Изучение физико-химических и механо-химических свойств реконструированного актомиозина и альфа-актинина скелетных мышц лягушки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, Заалишвили, Т.М.

• Заалишвили, Т.М.
• 1984

Оглавление диссертации Заалишвили, Т.М.

Введение.

Глава I. Обзор литературы

1. Структура сократительного аппарата и белковой состав поперечно-полосатой мышцы.

2. Характеристика мышечных белков

А/ Миозин.II

Б/ Актин.

В/ Актомиозин.

Г/ Актомиозиновая АТФаза.

Д/ oL.

3. Взаимодействие о^-актинина с реконструированным актомиозином.

Взаимодействие о£-актинина с актином.

5. Модельные опыты мышечного сокращения.

Глава П. Методы исследования

1. Получение миозина А.

2. Получение актина.

3. Получение реконструированного актомиозина.

4. Получение о£-актинйна;-.

5. Оценка чистоты белковых препаратов.

6. Определение концентрации белков биуретовым реагентом.

7. Измерение суперпреципитации актомиозиновой суспензии методом измерения оптической плотности

8. Метод микрокалориметрии.

9. Вискозиметрия.

10. Метод диффузии.

11. Метод ультрацентрифугирования.

12. Парциальный удельный объем.

Глава Ш. Экспериментальная часть и обсуждение полученных результатов

I. Кинетика суперпреципитации и АТФазной активности реконструированного актомиозина скелетных мышц лягушки

А/ Влияние концентрации АТФ, ионов и рН на суперпреципитацию и АТФазную активность реконструированного актомиозина лягушки.

Б/ Влияние температуры и температурной преинкубации на суперпреципитацию и АТФазную активность реконструированного актомиоаина лягушки.

2. Взаимодействие оС-актинина лягушки с актином и реконструированным актомиозином

А/ Влияние оС-актинина лягушки на суперпреципитацию и АТФазную активность реконструированного актомиозина.

Б/ Влияние об-актинина лягушки на вязкость

Ф-актина.

В/ Температурная зависимость Г-Ф превращения актина лягушки в отсутствии и в присутствии oi -актинина.

3. Термодинамические параметры Г-актина, миозина

А, актомиозина и системы - АМ+АТФ.

Определение параметров -актинина из данных гидродинамических исследований.

А/ Гидродинамические параметры оС-актинина лягушки и его молекулярный вес.

Б/ Определение параметров -актинина лягушки в растворе из данных гидродинамических исследований.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение физико-химических и механо-химических свойств реконструированного актомиозина и альфа-актинина скелетных мышц лягушки»

Для установления механизма мышечного сокращения необходимо изучить свойства отдельных белковых компонентов мышцы и воссоздать из них модельные механохимические системы, имитирующие процесс сокращения m liitzo .

Добавление АТФ к суспензии актомиозина (AM) при низкой ионной силе (0=0,05) приводит к уплотнению агрегатов этого белкового комплекса; этот процесс, который рассматривается как модель мышечного сокращения, именуется суперпреципитацией (СПП).

На сегодняшний день принято, что суперпреципитация обусловлена АТФазной активностью актомиозина, а его взаимодействие с АТФ является моделью мышечного сокращения. Однако, хотя считается, что в основе сократительного акта и суперпреципитации лежат идентичные конформационные превращения сократительных белков, механизм и природа процесса суперпреципитации полностью не выяснены. С этой точки зрения определенное значение имеет установление скорости и степени суперпреципитации и АТФазной активности реконструированного актомиозина, полученного из разных представителей эволюционной лестницы, так как функция каждого мышечного белка существенно зависит от высокоупорядоченной структуры, которую он образует внутри мышечного волокна и от кооперативных биохимических взаимодействий, происходящих в этой структуре.

- Результаты исследований главных сократительных белков -актина и миозина, а также данные, полученные на актомиозиновом комплексе, реконструированном из чистых препаратов актина и миозина, недостаточны для объяснения многих черт механохимии

- 5 сокращения мышечного волокна, поэтому изучению минорных белков уделяется особое внимание.

Среди минорных белков миофибрилл особая роль принадлежит oL-актинину, так как его свойство повышать АТФазную активность, скорость и степень суперпреципитации актомиозина - позволяет предполагать, что он принимает участие в процессе сокращения. Однако вопрос об участии d-актинина в механохимическом процессе является открытым, так как ol-актинин не является необходимым для сокращения реконструированного актомиозина /65, 183/; влияет ol-актинин на взаимодействие актина и миозина непосредственно или через изменение структуры актинового филамента,остается невыясненным.

Учитывая способность об-актинина взаимодействовать с Ф-ак-тином и его возможную локализацию в области 2 диска можно приписать этому белку чисто структурную роль. Однако, как следует из данных Аракава и сотр. /58/ содержание ol-актинина в мышце слишком мало, чтобы он мог быть основным белком такой организованной структуры, какой является 2-диск.

