Интегрированный подход отбора антагонистов токсинопродуцирующих микроскопических грибов для снижения уровня загрязнения продовольственного сырья микотоксинами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Хабирова Светлана Рашидовна

• Хабирова Светлана Рашидовна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Хабирова Светлана Рашидовна

Сокращения

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Экология и биология грибов вида Fusarium sporotrichioides

1.2 Экология и биология грибов вида Aspergillus flavus

1.3 Биологические эффекты загрязнения среды микотоксинами грибов родов Fusarium и рода Aspergillus

1.4 Межпопуляционные отношения фитопатогенных грибов и бактерий

1.5 Мероприятия, направленные на охрану живой природы как на видовом, так и экосистемном уровне, с применением фунгицидов

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Объекты исследования

2.2 Питательные среды и условия культивирования

2.3 Отбор проб и пробоподготовка

2.4 Методы исследования

2.4.1 Выделение чистых культур бактерий

2.4.2 Скрининг антагонистической активности бактерий в отношении грибов вида A. flavus и F. sporotrichioides

2.4.3 Методы изучения биологических свойств бактерий

2.4.4 Изучение способности бактерий к детоксикации зерна, контаминированного микроскопическими грибами

2.4.5 Токсикологическая оценка изучаемых бактерий-антагонистов

2.4.6 Разработка алгоритма

2.4.7 Статистическая обработка полученных данных

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Выделение бактерий-антагонистов A. flavus и F.sporotrichioides

2

3.2 Определение антагонистической активности против токсинопродуцирующих микроскопических грибов

3.2.1 Изучение противогрибковой активности отобранных изолятов бактерий против А. Аоуш

3.2.2 Изучение противогрибковой активности отобранных бактерий против F. sporotrichioides

3.3 Изучение ферментативных свойств бактерий-антагонистов

3.4 Исследование антагонизма бактерий и микроскопических грибов видов А. Аауш и F. sporotrichioides при моделировании процессов контаминации зерна в лабораторных условиях

3.4.1 Исследование ингибирования роста, развития А. Аауш и продукции афлатоксина В1 суспензией антагонистов

3.4.2 Исследование ингибирования роста, развития А. /1ауш и продукции афлатоксина В1, бесклеточной культуральной жидкостью, содержащей экзометаболиты

3.4.3 Исследование ингибирования роста, развития F.sporotrichioides и продукции зеараленона суспензией антагонистов

3.4.4 Исследование ингибирования роста, развития F.sporotrichioides и продукции зеараленона, бесклеточной культуральной жидкостью, содержащей экзометаболиты

3.5 Определение биологической безопасности отобранных бактерий-антагонистов

3.5.1 Изучение общей токсичности и патогенности

3.5.2 Определение фитотоксичности

3.5.3 Идентификация бактерий

3.5.4 Определение острой токсичности

3.5.5 Определение хронической токсичности

3.6 Разработка алгоритма отбора эффективных антагонистов микроскопических грибов

ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРЕДЛОЖЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Сокращения

ГА - голодный агар

ДИ - доверительный интервал

КЖ - культуральная жидкость

КОЕ - колониеобразующие единицы

МПА - мясо-пептонный агар

МПБ - мясо-пептонный бульон

ПДК - предельно допустимая концентрация

РФФИ - Российский фонд фундаментальных исследований

СА - сусло-агар

СБ - суспензия бактерий

ЧП - чашка Петри

PGPR - plant growth-promoting rhizobacteria

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Интегрированный подход отбора антагонистов токсинопродуцирующих микроскопических грибов для снижения уровня загрязнения продовольственного сырья микотоксинами»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

По данным, опубликованным Продовольственной и сельскохозяйственной организацией Объединённых Наций, «на сегодняшний день 25% зерна, производимого в мире контаминировано микотоксинами» (Попов и др., 2016). Современное агроэкологическое производство терпит огромные убытки, так как микроскопические грибы снижают качественный и количественный состав урожая, тем самым нанося существенный удар по экономике как развивающихся, так и развитых стран. В Российской Федерации контаминированность несеменного зерна микроскопическими грибами составляет 39,5 - 74,7%, и основная проблема состоит в том, что 70-80% этих микроскопических грибов являются токсинопродуцирующими. По данным Министерства сельского хозяйства России, проведенный микологический анализ зерна свидетельствует о том, что контаминация токсинопродуцирующими микроскопическими грибами происходит повсеместно (Донник и др., 2012).

Таким образом, фитопатогены и их производные представляют собой серьезную проблему для мирового растениеводства, животноводства, сельского хозяйства, угрозу окружающей среде и здоровью населения. На сегодняшний день не существует способа для окончательного предотвращения распространения токсинопродуцирующих микроскопических грибов. Однако есть несколько стратегий, которые способны временно ингибировать рост и развитие биопатогена (Rahman et al., 2018; Singh et al., 2021; Trejo-Raya, 2021; Steglinska, 2022). Биобезопасность растений, несеменного, семенного зерна, продуктов питания для человека - важный аспект современного мира, основа здорового существования растений, животных и человека.

Контаминация микроскопическими грибами может произойти как в полевых

условиях, так и во время хранения зерна. При попадании в организм животных и

человека микроскопические грибы и их токсины вызывают микотоксикозы,

которые приводят к увеличению заболеваемости, снижению продуктивности

животных (Streit et al., 2012; K^pinska-Pacelik, Biel, 2021; Awuchi et al., 2022). Одной

6

из наиболее перспективных стратегий биологической безопасности продовольственного сырья является применение биологических средств на основе бактерий и их метаболитов, отличающихся биологической безопасностью и отсутствием токсичности для животных и человека.

Степень разработанности проблемы

По данным на 2018 г. на территории России зарегистрированы и разрешены к использованию свыше 40 биологических средств для защиты растений, около 50% из них являются биофунгицидами (Государственный каталог пестицидов..., 2018). Ежегодно количество биологических средств защиты растений от токсинопродуцирующих микроскопических грибов растет. Исследователи из ФГБНУ ФНЦ ВНИИМК г. Краснодар разработали биологические препараты Вермикулен и Хетомин, действие которых основывается на антогонизме грибов Penicillium vemiculatum и Chaetomium. Ученые КГАУ и ФГБНУ СКФНЦСВВ г. Краснодар получили биофунгицид Ампеломицин, действующим объектом которого является гриб Ampelomyces quisqualis. Первое средство на основе бактерии Pseudomonas, Планриз, в конце 1980-х годов разработал А.Н. Перебитюк (Институт Генетики и Цитологии НАН Беларуси) на основе Pseudomonas fluorescens. Затем ученые из России смогли разработать биофунгициды на основе бактерий Ps. fluorescens и Pseudomonas aureofaciens. Например, Псевдобактерин, зарегистрированный в 1999 году, на основе Ps. aureofaciens - ИБ51 разработанный в Институте биологии Уфимского научного центра РАН. Псевдобактерин-2, в институте биохимии и физиологии микроорганизмов РАН, г. Пущино Московская обл. и многие другие. Первым зарегистрированным биопрепаратом на основе Bacillus subtilis является Бактофит, полученный ГНЦ прикладной микробиологии, пос. Оболенск, Московской области и ПО «Сиббиофарм». Позже были разработаны Алирин-Б и Гамаир (ВИЗР), и Фитоспорин (Республика Башкортостан). По данным ФГБУ «ВНИИ защиты растений», более востребованными биопрепаратами являются инсектицидные препараты, в основе которых Bacillus thuringiensis (https://apknet.ru/sovershenstvovanie-texnologii-i-sred/). Данные о новых штаммах бактерий-антагонистов микроскопических грибов

7

позволят сформировать предпосылку для разработки нового средства защиты растений, способа защиты зерна от микроскопических грибов и микотоксинов, решения проблем агроэкологии в условиях России. Однако необходимо сконцентрировать свое внимание и на правильности отбора антагонистов, и на том, что высокая контаминация токсинопродуцирующими микроскопическими грибами при всем многообразии биофунгицидов, так и не снизилась. В соответствии с этим необходимо структурировать и унифицировать последовательность действий при отборе антагонистов.

Цели и задачи исследования

Цель данной работы - разработка, теоретическое и практическое обоснование методологии отбора эффективных антагонистов для последующего их применения в комплексе мер по защите несеменного зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами и микотоксинами.

В ходе работы решались следующие задачи:

1. Оценить антагонистическую активность бактерий, выделенных из почвы и ризосферы, в отношении Aspergillusflavus и Fusarium sporotrichioides в условиях in vitro.

2. Выбрать перспективные антагонисты A. flavus и F. sporotrichioides на основании их ферментативной и антагонистической активности.

3. Оценить влияние бактериальной суспензии на рост тестовых фитопатогенов, на способность к ингибированию синтеза микотоксинов (афлатоксин В1 и зеараленон) в зерне, контаминированном A. flavus и F. sporotrich ioides.

4. Оценить эффект обработки зерна культуральной жидкостью, содержащей экзометаболиты, образовавшиеся в результате культивирования бактерий, на рост A. flavus и F. sporotrichioides, а также содержание микотоксинов (афлатоксин В1 и зеараленон).

5. Определить биологическую безопасность перспективных антагонистов.

6. Усовершенствовать алгоритм отбора эффективных антагонистов для защиты несеменного зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами и микотоксинами.

Научная новизна полученных результатов

Впервые разработан, теоретически и практически обоснован интегрированный подход отбора эффективных, биологически безопасных бактериальных антагонистов для защиты несеменного зерна как от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами, так и микотоксинами.

Впервые предложен способ обработки несеменного зерна (перед высушиванием и закладкой на хранение) трехсуточной бактериальной суспензией депонированного штамма B. 8ыЫШ8-93 (в дозе 5 мл/кг с концентрацией 1 х 1010 КОЕ/мл) для подавления роста А. /1ауш и F. sporotrichoides и снижения уровня содержания микотоксинов афлатоксин В1 и зеараленон.

Достоверность полученных результатов

Описанные в диссертационной работе результаты получены с использованием современных экологических, микробиологических, биохимических методов. Представленные в работе результаты являются воспроизводимыми, достоверность доказана статистическими методами. Результаты опубликованы в рецензируемых российских и зарубежных журналах и доложены на всероссийских и международных конференциях, соответствующих тематике диссертационного исследования.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные данные вносят вклад в формирование новых знаний об антагонизме бактерий и токсинопродуцирующих грибов, их экотоксикологического статуса. Полученные результаты могут стать теоретической основой поиска активных ингибиторов не только A. flavus и F. sporotrichoides, но и других микроскопических грибов, продуцирующих микотоксины.

Разработанный интегрированный подход может использоваться при

проведении агроэкологических мероприятий для защиты растений и

9

продовольственного сырья. Полученные результаты легли в основу патента на изобретение «Способ обработки несеменного зерна, пораженного микроскопическими грибами и микотоксинами» (Пат. 2650792, 2017). Используемые методы и подходы в изучении почвенных микроскопических грибов отображены в опубликованном учебном пособии и методических рекомендациях, результаты диссертационной работы могут использоваться в учебном процессе при чтении лекций и проведении практических занятий по таким дисциплинам, как «Основы биологической безопасности», «Экологическая эпидемиология», «Экологические основы инфекционной патологии организмов», в рамках основных образовательных программ высшего образования бакалавриата и магистратуры по направлению «Экология и природопользование».

Положения, выносимые на защиту:

1. Для определения наиболее активных антагонистов необходимо использовать комбинацию методов (двойных (встречных) культур, агаровых блоков, модифицированного штриха, отсроченного антагонизма), позволяющую выделить бактерии с универсальными свойствами, включая алиментарный антагонизм, конкуренцию за субстрат, антибиотический антагонизм.

