Использование эритроцитов в качестве переносчиков противоопухолевых препаратов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат наук Витвицкий, Виктор Марьянович

• Витвицкий, Виктор Марьянович
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Витвицкий, Виктор Марьянович

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность

Проблема транспорта лекарственных препаратов

Типы переносчиков лекарственных препаратов

Макромолекулы

Микро- и нанокорпускулярные переносчики

Клетки

Переносчики для Ь-аспарагиназы

и антрациклиновых антибиотиков

Цель работы

Задачи исследования

Научная новизна

Научно-практическое значение

Основные положения, выносимые на защиту

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие сведения о физиологии и метаболизме человеческих эритроцитов

1.1.1. Клеточный объем эритроцитов

1.1.2. Метаболизм эритроцитов

1.1.2.1. Энергетический метаболизм

1.1.2.2. Антиокислительный метаболизм

1.1.2.3. Метаболизм аденилатов

1.1.3. Связь между метаболизмом и

жизнеспособностью эритроцитов

1.2. Методы введения препаратов в эритроциты

1.2.1. Осмотические методы

1.2.1.1. Обратимый осмотический лизис

1.2.1.2. Ступенчатый лизис

1.2.1.3 Осмотический импульс

1.2.1.4. Гипотетический диализ

1.2.1.5. Ступенчатый диализ

1.2.1.6. Проточный диализ

1.2.2. Неосмотические методы

1.2.2.1. Электрический пробой клеточной мембраны

1.2.2.2. Лазерный удар

1.2.2.3. Химическая модификация клеточной мембраны

1.2.2.4. Использование проникающих пептидов

1.2.2.5. Присоединение препаратов к поверхности эритроцитов

1.2.2.6. Равновесное связывание с эритроцитами

1.3. Использование эритроцитов в качестве переносчиков биологически активных препаратов

1.3.1. Коррекция ферментопатий

1.3.2. Эритроцит как биореактор

1.3.3. Коррекция тромболитической активности

1.3.4. Использование эритроцитов в целях иммунизации

1.3.5. Выведение избытка железа из организма

1.3.6. Коррекция кислород-транспортной функции

1.3.7. Транспорт противоопухолевых препаратов

1.4. Использование эритроцитов в качестве переносчиков L-аспарагиназы

1.4.1. Общие сведения о препарате L-аспарагиназа

1.4.2. Аспарагиназа в эритроцитах

1.5. Использование эритроцитов в качестве переносчиков

антрациклиновых антибиотиков

1.5.1. Общие сведения об антрациклиновых антибиотиках

1.5.2. Макромолекулярные и корпускулярные переносчики антрациклиновых антибиотиков

1.5.3. Введение антрациклиновых антибиотиков

в эритроциты

1.5.4. Повреждающее воздействие антрациклиновых антибиотиков на эритроциты

1.5.5. Противоопухолевая активность эритроцитов, нагруженных антрациклиновыми антибиоотиками

1.5.6. Использование нагруженных антрациклиновыми антибиотиками эритроцитов в ветеринарной

и медицинской практике

ГЛАВА 2. РЕГИСТРАЦИЯ АТФ В ИНТАКТИЫХ ЭРИТРОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ ВВЕДЕННОЙ В КЛЕТКИ ЛЮЦИФЕРАЗЫ

2.1. Введение

2.2. Материалы и методы

2.3. Результаты

2.3.1. Влияние люциферина на люминесценцию эритроцитов, нагруженных люциферазой

2.3.2. Распределение люциферина между инкубационной

средой и эритроцитами

2.3.3. Кинетика люциферазной реакции в эритроцитах

2.3.4. Кинетика транспорта люциферина через мембрану эритроцитов

2.3.5. Зависимость люминесценции эритроцитов, нагруженных люциферазой, от температуры

2.3.6. Регистрация изменений концентрации АТФ

в эритроцитах с помощью введенной в них люциферазы

2.4. Обсуждение результатов

ГЛАВА 3. ЭРИТРОЦИТЫ, НАГРУЖЕННЫЕ L-АСПАРАГИНАЗОЙ

3.1. Введение

3.2. Транспорт аспарагина через мембрану человеческих эритроцитов и его разрушение введенной в эритроциты аспарагиназой

3.2.1. Введение

3.2.2. Материалы и методы

3.2.3. Результаты

3.2.4. Обсуждение результатов

3.3. Хранение эритроцитов, нагруженных аспарагиназой

3.3.1. Введение

3.3.2. Материалы и методы

3.3.3. Результаты

3.3.4. Обсуждение результатов

ГЛАВА 4. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ В КАЧЕСТВЕ ПЕРЕНОСЧИКОВ АНТРАЦИКЛИНОВЫХ

АНТИБИОТИКОВ

4.1. Связывание антрациклиновых антибиотиков с эритроцитами in vitro

4.1.1. Введение

4.1.2. Материалы и методы

4.1.3. Результаты

4.1.3.1. Связывание даунорубицина с эритроцитами

4.1.3.2. Связывание доксорубицина с эритроцитами

4.1.3.3. Связывание антрациклиновых антибиотиков с эритроцитами, обработанными глютаровым альдегидом

4.1.4. Обсуждение результатов

4.2. Повреждение эритроцитов антрациклиновыми антибиотиками in vitro

4.2.1. Введение

4.2.2. Материалы и методы

4.2.3. Описание устройства для измерения деформируемости эритроцитов

4.2.4. Результаты

4.2.4.1. Влияние даунорубицина и доксорубицина на выход гемоглобина из эритроцитов

4.2.4.2. Влияние даунорубицина и доксорубицина на выход калия из эритроцитов

4.2.4.3. Влияние даунорубицина на объем эритроцитов

4.2.4.4. Влияние даунорубицина и доксорубицина на деформируемость dpumpoifumoe

4.2.4.5. Влияние даунорубицина и доксорубицина на концентрацию АТФ в эритроцитах

4.2.5. Обсуждение результатов

4.3. Противоопухолевая активность и токсичность эритроцитарной формы даунорубицина на мышиных моделях

4.3.1. Введение

4.3.2. Материалы и методы

4.3.3. Результаты

4.3.3.1. Противоопухолевая активность и токсичность нагруженных даунорубицином эритроцитов на мышах

с асцитной опухолью Р388

4.3.3.2. Противоопухолевая активность и токсичность нагруженных даунорубицином эритроцитов на мышах с эритробластным лейкозом, индуцированным вирусом

Раушера

4.3.4. Обсуждение результатов

ГЛАВА 5. КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ, НАГРУЖЕННЫХ АНТРАЦИКЛИНОВЫМИ

АНТИБИОТИКАМИ

5.1 Фармакокинетика и переносимость эритроцитарной формы даунорубицина у больных острыми лейкозами

5.1.1. Введение

5.1.2. Материалы и методы

5.1.3. Результаты

5.1.3.1. Связывание даунорубицина с эритроцитами больных острыми лейкозами

5.1.3.2. Влияние даунорубицина на деформируемость эритроцитов больных

5.1.3.3. Фармакокинетика даунорубицина в крови и плазме больных при введении стандартной и эритроцитарной форм антибиотика

5.1.3.4. Переносимость эритроцитарной формы даунорубицина у больных острыми лейкозами

5.1.4. Обсуждение результатов

5.2. Фармакокинетика и переносимость эритроцитарных форм доксорубицина у больных лимфопролиферативными заболеваниями

5.2.1. Введение

5.2.2. Материалы и методы

5.2.3. Результаты

5.2.3.1. Связывание доксорубицина с эритроцитами

в крови больных

5.2.3.2. Фармакокинетика доксорубицина в крови и

плазме больных при введении стандартной и

эритроцитарной форм антибиотика

5.2.3.3. Переносимость эритроцитарной формы доксорубицина у больных лимфопролиферативными

заболеваниями

5.2.4. Обсуждение результатов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ В КАЧЕСТВЕ ПЕРЕНОСЧИКОВ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

БЛАГОДАРНОСТИ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование эритроцитов в качестве переносчиков противоопухолевых препаратов»

ВВЕДЕНИЕ.

Прогресс современной медицины в огромной степени обусловлен разработкой избирательно действующих лекарственных препаратов. Развитие химиотерапии от первых препаратов Пауля Эрлиха до современных мощных антибиотиков привело, наряду с иммунизацией, к фактической победе над большинством инфекционных и паразитарных заболеваний. В настоящее время в развитых странах на первый план начинают выходить проблемы борьбы с онкологическими и сердечнососудистыми заболеваниями, коррекции нарушений в иммунной системе, коррекции врожденных дефектов обмена веществ и т.п. Для решения этих проблем необходимы новые биологически активные препараты, такие как ферменты, цитокины, нуклеиновые кислоты, токсины, иммуномодуляторы, и др., требующие защиты от разрушения иммунной системой и преждевременного выведения из организма пациента, избирательной доставки в определенные ткани и клетки. Эти требования могут быть обеспечены с помощью специфических переносчиков. Таким образом, дальнейший прогресс в области медицины и фармакологии в значительной степени связан с разработкой переносчиков для транспорта биологически активных препаратов в организме.

Актуальность.

Проблема транспорта лекарственных препаратов.

Использование переносчиков для транспорта лекарственных препаратов в организме является перспективным направлением в современной фармакологии и медицине. Переносчик может защитить препарат от быстрого (преждевременного) разрушения, инактивации или выведения из организма, предотвратить или уменьшить нежелательные иммунные реакции на введение препарата. В случае медленного высвобождения связанного (ассоциированного) с переносчиком препарата его концентрация в организме

может длительно поддерживаться на необходимом уровне. Одним из важнейших результатов, ожидаемых от использования переносчиков, является избирательная доставка препарата в клетки и органы-мишени. Так или иначе, использование переносчиков может существенно изменить фармакокинетику препарата, понизить необходимую дозу или пиковую концентрацию, изменить распределение препарата в тканях организма, что, в свою очередь, может существенно повысить эффективность препарата и снизить его токсичность. Использование переносчиков желательно или необходимо для так называемых биофармацевтических препаратов, включающих ферменты, пептиды, нуклеиновые кислоты, токсины и тп. В настоящее время такие препараты активно внедряются в медицинскую практику [1]. Они применяются для коррекции генетических дефектов (ферментопатий), создания нового поколения вакцин, борьбы с тромбозами, коррекции нарушений в иммунной системе в противоопухолевой терапии и для решения многих других задач [28].

Особый интерес представляет использование переносчиков для противоопухолевых препаратов. Исключительно высокая эффективность современных антибиотиков обусловлена тем, что они подавляют метаболические системы микроорганизмов, отсутствующие в клетках организма-хозяина и, в результате, практически не влияют на нормальные клетки организма. Метаболизм опухолевых клеток принципиально не отличается от метаболизма нормальных клеток организма. В связи с этим, противоопухолевые препараты обладают весьма низкой избирательностью и, как следствие, высокой токсичностью по отношению к нормальным клеткам и тканям. Использование переносчиков может существенно повлиять на избирательность противоопухолевых препаратов и тем самым, повысить их терапевтическую эффективность. Таким образом, разработка переносчиков для лекарственных препаратов и, в особенности, для противоопухолевых препаратов является актуальной задачей современной фармакологии и медицины.

Типы переносчиков лекарственных препаратов.

В настоящее время широко используются три основных типа переносчиков фармакологических препаратов. Это различные макромолекулы, микро- и нанокорпускулярные переносчики (в том числе липосомы), а также клетки.

Макромолекулы. В качестве макромолекулярных переносчиков используются различные полимеры, белки, пептиды и т.п. В настоящее время целый ряд белковых и пептидных препаратов применяется в клинике в виде коньюгатов с полиэтиленгликолем [9]. Молекулы полиэтиленгликоля предотвращают разрушение препарата протеолитическими системами организма, замедляют его выведение из организма и затрудняют взаимодействие белка с иммунной системой пациента. В результате увеличивается время циркуляции препарата в кровотоке и предотвращаются нежелательные иммунные реакции. В то же время, в некоторых случаях отмечаются иммунные реакции на полиэтиленгликоль [10]. Кроме того, отмечается неопределенность в продолжительности циркуляции коньюгатов с полиэтиленгликолем и возможность накопления высокомолекулярных продуктов деградации коньюгатов в печени [9, 11].

Одними из наиболее перспективных макромолекул для переноса фармакологических препаратов являются антитела, поскольку они в принципе могут обеспечить исключительно избирательную доставку препаратов в определенные клетки и ткани. Коньюгаты на основе антител (иммуноконьюгаты) в основном разрабатываются для диагностики и лечения онкологических заболеваний. В настоящее время более 40 иммуноконьюгатов, предназначенных для применения в онкологической практике находится в стадии клинических испытаний [12]. Для доставки препаратов в определенные клетки и ткани могут также использоваться лиганды к специфичным рецепторам на поверхности клеток, такие как а-фетопротеин, эпидермальный фактор роста и др. [13-17]. Надо отметить, что конъюгаты противоопухолевых

препаратов с антителами и лигандами демонстрируют высокую активность и избирательность в экспериментах in vitro, однако in vivo их эффективность оказывается довольно низкой [12].

Большой интерес для использования в качестве переносчиков лекарственных препаратов представляют сравнительно недавно обнаруженные, так называемые проникающие пептиды (cell penetrating peptides). Этот класс пептидов включает в себя транспортный домен белка TAT (ВИЧ) [18], Antp (дрозофила) [19], VP22 (вирус герпеса) [20] и др. [21, 22]. Проникающие пептиды способны переносить любые присоединенные к ним структуры, от небольших молекул до наночастиц, через клеточные мембраны тканей всех типов, включая мембраны гемато-энцефалического барьера [18, 21, 23]. В настоящее время интенсивно исследуется возможность использования проникающих пептидов для доставки лекарственных препаратов в различные клетки [22].

