Иммуноцитохимический анализ ядерных антигенов лимфоцитов человека, выявляемых с помощью моноклональных антител тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат биологических наук Артеменко, Елизавета Георгиевна

• Артеменко, Елизавета Георгиевна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Артеменко, Елизавета Георгиевна

Список используемых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ «Ядерные антигены, ассоциированные с пролиферацией клеток, и методы их выявления».

1.1. Понятие «клеточный цикл», его фазы, состояние 12 пролиферативного покоя («вне цикла»), принципы регуляции клеточного цикла.

1.2. Ядерные антигены пролиферирующих клеток (Ki-67, PCNA, 15 ДНК-полимераза альфа и т. д.).

1.3. Основной ядрышковый белок В23.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Подбор оптимальных иммуноцитохимических способов 60 выявления ядрышкового антигена с помощью моноклонального антитела ЗС9.

3.2. Идентификация антигена, выявляемого антителом ЗС9.

3.3. Изучение локализации антигена, выявляемого МКА ЗС9, в 70 динамике клеточного цикла.

3.4. Изменения в локализации В23 при стимуляции клеток к 72 пролиферации.

3.5. Исследование лимфоцитов доноров и больных с различными 82 формами лимфопролиферативных заболеваний с помощью непрямого иммунопероксидазного метода.

3.6. Получение новых гибридом, продуцирующих моноклональные 90 антитела к ядерным антигенам лейкоцитов крови человека.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуноцитохимический анализ ядерных антигенов лимфоцитов человека, выявляемых с помощью моноклональных антител»

Актуальность темы:

Исследования клеток, проводимые методами иммуноцитохимии с использованием антител, получили очень широкое распространение как в фундаментальной клеточной биологии, так и в повседневной клинической практике. На сегодняшний день благодаря достижениям гибридомной биотехнологии в распоряжении исследователей имеется большое количество различных моноклональных антител (МКА) - стандартных и однородных агентов, доступных для получения в лабораторных условиях в неограниченном количестве. Одной из областей их применения является изучение клеточной пролиферации, поскольку изменения в наличии или распределении различных антигенов,' происходящие в клетках по ходу клеточного цикла, можно идентифицировать с помощью соответствующих антител. Помимо этого, в клинической практике количественный показатель пролиферативной активности, определяемый с помощью МКА, является важной характеристикой неопластической клеточной популяции и используется для прогнозирования течения опухолевого заболевания.

Антигенные структуры, экспрессия которых ассоциирована с клеточным циклом, могут быть локализованы на мембране и в цитоплазме, однако наибольший интерес вызывают ядерные антигены, так как основные изменения в процессе деления клеток сосредоточены именно в клеточном ядре. В мире получен ряд моноклональных антител к ядерным антигенам, ассоциированным с клеточной пролиферацией, часть из которых локализуется в особом компартменте клеточного ядра -ядрышках.

Ядрышко является обязательным структурным компонентом ядер клеток эукариот, в котором происходит синтез рибосомных РНК- и сборка прерибосомных частиц. Изменение функционального состояния ядрышка в ходе клеточного цикла сопровождается также изменением его иммуноцитохимических особенностей, что отчетливо проявляется при использовании антител к различным ядрышковым белкам. За последние два десятилетия в результате получения и применения моноклональных антител был открыт ряд новых белков, имеющих ядрышковую локализацию; антитела к которым нашли применение в клинической практике. Наиболее известным является< белок Ki-67, выявляющийся в поздней Gi, S, G2 и М-фазах клеточного цикла, но отсутствующий в Go-периоде (77). Кроме того, известен ряд других белков ядрышка, которые можно рассматривать в качестве возможных маркеров клеточной; пролиферации. К ним, в частности, можно отнести основной ядрышковый белок В23/нуклеофозмин, а также белки, которые участвуют в транскрипции рибосомных генов. Эти белки, как правило, обладают аргентофильными свойствами и проявляются при селективном окрашивании клеток солями серебра. Они локализуются в районе ядрышек в интерфазе и ядрышковых организаторов хромосом в митозе. Известно, что количество аргентофильных белков, определенное цитохимически на тотальных препаратах клеток или методом Вестерн-блоттинга в клеточных экстрактах, отражает способность клеток к пролиферации, закономерно изменяется в* динамике клеточного цикла и является надежным цитохимическим маркером клеточного; метаболизма в целом (54, 181). Однако в литературе до сих пор отсутствуют прямые доказательства того, что локализация и количество белка В23 в клетках действительно изменяются с течением клеточного цикла, которые были бы получены с использованием антител к этому белку. В то же время, набор моноклональных антител к индивидуальным ядрышковым белкам, которые можно было- бы использовать не только для изучения фундаментальных вопросов, связанных с биогенезом рибосом, но и для решения прикладных задач, является на сегодняшний день явно недостаточным. Как правило, в распоряжении исследователей имеются аутоиммунные или поликлональные антитела к ядрышку, количество которых в силу их происхождения ограничено. В связи с этим, детальное изучение нового моноклонального антитела ЗС9, полученного в лаборатории клинической иммунологии ГНЦ РАМН (зав. лаб. - проф. Булычева Т.И.), которое направлено к ядрышковому антигену, является на сегодняшний день крайне актуальной задачей.

Цель работы:

Идентификация антигена, выявляемого новым моноклональным антителом ЗС9, а также изучение возможности использования этого антитела для анализа пролиферативной активности клеток в лабораторной и клинической практике.

Задачи работы:

1. Определить электрофоретическую подвижность и описать локализацию ■ антигена, выявляемого моноклональным антителом ЗС9, с помощью световой иммуноцитохимии. Методом иммунопреципитации выяснить возможное соответствие ЗС9-антигена основному белку ядрышка В23/нуклеофозмину.

2. Разработать оптимальную методику для иммунофлюоресцентного и иммунопероксидазного выявления антигена с помощью антитела ЗС9 на фиксированных препаратах клеток, учитывая его принадлежность к IgM-классу иммуноглобулинов.

3. Определить качественные и количественные изменения выявляемого антигена при переходе клеток из состояния покоя к пролиферации на модели первичной культуры донорских лимфоцитов, стимулированных фитогемагглютинином.

4. Провести сравнительный анализ динамики антигена, выявляемого антителом ЗС9, и известного маркера клеточного цикла белка Ki-67 при индуцированной активации лимфоцитов к пролиферации.

5. Оценить возможность использования антитела ЗС9 для анализа пролиферативной активности клеток в лабораторной и клинической практике при различных злокачественных заболеваниях системы крови.

Научная новизна:

Установлено, что полученное моноклональное антитело ЗС9 выявляет ядрышковый белок В23/нуклеофозмин.

Разработан оптимальный режим для иммунофлюоресцентного и иммунопероксидазного выявления белка В23 с помощью антитела ЗС9 на препаратах фиксированных клеток.

С помощью антитела ЗС9 выявлены количественные и качественные изменения в распределении В23 в лимфоцитах периферической крови человека, стимулированных к пролиферации фитогемагглютинином.

Моноклональное антитело к В23 было впервые использовано для оценки пролиферативной активности гемопоэтических клеток. Сравнительный анализ показал, что накопление белка В23 происходит уже в ранней Gi-стадии, до появления в них известного маркера пролиферирующих клеток белка Ki-67. Полученные данные указывают на то, что антитело ЗС9 позволяет выявить более ранние стадии пролиферации, чем антитело Ki-67.

