Исследование конъюгатов белков и нерастворимых соединений d-элементов в бесприборном иммунохимическом анализе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат химических наук Орлова, Ольга Юрьевна

• Орлова, Ольга Юрьевна
• кандидат химических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат химических наук Орлова, Ольга Юрьевна

СОДЕРЖАНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ И МОНИТОРИНГА ИНФЕКЦИОННЫХ И СОМАТИЧЕСКИХ ПАТОЛОГИЙ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ (обзор литературы).

1.1. Виды иммунохимического анализа.

1.2. Методы генного зондирования.

1.3. Метод диагностических экспресс-тестов.

1.4. Иммуномембранный метод.

1.5. Иммунохроматографический анализ.

1.6. Иммуносорбенты для иммунохимического анализа.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.Материалы исследования.

2.2 Методы исследования.

2.3. Статистическая обработка полученных результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Выбор оптимальных твердофазных носителей.

3.2. Сопоставление различных способов проведения иммунохимического анализа с использованием гидрозольных препаратов.

3.3. Определение оптимального модификатора для твёрдой фазы.

3.4. Результаты хемосорбции в модельной системе.

3.5. Экспериментальные данные по определению антител к дифтерийному анатоксину в сыворотке крови.

3.6. Изучение гидрозольных диагностикумов для детекции антител к

М. tuberculosis.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование конъюгатов белков и нерастворимых соединений d-элементов в бесприборном иммунохимическом анализе»

Актуальность проблемы. При развитии патологического состояния болезни в организме человека в его биологических жидкостях: крови, моче, слюне появляются определенные маркеры - специфические вещества сложной, как правило, белковой природы. При обнаружении тех или иных специфических маркеров врач может судить о факте заболевания. В ряде случаев это удается тогда, когда больной не подозревает о начале и развитии болезни. Следовательно, необходимо внедрять в практическую деятельность врача новые экспрессные методы ранней диагностики. В распоряжении любого врача-клинициста должны быть диагностические препараты, позволяющие осуществить хотя бы качественную диагностику (по принципу «да»-«нет»)с последующим более полным исследованием в случае «да» конкретной патологии, соответствующей его специальности.

Эти препараты должны быть дешевы, экспрессны - постановка реакции и считывание результатов не более 1-2 минут, не требующих дополнительных приборов (возможность проводить реакции непосредственно на рабочем месте), возможность ставить реакции с малыми объемами препарата и биоматериала, взятого от больного (10-20 мкл). Кроме того, они должны иметь стабильные и воспроизводимые иммунохимические свойства, т.е. выявлять маркеры того или иного заболевания в самом широком спектре биологических жидкостей (в моче, слюне, сыворотке крови и т.д.) в минимальных концентрациях. В настоящее время иммунохимические методы далеки от сформулированных выше требований. Для большинства из них характерна не экспрессность, высокая стоимость одного анализа, требуются дорогостоящие приборы. Учитывая отсутствие приборов, простоту применения и быстроту постановки реакции, можно рекомендовать эти препараты для решения задач, стоящих перед МЧС, в практику прямого переливания крови в медицине катастроф (в условиях, приближенных к полевым), когда необходимо защитить пациента при трансфузиологических процедурах от контаминантных инфекций, а также оценки краш-синдрома.

В последнее время предложено решение данной задачи. Все иммунохимические методы базируются на известном уже почти столетие феномене взаимодействия между антигеном и антителом. Поэтому можно использовать в качестве диагностических препаратов так называемые гидрозоли: ультрадисперсные частицы оксидов металлов побочных подгрупп и комплексные соединения, на поверхность которых по определенной технологии нанесены антигены, либо антитела, ассоциированные с тем или иным заболеванием. Если в распоряжении врача имеется один из компонентов данной пары: антиген либо соответствующие антитела, то он может поставить верный диагноз и принять адекватные решения. Определенное место эти препараты могут занять в тестировании эффективности вакцинации разных групп населения против ряда инфекционных заболеваний: клещевой энцефалит, столбняк, коклюш, дифтерия, туберкулез. При помощи их можно осуществлять также диагностику соматических (острый инфаркт миокарда, злокачественные опухоли) патологий. Данный вид иммунологического анализа является полуколичественным, основан на методе гидрозольной агглютинации.[42.] Антитела оценивается по предельным титрам (концентрациям), а антигены -путём постановки параллельной реакции с референсным препаратом. Реакция происходит в лунках планшета, куда закапывают разведённый буфером гидрозоль и затем разведённый биоматериал. Результат считывается визуально. Общее время постановки 10-15 минут. Гидрозольные диагностикумы производятся в жидком виде и не требуют лиофилизации (вакуумной сушки). Сроки хранения от 9 месяцев до одного года в зависимости от исходных биолигандов.

