Изучение блокирующего действия Тамм-Хорсфалл протеина на колонизацию мочевыводящих путей уропатогенными штаммами E. coli тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Ружанская, Анна Владиславовна

• Ружанская, Анна Владиславовна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ружанская, Анна Владиславовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Escherichia coli как условно-патогенный микроорганизм 1.1.1. Типы адгезинов Е. coli

1.1.1.1. Маннозочувствительные фимбрии или фимбрии 1 типа Е. coli

1.1.1.2. Маннозоустойчивые фимбрии Е. coli

1.2. Общая характеристика Тамм-Хорсфалл протеина

1.2.1. Структура Тамм-Хорсфалл протеина 17 1.2.1.1 .Аминокислотный состав Тамм-Хорсфалл протеина 19 1.2.1.2. Углеводный состав Тамм-Хорсфалл протеина

1.2.2. Способы идентификации и выделения Тамм-Хорсфалл протеина

1.3. Роль Тамм-Хорсфалл протеина в развитии восходящей уроинфекции

1.3.1. Взаимодействие Е. coli, несущих Р-фимбрии с Тамм-Хорсфалл протеином

1.3.2. Взаимодействие Е. coli, несущих фимбрии 1 типа с Тамм-Хорсфалл протеином

1.3.3. Взаимодействие Е. coli, несущих S-фимбрии с Тамм-Хорсфалл протеином

1.3.4. Взаимодействие Е. coli, несущих адгезин 075Х с Тамм-Хорсфалл протеином

1.4. Биологическая роль ТХП 28 1.4.1. Исследование Тамм-Хорсфалл протеина на мышиных моделях

1.5. Патологическое значение Тамм-Хорсфалл протеина 30 1.5.1. Количественное содержание Тамм-Хорсфалл протеина в норме и при патологии

1.5.1.1. Экскреция Тамм-Хорсфалл протеина при трансплантации почки

1.5.2 Антителопродукция к Тамм-Хорсфалл протеину

1.5.2.1. Возрастная зависимость антителообразования к Тамм-Хорсфалл протеину

1.5.2.2. Антителопродукция к Тамм-Хорсфалл протеину при патологиях 35 1.5.3. Феномен Тамм-Хорсфалл протеина при трансплантации почки

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы

2.1.1. Штаммы микроорганизмов

2.1.2. Клинический материал

2.1.3. Среды, антибиотики и реактивы, используемые в работе

2.1.3.1. Среды

2.1.3.2. Антибиотики

2.1.3.3. Реактивы

2.1.3.4. Экспериментальные животные

2.1.3.5. Оборудование

2.2. Методы исследования

2.2.1. Выделение Тамм-Хорсфалл протеина

2.2.2. Получение иммунных сывороток

2.2.3.Получение антигенного эритроцитарного диагностикума

2.2.4. Исследование бактериальной адгезии

2.2.4.1. Исследование адгезии Е. coli в реакции агглютинации дрожжей

2.2.4.2. Реакция нейтрализации агглютинации дрожжей

2.2.4.3. а,б Реакция торможения агглютинации дрожжей

2.2.4.4. Исследование агглютинации эритроцитов барана

2.2.4.5. реакция нейтрализации эритроцитов барана

2.2.4.6. Реакция торможения агглютинации эритроцитов барана

2.2.4.7. исследование агглютинации эритроцитов морской свинки

2.2.4.8. Реакция нейтрализации эритроцитов морской свинки

2.2.4.9. Реакция торможения агглютинации эритроцитов морской свинки

2.2.5. Методы постановки серологических и иммунохимических реакций

2.2.5.1. Реакция агглютинации с иммунной сывороткой

2.2.5.2. Реакция торможения Тамм-Хорсфалл протеина агглютинации иммунной сыворотки

2.2.5.3. Определение концентрации ТХП в образцах мочи по реакции нейтрализации антител

2.2.5.4. Реакция нейтрализации антител нативной мочой

2.2.5.5. Реакция преципитации в геле

2.2.5.6. Иммуноэлектофорез

2.2.6. Математическая и статистическая обработка данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Адгезия Е. coli на эпителиальные клетки мочевыводящего тракта и роль ТХП как протективного фактора

3.1.1. Изучение адгезинов музейных штаммов Е. coli в сравнении с клиническими изолятами. Блокирующее действие

