Интерференционная фазометрия ядерных структур лимфоцитов при трансплантации почки (клинико-экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.24, кандидат медицинских наук Цалман, Антон Янович

• Цалман, Антон Янович
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Цалман, Антон Янович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ИММУНОПАТОГЕНЕЗ, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ОСТРОГО ОТТОРЖЕНИЯ РЕНАЛЬНОГО АЛЛОТРАНСПЛАНТАТА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Иммунопатогенез криза отторжения почечного аллотрансплантата.

1.2. Иммунологические методы диагностики криза отторжения.

1.2.1. Общепринятые иммунологические методы диагностики острого отторжения.

1.2.2. Возможности компьютерной фазовой морфометрии в диагностике острого отторжения.

1.3. Коррекция иммунологических нарушений при остром отторжении аллотрансплантата почки.v.

ГЛАВА 2. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Клиническая характеристика обследованных пациентов.

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Витальная компьютерная фазометрия клеток.

2.2.1.1. Выделение мононуклеаров.

2.2.1.2. Разделение мононуклеаров по степени адгезивности к пластику.

2.2.1.3. Метод витальной компьютерной фазометрии клеток крови.

2.2.4. Метод проточной лазерной цитометрии.

2.2.5. Методика приготовления и исследования пункционных биоптатов.

2.2.6. Ультразвуковое и доплеровское исследование.

2.2.7. Динамическая нефросцинтиграфия.

2.2.8. Методы статистической обработки результатов.

ГЛАВА 3. МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЯДЕРНЫХ СТРУКТУР ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

3.1. Разработка морфометрических критериев реактивных изменений ядер лимфоцитов в процессе их активации.

3.2. Фазометрия ядерных структур лимфоцитов здоровых добровольцев и больных ТХПН на стадии заместительной почечной терапии.

3.3. Морфометрический анализ ядерных структур лимфоцитов у реципиентов почечного трансплантата с неосложненным послеоперационным течением.

3.4. Морфометрический анализ ядерных структур лимфоцитов у реципиентов АТТП с отсроченной функцией трансплантата.

ГЛАВА 4. ВИТАЛЬНАЯ ФАЗОМЕТРИЯ ЯДЕРНЫХ СТРУКТУР ЛИМФОЦИТОВ ПРИ КРИЗЕ ОТТОРЖЕНИЯ РЕНАЛЬНОГО АЛЛОТРАНСПЛАНТАТА.

4.1. Витальная компьютерная фазометрия в диагностике острого отторжения почечного аллотрансплантата.

4.2. Морфометрическая характеристика ядерных структур лимфоцитов в оценке эффективности антикризовой терапии.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Интерференционная фазометрия ядерных структур лимфоцитов при трансплантации почки (клинико-экспериментальное исследование)»

Актуальность проблемы

Важным фактором ухудшения функции почечного аллотрансплантата является острое отторжение в раннем послеоперационном периоде, поэтому своевременная его диагностика и адекватное лечение являются важными предикторами благоприятного клинического исхода (Divate S.A., 2000; Johnston О, O'kelly Р, 2006; Karczewski J., 2008).

В настоящее время диагностика острой реакции отторжения основывается на комплексной оценке клинических симптомов, лабораторных показателей и результатов специальных инструментальных методов, включая ультразвуковое, допплеровское исследование и динамическую нефросцинтиграфию. Однако большинство определяемых признаков не являются строго специфичными для острого отторжения (Сандриков В.А., Садовников В.И., 2001; Danovitch G.M., 2001; Tinckam K.J. et al., 2004). Они могут регистрироваться в различных комбинациях вследствие острого канальцевого некроза, инфекционных, хирургических осложнений, токсичности ингибиторов кальциневрина и других лекарственных средств (Арзуманов С.В. и соавт., 2005; Шумаков В.И. и соавт., 2006; Dalton R.S. et al., 2005).

Наиболее достоверным методом диагностики острой реакции отторжения (ОРО) в настоящее время остается пункционная биопсия. Однако, в связи с инвазивностью данного метода, необходимостью проведения подготовки пациента, наличием ряда противопоказаний и определенного риска развития осложнений, считать пункционную биопсию «золотым стандартом» дифференциальной диагностики патологических состояний нефротрансплантата можно достаточно условно.

В последнее время активно ведутся научные поиски по разработке инструментальных способов обследования реципиентов почечного аллотрансплантата и использованию лабораторных методов на основе учета и анализа патогенетических факторов дисфункции трансплантированной почки. И, если использование современных инструментальных методов в определенной мере ограничено наличием существующих диагностических аппаратов и приборных комплексов, то широкий круг лабораторных тестов продолжает увеличиваться (Сандриков В. А., Садовников В.И., 2001; Шумаков В.И. и соавт., 2006; Pabisiak К. et al., 2004).