Микро- и нанокорпускулярные переносчики. Эти переносчики включают в себя различные мицеллы [24, 25], эмульсии [25], липосомы [8, 2527] и другие структуры [25, 28-32]. Разработка различных микро и наночастиц в качестве переносчиков лекарственных препаратов в настоящее время активно развивается в связи с бурным развитием нанотехнологии. Среди микрокорпускулярных переносчиков наиболее широко известны липосомы. Липосомы представляют собой микроскопические пузырьки, оболочка которых состоит из одного или нескольких двойных слоев, образованных полярными липидами. В большинстве случаев размер липосом лежит в пределах 20-200 нм, однако он может достигать нескольких микрон [33, 34]. Липосомы были открыты в 1960-х годах [35, 36] и с тех пор интенсивно исследуются как наиболее перспективные переносчики лекарственных препаратов. Они могут использоваться для транспортировки как гидрофильных препаратов, заключенных внутри липосомы, так и гидрофобных препаратов, растворенных в липидной оболочке. Серьезными проблемами, связанными с использованием липосом являются довольно короткий срок хранения липосомальных

препаратов и быстрое (в течение нескольких часов) выведение липосом из циркуляции при внутривенном введении [37, 38]. Покрытие поверхности липосом полиэтиленгликолем позволяет увеличить время их циркуляции в организме в несколько раз по сравнению с необработанными липосомами [3941]. Присоединение к поверхности липосом антител или других специфических лигандов может обеспечить направленный транспорт содержащихся в липосомах препаратов в определенные клетки или ткани [8, 26, 27, 42, 43]. За последние 20 лет в клиническую практику вошел целый ряд липосомальных препаратов, включая липосомальные формы даунорубицина (даунозом), доксорубицина (доксил), амфотерицина В (амбизом), цитарабина (депоцит) и др. [8, 44, 45].

Клетки. Среди клеток наибольший интерес, как потенциальные переносчики лекарственных препаратов, представляют эритроциты. Эти клетки доступны в больших количествах. Процедуры введения в них, или присоединения к ним, различных веществ достаточно просты и эффективны. Несомненными достоинствами эритроцитов являются идеальная биосовместимость и способность к длительной (порядка 100 дней) циркуляции в организме. Весьма существенно то, что разрушение эритроцитов в организме является естественным процессом и не приводит к каким-либо побочным эффектам. Возможность использования в качестве переносчиков аутологичных эритроцитов сводит к минимуму риск инфицирования пациента. Относительно несложные методы обработки позволяют получать эритроциты-носители, которые селективно захватываются органами ретикулоэндотелиальной системы [46-49], а также клетками иммунной системы [50-53], что открывает возможность направленного транспорта препаратов в эти органы и клетки с помощью эритроцитов. В литературе описано множество примеров использования эритроцитов-переносчиков [54-58]. Одним из наиболее перспективных применений эритроцитов-переносчиков является транспорт ферментов, метаболизирующих субстраты, проникающие через клеточную мембрану. Такие эритроциты могут применяться для коррекции

ферментопатий [59-62], для удаления из крови токсичных соединений [63-66], в химиотерапии онкологических заболеваний [67-69] и т.п. Большой интерес представляет использование эритроцитов в качестве циркулирующих биореакторов, перерабатывающих введенные в них предшественники лекарственных препаратов в активные формы, диффундирующие через клеточную мембрану в кровоток [70, 71]. Использование эритроцитов для доставки антигенов и иммуномодуляторов к иммунным клеткам открывает новые возможности в разработке вакцин [55, 57]. Активно ведутся исследования по использованию эритроцитов в качестве переносчиков факторов свертывания крови для борьбы с тромбозами [58]. Эритроциты-носители могут быть использованы для создания пролонгированных форм многих препаратов [55, 61, 72], для коррекции кислород-транспортной функции крови [61], для генной терапии [73-77] и для решения множества других задач. В настоящее время приготовление и использование эритроцитов-носителей выходит на промышленный, коммерческий уровень [54, 61].

Переносчики для Ь-аспарагиназы и антрациклиновых антибиотиков. В нашей работе исследовалась возможность использования эритроцитов в качестве переносчиков противоопухолевого ферментативного препарата Ь-аспарагиназы, а также пртивоопухолевых антрациклиновых антибиотиков даунорубицина и доксорубицина.

Фармакологический препарат Ь-аспарагиназа (аспарагиназа) является бактериальным ферментом, осуществляющим гидролиз аспарагина. Аспарагиназа широко используется в клинической практике для лечения острых лимфобластных лейкозов [3, 78]. Механизм действия аспарагиназы основан на том, что при ее введении пациентам уровень аспарагина в крови резко падает. Это вызывает гибель лейкозных клеток, неспособных синтезировать аспарагин самостоятельно из-за низкого уровня аспарагинсинтетазы. Однако препарат аспарагиназа обладает высокой иммуногенностью, что приводит к очень быстрому выведению его из организма и часто вызывает нежелательные иммунные реакции у пациентов,

включая аллергию и анафилактический шок [79-82]. Введение аспарагиназы в эритроциты позволяет снизить контакт препарата с иммунной системой пациента, что должно увеличить время его циркуляции в организме, предотвратить иммунные реакции у пациентов и, в конечном итоге, повысить эффективность терапии [68, 69]. Исследования направленные на разработку эритроцитарных форм аспарагиназы проводятся, начиная с 1976 г. [83]. Наша работа была направлена на вяснение такого принципиально важного вопроса, как возможность транспорта аспарагина через мембрану эритроцитов. В настоящее время в клиническую практику активно внедряется первый коммерческий препарат эритроцитов, нагруженных аспарагиназой (вКАЗРА) [61].

Антрациклиновые антибиотики являются наиболее эффективными и широко используемыми противоопухолевыми препаратами [84, 85]. Однако их применение в клинической практике ограничено высокой токсичностью (в том числе кардиотоксичностью), приводящей к серьезным нежелательным побочным эффектам [84, 86]. Предполагается, что использование переносчиков может повысить избирательность антрациклиновых антибиотиков (например, за счет направленного транспорта препаратов в клетки и органы - мишени) и, тем самым повысить их терапевтическую эффективность. В настоящее время в клинической практике используются липосомальные формы даунорубицина (даунозом ОаипоХоте) и доксорубицина (доксил БохП) [84, 87]. Основным преимуществом липосомальных форм антрациклиновых антибиотиков в клинической практике является низкая кардиотоксичность, поскольку их противоопухолевая активность в большинстве случаев оказывается такой же, как и у стандартных форм [84, 87, 88]. Основным препятствием к повышению дозы липосомальных форм антрациклиновых антибиотиков (и, тем самым к повышению противоопухолевой активности) является развитие тяжелого ладонно-подошвенного синдрома. Этот синдром, возникающий у значительного (до 50%) числа пациентов, обусловлен накоплением антибиотиков в коже, в основном в ладонях и подошвах ног, что приводит к

покраснению кожных покровов, отекам, сильной боли и, в некоторых случаях, к появлению волдырей и язв [84, 87-90].

Предпринимались попытки использовать в качестве переносчиков доксорубицина эритроциты, обработанные глютаровым альдегидом [91-94], но в связи с высокой токсичностью полученных препаратов, работы в этом направлении были прекращены. В то же время, возможность использования интактных эритроцитов в качестве переносчиков антрациклиновых антибиотиков в работах других авторов практически не рассматривалась.

Таким образом, можно заключить, что разработка эритроцитарных форм L-аспарагиназы и антрациклиновых антибиотиков является актуальной задачей современной фармакологии и медицины.

Цель работы.

Разработка и исследование эритроцитарных форм противоопухолевых препаратов L-аспарагиназы, даунорубицина и доксорубицина.

Задачи исследования.

1. Освоение технологии включения ферментативных препаратов в эритроциты человека с использованием модельного объекта - люциферазы из светляков Lucióla mingrelica.

2. Выяснение возможности транспорта аспарагина через клеточную мембрану эритроцитов человека.

3. Исследование функциональной полноценности и стабильности противоопухолевого ферментативного препарата L-аспарагиназы, введенного в эритроциты.

4. Исследование связывания антрациклиновых антибиотиков даунорубицина и доксорубицина с эритроцитами, а также влияния этих антибиотиков на биохимические и физиологические параметры эритроцитов in vitro.

5. Проверка терапевтической активности эритроцитов, нагруженных даунорубицином на мышиных моделях.

6. Исследование фармакокинетики и переносимости эритроцитарных форм даунорубицина и доксорубицина у больных с лимфопролиферативными заболеваниями.

Научная новизна.

В работе впервые показана возможность введения в эритроциты люциферазы из светляков Lucióla mingrelica Введение в эритроциты люциферазы дает возможность непрерывной регистрации уровня АТФ в клетках без их разрушения. Впервые исследована кинетика транспорта аспарагина через клеточную мембрану эритроцитов человека. Показана возможность использования нагруженных L-аспарагиназой человеческих эритроцитов для разрушения аспарагина во внеклеточной среде. Предложен способ хранения нагруженных L-аспарагиназой эритроцитов. Впервые исследована кинетика связывания антрациклиновых антибиотиков: даунорубицина и доксорубицина, с эритроцитами. Показана возможность получения нагруженных антрациклиновыми антибиотиками эритроцитов путем инкубации эритроцитов в изотонической среде, содержащей антибиотик. Исследована противоопухолевая активность нагруженных даунорубицином эритроцитов на мышиных моделях. Впервые исследована фармакокинетика и переносимость эритроцитарных форм даунорубицина и доксорубицина у пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями.

Научно-практическое значение.

Полученные результаты указывают на перспективность использования нагруженных различными препаратами эритроцитов для решения как фундаменталных, так и практических задач. Показана высокая перспективность

использования эритроцитов в качестве переносчиков противоопухолевого препарата Ь-аспарагиназы и антрациклиновых антибиотиков. Работа фактически открывает новое направление в разработке эритроцитарных форм антрациклиновых антибиотиков. На основании полученных результатов предложена исключительно простая методика приготовления эритроцитов, нагруженных антрациклиновыми антибиотиками. На мышиных моделях показано, что противоопухолевая активность эритроцитарных форм даунорубицина остается неизменной, а токсичность снижена по сравнению со стандартной формой (раствором) антибиотика. Введение эритроцитов, нагруженных даунорубицином или доксорубицином пациентам с лимфопролиферативными заболеваниями приводит к снижению пиковых концентраций и увеличению времени циркуляции антибиотиков в крови. Эритроцитарные формы антрациклиновых антибиотиков переносятся пациентами лучше, чем стандартные формы. Это открывает возможности для повышения эффективности терапии за счет повышения доз антибиотиков, изменения протоколов введения препаратов и т.п.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Введенная в эритроциты Ь-аспарагиназа быстро разрушает поступающий в эти клетки аспарагин, что делает эритроцит перспективным переносчиком противоопухолевого препарата Ь-аспарагиназы.

2. Антрациклиновые антибиотики достаточно быстро связываются эритроцитами в изотонической среде, что позволяет легко получать нагруженные этими антибиотиками эритроциты как в лабораторных, так и в клинических условиях.

3. Исследования на мышиных моделях показывают, что эритроцитарные формы даунорубицина сохраняют высокую противоопухолевую активность и в то же время обладают меньшей, по сравнению со стандартной формой этого антибиотика, токсичностью.

4. Введение эритроцитарных форм даунорубицина и доксорубицина пациентам с лимфопролиферативными заболеваниями приводит к снижению пиковых концентраций, увеличению времени циркуляции антибиотиков в крови и к увеличению площади под фармакокинетической кривой.

5. Эритроцитарные формы даунорубицина и доксорубицина переносятся пациентами лучше, чем стандартные формы этих антибиотиков.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общие сведения о физиологии и метаболизме человеческих эритроцитов.

Эритроциты или красные клетки крови представляют собой специализированные клетки, основной функцией которых является транспорт кислорода от легких к тканям. Строение и физиология эритроцитов описаны в целом ряде монографий и обзоров [95-98]. Эритроциты составляют основную массу клеток крови. В норме в одном микролитре человеческой крови содержится около 5x106 эритроцитов. Объемная доля эритроцитов в человеческой крови (гематокрит) составляет 40-45%. Время жизни человеческих эритроцитов в кровотоке составляет 100-120 дней.

В неподвижном состоянии в плазме крови нормальные человеческие эритроциты имеют форму двояковогнутых дисков диаметром около 7 мкм и толщиной около 2 мкм (Рис. 1.1). Благодаря дисковидной форме эритроциты имеют большое отношение площади клеточной поверхности к объему, что обеспечивает быстрый газообмен между клеткой и внешней средой. Характерной особенностью эритроцитов млекопитающих является отсутствие ядра и других органелл. Основным содержимым эритроцитов является кислород-связывающий белок гемоглобин. В одном литре человеческих эритроцитах содержится около 300 г гемоглобина (около 5 мМ), позволяющего связать до 408 мл кислорода [95, 99].

Наличие высокой концентрации гемоглобина является одним из двух ключевых факторов, обеспечивающих кислород-транспортную функцию эритроцитов. Другим ключевым фактором, обеспечивающим функциональную полноценность эритроцитов является их способность циркулировать в кровотоке. Эритроциты, не способные к циркуляции не могут обеспечить транспорт кислорода от легких к тканям даже при наличии гемоглобина.

Рис. 1.1. Изображение эритроцитов человека, полученное с помощью сканирующего электронного микроскопа. Изображение скопировано с сайта компании-производителя электронных микроскопов FEI

(http://www.fei.com/image-galleiy/human-red-blood-cells/)

В ходе циркуляции в организме эритроциты млекопитающих проходят по тканевым капиллярам, диаметр которых меньше, чем диаметр эритроцитов. Способность эритроцитов проходить по тонким тканевым капиллярам связана с их высокой деформируемостью. В свою очередь, высокая деформируемость эритроцитов млекопитающих обусловлена их дисковидной формой (то есть высоким отношением площади поверхности к объему клетки) и высокой эластичностью клеточной мембраны [100-103]. Эритроциты, не способные по тем или иным причинам к циркуляции, удаляются из кровотока органами ретикуло-эндотелиальной системы включая селезенку, печень, и костный мозг [95, 104-106].

1.1.1. Клеточный объем эритроцитов.

Объем нормального человеческого эритроцита находится в пределах 80-96-10"15 л [95]. Клеточный объем эритроцита является одним из ключевых факторов, определяющих функциональную полноценность и жизнеспособность этой клетки. Эритроцит окружен эластичной, но практически нерастяжимой мембраной и поддерживает дисковидную форму, необходимую для эффективного газообмена между клеткой и средой и для нормальной циркуляции в организме, за счет стабилизации (регуляции) клеточного объема. Проницаемость клеточной мембраны эритроцитов человека для белков, большинства внутриклеточных метаболитов и катионов металлов, таких как Ка+, и К+, значительно меньше, чем для воды [95, 107]. Это позволяет эритроцитам поддерживать свой объем за счет осмотического баланса между клеткой и средой. Концентрация белков и метаболитов в эритроцитах выше, чем в плазме крови. Эта разница компенсируется неравновесным распределением ионов 1Ча+ и К+ между клеткой и плазмой. В упрощенном виде это можно объяснить так. Концентрации ионов Ыа+ и К+ в плазме составляют 140 и 5 мМ, а в эритроцитах 10 и 100 мМ соответственно. Таким образом, суммарная концентрация ионов Ыа и К в плазме (145 мМ) оказывается выше, чем в эритроцитах (110 мМ). При суммарной концентрации белка (в основном

гемоглобина) и метаболитов в эритроцитах равной 35 мМ суммарные концентрации растворенных веществ в клетках и среде оказываются одинаковыми (145 мМ), что обеспечивает осмотический баланс между клетками и средой [108-112].

