Исследование жирнокислотного состава жира байкальской нерпы Phoca (PUSA) Sibirica Gmel и разработка новых путей его применения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Аверина, Елена Сергеевна

• Аверина, Елена Сергеевна
• кандидат химических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат химических наук Аверина, Елена Сергеевна

Список сокращений

Введение .?

1. Литературный обзор

1.1. Полиненасыщенные жирные кислоты: функции и свойства.

1.2. Жирные кислоты липидов трофической цепи Байкала.

1.2.1. Исследование жирнокислотного состава жира байкальской нерпы.

1.3. Сравнительный анализ жирнокислотного состава жира тюленей.

1.4. Сополимеризация жиров, содержащих ненасыщенные жирные кислоты.

1.5. Модифицированные олигоэфиры (алкиды).

1.6. Поверхностно-активные соединения.

1.6.1. Синтез полимерных суспензий с карбоксильными группами на поверхности частиц.

1.6.2. Полимерные суспензии для биологических исследований. Иммобилизация белков на поверхность полимерных частиц.

2. Обсуждение результатов

2.1. Исследование жира нерпы оз. Байкал.

2.1.1. Исследование жирнокислотного состава жира нерпы и проведение сравнительного анализа с f составом жиров морских тюленей.

• 2.1.2. Состав хлорорганических соединений в жире байкальской нерпы.

2.2. Исследование биологической активности жирных кислот жира байкальской нерпы.

2.2.1. Получение и исследование концентрата жирных » кислот жира байкальской нерпы, обогащенного полиненасыщенными кислотами.

2.2.2. Биологическая активность липосом на основе концентрата полиненасыщенных жирных кислот жира байкальской нерпы.

2.3. Синтез и исследование сополимеров на основе жира и жирных кислот жира байкальской нерпы.

2.4. Синтез и свойства эфиров полиэтиленгликолей и кислот жира байкальской нерпы.

2.5. Гетерофазная полимеризация стирола в присутствии жирных кислот, эфиров полиэтиленгликолей, сополимеров жира нерпы и жирных кислот жира с ММА.

2.6. Синтез и свойства олигоэфиров (алкидов) на основе жира байкальской нерпы.

3. Экспериментальная часть

3.1. Объекты исследования.

3.2. Материалы и методы.

3.2.1. Экстракция общих липидов.

3.2.2. Определение основных показателей состава и качества жира.

3.2.2.1. Определение йодного числа жира по Кауфману.

3.2.2.2. Определение перекисного числа.

3.2.2.3. Определение кислотного числа.

3.2.2.4. Определение числа омыления.

3.2.3. Анализ химического состава жира.

3.2.3.1. Приготовление сорбентов для тонкослойной хроматографии.

3.2.3.2. Приготовление пластинок для тонкослойной хроматографии.

3.2.3.3. Получение метиловых эфиров жирных кислот по методу Карро и Дубак.

3.2.3.4. Получение метиловых эфиров жирных кислот с применением 2 н. хлористого водорода в метиловом спирте.

3.2.3.5. Очистка метиловых эфиров жирных кислот.

3.2.3.6. Разделение метиловых эфиров жирных кислот по степени ненасыщенности.

3.2.3.7. Анализ метиловых эфиров жирных кислот.

3.2.3.8. Исследование фракционного состава жира байкальской нерпы.

3.2.4. Синтез соединений на основе жира байкальской нерпы.

3.2.4.1. Получение свободных жирных кислот.

3.2.4.2. Получение концентрата, обогащенного полиненасыщенными жирными кислотами.

3.2.4.3. Получение липосом.

3.2.4.4. Выделение и разделение ксантоновых соединений.

3.2.4.5. Определение содержания желчных кислот и холестерина в желчи.

3.2.4.6. Определение билирубина в желчи.

3.2.4.7. Сополимеризация метилметакрилата и жира байкальской нерпы.

3.2.4.8. Синтез сополимеров метилметакрилата и жирных кислот жира байкальской нерпы.

3.2.4.9. Синтез поверхностно-активных соединений на основе полиэтиленгликолей и миристиновой кислоты.

3.2.4.10. Синтез поверхностно-активных соединений на основе полиэтиленгликолей и хлорангидридов кислот жира байкальской нерпы.

3.2.4.11. Синтез модифицированных олигоэфиров алкидов) и пленок на их основе.

3.2.4.12. Физико-химические методы исследования свойств полученных полимеров и сополимеров.