2. Бактерии, проявляющие антагонизм по отношению к А. Аоуш и К sporotrichoides за счет быстрого роста при культивировании в искусственных условиях и активности метаболитов, рекомендуется использовать для разработки биопрепаратов, основой которых являются экзометаболиты этих штаммов; а проявляющие антагонизм за счет быстрого роста в естественной среде (зерно) и активности метаболитов - в виде суспензии, содержащей непосредственно сами живые штаммы.

3. Разработанный алгоритм, включающий определение антагонистической активности, изучение ферментативных свойств, моделирование процессов контаминации зерна токсинопродуцирующими микроскопическими грибами в лабораторных условиях и подтверждение биологической безопасности, позволяет выявить наиболее эффективные бактерии-антагонисты для защиты несеменного

зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами и микотоксинами.

Апробация полученных результатов

Материалы диссертационной работы представлены и доложены на конференциях: VII междунар. конф. молодых ученых: биофизиков, биотехнологов, молекулярных биологов и вирусологов (Новосибирск, 2020); Всероссийской с междунар. участием онлайн конф.: «Современная биотехнология: актуальные вопросы, инновации и достижения» (Кемерово, 2020); Всероссийском конгрессе по медицинской микробиологии, эпидемиологии, клинической микологии и иммунологии (XXIII Кашкинские чтения) (Екатеринбург, 2020); Междунар. науч. -практ. конф. «Экология и природопользование» (Магас, 2020); Междунар. науч.-практ. конф. «Современная ветеринарная наука: теория и практика» (Ижевск, 2020); I Междунар. науч. -практ. конф. «Обеспечение устойчивого развития в контексте сельского хозяйства, зеленой энергетики, экологии и науки о Земле» (ESDCA-I-2021) (Смоленск, 2021); Междунар. науч.-практ. конф.: «Развитие АПК в условиях роботизации и цифровизации производства в России и за рубежом» фАЮЯА 2021) (Екатеринбург, 2021).

Место выполнения работы и личный вклад соискателя

Основные экспериментальные работы выполнены на кафедре прикладной экологии, учебно-научной лаборатории «Центр агро- и экобиотехнологий» Института экологии и природопользования Казанского (Приволжского) федерального университета. Часть экспериментов была проведена автором в рамках договора о сотрудничестве между кафедрой прикладной экологии ИЭиП КФУ и ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Автор принимал участие в планировании и осуществлении экспериментальной части работы. Автором был проведен анализ, статистическая обработка полученных данных и интерпретация полученных результатов. Соавтором публикаций является научный руководитель, доцент кафедры прикладной экологии Э.А. Шуралев, участвовавший в обсуждении результатов.

Связь работы с научными программами

Выполнение диссертационного исследования проходило в рамках поддержанного гранта РФФИ «Аспиранты» (номер 20-316-90001) (Конкурс на лучшие проекты фундаментальных научных исследований, выполняемые молодыми учеными, обучающимися в аспирантуре) на тему: «Роль сапрофитных микроорганизмов в ингибировании синтеза и деградации микотоксинов».

Соответствие паспорту научной специальности

Результаты проведенного исследования соответствуют п.2 и п.10 паспорта специальности 1.5.15. Экология.

Публикации полученных результатов

По теме диссертационной работы опубликовано 15 печатных работ, в том числе 2 статьи, цитируемые в международных библиографических и реферативных базах данных Scopus и Web-Of-Science, 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования РФ, 1 учебное пособие, 1 методические рекомендации для студентов, обучающихся по направлению «Экология и природопользование», а также 1 патент на изобретение.

Объем и структура диссертационной работы. Текст диссертационной работы изложен на 177 страницах компьютерного текста, иллюстрирован 28 рисунками и 32 таблицами. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, практического предложения, списка литературы, включающего 97 отечественных и 113 иностранных источников, и приложений.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Экология и биология грибов вида Fusarium sporotrichioides

F. sporotrichioides (Sherb.) Bilai (1953) широко распространен на территории Планеты Земля. Данный вид грибов обладает способностью продуцировать широкий спектр микотоксинов трихотеценового ряда, включая Т-2 токсин, дезоксиниваленол, фумонизины, зеараленон, монилиформин,

диацетоксисцирпенол, фузаровую кислоту (Bottalico, Perrone, 2002; Гагкаева и др., 2009; Попов и др., 2018). F. sporotrichioides можно причислить к одному из наиболее опасных фитопатогенов, который способен повлиять на дальнейшее развитие всей экосистемы (Гагкаева и др., 2011; Идиятов и др., 2018). Грибковые фитопатогены растений воздействуют на снижение качества и уровня урожая растений, ингибируют продуктивность животных, снижают иммунитет (Streit et al., 2012). Эти факторы - угроза здоровью животных и человека.

F. sporotrichioides обладает способностью к росту и развитию при различных условиях окружающей среды (Bottalico, Perrone, 2002; Гагкаева и др., 2014; Bernhoft et al., 2022). Морфологические признаки грибов рода Fusarium достаточно разнообразны, данный род широко распространен на однодольных и двудольных растениях. Внешне микроскопические грибы этого рода обладают схожими чертами, однако на уровне микроструктур прослеживаются различия. Например, у F. sporotrichioides наблюдается наличие прямых конидиеносцев, на кончиках которых разветвлены монофиалиды и полифиалиды, макроконидии выглядят веретеновидно - серповидными, отмечено сужение апикальной клетки к концу, базальная клетка выражена, чаще всего отмечается от трех до семи перегородок. Гифы способны образовывать добавочные охряно-коричневые хламидоспоры. Микроконидии образуют ложные головки, характеризующиеся шарообразной и грушеобразной формой с заоостренным или овальным концом, чаще всего одноклеточные, выделяют от одной до трех перегородок. Точное соотношение макро- и микроконидий по количеству сложно определить, так как это зависит от штаммов, условий культивирования и возраста культуры. Отмечено редкое

формирование спородохий и более частое - склероций. На твердой питательной среде данный вид образует пушистый мицелий бело-розового, розоватого, желтоватого или красноватого цветов (Гагкаева и др., 2008).

Период 1932-1945 гг. ознаменован появлением в России и близлежайших странах опасного заболевания, связанного с F. sporotrichioides - септической ангиной, а именно алиментарно-токсической алейкией. Население Алтайского края, Куйбышевской, Оренбургской, Саратовской, Ульяновской, Тамбовской, Ярославской, Кировской областей, Республики Татарстан и Башкортостан, Казахстана серьезно пострадало от этого заболевания (Саркисов, Квашнина, 1948; Гагкаева и др., 2011). Распространение данной инфекции произошло из-за употребления в пищу зерновых культур, которые были контаминированы еще на стадии роста и развития растений на полях неправильно подготовленных для посадки зерновых культур. Ярко выраженными симптомами септической ангины были: головная боль, высокая температура, озноб, боль в мышцах, суставах, тошнота, рвота, что являлось предпосылкой для развития геморрагического диатеза, в последствии формирования кровоточащих язв. В тот период пострадал не только урожай, но и животные, потреблявшие солому с неубранных полей, оставленную под снегом до весны. В 1941-1944 гг. отмечен пик заболеваемости. В течение 9 месяцев 1944 г. в Республике Башкортостан от данной инфекции пострадало более 14000 человек, а в Республике Татарстан около 7000, Оренбургской области около 4000. В 1944 г. группа ученых под руководством А.Х. Саркисова установила, что главной причиной этого заболевания является гриб F. sporotrichioides, который паразитировал на сельскохозяйственных растениях, выделяя микотоксины (Саркисов, Квашнина, 1948; Гагкаева и др., 2011). Однако подробное описание этого токсина произошло лишь в 1968 г. в Японии, Т-2 токсин. При выделении микотоксина, было ошибочно предположено, что его продуцентом является Fusarium tricinctum, позже определили, что данный гриб являлся F. sporotrichioides (Гагкаева и др., 2011).

Однако это не единственная грибковая инфекция, связанная с описываемым микромицетом. Широкую известность приобрело заболевание, которое коснулось

14

каждого третьего новорожденного ребенка на Алтае. Это так называемая «желтуха неясного генезиса». Признаками данного заболевания является поражение нервной системы, почек и т.п. Был исследован урожай алтайского зерна и результаты показали, что все зерно поражено грибами видов Fusarium poae и F. sporotrichioides — продуцентами Т-2 токсина (Охапкина, Ханжин, 2012). Данное заболевание является известным примером того, насколько опасны грибы р. Fusarium и продуцируемые ими микотоксины (Гагкаева и др., 2011).

Таким образом, исторические данные являются доказательством того, что при неконтролируемом распространении токсинпродуцирущего микроскопического гриба F. sporotrichioides возможна вспышка грибковых инфекций, которая приводит к снижению количественного и качественного состава урожая, численности популяции животных и человека. Необходимо разрабатывать способы, ингибирующие рост и развитие плесневого гриба и дезактивирующие действие продуцируемых им микотоксинов.

1.2 Экология и биология грибов вида Aspergillus flavus

A. flavus принадлежит к отделу Ascomycota и семейству Trichomaceae. На сегодняшний день A. flavus приобретает все большую «популярность», так как именно данный микроскопический гриб является вторым по значимости объектом, вызывающим инвазивный аспергиллез и поверхностные инфекции (Krishnan et al., 2008). При проведении лабораторных исследований и сравнивая внутренние инфекции, вызванные у мышей A. flavus, можно сделать вывод, что данный гриб достаточно вирулентен. Распространенные симптомы, связанные с A. flavus представляют собой синусит, кожный аспергиллез, инфекции и остеомиелит после травмы и вакцинации (Chang et al., 2014). A. flavus ответственен за 10% бронхолегочных инфекций (Krishnan et al., 2008). Основной способ заражения человека - воздушно-капельный: через вдыхание конидий или поступление с пищей. Существуют также вторичные пути передачи: через контакт с кожей или раной, загрязнение внутривенных растворов, раневых повязок. Заболевания,

связанные с распространением A. flavus наиболее часто встречаются у людей занимающихся сельскохозяйственной деятельностью. Согласно статистике, работники этой сферы чаще болеют аллергическими респираторными заболеваниями, включая астму (Krishnan et al., 2008). A. flavus продуцирует афлатоксины - токсичные, гепатокарциногенные природные соединения (Hedayati et al., 2007; Chang et al., 2014). Одним из интересных веществ, которое синтезирует A. flavus, является циклопиазоновая кислота (CPA) - индол-тетрамикислый микотоксин. Его роль в экологии гриба неизвестна. Однако изучено, что CPA является ингибитором кальций-зависимой аденозинтрифосфатазы в саркоплазматическом ретикулуме, воздействие которого у некоторых животных приводит к некрозу органов и смерти. A. flavus продуцирует афлатоксины в специализированных эндосомах мицелия и впоследствии они секретируются в окружающую среду. Афлатоксины также были обнаружены во всех клеточных структурах грибов, включая мицелий, конидии и склероции (Calvo, Cary, 2015). Данный гриб широко распространен по всему миру, чаще всего его можно обнаружить в почве в виде конидий или склероций, в виде мицелия, проникнувшего в ткани растений. Его относят к числу факультативных паразитов, сапротрофов. A. flavus является оппортунистическим патогеном животных и людей с ослабленным иммунитетом (Chang et al., 2014).