Показаны статистически значимые различия (р<0,05) по экспрессии В23 в лимфоцитах здоровых лиц и больных различными лимфопролиферативными заболеваниями.

Теоретическое и практическое значение:

Полученный в лаборатории штамм гибридомных клеток ЗС9 является пригодным для создания препарата моноклонального антитела к белку В23 в лабораторном и промышленном производстве. Секретируемое им антитело может служить инструментом для фундаментальных исследований в области цитологии и молекулярной биологии. Помимо этого, оно может быть рекомендовано в качестве реагента, используемого в дополнение к существующей диагностической панели моноклональных антител для иммунофенотипирования клеток больных лейкозами и лимфомами, позволяя производить оценку пролиферативной активности патологических клеток. Иммунопероксидазная методика упрощена и адаптирована для дальнейшего широкого лабораторного использования. Отработана оптимальная методика проведения иммунофлюоресцентного окрашивания, позволяющая выявлять типичный для белка В23 характер свечения.

Положения, выносимые на защиту:

1. Моноклональное антитело ЗС9 выявляет антиген, соответствующий основному ядрышковому белку В23/нуклеофозмину, и направлено к его обеим изоформам (В23.1 и В23.2).

2. На модели стимулированной фитогемагглютинином культуры донорских лимфоцитов выявлено, что белок В23 является надежным иммунохимическим маркером последовательных стадий активации лимфоцитов человека к пролиферации. Ядрышковый белок В23 начинает выявляться в клетках раньше маркера репликативного периода - белка Ki-67.

3. На основании клинико-лабораторного анализа обследуемых лиц (30 здоровых и 70 больных с различными лимфопролиферативными заболеваниями) показана положительная корреляция между экспрессией антигенов В23 и Ki-67 (г=0,2; р<0,05). Выявлены статистически значимые различия (р<0,05) по степени экспрессии В23 в лимфоцитах здоровых лиц и больных всеми нозологическими формами лимфопролиферативных заболеваний, а также больных хроническим В-лимфолейкозом и В-лимфосаркомой.

Апробация работы состоялась на заседании проблемной комиссии «Кроветворение в норме и патологии, молекулярная биология, биотехнология» Гематологического научного центра РАМН. Материалы диссертации были доложены на XIII Всероссийском симпозиуме «Структура и функции клеточного ядра» (Санкт-Петербург, октябрь 1999 г.), на Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии» (Санкт-Петербург, июнь 2000 г., июнь 2002 г., июнь 2004 г.), на I Всероссийском съезде гематологов (Москва, апрель 2002 г.), на научно-практической конференции «Новое в гематологии и клинической трансфузиологии» (Москва; апрель 2003 г., апрель 2004 г.), на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» (Анапа, сентябрь 2004 г.), на Международном научном семинаре «Современная диагностика лимфопролиферативных заболеваний» (Санкт-Петербург, октябрь 2004 г.). По материалам диссертации опубликовано три статьи в центральных журналах и трое тезисов, в том числе одна статья — в зарубежной печати.

Работа выполнена в лаборатории клинической иммунологии Гематологического научного центра РАМН (зав. лаб. - проф., д.м.н. Булычева Т.И.) и в лаборатории ультраструктуры клеточного ядра сектора электронной микроскопии Института физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского Государственного Университета им. М.В. Ломоносова (зав. лаб. - д.б.н. Зацепина О.В.).

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Артеменко, Елизавета Георгиевна

ВЫВОДЫ.

1. Идентифицирован ядрышковый антиген с молекулярной массой 35-40 кДа, выявляемый моноклональным антителом ЗС9. Доказано, что он соответствует основному ядрышковому белку В23/нуклеофозмину.

2. Показано, что антитело ЗС9 направлено к обеим изоформам белка В23 — доминирующей В23.1 (молекулярная масса 37-38 кДа) и минорной В23.2 (молекулярная масса 35-36 кДа).

3. Разработаны оптимальные условия иммунофлюоресцентного и иммунопероксидазного выявления белка В23 в различных типах клеток с учетом принадлежности антитела ЗС9 к IgM-классу иммуноглобулинов.

4. Прослежены качественные и количественные изменения в распределении ядрышкового белка В23 в динамике клеточного цикла. Установлено, что белок В23 является надежным иммуноцитохимическим маркером последовательных стадий активации лимфоцитов человека к пролиферации.

5. На модели ФГА-стимулированной культуры донорских лимфоцитов показано, что белок В23 начинает выявляться в клетках раньше маркера репликативного периода белка Ki-67.

6. Выявлена положительная корреляция между экспрессией антигенов В23 и Ki-67 (г=0,2; р<0,05) в клетках больных с различными лимфопролиферативными заболеваниями. Обнаружены статистически значимые различия (р<0,05) по степени экспрессии В23 между группой здоровых лиц и больными каждой из нозологических форм, а также между больными с хроническим В-лимфолейкозом и Беркиттоподобной лимфомой.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Артеменко, Елизавета Георгиевна, 2004 год

1. Барышников Ю.А. Моноклональные антитела серии ИКО к дифференцировочным антигенам лейкоцитов человека. // Гематол. трансфузиол. 1990; 35(8): 4-7.

2. Браун Дж., Линг Н.Р. Моноклональные антитела мыши. // в кн. Кэтти Д. (ред.) Антитела. Методы. Кн.1 -М.: Мир, 1991; 117.

3. Ерифанова О.И. Общие принципы регуляции клеточного цикла. // в кн. «Лекции о клеточном цикле» М.: КМК Scientific Press, 2003; 151.

4. Короткова О.В., Барышников А.Ю., Тупицин Н.Н. и др. Моноклональные антитела ИКО-10 к антигену Thy-Г. // Эксперим. онкол. 1989; 11(2): 33-35.

5. Крокер Д.Ж. Показатели клеточной пролиферации при злокачественных лимфомах с особым рассмотрением ядрышкообразующих районов.//Гематол. Трансфузиол. 1994; 39(6): 12-19.

6. Малашенко . О.С., Самойлова Р.С., Булычева Т.И. Иммуноцитохимический метод оценки пролиферативного статуса лимфоидных клеток при лимфопролиферативных заболеваниях. // Клиническая лабораторная диагностика. 1995; 3: 51-54.

7. Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е. Структура и функция ядрышковых организаторов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты. // Цитология. 1992; 34(10): 3-25.

8. Мамаев Н.Н., Мартинес У., Морозова В.О., Иванова Н.А. Характеристика окрашенных серебром ядрышек в бластных элементах разного диаметра больных острыми лейкозами. // Цитология. 1988; 30: 1478-1482.

9. Новикова Н.Н., Митерев Г.Ю., Новикова М.С. и др. Моноклональные антитела ВСА-09, направленные к поверхностномуантигену бластных клеток при остром миелобластном лейкозе. // Гематол. трансфузиол. 1991; 36(1): 31-32.

10. Погорелов В. М. Оценка Ag-положительных ядрышкообразующих районов хромосом в нуклеолах интерфазных злокачественных клеток. // Гематол. Трансфузиол. 1994; 39(6): 19-21.

11. Сидоренко С.П., Шлапацкая JI.H., Ветрова Е.П. и др. Моноклональные антитела ИПО-38 к ядерному антигену пролиферирующих клеток. // Эксперим. онкол. 1994; 16: 145-149.

