Использование адипокинового профиля крови и фолликулярной жидкости у пациенток с бесплодием для повышения эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Рыжов Юлиан Рэммович

• Рыжов Юлиан Рэммович
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Рыжов Юлиан Рэммович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Жировая ткань как орган эндокринной системы

1.1.1. Лептин

1.1.2. Грелин

1.1.3. Адипонектин

1.1.4. Обусловленные полом различия уровней адипокинов в

крови

1.1.5. Изменение уровней адипокинов в крови на протяжении менструального цикла

1.1.6. Изменение уровней адипокинов в крови при

беременности

1.1.7. Изменение уровней адипокинов в крови на протяжении

суток

1.2. Адипокины и пищевое поведение

1.3. Адипокиновый сигналинг

1.4. Адипокины и репродукция

1.4.1. Гипоталамус

1.4.2. Гипофиз

1.4.3. Яичники

1.4.4. Матка

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Анализ клинических и анамнестических

данных

2.2.2. Гормональный метод

2.2.3. Ультразвуковое исследование

2.2.4. Протокол контролируемой овариальной стимуляции

2.2.5. Техника оплодотворения и культивирования эмбрионов

2.2.6. Иммуноферментный анализ

2.2.7. Статистический анализ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Клинико-анамнестическая характеристика пациентов обследованных групп

3.2. Исследование уровней адипокинов в фолликулярной жидкости пациенток с бесплодием в зависимости от индекса массы тела

3.3. Взаимосвязи между содержанием адипокинов и их соотношениями в фолликулярной жидкости и крови с основными параметрами эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий

3.4. Динамический мониторинг уровней адипокинов в крови в условиях стимуляции гонадотропинами при прогнозировании эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий

3.5. Разработка математических моделей прогнозирования вероятности наступления клинической беременности в циклах ВРТ на основе адипокинового профиля крови и ФЖ и создание алгоритма принятия решений принятия клинических решений врача акушера-гинеколога в ходе программ ВРТ

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования и степень разработанности темы

Неспособность семейной пары к деторождению ставит под сомнение перспективы развития человеческой цивилизации в привычном ее понимании и существование человека как вида.

Сегодня одним из основных направлений медицины является персонализация, что особенно актуально для программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Учитывая высокую стоимость лечения с применением ВРТ, психологический дискомфорт в паре от неудач программ ВРТ, а также спектр возможных осложнений, поиск маркеров, способных прогнозировать наступление беременности в программах ВРТ и помогающих избежать переносов эмбрионов, не проводящих к наступлению беременности, является перспективным направлением научных исследований.

Жировая ткань секретирует большой спектр гормоноподобных веществ, адипокинов, которые помимо регуляции энергетического обмена и пищевого поведения, также вовлечены в регуляцию сердечно-сосудистой системы, процессов воспаления, канцерогенеза и репродуктивной функции, наиболее изученными адипокинами являются лептин, адипонектин и грелин [133, 151, 163]. Адипокины являются перспективными маркерами результативности программ ВРТ, однако имеющиеся литературные данные фрагментарны, противоречивы и не учитывают весь спектр факторов, оказывающих влияние на уровни адипокинов в крови и фолликулярной жидкости в условиях контролируемой овариальный стимуляции в программах ВРТ [22, 51, 136, 175].

Цель исследования

Повысить эффективность программ ВРТ на основании оценки адипокинового профиля крови и фолликулярной жидкости.

Задачи исследования

1. Определить уровни лептина, грелина и адипонектина, а также их соотношений в фолликулярной жидкости в условиях контролируемой овариальной стимуляции в протоколах ВРТ у пациенток с бесплодием в зависимости от индекса массы тела (ИМТ) и наступления клинической беременности.

2. Выделить клинико-анамнестические характеристики пациенток, позволяющие использовать адипокиновый профиль фолликулярной жидкости (ФЖ) для прогнозирования наступления клинической беременности в протоколах ВРТ.

3. Определить оптимальные для прогнозирования эффективности программ ВРТ точки оценки адипокинового профиля крови в условиях контролируемой овариальной стимуляции.

4. Выявить взаимосвязь уровней лептина, грелина и адипонектина, а также их соотношений в крови и фолликулярной жидкости с основными параметрами эффективности программ ВРТ.

5. Разработать математические модели, прогнозирующие наступление клинической беременности в протоколах ВРТ в зависимости от адипокинового профиля крови и фолликулярной жидкости, и на их основе создать алгоритм принятия клинических решений врача акушера-гинеколога в ходе программ ВРТ.

Научная новизна и теоретическая значимость работы

Расширены существующие представления о взаимосвязи уровней адипокинов крови и фолликулярной жидкости с наступлением клинической беременности в программе ВРТ.

Впервые изучена динамика уровней лептина, грелина и адипонектина, а также их соотношений в крови в условиях стимуляции суперовуляции гонадотропинами в программе ВРТ в трех точках: день начала овариальной стимуляции, день трансвагинальной пункции (ТВП) фолликулов, день переноса эмбрионов. Выявлены закономерности, дополняющие концепцию роли адипокинов в патогенезе бесплодия, в частности определены антагонистические влияния лептина и грелина в отношении фолликулогенеза и подчеркнута важность определения относительных уровней адипокинов для оценки их регуляторного воздействия на репродуктивную функцию.

Впервые проведено сравнение прогностической значимости уровней адипокинов и их соотношений в крови и фолликулярной жидкости в отношении наступления клинической беременности в программах ВРТ в зависимости от ИМТ пациентки и обоснована целесообразность оценки адипокинового профиля фолликулярной жидкости у пациенток с ИМТ в диапазоне 18.5 - 24.9 кг/м2.

Разработаны модели математического прогнозирования наступления клинической беременности в программах ВРТ в зависимости от адипокинового профиля крови и фолликулярной жидкости.

Практическая значимость работы

Анализ полученных данных позволил определить наличие достоверной взаимосвязи между уровнями лептина, адипонектина, грелина и их соотношениями в крови и фолликулярной жидкости и наступлением клинической беременности в протоколах ВРТ. С помощью множественной логистической регрессии построены

математические модели, прогнозирующие наступление клинической беременности в протоколе ВРТ на основании соотношений уровней лептина, адипонектина и грелина, которые могут быть использована для принятия решения о целесообразности переноса эмбрионов в цикле ВРТ с овариальной стимуляцией.

Методология исследования

Проведенное исследование выполнено на базе ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта» и включает два этапа, каждый из которых является проспективным исследованием типа случай-контроль. В исследовании участвовали пациентки, проходящие лечение бесплодия с применением ВРТ.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Уровни адипокинов и их соотношения в ФЖ в день ТВП являются предикторами наступления клинической беременности в протоколах ВРТ у пациенток с нормальной массой тела, в то время как у пациенток с повышенной массой тела уровни адипокинов в ФЖ в день ТВП не имеют прогностической ценности.

2. В день начала овариальной стимуляции уровни лептина, грелина и адипонектина, а также соотношения лептин/адипонектин, лептин/грелин и адипонектин/грелин в крови достоверно не различаются в зависимости от наступления беременности.

В день ТВП у пациенток, у которых наступила беременность, уровни лептина и соотношения лептин/адипонектин и лептин/грелин в крови достоверно меньше, а уровни грелина, адипонектина и соотношение адипонектин/грелин достоверно больше, чем у пациенток, у которых беременность не наступила.

В день переноса эмбрионов у пациенток, у которых наступила беременность, уровни лептина, адипонектина и соотношения лептин/адипонектин, лептин/грелин и

адипонектин/грелин в крови достоверно меньше, а уровень грелина достоверно больше, чем у пациенток, у которых беременность не наступила.

3. Обнаружена достоверная взаимосвязь между уровнями адипокинов и их отношениями в ФЖ и основными параметрами эффективности программ ВРТ, а также восприимчивостью яичников к стимулирующему воздействию гонадотропинов.

4. Созданные математические модели с высокой достоверностью прогнозируют наступление клинической беременности в циклах ВРТ при использовании сочетания уровней лептина, грелина и адипонектина в крови и ФЖ в день ТВП и день переноса эмбрионов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование адипокинового профиля крови и фолликулярной жидкости у пациенток с бесплодием для повышения эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий»

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы доложены на XVI Всероссийской конференции с международным участием «Совещание по эволюционной физиологии имени академика Л.А. Орбели», Санкт-Петербург, 2020; I Научно-практической конференции с международным участием «Здоровье женщины, плода, новорожденного», Санкт-Петербург, 2021; Онлайн конференции «Медицина для будущего: бесплодие и невынашивание», Санкт-Петербург, 2021; Онлайн конференции «ESHRE Virtual 37th Annual Meeting», 2021; Конференции «Научно-практическая школа по репродуктологии», Санкт-Петербург, 2021; III Научно-практической конференции с международным участием «Здоровье женщины, плода, новорожденного», Санкт-Петербург, 2023; Конференции «Репродуктивное здоровье пары: индивидуальный подход к планированию и ведению беременности», Санкт-Петербург, 2023; IV Научно-практической конференции с международным участием «Здоровье женщины, плода, новорожденного», Санкт-Петербург, 2024.

Разработанный алгоритм принятия решения о переносе эмбрионов в циклах ВРТ внедрен в практику работы отделения вспомогательных репродуктивных

технологий ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта».

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, из которых 2 входят в перечень изданий, рекомендованных ВАК, и 2 в изданиях, рецензируемых в международных базах данных (Scopus, Web of Science).

Личный вклад автора в исследование

Все этапы научного исследования были выполнены автором лично: выбор темы, формулировка цели и задач исследования, сбор биологического материала и клинических данных, проведение иммуноферментного анализа, статистическая обработка полученных данных, а также их интерпретация и обобщение.

Все этапы клинического ведения пациентов и их лечения с применением ВРТ были проведены на базе отделения вспомогательных репродуктивных технологий ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта» (заведующий отделением - д. м. н., профессор А.М. Гзгзян).

Структура и объем диссертации

Текст рукописи изложен на 113 страницах машинописного текста и состоит из введения, глав с описанием материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списков сокращения и литературы. Работа иллюстрирована 5 рисунками и 22 таблицами. Библиографический список состоит из 189 источников.

Диссертационная работа соответствует паспорту научной специальности 3.1.4. - Акушерство и гинекология по пункту 1 «Исследования по изучению эпидемиологии, этиологии, патогенеза гинекологических заболеваний» и пункту 4 «Разработка и

усовершенствование методов диагностики, лечения и профилактики осложненного течения беременности и родов, гинекологических заболеваний».

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Жировая ткань как орган эндокринной системы

Исторически жировая ткань рассматривалась исключительно в качестве хранилища липидов. Также упоминалась механическая функция жировой ткани в виде амортизации при падении, подчеркивалась важная роль жировой ткани в сохранении физиологической синтопии почек. Но в целом жировая ткань воспринималась в качестве достаточно инертного органа.

