Исследование генетической структуры популяций дикой сои, как элемент изучения биобезопасности генетически модифицированных растений в центрах происхождения и разнообразия вида тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Недолужко, Артем Валерьевич

• Недолужко, Артем Валерьевич
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Недолужко, Артем Валерьевич

Список использованных сокращений

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Биология дикой сои

1.1.1. Таксономия видов рода Glycine

1.1.2. Географическое распространение G. soja

1.1.3. Морфологические особенности G. soja

1.1.4. Жизненный цикл и распространение семян G. soja

1.1.5. Происхождение G. soja и центры её генетического разнообразия

1.2. Изучение генетического полиморфизма G. soja

1.3. Филогенетические отношения в подроде Sofa и проблема происхождения культурной сои 3 О

1.4. Биобезопасность ГМ сои в центре происхождения и разнообразия G. soja

1.5.Сохранение генетических ресурсов дикой сои

2. Материал и методы

2.1 .Материал

2.2. Методы

2.2.1. Выделение ДНК из растительной ткани

2.2.2. Измерение концентрации ДНК

2.2.3. Создание эквнмолярных смесей ДНК

2.2.4. Полимеразная цепная реакции

2.2.5. Фракционирование фрагментов ДНК

2.2.6. Обработка данных генетического анализа

3. Результаты и обсуждение

3.1. Изучение генетического разнообразия G. soja на территории Приморского края

3.2. Молекулярно-генетический анализ филогенетических связей видов рода Glycine подрода Soja

3.3. Скрининг присутствия ГМ сои (GTS 40-3-2) в агроцсночах юга российского Дальних» Востока

3.4. Сохранение генофонда G. soja 84 Выводы 86 Список литературы 88 Приложение

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ГМ соя Генетически модифицированная соя

ЛЭП Линия электропередачи мРНК Матричная (информационная) РНК мтДНК Митохондриальная ДНК хлДНК Хлоропластная ДНК

AFLP-PCR (Amplification Fragment Length

Polymorphism)- Полиморфизм длин амплифицированных фрагментов

AMY (Amylase) - Амилаза

ASLP (Amplification Sequence Length

Polymorphism) - Полиморфизм длин амплифицированных последовательностей ДНК

АТФаза

Esterase) - Эстераза

Isocitrate Dehydrogenase) Изоцитрат Дегидрогеназа

International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications) - Международная служба по агробиотехнологии

Inter-Simple Sequence Repeat) Амплифицированные последовательности ДНК, фланкируемые микросателлитами

Internal Transcribed Spacer) Транскрибируемый спейсер, регионы на рДНК

ATPase EST

IDH ISAAA

ISSR-PCR

ITS1 иITS

MDH PCR

RAPD-PCR

SNPs SSR-PCR

ТВЕ-буфер ТЕ-буфер UPGMA

Neighbor-Joining) - Объединение ближайших соседей

Malic dehydrogenase) Малатдегидрогеназа

Polymerase Chain Reaction) -Полимеразная цепная реакция

Random Amplified Polymorphic

DNA) Амплнфнцированные последовательности случайной полиморфной ДНК

Restriction Fragment Length Polymorphism)- Полиморфизм длины рестрикционных фрагментов или ПДРФ

Single Nucleotide Polymorphisms) -Единичные нуклеотидные полиморфизмы

Simple Sequence Repeats)- Простые повторяющихся последовательности (микросателлиты)

Трис-борат-ЭДТА

Трис-ЭДТА

Unbiased Pair Group Method Analysis) -Невзвешенный парно-групповой метод анализа метода Варда

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование генетической структуры популяций дикой сои, как элемент изучения биобезопасности генетически модифицированных растений в центрах происхождения и разнообразия вида»

Актуальность проблемы. Одним из перспективных направлений современной биотехнологии является генетическая инженерия растений. Генетически модифицированные (ГМ) растения играют важнейшую роль в современном сельском хозяйстве, и в последние годы в мире наблюдается устойчивая тенденция к увеличению посевных площадей и расширению сфер их использования. Обязательным условием для внедрения ГМ растений в сельское хозяйство является установление их статуса биобезопасности их бнобезоиасносш.

Одним из основных иетшцйалышх рисков при выращивании ГМ растений является возможность переноса и распространения ГМ вставки в популяциях диких родичей. Поэтому при исследовании биобезопасности ГМ растений, особенно в центрах происхождения и разнообразия видов, основная роль отводится изучению генетической структуры популяций диких родичей культурного растения и выбору модельных популяций для дальнейших исследований вероятности перекрёстного опыления между видами.

