Исследование возможности индукции экстратимической дифференцировки αβТ-лимфоцитов при беременности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат биологических наук Глебездина, Наталья Сергеевна

• Глебездина, Наталья Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Глебездина, Наталья Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Антигеннезависимая дифференцировка Т-лимфоцитов (тимическая дифференцировка)

1.1.1. Механизмы реаранжировки генов антигенного рецептора

1.1.2. Экстратимическая дифференцировка Т-лимфоцитов

1.2. Беременность как феномен естественной аллотрансплантации

1.2.1. Механизмы, обеспечивающие толерантность

1.2.2. Животные модели для изучения иммунологических механизмов при беременности на примере мышей

1.2.3. Экстратимическая дифференцировка Т-лимфоцитов

при беременности

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ НАЛИЧИЯ ПРОЦЕССОВ ЭКСТРАТИМИЧЕСКОЙ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ Т-КЛЕТОК ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

3.1. Экспрессия маркеров дифференцировки Т-клеток в центральных и периферических лимфоидных органах нелинейных животных

3.2. Экспрессия маркера реаранжировки генов TCR aßT-лимфоцитами центральных и периферических лимфоидных

органов линейных мышей

ГЛАВА 4. АНАЛИЗ РОЛИ МОЛЕКУЛЫ CD40 В ИНДУКЦИИ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАЗЫ aßT-ЛИМФОЦИТАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

4.1. Коэкспрессия CD40 и RAG-1 периферическими aßT-лимфоцитами беременных мышей и роль С040-зависимой стимуляции в индукции рекомбиназы в aßT-клетках in vitro

4.2. Анализ экспрессии 11А0-1 и СБ40 а^Т-лимфоцитами

периферической крови человека при беременности

ГЛАВА 5. РЕАКТИВНОСТЬ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ офТ-ЛИМФОЦИТОВ БЕРЕМЕННЫХ САМОК НА АНТИГЕНЫ

САМЦА

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ДН-тимоциты - дубль-негативные тимоциты

ДП-тимоциты - дубль-позитивные тимоциты

ЛУ - лимфатический узел

ОМ - онкостатин М

ПЦР - полимеразно-цепная реакция

ЦТЛ - цитотоксические Т-лимфоциты

ЭТС - эмбриональная телячья сыворотка

CD - молекулы дифференцировки лимфоидных клеток

GM-CSF - гранулоцит-макрофагальный колониестимулирующий фактор

HLA - главный комплекс гистосовместимости человека

Ig - иммуноглобулин

IEL - интраэпителиальные лимфоциты

IFNy - интерферон у

IL - интерлейкин

МНС - главный комплекс гистосовместимости

NK - естественные клетки киллеры

PGE - простагландин Е

RAG - гены, кодирующие рекомбиназы

TCR - Т-клеточный рецептор

TGF-ß - трансформирующий фактор роста ß

Th - Т-лимфоцит-хелпер

TNF - фактор некроза опухоли

Treg - регуляторные Т-клетки

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование возможности индукции экстратимической дифференцировки αβТ-лимфоцитов при беременности»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы.

Согласно традиционным представлениям, основные этапы созревания и дифференцировки а(ЗТ-лимфоцитов осуществляются в тимусе. В процессе тимического развития Т-клеточные предшественники формируют антигенспецифичный рецептор (Т Cell Receptor, TCR) и проходят процессы клональной селекции, обеспечивающие элиминацию аутореактивных клонов [12, 68]. В результате зрелые Т-лимфоциты, выходящие на периферию, способны эффективно выполнять функции иммунного надзора, а именно - распознавать и обеспечивать уничтожение чужеродных антигенов, не повреждая при этом собственных тканей.

Известно, что при некоторых физиологических и патологических состояниях, сопровождаемых атрофией тимуса, в организме активируется альтернативный путь дифференцировки - экстратимический, который затрагивает не только у5Т-лимфоциты, традиционно созревающие вне тимуса [154, 130], но и сфТ-клетки [155, 96]. Такой компенсаторный механизм имеет место при стрессе [169], аутоиммунных [166, 13] и некоторых инфекционных заболеваниях [100, 111], а также в случае возрастных изменений [140]. Логично предположить, что аналогичный механизм включается и при беременности, которая сопровождается существенной атрофией тимуса, выраженной в снижении его массы [151] и клеточности [151, 171], главным образом за счет атрофии коркового слоя и истощения популяции кортикальных тимоцитов [171]. На возможность активации экстратимического развития сфТ-клеток в этот период указывает и тот факт, что отдельные факторы, ассоциированные с беременностью, в частности, онкостатин M [32] или эстрогены в высокой

дозе [143], при экзогенном введении вызывают появление на периферии офТ-клеток с незрелым фенотипом (СВ4+СБ8+) [32] или с промежуточным уровнем экспрессии ТСЯ, указывающим на их экстратимическое происхождение [143].

Поскольку беременность, будучи феноменом естественной аллотрансплантации, требует наличия эффективных регуляторных механизмов для предупреждения возможных антифетальных иммунных реакций, и основная роль в этом процессе отводится локальному иммунитету, при исследовании экстратимического развития Т-лимфоцитов особый интерес представляла дифференцированная оценка этих процессов в зависимости от Т-клеточной локализации: в селезенке, периферической крови, лимфатических узлах, причем отдельно - в дренирующих матку и не дренирующих.

Цель работы: исследовать наличие процессов экстратимической дифференцировки арТ-лимфоцитов при беременности у мышей, а также возможные механизмы их активации.

В соответствии с этой целью в работе решались следующие задачи:

1. Оценить возможность активации процессов дифференцировки офТ-лимфоцитов в периферических лимфоидных органах и тканях при беременности у мышей.

2. Определить роль молекулы СБ40 в индукции экспрессии ключевого маркера дифференцировки Т-лимфоцитов, рекомбиназы ЯАО-1.

3. Сопоставить реактивность периферических офТ-лимфоцитов различной локализации беременных мышей в отношении антигенов самца.

Научная новизна работы.

Вопрос об активации экстратимического пути дифференцировки а{ЗТ-лимфоцитов при беременности до сих пор никем не рассматривался, поэтому все полученные результаты являются новыми. В частности, впервые на основе экспрессии ключевого фактора реаранжировки, рекомбиназы ЫАО-1, а также маркера незрелых Т-клеточных предшественников, суррогатной а-цепи ТСЯ, показана возможность активации процессов дифференцировки в периферических арТ-клетках беременных мышей, причем данный процесс прослежен в динамике беременности и при разных вариантах скрещивания. Впервые выявлено появление при беременности нетипичной популяции СБ40+Т-лимфоцитов. Впервые свойства и функции периферических Т-лимфоцитов беременных самок мышей, в том числе их реактивность в отношении аллоантигенов самца, исследованы дифференцированно для Т-клеток различной локализации - спленоцитов, лейкоцитов, клеток разных типов лимфатических узлов.

Теоретическая и практическая значимость работы.

В работе выявлен принципиально новый механизм регуляции иммунной системы при беременности, связанный с возможной индукцией альтернативного, экстратимического, пути дифференцировки арТ-лимфоцитов. С одной стороны, данный феномен может вносить вклад в формирование толерантности материнского организма к чужеродному для нее (полуаллогенному) плоду - в том случае, если речь идет о развитии регуляторных Т-клеток. С другой стороны, учитывая отсутствие на периферии условий для эффективной клональной селекции, экстратимическая дифференцировка может быть причиной развития

аутоиммунных патологий, которые часто провоцируются беременностью. Кроме того, согласно полученным данным, Т-лимфоциты лимфатических узлов, дренирующих матку, существенно отличаются по своим свойствам и функциям от Т-клеток других лимфатических узлов или селезенки, что указывает на необходимость новых, дифференцированных подходов к исследованию Т-клеточного звена при беременности.

Результаты работы изменяют существующие представления как о тимической дифференцировке, так и о механизмах формирования толерантности, в том числе при беременности, и найдут применение в биологии, а также в экспериментальной и практической медицине.

Положения, выносимые на защиту:

1. Физиологическая беременность сопровождается активацией экстратимической реаранжировки генов антигенного рецептора Т-лимфоцитов - ключевого события Т-клеточной дифференцировки, а также появлением на периферии незрелых Т-лимфоцитов, несущих суррогатную а-цепь ТСЯ. Данный процесс характерен, главным образом, для лимфатических узлов, дренирующих матку. Он выявляется, начиная с середины беременности, причем, как у нелинейных животных, так и у мышей линии СВАЯ при разных вариантах скрещивания, моделирующих нормальную аллогенную и нормальную сингенную беременности, а также в склонной к аборту комбинации.

2. Беременность у мышей ассоциирована с появлением в периферических лимфоидных органах Т-лимфоцитов, несущих на мембране нетипичную для них молекулу СБ40. Локализация СБ40-позитивной Т-клеточной субпопуляции аналогична локализации ключевого фактора и маркера реаранжировки генов ТСЯ, рекомбиназы

ИА0-1, т.е. ограничена в основном лимфатическими узлами, дренирующими матку, однако, непосредственного участия СВ40 в активации экспрессии рекомбиназы не выявлено.