12. Упоров А. В., Цирлина Е.В., Пожарский К.М. Сравнительное исследование пролиферации (по выявлению Ki-67 антигена) и активности ядрышкообразующих районов в клетках рака молочной железы. // Вопр. Онкол. 1998; 44(3): 316-324.

13. Филатов А.В., Бачурин П.С., Щербухин В.В. и др. Исследование экспрессии пан-Т- клеточных маркеров лимфоцитов человека при первичных иммунодефицитах. // Иммунология. 1987; 5:81-84.

14. Филатов А.В., Бачурин П.С., Маркова Н.А. и др. Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов человека. // Гематол. трансфузиол. 1990; 35(4): 16-19.

15. Челидзе П.В., Зацепина О.В. Морфо-функциональная классификация ядрышек. // Усп. Совр. Биол. 1988; 105: 252-258.

16. Шпакова А.П., Булычева Т.И. 1992. Определение совместимости по локусу HLA-D в смешанной культуре лимфоцитов при трансплантации костного мозга. // Клиническая лабораторная диагностика. 1-2: 36-39.

17. Зацепина О.В., Сметана К. Электронно-микроскопическое исследование локализации Ag-белков в ядрышках лимфоцитов человека. // Цитология. 1985; 27(11): 1228-1234.

18. Aoyagi К., Kohfuji К., Yano S., et al. The expression of proliferating cell nuclear antigen, p53, p21, and apoptosis in primary gastric lymphoma. // Surgery. 2002; 132(1): 20-26.

19. Bocker Т., Bittinger A., Wieland W. et al. In vitro and ex vivo expression of nucleolar proteins B23 and p 120 in benign and malignant epithelial lesions of the prostate. //Mod. PathoL 1995; 8(3): 226-31.

20. Bolton W., Freeman J., Mikulka W. et al. Expression of proliferation-associated antigens (PCNA, pi20, pl45) during the reentry of G0 cells into the cell cycle. // Cytometry. 1994; 17(1): 66-74.

21. Bravo R., Macdonald-Bravo M. Changes in the nuclear distribution of cyclin/PCNA but not its synthesis depend on DNA replication. // EMBO J. 1985; 4: 655-659;

22. Bravo R., Macdonald-Bravo M. Existence of two populations of cyclin/proliferating cell nuclear antigen during the cell cycle/ Association with DNA replication sites. // J. Cell Biol. 1987; 105: 1549-1555.

23. Brons P., Raemaekers J., Bogman M. et al. cell cycle kinetics in malignant lymphoma studied with in vivo iododeoxyuridine administration, nuclear Ki-67 staining, and flow cytometry. //Blood. 1992; 80(9): 2336-2343.

24. Broun D., Gatter K. Monoclonal antibody Ki-67: its use in histopathology. // Histopathology. 1990; 17(6): 489-503.

25. Broun D., Gatter K., Nason D. Proliferation in non-Hodgkin's lymphoma: a comparison of Ki-67 staining on fine needle aspiration and cryostat sections.// J. Clin. Pathol. 1990; 43(4): 325-328.

26. Bruno S., Darzinkievwicz Z. Cell Cycle dependent expressin and stability of the nuclear protein detected by Ki-67 antibody in HL-60 cells. // Cell Prolif. 1992; 25(1): 31-40.

27. Burford-Mason A., MacKay A., Cummins M. et al. Detection of proliferating cell nuclear antigen in paraffin-embedded specimens is dependent on preembedding tissue handling and fixation. // Arch. Pathol. Lab. Med. 1994; 118(10): 1007-1013.

28. Bush C., Price A., Norton J. et al. Proliferation in human bladder carcinoma measured by Ki-67 antibody labeling: its potential clinical importance. //Br. J. Cancer. 1991; 64(2): 357-360.

29. Canet V., Montmasson M.P., Usson Y. et al. Correlation between silver-stained nucleolar organizer region area and cell cycle time. // Cytometry. 2001; 43(2): 110-116.

30. Carr I., Pettigrew N. How malignant is malignant? A brief review of the microscopic assessment of human neoplasms, and the prediction of whether they will metastasize and kill. // Clin. Exp. Metastasis. 1991; 9(2): 127-137.

31. Ceccarelli C., Trere D., Santini D. et al. AgNORs in breast tumours. // Micron. 2000; 31(2): 143-149.

32. Chan P.K. Characterization and cellular localization of nucleophosmin/B23 in HeLa cells treated with selected cytotoxic agents (studies of B23-translocation mechanism). // Exp. Cell Res. 1992; 203(1): 174-181.

33. Chan P.K., Aldrich M., Busch H; Alterations in immunolocalization of the phosphoprotein B23 in HeLa cells during serum starvation. // Exp. Cell Res. 1985; 161(1): 101-110.

34. Chan P.K., Chan F.Y. Nucleophosmin/B23 (NPM) oligomer is a major and stable entity in HeLa cells. // Biochim. Biophys. Acta. 1995; 1262(1): 3742.

35. Chan P.K., Liu Q.-R, Durban E. The major phosphrylation site of nucleophosmin (B23) is phosphorylated by a nuclear kinase II. // Biochem. J. 1990; 270: 549-552.

36. Chan P.K., Qi Y., Amley J., Koller C.A. Quantitation of the nucleophosmin/B23-translocation using imaging analysis. // Cancer Lett. 1996; 100(1-2): 191-197.

37. Chang J.-H. and M.O.J. Olson. Structure of the gene for rat nucleolar proteinB23. III. Biol. Chem. 1990; 265(30): 18227-18233.

38. Chatterjee A., Freeman J.W., Busch H. Identification and partial characterization of a Mr 40,000 nucleolar antigen associated with cell proliferation.//Cancer Res. 1987; 15;47(4): 1123-1129.

39. Chatterjee A., Freeman J.W., Busch H. Identification and partial characterization of a Mr 105,000 nucleolar antigen associated with cell proliferation. // Cancer Res. 1987; 1;47(23): 6329-6334.

40. Chen J., Jackson P., Kirschner M. et al. Separate domains of p21 invovled in the inhibition of Cdk kinase and PCNA. // Nature. 1995; 374(6520): 386-388.

41. Chiarle R., JGong J.Z., Guasparri I. et al. NPM-ALK transgenic mice spontaneously develop T-cell lymphomas and plasma cell tumors. // Blood. 2002; epub ahead of print.

42. Coltrera M., Gown A. PCNA/cyclin expression and BrdU uptake define different subpopulations in different cell lines. //J. Histochem. Cytochem. 1991; 39(1): 23-30.

43. Cordell J., Pulford K., Bigerna B. et al. Detection of normal and chimeric nucleophosmin in human cells. // Blood. 1999; 93(2): 632-642.

44. Couldwell W., Weiss M., Law R. et al. Paradoxical elevation of Ki-67 labeling with protein kinase inhibition in malignant gliomas. // J. Neurosurg. 1995; 82(3): 461-468.

45. Del Bino G., Li X., Traganos F. et al. Altered susceptibility of differentiating HL-60 cells to apoptosis induced by antitumor drugs. // Leukemia: 1994; 8(2): 281-288.

46. Derenzini M. The AgNORs. // Micron. 2000; 31(2): 117-120.

47. Derenzini M., Pession A., Threre D. Quantity of nucleolar silver-stained proteins is related to proliferating activity in cancer cells. // Lab. Invest. 1990; 63:137-140.

