Иммуномодуляторы на основе мурамилпептидов и бактериальной ДНК: от эксперимента к клинике тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.03, кандидат наук Пащенков, Михаил Владимирович

• Пащенков, Михаил Владимирович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Пащенков, Михаил Владимирович

Оглавление

ОСНОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1 Общая характеристика иммуномодуляторов

1.2 Принципы функционирования врожденной иммунной системы

1.3 Бактериальные иммуномодуляторы как аналоги ПАМП

1.4 Иммунобиологические и терапевтические свойства мурамилпептидов

1.5 Иммунобиологические и терапевтические свойства микробной ДНК и ее аналогов

1.6 Дендритные клетки — связующее звено между врожденным и адаптивным иммунитетом

1.7 Роль хемокинов CCL19 и CCL21 в миграции дендритных клеток и клеток адаптивной иммунной системы

1.8 Дистанционное управление клеточным составом ЛУ как способ иммуномодулирующего воздействия

1.9 Резюме

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1 К главе 3

2.2 К главе 4

2.3 К главе 5

2.4 К главе 6

2.5 Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. Иммунобиологические свойства мурамилпептидов грамотрицательных бактерий

3.1 Получение комплекса мурамилпептидов из S. typhi и подтверждение его биологической активности

3.2 Влияние мурамилпептидов грамотрицательных бактерий на МФ и ДК человека in vitro

3.3 Факторы, определяющие различия в ответе ДК и МФ на мурамилпептиды in vitro

3.4 Характеризация рецепторов, участвующих в активации МФ под действием ГМтри и диГМтетра

3.5 Характеризация поглощения, процессинга и сигнальных путей ГМтри и диГМтетра в МФ

3.6 Иммуностимулирующая активность производных мурамилпептидов

3.7 Индукция толерантности и перекрестной толерантности МФ к мурамилпептидам и ЛПС

3.8 Влияние КМП грамотрицательных бактерий на врожденный иммунитет мышей

3.9 Обнаружение и характеризация антител к КМП

ГЛАВА 4. Клиническая и иммунологическая эффективность комплекса мурамилпептидов грамотрицательных бактерий (препарата «Полимурамил»)

4.1 I фаза клинических испытаний

4.2 II/III фаза клинических испытаний

ГЛАВА 5. Противоопухолевая активность и механизмы действия CpG-ОДН 7909 у пациентов с метастатической меланомой (II фаза клинических испытаний)

5.1 Характеристики пациентов

5.2 Терапевтическая эффективность

5.3 Нежелательные явления

5.4 Изменения фенотипических и функциональных свойств клеток крови в ходе лечения CpG-ОДН 7909

5.5 Лабораторные предикторы эффективности CpG-ОДН 7909

5.6 Анализ ЛУ, дренирующих места введения CpG-ОДН 7909

5.7 Анализ метастазов, прогрессирующих после частичной ремиссии или стабилизации

ГЛАВА 6. Дистанционное управление миграцией клеток иммунной системы с помощью

трансгенной экспрессии хемокина CCL21 в коже

6.1 Трансфекция плазмидами, кодирующими mCCL21, приводит к экспрессии и секреции mCCL21 клетками COS-7 in vitro

6.2 Трансгенный mCCL21 обладает функциональной активностью

6.3 Трансгенный и рекомбинантный CCL21 повышают поглощение декстрана и экспрессию CD40 на ДК

6.4 Введение mCCL21 -кодирующих плазмид в кожу с помощью генного ружья вызывает экспрессию mCCL21 в эпидермисе с последующей диффузией в дерму и накоплением в дренирующих ЛУ

6.5 Внутрикожное введение плазмид, кодирующих mCCL21, вызывает миграцию ДК и различных субпопуляций Т-клеток в дренирующие ЛУ

6.6 Внутрикожное введение плазмиды, кодирующей mCCL21, усиливает эмиграцию ДК из трансфицированных участков кожи

ГЛАВА 7. Обсуждение

7.1 «Полимурамил» — иммуномодулятор на основе естественных мурамилпептидов грамотрицательных бактерий

7.2 CpG-ОДН 7909 — синтетический аналог бактериальной ДНК с противоопухолевой активностью

7.3 Дистанционное управление клеточным составом ЛУ путем трансгенной экспрессии хемокинов в коже

7.4 Заключение

ВЫВОДЫ

БЛАГОДАРНОСТЬ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ОСНОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

2-5-ОАС — 2'5'-олигоаденилатсинтетаза

АГ — антиген

АПК — антигенпредставляющая клетка

AT — антитела

АЧТВ — активированное частичное тромбопластиновое время

БСА — бычий сывороточный альбумин

ВВЭ — венулы с высоким эндотелием (high endothelial venules)

ВЭЖХ — высокоэффективная жидкостная хроматография

ГМДП — глюкозаминилмурамилдипептид

ГМтри — глюкозаминилмурамилтрипептид

ГМтетра — глюкозаминилмурамилтетрапептид

ДК — дендритная клетка

диГМтетра — димер глюкозаминилмурамилтетрапептида

ИФА — иммуноферментный анализ

КИП — коктейль ингибиторов протеаз

КМП — комплекс мурамилпептидов

JI2000 — липофектамин

ЛПС — липополисахарид

ЛУ — лимфатический узел

МАПК — митоген-активируемая протеинкиназа

МАТ — моноклональное антитело

МДП — мурамилдипептид

МЛУ — множественная лекарственная устойчивость

МНК — мононуклеарная клетка

МФ — макрофаг

НЯ — нежелательное явление

ОДН — олигодезоксинуклеотид

OnjNF — остаточная продукция фактора некроза опухолей

ПАМП — патоген-ассоциированный молекулярный паттерн

ПГ — пептидогликан

пДК — плазмацитоидная дендритная клетка

пДНК — плазмидная ДНК

ппДК — плазмацитоидная пре-дендритная клетка

ПЗ — прогрессирование заболевания

ПМ — «Полимурамил»

ПР — полная ремиссия

ПРР — паттерн-распознающий рецептор

ПЦР-РВ — полимеразная цепная реакция в реальном времени

СЗ — стабилизация заболевания

СИФ — средняя интенсивность флюоресценции

УДФ — уридиндифосфат

ФР — физиологический раствор

ХЛ — хемилюминесценция

ЦТЛ — цитотоксический Т-лимфоцит

4P — частичная ремиссия

ЭБ — эритроциты барана

ЭЕ — эндотоксиновая единица

ActD — актиномицин D

CCL — CC chemokine ligand - хемокин СС-типа

CCR — CC chemokine receptor - рецептор к СС-хемокину

CFSE — карбоксифлюоресцеина сукцинимидиловый эфир

CpG-ОДН — ОДН, содержащий тандем(ы) «неметилированный цитозин — гуанин)

CRP — C-reactive protein - С-реактивный белок

СТСАЕ — Common Terminology Criteria for Adverse Events - общие

терминологические критерии нежелательных явлений

CXCL — СХС chemokine ligand - хемокин СХС-типа

EGFP — enhanced green fluorescent protein - усиленный зеленый флюоресцентный белок

ELISPOT — enzyme-linked immunospot assay

FAM — 6-карбоксифлюоресцеин

FITC — флюоресцеина изотиоцианат

GAPDH — глицеральдегидфосфатдегидрогеназа

GM-CSF — гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор

IFN — интерферон

IKK — iKB-kinase - киназа фактора 1кВ

IL — интерлейкин

IRAK — interleukin-1 receptor-associated kinase - киназа, ассоциированная с

рецептором к интерлейкину-1

IRES — internal ribosome entry site - внутренний сайт входа в рибосомы

LAL — limulus amoebocyte lysate - лизат амебы лимулюс

Lin — общее обозначение линейных маркеров CD3, CD14, CD16, CD19, CD56

МСР-1 — monocyte chemotactic protein-1 - моноцитарный хемотактический белок

meso-DAP — л/езо-диаминопимелиновая кислота

МНС — major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости

MIP — macrophage inflammatory protein - макрофагальный воспалительный белок

MyD88 — myeloid differentiation antigen 88 - миелоидный дифференцировочный антиген

NF-kB — nuclear factor kappa В - ядерный фактор каппа-В

NLR — NOD-like receptor - NOD-подобный рецептор

NOD — nucleotide oligomerization domain - домен олигомеризации

олигонуклеотидов

РЕ — phycoerythrine - фикоэритрин

Pit — paucity of lymphoid tissue - разреженность лимфоидной ткани

RIP2 — receptor-interacting protein 2 - рецептор-взаимодействующий белок

siRNA — small interfering ribonucleic acid - малая интерферирующая РНК

Th — T helper - Т-хелпер

TLR — Toll-like receptor - То11-подобный рецептор

TNF — фактор некроза опухолей

Treg — Т-регуляторная клетка

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуномодуляторы на основе мурамилпептидов и бактериальной ДНК: от эксперимента к клинике»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы

Разработка препаратов, направленных на повышение резистентности организма против инфекций и на отторжение злокачественных опухолей является важной, актуальной задачей. Это обусловлено ростом частоты инфекций, вызванных антибиотикоустойчивыми штаммами бактерий [127], ростом частоты хронических инфекционно-воспалительных заболеваний, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами, ростом частоты злокачественных новообразований.

Повышение резистентности против инфекций может быть достигнуто путем стимуляции как адаптивного, так и врожденного компонентов иммунной системы. Вакцины активируют адаптивный иммунитет и обеспечивают длительную специфическую защиту, которая, как правило, развивается медленно и эффективна только против одного вида микроорганизмов. Иммуномодуляторы бактериального происхождения активируют врожденный иммунитет. Поэтому защитное действие этой группы препаратов, в отличие от действия вакцин, наступает быстро, а также является относительно неспецифичным, т.е. эффективным против больших групп патогенов. Все это делает иммуномодуляторы бактериального происхождения мощными средствами не только профилактики, но и лечения инфекций. Иммуномодуляторы, в отличие от антибиотиков, не действуют непосредственно на микробы, в связи с чем к ним не формируется лекарственной устойчивости у микробов. Кроме того, правильно подобранная иммуномодулирующая терапия позволяет частично или полностью восстановить нарушенную функцию иммунитета у пациентов с вторичными иммунодефицитами, по крайней мере на время лечения антибиотиками.

Учитывая сказанное, иммуномодуляторы бактериального происхождения целесообразно применять совместно с антибиотиками для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний, особенно при инфекциях лекарственно-устойчивыми штаммами и/или при наличии иммунодефицитных состояний (стратегия «двойного удара» [18]). Кроме того, эта группа иммуномодуляторов может применяться и в ситуациях, требующих быстрого повышения резистентности организма при угрозе индивидуального или массового заражения. Учитывая разнообразие

микроорганизмов, иммуиомодулятора «против всех инфекций», вероятно, не существует. Однако поиск препаратов, дающих оптимальную защиту против определенных видов инфекций, оправдан и пока далек от завершения.