Таким образом, основным предметом нашего исследования стали разработка и создание экспрессных иммунохимических препаратов, которые соответствовали бы выше перечисленным требованиям.

Цель исследования. Изучение особенностей синтеза гидрозольных диагностикумов на основе ультрадисперсных частиц неорганической природы: оксидов, комплексных соединений, на поверхность которых сорбированы специфические белки - антигены - маркеры определенных заболеваний. Задачи исследования:

1. Выбор оптимальных носителей для синтеза диагностикумов на основе катионов металлов побочных подгрупп.

2. Исследование различных способов хемосорбции белков на выбранные твердые фазы.

3. Установление закономерностей между дозировкой химического модификатора и свойствами гидрозоля.

4. Получение и апробация диагностических препаратов на выявление маркеров таких заболеваний, как туберкулез, дифтерия.

Научная новизна:

1. Проведено комплексное исследование и выбор наиболее оптимального неорганического материала для последующего изготовления конъюгатов этих веществ и специфических белков-антигенов для иммунохимичес-кого анализа.

2. На основе экспериментальных данных осуществлён синтез гидрозольных препаратов.

3. Установлены количественные соотношения между дозировками химических модификаторов на поверхности ультрадисперсных частиц и свойствами получающихся продуктов - иммунохимических гидрозолей. Положения, выносимые на защиту:

1. Конъюгаты белков и неорганических дисперсных частиц - гидрозоли должны синтезироваться на основе гидрофобных неорганических объектов. Наиболее приемлемыми из таковых могут быть названы - оксид железа (III), оксид меди (И), гексацианоферрат (II) железа (III).

2. Исследование методов постановки реакции гидрозольной агглютинации в варианте на стекле, в U-образном планшете и на пористом мембранном фильтре.

3. Оптимальными по иммунохимическим свойствам являются гидрозоли, поверхности которых перед сорбцией специфических белков-биолигандов подвергаются химической модификации для ковалентного связывания белка с твердой поверхностью. Использовались модификаторы, осуществляющие хемосорбцию либо по NH2-rpynne (нитрозоамины), либо по SH-группе (катионы тяжёлых d-элементов периодической системы -Pb2+, Hg2"1).

4. На основании этих положений осуществлен синтез гидрозолей для экспрессного бесприборного выявления определённых антител к возбудителям туберкулёза, дифтерии в биологических жидкостях человека.

Практическая значимость.

Получение и последующая реализация гидрозольных диагностикумов в практическом здравоохранении, предназначенных для выявления маркеров таких заболеваний, как туберкулез и дифтерия.

Реализация в практическом здравоохранении.

Результаты исследований внедрены в практику специализированной противотуберкулёзной больницы ГУИН по Кировской области.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 90 страницах машинописного текста и состоит из введения, трёх глав, выводов, списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 10 рисунками, 7 таблицами. Библиографический указатель литературы включает 83 отечественных и 41 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Орлова, Ольга Юрьевна

ВЫВОДЫ.

1. В работе изучен синтез гидрозольных препаратов на основе d-элементов для получения экспрессных иммунохимических диагностикумов.

2. Исследованы методы постановки реакции гидрозольной агглютинации в U-образном планшете, на предметном стекле и на пористом мембранном фильтре. Доказано: более перспективным методом является постановка на предметном стекле и на пористом мембранном фильтре, как более экспрессные, показательные и менее затратные.