48. Derenzini M., Ploton D. Interphase nucleolar organizer regions in cancer cells. //Int. Rev. Exp. Pathol. 1991; 32: 149-192.

49. Derenzini M., Sirri V., Pession A. et al. Quantitative changes of the two major AgNOR proteins, nucleolin and protein B23, related to stimulation of rDNA transcription. // Exp. Cell Res. 1995; 219(1): 276-282.

50. Derenzini M, Sirri V, Trere D, Ochs RL. The quantity of nucleolar proteins nucleolin and protein B23 is related to cell doubling time in human cancer cells. // Lab. Invest. 1995; 73(4): 497-502.

51. Derenzini M., Trere D. AgNOR proteins as a parameter of the rapidity of cell proliferation. //Zentralbl. Pathol. 1994; 140(1): 7-10 .

52. Derenzini M., Trere D., Pession A. et al. Nucleolar size indicates the rapidity of ceir proliferation in cancer tissues. // J. Pathol. 2000; 191(2): 181186.

53. Derenzini M, Trere D, Pession A, et al. Nucleolar function and size in cancer cells. //Am. J. Pathol. 1998; 152(5): 1291-1297.

54. Van Dierendonck J., Wijsman J., Keijezer R. et al. Cell cycle-related staining patterns of anti-proliferating cell; nuclear antigen monoclonal antibodies. Comparison with BrdUrd labeling and Ki-67 staining. // Am. J. Pathol. 1991; 138(5): 1165-1172.

55. Duchrow M., Schluter C., Wohlenberg C. et al. Molecular characterization of the gene locus of the human cell proliferation-associated nuclear protein defined by monoclonal antibody Ki-67. // Cell Prolif. 1996; 29(1): 1-12.

56. Endl E., Gerdes J. The Ki-67 protein: fascinating forms and an unknown function. // Exp. Cell Res. 2000; 257(2): 231-237.

57. Endl E., Gerdes J. J. Posttranslational modifications of the KI-67 protein coincide with two major checkpoints during mitosis. // Cell Physiol. 2000; 182(3): 371-380.

58. Fairman M. DNA polymerase delta/PCNA: action and interaction. // J. Cell Sci. 1990; 95: 1-4:

59. Falini В., Flenghi L., Fagioli M. et al. Evolutionary conservation in various mammalian species of the human proliferation-associated epitope recognized by Ki-67 monoclonal antibody. // J. Histochem. Cytochem. 1989; 37: 1471-1476.

60. Feuerstein N. and Mond J.J. "Numatrin", a nuclear matrix protein associated with induction of proliferation in В lymphocytes. J. Biol. Chem. 1987; 262: 11389-11397.

61. Freeman J., Busch R. Monoclonal antibodies to human tumor nucleolar antigens: probes for studying biological function and determining clinical significance. // Hum. Antibodies Hybridomas. 1991; 2(1): 4-10.

62. Freeman J., Busch R., Gyorkey F. et al. Identification and characterization of human proliferation-associated nucleolar antigen with a molecular weight of 120.000 expressed in early Gi.phase. // Cancer Res. 1988; 48(5): 1244-1251.

63. Freeman J., Hazlewood J., Bondada V. et al. Proliferation related nucleolar antigens pl45 and pl20 associated with separate nucleolar elements and differences in tissue distribution. // Cancer Commun. 1989; 1(6): 367-372.

64. Freeman J., McRoire D., Busch P. et al. Identification and partial characterization of a nucleolar antigen with a molecular weight of 145.000 found in a broad range of human cancers. // Cancer Res. 1986; 46(7): 35933598.

65. Fujimoto J., Shiota M., Iwahara T. et al. Characterization of the transforming activity of p80, a hyperphosphorylated protein in a Ki-1 lymphoma cell line with chromosomal translocation t(2;5). // Proc. Natl; Acad. Sci. USA. 1996; 93(9): 4181-4186.

66. Fukami-Kobayashi J., Mitsui Y. Overexpression of proliferating cell nuclear antigen in mammalian cells negates growth arrest by serum starvation and cell contact. // Jpn. J. Cancer Res. 1999; 90(3): 286-293.

67. Gerdes J., Lemke H., Baisch H. et al. Cell cycle analysis of a cell proliferation- associated human nuclear antigen defined by the monoclonal antibody Ki-67.//J. Immunol. 1984; 133: 1710-1715.

68. Gerdes J., Li L., Schlueter C. Immunochemical and molecular biologic characterization of the cell proliferation-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67. // Am. J. Pathol. 1991; 138(4): 867-873.

69. Gerdes J., Schwab U., Lemke H. et al. Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen associated with cell proliferation. // Int. J. Cancer. 1983; 31: 12-16.

70. Girod S., Groth W., Junk M. et al. P53 and PCNA expression in malignant melanomas of the head and neck. // Pigment. Cell Res. 1994; 7(5): 354-357.

71. Goodpasture C., Bloom S.E. Visualisation of nucleolar organizer regions in mammalian chromosomes using silver staining. // Chromosoma. 1975; 52: 37-50.

72. Gore S., Weng L., Burke P. Identification of growth factor-responsive acute myelogenous leukemia based on factor-dependence for survival and proliferation. // Leukemia. 1994; 8: 1854-1863.

73. Guillaud P., Vermont J., Seigneurin D. Automatic classification of cells in cell cycle phases based on Ki-67 antigen quantification by fluorescence microscopy. // Cell Prolif. 1991; 24(5): 481-491.

74. Haijolov A.A. The nucleolus and ribosome biogenesis. // Cell Biol. Monography. 1985; 12: 1-268.

75. Haldane J., Scott R., Wright N. Does the use Ki-67 allow the determination of tumor growth fraction? // J. Pathol. 1990; 160: 155-161.

76. Hall P., Kearsey J., Coates P. et al. Characterization of the interaction between PCNA and Gadd45. // Oncogene. 1995; 10(12): 2427-2433.

77. Hall P., Levison D., Woods A. et al. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunolocalization in paraffin sections: an index of cell proliferation with evidence of deregulated expression in some neoplasms. // J. Pathol. 1990; 162(4): 285-294.

78. Hall P., Woods A. Immunohistochemical markers of cellular proliferation. // Cell Tissue Kinet. 1990; 23: 505-522.

79. Hartwell L., Weinert T. Checkpoints. Controls that ensure the order of cell cycle events. // Science. 1989; 249: 629-638.

80. Hazlewood J., Fonagy A., Henning D. et al. mRNA levels for human nucleolar protein pi20 in tumor and nontumor cells. // Cancer Commun. 1989; 1(1): 29-34.

81. Hendricks J., Wilkinson E. Quality control considerations for Ki-67 detection and quantitation in paraffin-embedded tissue. // J. Cell Biochem. Suppl. 1994; 19: 105-110.

82. Hernandez-Verdun D. The nucleolus today. // J Cell Sci 1991; 99: 465471.

83. Hernandez-Verdun D., Roussel P., Gebrane-Younes J. Emerging concepts of nucleolar assembly. // J. Cell Sci. 2002; 115(Pt 11) :2265-7220.

84. Hingorani K., Szebeni A., Olson M.O. Mapping the functional domains of nucleolar protein B23. // J. Biol. Chem. 2000; 275(32):24451-24457.

