Использование технологий ДНК-маркирования в селекционно-генетических исследованиях яблони тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат наук Ушакова, Яна Владимировна

• Ушакова, Яна Владимировна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Ушакова, Яна Владимировна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Значение яблони как плодовой культуры, основные задачи и направления

в современной селекции яблони

1.2. Парша яблони

1.3 Понятие молекулярного маркера и основные типы маркерных систем

1.4 Молекулярно-генетические методы в изучении устойчивости яблони к парше

1.5 Изучение генетического разнообразия яблони

1.6 Молекулярно-генетический полиморфизм гена самонесовместимости в пределах вида Malus domestica

2 УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Условия проведения и материал исследований

2.2 Молекулярные маркеры, использованные в работе

2.3 Методы исследований

2.4 Статистическая обработка данных

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3. 1 Апробация методов экстракции ДНК

3.2 Идентификация генов Vf и Vm у отечественных сортов и селекционных форм яблони

3.3 Совершенствование ДНК-маркерной идентификации гена Vf иммунитета яблони к парше

3.4 Молекулярно-генетическая идентификация аллелей гена самонесовместимости в сортах яблони

3.5 Исследование полиморфизма микросателлитных локусов сортов яблони отечественной селекции

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

2

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование технологий ДНК-маркирования в селекционно-генетических исследованиях яблони»

ВВЕДЕНИЕ

Применение ДНК-технологий в селекции и генетике сельскохозяйственных культур позволяет значительно расширить область научных исследований: от изучения генетического разнообразия и вопросов паспортизации сортов до защиты авторских прав селекционеров и продукции растениеводства от фальсификации, а также определение её качества и генетической чистоты.

Возможности ДНК-маркеров превосходят потенциал изоферментов и запасных белков. В связи с тем, что применение молекулярных маркеров не зависит от фенотипа растения, этапа вегетационного периода и их использование позволяет напрямую характеризовать генотип, они приобретают все большую ценность при оценке степени генетического разнообразия, а также в исследованиях, направленных на идентификацию генов, участвующих в детерминации хозяйственно-ценных признаков [Хавкин Э.Е., 1997]. Особенно актуально использование ДНК-маркеров при идентификации генов устойчивости к заболеваниям, т. к. это отменяет необходимость проведения

.фитопатологинеской-оценки.образцов--

Ввиду высокой вредоносности парши яблони, вызываемой грибным патогеном Venturia inaequalis (Cooke) G. Winter, актуально ускоренное создание сортов, иммунных к данному заболеванию. Решение этой задачи невозможно без глубоких знаний генетических основ устойчивости к парше. Особое значение здесь приобретает технология ДНК-маркирования, позволяющая проводить скрининг генетической плазмы яблони на наличие генов устойчивости на любом этапе селекционного процесса вне зависимости от фазы онтогенеза растений.

ДНК-маркеры могут быть использованы как для идентификации целевых генов, так и при изучении генетического разнообразия культурных растений. В этих целях могут быть эффективно использованы микросателлитные маркеры,

4

что обусловлено их локусспецифичностью и значительной аллельной изменчивостью [Хавкин Э.Е., 1997]. Чаще всего микросателлитные маркеры используют для дифференцировки растений внутри вида, идентификации сортов, составлении генетических карт и в маркерной селекции, а также в работах по изучению генетического разнообразия и паспортизации сортов культурных растений [Гостимский С.А., 1999].

Молекулярные ДНК-маркеры открывают большие перспективы для генетической паспортизации сортов яблони, детального картирования хромосом, изучения генетического разнообразия, определения родства на внутри- и межвидовом уровне и идентификации генов хозяйственно-ценных признаков в селекционном материале.

Степень разработанности темы

Вопросы по изучению эффективности селекционных программ создания устойчивых к парше сортов яблони, оценке уровня генетического полиморфизма генофонда яблони, а также определению ^-генотипов различных сортов яблони с применением молекулярно-генетических методов ДНК-маркирования нашли свое отражение в трудах VinatzerB.A., HemmatM., PatocchiA., BroothaertsW., AfunianM.R., LiebhardR., HegedüsA., Седова E.H., Супруна И.И., Ульяновской E.A., Г.А. Седышевой, З.М. Серова, ТокмаковаС.В., Шамшин, И.Н., Савельева Н.И. и других. В данных работах показано, что применение в генетических исследованиях методов, основанных на ДНК-маркировании, значительно повышает эффективность оценки растительного материала по многим интересующим хозяйственно-ценным признакам. Тем не менее, в данных работах не проводилась оценка генетического родства сортов яблони отечественной селекции из коллекции генетических ресурсов СКЗНИИСиВ с использованием полиморфизма микросателлитных маркеров наряду с молекулярно-генетической идентификацией аллелей S2, S3, S7, S10 гена самонесовместимости в отечественных районированных и перспективных сортах яблони.

Цель и задачи исследования

Цель исследований: разработка и совершенствование методологических подходов использования молекулярно-генетических методов оценки и отбора исходного материала яблони в селекционном процессе и комплексное изучение генофонда яблони коллекции генетических ресурсов ФГБНУ СКЗНИИСиВ с применением ДНК-маркерного анализа.

Для выполнения этой цели решаются следующие задачи:

- изучить генетическое разнообразие сортов яблони коллекции генетических ресурсов ФГБНУ СКЗНИИСиВ с использованием полиморфизма микросателлитных локусов ДНК в качестве маркерной системы;

-на основании данных анализа микросателлитных локусов ДНК составить молекулярно-генетические паспорта сортов яблони отечественной селекции с оценкой уровня общего генетического полиморфизма и степени их генетического родства;

- провести скрининг селекционного материала яблони, предоставляемого центром селекции ФГБНУ СКЗНИИСиВ с использованием ДНК-маркерного анализа для выявления образцов, несущих гены устойчивости к парше Vf и Ут\

- разработать ДНК-маркер для гена устойчивости яблони к парше V/ для получения ПЦР-продукта, специфичного для его доминантного аллеля, размером 100-150 пар нуклеотидов (п. н.);

- выполнить молекулярно-генетическую идентификацию аллелей 52, 53, 57, 810 гена самонесовместимости у отечественных сортов яблони с применением ДНК-маркерного анализа.

Научная новизна

В настоящей работе впервые выполнена оценка генетического родства сортов яблони отечественной селекции с использованием полиморфизма микросателлитных маркеров. На основании данных, полученных по

результатам анализа полиморфизма микросателлитных локусов, составлены ДНК-паспорта изученных сортов яблони.

Идентифицированы гены устойчивости к парше V/ и Ут с применением ДНК-маркерных технологий в сортах и селекционных формах яблони ФГБНУ СКЗНИИСиВ и ВНИИСПК.

Разработан молекулярный маркер к гену У/ на основании данных о его нуклеотидной последовательности с целью повышения перспективности и эффективности возможного применения мультиплексной ПЦР для одновременной идентификации гена У/ с генами устойчивости яблони к мучнистой росе.

Впервые проведена молекулярно-генетическая идентификация аллелей 52, 53, 57, Б10 гена самонесовместимости в отечественных районированных и перспективных сортах яблони.

На основании данных об аллельных комбинациях гена самонесовместимости определены группы совместимых и не совместимых при опылении сортов.

Практическая значимость исследования

Полученные с применением микросателлитного анализа данные о

„степени_генетического_родства—сортов—яблони—отечественной—еелекции-

востребованы в селекционном процессе и предназначены для улучшения качества гибридизации с целью получения максимального спектра изменчивости в гибридном потомстве.

Показана перспективность использования ДНК-маркирования для идентификации генов устойчивости к парше V/ и Ут, а также аллелей гена самонесовместимости у сортов и форм яблони отечественной и мировой селекции.

Идентифицированы доминантные аллели генов устойчивости яблони к парше V/ и Ут у сортов и элитных форм яблони селекции ФГБНУ СКЗНИИСиВ совместно с ВНИИСПК. Усовершенствованный ДНК-маркер гена V/ позволяет расширить возможность применения мультиплексной ПЦР при идентификации

7

данного гена устойчивости к парше в сочетании с другими генами хозяйственно-ценных признаков.

Информация об аллельном составе гена самонесовместимости позволит прогнозировать совместимость сортов при опылении, что даст возможность более эффективно формировать сортовые схемы садовых насаждений.

Методология и методы исследований

При планировании и проведении исследований в виде источников информации использовались научные статьи, доклады, книги производственной тематики, электронные ресурсы и другие материалы. При проведении исследований применялся системный подход. Теоретико-методологическую основу исследований составили методы планирования и проведения опытов, лабораторные исследования с применением системного подхода.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Обоснование актуальности формирования ДНК-паспортов сортов яблони отечественной селекции с применением микросателлитного анализа.

2. Новые данные о степени генетического родства изученных сортов яблони.

3. Методические аспекты идентификации генов устойчивости к парше V/ и Ут. Выявление образцов, несущих доминантные аллели генов устойчивости-к. парше У/к Ут.

4. Обоснование данных об аллельных комбинациях гена самонесовместимости у изученных сортов яблони отечественной селекции и установление степени совместимости сортов согласно выявленному аллельному составу б'-гена.

5. Усовершенствование ДНК-маркера гена V/ устойчивости к парше, дополняющего методическую базу и позволяющего расширить область применения мультиплексной ПЦР в идентификации генов хозяйственно-ценных признаков яблони.

Степень достоверности и апробация результатов исследований

подтверждается значительным объёмом полученных экспериментальных данных,

8

выполненных с применением с применением современных методов молекулярной генетики, стандартных методов математического анализа и положительными результатами апробации, проведённой в лабораторных условиях.

Результаты исследований доложены на ежегодных заседаниях Ученого совета ГНУ СКЗНИИСиВ Россельхозакадемии в 2009-2011 гг., III и IV Всероссийских научно-практических конференциях молодых ученых «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» (Краснодар, 2009-2010 гг.), Расширенном заседании Учёного совета по проблемам интенсивного садоводства посвященного 100-летию со дня рождения Гавриила Владимировича Трусевича (Краснодар, 2010 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, в том числе 8 из них в изданиях из Перечня, рекомендованного ВАК Российской Федерации.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 136 странице машинописного текста, включающих 12 таблиц и 26 рисунков. Состоит из введения, трех глав, выводов, рекомендаций для практической селекции и двух приложений. Список использованной литературы включает 202 источника, в том числе 127 - зарубежных авторов.