Устойчивая к гербициду ГМ соя оказалась перспективной моделью для изучения потенциального риска интрогрессии ГМ вставки в популяции диких родичей. Культурная соя (Glycine max (L.) Merr.) является факультативным перекрёстником — вероятность перекрёстного опыления варьирует от 0 до 3 % (Kiang et а!., 1992; Nakayama and Yamaguchi, 2002; Dorokhov et al., 2004), что позволяет проводить эксперименты в естественных условиях. Кроме того, ГМ соя, используемая в экспериментах и обладающая устойчивостью к гербициду, в значительной мере облегчает идентификацию межвидовых гибридов.

Для проведения оценки потенциального риска передачи признака устойчивости к гербициду в популяцию дикой сои в условиях Дальневосточного региона был осуществлён поиск репрезентативной популяции G. soja Siebold et Zucc., которая могла бы быть использована для этих целей.

Анализируя генетическую структуру популяций дикой сои, учитывали тот факт, что юг российского Дальнего Востока (Амурская область, Приморский и Хабаровский край) территориально входит в Китайско-Японский центр происхождения культурных растений (Вавилов, 1926) и является центром генетического разнообразия G. soja. Контрастность местных агроклиматических условий является одной из причин высокого генетического разнообразия дальневосточных форм дикой сои (Седова, 1989; Сеферова, 2006). Поэтому предстояло выявить наиболее репрезентативную популяцию, обладающую наибольшим генетическим полиморфизмом.

Учитывая генетическое родство видов, выделяемых в подроде Soja, для изучения внутривидового и межвидового полиморфизма были выбраны методы RAPD и ISSR-анализа. Для изучения генетического разнообразия дикой сои с помощью RAPD-анализа необходимо было подобрать дизайн праймеров, оптимизировать условия ПЦР, выбрать группу праймеров наиболее эффективных для изучения генетического полиморфизма в подроде Soja рода Glycine.

Данная работа направлена на развитие новых методических подходов и их использование в изучении биобезопасности ГМ растений — важного этапа при внедрении достижений современной биотехнологии в экономику страны. Исследования проводились в соответствии с законом «О генно-инженерной деятельности», разрабатывались научно-методические подходы и рекомендации для применения ГМ растений в открытых системах и проведения контроля их био безопасности. Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось исследование генетической структуры популяций дикой сои на юге Дальнего Востока России в контексте изучения потенциального риска использования ГМ растений в центрах происхождения и разнообразия их дикорастущих родичей. В соответствии с данной целью поставлены следующие задачи:

1. Отработать методические подходы для генотипирования и выявления внутривидового полиморфизма растений рода Glycine подрода Soja с использованием высокоэффективных ISSR и RAPD-праймеров и оптимизированных условий проведения ПНР.

2. Изучить генетическую структуру популяции G. soja, произрастающей на Приханкайской равнине. Оценить возможность использования её в качестве репрезентативной при проведении экспериментов по изучению переноса генов от культурной к дикой сое.

3. Охарактеризовать степень генетической дифференциации популяций G. soja в антропогенных и естественных ландшафтах, исходя из того, что популяции дикой сои, произрастающие в антропогенных ландшафтах, являются первичными потенциальными акцепторами ГМ вставки.

4. Изучить филогенетические взаимоотношения в подроде Soja рода Glycine, используя ISSR и RAPD-анализ.

5. Выявить уникальные фрагменты ДНК, характерные для G. max, G. soja и G. gracilis, необходимые для надёжной идентификации видов и межвидовых гибридов.

6. Провести первичный скрининг присутствия ГМ сои (трансформационное событие GTS 40-3-2) в земледельческом районе Приханкайской равнины юга российского Дальнего Востока.

7. Разработать рекомендации по минимизации риска «выхода» ГМ вставки в естественные популяции при внедрении ГМ сортов сои на территории Дальнего Востока России и предложить меры для сохранения генофонда дикой сои.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Биология дикой сои

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Недолужко, Артем Валерьевич

ВЫВОДЫ

1. Отработана технология генотипирования и выявления внутривидового полиморфизма растений рода Glycine подрода Soja с использованием высокоэффективных RAPD-праймеров. Проведена оптимизация условий ПЦР. По результатам анализа 255 генотипов с использованием 60 RAPD-праймеров предложен оптимальный набор из 20 праймеров для генотипирования растений подрода Soja.

2. Применение технологии RAPD-анализа позволило установить, что популяция G. soja Приханкайской равнины обладает высоким генетическим разнообразием (Не — 0.324), сопоставимым с генетическим разнообразием в центре происхождения вида. Это позволяет использовать её в качестве модельной популяции при проведении испытаний на биобезопасность ГМ сои.

3. Проведены сравнительные популяционно-генетические исследования антропогенных и естественных популяций дикой сои. Высокий уровень генетического разнообразия (Р95 - 86.48%) характерен для естественных популяций, в то время как полиморфность в антропогенных популяциях (субпопуляциях) понижена (Р95 - 52.42%).