Сотрудниками отделения гемодиализа с пересадкой почки ГУ МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского был разработан способ диагностики острых реакций отторжения почечного трансплантата на основе измерений витальных морфометрических параметров иммунокомпетентных клеток методом компьютерной фазово-интерференционной микроскопии (Патент на изобретение «Способ диагностики отторжения почечного аллотрансплантата» № 2348932, 2009). Однако необходимость определения целого комплекса размерных показателей лимфоцитов, проведение многоуровневого математического анализа и сложность интерпретации полученных данных ограничивают возможность широкого использования метода в клинической практике, тем более для экспресс-диагностики ранней дисфункции почечного трансплантата.

Все вышеизложенное определяет актуальность выбранного направления исследований в плане совершенствования витальной компьютерной морфометрии. Анализ морфофункционального состояния ядерных структур иммунокомпетентных клеток может иметь не только научное значение для детального исследования патогенетических звеньев реакции отторжения трансплантированного органа, но и весьма важный практический результат для оперативной оценки иммунореактивности и прогнозирования состояния реципиента, а также построения индивидуализированных лечебно-реабилитационных программ, сравнения эффективности различных видов терапии, своевременного выявления осложнений, побочных и/или неблагоприятных эффектов лечения. Все это явилось основанием для проведения настоящего исследования.

Цель исследования. Изучить возможности интерференционной фазометрии ядерных структур лимфоцитов в доклинической диагностике острого отторжения почечного трансплантата и оценке эффективности противокризовой терапии.

Задачи исследования

1. Изучить в режиме реального времени качественные , и количественные изменения денситометрических параметров лимфоцитов периферической крови человека при их активации в условиях in vitro.

2. Провести сравнительный анализ структуры хроматина интерфазных ядер лимфоцитов периферической крови практически здоровых добровольцев и пациентов с терминальной стадией хронической почечной недостаточности методом витальной компьютерной морфометрии.

3. Изучить особенности динамики функциональной активности лимфоцитов у пациентов со стабильной и отсроченной функцией трансплантата в раннем посттрансплантационном периоде.

4. Оценить ядерный полиморфизм иммунокомпетентных клеток крови при острой реакции отторжения трансплантата.

5. Проанализировать изменения функциональной активности лимфоцитов на основе денситометрических показателей морфофункционального состояния их ядерных структур после проведения противокризовой терапии для оценки эффективности программ иммуносупрессии.

Научная новизна

В экспериментах in vitro изучены денситометрические параметры ядер лимфоцитов периферической крови при переходе клеток от состояния покоя к активной пролиферации, индуцированной фитогемагглютинином. Определены качественные и количественные показатели функционального состояния клеточных ядер, которые являются маркерами метаболической и пролиферативной активности лимфоцитов.

Впервые методом компьютерной фазовой морфометрии выявлена функциональная гетерогенность ядер циркулирующих лимфоцитов у больных с терминальной стадией хронической почечной недостаточности до и после аллотрансплантации трупной почки в раннем посттрансплантационном периоде.

Для оценки морфофункционального состояния иммунокомпетентных клеток на основе витальных денситометрических параметров предложен показатель функциональной активности ядер лимфоцитов (приоритетная справка на получение патента «Способ диагностики отторжения почечного аллотрансплантата» № 2009139822 от 28.10.2009).

Изучены особенности ядерного полиморфизма циркулирующих Т- и В-лимфоцитов у больных с признаками острой реакции отторжения нефротрансплантата и после проведения противокризовой терапии:

Практическая значимость

Разработаны дифференциально-диагностические цитологические критерии реактивных изменений ядер лимфоцитов на основе исследования морфоденситометрических характеристик хроматина и особенностей ядрышково-ядерного соотношения.

Полученные экспериментальные данные расширяют возможности витальной компьютерной морфометрии в оценке функционального состояния ядер лимфоцитов. Предложенный показатель ядерной активности лимфоцитов является ранним и объективным маркером их пролиферативного потенциала.

Проведение мониторинга денситометрических показателей ядер циркулирующих лимфоцитов позволяет своевременно выявлять изменение иммунореактивности реципиентов почечного трансплантата в раннем послеоперационном периоде.

Определение ядерной активности циркулирующих Т- и В-лимфоцитов позволяет проводить уточняющую экспресс-диагностику острой реакции отторжения нефротрансплантата, прогнозировать результаты лечения, оценивать эффективность противокризовой терапии.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Показатель функциональной активности ядер лимфоцитов, характеризующий конформационное состояние нуклеолярных белков и степень деконденсации хроматина, является универсальным количественным критерием пролиферативного потенциала иммунокомпетентных клеток.

2. Величина показателя функциональной активности ядер лимфоцитов может рассматриваться в качестве критерия ранней диагностики острого отторжения почечного трансплантата и эффективности проводимой противокризовой терапии.

Внедрение в практику. Основные положения и материалы диссертации внедрены в клиническую практику отделения гемодиализа с пересадкой почки ГУ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского.

Публикации. По результатам выполненных исследований опубликовано 8 печатных работ.