Выделяют два основных вида жировой ткани: белая жировая ткань и бурая жировая ткань. Белые адипоциты представляют из себя единую липидную каплю с распластанной по периферии цитоплазмой с органоидами. Белая жировая ткань аккумулирует липиды для последующего их распределения при дефиците калорий. Используя продуцируемые ею гормоны, называемые адипокинами, белая жировая ткань регулирует пищевое поведение, влияя на центры голода и насыщения в центральной нервной системе. Бурые адипоциты не содержат единой липидной капли в цитоплазме и не принимают активного участия в липидном обмене. Они богаты митохондриями, из-за которых приобрели такое название, и содержат белок термогенин, который встраивается во внутреннюю мембрану митохондрий и, являясь каналом для протонов, разобщает процесс окислительного фосфорилирования, позволяя протонам проникать из межмембранного пространства в матрикс митохондрий в обход АТФ-синтазы, что приводит к продукции тепла. Основная функция бурой жировой ткани - несократительный термогенез, стимулируемый посредством активации Р3-адренорецепторов. У человека бурая жировая ткань играет важную роль в терморегуляции в детском возрасте, с возрастом ее количество уменьшается.

Жировая ткань секретирует большой набор адипокинов: лептин, адипонектин, грелин, апелин, оментин, висфатин, которые помимо регуляции пищевого поведения

и энергетического обмена вовлечены в регуляцию сердечно-сосудистой системы, репродуктивной системы, процессов воспаления, канцерогенеза и метастазирования [133, 151, 163] (Рисунок 1)

Рисунок 1 - Плейотропный эффект адипокинов

1.1.1. Лептин

Первичная структура лептина кодируется геном оЬ(1ер), расположенным в 7-й хромосоме. Молекула лептина содержит 167 аминокислотных остатков и имеет молекулярный вес 16 кДа [128]. Основным источником лептина в крови являются адипоциты, секретирующие его в ответ на потребление пищи, в то время как при голодании уровень лептина в крови уменьшается [168]. С увеличением ИМТ увеличивается и уровень лептина в крови, что, по всей видимости, связано с компенсаторной попыткой ограничения поступления калорий [120].

1.1.2 Грелин

Грелин представляет из себя полипептид с массой 3.4 кДа, состоящий из 28 аминокислотных остатков. Продуктом гена ghrl, расположенного на коротком плече 3-й хромосомы, является состоящий из 117 аминокислотных остатков препрогрелин, который затем последовательно конвертируется в прогрелин и грелин [84]. В крови циркулирует две формы грелина: активный ацилированный грелин и неактивный деацилированный грелин. Фермент грелин О-ацилтрансфераза (GOAT) осуществляет активацию грелина, катализируя реакцию взаимодействия н-каприловой кислоты с остатком Ser3. Экспрессия грелина обнаружена во многих тканях [59], однако основным источником циркулирующего в крови грелина считают эндокринные клетки слизистой оболочки дна желудка [104]. Не обнаружено достоверных различий в экспрессии грелина в жировой ткани людей с нормальной массой и ожирением. Предполагается, что при ожирении жировая ткань производит больший вклад в уровень циркулирующего в крови грелина не из-за повышения экспрессии его гена, а из-за увеличения количества жировой ткани [104]. Повышая чувство голода, грелин является орексигенным гормоном.

1.1.3. Адипонектин

Адипонектин представляет из себя гликопротеин и существует в нескольких изоформах: глобулярной, мономерной, тримерной, гексамерной и мультимерной. Мономерный адипонектин состоит из 244 аминокислотных остатков и имеет молекулярный вес 26 кДа [65]. Первичная структура адипонектина кодируется геном adipoQ, расположенным на длинном плече 3-й хромосомы [26]. В молекуле мономерного адипонектина можно выделить следующие участки: N-концевая сигнальная последовательность, негомологичный или гипервариабельный участок,

коллагенозный домен, состоящий из 22 коллагеновых повторов и С-концевой С1-подобный глобулярный домен. Между гипервариабельным участком и коллагенозным доменом располагается аминокислотный остаток СуБ36, который необходим для формирования дисульфидных мостиков, удерживающих части мультимерных изоформ адипонектина. При увеличении ИМТ уровень адипонектина в крови снижается.

1.1.4. Обусловленные полом различия уровней адипокинов в крови

Уровень лептина в крови у мужчин и женщин различен. При этом половой диморфизм наблюдается еще до полового созревания - у девочек уровень лептина в крови выше, чем у мальчиков [182]. Затем с началом полового созревания уровень лептина повышается у обоих полов [148], играя значимую роль в активации гипоталамо-гипофизарно-гонадной оси [93]. При этом у детей с ожирением отмечается более высокий уровень лептина, что связывается с более ранним наступлением у них полового созревания [95]. Затем у мальчиков с повышением уровня тестостерона уровень лептина снижается, поскольку тестостерон способен подавлять секрецию лептина [38, 164]. На эксплантах жировой ткани показано, что женская жировая ткань активнее секретирует лептин в сравнении с мужской жировой тканью [169], что может быть объяснено стимулирующим секрецию лептина действием эстрадиола, наблюдаемым, что интересно, только в образцах женской жировой ткани [74, 76]. В итоге у женщин уровень лептина в крови оказывается выше, чем у мужчин [117, 149].

Отмечено, что тестостерон угнетает секрецию адипоцитами адипонектина [20], что обуславливает более низкий уровень адипонектина в крови у мужчин в сравнении с женщинами. При этом в опытах на мышах показано, что кастрация самцов повышает уровень адипонектина в крови.

Данные относительно различий в уровне грелина в крови у женщин и мужчин противоречивы [35, 75]. Однако в экспериментах на крысах показано, что кастрация самцов приводит к снижению уровня грелина в крови, который нормализуется заместительной терапией тестостероном [125]. При этом терапия тестостероном в контрольной группе также повышает уровень грелина в крови. В совокупности, упомянутые данные подчеркивают влияние половых гормонов на продукцию грелина.

1.1.5. Изменение уровней адипокинов в крови на протяжении менструального

цикла

Уровень лептина в крови изменяется в зависимости от фазы менструального цикла. На протяжении фолликулярной фазы его уровень постепенно увеличивается вместе с уровнем эстрадиола, затем наблюдается пик обоих гормонов, за которым следует некоторое их снижение и вторичный пик вместе с уровнем прогестерона в середине лютеиновой фазы [147]. У пациенток с ановуляторными циклами усредненная концентрация лептина оказалась такой же, как и в овуляторных циклах, но паттерн изменения концентрации на протяжении цикла различен, а средняя концентрация лептина в лютеиновую фазу в овуляторных циклах ниже. Усредненная концентрация лептина в фолликулярную фазу не коррелирует с шансом ановуляции в текущем цикле, однако обнаружена обратная корреляция между высотой пика лептина в ожидаемый день пика ЛГ и шансом ановуляции в текущем цикле.

Несмотря на определенные тенденции к увеличению или уменьшению в зависимости от дня цикла, достоверных различий по изменению уровня грелина в крови в зависимости от дня цикла не выявлено [121, 181]. При этом в экспериментах на крысах показано, что экспрессия грелина в яичнике повышается от проэструса к первому дню диэструса, после чего ко второму дню диэструса несколько снижается [60]. В то же время в желудке экспрессия грелина на протяжении эстрального цикла

не меняется, и изменений уровня грелина в крови на протяжении эстрального цикла также обнаружено не было.

Уровень адипонектина в крови на протяжении менструального цикла достоверно не меняется [150].

1.1.6. Изменение уровней адипокинов в крови при беременности

Во время беременности организму матери необходимо обеспечить накопление питательных веществ для передачи их растущему плоду и подготовки к лактации [45]. Физиологическое увеличение массы тела беременной сопровождается гиперфагией, физиологической гиперинсулинемией, умеренной гипергликемией и слабо выраженной инсулинорезистентностью [188]. С увеличением массы тела беременной повышается и уровень лептина в крови, достигая максимума к концу второго/началу третьего триместра [36]. После родов уровень лептина резко падает, достигая своих значений до начала беременности. Повышенный уровень лептина должен подавлять аппетит, что не наблюдается во время беременности, и свидетельствует о наличии не только физиологической инсулинорезистентности беременных, но также и о лептинорезистентности.

Уровень грелина в крови повышается ко второму триместру беременности, остается повышенным в третьем триместре и снижается после родов [159].

У беременных отмечается более низкий уровень адипонектина в крови [127]. Показано, что инсулин стимулирует секрецию адипонектина через PI3K-путь, но не через mTOR-путь [140]. Однако при состоянии физиологической инсулинорезистентности во время беременности инсулиновый сигналинг ослабевает, что может являться причиной понижения уровня адипонектина в крови. При этом для беременных пациенток с ожирением, у которых наблюдается значительно более высокий уровень инсулинорезистентности, также отмечается более низкий уровень адипонектина в крови [100].

1.1.7. Изменение уровня адипокинов в крови на протяжении суток

Уровень лептина в крови в течение дня непостоянен. Максимум секреции лептина приходится на ночные часы, в то время как минимум его секреции отмечается во второй половине дня [41]. При этом циркадный ритм секреции лептина сохраняется у пациентов с ожирением и сахарным диабетом 2 типа, однако амплитуда между максимальным и минимальным уровнем лептина в крови у пациентов с ожирением и сахарным диабетом 2 типа меньше в сравнении со здоровыми пациентами [130]. У пациентов с идиопатическим гипогонадотропным гипогонадизмом паттерн секреции лептина также оказывается интактным, а терапия экзогенными гонадотропинами не влияет на характер секреции лептина [41]. Sinha и соавторы (1996) предполагают, что ночной пик лептина необходим для подавления аппетита в ночное время суток.

Максимум секреции как ацилированного, так и деацилированного грелина приходится на ночные часы [70], при этом уровень грелина в крови не меняется при инфузии гидрокортизона.

Минимум уровня как общего адипонектина, так и его высокомолекулярной фракции приходится на ночные часы [42]. Установлено, что уровень низкомолекулярного адипонектина (LMW) и адипонектина со средней молекулярной массой (MMW) на протяжении суток не меняется.

1.2. Адипокины и пищевое поведение

Гипоталамус является ключевым регулятором пищевого поведения, основные регулирующие аппетит нейроны находятся в его аркуатном ядре [155]. Анорексигенные проопиомеланокортиновые нейроны (РОМС) секретируют а-меланоцитостимулирующий гормон, который подавляет аппетит, связываясь с меланокортиновыми рецепторами 4 типа (MC4R). При этом активация РОМС -

нейронов методами хемогенетики приводит к подавлению чувства голода [1], а инактивирующие мутации в гене MC4R приводят к гиперфагии и ожирению [33]. Популяция РОМС-нейронов гетерогенна - часть экспрессирует лептиновые рецепторы (LepR) [32], часть экспрессирует серотониновые рецепторы типа 2С (5-HT2CR). Обе эти субпопуляции РОМС-нейронов оказываются строго функционально разделены - лептин не активирует POMC/5-HT2CR+ нейроны, а серотонин POMC/LepR+ нейроны [145]. Мыши LepRdb/db с нокаутом по гену лептинового рецептора страдают от выраженного ожирения, в то время как у мышей с селективной делецией LepR на РОМС-нейронах с помощью технологии Сге-1охР ожирение выражено значительно меньше [116], что свидетельствует о том, что кроме РОМС-нейронов в центральной нервной системе (ЦНС) имеются и другие важные мишени действия лептина. Специфичная для РОМС-нейронов делеция LepR с помощью технологии CRISPR также не вызывала развития у мышей ожирения [78]. Орексигенные NPY/AgRP-нейроны секретируют стимулирующие аппетит нейропептид Y (NPY), агутиподобный пептид (AgRP) и ингибирующий нейротрансмиттер гамма-аминомасляную кислоту ^АВА). Нейропептид Y опосредует свой эффект путем активации NPY-рецепторов, в то время как агутиподобный пептид является обратным агонистом рецепторов MC4R. Активация AgRP-нейронов с помощью технологии DREADD приводила к гиперфагии и ожирению, в то время как их ингибирование, наоборот, подавляло аппетит [138]. Главным медиатором орексигенных сигналов от NPY/AgRP -нейронов считаются не NPY и AgRP, а нейротрансмиттер GABA, поскольку делеция гена ее переносчика у^М приводила к подавлению аппетита [160]. AgRP-нейроны также экспрессируют LepR [78]. При этом показано, что их селективная делеция в AgRP -нейронах приводит к развитию ожирения и повторяет фенотип, характерный для Ьерг ММЬ мышей, в отличие от делеции LepR в РОМС-нейронах. Таким образом, основным механизмом подавления лептином аппетита является ингибирование орексигенных AgRP-

нейронов, а не активация анорексигенных POMC-нейронов, хотя лептин напрямую вовлечен в модулирование активности POMC-нейронов.