3. Реактивность периферических сфТ-лимфоцитов беременных самок мышей в отношении аллоантигенов самца также зависит от их локализации: Т-лимфоциты лимфатических узлов, дренирующих матку, отвечают на спленоциты самца достоверно эффективнее Т-клеток лимфоузлов других типов.

Апробация работы и публикации.

Основные положения работы доложены, обсуждены и опубликованы на Региональной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Фундаментальные и прикладные исследования в биологии и экологии» (Пермь, 2006, 2007); 16 Европейском конгрессе по иммунологии (Париж, Франция, 2006); 2 Европейском конгрессе по иммунологии (Берлин, Германия, 2009); 12 Европейском конгрессе по иммунологии (Кобе, Япония, 2010); IV Всероссийской конференции «Иммунология репродукции» (Пермь, 2010); I Всероссийской с международным участием школы-конференции молодых ученых «Современные проблемы микробиологии, иммунологии и биотехнологии» (Пермь, 2011).

Основные результаты проведенных исследований представлены в 14 печатных работах, в том числе 3 статьях в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов диссертационных исследований.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 113 страницах машинописного текста,

содержит 11 таблиц и 13 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка цитируемой литературы, включающего 207 наименований, среди которых 12 отечественных и 195 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Глебездина, Наталья Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. У беременных самок мышей Swiss, начиная со второй половины беременности, в Т-лимфоцитах лимфатических узлов выявляется маркер незрелых тимических предшественников, а также ключевой фактор реаранжировки генов TCR, что свидетельствует об активации экстратимической дифференцировки Т-лимфоцитов; эти процессы идут преимущественно в дренирующих матку (парааортальных) лимфоузлах, но, в меньшей степени, и в не дренирующих (главным образом, в подмышечных).

2. Беременность у самок линии CBA/J сопровождается активацией экспрессии маркера реаранжировки генов TCR, основного события тимической дифференцировки, в офТ-лимфоцитах периферических лимфоидных органов, главным образом парааортальных лимфатических узлов; этот феномен регистрируется при разных вариантах скрещивания: CBA/J х BALB/c (нормальная аллогенная беременность), CBA/J х CBA/J (нормальная сингенная беременность) и CBA/J х DBA/2 (склонная к аборту комбинация).

3. У беременных самок мышей Swiss регистрируется необычная популяция СВ40-позитивных а|ЗТ-лимфоцитов, появление ее совпадает по времени (вторая половина беременности) и по локализации (лимфатические узлы, дренирующие матку) с активацией процессов реаранжировки в а(ЗТ-клетках.

4. Анализ наличия процессов реаранжировки в сфТ-лимфоцитах в зависимости от экспрессии на мембране CD40, а также их индукции при ответе на СБ40-зависимую активацию, указывает на отсутствие причинно-следственной связи между этими явлениями.

5. Пролиферативный ответ а(ЗТ-лимфоцитов беременных самок СВАЯ на спленоциты самца наиболее выражен при нормальной аллогенной беременности (СВАЯ х ВАЬВ/с), в меньшей степени при сингенной беременности (СВАЯ х СВАЯ), и не выявляется в склонной к аборту комбинации (СВАЯ х БВА/2); при этом клетки лимфатических узлов, дренирующих матку, отвечают на антигены самца достоверно эффективнее, чем лимфоциты других типов лимфатических узлов, что совпадает с локализацией процессов реаранжировки в офТ-лимфоцитах.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Физиологическая беременность вносит существенные коррективы в процессы антигеннезависимой дифференцировки Т-лимфоцитов. С одной стороны, она сопровождается временной инволюцией тимуса, выраженной в снижении его массы [151], клеточности [151, 171] и секреторной функции [171]. С другой стороны, в период беременности активизируются процессы экстратимической дифференцировки Т-клеток - возможно, как механизм компенсации частичного подавления тимического пути развития. По крайней мере, это убедительно показано для у5Т-лимфоцитов, развивающихся в децидуальной оболочке [154, 130].

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что и для а(ЗТ-лимфоцитов, традиционно дифференцирующихся в тимусе, такой путь развития при беременности весьма вероятен. Так, мы показали, что Т-лимфоциты периферических лимфоидных органов беременных мышей экспрессируют на уровне мРНК рекомбиназу ЯАО-1, ключевой фактор и маркер реаранжировки генов ТСЯ в клетке, причем наиболее четко и воспроизводимо этот эффект выявлялся в парааортальных лимфатических узлах, дренирующих матку. Данный феномен подтвердился и на уровне белка, в том числе в отношении преимущественной экспрессии рекомбиназы в парааортальных лимфоузлах.

Исследуя возможные механизмы индукции рекомбиназной активности в периферических Т-лимфоцитах при беременности, мы оценили роль СБ40-зависимого сигнала в этом процессе. Полученные данные подтвердили наше предположение об экспрессии частью Т-лимфоцитов при беременности нетипичной для них молекулы СБ40. Более того, характер распределения рекомбиназы в клетках различных лимфоидных органов был аналогичен таковому для RAG-1: СВ40-позитивные Т-лимфоциты выявлялись преимущественно в парааортальных ЛУ, дренирующих матку, и, в меньшей степени, в подмышечных. Тем не менее, анализ одновременной экспрессии Т-лимфоцитами рекомбиназы и CD40 не выявил связи между этими показателями: RAG-1 выявлялась как в CD40+ арТ-лимфоцитах, так и в традиционной, СБ40-негативной Т-клеточной субпопуляции. Кроме того, направленная СБ40-зависимая стимуляция сфТ-лимфоцитов in vitro не вызывала появления новых RAG-1 +-клеток в культуре. Тем не менее, тот факт, что обе молекулы выявляются главным образом в ЛУ, дренирующих матку, заслуживает пристального внимания. Он свидетельствует о том, что экспрессия указанных факторов имеет общую регуляцию и/или одинаковое биологическое значение.

Наличие при беременности процессов реаранжировки антигенного рецептора в Т-клетках ЛУ имеет как минимум два логичных объяснения. Первое заключается в том, что незрелые тимоциты под действием тех или иных факторов, ассоциированных с беременностью, мигрируют в периферические лимфоидные органы и там завершают свое развитие (рисунок 13). В пользу этого механизма говорит экспрессия в периферических Т-клетках pre-TCRa, которая в норме выявляется только в ранних тимических предшественниках [34]. рге-ТСИа тимоцитА/^АУ;: Ч^^^/ргс-ТС1*а гс-ТСИа завершение дифферендировки: миграция зрелых Т-клеток ревизия ТСЛ

Факторы, ассоциированные с беременностью , ОбМ, эстрогены - ?

Лимфатический узел

Рисунок 13 - Гипотетические механизмы появления мРНК ЫАС-1 и рге-ТСИа в популяции периферических Т-лимфоцитов при беременности.

Примечание: БИ - дуль-негативный тимоцит (СВ4ТЮ8~), БР - дубль-позитивный тимоцит (СБ4+С08+), Ъ\¥ - фактор, ингибирующий лейкемию, БР -синг-позитивный тимоцит (СБ4"ЧЛЖ или (СБ4ТЮ8+).

Второй механизм предполагает активацию недавно открытого процесса, известного как «ревизия антигенного рецептора», при котором в зрелых периферических Т-лимфоцитах повторно индуцируются процессы реаранжировки цепей антигенного рецептора, сопровождающиеся формированием ТСИ. с новой специфичностью [3]. Не исключено, что оба механизма вносят вклад в этот процесс. Что касается факторов, индуцирующих его, то эту роль могут играть уже упоминавшиеся ранее члены семейства интерлейкина 6 - ОМ [32] и/или фактор, ингибирующий лейкемию (Leukemia Inhibitory Factor, LIF) [168], а также эстрогены [143], способные при экзогенном введении [32, 143] или в случае трансгенной экспрессии [168] активировать процессы экстратимической дифференцировки арТ-клеток у мышей. Кроме того, согласно последним литературным данным, гемопоэтические и стромальные клетки ЛУ у ОМ-трансгенных животных способны презентировать тканеспецифичные антигены не менее эффективно, чем эпителий тимуса, обеспечивая тем самым клональную селекцию созревающих на периферии Т-лимфоцитов [30], то есть при ОМ-зависимой активации экстратимической дифференцировки ЛУ фактически могут брать на себя функции тимуса.

Обсуждая биологическое значение выявленного феномена, важно учитывать, что речь идет о беременности, которая, в силу экспрессии плодом чужеродных (отцовских) антигенов, предполагает включение сложных механизмов регуляции иммунной системы матери, предупреждающих реакции отторжения. Расшифровка этих механизмов на сегодняшний день не завершена. В этой связи особый интерес представляет выявленная в работе преимущественная активация процессов реаранжировки именно в лимфоузлах, дренирующих матку. Вероятнее всего, смысл такой активации заключается не просто в компенсации атрофических процессов, происходящих в этот период в тимусе, а в локальной коррекции антигенраспознающего репертуара Т-лимфоцитов, с учетом появления в организме новых антигенов - фетальных и плацентарных. Это предположение отчасти подтверждается данными по реактивности периферических Т-лимфоцитов беременных самок в отношении антигенов самца: пролиферативный ответ Т-клеток парааортальных ЛУ, в которых как раз и регистрируется преимущественно активация рекомбиназы, в наших экспериментах был заметно выше, чем у Т-лимфоцитов лимфоузлов других типов.