3.2.4.13. Гетерофазная полимеризация стирола.

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование жирнокислотного состава жира байкальской нерпы Phoca (PUSA) Sibirica Gmel и разработка новых путей его применения»

Байкальская нерпа является замыкающим звеном в трофической цепи оз. Байкал, оказывает огромное влияние на функционирование экосистемы озера и служит индикатором не только рыбных запасов, но и биоценоза в целом, включая антропогенное воздействие. Важнейшими характеристиками физиолого-биохимической индикации состояния организмов и популяций при различных условиях обитания являются липидные показатели, в том числе жирнокислотный состав, отражающие степень благополучия как отдельных особей, так и популяций в целом. Для исследования путей формирования и выявления основных параметров, влияющих на жирнокислотный состав гидробионтов, актуален поиск новых подходов к исследованию состава липидов гидробионтов и методам интерпретации полученных данных.

Устойчивая тенденция к более широкому применению в практическом здравоохранении лекарственных препаратов и биологически активных добавок к пище на основе натурального сырья привлекает внимание к жирам рыб и морских млекопитающих, содержащих биологически активные полиненасыщенные жирные кислоты в том числе с 5 и 6 двойными связями, которых нет ни в животных жирах, ни в растительных маслах [1].

Жиры гидробионтов, как возобновляемые природные ресурсы, перспективны для производства новых защитных покрытий, смазок, уплотнителей, чернил, поверхностно-активных веществ [2].

На протяжении длительного времени ведется меховой промысел байкальской нерпы. Жир, составляющий половину массы туши, до сих пор практически не используется. Жир байкальской нерпы содержит большое количество биологически активных полиненасыщенных кислот, в том числе эссенциальных. Поэтому работа, направленная на исследование жирнокислотного состава и поиски новых путей применения жира байкальской нерпы в фармакологии и различных областях химии, актуальна. s

Цель работы: Исследование жира байкальской нерпы Phoca (Pusa) Sibirica Gmel и поиски новых путей его применения.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать жирнокислотный состав жира байкальской нерпы и голомянки - главной кормовой базы нерпы.

2. Выделить и исследовать концентрат жирных кислот жира байкальской нерпы, обогащенный полиненасыщенными жирными кислотами и разработать на его основе лекарственные препараты в липосомальной форме.

3. Найти пути практического применения жира байкальской нерпы: получить и исследовать свойства сополимеров, поверхностно-активных соединений и алкидов на основе жира и жирных кислот жира нерпы.

Научная новизна:

Исследование жирнокислотного состава жира байкальской нерпы послойно и проведение сравнительного анализа жирнокислотного состава жира байкальской нерпы и жира главной кормовой базы нерпы - голомянки, а также жирнокислотного состава жира близких морских родственников нерпы -кольчатого тюленя (Северное море) и различных морских рыб - кормовой базы кольчатого тюленя, с использованием многофакторного анализа принципиальных компонент - principle component analysis (PC-analysis), выявило систематические различия процентного содержания жирных кислот в исследованных объектах. Найденые различия для разных слоев подкожного жира исследованных тюленей больше, чем различия жирнокислотного состава, выявленные для разных видов. Полученные данные раскрывают уникальный состав жирных кислот жира байкальских тюленя и голомянки, который отличается от жирнокислотного состава жира морских тюленей и морских рыб.

Получен и исследован концентрат полиненасыщенных жирных кислот, выделенных из жира байкальской нерпы, который включает широкий спектр полиненасыщенных кислот, в том числе эссенциальных (линолевая

11,8±0,5%, линоленовая - 7,3±0,7%, арахидоновая - 6,2±0,6%, эйкозапентаеновая - 14,1+1,8%, докозагексаеновая - 23,7±4,0%).

Получены сополимеры метилметакрилата и триацилглицеринов ненасыщенных жирных кислот, а также свободных жирных кислот жира байкальской нерпы с использованием различных соотношений исходных мономеров, изучены их термические, термомеханические и поверхностно-активные свойства. В реакциях гетерофазной полимеризации стирола с использованием в качестве ПАВ синтезированных сополимеров получены полистирольные суспензии с узким распределением частиц по размерам, коэффициент полидисперсности у этих суспензий в основном не превышает значения 1,02.