85. Hirt A., Werren E., Luethy A. et al. Cell cycle analysis in lymphoid neoplasma in childhood: differences among immunologic subtypes and similarities in the proliferation of normal and leukemic precursor B-cells. // Br. J.Haematol. 1992; 80(2): 189-193.

86. Hofmann-Wellenhof R., Smolle J., Kerl H. The influence of staining procedures on the assessment of cell proliferation as defined by the monoclonal antibody Ki67. // Am. J. Dermapathol. 1990; 12(5): 458-461.

87. Hozak P., Zatsepina O., Vasilyeva J. Chentsov Y. An electron microscopic study of nucleolus organizer regions at some stages of the cell cycle (Gi period, G2 period, mitosis). // Biol. Cell. 1986; 57(3): 197-205.

88. Isola J., helin H., Kellionienei O. Immunoelectron-microscopic localization of a proliferation-associated antigen Ki-67 in MCF-7 cells. // J. Histochem. 1990; 22(9): 498-506.

89. Ivanyi J.L., Kiss A., Telek B. Nucleolar organizer regions in acute and chronic leukaemias. //Acta Histochem 1992; 93(2): 453-461.

90. Iyengar B. Expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA): proliferative phase functions and malignant transformation of melanocytes. // Melanoma Res. 1994; 4(5): 293-295.

91. Izban K.F., Alkan S., Singleton T.P., Hsi E.D. Multiparameter immunohistochemical analysis of the cell cycle proteins. cyclinDl, Ki-67, p21WAFl, p27KIPl, and p53 in mantle cell lymphoma. // Arch. Pathol. Lab. Med. 2000; 124(10): 1457-1462.

92. Jakobisiak M., Bruno S., Skierski J. et al. Cell cycle specific effects of lovastatin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991; 88(9): 3628-3632.

93. Jiang P.S., Chang J.H., Yung B.Y. Different kinases phosphorylate nucleophosmin/B23 at different sites during G(2) and M phases of the cell cycle. //CancerLett. 2000; 153(1-2): 151-160.

94. Junera' H.R., Masson C., Geraud G. et al. Involvement of in situ conformation of ribosomal genes and selective distribution of upstream binding factor in rRNA transcription. // Mol. Biol. Cell. 1997; 8: 145-156.

95. Kalir Т., Chan K.S., Liu Z. et al. Semi-automatic quantitation of nucleolar organizer regions in non-Hodgkin's lymphomas. // Pathol. Res. Pract. 1994; 190(2): 124-128.

96. Kamel O., LeBrun D., Davis R. et al. Growth fraction estimation of malignant lymphomas in formalin-fixed paraffin-embedded tissue using anti-PCNA/cyclin 19A2. Correlation with Ki-67 labeling. Am. J. Pathol. 1991; 138(6): 1471-1477.

97. Kamerow H., Perchick A., Burstein D. Immunocytochemical detection of cyclin, a proliferation-associated protein, in cytologic preparations. // Acta Cytol. 1991; 35(5): 491-496.

98. Keim D., Hailat N., Hodge D. et al. Proliferating cell nuclear antigen expression in childhood acute leukemia. // Blood. 1990; 76(5): 985-990.

99. Key G., Kubbutat M., Gerdes J. Assessment of cell proliferation by means of an enzyme-linked immunosorbent assay based on the detection of the Ki-67 protein. // J. Immunol. Meth. 1994; 117: 113-117.

100. Keyomarsi K., Sandoval L., Band V. et al. Synchronization of tumor and normal cells from Gi to multiple cell cycles by lovastatin. // Cancer res. 1991; 51(13): 3602-3609.

101. Klobusicka M., Babusikova O. The relationship between argyrophilic proteins and some immunophenotypic markers in acute leukemia cells. // Neoplasma. 1997; 44(6): 356-360.

102. Kondo Т., Minamino N., Nagamura-Inoue Т. et al; Identification and characterization of nucleophosmin/B23/numatrin which binds the anti-oncogenic transcription factor IRF-1 and manifests oncogenic activity. // Oncogene. 1997; 15(11): 1275-1281.

103. Kotelnikov V. Prognostic significance of neoplastic cell proliferation in human haematological malignancies. // Folia Haematol; 1990; 117(3): 391-397.

104. Krauss J., Pantazis C., Chandler F. The proliferative fraction in lymph nodes: a comparison of proliferating cell nuclear antigen morphometry to flow cytometry. //Ann. Clin. Lab. Sci. 1992; 22(3): 189-196.

105. Kreitz S., Fackelmayer F.O., Gerdes J., Knippers R. The proliferation-specific human Ki-67 protein is a constituent of compact chromatin. // Exp .Cell Res. 2000; 261(1): 284-292.

106. Kreipe H., Heidebrecht H., Hansen S. et al. New proliferation-associated nuclear antigen detectible in paraffin-embedded tissue by the monoclonal antibody Ki-Sl. // Am. J. Pathol. 1993; 142(1): 3-9.

107. Kreipe H., Wacker H., Heidebrecht H. et al. Determination of the growth fraction in non-Hodgkin's lymphomas by monoclonal antibody Ki-S5 directed against a formalin-resistant epitope of the Ki-67 antigen. // Am. J. Pathol. 1993; 142(6): 1689-1694.

108. Kurki P., Vanderlaan M., Polbear F. et al. Expression of proliferation cell nuclear antigen (PCNA/cyclin) during the cell cycle. // Exp. Cell Res. 1986; 2166: 209-219.

109. Kute Т., Quadri Y. Measurement of proliferation nuclear and membrane markers in tumor cells by flow cytometry. // J. Cytochem. Histochem. 1991; 39(8): 1125-1130.

110. Landberg G., Roos G. Washless double staining of PCNA and Ki-67 in FCM cell cycle analysis. // Cell Prolif. 1990; 24(1): 106-111.

111. Landberg G., Roos G. Antibodies to proliferating cell nuclear antigen as S-phase probes in flow cytometric се1Г cycle analysis. // Cancer Res. 1991; 51(17): 4570-4574.

112. Landberg G., Tan E., Roos G. Flow cytometric multiparameter analysis of proliferating cell nuclear antigen/cyclin and Ki-67 antigen: a new view of the cell cycle. // Exp. Cell Res. 1990; 187(1): 111-118.

113. Larsson P. Cell proliferation in renal cell carcinoma. A clinical study with special reference to prognosis. // Scand. J. Urol. Nephrol. Suppl. 1994; 165: 1-8.

114. Laskey R., Fairman M., Blow J. S phase of the cell cycle. // Science. 1989; 246: 609-613.

115. Lee M. Y. W. T., Alegandro R., Toomew N. Immunochemical studies of DNA polymerase delta: relationships with DNA polymerase alpha. // Arch. Biochem. Biophis. 1989; 272: 1-9.

116. Lelle R.J. In situ determination of the Ki-67 growth fraction (Ki-67 GF) in human tumors Article in German. // Acta Histochem. Suppl. 1990; 39: 109124.

117. Leonardi E., Girlando S., Serio G. et al. PCNA and Ki-67 expression in breast carcinoma. Correlations with clinical and biological variables. // J. Clin. Pathol. 1992;45:416-419.

118. Leoncini L., Del Vecchio M., Megha T. et al. Correlations between apoptotic and proliferative indices in malignant non-Hodgkin's lymphomas. // Am. J. Pathol. 1993; 142(3): 755-763.