С одной стороны, индукция реаранжировки генов TCR на периферии может представлять собой новый, ранее неизвестный механизм формирования иммунной толерантности матери к плоду - в том случае, если такой реаранжировке подвергаются регуляторные клетки, реализующие в дальнейшем иммуносупрессивную активность, или же эффекторные Т-лимфоциты, которые под действием репродуктивных гормонов дифференцируются преимущественно в Th2 и продуцируют цитокины, оказывающие трофическое действие на плаценту. Это верно для нормальной аллогенной беременности, тогда как в комбинации CBA/J х DBA/2, имеющей дефект в активации дифференцировки Th2, аналогичный процесс будет проводить к появлению агрессивных Т-клеточных клонов, что возможно, и объясняет высокую частоту спонтанных абортов при данном варианте скрещивания. Для сингенной беременности экстратимическая реаранжировка может обеспечивать формирование клеток, усиливающих ответ на низкоиммуногенные структуры плода.

С другой стороны, такая реаранжировка на периферии может быть причиной активации аутоиммунных процессов в организме, которые часто провоцируются беременностью [4].

Выражаю благодарность д.мм., профессору C.B. Ширшеву за первоначальную идею о возможности активации при беременности альтернативного пути развития afiT-лимфоцитов, которая легла в основу данной работы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Глебездина, Наталья Сергеевна, 2012 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Колесников С.И. Генетико-физиологические взаимоотношения матери и плода / С.И. Колесников, Л.М. Морозова. Новосибирск: Наука. 1985. 184 с.

2. Куклина Е.М. Молекулярные механизмы дифференцировки тимоцитов // Онтогенез. 2003. Т. 34 (5). С. 342-357.

3. Куклина Е.М. Ревизия антигенного рецептора Т-лимфоцитов // Биохимия. 2006. Т. 71 (8). С. 1021-1033.

4. Куклина Е.М. Беременность и аутоиммунитет // Российский иммунологический журнал. 2010. Т. 4 (13). № 4. С. 352-356.

5. Куклина Е.М. Роль С040-зависимого сигнала в индукции экспрессии рекомбиназы RAG-1 в периферических Т-лимфоцитах пациентов с аутоиммунной формой диабета / Е.М. Куклина, О.Л. Горбунова, E.H. Смирнова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2011. Т. 152 (9). С. 306.

6. Мейсон Д. Лимфоциты: Методы / Д. Мейсон, Дж. Пенхейл, Дж. Седжуик; пер. с англ. А.Н. Маца и A.A. Фельдшеровой; под ред. А.Н. Маца. М.: Мир, 1990. С. 87-88.

7. Трунова Л.А. Иммунология репродукции. Новосибирск: Наука, 1984. 157 с.

8. Ширшев C.B. Механизмы иммунного контроля процессов репродукции. Екатеринбург: УрО РАН, 1999. 383 с.

9. Ширшев C.B. Механизмы иммуноэндокринного контроля процессов репродукции: в 2 тт.: т. 1. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. 430 с.

10. Ширшев C.B. Механизмы иммуноэндокринного контроля процессов репродукции: в 2 тт.: т. 2. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. 560 с.

11. Ширшев С.В. Иммунология материнско-фетальных взаимодействий. Екатеринбург: УрО РАН, 2009 г. 583 с.

12. Ярилин А.А. Структура тимуса и дифференцировка Т-лимфоцитов / А.А. Ярилин, В.Г. Пинчук, Ю.А. Гриневич. Киев: Наук.

думка, 1991.258 с.

13. Abo Т. Extrathymic pathways of T-cell differentiation and

immunomodulation // Int. Immunol. 2001. V. 1. P. 1261-1273.

14. Agosti V. Critical role for Kit-mediated Src kinase but not PI 3-kinase signaling in pro T and pro В cell development / V. Agosti, S. Corbacioglu, I. Ehlers, C. Waskow, G. Sommer, G. Berrozpe, H. Kissel, C.M. Tucker, K. Manova, M.A. Moore, H.R. Rodewald, P. Besmer // J. Exp. Med. 2004. V. 199 (6). P. 867-878.

15. Akamatsu Y. Distinct roles of RAG 1 and RAG2 in binding the V(D)J recombination signal sequences / Y. Akamatsu, M.A. Oettinge // Mol. Cell Biol. 1998. V. 18(8). P. 4670-4678.

16. Akashi K. Role of interleukin-7 in T-cell development from hematopoietic stem cells / K. Akashi, M. Kondo, I.L. Weissman // Immunol. Rev.

1998. У. 165. P. 13-28.

17. Ali M. Differential regulation of peripheral CD4+ T cell tolerance induced by deletion and TCR revision / M. АН, M. Weinreich, S. Balcaitis, С J. Cooper, P.J. Fink // J. Immunol. 2003. V. 171 (11). P. 6290-6296.

18. Allison J.P. The immunobiology of T cells with invariant gamma delta antigen receptors / J.P. Allison, W.L. Havran // Annu. Rev. Immunol. 1991. V. 9. P. 679-705.

19. Allman D. Thymopoiesis independent of common lymphoid progenitors / D. Allman, A. Sambandam, S. Kim, J.P. Miller, A. Pagan, D. Well, A. Meraz, A. Bhandoola//Nat. Immunol. 2003. V. 4 (2). P. 168-174.

20. Alizadeh M. Evidence for a polymorphism of HLA-G gene / M. Alizadeh, C. Legras, G. Semana//Hum. Immunol. 1993. V. 38. P. 206-212.

21. Antica M. Development of T lymphocytes at extrathymic sites / M. Antica, R. Scollay // J. Immunol. 1999. V. 163 (1). P. 206-211.

22. Ardavin C. Thymic dendritic cells and T cells develop simultaneously in the thymus from a common precursor population / C. Ardavin, L. Wu, C.L. Li, K. Shortman // Nature. 1993. V. 362 (6422). P. 761763.

23. Arsanow D.M. Selection is not required to produce invariant T-cell receptor gamma-gene junctional sequences / D.M. Arsanow, D. Cado, D.H. Raulet//Nature. 1993. V. 362 (6416). P. 158-160.

24. Bailin T. A RAG1 and RAG2 tetramer complex is active in cleavage in V(D)J recombination / T. Bailin, X. Mo, M.J. Sadofsky // Mol. Cell Biol. 1999. V. 19. P. 4664-4671.

25. Baker R.L. CD40 on NOD CD4 T cells contributes to their activation and pathogenicity / R.L. Baker, D.H. Wagner, K. Haskins // J. Autoimmun. 2008. V. 31. P. 385-392.

26. Bianchi D.W. Male fetal progenitor cells persist in maternal blood for as long as 27 years postpartum / D.W. Bianchi, G.K. Zickwolf, G.J. Weil, S. Sylvester, M.A. DeMaria // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 1996. V. 93 (2). P. 705-708.

27. Bigby M. Most gamma delta T cells develop normally in the absence of MHC class II molecules / M. Bigby, J.S. Markowitz, P.A. Bleicher, M.J. Grusby, S. Simha, M. Siebrecht, M. Wagner, C. Nagler-Anderson, L.H. Glimcher // J. Immunol. 1993. V. 151 (9). P. 4465-4475.

28. Bijlmakers M.J. Putting together an MHC class I molecule / M.J. Bijlmakers, H.L. Ploegh // Curr. Opin. Immunol. 1993. V. 5. P. 21-27.

29. Biais M.E. Do thymically and strictly extrathymically developing T cells generate similar immune responses? / M.E. Biais, G. Gérard, M.M. Martinic, G. Roy-Proulx, R.M. Zinkernagel, C. Perreault // Blood. 2004. V. 103 (8). P. 3102-3110.

30. Biais M.E. T-cell development: an extrathymic perspective / M.E. Biais, I. Louis, C. Perreault // Immunol. Rev. 2006. V. 209. P. 103-114.

31. Bobe P. Immunogenetic studies of spontaneous abortion in mice. III. Non-H-2 antigens and gestation / P. Bobe, N. Kiger // J. Immunogenet. 1989. V.16(3).P. 223-231.

32. Boileau C. Regulation of extrathymic T cell development and turnover by oncostatin M / C. Boileau, M. Houde, G. Dulude, C.H. Clegg, C. Perreault // J. Immunol. 2000. V. 164 (11). P. 5713-5720.

33. Bonneville M. Intestinal intraepithelial lymphocytes are a distinct set of gamma delta T cells / M. Bonneville, C.A.-Jr. Janeway, K. Ito, W. Haser, I. Ishida, N. Nakanishi, S. Tonegawa // Nature. 1988. V. 336 (6198). P. 479-481.

34. Bruno L., Rocha B., Rolink A., von Boehmer H., Rodewald H.R. // Eur. J. Immunol. 1995. V. 25. P. 1877-1882.

35. Bynoe M.S. T cells from epicutaneously immunized mice are prone to T cell receptor revision / M.S. Bynoe, C. Viret, R.A. Flavell, C.A.-Jr. Janeway // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. V. 102 (8). P. 2898-2903.