4. Идентифицированы уникальные RAPD-фрагменты для G. soja - ОРХ-05450 и для G. max — ОРО-О5750, которые могут быть использованы в качестве маркеров при изучении гибридизационной способности видов подрода Soja.

5. С использованием RAPD и ISSR-маркеров установлена генетическая близость образцов G. soja, G. gracilis и сортов G. max.

6. Первичный скрининг показал отсутствие ГМ сои (трансформационное событие GTS 40-3-2) в земледельческом районе Приханкайской равнины.

7. В случае внедрения ГМ сои на территорию юга Дальнего Востока РФ, необходимо проводить мониторинг не только популяций G. soja антропогенных ландшафтов, но и зон соприкосновения популяций дикой сои, произрастающих в антропогенных и ненарушенных ландшафтах. Верховья рек должны стать охраняемыми территориями, где возможно проводить поиск выдающихся генотипов дикой сои для селекционно-генетических исследований. В случае внедрения ГМ сои в Россию, необходимо воздержаться от её выращивания в верховьях рек.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Недолужко, Артем Валерьевич, 2008 год

1. Абрамсон Н.И. Фитогеография: итоги, проблемы, перспективы // Вестник ВОГиС. 2007. Т. 11. №2. С. 307-331.

2. Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика: Пер. с англ. М.: Мир, 1988, Т. 3. 335 с.

3. Ала А.Я. Дикая уссурийская соя донор генов повышенного содержания белка в семенах // Генетика и селекция сельскохозяйственных культур. Новосибирск, 1978. Т. 26. С. 16-20.

4. Ала А.Я., Ала B.C. Использование зародышевой плазмы диких форм сои в селекции. Благовещенск, 2002. 44 с.

5. Ала А.Я., Тильба В.А. Соя: генетические методы селекции G. max (L.) Men", х G. soja, Благовещенск: ПКИ «Зея», 2005. 128 с.

6. Брик А.Ф., Сиволап Ю.М. Молекулярно-генетический полиморфизм сои, детектированный ПП ПЦР, SSRP и ISSR // Цитология и генетика. 2001. Т. 35. №5. С. 3-9.

7. Вавилов Н.И. Центры происхождения культурных растений. JL: тип. им. Гутгенберг, 1926. 248 с.

8. Глазко В.И. Генетически детерминированной полиморфизм ферментов у некоторых сортов сои {Glycine max) и дикой сои (Glycine soja) // Цитология и генетика. 2000. Т. 34. №. 2. С. 77-84.

9. Ю.Дорохов Б.Д., Игнатов А.Н., Серяпин А.А., Дорохов Д.Б. Изучение генетического разнообразия дикорастущей сои {(Glycine soja Siebold et

10. П.Дорохов Д.Б., Клоке Э. Быстрая и экономичная технология RAPD анализа растительных геномов // Генетика. 1996. Т. 33. С. 358 — 365.

11. Козак М.Ф. Эволюционная экология и морфология представителей двух видов сои (Glicine L.). Автореферат доктора биологических наук. Астрахань, 2005. 50 с.

12. Комаров B.JI., Клобукова-Алисова Е.Н. Определитель растений Дальневосточного края. Л,: Изд-во АН ССС, 1932. Т. 2. 1175 с.

13. Куренцова Г.Э. Растительность Приханкайской равнины и окружающих предгорий. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1962. 137 с.

14. Маак Р. Путешествие по долине р. Уссури. Санкт-Петербург, 1861. Т. 2. 344 с.

15. Майр Э. Зоологический вид и эволюция. М: Мир, 1968. 398 с.

16. Майр Э. Популяции, виды и эволюция. М: Мир, 1974. 460 с.

17. Москалейчик Ф.Ф. Современные представления о генетической динамике подразделённых популяций // Успехи современной биологии. 2003. Т. 123. №5. С. 445-466.

18. Научно-прикладной справочник по климату СССР. Серия 3. Многолетние данные. Приморский край. Ч. 1-6. Вып. 26. Л.: Гидрометеоиздат, 1988. 416 с.

19. Недолужко В.А., Денисов Н.И. Флора сосудистых растений острова Русский. Залив Петра Великого в Японском // Труды ботанических садов ДВО РАН. Владивосток.: Дальнаука, 2001. 98 с.

20. Недолужко А.В., Тихонов А.В., Дорохов Д.Б. Молекулярно-генетический анализ структуры популяций дикой сои (Glycine soja Sieb. & Zucc.) в антропогенных и естественных ландшафтах Приморского края // Генетика. 2008. Т. 44. № 8. С. 1084 1088.