3. Синтезированы твердофазные носители для получения гидрозольных препаратов: окрашенные оксиды меди (II), железа (III) в виде ультрадисперсных суспензий в воде и золь гексацианоферрата (II) железа (III). Наиболее перспективным твёрдофазным носителем оказался золь гексацианоферрата (И) железа (III), который в реакции гидрозольной агглютинации показал наименьшее время постановки на стекле.

4. Проведена модификация твердых поверхностей всех трех гидрозольных препаратов нитрозодиметиланилином и солями d-элементов (хлоридом ртути (II) и хлоридом свинца (И)). Выявлено, что закономерности, полученные в реакциях с модельным антигеном (противокоревым у-глобулином человека), справедливы и для конкретных систем - с дифтерийным анатоксином, туберкулезным антигеном ППД.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Таким образом, исходя из представленных экспериментальных и теоретических данных, можно сделать предварительные заключения. В работе доказано, что коллоидный раствор на основе гексацианоферрата (II) железа (III) можно использовать в качестве экспрессных бесприборных диагностикумов, для детекции различных видов маркёров. Данные препараты могут служить основой для разработки большого количества бесприборных диагностических систем и могут использоваться там, где требуется выявить феномен взаимодействия антигена с антителом. Это может использоваться не только в медицине, в экологии (выявление аллергенов в окружающей среде), но и в ветеринарии (выявление таких патологий у животных, как собачий гепатит, энтерит). Доказано, что именно ковалентная "пришивка" белка к данной твёрдой фазе обеспечивает воспроизводство иммунохимических свойств.

Кроме этого, все исходные материалы: оксиды металлов, компоненты буферных растворов относятся к наименее опасному - IV классу опасности химических реагентов. Данные препараты безвредны для человека .

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Орлова, Ольга Юрьевна, 2005 год

1. Амброзиус X. Иммунология: Справочник. / под ред. Г. Бундау; пер.с нем,.- 2-е изд.-Киев.: Наукова думка, 1981.-480 с.

2. Амброзиус X., Фибих Г. Иммунологические методы /. под ред. Г.Фримеля пер. с нем. А.П. Тарасова.- М.: Медицина, 1987.- 472 с. t

3. Ахметов, А.С. Радиоиммунологический анализ в клинической практике./ Журн. Всесоюзного хим. об-ва им. Д.И. Менделеева ,- 1982.- Т. 27. №4. М.: Химия.- С.76-80.

4. Беленький, Е.Ф., И.Ф. Рискин. Химия и технология пигментов. / под ред. Л.Ф. Корсунского.- 4-е изд., Л.: Химия, 1974.- 656 с.

5. Березин, И.В. Иммобилизованные ферменты : Современное состояние и перспективы /В.К. Антонов, С.Д. Варфоломеев, Л.И., Воробьёва // М.: МГУ, Т.1.-1976.- 296 с.

6. Вербов, В.Н. Иммуноферментный анализ. // Труды Лен. НИИ им. Пастера-Л.,1989,-С.З-28.

7. Воюцкий, С. С. Курс коллоидной химии. / 2-е. изд.,- М.: 'Химия', 1975.512 с.

8. Гаврилова, Е. М., Гомогенный иммуноферментный анализ новое направление иммунохимии. /Журн. Всесоюзного хим. об-ва им. Д.И. Менделеева,-1982.- Т.27. № 4. М.: Химия,-С. 90-96.

9. Гнутова, Р.В. Серология и иммунохимия вирусов растений. М., Наука, — 1993,-С.102-104.

10. Гурвич, А.Е., ДСузовлева О.Е. Получение белково-целлюлозных компонентов (иммуносорбентов) в виде суспензий, способных присоединять большие количества антител./ Журн. Биохимия,-1961.- Т. 26. №5. М.: изд. Академии наук СССР. С.934-942.

11. Дзантиев, Б.Б., Егоров А.Н. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа / журн. Всесоюзного хим. об-ваим. Д.И. Менделеева,- 1982.- Т.27. № 4. М.: Химия, -С.82-89.

