Использование клеточных биотехнологий для создания линий тритикале с хозяйственно-ценными признаками тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Акинина, Виктория Николаевна

• Акинина, Виктория Николаевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Акинина, Виктория Николаевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

стр.

Список сокращений, условных обозначений и символов

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. КЛЕТОЧНЫЕ БИОТЕХНОЛОГИИ И СОЗДАНИЕ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ ТРИТИКАЛЕ

(обзор литературы)

1.1 .Тритикале как перспективная зерновая культура

1.2.Генетический материал для селекции тритикале

1.3.Клеточные биотехнологии тритикале

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Изучаемый материал

2.2. Методы исследований

2.3. Условия проведения полевых исследований

ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ РЕЦИПРОКНЫХ ГИБРИДОВ

ТРИТИКАЛЕ X МЯГКАЯ ПШЕНИЦА

ГЛАВА 4. ГАПЛОИДИЯ В КУЛЬТУРЕ ПЫЛЬНИКОВ ГИБРИДОВ

ТРИТИКАЛЕ X МЯГКАЯ ПШЕНИЦА

4.1. Гаплоидия в культуре пыльников перспективных семей

4.2. Гаплоидия в культуре пыльников гибридов тритикале

4.3. Сравнительная эффективность индукционных питательных сред N-6 иС-17

ГЛАВА 5. МИКРОКЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ ТРИТИКАЛЕ

IN VITRO

ГЛАВА 6. СЕЛЕКЦИОННАЯ ЦЕННОСТЬ ЛИНИЙ ТРИТИКАЛЕ

6.1.Урожай зерна и элементы его структуры у БН-линий тритикале

6.2.8Б8-седиментация как экспресс-метод оценки качества зерна

тритикале

6.3.Характеристика запасных белков БН-линий тритикале

ВЫВОДЫ И ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений, условных обозначений и символов

АД - амфидиплоид (пшенично-ржаной гибрид)

DH (doubled haploid) - линии - потомства диплоидизированных гаплоидов 2,4-Д - 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота ИУК - индолилуксусная кислота

Fi, F2 - гибриды первого, второго и последующих поколений НСР - наименьшая существенная разность ПТГ - отборы из гибридов пшеница х тритикале * -р<0,05, в соответствии с F-критерием

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование клеточных биотехнологий для создания линий тритикале с хозяйственно-ценными признаками»

ВВЕДЕНИЕ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В прикладной биотехнологии широко используются методы культуры клеток и тканей растений. Применение клеточных технологий в селекции растений позволяет расширять границы отдаленных скрещиваний и получать уникальные генотипы, ускорять селекционный процесс и делать его более эффективным. На сегодняшний день с применением только гаплоидной биотехнологии создано почти 300 сортов сельскохозяйственных культур, половина из которых принадлежит видам сем. Роасеае (http://www.scri.sari.ac.uk/assos/COST851/Default.htm). В Европе почти 50% возделываемых сортов ячменя получены с использованием гаплоидных технологий, а в Канаде три из пяти занимающих наибольшие площади сортов пшеницы класса CWRS (Canada Western Red Spring) получены на основе линий гаплоидного происхождения (DH-сорта) (Dunwell, 2010).

Коммерческий интерес к методам получения гаплоидов подтвержден значительным числом патентов в США и странах Европы (Dunwell, 2009).

В селекции зерновых культур все большее значение приобретает отдаленная гибридизация, значительно расширяющая возможности селекционера в создании трансгрессивных генотипов по продуктивности, зимостойкости, качеству зерна и другим хозяйственно-значимым признакам, которыми должен обладать современный сорт культурного злака. Тритикале (х Triticosecale Wittmack), искусственно созданный амфидиплоид, становится культурой многоцелевого назначения. Мировые площади под тритикале составляют 3,9 млн. га и имеют тенденцию к постоянному росту (http: //faostat.fao.org/site/567).

В мировой практике отсутствуют биотехнологии ускоренного создания засухоустойчивых сортов тритикале и его генетического разнообразия. Подтверждением является отсутствие биотехнологических сортов этой культуры,

созданных с применением различных методов культуры тканей, в отличие от многочисленных сортов пшеницы, ячменя и риса, которые успешно возделываются в различных регионах мира.

Генный пул D-генома мягкой пшеницы является основным источником для улучшения тритикале (Gill et al., 2004). Однако использование генетического материала хромосом D-генома мягкой пшеницы сопряжено с рядом трудностей, основными из которых являются слабая завязываемость семян при получении гибридов, низкая фертильность гибридов первого поколения, длительность формообразовательного процесса, требующая дополнительных временных и материальных затрат.

Цель исследований: На основе использования клеточных технологий, создать линии тритикале, с привлечением генного пула D-генома мягкой пшеницы, и оценить их хозяйственно-ценные признаки.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Получить новые гибридные комбинации тритикале х мягкая пшеница на основе современных сортов этих культур с использованием культуры зародышей in vitro',

2. Оценить параметры основных этапов андрогенеза in vitro у межродовых гибридов тритикале х мягкая пшеница;

3. Выявить долю влияния генотипа, питательной среды и их взаимодействия на основные этапы получения гаплоидных растений межродовых гибридов тритикале х мягкая пшеница;

4. Получить DH-линии в культуре пыльников межродовых гибридов тритикале х мягкая пшеница;

5. Изучить влияние экспланта на эффективность микроклонального размножения стерильных растений тритикале (отдаленных гибридов и гаплоидов);

6. Оценить полученные DH-линии тритикале по хозяйственно-ценным признакам.

Положения, выносимые на защиту.

1. Эмбриокультура гибридов пшеница х тритикале не только позволяет расширить границы скрещиваний, но и в сочетании с яровизацией in vitro сократить сроки получения семян у гибридов ранних поколений;

2. Доля влияния генотипа, питательной среды и их взаимодействия различается на отдельных этапах андрогенеза in vitro тритикале;

3. Культивирование сегментов колосьев на 5-6 этапе органогенеза позволяет снижать генотипическую зависимость формирования эмбриогенного каллуса и регенерантов при микроклональном размножении растений тритикале;

4. Созданные с использованием биотехнологических методов линии тритикале, обладают хозяйственно-ценными признаками и служат исходным материалом для селекции.

Научная новизна работы. Установлено, что эмбриокультура в сочетании с яровизацией в условиях in vitro позволяет сокращать сроки получения гибридных семян ранних поколений. Получены новые гибридные комбинации тритикале х мягкая пшеница, включающие генофонды современных сортов, адаптированных к Нижне-Волжскому региону. Определены параметры основных этапов андрогенеза in vitro у гибридов тритикале х мягкая пшеница. Впервые выявлено, что доля влияния генотипа, питательных сред и их взаимодействия различается на разных этапах андрогенеза in vitro межродовых гибридов тритикале. Установлено, что культивирование сегментов колосьев на 5-6 этапе органогенеза позволяет снижать генотипическую зависимость формирования эмбриогенного каллуса и регенерантов при микроклональном размножении растений тритикале.

Практическая значимость Получены новые гибридные комбинации тритикале х мягкая пшеница на основе современных адаптированных к условиям Нижнего Поволжья сортов этих культур, которые служат исходным материалом для селекции и пополнения генофонда тритикале. Получены и включены в селекционный процесс DH-линии тритикале, обладающие хозяйственно-ценными признаками. Выделены линии тритикале, содержащие высокомолекулярные запасные белки мягкой пшеницы.

Личный вклад соискателя. Основная часть экспериментальной работы и обобщение результатов исследований выполнена автором самостоятельно. Биохимические исследования спектра запасных белков (глиадинов и глютенинов) проведены с.н.с. лаборатории клеточной селекции Итальянской Ю.В. 808-тест на качество зерна проведен совместно с с.н.с. лаб. клеточной селекции, кандидатом с.-х. наук Кибкало И.А.

Апробация работы. Результаты исследований и основные положения диссертации докладывались на следующих научно-практических конференциях и совещаниях: международных - «Вавиловские чтения» (Саратов, 2010, 2011, 2012), Международная научная конференция по итогам научно-исследовательской и производственной работы за 2010 г. (Саратов, 2011), «Инновационные технологии создания и возделывания сельскохозяйственных растений» (Саратов, 2011), «Исследования молодых ученых в биологии и экологии» (Саратов, 2011), «Экология, генетика, селекция на службе человечества» (Ульяновск, 2011), «Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата» (Ростов-на-Дону, 2012); всероссийских - конференция, посвященная 100-летию со дня рождения С.С. Хохлова (Саратов, 2010), «Исследования молодых ученых в биологии и экологии» (Саратов, 2011), П-й Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов, посвященной 135-летию А.И. Стебута «Проблемы и перспективы аграрной науки в России» (Саратов, 2013), а также 10-я и 13-я молодежная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» (Москва, 2010, 2013), конференция 2-ой специализированной агропромышленной выставки «САРАТОВ-АГРО 2011» (Саратов, 2011), Третья школа-конференция молодых ученых Волго-Уральского региона по физико-химической биологии и биотехнологии «Биомика - наука XXI века» (Уфа, 2012).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 34 работы, из них 6 - в рекомендованных ВАК РФ изданиях.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы,

включающего 204 источника, в т.ч. 106 - на иностранных языках. Работа изложена на 131 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 14 рисунками и 29 таблицами.