В соответствие с осмотическим равновесием, увеличение концентрации непроникающих через мембрану веществ (например, ионов Ка+ или К+) во внешней среде приводит к снижению объема эритроцитов и сжатию клеток вследствие выхода из них воды. Это приводит к увеличению внутриклеточной вязкости, что в свою очередь ухудшает деформируемость эритроцитов и их способность к циркуляции [100]. Уменьшение концентрации непроникающих веществ в среде (за счет ее разбавления водой) приводит к поступлению воды в клетки и к их набуханию, что также затрудняет циркуляцию эритроцитов по тканевым капиллярам. Вследствие нерастяжимости эритроцитарной мембраны максимальное увеличение объема эритроцита ограничено и составляет около 1,6 от нормального объема при достижении клеткой сферической формы [113, 114]. Дальнейшее уменьшение тоничности среды приводит к разрыву клеточной мембраны, то есть к так называемому осмотическому лизису эритроцитов (гемолизу). По-видимому, нормальные эритроциты человека лишены каких-либо механизмов, обеспечивающих стабилизацию клеточного объема при изменениях осмотичности среды. Это скорее всего говорит о том, что в организме осмотичность внешней среды (плазмы крови) практически постоянна.

Изменение объема эритроцита может происходить также при нарушении осмотического баланса связанного с изменениями распределения ионов и К+ между клеткой и средой вследствие повреждения клеточной мембраны, нарушения работы транспортной Ка,К-АТФазы и т.п. Такая причина изменения объема эритроцита представляется физиологически более реальной, чем изменение тоничности плазмы в организме. Транспортная Ка,К-АТФаза ингибируется различными природными препаратами, в том числе сердечными гликозидами строфантином в и строфантином К [115-118]. Окисление

компонентов мембраны эритроцита приводит к образованию пор, через которые могут проходить анионы, катионы металлов и даже белки [119-121]. Значительное (в несколько раз) увеличение проницаемости мембраны эритроцитов и нарушение в них ионного баланса наблюдается при некоторых патологиях [122-130]. Увеличение проницаемости клеточной мембраны для катионов вызывают некоторые антибиотики, и другие мембранотропные вещества [111,116, 117, 131, 132].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Витвицкий, Виктор Марьянович, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Walsh G: Biopharmaceutical benchmarks 2010. Nat Biotechnol 2010, 28(9):917-924.

2. Serana F, Sottini A, Chiarini M, Zanotti C, Ghidini C, Lanfranchi A, Notarangelo LD, Caimi L, Imberti L: The different extent of В and T cell immune reconstitution after hematopoietic stem cell transplantation and enzyme replacement therapies in SCID patients with adenosine deaminase deficiency. J Immunol 2010, 185(12):7713-7722.

3. van den Berg H: Asparaginase revisited. Leuk Lymphoma 2011, 52(2):168-178.

4. Gentilucci L, Tolomelli A, Squassabia F: Peptides and peptidomimetics in medicine, surgery and biotechnology. Curr Med Chem 2006, 13(20):2449-2466.

5. Stepanov AV, Belogurov AA, Jr., Ponomarenko NA, Stremovskiy OA, Kozlov LV, Bichucher AM, Dmitriev SE, Smirnov IV, Shamborant OG, Balabashin DS et al: Design of targeted В cell killing agents. PLoS One 2011, 6(6):e20991.

6. Zaitsev S, Spitzer D, Murciano JC, Ding BS, Tliba S, Kowalska MA, Bdeir K, Kuo A, Stepanova V, Atkinson JP et al: Targeting of a mutant plasminogen activator to circulating red blood cells for prophylactic fibrinolysis. J Pharmacol Exp Ther 2010, 332(3): 1022-1031.

7. Петухова HB, Иванов ПА, Мигунов АИ: Вирусоподобные частицы -новая стратегия для создания противогриппозных вакцин. Вопросы Вирусологии 2013, 58(2):10-14.

8. Барышников АЮ: Наноструктурированные липосомальные системы как средство доставки противоопухолевых препаратов. Вестник РАМН 2012(3):23-31.

9. Veronese FM, Mero A: The impact of PEGylation on biological therapies. BioDrugs 2008, 22(5):315-329.

10. Armstrong JK, Hempel G, Koling S, Chan LS, Fisher T, Meiselman HJ, Garratty G: Antibody against poly(ethylene glycol) adversely affects PEG-asparaginase therapy in acute lymphoblastic leukemia patients. Cancer 2007, 110(1):103-111-

11. Veronese FM: Peptide and protein PEGylation: a review of problems and solutions. Biomaterials 2001, 22(5):405-417.

12. Pasquetto MV, Vecchia L, Covini D, Digilio R, Scotti C: Targeted drug delivery using immunoconjugates: principles and applications. J Immunother 2011, 34(9):611-628.

13. Seymour LW, Ferry DR, Anderson D, Hesslewood S, Julyan PJ, Poyner R, Doran J, Young AM, Burties S, Kerr DJ: Hepatic drug targeting: phase I evaluation of polymer-bound doxorubicin. J Clin Oncol 2002, 20(6): 16681676.

14. Lutsenko SV, Feldman NB, Severin SE: Cytotoxic and antitumor activities of doxorubicin conjugates with the epidermal growth factor and its receptor-binding fragment. J Drug Target 2002, 10(7):567-571.

15. Lutsenko SV, Feldman NB, Finakova GV, Gukasova NV, Petukhov SP, Posypanova GA, Skryabin KG, Severin SE: Antitumor activity of alpha fetoprotein and epidermal growth factor conjugates in vitro and in vivo. Tumour Biol 2000, 21(6):367-374.

16. Mizejewski GJ, Mirowski M, Garnuszek P, Maurin M, Cohen BD, Poiesz BJ, Posypanova GA, Makarov VA, Severin ES, Severin SE: Targeted delivery of anti-cancer growth inhibitory peptides derived from human alpha-fetoprotein: review of an International Multi-Center Collaborative Study. J Drug Target 2010, 18(8):575-588.

17. Posypanova GA, Makarov VA, Savvateeva MV, Bereznikova AV, Severin ES: The receptor binding fragment of alpha-fetoprotein is a promising new vector for the selective delivery of antineoplastic agents. J Drug Target 2013, 21(5):458-465.

18. Schwarze SR., Ho A, Vocero-Akbani A, Dowdy SF: In vivo protein transduction: delivery of a biologically active protein into the mouse. Science 1999, 285(5433):1569-1572.

19. Joliot A, Pernelle C, Deagostini-Bazin H, Prochiantz A: Antennapedia homeobox peptide regulates neural morphogenesis. Proc Natl Acad Sci U S A 1991, 88(5): 1864-1868.

20. Elliott G, O'Hare P: Intercellular trafficking and protein delivery by a herpesvirus structural protein. Cell 1997, 88(2):223-233.

21. Dietz GP, Bahr M: Delivery of bioactive molecules into the cell: the Trojan horse approach. Mol Cell Neurosci 2004, 27(2):85-131.

22. Koren E, Torchilin VP: Cell-penetrating peptides: breaking through to the other side. Trends Mol Med 2012, 18(7):385-393.

23. Nori A, Jensen KD, Tijerina M, Kopeckova P, Kopecek J: Subcellular trafficking of HPMA copolymer-Tat conjugates in human ovarian carcinoma cells. J Control Release 2003, 91(l-2):53-59.

24. Batrakova EV, Kabanov AV: Pluronic block copolymers: evolution of drug delivery concept from inert nanocarriers to biological response modifiers. J Control Release 2008, 130(2):98-106.

25. Kawakami K, Ebara M, Izawa H, Sanchez-Ballester NM, Hill JP, Ariga K: Supramolecular approaches for drug development. Curr Med Chem 2012, 19(15):2388-2398.

26. Levchenko TS, Hartner WC, Torchilin VP: Liposomes for cardiovascular targeting. Ther Deliv 2012, 3(4):501-514.

27. Heneweer C, Gendy SE, Penate-Medina O: Liposomes and inorganic nanoparticles for drug delivery and cancer imaging. Ther Deliv 2012, 3(5):645-656.

28. Hood E, Simone E, Wattamwar P, Dziubla T, Muzykantov V: Nanocarriers for vascular delivery of antioxidants. Nanomedicine (Lond) 2011, 6(7): 1257-1272.

29. Pearce TR, Shroff K, Kokkoli E: Peptide targeted lipid nanoparticles for anticancer drug delivery. Adv Mater 2012, 24(28):3803-3822, 3710.

30. Kooijmans SA, Vader P, van Dommelen SM, van Solinge WW, Schiffelers RM: Exosome mimetics: a novel class of drug delivery systems. Int J Nanomedicine 2012, 7:1525-1541.

31. Murakami T: Phospholipid nanodisc engineering for drug delivery systems. Biotechnol J 2012, 7(6):762-767.

32. Brandelli A: Nanostructures as promising tools for delivery of antimicrobial peptides. Mini Rev Med Chem2012, 12(8):731-741.

33. Hupfeld S, Holsaeter AM, Skar M, Frantzen CB, Brandi M: Liposome size analysis by dynamic/static light scattering upon size exclusion-/field flow-fractionation. J Nanosci Nanotechnol 2006, 6(9-10):3025-3031.

34. Castile JD, Taylor KM: Factors affecting the size distribution of liposomes produced by freeze-thaw extrusion. Int J Pharm 1999, 188(l):87-95.

35. Bangham AD, Home RW: Negative Staining of Phospholipids and Their Structural Modification by Surface-Active Agents as Observed in the Electron Microscope. J Mol Biol 1964, 8:660-668.

36. Bangham AD, Standish MM, Watkins JC: Diffusion of univalent ions across the lamellae of swollen phospholipids. J Mol Biol 1965, 13(l):238-252.

37. Gill PS, Espina BM, Muggia F, Cabriales S, Tulpule A, Esplin JA, Liebman HA, Forssen E, Ross ME, Levine AM: Phase I/II clinical and pharmacokinetic evaluation of liposomal daunorubicin. J Clin Oncol 1995, 13(4):996-1003.

38. Pea F, Russo D, Michieli M, Baraldo M, Ermacora A, Damiani D, Baccarani M, Furlanut M: Liposomal daunorubicin plasmatic and renal disposition in patients with acute leukemia. Cancer Chemother Pharmacol 2000, 46(4):279-286.

39. Gabizon A, Catane R, Uziely B, Kaufman B, Safra T, Cohen R, Martin F, Huang A, Barenholz Y: Prolonged circulation time and enhanced accumulation in malignant exudates of doxorubicin encapsulated in polyethylene-glycol coated liposomes. Cancer Res 1994, 54(4):987-992.

40. Coukell AJ, Spencer CM: Polyethylene glycol-liposomal doxorubicin. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties, and

therapeutic efficacy in the management of AIDS-related Kaposi's sarcoma. Drugs 1997, 53(3):520-538.

41. Lyass O, Uziely B, Ben-Yosef R, Tzemach D, Heshing NI, Lotem M, Brufman G, Gabizon A: Correlation of toxicity with pharmacokinetics of pegylated liposomal doxorubicin (Doxil) in metastatic breast carcinoma. Cancer 2000, 89(5): 1037-1047.

42. Allen TM, Brandéis E, Hansen CB, Kao GY, Zalipsky S: A new strategy for attachment of antibodies to sterically stabilized liposomes resulting in efficient targeting to cancer cells. Biochim Biophys Acta 1995, 1237(2):99-108.

43. Tseng YL, Hong RL, Tao MH, Chang FH: Sterically stabilized anti-idiotype immunoliposomes improve the therapeutic efficacy of doxorubicin in a murine B-cell lymphoma model. Int J Cancer 1999, 80(5):723-730.

44. Zhang L, Gu FX, Chan JM, Wang AZ, Langer RS, Farokhzad OC: Nanoparticles in medicine: therapeutic applications and developments. Clin Pharmacol Ther 2008, 83(5):761-769.

45. Drummond DC, Meyer O, Hong K, Kirpotin DB, Papahadjopoulos D: Optimizing liposomes for delivery of chemotherapeutic agents to solid tumors. Pharmacol Rev 1999, 51(4):691-743.

46. Deloach J, Peters S, Pinkard O, Glew R, Ihler G: Effect of glutaraldehyde treatment on enzyme-loaded erythrocytes. Biochim Biophys Acta 1977, 496(2):507-515.

47. Zocchi E, Guida L, Benatti U, Canepa M, Borgiani L, Zanin T, De Flora A: Hepatic or splenic targeting of carrier erythrocytes: a murine model. Biotechnol Appl Biochem 1987, 9(5):423-434.

48. Zocchi E, Tonetti M, Polvani C, Guida L, Benatti U, De Flora A: In vivo liver and lung targeting of adriamycin encapsulated in glutaraldehyde-treated murine erythrocytes. Biotechnol Appl Biochem 1988, 10(6):555-562.

49. Jordan JA, DeLoach JR, Luque J, Diez JC: Targeting of mouse erythrocytes by band 3 crosslinkers. Biochim Biophys Acta 1996, 1291(l):27-34.

50. Magnani M, Casabianca A, Fraternale A, Brandi G, Gessani S, Williams R, Giovine M, Damonte G, De Flora A, Benatti U: Synthesis and targeted delivery of an azidothymidine homodinucleotide conferring protection to macrophages against retroviral infection. Proc Natl Acad Sci U S A 1996, 93(9):4403-4408.

51. Chiarantini L, Droleskey R, Magnani M, DeLoach JR: In vitro targeting of erythrocytes to cytotoxic T-cells by coupling of Thy-1.2 monoclonal antibody. Biotechnol Appl Biochem 1992, 15(2):171-184.

52. Magnani M, Rossi L, Brandi G, Schiavano GF, Montroni M, Piedimonte G: Targeting antiretroviral nucleoside analogues in phosphorylated form to macrophages: in vitro and in vivo studies. Proc Natl Acad Sci U S A 1992, 89(14):6477-6481.