ТХП на адгезию Е. coli к клеткам-мишеням

3.2. Тест-система для определения Тамм-Хорсфалл протеина

3.2.1. Тестирование иммунной сыворотки в РИД

3.2.2. Исследование активности сывороток

3.2.3. Исследование активности антигенного эритроцитарного диагностикума

3.3. Исследование продукции аутоантител к Тамм-Хорсфалл протеину и влияние их на изменение уровня ТХП в моче

3.3.1. Исследование антителопродукции к Тамм-Хорсфалл протеину у доноров и реципиентов почечного трансплантата

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение блокирующего действия Тамм-Хорсфалл протеина на колонизацию мочевыводящих путей уропатогенными штаммами E. coli»

В настоящее время трансплантация почек вошла в широкую медицинскую практику. Одним из наиболее частых послеоперационных осложнений является развитие восходящей уроинфекции. Escherichia coli в этиологической структуре этой патологии занимает ведущее место, в связи с чем исследование механизмов колонизации этим микробом мочевыделительного тракта является актуальным. Одним из физиологических барьеров на пути восходящей уроинфекции является Тамм-Хорсфалл протеин (ТХП).

Этот белок был обнаружен в моче здорового человека в 1950 г. исследователями I. Tamm и F. Horsfall (102). В норме он выявляется исключительно в почках, но при этом не является непосредственным структурным элементом органа, а активно секретируется эпителиальными клетками восходящего отдела петли Генле, выделяясь с мочой в количестве от 50 до 244 мкг/мл (5).

Несмотря на значительный исследовательский интерес, физиологическая функция этого белка полностью не расшифрована. В 1980 Orskov и соавт. доказали возможность связывания Тамм-Хорсфалл протеина с фимбриями 1 типа Escherichia coli (83). ТХП обладает способностью взаимодействовать с FimH доменом фимбрий 1 типа кишечной палочки, препятствуя тем самым адгезии Е. coli на уроэпителии.

Основой успешной колонизации слизистой мочевого тракта является соответствие фенотипа адгезина рецепторам, локализованным на клетках-мишенях. В этой связи актуальным является определение фенотипов адгезинов, характерных для уропатогенных вариантов Е. coli, и выявление степени блокирования их ТХП на клетках мишенях.

Рассматривая ТХП как фактор защиты мочевыводящего тракта, важным аспектом данной проблемы является выяснение возможности иммунного ответа на этот белок и определение роли аутоантител (ААТ) к ТХП при адгезии Е. coli на уроэпителии.

Цель и задачи работы.

Цель исследования заключалась в определении значения Тамм-Хорсфалл протеина в колонизации мочевыделительного тракта штаммами Е. coli, различающимися по фенотипу адгезинов.

По ходу достижения поставленной цели последовательно решались следующие задачи:

1. Разработать тест-систему, включающую иммунную сыворотку и антигенный диагностикум к ТХП;

2. Исследовать блокирующую активность Тамм-Хорсфалл протеина на адгезию различных штаммов Е. coli;

3. Исследовать иммунный ответ на ТХП у доноров и реципиентов почечного трансплантата;

4. Изучить влияние ААТ к ТХП на секрецию данного белка.

Научная иовизна.

Впервые в нашей стране была создана тест-система для определения секреции ТХП в моче и ААТ к нему в сыворотке крови. Это позволило провести мониторинг данных показателей у реципиентов почечного трансплантата. Впервые аутоантитела к ТХП в сыворотке крови были выявлены у доноров почечного трансплантата.

Изучено блокирующее действие ТХП на разные фенотипы адгезинов Е. coli и таким образом, исследована защитная роль этого белка при развитии восходящей уроинфекции у лиц с трансплантированной почкой.

Практическая значимость

Предложен простой в исполнении и эффективный метод количественного определения ТХП в моче, а также детекции уровня ААТ к ТХП в сыворотке крови.

Данные сравнительного анализа адгезивных способностей музейных и клинических штаммов E.coli, а также выведенный индекс блокирования их адгезии Тамм-Хорсфалл протеином, свидетельствуют о роли ТХП как селективного фактора при колонизации эпителия мочевого тракта и развитии восходящей уроинфекции.