Известные на сегодня бактериальные иммуномодуляторы относятся в основном к двум группам: 1) мурамилпептиды и их синтетические аналоги; 2) нуклеиновые кислоты и их синтетические аналоги. Мурамилпептиды представляют собой мономерные фрагменты пептидогликана (ПГ) бактерий. Все известные на сегодня мурамилпептидные иммуномодуляторы, в том числе отечественный препарат Ликопид, являются аналогами мурамилдипептида, который активирует врожденный иммунитет через рецептор NOD2 [123, 254]. В то же время мурамилпептиды грамотрицательных бактерий обладают структурной особенностью, а именно содержат в 3-м положении пептидной части остаток мезо-диаминопимелиновой кислоты (мезо-ДАП). Такие мурамилпептиды распознаются рецептором NOD1 [79]. По данным литературы, агонисты NOD1 являются более эффективными активаторами системы фагоцитов, чем агонисты NOD2, и поэтому лучше защищают от бактериальных инфекций [85]. Однако возможности терапевтического применения мурамилпептидов грамотрицательных бактерий, активирующих рецептор NOD1, практически не исследованы. Недостаточно изучены механизмы действия этих мурамилпептидов на клетки врожденной и адаптивной иммунной системы и на организм человека в целом, не охарактеризована возможная терапевтическая эффективность при инфекционно-воспалительных заболеваниях.

Целью иммуномодулирующей терапией при онкологических заболеваниях является разрыв выгодных для опухоли взаимоотношений с иммунной системой, активация клеток-эффекторов противоопухолевого иммунитета. В этом отношении привлекательны синтетические олигодезоксинуклеотиды (ОДН), содержащие тандемы «неметилированный цитозин — гуанин» (CpG). Эти соединения представляют собой синтетические аналоги бактериальной ДНК [208]. CpG-ОДН обладают несколькими видами противоопухолевой активности: вызывают выработку интерферонов I типа, которые обладают антипролиферативным и иммунодулирующим действием; посредством интерферонов вызывают активацию противоопухолевых эффекторов — NK-клеток, CD8+ Т-клеток; вызывают

созревание плазмацитоидных дендритных клеток, что способствует индукции адаптивного иммунного ответа против опухоли [203]. В доклинических испытаниях на животных показана противоопухолевая активность CpG-ОДН in vivo, тогда как в I фазе клинических испытаний показана безопасность CpG-ОДН у человека [207]. Однако терапевтическая эффективность CpG-ОДН у пациентов со злокачественными опухолями не изучена. Не решен принципиальный вопрос: возможно ли путем активации врожденной иммунной системы с помощью CpG-ОДН добиться регресса злокачественной опухоли у человека. Не охарактеризованы механизмы действия CpG-ОДН при злокачественных новообразованиях, биомаркеры ответа иммунной системы на CpG-ОДН, предикторы возможной клинической эффективности CpG-ОДН.

Бактериальная ДНК, помимо активации врожденного иммунитета, может выступать и в ином качестве — как носитель (вектор) генотерапевтического воздействия. Традиционные бактериальные иммуномодуляторы, воздействуя на клетки иммунной системы, вызывают изменение экспрессии сотен генов. Генотерапия представляет собой принципиально иной подход к иммуномодуляции, поскольку позволяет более тонко влиять на отдельные процессы в иммунной системе путем изменения экспрессии отдельных генов. Одним из таких процессов является миграция клеток, которая контролируется хемокинами (цитокинами-хемоаттрактантами). Регулирование миграции путем трансгенной экспрессии хемокинов, которая обеспечивается бактериальными векторами, можно рассматривать как способ иммуномодулирующего воздействия. Однако возможности этого подхода практически не изучены. В частности, одним из ключевых хемокинов, регулирующих миграцию клеток врожденной и адаптивной иммунной системы, является CCL21 [381]. Неизвестно, можно ли с помощью плазмидных векторов добиться значимой экспрессии CCL21 in vivo. Неизвестны кинетика и распределение трансгенного белка в организме. Неизвестно, какое влияние может оказывать трансгенный CCL21 на миграцию клеток в месте экспрессии и во вторичных лимфоидных органах.

Цели и задачи

Цель работы — изучение механизмов действия и терапевтической эффективности иммуномодуляторов бактериального происхождения на основе мурамилпептидов, бактериальной ДНК и ее синтетических аналогов.

Задачи:

1. Изучить иммунобиологические свойства мурамилпептидов грамотрицательных бактерий.

2. Изучить терапевтическую эффективность мурамилпептидов грамотрицательных бактерий в клинических испытаниях.

3. Изучить терапевтическую эффективность и механизмы действия синтетического олигодезоксинуклеотида, содержащего неметилированные тандемы цитозин-гуанин (СрО-олигодезоксинуклеотида), в клинических испытаниях при метастатической меланоме.

4. Изучить возможность применения бактериальной плазмидной ДНК как носителя геноспецифического иммуномодулирующего воздействия (на модели регулирования миграции клеток иммунной системы путем трансгенной экспрессии хемокина ССЬ21, достигаемой с помощью плазмидных векторов).

Научная новизна

В работе получены новые данные о свойствах, возможностях клинического применения и механизмах действия мурамилпептидов и Срв-ОДН; предложен принципиально новый подход к иммуномодуляции, основанный на временной трансгенной экспрессии хемокинов.

В частности, впервые систематически изучены иммунобиологические свойства естественных мурамилпептидов грамотрицательных бактерий, содержащих остаток мезо-ДАП. Впервые показано, что иммуностимулирующей активностью обладают мурамилпептиды, содержащие остаток мезо-ДАП не только в концевом положении, но и внутри олигопептидной цепи.

Впервые охарактеризован рецепторный аппарат и сигнальные пути, участвующие в активации клеток под действием димерного мурамилпептида

диГМтетра. В отличие от мономерного ГМтри, который распознается преимущественно через NOD1, в распознавании диГМтетра участвуют рецепторы NODI, NOD2 и TLR2. С помощью ингибиторного анализа показано, что оба мурамилпептида активируют сигнальную цепочку RIP2 - IKK - NF-кВ, а также киназу р38.

На основе этих предпосылок впервые создан иммуномодулирующий препарат, представляющий собой комплекс мурамилпептидов (КМП) грамотрицательных бактерий (ГМтри + ГМтетра + диГМтетра). Впервые показано, что КМП активирует систему фагоцитов у экспериментальных мышей и обладает выраженным протективным действием против бактериальных инфекций. В доклинических и клинических испытаниях показана безопасность этого препарата. В рамках клинических испытаний указанного комплекса мурамилпептидов впервые изучено влияние агонистов NOD1 на иммунную систему человека. Показано, что при введении здоровым добровольцам препарат усиливает бактерицидность лейкоцитов, индуцирует выработку провоспалительных цито- и хемокинов, С-реактивного белка, IgM. Впервые показано, что лабораторными маркерами ответа на мурамилпептиды грамотрицательных бактерий у человека могут служить уровни хемокинов CCL4 (MIP-lß) и CCL2 (МСР-1), цитокина IL-6, а также С-реактивного белка в сыворотке. Во II/III фазе клинических испытаний впервые показано, что КМП обладает терапевтическим действием у пациентов с гнойной инфекцией, ускоряет их выздоровление при добавлении к стандартному лечению (хирургическая операция + антибиотикотерапия).

Впервые обнаружено, что миелоидные ДК при стимуляции мурамилпептидами секретируют существенно более низкие количества провоспалительных цито- и хемокинов, чем макрофаги (МФ) при тех же условиях стимуляции, что обусловлено минимум двумя факторами: ранним прекращением экспрессии генов провоспалительных цитокинов и неэффективностью трансляции мРНК провоспалительных цитокинов в ДК, стимулированных мурамилпептидами. Впервые показано усиливающее действие интерлейкина-1 ß на секрецию цитокинов ДК при стимуляции мурамилпептидами.

Показано, что мурамилпептиды грамотрицательных бактерий не индуцируют перекрестную толерантность к липополисахариду (ЛПС). В то же

время мурамилпептиды индуцируют перекрестную толерантность друг к другу, а также не влияют на ЛПС-индуцированную толерантность к ЛПС, что обосновывает возможность сочетанного применения мурамилпептидов и ЛПС для профилактики септического шока.

Впервые обнаружены антигенные и иммуногенные свойства диГМтетра, изучены кинетика, изотипический состав и эпитопная специфичность антител (АТ) к диГМтетра, показаны их защитные свойства на модели летальной инфекции грамотрицательными бактериями.

Впервые показана принципиальная возможность добиться регресса метастатической меланомы, вплоть до индукции длительной ремиссии, с помощью агонистов рецептора ТЫ19 — Срв-ОДН. Подтверждена безопасность применяемого агониста ТЬЯ9 — Срв-ОДН 7909. Впервые всесторонне изучены иммунологические эффекты, индуцируемые Срв-ОДН у пациентов с метастатической меланомой. Впервые показано, что Срв-ОДН при введении пациентам с меланомой вызывает продукцию ИФН I типа, активацию плазмацитоидных предендритных клеток (ппДК), повышение уровней циркулирующих ранних плазматических клеток, снижение уровней циркулирующих ЫК-клеток, а также — у части пациентов — повышение 1ЧК-активности. Впервые показано, что терапевтическая активность Срв-ОДН ассоциирована с повышением №С-активности, что позволяет рассматривать цепочку «Срв-ОДН — ппДК — цитокины (ИФН I типа) — 1МК-клетки» в качестве одного из основных механизмов противоопухолевого действия СрО-ОДН. Впервые охарактеризованы изменения в лимфатических узлах (ЛУ), дренирующих места подкожного введения Срв-ОДН, показана роль ЛУ в механизмах действия СрО-ОДН. Впервые выдвинуто предположение о том, что Т^-клетки блокируют некоторые эффекты Срв-ОДН, что позволяет рассматривать деплецию Т^-клеток как способ повышения терапевтической активности Срв-ОДН.

Впервые показана принципиальная возможность дистанционно управлять клеточным составом регионарных лимфатических узлов (ЛУ) путем трансгенной экспрессии хемокинов в эпидермисе. Впервые получены плазмидные конструкции, позволяющие экспрессировать в эукариотических клетках хемокин ССЬ21 и маркерный белок ЕвРР (как раздельно, так и в виде гибридного белка), что

позволяет отслеживать трансфицироваиные клетки и оценивать внутриклеточное распределение трансгенного ССЬ21. Показано, что внутрикожное введение этих конструкций с помощью технологии генного ружья позволяет добиться высокой экспрессии хемокина ССЬ21 в эпидермисе, которая длится несколько суток. Впервые показано, что трансгенный ССЬ21, экспрессируемый в эпидермисе, доставляется с током лимфы в регионарные ЛУ и накапливается в них в высокой, физиологически значимой концентрации. Впервые показано, что трансгенный ССЬ21, транспортирующийся в ЛУ, влияет на клеточный состав ЛУ, в частности, вызывает накопление в этих ЛУ зрелых ДК и наивных Т-клеток. Впервые выявлена способность ССЬ21 усиливать макропиноцитоз и экспрессию СЭ40 на ДК.