Практическая ценность:

Липосомальные средства на основе концентрата полиненасыщенных жирных кислот, выделенного из жира байкальской нерпы, обладают иммуннобиологической и гепатозащитной активностью. Так, полученные препараты обладают иммунномоделирующим действием в отношении макрофагального и гуморального звеньев иммунного ответа на фоне введения в организм иммунодепресанта азатиоприна. Липосомы с включением природных ксантонов повышают скорость секреции желчи, экскрецию холестерина и выделение билирубина, стимулируют синтез желчных кислот.

Полистирольные суспензии с узким распределением частиц, полученные в присутствии жира байкальской нерпы, смеси жирных кислот жира нерпы, а также синтезированных сополимеров (жира и метилметакрилата, жирных кислот жира нерпы и метилметакрилата, диэфиров полиэтиленгликолей-600, -2000 и жирных кислот жира нерпы, моноэфиров метилполиэтиленгликолей

550, -1900 и жирных кислот жира нерпы) могут быть рекомендованы в качестве » носителей биолигандов в иммунохимических исследованиях.

Апробация работы: Результаты работы докладывались на научно-практической конференции "Проблемы охраны здоровья рыб в аквакультуре"

Москва, 2000 г.), Всероссийской научно-практической конференции и выставки с международным участием "Достижения науки и техники -развитию сибирских регионов" (Красноярск, 1999 г.), 1-ой и 2-ой международной конференции молодых ученых и студентов "Актуальные проблемы современной науки" (Самара, 2000, 2001 гг.), 1-ой и 2-ой школах-семинарах молодых ученых России "Проблемы устойчивого развития региона" (Улан-Удэ, 1999, 2001 гг.), всероссийской конференции с международным участием "Современные проблемы химии высокомолекулярных соединений: высокоэффективные и экологически безопасные процессы синтеза природных и синтетических полимеров и материалов на их основе" (Улан-Удэ, 2002 гг.), втором международном симпозиуме "Экологически эквивалентные и экзотические виды гидробионтов в великих и больших озерах мира" (Улан-Удэ, 2002 гг.).

Об актуальности работы свидетельствует поддержка данных исследований грантами:

1. "Проведение экспедиционных исследований эндемиков оз. Байкал как биоиндикаторов его экосистемы" (Федеральная целевая программа "Интеграция", 2001 г.).

2. "Научные исследования высшей школы по приоритетным направлениям науки и техники" (Федеральная научно-техническая программа, подпрограмма "Химия и химические продукты", код проекта 203.02.06.012).

3. "Разработка рекомендаций по использованию нетрадиционных индикаторов в практике государственного экологического контроля и мониторинга окружающей среды на основе анализа влияния загрязнений озера Байкал на состояние особо ценных биологических компонентов экосистем" (ФЦП "Экология и природные ресурсы России", подпрограмма "Охрана озера Байкал и Байкальской природной территории", 2002 г.). и

4. "Направленный поиск биологически активных соединений и разработка научных основ создания лекарственных препаратов" (Междисциплинарный интеграционный проект СО РАН, 2000 -2002 гг.).

5. "Проведение экспедиционных исследований эндемиков оз. Байкал" (Международный экспедиционный проект СО РАН, 2002 г.).

6. "Государственная поддержка интеграции высшего образования и фундаментальной науки " (ФЦП "Интеграция", "Использование потенциала ведущих научных центров страны для стажировки молодых исследователей, аспирантов и докторантов высших учебных заведений", 2001,2003 гг.).

7. "Поддержка совместных программ и проектов, а также научных и образовательных организаций по разработке и производству наукоемкой продукции, формированию совместных инновационных структур" (ФЦП "Интеграция", направление 1.3,2002,2003 гг.).

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Учитывая цели и задачи данной работы, изложенные во введении, целесообразно посвятить литературный обзор жирнокислотному составу липидов морской и пресноводной фауны, в том числе байкальской нерпы, а также синтезу и свойствам соединений на основе жиров гидробионтов.

Большое количество публикаций по изучению жиров гидробионтов [314] посвящены в основном исследованию этих жиров в целях изучения их питательной ценности, а также сравнительному анализу жирнокислотного состава в зависимости от вида, возраста, пола и условий окружающей среды.