По морфологическим характеристикам колонии A. flavus плоские, зернистые, пушистые, с выемками. Поверхность колонии на начальном этапе роста желтая, но по мере развития приобретает темно-желтовато-зеленый цвет, характерно отличающийся от поверхности других обычно встречающихся Aspergillus spp., таких как Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus nidulans и Aspergillus terreus. Гифы стекловидные, прозрачные, разветвляющиеся под углом 45 начало конидиофоры (до 800 мкм длиной и 15-20 мкм шириной) берут из поддерживающих гифов и заканчиваются пузырьками на вершине, а везикула (2045 мкм) шаровидная с излучениями. Фиалиды могут присоединяться к везикуле непосредственно или через поддерживающую клетку, называемую метулой (8*5

мкм). Конидии имеют диаметр 2-5 мкм. Склероции A. flavus имеют ключевое

16

значение в их идентификации. In vitro A. flavus хорошо растет на декстрозном агаре Сабуро, Чапек-агаре, солодовом экстракте при 37 °C, а прорастание конидий происходит через 24 ч. Первичный рост наблюдается за счет апикального гифального расширения (Sutton et al., 1998; Krishnan et al., 2008). Этот токсинообразующий гриб термотолерантен, поэтому широко распространён по всему миру. Наиболее благоприятными условия для его роста и развития являются жаркие и влажные климатические условия, оптимум по влажности наблюдается в пределах 13-14 %. Температурный минимум и максимум, при котором они растут колеблется в диапазоне от 12-50 °C, а оптимальная температура роста составляет 37 °C. Конидии являются гидрофобными и легко переносимыми по воздуху со способностью прорастать в широком диапазоне условий (Foley et. al., 2014). A. flavus имеет сложноустроенную морфологию с двумя морфотипами, основой в различии которых является образование склероций. Первый морфотип L, который характеризуется низким уровнем образования афлатоксинов и в тоже время способностью к образованию большого количества склероциев и конидиоспор. Второй тип S, с высоким уровнем образования афлатоксина и более низким конидиоспор и склероциев (Foley et al., 2014; Попов и др., 2018). В работе A.M. Calvo и J.W. Cary (2015) обсуждается вопрос о постоянном присутствии метаболитов в одном склеротическом морфотипе по сравнению с другим, что в конечном итоге может оказать влияние на роль микотоксинов в склеротическом морфогенезе.

Изучением A. flavus в качестве растительного фитопатогена занимаются

разные исследователи. Например, S. Montalbano (2021) в своем исследовании

обсуждает проект «Aflatox», основой которого является разработка ингибиторов

нового поколения против аспергилла. Отобраны наилучшие кандидаты для

сдерживания афлатоксинов, их оценили по многим критериям - цитотоксичности,

генотоксичности и эпигенотоксичности, чтобы исключить потенциальное вредное

воздействие на растения на которых растут грибы, и всю экосистему (Montalbano

et al., 2021). El-Baky (2021) с соавторами утверждает, что грибковые инфекции

растений могут возникать из многих источников, таких как контаминированная

17

почва, семена или остатки урожая. И чтобы внести свой вклад в борьбу с данным фитопатогеном он изучил протокол борьбы A. flavus и A. niger на растении.

Следовательно, A. flavus является интересным объектом для изучения и способы для дезактивации данного микромицета и его микотоксинов изучены не полностью. Это является основанием для более детального поиска способов для ингибирования роста и развития микромицета и блокирования синтеза афлатоксинов для сохранения высокого уровня урожая, здоровья животных и человека.

1.3 Биологические эффекты загрязнения среды микотоксинами грибов родов Fusarium и рода Aspergillus

Наиболее опасными вторичными метаболитами микроскопических грибов являются микотоксины. Они существовали всегда, еще со времен выращивания первых культур растений, но изучение их химической структуры и признание как продукта метаболизма микромицетов произошло совсем недавно. Имеются исторические доказательства существования микотоксинов еще до времен, когда обнаружен афлатоксин в 1960-е годы. Вторичные метаболиты грибов чаще всего рассмотрены в качестве продуктов, образующихся в процессе хранения зерна (Richard, 2007).

Глобальное распространение микотоксинов считается основным фактором риска для здоровья животных и человека (Sifri, 2006). Плесневые грибы родов Fusarium и Aspergillus синтезируют вторичные метаболиты в процессе роста и развития на растениях, неправильной предпосевной обработки сельскохозяйственных земель, сбора, хранения и переработки зерновых культур. Большое влияние на этот процесс оказывают факторы окружающей среды (Streit et al., 2012; Попов и др., 2018). В.С. Попов утверждает: «согласно данным организации по продовольствию и сельскому хозяйству при ООН (ФАО) 25 % производимого в мире зерна загрязнено микотоксинами» (Krska et al., 2012; Попов и др., 2018). Негативные последствия попадания в организм животного или

человека продукции микроскопических грибов в концентрациях, превышающих ПДК выражаются в острой токсической реакции, то есть в микотоксикозе (Bryden, 2012; Streit et al., 2012; Попов и др., 2018). Для плесневых грибов данный продукт необходим в качестве средства защиты, которое продуцируется при колебаниях температуры, влажности, концентрации кислорода, при антагонизме с бактериями в почве. Данная «защита» является ответом на окислительный стресс, являясь компонентом, перехватывающим избыточно активный кислород, который опасен для гриба; выполняет роль химического сигнала при взаимодействии разных видов микроорганизмов (Джавахия и др., 2017; Попов и др., 2018).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Хабирова Светлана Рашидовна, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алексеева, А. С. Антагонистическая активность растительно-бактериальных ассоциантов [Текст] / А.С. Алексеева, М.Н. Артамонова, Н.И. Потатуркина-Нестерова // Журнал Фундаментальные исследования. - 2013. - №11 (часть 5) - С. 929-932.

2. Алимова, Ф.К. Некоторые вопросы применения препаратов на основе грибов рода Trichoderma в сельском хозяйстве [Текст] / Алимова Ф.К. // «АГРО ХХ1». Научно-практический журнал. - 2006. - №4 - 6. - С.18-21.

3. Амиров, Д.Р. Клиническая гематология животных: учебное пособие [Текст] / Д.Р. Амиров, Б.Ф. Тамимдаров, А.Р. Шагеева. - Казань: Центр информационных технологий КГАВМ, 2020. - 134с.

4. Аникиев, В.В. Руководство к практическим занятиям по микробиологии/ В.В. Аникиев, К.А. Лукомская // М., 1977. - с.112.

5. Артамонова, М.Н. Антагонистическая активность ассоциативных ризобактерий [Текст] / М.Н. Артамонова, А.С. Алексеева, Н.И. Потатуркина-Нестерова // Международный журнал экспериментального образования. - 2013. - №10 (часть 2). - С.276-279.

6. Архипов, И.А. Изучение Антагонистических взаимоотношений фитопатогенных и почвенных грибов [Текст] / И.А. Архипов // Сборник статей по материалам V научно-практической конференции молодых ученых (III всероссийской), Шаг в науку. Москва, 2022. - С.564-567.

7. Асатурова, А. М. Отбор перспективных агентов биологического контроля для защиты озимой пшеницы от возбудителей фузариоза [Текст] / А. М. Асатурова // Научный журнал КубГАУ. - 2012. - №75. - С.1-12.

8. Афанасьев, М.В. MALDI-ToF масс-спектрометрический анализ для идентификации возбудителей чумы, холеры и туляремии [Текст] / М.В. Афанасьев, Л. В. Миронова, С. В. Балахонов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - 2015. - №2. - С.3-9.

9. Бруслик, Н. Л. Сравнительная характеристика амилолитической активности грамположительных бактерий [Текст] / Н. Л. Бруслик, А. Р.

149

Каюмов, М. И. Богачев, Д. Р. Яруллина // Вестник ВГУ, Серия: химия. биология. Фармация. - 2014. - №2. - С.47-51.

10. Гагкаева, Т.Ю. Современная таксономия грибов из рода Fusarium раздел Sporotrichiella [Текст] / Т.Ю. Гагкаева, О.П. Гаврилова, М.М. Левитин // Микология и фитопатология. - 2008. - Т.42, Вып. 3. - С.201-214.

11. Гагкаева, Т.Ю. Зараженность зерна и видовой состав грибов рода Fusarium на территории РФ в 2004-2006 годах [Текст] / Т.Ю. Гагкаева, М.М. Левитин, С.С. Санин, Л.Н. Назарова //АГРО XXI. - 2009. - №4-6. -С.3-5.

12. Гагкаева, Т.Ю. Фузариоз зерновых культур [Текст] / Т.Ю. Гагкаева, О.П. Гаврилова, М.М. Левитин, К.В. Новожилов // Приложение к журналу «Защита и карантин растений». - 2011. - №5. - 52с.

13. Гагкаева, Т.Ю. Биоразнообразие и ареалы основных токсинопродуцирующих грибов рода Fusarium [Текст] / Т.Ю. Гагкаева, О.П. Гаврилова, М.М. Левитин // Биосфера. - 2014. - №1. - С.36-45.

14. Ганина, В.И. Изучение антагонистической активности и идентификация бифидобактерий и молочнокислых палочек, рекомендуемых для получения продуктов лечебно-профилактического назначения и пробиотиков [Текст] / В.И. Ганина, А.М. Лысенко, Ю.В. Гурьева, Н.Ф. Калинина // Биотехнология. - 1999. - №2. - С. 15-21

15. Глик, Б. Молекулярная биотехнология [Текст] / Б. Глик, Дж. Пастернак. -М: Мир, 2002. - С.88-89.

16. Госманов, Р.Г. Микробиология [Текст] / Р.Г. Госманов [и др.]. - СПб.: Лань, 2011. - 496с.

17. ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные Вещества. Классификация и общие требования безопасности [Текст] -М.: Стандартинформ, 2007. - 7с.

18. ГОСТ 10444.1-84 Консервы.Приготовление растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2010. - 18с.

150

19. ГОСТ 13496.6-71 Комбикорм. Метод выделения микроскопических грибов. Официальное издание [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2011. - 6с.

20. ГОСТ 31691-2012 Зерно и продукты его переработки, комбикорма. Определение содержания зеараленона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2013. - 13с.

21. ГОСТ 31748-2012 Продукты пищевые. Определение афлатоксина В1 и общего содержания афлатоксинов В1, В2, G1 и G2 в зерновых культурах, орехах и продуктах их переработки. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2014. - 22с.

22. ГОСТ 31674-2012 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения общей токсичности [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2014. -30с.

23. ГОСТ 32644-2014 Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Острая пероральная токсичность -метод определения класса острой токсичности [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2015. - 15с.

24. ГОСТ 34140-2017 Продукты пищевые, корма, продовольственное сырье. Метод определения микотоксинов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2017. - 23с.

25. ГОСТ 17.4.4.02-2017 Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа [Текст]. - М.: Стандартинформ, 2018. -12с.

26. ГОСТ 32519-2013 Методы испытаний по воздействию химической продукции на организм человека. Изучение хронической токсичности при внутрижелудочном поступлении[Текст]. - М.: Стандартинформ, 2019. - 16с.

27. Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, Минсельхоз России, Москва, 2018. - С.2971.

28. Градова, Н.Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии [Текст] / Н.Б. Градова, Е.С. Бабусенко, И.Б. Горнова. - М.: ДеЛи принт, 2004. -144с.

29. Гуревич, П. А. Антагонистическая активность некоторых штаммов рода Bacillus против фитопатогенных микромицетов [Текст] / П. А. Гуревич, В. М. Крутьков, Б. П. Струнин, М. Г. Тимофеева, Г. Э. Актуганов, А. М. Колбин, Т. Б. Пахомова // Вестник Казанского технологического университета. - 2012. - №11. - С.137-139.

30. Джавахия, В.Г. Некоторые природные и синтетические соединения, блокирующие биосинтез афлатоксина В1 и меланина у Aspergillus flavus [Текст] / В.Г. Джавахия, Т.М. Воинова, С.Б. Поплетаева, Н.В. Стацюк, О.Д. Микитюк, Т.А. Назарова, Л.А. Щербакова // Сельскохозяйственная биология. - 2016. - №4. - C.533-542.

31. Джавахия, В.Г. Афлатоксины: ингибирование биосинтеза, профилактика загрязнения и деконтаминация агропродукции: монография [Текст] / В.Г. Джавахия, Н.В. Стацюк, Л.А. Щербакова, С.Б. Поплетаева. - М.: ООО Редакция журнала «Достижения науки и техники АПК», 2017. - 162с.