36. Castellucci M. The development of the human placental villous tree / M. Castellucci, M. Scheper, I. Sheffen // Anat. Embryol. 1990. V. 181. P. 117-123.

37. Chantakru S. A study on the density and distribution of uterine Natural Killer cells at mid pregnancy in mice genetically-ablated for CCR2, CCR 5 and the CCR5 receptor ligand, MIP-1 alpha / S. Chantakru, W.A. Kuziel, N. Maeda, B.A. Croy // J. Reprod. Immunol. 2001. V. 49 (1). P. 33-47.

38. Chapoval A.I. B7-H3: a costimulatory molecule for T cell activation

and IFN-gamma production / A.I. Chapoval, J. Ni, J.S. Lau, R.A. Wilcox, D.B. Flies, D. Liu, H. Dong, G.L. Sica, G. Zhu, K. Tamada, L. Chen // Nat. Immunol. 2001. V. 2 (3). P. 269-274.

39. Chaouat G. Vaccination against spontaneous abortion in mice / G. Chaouat, N. Kiger, T.G. Wegmann // J. Reprod. Immunol. 1983. V.5. P. 389392.

40. Chaouat G. Immunologic consequences of vaccination against abortion in mice / G. Chaouat, J.P. Kolb, N. Kiger, M. Stanislawski, T.G. Wegmann // J. Immunol. 1985. V.134 (3). P. 1594-1598.

41. Chaouat G. Genetic aspects of the CBA/JxDBA/2 and BlOxBlO. A models of murine spontaneous abortions and prevention by leucocyte immunisation / G. Chaouat, D.A. Clark, T.G. Wegmann // Early Pregnancy Loss: Mechanisms and Treatment / Eds. W.R. Allen, D.A. Clark, T.J.-III. Gill, J.F. Mowbray, W.R.L.Robertson. 1988. P. 89-102.

42. Chaouat G. Immunological manipulations in animal pregnancy and models of pregnancy failure / G. Chaouat, E. Menu, C. Bonneton, R. Kinsky // Curr. Opin Immunol. 1989. V. l.P. 1153-1156.

43. Chaouat G. IL-10 prevents naturally occurring fetal loss in the CBA x DBA/2 mating combination, and local defect in IL-10 production in this abortion-prone combination is corrected by in vivo injection of IFN-tau /G. Chaouat, A. Assal Meliani, J. Martal, R. Raghupathy, J.F. Elliott, T. Mosmann, T.G. Wegmann // J. Immunol. 1995. V. 154 (9). P. 4261-4268.

44. Chavez D.J. Allogeneic matings and immunization have different effects on nulliparous and muciparous mice / D.J. Chavez, J.A. Mclntyre, J.A. Colliver, W.P. Faulk // J. Immunol. 1987. V. 139 (1). P. 85-88.

45. Chen H.L. Tumor necrosis factor alpha mRNA and protein are present in human placental and uterine cells at early and late stadies of gestation

/H.L. Chen, Y.P. Yang, X.L.Hu//Am. J. Pathol. 1991. V. 139.P. 327-335.

46. Cher D.J. Two types of murine helper T cell clones. II. Delayed-type hypersensitivity is mediated by Thl clones / DJ. Cher, T.R. Mosmann // J. Immunol. 1987. V. 138. P. 3688-3694.

47. Chomczynski P. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction / P. Chomczynski, N. Sacchi // Anal. Biochem. 1987. V. 162. P. 156-159.

48. Chumbley G. In situ hybridization and Northern blot demonstration of HLA-G mRNA in human trophoblast populations by locus-specific oligonucleotide / G. Chumbley, A. King, N. Holmes, Y.W. Loke // Hum. Immunol. 1993. V. 37. P. 17-21.

49. Clark D.A. Impairment of graft versus host reaction in pregnant mice: II) selective suppression of cytotoxic cell generation correlates with soluble suppressor activity and with successful allogeneic pregnancy / D.A. Clark, M.R. McDermott, M.R. Szewczuk // Cell Immunol. 1980. V. 1980. P. 106-118.

50. Clark D.A. Active suppression of host-vs graft reaction in pregnant mice. IX. Soluble suppressor activity obtained from allopregnant mouse decidua that blocks the cytolytic effector response to IL-2 is related to transforming growth factor-beta / D.A. Clark, M. Falbo, R.B. Rowley, D. Banwatt, J. Stedronska-Clark // J. Immunol. 1988. V. 141 (11). P. 3833-3840.

51. Clark D.A. Murine pregnancy decidua produces a unique immunosuppressive molecule related to TGF (3-2 / D.A. Clark, K.C. Flanders, D. Banwatt // J. Immunol. 1990. V. 144. P. 3008-3015.

52. Clegg C.H. Regulation of an extrathymic T-cell development pathway by oncostatin M / C.H. Clegg, J.T. Rulffes, P.M. Wallace, H.S. Haugen // Nature. 1996. V. 384 (6606). P. 261-263.

53. Clegg C.H. Oncostatin M transforms lymphoid tissue function in transgenic mice by stimulating lymph node T-cell development and thymus autoantibody production / C.H. Clegg, H.S. Haugen, J.T. Rulffes, S.L. Friend, A.G. Farr // Exp. Hematol. 1999. V. 27 (4). P. 712-725.

54. Cobas M. Beta-catenin is dispensable for hematopoiesis and lymphopoiesis / M. Cobas, A. Wilson, B. Ernst, S.J. Mancini, H.R. MacDonald, R. Kemler, F. Radtke // J. Exp. Med. 2004. V. 199 (2). P. 221-229.

55. Cooper C.J. T cell receptor revision does not solely target recent thymic emigrants / C.J. Cooper, M.T. Orr, C.J. McMahan, P.J. Fink // J. Immunol. 2003. V. 171 (1). P. 226-233.

56. Corcoran L. The lymphoid past of mouse plasmacytoid cells and thymic dendritic cells / L. Corcoran, I. Ferrero, D. Vremec, K. Lucas, J. Waithman, M. O'Keeffe, L. Wu, A. Wilson, K. Shortman // J. Immunol. 2003. V. 170 (10). P. 4926-4932.

57. Croy B.A. Characterization of murine decidual natural killer (NK) cells and their relevance to the success of pregnancy / B.A. Croy, P. Gambel, J. Rossant, T.G. Wegmann // Cell Immunol. 1985. V. 93. P. 315-326.

58. Dang Y. Natural killer 1.1 (+) alpha beta T cells in the periimplantation uterus / Y. Dang, J. Beckers, C.R. Wang, K.D. Heyborne // Immunology. 2000. V.101 (4). P. 484-491.

59. De Fougerolles A.R. Modulation of the natural killer cell activity in pregnant mice alters the spontaneous abortion rate / A.R. De Fougerolles, M.G. Baines // J. Reprod. Immunol. 1987. V. 11. P. 146-154.

60. Desoye G. Lack of HLA class I and class II antigens on human preimplantation embryos / G. Desoye, G.A. Dohr, W. Motter, R. Winter, W. Urdl, H. Pusch, B. Uchanska-Ziegler, A. Ziegler // J. Immunol. 1988. V. 140 (12). P. 4157-4159.

61. Difilippantonio M.J. RAG1 mediates signal sequence recognition and recruitment of RAG2 in V(D)J recombination / M.J. Difilippantonio, C.J. McMahan, Q.M. Eastman, E. Spanopoulou, D.G. Schatz // Cell. 1996. V. 87 (2). P. 253-262.

62. Dong V.M. Transplantation tolerance: the concept and its applicability / V.M. Dong, K.L. Womer, M.H. Sayegh // Pediatr. Transplant. 1999. V. 3 (3). P. 181-192.

63. Donglas D.W. Trophoblast in the circulating blood during pregnancy / D.W. Donglas, Z. Thomas, M. Carr, et al. // J. Obstet. Gynecol. 1959. V. 78. P. 960-973.

64. Douglas G.C. Maternal-fetal transmission of human immunodeficiency virus: a review of possible roules and cellular mechanisms of infection / G.C. Douglas, B.F. King // Clin. Infect. Dis. 1992. V. 15. P. 678-683.

65. Ellis S.A. Evidence for a novel HLA antigen on human extravillous trophoblast and a choriocarcinoma cell line / S.A. Ellis, I.L. Sargent, C.W.G. Redman, A.J. McMichael // Immunology. 1986. V. 59. P. 595-601.

66. Ellis S.A. HLA-G at the interface // Am. J. Reprod. Immunol. 1990a. V. 23. P. 84-91.

67. Ellis S.A. Human trophoblast and a choriocarcinoma cell line Be Wo express a truncated HLA class I molecule / S.A. Ellis, M.S. Palmer, A.J. McMichael //J. Immunol. 1990b. V. 144. P. 731-740.

68. Fehling H.J. Early aßT cell development in the thymus of normal and genetically altered mice / H.J. Fehling, H. von Boehmer // Curr. Opin. Immunol. 1997. V. 9. P. 263- 275.

69. Fidel P.L.-Jr. T lymphocytes in the murine vaginal mucosa are phenotypically distinct from those in the periphery / P.L.-Jr. Fidel, N.A. Wolf, M.A. KuKuruga// Infect. Immun. 1996. V. 64 (9). P. 3793-3799.