12. Думанский, А. В., Учение о коллоидах,/ 3 -е изд., М. J1. Госхимиздат,1948.-416 с.

13. Думпес Ю. Я. Диагностические экспресс-тесты на твёрдофазных носителях для медицинских биохимических анализов. // Рига.: Медицина, 1986.-198 С.

14. Егоров A.M., Теория и практика иммуноферментного анализа. /Ф.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова,- М., "Высшая школа",1991.-271С.

15. Егоров, A.M., Диков М.М. Структура и механизм действия антител. / .Журн. Всесоюзного хим. об-ва им. Д.И. Менделеева,-1982.- Т.24. №4. М.: Химия . С.21-28.

16. Ефременко, В.И. Опыт применения магноиммуносорбентных диагностикумов в эпиднадзоре за холерой в Дагестане и Чеченской Респ./ В.И. Ефременко, В.И. Таран, Е.И. Афанасьев. Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1996.-№3. М.: С-инфо.-С.73-75.

17. Жуков, И. И. Коллоидная химия, ч. 1. / Л., изд. ЛГУ им. А.А. Жданова,1949.-324 с.

18. Заявка №4826518/14(055046) МКЛ5 G 01 № 33/92 Способ многократного использования иммунологических твердофазных носителей на основе полимеров./ Мешандин А.Г.; заявитель НИИ им. И.И. Мечникова; заявл. 17.05.90.

19. Зильберман, Е.Н. Реакция нитрилов./М.: Химия, 1972.-447 с.

20. Иммуногенетика человека.: Основные принципы и клиническое значение. / Под ред. С. Литвина, пер. с англ.-Т.2. М.: Мир. 1994.- 366 с.

21. Иммунология. Методы исследований. / под ред. И. Лефковитса; пер. с англ. А.И. Маца.-М.: Мир, 1983.-348 с.

22. Иммунолюминесценция в медицине. // Под ред. Е.Н. Левиной, М.:1. Медицина, 1977.- 216 с.

23. Иммуноферментный анализ. / под ред. Т.Т.Нго и Г.Ленхоффа, пер. с англ. С.В. Калугера М.: Мир, 1988.-444 с.

24. Иммунохимический анализ./ Под ред. действ, чл. АМН СССР проф. JI.A. Зильбера. М.: Медицина, 1968.- 300 с.

25. Иммунохимия в клинической лабораторной практике. / под ред. А.М.Уорда, Дж.Т.Уичера. пер.с англ. A.M. Авербаха.- М.: Медицина, 1981.- С.59-69.

26. Карякин Ю.В. Ангелов И.И. Чистые химические вещества. / 4-е изд. М.: Химия, 1974.- 409 с.

27. Коллинз, У.П. Новые методы иммуноанализа. / Тертон М., Балангхем Д., под ред. У.П. Коллинза, пер. с англ. М.: Мир, 1991.- с.151-154.

28. Кройт, Г.Р. Наука о коллоидах. / Под ред. Г. Р. Кройта, пер. с англ. И.А. Плетневой. Т. 1.- М., изд. иностр. лит.,1955.- 538 с.

29. Ленский,С.В. Твердофазный РИА для диагностики клещевого энцефалита/ автореф. дисс. канд. биол. наук. -Свердловск., 1982.-20 с.

30. Мешандин, А.Г. Физико-химические аспекты сорбционных процессов при синтезе биолигандов:/ дис.док. тех. наук : 03.00.23.- М.,-1994.216.С.

31. Мешандин, А. Г, Ванеева Л. И. Проблемы потери активности сорбированных лигандов в гетерогенном иммуноферментном анализе ./Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1994.- №4.- М.: С-инфо.- С. 52-55.

32. Мешандин, А. Г. Возможность применения гидрозольных препаратов впрактике гематологии и трансфузиологии //Актуальные вопросы трансфузионной и клинической медицины. Материалы науч. конф.16-17 апреля 1997-Киров.- С.56-57.

33. Мешандин, А. Г., Матвеев А. Г. Латексные тест-системы- основа для создания бесприборных диагностикумов.//Труды раб. совещ. Состояние диагностики бактериальных инфекций. Оболенск.-1989.-С.143.