Апробация работы. Основные материалы и положения работы доложены и обсуждены: на 24-й научно-практической конференции «Морфометрия в диагностике болезней», Москва, 2005г.; 25-й научно-практической конференции «Морфометрия в диагностике болезней», Москва, 2006г.; I научно-практической конференции «Цитометрия в биологии и медицине: фундаментальные и прикладные аспекты», Москва, 2008г.; II научно-практической конференции «Цитометрия в биологии и медицине: фундаментальные и прикладные аспекты», Москва, 2009г.; научно-практической конференции сотрудников отделения гемодиализа с пересадкой почки, отделения хирургической гемокоррекции и детоксикации, кафедры Эфферентной медицины, клинической и оперативной нефрологии ФУВ ГУ МОНИКИ им. М.Ф Владимирского, Москва, 2010г.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 37 отечественных и 105 зарубежных источника.

Заключение диссертации по теме «Трансплантология и искусственные органы», Цалман, Антон Янович

ВЫВОДЫ

1. В экспериментах in vitro установлены дозо- и времязависимые эффекты изменения денситометрических показателей ядер лимфоцитов человека, активированных митогеном фитогемагглютинином. Фазовая высота живой клетки отражает особенности ядерного полиморфизма, предшествует динамике других ее морфометрических показателей и может рассматриваться в качестве раннего критерия пролиферативной активности лимфоцита.

2. Среднепопуляционные показатели функциональной активности ядер (FA) Т- и В-лимфоцитов больных с терминальной стадией ХПН отражают снижение пролиферативного потенциала циркулирующих клеток и составляют 1,56 и 1,54, против 1,83 и 1,85, установленных у здоровых лиц.

3. В посттрансплантационном периоде у пациентов без криза отторжения отмечается подавление функциональной активности циркулирующих лимфоцитов: величина FA Т- и В- клеток снижается до 1,21 и 1,35, соответственно, как при первичной, так и при отсроченной функции трансплантата

4. При развитиии острой реакции отторжения трансплантата на фоне базовой иммуносупрессии наблюдается прогрессирующее увеличение функциональной активности лимфоцитов: величина FA составляет >1,8±0,1.

5. Эффективность противокризовой терапии может быть количественно оценена по динамике значений показателя функциональной активности ядер лимфоцитов: снижение FA до 1,4, свидетельствует об эффективности проводимого лечения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки иммунологического статуса реципиентов почечного трансплантата целесообразно применять компьютерную фазовую морфометрию, как малоинвазивный, оперативный и информативный скрининговый метод экспресс-оценки морфофункционального состояния ядерных структур лимфоцитов периферической крови.

2. Для контроля за иммунореактивностью реципиентов почечного трансплантата целесообразно определять показатель ядерной активности лимфоцитов в раннем послеоперационном периоде каждые 3-4 дня.

3. Повышение показателя ядерной активности является показанием для проведения тщательного лабораторно- инструментального обследования, направленного на подтверждение острой реакции отторжения трансплантата.

4. Во время проведения противокризовой терапии следует определять показатель ядерной активности лимфоцитов каждые 2 дня для контроля эффективности проводимого лечения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Цалман, Антон Янович, 2010 год

1. Арзуманов С.В., Пинчук А.В., Ржевская О.Н. Ишемическое повреждение почечного аллотрансплантата и острая реакция отторжения: причинно-следственная взаимосвязь. // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2005. — № 1. - С. 12 - 14.

2. Арзуманов С.В., Синютин А.А., Степанов В.А. Иммунобиологические маркеры в диагностике отторжения трансплантированной почки. // Иммунология. 2008. - №1. — С. 52 - 55.

3. Белорусов О.С. Достижения и перспективы в проблеме пересадки почки. // Клиническая медицина. — 1992. —№2. — С. 5 — 8.

4. Белорусов О.С., Горяйнов В.А. Пересадка почки от живого родственного донора. // Трансплантология и искусственные органы. — 1995. — №2- С. 28-33.

5. Белорусов О.С., Горяйнов В.А., Синютин А.А. Причины потерь аллогенных почек в раннем посттрансплантационном периоде. // Трансплантология и искусственные органы. 1998. - №3. - С. 27 - 29.

6. Вельков В.В. С-реактивный белок: новые возможности для лабораторной диагностики. // Лаборатория. 2006. - № 3. - С. 6-10.

7. Витальная компьютерная морфометрия клеток крови в решении клинико-диагностических задач. / Кардашова 3.3., Власова Е.А., Кастрикина Е.С. и др. // Вестник последипломного медицинского образования. — 2008. — №3-4. С.75-77.

8. Влияние циклоспорина А на рецепторы и пролиферативную активность иммунокомпетентных клеток реципиентов аллогенной почки. / Дранник Г.Н., Лунева А.Г., Калинина Н.А., Баран Е.Я. // Лабораторная диагностика. 1998. - №2. - С. 24-28.

9. Дранник Г.Н., Лунева А.Г. ИЛ-10 продуцирующая функция лимфоцитов- критерий диагностики посттрансплантационных осложнений у реципиентов с аллогенной почкой. // Лаб. Диагностика. — 2000, №4. — С.14-18.

10. Ильинский И.М., Рябоштанова Е.И., Северин В.В. Патоморфология аллотрансплантированных органов. В книге «Трансплантология» под редакцией Шумакова В.И. // Москва: Медицина. — 1995. — 388 с.