Теоретическая и практическая значимость

Теоретическая значимость работы состоит в обнаружении новых свойств и способов применения иммуномодуляторов бактериального происхождения. Во-первых, обнаружены новые аспекты влияния мурамилпептидов на врожденный и адаптивный иммунитет: уточнены механизмы распознавания мурамилпептидов грамотрицательных бактерий клетками врожденной иммунной системы человека; описаны особенности экспрессии и секреции провоспалительных цитокинов клетками врожденной иммунной системы человека при воздействии мурамилпептидов; описана способность мурамилпептидов грамотрицательных бактерий усиливать резистентность к грамположительным бактериям; обнаружена иммуногенность более сложных по структуре мурамилпептидов грамотрицательных бактерий, таких как диГМтетра, которая проявляется при иммунизации высокими дозами этих соединений; продемонстрированы защитные свойства АТ против таких мурамилпептидов. В целом, эти результаты расширяют понимание механизмов действия мурамилпептидных иммуномодуляторов. Во-вторых, показана принципиальная возможность добиться регресса меланомы с помощью активатора врожденного иммунитета — Срв-ОДН. В-третьих, показана эффективность генотерапевтического подхода к иммуномодуляции с использованием бактериальных векторов.

Основной практический результат работы — создание нового иммуномодулирующего препарата «Полимурамил», представляющего собой

комплекс мурамилпептидов грамотрицательных бактерий. По результатам клинических испытаний, «Полимурамил» рекомендуется к применению в сочетании со стандартной терапией гнойных хирургических инфекций и гнойных инфекций кожи. Препарат улучшает общие результаты лечения, ускоряет разрешение воспаления, заживление раневых дефектов. Субстанция «Полимурамил» включена в Государственный реестр лекарственных средств РФ под № ФС-000557, лекарственный препарат «Полимурамил» — под № ЛП-002069.

Результаты работы позволяют рассматривать вопрос о повышении разовой и курсовой дозы «Полимурамила», а также о расширении показаний к применению препарата. Кроме того, полученные в работе новые теоретические данные о свойствах мурамилпептидов могут быть использованы для создания семейства препаратов, являющихся как «чистыми» иммуномодуляторами (ГМтри, ГМтетра), так и антибактериальными вакцинами широкого спектра действия (диГМтетра).

Уровни ССЬ4 (М1Р-1р), ССЬ2 (МСР-1), 1Ь-6 и С-реактивного белка в сыворотке являются биологическими маркерами ответа врожденной иммунной системы на мурамилпептиды грамотрицательных бактерий. Эти показатели могут использоваться для лабораторного мониторинга иммунного ответа при клинических испытаниях мурамилпептидных препаратов.

Подтверждено, что мурамилпептиды не индуцируют секрецию ТЫ- и ТЫ 7-инструктивных цитокинов антигенпредставляющими клетками, что следует учитывать при использовании мурамилпептидов в качестве иммунологических адъювантов в вакцинах.

Второй основной практический результат — демонстрация эффективности СрО-ОДН в качестве монопрепаратов у части пациентов с метастатической меланомой, что дает основания для клинического применения этого класса препаратов при меланоме. Полученные данные могут быть использованы в качестве отправной точки при оптимизации режима введения СрО-ОДН, а также при разработке способов применения СрО-ОДН при других злокачественных опухолях. Результаты работы показывают, что применение СрО-ОДН, вероятно, необходимо сочетать с деплецией Тге§-клеток, с тем чтобы повысить активирующее влияние Срв-ОДН на адаптивный иммунный ответ. В работе идентифицированы показатели иммунной системы, которые могут быть

использованы для предварительного отбора пациентов, у которых терапия СрО-ОДН будет наиболее эффективна.

В работе идентифицированы биологические маркеры активации иммунной системы под действием Срв-ОДН: 1) активность 2'5'-олигоаденилатсинтазы в сыворотке; 2) уровень ранних плазматических клеток (СВ19+СБ38Ь18Ь) в крови. Эти показатели могут использоваться для иммуномониторинга при последующих клинических испытаниях Срв-ОДН. Динамика МС-активности мононуклеарных клеток крови, нормализованная на процентное содержание ЫК-клеток, может быть использована как лабораторный показатель при оценке клинической эффективности Срв-ОДН в ходе терапии.

Технология дистанционного управления клеточным составом ЛУ с помощью трансгенной экспрессии хемокинов в эпидермисе может применяться в эксперименте для регулирования миграции различных клеток иммунной системы. Полученные данные позволяют разрабатывать эту технологию в качестве средства, повышающего эффективность профилактической и лечебной вакцинации. Обработка дендритных клеток хемокином ССЬ21 может использоваться для усиления поглощения антигенов при приготовлении дендритно-клеточных вакцин.

Положения, выносимые на защиту

1. Мурамилпептиды грамотрицательных бактерий индуцируют комплекс защитных реакций врожденного иммунитета, приводящий к повышению резистентности против бактериальных инфекций.

2. Лекарственный препарат, представляющий собой комплекс мурамилпептидов грамотрицательных бактерий, обладает объективной иммунологической и клинической эффективностью у человека.

3. Срв-ОДН обладают объективной иммунологической и клинической эффективностью у пациентов с метастатической меланомой. Механизм противоопухолевого действия Срв-ОДН при меланоме связан с повышением МК-активности в процессе лечения.

4. Временная трансгенная экспрессия хемокина ССЬ21 в эпидермисе является инструментом, позволяющим регулировать численность дендритных клеток и Т-клеток в регионарных ЛУ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Общая характеристика иммуномодуляторов

1.1.1 Зачем нужны иммуномодуляторы?

Потребность в разработке новых иммуномодуляторов обусловлена несколькими факторами. Во-первых, проблема лекарственной устойчивости и множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) бактерий в последние годы приобретает все большее значение [127]. МЛУ определяют как нечувствительность данного штамма бактерий минимум к 1 препарату из 3 и более групп антибиотиков, обычно эффективных против данного вида бактерий [239]. Причинами МЛУ являются как нерациональная антибиотикотерапия, так и эволюция бактерий под селективным давлением антибиотиков. МЛУ чаще всего встречается среди штаммов St. aureus (включая метициллин-резистентные штаммы), Enterococci, Enter obacteriaceae, P. aeruginosa, Acinetobacter baumannii, M. tuberculosis [127, 212]. Так, в США 60% выделенных от пациентов культур Acinetobacter baumannii, 15% культур К. pneumoniae и 10% культур P. aeruginosa удовлетворяют критериям МЛУ [181]. Многие лекарственно-устойчивые штаммы являются внутрибольничными; в особо тяжелых случаях в стационаре возникает по сути эндемичный очаг инфекции, с трудом поддающийся искоренению [292]. По оценке Европейского центра по контролю за инфекционными заболеваниями, в 2007 г. инфекции лекарственно-устойчивыми микроорганизмами стали причиной смерти примерно 25 ООО человек и обошлись системе здравоохранения ЕС в 2,5 млн дополнительных койко-дней и 900 млн евро [347]. Фиксируются случаи панлекарственной устойчивости, т.е. нечувствительности ко всем разрешенным к применению антибиотикам [239]. В этой ситуации лекарственные средства, направленные на активацию собственных защитных сил организма, такие как вакцины и иммуномодуляторы, становятся неизбежным дополнением или даже альтернативой антибиотикотерапии.

Во-вторых, еще в 1990-е гг. стало понятно, что у иммунокомпрометированных лиц невозможно добиться искоренения инфекции с помощью одних только антимикробных средств [18]. В этой связи была выдвинута концепция совместного применения антибиотиков и иммуномодуляторов — так

называемого «двойного удара» по микроорганизму, когда антибиотик и иммуномодулятор усиливают эффективность друг друга [18].

В-третьих, иммуномодулирующая терапия привлекает внимание и как способ лечения злокачественных опухолей, особенно на их распространенной стадии, когда оперативное и лучевое лечение неприменимы, а химиотерапия сталкивается с проблемой МЛУ опухоли или не может быть проведена в адекватном объеме из-за токсичности.

1.1.2 Виды иммуномодулирующей терапии

К иммуномодулирующей терапии в широком смысле слова относят любое воздействие, приводящее к усилению или подавлению функций иммунной системы (т.е. к иммуностимуляции или иммуносупрессии). Согласно классификации Хаитова и Пинегина [24], иммуномодуляторы делятся на экзогенные (полученные из микробного или растительного сырья), эндогенные (полученные из тканей человека и млекопитающих) и химически чистые; в последнюю группу входят препараты, полученные путем химического синтеза (синтетические), либо путем биосинтеза (рекомбинантные). Все чаще в качестве носителей иммуномодулирующего воздействия используются модифицированные клетки иммунной системы (клеточная терапия) и ДНК, кодирующая гены, имеющие отношение к иммунному ответу (генотерапия).

Один из наиболее обширных классов иммуномодуляторов — это вещества бактериальной природы и их (полу)синтетические аналоги. Как правило, эти препараты активируют врожденный иммунитет. Бактериальные иммуномодуляторы, таким образом, являются альтернативой вакцинам, которые обеспечивают специфическую защиту путем активации адаптивного иммунитета. Будучи активаторами врожденного иммунитета, в том числе антигенпредставляющих клеток (АПК), бактериальные иммуномодуляторы могут применяться в составе вакцин как адъюванты.

Одной из альтернатив «классической» иммуномодулирующей терапии является генотерапия. В отличие от иммуностимуляторов, которые одновременно влияют на экспрессию множества генов, генотерапия позволяет оказывать иммуномодулирующее воздействие путем избирательного изменения экспрессии только одного гена. Такой подход может применяться для восстановления функции

данного гена, утраченной при врожденном иммунодефиците, а также для усиления нормальной функции гена при наличии показаний. Носителями (векторами) генотерапии могут служить бактериальные плазмиды, вирусы, модифицированные клетки. Хотя данный подход к иммуномодуляции является на сегодня в основном экспериментальным, в 2010 г. сообщалось об успешной генотерапии синдрома Вискотта—Олдрича, основанной на пересадке больным детям аутологичных стволовых клеток, в которые с помощью вирусного вектора был введен нормальный аллель гена WAS [61].

1.2 Принципы функционирования врожденной иммунной системы

Поскольку основной мишенью бактериальных иммуномодуляторов является врожденная иммунная система, то имеет смысл остановиться на принципах ее функционирования.

1.2.1 Способы обнаружения микробной инвазии

Врожденная иммунная система обнаруживает микробную инвазию путем распознавания чужого и распознавания «измененного своего».