32. Донник, И.М. Руководство по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов с учетом региональных особенностей [Текст] / И.М. Донник, И.А. Шкуратова, И.А. Лебедева, М.В. Ряпосова, АЛО. Лошманова, H.A. Бсзбородова, H.H. Беспамятных, Н.В. Киселева, А.Г. Исаева, E.H. Беспамятных // Научные рекомендации. - Екатеринбург, 2012. - 48с.

33. Егоров, Н.С. Выделение микробов-антагонистов и биологические методы учета их антибиотической активности [Текст] / Н.С. Егоров. - М.: Изд-во МГУ, 1957. - 78с.

34. Жакслыкова, С.А. Антагонистическая активность бактериальных молочнокислых заквасок [Текст] / С.А. Жакслыкова, Р.Э. Хабибуллин, Г.Ю. Яковлева, О.А. Решетник // Вестник Казанского технологического университета. - 2014. - №10. - С.152-155.

35. Захарова, Ю.В. Механизмы резистентности бифидобактерий к липолитическим ферментам Staphylococcus aureus [Текст] / Ю.В. Захарова, Л.Ю. Отдушкина, Л.А. Леванова, А.С. Сухих // Фундаментальная и клиническая медицина. - 2017. - №1. - С.6-12.

36. Зверев, В. В. Микробиология, вирусология: руководство к практическим занятиям: учеб. пособие [Текст] / В. В. Зверев [и др. ; под ред. В. В. Зверева, М. Н. Бойченко. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2015. - 360с.

37. Идиятов, И.И. / Поиск эффективных средств биологической защиты растений и кормов против микромицета Aspergillus flavus [Текст] / И.И. Идиятов, С.Р.Галлямова, В.В.Бирюля, Л.Р.Валиуллин, К.Х. Папуниди // Ветеринарный врач. - 2017. - №5. - С.24-30.

38. Идиятов, И.И. Первичный скрининг микроорганизмов антагонистов к микроскопическим грибам Aspergillus flavus и Fusarium sporotrichioides / И.И. Идиятов, Д.А. Валиуллина, С.Р. Галлямова // Ученые записки КГАВМ. 2017. - №231(Ш). - С.90-93

39. Идиятов, И.И. Поиск антагонистов микромицета Fusarium sporotrichioides [Текст] / И.И. Идиятов, Л.Р. Валиуллин, С.Р. Галлямова, В.В. Бирюля // Аграрный вестник Урала. - 2018. - №3. - С.10-20.

40. Идиятов, И.И. Оценка воздействия пробиотических штаммов на инфузориях [Текст] / И.И. Идиятов, С.Р. Хабирова, А.М. Тремасова, А.И. Ерошин, В.В. Бирюля // Ветеринарный врач. - 2020. - №3. - С.21-27.

41. Идиятов, И.И. Оценка безопасности перспективных эндофитных штаммов [Текст] / И.И. Идиятов, А.И. Ерошин, Н.И. Хаммадов, С.Р. Хабирова // В книге: Современная биотехнология: актуальные вопросы, инновации и достижения. Сборник тезисов Всероссийской с

международным участием онлайн-конференции. Под общей редакцией А.Ю. Просекова. - 2020. - С.78-80.

42. Иркитова, А. Н. Сравнительный анализ методов определения антагонистической активности молочнокислых бактерий [Текст] / А. Н. Иркитова, Я. Р. Каган, Г. Г. Соколова // Известия АлтГУ. - 2012. - №3-1. - С.41-44.

43. Иркитова, А.Н. Оптимизация метода определения антагонистической активности пробиотических бактерий [Текст] / А.Н. Иркитова, Е.С. Яценко // ТППП АПК. - 2017. - №5(19). - С.113-117.

44. Кондакова, О. Э. Оценка биологической активности музейных культур микроорганизмов-антагонистов и их использование для предпосевной обработки семян сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.) in vitro [Текст] / О. Э. Кондакова, И. Д. Гродницкая // Вестн. Том. гос. ун-та. Биология. -2018. - №42. - С.54-68.

45. Концевая, И. И. Микробиология: культивирование и рост бактерий. Практическое руководство для студ. биологич. спец. вузов [Текст] / И. И. Концевая; М-во образования РБ, Гомельский гос. ун-т им. Ф. Скорины. -Чернигов: Десна Полиграф, 2017. - 44с.

46. Лабинская, А.С. Санитарно-микробиологическое исследование почвы. Руководство по медицинской микробиологии. Общая и санитарная микробиология [Текст] / Ред. А.С. Лабинская, Е.Г. Волина. - М.: БИНОМ, 2008. - С.825-890.

47. Ланкина, Е. П. Сравнительный анализ встречаемости бактерий-антагонистов к фитопатогенным грибам в бактериальных сообществах почв, почвоподобном субстрате и карстовых пещерах [Текст] / Е. П. Ланкина, С. В. Хижняк // Вестник КрасГАУ. - 2013. - №2. - С.65-68.

48. Левитин, М.М. Токсигенные грибы и проблемы продовольственной безопасности (обзор) [Текст] / М.М. Левитин, В.Г. Джавахия // Достижения науки и техники АПК. - 2020. - Т.34, №12. - С.5-11.

49. Ленченко, Е.М. Исследование антагонистических свойств и чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам [Текст] / Е.М. Ленченко, Ху Бинхун, Ю.В. Ломова // Аграрная наука. -2017. - №6. - С.17-22.

50. Леонтьев, В. Н. Основы токсикологии: учеб. -метод. пособие для студентов [Текст] / В. Н. Леонтьев, О. С. Игнатовец, Е. А. Флюрик. -Минск: БГТУ, 2014. - 148с.

51. Матросова, Л.Е. Фармако-токсикологическая и биологическая оценка ускорителя ферментации УФ-1 для переработки органических отходов животноводства): специальность 16.00.04 - «Ветеринарная фармакология с токсикологией»; 03.00.07 - «Микробиология»: диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук [Текст] / Матросова Лилия Евгеньевна: Федеральное государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт. - Казань, 2005. - 151с.

52. Орлова, С.Н. Выделение и изучение основных свойств липидоокисляющих микроорганизмов [Текст] / С.Н. Орлова, Н.В. Герман, И.В. Владимцева, О.В. Колотова, И.С. Бойкова // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - №3. - С. 1-7.

53. Охапкина, В.Ю. Эколого-эпидемиологическое значение микромицетов рода Fusarium [Текст] / В.Ю. Охапкина, А. А. Ханжин // Теоретическая и прикладная экология. - 2012. - №2. - С.5-14.

54. Патент 2235771 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 01 N 63/00, Штамм бактерий p469 для получения преперата против болезней растений, вызываемых фитопатогенными грибами и бактериями [Текст] / Асланян Е.М., Галкина Н.Н., Добрица А.П., Коломбет Л.В., Корецкая Н.Г., Кочетков В.В.; заявитель и патентообладатель Государственное унитарное предприятие «Государственный научный центр прикладной микробиологии». - № 2002112565/13; заявл. 13.05.2002; опубл. 20.04.2004. - 5с.

55. Патент 2412989 Российская Федерация, МПК C12 N 1/00, A 61 K 35/74, Способ индивидуального определения антагонистической активности пробиотических препаратов, содержащих лактобактерии и/или бифидобактерии, в связи с условно-патогенными явлениями, выделенными при диагностике дисбактериоза кишечника [Текст] / Оришак Е.А., Нилова Л.Ю., Бойцов А.Г.; заявитель и патентообладатель Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». - № 2009145605/10; заявл. 08.12.2009; опубл. 27.02.2011 Бюл. №6. - 24с.

56. Патент 2478290 Российская Федерация, МПК7 A 01 N 63/02, A 01 C 1/06, C 12 N 1/20, C 12 R 1/07, Биопрепарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней, повышения урожайности и почвенного плодородия [Текст] / Сираева З.Ю., Захарова Н.Г.; заявитель и патентообладатель Общество с ограниченной ответственностью «Бациз». - № 2011145665/10; заявл. 11.11.2011; опубл. 10.04.2013 Бюл. №10. - 13с.

57. Патент 26082 Республика Казахстан, МПК C 12 Q 1/00, Способ определения целлюлозолитической активности чистой культуры микроорганизмов по разложению растительных остатков [Текст] / Науанова А. П.; заявитель и патентообладатель Акционерное общество «Казахский агротехнический университет им. Сакена Сейфуллина». - № 2011/1022.1; заявл. 05.10.2011; опубл. 14.09.2012, бюл. №9. - 4с.

58. Патент 2599416 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 01 N 63/02, C 12 R 1/07, Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней [Текст] / Чеботарь В. К., Ерофеев С.В.; заявитель и патентообладатель Общество с ограниченной ответственностью "БИСОЛБИ ПЛЮС". - № 2015137387/10; заявл. 02.09.2015; опубл. 10.10.2016, Бюл. №28. - 24с.

59. Патент 2539762 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 61 K 35/74, A 23 K 3/00 , A 01 N 63/00, C 12 R 1/125, Штамм бактерий Bacillus subtilis, обладающий способностью к расщеплению сахаров и антагонистическим действием в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий и грибов, и его применение [Текст] / Кузнецова Т. Н., Кузнецов В. И., Кузнецова М. В.; заявитель и патентообладатель Общество с ограниченной ответственностью Научно-внедренческое предприятие «БашИнком». - № 2013142897/10; заявл. 19.09.2013; опубл. 27.01.2015, Бюл. №3. - 10с.

60. Патент 2553518 Российская Федерация, МПК C 12 R1/125, C 12 N1/20, A 01 N63/00 Штамм бактерий Bacillus subtilis для получения биопрепарата против фитопатогенных грибов [Текст] / Асатурова А.М., Дубяга В. М.; заявитель и патентообладатель Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук. - № 2013151377/10; заявл. 20.11.2013; опубл. 20.06.2015, Бюл. №17. - 9с.

61. Патент 2621356 Российская Федерация, МПК A 01 N63/00, C 12 N1/20 Биофунгицид для защиты сельскохозяйственных культур от болезней и повышения урожайности [Текст] / Асатурова А.М., Томашевич Н. С., Жевнова Н. А., Хомяк А. И., Дубяга В. М., Павлова М. Д., Козицын А. Е., Сидорова Т.М.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений». -№ 2015151901; заявл. 03.12.2015; опубл. 02.06.2017, Бюл. №16. - 1с.

62. Патент 2588473 Российская Федерация, МПК C 12 N1/20, A 01 N63/02 Штамм бактерий Pseudomonas chlororaphis для защиты растений от фитопатогенных грибов и бактерий и стимуляции роста растений [Текст] / Анохина Т.О., Сиунова Т. В., Сизова О. И., Кочетков В. В., Боронин А. М.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и физиологии им. Г.К.

157

Скрябина Российской академии наук (ИБФМ РАН). - № 2015118653/10; заявл. 20.05.2015; опубл. 27.06.2016, Бюл. №18. - 14с.

63. Патент 2650792 Российская Федерация, МПК A 01 N 63/00, C 12 N 1/20, C 12 R 1/125 Способ обработки несеменного зерна, пораженного микроскопическими грибами и микотоксинами [Текст] / Идиятов И.И., Валиуллин Л.Р., Бирюля В.В., Галлямова С.Р., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х., Никитин А.И., Валидов Ш.З.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ). - № 2007124405/13; заявл. 28.06.2017; опубл.10.11.2018, Бюл. №31. - 6с.