21. Пробатова Н.С., Селедец В.П., Недолужко В.А., Павлова Н.С. Сосудистые растения островов залива Петра Великого в Японском море (Приморский край). Владивосток: Дальнаука, 1998. 116 с.

22. Седова Т.С. К итогам изучения коллекции дикорастущей уссурийской сои // Научно-технический бюллетень ВИР. Л.: ВИР, 1989. Вып. 194. С. 8 9.

23. Сеферова И.В. Распространение дикорастущей уссурийской сои (Glycine soja) на территории России и представленность ее в коллекции ВИР // Генетические ресурсы культурных растений. Международная научно-практическая конференция. СПб, 2001. 490 с.

24. Сеферова И.В. Географическая изменчивость Glycine soja на российской части ареала // Материалы международной научной конференции,посвященной 200-летию Казанской ботанической школы. Казань, 2006. С. 121 123.

25. Скворцов Б.В. Дикая и культурная соя Восточной Азии // Вестник Маньчжурии. Харбин, 1927. №9. С. 35-43.

26. Сунь Син-Дун Соя. М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1958. 248 с. Перевод с китайского.

27. Тупикова Г.П. Соя JI.: Издание Всесоюзного института прикладной ботаники и новых культур, 1929. 255 с.

28. Харкевич С.С. Сосудистые растения Советского Дальнего Востока. Л.: Наука, 1989. Т. 4. 378 с.

29. Хедрик Ф. Генетика популяций: пер. с англ. М.: Техносфера, 2003. 592 с.

30. Яковлев И.А., Клейншмит Й. Генетическая дифференциация дуба черешчатого (Querqus robur L.) в европейской части России на основе RAPD-маркеров // Генетика. 2002. Т. 38. №2. С. 207-215.

31. Aagaard J.E., Krutovskii K.V., Strauss S.H. RAPDs and allozymes exibit similar levels of diversity and differentiation among populations and races of Douglas-fir // Journal of Heredity. 1998. V. 81. P. 69 78.

32. Abe J., Hasegawa A., Fukushi 11., Mikami Т., Ohara M. Shimamoto Y. Introgression between wild and cultivated soybeans of Japan revealed by RFLP analysis of cMoroplast DNAs // Economic Botany. 1999. V. 53. P. 285 291.

33. Abe J., Xu D.H., Suzuki Y., Kanazawa A., Shimamoto Y., Soybean germplasm pools in Asia revealed by nuclear SSRs // Theoretical and Applied Genetics. 2003. V. 106. P. 445-453.

34. Ahmad S., Wahid A., Rasul E., Wahid A. Comparative morphological and physiological responses of green gram genotypes to salinity applied at different growth stages //Botanical Bulletin of Academia Sinica. 2005. V. 46. P. 135 — 142.

35. Broich S.L., Palmer R. A claster analysis of wild and domesticated soybean phenotypes // Euphytica. 1980. V. 29. P. 23 32.

36. Brovvn-Guedira G.L., Thompson J.A., Nelson R.L., Warburton M.L. Evaluation of genetic diversity of soybean introductions and North American ancestors using RAPD and SSR markers // Crop Science. 2000. V. 40. P. 815 823.

37. Caldwell B.E. ed. Soybeans: improvement, production and uses. Madison, Wisconsin: American Society of Agronomy, 1973. 681 p.

38. Cao Y., Zhang X., Bai J., Gong G. Distribution on the wild germplasm resources of main food crops in China // Acta Agronomica Sinica. 1999. V. 25 №4. P. 424 432.

39. Chen Y. Evaluation of diversity in Glycine soja and genetic relationships within the subgenus Soja // Dissertation of Doctor of Philosophy in Crop Science. Urbana, Illinois. 2002.

40. Chen Y., Nelson R.L. Genetic variation and relationships among cultivated, wild, and semiwild soybean // Crop Science. 2004a V. 44. P. 316 325.

41. Chen Y., Nelson R.L. Evaluation and classification of leaflet shape and size in wild soybean // Crop Science. 2004b. V. 44. P. 671-677.

42. Chiang Y. Genetic and quantitative variation in wild soybean (Glycine soja) populations // Dissertation Abstracts International. PhD University of New Hampshire. 1985.

43. Cho M.R. Won S.Y., Ryu T.H, Sohn S.I., Kim J.K., Baek H.J. Genetic Diversity and GM soybean in Korea (unpublished).

44. Dong Y., Sun H., Zhuang В., Zhao L., He M. The genetic diversity in annual wild soybean // VI World Soybean Resource Conference. USA, Chicago, 1999. P. 147-155.

45. Dong Y.S., Zhuang B.C., Zhao L.M., Sun H., Zhang M., He M. Y. The genetic diversity centers of annual wild soybean in China // Acta Agronomica Sinica.2000. V. 26. № 5. P. 522 527.