1.2.1.1 Распознавание чужого

Этот способ основан на узнавании полностью чужеродных для организма молекулярных структур микробного происхождения. Такие структуры получили название патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (ПАМП) [169]. ПАМП обладают тремя ключевыми свойствами: 1) отсутствуют в макроорганизме или в данном компартменте макроорганизма (последнее относится к нуклеиновым кислотам); 2) жизненно необходимы для функционирования микроорганизмов; 3) имеются у больших групп микроорганизмов или у всех микроорганизмов, что позволяет сократить количество распознающих рецепторов. Основные ПАМП приведены в таблице 1. Как правило, это либо облигатные полисахаридные или гликолипидные компоненты клеточной стенки микробов, либо нуклеиновые кислоты. Лишь немногие ПАМП являются белками (флагеллин, профилин).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пащенков, Михаил Владимирович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Государственная фармакопея Российской Федерации, 12-е издание. - М., 2008. -часть 1. - С. 129.

2. Винницкий Л. И., Бунятян К. А., Пинегин Б. В. и др. Отечественный иммуномодулятор нового поколения Ликопид в комплексном лечении и профилактике инфекционных осложнений в хирургической клинике // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. - 1997. - С. 46-49.

3. Кирюхин А. В., Парфенова Н. А., Максимова Т. А. и др. Оптимизация лечения часто и длительно болеющих детей: иммунокоррекция Ликопидом // Ликопид в комплексном лечении и профилактике иммунодефицитных состояний. / М., 2005. -С. 57-64.

4. Конорев М. Р. Влияние Ликопида на персистенцию Helicobacter pylori в слизистой оболочке желудка больных с хроническими гастритами // Ликопид в комплексном лечении и профилактике иммунодефицитных состояний. /М., 2005. - С. 132-135.

5. Львов В. Л., Пинегин Б. В., Хаитов Р. М., Пащенков М. В. Применение композиции, состоящей из низкомолекулярных фрагментов пептидогликана грамотрицательных бактерий, для лечения и профилактики заболеваний человека. Патент Российской Федерации 2441906. // Бюллетень Роспатента N 4. - 2012.

6. Пащенков М. В., Алхазова Б. И., Львов В. Л., Пинегин Б. В. Индукция толерантности макрофагов человека к липополисахариду и мурамилпептидам грамотрицательных бактерий // Российский иммунологический журнал. - 2012. -Т.6 - С.246-252.

7. Пащенков М. В., Алхазова Б. И., Львов В. Л., Пинегин Б. В. Особенности индукции провоспалительных генов в дендритных клетках и макрофагах под действием глюкозаминилмурамилтрипептида грамотрицательных бактерий // Иммунология. -2013. - Т. 34. -С.10-15.

8. Пащенков М. В., Алхазова Б. К, Львов В. Л., Пинегин Б. В. Применение ингибиторного анализа для изучения механизма действия мурамилпептидного иммуномодулятора "Полимурамил" // Медицинская иммунология. - 2013. - Т. 15. -С.56-62.

9. Пащенков М. В., Будихина А. С., Голубева Н. М. и др. Результаты I фазы клинических испытаний иммуномодулятора "Полимурамил" // Иммунология. -2011.-Т. 32.-С. 239-243.

10. Пащенков М. В., Будихина А. С., Голубева Н. М. и др. Результаты II/III фазы клинических испытаний иммуномодулятора "Полимурамил" при гнойной хирургической инфекции // Иммунология. - 2012. - Т. 33. - С. 199-203.

11. Пащенков М. В., Муругина Н. Е., Муругин В. В., Пинегин Б. В. Выявление и характеризация цитолитических CD8+ и CD4+ Т-клеток // Иммунология. - 2010. -Т. 31.-С. 4-12.

12. Пащенков М. В., Пак В. Г., Алхазова Б. И. и др. Индукция и защитные свойства антител к мурамилпептидам грамотрицательных бактерий // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 2013. - №2. - С.64-73.

13. Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Роль дендритных клеток в регуляции иммунного ответа // Иммунология. - 2002. - Т. 23. - С. 313-320.

14. Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Основные свойства дендритных клеток // Иммунология. - 2001. - Т. 22. - С. 7-16.

15. Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Применение РНК-интерференции для изучения механизмов распознавания мурамилпептидов. // Иммунология. - 2012. - Т. 33. -С. 292-297.

16. Пащенков М. В., Попилюк С. Ф., Алхазова Б. И. и др. Влияние муропептидов, содержащих остаток мезо-диаминопимелиновой кислоты, на макрофаги и дендритные клетки человека // Цитокины и воспаление. - 2012. - Т. 11. - С. 33-41.

17.

18.

19.

20.

21

22,

23

24,

25,

26

27

28

29

30

31

32

33

34

Пащенков М. В., Попилюк С. Ф., Алхазова Б. И. и др. Иммунобиологические свойства мурамилпептидных фрагментов пептидогликана грамотрицательных бактерий // Иммунология. - 2010. - Т. 31. - С. 119-125.

Пинегин Б. В., Андронова Т. М. Некоторые теоретические и практические вопросы клинического применения иммуномодулятора ликопида // Иммунология. - 1998. -Т. 18.-С. 60-63.

Пинегин Б. В., Андронова Т. М., Карсонова М. И. Препараты мурамилдипептидного ряда - иммунотропные лекарственные средства нового поколения // Ликопид в комплексном лечении и профилактике иммунодефицитных состояний / М., 2005. -С. 19-36.

Сизякина Л. П., Урбан Е. О. Клинико-иммунологические аспекты применения иммуномодулятора Ликопид в комплексной терапии гормонозависимой бронхиальной астмы у детей // Ликопид в комплексном лечении и профилактике иммунодефицитных состояний / М., 2005. - С. 65-77.

Хаитов М. Р. Новые иммунобиотехнологические методы для профилактики и лечения вирус-ассоциированных заболеваний // Автореферат дисс... д.м.н. М., 2008. Хаитов Р. М., Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Биология рецепторов врожденной иммунной системы // Физиология и патология иммунной системы. - 2008. - Т. 12. -С.3-28.

Хаитов Р. М., Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Роль паттерн-распознающих рецепторов во врожденном и адаптивном иммунитете // Иммунология. - 2009. - Т. 30. - С. 66-76.

Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения // Иммунология. - 2000. - Т. 21. - С. 4-7. Эстон Р. Возможности использования препарата ГМДП для профилактики и лечения гнойно-септических осложнений в послеоперационном периоде // Ликопид в комплексном лечении и профилактике иммунодефицитных состояний / М., 2005. С. 219-224.

Aboab J., Nardi О., Lipiner D. et al. Emerging drugs for the treatment of sepsis // Expert Opin Emerg Drugs. - 2006. - Vol. 11. - P. 7-22.

Adam A., Ciorbaru R, Ellouz F. et al. Adjuvant activity of monomeric bacterial cell wall peptidoglycans // Biochem Biophys Res Commun. - 1974. - Vol. 56. - P. 561-567. Adam A., Ciorbaru R., Petit J. F., Lederer E. Isolation and properties of a macromolecular, water-soluble, immuno-adjuvant fraction from the cell wall of Mycobacterium smegmatis // Proc Natl Acad Sci USA.- 1972. - Vol. 69. - P. 851-854. AJkarian M., Sedy J. R., Yang J. et al. T-bet is a STATl-induced regulator of IL-12R expression in naive CD4+ T cells // Nat Immunol. - 2002. - Vol. 3. - P. 549-557. Aloisi F., Ria F., Columba-Cabezas S. et al. Relative efficiency of microglia, astrocytes, dendritic cells and В cells in naive CD4+ T cell priming and Thl/Th2 cell restimulation // Eur J Immunol. - 1999. - Vol. 29. - P. 2705-2714.

Ando К., Mori К., Corradini N. et al. Mifamurtide for the treatment of nonmetastatic osteosarcoma // Expert Opin Pharmacother. - 2011. - Vol. 12. - P. 285-292. Anguille S., Lion E., Tel J. et al. Interleukin-15-induced CD56(+) myeloid dendritic cells combine potent tumor antigen presentation with direct tumoricidal potential // PLoS One. -2012.-Vol. 7.-P. e51851.

AsongJ., Wolfert M. A., Maiti К. K. et al. Binding and Cellular Activation Studies Reveal That Toll-like Receptor 2 Can Differentially Recognize Peptidoglycan from Grampositive and Gram-negative Bacteria // J Biol Chem. - 2009. - Vol. 284. - P. 8643-8653. Astiz M. E., Rackow E. C., Kim Y. В., Weil M. H. Monophosphoryl lipid A induces tolerance to the lethal hemodynamic effects of endotoxemia // Circ Shock. - 1991. - Vol. 33. - P. 92-97.

35.

36.

37.

38.

39.

40.

41.

42.

43.

44,

45,

46

47,

48,

49

50

51

52,

53

54

Azuma I. Development of the cytokine inducer romurtide: experimental studies and

clinical application // Trends Pharmacol Sci. - 1992. - Vol. 13. - P. 425-428.

Azuma I. Review: inducer of cytokines in vivo: overview of field and romurtide

experience // Int J Immunopharmacol. - 1992. - Vol. 14. - P. 487-496.

Azuma I., Ishihara C., Iida J. et al. Stimulation of host-defense mechanism with synthetic

adjuvants and recombinant cytokines against viral infection in mice // Adv Exp Med

Biol. - 1992. - Vol. 319. - P. 253-263.

Backstrom E., Kristensson K., Ljunggren H. G. Activation of natural killer cells: underlying molecular mechanisms revealed // Scand J Immunol. - 2004. - Vol. 60. - P. 14-22.

Baecher-Allan C., Brown J. A., Freeman G. J., Hafler D. A. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood // J Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 1245-1253. Baekkevold E. S., Yamanaka T., Palframan R. T. et al. The CCR7 ligand elc (CCL19) is transcytosed in high endothelial venules and mediates T cell recruitment // J Exp Med. -2001. - Vol. 193. - P. 1105-1112.

Bagchi A., Herrup E. A., Warren H. S. et al. MyD88-dependent and MyD88-independent pathways in synergy, priming, and tolerance between TLR agonists // J Immunol. - 2007. -Vol. 178. - P. 1164-1171.

Bahr G. M., Darcissac E., Bevec D. et al. Immunopharmacological activities and clinical development of muramyl peptides with particular emphasis on murabutide // Int J Immunopharmacol. - 1995. - Vol. 17. - P. 117-131.

Baines J., Cells E. Immune-mediated tumor regression induced by CpG-containing oligodeoxynucleotides // Clin Cancer Res. - 2003. - Vol. 9. - P. 2693-2700. Balch C. M., Buzaid A. C., Soong S. J. et al. Final version of the American Joint Committee on Cancer staging system for cutaneous melanoma // J Clin Oncol. - 2001. -Vol. 19.-P. 3635-3648.

Balkwill F. R., Mantovani A. Cancer-related inflammation: common themes and therapeutic opportunities // Semin Cancer Biol. - 2012. - Vol. 22. - P. 33-40. Ballas Z. K., Krieg A. M., Warren T. et al. Divergent therapeutic and immunologic effects of oligodeoxynucleotides with distinct CpG motifs // J Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 4878-4886.