Изучение действия d-актинина на Г-Ф превращение актина поперечно-полосатой мышцы кролика ыъ ultzo позволило предположить его регуляторную роль при образовании тонких филаментов /42/. Кроме того оказалось, что температура среды в значительной степени влияет на активность dl-актинина /40,72,97/.Послед-нее позволяет допустить, что ol-актинин, выделенный из мышц Шоднокровных может обладать свойствами, отличными от соответствующего белка теплокровных. Все эти свойства вызывают повышенный интерес к изучению ol-актинина из разных объектов.

Наибольшее количество исследований по физиологии и энергетике мышечного сокращения выполнено на скелетной мышце лягушки.

- 6

Наряду с летательными мышцами насекомых портняжная мышца лягушки часто используется также для изучения изменений расположения белковых компонентов в тонких и толстых филаментах методом дифракции Х-лучей. С другой стороны, наши знания в области сократительных белков мышц земноводных слишком скудны. Отсутствие детального биохимического исследования миозина лягушки в значительной степени объясняется его быстрой инактивацией /91/ и тенденцией образовать агрегаты /101/ при 0°С. Кроме того, в работах /91,101,110/ были отмечены трудности его очистки от примеси актина, загрязняющего препараты миозина, полученного с использованием стандартной процедуры приготовления препарата и процедуры диссоциации актомиозина по Веберу /226/.

Термодинамические и гидродинамические параметры сократительных белков теплокровных животных хорошо изучены, также хорошо изучены кинетика АТФазной реакции и суперпреципитации, и влияние ol-актинина на суперпреципитацию, АТФазную активность и Г-Ф превращение актина /5,6,9,10,II,38,40,41,42,54/. Эти вопросы в случав холоднокровных, в частности, лягушки, не исследовались. Восполнение этого пробела является чрезвычайно важным в целях сопоставления физико-химических и биофизических показателей механохимической системы мышц лягушки с их физиологическими показателями, тем более, что физиология нервно-мышечной системы в основном разработана на нервно-мышечном препарате лягушки. Оно важно также в аспекте углубления и расширения сравнительно-биологических исследований, так как определенное значение имеет изучение физико-химических и механо-хи-мических свойств мышечных белков животных, стоящих на разных ступенях эволюционного развития.

В связи со сказанным, актуальной проблемой является ис

- 7 следование физико-химических и механохимических свойств мышечных белков лягушки. Целью настоящей работы явилось исследование зависимостей скорости и степени суперпреципитации и АТФаз-ной активности реконструированного актомиозина лягушки от различных условий реакционной среды, изучение взаимодействия сС-актинина с актином и реконструированным актомиозином и определение гидродинамических и термодинамических параметров сократительных белков скелетных мышц лягушки.

- 8

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Заалишвили, Т.М.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ

Для исследования кинетики суперпреципитации и АТФазной активности реконструированного актомиозина, а также для определения термодинамических и гидродинамических параметров сократительных белков была разработана методика выделения сверхчистых препаратов миозина, актина и о(.-актинина из скелетных мышц лягушки Rana HidiSunda.

Проведенные нами эксперименты показали, что имеет место разобщение кривых зависимостей скорости и степени суперпреципитации и скорости актомиозиновой АТФазы от различных условий реакционной среды. Часть энергии, освобожденной в результате ферментативной реакции, диссипитирует без выполнения механической работы.

В результате изучения взаимодействия о£,-актинина лягушки с актомиозином получено, что максимумы скоростей суперпреципитации и АТФазной активности системы АМ+ оС-актинин лежат при 0,06М ЮСе. Способность с^-актинина увеличивать АТФазную активность и суперпреципитацию актомиозина зависит от количественного соотношения актомиозина и dl-актинина.

Добавление 1% dt-актинина значительно ускоряет Г-Ф превращение. Скрепление полимеров актина Л-актинином приводит к образованию сетчатой структуры, раствор переходит в гель. При 20°С, в случае лягушки, для образования геля требовалось свыше 11$ cL-актинина.

Изучение тепловой денатурации реконструированного актомиозина и системы АМ+АТФ при 3=0,05 показало, что температурный интервал плавления системы АМ+АТФ шире, чем суспензии актомиозина, а теплота плавления системы АМ+АТФ превышает

- 117 теплоту плавления актомиозина.

На основании всего изложенного выше можно сформулировать следующие выводы:

1. Как скорость суперпреципитации, так и скорость АТФазной реакции реконструированного актомиозина лягушки является линейной функцией отрицательного логарифма концентрации ионов о , Z

Mg и возрастают с увеличением концентрации АТФ до 10 М, после чего, вследствие частичного растворения актомиозина, скорости этих процессов уменьшаются.

2. Сопоставление зависимостей скорости и степени суперпреципитации и скорости актомиозиновой АТФазы от концентрации ионов К»<+ , рН среды и температуры дает разобщение кривых зависимостей. Для осуществления суперпреципитации вовсе не обязательно использование механохимической системой всей энергии, выделяемой при расщеплении АТФ.