Положения, выносимые на защиту

1. Создана тест-система для количественного определения ТХП в моче и выявления ААТ к этому белку в сыворотке крови;

2. ТХП является селективным фактором для различных фенотипов адгезинов Е. coli при развитии восходящей уроинфекции;

3. Титр ААТ к ТХП в сыворотке крови выявляется не только у реципиентов, но и доноров почечного трансплантата;

4. ТХП способен связываться с ААТ непосредственно в организме, что сопровождается снижением его секреции.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Ружанская, Анна Владиславовна

ВЫВОДЫ:

1.В кишечной популяции штаммов Е. coli встречаются варианты, сходные по фенотипу адгезинов с уропатогенными;

2. Штаммы Е. coli, высевающиеся с мочой, блокируются ТХП слабее, чем кишечные изоляты, что является одним из ключевых моментов в развитии восходящей уроинфекции;

3. Индукция А AT к ТХП отменяет протективное действие ТХП по отношению к колонизации Е. coli мочевыводящих путей;

4. При операции физиологическая защита ТХП может нарушаться за счет снижения его секреции и открываются ворота уроинфекции;

5. Титр А AT к ТХП, значительно превышает диагностический и после операции присутствует не только у реципиентов почечного трансплантата, но и у доноров.

Список публикаций по материалам диссертации.

A.B. Ружанская, O.E. Миленина, Э.Г. Кравцов, М.В. Далии, Н.И. Габриэлян. Методические подходы к определению Tamm-Horsfall протеина.// «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины» -2005, №9-с.316-319;

A.B. Ружанская, Э.Г. Кравцов, М.В. Далин, Н.И. Габриэлян. Исследование антителопродукции к Tamm-Horsfall протеину у доноров и реципиентов почечного трансплантата.// «Бюллетень экспериментальной биологии и медицины» - 2005, №4. A.B. Ружанская, Э.Г. Кравцов, М.В. Далин, Н.И. Габриэлян. Изучение продукции аутоантител к Тамм-Хорсфалл протеину (ТХП) у доноров и реципиентов почечного трансплантата и влияние их на изменение уровня ТХП в моче. // «Вестник трансплантологии и искусственных органов «МОО» Научное общество трансплантологов» - 2006 - №1.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ современной литературы показал, что исследования Тамм-Хорсфалл протеина (ТХП) имеет много аспектов. Одним из них является изучение защитной функции этого белка от восходящей инфекции мочевыделителыюго тракта (5, 86, 90, 110). Защитная роль этого белка была убедительно доказана в прямых опытах, которые продемонстрировали высокую чувствительность к восходящей уроинфекции линий мышей, дефектных по гену, контролирующему продукцию ТХП (29). Известно, что ТХП может связываться с маннозочувствительными сайтами адгезинов I типа Е. coli. Именно это обстоятельство позволяет считать, что данный белок блокирует адгезию кишечной палочки на уроэпителии и не позволяет кишечной флоре распространяться в новую для нее экологическую нишу. Однако при исследовании особенностей фенотипов адгезинов Е. coli, многие авторы приходят к заключению, что уропатогенные варианты этих микробов по фенотипу существенно отличаются от Е. coli, для которых кишечник является естественной средой обитания. Проведенные нами исследования показали, что характерным для кишечных изолятов является экспрессия адгезинов 1 типа, в то время как у изолятов, полученных из мочи, этот тип адгезина не является доминирующим. По данным Тринчиной Е. даже в том случае, если уропатоенные штаммы экспрессируют адгезин 1 типа, то он отличается по FimH фенотипу от кишечных штаммов. Структура FimH уропатогенных вариантов обеспечивает более прочное прикрепление микробов к эпителию, что позволяет им противодействовать потоку мочи. Сравнительное изучение референс-штаммов урологического и кишечного происхождения с клиническими изолятами позволило заключить, что в кишечной популяции Е. coli существуют варианты, по фенотипу адгезинов сходные с уропатогенными штаммами, но именно они при контаминации кишечной флорой мочевыделителыюго тракта могут занять новую экологическую нишу. Одним из факторов селекции в данном случае является ТХП, который, связываясь с адгезином, препятствует фиксации Е. coli на уроэпителии, и только варианты, способные уклоняться от такого действия ТХП могут удерживаться в мочевыводящем тракте.