Установлено [15], что состав липидов, в том числе состав жирных кислот, является одной из наиболее важных характеристик, отражающих здоровье популяции в различных условиях обитания. Широкий спектр свойств и функций жирных кислот, участие в процессах метаболизма, в том числе на клеточном уровне, позволяет отнести эти биологически активные вещества к регуляторам и индикаторам функционального состояния организма.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Аверина, Елена Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. Изучен жирнокислотный состав жира байкальской нерпы. Обнаружен широкий спектр кислот, из них на долю насыщенных приходится 1219%, мононенасыщенных - 46-63%, полиненасыщенных - 25-35% кислот. При изучении состава жирных кислот жира послойно найдены различия состава жирных кислот между внутренним и верхним слоями жира нерпы. Во внутреннем слое все насыщенные и полиненасыщенные кислоты находятся в более высоких концентрациях, в то время как мононенасыщенные кислоты представлены в малых количествах по сравнению с верхним слоем. Проведено сравнение жирнокислотного состава жира байкальской нерпы и основной кормовой базы нерпы -голомянки, а также жирнокислотного состава жира близких морских родственников нерпы — кольчатого тюленя (Северное море) и различных морских рыб - кормовой базы кольчатого тюленя с применением многофакторного анализа принципиальных компонент. Обнаруженные различия жирнокислотного состава жира изученных тюленей и рыб свидетельствуют об уникальном составе жирных кислот жира байкальской нерпы.

2. Получен концентрат жирных кислот жира байкальской нерпы, обогащенный полиненасыщенными кислотами. Исследование жирнокислотного состава выявило широкий спектр ненасыщенных жирных кислот, в том числе эссенциальных (линолевая - 11,8± 0.5%, линоленовая - 7,3±0.7%, арахидоновая - 6,2±0.6%, эйкозапентаеновая -14,1±1.8%, докозагексаеновая - 23.7±4.0%), что свидетельствует о высокой биологической активности полученного концентрата полиненасыщенных жирных кислот.

Разработаны липосомальные препараты на основе концентрата полиненасыщенных жирных кислот. В результате эксперимента установлено, что полученные препараты обладают иммунномодулирующим действием в отношении макрофагального и гуморального звеньев иммунного ответа. Липосомы с включением природных ксантонов обладают гепатопротекторными свойствами (повышают скорость секреции желчи, экскрецию холестерина и выделение билирубина, стимулируют синтез желчных кислот). Радикальной полимеризацией жира нерпы и его свободных жирных кислот с метилметакрилатом получены новые сополимеры. Проведено изучение строения и свойств различными методами (ЯМР-Н1-спектроскопия, ТГА, ТМА, 11IX, вискозиметрия), которое свидетельствует об образовании сополимеров.

Синтезированы эфиры полиэтиленгликолей, метилполиэтиленгликолей различных молекулярных масс и миристиновой кислоты, а также смеси свободных жирных кислот, состав которых подтвержден данными элементного анализа и ЯМР-Н'-сректроскипии. Исследование поверхностно-активных свойств (поверхностное натяжение, критическая концентрация мицелообразования) показало, что наиболее эффективными ПАВ являются моноэфиры метилполиэтиленгликоля-550 с миристиновой кислотой и жирными кислотами жира нерпы.

Методом гетерофазной полимеризации при использовании в качестве ПАВ полученных сополимеров и эфиров получены полистирольные суспензии с узким распределением частиц по размерам (коэффициент полидисперсности, в основном, не превышает 1,02), которые могут быть рекомендованы в качестве носителей биолигандов в иммуннохимических исследованиях.

Синтезированы сложные олигоэфиры на основе подсолнечного масла (пентафталевые алкидные смолы) с частичной заменой подсолнечного масла на жир нерпы, технологические параметры которых находятся в соответствии с ГОСТами, установленными для лакокрасочных материалов. Установлено, что замена подсолнечного масла на 20% и 50% жиром нерпы приводит к увеличению эластичности пленок и не снижает их водостойкость.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Аверина, Елена Сергеевна, 2003 год

1. Ржавская Ф.М. Жиры рыб и морских млекопитающих. М.: Наука, 1976.

2. Gruder Е.Н. (1967) In: М.Е. Stansby (Eds.) Fish oils: their chemistry, technology, stability, nutritional properties and uses. Connecticut: The AVI Publishing Company, pp. 3-30.