53. Lotero LA, Olmos G, Diez JC: Delivery to macrophages and toxic action of etoposide carried in mouse red blood cells. Biochim Biophys Acta 2003, 1620(1-3):160-166.

54. Magnani M: Erythrocytes as carriers for drugs: the transition from the laboratory to the clinic is approaching. Expert Opin Biol Ther 2012, 12(2):137-138.

55. Провоторов BM, Иванова ГА: Роль и место эритроцитов в системе направленного транспорта различных фармакологических средств. Клиническая медицина 2009, 87(9):4-8.

56. DeLoach JR: Carrier erythrocytes. Med Res Rev 1986, 6(4):487-504.

57. Magnani M, Pierige F, Rossi L: Erythrocytes as a novel delivery vehicle for biologies: from enzymes to nucleic acid-based therapeutics. Ther Deliv 2012, 3(3):405-414.

58. Muzykantov VR: Drug delivery by red blood cells: vascular carriers designed by mother nature. Expert Opin Drug Deliv 2010, 7(4):403-427.

59. Bax BE, Bain MD, Fairbanks LD, Webster AD, Ind PW, Hershfield MS, Chalmers RA: A 9-yr evaluation of carrier erythrocyte encapsulated adenosine

deaminase (ADA) therapy in a patient with adult-type ADA deficiency. Eur J Haematol 2007, 79(4):338-348.

60. Moran NF, Bain MD, Muqit MM, Bax BE: Carrier erythrocyte entrapped thymidine phosphorylase therapy for MNGIE. Neurology 2008, 71(9):686-688.

61. Godfrin Y, Horand F, Franco R, Dufour E, Kosenko E, Bax BE, Banz A, Skorokhod OA, Lanao JM, Vitvitsky V et al: International seminar on the red blood cells as vehicles for drugs. Expert Opin Biol Ther 2012, 12(1):127-133.

62. Yew NS, Dufour E, Przybylska M, Putelat J, Crawley C, Foster M, Gentry S, Reczek D, Kloss A, Meyzaud A et al: Erythrocytes encapsulated with phenylalanine hydroxylase exhibit improved pharmacokinetics and lowered plasma phenylalanine levels in normal mice. Mol Genet Metab 2013, 109(4):339-344.

63. Pei L, Petrikovics I, Way JL: Antagonism of the lethal effects of paraoxon by carrier erythrocytes containing phosphotriesterase. Fundam Appl Toxicol 1995, 28(2):209-214.

64. Kosenko EA, Venediktova N1, Kudryavtsev AA, Ataullakhanov FI, Kaminsky YG, Felipo V, Montoliu C: Encapsulation of glutamine synthetase in mouse erythrocytes: a new procedure for ammonia detoxification. Biochem Cell Biol 2008, 86(6):469-476.

65. Ninfali P, Rossi L, Baronciani L, Tirillini B, Ropars C, Magnani M: Acetaldehyde, ethanol and acetone concentrations in blood of alcohol-treated mice receiving aldehyde dehydrogenase-loaded erythrocytes. Alcohol Alcohol 1992, 27(l):19-23.

66. Lizano C, Perez MT, Pinilla M: Mouse erythrocytes as carriers for coencapsulated alcohol and aldehyde dehydrogenase obtained by electroporation in vivo survival rate in circulation, organ distribution and ethanol degradation. Life Sci 2001, 68(17):2001-2016.

67. Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Жаботинский AM, Пичугин АВ: Проницаемость человеческих эритроцитов для аспарагина. Биохимия 1985, 50(10): 1733-1737.

68. Kravtzoff R, Colombat РН, Desbois I, Linassier С, Muh JP, Philip T, В lay JY, Gardenbas M, Poumier-Gaschard P, Lamagnere JP et al: Tolerance evaluation of L-asparaginase loaded in red blood cells. Eur J Clin Pharmacol 1996, 51(3-4):221-225.

69. Kravtzoff R, Desbois I, Lamagnere JP, Muh JP, Valat C, Chassaigne M, Colombat P, Ropars C: Improved pharmacodynamics of L-asparaginase-loaded in human red blood cells. Eur J Clin Pharmacol 1996, 49(6):465-470.

70. Fraternale A, Rossi L, Magnani M: Encapsulation, metabolism and release of 2-fluoro-ara-AMP from human erythrocytes. Biochim Biophys Acta 1996, 1291(2): 149-154.

71. Benatti U, Giovine M, Damonte G, Gasparini A, Scarfi S, De Flora A, Fraternale A, Rossi L, Magnani M: Azidothymidine homodinucleotide-loaded erythrocytes and bioreactors for slow delivery of the antiretroviral drug azidothymidine. Biochem Biophys Res Commun 1996, 220(l):20-25.

72. Yuan SH, Ge WH, Huo J, Wang XH: Slow release properties and liver-targeting characteristics of methotrexate erythrocyte carriers. Fundam Clin Pharmacol 2009, 23(2): 189-196.

73. Byun HM, Suh D, Yoon H, Kim JM, Choi HG, Kim WK, Ко JJ, Oh YK: Erythrocyte ghost-mediated gene delivery for prolonged and blood-targeted expression. Gene Ther 2004, 11(5):492-496.

74. Grimaldi S, Lisi A, Pozzi D, Santoro N: Attempts to use liposomes and RBC ghosts as vectors in drug and antisense therapy of virus infection. Res Virol 1997, 148(2):177-180.

75. Kim SH, Kim EJ, Hou JH, Kim JM, Choi HG, Shim CK, Oh YK: Opsonized erythrocyte ghosts for liver-targeted delivery of antisense oligodeoxynucleotides. Biomaterials 2009, 30(5):959-967.

76. Fraternale A, Paoletti MF, Casabianca A, Orlandi C, Millo E, Balestra E, Damonte G, Perno CF, Magnani M: Erythrocytes as carriers of antisense PNA addressed against HIV-1 gag-pol transframe domain. J Drug Target 2009, 17(4):278-285.

77. Magnani M, Rossi L, Fraternale A, Bianchi M, Antonelli A, Crinelli R, Chiarantini L: Erythrocyte-mediated delivery of drugs, peptides and modified oligonucleotides. Gene Ther 2002, 9(11):749-751.

78. Avramis VI: Asparaginases: biochemical pharmacology and modes of drug resistance. Anticancer Res 2012, 32(7):2423-2437.

79. Avramis VI, Sencer S, Periclou AP, Sather H, Bostrom BC, Cohen LJ, Ettinger AG, Ettinger LJ, Franklin J, Gaynon PS et al: A randomized comparison of native Escherichia coli asparaginase and polyethylene glycol conjugated asparaginase for treatment of children with newly diagnosed standard-risk acute lymphoblastic leukemia: a Children's Cancer Group study. Blood 2002, 99(6): 1986-1994.

80. Evans WE, Tsiatis A, Rivera G, Murphy SB, Dahl GV, Denison M, Crom WR, Barker LF, Mauer AM: Anaphylactoid reactions to Escherichia coli and Erwinia asparaginase in children with leukemia and lymphoma. Cancer 1982, 49(7):1378-1383.

81. Nesbit ME, Ertel I, Hammond GD: L-Asparaginase as a single agent in acute lymphocytic leukemia: survey of studies form Childrens Cancer Study Group. Cancer Treat Rep 1981, 65 Suppl 4:101-107.

82. Shepherd GM: Hypersensitivity reactions to chemotherapeutic drugs. Clin Rev Allergy Immunol 2003, 24(3):253-262.

83. Updike SJ, Wakamiya RT, Lightfoot EN, Jr.: Asparaginase entrapped in red blood cells: action and survival. Science 1976, 193(4254):681-683.

84. Minotti G, Menna P, Salvatorelli E, Cairo G, Gianni L: Anthracyclines: molecular advances and pharmacologic developments in antitumor activity and cardiotoxicity. Pharmacol Rev 2004, 56(2): 185-229.

85. Weiss RB: The anthracyelines: will we ever find a better doxorubicin? Semin Oncol 1992, 19(6):670-686.

86. Octavia Y, Tocchetti CG, Gabrielson KL, Janssens S, Crijns HJ, Moens AL: Doxorubicin-induced cardiomyopathy: from molecular mechanisms to therapeutic strategies. J Mol Cell Cardiol 2012, 52(6):1213-1225.

87. Solomon R, Gabizon AA: Clinical pharmacology of liposomal anthracyclines: focus on pegylated liposomal Doxorubicin. Clin Lymphoma Myeloma 2008, 8(l):21-32.

88. Barenholz Y: Doxil(R)~the first FDA-approved nano-drug: lessons learned. J Control Release 2012, 160(2): 117-134.

89. Johnston SR, Gore ME: Caelyx: phase II studies in ovarian cancer. Eur J Cancer 2001, 37 Suppl 9:S8-14.

90. Ortho Biotech Products LP: DOXIL (doxorubicin HC1 liposome injection). Product Information. In. Raritan, New Jersey, USA; 2007.

91. Matherne CM, Satterfield WC, Gasparini A, Tonetti M, Astroff AB, Schmidt RD, Rowe LD, DeLoach JR: Clinical efficacy and toxicity of doxorubicin encapsulated in glutaraldehyde-treated erythrocytes administered to dogs with lymphosarcoma. Am J Vet Res 1994, 55(6):847-853.

92. Tonetti M, Polvani C, Zocchi E, Guida L, Benatti U, Biassoni P, Romei F, Guglielmi A, Aschele C, Sobrero A et al: Liver targeting of autologous erythrocytes loaded with doxorubicin. Eur J Cancer 1991, 27(7):947-948.

93. Tonetti M, Zocchi E, Guida L, Polvani C, Benatti U, Biassoni P, Romei F, Guglielmi A, Aschele C, Sobrero A et al: Use of glutaraldehyde treated autologous human erythrocytes for hepatic targeting of doxorubicin. Adv Exp Med Biol 1992, 326:307-317.

94. Zocchi E, Tonetti M, Polvani C, Guida L, Benatti U, De Flora A: Encapsulation of doxorubicin in liver-targeted erythrocytes increases the therapeutic index of the drug in a murine metastatic model. Proc Natl Acad Sci USA 1989, 86(6):2040-2044.

95. Lang F, Foller M (eds.): Erythrocytes: Physiology and pathophysiology. London: Imperial College Press; 2012.

96. Кассирский ИА, Алексеев ГА: Клиническая гематология, 4 edn. Москва: Медицина; 1970.

97. Рапопорт СМ: Медицинская биохимия. Москва: Медицина; 1966.

98. Бабский ЕБ, Зубков АА, Косицкий ГИ, Ходоров БИ: Физиология человека, 2 edn. Москва: Медицина; 1972.

99. Dominguez de Villota ED, Ruiz Carmona MT, Rubio J J, de Andres S: Equality of the in vivo and in vitro oxygen-binding capacity of haemoglobin in patients with severe respiratory disease. Br J Anaesth 1981, 53(12):1325-1328.

100. Mohandas N, Gallagher PG: Red cell membrane: past, present, and future. Blood 2008, 112(10):3939-3948.

101. Branemark PI: Intravascular anatomy of blood cells in man. Basel: S. Karger; 1971.

102. Reinhart WH, Huang C, Vayo M, Norwich G, Chien S, Skalak R: Folding of red blood cells in capillaries and narrow pores. Biorheology 1991, 28(6):537-549.

103. Атауллаханов ФИ, Витвицкий BM, Лисовская ИЛ, Тужилова ЕГ: Анализ геометрических параметров и механических свойств эритроцитов методом фильтрации через мембранные ядерные фильтры. I. Математическая модель. Биофизика 1994, 39(4):672-680.

104. Bosman GJ, Willekens FL, Werre JM: Erythrocyte aging: a more than superficial resemblance to apoptosis? Cell Physiol Biochem 2005, 16(l-3):l-8.

105. Kiefer CR, Snyder LM: Oxidation and erythrocyte senescence. Curr Opin Hematol 2000, 7(2): 113-116.

106. Arese P, Turrini F, Schwarzer E: Band 3/complement-mediated recognition and removal of normally senescent and pathological human erythrocytes. Cell Physiol Biochem 2005, 16(4-6):133-146.

107. Yang B, Ma T, Verkman AS: Erythrocyte water permeability and renal function in double knockout mice lacking aquaporin-1 and aquaporin-3. J Biol Chem 2001, 276(1 ):624-628.

108. Ataullakhanov FI, Komarova SV, Martynov MV, Vitvitsky VM: A possible role of adenylate metabolism in human erythrocytes. 2. Adenylate metabolism is able to improve the erythrocyte volume stabilization. J Theor Biol 1996, 183(3):307-316.

109. Martinov MV, Plotnikov AG, Vitvitsky VM, Ataullakhanov FI: Deficiencies of glycolytic enzymes as a possible cause of hemolytic anemia. Biochim Biophys Acta 2000, 1474(l):75-87.

110. Martinov MV, Vitvitsky VM, Ataullakhanov FI: Volume stabilization in human erythrocytes: combined effects of Ca2+-dependent potassium channels and adenylate metabolism. Biophys Chem 1999, 80(3): 199-215.

111. Vitvitsky VM, Frolova EV, Martinov MV, Komarova SV, Ataullakhanov FI: Anion permeability and erythrocyte swelling. Bioelectrochemistry 2000, 52(2):169-177.

112. Beilin LJ, Knight GJ, Munro-Faure AD, Anderson J: The sodium, potassium, and water contents of red blood cells of healthy human adults. J Clin Invest 1966, 45(11): 1817-1825.

113. Lew VL, Raftos JE, Sorette M, Bookchin RM, Mohandas N: Generation of normal human red cell volume, hemoglobin content, and membrane area distributions by "birth" or regulation? Blood 1995, 86(1):334-341.

114. Linderkamp O, Meiselman HJ: Geometric, osmotic, and membrane mechanical properties of density-separated human red cells. Blood 1982, 59(6):1121-1127.

115. Feig SA, Segel GB, Shohet SB, Nathan DG: Energy metabolism in human erythrocytes. II. Effects of glucose depletion. J Clin Invest 1972, 51(6): 15471554.

116. Blum SF, Shohet SB, Nathan DG, Gardner FH: The effect of amphotericin В on erythrocyte membrane cation permeability: its relation to in vivo erythrocyte survival. J Lab Clin Med 1969, 73(6):980-987.

117. Segel GB, Feig SA, Glader BE, Muller A, Dutcher P, Nathan DG: Energy metabolism in human erythrocytes: the role of phosphoglycerate kinase in cation transport. Blood 1975, 46(2):271-278.

