Изменчивость гипервариабельных участков генома человека при воздействии хронического гамма-облучения и индивидуальная радиочувствительность тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Гончарова, Ирина Александровна

• Гончарова, Ирина Александровна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гончарова, Ирина Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Радиационное облучение и концепции действия малых доз радиации на живые организмы.

1.2. Молекулярно-генетические подходы, применяемые для оценки влияния малых доз радиации на геном человека.

1.3. Генетические основы индивидуальной радиочувствительности человека.

1.3.1. Гены синтаз оксида азота (NOS) и индивидуальная радиочувствительность.

1.3.2. Гены метаболизма ксенобиотиков и их вклад в формирование индивидуальной радиочувствительности.

1.3.1. Роль митохондриальной ДНК в формировании индивидуальной радиочувствительности.

Резюме.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Структура и объем исследованного материала.

2.2. Характеристика методов исследования.

2.2.1. Молекулярно-генетические методы.

2.2.2. Биометрические и генетико-статистические методы.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Генетическое разнообразие городской и сельской популяции

Томской области.

3.1.1. Распределение аллелей микросателлитных локусов D2S2739, D9S768, АСТВР в городской и сельской популяциях Томской области.

3.1.2. Сравнительная оценка размеров родительских аллелей минисателлитных локусов В6.7, СЕВ 1, СЕВ 15, MS 1, MS31, MS в городской и сельской популяциях Томской области.

3.1.3. Оценка частот гаплогрупп Н, U, Т митохондриальной ДНК и полиморфизмов генов NOS3, GST, CYP в городской популяции Томской области.

3.2. Оценка частоты мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1,

СЕВ 15, MS 1, MS31, MS32 и микросателлитных D2S2739,

D9S768, АСТВР локусов ДНК.

3.2.1. Частоты мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ15, MSI, MS31, MS32 и микросателлитных D2S2739,

D9S768, АСТВР локусов у жителей Томской области.

3.2.2. Сравнительная оценка частоты мутирования мини- и микросателлитных локусов в группе рабочих СХК и контрольной группе.

3.2.3. Оценка частот мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MS 1, MS31, MS32 локусов мужских и женских гамет.

3.2.4. Сравнительная оценка частот мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, MS31 локусов у рабочих СХК и популяций различных регионов мира, подвергшихся влиянию радиационных факторов.

3.2.5. Анализ зависимости частоты мутирования минисателлитных локусов ДНК от дозы внешнего гамма-облучения.

3.3. Исследование наследственной компоненты индивидуальной радиочувствительности человека.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изменчивость гипервариабельных участков генома человека при воздействии хронического гамма-облучения и индивидуальная радиочувствительность»

В связи с продолжающимся техногенным загрязнением окружающий среды радиоактивными отходами все более остро встает вопрос об оценке влияния радиации на генетическое здоровье людей. Изучению этого влияния на разные системы организмов и генетико-экологическим оценкам состояния здоровья жителей территорий, подвергшихся воздействию неблагоприятных факторов, посвящен ряд исследований, проводимых как в нашей стране, так и за рубежом (Лазюк и др., 1990; Нугис, Ижевскй, 1996; Севанькаев и др., 1994; Спитковский и др., 1994; Бочков и др., 1996, 1999; Гераськин 1995а, 19956, 1998; Пилинская и др., 1996; Ревазова 1996; Сусков 1996; Возилова и др., 1998; Аклеев и др., 1998; Гончарова Р.И., 1999; Плеханов и др., 2000; Назаренко и др., 2001; Satoh et al., 1995; Neel et al., 1995, 1998; Dubrova et al., 1996, 1997, 2002).

Многолетние экспериментальные исследования, выполненные на различных видах живых организмов, показали, что радиоактивное облучение в малых дозах может не иметь видимых последствий для облученного организма, однако приводит к накоплению генетических изменений, которые могут повлиять на здоровье и жизнеспособность последующих поколений (Готлиб и др., 1991; Гилева и др., 1996; Кузин, 1997; Luskey, 1999). Поскольку методические подходы, имеющиеся на сегодняшний день, только частично позволяют решить проблему оценки влияния малых доз радиации на геном человека, полученные данные остаются противоречивыми.

В последние годы для изучения воздействия радиации использовались методы, позволяющие учитывать генетические изменения в соматических клетках облученных. Стабильные хромосомные аберрации, мутантные по локусу GPA эритроциты и по локусу HPRT лимфоциты явились достаточно точными индикаторами острого облучения в диапазоне доз, начиная от 100 бэр (Пилинская, 1996; Пилинская и др., 1996; Аклеев,1998; Возилова, 1997; Akiyama, 1996; Shanahan, 1996, Krejea et al., 1999; Jones et al., 1999). Наличие 5 генетических эффектов хронического облучения в малых дозах до сих пор остается спорным как на уровне соматических, так и на уровне половых клеток. При этом ни один из вышеперечисленных методов не может оценить степень влияния радиации на потомков облученных родителей.

Для этого в качестве тест-системы было предложено использование метода оценки частоты мутирования минисателлитных последовательностей ДНК, которые были открыты A.J. Jeffreys (Jeffreys, 1985; Моляка, 1994, Соловьева, 1995; Dubrova et al., 1996). Данная тест-система оказалась единственной, с помощью которой удалось оценить влияние радиации на потомков облученных родителей (Соловьева, 1995, Dubrova et al., 1996, 1997, 2001).

Работы, использующие минисателлитные локусы ДНК в качестве тест-системы, проводились в двух направлениях. Во-первых, это экспериментальные исследования, выполненные на мышах, которые показали, что:

- минисателлитные районы ДНК представляют собой систему, способную фиксировать воздействие радиационных факторов даже при наличии небольшого числа особей (п=252), по сравнению с ранее применяемыми тест-системами, где число обследованных должно было быть не меньше двух тысяч;

- наибольшая частота мутирования минисателлитных локусов наблюдается при облучении мышей на премейотической стадии сперматогенеза;

- острое рентгеновское и хроническое гамма-облучение оказывают сходное воздействие на частоту мутирования минисателлитных локусов ДНК;

- облучение нейтронами приводит к значительно большему выходу мутаций в минисателлитных локусах по сравнению с острым облучением (Dubrova et al., 1997,1998,2001).

В отличие от экспериментальных исследований, выполненных на мышах (Dubrova et al., 1997, 1998, 2001), при которых возможно разграничить различные типы радиационных факторов и отдельно оценить степень их 6 воздействия на организм, в популяциях человека исследования проводились в группах лиц, подвергшихся сочетанному внешнему и внутреннему облучению в результате одновременного воздействия гамма-, бета- и альфа-излучателей в совокупности с различными химическими мутагенами (Соловьева и др., 1995; Пилинская и др., 1996; Возилова и др., 1998; Ыее1 е1 а1., 1995, 1998; БиЬгоуа е1 а1., 1997, 2002). В этом случае невозможно оценить какой из радиационных, химических, или совокупность факторов в большей степени вызывают повышение частоты мутирования минисателлитных локусов ДНК. Поэтому исследования, спланированные таким образом, что возможно выделение одного радиационного фактора и оценка его воздействия на геном человека, остаются актуальными.

Отметим еще одно направление генетических исследований, активно развиваемое в настоящее время. В связи с интенсивной промышленной деятельностью с каждым годом усиливается загрязнение окружающей среды и увеличивается число лиц, контактирующих с вредными для здоровья веществами. Это может приводить к увеличению частоты широко распространенных заболеваний, таких как рак, бронхиальная астма, сердечнососудистая патология. В настоящее время известно, что развитие таких заболеваний человека обусловлено как генетическими, так и средовыми факторами (Пузырев и др., 2000; Рекопеп, МсКизс1к, 2001). В связи с этим, одним из подходов, направленных на снижение заболеваемости, является сокращение групп риска путем ограничения деятельности в сфере «вредных» производств лиц, имеющих повышенную чувствительность к воздействию генотоксических агентов, которая, вероятно, является генетически детерминированной. Для решения такой задачи необходимо изучение вклада полиморфных вариантов генов предрасположенности к широко распространенным заболеваниям или «генов внешней среды» в формирование индивидуальной чувствительности человека к воздействию генотоксических агентов. 7

Известно, что некоторые полиморфные варианты генов вносят вклад в развитие заболеваний и могут определять индивидуальную чувствительность к лекарственным препаратам или ассоциироваться с риском повышения частоты хромосомных аберраций и микроядер в лимфоцитах при воздействии химических агентов (Пузырев и др., 2000; Ляхович и др., 2000; Косянкова, 2001; Abdel-Rahman et al., 1998; Falk et al., 1999; Lee et al., 2000; Spurdle, Chen, 2000; Spurdle et al., 2001). Однако, до настоящего времени работы по изучению генетической основы индивидуальной радиочувствительности остаются немногочисленными (Тельнов, 1994; Тельнов и др., 1995).