Транспорт лептина из крови к структурам головного мозга ограничен гематоэнцефалическим барьером (ГЭБ). Лептин является слишком крупной молекулой для свободной диффузии через ГЭБ, и проникает в ЦНС при помощи насыщаемых белков переносчиков [111]. Важным компонентом системы транспорта веществ в головной мозг из периферической крови являются циркумвентрикулярные органы (ЦВО), расположенные вблизи третьего и четвертого желудочков и характеризуемые наибольшей проницаемостью ГЭБ. С функциональной точки зрении выделяют сенсорные и секреторные ЦВО. Именно через сенсорные ЦВО происходит рецепция необходимых для вегетативного контроля сигналов. К сенсорным ЦВО относятся area postrema, субфорникальный орган и васкулярный орган терминальной пластинки. Установлено, что именно через сенсорные ЦВО лептин способен проникать из периферического кровотока в ЦНС [71]. Увеличение же проницаемости ГЭБ в секреторных ЦВО, к которым относятся субкомиссуральный орган, срединное возвышение, задняя доля гипофиза и эпифиз, необходимо для облегчения секреции ими гормонов и гормоноподобных веществ.

В транспорт лептина через ГЭБ вовлечены полноразмерные лептиновые рецепторы Ob-Rb [170]. Однако блокировка взаимодействия лептина с рецептором Ob-Rb не приводит к подавлению его трансцитоза [99], что дает основания предполагать, что транспорт лептина через ГЭБ осуществляется не только с помощью рецептора Ob-Rb, но и, возможно, с помощью его укороченных изоформ. Эксперименты с искусственно укороченными изоформами лептинового рецептора также подтверждают, что укороченные формы рецептора не теряют способность к эндоцитозу лептина [180]. Предполагалось, что лептин может проникать через ГЭБ и с помощью других транспортеров, а именно с помощью мегалина, однако последние исследования это не подтверждают [102]. При этом обнаружено, что танициты транспортируют лептин независимо от LepR [162].

При ожирении уровень лептина в крови увеличивается [120]. При этом интересно, что уровень лептина начинает значимо повышаться уже при значении ИМТ 24,6 кг/м2, находящемся в пределах нормы. Повышение уровня лептина в крови при ожирении должно приводить к подавлению аппетита и нормализации веса, чего, однако, не наблюдается, что позволяет говорить о лептиновой резистентности, которая должна быть ограничением к применению препаратов лептина для лечения ожирения. Однако в рандомизированном контролируемом исследовании Heymsfield и соавторов (1999) было показано, что повышение дозы экзогенного лептина позволяет добиться понижения массы тела у пациентов с ожирением, что свидетельствует о том, что лептиновая резистентность является относительной. Banks и соавторы (1999) в экспериментах с меченым лептином также показали относительность лептиновой резистентности, установив, что у мышей с ожирением транспорт лептина через ГЭБ снижен примерно на две трети в сравнении с худыми мышами. При этом показано, что нарушение транспорта происходило не из-за насыщения транспортных систем, а из-за нарушения самой системы транспортировки. Уровень лептина в спинномозговой жидкости (СМЖ) отражает его уровень в ЦНС. Ожидаемо, уровень лептина в СМЖ коррелирует с его уровнем в крови [29]. У человека при ожирении уровень лептина в СМЖ растет, но отношение уровня лептина в крови к его уровня в СМЖ падает, что свидетельствует об ухудшении транспорта лептина в СМЖ [37]. Ряд авторов в экспериментах на мышах получили данные об интактности транспорта лептина через ГЭБ при ожирении [68, 176]. Это может быть связано с тем, что лептиновая резистентность развивается на более позднем сроке.

Транскрипционный фактор преобразователь сигнала и активатор транскрипции 3 (STAT3) является одной из мишеней лептинового сигналинга и фосфорилируется при активации LepR [171]. Периферическое введение лептина мышам через 4 недели высококалорийной диеты приводит к фосфорилированию STAT3. Через 15 недель периферически введенный лептин уже не вызывает фосфорилирование STAT3, в то же время его интрацеребровентрикулярное введение вызывает фосфорилирование

STAT3, что с одной стороны свидетельствует о нарушении транспорта лептина через ГЭБ и с другой стороны о сохранении лептиновой чувствительности ЦНС [178].

Нарушение транспорта через ГЭБ может быть следствием предшествующей лептиновой резистентности в ЦНС. У крыс с диет-индуцированным ожирением (ДИО) периферическое введение лептина оказывало на 54% меньший анорексигенный эффект в сравнении с крысами с нормальной массой тела [122]. Фосфорилирование STAT3 так же было снижено в аркуатном, вентромедиальном и дорсомедиальном ядрах. Интересно, что экспрессия лептинового рецептора в аркуатном ядре у ДИО-крыс также была снижена на 24%. При этом авторы отмечают, транспорт лептина через ГЭБ у ДИО-крыс наблюдается на более позднем сроке ожирения. Уже сформировавшуюся лептиновую резистентность на уровне ГЭБ можно преодолеть с помощью белков-пенетраторов, которые способны встраиваться в клеточную мембрану и облегчать транслокацию молекул внутрь клетки [189]. Интраназальное введение лептина крысам вместе с белком-пенетратором пенетратином повышает уровень лептина в крови в сравнении с введением лептина без пенетратина, а также стимулирует накопление лептина в передних отделах мозга, фосфорилирование STAT3 и снижение веса [161], что делает применение белков-пенетраторов совместно с лептином перспективным направлением в лечении пациентов с ожирением и лептиновой резистентностью.

Грелин усиливает чувство голода, являясь орексигенным фактором. Уровень грелина в крови увеличивается перед приемом пищи и уменьшается после приема пищи [135]. При этом степень постпрандиального понижения уровня грелина в крови находится в прямой зависимости от интервала между приемами пищи, но только у подопытных с нормальной массой тела. У подопытных с ожирением подобной зависимости не наблюдалось, что свидетельствует об их меньшей чувствительности к уровню грелина.

В пищевом поведении выделяют два компонента: гомеостатический и гедонистический. Триггером для гомеостатического потребления пищи является

дефицит калорий, в то время как для гедонистического - сигналы от органов чувств. Показано, что внутривенное введение грелина усиливает субъективное чувство голода, которое подопытные испытывали при демонстрации фотографий пищи [124], подчеркивая важность грелина в формировании гедонистического компонента пищевого поведения, который является ведущим в патогенезе ожирения.

Орексигенное действие грелина связывают с активацией NPY/AgRP-экспрессирующих нейронов гипоталамуса [21], а также с подавлением синтеза малонил-кофермента А и повышением активности пальмитоилтрансферазы-1 [96]. Грелин необходим для формирования системы пищевого поведения в целом. Показано, что избыток калорий у новорожденных мышат приводит к грелиновой резистентности, которая формируется на этапе транспорта грелина из периферического кровотока в ЦНС, при этом введение грелина в СМЖ вызывает привычную активацию нейронов аркуатного ядра гипоталамуса [129].

Показано, что постпрандиальное повышение уровня инсулина, но не глюкозы, в крови подавляет аппетит [23], что может являться причиной переедания при нарастании инсулинорезистентности при избытке массе тела и ожирении. Влияние адипонектина на аппетит и энергетический обмен частично связано с усилением им инсулинового сигналинга [152], что вызывает интерес к адипонектину и селективным агонистам его рецепторов как к перспективным сахароснижающим препаратам для лечения сахарного диабета 2 типа [24]. Уровень адипонектина в крови и СМЖ повышается при голодании и снижается после приема пищи [14]. Повышая активность аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназы (ЛМРК) в нейронах аркуатного ядра гипоталамуса, адипонектин стимулирует потребление пищи и снижает энергозатраты.

1.3. Адипокиновый сигналинг

Лептиновый рецептор кодируется геном ob и относится к семейству цитокиновых рецепторов типа 1 [115]. Транскрипт гена ob подвергается альтернативному сплайсингу, в результате чего образуется шесть изоформ лептинового рецептора, из которых только полноразмерный рецептор Ob-Rb является полностью функционально активным и содержит 303 аминокислотных остатка в цитоплазматическом С-концевом домене, в то время как изоформы Ob-Ra, Ob-Rc, Ob-Rd, Ob-Rf - только 32-40 аминокислотных остатков. Внеклеточный и трансмембранный домены у Ob-Rb и в коротких изоформах идентичны и состоят из 816 и 34 аминокислотных остатков, соответственно. Изоформа Ob-Re не имеет ни цитоплазматического, ни трансмембранного домена и является секреторной формой рецептора.

Как полноразмерный Ob-Rb, так и укороченные изоформы содержат мотив box 1 для связывания с тирозинкиназой Янус-киназа 2 (JAK2), однако эффект от активации JAK2 короткими изоформами отличается от полноразмерной изоформы. В дополнение к box 1 цитоплазматический домен Ob-Rb содержит box 2, который также служит для связывания JAK2-киназы, box 3 для связывания транскрипционного фактора STAT3 и четыре тирозиновых остатка для активации различных сигнальных путей - Tyr974, Tyr985, Tyr1077 и Tyr1138 (Рисунок 2).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Рыжов Юлиан Рэммович, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Acute and long-term suppression of feeding behavior by POMC neurons in the brainstem and hypothalamus, respectively / C. Zhan, J. Zhou, Q. Feng [et al.] // J. Neurosci. - 2013. - Vol. 33, N. 8. - P. 3624-3632. DOI: 10.1523/JNEUROSCI.2742-12.2013.

2. Acute effects of leptin require PI3K signaling in hypothalamic proopiomelanocortin neurons in mice / J. W. Hill, K. W. Williams, C. Ye [et al.] // J. Clin. Invest. - 2008. - Vol. 118, N. 5. - P. 1796-1805. DOI: 10.1172/JCI32964.

3. Acylated and unacylated ghrelin promote proliferation and inhibit apoptosis of pancreatic beta-cells and human islets: involvement of 3',5'-cyclic adenosine monophosphate/protein kinase A, extracellular signal-regulated kinase 1/2, and phosphatidyl inositol 3-Kinase/Akt signaling / R. Granata, F. Settanni, L. Biancone [et al.] // Endocrinology. - 2007. - Vol. 148, N. 2. - P. 512-529. DOI: 10.1210/en.2006-0266.