118. Dahl JL, Hokin LE: The sodium-potassium adenosinetriphosphatase. Annu Rev Biochem 1974, 43(0):327-356.

119. Атауллаханов ФИ, Витвицкий BM, Жаботинский AM, Кияткин АБ, Пичугин АВ, Синауридзе ЕИ: Метаболические изменения, ведущие к окислительному лизису эритроцитов, поддерживаемых в нормальном состоянии in vitro. Биохимия 1986, 51(9): 1562-1570.

120. Deuticke В, Heller KB, Haest CW: Leak formation in human erythrocytes by the radical-forming oxidant t-butylhydroperoxide. Biochim Biophys Acta 1986, 854(2):169-183.

121. Dwight JF, Hendry BM: The effects of tert-butyl hydroperoxide on human erythrocyte membrane ion transport and the protective actions of antioxidants. Clin Chim Acta 1996, 249(1-2): 167-181.

122. Орлов CH, Покудин НИ, Эль-Раби JIC, Брусованик ВИ, Кубатиев АА: Транспорт ионов в человеческие эритроциты при различных формах гемолитической анемии: корреляционный анализ. Biokhimiia 1993, 58(6):866-873.

123. Kramer HJ, Gospodinov D, Kruck F: Functional and metabolic studies on red blood cell sodium transport in chronic uremia. Nephron 1976, 16(5):344-358.

124. Illner H, Shires GT: Changes in sodium, potassium, and adenosine triphosphate contents of red blood cells in sepsis and septic shock. Circ Shock 1982, 9(3):259-267.

125. Mir MA, Bobinski H: Altered membrane sodium transport and the presence of a plasma ouabain-like inhibitory factor in acute myeloid leukaemia. Clin Sci Mol Med 1975, 48(3):213-218.

126. Corry DB, Ellis CC, Tuck ML: Increased inward passive permeability in vitro to sodium in uraemic erythrocytes. Clin Sei (Lond) 1996, 90(l):3-8.

127. Kraatz G, Wolf E, Gruska S: K(+)-permeability in diabetics and nondiabetics with and without renal insufficiency. Exp Clin Endocrinol Diabetes 1997, 105 Suppl 2:19-21.

128. Oski FA, Naiman JL, Blum SF, Zarkowsky HS, Whaun J, Shohet SB, Green A, Nathan DG: Congenital hemolytic anemia with high-sodium, low-potassium red cells. Studies of three generations of a family with a new variant. N Engl J Med 1969, 280(17):909-916.

129. Mentzer WC, Jr., Smith WB, Goldstone J, Shohet SB: Hereditary stomatocytosis: membrane and metabolism studies. Blood 1975, 46(5):659-669.

130. Bienzle U, Niethammer D, Kleeberg U, Ungefehr K, Kohne E, Kleihauer E: Congenital stomatocytosis and chronic haemolytic anaemia. Scand J Haematol 1975, 15(5):339-346.

131. Овчинников ЮА, Иванов BE, Шкроб AM: Мембранно-активные комплексоны. In. Москва: Наука; 1974.

132. Deuticke В, Kim М, Zollner С: The influence of amphotericin В on the permeability of mammalian erythrocytes to nonelectrolites, anions and cations. Biochim Biophys Acta 1973, 318:345-359.

133. Nash GB, Wyard SJ: Changes in surface area and volume measured by micropipette aspiration for erythrocytes ageing in vivo. Biorheology 1980, 17(5-6):479-484.

134. Bosch FH, Werre JM, Schipper L, Roerdinkholder-Stoelwinder B, Hüls T, Willekens FL, Wichers G, Halie MR: Determinants of red blood cell deformability in relation to cell age. Eur J Haematol 1994, 52(1):35-41.

135. Waugh RE, Narla M, Jackson CW, Mueller TJ, Suzuki T, Dale GL: Rheologie properties of senescent erythrocytes: loss of surface area and volume with red blood cell age. Blood 1992, 79(5):1351-1358.

136. Мороз ИА, Атауллаханов ФИ, Кияткин АБ, Пичугин АВ, Витвицкий ВМ: Математическая модель стабилизации объема эритроцитов. Биологические мембраны 1989, 6(4):409-419.

137. Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Комарова СВ: Возможная роль метаболизма адениновых нуклеотидов в регуляции объема эритроцитов человека. Биологические мембраны 1996, 13(2): 196-207.

138. Glynn IM, Karlish SJ: ATP hydrolysis associated with an uncoupled sodium flux through the sodium pump: evidence for allosteric effects of intracellular ATP and extracellular sodium. J Physiol 1976, 256(2):465-496.

139. Robinson JD, Flashner MS: The (Na+ + K+)-activated ATPase. Enzymatic and transport properties. Biochim Biophys Acta 1979, 549(2):145-176.

140. Атауллаханов ФИ, Буравцев BH, Витвицкий ВМ, Дибров БФ, Жаботинский AM, Пичугин АВ, Холоденко БН, Эрлих ЛИ: Связь между скоростью АТР-потребляющих процессов и концентрацией АТР в интактных эритроцитах. Биохимия 1980, 45(6):1075-1079.

141. Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Комарова СВ, Мошаров ЕВ: Энергозависимые процессы и метаболизм аденилатов в эритроцитах человека. Биохимия 1996, 61(2):266-275.

142. Kennedy BG, Lunn G, Hoffman JF: Effects of altering the ATP/ADP ratio on pump-mediated Na/K and Na/Na exchanges in resealed human red blood cell ghosts. J Gen Physiol 1986, 87(l):47-72.

143. Hoffmann EK, Simonsen LO: Membrane mechanisms in volume and pH regulation invertebrate cells. Physiol Rev 1989, 69(2):315-382.

144. Sarkadi B, Parker JC: Activation of ion transport pathways by changes in cell volume. Biochim Biophys Acta 1991, 1071(4):407-427.

145. Stewart GW: The membrane defect in hereditary stomatocytosis. Baillieres Clin Haematol 1993, 6(2):371-399.

146. Ellory JC, Hall AC, Amess JA: Passive potassium transport in human red cells. Biomed Biochim Acta 1987, 46(2-3):S31-35.

147. Ellory JC, Hall AC, Ody SA, Poli de Figueiredos CE, Chalder S, Stuart J: KC1 cotransport in HbAA and HbSS red cells: activation by intracellular acidity and disappearance during maturation. Adv Exp Med Biol 1991, 307:47-57.

148. Gardos G: The role of calcium in the potassium permeability of human erythrocytes. Acta Physiol Hung 1959, 15(2):121-125.

149. Halperin JA, Brugnara C, Nicholson-Weller A: Ca2+-activated K+ efflux limits complement-mediated lysis of human erythrocytes. J Clin Invest 1989, 83(5): 1466-1471.

150. Halperin JA, Taratuska A, Rynkiewicz M, Nicholson-Weller A: Transient changes in erythrocyte membrane permeability are induced by sublytic amounts of the complement membrane attack complex (C5b-9). Blood 1993, 81(l):200-205.

151. Бойтлер Э: Нарушения метсболизма эритроцитов и гемолитическая анемия. Москва: Медицина; 1981.

152. Rapoport S: The regulation of glycolysis in mammalian erythrocytes. Essays Biochem 1968,4:69-103.

153. Ataullakhanov FI, Vitvitsky VM, Zhabotinsky AM, Pichugin AV, Platonova OV, Kholodenko BN, Ehrlich LI: The regulation of glycolysis in human erythrocytes. The dependence of the glycolytic flux on the ATP concentration. Eur J Biochem 1981, 115(2):359-365.

154. Аграненко BA, Атауллаханов ФИ, Баташева ТВ, Витвицкий ВМ, М. ЖА: Изменения регуляторной характеристики гликолиза в эритроцитах при хранении донорской крови. Вопросы медицинской химии 1984, 30(3):109-112.

155. Ataullakhanov FI, Vitvitsky VM: What determines the intracellular ATP concentration. Biosci Rep 2002, 22(5-6):501-511.

156. Витвицкий ВМ: Регуляция гликолиза в эритроцитах человека. Механизм стабилизации концентрации АТФ. Москва; 1979.

157. Атауллаханов АИ, Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Жаботинский AM, Пичугин АВ: 2,3-дифосфоглицератный шунт и стабилизация уровня АТР в эритроцитах млекопитающих. Биохимия 1985, 50(6):1005-1011.

158. Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Жаботинский AM, Пичугин АВ, Помазанов ВВ, Титкова НФ: Влияние гликолиза на метаболизм аденилатов в эритроцитах человека. Биохимия 1984, 49(1):104-110.

159. Wallas СН: Elevated red blood cell 2,3-diphosphoglycerate levels in black blood donors. Transfusion 1978, 18(1):108-112.

160. Mansell MA, Allsop J, North ME, Simmonds RJ, Harkness RA, Watts RW: Effect of renal failure on erythrocyte purine nucleotide, nucleoside and base concentrations and some related enzyme activities. Clin Sci (Lond) 1981, 61(6):757-764.

161. Lichtman MA, Miller DR: Erythrocyte glycolysis, 2,3-diphosphoglycerate and adenosine triphosphate concentration in uremic subjects: relationship to extracellular phosphate concentration. J Lab Clin Med 1970, 76(2):267-279.

162. Cartier P, Leroux JP, Royer P, Balsan S: [Study on glycolysis and permeability of erythrocytes to orthophosphate ions in hereditary hypophosphatemic vitamin D-resistant rickets]. Clin Chim Acta 1970, 29(2):261-271.

163. Beutler E, Dyment PG, Matsumoto F: Hereditary nonspherocytic hemolytic anemia and hexokinase deficiency. Blood 1978, 51(5):935-940.

164. Benatti U, Morelli A, Damiani G, De Flora A: A methemoglobin-dependent and plasma-stimulated experimental model of oxidative hemolysis. Biochem Biophys Res Commun 1982, 106(4):1183-1190.

165. Малер Г, Кордес Ю: Основы биологической химии. Москва: Мир; 1970.

166. Ленинджер А: Биохимия. Москва: Мир; 1974.

167. Albrecht V, Roigas H, Schultze M, Jacobasch G, Rapoport S: The influence of pH and methylene blue on the pathways of glucose utilization and lactate formation in erythrocytes of man. Eur J Biochem 1971, 20(l):44-50.

168. Rose IA, O'Connell EL: The Role of Glucose 6-Phosphate in the Regulation of Glucose Metabolism in Human Erythrocytes. J Biol Chem 1964, 239:12-17.

169. Sagone AL, Jr., Balcerzak SP, Metz EN: The response of red cell hexose monophosphate shunt after sulfhydryl inhibition. Blood 1975, 45(l):49-54.

170. Атауллаханов ФИ, Жаботинский AM, Пичугин AB, Толокнова НФ: Зависимость скорости функционирования пентозного пути в эритроцитах от степени восстановленности глютатиона. Биохимия 1981, 46(3):530-541.

171. Jacob HS, Jandl JH: Effects of sulfhydryl inhibition on red blood cells. 3. Glutathione in the regulation of the hexose monophosphate pathway. J Biol Chem 1966, 241(18):4243-4250.

172. Кушаковский MC: Клинические формы повреждения гемоглобина. Ленинград: Медицина; 1968.

173. Atkinson DE: Cellular energy metabolism and its regulation. New York: Academic Press; 1977.

174. Minakami S, Suzuki C, Saito T, Yoshikawa H: Studies on erythrocyte glycolysis. I. Determination of the glycolytic intermediates in human erythrocytes. J Biochem 1965, 58(6):543-550.

175. Bartlett GR: Human red cell glycolytic intermediates. J Biol Chem 1959, 234(3):449-458.

176. Komarova SV, Mosharov EV, Vitvitsky VM, Ataullakhanov FI: Adenine nucleotide synthesis in human erythrocytes depends on the mode of supplementation of cell suspension with adenosine. Blood Cells Mol Dis 1999, 25(3-4):170-179.

177. Meyskens FL, Williams HE: Adenosine metabolism in human erythrocytes. Biochim Biophys Acta 1971, 240(2): 170-179.

178. Dean BM, Perrett D: Studies on adenine and adenosine metabolism by intact human erythrocytes using high performance liquid chromatography. Biochim Biophys Acta 1976, 437(l):l-5.

179. Rapoport I, Rapoport SM, Gerber G: Degradation of AMP in erythrocytes of man. Evidence for a cytosolic phosphatase activity. Biomed Biochim Acta 1987, 46(5):317-329.

180. van den Berghe G, Bontemps F: Adenine nucleotide catabolism in human erythrocytes: pathways and regulation. Biomed Biochim Acta 1990, 49(2-3):S117-122.

181. Paglia DE, Valentine WN, Nakatani M, Brockway RA: Mechanisms of adenosine 5'-monophosphate catabolism in human erythrocytes. Blood 1986, 67(4):988-992.

182. Bishop C: Purine metabolism in human blood studied in vivo by injection of C14-adenine. J Biol Chem 1961, 236(6):1778-1779.

183. Rapoport I, Berger H, Eisner R, Rapoport S: PH-dependent changes of 2,3-bisphosphoglycerate in human red cells during transitional and steady states in vitro. Eur J Biochem 1977, 73(2):421-427.

184. Атауллаханов ФИ: Регуляция метаболизма в эритроцитах. Москва; 1982.

185. Комарова СВ: Регуляция метаболизма аденилатов в эритроцитах человека. Москва; 1996.

186. Ropars С, Avenard G, Chassaigne М: Large-scale entrapment of drugs into resealed red blood cells using a continuous-flow dialysis system. Methods Enzymol 1987, 149:242-248.

187. Dern RJ, Brewer GJ, Wiorkowski JJ: Studies on the preservation of human blood. II. The relationship of erythrocyte adenosine triphosphate levels and other in vitro measures to red cell storageability. J Lab Clin Med 1967, 69(6):968-978.

188. Beutler E, West C: Storage of red cell concentrates in CPD-A2 for 42 and 49 days. J Lab Clin Med 1983, 102(l):53-62.

189. Lachant NA, Noble NA, Myrhe BA, Tanaka KR: Antioxidant metabolism during blood storage and its relationship to posttransfusion red cell survival. Am J Hematol 1984, 17(3):237-249.

190. Эрлих ЛИ, Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Жаботинский AM, Пичугин АВ: Анализ с помощью математической модели связи дефицитов ферментов гликолиза с наследственными гемолитическими

анемиями. Известия Академии Наук СССР Серия Биологическая 1985(5):754-766.