11. Компьютерная фазово-интерференционная микроскопия в биологии и медицине. / Метелин В.Б., Минаев В.Л., Валов А.Л. и др. // «Актуальные проблемы морфологии». — Сборник научных трудов. Красноярск. - 2004. -С. 180-182.

12. Константинов Б.А. Клиническая трансплантология. // Москва: Аир Арт. 2004. - 303 с.

13. Константинов Б.А., Дземешкевич С.Л. Введение в клиническую трансплантологию. // Москва: Антиква. 1993. - 391 с.

14. Новый подход к прижизненной оценке морфофункционального состояния клеток крови человека. / Шабалин В.Н., Василенко И.А., Бабакова С.В., Конрадов А.А. //Ежегодник национального геронтологического центра. -2001.-№ 1.-С. 7-14.

15. Оценка кровотока в трансплантированной почке методом динамической сцинтиграфии. / Подшивалин А.В., Ермоленко А.Е., Тарабарко Н.В., Беляев А.Ю. // Трансплантология и искусственные органы. — 1998. — №4. С. 25.

16. Прижизненная компьютерная динамическая фазометрия клеток крови человека в норме и патологии. / Василенко И.А., Тычинский В.П., Конрадов А.А. и др. // Материалы форума «Лабораторная диагностика -2002». Москва, ЦДХ, 28-31 мая 2002г. - С.317 - 318.

17. Сандриков В.А. Ультразвуковое исследование в оценке комбинированной трупной трансплантации панкреатодуоденального комплекса и почки. // Ультразвуковая и функциональная диагностика. — 2008.- №4. -С. 17-24.

18. Сандриков В.А., Садовников В.И. Клиническая физиология трансплантированной почки. // Москва: Наука/Интерпериодика. — 2001. — 383 с.

19. Суханов А.В. Banff-классификация патологии аллотрансплантата почки. // Нефрология и диализ. 2000. - № 1-2. - С. 58 - 62.

20. Сухих Г.Т., Богданова И.М. Иммунологические аспекты клеточной терапии. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1998, — Т-125, №2. — С.124-129.

21. Томилина Н.А., Столяревич Е.С., Баранова Ф.С. Факторы риска поздней дисфункции трансплантированной почки. // Нефрология и диализ. — 2003.-Т. 5, №1. С. 70-75.

22. Траилин А.В. Роль неинвазивных методов в диагностике состояния почечного аллотрансплантата и профилактике его дисфункции. // Укр. Мед. Часопис. 2007. - № 6. - С. 76-83.

23. Трансплантация почки от живого родственного донора. / Мойсюк Я.Г., Шаршаткин А.В., Беляев А.Ю., Корсакова Т.В. // Нефрология и диализ. 2001. - Т.З, №3. - С. 328 -334.

24. Хаитов P.M., Г.А.Игнатьева, И.Г.Сидорович. Иммунология. // Москва: Медицина. 2000. - С.51-60.

25. Шумаков В.И. Трансплантология. // Москва: МИА. 2006. - 540 с.

26. Ярилин A.JI. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии. // Иммунология. — 1997. — № 3. — С. 7—12.

27. Ярилин А.А. Гомеостатические процессы в иммунной системе. Контроль численности лимфоцитов. // Иммунология. 2004. — № 5. - С.312 — 320.

28. Ярилин А.А. Иммунный синапс как структурная основа презентации антигена. // Иммунология. 2003. - №6. - С. 347- 349.

29. Allison J.P., Krummel M.F. T-cell costimulatory activation pathways in transplant rejection. // Science. 1995. - Vol. 270, № 5238. - P. 932-934.

30. Arthur J. Matas, Kim Solez. From first principles tubulitis in protocol biopsies and learning from history. // American Journal of Transplantation. - 2001. -Vol. VI, №1.- P. 4-5.

31. Association between recipient ICAM-1 K469 allele and renal allograft acute rejection. / Tajik N., Salari F., Ghods A.J., et al. // Int. J. Immunogenet. -2008. Vol. 35, №1. - P. 9-13.

32. Bardsley-Elliot A., Noble S., Foster R.H. Mycophenolate mofetil: a review of its use in the management of solid organ transplantation. // BioDrugs. -1999. Vol. 12, №5. - P.363-410.

33. Barshes N.R., Goodpastor S.E., Goss J.A. Pharmacologic immunosuppression. // Front. Biosci. 2004. - Vol. 1, №9. - P. 411-420.

34. Beik A.I., Morris A.G., Higgins R.M. Serial flow cytometric analysis of T-cell surface markers can be useful in differential diagnosis of renal allograft dysfunction. // Clin. Transplant. 1998. - Vol. 12, №1. - P. 24-29.

35. Benitez F., Najafian N. Novel noninvasive assays to predict transplantation rejection and tolerance: enumeration of cytokine-producing alloreactive T cells. // Clin. Lab. Med. 2008. - Vol. 28, № 3. - P.365-373.

36. Budde K., Waiser J., Ceska V. Interleukin-8 expression in patients after renal transplantation. // Am. J. Kidney Dis. 1997. - Vol. 29, №6. - P. 871-880.