3. Относительная вязкость Г-актина и суперпреципитация и АТФазная активность актомиозина лягушки, реконструированного из миозина и проинкубированного актина практически не меняются при преинкубации актина до 55^, в то время как относительная вязкость Ф-актина, начиная с 35°С, резко падает. Для суперпреципитации вовсе не требуются длинные цепи Ф-актина,процесс Г-Ф превращения актина в больших масштабах не может лежать в основе сокращения мышцы.

В то время как реконструированный актомиозин лягушки характеризуется высокой магний-активируемой АТФазной активностью, скорость и степень суперпреципитации актомиозина лягушки в некоторых случаях в 100 раз ниже скорости и степени суперпреципитации реконструированного актомиозина кролика. По

- Ц8 всей вероятности, при раздельном получении миозина и актина лягушки выпадают некоторые белковые факторы, необходимые для процесса сокращения. Однако нужно отметить, что различия в величинах скорости и степени суперпреципитации могут быть также обусловлены сезоном года.

5. Максимумы скоростей суперпреципитации и АТФазной активности системы АМ+ d -актинин лежат при 0,06М &С6, в то время как при изучении влияния ионной силы на суперпреципитацию и АТФазную активность реконструированного актомиозина получаются значительные разобщения этих зависимостей. По всей вероятности добавления ol-актинина к реконструированному актомиозину регулирует процесс суперпреципитации реконструированного актомиозина гидролизом АТФ, что позволяет заключить, что о(,-акти-нин может принимать непосредственное участие в механохимичес-ком процессе. При добавлении 50% оС-актинина /от полного веса актомиозина/ происходит заметное увеличение скорости и степени суперпреципитации и сравнительно слабое возрастание АТФазной активности.

6. Добавление 1% оС-актинина значительно ускоряет Г-Ф превращение актина, укорачивает латентный период полимеризации и уменьшает энергию активации от 8,7 до 4,9 ккал/моль. При низких концентрациях Д-5%/ d-актинин лягушки ускоряет процесс полимеризации, а свыше 7% не только ускоряет этот процесс, но и влияет на асимметрию фибрилл актина.

7. Тепловая денатурация Г-актина начинается с 46°С и заканчивается при 64°С /Т=18°С/. Характеристическая температура перехода Т^ равна 54°С. Теплота плавления Г-актина д0= 5,76 кал/г-град. Температурный интервал, в области которого происходит денатурация миозина А лТ равняется 44°С. Теплота

- 1X9 плавления миозина А д0= 6,70 кал/г-град.

При низкой ионной силе / С3= 0,05/ интервал температурного плавления системы актомиозина+АТФ шире / дТ = 29°С/, чем суспензии актомиозина /дТ = 20°С/. Теплота плавления системы актомиозин + АТФ /дО.= 1,71 кал/г-град/ превышает теплоту плавления актомиозина /д&= 1,40 кал/г-град/, что, видимо, указывает на образование под влиянием АТФ в частицах актомиозино-вой суспензии добавочных связей. По всей вероятности стрикция актомиозиновых частиц под влиянием АТФ, обусловлена возникновением именно этих связей.

8. Показано, что чистый препарат оС-актинина лягушки в среде содержащей 1мМ оСаНС03 , характеризуется следующими гидроо динамическими параметрами: Cv]] = 0,21 дл/г, Sao,* = 6,01* •Ю""13сек, if^bu = 2,79«10""7см2сек~1, \Т = 0,72 см3г"1. Молекулярный вес оС-актинина лягушки М=192000 дальтон, коэффициент относительного трения J/J0 = 2,02, а коэффициент асимметрии Р=20. Установлено, что длина и диаметр dL-актинина лягушки равны 385$ и 20$, соответственно.

9. Гидродинамические исследования показали, что oL-акти-нин лягушки по своим молекулярным параметрам не отличается от oL-актинина кролика и карпа.

10. Сравнивая результаты, полученные при исследовании биологической активности и молекулярных параметров ol-актинина кролика, зеркального карпа и лягушки можно заключить, что при переходе от одной ступени эволюционного развития животных к другой, основные базисные процессы в клетке не претерпели существенных изменений.

- 120

Список литературы диссертационного исследования Заалишвили, Т.М., 1984 год

1. Аналитические методы белковой химии. Под ред.П.Александроваи Р.Блока, М., ИЙЛ, 1963, 225.

2. Бейли Дж. Методы химии белков. М., "МИР" , 1965.

3. Белки, сб.под ред.Нейрата Г. и Бейли К. т.2, И., ИИЛД956.

4. Болотина Н.А., Вазина А.А., Волькенштейн М.В., Лисоцкая Н.С.,

5. Франк Г.М. Изучение Г-Ф перехода в актине методом оптической вращательной дисперсии. В сб. Биофизика мышечного сокращения. М., 1966, 197-202.

6. Бурджанадзе Т.В., Вепхвадзе Л.К., Кизирия Е.Л., Монаселидзе Д.Р., Привалов П.Л., Чарквиани Г.Г. Тепловая денатурация миозина, тяжелого и легкого меромиози-нов. В сб. Биофизика мышечного сокращения. М., "Наука", 1966, 218-223.