Проведение исследований. Работа выполнена в ГНУ НИИСХ Юго-Востока Россельхозакадемии и является частью НИР лаборатории клеточной селекции «Разработать усовершенствованную биотехнологию ускоренного создания селекционного материала озимой гексаплоидной тритикале» № гос. регистрации 15070.6111004668.06.8.002.2.

ГЛАВА 1. КЛЕТОЧНЫЕ БИОТЕХНОЛОГИИ И СОЗДАНИЕ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ ТРИТИКАЛЕ

(обзор литературы)

1.1. Тритикале как перспективная зерновая культура

В селекции зерновых культур все большее значение приобретает отдаленная гибридизация, значительно расширяющая возможности селекционера в создании трансгрессивных генотипов по продуктивности, зимостойкости, качеству зерна и другим хозяйственно-значимым признакам, которыми должен обладать современный сорт культурного злака.

В последнее время в теоретическом и селекционно-практическом отношениях особую роль приобретает тритикале (X Triticosecale Wittmack) -новый ботанический вид злакового растения (пшенично-ржаные амфидиплоиды). В термине тритикале объединены латинские названия родов родительских компонентов Triticum (пшеница - мать) и Seeale (рожь - отец).

В 2011 г площади под тритикале в мире составили 3,9 млн. га. В сравнении с 1998 г. увеличение составило 1,6 млн. га (FAO http://faostat.fao.org). Основными странами, в которых культивируется тритикале, являются Польша, Беларусь, Германия, Франция, Австралия и Китай. В РФ тритикале возделывается на площади 222 тыс. га (таблица 1). В Приволжском ФО площади составляют 92,1 тыс.га, в Саратовской области - 4,4 тыс.га (Пономарев, 2012).

В зерне тритикале накапливается значительное количество белка высокой биологической ценности. По содержанию незаменимых аминокислот белки этой культуры более полноценны, чем белки пшеницы. Количество незаменимой аминокислоты - лизина - в белках зерна, муки и отрубей выше, чем у пшеницы. Тритикале характеризуется также минеральной и витаминной

сбалансированностью зерна. Урожай зерна некоторых сортов составляет 1011 т/га. Ценное качество зерновых сортов - способность формировать высокую

долю зерна в накопленной биомассе, по сравнению с другими сельскохозяйственными культурами. Культура хорошо отзывается на внесение удобрений и окупает их затраты (Орлова, 2011).

Народно-хозяйственное значение этой культуры можно рассматривать в трех основных направлениях. Прежде всего, это использование в кормлении сельскохозяйственных животных - тритикале используется как главный компонент комбикормов. В Польше разработана технология переработки зерна тритикале, позволяющая использовать его до 80% в рационе при откорме свиней и бройлеров. В системе организации кормления животных в летний период важная роль принадлежит зеленому конвейеру, неотъемлемой частью которого является тритикале. Кормовая направленность тритикале обусловливается высоким биологическим потенциалом урожайности зеленой массы. Биологическая ценность зерна тритикале в целом выше, чем у пшеницы и ржи. При включении в рацион зерна тритикале среднесуточный привес животных выше, чем при скармливании зерна пшеницы, ячменя и кукурузы, а затраты корма на единицу привеса ниже (Возделывание и использование..., 2004).

В России тритикале используют в производстве комбикормов для свиней и бройлеров и спирта (его выход из зерна тритикале на 3-5% больше, чем из зерна пшеницы и других зерновых культур).

Мука из зерна тритикале служит как основной компонент сырья в кондитерском производстве (бисквиты, печенье, кексы, крекеры), при приготовлении быстрых завтраков. Широкое применение получают хлебобулочные изделия из муки нескольких злаков с участием тритикале.

Объединение в одном организме генетических потенциалов пшеницы и ржи привело к созданию культуры, которая по урожаю зерна и питательной ценности превосходит обоих родителей. Однако тритикале не лишено недостатков, главный из которых - низкие хлебопекарные качества. Они могут быть устранены с помощью методов хромосомной инженерии за счет введения в кариотип гексаплоидных тритикале хромосом Б-генома мягкой пшеницы.

Таблица 1 - Производство зерна тритикале в мире (БАО http://faostat.fao.org)

№ Страна Посевная Урожайность, Валовый

п/п площадь, тыс.га ц/га сбор, тыс. т

1 Польша 1269,3 33,4 4235,3

2 Беларусь 413,7 32,0 1324,2

3 Франция 391,0 50,8 1986,0

4 Германия 383,4 52,3 2004,3

5 Китай 250,0 18,1 453,0

6 Российская Федерация 222,0 23,5 522,6

7 Австралия 187,2 19,0 355,1

8 Венгрия 119,5 31,1 371,9

9 Литва 110,8 22,1 245,0

10 Испания 64,0 21,7 138,7

11 Австрия 47,8 48,2 230,5

12 Бразилия 46,6 25,2 117,5

13 Чешская Республика 45,9 37,3 171,2

14 Румыния 40,7 30,3 123,1

15 Швеция 37,4 44,1 164,9

16 Дания 36,5 48,6 177,4

17 Сербия 36,3 31,3 113,4

18 Турция 26,8 34,7 93,3

19 Португалия 24,5 10,6 25,9

20 Канада 22,2 29,7 65,9

Всего 3850,8 13384,9

1.2. Генетический материал для селекции тритикале

Первичные тритикале (амфидиплоиды, 2п=3х=42) являются важным исходным материалом для селекции. Основным преимуществом скрещиваний большого числа форм пшеницы с рожью заключается в расширении генетического потенциала тритикале и возможности его использования для получения новых форм путем внутривидовой гибридизации. Разработка и использование метода колхицинирования и эмбриокультуры в 50-60-х годах XX века явились важной вехой в синтезе гексаплоидных тритикале. Вместо поиска редких спонтанных амфидиплоидов и использования таких низкоэффективных методов, как доопыление стерильных гибридов Бь генетики и селекционеры получили возможность сравнительно легко и быстро синтезировать новые амфидиплоиды (ААВВКК.) практически в неограниченном количестве. Последние цитологически более стабильны и фертильны по сравнению с октаплоидами (ААВВБВКЯ). Практическая селекция доказала перспективность их использования. Прогресс, достигнутый в разработке методов колхицинирования, стимулировал в 50-60-х годах XX века синтез гексаплоидных тритикале. Процесс создания первичных гексаплоидных тритикале с помощью метода эмбриокультуры при скрещивании тетраплоидной пшеницы с ди- и тетраплоидной рожью состоит из трех основных этапов.

1. Скрещивание пшеницы (АВ) с рожью (Я) и получение пшенично-ржаных гибридов.

2. Получение амфигаплоидов (АВЯ, 2п=21) с помощью метода эмбриокультуры.

3. Получение амфидиплоидов (ААВВКЛ, 2п=42) путем колхицинирования.

Скрещивания твердой пшеницы с рожью характеризуются более ярко выраженной постгамной несовместимостью геномов пшеницы и ржи с нарушениями всего эмбрио- и эндоспермогенеза, что было продемонстрировано при создании первичных гексаплоидных тритикале (Гордей, 1992; Тимофеев,

2000). Семена лишены эндосперма и для получения амфигаплоидов требуется обязательное культивирование зародышей на искусственной питательной среде. Оказалось, что при увеличении уровня плоидности у пшеницы совместимость с рожью возрастает, поэтому получение пшенично-ржаных амфигаплоидов при скрещивании гексаплоидных пшениц с диплоидной рожью осуществляется значительно легче.

По современным данным (Catalogue of Gene Symbols of Wheat, 2008), скрещиваемость пшеницы с рожью и другими видами контролируют четыре гена: krl локализованный на 5BL, кг2 локализован на 5AL, кгЗ на 5D и кг4 на 1А-хромосомах. Доминантные Кг-tquu не только ингибируют рост пыльцевых трубок ржи в тканях пестика пшеницы и процесс оплодотворения (прогамная несовместимость), но и нарушают развитие эндосперма и зародыша в гибридном семени (постгамная несовместимость).

Н.И. Вавилов (1967) отмечал, что сохранение генов высокой совместимости с рожью среди пшениц Китая, Японии и Сибири связано, по-видимому, с их географической изоляцией и отсутствием перекрестного опыления, т.к. в этих земледельческих районах возделывается или пшеница или рожь. Японские и китайские сорта пшеницы, в особенности местного происхождения, проявляют и высокую скрещиваемость с Hordeum bulbosum с частотой завязываемости до 30% (Inagaki, Snape, 1982; Lie et. al., 1982).

Большинство сортов мягкой пшеницы (75-80%) имеют генотип KrlKr2, а генотип krlkr2 - только 7%. Среди сортов мягкой пшеницы в опытах Гордей (1992) выявлены сорта «Роазон» (Франция) и к-42052 (КНР), которые обладают высокой скрещиваемостью с рожью (более 50%).

Хорошая скрещиваемость мягкой пшеницы с рожью обусловлена двумя рецессивными генами krl и Аг2, причем ген krl оказывает более сильное влияние на совместимость с рожью, чем ген кг2. Сорта пшеницы с доминантными генами Krl и Кг2 при опылении пыльцой ржи завязывают до 10% гибридных семян. Пшеницы с генотипом Krl кг 2 и krl Кг 2 завязывают соответственно 10-30 и 30-

50%, а пшеницы с генотипом krlkr2 - более 50% семян (Lei, 1943, цит. по Гордей, 1992).