4. Acylated ghrelin inhibits spontaneous luteinizing hormone pulsatility and responsiveness to naloxone but not that to gonadotropin-releasing hormone in young men: evidence for a central inhibitory action of ghrelin on the gonadal axis / F. Lanfranco, L. Bonelli, M. Baldi [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2008. - Vol. 93, N. 9. - P. 36333639. DOI: 10.1210/jc.2008-0049.

5. Adipocyte versus pituitary leptin in the regulation of pituitary hormones: somatotropes develop normally in the absence of circulating leptin / A. K. Odle, A. Haney, M. Allensworth-James [et al.] // Endocrinology. - 2014. - Vol. 155, N. 11. - P. 4316-4328. DOI: 10.1210/en.2014-1172.

6. Adiponectin activates adenosine monophosphate-activated protein kinase and decreases luteinizing hormone secretion in LbetaT2 gonadotropes / M. Lu, Q. Tang, J. M. Olefsky [et al.] Mol. Endocrinol. 2008. - Vol. 22, N. 3. - P. 760-771. DOI: 10.1210/me.2007-0330.

7. Adipokine gene expression in brain and pituitary gland / M. Wilkinson, R. Brown,

5. A. Imran [et al.] // Neuroendocrinology. - 2007. - Vol. 86, N. 3. - P. 191-209. DOI: 10.1159/000108635.

8. Adiponectin-leptin ratio for the early detection of lean non-alcoholic fatty liver disease independent of insulin resistance / C. W. Lu, K. C. Yang, Y. C. Chi [et al.] // Ann. Med. - 2023. - Vol. 55, N. 1. - P. 634-642. DOI: 10.1080/07853890.2023.2179106.

9. Adiponectin and resistin in human cerebrospinal fluid and expression of adiponectin receptors in the human hypothalamus / K. Kos, A. L. Harte, N. F. da Silva [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2007. - Vol. 92, N. 3. - P. 1129-1136. DOI: 10.1210/jc.2006-1841.

10. Adiponectin complexes in human cerebrospinal fluid: distinct complex distribution from serum / C. M. Kusminski, P. G. McTernan, T. Schraw [et al.] // Diabetologia. - 2007. - Vol. 50, N. 3. - P. 634-642. DOI: 10.1007/s00125-006-0577-9.

11. Adiponectin increases insulin-like growth factor I-induced progesterone and estradiol secretion in human granulosa cells / C. Chabrolle, L. Tosca, C. Ramé [et al.] // J. Fertil. Steril. - 2009. - Vol. 92, N. 6. - P. 1988-1996. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2008.09.008.

12. Adiponectin induces periovulatory changes in ovarian follicular cells / S. Ledoux, D. B. Campos, F. L. Lopes [et al.] // Endocrinology. - 2006. - Vol. 147, N. 11. - P. 51785186. DOI: 10.1210/en.2006-0679.

13. Adiponectin inhibits KISS1 gene transcription through AMPK and specificity protein-1 in the hypothalamic GT1-7 neurons / J. P. Wen, C. Liu, W. K. Bi [et al.] // J. Endocrinol. - 2012. - Vol. 214, N. 2. - P. 177-189. DOI: 10.1530/JOE-12-0054.

14. Adiponectin stimulates AMP-activated protein kinase in the hypothalamus and increases food intake / N. Kubota, W. Yano, T. Kubota T [et al.] // Cell Metab. - 2007. -Vol. 6, N. 1. - P. 55-68. DOI: 10.1016/j.cmet.2007.06.003.

15. Adiponectin to leptin ratio reflects inflammatory burden and survival in COVID-19 / L. Di Filippo, R. De Lorenzo, C. Sciorati [et al.] // Diabetes. Metab. - 2021. - Vol. 47, N.

6. - P. 101268. DOI: 10.1016/j.diabet.2021.101268.

16. AgRP to Kissl neuron signaling links nutritional state and fertility / S. L. Padilla, J. Qiu, C. C. Nestor [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2017. - Vol. 114, N. 9. - P. 2413-2418. DOI: 10.1073/pnas.1621065114. Erratum in: Proc Natl Acad Sci U S A. 2017. -Vol. 114, N. 17. - E3584.

17. A high-protein diet induces sustained reductions in appetite, ad libitum caloric intake, and body weight despite compensatory changes in diurnal plasma leptin and ghrelin concentrations / D. S. Weigle, P. A. Breen, C. C. Matthys [et al.] // Am. J. Clin. Nutr. -2005. - Vol. 82, N. 1. - P. 41-48. DOI: 10.1093/ajcn.82.1.41.

18. AMPK mediates regulation of voltage-gated calcium channels by leptin in isolated neurons from arcuate nucleus / K. Bermeo, H. Castro, I. Arenas [et al.] // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. - 2020. - Vol. 319, N. 6. - P. E1112-E1120. DOI: 10.1152/ajpendo.00299.2020.

19. An APPL1-AMPK signaling axis mediates beneficial metabolic effects of adiponectin in the heart / X. Fang, R. Palanivel, J. Cresser [et al.] // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. - 2010. - Vol. 299, N. 5. - E721-9. DOI: 10.1152/ajpendo.00086.2010.

20. Androgens decrease plasma adiponectin, an insulin-sensitizing adipocyte-derived protein / H. Nishizawa, I. Shimomura, K. Kishida [et al.] // Diabetes. - 2002. - Vol. 51, N. 9. - P. 2734-2741. DOI: 10.2337/diabetes.51.9.2734.

21. A role for ghrelin in the central regulation of feeding / M. Nakazato, N. Murakami, Y. Date [et al.] // Nature. - 2001. - Vol. 409, N. 6817. - P. 194-198. DOI: 10.1038/35051587.

22. Association of serum and follicular fluid leptin and ghrelin levels with in vitro fertilization success / S. Akarsu, B. Buke, F. Göde [et al.] // Ginekol. Pol. - 2017. - Vol. 88, N. 9. - P. 469-474. DOI: 10.5603/gp.a2017.0086.

23. Associations between postprandial insulin and blood glucose responses, appetite sensations and energy intake in normal weight and overweight individuals: a meta-analysis of test meal studies / A. Flint, N. T. Gregersen, L. L. Gluud [et al.] // Br. J. Nutr. - 2007. -Vol. 98, N. 1. - P. 17-25. DOI: 10.1017/S000711450768297X.

24. Bailey, C. J. Future glucose-lowering drugs for type 2 diabetes / Bailey C. J., Tahrani A. A., Barnett A. H. // Lancet Diabetes Endocrinol. - 2016. - Vol. 4, N. 4. - P. 350359. DOI: 10.1016/S2213-8587(15)00462-3.

25. Banks, W. A. Impaired transport of leptin across the blood-brain barrier in obesity / W. A. Banks, C. R. DiPalma, C. L. Farrell // Peptides. - 1999. - Vol. 20, N. 11. - P.1341-1345. DOI: 10.1016/s0196-9781(99)00139-4.

26. Breitfeld, J. Genetics of adiponectin / J. Breitfeld, M. Stumvoll, P. Kovacs // Biochimie. - 2012. - Vol. 94, N. 10. - P. 2157-2163. DOI: 10.1016/j.biochi.2012.03.004.

27. Buechler, C. Adiponectin receptor binding proteins--recent advances in elucidating adiponectin signalling pathways / C. Buechler, J. Wanninger, M. Neumeier // FEBS Lett. -2010. - Vol. 584, N. 20. - P. 4280-4286. DOI: 10.1016/j.febslet.2010.09.035.

28. Calcium signals activated by ghrelin and D-Lys(3)-GHRP-6 ghrelin antagonist in developing dorsal root ganglion glial cells / J. Erriquez, S. Bernascone, M. Ciarletta [et al.] Cell Calcium. - 2009. - Vol. 46, N. 3. - P. 197-208. DOI: 10.1016/j.ceca.2009.07.003.

29. Cerebrospinal fluid leptin levels: relationship to plasma levels and to adiposity in humans / M. W. Schwartz, E. Peskind, M. Raskind [et al.] // Nat. Med. - 1996. - Vol. 2, N. 5. - P. 589-593. DOI: 10.1038/nm0596-589.

30. Chabrolle, C. Regulation of adiponectin and its receptors in rat ovary by human chorionic gonadotrophin treatment and potential involvement of adiponectin in granulosa cell steroidogenesis / C. Chabrolle, L. Tosca, J. Dupont // Reproduction. - 2007. - Vol. 133, N. 4. - P. 719-731. DOI: 10.1530/REP-06-0244.

31. Chakrabarti, S. Unacylated ghrelin: a gut-limb connection / S. Chakrabarti // Diabetes. - 2015. - Vol. 64, N. 4. - P. 1097-1098. DOI: 10.2337/db14-1825.

32. Cheung, C. Proopiomelanocortin neurons are direct targets for leptin in the hypothalamus / C. C. Cheung, D. K. Clifton, R. A. Steiner // Endocrinology. - 1997. - Vol. 138, N. 10. - P. 4489-4492. DOI: 10.1210/endo.138.10.5570.

33. Clinical spectrum of obesity and mutations in the melanocortin 4 receptor gene / I. S. Farooqi, J. M. Keogh, G. S. Yeo [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2003 - Vol. 348, N. 12. - P. 1085-1095. DOI: 10.1056/NEJMoa022050.

34. Cloning of adiponectin receptors that mediate antidiabetic metabolic effects / T. Yamauchi, J. Kamon, Y. Ito Y [et al.] // Nature. - 2003. - Vol. 423, N. 6941. - P. 762-769. DOI: 10.1038/nature01705. Erratum in: Nature. 2004. - Vol. 431, N. 7012. - P.1123.

35. Comparative evaluation of gastric ghrelin cells and levels of hormone in the serum of healthy women and men / I. Kasacka, M. Arciszewski, I. Janiuk [et al.] // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. - 2013. - Vol. 27, N. 1. - P. 69-78.

36. Circulating leptin in women: a longitudinal study in the menstrual cycle and during pregnancy / L. Hardie, P. Trayhurn, D. Abramovich [et al.] // Clin. Endocrinol. (Oxf). -1997. - Vol. 47, N 1. - P. 101-106. DOI: 10.1046/j.1365-2265.1997.2441017.x.

37. Decreased cerebrospinal-fluid/serum leptin ratio in obesity: a possible mechanism for leptin resistance / J. F. Caro, J. W. Kolaczynski, M. R. Nyce [et al.] // Lancet. 1996. -Vol. 348, N. 9021. - P. 159-161. DOI: 10.1016/s0140-6736(96)03173-x.

38. De Pergola, G. The adipose tissue metabolism: role of testosterone and dehydroepiandrosterone / G. De Pergola // Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord. - 2000. - Vol. 24 Suppl 2. - S59-63. DOI: 10.1038/sj.ijo.0801280.

39. Dieudonné MN. Adiponectin limits differentiation and trophoblast invasion in human endometrial cells / F. Duval, E. Dos Santos, H. Moindjie [et al.] // J. Mol. Endocrinol. - 2017. - Vol. 59, N. 3. - P. 285-297. DOI: 10.1530/JME-17-0046.