Следует отметить, что при изучении вклада полиморфных вариантов генов в формирование изучаемого признака, необходимо проведение оценки генетической структуры исследуемых групп для избежания ошибок, связанных с межэтническими и межпопуляционными различиями в распространении нормальных и ассоциированных с патологией аллелей.

Цель исследования: Оценить изменчивость гипервариабельных участков генома при воздействии внешнего гамма-облучения и изучить наследственную компоненту индивидуальной радиочувствительности человека.

Задачи исследования:

1. Изучить полиморфизм мини- и микросателлитных локусов ДНК городского (г. Северск) и сельского (пос. Каргала) населения Томской области, проживающего в различных экологических условиях.

2. Провести сравнительный анализ частоты мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MSI, MS31, MS32 и микросателлитных D9S768, АСТВР2, D2S2739 локусов ДНК у лиц, подвергавшихся воздействию внешнего гамма-облучения в ходе профессиональной деятельности, и лиц, проживающих в радиационно безопасном районе Томской области.

3. Изучить зависимость мутирования мини- и микросателлитных последовательностей ДНК у лиц, подвергшихся воздействию радиации, от полученной дозы хронического внешнего гамма-облучения. 8

4. Охарактеризовать изменчивость генов синтазы оксида азота N033, метаболизма ксенобиотиков СУР2Е1, 08ТТ1, б&ТЖ/ и гаплогрупп Н, и, Т митохондриальной ДНК у жителей Томской области.

5. Оценить вклад полиморфных вариантов генов N083 (УТчГТ11, С774Т, в894Т, А924Т), СУР2Е1, С8ТТ1, С8ТМ1 и гаплогрупп Н, и, Т митохондриальной ДНК в формирование индивидуальной радиочувствительности человека.

Научная новизна: Впервые дана характеристика генетического разнообразия городской (г. Северск) и сельской (пос. Каргала) популяций Томской области по микросателлитным ДНК маркерам, а также представлены данные по частотам полиморфных вариантов генов синтазы оксида азота ЛГ05,3(\ГЫТЯ, С774Т, в894Т, А924Т), метаболизма ксенобиотиков СУР2Е1, <^777, и гаплогрупп Н, и, Т митохондриальной ДНК у жителей г. Северска. Впервые проведена сравнительная оценка частот мутирования мини- и микросателлитных районов генома у лиц, подвергшихся и не подвергавшихся воздействию хронического внешнего гамма-облучения в малых дозах. Получены новые данные об особенностях мутирования минисателлитных районов ДНК у лиц, проживающих в различных экологических условиях. Проведена оценка зависимости частоты мутирования мини- и микросателлитных локусов генома человека от дозы хронического внешнего гамма-облучения. Впервые проведено изучение вклада полиморфных вариантов генов N083 (УШИ, С774Т, в894Т, А924Т), СУР2Е1, (75ТШ и гаплогрупп Н, и, Т митохондриальной ДНК в формирование индивидуальной радиочувствительности человека.

Практическая значимость: Характеристика генетической структуры обследованных популяций может быть использована для составления геногеографических карт, изучения закономерностей распределения частот генов и динамики популяционной структуры. Данные о частотах аллелей и генотипов исследованных маркеров в городской и сельской популяциях Томской области могут быть использованы для оценки их вклада в подверженность к мультифакториальным заболеваниям. Полученные в настоящем 9 исследовании данные расширят представления о влиянии хронического гамма-облучения в малых дозах на закономерности мутирования гипервариабельных участков генома человека. Результаты оценки вклада полиморфных вариантов генов в формирование индивидуальной радиочувствительности человека могут быть использованы в программах, направленных на снижение заболеваемости населения посредством выделения групп риска и ограничения в сфере деятельности «вредных» производств лиц, имеющих повышенную чувствительность к воздействию генотоксических агентов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Городское и сельское население Томской области, различающееся по экологическим условиям проживания, характеризуется сходной генетической структурой по изученным мини- и микросателлитным локусам ДНК.

2. Оценки частот мутирования мини- и микросателлитных последовательностей ДНК гамет для лиц, подвергавшихся воздействию малых доз внешнего гамма-облучения, и лиц, проживающих в экологически чистом районе Томской области, находятся в границах величин, показанных для населения различных регионов мира, не подвергавшихся облучению.

3. Не установлено зависимости мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MSI, MS31, MS32 и микросателлитных D9S768, АСТВР2, D2S2739 локусов ДНК от дозы внешнего гамма-облучения в диапазоне доз от 1 до 139 бэр.

4. Наибольший вклад в формирование индивидуальной чувствительности человека к воздействию генотоксических агентов на фоне хронического гамма-облучения вносит комбинация полиморфных вариантов генов GSTT1 и GSTM1.

Апробация работы: Результаты диссертационной работы были доложены и обсуждены на Третьей итоговой конференции НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН (г.Томск, 2000 г.); 10-ом Международном конгрессе по

10 генетике человека (1СЬЮ, г.Вена, 2001 г.); Первой Международной научно-практической конференции «Медицинские и экологические эффекты ионизирующей радиации» (Северск-Томск, 2001 г.); межлабораторном научном семинаре НИИ МГ ТНЦ СО РАМН (март 2002 г.). Публикации: По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ. Структура и объем диссертации: Диссертационная работа изложена на 153 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных результатов и их обсуждения, заключения и выводов. Данные проиллюстрированы 31 таблицей, 13 рисунками. Библиографический указатель включает 230 источников, из них 82 работы отечественных авторов.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Гончарова, Ирина Александровна

127 ВЫВОДЫ

1. Население Томской области, проживающее в различных экологических условиях, характеризуется сходной генетической структурой по миниса-теллитным В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MSI, MS31, MS32 и микросателлитным D2S2739, D9S768, АСТВР2 локусам ДНК.

2. Частоты мутирования минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MSI, MS31, MS32 и микросателлитных D9S768, АСТВР2, D2S2739 локусов в группе рабочих СХК, подвергшихся влиянию внешнего гамма-облучения в малых дозах, не отличаются от значений, полученных для лиц, проживающих в незагрязненном радионуклидами поселке Каргала, и составляют 0,034; 0,035 для минисателлитных и 0,010; 0,011 для микросателлитных маркеров соответственно.

3. Не показано зависимости между дозой облучения и мутированием исследованных мини- и микросателлитных локусов ДНК у рабочих, подвергшихся воздействию малых доз внешнего гамма-облучения.

4. Население Томской области, подвергшееся и не подвергавшееся облучению, характеризуются сходным спектром (делеции/инсерции) мутационных изменений минисателлитных В6.7, СЕВ1, СЕВ 15, MSI, MS31, MS32 локусов ДНК. Наблюдается общая тенденция к увеличению длинны повторяющегося тракта минисателлитных локусов в обеих исследованных группах.

5. Популяция г. Северска характеризуется сходными значениями частот аллелей и генотипов по полиморфным вариантам генов NOS3 (VNTR, С774Т, G894T, А924Т) CYP2E1, GSTT1, гаплогрупп H, U, Т митохондриальной ДНК и более высокой частотой «нулевого» генотипа GSTM1 (75,7%) по сравнению с другими европеоидными популяциями мира.

6. Наибольший вклад в формирование индивидуальной чувствительности человека к воздействию генотоксических агентов на фоне хронического гамма-облучения вносит сочетание генотипов генов GSTT1 и GSTM1

128

Благодарности

Считаю своим долгом выразить благодарность директору НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН, академику РАМН, профессору Пузыреву В.П, который был инициатором данной работы, и осуществлял консультативную помощь на всех этапах выполнения исследования. Выражаю свою искреннюю признательность руководителю настоящей работы доктору биолоигческих наук Кучер Аксане Николаевне за мудрое руководство, чуткое и внимательное отношение. Хочу выразить благодарность профессору Ю.Е. Дуброве за предоставленную возможность использования минисателлитных зондов и помощь в проведении оценки частот мутирования данных участков генома. Выражаю благодарность Поповой H.A. за организацию работ по сбору материала, лаборатории Назаренко Л.П. за проведение забора первичного материала, коллегам по работе Фрейдину М.Б., Голубенко М. В., Косянковой Т.В. за помощь в выполнении исследования и обсуждении полученных результатов.