Кролов (1970) полагал, что межсортовые различия по уровню скрещиваемости с рожью связаны с особенностями распределения генов совместимости. Он подразделял сорта мягкой пшеницы по скрещиваемости с рожью на четыре группы:

1. KrlKrlKr2Kr2 - при опылении рожью завязывают 0-10% семян;

2. KrlKrlkr2kr2 - завязывают при опылении рожью 10-30% гибридных семян;

3. krlkrlKr2Kr2 - завязывают 30-50% семян;

Новый важный этап в селекции гексаплоидных тритикале начался, когда было показано, что гибридизация между октаплоидными и гексаплоидными линиями приводит к появлению ценных в селекционном отношении рекомбинантов. В потомстве таких гибридов могут быть отобраны так называемые вторичные тритикале, обладающие улучшенными свойствами по сравнению с исходными 42-х хромосомными формами. Значение такого подхода для селекции было оценено Писаревым (1960) и Махалиным (1963). Таким путем были созданы гексаплоидные тритикале с повышенной продуктивностью, хорошо озерненным колосом и устойчивые к полеганию.

Следующий крупный шаг в селекции гексаплоидных тритикале связан с созданием новой высокоурожайной культуры - озимой гексаплоидной тритикале. Наиболее результативным подходом в селекции гексаплоидных тритикале явился синтез трехвидовых форм, объединяющих признаки трех видов - мягкой пшеницы, твердой пшеницы и ржи. Сущность метода заключается в том, что первое поколение гибридов от скрещивания мягкой пшеницы AABBDD с рожью RR опыляют пыльцой двухвидовых гексаплоидных тритикале (AABBRR). Такой метод синтеза тритикале А.Ф. Шулындиным был назван биологическим, так как химические либо физические воздействия на растения здесь не используются (Шулындин, 1975). Созданные в Украинском НИИ растениеводства, селекции и генетики им. Юрьева сорта трехвидовых тритикале «Амфидиплоид 206»,

«Амфидиплоид 201» характеризовались высокой зимостойкостью и урожайностью, хорошим качеством зерна и зеленой массы (Шулындин, 1975). Сорт тритикале «АД 206» был первым районированным в стране сортом этой культуры. Сорт «АД 206» был стандартом до 1986 года, затем его сменил «сорт АД 3/5», также селекции УНИИРСиГ им Юрьева. Новый сорт превосходил «АД 206» по продуктивности и особенно по качеству зерна. В то же время «АД 3/5» имел один существенный недостаток - ломкий колос. При малейшем перестое колос распадался на отдельные колоски, зерно плохо вымолачивалось.

Линии с замещениями и транслокациями - исходный материал для селекции тритикале. У тритикале генетическая изменчивость может быть расширена при получении новых первичных тритикале, а также созданием линий с замещениями или транслокациями от D-генома. Генный пул D-генома мягкой пшеницы является основным источником для улучшения тритикале (Gill et al., 2004).

Для переноса генов из различных генных пулов разработаны методы «хромосомной инженерии» (Qi et al., 2007). Первой ступенью переноса генов является получение амфидиплоидов, а также линий с дополненными и замещенными хромосомами. Термин «хромосомная инженерия» был введен в обиход американским ученым Эрнестом Сирсом (1977). Согласно трактовке автора, он означает перенос чужеродных хромосом, несущих отдельные желаемые гены, в хромосомы пшеницы. По мере разработки этого направления понятие «хромосомная инженерия» было расширено и в настоящее время включает манипуляции хромосомным составом растений на уровне целых геномов, отдельных хромосом и их сегментов для увеличения генетического разнообразия культурных видов.

Для переноса целых хромосомных плеч у пшеницы используются центрические разрывы-слияния унивалентных хромосом. Униваленты имеют тенденцию разрываться в центромере с последующим слиянием разорванных плеч и образованием Робертсоновских транслокаций.

Для переноса фрагментов меньших, чем целое плечо, Сире применил радиацию, осуществив перенос гена Lr9 от Ае. umbellulata в мягкую пшеницу. Для этой же цели используются и так называемые гаметоцидные гены, а также ионизирующее излучение. Такие приемы индуцируют случайные разрывы хромосом и последующие слияния разорванных сегментов.

Частота гомеологичных рекомбинаций оценивается по частоте хиазм между цитологически маркированными хромосомами и может быть различной у разных видов, разных хромосом и их плечах. Так, при изучении гомеологичной рекомбинации между хромосомой пшеницы 2В и ржаной 2R были обнаружены 30-кратные различия по частоте рекомбинаций в коротком плече (2RS и 2BS; 0,48%) и длинном (2RL и 2BL; 14,67%) (Lukaszevski et al., 2004).

В хромосомной инженерии используются гены, оказывающие влияние на уровень гомеологичной рекомбинации. Классическим примером использования фактора регуляции является Phi (pairing homeologous) ген (Sears, 1977). У мягкой пшеницы Phi-ген супрессирует гомеологичную рекомбинацию. При отсутствии этого гена происходит гомеологичная рекомбинация с последующими структурными преобразованиями хромосом.

Используя воздействие радиацией, Сире получил у яровой пшеницы «Чайнз Спринг» мутацию phlb, использование которой обеспечивало гомеологичную рекомбинацию между пшеничными и чужеродными хромосомами.

Замещение хромосом (chromosome substition) - процесс целенаправленного замещения хромосом данного организма на гомо- или гомеологичные хромосомы генетически отличающихся организмов в процессе гибридизации и селекции. Особый интерес у тритикале имеют R(D), R(B), A(D), B(D) - замещения, первые сообщения о которых появились в начале 70-х годов и были основаны на анализе конъюгации хромосом при скрещивании тритикале с телоцентриками, несущими D-хромосомы.

В то же время считается, что присутствие некоторых хромосом ржи необходимо, поскольку с ними связываются отдельные хозяйственно-ценные признаки. Так, например, при наличии 4R и 6R хромосом обеспечивается высокое

содержание белка, высокое содержание лизина связано с присутствием 311 и 6Я хромосом, а устойчивость к низкому рН и токсичности алюминия обеспечивается присутствием 1Яи отсутствием 7Я хромосом(8о\уа, Ош1аГзоп, 1980).

Существуют различные взгляды на перспективы использования линий, содержащих замещенные хромосомы. Первоначально отмечалась низкая конкурентная способность таких линий. Однако такие данные получены на единичных линиях. Проявление тех или иных признаков в конкретной линии обусловлено взаимодействием пшеничных и ржаного геномов, что может приводить к новому проявления признака.

При получении новых сортов тритикале селекционеры должны использовать все возможности получения рекомбинантных форм, включая методы геномной и хромосомной инженерии. Существуют различные методы получения замещенных форм тритикале.

1. Скрещивание тритикале разного уровня плоидности. Б(А) и О(В)-замещения можно получить в результате скрещивания октаплоидных форм с гексаплоидными. Изменчивость по числу хромосом у гибридов первого поколения является следствием цитологической нестабильности гамет октаплоидов. Метод позволяет получать 42-х хромосомные формы с широким спектром межгеномных замещений. Главным достоинством этого метода является большое разнообразие получаемого материала (Дубовец, 1995).

2. Скрещивание гексаплоидых тритикале с мягкой пшеницей. замещения можно получить в результате скрещивания гексаплоидных тритикале с мягкой пшеницей с последующим отбором тритикальных линий.

Все перечисленные факторы изменчивости обеспечивают возможность отбора определенных генотипов среди этих гибридов. Среди таких гибридов были выделены константные линии, превышающие родительский сорт, а также сорт мягкой пшеницы по следующим признакам: длине колоса, массе 1000 зерен, содержанию белка и клейковины, некоторым показателям хлебопекарных качеств, вегетационному периоду, а также урожайности. Были обнаружены также

линии, превосходящие родительские сорта по зимостойкости (в том числе по морозостойкости) и по устойчивости к некоторым заболеваниям.

В тех случаях, когда в таких скрещиваниях тритикале используется в качестве материнской формы, завязывается меньше семян, чем при реципрокном скрещивании, но развитие этих семян идет лучше. Завязываемость зерновок составляет 25,3% при почти 100% всхожести гибридных семян (Степочкин, 2009). В экспериментах Максимова (1975) при опылении 15135 цветков гексаплоидного тритикале мягкой пшеницей завязалось 26,4% зерновок, их всхожесть составляла 73,7%; в обратной комбинации при опылении 5134 цветков мягкой пшеницы был 990 получено 61,9% зерновок, однако их всхожесть составила всего 0,5% (Максимов, 1975).

Цитоэмбриологический анализ причин реципрокных различий по завязываемости семян и их всхожести показал, что в зависимости от направления скрещивания несовместимость проявляется на разных этапах развития семян. Если в качестве материнского родителя используется тритикале, то несовместимость проявляется с момента взаимодействия пыльцевой трубки с тканями пестика, что приводит к уменьшенному числу оплодотворенных семяпочек. Неоплодотворенные зародышевые мешки дегенерируют к 10 дню после опыления. В тех же случаях, когда оплодотворение происходит, развитие гибридных семян протекает относительно нормально, что приводит к высокой всхожести семян первого гибридного поколения.

