Иммунологические и молекулярно-генетические предикторы раннего прерывания беременности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Татаркова Елена Анатольевна

• Татаркова Елена Анатольевна
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Татаркова Елена Анатольевна

Введение

Глава I. Обзор литературы. Ранние репродуктивные потери как

проблема современного акушерства

1.1. Факторы риска прерывания беременности и нарушения функционирования фетоплацентарного комплекса как отправная точка неблагоприятных исходов гестационного процесса

1.2. Роль полиморфизмов генов фолатного цикла в раннем самопроизвольном прерывании беременности

1.2.1. Полиморфизмы гена MTHFR, ассоциированные с репродуктивными потерями

1.2.2. Полиморфизмы гена MTR, ассоциированные с репродуктивными осложнениями

1.2.3. Полиморфизмы гена MTRR, ассоциированные с нарушениями гестации

1.2.4. Полиморфизмы гена SLC, ассоциированные с нарушениями гестации

1.3. Цитокины в развитии ранних репродуктивных осложнений

1.3.1. Роль SNP C511T гена IL-1fi и уровней продукции цитокина

в развитии осложнений течения беременности

1.3.2. Роль SNP G308A гена TNF-a и уровней продукции цитокина в развитии осложнений течения беременности

1.3.3. Роль SNP G197A гена IL-17A и уровней продукции цитокина в развитии осложнений течения беременности

1.3.4. Роль SNP гена IL-4 и уровней продукции цитокина в развитии осложнений течения беременности

1.3.5. Роль SNP A1188C гена IL-12B в развитии осложнений течения беременности

1.4. HLA DRB1 и угроза прерывания беременности

1.5. Значение цитотоксической активности мононуклеарных клеток крови и нейтрофильных гранулоцитов в развитии угрожающего выкидыша

Глава II. Методология исследования

2.1. Материалы и методы

. 2.1.1. Реактивы для выделения и культивирования МНК,

нейтрофилов и клеточной линии К562

2.1.2. Коммерческие тест-системы

2.2. Экспериментальные методы

2.2.1. Молекулярно-генетические методы

2.2.1.1. Выделение геномной ДНК из периферической крови

2.2.1.2. Типирование полиморфных вариантов генов 54 полимеразной цепной реакцией с электрофоретической детекцией результатов

2.2.1.3. Типирование полиморфных вариантов генов полимеразной цепной реакцией с детекцией результатов в режиме Real-Time

2.2.2. Культуральные работы

2.2.2.1. Приготовление культуральной среды

2.2.2.2. Выделение МНК, нейтрофилов и клеток NK-чувствительной опухолевой линии К562

2.2.2.3. Постановка in vitro спонтанной и стимулированной продукции цитокинов МНК доноров и больных

2.2.2.4. Постановка цитотоксического МТТ-теста

2.2.3. Твёрдофазный иммуноферментный анализ

2.2.3.1. Подготовка сыворотки

2.2.3.2. ELISA - твёрдофазный иммуноферментный анализ

2.3. Статистическая обработка данных

2.4. Общая характеристика обследованных лиц

Глава III. Результаты исследований

3.1. SNPs генов фолатного цикла, вовлечённые в развитие угрожающего выкидыша в I триместре беременности у жительниц РА

3.2. Полиморфизмы генов медиаторов воспаления, ассоцированные

с симптомокомплексом раннего угрожающего выкидыша

3.2.1. Роль IL-ip в течении гестационного процесса, осложнённом угрозой раннего выкидыша

3.2.2. Распределение аллелей и генотипов IL-1fi (T511C) в группах женщин с физиологической гестацией и с угрозой раннего выкидыша

3.2.3. Сывороточные концентрации и уровни продукции in vitro МНК IL-ip в обследованных группах женщин

3.3. Роль TNF-a в течении гестационного процесса, осложнённом угрозой раннего выкидыша

3.3.1. Распределение аллелей и генотипов TNF-a (G308A) в группах женщин с физиологической гестацией и с угрозой раннего выкидыша