119. Liu Q.-R, Chan P.K. Characterization of seven processed pseudogenes of nucleophosmin/B23 in the human genome. // DNA and Cell Biol. 1993; 12: 149156.

120. Liu Q.R., Chan P.K. Formation of nucleophosmin/B23 oligomers requires both the amino- and the carboxyl-terminal domains of the protein. // Eur. J. Biochem. 1991; 200(3): 715-721.

121. Liu Y.C., Chen G.S., Liu W.L. et al. Estimation of PCNA mRNA stability in cell cycle by a serum- deprivation method. // J. Cell Biochem. 1995; 57(4): 641-646.

122. Liu H.T., Yung B.Y. In vivo interaction of nucleophosmin/B23 and protein C23 during cell cycle progression in HeLa cells. // Cancer Lett. 1999; 144(1): 45.54.

123. Lohr F., Wenz F., Haas S. et al. Comparison of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) staining and BrdUrd-labeling index under different proliferative conditions in vitro by flow cytometry. // Cell Prolif. 1995; 28(2): 93-104.

124. Lorand-Metze I., Carvalho M.A., Metze K. Relationship between morphometric analysis of nucleolar organizer regions and cell proliferation in acute leukemias. //Cytometry. 1998; 32(1): 51-56.

125. Lundblad D., Landberg G., Roos G. et al. Ki-67 as a marker for cell cycle regulation by interferon. // Anticancer Res. 1991; 11(6): 2131-2136.

126. MacCallum D.E., Hall P.A. Biochemical characterization of pKi67 with the identification of a mitotic-specific form associated with hyperphosphorylation and altered DNA binding. // Exp. Cell Res. 1999; 252(1): 186-198.

127. MacCallum D.E., Hall P.A. The location of pKi67 in the outer dense fibrillary compartment of the nucleolus points to a role in ribosome biogenesis during the cell division cycle. // J. Pathol. 2000; 190(5): 537-544.

128. Marandola P., Lardennois В., Ploton D. et al. A new marker for early detection and indicator of progression of cancer of the bladder. Preliminary results with Ag-NOR index in 38 cases of superficial bladder cancer. // Eur. Urol. 1992; 21(1): 31-33.

129. Marandola P., Lardennois В., Ploton D. et al. Nucleolar organizer regions: preliminary results of the clinical use of a new marker for prostatic carcinoma (40 cases). // Eur Urol 1992; 21(1): 71-74.

130. McGrath P., Holley D., Hamby L. et al. Prospective study correlating pi20 antigen expression with established prognostic factors in breast cancer. // Surg. Oncol. 1994; 3(2): 69-77.

131. Mcintosh I., Koonce M. Mitosis. // Science. 1989; 246: 622-628.

132. Miettinen M., Schwarting R., Hyun B. Immunohistochemical evaluation of hematologic malignancies. // Hematol. Oncol. Clin North Am. 1994; 8(4): 683-701.

133. Mikulka W., Bolton W. methodologies for the preservation of proliferation associated antigens PCNA, pi20, and pi05 in tumor cell lines for use in flow cytometry. // cytometry. 1994; 17(3): 246-257.

134. Mitani S., tango Т., Sonobe Y. et al. Expression of three cell proliferation-associated antigens, DNA polymerase alpha, Ki-67 antigen and transferring receptor in nodal and cutaneous T-cell lymphomas. // Int. J; Hematol. 1991; 54(5): 385-393.

135. Montalban C., Obeso G., Gallego A. Peripheral T-cell lymphoma: a clinicopathological study of 41 cases and evaluation of the prognostic significance of the update Kiel classification. // Histopathology. 1993; 22(4): 303-310.

136. Muro Y., Chan E., Landberg G. et al. A cell-cycle nuclear autoantigen containing WD-40 motifs expressed mainly in S and G2 phase cells. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995; 207(3): 1029-1037.

137. Murray A., Kirschner M. Dominoes and clocks: the union of two views of the cell cycle. // Science. 1989; 246: 614-621.

138. Ng I.O., Lai E.C, Fan S.T. et al. Prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen expression in hepatocellular carcinoma. // Cancer. 1994; 73(9): 2268-2274.

139. Niewiadomska H., Mirowski M., Kulczycka D. et al. Some oncogene and tumour suppressor gene protein products expression in B-cellchronic lymphocytic leukaemia. //Cytobios. 2000; 103(404):.159-168.

140. Nilsson S., Nordgren H., Eklov S. et al. Expression of Ki-67 a proliferation-associated antigen — in prostatic cancer. // Acta Oncol. 1991; 30(2): 177-179.

141. Nozawa Y., Van Belzen N., Van der Made A.C. et al. Expression of nucleophosmin/B23 in normal and neoplastic colorectal mucosa. // J. Pathol. 1996; 178(1): 48-52.

142. Ochs R., Lischive M.A., O'Leary P., Busch H. Localization of nucleolar phosphoproteins B23 and C23 during mitosis. // Exp.Cell Res. 1983; 146: 139149.

143. Ochs R., Reilly M., Freeman J., Busch H. Intranucleolar localization of human proliferating cell nuclear antigen pi20. // Cancer Res. 1988; 48(22): 6523-6529.

144. Ogata K., Kurki P., Celi J.E.E. et al. Monoclonal antibodies to a nuclear protein (PCNA/cyclin) associated with DNA replication. // Exp. Cell Res. 1987; 168:475-486.

145. Okuda M. The role of nucleophosmin in centrosome duplication. // Oncogene. 2002; 21(40): 6170-6174.

146. O'Rielly R., Crafford A., Miller L. Viral proliferating cell nuclear antigen. //Nature. 1989; 337: 606-611.

147. Ozdemir B.H., Ozdemir O.G., Sertcelik A. The prognostic importance of the nucleolar organizer region (AgNOR), Ki-67 and proliferating cell nuclearantigen (PCNA) in primary nonurachal bladder adenocarcinoma. // APMIS. 2001; 109(6): 428-434.

148. Papadhimitriou S., Daskalopoulou D., Tsaftaridis P. et al. Evaluation of argyrophylic nucleolar organizer regions (AgNORs) in multiple myeloma. // J. Clin Pathol. 2000; 53: 462-465.

149. Parkins C., Bush C., Price P., Steel G. Cell proliferation in human tumor xenografts: measurement using antibody labeling against bromodeoxyuridine and Ki-67. // Cell Prolif. 1991; 24(2): 171-179.

150. Parkins C., Darling J., Gill S. et al; cell proliferation in serial biopsies through human malignant brain tumors: measurement using Ki-67 antibody labeling. // Br. J. Neurosurg. 1991; 5(3): 289-298.

151. Paulin-Levasseur M., Julien M., Horner M., Chen G. Characterization of the 2H12 antigen as a nonshuttling human isoelectric variant of the nucleolar proteinB23. //Exp. Cell Res. 1995; 219: 514-526.

152. Pellicciari C., Filippini C., De-Grada L. et al. Cell cycle effects of hypertonic stress on various human cells in culture. // Cell Biochem Funct. 1995; 13(1): 1-8.

153. Pelusi G., Trere D., Formelli G. et al. AgNOR protein quantity of cervical smears correlates with that of histological sections in cervical intraepithelial neoplasia. // Eur. J. Histochem. 1997; 41(2): 105-110.