64. Патент 2701500 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 01 N 63/02, C 12 R 1/07 Штамм спорообразующих бактерий Bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным действием против фитопатогенных грибов, вызывающих заболевания овощных растений, биологический препарат на его основе [Текст] / Кузнецова Н. И., Азизбекян Р. Р., Кузин А. И., Николаенко М. А., Сунь Ч., Лю Ц., Сюн Р., Цзо Ц.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное учреждение Государственный генетика научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра «Курчатовский институт» (НИЦ Курчатовский институт» - ГосНИИгенетика). - № 2018134212; заявл. 28.09.2018; опубл. 26.09.2019, Бюл. №27. - 14с.

65. Патент 2724464 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 01 N 63/00, A 01 P 3/00, A 01 C 1/06, C 12 R 1/07 Штаммы, биопрепарат, способ получения биопрепарата и способ биологической защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза [Текст] / Чистяков В.А., Говорцов А.В., Усатов А.В., Празднова Е.В., Мазанко М.С., Брень А.Б., Усатова О.А., Вассильченко Н.Г.; заявитель и патентообладатель

Общество с ограниченной ответсвтенностью «Агрофирма Урожайная». -№ 2019139147; заявл. 02.12.2019; опубл. 23.06.2020, Бюл. №18 - 87с.

66. Патент 2764695 Российская Федерация, МПК C 12 N 1/20, A 01 N 63/22, C 12 R 1/125. Штамм Bacillus subtilis subsp. subtilis - антагонист фитопатогенных микромицетов с ростостимулирующими свойствами и микробное средство на их основе для повышения продуктивности сельскохозяйственных растений и защиты от грибковых заболеваний [Текст] / Каменева И. А., Мельничук Т.Н., Алексеенко Н.В., Якубовская А. И., Паштецкий В. С., Абдурашитов С. Ф., Гритчин М. В., Смирнова И. И.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский институт развития хозяйства Крыма». - № 2020140456; заявл. 08.12.2020; опубл. 19.01.2022, Бюл. №2 - 10с.

67. Поликсенова, В.Д. Методические указания к занятиям спецпрактикума по разделу «Микология. Методы экспериментального изучения микроскопических грибов» [Текст] / Авт.-сост. В.Д. Поликсенова, А.К. Храмцов, С.Г. Пискун. - Мн.: БГУ, 2004. - 36с.

68. Полякова, М.А. Исследование зависимости антагонистических свойств грибов рода Trichoderma spp. от количественного содержания источника углерода в питательной среде [Текст] / М.А. Полякова, Е.В. Ревкова // Вестник ОрелГАУ. - 2017. - №2. - C.57-61.

69. Попов, Д.А. Применение метода MALDI-TOF MS в современной микробиологической лаборатории [Текст] / Д.А. Попов, С.Т. Овсеенко, Т.Ю. Вострикова // ФГБУ НЦ ССХ ИМ. А.Н. Бакулева Минздрава Россиию. - 2016. - C.53-56.

70. Попов, В. С. Проблемы микотоксикозов в современных условиях и принципы профилактических решений: монография [Текст] / В. С. Попов, Н. В. Самбуров, Н. В. Воробьева. - Курск: Планета+, 2018. - 158 с.

71. Рябова, О. В. К вопросу разработки микробиологических препаратов (фунгицидов и удобрений) для условий Северо-Востока европейской

159

части Российской Федерации [Текст] / О. В. Рябова // Аграрная наука Евро-Северо-Востока. - 2016. - №1 (50). - С.1-10.

72. Савицкая, И. С. Принципы отбора штаммов для нового лактосодержащего пробиотика [Текст] / И. С. Савицкая, А. С. Кистаубаева, М. Абдулжанова, Ж. Жумагалиева // Вестник КазНУ. Серия биологическая. - 2012. - Т. 56, № 4. - С.227-232.

73. Саркисов, А.Х. Новые токсико-биологические свойства гриба Fusarium sporotrichioides Sherb. [Текст] / А.Х. Саркисов, Е.С. Квашнина // Доклады АН СССР. - 1948.

74. Сейкетов, Г.Ш. Грибы рода Trichoderma и их использование в практике [Текст] / Г.Ш. Сейкетов // Алма-Ата: Наука, 2011. - 245с.

75. Сергеюк, Н.П. Научные основы оценки опасности и гигиенической регламентации промышленных микроорганизмов: специальность 14.00.07 - «Гигиена»: диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук наук: [Текст] / Сергеюк Надежда Павловна: ФГАОУВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет». -Казань, 2012. - 240с.

76. Сидорова, Т.М. Биологически активные метаболиты Bacillus subtilis и их роль в контроле фитопатогенных микроорганизмов [Текст] / Т.М. Сидорова, А.М. Асатурова, А.И. Хомяк // С.-х. биол. - 2018. - №1. - С.29-37.

77. Сидорова, Т. М. Особенности антагонизма бактерий рода Bacillus по отношению к токсиногенным грибам Fusarium при защите растений от болезни и контаминации микотоксинами (обзор) [Текст] / Т. М. Сидорова, А. М. Асатурова, В. В. Аллахвердян // Юг России: экология, развитие. -2021. - Т.16, №4. - С.86-103.

78. Соколова, Г.Д. Антагонисты фитопатогенного гриба Fusarium graminearum [Текст] / Г.Д. Соколова, А.П. Глинушкин // Микология и фитопатология. - 2017. - Т. 51, №4. - С. 191-201.

79. Теппер, Е.З. Практиккум по микробиологии [Текст] / Е.З. Теппер, В.К. Шильникова, Г.И. Переверзева. - М.: Дрофа, 2004. - 256с.

80. Технический регламент Таможенного союза ТРТС 021-2011 О безопасности пищевой продукции. Официальный сайт Комиссии Таможенного союза www.tsouz.ru, 15.12.2011.

81. Тимохина, Т.Х. Способ получения экзометаболитов бифидобактерий с высокой антимикробной активностью [Текст] / Т.Х.Тимохина, А.А. Марков, Я.И. Паромова, В.Н. Самикова, Н.Б. Перунова // Медицинская наука и образование Урала. - 2016. -№2. - С.152-154.

82. Франк, Р. И. Биопрепараты в современном земледелии [Текст] / Р. И. Франк, В. И. Кищенко // Защита и карантин растений. - 2008. - №4. -С.30-32.

83. Ха, Т. З. Ключевой стимулятор роста растений - ризобактерии Текст: непосредственный [Текст] / Т. З. Ха, и др. // Вестник ПГТУ. Серия: Лес. Экология. Природопользование. - 2020. - №3(47). - С 58-73.

84. Хабирова, С.Р. Гидролазы как ферментативный инструмент борьбы с токсигенными микромицетами [Текст] / С.Р. Хабирова, И.И. Идиятов, Э.А. Шуралев // В книге: VII Международная конференция молодых ученых: биофизиков, биотехнологов, молекулярных биологов и вирусологов. в рамках площадки открытых коммуникаций 0репВю-2020, 2020. - С. 165-167.

85. Хабирова, С.Р. Оценка безвредности, вирулентности и токсигенности антагонистов токсигенных микромицетов [Текст] / С.Р. Хабирова, И.И. Идиятов, Э.А. Шуралев // В сборнике: Современная ветеринарная наука: теория и практика.Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 20-летию факультета ветеринарной медицины Ижевской ГСХА. Ижевск, 2020. - С.213-217.

86. Хабирова С.Р. Оценка безопасности консорциума выделенных из

природных биотопов микроорганизмов- антагонистов микромицетов

161

[Текст] / С.Р. Хабирова, И.И. Идиятов, Э.А. Шуралев // В сб.: Экология и природопользование. Материалы Международной научно-практической конференции (г. Магас, 21-23 октября 2020 г.). - Назрань, ООО «КЕП», 2020 - С.312-317.

87. Хабирова, С.Р. Оценка ингибирования роста микромицета Aspergillus flavus почвенными и эндофитными сапрофитами [Текст] /С.Р. Хабирова// Проблемы медицинской микологии. - 2020. - Т. 22, №3. - С. 141.

88. Хабирова С.Р. Ингибирующее влияние экзометаболитов ризосферных бактерий на синтез афлатоксина В1 фитопатогеном Aspergillus flavus [Текст] / С.Р. Хабирова // Естественные и технические науки. - 2022. -№4 (167). - С.47-51.

89. Хабирова, С.Р. Биотестирование безопасности микробных биопрепаратов, потенциальных кандидатов для использования в качестве антагонистов Aspergillus flavus и Fusarium sporotrichioides / С.Р. Хабирова, Э.А. Шуралев // Естественные и технические науки. - 2022. -№11(174). - C.55-62.

90. Хайруллин, Р.М. Новый подход к экологическому безопасному контролю уровня микотоксинов в продукции растениеводства [Текст] / Р.М. Хайруллин, Д.Р. Уразбахтина // Биомика. - 2012. - Т.2. - №2. - С.68-75.

91. Шеина, Н. И. Критерии оценки биобезопасности микроорганизмов, используемых в биотехнологической промышленности [Текст] / Н. И. Шеина // Вестник ОГУ. - 2012. - №6 (142). - С.165-169.

92. Шмидт, К. Н. Выделение новых штаммов-деструкторов целлюлозы, их роль в снижении антропогенной нагрузки на экосистему [Текст] / К. Н. Шмидт, Г. Г. Худайгулов // Вестник Южно-Уральского государственного университета. Серия: Пищевые и биотехнологии. -2016. - №4. - С.1-10.

93. Штерншис, М. В. Тенденции развития биотехнологии микробных средств защиты растений в России [Текст] /М. В. Штерншис // Вестн. Том. гос. ун-та. Биология. - 2012. - №2(18). - С.92-100.

94. Щербакова, Т. Антагонистическая активность гриба Trichoderma virens по отношению к патогенам Sclerotinia Sclerotiorum и Fusarium sp. [Текст] / Т. Щербакова // In: Buletinul Academiei de §tim|e a Moldovei. §tiin|ele vietii. - 2010. - №1(310). - C.106-114.

95. Щербаков, М. Г. Влияние состава питательных сред на протеолитическую активность глубинных культур Bacillus subtilis ВКПМ и Bacillus licheniformis ВКПМ 2336 [Текст] / М. Г. Щербаков, А. А. Ильязов, М. Ю. Шапошникова, П. Г. Васильев, В.И. Фролов, Р. В. Котельников // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. - 2014. - №21(49). -С.36-39.

96. Югина, Н.А. Протеолитическая активность микроорганизмов, выделенных из активного ила очистных сооружений МУП «Водоканал» г. Казани [Текст] / Н.А. Югина, А.И. Хабибрахманова, Е.О. Михайлова, М.В. Шулаев // Вестник Казанского технологического университета. -2015. - №19. - С.279-281.

97. Совершенствование технологии и средств применения биологических удобрений и биопрепаратов, а также гуминовых продуктов для повышения урожайности сельскохозяйственных культур и улучшения качества растениеводческой продукции [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://apknet.ru/sovershenstvovanie-texnologii-i-sred/

98. Abbas, A. Antagonist effects of strains of Bacillus spp. against Rhizoctonia solani for their protection against several plant diseases: alternatives to chemical pesticides [Text] / A. Abbas et al. // Comptes Rendus Biologies. -2019. - V.342, Is. 5 - 6. - P. 124-135.

99. Ahad, R. Microbial detoxification of eleven food and feed contaminating trichothecene mycotoxins. BMC Biotechnol [Text] / R. Ahad, T. Zhou, D. Lepp, K.P. Pauls. - 2017. - V.17 (1) - P.30.

100. Ahmad, Z. Isolated Bacillus subtilis strain 330-2 and its antagonistic genes identified by the removing PCR [Text] / Z. Ahmad, J. Wu, L. Chen // Scientific Reports. - 2017. - V.7. - P. 1-13.