7. Бурджанадзе Т.В., Монаселидзе Д.Р., Бакрадзе Н.Г., Кизирия Е.Л., Чарквиани Г.Г. Тепловая денатурация фибриллярных белков. Труды юбилейной сессии Института физики АН ГССР. Тбилиси, 1968, 294-300.

8. Вазина А.А., Болотина И.А., Волькенштейн М.В., Лясоцкая

9. Н.С., Франк Г.М. Конформация полипептидной цепи в Г- и Ф-актине. Биофизика, 1965, 10, 567-570.

10. Гауровиц Ф. Химия и функция белков. М., "Мир", 1965.

11. Гачечиладзе Н.А. Механохимия сокращения синтетического актомиозина поперечно-полосатой мышцы. Автореферат канд.дисс., Тбилиси, 1974.

12. Гачечиладзе Н.А., Заалишвили М.М. Взаимодействие синтетического актомиозина поперечно-полосатой мышцы с АТФ. Сообщения АН ГССР, 1970, 59, 693-696.- 121

13. Гачечиладзе Н.А., Заалишвили М.М., Курдованидзе Ц.А.Влияние рН, концентрации ионов магния и калия на АТФазную активность и суперпреципитацию синтетического актомиозина. Сообщения АН ГССР,1970, 60, 601-604.

14. Гачечиладзе Н.А., Заалишвили М.М. Влияние температуры итемпературной преинкубации на суперпреципитацию и АТФазную активность синтетического актомиозина. Сообщ.АН ГССР, 1972, 66, 673-676.

15. Гедеванишвили Г.И., Стуруа М.Г., Ломидзе Л.Г., Исследование параметров молекулы cL-актинина карпа гидродинамическими методами. Тезисы докладов юбилейной конференции молодых ученых г.Тбилиси, 1981, 417.

16. Герасимов В.В., Геташвили Г.Р., Мелитаури Г.Г., Михайлов

17. B.C. Исследование тепловой денатурации рибо-нуклеазы методом термической спектроскопии.- Вопросы биохимии нервной и мышечной систем.1971, вып.2, 134-145.

18. Егиазарова А.Р., Стефаненко Г.А., Фурман В.Я., Бут Е.В.,

19. Миндадзе М.Р., Заалишвили М.М. Физико-химические свойства молекул тропонина и d-актинина.- Тезисы докладов Ш симпозиума "Биофизика мышечного сокращения", Ереван, 1971, 33.

20. Заалишвили М.М. О взаимодействии миозина и актомиозина саденозинтрифосфорной кислотой. Биохимия, I960, 25, 912-919.

21. Заалишвили М.М. Физико-химические основы мышечной деятельности. Тбилиси, 1971, 119.- 122

22. Заалишвили М.М., Актинины. В кн.: "Биофизические и биохимические методы исследования мышечных белков" под ред.Г.Р.Иваницкого, Ленинград, "Наука", 1978, 165-179.

23. Заалишвили Т.М., Кобахидзе Г.Т. Влияние концентрации АТФ,ионов магния и рН на суперпреципитацию и АТФазную активность синтетического актомиозина скелетных мышц лягушки. Сообщения АН ГССР, 1981, 103, 165-168.

24. Заалишвили Т.М., Кобахидзе Г.Т., Височек Л.М. Некоторыетермодинамические параметры главных сократительных белков скелетных мышц лягушки. Сообщения АН ГССР, 1981, 104, 461-464.

25. Заалишвили Т.М., Кобахидзе Г.Т. Взаимодействие oL-актинина лягушки Папа HudUiWcLa. с актином и реконструированным актомиозином. Известия АН ГССР, Серия биологическая, 1983, 9, 52-58.

26. Заалишвили Т.М., Кобахидзе Г.Т. Влияние ионной силы,температуры и температурной преинкубации Г-актина на суперпреципитацию и АТФазную активность синтетического актомиозина скелетных мышц лягушки, Сообщения АН ГССР, 1983, 109, 621-624.

27. Иванов И.И. Химическая динамика мышцы и подвижных клеток.1. М., "Медгиз", 1950.

28. Иванов И.И., Юрьев В.А. Биохимия и патобиохимия мышц. Л.1. Медгиз", 1961.

29. Иванов И.И., Лахова З.Н., Зиновьева И.Т., Мирович Н.И.,

30. Моисеева В.П., Паршина Э.Л., Тукачинский С.Е., Юрьев В.А., Фракционный состав белков и сокра- 123 тигельная функция мышц различных типов. Биохимия, 1969, 24, 451-457.

31. Йоу Д.Х. Нефрелометрия, М.-Л., 1936.

32. Кофман Е.Б. Суперпреципитация актомиозина. В кн.: "Биофизические и биохимические методы исследования мышечных белков" под ред.Г.Р.Иваницкого.Ленинград, "Наука", 1978, 40-54.

33. Лебедев А.А., Труды ГОИ 5, 53, 1931, цитируется по Цветкову В.Н., ЖЭТФ, 1951, 21, 701-710.

34. Любимова М.Н., Энгельгардт В.А. Аденозинтрифосфатаза имиозин мышцы. Биохимия, 1939, 4, 716.