154. Pession A., Farabegoli F., Trere D. et al. The Ag-NOR proteins and transcription and duplication of ribosomal genes in mammalian cell nucleoli. // Chromosoma. 1991; 100: 242-250.

155. Petrzilka G., Schroeder H. Activation of human T-lymphocytes. // Cell Tissue Res. 1979; 201: 101 -127.

156. Philipova R., Vassilev A., Kaneva R. et al. Expression of the nuclear protein mitotin in differentiating in vitro HL-60 cells. // Biol. Cell. 1991; 72(1-2): 47-50.

157. Philipova R., Zhelev N., Todorov I. et al. Monoclonal antibodies against nuclear matrix antigen in proliferating human cells. // Biol. Cell. 1987; 60: 1-6.

158. Pich A., Chiusa L., Audisio E., Marmont F. Nucleolar organizer region counts predict complete remission, remission duration, and survival in adult acute myelogenous leukemia patients. // J. Clin. Oncol. 1998; 16(4): 1512-1518.

159. Pogorelov V., Kaplanskaya I., Baydurin S. et al. Computerized histopathologic estimation of malignant potential in non-Hodgkin's lymphomas. // In: Modeling and signal processing of cellular systems. Ulm University, 1991; 221-226.

160. Porschen R., Kriegel A., Langen C. et al. Assessment of proliferative activity in carcinomas of the human alimentary tract by ki-67 immunostaining. // Int. J. Cancer. 1991; 47(5): 686-691.

161. Prelich G., Tan C.K., Kostura M; et al. Functional identity of proliferating cell nuclear antigen and DNA polymerase delta auxiliary protein. // Nature. 1987; 326: 517-521.

162. Prosperi E. Multiple roles of the proliferating cell nuclear antigen: DNA replication, repair and cell cycle control. // Prog. Cell Cycle Res. 1997; 3: 193210.

163. Prosperi E., Scovassi A., Stivala L., Bianchi L. Proliferating cell nuclear antigen bound to DNA synthesis sites: phosphorylation and association with cyclin D1 and cyclin A. // Exp. Cell Res. 1994; 215(2): 257-262.

164. Qiao L., Pizzolo G., Melamed M. Effects of selected chemotherapeutic agents on PCNA expression in prostate carcinoma cell lines. // Urol. Res. 1994; 22(3): 171-176.

165. Rao V.V., Dchnittger S., Hansmann I. Chromosomal localization of the human proliferating cell nuclear antigen (PCNA) gene to or close to 20pl2 by in situ hybridization. // Cytogenet. Cell Genet. 1991; 56(3-4): 169-170.

166. Raty R., Franssila K., Joensuu H. et al. Ki-67 expression level, histological subtype, and the International Prognostic Index as outcome predictors in mantle cell lymphoma. // Eur. J. Haematol. 2002; 69(1): 11-20.

167. Raza A., Imren S., Gezer S. et al. Expression of nucleolar antigen p 145 in bone marrow cells of patients with myeloid leukemias. // Cancer Res. 1989; 49(2): 482-487.

168. Rivas C., Echezarreta G., Garcia R. et al. A multiparametric study of malignant lymphoma of mucosa associated lymphoid tissue (MALT). // Leuk. Lymphoma. 1992; 8(1-2): 87-96.

169. Roussel P., Andre C., Comai L., Hernandez-Verdun D. The rDNA transcription machinery is assembled during mitosis in active NGRs and absent in inactive NORs. // J. Cell Biol. 1996; 133: 235-246.

170. Roussel P., Belenguer P., Amalric F., Hernandes-Verdun D. Nucleolin is an Ag-NOR protein this property is determined by its amino-terminal domain independently of its phosphorylation state// Exp. Cell Res. 1992; 203: 259-269.

171. Roussel P. and Hernandez-Verdun D. Identification of Ag-NOR proteins, markers of proliferation related to ribosomal gene activity. // Exp. Cell Res. 1994; 214: 465-472.

172. Sabattini E., Gerdes J., Gherlinzoni F. et al. Comparison between the monoclonal antibodies Ki-67 and PC10 in 125 malignant lymphomas. // J. Pathol. 1993; 169(4): 397-403.

173. Sarraf C., McCormick C., Brown G. et al. Proliferating cell nuclear antigen immunolocalization in gastro-intestinal epithelia. // Digestion. 1991; 50(2): 85-91.

174. Sasaki K., Matsumura K., Murakami T. et al. Intranuclear localization of the Ki-67 reactive nuclear antigen in HeLa cells. Flow cytometric analysis. // Biol. Cell. 1990; 68: 129-132.

175. Sasaki К., Murakami Т., Kawasaki M. et al. The cell cycle associated changes of the Ki-67 reactive nuclear antigen expression. // J. Cell Physiol. 1987; 133: 679-583.

176. Schmidt-Zachmann M.S., Hugle-Dorr В., Franke W.W. A constitutive nucleolar protein identified as a member of the nucleoplasmin family. // EMBO J. 1987; 6: 1881-1890.

177. Scholzen Т., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown. // J. Cell Physiol. 2000; 182(3): 311-322.

178. Schonk D., Kuijpers H., van Drumen E. Assignment of the gene(s) involved in the expression of the proliferation-related Ki-67 antigen to human chromosome 10. //Hum. Genet. 1989; 83: 297-302.

179. Seiter P., Zatsepina O.V., Hoffmann M., Grummt I. Constitutive and strong association of PAF 53 with RNA polymerase I. // Chromosoma. 1997; 106: 216-255.

180. Shaw P.J., Jordan E.G. The nucleolus. // Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 1995; 11:93-121.

181. Shibuya M., Ito S., Miwa Т., et al. Proliferative potential of brain tumors. Analyses with Ki-67 and anti-DNA polymerase alpha monoclonal antibodies, bromodeoxyuridine labeling, and nuclear organizer region counts. // Cancer. 1993; 71(1): 199-206.

182. Sirri V., Roussel P., Gendron M.C., Hernandez-Verdun D. Amount of the two major Ag-NOR proteins, nucleolin, and protein B23 is cell-cycle dependent. // Cytometry. 1997; 28 (2): 147-156.

183. Sirri V., Roussel P., Hernandez-Verdun D. The AgNOR proteins: qualitative and quantitative changes during the cell cycle. // Micron. 2000; 31(2): 121-126.

184. Sirri V., Roussel .P, Trere D. et al. Amount variability of total and individual Ag-NOR proteins in cells stimulated to proliferate. // J. Histochem. Cytochem. 1995; 43(9): 887-893.

185. Smetana K. and Busch H. The nucleolus and nucleolar DNA. The cell nucleus. // New York Academic Press. 1974; 75-148.

186. Smetana K., Ochs R., Lischwe M. et al. Immunofluorescence studies on protein B23 and C23 in nucleoli of human lymphocytes. // Exp. Cell Res. 1984; 152: 195-203.

187. Steck K., el Naggar A. Comparative flow cytometric analysis of Ki-67 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in solid neoplasms. // Cytometry. 1994; 17(3): 258-265.

188. Stein H., Foss H.-D., Durkop H. et al. CD30+ anaplastic large cell lymphoma: a review of its histopathologic, genetic and clinical features. // Blood. 2000: 96(12): 3681-3695.

189. Stephenson C., Desai Z., Bridges J. The proliferative activity of B-chronic lymphocytic leukemia lymphocytes prior to and after stimulation with TP A and PHA.//Leuk. Res. 1991; 15(11): 1005-1012.