_Благодарности.—Автор—выражает—большую—благодарность—канди-дату-

биологических наук Супруну Ивану Ивановичу за научное и методическое руководство, просмотр и редакцию рукописи, ценные замечания и предложения. Автор благодарит Седова E.H. (доктор сельскохозяйственных наук, профессор, академик РАН), Ульяновскую Е.В. (доктор биологических наук), Артюх С.Н. (кандидат сельскохозяйственных наук), Ефимову И.Л. (научный сотрудник лаборатории питомниководства) за предоставление селекционного растительного материала для проведения исследований и неоценимую помощь в обсуждении их результатов, а также Токмакова C.B. (кандидат биологических наук), Сундыреву М.А. (кандидат сельскохозяйственных наук) и Якубу Ю.Ф. (кандидат технических наук) за просмотр и обсуждение рукописи.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Значение яблони как плодовой культуры, основные задачи и направления в современной селекции яблони

Одно из ведущих мест среди плодовых культур в России, благодаря биологическим и хозяйственным качествам, принадлежит яблоне, занимающей более 60% всей площади садов. Центром происхождения яблони считается Восточная Азия. Дикорастущий предок окультуренных сортов яблони - это яблоня Сиверса (Malus sieversii), произрастающая в Средней Азии [Christopher M.R. et al., 2009].

Широкое распространение культуры яблони обусловлено большим потребительским спросом на ее диетические плоды, богатые витаминами, легко усвояемыми аминокислотами, сахарами, азотистыми и другими биологически активными веществами. Кроме того, плоды яблони ценятся за их профилактические и лечебные свойства, а также возможность использования их как в свежем, так и в переработанном виде круглый год [Куликов И.М. и др., 2006].

По Северо-Кавказскому региону в Госреестр РФ селекционных достижений, допущенных к использованию, на 2013 год включено 64 сорта яблони различных сроков созревания, из которых 67 % - сорта местной селекции, полученные в СКЗНИИСиВ (24 сорта), Крымской ОСС (6 сортов), Дагестанской СОС (7 сортов), Россошанской ЗОСС (4 сорта), ВНИИЦиСК (1 сорт), КубГАУ (1 сорт). В целом в настоящее время сортимент яблони расширен на 36 %, ввиду увеличения числа допущенных сортов с 47 до 64. В больше й степени расширен летний сортимент (на 80 %), в меньшей степени - осенний и зимний (на 14 и 30 % соответственно) [Артюх С.Н. и др., 2001; Егоров Е.А., 2013].

Анализ сложившегося сортимента яблони показывает, что несмотря на существенное обновление достаточно обширный сортовой состав яблони не отвечает полностью требованиям современного промышленного интенсивного

10

садоводства, не обладает в полной мере необходимым сочетанием высокой адаптивности к абио- и биотическим стрессорам среды с показателями на максимально возможном уровне продуктивности и качества плодов [Артюх С.Н. и др., 1999].

С целью дальнейшего совершенствования сортимента яблони современные программы селекционных исследований включают такие задачи как разработка системы производства, переработки и хранения получаемой продукции с использованием высокопродуктивных сортов, оздоровленного посадочного материала и новой техники [Ульяновская Е.В. и др., 2013]. В связи с этим возникает необходимость точного и быстрого выявления закономерностей наследования важнейших хозяйственно-ценных признаков яблони: устойчивости к неблагоприятным абиотическим и биотическим факторам, особенностей роста, структурных признаков урожайности, товарных и потребительских качеств плодов, а также экспрессивности идентифицированных генов и характера их взаимодействия [Ульяновская Е.В. и др., 2011].

Особую ценность приобретают исследования, направленные на оценку генетического разнообразия, паспортизацию и классификацию сортов, картирование и определение физической природы генов и генетического мониторинга в селекции и генетике яблони [Shulaev V. et al., 2008 ].

Вовлечение в селекционный процесс современных молекулярно-генетических методов ДНК-маркирования необходимо для эффективной модернизации селекционного процесса и, соответственно, совершенствования отечественного сортимента яблони [Ульяновская Е.В. и др., 2011].

1.2. Парша яблони

Одной из главных проблем современной селекции яблони считается создание сортов, обладающих наряду с комплексом ценных хозяйственно-биологических признаков устойчивостью к патогенам. Самым распространенным на юге России и вредоносным заболеванием яблони

11

является парша [Ефимова И.Л. и др., 2010]. Снижение урожая яблок в нашей стране от поражения паршой составляет не менее 40 %, а в годы массового распространения теряется почти весь урожай [Седов Е.Н. и др., 1983]. Применение химических методов защиты в садах против этой болезни способствует постепенному возникновению резистентности патогенов к используемым препаратам. Возникает необходимость использования новых фунгицидов широкого спектра действия, что приводит не только к загрязнению окружающей среды, уничтожению полезной энтомофауны, но и возникновению угрозы здоровью людей [Смольякова В.М. и др., 2005]. Возделывание устойчивых к парше сортов яблони в комплексе с интегрированной защитой против других вредителей и болезней позволяет снизить затраты на фунгициды почти на 70 % и получать относительно чистую и безопасную для здоровья человека продукцию [Седов Е.Н., 1992].

Одним из первых селекцию иммунных к парше сортов яблони начал американский ученый L.F. Hough в сороковых годах двадцатого века. В штате Иллинойс была скрещена форма яблони М. Floribunda 821 (с геном Vf иммунитета к парше) с сортом Ром Бьюти. Среди полученных сеянцев было равное количество иммунных и восприимчивых к парше. Среди иммунных сеянцев было отобрано два, ставших исходным материалом для широкомасштабной селекционной программы (PRI), развернутой в США, Канаде, Франции и Великобритании [Седов Е.Н., 2007]. В настоящее время в мире создано более 155 сортов с моногенной устойчивостью к парше, которые почти не требуют применения фунгицидов [Савельев Н.И., 2008; Савельева Н.Н. и др., 2008].

В России селекция на олигогенную устойчивость к парше начата в начале 70-х годов на основе использования главных генов устойчивости Vf Vm и Vr [Ищенко Л.А., 1987]. С 1975 г. во ВНИИСПК под руководством академика Е.Н. Седова проводится работа по селекции сортов яблони, обладающих иммунитетом к парше, с использованием как метода раннего отбора на искусственных инфекционных фонах и приемов ускорения плодоношения

12

гибридных сеянцев, так и новых методик селекции [Ульяновская Е.В.'и др., 2013]. Особый интерес представляет совмещение олигогенной и полигенной устойчивости к парше, а также двух и более главных генов устойчивости в одном генотипе яблони [Седов Е.Н. и др., 1987].

В настоящее время во ВНИИСПК и ФГБНУ СКЗНИИСиВ ведется совместная селекционная программа по созданию сортов яблони с более стабильной, долговременной устойчивостью яблони к парше с применением молекулярно-генетических методов ДНК-маркирования, позволяющих проводить исследования на высоком научно-методическом уровне [Супрун И.И. и др., 2009, 2011; Ульяновская Е.В. и др., 2011, 2012].

Постоянное наблюдение за многообразием форм и непрерывной изменчивостью возбудителя парши яблони является необходимым условием для продуктивной селекции устойчивых к данному заболеванию сортов яблони [Ефимова И.Л. и др., 2012].

Возбудитель парши яблони Venturia inaequalis (Cooke) G. Winter относится к классу Сумчатые грибы (Ascomycetes), подклассу Локулоаскомицеты (Loculoascomycetidae), порядку Дотидеальные (Dothideales), семейству Вентуриевые (Venturiaceae), роду Venturia [Барсукова О.Н., 1985].

_С помощью стандартных сортов-дифференциатор_ов_яблони-Выявлено-1-9-

генных пар (локусов), контролирующих патогенность клонов гриба [Williams Е.В. et al., 1969]. Каждая пара состоит из аллели вирулентности Р+ (Р1+ , Р2+ и т. д.), вызывающий на том или ином сорте (или группе сортов) обильное спороношение гриба (реакция «поражение») и аллели авирулентности Р (PI, Р2 и т. д.), вызывающей на том же сорте (сортах) хлоротические и некротические пятна без спороношения или с очень слабым спороношением патогенна (реакция «пятно»). Каждый клон (физиологическая раса, биотип) гриба отличается своим, только ему присущим набором аллелей вирулентности и авирулентности [Бондарь Л.В., 1981]. Частота встречаемости тех или иных генов вирулентности и определяет различия по вирулентности популяций и биотипов гриба [Седов Е.Н. и др., 1983].

13

В настоящее время известны восемь рас Venturia inaequalis, наиболее изучены первые пять. Самой распространенной расой, поражающей даже Malus silvestris и Malus floribunda, является раса 1. Устойчивостью к ней обладают некоторые мелкоплодные виды и сорта Сибири, Японии и Северо-Восточного Китая. Согласно исследованиям американских ученых [Barnes Е.Н. et al., 1961; Kuc J. et al., 1959; MacLennan D.H. et al., 1963] расы 2-4, кроме специфичных для них генов вирулентности, обладают также генами вирулентности расы 1 по отношению к промышленным сортам яблони. Отличаются между собой популяции возбудителя парши в европейской и азиатской частях России по своей специализации и вирулентности [Гешеле Э.Э., 1958; Казенас Л.Д., 1953; Матвеева В.К. и др., 1965; Сахарова Л.П., 1968; Хохрякова Т.М., 1978]. В начале 1990-х годов в Германии и Франции идентифицирована шестая раса парши, которая способна преодолевать устойчивость у сортов и форм яблони с геном Vf\Dmt\ С.Е. et al., 2003; Lespinasse V., 1994]. Выявление седьмой расы парши позволило идентифицировать ген Vg, контролирующий устойчивость к ней у сорта яблони Голден Делишес [Benaouf G. et al., 2000]. Восьмая раса парши была описана в 2005 г. V.G.M. Bus с соавторами [Bus V.G.M. et al., 2005].

Различают полигенную (относительную, частичную)_устойчивость,

яблони к парше, степень которой может изменяться под влиянием условий внешней среды, и олигогенную или невосприимчивость (иммунитет). Иммунитет определяется одним или несколькими главными генами и присущ некоторым мелкоплодным клонам диких видов, а также созданным на их основе полукультурным и культурным сортам [Ульяновская Е.В. и др., 2013]. При скрещивании двух форм, одна из которых имеет данный ген в отличие от другой, расщепление идет по типу анализирующего скрещивания, и отношение устойчивых сеянцев к восприимчивым составляет 1:1, следовательно, около 50 % полученного потомства является устойчивым [Седов Е.Н., 1992; Durel С.Е. et al., 2004].