В реципрокных скрещиваниях Т. аезйуит х ТгШса1е несовместимость проявляется позднее - после оплодотворения. Нарушения охватывают зародыш и эндосперм на разных фазах развития, в результате чего получается большое количество семян, но щуплых и нежизнеспособных (Молхова, Сьбева, 1976). По мнению авторов, наблюдаемые нарушения являются следствием глубоких физиологических процессов несовместимости между пшеницей и рожью. В скрещиваниях мягкой пшеницы с гексаплоидными тритикале нет хромосомных различий. Разница существует в геномной конституции эндосперма (АААВВВОШ1, АААВВВООЯ) и цитоплазмы. В одном случае цитоплазма

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Акинина, Виктория Николаевна

ВЫВОДЫ

1. На основе использования эмбриокультуры in vitro получены новые межродовые гибриды тритикале х мягкая пшеница по 36 реципрокным комбинациям скрещивания - 13 прямых и 23 обратных на основе современных адаптивных сортов и перспективных линий этих культур.

2. Частота эмбриогенных пыльников варьировала в разных гибридных комбинациях тритикале * мягкая пшеница от 6,7 до 46,3%, новообразований (каллусов и эмбриоидов) - от 9,1 до 78,2%, растений-регенерантов - от 1,0 до 31,4%. Соотношение зеленых растений к альбиносам составило 1:5.

3. Доля влияния генотипа, состава питательной среды и их взаимодействия различается на отдельных этапах андрогенеза in vitro у тритикале. Наибольший вклад на этапе «индукция эмбриогенных пыльников» и «индукция новообразований» оказал генотип (58,1 и 75,0% соответственно). Для этапа «регенерация растений» доля влияния генотипа и взаимодействия генотип х питательная среда была примерно одинаковой (45,5 и 51,7%). Регенерация зеленых растений обусловлена, главным образом, взаимодействием генотип х питательная среда (69,8%).

4. Культивирование сегментов колосьев на 5-6 этапе органогенеза позволяет снижать генотипическую зависимость формирования эмбриогенного каллуса и регенерантов и может быть использовано при микроклональном размножении стерильных гибридов и гаплоидов.

5. Выявлены DH-линии тритикале JI 3, 9, 10, 11 и 13, содержащие высокомолекулярные запасные белки мягкой пшеницы.

6. Выделены линии с величиной SDS-осадка, как экспресс-метода оценки качества зерна тритикале, промежуточной между традиционными тритикале и мягкой пшеницей. Наибольшая величина осадка отмечена для DH-линий Л 2, 3, 8,9, 12, 13.

7. Создана и включена в селекционный процесс коллекция DH-линий, различающихся комплексом хозяйственно-ценных признаков на основе гибридов

тритикале х мягкая пшеница. В контрольный питомник включены Л№8 и Л№9, характеризующиеся высокой урожайностью зерна, массой 1000 зерен, промежуточной между тритикале и пшеницей величиной SDS-осадка.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для пополнения генофонда тритикале на основе скрещиваний мягкая пшеница х тритикале применять метод культуры зародышей in vitro.

2. Для размножения стерильных растений тритикале (гаплоиды и отдаленные гибриды) использовать сегменты колосьев на 5-6 этапе органогенеза.

3. В селекции, биотехнологии и генетике тритикале использовать полученные DH-линии тритикале.

110

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Акинина, Виктория Николаевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Айдиев А .Я. Роль экологической селекции в создании новых сортов тритикале для адаптивного земледелия // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012. -С. 9-11.

2. Антоненко Е.В., Кременевская Е.М., Ермишина Е.М., Лемеш В.А. Анализ полиморфизма микросателлитных локусов, связанных со способностью к андрогенезу in vitro у ярового гексаплоидного тритикале / X Междунар. конф. «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». -Казань, 2013.-С.93.

3. Батыгина Т.Б. Хлебное зерно: атлас. Л.: Наука, Ленингр. отд-ние, 1987.- 102 с.

4. Батыгина Т.Б. Пыльник как модель изучения морфогенетических потенций и путей морфогенеза // Эмбриология цветковых растений: терминология и концепции. Т.1. Генеративные органы цветка. - СПб., 1994. -С.120-121.

5. Бебякин В.М. Эффективность отбора по показателю SDS-седиментации в гибридных популяциях яровой мягкой пшеницы // Аграрный вестник Юго-Востока. - 2009. - №3. - С. 13-14.

6. Бебякин В.М., Бунтина М.В., Васильчук Н.С. Информативность показателя ДСН - седиментация в связи с селекцией яровой твердой пшеницы // Доклады ВАСХНИЛ. - 1987. - № 3. - С. 3-5.

7. Беспалова Л.А., Боровик А.Н., Пузырная О.Ю. Использование гена сферококкоидности в создании зернового тритикале // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012.-С. 21-26.

8. Бободжанов В.А., Солоненко Л.П., Бободжанова М.Б. Биохимические особенности зерна гексаплоидного тритикале // Докл. ВАСХНИЛ. -1988. -№5. -С.5-8.

9. Большова H.JI., Бадаева Е.Д., Бадаев Н.С.Сравнение дифференциально окрашенных хромосом у двух родственных видов ржи // Генетика. - 1984. №12.-С.-2025-2030.

10. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. -М.: Наука, 1974. -272 с.

11. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе: учеб. пособие. - М.:ФБК-Пресс, 1999. - 160 с.

12. Вавилов H.H. Роль Центральной Азии в происхождении культурных растений // Избр. произв. в 2-х томах. - Л.Б. - 1967. -536 с.

13. Внучкова В. А. Получение фертильного потомства от гаплоидных растений тритикале, выращенных из пыльников in vitro // Докл. ВАСХНИЛ. - 1980. -№8. - С. 15-17.

14. Возделывание и использование тритикале в Краснодарском крае / Романенко A.A., Тимофеев В.Б., Беспалова Л.А. и др. // РАСХН, КНИИСХ. -Краснодар. - 2004., 56 с.

15. Высоцкая И.Б. Культура пыльников in vitro в селекции тритикале: автореф. дис. ...канд. биол. наук. - Ставрополь, 2002. -20 с.

16. Высоцкая И.Б., Кривенко A.A., Барыльник К.Г. Формообразовательный процесс в поколении R2 андроклинных регенерантов тритикале // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. -Ростов-н/Д, 2012. -С. 26-33.

17. Высоцкая И.Б., Кривенко A.A., Барыльник К.Г. Эффективное использование метода искусственного андрогенеза в селекции тритикале // Роль тритикале в стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ. конф. -Ростов-н/Д, 2010. - С.11-16

18. Гааль Э., Медьеши Г., Верецкеи Л. Электрофорез в разделении биологических макромолекул. -М.:Мир, 1982. -448 с.

19. Гирко B.C. Методы клеточной селекции в селекционных программах зерновых культур // Вестн. с.-х. науки. - 1992. -Т.7. - С.85-88.

20. Гирко B.C. Преодоление поетгамных барьеров несовместимости при отдаленной гибридизации злаков // Докл. РАСХН. - 1996. -№1. - С. 4-7.

21. Гирко B.C., Гирко A.B. Прикладная биотехнология в селекции и растениеводстве // Геном растений: материалы V междунар. конф. - Одесса, 2008.-С. 39-42.

22. Гончаров C.B. Европейский семенной рынок тритикале // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: материалы междунар. науч.-практ. конф. -Ростов-н/Д, 2012. -С. 141-146.

23. Гордей И.А. Тритикале. Генетические основы создания. -Минск: Наука и техника, 1992. - 287 с.

24. Гордей И.А. Хромосомные технологии в селекции зерновых культур // В мире науки. 2011. 4(98), http//www.innosfera.org/node/991

25. Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию / МСХ РФ, ФГБУ «Государственная комиссия Российской Федерации по испытанию и охране селекционных достижений». -М. 2012.-384 с.

26. Гриб С.И., Буштевич В.Н. Генофонд, методы и результаты селекции тритикале в Беларуси // Генетичш ресурси рослин. - 2008. - №5. -С.137-143.

27. Грабовец, А.И., Крохмаль A.B., Чекунова H.A. Особенности селекции гексаплоидных тритикале в условиях Среднего Дона и некоторые итоги // Генетика и селекция растений на Дону. - Ростов- н/Д, 2003. - Вып. 3. -С. 107-133.

28. Грабовец А.И. Методы и результаты селекции озимого тритикале на Дону // Роль тритикале в стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2010.-С. 66-74.

29. Грабовец А.И., Крохмаль A.B., Копусь М.М. Некоторые аспекты седлекции хлебопекарных тритикале // Роль тритикале в стабилизации и

увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ. конф. -Ростов-н/Д, 2010.-С. 57-66.

30. Грабовец А.И., Крохмаль A.B., Шевченко H.A. Принципы селекции и использование тритикале для хлебопекарных целей // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, межд. науч.-практ. конф. -Ростов-н/Д, 2012. -С. 41-48.

31. Грабовец А.И. Тритикале - культура будущего /http://www.avgust.com/

32. Грабовец А.И. Тритикале - культура какого рода и для каких целей? /http://www.agroyug.ru/

33. Гриб С.И., Буштевич В.Н. Селекция тритикале в Беларуси результаты, проблемы и пути их решения // Роль тритикале в стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ конф. - Ростов-н/Д, 2010. - С. 74-79.