35. Мартин Р. Введение в биофизическую химию, М., "МИР",1966.

36. Пантелеева Н.С., Кулева Н.В., Карандашев Э.А. Значениекарбоксильных и имидазольных групп белка для катализа реакции изотопного обмена кислорода миозином. Симпозиум по биофизике мышечного сокращения. Тезисы докладов, Ереван,1971,46.

37. Перри С. Взаимоотношения между химическими и сократительными свойствами клеток скелетных мышц и их структурой. В кн.: Современные проблемы биохимии, М., ИЛ, 1957, 148.

38. Пинаев Г.П. Изменение формы и размера частиц актомиозинапоперечнополосатой мускулатуры в онтогенезе. Биохимия, 1965, 30, 20-32.

39. Поглазов Б.Ф. Структура и функции сократительных белков,1. М., "Наука", 1965.

40. Поглазов Б.Ф., Баев А.А. О роли сульфгидрильных групп вполимеризации актина. Биохимия, 1961, 26, 535-540.- 124

41. Самосудова Н.В., Каламкарова М.Б., Огневицкая М.М. Локализация актина и тропомиозина в изолированных миофибриллах. В сб.: Биофизика мышечного сокращения. М., "Наука", 1966, 32-36.

42. Сент-Дьёрдьи А. О мышечной деятельности, М., "Медгиз",1947.

43. Стефаненко Г.А. Исследование некоторых физико-химическихсвойств ol-актинина поперечно-полосатой мышцы кролика. Автореферат канд.дисс.,Тбилиси,1975.

44. Стефаненко Г.А., кохашвили М.И., Григорьева Л.С., Миндадзе М.Р., Фурман В.Я., Заалишвили М.М. В кн.: Биофизика и биохимия мышечного сокращения. М., "Наука", 1976, 175-178.

45. Стефаненко Г.А., Сванидзе Э.С., Заалишвили М.М. Влияниетемпературы на Г-Ф превращение актина в присутствии dL-актинина. Сообщ.АН ГССР, 1973, 72, 169-172.

46. Стефаненко Г.А., Симонидзе М.Ш., Заалишвили М.М. ВлияниеoL-актинина на кинетику Г-Ф перехода актина. Соо0щ. АН ГССР, 1972, 68, 713-716.

47. Стефаненко Г.А., Фурман В.Я., Заалишвили М.М. Молекулярная характеристика oL-актинина. Сообщ. АН ГССР, 1973, 70, 713-717.

48. Тенфорд Ч. Физическая химия полимеров. М., "Химия",1965.

49. Тономура Ю., Канасава Г., Секия К. Фосфорилирование иконформационная перестройка миозина при его взаимодействии с аденозинтрифосфорной кислотой. В кн. Молекулярная биология. Проблемы и перспективы. "Наука",1964, 227-240.- 125

50. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот, под ред.Лазуркина Н.С., М., "Наука", 1967.

51. Физические методы органической химии, под ред.Вайсбергера.1. А., т.1, М., ИШ1, 1950.

52. Фурман В.Я., Стефаненко Г.А., Заалишвили М.М., Микадзе М.Г.

53. Парциальный удельный объем оС-актинина. Сообщения АН ГССР, 1972, 66, 169-172.

54. Хаксли X. Структура поперечно-полосатой мышцы. В сб. Молекулярная биология, М., ЙИЛ, 1963, 13-27.

55. Хаксли X. Механизм мышечного сокращения. В сб. Молекулы иклетки, вып.2, М., "Мир", 1967, I07-II9.

56. Цветков В.Н. Изучение диффузии в жидкостях при помощи поляризационного интерферометра. ЖЭТФ, 1951, 21, 701-710.

57. Цветков В.Н., Кленин С.И. Диффузия и вязкость растворовполиметилметакрилата и полипаратретичного бу-тилфенилметакрилата. -ЖЭТФ,1958,28,1019-1029.

58. Цветков В.Н., Эскин В.Е., Френкель С.Я. Структура макромолекул в растворе. М., "Наука", 1964.

59. Шефрин К.С. Рассеяние света в мутной среде. М.-Л., Гостсхиздат, 1951.

60. Шрайбман Ф.О. Механизм влияния на скелетную мышцу и еесократительные белки 1-Фтор-2,4-Динитрофторбен-зола.Автореферат канд.дисс.Тбилиси,1972.

61. Энгельгардт В.А., Любимова М.Н. К механохимии мышцы.- Биохимия, 1942, 7, 205-231.

62. Bagshaw C.R., Trentham D.R. The reversibility of ATP devageby myosin. Biochem. J. 1973, 133, 323-328.

63. Bagshaw C.R., Eccleston J.F., Eckstein P., Goody R.S.,

64. Gutfreund H., Trentham D.R. Two-step process of adenosin triphosphate association and adenosine diphosphate dissociation. Biochem.J., 1974 141, 351-364.

65. Balint M., Fekete G., Szikagy L., Blazo H., Biro N.A. Symp.on the "Interactions between subunits of biological macromolecules", Cambridge, England, 1968, p.24.