191. Hamidi М, Tajerzadeh Н: Carrier erythrocytes: an overview. Drug Deliv 2003, 10(l):9-20.

192. Hamidi M, Zarrin A, Foroozesh M, Mohammadi-Samani S: Applications of carrier erythrocytes in delivery of biopharmaceuticals. J Control Release 2007, 118(2):145-160.

193. Hoffman JF: The active transport of sodium by ghosts of human red blood cells. J Gen Physiol 1962, 45:837-859.

194. Hoffman JF: Physiological characteristics of human red blood cell ghosts. J Gen Physiol 1958, 42(l):9-28.

195. Marsden NV, Ostling SG: Accumulation of dextran in human red cells after haemolysis. Nature 1959, 184(Suppl 10):723-724.

196. Baker RF: Entry of ferritin into human red cells during hypotonic haemolysis. Nature 1967,215(5099):424-425.

197. Seeman P: Transient holes in the erythrocyte membrane during hypotonic hemolysis and stable holes in the membrane after lysis by saponin and lysolecithin. J Cell Biol 1967, 32(l):55-70.

198. Bodemann H, Passow H: Factors controlling the resealing of the membrane of human erythrocyte ghosts after hypotonic hemolysis. J Membr Biol 1972, 8(l):l-26.

199. Ihler GM, Glew RH, Schnure FW: Enzyme loading of erythrocytes. Proc Natl Acad Sci U S A 1973, 70(9):2663-2666.

200. Loyter A, Zakai N, Kulka RG: "Ultramicroinjection" of macromolecules or small particles into animal cells. A new technique based on virus-induced cell fusion. J Cell Biol 1975, 66(2):292-304.

201. Furusawa M, Nishimura T, Yamaizumi M, Okada Y: Injection of foreign substances into single cells by cell fusion. Nature 1974, 249(456):449-450.

202. Schlegel RA, Rechsteiner MC: Red cell-mediated microinjection of macromolecules into mammalian cells. Methods Cell Biol 1978, 20:341-354.

203. Franco R, Barker R, Mayfield G, Silberstein E, Weiner M: The in vivo survival of human red cells with low oxygen affinity prepared by the osmotic pulse method of inositol hexaphosphate incorporation. Transfusion 1990, 30(3):196-200.

204. Franco RS, Barker RL: Modification of the oxygen affinity and intracellular hemoglobin concentration of normal and sickle cells by means of an osmotic pulse. J Lab Clin Med 1989, 113(l):58-66.

205. Franco RS, Barker R, Novick S, Weiner M, Martelo OJ: Effect of inositol hexaphosphate on the transient behavior of red cells following a DMSO-induced osmotic pulse. J Cell Physiol 1986, 129(2):221-229.

206. Franco RS, Wagner K, Weiner M, Martelo OJ: Preparation of low-affinity red cells with dimethylsulfoxide-mediated inositol hexaphosphate incorporation: hemoglobin and ATP recovery using a continuous-flow method. Am J Hematol 1984, 17(4):393-400.

207. Deloach J, Ihler G: A dialysis procedure for loading erythrocytes with enzymes and lipids. Biochim Biophys Acta 1977, 496(1):136-145.

208. Dale GL, Villacorte DG, Beutler E: High-yield entrapment of proteins into erythrocytes. Biochem Med 1977, 18(2):220-225.

209. Dale GL: High-efficiency entrapment of enzymes in resealed red cell ghosts by dialysis. Methods Enzymol 1987, 149:229-234.

210. Sinauridze EI, Vitvitsky VM, Pichugin AV, Zhabotinsky AM, Ataullakhanov FI: A new chemotherapeutic agent: L-asparaginase entrapped in red blood cells. Adv Exp Med Biol 1992, 326:203-206.

211. Синауридзе ЕИ: Метод получения эритроцитов, наполненных лекарственными препаратами. In., vol. № 1469609. Авторское свидетельство СССР; 1988.

212. Sinauridze EI, Vuimo ТА, Kulikova EV, Shmyrev, II, Ataullakhanov FI: A new drug form of blood coagulation factor IX: red blood cell-entrapped factor IX. Med Sci Monit 2010, 16(10):PI19-26.

213. Ropars C, Teisseire B, Avenard G, Chassaigne M, Hurel C, Girot R, Nicolau C: Improved oxygen delivery to tissues and iron chelator transport through the use of lysed and resealed red blood cells: a new perspective on Cooley's anemia therapy. AnnN Y Acad Sci 1985, 445:304-315.

214. Teisseire B, Ropars C, Villereal MC, Nicolau C: Long-term physiological effects of enhanced 02 release by inositol hexaphosphate-loaded erythrocytes. Proc Natl Acad Sci U S A 1987, 84(19):6894-6898.

215. Magnani M, Rossi L, D'Ascenzo M, Panzani I, Bigi L, Zanella A: Erythrocyte engineering for drug delivery and targeting. Biotechnol Appl Biochem 1998, 28 (Pt 1): 1 -6.

216. Kinosita K, Jr., Tsong TY: Survival of sucrose-loaded erythrocytes in the circulation. Nature 1978, 272(5650):258-260.

217. Kinosita K, Jr., Tsong TY: Formation and resealing of pores of controlled sizes in human erythrocyte membrane. Nature 1977, 268(5619):438-441.

218. Kinosita K, Jr., Tsong TT: Hemolysis of human erythrocytes by transient electric field. Proc Natl Acad Sci U S A 1977, 74(5): 1923-1927.

219. Riemann F, Zimmermann U, Pilwat G: Release and uptake of haemoglobin and ions in red blood cells induced by dielectric breakdown. Biochim Biophys Acta 1975, 394(3):449-462.

220. Zimmermann U, Pilwat G, Riemann F: Preparation of erythrocyte ghosts by dielectric breakdown of the cell membrane. Biochim Biophys Acta 1975, 375(2):209-219.

221. Zimmermann U, Riemann F, Pilwat G: Enzyme loading of electrically homogeneous human red blood cell ghosts prepared by dielelctric breakdown. Biochim Biophys Acta 1976, 436(2):460-474.

222. Mulholland SE, Lee S, McAuliffe DJ, Doukas AG: Cell loading with lasergenerated stress waves: the role of the stress gradient. Pharm Res 1999, 16(4):514-518.

223. Pressman BC: Biological applications of ionophores. Annu Rev Biochem 1976, 45:501-530.

224. Vertut-Doi A, Hannaert P, Bolard J: The polyene antibiotic amphotericin В inhibits the Na+/K+ pump of human erythrocytes. Biochem Biophys Res Commun 1988, 157(2):692-697.

225. Kitao T, Hattori K: Erythrocyte entrapment of daunomycin by amphotericin В without hemolysis. Cancer Res 1980, 40(4): 1351-1353.

226. Ataullakhanov FI, Vitvitsky VM, Kovaleva VL, Mironova SB: Rubomycin loaded erythrocytes in the treatment of mouse tumor P388. Adv Exp Med Biol 1992, 326:209-213.

227. Атауллаханов АИ, Баташева ТВ, Витвицкий ВМ: Влияни температуры, концентрации даунорубицина и гематокрита суспензии на связывание даунорубицина эритроцитами человека. Антибиотики и химиотерапия 1994, 39(9-10):26-29.

228. Ataullakhanov FI, Kulikova EV, Vitvitsky VM: Doxorubicin binding by human erythrocytes. Advances in the Biosciences 1994, 92:163-168.

229. Lemeshko VV: Electrical potentiation of the membrane permeabilization by new peptides with anticancer properties. Biochim Biophys Acta 2013, 1828(3): 1047-1056.

230. Huang Y, Park YS, Wang J, Moon C, Kwon YM, Chung HS, Park YJ, Yang VC: ATTEMPTS system: a macromolecular prodrug strategy for cancer drug delivery. CurrPharmDes 2010, 16(21):2369-2376.

231. Kwon YM, Chung HS, Moon C, Yockman J, Park YJ, Gitlin SD, David AE, Yang VC: L-Asparaginase encapsulated intact erythrocytes for treatment of acute lymphoblastic leukemia (ALL). J Control Release 2009, 139(3): 182-189.

232. Zaitsev S, Danielyan K, Murciano JC, Ganguly K, Krasik T, Taylor RP, Pincus S, Jones S, Cines DB, Muzykantov VR: Human complement receptor type 1-directed loading of tissue plasminogen activator on circulating erythrocytes for prophylactic fibrinolysis. Blood 2006, 108(6):1895-1902.

233. Tonetti M, Astroff B, Satterfield W, De Flora A, Benatti U, DeLoach JR: Construction and characterization of adriamycin-loaded canine red blood cells

as a potential slow delivery system. Biotechnol Appl Biochem 1990, 12(6):621-629.

234. DeLoach JR, Droleskey R: Interaction of anthracycline drugs with canine and bovine carrier erythrocytes. J Appl Biochem 1985, 7(4-5):332-340.

235. Атауллаханов ФИ, Баташева ТВ, Витвицкий ВМ, Комарова СВ: Влияние обработки глютаровым альдегидом на выход рубомицина и гемоглобина из нагруженных рубомицином мышиных эритроцитов. Биотехнология 1993(2):40-43.

236. De Flora A, Benatti U, Guida L, Zocchi E: Encapsulation of adriamycin in human erythrocytes. Proc Natl Acad Sei U S A 1986, 83(18):7029-7033.

237. Ataullakhanov FI, Batasheva TV, Bukhman VM, Komarova SV, Oreshkina TD, Vitvitsky VM: Treatment of Rausher virus induced murine erythroblastic leukemia with rubomycin loaded erythrocytes. Advances in the Biosciences 1994, 92:177-183.

238. Morales LE: Gaucher's disease: a review. Ann Pharmacother 1996, 30(4):381-388.

239. Dale GL, Beutler E: Enzyme replacement therapy in Gaucher's disease: a rapid, high-yield method for purification of glucocerebrosidase. Proc Natl Acad Sei U S A 1976, 73(12):4672-4674.

240. Beutler E, Dale GL, Guinto DE, Kühl W: Enzyme replacement therapy in Gaucher's disease: preliminary clinical trial of a new enzyme preparation. Proc Natl Acad Sei U S A 1977, 74(10):4620-4623.

241. Terheggen HG, Lowenthal A, Lavinha F, Colombo JP: Familial hyperargininaemia. Arch Dis Child 1975, 50(l):57-62.

242. Adriaenssens K, Karcher D, Lowenthal A, Terheggen HG: Use of enzyme-loaded erythrocytes in in-vitro correction of arginase-deficient erythrocytes in familial hyperargininemia. Clin Chem 1976, 22(3):323-326.

243. Adriaenssens K, Karcher D, Marescau B, Van Broeckhoven C, Lowenthal A, Terheggen HC: Hyperargininemia: the rat as a model for the human disease and the comparative response to enzyme replacement therapy with free

arginase and arginase-loaded erythrocytes in vivo. Int J Biochem 1984, 16(7):779-786.

244. Blackburn MR, Kellems RE: Adenosine deaminase deficiency: metabolic basis of immune deficiency and pulmonary inflammation. Adv Immunol 2005, 86:1-41.

245. Nishino I, Spinazzola A, Papadimitriou A, Hammans S, Steiner I, Hahn CD, Connolly AM, Verloes A, Guimaraes J, Maillard I et al: Mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy: an autosomal recessive disorder due to thymidine phosphorylase mutations. Ann Neurol 2000, 47(6):792-800.

246. Hirano M, Garone C, Quinzii CM: CoQ(10) deficiencies and MNGIE: two treatable mitochondrial disorders. Biochim Biophys Acta 2012, 1820(5):625-631.

247. Bax BE, Bain MD, Scarpelli M, Filosto M, Tonin P, Moran N: Clinical and biochemical improvements in a patient with MNGIE following enzyme replacement. Neurology 2013, 81(14): 1269-1271.

248. Levene M, Coleman DG, Kilpatrick HC, Fairbanks LD, Gangadharan B, Gasson C, Bax BE: Preclinical toxicity evaluation of erythrocyte-encapsulated thymidine phosphorylase in BALB/c mice and beagle dogs: an enzyme-replacement therapy for mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy. Toxicol Sei 2013, 131(1):311-324.

249. Blau N, van Spronsen FJ, Levy HL: Phenylketonuria. Lancet 2010, 376(9750): 1417-1427.

250. Mitchell JJ, Trakadis YJ, Scriver CR: Phenylalanine hydroxylase deficiency. Genet Med 2011, 13(8):697-707.

251. Magnani M, Rossi L, Casabianca A, Fraternale A, Schiavano G, Brandi G, Mannello F, Piedimonte G: Red blood cells as advanced drug delivery systems for antiviral nucleoside analogues. Adv Exp Med Biol 1992, 326:239-245.

252. De Flora A, Zocchi E, Guida L, Polvani C, Benatti U: Conversion of encapsulated 5-fluoro-2'-deoxyuridine 5'-monophosphate to the antineoplastic

drug 5-fluoro-2'-deoxyuridine in human erythrocytes. Proc Natl Acad Sci U S A 1988, 85(9):3145-3149.

253. Pitt E, Johnson CM, Lewis DA, Jenner DA, Offord RE: Encapsulation of drugs in intact erythrocytes: an intravenous delivery system. Biochem Pharmacol 1983, 32(22):3359-3368.

254. Rossi L, Serafini S, Cenerini L, Picardi F, Bigi L, Panzani I, Magnani M: Erythrocyte-mediated delivery of dexamethasone in patients with chronic obstructive pulmonary disease. Biotechnol Appl Biochem 2001, 33(Pt 2):85-89.

255. Annese V, Latiano A, Rossi L, Lombardi G, Dallapiccola B, Serafini S, Damonte G, Andriulli A, Magnani M: Erythrocytes-mediated delivery of dexamethasone in steroid-dependent IBD patients-a pilot uncontrolled study. Am J Gastroenterol 2005, 100(6): 1370-1375.

256. Kaminsky YG, Kosenko EA, Alexandrovich YG, Ataullakhanov FI: Experiments on alcocytes containing enzyme nanoparticles for reducing toxic blood concentration of ethanol. Bull Exp Biol Med 2012, 153(1):170-172.

257. Leung P, Cannon EP, Petrikovics I, Hawkins A, Way JL: In vivo studies on rhodanese encapsulation in mouse carrier erythrocytes. Toxicol Appl Pharmacol 1991, 110(2):268-274.

258. Sanz S, Lizano C, Luque J, Pinilla M: In vitro and in vivo study of glutamate dehydrogenase encapsulated into mouse erythrocytes by a hypotonic dialysis procedure. Life Sci 1999, 65(26):2781-2789.