Выявление источников устойчивости обычно предшествует селекционной работе на улучшение этого признака. На начальном этапе изучения признака устойчивости к парше было идентифицировано шесть основных генов, обуславливающих ммунитет яблони к парше: Vf Vm, Vb, Vbj, Vr, Va [Козловская З.А. и др., 2005].

В дальнейшем, с применением методов молекулярного ДНК-маркирования, идентифицировали еще ряд генов, кроме указанных: Vd (источник гена - сорт Durello di Forli); Vh2, Vh4 - источник гена образец R-12740-7А, относящийся к виду Malus pimula; Vh8 - источник гена образец W193B, относящийся к виду М. silvestris [Lespinasse V., 1994].

Сорта с геном Vf иммунитета к парше имеют сложное генетическое происхождение. Большинство сортов с геном Vf было получено на основе двух потомков F2 от М. floribunda 821: 26829-2-2 и 26830-2. В свою очередь, эти сеянцы выделены в потомстве от скрещивания двух сибсов: 9433-2-2 (Ром Бьюти х м floribunda 821) х 9433-2-8 (Ром Бьюти х М. floribunda 821) [Ульяновская Е.В. и др., 2013]. К настоящему времени от клона М. floribunda 821 отечественными и зарубежными селекционерами получено более 155 сортов яблони с олигогенной устойчивостью к парше, причем доля тех, у

которых устойчивость контролируется геном Vf. превышает_85—%_[Савельев-

Н.И., 1998]. Согласно недавним исследованиям у клона М. floribunda 821, кроме гена Vf имеется второй независимый доминантный ген Vfh, который индуцирует гиперчувствительную реакцию [Benaouf G. et al., 2000]. Это согласуется с данными, которые свидетельствуют, что устойчивость к парше у М. floribunda 821 определяется не одним геном Vf как считалось ранее, а имеет более сложную природу. Следовательно, представление, что устойчивость, контролируемая геном Vf будет стабильной, нуждается в переоценке [Жданов В.В. и др., 1995].

В зарубежных селекционных программах для гибридизации широко использовались сорта, несушие ген Vf это: Прима, Присцилла, Флорина, Фридом, в несколько меньшей степени - Редфри, СО-ОР 17, Либерти, Голдраш,

15

Интерпрайс, ВМ41497 [Laurens F., 1999]. Сорта Муррей и Раувилл получены на основе доноров с геном Vm, Нова Эсигро, Новамак, Новаспай несут ген Vr [Ульяновская Е.В. и др., 2013].

В качестве донора гена Va часто используют формы сорта Антоновка и производные от них сеянцы, в потомстве которых выход высокоустойчивых к парше сеянцев составляет около 11 % [Браун А.Д., 1981; Williams E.B. et al., 1969]. Из восприимчивых родителей привлекают для скрещиваний сорта с высоким качеством плодов и другими хозяйственно-ценными признаками. В Институте садоводства и селекции в городе Дрезден-Пильнице (Германия) от скрещивания сортов Jongrimes и Антоновка выведен сорт Reglindis с генетической устойчивостью к парше. В потомствах от гибридизации сортов яблони домашней и доноров с геном Vr (производные M. pumila) получены сорта Realka, Releía, Remura и Reha [Fischer С., 2000].

Большой проблемой в селекции яблони на устойчивость к парше является стабильность и долговременность этого признака [Браун А.Д., 1981; Седов E.H. и др., 1985; Daeton D. et al., 1983; Williams E.B. et al., 1969]. От степени устойчивости родителей зависит поражаемость потомства. Хотя подбор родителей по фенотипу устойчивости и имеет значение, большое влияние на разнообразие потомства оказывают условия внешней среды,_поэ_тому_подбор. родителей по фенотипу должен быть дополнен оценкой родителей по потомству [Жданов В.В. и др., 1991].

Сорта яблони могут терять устойчивость к парше, в результате чего учащаются случаи массового заболевания паршой. Причины потери устойчивости сортов могут быть различны, но первостепенное значение имеет изменчивость патогена и условий внешней среды, а также самого хозяина [Gessler С. et al., 2006]. Многие относительно устойчивые культурные сорта яблони становятся восприимчивыми при интродукции их в другую зону, где имеются вирулентные для них клоны гриба. Чаще поражаются паршой сорта с ослабленными под влиянием стрессовых факторов внешней среды защитными реакциями [Седов E.H. и др., 1982]. Редко встречающиеся или новые расы

16

патогена обычно не приносят большого ущерба до тех пор, пока сорт не занимает больших ареалов. Но по мере роста площадей под сортом происходит постепенное их накопление и широкое распространение [Савельев Н.И., 2002].

Рекомендуется два основных пути создания сортов с более стабильным долговременным иммунитетом: 1) совмещение олигогенной (вертикальной) и полигенной (горизонтальной) устойчивости; 2) комбинирование главных генов устойчивости. Закладка садов сортами с различными типами устойчивости также будет способствовать снижению риска поражения паршой (на 60-80%) [Браун А.Д., 1981; Жданов В.В. и др., 1991; Daeton D. et al., 1983].

На современном этапе развития селекционных технологий, благодаря успехам молекулярной биологии, развитию методов молекулярного ДНК-маркирования и накоплению экспериментальных данных в области молекулярно-генетических исследований, появилась технология так называемой маркерной селекции (marker assisted selection - MAS). Данная технология позволяет проводить идентификацию и отбор генотипов, несущих целевые гены, минуя фенотипическую оценку, основываясь лишь на данных ДНК-анализа [Ульяновская Е.В. и др., 2012]. Таким образом, наиболее перспективным и экономически оправданным подходом в селекционной работе по созданию устойчивых к парше сортов яблони является_с.онетание_как-оригинальных и усовершенствованных традиционных методов оценки селекционного материала, так и современных молекулярно-генетических методов [Ульяновская Е.В. и др., 2011].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Ушакова, Яна Владимировна, 2015 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Артюх, С.Н. Сорта яблони / С.Н. Артюх, И.Л. Ефимова // Сад и виноградник. Краснодар. - 1998. - С. 103-112.

2. Артюх, С.Н. Принципиальные подходы к развитию плодоводства нового века - проблемы и задачи / С.Н. Артюх, А.Н. Фисенко, И.А. Драгавцева, Г.Н. Теренко, В.П. Попова // Проблемы и перспективы стабилизации и развития садоводства и виноградарства: Материалы междунар. науч.-практ. конф. «Садоводство и виноградарство 21 века». Краснодар. - 1999. - С. 105-110.

3. Артюх, С.Н. Проблемы селекции садовых растений на юге России / С.Н. Артюх, А.П. Луговской, Л.И. Дутова // Формы и методы научного и организационно-экономического обеспечения отраслей в условиях рыночных отношений (садоводство и виноградарство). Краснодар. - 2001. - С. 134-140.

4. Ульяновкая, Е.В. Атлас лучших сортов плодовых и ягодных культур Краснодарского края. Яблоня / Е.В. Ульяновкая. - ГНУ СКЗНИИСиВ Россельхозакадемии. - 2008. - 104 с.

5. Барсукова, О.Н. Расовый состав Venturia inaequalis (Cke.) Wint. на Кавказе / О.Н. Барсукова // Микология и фитопатология. - 1985. - Т. 19. Вып. 6. - С.499-502.

6. Бондарь, Л.В. Расовый состав возбудителя парши яблони в Белоруссии и селекции яблони на иммунитет к парше / Л.В. Бондарь // Селекция яблони в СССР. Орел. - 1981. - С. 89-95.

7. Браун, А.Д. Яблоня. Селекция плодовых растений / А.Д. Браун. - М.: Колос, 1981.-С. 13-61.

8. Гешеле, Э.Э. К биологии возбудителя парши яблони в условиях Сибири / Э.Э. Гешеле // Труды Омского с.-х. института им. С.М. Кирова. -1958. - Т. 22. Вып. 2. - С. 117-122.

9. Гостимский, С.А. Использование молекулярных маркеров для анализа генома растений / С.А. Гостимский, З.Г. Кокаева, В.К. Боброва // Генетика. -1999.-Т. 35. - С.1538-1549.

10. Гучетль, С.З. Применение RAPD-ПЦР маркеров для дифференциации физиологических рас Plasmopara halstedii (Farl.) Berl. et de Toni, поражающих подсолнечник в Краснодарском крае / С.З. Гучетль, Т.А. Чедюстникова, М.В. Ивебор, Т.С. Антонова, Н.М. Арасланова, С.А. Рамазанова // Сельскохозяйственная биология. - 2008. - № 5. - С. 82-87.

11. Егоров, Е.А. Программа Северо-Кавказского центра по селекции плодовых, ягодных, цветочно-декоративных культур и винограда на период до 2030 года / Е.А. Егоров. - Краснодар: ГНУ СКЗНИИСиВ, 2013. - 202 с. '

12. Ефимова, И.Л. Оценка самоплодности сортов яблони. Селекционно-генетическое совершенствование породно-сортового состава садовых культур на Северном Кавказе / И.Л. Ефимова; под ред. Э.В. Макарова. - Краснодар, 2005.-С. 102-104.

13. Ефимова, И.Л. Устойчивость сортов яблони к грибным заболеваниям на юге России / И.Л. Ефимова, Г.В. Якуба // Плодоводство и ягодоводство России. - 2010. - Т.24. - №2. - С 403-409.

14. Ефимова, И.Л., Якуба Г.В. Поражаемость сортов яблони грибными болезнями в условиях Краснодарского края // Плодоводство и ягодоводство России. - 2012. - Т.30. - С 352-358.

15. Жданов, В.В. Генетико-иммунологические основы, результаты и перспективы селекции яблони на устойчивость к болезням и вредителям /В.В. Жданов, E.H. Седов. // Юбилейный сб.- Орел: ВНИИСПК. - 1995. - С. 88-101.

16. Жданов, В.В. Селекция яблони на устойчивость к парше / В.В. Жданов, E.H. Седов. - Тула: Приок. кн. изд-во, 1991 - 207 с.