129

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе настоящего исследования была проведена оценка генетического разнообразия городской (г. Северск) и сельской (пос. Каргала) популяций Томской области, характеризующихся различными экологическими условиями проживания по микросателлитным маркерам ДНК. Несмотря на то, что полокусный анализ выявил различия между наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготнотью как в г. Северске, так и в пос. Каргала, суммарно не было обнаружено различий между наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготностью как внутри, так и между группами. По эффективному числу аллелей пос. Каргала характеризовался меньшим генетическим разнообразием. Сравнение распределения частот аллелей в изучаемых популяциях показало, что несмотря на различия по частотам отдельных аллелей между г. Северском и пос. Каргала в целом, по совокупности изученных микросателлитных локусов, была получена невысокая суммарная оценка гетерогенности.

Изучение распределения полиморфных вариантов генов синтазы оксида азота NOS3, метаболизма ксенобиотиков CYP2E1, GSTM1, GSTT1 и гаплогрупп H, U, Т мт ДНК в популяции г. Северска показало, что наблюдаемое распределение частот генотипов по всем изученным маркерам подчиняется равновесию Харди-Вайнберга. Не было обнаружено различий между г. Северском и другими популяциями европеоидного происхождения в распределении частот аллелей и генотипов по полиморфным вариантам генов NOS3 (VNTR полиморфизм), CYP2E1, GSTT1 и гаплогрупп H, U, Т мтДНК (Helzsouer et al., 1998; Torroni et al., 1998; Степанов и др., 1998; Чистяков и др., 2000). В г. Северске наблюдалось накопление гомозигот по нулевому аллелю гена GSTM1: частота генотипа GSTM10/0 значимо отличалась даже от таких географически приближенных популяций, как популяция г. Новосибирска; полученные значения частоты нулевого генотипа для рабочих СХК близки к значениям, характерным для лиц, имеющих различную онкологическую патологию (Ляхович и др., 2000; Spurdle et al., 2001). Накопление нулевого генотипа GSTM1 может предполагать повышение заболеваемости населения

122 г. Северска различными формами онкологической патологии. Однако, эпидемиологические исследования показали, что общая частота заболеваемости различными формами рака в г. Северске не отличается от г. Томска, и имеет тенденции, характерные для всего мира. Накопление гомозигот по нулевому аллелю гена GSTM1 возможно связано с особенностями истории формирования популяции г. Северска.

При оценке частот мутирования мини- и микросателлитных локусов ДНК, было установлено, что как полокусные, так и суммарные значения, полученные для жителей Томской области, находятся в пределах величин, описанных в литературе (Nakamura, 1987; Jeffreys, 1990; Dubrova et al., 1997; Brinkmann et al., 1995; Ellegren, 2000). При проведении сравнительной оценки было выявлено, что частоты мутирования исследованных мини- и микросателлитных локусов ДНК в группе лиц, подвергшихся влиянию хронического внешнего гамма-облучения, и в контрольной группе имеют сходные значения и находятся в пределах величин, представленных в литературе по данным локусам для групп лиц, не подвергавшихся воздействию радиационных факторов.

В настоящем исследовании была проведена сравнительная оценка частоты мутирования отцовских и материнских гамет, которая показала, что частота мутирования мужских гамет в 10 раз выше чем женских в группе работников СХК и в 2,9 раза выше в контрольной группе, что согласуется с данными литературы (Olaisen, 1993; Dubrova et al., 1998). Полученные данные говорят о необходимости при планировании иследований по оценке частоты мутирования миниателлитных районов ДНК, учитывать полозависимость данного показателя.

Кроме этого, полученные данные указывают на то, что в мужских и женских гаметах минисателлитные локусы подвергаются мутационным изменениям избирательно. У мужчин во всех сравниваемых популяциях, включая Северск и Каргалу, наибольшая частота мутирования наблюдалась для локуса СЕВ1, у женщин - для локусов MS1 и В6.7. Поскольку мужчины,

123 работая на СХК, подвергались воздействию одного из радиационных факторов, для оценки подверженности минисателлитных локусов воздействию внешнего гамма-облучения в расчеты были включены аллели, унаследованные от отца, тем самым учитывались мутации отцовского происхождения. Женщины не подвергались воздействию радионуклидов в процессе профессиональной деятельности и проживали в экологически сходных условиях. Как показали цитогенетические исследования (Бочков и др., 1999), для жителей г.Северска характерна повышенная частота хромосомных аберраций хроматидного типа, что указывает на воздействие химических мутагенов. Поэтому, оценка частоты мутирования минисателлитных локусов у матерей, в данном случае, могла бы выявить влияние химических мутагенов на минисателлитные последовательности генома Однако, не было выявлено значимых различий по частотам мутирования как мужских гамет между группой г.Северска и контролем, так и женских. В целом, как значения частот мутирования, полученные для каждого локуса, так и средние значения в обеих исследованных группах у мужчин и у женщин, не отличались от частот, полученных для этих же локусов в других группах лиц, не подвергавшихся воздействию радиационных факторов (Уег§паис1, 1991; ОЫэеп, 1993; Виагс!, 1994; 8аЮЬ а1., 1996; БиЬгоуа ег а1., 1997).

Поскольку для рабочих СХК получены сходные значения по частотам мутирования как между группами, не подвергшихся облучению, так и для облученными, для определения места нахождения исследуемой группы среди других популяций проведена процедура многомерного шкалирования, которая позволила наглядно показать, что обе исследуемые группы по частотам мутирования располагаются ближе к популяциям, не подвергавшимся облучению.

В литературе имеются данные, сообщающие о том, что при обследовании лиц, проживающих в Могилевской области и Казахстане вблизи Семипалатинского полигона, установлена прямая зависимость частоты мутирования минисателлитных локусов от степени радиоактивного

124 загрязнения территории. В настоящем исследовании была оценена зависимость частоты мутаций в исследуемых минисателлитных локусах от дозы внешнего гамма-облучения. Дискриминантный анализ и точный тест Фишера не показали наличия зависимости между частотой мутирования и дозой внешнего гамма-облучения. Полученные результаты не согласуются с литературными данными (ОиЬгоуа а1., 1997; 2002), что можно объяснить влиянием различного спектра радиационных факторов. Если рабочие СХК подвергались только внешнему гамма-облучению, то, при взрыве бомб на Семипалатинском полигоне население подвергалось воздействию электромагнитного излучения, потока нейтронов с высокой энергией, гамма-квантов, альфа- и бета-частиц. При аварии на Чернобыльской АЭС - внешнему и внутреннему облучению иодом-131 и цезием-137, выпадение которого привело к радиоактивному загрязнению почвы и водных источников.

Не обнаружено различий в спектре мутационных изменений между трупами лиц, подвергавшихся и не подвергавшихся облучению. Наблюдается общая тенденция к увеличению длинны повторяющегося тракта исследованных минисателлитных локусов ДНК в обих группах лиц.

Несмотря на то,что анализ процессов, происходящих в разлиных системах организмов (микроорганизмы, растения, наземные животные и гибродионты) показал наличие процессов деградации экосистем на всех уровнях организации биоты под воздействием Сибирского химического комбината (Дмитриева, Плеханов, 2000), в настоящем исследовании не было обнаружено изменений закономерностей мутационного процесса гипревариабельных последовательностей генома человека под воздействием факторов ядерно-химического производства. Данные настоящего исследования, проведенные на молекулярно-генетическом уровне, согласуются с результатами, проведенными на организменном (эпидемиологическими исследованиями, включающими ретроспективный учет врожденных пороков развития (ВПР)) и клеточном (цитогенетический анализ хромосомных аберраций) уровнях (Минайчева и др., 2001; Пузырев и

125 др., 2001). Ретроспективный учет врожденных пороков развития (ВПР), показал, что груз ВПР у детей до 1 года в г. Северске сопоставим с другими популяциями России и мира (Минайчева и др., 2001). Цитогенетические исследования показали, что чатота двухударных хромомсоных аберраций -маркеров радиационного поражения в г. Северске не отличается от контрольных параметров и составляет около 0,1%, однако наблюдается повышение частоты хромосомных аберраций нерадиационной природы, что указывает на воздействие химических мутагенов (Пузырев и др., 2001).

При изучении вклада полиморфных вариантов генов синтазы оксида азота N083 (УШИ, С774Т, С894Т, А924Т), метаболизма ксенобиотиков СУР2Е1, (75777, С8ТМ1 и гаплогрупп Н, и, Т в формирование индивидуальной чувствительности к воздействию генотоксических агентов, было установлено, что частоты аллелей и генотипов генов N083, СУР2Е1, С8ТТ1 и гаплогрупп мт ДНК в группах со спонтанными и повышенными значениями частот хромосомных аберраций характеризовались сходными значениями, не отличались от значений, полученных для других популяций европеоидного происхождения.