259. Gore JM, Sloan M, Price TR, Randall AM, Bovill E, Collen D, Forman S, Knatterud GL, Sopko G, Terrin ML: Intracerebral hemorrhage, cerebral infarction, and subdural hematoma after acute myocardial infarction and thrombolytic therapy in the Thrombolysis in Myocardial Infarction Study. Thrombolysis in Myocardial Infarction, Phase II, pilot and clinical trial. Circulation 1991, 83(2):448-459.

260. Tsirka SE, Gualandris A, Amaral DG, Strickland S: Excitotoxin-induced neuronal degeneration and seizure are mediated by tissue plasminogen activator. Nature 1995, 377(6547):340-344.

261. Cannon CP, Gibson CM, McCabe CH, Adgey AA, Schweiger MJ, Sequeira RF, Grollier G, Giugliano RP, Frey M, Mueller HS et al: TNK-tissue plasminogen activator compared with front-loaded alteplase in acute myocardial infarction: results of the TIMI 10B trial. Thrombolysis in Myocardial Infarction (TIMI) 10B Investigators. Circulation 1998, 98(25):2805-2814.

262. Modi NB, Fox NL, Clow FW, Tanswell P, Cannon CP, Van de Werf F, Braunwald E: Pharmacokinetics and pharmacodynamics of tenecteplase: results from a phase II study in patients with acute myocardial infarction. J Clin Pharmacol 2000, 40(5):508-515.

263. Polvani C, Gasparini A, Benatti U, DeFlora A, Silvestri S, Volpini G, Nencioni L: Murine red blood cells as efficient carriers of three bacterial antigens for the production of specific and neutralizing antibodies. Biotechnol Appl Biochem 1991, 14(3):347-356.

264. Magnani M, Chiarantini L, Vittoria E, Mancini U, Rossi L, Fazi A: Red blood cells as an antigen-delivery system. Biotechnol Appl Biochem 1992, 16(2):188-194.

265. Hamidi M, Zarei N, Zarrin AH, Mohammadi-Samani S: Preparation and in vitro characterization of carrier erythrocytes for vaccine delivery. Int J Pharm 2007, 338(l-2):70-78.

266. Banz A, Cremel M, Rembert A, Godfrin Y: In situ targeting of dendritic cells by antigen-loaded red blood cells: A novel approach to cancer immunotherapy. Vaccine 2010, 28(17):2965-2972.

267. Chiarantini L, Argnani R, Zucchini S, Stevanato L, Zabardi P, Grossi MP, Magnani M, Manservigi R: Red blood cells as delivery system for recombinant HSV-1 glycoprotein B: immunogenicity and protection in mice. Vaccine 1997, 15(3):276-280.

268. Corinti S, Chiarantini L, Dominici S, Laguardia ME, Magnani M, Girolomoni G: Erythrocytes deliver Tat to interferon-gamma-treated human dendritic cells for efficient initiation of specific type 1 immune responses in vitro. J Leukoc Biol 2002, 71(4):652-658.

269. Dominici S, Laguardia ME, Serafini G, Chiarantini L, Fortini C, Tripiciano A, Brocca-Cofano E, Scoglio A, Caputo A, Fiorelli V et al: Red blood cellmediated delivery of recombinant HIV-1 Tat protein in mice induces anti-Tat neutralizing antibodies and CTL. Vaccine 2003, 21(17-18):2073-2081.

270. Gautam S, Barna B, Chiang T, Pettay J, Deodhar S: Use of resealed erythrocytes as delivery system for C-reactive protein (CRP) to generate macrophage-mediated tumoricidal activity. J Biol Response Mod 1987, 6(3):346-354.

271. Green R, Miller J, Crosby W: Enhancement of iron chelation by desferrioxamine entrapped in red blood cell ghosts. Blood 1981, 57(5):866-872.

272. Green R, Lamon J, Curran D: Clinical trial of desferrioxamine entrapped in red cell ghosts. Lancet 1980, 2(8190):327-330.

273. Teisseire BP, Ropars C, Vallez MO, Herigault RA, Nicolau C: Physiological effects of high-P50 erythrocyte transfusion on piglets. J Appl Physiol (1985) 1985, 58(6):1810-1817.

274. Benesch RE, Edalji R, Benesch R: Reciprocal interaction of hemoglobin with oxygen and protons. The influence of allosteric polyanions. Biochemistry 1977, 16(12):2594-2597.

275. Lamarre Y, Bourgeaux V, Pichon A, Hardeman MR, Campion Y, Hardeman-Zijp M, Martin C, Richalet JP, Bernaudin F, Driss F et al: Effect of inositol hexaphosphate-loaded red blood cells (RBCs) on the rheology of sickle RBCs. Transfusion 2013, 53(3):627-636.

276. Bourgeaux V, Hequet O, Campion Y, Delcambre G, Chevrier AM, Rigal D, Godfrin Y: Inositol hexaphosphate-loaded red blood cells prevent in vitro sickling. Transfusion 2010, 50(10):2176-2184.

277. Bourgeaux V, Aufradet E, Campion Y, De Souza G, Horand F, Bessaad A, Chevrier AM, Canet-Soulas E, Godfrin Y, Martin C: Efficacy of homologous inositol hexaphosphate-loaded red blood cells in sickle transgenic mice. Br J Haematol 2012, 157(3):357-369.

278. Lynch WE, Sartiano GP, Ghaffar A: Erythrocytes as carriers of chemotherapeutic agents for targeting the reticuloendothelial system. Am J Hematol 1980, 9(3):249-259.

279. DeLoach JR, Barton C: Circulating carrier erythrocytes: slow-release vehicle for an antileukemic drug, cytosine arabinoside. Am J Vet Res 1982, 43(12):2210-2212.

280. Flynn G, McHale L, McHale AP: Methotrexate-loaded, photosensitized erythrocytes: a photo-activatable carrier/delivery system for use in cancer therapy. Cancer Lett 1994, 82(2):225-229.

281. Mishra PR, Jain NK: Biotinylated methotrexate loaded erythrocytes for enhanced liver uptake. 'A study on the rat'. Int J Pharm 2002, 231(2):145-153.

282. Kitao T, Hattori K, Takeshita M: Agglutination of leukemic cells and daunomycin entrapped erythrocytes with lectin in vitro and in vivo. Experientia 1978, 34(l):94-95.

283. Ataullakhanov FI, Kulikova EV, Vitvitsky VM: Reversible binding of anthracycline antibiotics to erythrocytes treated with glutaraldehyde. Biotechnol Appl Biochem 1996, 24 ( Pt 3):241-244.

284. Skorokhod OA, Garmaeva T, Vitvitsky VM, Isaev VG, Parovichnikova EN, Savchenko VG, Ataullakhanov FI: Pharmacokinetics of erythrocyte-bound daunorubicin in patients with acute leukemia. Med Sci Monit 2004, 10(4):PI55-64.

285. Skorokhod O, Kulikova EV, Galkina NM, Medvedev PV, Zybunova EE, Vitvitsky VM, Pivnik AV, Ataullakhanov FI: Doxorubicin pharmacokinetics in lymphoma patients treated with doxorubicin-loaded eythrocytes. Haematologica 2007, 92(4):570-571.

286. Hill JM, Roberts J, Loeb E, Khan A, MacLellan A, Hill RW: L-asparaginase therapy for leukemia and other malignant neoplasms. Remission in human leukemia. Jama 1967, 202(9):882-888.

287. Cooney DA, Capizzi RL, Handschumacher RE: Evaluation of L-asparagine metabolism in animals and man. Cancer Res 1970, 30(4):929-935.

288. Riccardi R, Holcenberg JS, Glaubiger DL, Wood JH, Poplack DG: L-asparaginase pharmacokinetics and asparagine levels in cerebrospinal fluid of rhesus monkeys and humans. Cancer Res 1981, 41(11 Pt l):4554-4558.

289. Ho DH, Brown NS, Yen A, Holmes R, Keating M, Abuchowski A, Newman RA, Krakoff IH: Clinical pharmacology of polyethylene glycol-L-asparaginase. Drug Metab Dispos 1986, 14(3):349-352.

290. Graham ML: Pegaspargase: a review of clinical studies. Adv Drug Deliv Rev 2003, 55(10):1293-1302.

291. Updike SJ, Wakamiya RT: Infusion of red blood cell-loaded asparaginase in monkey. Immunologic, metabolic, and toxicologic consequences. J Lab Clin Med 1983, 101(5):679-691.

292. Updike SJ: Entrapment of L-asparaginase in red blood cells. A strategy to improve treatment of acute lymphoblastic leukemia. Bibl Haematol 1985(51):65-74.

293. Alpar HO, Lewis DA: Therapeutic efficacy of asparaginase encapsulated in intact erythrocytes. Biochem Pharmacol 1985, 34(2):257-261.

294. Naqi A, DeLoach JR, Andrews K, Satterfield W, Keeling M: Determination of parameters for enzyme therapy using L-asparaginase entrapped in canine erythrocytes. Biotechnol Appl Biochem 1988, 10(4):365-372.

295. DeLoach JR, Andrews K, Satterfield W, Keeling M: Intraperitoneal administration of carrier erythrocytes in dogs: an improved method for delivery of L-asparaginase. Biotechnol Appl Biochem 1990, 12(3):331-335.

296. Kravtzoff R, Ropars C, Laguerre M, Muh JP, Chassaigne M: Erythrocytes as carriers for L-asparaginase. Methodological and mouse in-vivo studies. J Pharm Pharmacol 1990, 42(7):473-476.

297. Kravtzoff R, Desbois I, Сhassaigne M, Muh JP, Lamagnere JP, Colombat P, Ropars C: In-vivo activity of L-asparaginase entrapped into human and mouse red blood cells. Advances in the biosciences 1991, 81:127-137.

298. Kravtzoff R, Desbois I, Doinel C, Colombat P, Lamagnere JP, Chassaigne M, Ropars C: Immunological response to L-asparaginase loaded into red blood cells. Adv Exp Med Biol 1992, 326:175-182.

299. Аграненко В А, Атауллаханов ФИ, Витвицкий ВМ, Кияткин АБ, Жаботинский AM, Маркова НА, Синауридзе ЕИ: Способ консервирования фармакоцитов с включенной L-аспарагиназой. In., vol. №1777887. Авторское свидетельство СССР; 1990.

300. Domenech С, Thomas X, Chabaud S, Baruchel A, Gueyffier F, Mazingue F, Auvrignon A, Corm S, Dombret H, Chevallier P et al: l-asparaginase loaded red blood cells in refractory or relapsing acute lymphoblastic leukaemia in children and adults: results of the GRASPALL 2005-01 randomized trial. Br J Haematol 2011, 153(l):58-65.

301. Hortobagyi GN: Anthracyclines in the treatment of cancer. An overview. Drugs 1997, 54 Suppl 4:1-7.

302. Richardson DS, Johnson SA: Anthracyclines in haematology: preclinical studies, toxicity and delivery systems. Blood Rev 1997, 11(4):201-223.

303. Gewirtz DA: A critical evaluation of the mechanisms of action proposed for the antitumor effects of the anthracycline antibiotics adriamycin and daunorubicin. Biochem Pharmacol 1999, 57(7):727-741.

304. Wakabayashi I, Groschner K: Vascular actions of anthracycline antibiotics. Curr Med Chem 2003, 10(5):427-436.

305. Zucchi R, Danesi R: Cardiac toxicity of antineoplastic anthracyclines. Curr Med Chem Anticancer Agents 2003, 3(2): 151-171.

306. Steinherz LJ, Steinherz PG, Tan CT, Heller G, Murphy ML: Cardiac toxicity 4 to 20 years after completing anthracycline therapy. Jama 1991, 266(12):1672-1677.

307. Lee YT, Chan KK, Harris PA, Cohen JL: Distribution of adriamycin in cancer patients: tissue uptakes, plasma concentration after IV and hepatic IA administration. Cancer 1980, 45(9):2231-2239.

308. Piazza E, Donelli MG, Broggini M, Sessa C, Natale N, Ottolenghi L, Marsoni S, Libretti A, Mangioni C, Morasca L: Early phase pharmacokinetics of doxorubicin (adriamycin) in plasma of cancer patients during single- or multiple-drug therapy. Cancer Treat Rep 1980, 64(8-9):845-854.

309. Speth PA, Linssen PC, de Pauw BE, de Witte TJ: Cellular pharmacokinetics of daunomycin administered as continuous intravenous infusion in the treatment of acute non-lymphocytic leukaemia. Br J Haematol 1986, 63(3):602-605.

310. Куликова ЕВ, Витвицкий BM, Кохно АВ, Исаев ВГ, Паровичникова ЕН, Савченко ВГ, Атауллаханов ФИ: Введение эритроцитов, нагруженных доксорубицином, больным с лимфопролиферативными заболеваниями. Гематология и трансфузиология 1998, 43(4):26-29.

311. Robert J, Gianni L: Pharmacokinetics and metabolism of anthracyclines. Cancer Surv 1993, 17:219-252.

312. Johnson SA, Richardson DS: Anthracyclines in haematology: pharmacokinetics and clinical studies. Blood Rev 1998, 12(1):52-71.

313. Dillman RO, Johnson DE, Shawler DL, Koziol JA: Superiority of an acid-labile daunorubicin-monoclonal antibody immunoconjugate compared to free drug. Cancer Res 1988, 48(21):6097-6102.

314. Yabbarov NG, Posypanova GA, Vorontsov EA, Obydenny SI, Severin ES: A new system for targeted delivery of doxorubicin into tumor cells. J Control Release 2013, 168(2):135-141.

315. Yang HM, Reisfeld RA: Doxorubicin conjugated with a monoclonal antibody directed to a human melanoma-associated proteoglycan suppresses the growth of established tumor xenografts in nude mice. Proc Natl Acad Sci U S A 1988, 85(4):1189-1193.

316. Feldman NB, Kiselev SM, Gukasova NV, Posypanova GA, Lutsenko SV, Severin SE: Antitumor activity of alpha-fetoprotein conjugate with doxorubicin in vitro and in vivo. Biochemistry (Mose) 2000, 65(8):967-971.

317. Lutsenko SV, Feldman NB, Gumanov SG, Rodina AV, Severin SE: Cytotoxic activity, accumulation, and intracellular distribution of anthracycline antibiotics and their conjugates with the epidermal growth factor in sensitive and resistant MCF-7 cells. Biochemistry (Mose) 2000, 65(11): 1299-1304.