17. Ищенко, Л.А. Достижения и проблемы иммунитета плодовых и ягодных культур / Л.А. Ищенко // Генетические основы селекции на иммунитет плодовых, ягодных культур и винограда. Мичуринск. - 1987. - С. 3-14.

18. Казенас, JI.Д. Болезни плодовых и ягодных культур Алма-Атинской зоны плодоводства / Л.Д. Казенас // Труды республиканской станции защиты растений.- 1953.-Т. 1.-С. 179-257.

19. Козловская, З.А. Сравнительная оценка потенциала устойчивости к парше сортов и гибридов яблони в эпифитотийный год / З.А. Козловская, С.А. Ярмолич, Г.М. Марудо // Плодоводство. Самохваловичи. - 2005. - Т. 17. - 4.1. -С. 30-34.

20. Конарев, В.Г. Белки как генетические маркеры растений / В.Г. Конарев. - М.: Колос, 1983. - 320 с.

21. Куликов, И.М. Инновационные направления в производстве сертифицированного посадочного материала плодовых и ягодных культур / И.М. Куликов // Плодоводство и ягодоводство России. - 2008. - Т. 18. - С. 3-7.

22. Куликов, И.М. Производство плодов и ягод в мире / И.М. Куликов, О.З. Метлицкий // Плодоводство и ягодоводство в России. - 2006. - Т.7. -С. 99-112.

23. Льюин, Б. Гены / Б. Льюин. - М.: Мир, 1987. - 544 с.

24. Матвеева, В.К. Парша яблони в Алма-Атинской области / В.К. Матвеева, Л.П. Сахарова // Вестник сельскохозяйственной науки. Алма-Ата. -1965,-№7.-С. 122-124.

25. Остерман, Л.А. Методы исследования нуклеиновых кислот / Л.А. Остерман. -М.: Наука, 1981.-288 с.

26. Пономаренко, В.В. Генетический потенциал видов рода Malus Mill, устойчивости к парше /В.В. Пономаренко // Совершенствование сортимента и технологий возделывания плодовых и ягодных культур: Материалы международной научно-практич. конф. Орел. - 2010. — С. 56-78.

27. Савельев, Н.И. Генетические основы селекции яблони / Н.И. Савельев. - Мичуринск: Изд-во ВНИИГиСПР им. Мичурирна, 1998. - 304 с.

28. Савельев, Н.И. Достижения по селекции сортов яблони с генетической устойчивостью к парше / Н.И. Савельев // Современные тенденции развития промышленного садоводства. Барнаул. - 2008. - С. 130-135.

110

29. Савельев, Н.И. Яблоня. Создание новых сортов и доноров ценных признаков на основе идентификации генов плодовых растений / под ред. Н.И. Савельева. - Мичуринск: ВНИИГИСПР им. И.В. Мичурина, 2002. - 20 с.

30. Савельева, H.H. Экономическая эффективность иммунных к парше сортов яблони в период полного плодоношения / H.H. Савельева, Н.И. Савельев // Оптимизация технолого-экономических параметров структуры агроценозов и регламентов возделывания плодовых культур и винограда. Краснодар: СКЗНИИСиВ. - 2008. - Т.1. - С.60-64.

31. Сахарова, Л.П. Биологические особенности двух рас возбудителя парши яблони на юго-востоке Казахстана / Л.П. Сахарова // Вестник сельскохозяйственной науки. - 1968. - №3. - С. 117-122.

32. Сиволап, Ю.М. Использование продуктов полимеразной цепной реакции для картирования генома ячменя (Hordeum vulgare L.) / Ю.М. Сиволап, Р.Н. Календарь, В.П. Нецветаев // Генетика. - 1997. - Т. 33. - С. 53-60.

33. Седов, E.H. История, задачи, методы и результаты селекции яблони / E.H. Седов // Сельскохозяйственная биология. -2007. -№1. - С. 3-15.

34. Седов, E.H. Помология. Яблоня / E.H. Седов. - Орел: ВНИИСПК, 2005.-576 с.

35. Седов, E.H. Селекция семечковых культур на устойчивость к парше и мучнистой росе - приоритетное направление науки / E.H. Седов // Садоводство и виноградарство. - 1992. -№1. - С. 11-14

36. Седов, E.H. Селекция и агробиологическая оценка новых сортов яблони / E.H. Седов, М.А. Макаркина, З.М. Серова // Доклады РАСХН. - 2006. -№3. - С. 74-82.

37. Седов, E.H. Методика отбора устойчивых к парше сортов и сеянцев яблони на искусственных инфекционных фонах / E.H. Седов, В.В. Жданов. -М., 1985.-48 с.

38. Седов, E.H. Отбор иммунных к парше гибридов яблони на искусственном инфекционном фоне / E.H. Седов, В.В. Жданов // Микология и фитопатология. - 1987. - Т. 21. - Вып. 5. - С. 463-466.

39. Седов, E.H. Пути селекции яблони на стабильную устойчивость к парше / E.H. Седов, В.В. Жданов // Четвертый съезд Всесоюзного общества генетиков и селекционеров им. Н.И. Вавилова: Тезисы докл. Кишинев. - 1982. -С. 165-166.

40. Седов, E.H., Жданов В.В. Устойчивость яблони к парше (сорта и селекция) / E.H. Седов, В.В. Жданов. - Орел, 1983. - 113 с.

41. Смольякова, В.М. Элементы концепции экологизации защиты плодовых и ягодных культур от вредных организмов / В.М. Смольякова, JI.A. Пузанова, Г.В. Якуба, H.A. Холод // Основные итоги научных исследований. Краснодар. - 2005. - С. 108-111.

42. Созинов, A.A. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / A.A. Созинов. - М., 1985. - 245 с.

43. Суворова, Г.Н. Филогенетическое родство некоторых сортов, видов и гибридов рода Fagopyrum Mill., установленное RAPD-анализом / Г.Н. Суворова, X. Фунатсуки, Ф. Терами // Генетика. - 1999. - Т. 35. - С. 1659-1664.

44. Супрун, И.И. Генотипирование подвоев яблони отечественной селекции с использованием мультиплексного STR-анализа / И.И. Супрун, Я.И. Алексеев, О.П. Малюченко, A.B. Бабаков, Я.В. Ушакова // Садоводство и виноградарство. - 2012. -№4. - С. 20-23.

45. Супрун, И.И. Молекулярно-генетические аспекты самонесовместимости яблони [Электронный ресурс] / И.И. Супрун, И.В. Степанов, C.B. Токмаков // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университет. - 2012. №06 (80). -Режим доступа: http://ej.kubagro.ru/2012/06/pdf/26.pdf.

46. Супрун, И.И. Изучение аллельного разнообразия генов синтеза этилена Md-ACSl и Md-ACOl в отечественной генплазме яблони / И.И. Супрун, C.B. Токмаков // Вавиловский журнал генетики и селекции. — 2013. — Т. 17,-№2.-С. 298-302.

47. Супрун, И.И. Генотипирование сортов яблони российской селекции с использованием микросателлитных маркеров / И.И. Супрун, C.B. Токмаков,

О.П. Малюченко, Я.В. Ушакова, A.B. Бабаков // Известия ТСХА. - 2011. -Вып.6. - С. 162-166.

48. Супрун, И.И. Идентификация аллелей S2, S3, S5, S6 гена самонесовместимости у сортов черешни из коллекции СКЗНИИСиВ 1 И.И. Супрун, C.B. Токмаков, И.В. Степанов // Методологическое обеспечение селекции садовых культур и винограда на современном этапе. Краснодар. СКЗНИИСиВ. - Т. 1. - 2013. - С. 97-101.

49. Супрун, И.И. Генотипирование сортов яблони российской селекции с использованием микросателлитных маркеров / Супрун И.И., Токмаков C.B., Малюченко О.П., Ушакова Я.В., Бабаков A.B. // Известия ТСХН. - 2011. - Вып. 6.-С. 162-166.

50. Супрун, И.И. Разработка мультиплексных наборов SSR-маркеров для использования в изучении генетического разнообразия в пределах родов Malus, Prunus и Pyrus / И.И.Супрун, C.B. Токмаков, И.В. Степанов, И.М. Балапаноц // Метологическое обеспечение селекции садовых культур и винограда на современном этапе. Краснодар. ГНУ СКЗНИИСиВ. - 2013. - Том 1. - 282 с.

51. Супрун, И.И. Изучение аллельного полиморфизма гена самонесовместимости и цитологических особенностей опыления сортов яблони [Электронный ресурс] / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская // Плодоводство и виноградарство Юга России. - 2012. - № 13 (01). - Режим доступа: http ://j ournal .kubansad.ru/pdf/12/01 /02 .pdf.

52. Супрун, И.И. Использование молекулярно-генетических методов установления закономерностей наследования для выявления доноров значимых признаков яблони [Электронный ресурс] / И.И Супрун, Е.В. Ульяновская, E.H. Седов, Г.А. Седышева, З.М. Серова // Плодоводство и виноградарство Юга России. - 2012. - № 13 (01). - Режим доступа: http://journal.kubansad.rU/pdf/l 2/01/02.pdf.

53. Супрун, И.И. Методологические аспекты использования ДНК-маркирования в селекции яблони на устойчивость к парше / И.И. Супрун, Е.В.

Ульяновская, Я.В. Ушакова // Труды Кубанского государственного университета. - 2010. - №1(22). - С. 86-88.

54. Супрун, И.И. Использование методов ДНК-маркирования для идентификации аллелей гена самонесовместимости яблони / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова // Труды Кубанского государственного университета. - 2010. - №1 (22). - С. 57-59 .

55. Супрун, И.И. Перспективы использования ДНК-маркерной технологии для повышения эффективности селекции яблони / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова // Высокоточные технологии производства, хранения и переработки плодовой и ягодной продукции: Материалы научно-практич. конференции. Краснодар. - 2010. - С. 38-43.

56. Супрун, И.И. Селекционно-генетическое изучение российской генплазмы яблони с применением молекулярного ДНК-маркирования / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова // Нетрадиционное растениеводство. Селекция и генетика. Эниология. Экология и здоровье. Алушта, Украина. -2010.-С. 337-340.

57. Супрун, И.И. Молекулярно-генетическая идентификация аллелей гена самонесовместимости у сортов яблони отечественной селекции / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова, Е.Т. Ильницкая // Доклады РАСХН. — 2011.— №5.-С. 15-18.