40. Dimerization of adiponectin receptor 1 is inhibited by adiponectin / D. Kosel, J. T. Heiker, C. Juhl [et al.] // J. Cell Sci. - 2010. - Vol. 123(Pt 8). - P. 1320-1328. DOI: 10.1242/jcs.057919.

41. Diurnal leptin secretion is intact in male hypogonadotropic hypogonadism and is not influenced by exogenous gonadotropins / G. Kilciler, M. Ozata, C. Oktenli [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2002. - Vol. 87, N. 11. - P. 5023-5029. DOI: 10.1210/jc.2002-020516.

42. Diurnal variation and effect of insulin on circulating high molecular weight (HMW) adiponectin and NF-kB activity in human endothelial cells / B. K. Tan, R. Adya, K. C. Lewandowski [et al.] / Atherosclerosis. - 2011. - Vol. 214, N. 1. - P. 174-177. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2010.10.013.

43. Effect of adiponectin on bovine granulosa cell steroidogenesis, oocyte maturation and embryo development / V. Maillard, S. Uzbekova, F. Guignot [et al.] // Reprod. Biol. Endocrinol. - 2010. - Vol. 10, N. 8. - P. 23. DOI: 10.1186/1477-7827-8-23.

44. Effect of estradiol and progesterone on metabolic biomarkers in healthy bitches / A. Tvarijonaviciute, J. D. Carrillo-Sanchez, J. J. Ceron // Reprod. Domest. Anim. - 2013. -Vol. 48, N. 3. - P. 520-524. DOI: 10.1111/rda.12120.

45. Effect of fat and fat-free mass deposition during pregnancy on birth weight / J. Villar, M. Cogswell, E. Kestler [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 1992. - Vol. 167, N. 5. - P. 1344-1352. DOI: 10.1016/s0002-9378(11)91714-1.

46. Effects of ghrelin on Kisspeptin mRNA expression in the hypothalamic medial preoptic area and pulsatile luteinising hormone secretion in the female rat / S. Forbes, X. F. Li, J. Kinsey-Jones [et al.] // Neurosci. Lett. - 2009. - Vol. 460, N. 2. - P. 143-147. DOI: 10.1016/j.neulet.2009.05.060.

47. Effects of ghrelin upon gonadotropin-releasing hormone and gonadotropin secretion in adult female rats: in vivo and in vitro studies / R. Fernández-Fernández, M. Tena-Sempere, V. M. Navarro [et al.] // Neuroendocrinology. - 2005. - Vol. 82, N. 5-6. -P. 245-255. DOI: 10.1159/000092753.

48. Elias, C. F. Leptin signaling and circuits in puberty and fertility / C. F. Elias, D. Purohit. // Cell. Mol. Life Sci. - 2013. - Vol. 70, N. 5. - P. 841-862. DOI: 10.1007/s00018-012-1095-1.

49. Eliasson, B. Leptin levels in smokers and long-term users of nicotine gum / B. Eliasson, U. Smith // Eur. J. Clin. Invest. - 1999. - Vol. 29, N. 2. - P. 145-152. DOI: 10.1046/j.1365-2362.1999.00420.x.

50. Energetic demands of lactation produce an increase in the expression of growth hormone secretagogue receptor in the hypothalamus and ventral tegmental area of the rat despite a reduction in circulating ghrelin / M. Wellman, R. Budin, B. Woodside [et al.] // J. Neuroendocrinol. - 2022. - Vol. 34, N. 4. - e13126. DOI: 10.1111/jne.13126.

51. Estradiol and leptin as conditional prognostic IVF markers / G. Anifandis, E. Koutselini, K. Louridas // Reproduction. - 2005. - Vol. 129, N. 4. - P. 531-534. DOI: 10.1530/rep.1.00567.

52. Evidence for decreased expression of APPL1 associated with reduced insulin and adiponectin receptors expression in PCOS patients / R. Dehghan, M. Saidijam, M. Mehdizadeh [et al.] // J. Endocrinol. Invest. - 2016. - Vol. 39, N. 9. - P. 1075-1082. DOI: 10.1007/s40618-016-0468-y.

53. Evidence of leptin expression in normal and polycystic human ovaries / S. Löffler, G. Aust, U. Köhler [et al.] // Mol. Hum. Reprod. - 2001. - Vol. 7, N. 12. - P. 1143-1149. DOI: 10.1093/molehr/7.12.1143

54. Expression of adiponectin and adiponectin receptors in human pituitary gland and brain / A. Psilopanagioti, H. Papadaki, E. F. Kranioti // Neuroendocrinology. - 2009. - Vol. 89, N. 1. - P. 38-47. DOI: 10.1159/000151396.

55. Expression of adiponectin and its receptors (AdipoR1 and AdipoR2) in goat ovary and its effect on oocyte nuclear maturation in vitro / B. S. P. Oliveira, J. A. S. Costa, E. T. Gomes [et al.] // Theriogenology. - 2017. - Vol. 104. - P. 127-133. DOI: 10.1016/j .theriogenology.2017.08.013.

56. Expression of adiponectin receptors and its possible implication in the human endometrium / Y. Takemura, Y. Osuga, T. Yamauchi [et al.] // Endocrinology. - 2006. -Vol. 147, N. 7. - P. 3203-3210. DOI: 10.1210/en.2005-1510.

57. Expression of functional leptin receptors in the human ovary / C. Karlsson, K. Lindell, E. Svensson [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1997. - Vol. 82, N. 12. - P. 4144-4148. DOI: 10.1210/jcem.82.12.4446.

58. Expression of ghrelin and ghrelin functional receptor GHSRla in human pituitary adenomas / M. Andrusiewicz, H. Komarowska, I. Skibinska [et al.] // Pol. Arch. Intern. Med. - 2017. - Vol. 127, N. 3. - P. 163-169. DOI: 10.20452/pamw.3967.

59. Expression of ghrelin and its receptor in human tissues / B. Ueberberg, N. Unger, W. Saeger [et al.] // Horm. Metab. Res. - 2009. - Vol. 41, N. 11. - P. 814-821. DOI: 10.1055/s-0029-1233462.

60. Expression of ghrelin in the cyclic and pregnant rat ovary / J. E. Caminos, M. Tena-Sempere, F. Gaytan [et al.] // Endocrinology. - 2003. - Vol. 144, N. 4. - P. 1594-1602. DOI: 10.1210/en.2002-221058.

61. Expression of ghrelin in the porcine hypothalamo-pituitary-ovary axis during the estrous cycle / W. Zhang, Z. Lei, J. Su [et al.] // Anim. Reprod. Sci. - 2008. - Vol. 109, N. 1-4. - P. 356-367. DOI: 10.1016/j.anireprosci.2007.12.020.

62. Expression of a leptin receptor in immortalized gonadotropin-releasing hormone-secreting neurons / P. Magni, R. Vettor, C. Pagano [et al.] // Endocrinology. - 1999. - Vol. 140, N. 4. - P. 1581-1585. DOI: 10.1210/endo.140.4.6622.

63. Expression of leptin and its receptor in the murine ovary: possible role in the regulation of oocyte maturation / N. K. Ryan, C. M. Woodhouse, K. H. Van der Hoek [et al] // Biol. Reprod. - 2002. - Vol. 66, N. 5. - P. 1548-1554. DOI: 10.1095/biolreprod66.5.1548.

64. Expression of leptin and long-form leptin-receptor proteins in porcine hypothalamus during oestrous cycle and pregnancy / G. Siawrys, T. Kaminski, N. Smolinska [et al.] // J. Reprod. Domest. Anim. - 2009. - Vol. 44, N. 6. - P. 920-926. DOI: 10.1111/j.1439-0531.2008.01118.x.

65. Fang, H. Adiponectin Regulation and Function / H. Fang, R. L. Judd // Compr. Physiol. - 2018. - Vol. 8, N. 3. - P. 1031-1063. DOI: 10.1002/cphy.c170046.

66. Fasting and postprandial acyl and desacyl ghrelin levels in obese and non-obese subjects / J. A. Dardzinska, S. Malgorzewicz, L. Kaska [et al.] // Endokrynol. Pol. - 2014. -Vol. 65, N. 5. - P. 377-3781. DOI: 10.5603/EP.2014.0052.

67. Fasting and postprandial levels of ghrelin, leptin and insulin in lean, obese and anorexic subjects / E. Korek, H. Krauss, M. Gibas-Dorna [et al.] // Prz. Gastroenterol. -2013. - Vol. 8, N. 6. - P. 383-389. DOI: 10.5114/pg.2013.39922.

68. Fluorescent blood-brain barrier tracing shows intact leptin transport in obese mice / L. Harrison, S. C. Schriever, A. Feuchtinger [et al.] // Int. J. Obes. (Lond). - 2019. - Vol. 43, N. 6. - P. 1305-1318. DOI: 10.1038/s41366-018-0221-z.

69. Follicular fluid levels of vascular endothelial growth factor and leptin are associated with pregnancy outcome of normal women participating in intracytoplasmic sperm injection cycles / B. Asimakopoulos, N. Nikolettos, D. N. Papachristou [et al.] // Physiol. Res. - 2005. - Vol. 54, N. 3. - P. 263-270.

70. Four-hour infusion of hydrocortisone does not suppress the nocturnal increase of circulating acyl- or desacyl-ghrelin concentrations in healthy young adults / R. Nass, J. Liu, J. Patrie [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2014. - Vol. 99, N. 9. - E1696-700. DOI: 10.1210/jc.2014-1210.

71. From sensory circumventricular organs to cerebral cortex: Neural pathways controlling thirst and hunger / M. J. McKinley, D. A. Denton, P. J. Ryan [et al.] // J. Neuroendocrinol. - 2019. - Vol. 31, N. 3. - P. e12689. DOI: 10.1111/jne.12689.

72. Furuta, M. Intracerebroventricular administration of ghrelin rapidly suppresses pulsatile luteinizing hormone secretion in ovariectomized rats / M. Furuta, T. Funabashi, F. Kimura // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2001. - Vol. 288, N. 4. - P. 780-785. DOI: 10.1006/bbrc.2001.5854.

73. Gardner, D. K. Culture and transfer of human blastocysts / D. K. Gardner, W. B. Schoolcraft // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. - 1999. - Vol. 11, N. 3. - P. 307-311. DOI: 10.1097/00001703-199906000-00013.

74. Geber, S. Effects of estradiol and FSH on leptin levels in women with suppressed pituitary / S. Geber, A. H. Brandao, M. Sampaio // Reprod. Biol. Endocrinol. - 2012. - Vol. 10, N. 45. DOI: 10.1186/1477-7827-10-45.

75. Gender difference of circulating ghrelin and leptin concentrations in chronic Helicobacter pylori infection / C. H. Chuang, B. S. Sheu, H. B. Yang [et al.] // Helicobacter.

- 2009. - Vol. 14, N. 1. - P. 54-60. DOI: 10.1111/j.1523-5378.2009.00653.x.

76. Gender differences in both spontaneous and stimulated leptin secretion by human omental adipose tissue in vitro: dexamethasone and estradiol stimulate leptin release in women, but not in men / X. Casabiell, V. Pineiro, R. Peino [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1998. - Vol. 83. N. 6. - P. 2149-2155. DOI: 10.1210/jcem.83.6.4849.