70. Fidel P.L.-Jr. Analysis of vaginal cell populations during experimental vaginal candidiasis / P.L.-Jr. Fidel, W. Luo, C. Steele, J. Chabain, M. Baker, F.-Jr. Wormley//Infect. Immun. 1999. V. 67 (6). P. 3135-3140.

71. Fink P.J. Both intrathymic and peripheral selection modulate the differential expression of V beta 5 among CD4+ and CD8+ T cells / P.J. Fink, K. Swan, G. Turk, et al. // J. Exp. Med. 1992. V. 176 (6). P. 1733-1738.

72. Fink P.J. The induction of peripheral tolerance by the chronic activation and deletion of CD4+V beta 5+ cells / P.J. Fink, C.A. Fang, G.L. Turk // J. Immunol. 1994. V. 152 (9). P. 4270-4281.

73. Gendron R.L. Infiltrating decidual natural killer cells are associated with spontaneous abortion in mice / R.L. Gendron, M.G. Baines // Cell. Immunol. 1988. V. 113. P. 261-268.

74. Ghaleb M. Vaginal T lymphocyte population kinetics during experimental vaginal candidosis: evidence for a possible role of CD8+ T cells in protection against vaginal candidosis / M. Ghaleb, M. Hamad, K.H. Abu-Elteen // Clin. Exp. Immunol. 2003. V. 131 (1). P. 26-33.

75. Goeken N.E. Human suppressor cell induction in vitro: Preferential activation by class IMHC antigen // J. Immunol. 1984. V. 132. P. 2291-2299.

76. Goodman T.G. Expression of the y5 T-cell receptor on intestinal CD8+ intraepithelial lymphocytes / T.G. Goodman, L. Lefrancois // Nature. 1988. V. 333. P. 855-857.

77. Grewal I.S. CD40 and CD154 in cell-mediated immunity / I.S.Grewal, R.A. Flavell // Annu. Rev. Immunol. 1998. V. 16. P. 111-135.

78. Guy-Grand D. Gut intraepithelial lymphocyte development / D. Guyrand, P. Vassalli // Curr. Opin. Immunol. 2002. V. 14 (2). P. 255-259.

79. Haddad E.K. Early embryo loss is associated with local production of nitric oxide by decidual mononuclear cells / E.K. Haddad, A.J. Duclos,

M.G. Baines // J. Exp Med. 1995. V. 182 (4). P. 1143-1151.

80. Haddad E.K. Early embryo loss is associated with the prior expression of macrophage activation markers in the deciduas / E.K. Haddad, A.J. Duclos, W.S. Lapp, M.G. Baines // J. Immunol. 1997. V. 158 (10). P. 48864892.

81. Hagan P. Immunosuppressive activity of corticotrophin-releasing factor: inhibition of IL-1 and IL-6 production by human mononuclear cells / P. Hagan, S. Poole, A.F. Bristow//Biochem. 1992. V. 281. P. 251-257.

82. Hamad M. T cell precursors in the spleen give rise to complex T cell repertoires in the thymus and the intestine / M. Hamad, M. Whetsell, J.R. Klein // J. Immunol. 1995. V. 155 (6). P. 2866-2876.

83. Hamad M. T cell progenitors in the murine small intestine / M. Hamad, M. Whetsell, J. Wang, J.R. Klein // Dev. Comp. Immunol. 1997. V. 21 (5). P. 435442.

84. Hamad M. The case for extrathymic development of vaginal T lymphocytes // J. Reprod. Immunol. 2008. V. 77(2). P. 109-116.

85. Harman B.C. Microenvironmental regulation of Notch signalling in T cell development / B.C. Harman, E.J. Jenkinson, G. Anderson // Semin. Immunol. 2003. V. 15 (2). P. 91-97.

86. Hayakawa S. Expression of recombinase-activating genes (RAG-1 and 2) in human decidual mononuclear cells / S. Hayakawa, S. Saito, N. Nemoto, F. Chishima, et al. // J. Immunol. 1994. V. 153 (11). P. 4934-4939.

87. Herrera N.E. Analysis of specific immunoglobulin-secreting cells in dose proximity to the mid gestation mouse embryo: their potential role in fetal survival / N.E. Herrera, D.W. Dresser // Eur. Fed. Immunol. Soc. Helsenki. 1991. P. 17.

88. Heyborne K.D. Characterization of gamma delta T lymphocytes at the

maternal-fetal interface / K.D. Heyborne, R.L. Cranfill, S.R. Carding, W.K. Born, R.L. O'Brien // J. Immunol. 1992 V. 149 (9). P. 2872-2878.

89. Heyborne K.D. Recognition of trophoblasts by gamma delta T cells / K.D. Heyborne, Y.X. Fu, A. Nelson, A. Farr, R.L. O'Brien, W. Born // J. Immunol. 1994. V. 153 (7). P. 2918-2926.

90. Hikida M. Reexpression of RAG-1 and RAG-2 genes in activated mature mouse B cells / M. Hikida, M. Mori, T. Takai, K.I. Tomochika, K. Hamatani, H. Ohmori // Science. 1996. V. 274 (5295). P. 2092-2094.

91. Holland O.J. Minor histocompatibility antigens are expressed in syncytiotrophoblast and trophoblast debris: implications for maternal alloreactivity to the fetus / O.J. Holland, C. Linscheid, H.C. Hodes, T.L. Nauser, et al. // Am. J. Pathol. 2012. V. 180 (1). P. 256-266.

92. Hoskin D.W. Specific maternal anti-fetal lymphoproliferative responses and their regulation by natural immunosuppressive factors / D.W. Hoskin, R.A. Murgita // Clin Exp Immunol. 1989. V. 76 (2). P. 262-267.

93. Huang C.Y. Superantigen-induced TCR alpha locus secondary rearrangement: role in tolerance induction / C.Y. Huang, R. Golub, G.E. Wu, O. Kanagawa // J. Immunol. 2002. V. 168 (7). P. 3259-3265.

94. Hunt J.S. Analysis of the expression and immunostimulatory capacity of class I major histocompatibility antigens on rat trophoblast cell lines / J.S. Hunt, Y. Yang, D. Wheaton, H.W. Kunz, T.J. Gill // Am. J. Reprod. Immunol. 1991. V. 26 (3). P. 129-135.

95. Hunt J.S. Immunobiology of pregnancy // Curr. Opin. Immunol. 1992. V. 4. P. 591-596.

96. Ibraghimov A.R. Resident CD4+ alpha beta T cells of the murine female genital tract: a phenotypically distinct T cell lineage that rapidly proliferates in response to systemic T cell activation stimuli / A.R. Ibraghimov,

R.E. Sacco, M Sandor, L.Z. Iakoubov, R.G Lynch // Int. Immunol. 1995. V. 7 (11). P. 1763-1769.

97. Iezzi G. CD40-CD40L cross-talk integrates strong antigenic signals and microbial stimuli to induce development of IL-17-producing CD4+ T cells / G. Iezzi, I. Sonderegger, F. Ampenberger, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009. V. 106. P. 876-881.

98. Itohara S. Homing of a yb thymocyte subset wich homogeneous T-cell receptors to mucosal epithelia / S. Itohara, A.G. Farr, J.J. Laffaille // Science. 1990. V. 343. P. 754-757.

99. Johansson M. A unique population of extrathymically derived alpha beta TCR+CD4"CD8" T cells with regulatory functions dominates the mouse female genital tract / M. Johansson, N. Lycke // J. Immunol. 2003. V. 170 (4). P. 16591666.

100. Kadena T. TCR alpha beta+CD4"CD8"T cells differentiate extrathymically in an lck-independent manner and participate in early response against Listeria monocytogenes infection through interferon-gamma production /T. Kadena, G. Matsuzaki, S. Fujise, K. Kishihara, et al. // Immunology. 1997. V. 91 (4). P. 511-519.

101. Kajii T. XY and XX complete moles: clinical and morphologic correlations / T. Kajii, H. Kurashige, K. Ohama, F. Uchino // Am. J. Obstet. Gynecol. 1984. V. 150 (1). P. 57-64.

102. Kanamori Y. Identification of novel lymphoid tissues in murine intestinal mucosa where clusters of c-kit+ IL-7R+ Thyl+ lympho-hemopoietic progenitors develop / Y. Kanamori, K. Ishimaru, M. Nanno, K. Maki, et al. // J. Exp. Med. 1996. V. 184 (4). P. 1449-1459.

103. Kane L.P. Signal transduction by the TCR for antigen / L.P. Kane, J. Lin, A. Weiss // Curr. Opin. Immunol. 2000. V. 12 (3). P. 242-249.

104. Kaplan C. The placenta and viral infections // Clin. Obstet. Gynecol. 1990. V. 33. P. 232-233.

105. Kawachi Y. Self-reactive T cell clones in a restricted population of interleukin-2 receptor beta+ cells expressing intermediate levels of the T cell receptor in the liver and other immune organs / Y. Kawachi, H. Watanabe, T. Moroda, M. Haga, et al. // Eur. J. Immunol. 1995. V. 25 (8). P. 2272-2278.

106. Kiger N. Immunogenetic studies of spontaneous abortion in mice: I. Preimmunisation of the mother with allogeneic spleen cells / N. Kiger, G. Chaouat, J.P. Kolb // J. Immunol. 1985. V. 134. P. 2966-2972.