37. C4d as a significant predictor for humoral rejection in renal allografts. / Jianghua C., Wenqing X., Huiping W. et al. // Clin. Transplant. 2005. - Vol. 19, №6.-P. 785-791.

38. C4d deposition in early renal allograft protocol biopsies. / Koo D.D., Roberts I.S., Quiroga I. et al. // Transplantation. 2004. - Vol. 78, №3 - P. 398403.

39. CD69 expression on peripheral CD8 T cell correlates with acute rejection in renal transplant recipients. / Posset A.M., Vincerty F., Bedonni M., Lantz M. // Transplantation. 2003. - Vol. 76, №1. - P. 190-195.

40. Clinical significance of monitoring circulating CD4+CD25+ regulatory T cells in kidney transplantation during the early posttransplant period. / Kim S.H., Oh E.J., Ghee J.Y. et al. // J. Korean Med. Sci. 2009. - №. 24. -P. 135-142.

41. Clinicopathological evaluation of renal allograft treated with anti-CD25 monoclonal antibody. / Okamoto M., Akioka K., Higuchi A. et al. // Clin. Transplant. 2005. - Vol. 19, № 14. - P. 49-53.

42. Cystatin-C and creatinine as indices of glomerular filtration rate in the immediate follow-up of renal transplant patients. / Kocak H., Oner-Iyidogan Y., Gurdol F. et al. // Clin. Exp. Med. 2005. - Vol.5, №1. - P. 14 -19.

43. Cytokine gene polymorphism in kidney transplantation Impact of TGF-betal, TNF-alpha and IL-6 on graft outcome. / Nikolova P.N., Ivanova M.I., Mihailova S.M. et al. // Transpl. Immunol. - 2008. - Vol. 18, №4. - P. 344-348.

44. Danovitch G.M. Handbook of kidney transplantation. // Los Angeles, CA USA: Lippincott Williams & Wilkins. 2001. - 443 p.

45. Danovitch G.M., Gill J., Bunnapradist S. Immunosuppression of the elderly kidney transplant recipient. // Transplantation. — 2007. — Vol. 84, №3. — P.285-291.

46. Danovitch G.M., Nast C.C., Wilkinson A. Evaluation of fine-needle aspiration biopsy in the diagnosis of renal transplant dysfunction. // Am. J. Kidney Dis. 1991. - Vol. 17, №3. - P. 362.

47. Di Filippo S. Anti-IL-2 receptor antibody vs. polyclonal anti-lymphocyte antibody as induction therapy in pediatric transplantation. // Pediatr. Transplant. — 2005. Vol. 9, №3. - P.373—380.

48. Diagnosis of acute humoral rejection using immunofluorescence in renal allograft biopsies- one step towards better understanding. / Vanikar A.V., Trivedi H., Patel R.D., et al. // Indian J. Pathol. Microbiol. 2007. - Vol. 50, №3. - P. 502-506.

49. Differentiation of cytomegalovirus infection from acute rejection using renal allograft fine needle aspirates. / Nast C.C., Wilkinson A., Rosenthal T. et al. // J.Am. Soc. Nephrol. 1991.-Vol. 1.,№1.-P. 1204.

50. Evaluation of biomarker discovery approaches to detect protein biomarkers of acute renal allograft rejection. / Voshol H., Brendlen N., Muller D., et al. // J. Proteome Res. 2005. - Vol. 4, №4. - P. 1192-1199.

51. Expression of CD 158b on peripheral blood lymphocytic cell after kidney transplantation. / Kang N., Guan D., Xing N. et al. // Transplant. Proc. 2005. -Vol.37, №2. - P.782-784.

52. Following anti-CD25 treatment, a functional CD4+CD25+ regulatory T-cell pool is present in renal transplant recipients. / Kreijveld E., Koenen H.J., Klasen IS. et al. // Am. J. Transplant. 2007. - Vol. 7, №1. - P.249-255.

53. Frank M.M., Basta M., Fries L.K. The effects of intravenous immunoglobulin on complement-dependent immune damage of cells and tissues. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1992. - №. 62. - P. 72-77.

54. Gene expression of perforin by peripheral blood lymphocytes as a marker of acute rejection. / Shin G.T., Kim S.J., Lee T.S. et al. // Nephron. Clin. Pract. 2005. - Vol. 100, №3. - P. 63-70.

55. Granzyme В and perforin as predictive markers for acute rejection in human transplantation. / D'Errico A., Corti В., Pinna A.D. et al. // Transplant. Proc. 2003. - Vol. 35, №8. - P.3061-3065.

56. Grunewald R.W., Fielder G.M., Stock B. Soluble CD-4 and CD-8 as markers of immunological activation in renal transplant recipients. // Nephron. Dial. Transplant. 2000. - Vol. 15, №1. - P. 71-77.

57. Gudmundsdottir H., Turka L.A. T-cell costimulatory blockade: new therapies for transplant rejection. // J. Am. Soc. Nephrol. — 1999. — Vol. 10, №6. — P. 1356.

58. Gupta R.K., Jain M., Sharma R.K. Serum and urinary interleukin-2 levels as predictors in acute renal allograft rejection. // Indian J. Med. Res. 2004. -Vol. 119, №1.-P. 24-27.