101. Alblooshi, A. A. Biocontrol potential of endophytic actinobacteria against Fusarium solani, the causal agent of sudden decline syndrome on date palm in the UAE [Text] / A.A. Alblooshi // Journal of Fungi. - 2021. - V.8, Is.1. - P.8-32.

102. Ali, S. Genetic, physiological and biochemical characterization of Bacillus sp. strain RMB7 exhibiting plant growth promoting and broad spectrum antifungal activities[Text] / S. Ali, S. Hameed, A. Imran, M. Iqbal, G. Lazarovits // Microbial Cell Factory. - 2014. - V.13. - P. 144-159.

103. Awuchi, C.G. Mycotoxins' toxicological mechanisms involving humans, livestock and their associated health concerns [Text] / C. G. Awuchi et al. // Toxins (Basel). - 2022. - V.24, Is.14 (3). - P.167-200.

104. Bacon, C.W. Bacterial endophytes: The endophytic niche, its occupants, and its utility [Text] / C. Bacon, D. M. Hinton // Plant-Associated Bacteria. - 2006. - P.154-194.

105. Bakker, P.A.H.M. Induced systemic resistance by fluorescent Pseudomonas spp. [Text] / A.H.M. Bakker, C.M.J. PPieterse, L.C. Van Loon // Phytopathology. - 2007. - V.97. - P.239-243.

106. Beauséjour, J. Effect of Streptomyces melanosporofaciens strain EF-76 and of chitosan on common scab of potato [Text] / J. Beauséjour, N. Clermont, & C. Beaulieu // Plant and Soil. - 2003. - V.256. - P.463-468.

107. Benítez, T. Biocontrol mechanisms of Trichoderma strains [Text] / T. Benítez, A.M. Rincón, M.C .Limón, and A.C. Codón // Int Microbiol. - 2004. - V.7. -P.249-260.

108. Bernhoft, A. Effect of Organic and Conventional Cereal Production Methods on Fusarium Head Blight and Mycotoxin Contamination Levels [Text] / A. Bernhoft, J. Wang, C. Leifert // Agronomy. - 2022. - V.12, Is. 4. - P.797.

109. Bhattacharyya, P.N. Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR): emergence in agriculture [Text] / P.N. Bhattacharyya, D.K. Jha // World Journal of Microbiology and Biotechnology. - 2012. - V.8, Is.4. - P.1327-1350.

110. Blount, W.P. Turkey "X" Disease [Text] / W.P. Blount // J. Br. Turkey. - 1961.

- V.9. - P.55-58.

111. Bottalico, A. Toxigenic Fusarium species and mycotoxins associated with head blight in small-grain cereals in Europe [Text] / A. Bottalico, G. Perrone // European Journal of Plant Pathology. - 2002. - V.108. - P.611-624.

112. Bouhet, S. Mycotoxin fumonisin B1 selectively down-regulates the basal IL-8 expression in pig intestine: In vivo and in vitro studies [Text] / S. Bouhet, Le E. Dorze, S.Y.Péres, J.M. Fairbrother, I.P. Oswald // Food Chemistry. - 2006.

- V.44. - P.1768-1773.

113. Braun, H. Trichoderma harzianum: inhibition of mycotoxin producing fungi and toxin biosynthesis [Text] / H. Braun, L. Woitsch, B. Hetzer, R. Geisen, B. Zange, M. Schmidt-Heydt // International Journal of Food Microbiology. -2018. - V.280. - P.10-16.

114. Bryden, W.L. Mycotoxin contamination of the feed supply chain: Implications for animal productivity and feed security [Text] / W.L. Bryden // Animal Feed Science and Technology. - 2012. - V.173 - P.134-158.

115. Calvo, A.M. Association of fungal secondary metabolism and sclerotial biology [Text] / A.M. Calvo, J.W.Cary // Frontiers in Microbiology. - 2015. -V.6. - P.62.

116. Cazorla, F.M. Isolation and characterization of antagonistic Bacillus subtilis strains from the avocado rhizoplane displaying biocontrol activity [Text] / F.M. Cazorla, D. Romero, A. Pérez-García, B.J. Lugtenberg, Ad. Vicente, G. Bloemberg // J Appl Microbiol. - 2007. - V.103, Is.5 - P.1950-1959.

117. Chang, P.-K. Aspergillus | Introduction Encyclopedia of Food Microbiology (Second Edition) [Text] / P.-K. Chang, B.W.Horn, K. Abe // Gomi. - 2014. -P.77-82.

118. Chen, J.L. Endophytic Trichoderma gamsii YIM PH30019: a promising biocontrol agent with hyperosmolar, mycoparasitism, and antagonistic activities of induced volatile organic compounds on root-rot pathogenic fungi of Panax notoginseng [Text] / J.L. Chen, S.Z. Sun et al. // Journal of Ginseng Research. - 2016. - V.40, Is.4. - P.315-324.

119. Chen, J. Antagonistic Activity of Trichoderma spp. Against Fusarium oxysporum in Rhizosphere of Radix pseudostellariae Triggers the Expression of Host Defense Genes and Improves Its Growth Under Long-Term Monoculture System [Text] / J. L. Chen, I.U. Zhou, Y. Din et al. // Frontiers in Microbiology. - 2021. - V.12. - P. 1-12.

120. Chitlaru, T. Progress and novel strategies in vaccine development and treatment of Anthrax [Text] / T. Chitlaru, Z. Altboum, S. Reuveny, A. Shafferman // Immunological Reviews. - 2011. -V.239. - P.221-236.

121. Compant, S. Use of plant growth-promoting bacteria for biocontrol of plant diseases: Principles, mechanisms of action and future prospects / S. Compant, B. Duffy et al. // Applied and Environmental Microbiology. - 2005. - V.71. -P.4951-4959.

122. Conn, V.M. Endophytic actinobacteria induce defense pathways in Arabidopsis thaliana [Text] / V.M. Conn, A.R. Walker, C.M. Franco // Molecular Plant-Microbe Interactions. - 2008. - V.2. - P.208-218.

123. Coppock, R. W. Aflatoxins [Text] / R. W. Coppock et al. // Veterinary Toxicology (Third Edition ) Basic and Clinical Principles. - Ed. New York: Elsevier: Academic Press, 2007. - P.939-950.

124. Corrales, M. Characterization of phenolic content, in vitro biological activity, and pesticide loads of extracts from white grape skins from organic and conventional cultivars [Text] / M. Corrales et al. // Food and Chemical Toxicology. - 2010. - V.48. - P.3471-3476. .

125. Cotxarrera, L. Use of sewage sludge compost and Trichoderma asperellum isolates to suppress Fusariumwilt of tomato [Text] / L. Cotxarrera, M. I. Trillas-

Gay, C. Steinberg, C. Alabouvette // Soil Biology and Biochemistry. - 2002. -V.34. - P.467-476.

126. Couillerot, O. Pseudomonas fluorescens and closely-related fluorescent pseudomonads as biocontrol agents of soil-borne phytopathogens [Text] / O. Couillerot etal. // Letters in Applied Microbiology. - 2009. - V.8, Is.5. - P.505-512.

127. Dias, M.P. Plant growth and resistance promoted by Streptomyces spp. in tomato [Text] /M.P. Dias et al. // Plant Physiology and Biochemistry. - 2017.

- V.118 - P.479-493.

128. Douriet-Gamez, N.R. Genomic analysis of Bacillus sp. strain b25, a biocontrol agent of maize pathogen Fusarium verticillioides [Text] / N.R. Douriet-Gamez et al. // Curr. Microbiol. - 2018. - V.75. - P.247-255.

129. Edwards, S.G. Emerging issues of HT-2 and T-2 toxins in European cereal production [Text] / S.G. Edwards et al. // World Mycotoxin Journal. - 2009. -V.2. - P.173-179.

130. Egal, S.Dietary exposure to aflatoxin from maize and groundnut in young children from Benin and Togo, West Africa [Text] / S.Egal et al. // International Journal of Food Microbiology. - 2005. - V.104, Is. 2. - P.215-224.

131. El-Baky, N.A. The Development of a phytopathogenic fungi control trial: Aspergillus flavus and Aspergillus niger infection in jojoba tissue culture as a model [Text] / N.A. El-Baky et al. // Scientific World Journal. - 2021. - P. 1-8.

132. El-Komy, M.H. Characterization of novel Trichoderma asperellum isolates to select effective biocontrol agents against tomato fusarium wilt [Text] / M.H. El-Komy et al. // The Plant Pathology Journal. - 2015. - V.31, Is.1. - P50-60.

133. El-Tarabily, K.A. Non-streptomycete actinomycetes as biocontrol agents of soil-borne fungal plant pathogens and as plant growth promoters [Text] / El-K.A. Tarabily, K. Sivasithamparam // Soil Biology and Biochemistry. - 2006.

- V.38. - P.1505-1520.

134. Figueroa-López, A.M. Rhizospheric bacteria of maize with potential for biocontrol of Fusarium verticillioides [Text] /A.M. Figueroa-López et al. // Springerplus. - 2016. - V.5 - P.330-342.

135. Foley, K. The distribution of Aspergillus spp. opportunistic parasites in hives and their pathogenicity to honey bees [Text] / K. Foley, G. Fazio, A.B. Jensen, W.O.Hughes // Veterinary Microbiology. - 2014. - V.169, Is. 3-4. - P.203-210.

136. Frisvad, J.C. Fumonisin B2 Production by Aspergillus niger [Text] / J.C. Frisvad et al. // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2007. - V.55. -P.9727-9732.

137. Galletti, S. Selected isolates of Trichoderma gamsii induce different pathways of systemic resistance in maize upon Fusarium verticillioides challenge [Text] / S. Galletti, R. Paris, S. Cianchetta // Microbiology Research. - 2020. - V.233.

- P.126406-126421.

138. García-Cano, I. Lactic acid bacteria isolated from dairy products as potential producers of lipolytic, proteolytic and antibacterial proteins [Text] / I. García-Cano, D. Rocha-Mendoza, J. Ortega-Anaya, K. Wang, E. Kosmerl, R. Jiménez-Flores // Appl Microbiol Biotechnol. - 2019. - V. 103 (13). - P.5243-5257.

139. Getha, K. Antagonistic effects of Streptomyces violaceusniger strain G10 on Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4: indirect evidence for the role of antibiosis in the antagonistic process[Text] / K. Getha, S.Vikineswary // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology. - 2002. - V.28, Is. 6. - P.303-310.

140. Haas, D. Biological control of soil-borne pathogens by fluorescent Pseudomonads [Text] / D. Haas, G. Défago // Nature Reviews Microbiology.

- 2005. - V.3. - P.307-319.

141. Hamid, A.S. Aflatoxin B1-induced hepatocellular carcinoma in developing

countries: Geographical distribution, mechanism of action and prevention

[Text] / A.S. Hamid, I.G. Tesfamariam, Y. Zhang, Z.G. Zhang // Oncology

Letters. - 2013. - V.5, Is.4. - P.1087-1092.

168

142. Harman, G. E. Trichoderma species-opportunistic, avirulent plant symbionts [Text] / G. E. Harman, C. R. Howell, A. Viterbo, I. Chel, and M. Lorito // Nature Reviews Microbiology. - 2004. - V.2. - P.43-56.

143. Hastuti, R.D. Endophytic Streptomyces sp. as Biocontrol Agents of Rice Bacterial Leaf Blight Pathogen (Xanthomonas oryzae pv. oryzae) [Text] / R.D. Hastuti, L. Yulin, S. Antonius, S. Rasti // BioScience. - 2012. - V.19, Is.4. -P.155-162.

144. Hazarika, D.J. Lipopeptide mediated biocontrol activity of endophytic Bacillus subtilis against fungal phytopathogens [Text] / D.J. Hazarika et al. // BMC Microbiol. - 2019 - V.19, Is.1. - P.71.

