., Kaisho Т., Akira S. Toll-like receptors. Annu. Rev. Immunol., 2003, v.21,p.335-376.

84. Takeuchi 0.,Kawai Т., Muhlradt P.F., Morr M.,Radolf J.D., Zychlinsky A. Discrimination of bacterial lipoproteins by Toll-like receptor 6. Int. Immunol., 2001, v.13, p.933-940.

85. Takeuchi O., Sato S., Horiuchi Т., Hoshino K., Takeda K., Dong Z. Role of Toll-like receptor 1 in mediating immune responses to microbial lipoproteins. J. Immunol., 2002, v.169, p.10-14.

86. Werner G., Jolles P. Immunostimulating agents: what next? Europ. J. Biochem., 1996, v.242, p.1-19.

87. Werner Т., Liu G., Kang D., Ekengren S., Steiner H., Hultmark D. A family of peptidoglycan recognitionproteins in the fruit fly Drosophila melanogaster. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, v.97, p.13772-13777.

88. Wolfert M., Murray Т., Boons G., Moore J. The origin of the synergistic effect of muramyl dipeptide with endotoxin and peptidoglycan. J. Biol. Chem., 2002, v.277, p.39179-39186.

89. Wright S.D., Ramos R.A., Tobias P.S., Ulevitch R.J., Mathison J.C. CD 14, a receptor for complex of lipopolisaccharide (LPS) and LPS binding protein. Science, 1990, v.249, p.1431-1433.

90. Yoshida H., Kinoshita К., Ashida M. Purification of peptidoglycan recognition from hemolymphof silkworm, Bomdyx mori. J. Biol. Chem., 1996, v.271, p.13854-13860.