Были обнаружены различия между исследуемыми группами при сравнении распределения частот генотипов комбинации генов (75777; С8ТМ1. Самое неблагоприятное сочетание генотипов С8ТТ1 0/0; С8ТМ1 0/0 в группе с высокими частотами хромосомных аберраций составило 10,5%, тогда как в группе с нормальными частотами хромосомных аберраций - 2% (Р=0,1). Таким образом, лиц, характеризующихся нулевыми генотипами по обоим генам можно отнести к группе риска, так как отсутствие двух ферментов второй фазы детоксикации ксенобиотиков может привести к накоплению токсинов в организме и развитию онкологической патологии (Баранов и др., 2000).

Поскльку, вероятно, индивидуальная радиочувствительность являетя полигенным признаком, где наблюдается взаимодействие многих генов,

126 вносящих небольшой вклад, целесообразно продолжить исследования, увеличив численность выборок и расширив спектр маркеров

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гончарова, Ирина Александровна, 2002 год

1. Аклеев A.B., Веремеева Г.А., Киоизуми С. Влияние хронического радиационного воздействия на уровень соматических мутаций в клетках периферической крови людей в отдаленные сроки // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т.38. - Вып.4. - С.573-586.

2. Аклеев A.B. Иммунологические и цитогенетические последствия хронического радиационного воздействия на организм человека // Автореф. дисс. доктора мед. наук. М., 1995. - 48с.

3. Аклеев A.B., Ава А., Акияма М. и др. Биологическая индикация хронического облучения в отдаленные сроки. Материалы 1-го международного симпозиума (г. Челябинск, 9-13 сентября 1995г.). М., 1996. - Т.1. - С.7-19.

4. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза. М.: Мир, 1978. - 464 с.

5. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э, Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности». Введение в предиктивную медицину. С-Петерб.: Интермедика, 2000. 272 с.

6. Бочков Н.П. Аналитический обзор цитогенетических исследований после Чернобыльской аварии // Вестник Российской акад. наук. 1993. - №5. - С. 51-56.

7. Бочков Н.П., Моляка Ю.К. Генетический мониторинг популяций человека по учету мутационных событий на уровне ДНК // Вестник РАМН. 1996. -Т. 8. - С.7-10.

8. Бочков Н.П., Моляка Ю.К., Раевская Г.В. и др. Стабильность минисателлитных локусов в геноме клеточной культуры HeLa // Бюллетень эксп. Биологии и мед. 1996. - № 9. - С. 311-314.

9. Бочков Н.П., Попова H.A., Назаренко С.А. и др. Необычайно высокий уровень хромосомной изменчивости в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 1999. - Т. 35. - №5. - С. 735742.

10. Ю.Булатов В.И. Россия радиоактивная. Новосибирск.: ЦЕРИС, 1996. - 269 с.130

11. Ванин А.Ф. Оксид азота в биологии; история, состояние и перспективы исследований // Биохимия. 1998,- Т.63 - №7. - С. 867-869.

12. Василенко И.Я. Радиация. Источники, нормирование облучения // Природа. №4. - 2001. - с. 10-16.

13. Вейр Б. Анализ генетических данных. М.: Мир, 1995. - 400 с.

14. Винк Д.А., Водовоз И., Кук Д.А. Значение химических свойств оксида азота для лечения онкологических заболеваний. // Биохимия. 1998. - Т. 63.-№7.-С. 948-957.

15. Возилова A.B. Отдаленные цитогенетические эффекты хронического облучения населения Южного Урала // Автореф. дисс. . кандидата биол. наук. М., 1997. 24с.

16. Возилова A.B., Аклеев A.B., Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Отдаленные цитогенетические эффекты хронического облучения населения Южного Урала // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т.38. ~ Вып.4. -С.586-591.

17. Гераськин С.А., Дикарев В .Г., Удалова A.A. и др. Анализ цитогенетических последствий хронического облучения в малых дозах посевов сельскохозяйственных культур // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т.38. - Вып.З. - С.367-375.

18. Гераськин С.А. Концепция биологического действия малых доз ионизирующего излучения на клетки // Радиационная биология. Радиоэкология.- 1995.- Т.35. Вып. 3.- С.571-580.

19. Гераськин С.А. Критический анализ современных концепций и подходов к оценке биологического действия малых доз ионизирующего излучения // Радиационная биология. Радиоэкология.- 1995.- Т.35. Вып. 5.- С.563-570.

20. Гилева Н.М., Любашевсккий В.И., и др. Наследуемая хромосомная нестабильность у обыкновенной полевки (Microtus arvalis) из района Кыштымской ядерной аварии факт или гипотеза? // Генетика. - 1996. -Т.32. - № 1. - С.114-119.131

21. Гистология / Ред. Ю.И. Афанасьева, H.A. Юрина. М.: Медицина, 1989. -668 с.

22. Говорун Р.Д. Цитогенетические нарушения и мутагенез в клетках млекопитающих и человек, индуцированные ионизирующим излучением с различной ЛПЭ // Радиационная биология. Радиоэкология. 1997. - Т.37. -Вып. 4. - С. 539-548.

23. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. Санкт-Петербург: - 1997. -286 с.

24. Готлиб В.Я., Пелевина И.И., Конопля Е.Ф., Альферович A.A. Некоторые аспекты биологического действия малых доз радиации // Радиобиология. -1991.-Т.31. Вып.З. - С.318-325.

25. Дмитриева Н.Г., Плеханов Г.Ф. Комплексная оценка состояния окружающей природной среды в 30-км зоне г. Северска / Экологическая оценка территории ЗАТО Северск и 30-км зоны СХК. Томск: Изд-во Том. Ун-та.-2000.- 162 с.

26. Дубинин Н.П. Некоторые проблемы современной генетики. М.: Наука, 1994.-224 с.

27. Животовский Л.А. Популяционная биометрия. М.: Наука, 1991. - 272 с.

28. Иващенко Т.Э., Сиделева О.Г., Петрова М.А., и др. Генетические факторы предрасположенности к бронхиальной астме // Генетика. 2001. - Т. 37. -№1. - С. 107-111.

29. Кондратьева Е.И., Кравец Е.Б., Косянкова Т.В., Вылегжанина Е.В., Фрейдин М.Б. Анализ VNTR полиморфизма гена NOS3 у больных сахарным диабетом 1 типа // Бюлл. эксперемент. Биологии и медицины. -2001. Прилож. 1. - С.60-62.

30. Кондратьева Е.И., Кравец Е. Б., Косянкова Т.В., и др. Анализ VNTR полиморфизма гена NOS3 у больных сахарным диабетом I типа // Бюл. эксперем. биологии и медицины. 2001. - Прилож. 1. - С. 60-62.132

31. Коненков В.И. Медицинская и экологическая иммуногенетика. -Новосибирск. -1999. 250 с.

32. Косянкова Т.В., Пузырев К.В., Ковалев И.А. Генетика сердечнососудистой патологии / Сборник статей "Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике". Новосибирск: Издательский дом, 2001.- С. 34-41.

33. Кузин A.M. Вторичные биогенные излучения лучи жизни. Пущино, 1997.-38с.

34. Кучер А. Н. Динамика генетико-деомграфической структуры и генетическое разнообразие коренных и пришлых популяций сибирского региона: Дисс. докт. биол. наук. Томск, 2001. - 334 с.

35. Кучер А.Н., Пузырев В.П. Генетическая структура популяций и уровень здоровья неселения / Сб. «Гнетика человека и патология». Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1992. - с. 17-20.

36. Лазюк Г.И., Бедельбаева К.А., Фомина Ж.Н. Цитогенетические эффекты дополнительного радиационного воздействия малых доз ионизирующего излучения // Здравоохранение Белоруссии. 1990. - № 11.- С.38-41.

37. Леонов В.П. Обработка экспериментальных ланных на программируемых микрокалькуляторах. Томск.: Изд-во Том. Ун-та, 1990. - 376 с.

38. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Д. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. М.: Мир, 1984. - 479 с.

39. Малярчук Б.А.,- Деренко М.В. Изменчивость митохондриальной ДНК человека: распределение «горячих точек» в гипервариабельном сегменте I главной некодирующей области // Генетика. 2001. - Т. 37. - № 3. - С. 9911001.

40. Матвеева В.Г., Саблина О.В., Еремина В.Р., и др. Цитогенетика врожденных патологий у населения Алтая в зонах радиационного загрязнения. Генетические эффекты антропогенных факторов среды. Новосибирск, 1993. Вып. 1. - С. 17.