34. Мешандин, А. Г., Матвеев А. Г. О возможности бесприборной экспресс диагностики инфекционных заболеваний .//Труды VI Всерос. Съезда микробиологов, эпидемиологов, паразитологов — Н. Новгород.-1991.-Т.2.-С.226.

35. Мешандин, А.Г. Гидрозольные препараты в диагностике различных инфекционных и соматических патологий / Паллиативная медицина и реабилитация .-1997.-№1.- М.: а/я 137. фонд Паллиативная медицина и реабилитация больных.-С.21-23.

36. Мешандин, А.Г., Серологическая диагностика сальмонеллезов./ Золотарев Ю.В. Золотарева Л. В. // Клиническая лабораторная диагностика,- М.: Медицина, 2001.- № 1.- С. 52-53.

37. Михайлов А.Т., Симирский В.Н.- Методы иммунохимического анализа в биологии развития /М.: Наука.- 1991.-315 с.

38. Неизотопные методы иммуноанализа. Итоги науки и техники, серия "Биотехнология". //М., Изд.ВИНИТИ, 1987.- С. 4-7.

39. Некрасов В.В. Руководство к малому практикуму по органической химии. //М., Госхимиздат., 1954.-295 с.

40. Оловников, A.M. Методы иммунохимического анализа./Журнл. ВХОим. Д.И.Менделеева. 1968-Т. 15 .-№6.- М.: Химия.- С.48-54.

41. Орлова О.Ю. Мешандин, А.Г. Гидрозоли: принципиально новый класс диагностических препаратов для выявления и мониторинга инфекционных и соматических патологий // Вятский медицинский вестник. -1999.-№1.- Киров., КГМА.- С. 37-42.

42. Орлова О.Ю., Мешандин А.Г. Сопоставление различных видов твердых фаз при синтезе гидрозольных иммунохимических диагностикумов./ Вятский медицинский вестник. 2000.-№ 3.- Киров.-С. 53-58.

43. Орлова О.Ю., Мешандин А.Г. Применение нового метода гидрозольной агглютинации для оценки поствакцинального противодифтерийного иммунитета./Идеи Пастера в борьбе с инфекциями. Материалы II международной конференции .-СПб, 2-4 сентября 1998.-С 193.

44. Орлова, О.Ю., Мешандин А.Г. Возможность применения гидрозольных препаратов в лабораторной практике./Клиническая лабораторная диагностика. 2000,- №10,- М.: Медицина.- С.5.

45. Остерман, A. JI. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммунноэлектрофарезом и радиоизотопными методами./ М.: Наука.-1983.- 304.C.

46. Падюков, Л.Н., Харитоненков И.Г. Иммунодиагностика инфекций./ Руководство: "Иммунология инфекционного процесса", М.: Медицина, 1994.- С. 63-68.

47. Пастер, Е.У. Практикум по иммунологии./ Учебное пос. для вузов-Киев.: Выща школа,1989.-302 С.

48. Пасынский, А. Г., Коллоидная химия / под ред. акад. В.А.Каргина.З-е изд., М.: Высшая школа, 1968.-232с.

49. Пат. № 2154826 Российская Федерация, С 2 G 01 №33/53 Способ постановки агглютинационного иммунологического анализа / Мешандин А.Г.; заявитель и патентообладатель Мешандин А.Г.-№ 95114935/14; заявл. 21.08.95; опубл.20.08.00, Бюл.№ 23 (II ч.),-376 с.

50. Пат. Su №1464089 А1, ЕР № 0254117 Физико- химические аспекты сорбционных процессов при синтезе твердофазных биолигандов./ Мешандин А, Г. заявл. 27.01.88; опубл.07.03.89.

51. Пат. Su №883053 А1, ЕР 1839560 Физико- химические аспекты сорбционных процессов при синтезе твердофазных биолигандов./ Мешандин А, Г. заявл. 30.12.88; опубл.23.11.89.