46. Dong Y.S., Zhuang B.C., Zhao L.M., Sun H., He M.Y. The genetic diversity of annual wild soybeans grown in China // Theoretical and Applied Genetics.2001. V. 103. P. 98 -103.

47. Dong Y.S, Zhao L.M., Liu В., Wang Z.W., Jin Z.Q., Sun H. The genetic diversity of cultivated soybean grown in China // Theoretical and Applied Genetics. 2004. V. 108. № 5. P. 931 936.

48. Doyle, J.J., Beachy R.N. Ribosomal gene variation in soy classification // Theoretical and Applied Genetics. 1985. V. 70. P. 369 376.58JDoyle J.J. 5S ribosomal gene variation in soybean {Glycine) and its progenitor

49. Theoretical and Applied Genetics. 1988. V. 75. P. 621 624. 59.Edwards K., Johnstone C., Thompson C.A Simple and rapid method for the preparation of plant genomic DNA for PCR analysis J J Nucleic Acids Research. 1991. V. 19. 6. P. 1349.

50. Ellstrand N.C., Prentice H.C., Hancock J.F. Gene flow and introgressiom. from domesticated plants into their wild relatives // Annual Review of Ecology Systematics. 1999. V. 30. P. 539 563.

51. Hrtl D.S., Fehr W.R. Agronomic performance of soybean genotype^ from Glycine max x Glycine soja crosses // Crop Science. 1985. V. 25. P. 589 — 592.

52. Forman R.T.T., Alexander L.E. Roads and their major ecological effects. Annual Review of Ecology and Systematics. 1998. Y. 29. P. 207 231.

53. Fujita R.y Ohara M., Okazaki K.? Shrmamoto Y. The extent of natural cross-pollination in wild soybean (Glycine soja) // Journal of Heredity. 1997. V. 38. P. 124-128.

54. Fukuda Y. Cytogenetical studies on the wild and cultivated Mancliurian soybean (Glycine L.) // Journal of Japanese Botany. 1933. V. 6. P. 489 — 506.

55. Hermann FJ. A revision of the genus Glycine and its immediate allies // US Department of Agriculture Technical Bulletin, 1962. Jfe 1268. P. 1 82.

56. Hirata Т., Abe J., Shimamoto Y. Genetic structure of the Japanese soybeanspopulation // Genetic Resources and Crop Evolution. 1999. V. 46. № 5. p. 441 -453.

57. Huang J., Rozelle S., Pray C., Wang Q. Plant Biotechnology in China // Science. 2002. V. 295. P. 674 677.

58. Hymowitz T. On the domestication of soybean // Economic Botany. 1970. V. 23. P. 408-423.

59. Hymowitz, Т., R.J. Singh. Taxonomy and speciation. In J.R. Wilcox (ed.) Soybeans: Improvement; production, and uses // American Society of Agronomy. 16. 2nd ed. ASA, Madison, WI, 1987. P. 23-48.

60. Hymowitz Т., Shurtleff W.R. Debunking soybean myths and legends in the historical and popular literature // Crop Science. 2005. V. 45. № 2. P. 473 -476.

61. Hyten D.L., Song Q., Zhu Y., Choi Ik-Y., Nelson R.L., Costa J.M., Specht J.E., Shoemaker R.C., Crcgan P.B. Impacts of genetic bottlenecks on soybean genome diversity // PNAS. 2006. V. 103. № 45. P. 16666 -16671.

62. Jin Y., He Т., Lu B.-R. Fine scale genetic structure in a wild soybean {Glycine soja) population and the implications for conservation 11 New Phytologist. 2003. V. 159. P. 513-519.

63. Jin Y., He Т., Lu B.-R. Genetic spatial clustering: significant implications for conservation of wild soybean (Glycine soja: Fabaceae) // Genetica. 2006. V. 128. P. 41-49.

64. Kanazawa A., Tozuka A., Akimoto Sh.-i., Abe J., Shimamoto Y. Phylogenetic relationships of the mitochondrial genomes in the genus Glycine subgenus Soja. Genes & Genetic Systems. 1998. Y. 73. P. 255 261.

65. Keen, N.L., Lyne ILL., Hymowitz T. Phytoalexin production as a chemosystematic parameter with Glycine ssp. // Biochemical Systematics and Ecology. 1986. V. 14. P. 481-486.

66. Keim P., Shoemaker R.C., Palmer R.G. Restriction fragment length polymorphism diversity in soybean // Theoretical and Applied Genetics. 1989. V. 77. P. 786-792.

67. SO.Kiang Y.T., Chiang Y.C., Kaizuma N. Genetic diversity in natural populations of wild soybean in Iwate Prefecture, Japan // Journal of Heredity. 1992. V. 93. P. 325-329.