34. Дивашук М.Г.Идентификация хромосомных транслокаций и замещений у некоторых форм яровой тритикале: автореф. дис. ...канд. биол. наук-М., 2007.-20 с.

35. Дьячук Т.И., Дьячук П.А. Методические рекомендации по получению гаплоидных растений мягкой пшеницы в культуре пыльников. - М. ВАСХНИЛ, 1989. - 37с.

36. Дьячук Т.И. Технологические и селекционные аспекты гаплоидии (на примере пшеницы и ячменя): автореф. дис. ... д-ра. биол. наук -Саратов, 2003.-50 с.

37. Дьячук Т.И., Акинина В.Н., Кибкало И.А. Исходный материал для селекции тритикале в Поволжье // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф., - Ростов-н/Д, 2012.-С.12-15.

38. Дьячук Т.И., Акинина В.Н., Поминов A.B., Кибкало И.А. Культура клеток в селекции пшеницы и тритикале / X Междунар. Конф.

биология клеток растений in vitro и биотехнология сборник тезисовказань 1418 октября 2013 г С.340-341.

39. Зеленин A.B. Геном растений // Вестн. РАН. - 2003. - Т. 73, №9. -С. 797-806.

40. Иванов Г.И. Биотехнологические аспекты создания исходного материала для селекции зерновых колосовых культур: автореф. дис. ... д-ра биол. наук. - Краснодар, 2006. - 46 с.

41. Игнатова С.А. Клеточные биотехнологии в растениеводстве, генетике и селекции растений: задачи, возможности разработки систем in vitro: [монография]. - Одесса: Астропринт, 2011. - 224 с.

42. Ильина Л.Г. Селекция яровой пшеницы в НИИСХ Юго-Востока / Сб. научных трудов НИИСХ Юго-Востока. Саратов. -1970. - 254 с.

43. Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В., Полищук В.Е. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. - Киев: Наукова думка, 1980.-399 с.

44. Клеточные биотехнологии в создании исходного материала для селекции тритикале / Т.И. Дьячук, О.В. Хомякова, C.B. Столярова, Ю.В. Итальянская, Н.Ф. Сафронова, Л.П. Медведева // Агр. вестник Юго-Востока. -2009. -№2.~ С. 9-10.

45. Ковтуненко В.Я. Тимофеев В. Б., Дудка Л.Ф. Методы и результативность селекции тритикале // Эволюция научных технологий в растениеводстве: сб. научных трудов в честь 90-летия КНИИСХ им. П.П. Лукьяненко. - Т.2. Тритикале. - Краснодар. 2004. - 362 с.

46. Ковтуненко В.Я. Селекция озимой и яровой тритикале различного использования для условий Северного Кавказа: автореф. дис. .. .д-ра с.-х. наук. - Краснодар, 2009. - 50 с.

47. Конарев В.Г. Молекулярно-биологические исследования генофонда культурных растений в ВИРе (1967-2007). - СПб., 2007. - 134 с.

48. Копусь М.М., Копусь Е.М. Генетика, геномика, синтетическая селекция и качество зерна пшеницы и тритикале // Роль тритикале в

стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ конф. - Ростов-н/Д, 2010. - С. 24-29.

49. Копусь Е.М., Копусь М.М. Проламиины зерна селекционных сортов зерновых культур в Ростовской области для идентификации и улучшения сортовых качеств семян // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012.-С. 53-59.

50. Копусь М.М., Самофалов А.П., Маркарова А.Р. Эталоны электрофореграмм проламинов зерна в сортовой идентификации лабораторными методами // Зерновое хозяйство. - 2009. - №2. - С. 1-6.

51. Крупнов В. А. Сравнительная оценка биотехнологических методов в селекции злаков // Вестн. с.-х. науки. - 1989. - №3. - С. 23-29.

52. Куркиев У.К., Куркиев К.У., Абдулаева А.К. Создание гексаплоидных тритикале с хромосомами генома D // Роль тритикале в стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ конф. - Ростов-н/Д, 2010. - С. 34-41.

53. Кучеренко JI.A. Биологические особенности риса в культуре in vitro и создание на их основе биотехнологий получения исходного селекционного материала : автореф. дис. ...д-ра биол. наук. -М., 1991.-41 с.

54. Лаптев Ю.П. Гетероплоидия в селекции растений. -М.: Колос, 1984.-247 с.

55. Лукьянюк С.Ф. Разработка приемов in vitro для получения гаплоидов ячменя и тритикале: автореф. дис. ...канд. биол. наук. - М., 1983. -18 с.

56. Методические рекомендации по получению гаплоидных растений мягкой пшеницы в культуре пыльников /сост.: Т.И. Дьячук, П.А. Дьячук; - М. ВАСХНИЛ, 1989. -37 с.

57. Методы культуры тканей и органов в селекции растений: методические рекомендации / ВСГИ; сост.: С.Ф. Лукьянюк, С.А. Игнатова -Одесса, 1980.-21 с.

58. Мировая коллекция ВИР - исходный материал для селекции яровых тритикале / Т.А. Юрченко, A.B. Крохмаль, А.И. Грабовец, П.В. Михайленко // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012. - С. 136-141.

59. Мироненко H.H. Особенности аминокислотного состава белка зерна тритикале, http: //chem.kstu.ru

60. Молхова Е., Сьбева 3. Исследование развития зародыша и эндосперма при скрещивании Triticale (2п=42) и Triticum aestivum L.// Тритикале: проблемы и перспективы: сб. науч. работ - Каменная степь, Часть II. Генетика и селекция. -1976. - С. 43-65.

61. Молканова, О.И., Данилова Т.В. Выход гаплоидных растений яровой пшеницы (Triticum aestivum L.) в культуре пыльников в зависимости от состава Сахаров питательной среды // Изв. ТСХА. - 1984. - №4. - С. 69-75.

62. Ницше В. Гаплоиды в селекции растений. - М.: Колос. 1980. -

126 с.

63. Новак Ф.И. Индукция гаплоидов в культуре тканей и их значение для селекции растений // Культура клеток растений и биотехнология. М, 1986.-С. 159-167.

64. О проблемах изучения генофонда и селекции тритикале / A.M. Медведев, J1.M. Медведева, М.А. Сидорова, В.А. Лавринова, О.В. Постовая // Роль тритикале в стабилизации и увеличении производства зерна и кормов: матер, междунар. науч.-практ конф. - Ростов-н/Д, 2010. - С. 41-51.

65. Орлов П.А. Факторы, определяющие эффективность индукции пыльцевого эмбриогенеза у пшеницы и тритикале // Теоретические и прикладные аспекты биохимии и биотехнологии растений: сб. науч. тр. III межд. конф. - Минск, 14-16 мая 2008. - Минск, 2008. - С.204-209.

66. Орлова, Н.С. Селекция тритикале в Нижнем Поволжье: автореф. дис. .. .д-ра с.-х. наук. - Саратов, 2002. -48 с.

67. Орлова, Н.С. Оценка зерновой продуктивности новых сортов озимой тритикале в конкурсном сортоизучении // Вавиловские чтения 2006: матер, междунар.науч.конф. - Саратов, 2006. - С. 41-43.

68. Орлова Н.С., Каневская И.Ю., Касынкина О.М. / Селекция тритикале в Нижнем Поволжье: история создания, биологические особенности, использование [монография]. - Саратов: ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 2011.- 180 с.

69. Осадчая Т.С., Першина Л.А., Девяткина Э.П. Влияние чужеродного генетического материала на андрогенез in vitro у мягкой пшеницы / X Международ. Конф. «Биология клеток растений in vitro и биотехнология (сб. тезисов). - Казань, 2013. -С. 133-134.

70. Официальный сайт FAO. - Режим доступа: http://faostat.fao.org

71. Оценка качества зерна мягкой пшеницы SDS-седиментацией /

B.П. Нецветаев, О.В. Лютенко, Л.С. Пащенко, И.И. Попкова // Сельскохозяйственная биология. - 2010. - №1. - С. 61-70.

72. Оценка хозяйственной ценности генотипов озимого тритикале (Triticosecale Wittmack) в условиях Беларуси / Н.П. Шишлова, В.А. Бандарчук, Ю.А. Кацер, Л.В. Новикова // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012. -

C.110-115.

73. Павлюк Н.Т., Гончаров C.B., Ващенко Т.Г. Андрогенез в культуре пыльников тритикале // Биологические основы и методы селекции и семеноводства культурных растений. - Воронеж. 1997. - С. 60-70.

74. Панченко В.В. Изучение и создание исходного материала яровой тритикале в Краснодарском крае: автореф. дис....канд.с.-х. наук. -Краснодар, 2010. - 24 с.

75. Плохинский H.A. Биометрия. Новосибирск: изд-во Новосибирского отделения АН СССР. - 362 с.

76. Пономарев С.Н. Адаптивные подходы к селекции озимой тритикале в республике Татарстан // Тритикале и его роль в условиях

нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012.-С. 80-87.

77. Попов П., Цветков С. Результаты работы по созданию озимых первичных и вторичных гексаплоидных тритикале // Тритикале. Изучение и селекция: матер, междунар. симп. - Ленинград, 3-7 июля 1973г. - Ленинград. 1975.-С. 156- 157.