52. Пат.№ 2154827 Российская Федерация, С 2 G 01 №33/53 Способ агглютинационного иммунологического анализа / Мешандин А.Г.; заявитель и патентообладатель Мешандин А.Г.-№ 95116983/14; заявл. 05.10.95; опубл.20.08.00, Бюл.№ 23 (И ч.),-376 с .

53. Пат.№ 2169924 Российская Федерация, С 2 G 01 №33/551 Способ агглютинационного иммунологического анализа / Мешандин А.Г.; заявитель и патентообладатель Мешандин А.Г.-№ 96118125/14; заявл. 12.09.96; опубл.27.06.01, Бюл.№ 18 (И ч.),-315 с.

54. Пат.№ 2170434 Российская Федерация, С 2 G 01 №33/551, 33/53 Способ агглютинационного иммунологического анализа / Мешандин А.Г.; заявитель и патентообладатель Мешандин А.Г.-№ 96118266/14; заявл. 12.09.96; опубл. 10.07.01,Бюл.№ 19 (II ч.),-311 с.

55. Песков, Н. П., Курс коллоидной химии,/ М., Л., Госхимиздат, 1940.-276с.

56. Писаренко, А. Г. Курс коллоидной химии, / Поспелова К. А., Яковлев А. Г., 3-е изд., М.: Высшая школа, 1969.- 249 с.

57. Покровский В.И. Иммуноферментный анализ: современное состояние и тенденции развития./Е.П. Голубинский, Н.А. Семина, И.В. Рубцов.//Обз. инф. ВНИИ мед. и мед- тех. инф. Мед. генетика и иммунол. 1986.- М., 74с.

58. Покровский, В. И., Семенов Б.Ф. Проблемы современной медицины и иммунохимии, / Журн. Всесоюзного хим. об-ва им. Д.И. Менделеева, 1982.- Т. 27. № 4.- М.: Химия, С. 97-103.

59. Полетаева, О.А., Мешандин А.Г. Иммуноагглютинационный диагностикум на основе моноклональных антител для скрининга эпителиального опухолевого маркера в цельной крови онкологических больных./Журн. Биотехнология, 1995.- №3-4.- М., С. 46-47.

60. Попечителев, Е.А., Старцева О.Н. Методы иммунохимических исследований, / СПб.: СГбГЭТУ, 1993,- С. 32-35.

61. Практическая иммунология. / Под ред. П.Н. Бургасова и И.С. Безденежных, М.: Медицина, 1969.-414 с.

62. Равич-Щербо М.И., Физическая и коллоидная химия. /2-е изд., М.: Высшая школа, 1968.-С. 150-153.

63. Ребиндер, П. А., Избранные труды: Поверхностные явления в дисперсных системах. / Коллоидная химия, М.: Наука, 1968.- 239 с.

64. Реми, Г. Курс неорганической химии. / Пер. с нем. к.х.н. А.И.Григорьева, Т. 2. М.: Мир, 1974.-888 с.

65. Роберте, Д.Д., Касерио М. Основы органической химии. / Пер. с англ. Ю.Г.Бунделя. 2-е изд.,- М.: Мир, 1978.Т.2.-775 с.

66. Стендаль, С. ,Сойни Э. Новые направления в развитии неизотопных методов иммуноанализа // Перспективы биоорганической химии и молекулярной биологии .М.: Наука, 1986.-С. 305-309.

67. Стендифер, Д. К. Иммуноферментный анализ антигенов с разделениемкомпонентов // Иммуноферментный анализ М.: Мир, 1988. С. 172-192.

68. Степанов, Б.Н. Введение в химию и технологию органических красителей. /3-е изд. -М.: Химия,1984.-589 с.

69. Строев, Е.А. Биологическая химия. / М.:Высшая школа ,1986 .-500 с.

70. Сухоруков, A.M., Пономарева A.M. Изучение сорбционных свойств полистироловых планшетов, используемых в иммуноферментном анализе/ Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 1987. № 9.-С. 18-22.

71. Теплова, Н.Н. Рабдомиолиз у хирургических больных в клинике неотложных состояний:/ дис. . канд. мед. наук : 14.00.37.- Пермь.,2000.- 137.C. »

72. Фримель, Г., Брок И. Основы иммунологии, /пер. с нем. А.П. Тарасова; под ред. А.И. Маца.-М.: Мир, 1986.-254 с.