68. SLKollipara, K.P., Singh R.J., Hymowitz T. PhylogeneJie and genomic relationships in the genus Glycine Willd. Based on sequences from the ITS region of nuclear rDNA // Genome. 1997. V. 40. P. 57-68.

69. Koyama M.L., Levesley A., Koebner R.M., Flowers T.J., Yeo A.R. Quantitative trait loci for component physiological traits determining salt tolerance in rice // Plant Physiology. 2001. V. 125. Аг« 1. P. 406 422.

70. Kuroda Y. Kaga A., Tomooka N., Vaughan D.A. Population genetic structure of Japanese wild soybean (Glycine soja) based on microsatellite variation // Molecular Ecology. 2006. V. 15. P. 959 974. *

71. Li J., Tao Y., Zheng S.Z., Zhou J.L. Isozymatic differentiation in local population of Glycine soja Sieb. et Zucc // Acta Botanica Sinica. 1995. Y. 37. P. 669 676 (in Chinese).

72. Li Z., Qiu L., Thompson J.A., Welsh M.M., Nelson RX. Molecular genetic analysis of U.S. and Chinese soybean ancestral lines // Crop Science. 2001. Y. 41. P. 1330-1336.

73. Li Z., Nelson R.L. Genetic diversity among soybean accessions from three countries measured by RAPDs // Сюр Science. 2001. V. 41. P. 1337 1347.

74. Lippe M. and Kowarik I. Long-distance dispersal of plants by vehicles as a driver of plant invasions // Conservation Biology. 2007. V. 21. № 4. P. 986 -996.

75. Liu В., Fujita Т., Yan Z.H., Sakamoto S„ Xu D., Abe J. QTL mapping of domestication-related traits in the soybean (Glycine max) И Annals of Botany. 2007. V. 100. № 5. p.i 12.

76. Lu B.-R. Conserving biodiversity of soybean gene pool in the biotechnology era // Plant Species Biology. 2004. V. 19. № 2. P. 115 125.

77. Manabe Т., Kashiwara Y., Yamada S., Harada J., Matsumura T. Environmental safety evaluation of transgenic soybean with glyphosate-tolerance in the environmentally isolated field // Breeding Science. 1996. V. 46. P. 261 (in Japanese).

78. Maughan P.J., Saghi Maroof М.Л., Buss G.R. Microsatellite and amplified sequence length polymorphisms in cultivated and wild soybean // Genome.1995. V. 38. P. 715 723.

79. Maughan P.J., Saghai Maroof M.A., Buss G.R., Huestis G.M. Amplified fragment length polymorphism (AFLP) in soybean: species diversity, inheritance, and near-isogenic line analysis // Theoretical and Applied Genetics.1996. V. 93. №3. P. 392-401.

80. Miller M.P. Tools for population genetic analyses (TFPGA) 1.3: A windows program for the analysis of allozyme and molecular population genetic data. Computer software distributed by author. 1997.

81. Nakavama Y., Yamaguchi H. Natural hybridization in wild soybean (Glycine max ssp. soja) by pollen flow from cultivated soybean (Glycine max ssp. max) in a designed population 11 Weed Biology and Management. 2002. V. 2. № 1. P. 189 —196.

82. Narvel J.M., Fehr W.R., Chu W.-C., Grant D., Shoemaker R.C. Simple sequence repeat diversity among soybean plant introductions and elite genotypes II Crop Science. 2000. V. 40. P. 1452 -1458.

83. Nap J.-P., Metz P. L. J., Escaler M., Conner A.J. The release of genetically modified crops environment // The Plant Journal. 2003. V. 33. P. 1-18.

84. Nedoluzhko A.V. and Dorokhov D.B. Study of the biosafety of genetically modified soybean in the center of its origin and diversity in the Far East of the Russian Federation // Cytology and Genetics. 2007. V. 3. P. 72-85.

85. Nei M. Genetic distance between populations // American Naturalist. 1972. V. 106. P. 283-92.

86. Nickrent D.L., Patrick J.A. The nuclear ribosomal DNA intergenic spacers of wild and cultivated soybean have low variation and cryptic subrepeats // Genome. 1998. V. 41. P. 183 192.

87. Nybom H. Comparison of different nuclear DNA markers for estimating intraspecific genetic diversity in plants // Molecular Ecology. 2004. V. 13. P. 1143-1155.

88. Ohara M., Shimamoto Y. Importance of genetic characterization and conservation of plant genetic resources: The breeding system and genetic diversity of wild soybean (Glycine soja) // Plant Species Biology. 2002. V. 17. P. 51-58.