190. Subong E.N., Shue M.J., Epstein J.I. et al. Monoclonal antibody to prostate cancer nuclear matrix protein (PRO:4-216) recognizes nucleophosmin/B23. // Prostate. 1999; 39(4): 298-304.

191. Takasaki Y., Deng J.S., Tan E.M. A nuclear antigen associated with cell proliferation and blast transformation. Its distribution in synchronized cells. // J. Exp. Med. 1981; 154: 1899-1903.

192. Tawfic SI, Olson M.O., Ahmed K. Role of protein phosphorylation in post-translational regulation of protein В23 during programmed cell death in the prostate gland. //J. Biol. Chem. 1995; 270(36): 21009-21015.

193. Todorov I. Philipova R., Zhelev N. Changes in a nuclear matrix antigen during the cell cycle: interphase and mitotic cells. // Biol. Cell: 1988; 62: 105111.

194. Trere D., Ceccarelli C., Danova; M., Derenzini M. In vivo bromodeoxyuridine labelling index, AgNOR protein expression and: DNA content in human tumours. // Eur. J. Histochem. .1996; 40(1): 17-26.

195. Trere D., Gramantieri L., Siringo S. et al. In hepatocellular carcinoma AgNOR protein expression correlates with tumour mass doubling time. // J; Hepatol. 1996; 24(1): 60-65.

196. Trere D., Melchiorri C., Chieco P. et al. Interphase AgNOR quantity and DNA content in endometrial adenocarcinoma. // Gynecol. Oncol. 1994; 53(2): 202-207.

197. Trere D., Migaldi M., Montanaro L. et al. p 120 expression provides a reliable indication of the rapidity of cell duplication in: cancer cells independently of tumor origin. // Ji Pathol; 2000; 192(2): 216-220;

198. Trere D., Pession A., Basso G. et al. Prognostic relevance of pretreatment proliferative rapidity of marrow blast cells in childhood acute lymphoblastic leukemia. //Br. J. Cancer. 1994; 70(6): 1198-1202.

199. Tsai S.T., Jin Y.T. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) expression in oral squamous cell carcinomas. // J. Oral Pathol. Med. 1995; 24(7): 313-315.

200. Tsurimoto T. PCNA binding proteins. // Front. Biosci: 1999; 4: 849-858.

201. Tungekar M., Gatter K., Dunnill M., Mason D. Ki-67 immunostaining and survival in operable lung cancer:// Histopathology. 1991; 19(6): 545-550.

202. Umekawa H., Chang J.-H., Correia J.J. et al. Nucleolar protein B23: bacterial expression, purification, oligomerization and secondary structures of two isoforms. // Cell. Mol. Biol; Res. 1993; 39: 635-645.

203. Verhuijen R., Kuijpers H., Schlingemann R. et al. I. Ki-67 detects a nuclear matrix-associated proliferation-related antigen. I. Intracellular localization during interphase. //J. Cell Sci: 1989; 92: 123-130.

204. Verhuijen R, Kuijpers H., Van Driel R. et al. I. Ki-67 detects a nuclear matrix-associated proliferation-related antigen. II. Localization in mitotic cells and association with chromosomes. //J. Cell Sci. 1989; 92: 131-138.

205. Veronese S., GambacortaM. Detection of Ki-67 proliferation rate in breast cancer. Correlation with clinical and pathologic features. // Am. J. Clin. Pathol. 1991; 95(1): 30-34.

206. Wachtler F., Ellinger A., Schwarzacher H.G. Nucleolar changes in human phytohaemagglutinin-stimulated lymphocytes. // Cell Tissue Res. 1980; 213(2): 351-360.

207. Wachtler F., Mosgoller W., Schwarzacher H.G. Electron microscopic in situ hybridization and autoradiography: localization and transcription of rDNA in human lymphocyte nucleoli. // Exp. Cell Res. 1990; 187(2): 346-348.

208. Wachtler F., Schwarzacher H.G., Ellinger A. The influence of the cell cycle on structure and number of nucleoli in cultured human lymphocytes. // Cell Tissue Res. 1982; 225(1): 155-163.

209. Wang D., Baumann A., Szebeni A., Olson M.O. The nucleic acid binding activity of nucleolar protein B23.1 resides in its carboxyl-terminal end. // J. Biol. Chem. 1994; 269(49): 30994-30998.

210. Wilson G., Saunders M., Dische S. et al. Direct comparison of bromodeoxyuridine and Ki-67 labeling indices in human tumors. // Cell Prolif. 1996; 29(3): 141-152.

211. Wu Y., Luo H., Kanaan N;, Wu J.J. The proteasome controls the expression of a proliferation-associated nuclear antigen Ki-67. // Cell Biochem. 2000; 76(4): 596-604.

212. Yamaguchi A., Takegawa S., Ishida T. et al. Detection of the growth fraction in colorectal tumours by a monoclonal antibody against DNA polymerase alpha. // Br. J. Cancer. 1990; 61: 390-397.

213. Yankulov K., Hadjilov K., Kounev K. The use of monoclonal antibody against a proliferating cell nuclear matrix antigen; in the study of solid human tumours. // Int. J. Cancer. 1989; 42: 800-807.

214. Yee H.T., Ponzoni M., Merson A. et al. Molecular characterization of the t(2;5) (p23; q35) translocation in anaplastic large cell lymphoma (Ki-1) and Hodgkin's disease. //Blood; 1996; 87(3): 1081-1088.

215. Yeo J.P., Toh B.H. Cell-cycle-associated autoantibodies: markers for autoimmunity and probes for molecular cell biology. // Autoimmunity. 1994; 18(4): 291-300.

216. You B.J., Huang I.J., Liu W.H. et al. Decrease in nucleophosmin/B23 mRNA and telomerase activity during indomethacin-induced apoptosis of gastric KATO-III cancer cells.//Arch. Pharmacol. 1999; 360(6): 683-690.

217. Yun J., Liew C.T., Chew E.Q., Chan J.Y. Expression and relocation of B23 in the process of rat liver cell hyperplasia and liver regeneration Article in Chinese. // Zhonghua Yi Xue Za Zhi 2002; 82(14): 974-978.

218. Yung B.Y., Yang Y.H., Bor A.M. Nucleolar protein B23 translocation after deferoxamine treatment in a human leukemia cell line. // Int. J. Cancer. 1991; 48(5): 779-784.

219. Zatsepina O.V., Rousselet A., Chan P.K. et al. The nucleolar phosphoprotein B23 redistributes in part to the spindle poles during mitosis. // J. Cell Sci. 1999; 112 ( Pt 4): 455-466.

220. Zatsepina O.V., Todorov I.T., Philipova R.N. et al. Cell cycle-dependent translocations of a major nucleolar phosphoprotein, B23, and some characteristics of its variants. // Eur. J. Cell Biol. 1997; 73(1): 58-70.

221. Zatsepina O.V., Voit R., Grummt I. et al. The RNA-polymerase I-specific transcription initiation factor UBF is associated with transcriptionally active and inactive ribosomal genes. // Chromosoma. 1993; 102: 599-611.

222. Zehr R., Bauer Т., Marks K., Weltevreden A. Ki-67 and grading of malignant fibrous histiocytomas. // Cancer. 1990; 66(9): 1984-1990.