Приведенный анализ блокирующего действия ТХП показал, что Е. coli кишечного происхождения характеризуются высоким уровнем блокирования маннозочувствительной адгезии на клетках-мишенях. Индекс блокирования урологических штаммов гораздо ниже, а в ряде случаев адгезия таких штаммов вообще не может быть отменена ТХП. Показано, что ингибирование не эффективно в отношении маннозочувствительной адгезии Е. coli. Эффект связывания маннозочувствительных адгезинов 1 типа ТХП, возможно, определяется структурой FimH области пилина. В настоящее время стало известно, что мутации в FimH кластере определяют связывание пилей с клеточным рецептором по моновалентному или поливалентному типу. В связи с этим, блокирующий эффект ТХП очевидно определяется конфигурацией маннозозависимого сайта FimH (7). Таким образом ТХП, выполняя защитную функцию, в низких концентрациях выступает в роли селективного фактора, вычленяя из контаминирующей кишечной популяции Е. coli варианты, уклоняющиеся от действия ТХП. Условием селекции уропатогенных вариантов является снижение концентрации этого белка в моче ниже физиологической нормы. Нами было показано, что такая ситуация возникает в том случае, когда ТХП связывается антителами. По данным литературы, срыв иммунологической толерантности к ТХП как аутоантигену возможен при некоторых патологиях (пиелонефрит, пузырно-мочеточниковый рефлюкс и прочее) (5). Было показано, что аутоантитела к этому белку появляются и при трансплантации почки. В наших исследованиях эти данные подтвердились. Установлено, что у лиц перенесших такую операцию на протяжении месяца титр антител достинает максимальных значений и сохраняется на высоком уровне более полугода. Поскольку индукция аутоантител наблюдается не только у реципиентов почки, но и у доноров мы считали, что причиной срыва иммунологической толерантности может быть любое оперативное вмешательство на этом органе. Нами была установлена высокая отрицательная корреляционная связь между титром аутоантител и уровнем ТХП в моче. Это позволяет заключить, что лица, перенесшие оперативное вмешательство становятся менее защищенными от восходящей уроинфекции.

В настоящей работе был рассмотрен только один из аспектов роли ТХП в почечной патологии, однако мы считали, что методические решения, предложенные в ней, окажутся полезными и при исследовании других сторон этой проблемы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ружанская, Анна Владиславовна, 2006 год

1. Бэм Э. Иммунодиффузия. Иммунологические методы. Под. Ред. Г. Фримеля, перевод с нем., 1987, М. Медицина, с. 73-89;

2. Галь Э., Медьеши Г., Верецкей JI. Электрофорез в разделениибиологических молекул. Пер. с англ. М., Мир, 1982, с. 236-246;

3. Гликопротеины. Под ред. Готтшалк А., Москва, Изд. Мир.

4. Далин М.В., Фиш Н.Г. Адгезины микроорганизмов. Под ред. Агаркова В.И. Москва, 1985, Итоги науки и техники.

5. Дранник Г.Н., Майданник В.Г. Белок Тамма-Хорсфала. Патогенетическая роль и клиническое значение при урологических и нефрологических заболеваниях. Урология и нефрология, 1990, №5, с. 69-74;

6. Кравцов Э.Г., Карманов М.И.; Авт. свид. № 1018643 от 22.01.83;

7. Тринчина Е.В. Автореферат; Москва, 2003;

8. Чеснокова B.JI. Автореферат; Москва, 1998;

9. Akiyama A., Stein P., Houshiar A., Parsons L. Urothelial cytoprotective activity of Tamm-Horsfall protein isolated from the urine of healthy subjects and patients with interstitial cystitis. Int. j. of urology, 2000, 7, 176-183;

10. Allen F. TisherC.C. Morphology of the ascending thick limb of Henle Kidney Int, 1976, 9, 8-22;

11. Andriole V.T. The role of Tamm-Horsfall protein in the pathogenesis of reflux nephropathy and chronic pyelonephritis. J. Biol. Med. 1985 v. 58. P. 91100

12. Bates JM, Raffi HM, Prasadan К et al. Tamm-Horsfall protein knockout mice are more prone to urinary tract infection: rapid communication. Kidney Int 2004; 65:791-797