107. Kimura M. Synchronous expansion of intermediate TCR cells in the liver and uterus during pregnancy / M. Kimura, H. Hanawa, H. Watanabe, M. Ogawa // Cell Immunol. 1995. V. 162 (1). P. 16-25.

108. Klein J.R. Phenotypic and functional characteristics of intraepithelial lymphocytes / J.R. Klein, R.L. Mosley // Kiyono H., McGhee J.R. (Eds.), Mucosal Immunology: Intraepithelial Lymphocytes. Raven Press, New York, NY. 1994. P. 33.

109. Kondo M. Identification of clonogenic common lymphoid progenitors in mouse bone marrow / M. Kondo, I.L. Weissman, K. Akashi // Cell. 1997. V. 91 (5). P. 661-672.

110. Lala P.K. Interruption of murine pregnancy by activation of antigen-nonspecific killer cells in the endometrium with indomethacin, high dose IL-2 or a combination //Res. Immunol. 1990. V. 141. P. 159-164.

111. Lamontagne L. Mouse hepatitis viral infection induces an extrathymic differentiation of the specific intrahepatic alpha beta-TCRintermediate LFA-lhigh T-cell population / L. Lamontagne, E. Massicotte, C. Page // Immunology. 1997. V. 90 (3). P. 402-411.

112. Lantelme E. Cutting edge: recombinase-activating gene expression

and V(D)J recombination in CD4+CD31ow mature T lymphocytes / E. Lantelme, B. Palermo, L. Granziero, S. Mantovani, et al. // J. Immunol. 2000. V. 164 (7). P. 3455-3459.

113. Lea R.G. Tumor necrosis factor-alpha mRNA-positive cells in spontaneous resorption in rodents / R.G. Lea, S. Mclntyre, J.D. Baird, D.A. Clark // Am. J. Reprod. Immunol. 1998 V. 39 (1). P. 50-57.

114. Lewis S.M. The mechanism of V(D)J joining: lessons from molecular, immunological, and comparative analyses // Adv. Immunol. 1994. V. 56. P. 27-150.

115. Li D.J. Comparative study of the third party and paternal leukocyte immunization in recurrent spontaneous abortion of lowered maternal-fetal immune-recognition / D.J. Li, C.J. Li, Y. Zhu, M.Y. Wang, et al. // Chin. J. Obstet. Gynecol. 1998. V.3. P. 597.

116. Lin W.C. Cell cycle regulation of V(D)J recombination-activating protein RAG-2 / W.C. Lin, S. Desiderio // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1994. V. 91. P. 2733-2737.

117. Lin Y. Murine CD45+CD86+ cells isolated from para-aortic lymph nodes in an abortionprone -prone model / Y. Lin, Y. Zeng, J. Zhao, S. Zeng, et al. // J. Reprod Immunol. 2004. V. 64 (1-2). P. 133-143.

118. Lindberg R.A. Cloning and characterization of a specific receptor for mouse oncostatin M / R.A. Lindberg, T.S. Juan, A.A. Welcher, Y. Sun, et al. //Mol. Cell. Biol. 1998. V. 18 (6). P. 3357-3367.

119. Louis I. Changes in the lymph node microenvironment induced by oncostatin M /1. Louis, G. Dulude, S. Corneau, S. Brochu, et al. // Blood. 2003. V.102 (4). P. 1397-1404.

120. McMahan C.J. RAG reexpression and DNA recombination at T cell receptor loci in peripheral CD4+ T cells / C.J. McMahan, P.J. Fink // Immunity.

1998. V. 9 (5). P. 637-647.

121. McMahan C.J. Receptor revision in peripheral T cells creates a diverse V beta repertoire / C.J. McMahan, P.J. Fink // J. Immunol. 2000. V. 165 (12). P. 6902-6907.

122. Malik N. Developmental abnormalities in mice transgenic for bovine oncostatin M / N. Malik, H.S. Haugen, B. Modrell, M. Shoyab, C.H. Clegg // Mol. Cell. Biol. 1995. V. 15 (5). P. 2349-2358.

123. Martin C.H. Efficient thymic immigration of B220+ lymphoid-restricted bone marrow cells with T precursor potential / C.H. Martin, I. Aifantis, M.L. Scimone, U.H. von Andrian, et al. // Nat. Immunol. 2003. V. 4 (9). P. 866-873.

124. Maruyama S. Quick recovery in the generation of self-reactive CD41ow natural killer (NK) T cells by an alternative intrathymic pathway when restored from acute thymic atrophy / S. Maruyama, A. Tsukahara, S. Suzuki, T. Tada, et al. // Clin. Exp. Immunol. 1999. V. 117(3). P. 587-595.

125. Menu E. Immunoactive products of human placenta. II. Direct inhibition of non-MHC restricted cytolytic activity of human CD3 alpha-beta but not CD3 gamma-delta expressing T cell clones / E. Menu, V. David, A. Bensussan, G. Chaouat // J. Reprod. Immunol. 1989. V. 16. P. 137-150.

126. Miller C.J. Langerhans cells, macrophages and lymphocyte subsets in the cervix and vagina of rhesus macaques / C.J. Miller, M. McChesney, P.F. Moore // Lab. Invest. 1992. V. 67 (5). P. 628-634.

127. Miller R.A. The aging immune system: primer and prospectus // Science. 1996. V. 273 (5271). P. 70-74.

128. Minagawa M. Mechanisms underlying immunologic states during pregnancy: possible association of the sympathetic nervous system / M. Minagawa, J. Narita, T. Tada, S. Maruyama, et al. // Cell. Immunol. 1999.

V. 196(1). P. 1-13.

129. Mincheva-Nilsson L. Human decidual leukocytes from early pregnancy contain high numbers of gamma delta+ cells and show selective down-regulation of alloreactivity / L. Mincheva-Nilsson, S. Hammarstrom, M.L. Hammarstrom // J. Immunol. 1992. V. 149 (6). P. 2203-2211.

130. Mincheva-Nilsson L. Gamma delta T cells of human early pregnancy decidua: evidence for local proliferation, phenotypic heterogeneity, and extrathymic differentiation / L. Mincheva-Nilsson, M. Kling, S. Hammarstrem, O. Nagaeva, et al. // J. Immunol. 1997. V. 159. P. 3266-3277.

131. Mombaerts P. RAG-1-deficient mice have no mature B and T lymphocytes / P. Mombaerts, J. Iacomini, R.S. Johnson, K. Herrup, et al. // Cell. 1992. V. 68 (5). P. 869-877.

132. Monroe R.J. Alt F.W. RAG2:GFP knockin mice reveal novel aspects of RAG2 expression in primary and peripheral lymphoid tissues / R.J. Monroe, K.J. Seidl, F. Gaertner, S.Han, et al. // Immunity. 1999. V. 11 (2). P. 201-212.

133. Moroda T. Self-reactive forbidden clones are confined to pathways of intermediate T-cell receptor cell differentiation even under immunosuppressive conditions / T. Moroda, Y. Kawachi, T. Iiai, A. Tsukahara, et al. // Immunology. 1997. V. 91 (1). P. 88-94.

134. Mosmann T.R. Thl and Th2 cells: different patterns of lymphokine secretion lead to different functional properties / T.R. Mosmann, R.L. Coffman //Annu. Rev. Immunol. 1989. V. 7. P. 145-151.

135. Nandi D. Phenotypic analysis and gamma delta-T cell receptor repertoire of murine T cells associated with the vaginal epithelium / D. Nandi, J.P. Allison // J. Immunol. 1991. V. 147 (6). P. 1773-1778.

136. Narita J. Differentiation of forbidden T cell clones and granulocytes

in the parenchymal space of the liver in mice treated with estrogen / J. Narita, C. Miyaji, H. Watanabe, S. Honda, et al. // Cell Immunol. 1998. V. 185(1). P. 113.

137. O'Donoghue K. Microchimerism in female bone marrow and bone decades after fetal mesenchymal stem-cell trafficking in pregnancy / K. O'Donoghue, J. Chan, J. de la Fuente, N. Kennea, et al. // Lancet. 2004. V.364 (9429). P. 179-182.

138. Oettinger M.A. RAG-1 and RAG-2, adjacent genes that synergistically activate V(D)J recombination / M.A. Oettinger, D.G. Schatz, C. Gorka., D. Baltimore // Science. 1990. V. 248. P. 1517-1523.

139. Ogata I. Oncostatin M is produced during pregnancy by decidual cells and stimulates the release of HCG / I. Ogata, K. Shimoya, A. Moriyama, Y. Shiki, et al. // Mol Hum Reprod. 2000. V. 6(8). P. 750-757

140. Ohteki T. Age-dependent increase of extrathymic T cells in the liver and their appearance in the periphery of older mice / T. Ohteki, Okuyama R., S. Seki, T. Abo, et al. // J. Immunol. 1992. V. 149 (5). P. 1562-1570.

141. Ohteki T. Expression of the CD28 costimulatory molecule on subsets of murine intestinal intraepithelial lymphocytes correlates with lineage and responsiveness / T. Ohteki, H.R. MacDonald // Eur. J. Immunol. 1993. V. 23 (6). P. 1251-1255.