77. Gene expression pattern of adiponectin and adiponectin receptors in dominant and atretic follicles and oocytes screened based on brilliant cresyl blue staining / M. R. Tabandeh, N. Golestani, M. Kafi [et al.] // Anim. Reprod. Sci. - 2012. - Vol. 131, N. 1-2. - P. 30-40. DOI: 10.1016/j.anireprosci.2012.02.006.

78. Genetic identification of leptin neural circuits in energy and glucose homeostasis / J. Xu, C. L. Bartolome, C. S. Low [et al.] // Nature. - 2018. - Vol. 556, N.7702. - P. 505509. DOI: 10.1038/s41586-018-0049-7.

79. Ghrelin Affects Gastric Cancer Progression by Activating AMPK Signaling Pathway / X. L. Hu, Y. J. Zhu, C. H. Hu [et al.] // Biochem. Genet. - 2021. - Vol. 59, N. 3.

- P. 652-667. DOI: 10.1007/s10528-020-10022-x.

80. Ghrelin affects the release of luteolytic and luteotropic factors in human luteal cells / A. Tropea, F. Tiberi, F. Minici [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2007. - Vol. 92, N. 8. - P. 3239-3245. DOI: 10.1210/jc.2007-0180.

81. Ghrelin ameliorates A549 cell apoptosis caused by paraquat via p38-MAPK regulated mitochondrial apoptotic pathway / S. Cui, Q. Nian, G. Chen [et al.] // Toxicology.

- 2019. - Vol. 1, N. 426. - P. 152267. DOI: 10.1016/j.tox.2019.152267.

82. Ghrelin and obestatin can promote human ovarian granulosa cell functions and FSH effects / A. V. Sirotkin, A. Tarko, M. Mlyncek [et al.] // Reprod. Biol. - 2023. - Vol. 23, N. 3. - P. 100795. DOI: 10.1016/j.repbio.2023.100795.

83. Ghrelin decreases firing activity of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) neurons in an estrous cycle and endocannabinoid signaling dependent manner / I. Farkas, C.

Vastagh, M. Sarvari [et al.] // PLoS One. - 2013. - Vol. 8, N. 10. - P. e78178. DOI: 10.1371/journal.pone.0078178.

84. Ghrelin gene-related peptides: multifunctional endocrine / autocrine modulators in health and disease / I. Seim, L. Amorim, C. Walpole [et al.] // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol.

- 2010. - Vol. 37, N. 1. - P. 125-131. DOI: 10.1111/j.1440-1681.2009.05241.x.

85. Ghrelin induces leptin resistance by activation of suppressor of cytokine signaling 3 expression in male rats: implications in satiety regulation / A. Heldsinger, G. Grabauskas, X. Wu [et al.] // Endocrinology. - 2014. - Vol. 155, N. 10. - P. 3956-3969. DOI: 10.1210/en.2013-2095.

86. Ghrelin inhibits steroid biosynthesis by cultured granulosa-lutein cells / I. Viani, A. Vottero, F. Tassi [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2008. - Vol. 93, N. 4. - P. 14761481. DOI: 10.1210/jc.2007-2063.

87. Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach / M. Kojima, H. Hosoda, Y. Date [et al.] // Nature. - 1999. - Vol. 402, N. 6762. - P. 656-660. DOI: 10.1038/45230.

88. Ghrelin is involved in the decidualization of human endometrial stromal cells / K. Tanaka, H. Minoura, T. Isobe [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2003. - Vol. 88, N. 5.

- P. 2335-2340. DOI: 10.1210/jc.2002-021024.

89. Ghrelin misbalance affects mice embryo implantation and pregnancy success by uterine immune dysregulation and nitrosative stress / E. M. Luque, C. M. Diaz-Lujan, D. A. Paira [et al.] // Front. Endocrinol. (Lausanne). - 2023. - Vol. 14. - P. 1288779. DOI: 10.3389/fendo.2023.1288779.

90. Ghrelin octanoylation by ghrelin O-acyltransferase: protein acylation impacting metabolic and neuroendocrine signalling / T. R. Davis, M. R. Pierce, S. X. Novak [et al.] // Open Biol. - 2021. - Vol. 11, N. 7. - P.210080. DOI: 10.1098/rsob.210080.

91. Ghrelin protects against lipopolysaccharide-induced acute respiratory distress syndrome through the PI3K/AKT pathway / L. Zhang, S. Ge, W. He [et al.] // J. Biol. Chem.

- 2021. - Vol. 297, N. 3. - P. 101111. DOI: 10.1016/j.jbc.2021.101111.

92. GnRH secretion is inhibited by adiponectin through activation of AMP-activated protein kinase and extracellular signal-regulated kinase / X. B. Cheng, J. P. Wen, J. Yang [et al.] // Endocrine. - 2011. - Vol. 39, N. 1. - P. 6-12. DOI: 10.1007/s12020-010-9375-8.

93. Gueorguiev, M. Leptin and puberty: a review / M. Gueorguiev, M. L. Góth, M. Korbonits // Pituitary. - 2001. - Vol. 4, N. 1-2. -P. 79-86. DOI: 10.1023/a:1012943029127.

94. High constitutive signaling of the ghrelin receptor - identification of a potent inverse agonist / B. Holst, A. Cygankiewicz, T. H. Jensen [et al.] // Mol. Endocrinol. - 2003.

- Vol. 17, N. 11. - P. 2201-2210. DOI: 10.1210/me.2003-0069.

95. Huang, A. The link between obesity and puberty: what is new? / A. Huang, C. L. Roth // Curr. Opin. Pediatr. - 2021. - Vol. 33, N. 4. - P. 449-457. DOI: 10.1097/M0P.0000000000001035.

96. Hypothalamic fatty acid metabolism mediates the orexigenic action of ghrelin / M. López, R. Lage, A. K. Saha [et al.] // Cell Metab. - 2008. - Vol. 7, N. 5. - P. 389-399. DOI: 10.1016/j.cmet.2008.03.006.

97. Immunolocalization of ghrelin and its functional receptor, the type 1a growth hormone secretagogue receptor, in the cyclic human ovary / F. Gaytan, M. L. Barreiro, L. K. Chopin // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2003. - Vol. 88, N. 2. - P. 879-887. DOI: 10.1210/jc.2002-021196.

98. Inflammatory markers in human follicular fluid correlate with lipid levels and body mass index / M. B. Gonzalez, M. Lane, E. J. Knight [et al.] // J. Reprod. Immunol. - 2018.

- Vol. 130. - P. 25-29. DOI: 10.1016/j.jri.2018.08.005.

99. Inhibition of leptin-ObR interaction does not prevent leptin translocation across a human blood-brain barrier model / D. Gonzalez-Carter, A. E. Goode, R. Fiammengo [et al.] // J. Neuroendocrinol. - 2016. - Vol. 28, N. 6. DOI: 10.1111/jne.12392.

100. Insulin Increases Adipose Adiponectin in Pregnancy by Inhibiting Ubiquitination and Degradation: Impact of Obesity / I. L. M. H. Aye, F. J. Rosario, A. Kramer [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2022. - Vol. 107, N. 1. - P. 53-66. DOI: 10.1210/clinem/dgab680.

101. Is leptin receptor expression triggered in the case of embryo transfer to endometrium coculture? / í. Kaplanoglu, G. Take Kaplanoglu, Ö. Qmar [et al.] // Turk. J. Med. Sci. - 2019. - Vol. 49, N. 4. - P. 1014-1018. DOI: 10.3906/sag-1810-160.

102. Is LRP2 involved in leptin transport over the blood-brain barrier and development of obesity? / E. S. Sandin, J. Folberth, H. Müller-Fielitz [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2021. -Vol. 22, N. 9. - P. 4998. DOI: 10.3390/ijms22094998.

103. Kisspeptin/GPR54 system: what do we know about its role in human reproduction? / C. M. Trevisan, E. Montagna, R. de Oliveira [et al.] // Cell. Physiol. Biochem. - 2018. - Vol. 49, N. 4. - P. 1259-1276. DOI: 10.1159/000493406.

104. Leptin and ghrelin expression in adipose tissues and serum levels in gastric banding patients / I. Knerr, D. Herzog, M. Rauh [et al.] // Eur. J. Clin. Invest. - 2006. - Vol. 36, N. 6. - P. 389-394. DOI: 10.1111/j.1365-2362.2006.01642.x.

105. Leptin and leptin receptor are expressed in the human endometrium and endometrial leptin secretion is regulated by the human blastocyst / R. R. González, P. Caballero-Campo, M. Jasper [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2000. - Vol. 85, N. 12.

- P. 4883-4888. DOI: 10.1210/jcem.85.12.7060.

106. Leptin and long form of leptin receptor genes expression in the hypothalamus and pituitary during the luteal phase and early pregnancy in pigs / T. Kaminski, N. Smolinska, A. Gajewska [et al.] // J. Physiol. Pharmacol. - 2006. - Vol. 57, N. 1. - P. 95-108.

107. Leptin and ObRa/MEK signalling in mouse oocyte maturation and preimplantation embryo development / Y. Ye, K. Kawamura, M. Sasaki [et al.] // Reprod. Biomed Online. -2009. - Vol. 19, N. 2. - P. 181-190. DOI: 10.1016/s1472-6483(10)60070-3.

108. Leptin controls adipose tissue lipogenesis via central, STAT3-independent mechanisms / C. Buettner, E. D. Muse, A. Cheng [et al.] // Nat. Med. 2008. - Vol. 14, N. 6.

- P. 667-675. DOI: 10.1038/nm1775.

109. Leptin down-regulates y-ENaC expression: a novel mechanism involved in low endometrial receptivity / X. H. Lin, M. E. Liu, H. Y. Xu [et al.] // Fertil. Steril. - 2015. -Vol. 103, N. 1. - P. 228-235. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2014.10.002.

110. Leptin enhances oocyte nuclear and cytoplasmic maturation via the mitogen-activated protein kinase pathway / J. Craig, H. Zhu, P. W. Dyce [et al.] // Endocrinology. -2004. - Vol. 145, N. 11. - P. 5355-5363. DOI: 10.1210/en.2004-0783.

111. Leptin enters the brain by a saturable system independent of insulin / W. A. Banks, A. J. Kastin, W. Huang [et al.] // Peptides. - 1996. - Vol. 17, N. 2. - P. 305-311. DOI: 10.1016/0196-9781(96)00025-3.

112. Leptin improves in-vitro maturation of goat oocytes through MAPK and JAK2/STAT3 pathways and affects gene expression of cumulus cells / J. A. S. Costa, G. A. Cezar, P. L. J. Monteiro [et al.] // Reprod. Biol. - 2022. - Vol. 22, N. 1. - P. 100609. DOI: 10.1016/j .repbio.2022.100609.

113. Leptin indirectly regulates gonadotropin-releasing hormone neuronal function / J. H. Quennell, A. C. Mulligan, A. Tups [et al.] // Endocrinology. - 2009. - Vol. 150, N. 6. -P. 2805-2812. DOI: 10.1210/en.2008-1693.

114. Leptin inhibits hypothalamic neurons by activation of ATP-sensitive potassium channels / D. Spanswick, M. A. Smith, V. E. Groppi [et al.] // Nature. - 1997. - Vol. 390, N. 6659. - P. 521-525. DOI: 10.1038/37379.