13. Quantitative immunoassay. Urol Res 1: 50-59, 1973;

14. Bleyer A.J., Hart T.C., Shihabi Z., Robins V., Hoyer J. Muttations in the uromodulin gene decrease urinary excretion of Tamm-Horsfall protein. Kidney Int., 2004, v 66,974-977;

15. Brinton C.C. The structure, function, synthesis and genetic control of bacterial pili and a molecular model for DNA and RNA transport in gram negative bacteria. Trans N Y Acad sci, 1965, 27,1003-1054;

16. Burg M.B. Green N.Function of Henle's loop. Am J of Physiology, 1973, 3

17. Carvalho M. Role of Tamm-Horsfall protein and uromodulin in calcium oxalate crystallization. Braz. J Med Res, 2002, 35(10), 1165-1172;

18. Cavallone D., Malagolini N., Serafini-Cessi F. Binding of human neutrophils to cell-surface anchored Tamm-Horsfall glycoprotein in tubulointerstitial nephritis. Kidney Int., 1999, 55(5), 1787-1789;

19. Chick S., Harber MJ., MacKenzie R., Asscher AW. Modified method for studying bacterial adhesion to isolated uroepithelial cells and uromucoid. Inf.and Immun., 1981, oct., 256-261.

20. Cohen A.H., Border W.A., Rajfer J., Dumke A. Identification and morphologic pattern of injury. Lab. Invest., 1984,50, 5,519

21. Dahan K, Devuyst O, Smaers M et al. A cluster of mutations in the UMOD gene causes familial juvenile hyperuricemic nephropathy with abnormal expression of uromodulin. J Am Soc Nephrol 2003; 14: 2883-2893

22. Dahan K, Fuchshuber A, Adamis S et al. Familial juvenile hyperuricemic nephropathy and autosomal dominant medullary cystic kidney disease type 2: two facets of the same disease? J Am Soc Nephrol 2001; 12: 2348-2357

23. DavvneyA. McLean C. Cattell W.R. The development of a radioimmunoassay for Tamm-Horsfall glycoprotein in serum. Biochem. J. 1980, v. 185, p. 679-687

24. Dawney A. Thornley C. Thornley C. Cattell W.R. An improved radioimmunoassay for urinary Tamm-Horsfall glycoprotein.n Biochem. J. 1982, v.206, p. 461;

25. Devuyst O., Dahan K., Pirson Y. Tamm-Horsfall protein or uromodulin: new ideas about an old molecule. Nephrology Dialysis Transplantation 2005 20(7): 1290-1294

26. Duguid J.P., Old D.C. Introduction: A historical perspective. In: Fimbriae:Adhesion, Genetics, biogenesis, and Vaccines (P. Klemm Ed.), 1994, CRC Press boca Raton, FL, 1-7;

27. Dulawa J, Jann K, Thomsen M. Tamm-Horsfall protein interferes with Bacterial adherence to human kidney cells. Eur. J of clin. Invest., 1988, 18, 8791

28. Dulawa J, Rambausek M., Jann K., Notohamiprodjo M., Ritz E. Abnormal radiofurosemide binding by Tamm-Horsfall glycoprotein of diabetic patients. Diabetologia, 1985, v. 28, 827-830;

29. Fasth A., Bjure J., Hellstrom M., Jacobsson B., Jodal U. Autoantibodies to Tamm-Horsfall glycoprotein in children with renal damage associated with urinary tract infections. Acta Paediatr Scand, 1980, 69, 709-715;

30. Fasth A., Hanson L.A., Jodal U., Peterson M.D. Autoantibodies to

31. Tamm-Horsfall glycoprotein associated with urinary tract infections in girls. The J of Pediatrics, 1979, v 95, 1, 54-60;

32. Fasth A., Jodal U. Progr. Allergy, 1983, 33, 247-258

33. Firon NOfek I., Sharon N. Carbohydrate-binding sites of the mannose-speeific fimbrial lectins of enterobacteria. Infect Immun, 1984, v 43, 1088-1090;

34. Fletcher A.P. Neuberger A. Tamm-Horsfall urinary glycoprotein. The chemical composition. Biochem J, 1970, 120, 417-420

35. Fletcher A.P. Neuberger A. Tamm-Horsfall urinary glycoprotein. The subunit structure. Biochem J, 1970, 120, 420-425

36. Fowler JE, Mariano M., Lau JLT Interaction of Tamm-Horsfall protein with transitional cells and transitional epithelium. The J of Urology, 138, aug, 446

37. Geerlings SE., Meiland R., Emiel C. et al. Adherence of Type 1-fimbriated Escherichia coli to uroepithelial cells. Diab. Care, 2002, 25, 1405-1409.