73. Харитоненков, И.Г., Христова M.JI. Использование иммуноферментных методов в вирусологии. / "Молекулярная генетика, микробиология, вирусология".1985.- №.6 .- С. 3-15

74. Цоллингер, Г. Химия азокрасителей. / пер. с нем О.Ф. Гинзбурга под ред. Проф. Б.А. Порай-Кошица, Л.: Госхимиздат, I960.- 363 с.

75. Чард, Т. Радиоиммунологические методы, / пер. с нем. М.С. Морозовой; под ред. Л. М. Варшавского.- М.: Мир, 1981.-246 с.

76. Шаханина, К.Л. Выбор критериев пригодности твердофазных носителей на основе полистерола для проведения иммуноферментного анализа./И.П. Павлова, Л.Ф. Евсеева, Н.С. Умнова. Журн. Микробиолог., эпидемиологии и иммунобиологии. 1987.- №9.-М,., С.8-9.

77. Шелудко, А.Д., Коллоидная химия, / пер. с болг. В.М.Муллера- М.:1. Мир, 1984.-319 с.

78. Эллин, Р.Д., Макензи Р. Иммунологические аспекты инфекционных заболеваний / под ред, Д.Дика; пер. с англ. А.С. Анта, М.: Медицина, 1982.- 574 с.

79. Adarwai А.То the question of retichal immunosozbent// Experimentia.-l 971 .-Vol.27.-P.514-515.

80. Aizawa M. Immunosensors //Philos. Trans. Royal soc. London., B. Biol. Science.-1987.-Vol.316.-P.-121-133.

81. Clark R., Engvall E. Enzyme linked immunosorbent assay// (ELISA).Teoreoretical and praktical aspects. Enzyme-Immunoassay (E.T.Maggioed.). Boca Raton, Florida.- 1981.-P.- 167-179.

82. Collins W.P.ed J.Wiley & Sons Alternative Immunoassays , //Chichester-New York-Brisbane-Toronto-Singapore, 1985.

83. Crosignani P.G., Nakamusa R.M., A method of sodium phase radioimmunoassay untilizing polypropylene dises. // J. Clin. Endocrinof and Metabol.- 1970.- Vol .-30 .- P. 153-160.

84. Edswall J.T. Methods of crosslinking. //J. Am. Chem. Soc. 1954.-Vol.-.76.-P.3131-3138.

85. Ekins R. In immunoassays for the 80s. // University Park Press, Baltimore, 1981.-P.-276.

86. Freundlich H., Kapillarchemie. / / Lpz., 1930.-B. 1 .-P.-32.

87. Gallo D. Uses of immunofluorescence in diagnostic virology. // Amer. J. Med. Technol.- 1983.-Vol.- 49.-P, 157-161.

88. Gleally John F. Monoclonal antibodies and their potential in medicine.// Irish Med. J.-1987, 80.-№6.-P.-161-162.

89. Goldring О. L. Detergent solubilised antigens in enzyme immunoassay with particular reference to enzyme-linked immunosorbent assey (ELISA) systems.//Immunoassay Technol.- Vol.- 2. Berlin; New York.- 1986.- P.189-213.

90. Guenes Z. Factors, that can influsence of reactions antigen-antibody. //J.Biochem Physiol.-1960.-Vol.38.-P.-1235-1243.

91. H. R. Kruyt Colloid science .// N. Y.-a. o., 1949.-Vol.-l-2.-P.-52.

92. Harlow E., Lane D. Antibodies. //A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor. Lab., 1988.-P.254.

93. Hazen Beth W., Hazen Kevin C. Modification and application of a simple, surface hydrophobicity detection method to immune cells.// J. Immunol. Meth, 1988, 107, №2.-P.- 157-163.

94. Hemmila J. Fluoroimmunoassays and immun fluorometric assays. // Clin. Chem. 1985.- Vol. 31. - P. 359-370.

95. Ichikawa E, Imagawa M. Enzyme inking of antibodies and their fragments for enzyme immunoassay and immunologicol staining. // J. Immunoassay -1983. -Vol.- 4.-P.- 1399 -1401.