58. Супрун, И.И. Скрининг селекционного материала яблони на наличие гена устойчивости к парше Vf с применением методов молекулярного маркирования / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова, E.H. Седов, Г.А. Седышева, З.М. Серова // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2011. - Т. 1 - № 3 (30). - С. 84-86.

59. Супрун, И.И. Использование методов молекулярного ДНК-маркирования в целях идентификации генов устойчивости к парше / И.И. Супрун, Е.В. Ульяновская, Я.В. Ушакова, E.H. Седов, З.М. Серова // Вклад фундаментальных научных исследований в развитие современной инновационной экономики Краснодарского края: Материалы научно-

практической конференции грантодержателей РФФИ и администрации Краснодарского края. - Краснодар. - 2009. - С. 102-103.

60. Суриков, И.М. Несовместимость и эмбриональная стерильность растений / Суриков И.М. - М., 1991. - 220 с.

61. Ульяновская, Е.В. Создание современных сортов яблони по заданным признакам / Е.В. Ульяновская // Критерии прецизионных технологий садоводства и виноградарства. Краснодар. - 2007. - С. 53-58.

62. Ульяновская, Е.В. Ускоренное создание иммунных к парше сортов яблони с использованием молекулярно-генетических методов исследования / Ульяновская Е.В., Седов E.H., Супрун И.И., Седышева Г.А., Серова З.М. -Краснодар, 2011. - 55 с.

63. Ульяновская, Е.В. Ускоренное создание генотипов яблони с повышенными показателями адаптивности и качества на основе выявленных закономерностей наследования значимых признаков / Е.В. Ульяновская, И.И. Супрун // Металогическое обеспечение селекции садовых культур и винограда на современном этапе. Краснодар: ГНУ СКЗНИИСиВ. - 2013. - Том 1. - 282 с.

64. Ульяновская, Е.В. Методологические подходы к созданию иммунных к парше сортов яблони с использованием молекулярно-генетических методов исследования / Е.В. Ульяновская, И.И. Супрун, E.H. Седов, Г.А. Седышева, З.М. Серова//Arpo XXI,-2013.-№ 1-3. - С.18-19.

65. Ульяновская, Е.В. Ускоренное создание генотипов яблони с повышенными показателями адаптивности и качества на основе выявленных закономерностей наследования значимых признаков / Е.В. Ульяновская, И.И. Супрун // Методологическое обеспечение селекции садовых культур и винограда на современном этапе. Краснодар: ГНУ СКЗНИИСиВ - 2013. - Т. 1. -С. 47-52.

66. Ульяновская, Е.В. Ускоренное создание иммунных к парше сортов яблони с использованием молекулярного ДНК-маркирования /- Е.В. Ульяновская, И.И. Супрун // Защита и карантин растений. - 2013. - № 5. - С. 22-24.

67. Ульяновская, E.B. Создание иммунных к парше сортов и форм яблони с использованием молекулярно-генетических методов / Е.В. Ульяновская, И.И. Супрун, E.H. Седов, Г.А. Седышева, З.М. Серова // Вестник РАСХН. — 2012. — №3,-С. 42-44.

68. Урбанович, О.Ю. Анализ полиморфизма SSR-локусов видов Malus / О.Ю. Урбанович, З.А. Козловская, A.A. Хацкевич // Известия Национальной академии наук Беларуси. - 2010. - №1. - С. 12-17.

69. Урбанович, О.Ю. Молекулярные методы идентификации и генотипирования яблони и груши / О.Ю. Урбанович; Институт генетики и цитологии HAH Беларуси. - Минкск: Право и экономика, 2013. - 210 с.

70. Хавкин, Э.Е. Молекулярные маркеры в растениеводстве / Э.Е. Хавкин // Сельскохозяйственная биология. - 1997. - №5. - С. 3-19.

71. Хохрякова, Т.М. О географическом видообразовании у фитопатогенных аскомицетов на плодовых в СССР / Т.М. Хохрякова // Микология и фитопатология. - 1978. - Т. 12. - Вып. 2. - С. 154-163.

72. Шамшин, И.Н. Анализ генетического полиморфизма генома яблони с использованием микросателлитных последовательностей ДНК / И.Н. Шамшин, A.M. Кудрявцев, Н.И. Савельев // Метологическое обеспечение селекции садовых культур и винограда на современном этапе. Краснодар: ГНУ СКЗНИИСиВ. - 2013. - Т. 1.-С. 39-42 с.

73. Шибата, Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биоптатов. Молекулярная клиническая диагностика'/ Д.К. Шибата. - М.: Мир, 1999. - 572 с.

74. Чан, В-Т.В. Гибридизация нуклеиновых кислот. Молекулярная клиническая диагностика / В-Т.В. Чан. - М.: Мир, 1999. - 594 с.

75. Янковский, Н.К. Молекулярно-генетические методы в руках детектива / Н.К. Янковский // Соросовский образовательный журнал. - 1996. -№2.-С. 21-27.

76. Alston, F.H. A Malus gene list / F.H. Alston, K.L. Phillips, K.M. Evans // Acta Hort. - 2000. - Vol. 538. - P. 561-570.

116

77. Afunian, M.R. Linkage Vfa4 in Malus x domestica and Malus floribunda with Vf resistanse to the apple scab pathogen Venturia inaequalis / M.R. Afunian, P.H. Goodwin, D.M. Hunter // Plant Pathology. - 2004. - Vol. 53. - P. 461-467.

78. Aharon, A. DNA microarrays for functional plant genomics / A. Aharon, O.Vorst // Plant Mol. Biol. - 2001. - Vol. 48. - P. 99-118.

79. Aldwinckle, H.S. Early determination of genotypes for apple scab resistance by forced flowering of test cross progenie / H.S. Aldwinckle, H.L.Gustafson, R.C. Lamb //Euphytica. - 1976. - Vol. 25. - P. 185-191.

80. Avise, J.C. Molecular markers, natural history and evolution / J.C. Avise, 1994,- 122 p.

81. Baldi, P. Clonning and linkage mapping of resistance gene homologues in apple / P. Baldi, A. Patocchi, E. Zini, C. Toller, R. Velasco, M. Komjanc // Theor. Appl. Genet. - 2004. - Vol. 109. - P. 231-239.

82. Barnes, E.H. The role of phloridzin in the postparasite physiology of the apple scab disease / E.H. Barnes, E.B. Williams // Can. J. Microbiol. - 1961. - Vol. 7.-P. 525-534.

83. Bayan, M.M. Genetic Identification of Some Syrian Local Apple (Malus sp.) Cultivars Using Molecular Markers / M.M. Bayan, A.A.Y. Rania, E.-H. Ola, M.I. Omayma // Research Journal of Agriculture and Biological Sciences. - 2007. - Vol. 3 (6).-P. 704-713.

84. Benaouf, G. Genetics of host-pathogen relationships between Venturia inaequalis race 6 and 7 and Malus species/ G. Benaouf, L. Parisi // Phytopathology. -2000. - Vol. 90. - P. 236-242.

85. Bolar, J.P. Synergistic activity of endochitinase and exochitinase from Trichoderma atroviride (T. harzianum) against the pathogenic fungus (Venturia inaequalis) in transgenic apple plants/ J.P. Bolar, J.L. Norelli, G.E. Harman, S.K. Brown, H.S. Aldwinckle // Transgenic Research. - 2001. - Vol. 10. - P. 533-543.

86. Bolar, J.P. Expression of endochitinase from Trichoderma harzianum in transgenic apple increases resistance to apple scab and reduces vigor / J.P. Bolar, J.L.

Norelli, K.-W. Wong, C.K. Hayes, G.E. Harman, H.S. Aldwinckle // Phytopathology. - 2000. - Vol. 90. - P. 72-77.

87. Boskovic, R. Correlation of stylar rybonuclease isoenzymes with incompatibility alleles in apple / R. Boskovic, K.R. Tobuut // Euphytica. - 1999. -Vol. 107.-P. 29^13.

88. Botstein, D. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms / D. Botstein, R.L.White, M. Skolnick, R.V. Davis // Amer. J. Hum. Genet. - 1980.-Vol. 32.-P. 314-331.

89. Boudichevskaia, A. Development of molecular markers for Vrl, a scab resistance factor from R12740-7A apple / A. Boudichevskaia, H. Flachowsky, C. Fischer, V. Hanke, F. Dunemann // Acta Hortic. - 2004. - Vol. 663. - P 171 -175.

90. Boudichevskaia, A. Development of multiallelic SCAR marker for the scab resistance gene Vrl/ Vh4/ Vx from R12740-7A apple and it's utility for molecular breeding / A. Boudichevskaia, H. Flachowsky, C. Fischer, V. Hanke, F. Dunemann // Tree Genetics and Genomes. - 2006. - Vol. 2.-P. 186-195.

91. Broothaerts, W. New findings in apple S-genotype analysis resolve previous confusion and request the re-numbering of some S-alleles / W. Broothaerts // Theor. Appl. Genet. - 2003. - Vol. 106. - P. 703-714.

92. Broothaerts, W. cDNA cloning and molecular analysis of two self-incompatibility alleles from apple / W. Broothaerts, G. Janssens, P. Proost, W. Broekaert // Plant. Mol. Biol. - 1995. - Vol. 27. - P. 449-511.

93. Bus, V.G.M. The Vh8 locus of a new gene-for-gene interaction between Venturia inaequalis and the wild apple Malus sieversii is closely linked to the Vh2 locus in Malus pumila R12740-7A / V.G.M. Bus, F.N.D. Laurens, W.E. Van De Weg, R.L. Rusholme, E.H.A. Rikkerink, S.E. Gardiner, H.C.M. Bassett, L.P. Kodde, K.M. Plummer // New Phytologist. - 2005. - Vol. 166. - P. 1035-1049.

94. Bus, V.G.M. The Vh2 and Vh4 scab resistance genes in two differential hosts derived from Russian apple R12740-7A map to the same linkage group of apple/ V.G.M Bus, E.H.A Rikkerink, E.W.V. de Weg, R.L. Rusholme, S.E.

Gardiner, H.C.M. Bassett, L.P. Kodde, L. Parisi, F.N.D. Laurens, E. Meulenbroek, K.MPlummer//Molecular Breeding.-2005.-Vol. 15.-P. 103-116.

95. Castiglioni, P. An AFLP-Based Procedure for the Efficient Mapping of Mutations and DNA Probes in Barley / P. Castiglioni, C. Pozzi, M. Heun, V. Terzi, K.J. Muller, W. Rohde, F. Salamini // Genetics. - 1998. - Vol. 149. - P. 2039-2056.