59. Harris K.R., DipardN.J. Serum C- reactive protein: a useful, economical marker of immune activation in cadaveric renal transplantation. // Transpl. Proc. — 1995. Vol. 27, № 1. - P.1046-1047.

60. Hartono C., Dadhania D., Suthanthiran M. Noninvasive diagnosis of acute rejection of solid organ transplants. // Front. Biosci. 2004. — Vol. 1, №9. — P.145—153.

61. Heightened peripheral blood lymphocyte CD69 expression is neither sensitive nor specific as a noninvasive diagnostic test for renal allograft rejection. /

62. Karpinski M., Rush D., Jeffery J. et al. // J. Am. Soc. Nephrol. 2003. - Vol. 14, №1. — P. 226-233.

63. Histological markers of humoral rejection in renal transplant patients. / Valente M., Furian L., Marino S., et al. // Transplant. Proc. 2007. - Vol. 39, №6. -P. 1827-1829.

64. Hongwei W., Nanra R.S., Stein A. Eosinophils in acute renal allograft rejection. // Transpl. Immunol. 1994. - Vol. 2, №1. - P. 41-46.

65. Humanized anti-CD 154 antibody therapy for the treatment of allograft rejection in nonhuman primates. / Xu H., Tadaki D.K., Elster E.A., et al. // Transplantation. 2002. - Vol. 74, №7. - P. 940-943.

66. IL-2 and TNF-alpha promoter polymorphisms in patients with acute kidney graft rejection. / Pawlik A., Domanski L., Rozanski J. et al. // Transplant. Proc. 2005. - Vol. 37, №5. - P.2041-2043.

67. Immunosuppression in renal transplantation: some aspects for the modern era. / Chadban S., Morris R., Hirsch H.H. et al. // Transplant. Rev. (Orlando). 2008. - Vol. 22, № 4. - P. 241-251.

68. Interleukin-10 and acute rejection in renal transplantation. / Plothow A., Bicalho M.G., Benvenutti R., Contieri F.L. // Transplant. Proc. 2003. - Vol. 35, №4.-P. 1338-1340.

69. Interleukin-2 receptor monoclonal antibodies in renal transplantation: meta-analysis of randomised trials. / Adu D., Cockwell P., Ives N.J. et al. // BMJ. -2003. Vol. 12, №7393. - P.789.

70. Ischemic postconditioning prevents ischemic acute renal failure. / Szwarc I., Soullier S., Gayrard N., et al. // Transplant. Proc. 2007. - Vol. 39, №8. - P. 2554-2556.

71. Izvolskaja N., Rainiene Т., Dainys B. Anti interleukin-2 receptor alpha antibodies (daclizumab) application for the treatment of kidney recipients. // Medicina (Kaunas). 2003. - Vol. 39, № 1. - P.166-170.

72. June C.H., Ledbetter J.A. Role of the CD 28 receptor in T-cell activation. // Immunol. Today. 1990. -№ 11. - P.211.

73. Kameoka H., Takahara S., Takano Y. Serum and urinary neopterin as markers in renal transplant patients. // Int. Urol. Nephrol. 1994. - Vol. 26, №1. -P. 107-115.

74. Kanodia K.V., Vanikar A.V., Trivedi H.L. Study of acute antibody-mediated rejection in renal allograft biopsies. // Transplant. Proc. — 2008. — Vol. 40, № 4. P.1099-1103.

75. Keil M., Pec M.K., Schenn G. Value of serum soluble tumour necrosis factor concentrations in the diagnosis and prognosis of renal graft rejection. // Nephrol. Dial. Transplant. 1994. - Vol. 9, №7. - P. 815-819.

76. Kirschfink M., Wienert Т., A Prado E.B. The effect of the compliment system on the acute reversible rejection of kidney transplants. // Immun. Infekt. — 1995. Vol. 23, №2. - P. 55-56.

77. Koike J., Yamaguchi Y., Horita S. Clinical and pathological assessment of acute vascular rejection in the transplant kidney. // Clin. Transplant. — 2001. — Vol. 15, №5.-P. 41-44.

78. Kulkarni A.A., Shah B.V. Mycophenolate mofetil: a promising immunosuppressive agent. // J. Assoc. Physicians. India. 2004. - Vol. 52. - P. 33-38.

79. Kutukculer N., Clark K., Rigg K.M. The value of posttransplant monitoring of interleukin (IL)-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-8, and soluble CD 23 in the plasma of renal allograft recipient. // Transplantation. 1995. - Vol. 59, №3. - P. 333-340.

80. Lafferty K., Bootes A., Dart G. Mechanisms of T-cell recognition of alloantigen. //Ibid. -1996. -№ 22. P. 138-149.

81. Le Bricon Т., Thervet E., Benlakehal M. Changes in plasma cystatin С after renal transplantation and acute rejection in adults. // Clin. Chem. — 1999. — Vol. 45, №12. P.2243—2249.

82. Lederer S.R., Friedrich N., Getto R. Non-invasive monitoring of renal transplant recipients: urinary excretion of soluble adhesion molecules and of the complement-split product C4d. // Nephron. Clin. Pract. 2003. - Vol. 94, №1. -P. 19-26.