3. Kakela R., Hyvarinen H//Resent Res. Devel. In Lipids Res. 1997.1. P. 1-7.

4. Simopoulos A.P.//American J. Clin. Nutr. 1991. 54. P. 438-463.

5. Jangaard P. M., Ackman R.G., Burgher R.D.//Canadian J. of Biochem. and Phisiol. 1963. 41. P. 2543-2546.

6. Ackman R.G., Hooper S.N.//J. fisheries research board of Canada. 1974. 31. №3. P. 333-341.

7. Iverson S. J., Frost K.J., Lowry L.F.//Mar Ecol Prog Ser. 1997. 151. P. 255271.

8. Kakela R., Ackman R.G., Hyvarinen H.//Lipids. 1995. 30. P. 725-731.

9. Smith R.J., Hobson K.A., Koopman H.N., Lavigne D.M.//Canadian J. Fish Aquat. Sci. 1996. 53. P. 272-279.

10. Ackman R.G., Sebedio J-L, Kovacs M.I.P.//Marine Chem. 1980. 9. P. 157164.

11. Grahl-Nielsen O., Barnung T.N.//Marine Environ Res. 1985. 17. P. 218221.

12. Ackman R.G., Lamothe F. Marine mammals. In: R.G. Ackman (ed.) Marine biogenetic lipids, fats and oils II. CRC, Boca Raton. 1989. P. 179381.

13. Iverson S. J., Oftedal O.T., Bowen W.D., Boness D.J., Sampugna J.//J. Сотр. Physiol. 1995. В 165. P. 1-12.

14. Kovacs K.M., Lavigne D.M.//Canadian J. Zool. 1986. 64. P. 1937-1943.

15. Сидоров B.C. Экологическая биохимия рыб. Липиды. Л.: Наука, 1983.

16. Rezanka T//J. Of Chromatography. 1993. 636. Р.249-254.

17. Rezanka T.//J. Progr. Lipid Res. 1989.28. P.147-187.

18. Poulos A.//J. Progr. Lipid Res. 1989.28. P.35-51.

19. Кучеренко H.E., Васильев A.H. Липиды. Киев: Вища школа, 1985.

20. Справочник биохимика. М.: Наука, 1991.

21. Heron D.S., Shinitzky M.//J. Immunol. 1980. 125. P. 689-695.

22. Graber R., Sumida C., Nanez E.A.//J. Lipid Med. Cell Sign. 1994. 9. P. 91116.

23. Spector A.//Lipids. 1999. 34. P. S1-S3.

24. Mead J.F.//J. of Lipid Research. 1984.25. P. 1517-1521.

25. Jump D.B., Clarke S.D., Thelen A., Liimata M., Ren В., Badin R.//Prog. Lipid Res. 1996. 35. P. 227-241.

26. Hardy S.J., Ferrante A., Robinson B.S.//J. Neurochem. 1994. 62. P. 15461551.

27. Резвухин А.И., Березовская E.B. Омега-3 жирные кислоты в профилактике и лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Новосибирск: Издательство НГУ, 1997.

28. Бурлакова Е.Б. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М.: Наука, 1981.

29. Когтева Г.С., Безуглов В.В.//Биохимия. 1998. Т. 63. № 1. С. 6-15.

30. Morris R.J.//Proc. R. Soc. Lond. 1984. В 222. P. 51-78.

31. Ackman R.G., Tocher C.S. and McLachlan J.//J. Fish. Res. Can. 1968. 25. P. 1603-1620.

32. Chuecas L. and Riley J.P.//J. Mar. Biol. Ass UK. 1969. 49. P. 97-116.

33. Volkman J.K., Jeffrey S.W., Nichols P.D., Rogers G.I. and Garland C.D.//J. Exp. Marine Biol. Ecol. 1989. 128. P. 210-240.

34. Graeve M., Kattner G. and Piepenburg D.//Polar Biol. 1997. 18. P.53-61.

35. Viso A.-C., and Marty J.-C.//Phytochemistry. 1993. 34. № 6. P. 1521-1533.

36. Albers C.S., Kattner G. and Hagen W.//Marine Chemistry. 1996. 55. P. 347-358.

37. Гурин И.С., Ажгихин И.С. Биологически активные вещества гидробионтов. Москва: Наука. 1981.

38. Fahl К. and Kattner G.//Polar Biol. 13. P. 405-409.

39. Kozlova T.A., Khotimchenko S.V.//Comp. Biochem. Physiol. 1993.1. № 1. P. 97-103.

40. Kozlova T.A., Khotimchenko S.V.//Comp. Biochem. Physiol. 2000. 126B. P.477-485.

41. Watanabe T.//Comp. Biochem. Physiol. 1982.94 В. P.367-374.

42. Graber R., Sumida C., Nanez E.A.//J. Lipid Med. Cell Sign. 1994. 9. P. 91116.

43. Демченко А.И., Заварзина Г.А., Лаврентьева B.B., Усов А.А. Актуальные проблемы фармации. Новосибирск: Наука. 1982. С. 57-66.