Banchereau J., Briere F., Caux C. et al. Immunobiology of dendritic cells // Annu Rev Immunol. - 2000. - Vol. 18. - P. 767-811.

Barton G. M., Kagan J. C., Medzhitov R. Intracellular localization of Toll-like receptor 9 prevents recognition of self DNA but facilitates access to viral DNA // Nat Immunol. -2006. - Vol. 7. - P. 49-56.

Berkow R. L., Wang D., Larrick J. W. et al. Enhancement of neutrophil superoxide production by preincubation with recombinant human tumor necrosis factor // J Immunol. - 1987. - Vol. 139. - P. 3783-3791.

Bernasconi N. L., Onai N., Lanzavecchia A. A role for Toll-like receptors in acquired immunity: up-regulation of TLR9 by BCR triggering in naive B cells and constitutive expression in memory B cells // Blood. - 2003. - Vol. 101. - P. 4500-4504. Bernasconi N. L., Traggiai E., Lanzavecchia A. Maintenance of serological memory by polyclonal activation of human memory B cells // Science. - 2002. - Vol. 298. - P. 21992202.

Bertrand M. J., Doiron K., Labbe K. et al. Cellular inhibitors of apoptosis cIAPl and cIAP2 are required for innate immunity signaling by the pattern recognition receptors NODI and NOD2 // Immunity. - 2009. - Vol. 30. - P. 789-801.

Beutler B. Inferences, questions and possibilities in Toll-like receptor signalling // Nature. - 2004. - Vol. 430. - P. 257-263.

Bianchi M. E. DAMPs, PAMPs and alarmins: all we need to know about danger // J Leukoc Biol. - 2007. - Vol. 81. - P. 1-5.

55. Bird A. P. CpG-rich islands and the function of DNA methylation // Nature. - 1986. -Vol. 321.-P. 209-213.

56. Bird A. P. DNA methylation and the frequency of CpG in animal DNA // Nucleic Acids Res. - 1980. - Vol. 8. - P. 1499-1504.

57. Biron C. A., Nguyen K. B., Pien G. C. et al. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines // Annu Rev Immunol. - 1999. - Vol. 17. - P. 189-220.

58. Blasius A., Vermi W., Krug A. et al. A cell-surface molecule selectively expressed on murine natural interferon-producing cells that blocks secretion of interferon-alpha // Blood. - 2004. - Vol. 103. - P. 4201-4206.

59. Bomford R, Stapleton M., Winsor S. et al. The control of the antibody isotype response to recombinant human immunodeficiency virus gpl20 antigen by adjuvants // AIDS Res Hum Retroviruses. - 1992. - Vol. 8. - P. 1765-1771.

60. Boon T., Coulie P. G., Van den Eynde B. J., van der Brüggen P. Human T cell responses against melanoma // Annu Rev Immunol. - 2006. - Vol. 24. - P. 175-208.

61. Boztug K., Schmidt M., Schwarzer A. et al. Stem-cell gene therapy for the Wiskott-Aldrich syndrome //N Engl J Med. - 2010. - Vol. 363. - P. 1918-1927.

62. Britten C. M., Meyer R. G., Frankenberg N. et al. The use of clonal mRNA as an antigenic format for the detection of antigen-specific T lymphocytes in IFN-gamma ELISPOT assays // J Immunol Methods. - 2004. - Vol. 287. - P. 125-136.

63. Brody J. D., Ai W. Z, Czerwinski D. K. et al. In situ vaccination with a TLR9 agonist induces systemic lymphoma regression: a phase I/II study // J Clin Oncol. - 2010. - Vol. 28. - P. 4324-4332.

64. Bromley S. K., Thomas S. Y., Luster A. D. Chemokine receptor CCR7 guides T cell exit from peripheral tissues and entry into afferent lymphatics // Nat Immunol. - 2005. - Vol. 6. - P. 895-901.

65. Buchwalder P. A., Buclin T., Trinchard I. et al. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of IFN-beta la in healthy volunteers // J Interferon Cytokine Res. - 2000. - Vol. 20. - P. 857-866.

66. Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) v2.0 // http://ctep.cancer.gov/protocolDevelopment/electronic applications/docs/ctcy20 .4-3 —

-992.pdf.--1999:----

67. Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) v3.0 // http://ctep.cancer.gov/protocolDevelopment/electronic_applications/docs/ctcaev3.pdf. 2006.

68. Callahan H. J., Maurer P. H. Communication to the editors: The immunogenicity of a low molecular weight synthetic polypeptide // Immunochemistry. - 1973. - Vol. 10. - P. 205-207.

69. Cao W., Liu Y. J. Innate immune functions of plasmacytoid dendritic cells // Curr Opin Immunol. - 2007. - Vol. 19. - P. 24-30.

70. Capparelli R., Nocerino N., Medaglia C. et al. The Staphylococcus aureus peptidoglycan protects mice against the pathogen and eradicates experimentally induced infection // PLoS One. - 2011. - Vol. 6. - P. e28377.

71. Cartwright N., Murch O., McMaster S. K. et al. Selective NODI agonists cause shock and organ injury/dysfunction in vivo // Am J Respir Crit Care Med. - 2007. - Vol. 175. -P. 595-603.

72. Casrouge A., Zhang S. Y., Eidenschenk C. et al. Herpes simplex virus encephalitis in human UNC-93B deficiency // Science. - 2006. - Vol. 314. - P. 308-312.

73. Castellaneta A., Sumpter T. L., Chen L. et al. NOD2 ligation subverts IFN-alpha production by liver plasmacytoid dendritic cells and inhibits their T cell allostimulatory activity via B7-H1 up-regulation // J Immunol. - 2009. - Vol. 183. - P. 6922-6932.

74.

75.

76.

77.

78.

79.

80

81.

82,

83

84

85

86

87

88

89

90

91

92

93

Caux C., Massacrier C., Vanbervliet B. et al. Activation of human dendritic cells through

CD40 cross-linking // J Exp Med. - 1994. - Vol. 180. - P. 1263-1272.

Cavaillon J. M., Adrie C., Fitting C., Adib-Conquy M. Endotoxin tolerance: is there a

clinical relevance? // J Endotoxin Res. - 2003. - Vol. 9. - P. 101-107.

Cella M., Facchetti F., Lanzavecchia A., Colonna M. Plasmacytoid dendritic cells

activated by influenza virus and CD40L drive a potent TH1 polarization // Nat Immunol.

-2000.-Vol. l.-P. 305-310.

Cella M., Jarrossay D., Facchetti F. et al. Plasmacytoid monocytes migrate to inflamed lymph nodes and produce large amounts of type I interferon // Nat Med. - 1999. - Vol. 5. -P. 919-923.

Cella M., Scheidegger D., Palmer-Lehmann K. et al. Ligation of CD40 on dendritic cells triggers production of high levels of interleukin-12 and enhances T cell stimulatory capacity: T-T help via APC activation // J Exp Med. - 1996. - Vol. 184. - P. 747-752. Chamaillard M., Hashimoto M., Horie Y. et al. An essential role for NODI in host recognition of bacterial peptidoglycan containing diaminopimelic acid // Nat Immunol. -2003. - Vol. 4. - P. 702-707.

Chen Z. J. Ubiquitin signalling in the NF-kappaB pathway // Nat Cell Biol. - 2005. - Vol. 7. - P. 758-765.

Cho J. H. The genetics and immunopathogenesis of inflammatory bowel disease // Nat Rev Immunol. - 2008. - Vol. 8. - P. 458-466.

Chockalingam A., Brooks J. C., Cameron J. L. et al. TLR9 traffics through the Golgi complex to localize to endolysosomes and respond to CpG DNA // Immunol Cell Biol. -2009.-Vol. 87.-P. 209-217.

Chou A. J., Kleinerman E. S., Krailo M. D. et al. Addition of muramyl tripeptide to chemotherapy for patients with newly diagnosed metastatic osteosarcoma: a report from the Children's Oncology Group // Cancer. - 2009. - Vol. 115. - P. 5339-5348. Christopher son K. W., 2nd, Campbell J. J., Hromas R. A. Transgenic overexpression of the CC chemokine CCL21 disrupts T-cell migration // Blood. - 2001. - Vol. 98. - P. 35623568.

Clarke T. B., Davis K. M., Lysenko E. S. et al. Recognition of peptidoglycan from the microbiota by Nodi enhances systemic innate immunity // Nat Med. - 2010. - Vol. 16. -P. 228-231.

Clynes R., Takechi Y., Moroi Y. et al. Fc receptors are required in passive and active immunity to melanoma // Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. - Vol. 95. - P. 652-656. Coffelt S. B., Scandurro A. B. Tumors sound the alarmin(s) // Cancer Res. - 2008. - Vol. 68. - P. 6482-6485.

Coley W. B. The Treatment of Inoperable Sarcoma by Bacterial Toxins (the Mixed Toxins of the Streptococcus erysipelas and the Bacillus prodigiosus) // Proc R Soc Med. -1910. - Vol. 3. - P. 1-48.

Coulombe F., Divangahi M., Veyrier F. et al. Increased NOD2-mediated recognition of N-glycolyl muramyl dipeptide // J Exp Med. - 2009. - Vol. 206. - P. 1709-1716. Coulombe F., Fiola S., Akira S. et al. Muramyl dipeptide induces NOD2-dependent Ly6C(high) monocyte recruitment to the lungs and protects against influenza virus infection // PLoS One. - 2012. - Vol. 7. - P. e36734.

Critchley-Thorne R. J., Simons D. L., Yan N. et al. Impaired interferon signaling is a common immune defect in human cancer // Proc Natl Acad Sci USA.- 2009. - Vol. 106.-P. 9010-9015.

Cross A. S. Endotoxin tolerance-current concepts in historical perspective // J Endotoxin Res. - 2002. - Vol. 8. - P. 83-98.

Dambaeva S. V., Mazurov D. V., Golubeva N. M. et al. Effect of Polyoxidonium on the Phagocytic Activity of Human Peripheral Blood Leukocytes // Russ J Immunol. - 2003. -Vol. 8. - P. 53-60.

94. Darcissac E. C., Vidal V, Guillaume M. et al. Clinical tolerance and profile of cytokine induction in healthy volunteers following the simultaneous administration of ifn-alpha and the synthetic immunomodulator murabutide // J Interferon Cytokine Res. - 2001. -Vol. 21.-P. 655-661.

95. Davis B. K., Wen H., Ting J. P. The inflammasome NLRs in immunity, inflammation, and associated diseases // Annu Rev Immunol. - 2011. - Vol. 29. - P. 707-735.

96. Davis K. M., Nakamura S., Weiser J. N. Nod2 sensing of lysozyme-digested peptidoglycan promotes macrophage recruitment and clearance of S. pneumoniae colonization in mice // J Clin Invest. - 2011. - Vol. 121. - P. 3666-3676.