96. Cao, H. The Arabidopsis NPR1 gene that controls systemic acquired resistance encodes a novel protein containing ankyrin repeats / H. Cao, J. Glazebrook, J.D. Clarke, S. Volko, X. Dong // Cell. - 1997. - Vol. 88. - P. 57-63.

97. Cheng, F.S. Development of a DNA marker for Vm, a gene conferring resistance to apple scab / F.S.Cheng, N.F.Weeden, S.K. Brown // Genome. - 1998. -Vol. 41.-P. 208-214.

98. Christopher, M.R. Genetic diversity and population structure in-Malus sieversii, a wild progenitor species of domesticated apple / M.R. Christopher, G.M. Volk, A.A. Reilley, A.D. Henk, D.R. Lockwood, P.A. Reeves, P.L. Forsline // Tree Genetics & Genomes. - 2009. - Vol. 5. - P. 339-347.

99. Daeton, D. Disease Resistance / D. Daeton, R.L. Bell, E.B. Williams // Methods in Fruit Breeding. - 1983. - P. 189-215.

100. De Nettancourt, D. Incompatibility in angiosperms / D. De Nettancourt // Theoretical and Applied Genetics. - 1977. - Vol. 3. - P. 55-69.

101. Diwan, N. Automated sizing of fluorescent-labeled simple sequence repeat (SSR) markers to assay genetic variation in soybean / N.Diwan, P.B. Cregan // Theor. Appl. Genet. - 1997. - Vol. 95. - P. 723-733.

102. Doyle, J.J. A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue / J.J.Doyle, J.L. Doyle // Phytochem. Bull. - 1987. - Vol. 19. - P. 11-15.

103. Dudley, J.W. Molecular markers in plant improvement-manipulation of genes affecting quantitative traits / J.W. Dudley // Crop science. - 1993. - Vol. 33. -P. 660-668.

104. Durel, C.E. An overview of the position and robustness of scab resistance QTLs and major genes by aligning genetic maps of five apple progenies / C.E.Durel,

F.Calenge, L.Parisi, Van de Weg, W.E. Kodde, R.Liebhard, C.Gessler, M.Thiermann, F.Dunemann, F.Gennari, S. Tartarini // Acta Hort. - 2004. - Vol. 663. - P. 135-140.

105. Durel, C.E. Genetic dissection of partial resistance to race 6 of Venturia inaequalis in apple / C.E. Durel, L. Parisi, F. Laurens, V.de Weg, R. Liebhard, M.F. Jourjon // Genome. - 2003. - Vol. 46. - P. 224-234.

106. Evans, K.M. Identification of SCAR markers linked to Pl-w moldew resistance in apple / K.M.Evans, C.M. James // Theor. Appl. Genet. - 2003. - Vol. 106.-P. 1178-1183

107. Faize, M. Chitinases of Trichoderma atroviride induce scab resistance and some metabolic changes in two cultivars of apple / M. Faize, M. Malnoy, F. Dupuis, M. Chevalier, L. Parisi, E. Chevreau // Phytopathology. - 2003. - Vol. 93. - P. 14961504.

108. Faize, M. Expression of wheat puroindoline-b reduces scab susceptibility in transgenic apple (Malus domestica Borkh.) / M. Faize, S. Sourice, F. Dupuis, L. Parisi, M.F. Gautier, E. Chevreau // Plant Science. - 2004. - Vol. 167. - P. 347-354.

109. Fernandez-Fernandez, F. Development of an STS map of an interspecific progeny of Malus / F. Fernandez-Fernandez, K.M. Eans, J.B. Clarke, C.L. Govan, C.M. James, S. Marie, K.R. Tobutt // Tree Genetic & Genomic. - 2008. - Vol. 4. - P. 469-479.

110. Fischer, C. Apple breeding in the Federal Centre for plant breeding research, Institute for fruit breeding at Dresden-Pillnitz, Germany / C. Fischer // Acta Hortic. - 2000. - Vol. 538. - P. 225-227.

111. Gao, Z.S. Genomic cloning and linkage mapping of the Mal d 1 (PR-10) gene family in apple (Malus domestica) / Z.S. Gao, W.E. V. De Weg, J.G. Schaart, H.J. Schouten, D.H. Tran, L.P. Koddle, I.M.V. Der Meer, A.H.M. Van Der Geest, J. Koddle, H. Breiteneder, K. Hoffmann-Sommergruber, D. Bosch, L.J.W.J. Gilissen // Theor. Appl. Genet.-2005.-Vol. 111. - P. 171-183.

112. Gardiner, S.E. Apple / S.E. Gardiner, V.G.M. Bus, R.L. Rusholme, D. Chagne, E.H.A. Rikkerink // Genome Mapping and Molecular Breeding. - 2007. - P. 1-62.

113. Gasia, F. Genetic assessment of apple germplasm in Bosnia and Herzegovina using microsatellite and morphologic markers / F. Gasia, S. Silvio, P. Naris, K. Mirsad, I. Peji // Scientia Horticulturae. - 2010. - Vol. 126. - P. 164-171.

114. Gau, A.E., Koutb M., Piotrowski M., Kloppstech K. Accumulation of pathogenesis-related proteins in the apoplast of a susceptible cultivar of apple (Malus domestica cv. Elstar) after infection by Venturia inaequalis and constitutive expression of PR genes in the resistant cultivar Remo / A.E. Gau, M. Koutb, M. Piotrowski, K. Kloppstech // European Journal of Plant Pathology. - 2004. - Vol. 110.-P. 703-711.

115. Gessler, C. Venturia inaequalis resistance in apple / C. Gessler, A. Patocchi, S. Sansavini, S. Tartarini, L. Gianfranceschi // Critical Reviews in Plant Sciences. - 2006. - Vol. 25. - P. 475-477.

116. Gharghani, A. Genetic identity and relationships of Iranian apples (Malusxdomestica Borkh) cultivars and landraces, wild apple species and representative old apple cultivars based on SSR markers / A. Gharghani, Z. Zamani, A. Talaie, N.C. Oraguzie, R. Fatahi, H. Hajnajari, C. Wiedow, S.E. Gardiner // Genet. Resour. Crop. Evol. - 2009. - Vol. 56. - P. 829-842.

117. Gianfranceschi, L. Molecular selection in apple for resistance to scab caused by Venturia inaequalis / L. Gianfranceschi, B. Koller, N. Seglias, M. Kellerhals, C. Gessler // Theor. Appl. Genet. - 1996. - Vol. 93. - P. 199-204.

118. Gianfranceschi, L. Simple sequence repeats for the genetic analysis of apple / L. Gianfranceschi, N. Seglias, R. Tarchini, M. Komjanc, C. Gessler // Theor Appl Genet. - 1998. - Vol. 96. - P. 1069-1076.

119. Goodman, R.N. The Hypersensitive Reaction in Plants to Pathogens / R.N. Goodman, A.J. Novacky, 1994. - 256 p.

120. Gopaljee, J. The Venturia Apple Pathosystem: PathogenicityMechanisms and Plant Defense Responses / J. Gopaljee, K. Thakur, P. Thakur // Journal of Biomedicine and Biotechnology. - 2009. - P. 10

121. Grodzicker, T. Cold Spring Harbor / T. Grodzicker, J. Williams, P. Sharp, J. Sambrook // Symp. Quant. Biol. - 1974. - Vol. 39. - P.439

122. Gygax, M. Molecular markers linked to the apple scab resistance gene Vbj derived from Malus baccata jacki / M. Gygax, L. Gianfranceschi, R. Liebhard, M. Kellerhals, C. Gessler, A. Patocchi // Theor. Appl. Genet. - 2004. - Vol. 109. - P. 1702-1709.

123. Hegedüs, A. Review of the self-incompatibility in apple (Malusxdomestica Borkh., syn.: Malus pumila Mill.) / A. Hegedüs // International Journal of Horticultural Science. -2006. - Vol. 12. - P. 31-36.

124. Hemmat, M. Identification and mapping of markers for resistance to apple scab from 'Antonovka' and 'Hansen's baccata №2' / M. Hemmat, S.K. Brown, H.S. Aldwinckle, S.A. Mehlenbacher, N.F. Weeden // Acta Horticulturae. - 2003. - Vol. 622.-P. 153-161.

125. Hemmat, M. Tagging and mapping scab resistance genes from R12740-7A apple / M. Hemmat, S.K. Brown, N.F. Weeden // Journal of the American Society of Horticultural Science. - 2002. - Vol. 127. - P. 365-370.

126. Hokanson, S.C. Microsatellite (SSR) markers reveal genetic identities, genetic diversity and relationships in a Malus domestica Borkh. core subset collection / S.C. Hokanson, A.K. Szewc-McFadden, W.F. Lamboy, J.R. McFerson // Theor. Appl. Genet. - 1998. - Vol. 97. - P. 671-683.

127. Hoy, T.K. Determination of Self-Incompatibility Genotypes of Korean Apple Cultivars Based on S-Rnase PCR / T.K. Hoy, G. Hatteri, Y. Hirata, D.I. Kim, J.H. Hwang, Y.U. Shin, I.S. Nou // Journal of Plant Biology. - 2006. - Vol. 49 (6). -P. 448-454.

128. Ignazio, V. Development and evaluation of a 9K SNP array for Peach by internationally coordinated SNP detection and validation in breeding germplasm / Ignazio V., B. Nahla, S. Simone, B. Gilmore, C.T. Lawley, K. Gasic, D. Micheletti, U.R. Rosyara, F. Cattonaro, E. Vendramin, D. Main, V. Aramini, A.L. Blas, T.C. Mockler, D.W. Bryant, L. Wilhelm, M. Troggio, B. Sosinski, M.J. Aranzana, P. Arus, A. Lezzoni, M. Morgante, C. Peace // PloS ONE. - 2012. - Vol. 7 (4). - P. 356-368.

129. Ishimizu, T. PCR-based method for identifying the S-genotypes of Japanese pear cultivars / T. Ishimizu, K. Inoue, M. Shimonaka, T.Saito, O. Terai, S. Norioka // Theor. Appl. Genet. - 1999. Vol. 98. - P. 961-967.