78. Приходько Н.И. Получение гаплоидных растений из пыльцевых зерен мягкой пшеницы Triticum aestivum L. // Труды по прикл. ботанике, генетике и селекции. - 1980. - Т.67, №3. - С.75-79.

79. Романенко А.А., Тимофеев В.Б., Беспалова Л.А. Возделывание и использование озимого тритикале в Краснодарском крае - Краснодар, 2004. -56 с.

80. Селекционная программа по тритикале в Краснодарском НИИСХ им. Лукьяненко / В.Я. Ковтуненко, В.Б. Тимофеев, Л.Д. Дудка, В.В. Панченко http://bo0k.net/index/php?p=chapter&bid=3879&chapter=l

81. Сибикеев С.Н., Сибикеева Ю.Е., Крупное В.А. Передача хромосомы 5R через гаметы и ее влияние на соматический эмбриоидогенез яровой мягкой пшеницы // Генетика растений. - Т.41, № 12. - С. 1-6.

82. Сорта полевых культур (каталог) / сост. Зинченко В.Е., Грабовец А.И. и др. - Ростов н/Д: Изд-во «Юг», - 2012. - 140 с.

83. Сорта пшеницы и тритикале Краснодарского НИИСХ им. П.П. Луъяненко / сост. Беспалова Л.А.и др.- Краснодар. - 2003. - 63 с.

84. Степочкин П.И. Формообразование в популяциях тритикале, пшеницы, ржи и его использование в селекции для условий Западной Сибири: автореф. дис. ...д-ра. с.-х. наук. - Новосибирск, 2009. - 37 с.

85. Суханов В.М. Андроклиния и ее особенности у пшеницы: дис. .. .канд. биол. наук. - Саратов, 1983. - 224 с.

86. Суханов В.М., Зайкина Т.Ф. Получение андроклинных линий пшеницы и тритикале путем создания органогенных штаммов // Апомиксис и селекция. - Саратов, 1987. -С. 3-13.

87. Тимофеев В.Б. Отдаленная гибридизация в селекции тритикале и пшеницы: автореф. дис. .. .д-ра с.-х. наук. - Немчиновка, 1995. - 48 с.

88. Тимофеев В.Б., Дудка Л.Ф., Ковтуненко В.Я. Однократный и многократный отбор в селекции сортов озимого гексаплоидного тритикале // Пшеница и тритикале: матер, науч.-практ. конф. «Зеленая революция П.П. Лукьяненко» - Краснодар, 2001. - С. 154-163.

89. Фомичева A.A., Крохмаль A.B. Исходный материал для селекции озимых тритикале на скороспелость, продуктивность и качество зерна // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, межд. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012. - С. 110-115.

90. Характеристика сортов тритикале, созданных в ГНУ ДЗНИИСХ http://donagrospravka.narod.ru

91. Ходорцева Л.Ф. Использование культуры зародышей и пыльников in vitro в создании селекционного материала у тритикале: автореф. дис. ...канд. биол. наук. - Минск, 1987. - 18 с.

92. Хомякова О.В. Создание исходного материала для селекции тритикале на основе клеточных биотехнологий : дис. ...канд. биол. наук. -Саратов, 2009.- 143 с.

93. Чистякова В.Н. Гаплоиды неполных пшенично-пырейных амфидиплоидов, мягкой пшеницы и ячменя: получение и использование. - М.: Макс-ПРЕСС, 2000. - 354 с.

94. Шевченко В.Е., Карпачев В.В., Сальникова З.Н. Образцы тритикале с хорошими хлебопекарными качествами // Селекция и семеноводство. - 1982. - №11. - С. 31-33.

95. Шпилев Н.С. Селекция и возделывание сортов озимой гексаплоидной тритикале: автореф. ...дис. докт. с.-х. наук. - Брянск, 2001. - 45 с.

96. Шулындин А.Ф. Генетические основы синтеза различных тритикале и их селекционное улучшение // Тритикале: изучение и селекция. -Л., 1975.-С. 53-56.

97. Щапова А.И., Кравцова Л.А., Потапова Т.А. Закономерности преобразования геномной структуры пшенично-ржаных полигаплоидов ABDR // Генетика. - 1987. - Т.23, №2. - С. 295-301.

98. Щипак Г.В., Цупко Ю.В., Щипак В.Г. Хлебопекарные качества сортов озимой гексаплоидной тритикале (Triticosecale Wittmack) // Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата: матер, междунар. науч.-практ. конф. - Ростов-н/Д, 2012. - С. 125-136.

99. Aditya, P., Gurdeep S., Harinder S. Relative efficiency of anther culture and chromosome elimination techniques for haploid production in triticale x wheat and triticale x triticale hybrids // Euphytica. - 2006. - Vol. 150, № 3. - P. -345.

100. Ainsley P.J. Aryan A.P. Efficient plant regeneration system for immature embryos of triticale (x Triticosecale Wittmack.) II Plant Growth Regul., -

1998.-Vol. 24.-P. 23-30.

101. Arsani A., Darvey N.M. The effect of colchicines on triticale anther-derived plants; microspore pre-treatment and haploid-plant treatment using a hydroponic recovery system // Euphytica, - 2001. - Vol. 122. - P. 235-241.

102. Atak N., Muharemm K., Khavar K. Effect of age on somatic embryogenesis from immature zygotic embryos of 5 turkish triticale genotypes // African J. of Biotechnology. - 2008. -Vol.7 (11). - P. 1765-1768.

103. Barnabas В., Szakacs E., Karsai I. In vitro androgenesis of wheat: from fundamental to practical application // Euphitica. - Vol. 119. - P. 211-216.

104. Barro F., Martin A., Barro F. Medium optimization for efficient somatic embryogenesis and plant regeneration from immature inflorescens and immature scutella of elite cultivars of wheat, barley and tritordeum //Euphytica. -

1999.-Vol. 108.-P. 161-167.

105. Belchev I., Tchorbadjieva M., Pantchev I. Effect of 5-azacytidine on callus induction and plant regeneration potential in anther culture of wheat (Triticum aestivum L.) // Bulg. J. Plant Physiol. - 2004. - Vol. 30 (1-2). - P. - 45 - 50.

106. Benavente E., Cifuents M., Dusautoir J. The use of cytogenetic tools for studies in the crop-to-wild gene transfer scenario // Cytogenetic Genome Res. -2008. - Vol. 120. - P. 384 - 395.

107. Bernard S. In vitro androgenesis in hexaploid triticale -determination of physical conditios increasing embryoid and green plant production // Z. Pflanzenzucht. - 1980. - Vol. 85. -P. 308 - 321.

108. Birsin M. A, Ôzgen M. Comparison of callus induction and plant regeneration from different embryo expiants of triticale (x triticosecale Wittmack.) // Cellular and molecular biology letters. - 2004. -Vol. 9. - P.353 - 361.

109. Bizimungo B., Collin J., Comeau A. Hybrid necrosis as a barrier to gene transfer in hexaploid winter wheat x triticale crosses // Canad. J.Plant Sci. -1998. - Vol. 78. - P. 239 - 244.

110. Budak H., Baenziger S., Breecher B. The effect of introgression of wheat D-genomes chromosomes into "Presto" triticale // Euphytica - 2004. -Vol.137.-P. 261 -270.

111. Buchuk, W. Wheat cultivar identification by gliadin electroforegrams. 1. Apparatus, methods and nomenclature // Canad. J. Plant Sci. -1978.-Vol.58.-P. 505 -507.

112. Cistue L., Soriano M., Castillo A.M. Production of doubled haploids in durum wheat (Triticum turgidum L.) through isolated microspore culture // Plant Cell Rep. - 2006. - Vol.25. - P.257 - 264.

113. Chaubey N.K., Khanna V.K. A study of crossability between wheat, triticale and rye // Curr. Sci. - 1986. - Vol. 55. - P. 744 - 745.

114. Charmet G. and Bernard S. Diallel analysis of androgenetic plant production in hexaploid triticale (x triticosecale, Wittmack) // Theoret. Appl. Genet. - 1984.-Vol. 69.-P. 55-61.

115. Chaudhary H.K., Dhaliwal I., Singh S. Genetics of androgenesis in winter and spring wheat genotypes // Euphytica. -2003. - Vol. 132. - P. 311 - 319.

116. Chaudhary H.K. Relative efficiency of different Graminae Genera for haploid induction in Triticale x wheat hybrids through the chromosome elimination technique // Plant Breed. - 2005. - Vol. 124. - P. 145 - 153.

117. Chaudhary, H.K, Sethi H.K., Singh S. Efficient haploid production in wheat by using pollen of Imperata cylindrical // Plant Breed. - 2005. - Vol.124. - P. 96-98.

118. Chu C.C, The N-6 medium and its application to anther culture of cereal crops // Proc. of symp. of plant tissue culture / Science Press: Peking. 1978. -P. 43-50.

119. Clive J. Global status of commercialized Biotech // GM Crops. ISAAA Brief, 35. Ithaca, NY - 2006. - P. 1 - 2.

120. Devaux P. and Pickering R. Haploids in the Improvement of Poaceae // Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Palmer C.E., Keller W.A and Kasha K.J.): Springer - Verlag. Berlin Heidelberg. 2005. - Vol. 56. - P. 215 - 242.