97. Divangahi M., Mostowy S., Coulombe F. et al. NOD2-deficient mice have impaired resistance to Mycobacterium tuberculosis infection through defective innate and adaptive immunity // J Immunol. - 2008. - Vol. 181. - P. 7157-7165.

98. Dong C., Davis R. J., Flavell R. A. MAP kinases in the immune response // Annu Rev Immunol. - 2002. - Vol. 20. - P. 55-72.

99. Dziarski R., Gupta D. Staphylococcus aureus peptidoglycan is a toll-like receptor 2 activator: a réévaluation // Infect Immun. - 2005. - Vol. 73. - P. 5212-5216.

100. Dzionek A., Fuchs A., Schmidt P. et al. BDCA-2, BDCA-3, and BDCA-4: three markers for distinct subsets of dendritic cells in human peripheral blood // J Immunol. - 2000. -Vol. 165. - P. 6037-6046.

101. Ehrenstein M. R, Notley C. A. The importance of natural IgM: scavenger, protector and regulator // Nat Rev Immunol. - 2010. - Vol. 10. - P. 778-786.

102. Ellouz F., Adam A., Ciorbaru R, Lederer E. Minimal structural requirements for adjuvant activity of bacterial peptidoglycan derivatives // Biochem Biophys Res Commun. - 1974. - Vol. 59. - P. 1317-1325.

103. Engels B., Rowley D. A., Schreiber H. Targeting stroma to treat cancers // Semin Cancer Biol. - 2012. - Vol. 22. - P. 41-49.

104. Faustin B., Lartigue L., Bruey J. M. et al. Reconstituted NALP1 inflammasome reveals two-step mechanism of caspase-1 activation // Mol Cell. - 2007. - Vol. 25. - P. 713-724.

105. Fehniger T. A., Cooper M. A., Nuovo G. J. et al. CD56bright natural killer cells are present in human lymph nodes and are activated by T cell-derived IL-2: a potential new link between adaptive and innate immunity // Blood. - 2003. - Vol. 101. - P. 3052-3057.

106. Fleischmann J., Golde D. W., Weisbart R. H., Gasson J. C. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor enhances phagocytosis of bacteria by human neutrophils // Blood. - 1986. - Vol. 68. - P. 708-711.

107. Fogler W. E., Fidler I. J. Comparative interaction of free and liposome-encapsulated nor-muramyl dipeptide or muramyl tripeptide phosphatidylethanolamine (3H-labelled) with human blood monocytes // Int J Immunopharmacol. - 1987. - Vol. 9. - P. 141-150.

108. Foissin B., Ohanian D., Yana M. [Clinical and therapeutic study of a new otorhinolaryngologic vaccine, 1RS 19] // Rev Laryngol Otol Rhinol (Bord). - 1967. - Vol. 88. - P. 443-449.

109. Forster R, Schubel A., Breitfeld D. et al. CCR7 coordinates the primary immune response by establishing functional microenvironments in secondary lymphoid organs // Cell. - 1999. - Vol. 99. - P. 23-33.

110. Foster S. L, Hargreaves D. C., Medzhitov R. Gene-specific control of inflammation by TLR-induced chromatin modifications // Nature. - 2007. - Vol. 447. - P. 972-978.

111. Franken N., Seidl P. H., Kuchenbauer T. et al. Specific immunoglobulin A antibodies to a peptide subunit sequence of bacterial cell wall peptidoglycan // Infect Immun. - 1984. -Vol. 44.-P. 182-187.

112. Franken N., Seidl P. H., Zauner E. et al. Quantitative determination of human IgG antibodies to the peptide subunit determinant of peptidoglycan by an enzyme-linked immunosorbent assay // Mol Immunol. - 1985. - Vol. 22. - P. 573-579.

113.

114.

115.

116.

117.

118.

119.

120.

121,

122.

123,

124,

125

126

127

128

129

130

Freudenberg M. A., Galanos C. Induction of tolerance to lipopolysaccharide (LPS)-D-galactosamine lethality by pretreatment with LPS is mediated by macrophages // Infect Immun. - 1988. - Vol. 56. - P. 1352-1357.

Fritz J. H., Girardin S. E., Fitting C. et al. Synergistic stimulation of human monocytes and dendritic cells by Toll-like receptor 4 and NODI- and NOD2-activating agonists // Eur J Immunol. - 2005. - Vol. 35. - P. 2459-2470.

Fritz J. H., Le Bourhis L, Sellge G. et al. Nodi-mediated innate immune recognition of peptidoglycan contributes to the onset of adaptive immunity // Immunity. - 2007. - Vol. 26. - P. 445-459.

Fujii S., Liu K., Smith C. et al. The linkage of innate to adaptive immunity via maturing dendritic cells in vivo requires CD40 ligation in addition to antigen presentation and CD80/86 costimulation // J Exp Med. - 2004. - Vol. 199. - P. 1607-1618. Gabrilovich D. I., Nagaraj S. Myeloid-derived suppressor cells as regulators of the immune system // Nat Rev Immunol. - 2009. - Vol. 9. - P. 162-174. Gais P., Tiedje C., Altmayr F. et al. TRIF signaling stimulates translation of TNF-alpha mRNA via prolonged activation of MK2 // J Immunol. - 2010. - Vol. 184. - P. 58425848.

Gallueci S., Lolkema M., Matzinger P. Natural adjuvants: endogenous activators of dendritic cells // Nat Med. - 1999. - Vol. 5. - P. 1249-1255.

Garlanda C., Bottazzi B., Bastone A., Mantovani A. Pentraxins at the crossroads between innate immunity, inflammation, matrix deposition, and female fertility // Annu Rev Immunol. - 2005. - Vol. 23. - P. 337-366.

Gerold G., Ajaj K. A., Bienert M. et al. A Toll-like receptor 2-integrin beta3 complex senses bacterial lipopeptides via vitronectin // Nat Immunol. - 2008. - Vol. 9. - P. 761768.

Girardin S. E., Boneca I. G., Carneiro L. A. et al. Nodi detects a unique muropeptide from gram-negative bacterial peptidoglycan // Science. - 2003. - Vol. 300. - P. 15841587.

Girardin S. E., Boneca I. G., Viala J. et al. Nod2 is a general sensor of peptidoglycan through muramyl dipeptide (MDP) detection // J Biol Chem. - 2003. - Vol. 278. - P. 8869-8872.

Girardin S. E., Travassos L. H., Herve M. et al. Peptidoglycan molecular requirements allowing detection by Nodi and Nod2 // J Biol Chem. - 2003. - Vol. 278. - P. 4170241708.

Godl K., Wissing J., Kurtenbach A. et al. An efficient proteomics method to identify the cellular targets of protein kinase inhibitors // Proc Natl Acad Sci USA.- 2003. - Vol. 100.-P. 15434-15439.

Gordon S., Taylor P. R. Monocyte and macrophage heterogeneity // Nat Rev Immunol. -2005. - Vol. 5. - P. 953-964.

Gould I. M. The epidemiology of antibiotic resistance // Int J Antimicrob Agents. - 2008. -Vol. 32 Suppl l.-P. S2-9.

Gross O., Yazdi A. S., Thomas C. J. et al. Inflammasome activators induce interleukin-1 alpha secretion via distinct pathways with differential requirement for the protease function of caspase-1 // Immunity. - 2012. - Vol. 36. - P. 388-400.

Grouard G., Rissoan M. C., Filgueira L. et al. The enigmatic plasmacytoid T cells develop into dendritic cells with interleukin (IL)-3 and CD40-ligand // J Exp Med. -1997. - Vol. 185. -P. 1101-1111.

Gunn M. D., Kyuwa S., Tarn C. et al. Mice lacking expression of secondary lymphoid organ chemokine have defects in lymphocyte homing and dendritic cell localization // J Exp Med. - 1999. - Vol. 189. - P. 451-460.

131.

132.

133.

134.

135.

136,

137,

138,

139

140

141

142

143

144

145

146

147

148

149

Gunn M. D., Tangemann K., Tarn C. et al. A chemokine expressed in lymphoid high endothelial venules promotes the adhesion and chemotaxis of naive T lymphocytes // Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. - Vol. 95. - P. 258-263.

Haas T., Metzger J., Schmitz F. et al. The DNA sugar backbone 2' deoxyribose determines toll-like receptor 9 activation // Immunity. - 2008. - Vol. 28. - P. 315-323. Harada Y., Kawano M. M., Huang N. et al. Identification of early plasma cells in peripheral blood and their clinical significance // Br J Haematol. - 1996. - Vol. 92. - P. 184-191.

Hardy R. R. B-l B cells: development, selection, natural autoantibody and leukemia // Curr Opin Immunol. - 2006. - Vol. 18. - P. 547-555.

Hartikka J., Sawdey M., Cornefert-Jensen F. et al. An improved plasmid DNA expression vector for direct injection into skeletal muscle // Hum Gene Ther. - 1996. -Vol. 7. - P. 1205-1217.

Hartmann G., Battiany J., Poeck H. et al. Rational design of new CpG oligonucleotides that combine B cell activation with high IFN-alpha induction in plasmacytoid dendritic cells // Eur J Immunol. - 2003. - Vol. 33. - P. 1633-1641.

Hartmann G., Weeratna R. D., Ballas Z. K. et al. Delineation of a CpG phosphorothioate oligodeoxynucleotide for activating primate immune responses in vitro and in vivo // J Immunol. - 2000. - Vol. 164. - P. 1617-1624.

Hasan U., Chaffois C., Gaillard C. et al. Human TLR10 is a functional receptor, expressed by B cells and plasmacytoid dendritic cells, which activates gene transcription through MyD88 // J Immunol. - 2005. - Vol. 174. - P. 2942-2950.

Hayashi F., Means T. K., Luster A. D. Toll-like receptors stimulate human neutrophil function // Blood. - 2003. - Vol. 102. - P. 2660-2669.

Hedl M., Abraham C. Distinct roles for Nod2 protein and autocrine interleukin-lbeta in muramyl dipeptide-induced mitogen-activated protein kinase activation and cytokine secretion in human macrophages // J Biol Chem. - 2011. - Vol. 286. - P. 26440-26449. Hedl M., Abraham C. Nod2-induced autocrine interleukin-1 alters signaling by ERK and p38 to differentially regulate secretion of inflammatory cytokines // Gastroenterology. -2012. - Vol. 143. - P. 1530-1543.

Hedl M., Li J., Cho J. H, Abraham C. Chronic stimulation of Nod2 mediates tolerance to bacterial products // Proc Natl Acad Sci USA.- 2007. - Vol. 104. - P. 19440-19445. Heikenwalder M., Polymenidou M., Junt T. et al. Lymphoid follicle destruction and immunosuppression after repeated CpG oligodeoxynucleotide administration // Nat Med. -2004.-Vol. 10.-P. 187-192.

Hemmi H., Takeuchi O., Kawai T. et al. A Toll-like receptor recognizes bacterial DNA // Nature. - 2000. - Vol. 408. - P. 740-745.