44. Пестерева О.В. Теоретическое обоснование и практические рекомендации использования жира нерпы на пищевые цели. Улан-Удэ: ВСГТУ, 1995.

45. Ламажапова Г.П. Дисс. канд.биол.наук. Улан-Удэ: ВСГТУ. 2001.

46. Kakela R., Hyvarinen H.//J. Сотр. Biochem. Physiol. 1998. 120В. P. 231237.

47. Kakela R., Hyvarinen H.//J. Сотр. Biochem. Physiol. 1995. 112B. № 1. P. 71-81.

48. Hansen Y.S.//Trends Biochem. Sci. 1986. 11. P. 263-265.

49. Kakela R., Hyvarinen H., Vainiotalo P.//Comp. Biochem. Physiol. 1993. 105B. №3/4. P. 553-565.

50. Ackman R.G.//Comp. Biochem. Physiol. 1967. 22. P. 907-922.

51. Grahl-Nielsen 0.//Canadian J. Fish. Aquat. Sci. 1999. 56. P. 2219-2223.

52. Johnsen R.I., Grahl-Nielsen O., Roem A.//Aquaculture Nutrition. 2000. 6. P. 255-261.

53. Grahl-Nielsen O., Hammill M.O., Lydersen C., Wahlstrom S.//J. Сотр. Physiol. B. 2000. 170. P. 277-283.

54. Lund J.//Norwegian Whaling Gazette. 1934. 39. P. 89-96

55. Kakela R., Hyvarinen H., Vainiotalo P.//Comp Biochem Physiol. B. 1993. 105. P. 553-565

56. Fredheim В., Holen S., Ugland K.I., Grahl-Nielsen O. Fatty acid composition in blubber, heart and brain from phocid seals. In: Blix AS, Walloe L, Ulltang 0 (eds) in Whales, Seals,Fish and Man, Elsevier, Amsterdam, Holland, 1995. P. 153-168.

57. Olsen E. and Grahl-Nielsen О.// Marine Biology. 2003. 142. P. 13-24

58. Тютюнников Б.Н. Химия жиров. M.: Пищевая промышленность, 1974.

59. Сорокин М.Ф., Кочнова З.А., Шодэ Л.Г. Химия и технология пленкообразующих веществ. М.: Химия, 1989.

60. Gruder, Е.Н. In: Stansby М.Е. (Eds) Fish oil: their chemistry, tecnology, stability, nutritional properties and users. Connecticut: The AVI Publishing Company. 1967. P. 3-30.

61. Li F., Marks D.W., Larock, R.C., Otaigbe, J.U.//J. Polymer. 2000. 41. P. 7925-7939.

62. Li F., Larock R.C. and Otaigbe, J.U.//J. Polymer. 2000. 41. P. 4849-4862.

63. Могилевич Г.Е., Могилевич М.Н.//Ж. Лакокрасочные материалы и их применение. 1976. № 3. С. 36-38.

64. Яковлев А.Д. Химия и технология лакокрасочных покрытий. Л.: Химия, 1981.

65. Bao-tian Lu.//Paint and Coat. Ind. 1988. № 3. С. 9-12.

66. Vollmer J.-P.//J. Peint., pigm., vernis. 1970. 46. № 10. P. 1155-1165.

67. Americus. Coating update: alkyd resin technology. Pigm. And resin Technol. 1975. №4. P. 11.

68. Bhatt, H.A., Tagdivala, P.V.//J. Paintindia. 1970. 20. №4. P. 19-28.

69. Bhatt H.A., Tagdivala P.V.//J. Paintindia. 1970. 20. №7. P. 19-21.

70. Шинода К., Накагава Т., Тамамуси Б., Исемура Т. Коллоидные поверхностно-активные вещества. М.: Мир, 1966.

71. Chin-Ming Chen, Chun-Hsiung Lu, Chien-Hsiang Chang, Yu-Min Yang, Jer-Ru Maa.//Colloids and Surfaces. A: Physicochemical and Engineering Aspects. 2000. 170. P. 173-179.

72. Pei Kan, Zhi-Beng Chen, Rou-Yen Kung, Chau-Jen Lee, I-Ming Chu.//Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 1999. 15. P.l 17-125.