318. Hopewel JW, Duncan R, Wilding D, Chakrabarti K: Preclinical evaluation of the cardiotoxicity of PK2: a novel HPMA copolymer-doxorubicin-galactosamine conjugate antitumour agent. Hum Exp Toxicol 2001, 20(9):461-470.

319. Kabanov AV, Batrakova EV, Alakhov VY: Pluronic block copolymers for overcoming drug resistance in cancer. Adv Drug Deliv Rev 2002, 54(5):759-779.

320. Batrakova EV, Li S, Brynskikh AM, Sharma AK, Li Y, Boska M, Gong N, Mosley RL, Alakhov VY, Gendelman HE et al: Effects of pluronic and doxorubicin on drug uptake, cellular metabolism, apoptosis and tumor inhibition in animal models of MDR cancers. J Control Release 2010, 143(3):290-301.

321. Исаев ВГ, Гармаева ТЦ, Скороход АА, Паровичникова ЕН, Тюрина НГ, Кучер РА, Витвицкий ВМ, Атауллаханов ФИ, Савченко ВГ: Применение иммобилизованных форм даунорубицина у больных острыми лейкозами. Терапевтический архив 1999, 71(10):32-37.

322. Sadava D, Coleman A, Kane SE: Liposomal daunorubicin overcomes drug resistance in human breast, ovarian and lung carcinoma cells. J Liposome Res 2002, 12(4):301-309.

323. Tyrrell DA, Ryman BE: The entrapment of therapeutic agents in resealed erythrocyte 'ghosts' and their fate in vivo. Biochem Soc Trans 1976, 4(4):677-680.

324. Gaudreault RC, Bellemare B, Lacroix J: Erythrocyte membrane-bound daunorubicin as a delivery system in anticancer treatment. Anticancer Res 1989, 9(4):1201-1205.

325. Ataullakhanov FI, Kulikova EV, Vitvitsky VM: Binding of daunorubicin and doxorubicin to erythrocytes treated with glutaraldehyde. In: Erythrocytes as drug carriers in medicine. Edited by Sprandel U, Way JL. New York: Plenum Press; 1997: 143-148.

326. Avrameas S, Ternynck T: The cross-linking of proteins with glutaraldehyde and its use for the preparation of immunoadsorbents. Immunochemistry 1969, 6(l):53-66.

327. Henderson CA, Metz EN, Balcerzak SP, Sagone AL, Jr.: Adriamycin and daunomycin generate reactive oxygen compounds in erythrocytes. Blood 1978, 52(5):878-885.

328. Shinohara K, Tanaka KR: The effects of adriamycin (doxorubicin HC1) on human red blood cells. Hemoglobin 1980, 4(5-6):735-745.

329. Arancia G, Bordi F, Calcabrini A, Diociaiuti M, Molinari A: Ultrastructural and spectroscopic methods in the study of anthracycline-membrane interaction. Pharmacol Res 1995, 32(5):255-272.

330. Скороход AA, Витвицкий BM, Кульман PA, Атауллаханов ФИ: Повреждающее воздействие рубомицина и доксорубицина на эритроциты человека in vitro. Вопросы онкологии 1999, 45(4):374-379.

331. Sprandel U, Zollner N: Osmotic fragility of drug carrier erythrocytes. Res Exp Med (Berl) 1985, 185(l):77-85.

332. Lisovskaya IL, Shurkhina ES, Yakovenko EE, Tsvetaeva NV, Kolodei SV, Shcherbinina SP, Ataullakhanov FI: Distributions of rheological parameters in populations of human erythrocytes. Biorheology 1999, 36(4):299-309.

333. Benatti U, Zocchi E, Tonetti M, Guida L, Polvani C, De Flora A: Enhanced antitumor activity of adriamycin by encapsulation in mouse erythrocytes targeted to liver and lungs. Pharmacol Res 1989, 21 Suppl 2:27-33.

334. Zocchi E, Tonetti M, Polvani C, DeFlora A: Enhanced antineoplastic efficiency of erythrocyte encapsulated doxorubicin in a murine liver metastatic model. Advances in the Biosciences 1991, 81:231-237.

335. Gasparini A, Chiarantini L, Kirch H, DeLoach JR: In vitro targeting of doxorubicin loaded canine erythrocytes to cytotoxic T-lymphocytes (CTLL). Adv Exp Med Biol 1992, 326:291-297.

336. Satterfield WC, Clarke MS, Hill MJ, DeLoach JR: Clinical evaluation of doxorubicin in canine carrier erythrocytes as therapy for canine lymphosarcoma. Advances in the Biosciences 1991, 81:189-193.

337. Gasparini A, Tonetti M, Astroff B, Rowe L, Satterfield W, Schmidt R, DeLoach JR: Pharmacokinetics of doxorubicin loaded and glutaraldehyde treated erythrocytes in healthy and lymphoma bearing dogs. Adv Exp Med Biol 1992,326:299-304.

338. Tonetti M, Astroff AB, Satterfield W, De Flora A, Benatti U, DeLoach JR: Pharmacokinetic properties of doxorubicin encapsulated in glutaraldehyde-treated canine erythrocytes. Am J Vet Res 1991, 52(10): 1630-1635.

339. Tonetti M, Bartolini A, Sobrero A, DeFlora A: Organ distribution of glutaraldehyde treated erythrocytes in patients with hepatic metastases. Advances in the Biosciences 1994, 94:169-176.

340. Ataullakhanov FI, Isaev VG, Kohno AV, Kulikova EV, Parovichnikova EN, Savchenko VG, Vitvitsky VM: Pharmacokinetics of doxorubicin in patients with lymphoproliferative disorders after infusion of doxorubicin-loaded erythrocytes. In: Erythrocytes as drug carriers in medicine Edited by Sprandel U, Way JL. New York: Plenum Press; 1997: 137-142.

341. Сидоренко ЮС, Златник ЕЮ, Владимирова ЛЮ, Закора ГИ: Влияние новых методов химиотерапии на биологических средах организма на иммунный статус больных раком молочной железы. Вопросы онкологии 2002, 48(10):202-205.

342. Сидоренко ЮС, Орловская ЛА, Солдаткина НВ, Емельянова ЛЭ, Косьяненко ВН: Методика хирургической химиотерапии на аутосредах

организма во время операций по поводу злокачественных опухолей молочной железы и толстой кишки. Хирургия 2006(10):27-29.

343. Атауллаханов ФИ, Пичугин АВ: Модификация люциферин-люциферазного метода определения концентрации АТФ в эритроцитах. Биофизика 1981, 26(1):86-88.

344. Угарова НИ, Бровко ЛЮ: Биолюминесценция и ее аналитическое применение. In: Химическая энзимология. Edited by Березин ИВ, Мартинек К. Москва: МГУ; 1983: 154.

345. Young JD, Ellory JC: Substrate specificity of amino acid transport in sheep erythrocytes. Biochem J 1977, 162(l):33-38.

346. Young JD, Ellory JC, Tucker EM: Amino acid transport in normal and glutathione-deficient sheep erythrocytes. Biochem J 1976, 154(l):43-48.

347. Ellory JC, Young JD: Neutral amino acid transport in erythrocytes from different mammalian species [proceedings], J Physiol 1977, 272(1):43P-44P.

348. Young JD, Jones SE, Ellory JC: Amino acid transport in human and in sheep erythrocytes. Proc R Soc Lond В Biol Sci 1980, 209(1176):355-375.

349. Ihler GM: Erythrocyte carriers. Pharmacol Ther 1983, 20(2):151-169.

350. Bergmeyer U (ed.): Methods of enzymatic analysis, 2nd English edn. New York: Academic Press; 1974.

351. Al-Saleh EA, Wheeler KP: Transport of neutral amino acids by human erythrocytes. Biochim Biophys Acta 1982, 684(2): 157-171.

352. Ellory JC, Lev VL (eds.): Membrane transport in red cells. New York: Academic Press; 1977.

353. Sowemimo-Coker SO: Red blood cell hemolysis during processing. Transfus Med Rev 2002, 16(l):46-60.

354. Атауллаханов ФИ, Витвицкий BM, Костына MA, Лисовская ИЛ: Способ определения деформируемости эритроцитов и устройство для его осуществления. In., vol. №2052194. Патент Российской Федерации; 1991.

355. Лисовская ИЛ, Витвицкий ВМ, Атауллаханов ФИ, Волкова РИ, Кульман РА, Гончаров ИБ, Аграненко ВА: Фильтрационное исследование

деформируемости эритроцитов. Гематология и трансфузиология 1993, 38(2):12-15.

356. Лисовская ИЛ, Атауллаханов ФИ, Тужилова ЕГ, Витвицкий ВМ: Анализ геометрических параметров и механических свойств эритроцитов методом фильтрации через мембранные ядерные фильтры. II. Экспериментальная проверка математической модели. Биофизика 1994, 39(5):864-871.

357. Davtyan ТК, Gyulkhandanyan AV, Gambarov SS, Avanessian LA, Alexanyan YT: The effects of adriamycin and adriamycin complexes with transitional metals on Ca(2+)-dependent K+ channels of human erythrocytes. Biochim Biophys Acta 1996, 1297(2):182-190.

358. Pluznik DH, Sachs L: Quantitation of a Murine Leukemia Virus with a Spleen Colony Assay. J Natl Cancer Inst 1964, 33:535-546.

359. Wiernik PH, Banks PL, Case DC, Jr., Arlin ZA, Periman PO, Todd MB, Ritch PS, Enck RE, Weitberg AB: Cytarabine plus idarubicin or daunorubicin as induction and consolidation therapy for previously untreated adult patients with acute myeloid leukemia. Blood 1992, 79(2):313-319.

360. Савченко ВГ, Паровичникова EH, Исаев ВГ, Клясова ГА, Кучер РА, Соколов АН, Саркисян ГП, Гальцева ИВ, Ольшанская ЮВ, Устинова ЕН et al: Лечение острых лимфобластных лейкозов взрослых. Терапевтический архив 1997, 69(7):5-11.

361. Alberts DS, Bachur NR, Holtzman JL: The pharmacokinetics of daunomycin in man. Clin Pharmacol Ther 1971, 12(1):96-104.

362. Paul C, Baurain R, Gahrton G, Peterson C: Determination of daunorubicin and its main metabolites in plasma, urine and leukaemic cells in patients with acute myeloblasts leukaemia. Cancer Lett 1980, 9(4):263-269.

363. Preisler HD, Gessner T, Azarnia N, Bolanowska W, Epstein J, Early AP, DArrigo P, Vogler R, Winton L, Chervenik P et al: Relationship between plasma adriamycin levels and the outcome of remission induction therapy for

acute nonlymphocytic leukemia. Cancer Chemother Pharmacol 1984, 12(2):125-130.

364. Robert J, Illiadis A, Hoerni B, Cano JP, Durand M, Lagarde C: Pharmacokinetics of adriamycin in patients with breast cancer: correlation between pharmacokinetic parameters and clinical short-term response. Eur J Cancer Clin Oncol 1982, 18(8):739-745.

365. Danesi R, Fogli S, Gennari A, Conte P, Del Tacca M: Pharmacokinetic-pharmacodynamic relationships of the anthracycline anticancer drugs. Clin Pharmacokinet 2002, 41(6):431-444.

366. Jabbour E, Chalhoub B, Suzan F, Aloulou S, Cainap C, Toumi N, Ferme C, Carde P, Ribrag V: Outcome of elderly patients with aggressive Non-Hodgkin's lymphoma refractory to or relapsing after first-line CHOP or CHOP-like chemotherapy: a low probability of cure. Leuk Lymphoma 2004, 45(7):1391-1394.

367. Diehl V: Advanced Hodgkin's disease: ABVD is better, yet is not good enough! J Clin Oncol 2003, 21(4):583-585.

368. Атауллаханов ФИ, Витвицкий BM, Жаботинский AM, Пичугин АВ, Синауридзе ЕИ: Регистрация АТФ в эритроцитах с помощью введенной в клетки люциферазы. Известия академии наук СССР Серия биологическая 1989(6):813-821.

369. Hamidi М, Tajerzadeh Н, Dehpour AR, Ejtemaee-Mehr S: Inhibition of serum angiotensin-converting enzyme in rabbits after intravenous administration of enalaprilat-loaded intact erythrocytes. J Pharm Pharmacol 2001, 53(9):1281-1286.

БЛАГОДАРНОСТИ

В выполнении этой работы, на разных ее этапах принимало участие много моих коллег и всем им я очень благодарен за помощь и сотрудничество.

В первую очередь я хочу выразить благодарность моему бывшему руководителю, Анатолию Марковичу Жаботинскому (посмертно), впервые поставившему передо мной задачу исследования эритроцитов в качестве переносчиков лекарственных препаратов.

Исключительную благодарность я выражаю моему формальному руководителю и научному консультанту Фазоилу Иноятовичу Атауллаханову за постоянную заботу, поддержку и помощь в выполнении этой работы. За его постоянные попытки заставить меня написать диссертацию, которые, в конце концов, привели к желаемому результату.

Отдельную благодарность я выражаю:

бывшему заведующему отделом консервирования крови Всесоюзного Ордена Ленина Института Переливания Крови (впоследствии Гематологического Научного Центра) Виктору Ардитовичу Аграненко за поддержку нашей работы на базе его отдела, каковую поддержку я, по-видимому, в свое время недооценивал.

Владимиру Михайловичу Бухману и Тамаре Дмитриевне Орешкиной за организацию исследований на мышиной модели лейкоза, индуцированного вирусом Раушера.

заведующим клиническими отделениями Гематологического Научного Центра, Валерию Григорьевичу Савченко и Александру Васильевичу Пивнику за обеспечение клинических исследований на базе их отделений,

Елене Викторовне Куликовой и Алексею Анатольевичу Скороходу, обеспечившим взаимодействие с клиническими подразделениями Гематологического Научного Центра и проведение фармакокинетических исследований.

Я выражаю глубокую благодарность следующим коллегам, принимавшим участие в выполнении этой работы:

Баташёвой Т.В. Кохно A.B.

Волковой Р.И. Кульману P.A.

Галкиной Н.М. Лисовской И.Л.

Гармаевой Т.Ц. Марковой H.A.

Зыбуновой Е.Е. Медведеву П.В.

Исаеву В.Г. Мироновой C.B.

Кияткину А.Б. Паровичниковой E.H.

Ковалевой B.J1. Пичугину A.B.

Комаровой C.B. Синауридзе Е.И.

Костыне М.А.

Также, я выражаю благодарность Борису Ефимовичу Мовшеву, сделавшему ценные замечания в процессе подготовки текста диссертации.