41. Минушина Л.О., Затейщиков Д. А., Затейщикова A.A., и др. Полиморфизм гена эндотелиальной NO синтазы и гипертрофия миокарда у больных артериальной гипертензией // Кардиология. - 2002. - №3. - С. 30-34.

42. Моляка Ю.К. Разработка метода учета мутаций в гипервариабельныхрайонах ДНК для целей генетического мониторинга // Автореф.канд.мед. наук. М., 1994.- 26 с.

43. Моляка Ю.К., Площанская О.Г., Колесникова Т.Н., и др. Генетические эффекты радиации в гипервариабельных районах ДНК соматических и зародышевых клеток / 3 Съезд по радиационным исследованиям. М., 1997 -Т. 2. с. 35.

44. Наследственность человека и окружающая среда.- М.: Наука, 1984. 200 с.

45. Назаренко Л.П., Назаренко С.А., Кириллина В.И., Прокопьева Ю.Н. Генетико-экологическая оценка состояния здоровья жителей Якутии. -Якутск, 2001.- 132 с.134

46. Недоспасов А.А.Биогенный оксид азота: десять лет второго пришествия, предыстория открытия аргининзависимого биосинтеза NO // Биорганическая химия. 1999. - Т.25. - №6. - С.403-411.

47. Окладникова Н.Д., Токарская З.Б., Мусаткова О.Б. Цитогенетический эффект длительного воздействия инкорпорированного плутония-239 и внешнего гамма-облучения у профессионалов (клиническое обследование) //Мед. радиология. 1994. - №1. - С.48-52.

48. Патрушев Л.И. Экспрессия генов. М.: Наука, 2000. - 527с.

49. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбский С.С. и др. Генетические эффекты в соматических клетках лиц, работающих в условиях хронического облучения разной интенсивности после аварии на Чернобыльской АЭС // Цитология и генетика. 1996. -Т.30. - №2. -С. 17-25.

50. Плеханов Г.Ф.> Дмитриева Н.Г., Мерзляков А.Л. Методология биомониторинга в 30-км зоне ЗАТО Северск / Экологическая оценка территории ЗАТО Северск и 30-км зоны СХК. Изд-во Том. Ун-та., 2000. -162 с.

51. Пузырев В.П. Состояние и перспективы геномных исследований в генетической кардиологии // Вестник Российской акад. мед. наук. -2000. -№7.-С. 28-33.

52. Пузырев В.П., Степанов В.А. Патологическая анатомия генома человека. -Новосибирск: Наука, 1997. -224 с.

53. Пузырев В.П., Голубенко М.В., Фрейдин М.Б. Сфера компетенции митохондриальной генетики // Вестник Российской Акад. Наук. 2000. -№10.-С. 31-37.

54. Севанькаев A.B., Насонов А.П. и др. Возможности применения методов биологической дозиметрии для ретроспективной оценки доз в связи с136последствиями аварии на Чернобыльской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. - Т.34. - Вып.6. - С.79.

55. Севанькаев A.B., СаенкоА.С. Соматический мутагенез как биологический дозиметр радиационного воздействия // Радиационная биология и радиоэкология. 1997. - Т. 37, Вып.4. - 560-564 с.

56. Снегерева Г.П., Шевченко В.А. Новицкая H.H. Использование FISH-метода для реконструкции доз, полученных участниками ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. - Т. 43. - Вып. 5. - С. 654-660.

57. Соловенчук J1.JT. Популяционно-генетические механизмы адаптации коренного и пришлого населения Северо-Востока СССр к экстремальным условиям окружающей среды: Дисс. докт. биол. наук. Москва, 1989. -420 с.

58. Сошникова JI.A, Тамашевич В.Н., Уебе Г., Шефер М. Многомерный статистический анализ в экономике. М.: Юнити - 1999. - 598 с.

59. Спитковский Д. М. Концепция действия малых доз ионизирующих излучений на клетки и ее возможные приложения к трактовке медико-биологических последствий // Радиобиология. 1992. - Т.32. - Вып.З. -С.З 82-400.137

60. Тейлор Б.С., Аларсон JI.X., Биллиар Т.Р. Индуцибельная синтаза оксида азота в печени: регуляция и функции // Биохимия. 1998. - Т. 63. - Вып. 7. -С. 905-923.

61. Тельнов В.И. Оценка распределения генотипов гаптоглобина у людей, подвергшихся хроническому профессиональному облучению в значительных дозах // Генетика. 1994. - Т. 30. - №9. - С. 1274-1277.

62. Тельнов В.И., Вологодская И.А., Жунтова Г.В. Распределение типов гаптоглобина и их значение в изменениях биохимических и иммунологических показателей у людей, облученных в малых дозах // Генетика. 1995. - Т. 31. - №5. - С. 715-721.

63. Шевченко В.А., Померанцева М.Д. Генетические последствия действия ионизирующих излучений. М.: Наука, 1985. 279с.

64. Шевченко В.А., Сусков И.И., Снигирева Г.П., и др. Генетический статус населения, подвергшегося воздействию ядерных испытаний // Вестник научной программы «Семипалатинский полигон». 1995. - №3. - С. 5-33.

65. Чистяков Д.А., Воронько О.Е., Савостьянов К.В., и др. Полиморфные маркеры генов эндотелиальной NO-синтазы и сосудистого рецептора ангиотензина II-и предрасположенность к ишемической болезни сердца // Генетика. 2000. - Т. 36. - № 12. - с. 1707-1711.

66. Энергетика: цифры и факты. -М.: ЦНИИ атоминформ. -1993.- С.294.

67. Энергетика: цифры и факты. -М.: ЦНИИатоминформ. -1994,- С. 42.

68. Ярмоленко С.П. Проблемы радиобиологии в конце XX столетия // Радиационная биология. Радиоэкология. 1997. - Т.37. - Вып. 4. - С. 488493.

69. Abdel-Rahmad S.Z., Ei-Zein R.A., Zwishchenberder J.В. Association of the NAT1*10 genotype with increased chromosome aberrations and higher lung cancer risk in cigarette smokers // Mutat. Res. 1998. - V. 398. - P. 43-54.

70. Akiyama M., Kyoizumi S., Hirai Y., et al. Studies on chromosome aberration and HPRT mutations in limphocytes and GPA mutation in erihtrocytes of atomic bomb survivors // Mutation and the environment. 1990. - V.25. - P. 6980.

71. Akar N., Akar E., Cin S et al. Endotelial nitric oxide synthase intron 4, 27 bp repet polymorphism in Turkish patients whith deep vien thrombosis and cerebrovascular accidents // Tromb. Res. 1999. - V. 94. - P. 63-64.

72. Akyama M., Kyozumi S., Kusunoki Y., et al. Monitoring exposure to atomic bomb radiation by somatic mutation // Environ Health Perspect. 1996. - V. 104. - P. 493-496.

73. Albertini R.J., Gennett I.N., Lambert В., et al. Mutation at the HPRT locus // Mutat. Res. 1989. - V. 216. - P.65-88.

74. Albertini R.J., Nisclas J.A., Fuscoe J.C., et al. In vivo mutations in human blood cell: biomarkers for molekular epidemiology // Environ Health Perspect.-1993. -V. 99.-P. 135-141.

75. Albertini R.J., Nisclas J.A., O'Neill J.P. Somatic cell gene mutations in humans: biomarkers for genotoxicity // Environ Health Perspect.-1993. V. 3. - P. 193201.139

76. Albertini R.J., Clark L.S., Nicklas J.A. and et all. Radiation quality affects the efficiency of induction and the molecular spectrum of HPRT mutations in human T cells // Radiation research. -1997.- V.148. P. S76-S86.

77. Ammenheuser M.M., Hastings D.A., whorton E.B., et al. Frequencies of Hprt mutant lymphocytes in smokers, non-smokers, and former smokers // Environ. Mol. Mutagen.-1997.-V. 138.-P. 131-138.

78. Amundson S.A., Chen D.J., Okinaka R.T. Alpha particle mutagenesis of human lymphoblastoid cell lines // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V. 70. - № 2. - P. 219226.

79. Anderson R.M., Marsden S.J., Wright E.G., et al. Complex chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes as a potential biomarker of exposure to hight-LET oc-particles // Int. J. Radiat. Biol. 2000. - V. 76. - № 1. -P. 31-42.

80. Awa A.A. Persistent chromosome aberration in the somatic cells of A-bomb survivors, Hiroshima and Nagasaki // J. Radiat. Res. 1991. -V. 32. - P. 265274.

81. Bauchinder M., Salassidis K., et al. Fish-based analysis of stable translocations in a Techa River population // Int. J. Radiat biol. 1998. - V. 73. - № 6. - P. 605-612.