121. Dunwell Jim M. Haploid in flowering plants: origins and exploitation // Plant Biotechnology Journal. - 2010. - Vol.8. Iss. 4. - P. 377 - 424.

122. Dubas E., Wedzoni M., Petrovska B. Cell structural reorganization during induction of androgenesis in isolated microspore cultures of triticale (Triticosecale Wittm.) // Acta biologica cracoviensia: Series botanica. - 2010. -Vol.52/l.-P. 73 -86.

123. Eapen S., Rao P.S. Plant regeneration from immature inflorescens callus cultures of wheat, rye and triticale // Euphytica. - 1985. -Vol.34. -P. 153 -159.

124. Eudes F., Acharya S., Laroche L.A Novel method to induce direct somatic embryogenesis, secondary embryogenesis and regeneration of fertile green cereal plants // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 2003. - Vol. 73. - P. 147 - 157.

125. Eudes F., Amundsen E. Isolated microspore culture of Canadian 6x Triticale // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 2005. - Vol.82 (3). - P. 233 - 241.

126. Eudes F. and Chugh A. An overview of triticale doubled haploids // Advances in haploid production in higher plants (ed. Touraev et al.): Springer Science + Business Media. - 2009. - Chapter 6. - P. 87 - 96.

127. Ferrie A.M.R., Caswell K.L. Isolated microspore culture technologies and resent progress for haploid and doubled haploid plant production // Plant Cell Tiss Organ Cult. - 2011. - Vol. 104. - P. 301 - 309.

128. Germana M.A. Anther culture for haploid and doubled haploid production // Plant Cell Tiss Organ Cult. - 2011. - Vol. 104. - P.283 - 300.

129. Germana M.A. Gametic embryogenesis and haploid technology as valuable support to plant breeding // Plant Cell Rep. - 2011. - Vol. 30. - P. 839 -857.

130. Gill R.S., Bains N.S. and G.S. Dhinda. Characterization of D/R chromosome segregant lines from triticale x bread wheat crosses using chromosome specific SSR markers http://www.shigen.nig.ac.jp/ewis/article/html/53/article.htm

131. Gupta R.B., Sheperd K.W., MacRitchie. Protein and Quality characterization of triticale translocation lines in breadmaking // Cereal Chem. -2010.-Vol.87.-P. 546-552.

132. Hess R.H., Carman J.G. Embryogenic competence of immature wheat embryos: genotype, donor plant environment and endogenous hormone levels // Crop Sci. - 1998. - Vol.38. - P. 249-253.

133. Hills M., Hall M., Messenger D. Evaluation of crossability between triticale (x Triticosecale Wittmack) and common Wheat, durum wheat and rye // Environm. Biosafety Res. - 2007. - Vol. 6. - P. 249-257.

134. Immonen A.S.T. Influence of media and growth regulators on somatic embryogenesis and plant regeneration for production of primary triticales // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 1996. - Vol. 44. - P. 45-52.

135. Jauhar Prem P. Haploidy in cultivated wheats: induction and utility in basic and applied research // Crop Sc. - 2008. - Vol.49 (3). - P. 737-755.

136. Jonala R.S., MacRitchie F., Herald T.J. Protein and quality characterization of triticale translocation lines in breadmaking // Cereal Chem. -2010. - Vol. 87(6). - P. 546-552.

137. Kammholz S.J., Sutherland M.W., Banks P.M. Improving the efficiency of haploid wheat production mediated by wide crossing // Sabrao Journal. -2000.-Vol. 28.-P. 37-46.

138. Karsai I., Bedo Z. and Hayes P.M. Effect of induction medium pH and maltose concentration on in vitro androgenesis of hexaploid winter triticale and wheat // Plant Cell Rep. - 1994. - Vol. 39. - P. 49-53.

139. Kapila R.K., Sethi G.S. Genotype and age effect of in vitro embryo rescue of bread wheat-hexaploid triticale hybrids // Plant Cell Tissue Organ Cult. -1993.-Vol. 35.-P. 287-291.

140. Karsai I, Bedo Z., Hayes P.M. Effect of induction medium pH and maltose concentration on in vitro androgenesis of hexaploid winter triticale and wheat // Plant Cell Rep. - 1994. - Vol.39. - P. 49-53.

141. Kasha K.J. Chromosome doubling and recovery of doubled haploid plants // Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Palmer C.E., Keller W.A and Kasha K.J.): Springer - Verlag. Berlin Heidelberg, - 2005. - Vol. 56. - P. 123152.

142. Kazman E.M., and Lelley T. Can bread making quality be introduced into hexaploid triticale by whole-chromosome manipulation // Triticale: today and tomorrow. Güedes-Pinto H., Darvey N. and Carnide V.P. (eds). Kluver Academic Publishers. - Dordrecht, 1996.-P. 141-148.

143. Keller J., Klocke E., Schmidt H. Einige morphologische Aspekte bei der Kultur von Antheren // Biol. Rundsch. - 1986. - B. 24. - S. 367-381.

144. Kihara H., Tsunewaki K. Use of an alien cytoplasm as a new method of producing haploids // Japan. J. Genet. - 1962. - Vol.37. - P. 310-313.

145. Kishore N, ChaudharyH.K., Chahota R.K. Relative efficiency of the maize and Imperata cylindrical mediated chromosome elimination approaches for

induction of haploids of wheat-rye derivatives // Plant Breeding. - 2011. - Vol. 130. - P.192-194.

146. Komeda N., Chaudhary H. K., Suzuki G. Cytological evidence for chromosome elimination in wheat x Imperata cylindrical hybrids // Genes Genet. -2007. - Vol. 82. - P. 241-248.

147. Krattiger A.F., Law C.N. The effect of adding NaCl and 2-mercaptoethanol and of other modifications to the SDS-sedimentation test // Gluten Proteins 1990. - St.Paul. - 1990. - P. 156-169.

148. Krzewska M., Czyczylo-Mysza I., Dubas E., Quantitative trait loci associated with androgenetic responsiveness in triticale (x Triticosecale Wittm.) anther culture // Plant Cell Rep. - 2012. - Vol. 31. - P. 2099-2108.

149. Lapitan N.L., Sears R.G., B.S. Gill. Translocations and other kariotypic structural changes in wheat x rye hybrids regenerated from tissue culture // Theoret. Appl. Genet. - 2004. - Vol. 68. - P. 547-554.

150. Laurie D.A., Bennet M.D. The production of haploid wheat plants from wheat x maize crosses // Theoret. Appl. Genet. - 1988. - Vol. 76. - P. 393-398.

151. Laurie D.A., Bennet M.D. Cytological evidence for fertilization in hexaploid wheat x sorghum crosses // Plant Breed. - 1988. - Vol. 100. - P. 73-82.

152. Laurie D.A, Bennet M.D. The timing of chromosome elimination in hexaploid wheat x maize crosses // Genome. - 1989. - Vol. 32. - P. 953-961.

153. Lefebvre D. and Devaux P. Doubled haploids of wheat from wheat x maize crosses: genotypic influence, fertility and inheritance of the 1BL - 1RS chromosome // Theoret. Appl. Genet. - 1996. - Vol. 93. - P. 1267-1273.

154. Lima-Brito J., Carvalho A., Maertin A. Morphological, yield, cytological and molecular characterization of a bread wheat x tritordeum F1 hybrid //J.of Genetics.- 2006. -Vol. 85(2).-P. 123-131.

155. Lorz H., Gobel E., Brown P. Advances in tissue culture and progress towards genetic transformation of cereals // Plant Breed. - 1988. - V.100. - P. 1-25.

156. Lukaszevski A., Gustafson J.P. Translocations and modifications of chromosomes in triticale x wheat hybrids // Theoret. Appl. Genet. - 1983. - V. 64. -P. 239-248.

157. Lukaszevski A. Manipulation of the 1RS.1BL translocation in wheat by induced homoeologous recombination // Crop Sc. -2000. - Vol. 40. - P. 216-225.

158. Lukaszevski A., Rybka K., Korzun V. Genetic and physical mapping of homeologous recombination points involving wheat chromosome 2B and rye chromosome 2R // Genome. - 2004. - Vol. 47. - P. 36-45.

159. Lukaszevski A. Cytogenetic engineered rye chromosomes 1R to improve bread-making quality of hexaploid triticale // Crop Science. - 2006. -Vol. 46.-P. 2183-2194.

160. Marsiniak K. Banaszak Z. and Wedzony M Effects of genotype, medium and sugar on triticale anther culture response // Cereal Research Com. -1998.-Vol. 26.-P. 145-151.

161. Marciniak A., Obuchowski W., Makovska A. Technological and nutrient aspects of utilization of triticale for extruded food production // Food science and technology. - 2008. - Vol.11. - P. 3-7.

162. Mendoza M.G., Kaeppler H.F. Auxin and sugar effect on callus induction and plant regeneration frequencies from mature embryos of wheat (Triticum aestivum L.) // In vitro cellular and developmental Biology. - 2002. - Vol. 38.-P. 39-45.

163. Mujeeb-Kazi A., Gul A., Ahmed J. A simplified and effective protocol for production of bread wheat haploids (n=3x=21, ABD) with some application areas in wheat improvement. // Pak.J.Bot. - 2006. - Vol. 38(2). - P. 393406.