145. Hedayati, M.T. Aspergillus flavus: human pathogen, allergen and mycotoxin producer [Text] / M.T. Hedayati, A.C. Pasqualotto, P.A. Warn, P. Bowyer, D.W. Denning // Microbiology (Reading). - 2007. - 153(Pt 6). - P.1677-1692.

146. Hoffmann, A. Co-Cultivation of Fusarium, Alternaria, and Pseudomonas on wheat-ears affects microbial growth and mycotoxin production [Text] / A. Hoffmann // Microorganisms. - 2021. - V.9, Is.2. - P.443-466.

147. Idiyatov, I.I. Study of antagonism of endophytic bacterial isolates against Fusarium sporotrichioides [Text] / I.I. Idiyatov, N.I. Khammadov, A.I. Eroshin, A.M. Tremasova, Yu.M. Tremasov, R.M. Potekhina, S.R. Khabirova et al. // Natural Volatiles and Essential Oils. - 2021. - V.8, No.4. - C.3550-3565.

148. Islam, M.R. isolation and identification of antifungal compounds from Bacillus subtilis C9 inhibiting the growth of plant pathogenic fungi [Text] / M.R. Islam, Y.T. Jeong, Y.S. Lee, C.H. Song // Mycobiology. - 2012. - V.40. - P.59-66.

149. K^pinska-Pacelik, J. Alimentary Risk of Mycotoxins for Humans and Animals [Text] / J. K?pinska-Pacelik, W. Biel // Toxins (Basel). - 2021. - V.21, Is. 13(11). - P.822-839.

150. Khabirova, S.R. Metabolite-associated enzymatic properties of microorganisms with an antagonistic effect on aspergillus and fusarium fungi, pathogenic for crops and farm animals [Text] / S.R. Khabirova, I.I. Idiyatov,

169

E.A. Shuralev, A.M. Tremasova //

IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. - 2021. - V.723 -P.1-7.

151. Khabirova, S.R. Potency of bacterial field isolates for zearalenone and aflatoxin b1 detoxification in contaminated crop-origin raw material [Text] / S.R. Khabirova, E.A. Shuralev, I.I. Idiyatov // In the collection of articles: IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. Series "International Scientific and Practical Conference: Development of the Agro-Industrial Complex in the Context of Robotization and Digitalization of Production in Russia and Abroad, DAICRA 2021", 2022. - V.949. - P. 1-7.

152. Kiely, P.D. Exploiting new systems-based strategies to elucidate plant-bacterial interactions in the rhizosphere [Text] / P.D. Kiely et al. // Microbial Ecology. - 2006. - V. 51. - P.257-266.

153. Kim, B.S. Isolation, identification and antifungal activity of a macrolide antibiotic, oligomycin A, produced by Streptomyces libani [Text] / B.S. Kim, S.S. Moon, B.K. Hwang // Canadian Journal of Botany. - 1999. - V.77. -P.850-858.

154. Krishnan, S. Aspergillus flavus: an emerging non-fumigatus Aspergillus species of significance [Text] / S. Krishnan, E.K. Manavathu, P.H. Chandrasekar // Mycoses. - 2008.- V.52, Is. 3. - P.206-222.

155. Krska, R. Guide to Mycotoxins featuring Mycotoxin Risk Management in Animal Production [Text] / R. Krska et al. // BIOMIN edition. - 2012. - 127pp.

156. Kumari, B. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR): modern prospects for sustainable agriculture [Text] / B. Kumari // Plant Health Under Biotic Stress. - 2019. - V.2. - P.109-127.

157. Li, X. Staurosporine from the endophytic Streptomyces sp. strain CNS-42 acts as a potential biocontrol agent and growth elicitor in cucumber [Text] / X. Li et al. // Antonie Van Leeuwenhoek. - 2014. - V.106, Is.3. - P.515-525.

158. Li, P. Detoxification of Mycotoxins through Biotransformation [Text] / P. Li, R. Su, R. Yin, D. Lai, M. Wang, Y. Liu, L. Zhou // Toxins (Basel). - 2020. -V.12, Is. - P.2121.

159. Loveleen, K. A. Antagonistic effect of Pseudomonas mendocina isolate against phytopathogenic fungi [Text] / K. A. Loveleen et al. // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2014. - V.5, Is.2. -P.509-518.

160. Marin, D.E. Sex-related differences in the immune response of weanling piglets exposed to low doses of fumonisin extract [Text] / D.E. Marin et al. // British Journal of Nutrition. - 2006. - V.95. - P. 1185-1192.

161. Markovich, N.A. Lytic enzymes of Trichoderma and their role in plant defense from fungal diseases [Text] / N.A. Markovich, G.L. Kononova // Applied Biochemistry and Microbiology. - 2003. - V.39. - P.389-400.

162. Martinez-Zavala, S.A. Chitinases ofBacillus thuringiensis: phylogeny, modular structure, and applied potentials [Text] / S.A. Martinez-Zavala // Frontiers in Microbiology. - 2020. - V. 10. - P.3032-1047.

163. Melen'tiev, A.I. Rol' khitinazy v proiavlenii antigribnoi aktivnosti shtammom Bacillus sp. 739 [The role of chitinase in antifungal activity of Bacillus sp. 739] [Text] / A.I. Melen'tiev, G.E. Aktuganov, N.F. Galimzianova // Mikrobiologiia. - 2001. - V.70, Is.5. - P.636-641.

164. Milani, J.M. Ecological conditions affecting mycotoxin production in cereals [Text] / J.M. Milani // Vet. Med. Czech Repub. - 2013. - V.58. - P.405-411.

165. Miljakovic, D. The significance of Bacillus spp. in disease suppression and growth promotion of field and vegetable crops [Text] / D. Miljakovic, J. Marinkovic, S. Balesevic-Tubic // Microorganisms. - 2020. - V.13, Is. 8(7) -P.1037.

166. Montalbano, S. The AFLATOX Project: approaching the development of new generation, natural-based compounds for the containment of the mycotoxigenic phytopathogen Aspergillus flavus and Aflatoxin contamination [Text] / S.

Montalbano et al. // International Journal of Molecular Sciences. - 2021. -V.22, Is.9. - P.4520-4539.

167. Montealegre, J.R. Selection of bioantagonistic bacteria to be used in biological control of Risoctonia solani in tomato[Text] / J.R. Montealegre, R. Reyes, L.M. Perez et al. // Electronic Journal of Biotechnology. - 2003. - V.6, N2. - P.116-127.

168. Munkvold, G. P. Fusarium species and their associated mycotoxins [Text] / G. P. Munkvold // Mycotoxigenic Fungi. - 2017. - P. 51-106.

169. Nesic, K. Fusarial toxins: secondary metabolites of Fusarium fungi [Text] K. Nesic, S. Ivanovic, V. Nesic // Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. - 2014. - V.228 - P. 101-120.

170. Noumavo, P. A. Plant growth promoting rhizobacteria: beneficial effects for healthy and sustainable agriculture [Text] / P. A. Noumavo // African Journal of Biotechnology. - 2016. - V.15, Is.27. - P.1452-1463.

171. Nowak-Thompson, B. Production of 2,4-diacetylphloroglucinol by the biocontrol agent Pseudomonas fluorescens Pf-5 B. [Text] / J. NowakThompson, G. Steven, J. Kraus, J.E. Loper // Canadian Journal of Microbiology. - 1994. - V.40, Is.12. - P.1064-1066.

172. Ntushelo, K. The mode of action of Bacillus species against Fusarium graminearum, tools for investigation, and future prospects [Text] / K. Ntushelo et al. // Toxins. - 2019. -V.11. - P.606-620.

173. Palazzini, J. Biocontrol of Fusarium graminearum sensu stricto, Reduction of Deoxynivalenol Accumulation and Phytohormone Induction by Two Selected Antagonists [Text] / J. Palazzini, P. Roncallo, R. Cantoro, M. Chiotta, N. Yerkovich, S. Palacios, V. Echenique, A. Torres, M. Ramirez, P. Karlovsky, S. Chulze // Toxins (Basel). - 2018. - V.10, Is.88. - P.1-12.

174. Pan, D. M. Endophytic bacteria from wheat grain as biocontrol agents of Fusarium graminearum and deoxynivalenol production in wheat [Text] / D. Pan, A. Mionetto, S. Tiscornia, L. Bettucci // Mycotoxin Res. - 2015. - V.1, Is.3. - P.137-143.

175. Patten, C.L. Role of Pseudomonas putida indoleacetic acid in development of the host plant root system [Text] / C.L. Patten, B.R. Glick // Applied and Environmental Microbiology. - 2002. - V.68. - P.3795-3801.

176. Pedrero-Méndez, A. Why is the correct selection of Trichoderma strains important? The case of wheat endophytic strains of T. harzianum and T. simmonsii [Text] / A. Pedrero-Méndez, H.C. Insuasti, T. Neagu, M. Illescas, M.B. Rubio, E. Monte, R. Hermosa // Journal of Fungi. - 2021. - V.7, Is.12. -P.1087-1108.

177. Penha, R.O. Bacillus lipopeptides as powerful pest control agents for a more sustainable and healthy agriculture: recent studies and innovations / R.O. Penha, L.P.S. Vandenberghe, C. Faulds, V.T. Soccol, C.R. Soccol // Planta. -2020. - V.25, No 1. - 70pp.

178. Pickova, D. Aflatoxins: History, Significant Milestones, Recent Data on Their Toxicity and Ways to Mitigation [Text] / D. Pickova, V. Ostry, J. Toman, F. Malir // Toxins (Basel). - 2021. - V.13, No6. - P.399-422.

179. Postolaky, O. Streptomycetes and micromycetes as perspective antagonists of fungal phytopathogens [Text] / O. Postolaky, T. Syrbu, N. Poiras, K. Baltsat, S. Maslobrod, S. Boortseva // Communications in agricultural and applied biological sciences. - 2012. - V.77, Is.3. - P.249-257.

180. Preston, G.M. Plant perceptions of plant growth-promoting Pseudomonas [Text] / G.M. Preston // Philosophical Transactions of the Royal Society B. -2004. - V.359, Is. 1446. - P.907-918.

181. Rahman, S.F. Emerging microbial biocontrol strategies for plant pathogens [Text] / S.F. Rahman, E. Singh, C.M.J. Pieterse, P.M. Schenk // Plant Science. - 2018. - V.267. - P.102-111.

182. Richard, J.L. Some major mycotoxins and their mycotoxicoses-an overview [Text] / J.L. Richard // International Journal of Food Microbiology. - 2007. -V.20, Is. 119. - P.3-10.

183. Saharan, B.S. Plant growth promoting rhizobacteria: a critical review [Text] / B.S. Saharan, V. Nehra // International Journal of Life Science and Medical Research. - 2011. - V.21. - P. 1-30.

184. Schisler, D.A. Biological control of Fusarium head blight of wheat and deoxynivalenol levels in grain via use of microbial antagonists [Text] / D.A. Schisler, N.I. Khan, M.J.Boehm // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 2002. - V.504. - P.53- 69.

185. Schuhmacher-Wolz, U. Report on toxicity data on trichothecene mycotoxins HT-2 and T-2 toxins [Text] / U. Schuhmacher-Wolz, K. Heine, K. Schneider // EFSA Supporting Publications. - 2010. - V.7, Is.7. - P.1- 57.

186. Shakeel, Q. Biocontrol of Aspergillus flavus on peanut kernels using Streptomyces yanglinensis 3-10 [Text] / Q. Shakeel et al. // Frontiers in Microbiology. - 2018. - V.9. - P.1049-1058.

187. Sifri, M. A summary of a panel discussion on safety levels for mycotoxins [Text] // The World Mycotoxin Forum - the fourth conference, (November 68, 2006). - Cincinnati, 2006. - P.90-91.