89. Palmer R.G., Heer H.E. Agronomic characteristics and genetics of a chromosome interchange in soybean // Euphytica. 1984. Y. 33. P. 651 663.

90. Palmer, R.G., Newhouse K.E., Graybosch R.A., Delannay X. Chromosome structure of wild soybean (Glycine soja Sieb. & Zucc.) accessions from China and the Soviet Union // Journal of Heredity. 1987. V. 78. P. 243247.

91. Palmer R.G., Sun H., Zhao L.M. Genetics and cytology of chromosome inversions in soybean germplasm // Crop Science. 2000. V. 40. P. 683 687.

92. Powell W., Morgante M., Doyle J., McNicol J., Tingey S., Rafalski A. Genepool variation in genus Glycine subgenus Soja revealed by polymorphic nuclear and chloroplast microsatellites // Genetics. 1996a. V. 144. № 2. P. 703 -803.

93. Powell W., Morgante M., Andre C., Hanafey M., Vogel J., Tingey S., Rafalski A. The comparison of RFLP, RAPD, AFLP and SSR (microsatellite) markers for germplasm analysis // Molecular Breeding. 1996b. V. 2. № 3. P. 225 -238.

94. Raybould A. F., Gray A. J. Genetically modified crops and hybridization with wild relatives: A UK perspective // The Journal of Applied Ecology. 1993. V. 30. №2. P. 199-219.

95. Singh R.J., Hymowitz T. The genomic relationship between Glycine max (L.) Merr. and G. soja Sieb. and Zucc. as revealed by pachytene chromosome analysis // Theoretical and Applied Genetics. 1988. V. 76. P. 705 711.

96. Shands H.L. Plant genetic resources conservation: The role of the gene bank in delivering useful genetic materials to the research scientist // Journal of Heredity. 1990. V. 81. № 1. P. 7-10.

97. Shimamoto Y., Fukushi H., Abe J., Kanazawa A., Gai J., Gao Z., Xu D. RFLPs of chloroplast and mitochondrial DNA in wild soybean, Glycine soja, growing in China // Genetic Resources and Crop Evolution. 1998. V. 45. P. 255-261.

98. Shoemaker, R.C., Hatfield P.M., Palmer R.G., Atherly A.A. Chloroplast DNA variation and evolution in the genus Glycine soja I I Journal of Heredity. 1986. V. 77. P. 26 — 30.

99. Singh R.J., Hymowitz T. Tlie genomic relationships between Glycine max (L.) Merr. and G. soja Sieb. and Zucc. as revealed by pachytene chromosome analysis // Theoretical and Applied Genetics. 1988. V. 76. P. 705 -711.

100. Singh R.J., Hymowitz T. The genomic relationships among Glycine soja Sieb. and Zucc., G. max (L.) Merr. and "G. gracilis" Skvortz // Plant Breeding. 1989. V. 103. P. 171-173.

101. Singh RJ., Hymowitz T. Soybean genetic resources and crop improvement//Genome. 1999. V. 42. P. 605-616.

102. Stewart C.N. Jr., Halfhill M.D., Warwick S.l. Transgene introgression from genetically modified crops to their wild relatives // Nature Reviews Genetics. 2003. V. 4. № ю. P. 806-817.

103. Tanksley S.D., McCouch S.R. Seed banks and molecular maps: Unlocking genetic potential from the wild 11 Science. 1997. V. 277. P. 1063 1066.

104. Thompson J.A., Nelson R.L., Vodkin L.O. Identification of diverse soybean gcrmplasm using RAPD markers // Crop Science. 1998. V. 38. P. 1348 1355.

105. Thompson J.A., Nelson R.L. Core set of primers to evaluate genetic diversity in soybean // Crop Science. 1998. V. 38. P. 1356-1362.

106. Thseng F.S., Tsai S.J., Abe J., Wu S.T. Glycine formosana Hosokawa in Taiwan: pod morphology, allozyme, and DNA polymorphism // Botanical Bulletin of AcademiaSinica. 1999. V. 40. P. 251 -257.

107. Thseng F.S. Lin Т.К., Wu S.T. The relations of genus Glycine subgenus Soja and Glycine formosana Hosokawa collected from Taiwan. Revealed by RAPD analysis II Journal of Japanese Botany. 2000. V. 75. № 5. P. 270 279.

108. Van de Peer Y., De Wachter R. TREECON for Windows: a software package for the construction and drawing of evolutionary trees for the Microsoft Windows environment // Computer applications in the Biosciences. 1994. V. 10. P. 569-570.

109. Villalta L, Bernet G.P., Carbonell E.A., Asins M.J. Comparative QTL analysis of salinity tolerance in terms of fruit yield using two solanum populations of F7 lines // Theoretical and Applied Genetics. 2007. V. 114. № 6. P. 1001 1017.