83. Lu I., Tian J., Zhang J. A study on serum soluble interleukin-2 receptor level in the diagnosis of acute rejection in renal transplantation. // Zhonghua. Nei. Ke. Za. Zhi. 1995. - Vol. 34, №6. - P. 371-373.

84. Lyonne K., Robert Zietse. Renal extraction of cystatin С vs 125I — iothalamate in hypertensive patients. // Nephrol. Dial. Transplant. — 2006. — №21. -P. 1253-1256.

85. Magil A.B., Tinckam K.J. Focal peritubular capillary C4d deposition in acute rejection. // Nephrol. Dial. Transplant. 2006. - Vol. 21, №5. - P. 13821388.

86. Marcussen N., Lai R., Olsen T.S. Morphometric and immunohistochemical investigation of renal biopsies from patients with transplant ATN, native ATN, or acute graft rejection. // Transplant. Proc. — 1996. — № 28. — P. 470-476.

87. Mathan A., Kuruvilla S., Abraham G. Interleukin-2 receptor expression in renal biopsies and the diagnosis of acute allograft rejection. // Indian J. Pathol. Microbiol. 2006. - Vol. 49, №1. - P. 12-16.

88. Mazur M.J., Heilman R.L. Early detection of acute renal failure by serum cystatin C: a new opportunity for a hepatologist. // Liver Transpl. — 2005. — Vol. 11, №6.-P. 705-707.

89. Molecular markers in subclinical acute rejection of renal transplants. / Aquino Dias E.C., Veronese F.J., Santos Gon9alves L.F., Manfro R.C. // Clin. Transplant. 2004. - Vol. 18, №3. - P.281-287.

90. Monitoring of T-cell subsets in patients treated with anti-CD 25 antibody. / Praditpomsilpa K., Avihingsanon Y., Kupatawintu P. et al. // Transplant. Proc. 2004. - Vol. 36, №2. - P. 487-491.

91. Monotherapy with the novel human anti-CD154 monoclonal antibody ABI793 in rhesus monkey renal transplantation model. / Kanmaz Т., Fechner JJr., Torrealba J. et al. // Transplantation. 2004. - Vol. 77, №6. - P. 914-920.

92. Moore K., Vierra P. Homology of cytokine syntesis inhibitory factor (IL-10) to the Epstein-Barr virus gene. // BCRFJ. -1990. Vol. 248. - P. 1230-1234.

93. Muller T.F., Kraus M., Neumann C. Detection of renal allograft rejection by complements C5A and TCC in plasma and urine. // J. Lab. Clin. Med. 1997. - Vol. 129, №1. - P. 62-71.

94. Mycophenolate mofetil vs azathioprine in a large population of elderly renal transplant patients. / Meier-Kriesche H.U., Morris J.A., Chu A.H. et al. // Nephrol. Dial. Transplant. 2004. - Vol. 19, №11. - P. 2864-2869.

95. Nast C.C. Fine needle aspiration cytology. In: Racusen L.C., Solez K., Burdick J.F. eds. Kidney transplant rejection. // New York: Marcel Dekker. 1998. -P. 419-443.

96. Nast C.C. Renal transplant fine needle aspiration and cytokine gene expression. // Pediatr. Nephrol. 1995. - Vol. 9. - P. 56-60.

97. Newstead C.G., Lamb W.R., Short C.D. Serum and urine IL-6 and TNF-alpha in renal transplant recipients with graft dysfunction. // Transplantation. -1993.-Vol. 56, №4.-P. 831-835.

98. Nickeleit V. Detection of the complement degradation product C4d in renal allografts: diagnostic and therapeutic implications. // J. Am. Soc. Nephrol. -2002. Vol. 13, №1. - P. 242-251.

99. Nickerson P. Analysis of cytokine transcripts in pancreatic islet cells allografts during rejection and tolerance induction. // Transplant. Proc. —1993. -Vol. 25. P.984-985.

100. Offermann G. Immunosuppression for long-term maintenance of renal allograft function. // Drugs. -2004. Vol. 64, №12. - P. 1325-1338.

101. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of systemically administered glucocorticoids. / Czock D., Keller F., Rasche F.M., Haussler U. // Clin. Pharmacokinet. 2005. - Vol. 44, №1. - P.61-98.

102. Polyclonal antibodies in renal transplantation a relook. / Sidhu M.S., Nayak K.S., Subhramanyam S.V., Sankar A. // Transplant. Proc. - 2007. - Vol. 39, №3.-P. 766-772.

103. Prognostic value of cytotoxic T-lymphocytes and CD40 in biopsies with early renal allograft rejection. / Mengel M., Mueller I., Behrend M. et al. // Transpl. Int. 2004. - Vol. 17, №6. - P. 293-300.

104. Reduced graft function (with or without dialysis) vs immediate graft function- a comparison of long-term renal allograft survival. / Johnston O., O'kelly P., Spencer S., et al. // Nephrol. Dial. Transplant. 2006. - Vol. 21, №8. - P. 2270-2274.