142. Ohtsuka K. A similar expression pattern of adhesion molecules between intermediate TCR cells in the liver and intraepithelial lymphocytes in the intestine / K. Ohtsuka, K. Hasegawa, K. Sato, K. Arai, et al. // Microbiol. Immunol. 1994. V. 38 (8). P. 677-683.

143. Okuyama R. Estrogen administration activates extrathymic T cell differentiation in the liver / R. Okuyama, T. Abo, S. Seki, T. Ohteki, et al. // J. Exp. Med. 1992. V. 175 (3). P. 661-669.

144. Panja A. CD 16 is involved in T cell-intestinal epithelial cell interactions / A. Panja, R.S. Blumberg, S.P. Balk, L. Mayer // J. Exp. Med. 1993. V. 178. P. 1115-1119.

145. Park S.Y. Differential contribution of the FcR gamma chain to the surface expression of the T cell receptor among T cells localized in epithelia: analysis of FcR gamma-deficient mice / S.Y. Park, H. Arase, K. Wakizaka, N. Hirayama, et al. // Eur. J. Immunol. 1995. V. 25 (7). P. 2107-2110.

146. Peters M. Interleukin-6 and soluble interleukin-6 receptor: direct stimulation of gpl30 and hematopoiesis / M. Peters, A.M. Miiller, S. Rose-John // Blood. 1998. V. 92 (10). P. 3495-3504.

147. Petroff M.G. Fetal antigens-identity, origins, and influences on the maternal immune system // Placenta. 2011. V. 32. P. 176-181.

148. Radtke F. Notch regulation of lymphocyte development and function / F. Radtke, A. Wilson, S.J. Mancini, H.R. MacDonald // Nat. Immunol. 2004. V. 5 (3). P. 247-253.

149. Rakasz E. Gamma delta T cells of the murine vagina: T cell response in vivo in the absence of the expression of CD2 and CD28 molecules /E. Rakasz, M. Hagen, M. Sandor, R.G. Lynch // Int. Immunol. 1997. V. 9 (1). P. 161-167.

150. Ramsden D.A. Cell-free V(D)J recombination / D.A. Ramsden, T.T. Paull, M. Gellert//Nature. 1997. V. 388. P. 488-491.

151. Rijhsinghani A.G. Effect of pregnancy on thymic T cell development / A.G. Rijhsinghani, S.K. Bhatia, L.T. Tygrett, T.J. Waldschmidt // Am. J Reprod. Immunol. 1996. V. 35 (6). P. 523-528.

152. Robertson S.A. Uterine epithelial cells synthesize granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin-6 in pregnant and nonpregnant mice / S.A. Robertson, G. Mayrhofer, R.F. Seamark // Biol. Reprod.

1992. V. 46. P. 1069-1079.

153. Robertson S.A. Seminal plasma and male factor signalling in the female reproductive tract // Cell Tissue Res. 2005. V. 322 (1). P. 43-52.

154. Robey E.A. The alpha beta versus gamma delta T-cell lineage choice / E.A. Robey, B.J. Fowlkes // Curr. Opin. Immunol. 1998. V. 10. P. 181— 187.

155. Rocha B. Extrathymic T cell differentiation / B. Rocha, D. GuyGrand, P. Vassalli // Curr. Opin. Immunol. 1995. V. 7 (2). P. 235-242.

156. Sanders S.K. Cell-cell adhesion mediated by CD8 and human histocompatibility leukocyte antigen G, a nonclassical major histocompatibility complex class I molecule on cytotrophoblasts / S.K. Sanders, P.A. Giblin, P. Kavathas // J. Exp. Med. 1991. V. 174. P. 737-742.

157. Sano M. Existence of suppressor cells in the spleen of allogeneic and syngeneic primiparous pregnant mice / M. Sano, S. Miake, Y. Yoshikai, K. Nomoto // J. Reprod. Immunol. 1984. V. 6. P. 239-246.

158. Sargent I.L. Immunoregulation in normal pregnancy and preeclampsia: an overview / I.L. Sargent, A.M. Borzychowski, C.W. Redman // Reprod. Biomed Online. 2006. V. 13 (5). P. 680-686.

159. Sasaki Y. Decidual and peripheral blood CD4+CD25+ regulatory T cells in early pregnancy subjects and spontaneous abortion cases / Y. Sasaki, M. Sakai, S. Miyazaki, S. Higuma, et al. // Mol Hum Reprod. 2004. V. 10 (5). P/ 347-353.

160. Sato N. Maintenance of pluripotency in human and mouse embryonic stem cells through activation of Wnt signaling by a pharmacological GSK-3-specific inhibitor / N. Sato, L. Meijer, L. Skaltsounis, P. Greengard, A.H. Brivanlou // Nat. Med. 2004. V. 10 (1). P. 55-63.

161. Schatz D.G. The V(D)J recombination activating gene, RAG-1 /

D.G. Schatz, M.A. Oettinger, D. Baltimore // Cell. 1989. V. 59. P. 1035-1048.

162. Scherer M.T. The use of mammary tumor virus (Mtv)-negative and single-Mtv mice to evaluate the effects of endogenous viral superantigens on the T cell repertoire / M.T. Scherer, L. Ignatowicz, A. Pullen, J. Kappler, P. Marrack // J. Exp. Med. 1995. V. 182 (5). P. 1493-1504.

163. Schmitt T.M. Induction of T cell development from hematopoietic progenitor cells by delta-like-1 in vitro / T.M. Schmitt, J.C. Zúñiga-Pflücker // Immunity. 2002. V. 17 (6). P. 749-756.

164. Schmitt T.M. Induction of T cell development and establishment of T cell competence from embryonic stem cells differentiated in vitro / T.M. Schmitt, R.F. de Pooter, M.A. Gronski, S.K. Cho, et al. // Nat. Immunol. 2004. V. 5 (4). P. 410-417.

165. Seki S. Identification of activated T cell receptor gamma delta lymphocytes in the liver of tumor-bearing hosts / S. Seki, T. Abo, T. Masuda, T. Ohteki, et al. // J. Clin. Invest. 1990. V. 86 (2). P. 409-415.

166. Seki S. Unusual alpha beta-T cells expanded in autoimmune lpr mice are probably a counterpart of normal T cells in the liver / S. Seki, T. Abo, T. Ohteki, K. Sugiura, K. Kumagai // J. Immunol. 1991. V. 147(4). P. 12141221.

167. Serra P. RAG-dependent peripheral T cell receptor diversification in CD8+ T lymphocytes / P. Serra, A. Amrani, B. Han, J. Yamanouchi, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. V. 99 (24). P. 15566-15571.

168. Shen M.M. Expression of LIF in transgenic mice results in altered thymic epithelium and apparent interconversion of thymic and lymph node morphologies / M.M. Shen, R.C. Skoda, R.D. Cardiff, J. Campos-Torres, et al. Expression // EMBO J. 1994. V. 13 (6). P1375-85.

169. Shimizu T. Resistance of extrathymic T cells to stress and the role

of endogenous glucocorticoids in stress associated immunosuppression /T. Shimizu, C. Kawamura T., Miyaji, H. Oya, et al. Resistance // Scand. J. Immunol. 2000. V. 51(3). P. 285-292.

170. Shinkai Y. Alt F.W. RAG-2-deficient mice lack mature lymphocytes owing to inability to initiate V(D)J rearrangement / Y. Shinkai, G. Rathbun, K.P. Lam, E.M. Oltz, et al. // Cell. 1992. V. 68(5). P. 855-867.

171. Shinomiya N. Thymic depletion in pregnancy: kinetics of thymocytes and immunologic capacities of the hosts / N. Shinomiya, S. Tsuru, M. Tsugita, Y. Katsura, et al. //J. Clin. Lab. Immunol. 1991. V. 34 (1). P. 11-22.

172. Shockett P.E. DNA hairpin opening mediated by the RAG1 and RAG2 proteins / P.E. Shockett, D.G. Schatz // Mol. Cell Biol. 1999. V. 19. P. 4159-4166.

173. Spaner D. Gamma delta T cells differentiate into a functional but nonproliferative state during a normal immune response / D. Spaner, K. Migita, A. Ochi, J. Shannon, et al. // Proc. Natl. Acad. Sei .U S A. 1993. V. 90 (18). P. 8415-8419.

174. Sperling A.I. CD43 is a murine T cell costimulatory receptor that functions independently of CD28 / A.I. Sperling, J.M. Green, R.L. Mosley, P.L. Smith, et al. // J. Exp. Med. 1995. V. 182 (1). P. 139-146.

175. Staal F.J. Wnt signaling is required for thymocyte development and activates Tcf-1 mediated transcription / F.J. Staal, J. Meeldijk, P. Moerer, P. Jay, et al. //Eur. J. Immunol. 2001. V. 31 (1). P. 285-293.

176. Staal F.J. Wnt target genes identified by DNA microarrays in immature CD34+ thymocytes regulate proliferation and cell adhesion / F.J. Staal, F. Weerkamp, M.R. Baert, C.M. van den Burg, et al. // J. Immunol. 2004. V. 172 (2). P. 1099-1108.

177. Stewart I. A morphological study of granulated metrial gland cells

and trophoblast cells in the labyrinthine placenta of the mouse // J. Anat. 1984. Vol. 139. P. 627-637.