188. Singh, Y. Surviving the odds: from perception to survival of fungal phytopathogens under host-generated oxidative burst [Text] / Y. Singh, A.M. Nair, P.K. Verma // Plant Communications: Cell Press. - 2021. - V.2, Is.3. -P.100-142.

189. Smith, M.-C. Natural Co-Occurrence of Mycotoxins in Foods and Feeds and Their in vitro Combined Toxicological Effects [Text] / M.- C. Smith, S. Madec, E. Coton, N. Hymery // Toxins. - 2016. - V.8, Is.4. - P.94-130.

190. Steglinska, A. Organic Compounds and Physiological Parameters as Markers of Potato (Solanum tuberosum L.) Infection with Phytopathogens [Text] /A. Steglinska // Molecules. - 2022. - V.9, Is.27 (12). - P.3708-3731.

191. Streit, E. Current situation of mycotoxin contamination and co-occurrence in animal feed-focus on Europe [Text] / E. Streit, G. Schatzmayr, P. Tassis, E. Tzika, D. Marin, I. Taranu, C. Tabuc, A. Nicolau, I. Aprodu, O. Puel, I.P. Oswald // Toxins (Basel). - 2012. - V.4, Is. 10. - P.788- 809.

174

192. Sutton, D.A. Guide to Clinically Significant Fungi [Text] / D.A. Sutton, A.W. Fothergill, M.G. Rinaldi //1st edn. Baltimore: Williams & Wilkins, 1998.

193. Takashi, S. Nutrition and dietary carcinogens [Text] / S. Takashi //Carcinogenesis. - 2000. - V.21, Is.3. - P.387-395.

194. Tirmenstein, M.A. Aflatoxin [Text] / M.A. Tirmenstein, R. Mangipudy // Encyclopedia of Toxicology (Third Edition). - 2014. - P. 104-106.

195. Trejo-Raya, A.B. Effective in vitro control of two phytopathogens of agricultural interest using cell-free extracts of Pseudomonas fluorescens and chitosan [Text] / A.B. Trejo-Raya // Molecules. - 2021. - V.26, Is.21. - P.6359-6372.

196. Van der Fels-Klerx, H.J. Occurrence data of trichothecene mycotoxins T-2 toxin and HT-2 toxin in food and feed [Text] / H.J. Van der Fels-Klerx // EFSA Supporting Publications. - 2010. - V.7, Is.7. - P.1-43.

197. Varga, J. Fumonisin contamination and fumonisin producing black Aspergilli in dried vine fruits of different origin [Text] / J.Varga, S. Kocsube, K.Suri, G. Szigeti, A. Szekeres, M. Varga, B. Toth, T. Bartok // International Journal of Food Microbiology. - 2010. - V.143. - P.143-149.

198. Vick, S.H.W. Delving into defence: identifying the Pseudomonas protegens Pf-5 gene suite involved in defence against secreted products of fungal, oomycete and bacterial rhizosphere competitors [Text] / S.H.W. Vick, B.K. Fabian, C.J. Dawson, C. Foster, A. Asher, K.A. Hassan, D.J. Midgley, I.T. Paulsen, S.G. Tetu // Microbial Genomics. - 2021. - V.7, Is.11. - P.1-13.

199. Vinale, F. Trichoderma secondary metabolites that affect plant metabolism [Text] / F. Vinale et al. // Natural Product Communications. - 2012. - V.11, No 7. - P.50-52.

200. Viterbo, A Significance of lytic enzymes from Trichoderma spp. in the biocontrol of fungal plant pathogens [Text] / A. Viterbo, O. Ramot, L.Y. Chermin and I. Chet // Antonie van Leeuwenhoek. - 2002. - V.81. - P.549-556.

201. Vurukonda, S.S.K.P. Plant Growth Promoting and Biocontrol Activity of Streptomyces spp. as Endophytes [Text] / S.S.K.P. Vurukonda, D. Giovanardi, E. Stefani // International Journal of Molecular Sciences. - 2018. - V.19, Is.4. - P.952-978.

202. Wang, Y. Secondary Metabolite Variation and Bioactivities of Two Marine Aspergillus Strains in Static Co-Culture Investigated by Molecular Network Analysis and Multiple Database Mining Based on LC-PDA-MS/MS [Text] / Y. Wang, E. Glukhov, Y. He, Y. Liu, L. Zhou, X. Ma, X. Hu, P. Hong, W.H. Gerwick, Y. Zhang // Antibiotics (Basel). - 2022. - V. 11(4). - P.513.

203. Watve, M. How many antibiotics are produced by the genus Streptomyces [Text] / M. Watve, R. Tickoo, M. Jog, B. Bhole // Archives of Microbiology. -2001. - V.176. - P.386-390.

204. Williams, J.H. Human aflatoxicosis in developing countries: a review of toxicology, exposure, potential health consequences, and interventions [Text] / J.H.Williams, T.D. Phillips, P.E. Jolly, J.K. Stiles, C.M. Jolly, D. Aggarwal // The American Journal of Clinical Nutrition.- 2004. - V.80, Is.5. - P.1106-1122.

205. Xu, B. A novel and effective Streptomyces sp. N2 Against various phytopathogenic fungi [Text] / B. Xu, W. Chen, Z.M. Wu, Y. Long, K.T. Li // Applied Biochemistry and Biotechnology. - 2015. - V.177, Is.6. - P.1338-1347.

206. Yang, X. Formulations can affect rhizosphere colonization and biocontrol efficiency of Trichoderma harzianum SQR-T037 against Fusarium wilt of cucumbers [Text] / X. Yang, L. Chen, X. Yong, and Q. Shen // Biology and Fertility of Soils. - 2011. - V.47. - P.23-248.

207. Yi ,Y.J. Antagonistic Activity and Mechanism of Bacillus subtilis XZ16-1 Suppression of Wheat Powdery Mildew and Growth Promotion of Wheat [Text] / Y.J. Yi et.al. Phytopathology. - 2022. - V.112, Is.12 - P.2476-2485.

208. Zalila-Kolsi, I. Antagonist effects of Bacillus spp. strains against Fusarium graminearum for protection of durum wheat (Triticum turgidum L.

176

subsp.durum) [Text] / I. Zalila-Kolsi // Microbiological Research. - 2016. -V.192. - P.148-158.

209. Zeigler, D.R. The genus Bacillus. Handbook of Microbiology. [Text] / D.R. Zeigler, J.B. Perkins. In Practical Edited by E. Goldman, L.H. Green // CRC Press: Boca Raton, FL, USA, 2018. - P.309-326.

210. Zinedine, A. Review on the toxicity, occurrence, metabolism, detoxification, regulations and intake of zearalenone: An estrogenic mycotoxin [Text] / A. Zinedine, J.M. Soriano, J.C. Molto, J. Man // Food and Chemical Toxicology. - 2007. - V.25. - P.1-18.

ПРИЛОЖЕНИЯ

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Патент на изобретение «Способ обработки несеменного зерна, пораженного микроскопическими грибами и

микотоксинами»..................................................................... 2

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Акт о внедрении результатов научных

исследований........................................................................ 5

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Учебное пособие «Методы исследования почвенных микромицетов при оценке биологических эффектов

загрязнения среды»................................................................. 6

ПРИЛОЖЕНИЕ Г. Методические рекомендации «Алгоритм отбора эффективных антагонистов для защиты несеменного зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами и микотоксинами»....................................................... 7

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Патент на изобретение «Способ обработки несеменного зерна, пораженного микроскопическими

грибами и микотоксинами

з

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Акт о внедрении результатов научных исследований

Общество с ограниченной ответственностью

апп ТЪегар«иИС£

Общество с ограниченной ответственностью «Научно-исследовательский лабораторный комплекс «ЛИОНЕКС»

ИНН 1660359736 /КПП 166001001 420073, г. Казань, ул. Гвардейская, д. 16, пом. 1101, офис 7 Расчетный счет 40702810323000082362 / БИК 042202847 Поволжский филиал АО «Райффайзенбанк» Кор/счет 30101810300000000847 Телефон: [phone]

В ООО «Научно-исследовательский лабораторный комплекс «ЛИОНЕКС» были приняты результаты научных исследований, которые будут применимы для разработки средств защиты и профилактики распространения фитопатогенов в объектах окружающей среды. Результаты научных исследований были получены аспирантом Института экологии и природопользования Казанского (Приволжского) федерального университета Хабировой Светланой Рашидовной в рамках выполнения диссертационной работы под руководством кандидата ветеринарных наук, доцента Шуралева Эдуарда Аркадьевича.

АКТ

о внедрении результатов научных исследований

г. Казань

19 сентября 2022г.

Республика Татарстан, 420073 г. Казань, ул. Гвардейская, дом 16,пом.1101, офис 7. [phone]

[e-mail] ИНН/КПП 1660359736/ 166001001

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Учебное пособие «Методы исследования почвенных микромицетов при оценке биологических эффектов загрязнения среды»

УДК 574:579.64:579.26:582.288.4:57.083.1 ББК20.1

Принято на заседании учебно-методической комиссии Института экологии и

природопользования Протокол № 2 от 16 февраля 2022 года

Рецензенты:

доктор биологических наук, профессор кафедры эпизоотологии и паразитологии КГАВМ М.А. Ефимова; кандидат биологических наук, старший научный сотрудник центральной научно-исследовательской лаборатории КГМА - филиала ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России А.Р. Валеева

Хабирова С.Р.

Методы исследования почвенных микромицетов при оценке биологических эффектов загрязнения среды: учебное пособие / С.Р. Хабирова, Э.А. Шуралев, М.Н. Мукминов. - Казань: Казан, ун-т, 2022. -128 с.

Микробное сообщество почвы является одним из параметров, который при неблагоприятных условиях может оказать негативную нагрузку на экосистему. Материалы, представленные в данном учебном пособии, представляют собой основные теоретические знания о микологии и практические лабораторные методы выделения, культивирования почвенных микромицетов. В учебном пособии приведен обширный список питательных сред, используемых при работе с плесневыми микромицетами и основные методы определения их антибиотической активности.

Учебное пособие предназначено для студентов бакалавриата и магистратуры, обучающихся по направлению «Экология и природопользование», а также для аспирантов, обучающихся по специальности «Экология» (биологические науки), для ознакомления с широким спектром методов исследования почвенных микромицетов.

©Хабирова С.Р., Шуралев Э.А., Мукминов М.Н., 2022 © Казанский университет, 2022

ПРИЛОЖЕНИЕ Г. Методические рекомендации «Алгоритм отбора эффективных антагонистов для защиты несеменного зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами

и микотоксинами»

УДК 574:579.26 ББК 20.1

Принято на заседании кафедры прикладной экологии Института экологии и

природопользования КФУ Протокол № 9 от 10.06.2022 года

Рецензент:

доктор биологических наук, профессор М.Н. Мукминов

Хабирова С.Р.

Алгоритм отбора эффективных антагонистов для защиты несеменного зерна от контаминации токсинопродуцирующими микроскопическими грибами и микотоксинами: Методические рекомендации / С.Р. Хабирова. - Казань: Казан, ун-т, 2022. - 36 с.

В методических рекомендациях определены порядок и условия отбора проб, выделения чистых культур микроорганизмов, определения антагонистической способности, оценки ферментативной активности, проведения лабораторных испытаний по искусственной контаминации растительного субстрата микроскопическими грибами и оценки действия суспензии микроорганизмов и культуральной жидкости, содержащей их экзометаболиты, биотестирования на простейших, растениях и лабораторных животных для определения биологической безопасности.

Методические рекомендации предназначены для студентов бакалавриата и магистратуры, обучающихся по направлению «Экология и природопользование», а также для аспирантов, обучающихся по направлению 1.5.15. Экология, с целью повышения их знаний, умений и навыков по отбору антагонистов токсинопродуцирующих микроскопических грибов.

©Хабирова С.Р., 2022