110. Volis S., Yakubov В., Shulgina I., Ward D., Zur V., Mendlinger S. Tests for adaptive RAPD variation in population genetic structure of wild barley, Hordeum spontaneum Koch // Biological Journal of the Linnean Society. 2001. V. 74. № 3. P. 289-303

111. Wang J.-B., Wang С., Shi S.-H., Zhong Y. ITS regions in diploids of Aegilops (Poaceae) and their pliylogenetic implications // Hereditas. 2000. V. 132. № 3. P. 209-213.

112. Wang K.-J., Takahata Y. A preliminary comparative evaluation of genetic diversity between Chinese and Japanese wild soybean (Glycine soja) germplasm pools using SSR markers // Genetic Resources and Crop Evolution. 2007. V. 54. № 1. P. 157-165.

113. Wei W., Zhong M., Wang H.-X.r Yun R., Hu Z.-A., Qian Y.-Q. Restriction endonuclease digestion of amplification products generated by RAPD technique in a population of Glycine soja И Acta Botanica Sinica. 1998. V. 40. № 5. P. 412 416 (in Chinese).

114. Williams L.F. Inheritance in a species cross in soybeans // Genetics. 1948. V. 33. P. 131-132.

115. Wolfenbarger LI., Phifer P.R. The ecological risks and benefits of genetically engineered plants // Science. 2000. v. 290. p. 2088 -2093.

116. Wu XL., He C.Y., Chen S. Y., Zhuang B.C., Wang K.J., Wang X.C. Pliylogenetic analysis of interspecies in genus Glycine through SSR markers // Acta Genetica Sinica. 2001. V. 28. №» 4. P. 359 366.

117. Xu B. A decade study of Chinese wild soybean (Glycine soja) // Jilin Agricultural Sciences. 1989. V. 39. № i. p. 5 12.

118. Xu D.H, Abe J., Gai J.Y., Shimamoto Y. Diversity of chloroplast DNA SSRs in wild and cultivated soybeans: evidence for multiple origins of cultivated soybean // Theoretical and Applied Genetics. 2002. V. 105. P. 645 653.

119. Xu D.H., Gai J.Y. Genetic diversity of wild and cultivated soybeans growing in China revealed by RAPD analysis // Plant Breeding. 2003. V. 122. № 6. P. 503 -506.

120. Xu H., Wang S., Xue D. Biodiversity conservation in China: Legislation, Plans and Measures // Biodiversity and Conservation. 1999. V. 8. № 6. P. 819 837.

121. Yeh F.C., Yang R.C., Boyle T. POPGENE. Microsoft Windows-based freeware for Population Genetic Analysis. Release 1.31. University of Alberta, Edmonton. 1999. Crp

122. Yu H. Genetic and morphological variation and differentiation of South Korean natural populations of wild soybean, Glycine soja Sieb. and Zucc. // Dissertation Abstracts International. University of New Hampshire, 1992

123. Yu H., Kiang Y.-T. Genetic variation in South Korean natural populations of wild soybean (Glycine soja) 11 Euphytica. 1993a. V. 68. № 3. P. 213 221.

124. Yu H., Kiang Y.-T. Inheritance and genetic linkage studies of isozymes in soybean // Journal of Heredity. 1993b. V. 84. № 6. P. 489 492.

125. Zeng Y., Wang J., Yang Z., Shen S., Wu L., Chen X., Meng J. The diversity and sustainable development of crop genetic resources in the Lancang River Valley // Genetic Resources and Crop Evolution. 2001. V. 48. № 3. P. 297 -306.

126. Zhang G.-Y., Guo Y., Chen S.-L., Chen S.-Y. RFLP tagging of a salt tolerance gene in rice // Plant Science. 1995. V. 110. № 2. P. 227 234.

127. Zhang К., Soliman K.M., Sapra V.T. Polymerase chain reaction detect polymorphisms and trait association in soybean // Biologia Plantarum. 1997. V. 40. №1. P. 43-53.

128. Zhao R., Cheng Z., Lu W., Lu B. Estimating genetic diversity and sampling strategy for a wild soybean {Glycine soja) population based on different molecular markers // Journal Chinese Science Bulletin. 2006. V. 51. № 10. P. 1219 -1227.

129. Zhu Т., Shi L. Doyle J.J. Keim P. A single nuclear locus phylogeny of soybean based on DNA sequence // Theoretical and Applied Genetics. 1995. V. 90. P. 991 -999.

130. Zhu W., Zhou Т., Zhong M., Lu B. Sampling strategy for wild soybean (Glycine soja) populations based on their genetic diversity and fine-scale spatial genetic structure // Frontiers of Biology in China. 2007. V. 2. № 4. P. 397 402.