105. Rituximab removes intrarenal В cell clusters in patients with renal vascular allograft rejection. / Steinmetz O.M., Lange-Husken F., Turner J.E. et al. //Transplantation. 2007. - Vol. 84, №7. - P. 842-850.

106. Romagnami S. Biology of human TH1 and TH2 cells. // J. Clin. Immunol. 1995. - Vol.15, №3. -P. 121-129.

107. Rush D. Protocol transplant biopsies: an underutilized tool in kidney transplantation. //Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2006. - Vol. 1, №1. - P. 138-143.

108. Salgado O. Noninvasive acute rejection diagnosis in kidney transplantation. // Transplant. Proc. 2002. - Vol. 34, №7. - P. 2543-2544.

109. Serial peripheral blood perforin and granzyme В gene expression measurements for prediction of acute rejection in kidney graft recipients. / Simon Т., Opelz G., Wiesel M. et al. // Am. J. Transplant. 2003. - Vol. 3, №9. - P. 1121-1127.

110. Seron D., Moreso F. Protocol biopsies in renal transplantation: prognostic value of structural monitoring. // Kidney Int. — 2007. Vol. 72, №6. -P. 690-697.

111. Serum C-reactive protein surge in renal transplant recipients: link with allograft survival. / Ozdemir N.F., Elsurer R., Ibis A. et al. // Transplant Proc. -2007. Vol. 39, №4. - P. 934-937.

112. Serum T-lymphocyte cytokines cannot predict early acute rejection in renal transplantation. / Ghafari A., Makhdoomi K., Ahmadpour P. et al. // Transplant Proc. -2007. Vol. 39, №4. - P.958-961.

113. Shoker A., George D., Yang H. Heightened CD40 ligand gene expression in peripheral CD4+ T cells from patients with kidney allograft rejection. // Transplantation. 2000. - Vol. 70, №3. - P. 497-505.

114. Sridhar N.R., Blanton M., First M.R. Flow cytometric evaluation of cytotoxic peripheral blood lymphocytes in acute renal graft rejection. // J. Am. Soc. Nephrol. 1992. - Vol. 3, №6. - P. 1220-1226.

115. Steinhoff J., Buhner U. Analysis of C- reactive protein in urine as an aid in the clinical diagnosis of disturbed renal transplant function. // Transpl. Proc. 1992.-№24.-P. 2735.

116. Steinhoff J., Einecke G. Renal graft rejection or urinary tract infection? // Transplantation. 1997. - Vol. 64, № 3. - P. 443-447.

117. Stock P.G., Ascher. Evidence for Direct and Indirect Pathways in the Generation of the Alloimmune Response Against Pancreatic Islets. // Transplantation. 1991. - Vol. 52, №4. - P. 704-709.

118. Successful rescue therapy with mycophenolate mofetil in kidney transplantation improves the long-term graft survival. / Kahu J., L5hmus A., Ilmoja M. et al. // Medicina (Kaunas). 2007. - Vol. 43, №12. - P. 953-958.

119. The role of polyclonal anti-T-lymphocyte antibodies (ATG) in the kidney transplantation. / Nikolovski M., Kotsev Iu., Dimitrov S. et al. // Khirurgiia (Sofiia). 2004. - Vol. 60, №4-5. - P. 42-45.

120. Thervet E. Sirolimus therapy following early cyclosporine withdrawal in transplant patients: mechanisms of action and clinical results. // Int. J. Nanomedicine. 2006. - Vol. 1, №3. - P. 269-281.

121. Traindl O., Gisinger C., Reading S. Circulating serum levels of soluble CD23 (sCD23) after renal transplantation. // Clin. Transplant. 1994. - Vol. 2, №1. - P. 87-92.

122. Treatment of early mixed cellular and humoral renal allograft rejection with tacrolimus and mycophenolate mofetil. / Sun Q., Liu Z.H., Cheng Z., et al. // Kidney Int. 2007. - Vol. 71, №1. - P. 24-30.

123. Vasconcellos L.M., Schachter A.D., Zheng X.X. Cytotoxic lymphocyte gene expression in peripheral blood leukocytes correlates with rejecting renal allografts. // Transplantation. 1998. - Vol. 66, №9. - P. 1264.

124. Vincenti F. New monoclonal antibodies in renal transplantation. // Minerva. Urol. Nefrol. 2003. - Vol. 55, №1. - P. 57-66.

125. Wagrowska-Danilewicz M., Danilewicz A/I. Immunoexpression of perforin and granzyme В on infiltrating lymphocytes in human renal acute allograft rejection. // Nefrologia. 2003. - Vol.23, №6. - P. 538-544.

126. Waiser J., Budde K., Kalalinic A. lnterleukin-6 expression after renal transplantation. //Nephrol. Dial. Transplant. 1997. - Vol. 12, №4. - P. 753-759.

127. Wang Y., Pontesili O. The role of CD4+ and CD8+ T-cells in the destruction of islet grafts by spontaneously diabetic mice. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - Vol.88. - P. 527-531.

128. Wilkinson A. Protocol transplant biopsies: are they really needed? // Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2006. - Vol.1, №1. - P. 130-137.