82. Bellamy R., Hill A. V. S. Short report on DNA marcer at candidate locus // Clin. Genet. 1997. - 52. - P. 192-193.

83. Berneburg M., Grether-Beck S., Kurten V., et al. Singlet oxigen mediates the UVA-induced generation of the photoaging-associated mitochondrial common deletion // J. Biol, Chem. 1999. - V. 28. - № 274. - P. 15345-15349.

84. Bhattacharyya N., Chen H.C., Grundfest-Broniatowski S., et al. Alteration of hMSH2 and DNA polymerase beta genes in breast carcinomas and fibroadenomas // Biochem. Biophis. Res. Commun. 1999. - V. 259. - P. 429435.

85. Bianchi N.O., Bianchi M.S., Richard S.M. Mitochondrial genome instability in human cancers // Mutat. Res. 2001. - V.488. - P.9-23.

86. Bigbee W.L., Jensen R.H., Veidebaum T., et al. Biodosimetry of Chernobyl cleanup workers from Estonia and Latvia using the glicophorin A in vivo somatic cell mutation assay //Radiat. Res. 1997. -V. 147. - P.215-224.

87. Brinkmann B., Moller A., Wiegand P. Structure of new mutations in 2 STR systems // Int. J. Legal. Med. 1995. - V. 107. - P. 201 -203.

88. Bruford V.W. Single-locus and multilocus DNA fingerprinting. Genetic Analysis of Populations // A Practical Approach. - 1992. - P.225-269.

89. Buard J, Vergnaud G. Complex recombination events at the hypermutable minisatellite CEB1 (D2S90)// EMBO J. 1994. - V.13. - P.3203-3210.

90. Burkart W., Jung T. Health risk from combined exposure: mechanistic considerations on deviation from additivity // Mutation Res. 1998. - V. 411.-P. 119-128.

91. Cantatore P., Saccone C. Organization, structure and evolution of mammalian mitihondrial genes // International Review of Cytology. 1987. - V. 108. - P. 149-208.

92. Charlesworth B., Sniegowski P., Wolfgang S. The evolutionary dynamics of repetitive DNA in eukaryotes //Nature. 1994. - V. 371. - P. 215-220.

93. Chakraborty R., Kimmel M., Stivers D., et al. Relative mutation rates at di-, try, and tetranucleotide microsatellite loci // Proc Natl Acad Sei USA. 1997. -V. 94.-P. 1041-1046.141

94. Chen H., Sandler D.P., Taylor J.A., et al. Increased risk for myelodysplasia syndromes in individuals with glutathione transferase theta 1 (GSTT1) gene defect // Lancet, 1996. - V. 347. - P. 295-297.

95. Chinnery P.F., Taylor G.A., Howell N., et al. Mitochondrial DNA haplogrups and susceptibility to AD and dementia with Lewy bodies // Neurology. 2000. -V. 55.-P.302-304.

96. Conforti-Froes N., Ei-Zein., Abdel-Rahman S.Z., et al. Predisposing genes and increased chromosome aberrations in lung cancer cigarette smokers // Mutat. Res. 1997. - V.379. - P. 53-59.

97. Conover C., Avramopoulos D., Gerken S., et al. The tetranucleotide repeat polimorphism D2S1245 demonstrates hipermutability in germline and somatic cells // Hum. Mol. Genet. 1995. - V. 4. - №. 7. - P. 1193-1199.

98. Cooper A., Pearl J., Brooks J., et al. Expression of the nitric oxide synthase 2 gene is not essential for early control of Mycobacterium tuberculosis in the murine lung // Infect. Immun. 2000. - V. 68. - № 12. - P. 6879-6882.

99. Croteau D.L., Stierum R.H., Bohr V.A. Mitochondrial DNA repair pathways // Mutation Research. 1999. - V. 434. - P. 137-148.

100. Crow J. F. The high spontaneous mutation rate: It is a health risk? // Proc.Natl.Acad.Sci USA. 1997.- Vol.94, - P.8380-8386.

101. Cruz A.D., Curry J., Curado M.P., et al. Monitoring HPRT mutant frequency over time in T-limphocytes of people accidentally exposed to high doses of ionizing radiation // Environ. And Mol. Mutagenesis. 1996. - V. 27. - P. 165175.

102. Cruz A.D., Volpe J.P., Saddi V., et al. Radiation risk estimation in human populations: Lessons from the radiological assident in Brazil // Mutat. Res.-1997.-V. 373.-P. 207-214.

103. Dubrova Y. E., Nesterov N. et al. Human minisatellite mutation rate after the Chernobyl accident // Nature. 1996. - V. 380. - P.683-686.142

104. Dubrova Y.E., Nesterov V.N., Krouchinsky N. G., et al. Further evidence for elevated human minisatellite mutation rate in Belarus eight years after the Chernobyl accident // Mutation Research. 1997. - V. 381. - P. 267-278.

105. Dubrova Y.E., Plumb M., Brown J., Jeffreys A.J. Radiation-induced germline instability at minisatellite loci // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V. 74. - № 6. - P. 689-696.

106. Dubrova Y.E., Plumb M., Brown J., and et al. Stage specificity, dose response, and doubling dose for mouse minisatellite germ-line mutation induced by acute radiation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 19986. - V. 95.- P.6251-6255.

107. Dubrova Y.E., Plumb M.A., Gutierrez B. et al. Trangenerational mutation by radiation // Nature. 2000. - V. 405. - P.37.

108. Dubrova Y.E., Rakhmet I., Bersimbaev, Liela B., et al. Nuclear weapons tests and human germline mutation rate // Science. 2002. - V. 295. - P. 1037.

109. Dubrova Y.E., Plumb M.A. Ionising radiation and mutation induction at mouse minisatellite loci The story of the two generations // Mutat. Res. 2001. - V. 9271.-P. 1-8.

110. Ellegren H., Lindgren G., Primmer C.R., Moller A.P. Fitness loss and germline mutations in barn swallows breeding in Chernobyl // Nature. 1997.- V. 9. - P.

111. Ellegren H. Microsatellite mutations in the germline: implication for evolutionary inference//TIG.-2000.-V. 16.-№. 12.-P. 551-558.

112. Falck G.C., Hirvonen A., Scsrpato R., et al. Micronuclei in blood lymphocyres and genetic polymorphism for GCTM1, GCTTl,and NAT2 in pesticide-exposed greenhouse workers // Mutat. Res. 1999. - V. 441. - P. 225-237.

113. Garthwaite J.No particular placeto go // Nature. 1998. - V.395. - №10. - P. 133-134.593.596.143

114. Gemmell N.J., Allendorf F.W. Mitochondrial mutations may decrease population viability // Trends in ecology and evolution. 2001. - V. 16. - №3. -P. 115-117.

115. Gough A.C., Miles J.S., Spurr N.K., et al. Identification of the ptimary gene defect at the cytochrome P450 CYP2D locus // Nature. 1990. - V. 347. - № 25.-P. 773-776.

116. Grasseman H. Genetics of the neuronal no-syntase // Pneuvologie. 2001. -V.55.-№ 8. - P. 390-395.

117. Griffin R.J., Makepeace C.M., Hur W.J., Song C.W. Radiosrnsitization of hipoxic tumor cells in vitro by nitric oxide // Int. J. Oncol. Biol.Phis. 1996. -V.36. - № 2. - P.377-383.

118. Guengerich F.P. Reactions and significance of cytochrome P-450 enzymes // J. Biol. Chem.-1991.-Vol. 266. No 16.-P. 10019-10022.

119. Hakoda M., Akiyama M., Kyoizumi S., et al. Increased somatic cell mutant frequency in atomic bomb survivors // Mutat.Res. 1988. - V. 201. - P.39-48.

120. Hausladen A., Stamler J. S. Nitric oxide in plant immunity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. - 95. - P. 10345-10347.

121. Hayashi S., Watanabe J., Nakachi K., Kawajiri K. Genetic linkage of lung cancer-associated Mspl polymorphims with amino acid replacement in the heme binding region of the human cytochrome P4501A1 gene // J. Biochem. -1991.-V. 110.-P. 407-411.

122. Healey CS, Dunning A.M., Durocher F., et al. Polymorphisms in the human aromatase cytochtome P450 gene (CYP19) and breast cancer risk // Carcinogenesis. 2000. - V.21. - № 2. - P. 189-193.144

123. Hei T.K., Wu L.J., Liu S.X., et al. Mutagenic effects of a single and an exact number of a particles in mammalian cells // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1997. - V. 94,- P.3765-3770.

124. Helzlsouer K.J., Selmin O., Huang H-Y., et al. Association between Glutatione S-transferase Ml, PI, and T1 genetic polimorphisms and development of brest cancer // J. Nat. Cancer Inst. 1998. - V. 90. - №7. - P. 512-518.