Henri S., Vremec D., Kamath A. et al. The dendritic cell populations of mouse lymph nodes // J Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 741-748.

Hiasa M., Abe M., Nakano A. et al. GM-CSF and IL-4 induce dendritic cell differentiation and disrupt osteoclastogenesis through M-CSF receptor shedding by up-regulation of TNF-alpha converting enzyme (TACE) // Blood. - 2009. - Vol. 114. - P. 4517-4526.

Hibbert L, Pflanz S., De Waal Malefyt R, Kastelein R. A. IL-27 and IFN-alpha signal via Statl and Stat3 and induce T-Bet and IL-12Rbeta2 in naive T cells // J Interferon Cytokine Res. - 2003. - Vol. 23. - P. 513-522.

Hirsh V., Paz-Ares L., Boyer M. et al. Randomized phase III trial of paclitaxel/carboplatin with or without PF-3512676 (Toll-like receptor 9 agonist) as firstline treatment for advanced non-small-cell lung cancer // J Clin Oncol. - 2011. - Vol. 29. - P. 2667-2674.

Hitti E., Iakovleva T., Brook M. et al. Mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 2 regulates tumor necrosis factor mRNA stability and translation mainly by

150.

151.

152.

153.

154.

155,

156.

157.

158

159

160

161

162

163

164

165

166

167

altering tristetraprolin expression, stability, and binding to adenine/uridine-rich element // Mol Cell Biol. - 2006. - Vol. 26. - P. 2399-2407.

Hoebe K., DuX., Georgel P. et al. Identification of Lps2 as a key transducer of MyD88-independent TIR signalling // Nature. - 2003. - Vol. 424. - P. 743-748. Hoebe K., Georgel P., Rutschmann S. et al. CD36 is a sensor of diacylglycerides // Nature. - 2005. - Vol. 433. - P. 523-527.

Hoedemakers R. M., Vossebeld P. J., Daemen T., Scherphof G. L. Functional characteristics of the rat liver macrophage population after a single intravenous injection of liposome-encapsulated muramyl peptides // J Immunother Emphasis Tumor Immunol. - 1993,-Vol. 13.-P. 252-260.

Hofmann M. A., Kors C., Audring H. et al. Phase 1 evaluation of intralesionally injected TLR9-agonist PF-3512676 in patients with basal cell carcinoma or metastatic melanoma // J Immunother. - 2008. - Vol. 31. - P. 520-527.

Honda K., Ohba Y., Yanai H. et al. Spatiotemporal regulation of MyD88-IRF-7 signalling for robust type-I interferon induction // Nature. - 2005. - Vol. 434. - P. 10351040.

Honda K., Yanai H, Mizutani T. et al. Role of a transductional-transcriptional processor complex involving MyD88 and IRF-7 in Toll-like receptor signaling // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. - Vol. 101. - P. 15416-15421.

Honda K., Yanai H., Negishi H. et al. IRF-7 is the master regulator of type-I interferon-dependent immune responses // Nature. - 2005. - Vol. 434. - P. 772-777. Hong M., Yoon S. I., Wilson I. A. Structure and functional characterization of the RNA-binding element of the NLRX1 innate immune modulator // Immunity. - 2012. - Vol. 36. -P. 337-347.

Horng T., Barton G. M., Flavell R. A., Medzhitov R. The adaptor molecule TIRAP provides signalling specificity for Toll-like receptors // Nature. - 2002. - Vol. 420. - P. 329-333.

Hornung V., Ablasser A., Charrel-Dennis M. et al. AIM2 recognizes cytosolic dsDNA and forms a caspase-1-activating inflammasome with ASC // Nature. - 2009. - Vol. 458. -P. 514-518.

Hornung V., Rothenfusser S., Britsch S. et al. Quantitative expression of toll-like receptor 1-10 mRNA in cellular subsets of human peripheral blood mononuclear cells and sensitivity to CpG oligodeoxynucleotides // J Immunol. - 2002. - Vol. 168. - P. 45314537.

Hotchkiss R. S., Karl I. E. The pathophysiology and treatment of sepsis // N Engl J Med. -2003. - Vol. 348. - P. 138-150.

Huang T. T., Feinberg S. L, Suryanarayanan S., Miyamoto S. The zinc finger domain of NEMO is selectively required for NF-kappa B activation by UV radiation and topoisomerase inhibitors // Mol Cell Biol. - 2002. - Vol. 22. - P. 5813-5825. Huster K. M., Busch V., Schiemann M. et al. Selective expression of IL-7 receptor on memory T cells identifies early CD40L-dependent generation of distinct CD8+ memory T cell subsets // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. - Vol. 101. - P. 5610-5615. Ichihara N., Kanazawa R., Sasaki S. et al. Phase I study and clinical pharmacological study of muroctasin // Arzneimittelforschung. - 1988. - Vol. 38. - P. 1043-1069. Inohara N., Koseki T., del Peso L. et al. Nodi, an Apaf-l-like activator of caspase-9 and nuclear factor-kappaB // J Biol Chem. - 1999. - Vol. 274. - P. 14560-14567. Ito T., Kanzler H., Duramad O. et al. Specialization, kinetics, and repertoire of type 1 interferon responses by human plasmacytoid predendritic cells // Blood. - 2006. - Vol. 107. - P. 2423-2431.

Jalili A., Makowski M., Switaj T. et al. Effective photoimmunotherapy of murine colon carcinoma induced by the combination of photodynamic therapy and dendritic cells // Clin Cancer Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 4498-4508.

168.

169.

170.

171.

172.

173.

174.

175.

176.

177

178

179.

180

181

182

183

184

185

186

187

Jalili A., Pashenkov M., Kriehuber E. et al. Induction of targeted cell migration by cutaneous administration of a DNA vector encoding a biologically active chemokine CCL21 // J Invest Dermatol. - 2010. - Vol. 130. - P. 1611-1623.

Janeway C. A., Jr. Approaching the asymptote? Evolution and revolution in immunology // Cold Spring Harb Symp Quant Biol. - 1989. - Vol. 54 Pt 1. - P. 1-13. Janeway C. A., Trovers P., Walport M., Capra J. D. Immunobiology: The immune system in health and disease, 4th ed. //. - 1999. - Vol. - P. 405.

Johnsen I. B., Nguyen T. T., Ringdal M. et al. Toll-like receptor 3 associates with c-Src tyrosine kinase on endosomes to initiate antiviral signaling // Embo J. - 2006. - Vol. 25. -P. 3335-3346.

Jonuleit H., Schmitt E., Schuler G. et al. Induction of interleukin 10-producing, nonproliferating CD4(+) T cells with regulatory properties by repetitive stimulation with allogeneic immature human dendritic cells // J Exp Med. - 2000. - Vol. 192. - P. 12131222.

Jonuleit H., Schmitt E., Stassen M. et al. Identification and functional characterization of human CD4(+)CD25(+) T cells with regulatory properties isolated from peripheral blood //J Exp Med. -2001. - Vol. 193. - P. 1285-1294.

Junt T., Scandella E., Forster R. et al. Impact of CCR7 on priming and distribution of antiviral effector and memory CTL // J Immunol. - 2004. - Vol. 173. - P. 6684-6693. Kabelitz D. Expression and function of Toll-like receptors in T lymphocytes // Curr Opin Immunol. - 2007. - Vol. 19. - P. 39-45.

Kadowaki N, Antonenko S., Liu Y. J. Distinct CpG DNA and polyinosinic-polycytidylic acid double-stranded RNA, respectively, stimulate CD 11c- type 2 dendritic cell precursors and CD1 lc+ dendritic cells to produce type IIFN // J Immunol. - 2001. - Vol. 166.-P. 2291-2295.

Kadowaki N., Ho S., Antonenko S. et al. Subsets of human dendritic cell precursors express different toll-like receptors and respond to different microbial antigens // J Exp Med. - 2001. - Vol. 194. - P. 863-869.

Kagan J. C., Medzhitov R. Phosphoinositide-mediated adaptor recruitment controls Tolllike receptor signaling // Cell. - 2006. - Vol. 125. - P. 943-955.

Kagan J. C., SuT., Horng T. et al. TRAM couples endocytosis of Toll-like receptor 4 to the induction of interferon-beta // Nat Immunol. - 2008. - Vol. 9. - P. 361-368. Kaji M., Kaji Y., Ohkuma K. et al. Phase 1 clinical tests of influenza MDP-virosome vaccine (KD-5382) // Vaccine. - 1992. - Vol. 10. - P. 663-667.

Kallen A. J., Hidron A. I., Patel J., Srinivasan A. Multidrug resistance among gramnegative pathogens that caused healthcare-associated infections reported to the National Healthcare Safety Network, 2006-2008 // Infect Control Hosp Epidemiol. - 2010. - Vol. 31. - P. 528-531.

Kanneganti T. D., Lamkanfi M., Kim Y. G. et al. Pannexin-1-mediated recognition of bacterial molecules activates the cryopyrin inflammasome independent of Toll-like receptor signaling // Immunity. - 2007. - Vol. 26. - P. 433-443.

Kanneganti T. D., Lamkanfi M., Nunez G. Intracellular NOD-like receptors in host defense and disease // Immunity. - 2007. - Vol. 27. - P. 549-559.

Karin M., Greten F. R. NF-kappaB: linking inflammation and immunity to cancer development and progression // Nat Rev Immunol. - 2005. - Vol. 5. - P. 749-759. Karre K. Natural killer cell recognition of missing self // Nat Immunol. - 2008. - Vol. 9. -P. 477-480.

Kawai T., Akira S. Pathogen recognition with Toll-like receptors // Curr Opin Immunol. -2005. - Vol. 17. - P. 338-344.

Kawai T., Sato S., Ishii K. J. et al. Interferon-alpha induction through Toll-like receptors involves a direct interaction of IRF7 with MyD88 and TRAF6 // Nat Immunol. - 2004. -Vol. 5. - P. 1061-1068.

188.

189.

190.

191.

192.

193.

194.

195.

196.

197.

198

199

200

201

202

203

204

205

206

207

Kawai T., Takahashi K., Sato S. et al. IPS-1, an adaptor triggering RIG-I- and Mda5-mediated type I interferon induction // Nat Immunol. - 2005. - Vol. 6. - P. 981-988. Kengatharan K. M., De Kimpe S., Robson C. et al. Mechanism of gram-positive shock: identification of peptidoglycan and lipoteichoic acid moieties essential in the induction of nitric oxide synthase, shock, and multiple organ failure // J Exp Med. - 1998. - Vol. 188. -P. 305-315.