115. Leptin receptors / E. Gorska, K. Popko, A. Stelmaszczyk-Emmel [et al.] // Eur. J. Med. Res. - 2010. - Vol. 15, Suppl 2. - P. 50-54. DOI: 10.1186/2047-783x-15-s2-50.

116. Leptin receptor signaling in POMC neurons is required for normal body weight homeostasis / N. Balthasar, R. Coppari, J. McMinn [et al.] // Neuron. - 2004. - Vol. 42, N. 6. - P. 983-991. DOI: 10.1016/j.neuron.2004.06.004.

117. Leptin reference values and cutoffs for identifying cardiometabolic abnormalities in the Spanish population / T. Gijon-Conde, A. Graciani, P. Guallar-Castillon [et al.] // Rev. Esp. Cardiol. (Engl Ed). - 2015. - Vol. 68, N. 8. - P. 672-679. DOI: 10.1016/j.rec.2014.08.015.

118. Leptin's effect on puberty in mice is relayed by the ventral premammillary nucleus and does not require signaling in Kiss1 neurons / J. Donato Jr., R. M. Cravo, R. Frazao [et al.] // J. Clin. Invest. - 2011. - Vol. 121, N. 1. - P. 355-368. DOI: 10.1172/JCI45106.

119. Leptin signaling in GABA neurons, but not glutamate neurons, is required for reproductive function / W. A. Zuure, A. L. Roberts, J. H. Quennell [et al.] // J. Neurosci. -2013. - Vol. 33, N. 45. - P.17874-17883. DOI: 10.1523/JNEUROSCI.2278-13.2013.

120. Leptin, soluble leptin receptors, free leptin index, and their relationship with insulin resistance and BMI: high normal BMI is the threshold for serum leptin increase in humans / M. Owecki, E. Nikisch, A. Miczke [et al.] // Horm. Metab. Res. - 2010. - Vol. 42, N 8. - P. 585-589. DOI: 10.1055/s-0030-1253422.

121. Levels of adipokines and some steroids during the menstrual cycle / M. Sramkova, M. Duskova, J. Vitkû [et al.] // Physiol. Res. - 2015. - Vol. 64(Suppl 2). - S. 147-154. DOI: 10.33549/physiolres.933116.

122. Levin, B. E. Obesity-prone rats have normal blood-brain barrier transport but defective central leptin signaling before obesity onset / B. E. Levin, A. A. Dunn-Meynell, W. A. Banks // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. - 2004. - Vol. 286, N. 1. - P. R143-150. DOI: 10.1152/ajpregu.00393.2003.

123. Loss of cytokine-STAT5 signaling in the CNS and pituitary gland alters energy balance and leads to obesity / J. Y. Lee, H. Muenzberg, O. Gavrilova [et al.] // PLoS One. -2008. - Vol. 3, N. 2. - e1639. DOI: 10.1371/journal.pone.0001639.

124. Meal anticipation potentiates postprandial ghrelin suppression in humans / V. Ott, M. Friedrich, J. Zemlin [et al.] // Psychoneuroendocrinology. - 2012. - Vol. 37, N. 7. - P. 1096-1100. DOI: 10.1016/j.psyneuen.2011.10.007.

125. Metabolic effects of testosterone hormone therapy in normal and orchiectomized male rats: from indirect calorimetry to lipolytic enzymes / M. M. Ali Abulmeaty, A. M. Almajwal, M. F. ElSadek [et al.] // Int. J. Endocrinol. - 2019. - Vol. 2019. - P. 7546385. DOI: 10.1155/2019/7546385.

126. Modulating effect of leptin on basal and follicle stimulating hormone stimulated steroidogenesis in cultured human lutein granulosa cells / M. Karamouti, P. Kollia, A. Kallitsaris [et al.] // J. Endocrinol. Invest. - 2009. - Vol. 32, N. 5. - P. 415-419. DOI: 10.1007/BF03346478.

127. Moyce Gruber, B. L. The Role of Adiponectin during Pregnancy and Gestational Diabetes / B. L. Moyce Gruber, V. W. Dolinsky // Life (Basel). - 2023. - Vol. 13, N. 2. - P. 301. DOI: 10.3390/life13020301.

128. Münzberg, H. Structure, production and signaling of leptin / H. Münzberg, C. D. Morrison // Metabolism. - 2015. - Vol. 64, N. 1. - P. 13-23. DOI: 10.1016/j.metabol.2014.09.010.

129. Neonatal overnutrition causes early alterations in the central response to peripheral ghrelin / G. Collden, E. Balland, J. Parkash [et al.] // Mol. Metab. - 2014. - Vol. 4, N. 1. -P. 15-24. DOI: 10.1016/j.molmet.2014.10.003.

130. Nocturnal rise of leptin in lean, obese, and non-insulin-dependent diabetes mellitus subjects / M. K. Sinha, J. P. Ohannesian, M. L. Heiman [et al.] // J. Clin. Invest. - 1996. -Vol. 97, N. 5. - P. 1344-1347. DOI: 10.1172/JCI118551.

131. Opposite effects of 17-ß estradiol and testosterone on mitochondrial biogenesis and adiponectin synthesis in white adipocytes / G. Capllonch-Amer, I. Llado, A. M. Proenza / J. Mol. Endocrinol. - 2014. - Vol. 52, N. 2. - P. 203-214. DOI: 10.1530/JME-13-0201.

132. Ovarian signalling pathways regulated by leptin during the ovulatory process / M. P. Di Yorio, M. G. Bilbao, A. M. Biagini-Majorel [et al.] // Reproduction. - 2013. - Vol. 146, N. 6. - P. 647-658. DOI: 10.1530/REP-13-0257.

133. Pham, D. V. Tumor metabolic reprogramming by adipokines as a critical driver of obesity-associated cancer progression / D. V. Pham, P. H. Park // Int. J. Mol. Sci. - 2021. -Vol. 22, N. 3. - P. 1444. DOI: 10.3390/ijms22031444.

134. PI3K signalling in leptin receptor cells: Role in growth and reproduction / D. Garcia-Galiano, B. C. Borges, S. J. Allen [et al.] // J. Neuroendocrinol. - 2019. - Vol. 31, N. 5. - P. e12685. DOI: 10.1111/jne.12685.

135. Postprandial ghrelin responses are associated with the intermeal interval in time-blinded normal weight men, but not in obese men / W. A. Blom, C. de Graaf, A. Lluch [et al.] // Physiol. Behav. - 2009. - Vol. 96, N.4-5. - P. 742-748. DOI: 10.1016/j.physbeh.2009.01.016.

136. Predictive value of serum and follicular fluid leptin concentrations during assisted reproductive cycles in normal women and in women with the polycystic ovarian syndrome / C. S. Mantzoros, D. W. Cramer, R. F. Liberman // Hum. Reprod. - 2000. - Vol. 15, N. 3. - P. 539-544. DOI: 10.1093/humrep/15.3.539.

137. Rak-Mardyla, A. Ghrelin negatively affects the function of ovarian follicles in mature pigs by direct action on basal and gonadotropin-stimulated steroidogenesis / A. Rak-Mardyla, A. Wrobel, E. L. Gregoraszczuk // Reprod. Sci. - 2015. - Vol. 22, N. 4. - P. 469475. DOI: 10.1177/1933719114549854.

138. Rapid, reversible activation of AgRP neurons drives feeding behavior in mice / M. J. Krashes, S. Koda, C. Ye [et al.] // J. Clin. Invest. - 2011. - Vol. 121, N. 4. - P. 1424-1428. DOI: 10.1172/JCI46229.

139. Recombinant leptin for weight loss in obese and lean adults: a randomized, controlled, dose-escalation trial / S. B. Heymsfield, A. S. Greenberg, K. Fujioka [et al.] // JAMA. - 1999. - Vol. 282, N. 16. - P. 1568-1575. DOI: 10.1001/jama.282.16.1568.

140. Regulation of adiponectin secretion by insulin and amino acids in 3T3-L1 adipocytes / R. M. Blumer, C. P. van Roomen, A. J. Meijer [et al.] // Metabolism. - 2008. -Vol. 57, N. 12. - P. 1655-1662. DOI: 10.1016/j.metabol.2008.07.020.

141. Regulation of pituitary cell function by adiponectin / F. Rodriguez-Pacheco, A. J. Martinez-Fuentes, S. Tovar [et al.] // Endocrinology. - 2007. - Vol. 148, N. 1. - P. 401-410. DOI: 10.1210/en.2006-1019.

142. Ringuet, M. T. G protein-coupled receptor interactions and modification of signalling involving the ghrelin receptor, GHSR1a / M. T. Ringuet, J. B. Furness, S. G. B. Furness // J. Neuroendocrinol. - 2022. - Vol. 34, N. 9. - e13077. DOI: 10.1111/jne.13077.

143. Role of leptin, adiponectin, and kisspeptin in polycystic ovarian syndrome pathogenesis / K. Nikolettos, N. Nikolettos, N. Vlahos [et al.] // Minerva Obstet. Gynecol. -2023. - Vol. 75, N. 5. - P. 460-467. DOI: 10.23736/S2724-606X.22.05139-9.

144. Selective deletion of leptin receptors in gonadotropes reveals activin and GnRH-binding sites as leptin targets in support of fertility / N. Akhter, T. CarlLee, M. M. Syed [et

al.] // Endocrinology. - 2014. - Vol. 155, N. 10. - P. 4027-4042. DOI: 10.1210/en.2014-1132.

145. Serotonin 2C receptor activates a distinct population of arcuate proopiomelanocortin neurons via TRPC channels / J. W. Sohn, Y. Xu, J. E. Jones [et al.] // Neuron. - 2011. - Vol. 71, N. 3. - P. 488-497. DOI: 10.1016/j.neuron.2011.06.012.

146. Serum and follicular fluid ghrelin levels negatively reflect human oocyte quality and in vitro embryo development / L. Li, M. Ferin, M. V. Sauer [et al.] // Fertil. Steril. -2011. - 96, N. 5. - P. 1116-1120. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2011.08.017.

147. Serum leptin levels and reproductive function during the menstrual cycle / K. Ahrens, S. L. Mumford, K. C. Schliep [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 2014. - Vol. 210, N. 3. -P. 248.e1-9. DOI: 10.1016/j.ajog.2013.11.009.

148. Serum leptin through childhood and adolescence / P. E. Clayton, M. S. Gill, C. M. Hall [et al.] // Clin. Endocrinol. (Oxf). - 1997. - Vol. 46, N. 6. - P. 727-733. DOI: 10.1046/j.1365-2265.1997.2081026.x.

149. Serum leptin values in the healthy obese and non-obese subjects of Rawalpindi / A. Kazmi, A. Sattar, R. Hashim [et al.] // J. Pak. Med. Assoc. - 2013. Vol. 63, N. 2. - P.245-248.

150. Serum pattern of circulating adipokines throughout the physiological menstrual cycle / B. Asimakopoulos, A. Milousis, T. Gioka [et al.] // Endocr. J. - 2009. - Vol. 56, N. 3. - P. 425-433. DOI: 10.1507/endocrj.k08e-222.

151. Sierawska, O. Interaction between selected adipokines and musculoskeletal and cardiovascular systems: a review of current knowledge / O. Sierawska, M. Sawczuk // Int. J. Mol. Sci. - 2023. - Vol. 24, N. 24. - P.17287. DOI: 10.3390/ijms242417287.