38. Gokhale JA., Glenton PA., Khan SR. Characterization of Tamm-Horsfall urinary glycoprotein in a rat nephrolithiasis model. Thhe J of Urology, 2001, 166, 1492-1497.

39. Goodall A.A. Marshall R.D. Problems relating to the storage and treatment of urine samples before radioimmunoassay for Tamm-Horsfall glycoprotein. Biochem. Soc. Trans. 1978, v.6, p. 1043

40. Grant A.M.S. Neuberger A. The development of radioimmunoassay for the measurment of urinary Tamm-Horsfall glycoprotein in the presence of sodium dodecyl sulfate. Clin. Sci. 973, v. 44, p. 163-179

41. Grant AM, Baker LRI, Neuberger A. Urinary Tamm-Horsfall glycoprotein in certain kidney diseases and its content in renal and bladder calculi. Clin Sci 44:377-384, 1973

42. Hartmann L. Bringuier A. Delain E. Ultrastructure-immunoreactivity interference in the radioimmunoassay of the Tamm-Horsfall urinary mucoprotein. J. Immunol. Methods, 1982, v. 54, p. 343-353

43. Hanson LA et al. Immunological aspects of pyelonephritis; Contrib Nephrol,1979,16,16-21

44. Hanson LA Fasth A Jodal U Auto-antibodies to Tamm-Horsfall protein, a tool for diagnosing the level of urinary infections Lancet 1: 226-228, 1976

45. Hodson C.J., Maling T.M., McManamon P.J. Brit. J. Radiol., 1975, 13, 1-26

46. Houwink A.L., Iterson W. Electron microscopical observations on bacterial cytology. A study on flagellation. Biochim Biophys. Acta, 1950, v 5, 10-44;

47. Hoyer JR, Seiler M.W. Influence of renal transplantation in rats on glomerular and tubular immune complexes. Am. J. of kidney dis., v 7, 1, 1986, 69-75

48. Hoyer JR Seiler MW Pathophysiology of Tamm-Horsfall protein. Kidney Int, 16, 1979, 279-289

49. Kaden J., Groth J., May G., Liedvogel B. Urinary Tamm-Horsfall protein asa marker of renal transplant function. Urol. Res., 1994, 22(3), 131-136;

50. Keutel H.J., King J.S., Boyce W.H. Further studies of uromucoid in normal and stone urine. Urologia Int., 1964,17, 324-341;

51. Keutel H J. Localisation of uromucoid in human kidneys and In sections of human kidney stone with fluorescent antibody technique. J. Histochem. Cytochem. 1965, v 13, p 155

52. Kjellsson B. Soderstorm T. An ELISA-method for quantification of Tamm

53. Horsfall protein using monoclonal antibodies.

54. Kurijama I.J., Kobayashi K., Fukuoka S. Lab. Invest., 1990, 5, 54

55. Lewis R.A. Schwartz R.H. Schenk E.A. Tamm-Horsfall mucoprotein. Ontogenic development. Lab. Invest., 1972, v 26, p. 728

56. Lose G., SrensenK., Frandsen B., Nathan E. Excretion of urinary Tamm-Horsfall glycoprotein in girls with recurrent urinary tract infection. Urol. Res. 1987, v. 15, p. 249

57. Lynn K.L., Shenkin A., Marshall R.D. Factors affecting excretion of human urinary Tamm-Horsfall glycoprotein. Clin. Sci. 1982, v. 62, p. 21-26

58. Lynn K.L., Marshall R.D. excretion of Tamm-Horsfall glycoprotein in renal disease. 1984, Clin. Neprology, v 22, 5, 253-257;

59. Leeker A., Kreft B., Sandmann J., Bates J., Wasenauer G., Muller H. et al. Tamm-Horsfall protein inhibits binding of S- and P-fimbriated E. coli to human renal tubular epithelium cells. Exp. Nephrol., 1997, 5, 38-46