Kerkmann M., Costa L. T., Richter C. et al. Spontaneous formation of nucleic acid-based nanoparticles is responsible for high interferon-alpha induction by CpG-A in plasmacytoid dendritic cells // J Biol Chem. - 2005. - Vol. 280. - P. 8086-8093. Kerkmann M., Rothenfusser S., Hornung V. et al. Activation with CpG-A and CpG-B oligonucleotides reveals two distinct regulatory pathways of type I IFN synthesis in human plasmacytoid dendritic cells // J Immunol. - 2003. - Vol. 170. - P. 4465-4474. Khaidukov S. V., Komaleva R. L., Nesmeyanov V. A. N-acetylglucosamine-containing muramyl peptides directly affect macrophages // Int J Immunopharmacol. - 1995. - Vol. 17. - P. 903-911.

Kim H. J., Yang J. S., Woo S. S. et al. Lipoteichoic acid and muramyl dipeptide synergistically induce maturation of human dendritic cells and concurrent expression of proinflammatory cytokines // J Leukoc Biol. - 2007. - Vol. 81. - P. 983-989. Kim J. G., Lee S. J., Kagnoff M. F. Nodi is an essential signal transducer in intestinal epithelial cells infected with bacteria that avoid recognition by toll-like receptors // Infect Immun. - 2004. - Vol. 72. - P. 1487-1495.

Kim J. Y., Omori E., Matsumoto K. et al. TAK1 is a central mediator of NOD2 signaling in epidermal cells // J Biol Chem. - 2008. - Vol. 283. - P. 137-144.

Kim T., Pazhoor S., Bao M. et al. Aspartate-glutamate-alanine-histidine box motif (DEAH)/RNA helicase A helicases sense microbial DNA in human plasmacytoid dendritic cells // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2010. - Vol. 107. - P. 15181-15186. Kim Y. G., Park J. H., Daignault S. et al. Cross-tolerization between Nodi and Nod2 signaling results in reduced refractoriness to bacterial infection in Nod2-deficient macrophages // J Immunol. - 2008. - Vol. 181. - P. 4340-4346.

Kim Y. H., Girardi M., Duvic M. et al. Phase I trial of a Toll-like receptor 9 agonist, PF-3512676 (CPG 7909), in patients with treatment-refractory, cutaneous T-cell lymphoma // J Am Acad Dermatol. - 2010. - Vol. 63. - P. 975-983.

Kim Y. M., Brinkmann M. M, Paquet M. E., Ploegh H. L. UNC93B1 delivers nucleotide-sensing toll-like receptors to endolysosomes // Nature. - 2008. - Vol. 452. - P. 234-238. Kobayashi K. S., Chamaillard M., Ogura Y. et al. Nod2-dependent regulation of innate and adaptive immunity in the intestinal tract // Science. - 2005. - Vol. 307. - P. 731-734. Kohrgruber N., Halanek N., Groger M. et al. Survival, maturation, and function of CD 11c- and CDllc+ peripheral blood dendritic cells are differentially regulated by cytokines // J Immunol. - 1999. - Vol. 163. - P. 3250-3259.

Krausgruber T., Saliba D., Ryzhakov G. et al. IRF5 is required for late-phase TNF secretion by human dendritic cells // Blood. - 2010. - Vol. 115. - P. 4421-4430. Krieg A. M. CpG motifs in bacterial DNA and their immune effects // Annu Rev Immunol. - 2002. - Vol. 20. - P. 709-760.

Krieg A. M. CpG motifs: the active ingredient in bacterial extracts? // Nat Med. - 2003. -Vol. 9. - P. 831-835.

Krieg A. M. CpG still rocks! Update on an accidental drug // Nucleic Acid Ther. - 2012. -Vol. 22. - P. 77-89.

Krieg A. M. Development of TLR9 agonists for cancer therapy // J Clin Invest. - 2007. -Vol. 117. - P. 1184-1194.

Krieg A. M., Efler S. M., Wittpoth M. et al. Induction of systemic THl-like innate immunity in normal volunteers following subcutaneous but not intravenous

208.

209.

210.

211.

212.

213.

214.

215.

216.

217,

218,

219,

220,

221

222,

223,

224,

225

226

administration of CPG 7909, a synthetic B-class CpG oligodeoxynucleotide TLR9 agonist // J Immunother. - 2004. - Vol. 27. - P. 460-471.

Krieg A. M., Yi A. K., Matson S. et al. CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation // Nature. - 1995. - Vol. 374. - P. 546-549.

Kriehuber E., Bauer W., Charbonnier A. S. et al. Balance between NF-kappaB and JNK/AP-1 activity controls dendritic cell life and death // Blood. - 2005. - Vol. 106. - P. 175-183.

Krug A., Rothenfusser S., Hornung V. et al. Identification of CpG oligonucleotide sequences with high induction of IFN-alpha/beta in plasmacytoid dendritic cells // Eur J Immunol. - 2001. - Vol. 31. - P. 2154-2163.

Krug A., Towarowski A., Britsch S. et al. Toll-like receptor expression reveals CpG DNA as a unique microbial stimulus for plasmacytoid dendritic cells which synergizes with CD40 ligand to induce high amounts of IL-12 // Eur J Immunol. - 2001. - Vol. 31. - P. 3026-3037.

Kunz A. N., Brook I. Emerging resistant Gram-negative aerobic bacilli in hospital-

acquired infections // Chemotherapy. - 2010. - Vol. 56. - P. 492-500.

Lachard J., Jars G., Fourestier J. [Clinical study of a new drug: Imudon, in the treatment

of diseases of the oral mucosa and periodontium] // Sem Hop Ther. - 1975. - Vol. 51. - P.

177-182.

Lahoud M. H., Ahmet F., Zhang J. G. et al. DEC-205 is a cell surface receptor for CpG oligonucleotides // Proc Natl Acad Sci USA.- 2012. - Vol. 109. - P. 16270-16275. Lande R, Gregorio J., Facchinetti V. et al. Plasmacytoid dendritic cells sense self-DNA coupled with antimicrobial peptide // Nature. - 2007. - Vol. 449. - P. 564-569. Langenkamp A., Messi M., Lanzavecchia A., Sallusto F. Kinetics of dendritic cell activation: impact on priming of TH1, TH2 and nonpolarized T cells // Nat Immunol. -2000.-Vol. 1.-P. 311-316.

Lanier L. L. NK cell recognition // Annu Rev Immunol. - 2005. - Vol. 23. - P. 225-274. Latz E., Schoenemeyer A., Visintin A. et al. TLR9 signals after translocating from the ER to CpG DNA in the lysosome // Nat Immunol. - 2004. - Vol. 5. - P. 190-198. Leadbetter E. A., Rifkin I. R, Hohlbaum A. M. et al. Chromatin-IgG complexes activate B cells by dual engagement of IgM and Toll-like receptors // Nature. - 2002. - Vol. 416. -P. 603-607.

Leber J. H., Crimmins G. T., Raghavan S. et al. Distinct TLR- and NLR-mediated transcriptional responses to an intracellular pathogen // PLoS Pathog. - 2008. - Vol. 4. -P. e6.

Lederer E. New developments in the field of synthetic muramyl peptides, especially as adjuvants for synthetic vaccines // Drugs Exp Clin Res. - 1986. - Vol. 12. - P. 429-440. Lee J., Tattoli I., Wojtal K. A. et al. pH-dependent internalization of muramyl peptides from early endosomes enables Nodi and Nod2 signaling // J Biol Chem. - 2009. - Vol. 284.-P. 23818-23829.

Lee K. H., Biswas A., Liu Y. J., Kobayashi K. S. Proteasomal degradation of Nod2 protein mediates tolerance to bacterial cell wall components // J Biol Chem. - 2012. - Vol. 287. -P. 39800-39811.

Lehner M. D., Ittner J., Bundschuh D. S. et al. Improved innate immunity of endotoxin-tolerant mice increases resistance to Salmonella enterica serovar typhimurium infection despite attenuated cytokine response // Infect Immun. - 2001. - Vol. 69. - P. 463-471. Lehner T., Caldwell J., Giasuddin A. S. Comparative immunogenicity and protective effect against dental caries of a low (3800) and a high (185,000) molecular weight protein in rhesus monkeys (Macaca mulatta) // Arch Oral Biol. - 1985. - Vol. 30. - P. 207-212. Leonard J. P., Link B. K., Emmanouilides C. et al. Phase I trial of toll-like receptor 9 agonist PF-3512676 with and following rituximab in patients with recurrent indolent and

227.

228.

229.

230.

231.

232.

233.

234.

235,

236

237

238

239

240

241

242

243

aggressive non Hodgkin's lymphoma // Clin Cancer Res. - 2007. - Vol. 13. - P. 61686174.

Liebes L., Walsh C. M., Chachoua A. et al. Modulation of monocyte functions by muramyl tripeptide phosphatidylethanolamine in a phase II study in patients with metastatic melanoma // J Natl Cancer Inst. - 1992. - Vol. 84. - P. 694-699. Lipford G. B., Sparwasser T., Zimmermann S. et al. CpG-DNA-mediated transient lymphadenopathy is associated with a state of Thl predisposition to antigen-driven responses // J Immunol. - 2000. - Vol. 165. - P. 1228-1235.

Lombardi V, Van Overtvelt L., Horiot S., Moingeon P. Human dendritic cells stimulated

via TLR7 and/or TLR8 induce the sequential production of 11-10, IFN-gamma, and IL-

17A by naive CD4+ T cells // J Immunol. - 2009. - Vol. 182. - P. 3372-3379.

Lotze M. T., Dallal R. M., Kirkwood J. M., Flickinger J. C. in "Cancer: principles &

practice of oncology," Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia. - 2001.

Lysenko E. S., Clarke T. B., Shchepetov M. et al. Nodi signaling overcomes resistance of

S. pneumoniae to opsonophagocytic killing // PLoS Pathog. - 2007. - Vol. 3. - P. el 18.

MacDonald K. P., Munster D. J., Clark G. J. et al. Characterization of human blood

dendritic cell subsets // Blood. - 2002. - Vol. 100. - P. 4512-4520.

Macia E., Ehrlich M., Massol R. et al. Dynasore, a cell-permeable inhibitor of dynamin // Dev Cell. - 2006. - Vol. 10. - P. 839-850.

MacLeod M., Kwakkenbos M. J., Crawford A. et al. CD4 memory T cells survive and proliferate but fail to differentiate in the absence of CD40 // J Exp Med. - 2006. - Vol. 203. - P. 897-906.

Maeda M., Knowles R. D., Kleiner man E. S. Muramyl tripeptide phosphatidylethanolamine encapsulated in liposomes stimulates monocyte production of tumor necrosis factor and interleukin-1 in vitro // Cancer Commun. - 1991. - Vol. 3. - P. 313-321.

Magalhaes J. G., Fritz J. H., Le Bourhis L. et al. Nod2-dependent Th2 polarization of antigen-specific immunity // J Immunol. - 2008. - Vol. 181. - P. 7925-7935. Magalhaes J. G., Philpott D. J., Nahori M. A. et al. Murine Nodi but not its human orthologue mediates innate immune detection of tracheal cytotoxin // EMBO Rep. - 2005. -Vol. 6. - P. 1201-1207.