130. Janick, J. Apples / J. Janick, J.N. Cumminis, S.K. Brown, M. Hemmat // Fruit breeding. - 1996. - Vol. 1. - P. 1-77.

131. Jansen, R.C. A Comment on Codominant Scoring of AFLP Markers / R.C. Jansen, H. Geerlings, A. Oeveren J.V., R.C. Van Schaik // Genetics. - 2001. -Vol. 158.-P. 925-926.

132. Janssens, G.A. A molecular method for S-allele identification in apple based on allele-specific PCR / G.A. Janssens, I.J. Goderis, W.F. Broekaert, W. Broothaerts // Theor. Appl. Genet. - 1995. - Vol. 91. - P. 691-698.

133. Kalendar, R. IRAP and REMAP: Two new retrotransposon-based DNA fingerprinting techniques / R. Kalendar, T. Grob, M. Regina, A. Suoniemi, A.H. Schulman // Theoretical and Applied Genetics. - 1999. - Vol. 98. - P. 704-711.

134. Kalendar, R. IRAP and REMAP for retrotransposon-based genqtyping and fingerprinting / R. Kalendar, A.H. Schulman // Nature Protocols. - 2006. Vol. 1 (5).-P. 2478-2484.

135. Kenis, K. Genetic linkage maps of two apple cultivars (Malus x domestica Borkh.) based on AFLP and microsatellite markers / K. Kenis, J. Keulemans // Molecular Breeding. -2005. Vol. 15 (2). - P. 205-219.

136. Kenis, K. Study of tree architecture of apple (Malus x domestica Borkh.) by QTL analysis of growth traits / K. Kenis, J. Keulemans // Molecular Breeding. -2007.-Vol. 19.-P. 193-208.

137. King, G.J. Quantitative genetic analysis and comparison of physical and sensory descriptors relating to fruit flesh firmness in apple (Malus pumila Mill.) / G.J. King, C. Maliepaard, J.R. Lynn, F.H. Alston, C.E. Durel, K.M. Evans, B. Griffon, F. Laurens, A.G. Manganaris, E. Schrevens, S. Tartarini, J. Verhaegh // Theor. Apple. Genet. - 2000. - Vol. 100.-P. 1074-1084.

138. Kobel, F. Weitere Untersuchungen über die Befruchtungsverh ltnisse der Apfel-und Bimsorten / F. Kobel, P. Steinegger, J. Anliker // Landw. Jb. Schweiz. -1939.-Vol. 53.-P. 160-191.

139. Komori, S. Discrimination of cross incompatibility by number of seeds per fruit and fruit set percentage in apples / S. Komori, J. Soejima, Y. Ito, H. Bessho, K. Abe, N. Kotoda // Bull. Natl. Inst. Fruit Tree Sei. - 1999. - Vol. 33. - P. 97-112.

140. Kuc, J. The effect to amino acids on the susceptibility of apple varieties to scab / J. Kuc, E. Barnes, A. Daftsions, E.B. Williams // Phytopatology. - 1959. Vol. 49.-P. 313-315.

141. Kurata, N., Umehara Y., Tanoue H., Sasaki T. Physical mapping of the rice genome with YAC clones // Plant. Mol. Biol. Vol. 35. - 1997. - P. 101-113.

142. Laima, A. Development of a dense SNP-based linkage map of an apple rootstock progeny using the Malus Infmium whole genome genotyping array / F. Fernandes-Fernandes J. Jansen, E. Banchi, K.M. Ewans, R. Viola, R. Velasco, J.M. Dunwell, M. Troggio, D.J. Sargent//BMC Genomics. - 2012. Vol. 13. - P. 203-213.

143. Laurens, F. Review of the current apple breeding programs in the world: objectives for scion cultivar improvement / F. Laurens // Acta Hortic. - 1999. - Vol. 484.-P. 163-170.

144. Lespinasse, V. Apple scab. Resistance and durability. New races and strategies for the future / V. Lespinasse // Progress in temperate fruit breeding. -1994.-P. 105-106.

145. Liebhard, R. Development and characterization of 140 new microsatellites in apple (Malus domestica Borkh.) / R. Liebhard, L. Gianffranceschi, B. Koller, C.D. Ryder, R. Tarchini E., V.De Weg, C. Gessler // Molecular Breeding. - 2002. - Vol. 10.-P. 217-241.

146. Liebhard, R. Creating a saturated reference map for the apple (Malus domestica Borkh.) genome / R. Liebhard, B. Koller, L. Gianffranceschi, C. Ge'ssler // Theor. Appl. Genet. -2003. - Vol. 106. - P. 1497-1508.

147. Litt, M. A hypervariable microsatellite revealed by in vitro amplification of a dinucleotide repeat within the cardiac muscle actin gene / M. Litt, J.A. Luty // Am.J.Hum.Genet. - 1989. - Vol. 44. - P. 388-396.

148. Luu, D.T. S-Rnase uptake by compatible pollen tubes in gametophytic self-incompatibility / D.T. Luu, X. Qin, D. Morse, M. Cappadocia // Nature. -2002. - Vol. 407. - P. 649-651.

149. MacHardy, W.E. Apple Scab, Biology, Epidemiology, and Management / W.E. MacHardy, 1996. - 545 p.

150. MacHardy, W. E. Parasitic and biological fitness of Venturia inaequalis: relationship to disease management strategies / W.E. MacHardy, D.M. Gadoury, C. Gessler // Plant Disease. - 2001. - Vol. 85. - P. 1036-1051.

151. MacLennan, D.H. Chemotherapy of the apple scab disease with butyric acid derivatives / D.H. MacLennan, J. Kuc, E.B. Williams // Phytopathology. -1963.-Vol. 53.-P. 1261-1266.

152. Maliepaard, C. Aligning male and female linkage maps of apple (Malus pumila Mill.) using multi-allelic markers / C. Maliepaard, F. Alston, G.V. Arkel, L.M. Brown, E. Chevreau, F. Dunemann, K.M. Evans, S. Gardiner, P. Guilford, A.W. Van Heusden, J. Janse, F. Laurens, J.R. Lynn, A.G. Manganaris, A.P.M. den Nijs, N. Periam, E. Rikkerink, P. Roche, C. Ryder, S. Sansavini, H. Schmidt, S. Tartarini, J.J. Verhaegh, M. Vrielink-van Ginkel, G.J. King // Theor. Appl. Genet. -1998.-Vol. 97.-P. 60-73.

153. Malnoy, M. Overexpression of the apple MpNPRl gene confers increased disease resistance in Malus domestica / M. Malnoy, Q. Jin, E. E. Borejsza-Wysocka, S.Y. He, H.S. Aldwinckle // Molecular Plant-Microbe Interactions. - 2007. - Vol. 20.-P. 1568-1580.

154. Markussen, T. Identification of PCR-based markers linked to the powdery-mildew-resistance gene P1I from Malus robusta in cultivated apple / T. Markussen, J. Kruger, H. Schmidt, F. Dunneman // Plant Breeding. - 1995. - Vol. 114.-P. 530-534.

155. Martinez, L.E. SSR-based assessment of genetic diversity in South American Vitis vinifera varieties / L.E. Martinez, P.F.Cavagnaro, R.W. Masuelli, M. Zuniga // Plant Sci. - 2006. - Vol. 170. - P. 1036-1044.

156. Matsumoto, S. Discovery of a new selfincompatibility allele in apple / S. Matsumoto, K. Kitahara // Hortscience. - 2000. - Vol. 35. - P. 1329-1332.

157. Matsumoto, S. A functional S-allele, 'Sg', in the wild apple possessing a single amino acid, S-Rnase 'SgO-Rnase', different from 'Sg-Rnase' in Malus 9 domestica cultivars / S. Matsumoto, K. Kitahara, H. Komatsu, J. Soejima // J. Hortic. Sci. Biotechnol.-2001.- Vol. 76.-P. 163-166.

158. Matsuura, T. Crystal structure at 1.5-A resolution of Pyrus pyrifolia pistil ribonuclease responsible for gametophytic self-incompatibility / T. Matsuura, H. Sakai, M. Unno, K. Ida, M. Sato, F. Sakiyama, S. Norioka // J. Biol. Chem. - 2001. -Vol. 48.-P. 45261-45269.

159. McClure, B.A. Style self-incompatibility gene products ofNicotiana alata are ribonucleases / B.A. McClure, P.R. Ebert, M.A. Anderson, R.J. Simpson, F. Sakiyama, A.E. Clarke // Nature. - 1989. - Vol. 342. - P. 955-957.

160. McCouch, S.R. Microsatellite marker development, mapping and applications in rice genetics and breeding / S.R. McCouch, X. Chen, O. Panaud, S. Temnykh // Plant Mol. Biol. - 1997. - Vol. 35. - P. 89-99.

161. Mohan, M. Genome mapping, molecular marker and marker-assisted selection in crop plants / M. Mohan, S. Nair, A. Bhagwat, T.G. Krishna, M. Yano, C.R. Bhatia, T. Sasaki // Molecular Breeding. - 1997. - Vol. 3. - P. 87-103.

162. Morgante, M. PCR-amplified microsatellite markers in plant genetics / M. Morgante, A.M. Oliveri //Plant J. - 1993. - Vol. 3. - P. 175-182.

163. Mueller, U.G. AFLP genotyping and fingerprinting / U.G. Mueller, L. Wolfenbarger // Trends Ecol. - 1999. - Vol. 14. - P. 389-394.

164. Murray, M. G. Rapid isolation of high molecular weight plant DNA / M.G. Murray, W.F. Thompson // Nucleic Acids Research. - 1980. - Vol. 10. - P. 4321-4325.

165. Nei, M. Mathematical model for studying genetic variation in terms of restriction endonucleases / M. Nei, W.-H. Li // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1979. -Vol. 76.-P. 5269-5273.

166. Oraguzie, N.C. Genetic diversity and relationship in Malus sp. Germplasm collections as determined by Random Amplified Polymorphic DNA / N.C. Oraguzie, S.E. Gardiner, H.C.M. Basset, S. Mirko, R.D. Ball, V.G.M. Bus, G. W. Allan // Journal of American Society of Horticultre Science. - 2001. - Vol. 126 (3).-P. 318-328.

167. Oraguzie, N.C. DNA fingerprinting of apple (Malus spp.) rootstocks using Simple Sequence Repeats / N.C. Oraguzie, T. Yamamoto, J. Soejima, T. Suzuki, H.N. De Silva // Plant Breed. - 2005. - Vol. 124. - P. 197-202.