178. Stingl G. Thy-1+ dentric epidermal cells express T3 abtigen and the T-cell receptor y chain / G. Stingl, F. Koning, H. Yamada, W.M. Yokoyama, et al. // Proc. Natl. Acad, Sei. USA. 1987.

179. Stromberg K. Human term placenta contains transforming growth factors / K. Stromberg, J.E. Pigott, D.A. Twardzik, D.R. Ranchalis // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1982. V. 106. P. 354-361.

180. Suciu-Foca N. Anti-idiotypic antibodies to anti-HLA receptors induced by pregnancy / N. Suciu-Foca, E. Reed, C. Rohowsky, P. Kung, D.W. King // Proc. Natl. Acad. Sei. U S A. 1983. V. 80 (3). P. 830-834.

181. Suzuki H. Deregulated T cell activation and autoimmunity in mice lacking interleukin-2 receptor beta / H. Suzuki, T.M. Kündig, C. Furlonger, A. Wakeham, et al. // Science. 1995. V. 268 (5216). P. 1472-1476.

182. Szekeres-Bartho J. Endocrine regulation of the immune system during pregnancy // Arch. Immunol. Ther. Exp. 1990. V. 38. P. 125-132.

183. Tafuri A. T cell awareness of paternal alloantigens during pregnancy / A Tafuri, J Alferink, P Möller, G.J Hämmerling, B Arnold // Science. 1995. V. 270 (5236). P. 630-633.

184. Tangri S. Maternal anti-placental reactivity in natural, immunological-mediated fetal resorptions / S. Tangri, T.G. Wegmann, H. Lin, R. Raghupathy // J. Immunol. 1994. V. 152. P. 4903-4911.

185. Terra R. Thymic and extrathymic T cell development pathways follow different rules / R. Terra, N. Labrecque, C. Perreault // J. Immunol. 2002. V. 169 (2). P. 684-692.

186. Terra R. T-cell generation by lymph node resident progenitor cells / R. Terra, I. Louis, R. Le Blanc, S. Quellet, et al. // Blood. 2005. V. 106 (1). P.

193-200.

187. Tonegawa S. Somatic generation of antibody diversity // Nature. 1983. V. 302. P. 575-581.

188. Tsai C.-L. Evidence of a critical architectural function for the RAG proteins in end processing, protection, and joining in V(D)J recombination / C.-L. Tsai, A.H. Drejer, D.G. Schatz // Genes Dev. 2002. V. 16. P. 1934-1949.

189. Tsukahara A. Mouse liver T cells: their change with aging and in comparison with peripheral T cells / A. Tsukahara, S. Seki, T. Iiai, T. Moroda, et al. // Hepatology. 1997a. V. 26 (2). P. 301-309.

190. Tsukahara A. Adrenergic stimulation simultaneously induces the expansion of granulocytes and extrathymic T-cells in mice / A. Tsukahara, T. Tada, S. Suzuki, T. Iiai, et al. //Biomed. Res. 1997b. V. 18. P.237-246.

191. Turka L.A. Thymocyte expression of RAG-1 and RAG-2: termination by T cell receptor cross-linking / L.A. Turka, D.G. Schatz, M.A. Oettinger, J.J. Chun, et al. // Science. 1991. V. 253(5021). P. 778-781.

192. Vaitatis G.M. Cutting Enge: CD40-Jnduced Expression of Recombination Activating Gene (RAG)l and RAG2: A Mechanism for the Generation of Autoaggressive T cells in the Periphery / G.M. Vaitatis, M. Poulin, R.J. Sanderson // J. Immunol. 2003. V. 170. P. 3455-3459.

193. Van Gent D.C. Initiation of V(D)J recombination in a cell-free system / D.C. Van Gent, J.F. McBlane, D.A. Ramsden, M.J/ Sadofsky, et al. // Cell. 1995. V. 81 (6). P. 925-934.

194. Vargas M.L. Incremento de células inmunes en la decidua en el tercer trimestre de embarazo / M.L. Vargas, P. Alemán, M. Camara, C. García-Tortosa, E. García-Olivares // Immunologia. 1990. V. 9. P. 27.

195. Vasse M. Oncostatin M induces angiogenesis in vitro and in vivo / M. Vasse, J. Pourtau, V. Trochon, M. Muraine, et al. // Arterioscler. Thromb.

Vase. Biol. 1999. V. 19 (8). P. 1835-1842.

196. Waid D.M. Peripheral CD41oCD40+ auto-aggressive T cell expansion during insulin-dependent diabetes mellitus / D.M. Waid,

G.M. Vaitaitis, D.H.Jr. Wagner // Europ. J. Immunol. 2004. V. 34(5). P. 14881497.

197. Warner S.J.C. Human vascular smooth muscle: target for and source of TNF / S.J.C. Warner, P. Libby // J. Immunol. 1989. V. 142. P. 100108.

198. Wegmann T.G. Allogeneic placenta is a paternal strain antigen immunoabsorbent / T.G. Wegmann, B. Singh, G.A. Carlson // J. Immunol. 1979.

V. 122(1). P. 270-274.

199. Wegmann T.G. Foetal protection against abortion: is it immunosuppression or immunostimulation? // Ann. Inst. Pasteur. Immunol. 1984. V. 135. P. 309-312.

200. Wegmann T.G. Bidirectional cytokine interactions in the maternal-fetal relationship: is successful pregnancy a Th2 phenomenon? / T.G. Wegmann,

H. Lin, L. Guilbert // Immunol. Today. 1993. V. 14. P. 353-356.

201. Wilson A. Two waves of recombinase gene expression in developing thymocytes / A. Wilson, W. Held, H.R. MacDonald // J. Exp. Med. 1994. V. 179. P. 1355-1360.

202. Wormley F.L.-Jr. Evidence for a unique expression of CD4 on murine vaginal CD4+ cells / F.L.-Jr. Wormley, M. Scott, W. Luo, M. Baker, et al. // Immunology. 2000. V. 100 (3). P. 300-308.

203. Xia W. Potential of T Cell Function by a Marine Algae-Derived Sulfated Polymannuroguluronate: In vitro Analysis of Novel Mechanisms / W. Xia, J. Li, M. Geng, X. Xin, J. Ding // J. Pharmacol. Shi. 2005. V. 97 (1). P. 107-115.

204. Xu Y. Deletion of beta-catenin impairs T cell development / Y. Xu, D. Banerjee, J. Huelsken, W. Birchmeier, J.M. Sen // Nat. Immunol. 2003. V. 4 (12). P. 1177-1182.

205. Yu W. Continued RAG expression in late stages of B cell development and no apparent re-induction after immunization / W. Yu, H. Nagaoka, M. Jankovic, Z. Misulovin, et al. // Nature. 1999. V. 400 (6745). P. 682-687.

206. Zenclussen A.C. Murine abortion is associated with enhanced interleukin-6 levels at the feto-maternal interface / A.C. Zenclussen, S. Blois, R. Stumpo, S. Olmos, et al. // Cytokine. 2003. V. 24. P. 150-160.

207. Zenclussen A.C. Abnormal T-cell reactivity against paternal antigens in spontaneous abortion: adoptive transfer of pregnancy-induced CD4+CD25+ T regulatory cells prevents fetal rejection in a murine abortion model / A.C. Zenclussen, K. Gerlof, M.L. Zenclussen, A. Sollwedel, et al. // Am. J. Pathol. 2005. V. 166(3). P. 811-822.

«УТВЕРЖДАЮ» Ректор Пермского государственного

«адыгого исследовательского университета, д ф.-Мгк профессор

И.Ю. Макарихин 2012 Г.

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

в учебный процесс Пермскою ^ г осударсх венного национального исследовательского университета результатов диссертационной работы Глебездиной Натальи Сергеевны по теме «Исследование возможности индукции экстратимической дифференцировки офТ-лимфоцитов при беременности» (кафедра микробиологии и иммунологии).

Мы, нижеподписавшиеся, комиссия в составе: председателя - проректора по учебной работе д.ф.-м.н., доцента Макарова С.О.; членов комиссии - заведующего кафедрой микробиологии и иммунологии, академика РАН и РАМН, профессора Черешнева В. А. и доцента кафедры микробиологии и иммунологии к.х.н. Тендряковой С.П. удостоверяем, что результаты диссертационной работы Глебездиной Натальи Сергеевны «Исследование возможности индукции экстратимической дифференцировки сфТ-лимфоцитов при беременности» внедрены в педагогическую практику кафедры микробиологии и иммунологии Пермского государственного национального исследовательского университета с 01 сентября 2011 года. Результаты диссертационной работы используются в лекционных курсах «Иммунология» и «Иммунология репродукции».

Председатель комиссии: Проректор по учебной работе, д.ф.-м.н., доцент

Члены комиссии:

Зав. кафедрой микробиологии и иммунологии, академик РАН и РАМН, профессор

Доцент кафедры микробиологии и иммунологии, к.х.н.

С.О. Макаров

B.А. Черешнев

C.П. Тендрякова

Подписи ччснов комиссии ЗАВЕРЯЮ

/ / \ Специалист ОК '_

М п.

(организация)

(У (И.О.6.)