125. Hibi K., Ishigami T., Tamura K. et al. Endothelial nitric cxide synthase gene polimorphism and acute myocardial infarction // Hypertension. 1998. - V. 32.-P. 521-526.

126. Houten B.V., Chen Y., Niclas J. A. and et all. Development of long PCR techniques to analyze deletion mutation of the human HPRT gene // Mutation Research. 1998. - V.403. - P. 171-175.

127. Jeffreys A. J., Wilson V., Thien L. Hypervariable "minisatellite" regions in human DNA // Nature. 1985. - V. 314. - №7. - P. 67-73.

128. Jeffreys A. J. Repeat Unit Sequence Variation in Minisatellites: A Novel Source of DNA Polymorphism for Studying Variation and Mutation by Single Molecule Analysis // Cell. 1990. - V. 60. - P.473-485.

129. Jeffreys A.J. The Efficiency of Multilocus DNA Fingerprint Probes for Individualization of Family Relationships, Determined from Extensive Casework//Am. J. Hum. Genet. -1991. V. 48. - P.824-840.

130. Jeffreys A.J., Wilson V. Hypervariable minisatellite region in human DNA // Nature. 1985. - V. 314. - P.67-73.145

131. Jensen R.H., Langlois R.G., Bigbee W.L., et al. Elevated frequency of glicophorin A mutations in erithrocytes from Chernobyl accident victims // Radiat. Res. 1995.-Vol. 141. - P.129-135.

132. Johns D.R. The other human genome: mitochondrial DNA and disease // Nature Medicine. 1996. - V.2. - P. 1065-1068.

133. Jones M., Thomas B., et al. Total gene deletion and mutant frequency of the HPRT gene as indicators of radiation exposure in Chernobyl liquidators // Mutat. Research. 1999. - V. 431. - P. 233-246.

134. Kawajiri K., Nakachi K., Imai K., Yoshii A., Shinoda N., Watanabe J. Identification of genetically high risk individuals to lung cancer by DNA polymorphism of the cytochrome P450IA1 gene // FEBS Lett. 1990. - V. 263. №1. - P. 131 - 133.

135. Kawasaki K., Suzukil T., et al. CC to TT mutation in the mitochondrial DNA of normal skin: relationship to ultraviolet light expozure // Mutat. Res. 2000. - V.22. - № 468 (1). - P. 35-43.

136. Kelsey K.T., Wiencke J. K. Growing pains for the environmental genetics of breast cancer: Observation on a study of the glutation-S-transferases // J. of the Nat.Cancer Inst. 1998. - V. 90. - № 7. - P. 484-485.

137. Kim J.W., Lee C.G., Park Y.G., et al. Combined analysis of germlyne polymorphisms of p53, GSTM1, GSTT1, CYP1A1, and CYP2E1: relation to the incidence rate of cervical carcinoma // Cancer. 2000. - V.88. - № 9. - P. 2082-2091.

138. Kodaira M., Satoh C., Hiyama K., et al. Lack effects of atomic bomb radiation on genetic instability of tandem- repetitive elements in human germ cell // Am. J. Hum. Genet. 1995. - V. 57. - P.1275-1283.146

139. Kovalchuk O., Dubrova Y.E., Arkhipov A., et al. Wheat mutation rate after Chernobyl // Nature. 2000. - V. 407. - P. 583.

140. Kreja L., Greulich K.M., et al. Stable chromosomal aberrations in haemopoietic strem cells in the blood of radiation accident victims // Int. J. Radiat. Biol. 1999. - V. 75. -№ 10. - P. 1241-1250.

141. Langlois R.G., Bigbee W.L., Kyoizumi S., et al. Evidence for increased somatic cell mutations at the glicophorin A locus in atomic bomb survivors // Science. 1987. -Vol. 236. - P. 445-448.

142. Lee Y., Cheon K., Lee N., et al. Gene polymorphisms of endotelial nitric oxide synthase and angiotensin-converting enzime in patients with asthma // Allerg. -2000.-V. 55. -P. 959-963.

143. Lin D-X., Tang Y-M., and et al. Susceptibility to esophagel cancer and genetic polymorphisms in glutathione S-Transferases Tl, PI, and Ml and cytochrome p450 2E1 // Cancer Epidemiol. Biomarkers. Prev. 1998. - V.7. - P. 10131018.

144. London S.J., Daly A.K., Cooper J., et al. Polymorphism of glutatione S-transferase Ml and lung cancer risk among afgican-americans and Caucasians in Los Angeles county, California // J. Nat. Cancer Inst. 1995. - V. 87. - P. 1246-1252.

145. Lucas J.N., Awa A., Straume T., et al. Rapid translocation frequency analysis in human decades after exposure to radiation // Int. J. Radiat. Biol. 1992. -V. 62. - №1. - P.53-63.

146. Luckey T.D., Nature with ionizing radiation: a provocative hypothisis // Nutrition and cancer. 1999. - V.34. - P. 1-11.

147. Lundberg J.O.N., Weitzberg E., Lundberg J.M., et al. Nitric oxide in exhaled air // Eur. Respir. J. 1996. - № 9. - P. 2671-2680.147

148. May A., Bohr V.A. Gene-specific repair of gamma-ray-induced DNA strand breaks in colon cancer cells: no coupling to transcription and no removal from the mitochondrial genome // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000.

149. V.16. №.269(2). -P. 433-437.

150. Messerini L., Ciantelli M., Baglioni S., et al. Prognostic significance of microsatellite instability in spotadic mucinous cilirectal cancer // Hum. Pathol. 1999. - V. 30. - P. 629-634.

151. Migot-Nabias F., Mombo L., Dubois B., et al. Human genetic factors related to susceptibil to mild malaria in Gabon // 2000. - V. 7. - № 7. - P. 435-441.

152. Michael W.B., Hanotte O., John F.Y., et all. Single-locus and multilocus DNA fingerprinting // Molecular Analysis of Population. A Practical approach. -1992.-P. 225-269.

153. Miller R.C., Randers-Pehrson G., Geard C.R., et al. The oncodenic transforming potential of the passage of single a particles through mammalian cell nuclei // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - V. 96. - P. 19-22.

154. Mitchell J.B., DeGraff W., Kim S., et al. Redox generation of nitric oxide to radiosensitize hypoxic cells // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phis. 1998. - V.42. -№ 4.-P. 795-798.

155. Naidoo R., Chetty R. The application of microsatellites in molecular pathology // Pathology oncology research. 1998. - V.4. - № 4. - P. 310-315.

156. Nakamura Y., Leppert M., Connel P., et al. Variable namber of tandem repeat (VNTR) markers for human gene mapping // Science. 1987.- V.235. - P. 1616-1622.

157. Nakayama T, Soma M., Takahashi Y., IzumiY.,Kanmatsuse K., Esumi M. Association analysis of CA repeat Polymorphism of the endothelial nitric oxide synthase gene with essential hypertension in Japanes // Clin. Genet. -1997. -V.51. №.1. -P.26-30.

158. Nebert D.W., Petersen D.D., Fornace A.J. Cellular response to oxidative stress // Biological Oxidation System. 1990. - V. 1. - P. 69-83.148

159. Nebert D.V., Garvan M.J. Ecogenetics: from biology to health // Toxicol. Indust. Hlth. 1997. - V.13. -P. 163-192.

160. Neel J.V. New- approaches to evaluating the genetic effects of the atomic bombs//Am. J. Hum. Genet. 1995. - V. 57. - P. 1263-1266.

161. Neel J.V. Genetic studies at the Atomic Bomb Casualty Commission -Radiation Effects Research Foundation: 1946-1997 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - V. 95. - P. 5432-5436.

162. Neel J.V. Reappraisal of Studies Concerning the genetic Effects of the Radiation of humans, mice, and drosophila // Environmental and Molecular Mutagenesis. 1998. - Vol. 31. - P. 4-10.

163. Nei M. Molecular evolutionary genetics. New York.: Columbia University press, 1987.- 187 c.

164. Neil J., Allendorf F.W. Mitochondrial mutations may decrease population viability // Trends in Ecology and Evolution. 2001. -V. 16. - №3. - P. 115117.

165. Novoradovsky A., Brantly M.L., Waclawiw M.A., and et al. Endotelial nitric oxide sinthase as a potential susceptibility gene in the pathogenesis of emphisema in a1-antitripsin deficiency // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1999.-V. 20.-P. 441-447.

166. Olaisen B.,Bekkemoen M., Hoff-Olsen P., Gill P. Human VNTR mutation and sex // DNA Fingerprinting: State of the Science, Birkhauser, Basel, 1993. P. 63-69.