168. Patocchi, A. Vr2: a new apple scab resistance gene / A. Patocchi, B. Bigler, B. Koller, M. Kellerhals, C. Gessler // Theoretical and Applied Genetics. -2004.-Vol. 109.-P. 1087-1092.

169. Patocchi, A. Identification by genome scanning approach (GSA) of a microsatellite tightly associated with the apple scab resistance gene Vm / A. Patocchi, M. Walser, S. Tartarini, G.A.L. Broggini, F. Gennari, S. Sansavini, C. Gessler // Genome. - 2005. - Vol. 48. - P. 630-636.

170. Pereira-Lorenzo, S. Evaluation of genetic identity and variation of local apple cultivars (Malus domestica Borkh.) from Spain using microsatellite markers / S. Pereira-Lorenzo, A.M. Ramos-Cabrer, M.B. Diaz-Hernandez // Genet. Resour. Crop. Evol. - 2007. - Vol. 54. - P. 405-420.

171. Pereira-Lorenzo, S. Genetic assessment of local apple cultivars from La Palma, Spain, using simple sequence repeats (SSRs) / S. Pereira-Lorenzo, A.M. Ramos-Cabrer, A.J. Gonzalez-Diaz, M.B. Diaz-Hernandez // Scientia Horticulturae. -2008.-Vol. 117.-P. 160-166.

172. Rogers, S.O. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh, herbarium and mummified plant tissues / S.O. Rogers, A.J. Bendich // Plant Molecular Biology. - 1985. - Vol. 5 - P. 69-76,

173. Rozemarijn Dreesen, S.G. Analysis of Malus S-Rnase gene diversity based on comparative study of old and modern apple cultivars and European wild apple / S.G. Rozemarijn Dreesen, B.T.M. Vanholme, K. Luyten, L. Van Wynsberghe, G. Fazio, I. Roldan-Ruiz, J. Keulemans // Mol. Breeding. - 2010. - Vol. 26. - P. 693709.

174. Saji, S. A physical map with yeast artificial chromosome (YAC) clones covering 63% of the 12 rice chromosomes / S. Saji, Y. Umehara, A.A. Baltazar, H. Yamane, H.A. Tanoue // Genome. - 2001. - Vol. 44. - P. 32-37.

175. Sakurai, K. Determining the selfmcompatibility alleles of Japanese apple cultivars / K. Sakurai, S.K. Brown, N.F. Weeden // Hort. Science. - 1997. - Vol. 32.-P. 1258-1259.

176. Sakurai, K. Self-incompatibility alleles of apple cultivars and advanced selections / K. Sakurai, S.K. Brown, N.F. Weeden // Hort. Science. - 2000. - Vol. 35.-P. 116-119.

177. Sassa, H. Identification of selfmcompatibility related glycoproteins in styles of apple (Malus domestica) / H. Sassa, N. Mase, H. Hirano, H. Ikehashi // Theor. Appl. Genet. - 1994. - Vol. 89. - P. 201-205.

178. Satish, K. Novel genomic approaches unravel genetic architecture of complex traits in apple / K. Satish, D.J. Garrick, M.C.A.M. Bink, C. Whitworth, D. Chagne, R.K. Volz // BMC Genomics. - 2013. - Vol. 14. - P. 393-406.

179. Schulman, A.H. Molecular markers to assess genetic diversity / A.H. Schulman//Euphytica. - 2007 - Vol. 158(3).-P. 313-321.

180. Schlotterer, C. Polymorphism and locus-specific effects on polymorphism at microsatellite loci in natural Drosophila melanogaster populations / C. Schlotterer, M. Soller// Genetics. - 1997. - Vol. 146. - P. 309-320.

181. Shenshan, L. Characterization of three new S-alleles and development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying the S-genotype in apple cultivars / Shenshan L., Maofu L., Zhenhai H., Kun W., Tianzhong L. // Tree Genetics & Genomes.-2010.-Vol. 6.-P. 161-168.

182. Shulaev, V. Multiple Models for Rosaceae Genomics / V. Shulaev, S.S. Korban, B. Sosinski, A.G. Abbott, H.S. Aldwinckle, K.M. Folta, A. Iezzoni, D. Main, P. Arus, A.M. Dandekar, K. Lewers, S.K. Brown, T.M. Davis, S.E. Gardiner, D. Potter, R.E. Veilleux // Plant Physiology. - 2008. - Vol. 147 .- P. 985-1003.

183. Silfverberg-Dil worth, E. Microsatellite markers spanning the apple (Malus x domestica Borkh.) genome / E. SilfVerberg-Dilworth, C.L. Matasci, W.E. Van de Weg, M.P.W. Van Kaauwen, M. Walser, L.P. Kodde, V. Soglio, L. Gianfranceschi, C.E. Durel, F. Costa, T. Yamamoto, B. Koller, C. Gessler, A. Patocchi // Tree Genetics &Genomes. - 2006. - Vol. 2. - P. 202-224.

184. Sladana, M. Application of molecular markers in apple breeding / M. Sladana, M. Lukic, R. Cerovic, M. Mitrovic, R. Boskovic // Genetika. .- 2010. - Vol. 42 (2).-P. 359-375.

185. Soriano, J.M. Identification and mapping of the novel apple scab resistance gene Vd3 / J.M. Soriano, S.G. Joshi, M. van Kaauwen, Y. Noordijk, R. Groenwold, B. Henken,, W.E. van de Weg, H.J. Schouten // Tree Genetics & Genomes. - 2009. - Vol. 5. - P. 475-482.

186. Soufflet-Freslon, V. Inheritance studies of apple scab resistance and identification of Rvil4, a new major gene that acts together with other broad-spectrum QTL / V. Soufflet-Freslon, L. Gianfranceschi, A. Patocchi, C.-E. Durel // Genome. - 2008. - Vol. 51 (8). - P. 657-667.

187. Suprun, I. Genetic resources of rosaceous fruit crops in southern Russia and their use in the / I. Suprun, G. Eremin, E. Ulyanovskaya, A. Lugovskoy, V. Kochetkov // Sixth Rosaceous Genomics Conference. - 2012. - P. 123.

188. Suprun, I.I. Molecular genetic identification of alleles of self-incompatibility gene in Russian apple varieties / I.I. Suprun, E.V. Ufyanovskaya, Ya.V. Ushakova, E.T. IFnitskaya // Russian Agricultural Sciences. - 2011. - Vol. 37 (5).-P. 373-375

189. Suprun, I. Use of DNA-markers on Russian genetic resources collections and breeding of Rosaceous fruit crops / I. Suprun, S. Tokmakov, E. Ilnitskaya, I. Stepanov // Sixth Rosaceous Genomics Conference. - 2012. - P. 124.

190. Tanksley, S.D. Molecular markers in plant breeding // Plant. Mol. Biol. Rep. - 1983.-Vol. l.-P. 3-8.

191. Tanksley, S.D. Advanced backcross QTL analysis: a method for the simultaneous discovery and transfer of valuable from unadapted germplasm into elite breeding lines / S.D. Tanksley, J.C. Nelson // Theor. Appl. Genet. - 1996. - Vol. 92.-P. 191-203.

192. Tartarini, S. Characterisation and genetic mapping of a major scab resistance gene from the old Italian apple cultivar "Durello di Forli" / S. Tartarini, F. Gennari, D. Pratesi, C. Palazzetti, S. Sansa vini, L. Parisi, V. Fouillet, C.E. Durel // ActaHort.-2004.-Vol. 663.-P. 129-133.

193. Thomas, M.R. Microsatellite repeats in grapevine reveal DNA polymorphism when analysed as sequence-tagged sites (STSs) / M.R. Thomas, N.S. Scott // Theor. Appl. Genet. - 1993. - Vol. 86. - P. 985-990.

194. Velasco, R. The genome of the domesticated apple (Malus x domestica Borkh) / R. Velasco, A. Zharkikh, A. Jason // Nature Genetics. - 2010. - Vol. 42. - P. 833-839.

195. Vinatzer, B.A. Apple contains receptor-like genes homologous to the Cladosporium fulvum resistance gene family of tomato with a cluster of genes cosegregating with Vf apple scab resistance / B.A. Vinatzer, A. Patocchi, L. Gianfranceschi, S. Tartarini, N.B. Zhang, C. Gessler, S. Sansvini // Molecular Plant-Microbe Interactions. -2001. - Vol. 14. - P. 508-515.

196. Vinatzer, B.A. Isolation of two microsatellite markers from BAC clones of the Vf scab resistance region and molecular characterization of scab-resistant accessions in Malus germplasm / B.A. Vinatzer, A. Patocchi, S. Tartarini, L. Gianfranceschi, S.Sansavini, C. Gessler // Plant Breed. - 2004. - Vol. 123. - P. 321326.

197. Vos, P. AFLP: a new technique for DNA fingerprinting. / P. Vos, R. Hogers, M. Bleeker, M. Rejans, T.van de Lee, M. Homes, A. Fritjers, J. Pot, J. Peleman, M. Kuiper, M. Zabeau // Nucl. Acids Res. - 1995. - Vol. 23. - P.4407-4414.

198. Wang, G.L. RFLP mapping of genes conferring complete and partial resistance to blast in a durably resistance rice cultivar / G.L. Wang, D.J. Mackill, M. Bonman, S.R. McCouch, M.C. Champoux, R. Nelson // Genetics. - 1994.,- Vol. 136.-P. 1421-1434.

199. Waugh, R. Genetic distribution of Bare-1-like retrotransposable elements in the barley genome revealed by sequence-specific amplification polymorphisms (S-SAP) / R. Waugh, K. McLean, A.J. Flavell, S.R. Pearce, A. Kumar, B.B. Thomas, W. Powell // Molecular General Genetics. - 1997. - Vol. 253 (6). - P. 687-694.

200. Weber, J.L. Human DNA polymorphism and methods of analysis / J.L. Weber//Curr. Opin. Biotechnol. - 1990.-Vol. 1. - P. 166-171.

201. Williams, E.B. Resistance in Malus to Venturia inaequalis / E.B. Williams, J. Kus // Annu. Rev. Phytopatol. - 1969. - Vol. 7. - P. 223-246.

202. Xu, M. A cluster of four receptor-like genes resides in the Vf locus that confers resistance to apple scab disease / M. Xu, S.S. Korban // Genetics. - 2002. -Vol. 162 (4).-P. 1995-2006.