66. Benett H.S. The structure of striated muscle as seen bythe electron microscope. In: structure and function of muscle. Boune J.H.(ed.), Acad. Pres. New York, London, 1960, 137-181.

67. Craid-Schmidt M.G., Robson R.M., Goll D.E., Stromer M.H.

68. EffectdO-actinin on actin structure. Release of bound nucleotide. Biochim.Biophys. Acta, 1981, 670, 9-16. 69» Debye P. The intrinsic viscosity of polymer solutions.

69. J.Chem.Phys., 1946, 14, 636-640. 70. Depuc R.H., Rice R.V. F-actin is a Right handed Helix.

70. J.Mol.Biol., 1965, 12, 302-303. 71» Drabikowski W., Nonomura J., Marujama K. d-actinin, tropomyosin and F-actin Interaction. J.Biochem., Tokyo, 1968, 63, 761-765.

71. Drabikowski W., Uowak E. The interaction of db-actinin with

72. P-actin and its abolition by tropomyosin. -Eur.J.Biochemistry, 1968, 5, 209-214.

73. Dreizen P., Hartshorne D.J., Stracher A. The Subunit structur<of Myosin. J.Biol.Chem.1966, 211, 433-448.

74. Ebashi S. Studies on the contractile system from a physiological point of view. XIII Intern.Gongr. of Physiol.Sci.Symposium 7, Tokyo, 1965, 405-407.

75. Ebashi S., Iwakura H., nanajima I., Uakamura R., Ooi. J .Newstructural proteins from dog heart and chicken.-Gizzard Biochem.Z., 1966, 345, 201-211.

76. Ebashi S., Kodana A. Native tropomyosin like action oftropenin on trypsin-treated myosin В» J.Biochem. Tokyo, 1966, 60, 733-734.

77. Ebashi S. Structural proteins and their interaction

78. Syprosia Biologica Hungarica,1967, 8, 77-87.

79. Eisenberg E., Moos C. The ATPase activity of acto-heavymeromyosin. A kinetic analysis of actin activation. Biochemistry. 1968, 7, 1486-1489.

80. Eisenberg E., Moos C. Binding of adenosin triphosphate tomyosin, heavy meromyosin and subfragment 1. -Biochemistry. 1970, 9, 4106-4116.

81. Hill T.L. A cross-bridge model of muscle contraction. Prog.Biophys.Mol.Biol. 1978, 33, 55-82.

82. Engelhardt V.A., Ljubimova M.N. Myosin and adenosintriphosphatase. Nature, 1939, 144, 663-669»

83. Ferenczi M., Homsher В., Mrenthom D.R., Weeds A.G. Preparation and characterization of frog muscle myosin subfragment 1 and actin. Biochem.J., 1978, 171, 155-163.

84. Goll D.E., Suzuki A., Temple I., Holmes G.R. Studies onpurified d»-actinin. I.Effect of temperature and tropomyosin on the сЬ-actinin/P-actin interaction. J.Mol.Biol., 1972,67,469-488.

85. Goll D.E., Momaerts W.F.H.M., Reedy M.K., Seraydarian K.

86. Hammond K.S., Goll D.E. Parification of Insect Myosin andcL-actinin. -Biochem.J., 1975, 151, 189-192.

87. Hamoir G.S., Reuter A. Isolement of proprietes de la myosinede greneuille. Biochim.biophys. Acta,1956, 21, 24-34.

88. Hanson J., Lowy J. The structure of F-actin and actinfilaments isolated from muscle. J. Mol.Biol. 1963, 6, 46-60.

89. Heffron J.J.A., Duggan P.P. Adenosine triphosphatase activity and superprecipitation of actomyosin from the frog, hana temporaria. -Int.J.Biochem. 1971, 2324-2336.

90. Hill T.L. Theoretical formalism for the sliding filamentmodel of contraction of striated muscle.

91. Part I. Prog.Biophys.Mol.Biol., 1974, 28, 267-340.

92. J.Mol.Biol., 1967, 30, 383-434.

93. Huxley H.E, The mechanism of muscular contraction. Science,1969, 164, 1356-1366.

94. Huxley H.E. Structural changes in muscle and rpoteins duringcontraction. -Intern.Congr.of Biochemistry. Switzerland, 1970, 23.

95. Huxley A.P., Simmons R.M. Proposed mechanism of forcegeneration in striated muscle. Nature,1971, 233, 533-538.123» Holmes G.R., Goll D.E., Suzuki A. Action of d»-actinin onactin viscosity. Biochim.Biophys.Acta, 1971, 2530, 240-243.

96. Biochim.Biophys.Acta, 1963, 75, 223-233.

97. Kasai M., Hama H. Natural P-actin. Ill.Natural P-actin asinactive polymer. Biochim.Biophys.Acta, 1969, 180, 550-561.

98. Killey W.W., Bradley L.B. The relationship between sulphydryl groups and the activation of myosin adenosine triphosphatase. J.Biol.Chem., 1956, 218, 653-659.131* Kihoshita N., Kubo S., Onishi H., Tonomura У. The Pre

99. Steady State of the myosin-adenosine Triphosphate system. VIII. Intermediate formation and activation of myosin by ATP. J.Biochem. (Tokyo), 1969, 65, 285-301.