167. Pedroni M., Tamassia M., Percesepe A., et al. Microsatellite instability in multiple colorectal tumors // Int. J. Cancer. 1999. - V. 31. P. 1-5.

168. Peltonen L., McKuscik V. Dissecting human disease in the postgenomic era // Science. 2001. - V. 291. - P. 1224-1229.

169. Perera F.P., Molecular Epidemiology: Insights into cancer susceptibility, risk assessment, and prevention // J. of the Nat.Cancer Inst. 1996. - V.88. - № 8. -P. 496-509.149

170. Philip I., Plantefeve G., Villaumier-Barrot S., et al. G894T polimorphism in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with an enhanced vascular responsiveness to phenylephrine // Circulation. 1999. - V. 22. - P. 3096-3099.

171. Pluth M.J., Ramsey J.M., Tucker D.J. Role of maternal exposures and newborn genotypes on newborn chromosome aberration frequencies // Mutation Res. -2000. V. 465.-P. 101-111.

172. Pressl S., Edvards A., Stephan G. The influence of age, sex and smoking habits on the background level of fish-detected translocation // Mutat. Research.1999.-V. 442.-P. 889-95.

173. Raunio H., Pasanen M., Maenpaa J. et al. Expression of extrahepatic cytochrome P450 in humans // In: Pacifici G.M. and Fracchia G.N. (Eds) Advances in Drug Metabolism in Man. Luxenbourg. - 1995. - P. 235-287.

174. Risch N.J. Searchin for genetic determinants in the new millenium // Nature.2000.-V. 405.-P. 847-856.

175. Roberts R., Joyce P., Kennedy M.A. Rapid and comprehensive determination of cytohrome P450 CYP2D6 poor metabolizer genotypes by multiplex polimerase chein reaction // Hum. Mutat. 2000. - V. 16. - № 1. - P. 77-85.

176. Ross R. The pathogenesis of atherosclerosis: perspectives for the 1990s // Nature. — 1993.-V. 362.-P. 801-809.

177. Saddi V., Curry J., Nohturfft A., et al. Increased hprt mutant frequencies in Brazilian children accidentally exposed to ionizing radiation // Environmental and molecular mutagenesis. 1996. - V. 28. - P. 267-275.

178. Satoh C., Takahashi N., Asakawa J. et al. Genetic analysis of children of atomic bomb survivors // Environ. Health Perspect. 1996. - V. 104, Supp. 3. -P.511-519.150

179. Scatpato R., Hirvonen A., Migliore L., et al. Influence of GSTM1 and GSTT1 polymorphisms on rte frequency of chromosome abberations in lymphocytes of smokes and-pesticide-exposed greenhouse workers // Mutat. Res. 1997. -V. 389.-P. 227-235.

180. Shanahan E. M., Peterson D., Roxby D., et al. Mutation rates at the glycophorin A and HPRT loci in uranium miners exposed to radon progeny // Occupational and environmental medicine. 1996. - V.53. - N.7. - P.439-444.

181. Shaun M., Petes D. The stabilization of repetitive tracts of DNA dy variant repeats requires a functional DNA mismatch repair system // Cell. 1995. -V. 83.-P. 539-545.

182. Shelby M.D., Zeiger E. Activity of human carcinogens in the Salmomella and rodent bone-marrow cytogenetics tests // Mutation. Res. 1990. - Vol. 34. -P. 257-261.

183. Sim E., Payton M., Noble M., Minchin R. An update on genetic, structural and functional studies of arylamine N-acetyltransferases in eucaryotes and procaryotes // Hum. Mol. Genet. 2000. - V. 9. - № 16. - P. 2435-2441.

184. Smith C.A., Gough A.C., Nigel Leugn P., et al. Debrisoquine hydroxylase gene polymorphism and susceptibility to Parkinson's disease // Lancet. -1992. V. 339. - № 6. - P. 1375-1377.

185. Song N., Tan W., Xing D., Lin D. CYP 1 Al polymorphism and risk of lung cancer in relation to tobacco smoking: a case-control study in China // Carcinogenesis. 2001. - Vol. 22. No 1. - P. 11-16

186. Spurdle A., Chen X., Abbazadeganm M., et al. CYP 17 promotor polymorphism and ovarian cancer risk // Int. J. Cancer. 2000. - V. 86. - P. 436-439.151

187. Spurdle A., John L., Hopper G., et al. CYP17 Promoter polymorphizm and breast cancer in Australian women under age forty years // J. of the Nat.Cancer Inst. 2000. - V. 92. - № 20. - P. 1675-1681.

188. Spurde A., Webb P., Purdie D.M., et al. Polymorphisms at the glutatione S-transferase GSTM1, GSTT1 and GSTP1 loci: risk of ovarian cancer by histological subtype // Carcinogenesis. 2001. - V.22. - № 1. - P.67-72.

189. Tang J.T., Yamazaki H., Inoue T., Koizumi M., Yoshida K., Ozeki S., Inoue T. Mitochondrial DNA influences sensitivity and induction of apoptosis in human fibroblasts // Anticancer Res. 1999. - V. 19. - № 2B. - P. 4959-4964.

190. Thompson G., Esposito M.S. The genetics of complex diseases // TCB, TIBS, TIG Millenium issue. 1999. -№ 12. - P. 17-20.

191. Tomita S., Mito Y., Kusano T., et al. Genetic alteration in human malignant tumor // Rinsho Byori. -1999. V. 47. -P. 20-26.

192. Torroni A., Huoponen K., Francalacci P., et al. Classification of European mtDNAs from an analysis of three European populations // Genetics. 1996. -V.144.-P. 1835-1850.

193. Torroni A., Bandelt H-J. Urbano D.L., and et al. MtDNA analisis reveals a major late paleolitic population expansion from Southwestern to Northeasen Europe // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V.62. - P. 1137-1152.

194. Torroni A. mtDNA haplogroups in human populations and disease studies // J. Cult. Heritage. 2000. - №1. - Sup.33-Sap.34.

195. Vergaud G., Mariat D., Apiou F., et al. The use of synthetic tandem repeats to isolate new VNTR loci: cloning of a human hypermutable seguence // Genomics.-1991.-V. 11.-P. 135-144.

196. Zielinska E., Nieewiarowski W., Bodarski G., Stanczyk A., Bolanovski W., Rebowski G. Arylamine N-acetytransferase (NAT2) gene mutation in152children with allergic diseases I I Clin. Pharmacol.Ther. -1997. Vol. 62. -№6.-P. 635-642.

197. Wallace D.C., Lott M.T., Huoponen K., Torroni A. Report of the committee on human mitochondrial DNA // Human gene mapping 1995: a compendium. Baltimore: John Hopkins University Press. - 1995. - P. 910-954.

198. Wang JS; Tseng HH; Shih DF; Jou HS; Ger LP.Expression of inducible nitric oxide synthase and apoptosis in human lupus nephritis // Nephron. 1997. -V.77. - № 4. - P. 404-11.

199. Yoshida K., Yamazaki H., Ozeki S. and et al. Role of mitochondrial DNA in radiation exposure // Radiat Med. 2000. - V. 18. - №2. - P. 87-91.

200. Yashin A.I., Benedicts G.D., Vaupel J.W., et al. Genes? Demography and life span: the contribution of demogdaphic data in genetic studies on aging and longevity // Am. J. Hum. Genet. 1999. - V. 65. - P. 1178-1193.

201. Yoshimura M., Yasue H., Nakayama M., et al. A missens Glu298Asp variant in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm in the Japanese // Hum. Genet. 1998. - V. 103. - P. 65-69.

202. Weinberg H., Nevo E., Korol A., et al. Molecular changes in the offspring of liquidators who emigrated to Israel from the Chernobyl disasret area // Environment. Health Perspect. 1997. -V. 105. - Sapp. 6. - P. 1479-1481.

203. Wilcox J.N., Subramanian R.R., Sundell C.L., Tracey W.R. et al. Expression of Multiple isoforms of nitric oxide synthase in normal and atherosclerotic vassels // Atheroscler. Thromb. Vase. Biol. -1997. V.17. - P.2479-2488.

204. Xu X., Kelsey K.T, Wiencke J.K., et al. Cytochrome P450 CYP1A1 Mspl polymorphism and cancer susceptibility // Cancer Epidemiol. Biomarkers and Prevent. 1996. - V. 5. - P. 687-692.153

205. Wu L.J., Randers-Pehrson G., Xu A., et al. Targeted cytoplasmic irradiation with alpha particles induces mutations in mammalian cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - V. 96. - P. 4959-4964.