60. Lowry O.H. et al. J. Biol. Chem., 1951, 193,265

61. Malagolini N., Cavallone D., Serafini-Cessi F. Intracellular transport, cell-surface exposure and release of recombinant Tamm-Horsfall protein. Kidney Int., 1997, 52(5), 1340-1350;

62. Marier R., Fong E., Jansen M., Hodson C.J., Richards F. Antibody to Tamm-Horsfall protein in patients with urinary tract obstruction and vesicoureteral reflux. The J. of infect. Dis., 1978, v 138, 6, 781-790;

63. Marr AMS Neuberger A. Ratcliffe W.A.Rabbit Tamm-Horsfall urinary glycoprotein: Chemical composition and subunit structure. Biochem J 122: 623-631,1971

64. Maxfield M. Molecular forms of human urinary mucoprotein present under physiological conditions. Biochem. Biophys. Acta, 1961, v. 49, p. 548

65. Maxfield M., Stefanye D. The amino acid composition of normal human urinary mucoprotein. 1962, The J. of biological chemistry, v 237, 8, 1962;

66. Mazzuchi N. Pecarovich R. Ross N. Rodriquez J. Sanguinetti C.M. Tamm-Horsfall urinary glycoprotein. Quantitation by radial immunodiffusion: normal patterns. J. Lab. Clin. Med. 1974, v. 84 p. 774-776

67. McQueen E.G. Engel G.B. Factors determining the aggregation of urinary mucoprotein. J. Clin. Path., 1966, v. 19, p. 392-396

68. McQueen EG The nature of urinary casts. J.Clin.Path, 1962, 15, 367

69. McKenzie JK., McQueen EG. Immunofluorescent localization of Tamm-Horsfall protein in human kidney. J.Clin.Path., 1969, 22, 334-339;

70. Mo L, Zhu XH, Huang HY, Shapiro E, Hasty DL, Wu XR. Ablation of the Tamm-Horsfall protein gene increases susceptibility of mice to bladder colonization by type 1-fimbriated Escherichia coli. Am J Physiol Renal Physiol 2004; 286: F795-F802

71. Mobley HLT., Chippendale GR., Tenney JH., Hull RA„ Warren JW. Expression of Type 1 Fimbriae may be required for persistence of Escherichia coli in the catheterized urinary tract. J of Clin.Microbiol., 1987, v 25, № 12, dec., 2253-2257

72. Muchmore AV, Decker JM. Uromodulin: a unique 85-kilodalton immunosuppressive glycoprotein isolated from urine of pregnant women. Science 1985; 229: 479^81

73. Ochman H., Selander R. Standart reference strains of E. coli from natural populations. J. of bacteriology, feb., 1984, 690-693;

74. Olczak T., Olczak M., Kubicz A., Dulawa J., Kokot F. Composition of the sugar moiety of Tamm-Horsfall protein in patients with urinary diseases. Int. J. clin.lab.res., 1999, 29, 68-74;

75. Olliez-Hartmann M., Pouget-Abadie C., Boullie J., Hartmann L. Variation of urinary Tamm-Horsfall protein in human during the first thirty years of life. Nephron, 1984, v. 38, p. 163

76. Orskov L., Ferencz A., Orskov F. Lancet, 1980, 1, 887

77. Parkinen J. Finne J. Isolation and structural characterization of five major sialyloligosaccharides and a sialylglycopeptide from normal human urine. Eur. J. Biochem. 1983, v. 136(8), p. 355-361

78. Parkkinen J., Virkola R., Korhonen T. Identification of factors in human urine that inhhibit the binding of E. coli adhesins. Inf and Imm., 1988, oct. 26232630

79. Patel R., McKenzie J.K., McQueen E.G. Tamm-Horsfall urinary mucoprotein and tubular obstruction by casts in acute renal failure. Lancet, 1964, v.l, p. 457-461

80. Pennica D., KohrW.S., Kuang W.S. et al. Identification of human uromodulin as the Tamm-Horsfall urinary glycoprotein. Science, 1987, v. 236, p. 83-88

81. Rambausek M., Rahm H-J., Jann K., Notohamiprodjo M., Ritz E. Abnornal glycolisation of Tamm-Horsfall protein (THP) in diabetes. Kidney Int., 1984, v. 25, 1,237

82. Rampoldi L, Caridi G, Santon D et al. Allelism of MCKD, FJHN and GCKD caused by impairment of uromodulin export dynamics. Hum Mol Genet 2003; 12: 3369-3384

83. Reinhart H., Obedenau N. Excretion of Tamm-Horsfall protein in women with reccurent urinary tract infection. The J of urology, 144, nov, 1185.