100. Leninger A.L. Reversal of thyroxine-induced swelling ofrat liver mitochondria by ATP. J.Biol.Chem., 1959, 234, 2187-2195.139* Lowey S.t Cohen C. Studies on the structure of myosin.

101. Lowey S., Slayter H.S., Weeds A.G., Baker H. Substructureof the myosin molecule. I.Subfragments of myosin by enzymic degradiation. J.Mol.Biol., 1969, 42, 1-29.

102. Lowy J., Vibert P.J. Structure and organization of actin ina molluscan smooth muscle. Nature, 1967, 215, 1254-1255.

103. Maruyama K., Ebashi S. cL-actinin, a new structural proteinfrom striated muscle. II. action on actdn. -J.Biochem., Tokyo, 1965, 58, 13-20.

104. Maruyama K. A study of Л-actinin, myofibrillar proteinfrom rabbit skeletal muscle. J.Biochem., Tokyo, 1971, 69, 369-386.

105. Masaki T. Abstract of 4th Congress of Japan Biophysical

106. Society, Hagoya, 1965, 13-16»

107. Masaki Т., Takaiti 0. M-Protein. J.Biochem. (Tokyo),1974, 75, 367-380.

108. Mihalyi E. Trypsin digestion of muscle proteins. II. Thekinetics of the digestion. J.Biol.Chem., 1953, 201, 197-201.

109. Mommaerts W.F.H.M., Green J. Adenosinetriphosphatase systemsof muscle. III. A study of the adenosinetriphosphatase activity of myosin. J.Biol.Chem. 1954, 208, 833-844.

110. Mulhern S.A., Eisenberg E. Further studies on the interaction of actin with heavy meromyosin an sub-fragment 1 in the presence of ATP. Biochemistry, 1976, 15, 5702-5708.

111. Murphy A.J., Morales M.F. Number and location of adenosintriphosphate sites of myosin. Biochemistry, 1970, 9, 1528-1532.

112. Nanninga L.B. Effect of heat on the kinetic constans ofmyosin-adenosine triphosphatase. Nature, 1962, 194, 187-188. 163» Nanninga L.B., Mommaerts W.F.H.M. The binding of adenosinetriphosphate by myosin. Fed.Proc., 1959, 18,292.300.

113. Nanninga L.B. On the interaction between myosin A and

114. F-actin. Biochim.Biophys. Acta, 1964, 82,507.517.

115. Neide С., Engel J. Exchange of ADP, ATP and 1:n6

116. J.Biol.Chem., 1961, 236, 214-218. 169» Perrin P. Mouvement brownien d'un ellipsoide. I.Dispersiondielectrique pour des molecules ellipsoidales. J.Phus.radium, 1934, 5, 497-501.

117. Perry S.V. The adenosintriphosphatase activity of myofibrilsisolated from skeletal muscle. Biochem. J., 1951, 48, 257-265.

118. Perry S.V. The structure and interactions of myosin.

119. Progr.Biophys.Mol.Biol., 1967, 17, 325-381.

120. Portzehl H., Schramm G., Weber H.H. Actomyosin und seinecomposition. Z.ITaturforsch., 19 50 , 58 , 61»

121. Reedy M.K. Cross bridges and periods in insect flight muscle.

122. Amer.Zoologist, 1967, 7, 465-481.176* Rice R.V. in Book "Biochemistry of muscle contraction"•

123. Ed. Gergely J., U.Y.Little Brown and Co., 1964, 41.

124. Rees M.K., Young M. Studies on the isolation and molecularproperties of homogeneous globular actin. -J.Biol.Chem., 1967, 242, 4449-4455.

125. Schaub M.C., Watterson J.G. Symmetry and assymetry in thecontractile protein myosin. J.Biochem., 1981, 63, 291-299.

126. Schliselfeld L.H., Barany M. The binding of adenosine triphosphate to myosin. Biochemistry, of 1968, 7, 3206-3213.

127. Sekine Т., Barnett M.L., Kielly W.W. The active site ofmyosin adenosine triphosphatase. J.Biol.Chem., 1962, 237, 2769-2775.

128. Sekine Т., Jamagucki M. Effect of ATP on the binding of

129. U-ethylmalcimide to SH groups in the active site of myosin ATPase. J.Biochem., 1963, 54, 196-204, 184.

130. Singh J., Goll D.E., Robson R.M., Stromer M.H., U- and C-terminal amino acids of purified d.-actinin. -Biochim.Biophys.Acta, 1977, 491, 29-45.

131. Singh J., Goll D.E., Robson R.M. Effect ofcL-actinin onactin structure. Actin ATPase activity. -Biochim.Biophys.Acta, 1981, 670, 1-8.