96. Jou-Chu-Ziu. //J.Immunol.Meth. 1989-.Vol.-124.-P.-159-163.

97. Kricka L. J., Whitehead T. P. Chemiluminescent and dioluminescent immunoassays.// J. Pharm. And Biomed. Anal. 1987.-№8.-P.- 829-833.

98. Lassons S.M , Ferens J.M., Radiologi.// 1985.- P.-155, P.- 489.

99. Letonen O. Antibody connection in immunoassays//J.Immunol.Meth.-1980.-Vol.-34.-P.-61-70.

100. Magnusson Karl-Eric, Bartonek Eva. // Immunol. Invest.,.- 1987.- № 3.- P.-227-240.

101. Matijevic E. Surface and colloid science. // N. Y. a. o., 1969.-Vol.-l-4.-P. 71.

102. Monroe D. Liposome immunoassay .//Immunoassay Thechnol. 1986.- Vol.2.- Berlin;New York.-P.- 167-187.

103. Nakana P.K. The synthesis conjugates peroxidaze with antidodies. //J.Histochem.Cytochem.-1968.-Vol.-16.-P.-337-502.

104. Newark N. J. Immunomedics inc receives patent on antidody-linking technology.//Appl. Genet. News.- 1987,8.-№1.P.- 8.

105. Nilsson Bertil, Larsson Ann-Charlott .An amplification technology for improving sensitivity when measuring components in biological samples.// J. Immunol. Meth., 1988, 108, № 1-2.-P.- 237-244.

106. Nossal Gustav J. V. Current concepts: immunology. The basic components of the immune system.//N. Engl. J. Med., 1987, 316 № 21.-P.- 1320-1325.

107. Olownikow A Diazocrossliking in immunology.//Immunochemistry.-1967.-Vol.-4-P.-77-80.

108. Pacry R. P., Love C., Detection of rubella antibody using an optical immunosenser.//J. Virol. Meth-1990.-Vol.27.-P.39-48.

109. Parsons G. N. Antibodi-coated plastie tubes in radioimmunoassay.// Meth Enzymol .-1981.-Vol.-73.- P.-196.

110. Pesons G. H. Antibody coated plastic tubes in radioimmunoassay. // Meth. Enzymol.- 1981.- Vol .-73.- P. 196.

111. Phillips A. P., Martin K. L. Direct and indirect immunofluorescence analysis of bacterial populations by flow cytometry. //J. Immunol. Meth., 1987, 101.-№2, P.-219-228.

112. Porstmann T. Entwicklung eines Doppel-Sandwich-Enzymim-Munoassay zum quantitativen Nachweis von HBsAg (I. Mitteilung).Dt. Gesund.// Wes.,-I980.-Vol.- 35.-P.- 598-600.

113. Sever John L. Future perspectives in virology diagnosis, treatment and immunoprophylaxix.// S. Afr. Med. J. 1986.- 70, Suppl.-P. 10-16.

114. Stewart- Tull Duncan E.S., Parant Monique. Immunopotentiators in vaccines: a drem to to a reality.//Ann. Immunol. Hung.- 1986,26.-№1.-P.- 197-223.

115. Stollar B. D., Rashtehian A. Immunochemikal approaches to gene probe assay // Annual. Biochem.-1987.-Vol.-161 .-P.- 387-394.

116. Timpl R., Furthmayr H. //Ysolation of pure anti collagen antibodies using a specific lmmunoadsorbent technigue, L.Ymmunitatsforsch, 1967.- P.-134, 391-396.

117. Werner Georges H. Synthetic immunostimulants(excluding sulur-containing compounds).//Comp. Immunol., Microbiol., and Infect. Dieseases.-1986,9.-№4 2-3.-P.-131-136.

118. Wood W. G. Luminescence immunoassays in theory and practice- the state of the art. //Immuneassey Thechnol.-1985.- Vol.- 1. Berlin, New York, P.-105 -150.