84. Reinhart H., Obedenau N., Walz D A new ELISA method for the rapid quantitation of Tamm-Horsfall protein in urine. AJCP, aug., 1989

85. Romero M., Zanaro N., Gonzalez L. et al. Tamm-Horsfall proteinexrcretion to predict the onset of renal insufficiency. Clin.Biochem., 2002, 35, 65-68;

86. Schenk E.A., Schwartz R.H., Lewis R.A. Tamm-Horsfall mucoprotein. Localization in the kidney. Lab. Investigation, 1971, v 25, 1, 92;

87. Schwartz RH, Berdon WE, Wagner J, Becker J, Baker DH Tamm-Horsfallurinary mucoprotein precipitation by Urographie contrast agents: in vitrostudies. Am J Roentgenol 108:698-701, 1970

88. Schwartz RH, J.D. Van Ess, Allyn G. May, Eric A. Schenk Tamm-Horsfall glycoproteinutia and renal allograft rejection. Transplantation, 1973, v 16, 2, 83

89. Shachner M., Peggy MM., Mayrer AR Interaction of Tamm-Horsfall

90. Protein with bacterial extracts. Kidney Int., 1987, 31, 77-84

91. Serafini-Cessi F., Malagolini N., Cavallone D. Tamm-Horsfall glycoprotein:biology and clinical relevance. Am. J. kidney dis., 2003, 42(4), 658-676;

92. Serafini-Cessi F. Malagolini N., Hoops T.C., Rindler M.J. Biosynthesis and oligosaccharide processing of human Tamm-Horsfall glycoprotein permanently expressed in HeLa cells. Biochem Biophys. Res. Commun., 1993, 194(2), 784-790;

93. Stapleton A., Moseley S., stamm W.E. Urovirulence determinants in E. coli isolates causing first-episode and recurrent cystitis in women. The J. of infect. Dis., 1991, 163,773-779;

94. Stevenson F.K. The viscosity of Tamm-Horsfall mucoprotein. Biochim Biophys. Acta, 1968, 160, 296-298;

95. Stevenson FK, KentPW Subunits of Tamm-Horsfall glycoprotein.Biochhem J, 116: 791-796, 1970

96. Tamm I., Horsfall J. Charakterization and separation of an inhibitor of viral hemagglutination present in urine. Proc. Soc.Exp.Biol.Med., 1950, 74, 108- 114.

97. Tamm I., Horsfall J. A mucoprotein derived from human urine which reacts with influenza, mumps, Newcastle disease viruses. J.Exp.Med.,1952, 95,71-97.

98. Thornley C., Dawnay A., Cattel W. Human Tamm-Horsfall glycoptotein: urinary and plasma levels in normal subjects and patients with renal disease determined by a fully validated radioimmunoassay. Clin/ science, 1985, v/ 68, 529-535;

99. Torffvit O., Kamper A.L., Strandgaard S. Scand. J. urol. Nephrol., 1997,dec., 31(6), 555-559;

100. Van der Anwera, P. Denis R. Acta clin. Belg., 1985, 40,3, 179-193

101. Weichhart T., Zlabinger G.J., Saemann M. The multiple functions of Tamm- Horsfall protein in human health and disease: A mystery clears up. Wien Klin Wochenschr., 2005, 117\9., 316-322;

102. Work J., Andriole V.T. Yale J. Biol. Med., 1980,53,3, 133-148

103. Zimmerhackl L.B., Rotasy K., Wiegele G., Rasenack A. et al. Tamm-Horsfall protein as a marker of tubular maturation. Pediatr. Nephrol., 1996, aug., 10(4), 448-452;

104. Zimmerhackl L.B. Evalution of nephrotoxicity with renal antigens in children: role of Tamm-Horsfall protein. Eur. J. Clin. Pharmacol., 1993, 44, 39-42;