132. Singh J., Goll D.E., Robson R.M. Effect ofoL-actinin onactin structure. Viscosity studies. Biochim., Biophys.Acta, 1981, 669, 1-6•

133. Spudich Y.A., Watt S.J. The regulation of rabbit skeletalmuscle contraction. J.Biol.Chem., 1971, 246, 4866-4871.

134. Stein L.A., Schwarz R., Chock P.B., Eisenberg E. The mechanism of the actomyosin ATPase: evidence that ATP hydrolysis can occur without dissociation of the actomyosin complex. Biochemistry, 1979, 18, 3895-3909.

135. Steiner R.F., Laki K., Spicer S. Hughtscattering studieson some muscle proteins. J.Polym.Sci., 1952, 8, 23-33.

136. Stracher A.S. Disulfide-sulphydryl interchange studies onmyosin A. J.Biol.Chem., 1964, 239,1118-1122.

137. Stracher A.S. Evidence for histidine at the active site ofmyosin A. J.Biol.Chem., 1965,240,958-965.

138. Straub F.B. Actin. Studies Inst.Med.Chem.Univ.Szeged,1942, 2, 3-15.

139. Straub F.B. Actin II. Studies Inst.Med.Chem.Univ.Szeged,1943, 3, 23-39.

140. Straub F.B. On the specificity of the ATP-effect. Studies1.st .Med.Chem.Univ.Szeged, 1943, 3, 38-39.

141. Stromer M.H., Hartshorne D.J., Rice R.V. Removal and reconstatution of Z-line material in a striated muscle. J.Cell Biol., 1967, 35, 23-28.

142. Stromer M.H., Coll D.E. Effect of temperature on the competitive bending of d«-actinin and tropomyosin to actin and to 2-line extracted myofibrils. J.Cell Biol., 1970, 47, 543-550.

143. Stromer M.H., Coll D.E. Studies of purified A.-actinin.1.. Electron microscopic studies on the compe-tive binding ofсЬ-actinin and tropomyosin to Z-line extracted myofibrils. J.Mol.Biol., 1972, 67, 489-495.

144. Strzelecka-Golaszewska H., Jakubiak M., Drabikowski W.

145. Changes in the state of actin during super-precipitation of actomyosin. Eur.J.Biochem.,1975, 55, 221-230.

146. Suzuki A., Goll D.E., Stromer M.H., Singh I., Temple J.db-actinin from red and white porcine muscle. -Biochim.Biophys.Acta, 1973, 295, 188-197.

147. Suzuki A., Goll D.E., Singh Y., Allen E.R., Robson M.R.,

148. Stromer M.H. Some properties of purified skeletal muscle ct»-actinin. J.Biochem.,1976, 251, 6860-6870.

149. Szent-Gyorgyi A.G. The contraction of myosin threads.

150. Studies Inst.Med.Chem.Univ., Szeged, 1942, 1, 17-26.

151. Szent-Gyorgyi A.G. Chemistry of muscle contraction. 2nded., Academie Press., Hew York, 1951» 213» Szent-Gyorgyi A. Meromyosins, the subunits of myosin.

152. Timioka H#V Lamaguchi K., Hashimoto K., Matsuura P. Studieson myosin of spiny lobster. I. Isolation and physico-chemical properties. Bull.Jap.Soc. Sci.Fish. « Нахон суйсан гаккайен", 1974, 40, 1269-1275.

153. Tonomura J., Tokura S., Sekiya K. Binding of myosin A to

154. F-actin. J.Biol.Chem., 1962, 237, 1074-1082.

155. Tonomura Y.,Kanazawa T. Formation of reactive myosinphosphate complex as a key reaction in muscle contraction. J.Biol.Chem., 1965,240,4110-4112,

156. Proc.Roy. Soc., (London), 1950, В 137, 50-60.

157. Weber A., Hasselbach W. Die Erhohung der rate der ATPspaltung durch myosin-und actomyosingele bei begim der spaltung. Biochim.Biophys.Acta, 1954, 15, 237-245.

158. Weber A. The ultracentrifugal sepration of L-myosin andactin in an actomyosin sol under the influence of ATP. Biochim.Biophys.Acta, 1956, 19, 345-351.

159. Weber A. Cyted by Temple J., Coll D.E. (BBA, 1970, 205,121.123). J.Gen.Physiol., 1969, 53, 781.

160. Weber K., Osborn M. The releability of molecular weightdetermination by dodecyl sulfate- polyacryla-mide gel electrophoresis. J.Biol.Chem., 1969, 242, 4406-4412.

161. Yasui Т., Watanabe S. A study of superprecipitation ofmyosin В by the change in turbidity. J.Biol. Chem., 1965, 240, 98-Ю5.

162. Yeltman D.R., Jung G., Carraway K.L., Isolation оf db-actininfrom sarcoma 180 ascites cell plasma membranes and comparison with smooth muscle dj-actinin. -Biochim.Biophys.Acta, 1981,668, 201-208.

163. Zobel C.R., Carlson P.D. An electron miscroscopic investigation of myosin and some of its aggregates. -J.Mol.Biol., 1963, 7, 78-89.