73. Chidambaram N., Burgess D. J.//AAPS Pharmsci. 2000. 2 (3). P. 1-11.

74. Schreier S., Malheiros S.V.P., Eneida de Paula.//Biochimica et Biophysica Acta. 2002. 1508. P. 210-234.

75. Berthod A., Tomer S., Dorsey J.G.//Talanta. 2001. 55. P. 69-83

76. Koynova R., Tenchov B.//Current opinion in Colloid and interface Science. 2001.6. P. 277-286

77. Шенфельд H. Поверхностно-активные вещества на основе оксида этилена. М.: Химия, 1982

78. Юрженко А.И., Колечкова М.А.//ДАН СССР. 1945.47. С. 348-356

79. Юрженко А.И., Гусяков В.П.//ДАН СССР. 1952. 86. С. 129-134.

80. Юрженко А.И.//ЖОХ. 1946. № 6. С 1172-1188.

81. Юрженко А.И., Минц С.М.//ДАН СССР. 1947. 55. С. 39-342.

82. Harkins W.D.//J. Am. Chem. Soc. 1947. 69. P. 1428-1444.

83. Harkins W.D.//J. Polymer Sci. 1950. 5. P. 217-251.

84. Ugelstad J., El-Aasser M.S., Vanderhoff J.W.//J. Polim. Sci. (Al). 1973. 11. №8. P. 503-513.

85. Никитина С.А. Дис. докт. хим. наук. Москва. 1970.

86. Грицкова И.А. Дис. докт. хим. наук. Москва. 1979.

87. Грицкова И.А., Седакова Л.И., Мурадян Д.С., Синекаев Б.М., Павлов А.В., Праведников А.И.//Докл. АН СССР. 1978. Т. 243. №2. С. 607-610

88. Shahar М., Meshylam Н., Margel S.//J. Appl. Polim. Sci. (A). 1986. 24. P. 203-208.

89. Hansen F.K., Ugelstad J.//J. Polim. Sci. (Al). 1979.17. № 10. P. 3069-3078.

90. Симакова Г.А., Каминский B.A., Грицкова И.А., Праведников. А.Н.//Докл. АН СССР. 1984. Т. 276. № 1.С. 151-153.

91. Хомиковский П.М.//Успехи химии. 1958. Т. 27. № 9. С. 1025-1055.

92. Emulsion Polimerization: Theoru and Practice. (Ed. by D.C. Blackley). London: Appl. Sci. Publ. 1975.

93. Wachtel R.E., LaMer V.R.//J. Colloid Interface Sci. 1962.17. P. 531-535.

94. Uniform Latex Particles. (Ed. L.B. Bang). Seradyn Inc., Indianapolis. 1984.

95. Hearn J., Wilkinson M.C., Goodall A.R.//Adv. Colloid Interface Sci. 1981.14. P. 173-176.

96. Muroi S., Hosoi K., Ishikawa T.//J. Appl. Polim. Sci. 1967. 11. P. 1963-1967.

97. Sakota K., Okaya T.//J. Appl. Polim. Sci. 1976. 20. P. 1235-1238.

98. Sakota K., Okaya T.//J. Appl. Polim. Sci. 1976.20. P. 2583-2585.

99. Okubo M., Kanaida K., Matsumoto T.//J. Appl. Polim. Sci. 1987. 33. P. 15111514.

100. Okubo M., Kanaida K.//Colloid Polim. Sci. 1987. 265. P. 246-250.

101. Gritskova L.A., Grzywa E.G.//Polymery. 1991. 36. P. 418-421.

102. Horak D., Straka J., Schneider В., Lednicky F.//J. Pilar. Polym. 1994. 35. P. 195-197.

103. Greene B.W., Sheetz D.P., Filer T.D.//J. Colloid Interface Sci. 1970. 32. P. 9093.104. Пат. 163091 Польша. 1994.

104. Грицкова И.А., Чирикова О.В., Щеголихина О.И., Жданов А.А.//ДАН. 1994.334. С. 57-61.

105. Yen S.P., Rembaum A., Molday R.W., Dreyer W. Emulsion Polym. 1976. 236. P. 127-129

106. Joensen H., Grahl-Nielsen 0.//Comp. Biochem. Physiol. 2001. В 129. P. 73-85.

107. Grahl-Nielsen O., Mjaavatten 0.//Marine Biology. 1991. 110. P. 59-64.В.Д

108. Пастухов 1993. Нерпа Байкала. Новосибирск: Наука.

109. Куценогий К.П., Киров Е.И., Кнорр И.Б. Пестициды в экосистемах: проблемы и перспективы. Аналит. Обзор. Новосибирск, 1994.