164. Muntzing A. Experience from work with induced polyploidy in cereals in Svol /1886-1946, History and present problems (ed. Akerman A, Tedin Q. and Froier k), 1946. - P. 324-337.

165. Nadolska-Orczyk A., Przetaliewicz A. Efficient method of Agrobacrerium mediated transformation for triticale (X Triticosecale Wittmack) // J. Plant Growth Reg. - 2005. - Vol. 24. - P. 2-10.

166. Oleszezuk S., Sova S., Zimny J. Direct embryogenesis and green plant regeneration from isolated microspores of hexaploid triticale ( X Triticosecale Wittmack) cv. Bogo // Plant Cell Rep. - 2004. - Vol. 22. - P. 885-895.

167. Oleszezuk S., Rabiza-Swider J, Lukaszewski A. Aneuploidy among androgenic progeny of hexaploid triticale (XTriticosecale Wittmack) // Plant Cell Rep.-2011.-Vol. 30.-P. 575-586.

168. Ozgen M., Birsin M.A. Callus induction and plant regeneration from immature and endosperm-supported mature embryos of winter oat (Avena sativa L.) // J. Genet. Breed. - 2002. - Vol. 56. - P. 339-344.

169. Padmaja G. Reddy V.D. and Redy G.M. Somatic embryogenesis and plant regeneration from mature embryo callus cultures of triticale // Indian J. Exp. Biol. - 1992.-Vol. 30. - P.181-184.

170. Palmer C.E.D., Keller W.A. Overview of haploidy // Biotechnology in Agriculture and Forestry (ed. by Palmer C.E., Keller W.A and Kasha K.J.): Springer - Verlag. Berlin Heidelberg, 2005. - Vol. 56. - P. 3-9.

171. Pauk J. Puolimatka M. In vitro androgenesis of triticale in isolated microspore culture // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 2000. - Vol. (3). - P.221-229.

172. Pauk J., Jansco M. and Simon - Kiss I. Rice doubled haploids and breeding // Advances in haploid production in higher plants (ed. Touraev et al.): Springer Science + Business Media. - 2009. - Chapter 16. - P. 189-197.

173. Pershina L.A., Belova L.I., Devyatkina E.P., Numerova O.M. The production of haploids in barley-wheat hybrid progenies under anther culture and hybridization with maize /Proc. Of the 11th EWAC Conference. - Novosiobirsk (Russia), 2000. - P.150-153.

174. Plaha P. and Sethi G.S. Comparative performance of bread wheat and hexaploid triticale cytoplasms // Theoret. Appl. Genet. - 1989. - Vol.77. -P.685-688.

175. Ponitka A., Slusarkiewicz-jarzina A., Wedzony M. The influence of various in vitro culture conditions on androgenesis embryo induction and plant regeneration from hexaploid triticale (x Triticosecale Wittm.) // J. Appl. Genet., -1999.-Vol.40.-P.165-174.

176. Ponitka A. The effect of liquid and solid medium on production of winter triticale (x triticosecale) anther derived embryos and plants // Cereal Res. Com. - 2007. - Vol.35 - P.15-22.

177. Pratap, A. Sethy G.S., Chaudhary H.K. Comparative performance of androgenesis and maize-mediated systems of polyhaploid induction in wheat and triticale (Triticum aestivum L; x Triticosecale Witt.) // Agris Repository Search Results. - 2004. - Vol.58 (4). - P. 311-317.

178. Pratap A., Sethi G.S., Chaudhary H.K. Relative efficiency of different Gramineae genera for haploid induction in triticale and triticale x wheat hybrids through the chromosome elimination technique // Plant Breed. - 2005. -Vol.124.-P.147-153.

179. Pratap A., Sethi S, Chaudhary K. Relative efficiency of anther culture and chromosome elimination techniques for haploid induction in triticale x wheat and triticale x triticale hybrids // Euphitica. - 2006. - Vol.150. - P.339-345.

180. Przetakiewicz A. The effect of auxin on plant regeneration of wheat, barley and triticale // Plant Cell Tissue Cult. - 2003. - Vol.73. - P.245-256.

181. Ramakanh S., MacRirche F., J. Herald. Protein and Quality Characterizatuion of triticale lines in breadmaking / Cereal Chemistry. 2010. Vol.87. P542-552.

182. Rubio S., Jouve N., Gonzalez N. Biolistic transfer of the gene uidA and its expression in haploid embryo-like structures of triticale (x Triticosecale Wittmack) // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 2004. - Vol. 77. - P 203-209.

183. Qi L., Friebe B., Zxang P. Homoelogous recombination, chromosome engineering and crop improvement // Chromosome Research. - 2007. -Vol. 15(13).-P.3-19.

184. Salmenkallio-Martilla M. Aspegren K., Akerman S. Transgenic barley (Hordeum vulgare L.) by electropotation of protoplasts // Plant Cell Reports.

- 1995.-Vol.15.-P. 301-304.

185. Shirdelmoghanloo H., Moieni A., Mousavi A. Effects of embryo induction media and pretreatments in isolated microspore culture of hexaploid wheat (Triticum aestivum L. cv. Falat) // African J. of Biotechnology. - 2009. - Vol.8 (22).

- P.6134-6140.

186. Schulze Ju. Improvement in cereal tissue culture by Thidiazuron: a review // Fruit, Vegetable and Cereal Science and Biotechnology. - 2007. - P.64-79.

187. Schumann, G. Untersuchung zum albinismus in Antherenkulturen von Triticale // Arch. Zuchtungforsch. Berlin. - 1982. - Bd. 18. - S. 115-122.

188. Schumann G. Zur Morphologie und Entwicklung androgenetischer Makrostrukturen in Antherenkulturen von Triticale // Arch. Zuchtungsforsch. -1987. - Bd.17. - S. 245-253.

189. Sears E.R. An induced mutant with homoeologous pairing in common wheat // Canad. Journ.Genet. Cytol. - 1977. - Vol.19. - P. 585-593.

190. Sikka A. and Immonen T. Comparison of callus culture with embryo culture at different times of embryo rescue for primary triticale production // Euphytica. - 1993.-Vol.70.-P.185-190.

191. Tao V.Z. and Hu H. Recombination of R-D chromosome in pollen plants cultured from hybrid of 6x Triticale x common wheat // Theoret. Appl. Genet.

- 1989. - Vol. 77. - P.899-904.

192. Tao V.Z., Snape J.W., Hu H. The cytological and genetic characterization of double haploid lines derived from triticale x wheat hybrids // Theoret. Appl. Genet. - 1991. - Vol. 81. - P.369-375.

193. Torp A.M., Hanson A.L., Holm I.B. Genetic markers for haploid formation in wheat anther culture // Proc. Of the 9th Int. Wheat Genet. Symp. -Saskatoon Sask., Canada, 1998. - Vol.3. - P. 159-161.

194. Tuvesson S., Ljungberg, Johansen N. Large-scale production of wheat and triticale doubled haploid through the use of a single-anther culture method // Plant Breed. - 2000. - Vol.119. - P. 455-459.

195. Vikrant G. and Rashid A. Comparative study of somatic embryogenesis from immature and mature embryos and organogenesis from leaf-base of Triticale // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. - 2001. - V.64. - P.33-38.

196. Was H.P. Metzger A.J., Lukaszevski A.J. The effect of D-genome chromosome substitutions and translocations of chromosome ID on some quality and agronomic parameters of winter triticale // Proc. 5th Int. Triticale Symp., Yune 30-Yuly 5, IHAR, Radzikov - Poland, -2002. - P. 59-69.

197. Wedsony M., Marcinska I., Ponitka A. Production of doubled haploids in triticale (x Triticosecale Wittmack.) by means of crosses with maize (Zea mays L.) using picloram and dicamba // Plant Breed. - 1998. - Vol.117. - P.211-215.

198. Wedzony M., Forster B.P., Zur I. Progress in doubled haploid technology in higher plants // Advances in haploid production in higher plants (ed. Touraev et al.): Springer Science + Business Media. - 2009. - Chapter 1. - P. 1-32.

199. Weyen J. Barley and wheat doubled haploids in breeding // Advances in haploid production in higher plants (ed. Touraev et al.): Springer Science + Business Media. -2009. - Chapter 15. - P. 179-187.

200. Wurschum T., Tucker M.R., Reif C.S. Improved efficiency of doubled haploid generation in hexaploid triticale by in vitro chromosome doubling // Plant Biology. - 2012. - Vol. 12 (109). - P. 1-7.

201. Yemets A.I., Btume Ya.B. Progress in plant polyploidization based on antimicrotubular drugs // The open horticulture Journal. - 2008. - Vol.1. - P. 1520.

202. Zimny J., Becker D., Brettschneider R., Lorz H. Fertile transgenic triticale (X Triticosecale Wittmack.) // Mol. Breed. - 1995. - Vol.1. - P. 155-164.

203. Zimny J. and Lorz H. Transgenic triticale (Triticum durum x Secale cereale) // Biotec. Agr. Forest. - 2000. - V.46. - P.109-126.

204. Zur I., Dubas E., Golemiec E., Wedzony M. Stress-induced changes important for effective androgenetic induction in isolated microspore culture of triticale (X triticosecale Wittmack) // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. - 2008. -Vol.94.-P.319-328.