152. Signaling mechanisms underlying the insulin-sensitizing effects of adiponectin / K. K. Cheng, K. S. Lam, B. Wang [et al.] // Best Pract. Res. Clin. Endocrinol. Metab. - 2014. - Vol. 28, N. 1. - P. 3-13. DOI: 10.1016/j.beem.2013.06.006.

153. Signaling through Tyr985 of leptin receptor as an age/diet-dependent switch in the regulation of energy balance / J. You, Y. Yu, L. Jiang [et al.] // Mol. Cell. Biol. - 2010. -Vol. 30, N. 7. - P. 1650-1659. DOI: 10.1128/MCB.01307-09.

154. Siu, M. K. The blood-follicle barrier (BFB) in disease and in ovarian function / M. K. Siu, C. Y. Cheng. // Adv. Exp. Med. Biol. - 2012. - Vol. 763. - P. 186-192. DOI: 10.1007/978-1-4614-4711-5_9.

155. Sohn, J. W. Network of hypothalamic neurons that control appetite / J. W. Sohn // BMB Rep. - 2015. - Vol. 48, N. 4. - P. 229-233. DOI: 10.5483/bmbrep.2015.48.4.272.

156. STAT3 phosphorylation in central leptin resistance / H. Liu, T. Du, C. Li [et al.] // Nutr. Metab. (Lond). - 2021. - Vol. 18, N. 1. - P. 39. DOI: 10.1186/s12986-021-00569-w.

157. STAT3 signalling is required for leptin regulation of energy balance but not reproduction / S. H. Bates, W. H. Stearns, T. A. Dundon [et al.] // Nature. - 2003. - Vol. 421, N. 6925. - P. 856-859. DOI: 10.1038/nature01388.

158. Structure-function studies on the new growth hormone-releasing peptide, ghrelin: minimal sequence of ghrelin necessary for activation of growth hormone secretagogue receptor 1a / M. A. Bednarek, S. D. Feighner, S. S. Pong [et al.] // J. Med. Chem. - 2000. -Vol. 43, N. 23. - P. 4370-4376. DOI: 10.1021/jm0001727.

159. Study of the Ghrelin/LEAP-2 Ratio in Humans and Rats during Different Phases of Pregnancy / M. F. Garces, J. D. Buell-Acosta, E. Angel-Müller [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2022. - Vol. 23, N. 17. - P. 9514. DOI: 10.3390/ijms23179514.

160. Synaptic release of GABA by AgRP neurons is required for normal regulation of energy balance / Q. Tong, C. P. Ye, J. E. Jones [et al.] // Nat. Neurosci. - 2008. - Vol. 11, N. 9. - P. 998-1000. DOI: 10.1038/nn.2167.

161. Systemic and brain delivery of leptin via intranasal coadministration with cell-penetrating peptides and its therapeutic potential for obesity / E. S. Khafagy, N. Kamei, Y. Fujiwara [et al.] // J. Control. Release. - 2020. - Vol. 319. - P. 397-406. DOI: 10.1016/j.jconrel.2020.01.016.

162. Tanycyte-independent control of hypothalamic leptin signalin / S. Yoo, D. Cha, D. W. Kim [et al.] // Front. Neurosci. - 2019. - Vol. 13. - P. 240. DOI: 10.3389/fnins.2019.00240.

163. Taylor, E. B. The complex role of adipokines in obesity, inflammation, and autoimmunity / E. B. Taylor // Clin. Sci. (Lond). - 2021. - Vol. 135, N. 6. - P. 731-752. DOI: 10.1042/CS20200895.

164. Testosterone substitution normalizes elevated serum leptin levels in hypogonadal men / F. Jockenhövel, W. F. Blum, E. Vogel [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1997. -Vol. 82, N. 8. - P. 2510-2513. DOI: 10.1210/jcem.82.8.4174.

165. The effect of estrogens on plasma ghrelin concentrations in women / K. Dafopoulos, N. Chalvatzas, G. Kosmas [et al.] J. Endocrinol. Invest. - 2010. - Vol. 33, N. 2. - P. 109-112. DOI: 10.1007/BF03346563.

166. The expression of leptin and its receptors in pre-ovulatory human follicles. / J. A. Cioffi, J. Van Blerkom, M. Antczak [et al.] // Mol. Hum. Reprod. - 1997. - Vol. 3, N. 6. -P. 467-472. DOI: 10.1093/molehr/3.6.467.

167. The impact of follicular fluid adiponectin and ghrelin levels based on BMI on IVF outcomes in PCOS / H. A. Inal, N. Yilmaz, U. Gorkem [et al.] // J. Endocrinol. Invest. -2016. - Vol. 39, N. 4. - P. 431-437. DOI: 10.1007/s40618-015-0392-6.

168. The influence of fasting and energy-restricted diets on leptin and adiponectin levels in humans: A systematic review and meta-analysis / H. Varkaneh Kord, M. G. Tinsley, O. H. Santos [et al.] // Clin. Nutr. - 2021. - Vol. 40, N. 4. - P. 1811-1821. DOI: 10.1016/j.clnu.2020.10.034.

169. The in vitro secretion of human leptin is gender-dependent but independent of the body mass index of the donors / C. Menendez, R. Baldelli, M. Lage [et al.] // Eur. J. Endocrinol. - 2000. - Vol. 143, N. 5. - P. 711-714. DOI: 10.1530/eje.0.1430711.

170. The LepR-mediated leptin transport across brain barriers controls food reward / A. Di Spiezio, E. S. Sandin, R. Dore [et al.] // Mol. Metab. - 2018. - Vol. 8. - P. 13-22. DOI: 10.1016/j.molmet.2017.12.001.

171. The Leptin Signaling / J. Liu, X. Yang, S. Yu [et al.] // Adv. Exp. Med. Biol. -2018. - Vol. 1090. - P. 123-144. DOI: 10.1007/978-981-13-1286-1_7.

172. The novel hypothalamic peptide ghrelin stimulates food intake and growth hormone secretion / A. M. Wren, C. J. Small , H. L. Ward [et al.] // Endocrinology. - 2000. - Vol. 141, N. 11. - P. 4325-4328. DOI: 10.1210/endo.141.11.7873.

173. The presence of acylated ghrelin during in vitro maturation of bovine oocytes induces cumulus cell DNA damage and apoptosis, and impairs early embryo development / M. A. Sirini, J. M. Anchordoquy, J. P. Anchordoquy [et al.] // Zygote. - 2017. - Vol. 25, N. 5. - P. 601-611. DOI: 10.1017/S0967199417000478.

174. The stimulatory effect of leptin on the neuroendocrine reproductive axis of the monkey / P. D. Finn, M. J. Cunningham, K. Y. Pau [et al.] // Endocrinology. - 1998. - Vol. 139, N. 11. - P. 4652-4662. DOI: 10.1210/endo.139.11.6297.

175. The utility of serum leptin and follicular fluid leptin, estradiol, and progesterone levels during an in vitro fertilization cycle / M. J. Hill, C. F. Uyehara, G. M. Hashiro [et al.] // J. Assist. Reprod. Genet. - 2007. - Vol. 24, N. 5. - P. 183-188. DOI: 10.1007/s10815-007-9106-0.

176. Time-resolved hypothalamic open flow micro-perfusion reveals normal leptin transport across the blood-brain barrier in leptin resistant mice / M. Kleinert, P. Kotzbeck, T. Altendorfer-Kroath [et al.] // Mol. Metab. - 2018. - Vol. 13. - P. 77-82. DOI: 10.1016/j.molmet.2018.04.008. Erratum in: Mol Metab. 2019. - Vol. 30. - P. 265.

177. Transcriptional and physiological roles for STAT proteins in leptin action / W. Pan, M. B. Allison, P. Sabatini [et al.] // Mol. Metab. - 2019. - Vol. 22. - P. 121-131. DOI: 10.1016/j.molmet.2019.01.007.

178. Two defects contribute to hypothalamic leptin resistance in mice with diet-induced obesity / K. El-Haschimi, D. D. Pierroz, S. M. Hileman [et al.] // J. Clin. Invest. - 2000. -Vol. 105, N. 12. - P. 1827-1832. DOI: 10.1172/JCI9842.

179. Unacylated ghrelin rapidly modulates lipogenic and insulin signaling pathway gene expression in metabolically active tissues of GHSR deleted mice / P. J. Delhanty, Y.

Sun, J. A. Visser [et al.] // PLoS One. - 2010. - Vol. 5, N. 7. - e11749. DOI: 10.1371/journal.pone.0011749.

180. Unique leptin trafficking by a tailless receptor / H. Tu, H. Hsuchou, A. J. Kastin [et al.] // FASEB J. - 2010. - Vol. 24, N. 7. - P. 2281-2291. DOI: 10.1096/fj.09-143487.

181. Variations of ghrelin and obestatin hormones during the menstrual cycle of women of different BMIs / A.M. Salem, R. Latif, N. Rafique [et al.] // Int. J. Womens. Health. -2022. - Vol. 14. - P. 1297-1305. DOI: 10.2147/IJWH.S375594.

182. Vitery, R. J. Dimorfismo sexual de la leptina, resistencia a la insulina y composición corporal en prepúberes normopeso [Leptin sexual dimorphism, insulin resistance, and body composition in normal weight prepubescent] / R. J. Vitery, G. Ortega, C. BC. Salazar // Rev Chil Pediatr. - 2020. - Vol. 91, N. 6. - P. 924-929. Spanish. DOI: 10.32641/rchped.vi91i6.1403.

183. World Health Organization. WHO Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen. 5th ed. WHO Press; Geneva, Switzerland: 2010. https://iris.who.int/handle/10665/44261

184. Yamauchi, T. Adiponectin receptor as a key player in healthy longevity and obesity-related diseases / T. Yamauchi, T. Kadowaki // Cell. Metab. - 2013. - Vol. 17, N. 2. - P. 185-196. DOI: 10.1016/j.cmet.2013.01.001

185. Yan, J. Adiponectin decreases lipids deposition by p38 MAPK/ATF2 signaling pathway in muscle of broilers / J. Yan, L. Gan, R. Qi R [et al.] // Mol. Biol. Rep. - 2013. -Vol. 40, N. 12. - P. 7017-7025. DOI: 10.1007/s11033-013-2821-y.

186. Yin-Yang regulation of adiponectin signaling by APPL isoforms in muscle cells / C. Wang, X. Xin, R. Xiang [et al.] // J. Biol. Chem. - 2009. - Vol. 284, N. 46. - P. 3160831615. DOI: 10.1074/jbc.M109.010355.

187. Yin, Y. The growth hormone secretagogue receptor: its intracellular signaling and regulation / Y. Yin, Y. Li, W. Zhang // Int. J. Mol. Sci. - 2014. - Vol. 15, N. 3. - P. 48374855. DOI: 10.3390/ijms15034837.

188. Zeng, Z. Metabolic adaptations in pregnancy: a review / Z. Zeng, F. Liu, S. Li // Ann. Nutr. Metab. - 2017. - Vol. 70, N. 1. - P. 59-65. DOI: 10.1159/000459633.

189. Zorko, M. Cell-Penetrating Peptides / M. Zorko, Ü. Langel // Methods. Mol. Biol. - 2022. - Vol. 2383. - P. 3-32. DOI: 10.1007/978-1-0716-1752-6 1.