110. Kucklick J. R., Bidleman T. F., McConnell L. L., Walla M. D., Ivanov G. P.//Environ. Sci. Technol. 1994. 28. P. 31-37.

111. Kucklick J.R., Harvey H.R., Ostrom P.H., Ostrom N.E., Baker J.E.//Environ. Tox. and Chemistry. 15(8). P. 1388-1400.

112. Nakata H., Tanabe S., Tatsukawa R.//Enviromental pollution. 1997. 95. № l.P. 57-65.

113. Tarasova E.N., Mamontov A.A., Mamontova E.A., Klasneier J., McLachan M.S.//Chemosphere. 1997. 34. № 11. P. 2419-2427.

114. Грачев M.A. О современном состоянии экологической системы озера Байкал. Иркутск, 1999.

115. Kozlova T.A.//Fish. Physiol. Biochem. 1998. 19. P. 211-216.

116. Swern D.//Industrial and engineering chemistry. 1955. 47. № 2. P. 216-221.

117. Wanasundara U.N., Shahidi F.//J. Food Chemistry. 1999. 65. P. 41-49.

118. Збарский Б.И., Иванов И.И., Мардашаев C.P. Биологическая химия. М.: Медицина. 1972.

119. Барсуков Л.И.//Соровский образовательный журнал. 1998. №10. С. 2-9.

120. Грегориадис Г., Алмисон А. Липосомы в биологических системах. М.: Просвещение, 1983.

121. Каплун А.П., Ле Банг Шон, Краснопольский Ю.М., Швец В.Л.//Вопр. мед. химии. 1999. 1. С. 4-11.

122. Глызин В.И., Николаева Г.Г., Даргаева Т.Д. Природные ксантоны. Сибирское отделение: Наука, 1986.

123. Скакун Н.П., Олейник А.Н.//Фармакология и токсикология. 1967. 30. №3. С. 334-337.

124. Арутюнян Н.С., Аришева Е.А. Лабораторный практикум по химии жиров. М.: Пищевая промышленность, 1979.126. ГОСТ 5475-6986.127. ГОСТ 26593-85.

125. Васильева Н.В. Практические работы по органической химии. М.: Химия, 1987.

126. Svetashev V. I, Vaskovsky V. E.//J. Chromatogr. 1972. 67. №2. P. 376-378.

127. Carreau J. P., Dubacq J. P.//J. Chromatogr. 1978. 151. P. 384-390.

128. Stoffel W., Chu F., Ahrens E.H.//Anal. Chem. 1959. 31. P. 307-308.

129. Joensen H., Grahl-Nielsen 0.//Comp. Biochem. And Physiol. 2000. В 126. P. 69-79.

130. Васьковский В.Е.//Соросовский образовательный журнал. 1997. 3. С. 32-37.

131. Кейтс М. Техника липидологии. М: Мир, 1975.

132. Jamieson G. R.//J. Chromatogr. Sci. 1975.13. P. 491-497.

133. Flanzy J., Boudon M., Zeger C., Phihet J.//J. Chromatogr. Sci. 1976. 14. P. 17-24.

134. Биохимия Практикум для студентов университетов. Под ред. Астиани Н. М.:МГУ, 1989.

135. Bangham A.D., Home R.W.//J. Mol. Biol. 1964. 8. P. 660-668.

136. Николаева Г.Г., Глызин В.И., Младенцева М.С.//Химия Природных Соединений. 1983. 1. С. 107-108.

137. Мирошниченко В.П., Тромашевская Л.Л., Касаткина М.Г., Казачек Г.А.//Лабораторное дело. 1978. 3. С.149-153.

138. Саатов Т.С., Исаев Э.И., Бурханов С.А.//Вестник АМН СССР. 1990. 8. С.7-49.

139. Органикум. М.: Мир, 1992. Т. 2.

140. Васнёв В.А. Дисс. докт.хим. наук. М.: ИНЭОС РАН. 1975.

141. Вайсберг А., Проскауэр Э., Ридрик Дж., Тупс Э., Спутник химика. М.: Иностранная литература, 1976.145. ГОСТ 8420-74.146. ГОСТ 17823.1-72.147. ГОСТ 5233-67.

142. Методические разработки к практикуму по коллоидной химии. Под ред. А.В. Перцова и Н.М. Задымовой. М.: МГУ им. М.В. Ломоносова. Ч. 1.