3.3.2. Сывороточных концентрации и уровни продукции in vitro МНК TNF-a в обследованных группах женщин

3.4. Роль IL-17A в течении гестационного процесса, осложнённом угрозой раннего выкидыша

3.4.1. Распределение аллелей и генотипов IL-17A (G197A) в группах женщин с физиологической гестацией и с угрозой раннего выкидыша

3.4.2. Сывороточных концентрации и уровни продукции in vitro МНК IL-17A в обследованных группах женщин

3.5. Роль IL-4 течении гестационного процесса, осложнённом угрозой раннего выкидыша

3.5.1. Распределение аллелей и генотипов IL-4 (C589T) в группах женщин с физиологической гестацией и с угрозой раннего выкидыша

3.5.2. Сывороточных концентрации и уровни продукции in vitro МНК IL-4 в обследованных группах женщин

3.6. Роль IL-12B в течении гестационного процесса, осложнённом

угрозой раннего выкидыша

3.6.1. Распределение аллелей и генотипов IL-12B (A1188C) в группах женщин с физиологической гестацией и с угрозой раннего выкидыша

3.7. Влияние SNPs генов цитокинов на сывороточные уровни, спонтанную и стимулированную in vitro продукцию медиаторов

3.8. Типирование ассоциированных с репродуктивными нарушениями специфичностей HLA DRB1 у жительниц РА

3.8.1. Ассоциированные с угрозой раннего выкидыша специфичности HLA DRB1 у жительниц РА

3.8.2. Частоты генотипов HLA DRB1 у жительниц РА

3.9. Цитотоксическая активность МНК и НФ периферической крови при раннем угрожающем выкидыше (в I триместре беременности)

Глава IV. Обсуждение

Выводы

Практические рекомендации

Список сокращений

Список литературы

Приложение

Введение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологические и молекулярно-генетические предикторы раннего прерывания беременности»

Актуальность работы.

Концепция Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) по безопасному материнству предусматривает снижение на 30% случаев перинатальной смертности, связанной в основном с проблемой самопроизвольного прерывания беременности (Радзинский В.Е., 2017; Николаева Е.А., 2018). Распространённость угрожающего выкидыша составляет 16-25%, а по некоторым данным - до 50% от числа всех беременностей (Дмитриенко Г.В., 2015; Невзорова И.А., 2015; Нефедова Д.Д., 2016; Шевцова Е.П., 2017; Курлович И.В., 2017; Нигматова Г.М., 2017). Симптомокомплекс угрожающего выкидыша в I триместре обусловлен нарушениями межсистемных и локальных взаимодействий в эндометрии, что в последующем может привести к развитию тяжёлых осложнений (плацентарной недостаточности, гестозу, преэклампсии, гипоксии, аномалиям развития плода), а в дальнейшем - к невынашиванию беременности или очень ранним преждевременным родам (Можаева Т.А., 2014; Сахаутдинова И.В., 2014; Андриевская И.А., 2017; Николаева А.Е., 2018; Батырева Н.В., 2018). Несмотря на проведение реабилитационных мероприятий при угрозе прерывания беременности, частота самопроизвольных выкидышей практически не снижается, достигая в I триместре 75-85%, что свидетельствует о недостаточной изученности этиологических факторов и патогенетических механизмов прерывания беременности (Буштырева И.О., 2015; Пустотина О.А., 2016; Хи Q., 2017; Киселева А.Н., 2017; Артемьева К.А., 2017).

Взаимодействие инвазирующегося трофобласта и клеток врождённого иммунитета необходимо для реализации механизма иммунной привилегированности, регуляторных и эффекторных функций материнского иммунного ответа и развития плаценты (Кузнецова И.В., 2016; Нигматова Г.М., 2017; Артемьева К.А., 2017). Антигенный состав трофобласта в основном представлен специфичностями II класса гистосовместимости (НЬЛ-ОЯБ!, -DQA1, -DQB1), участвующими в реализации иммунных реакций и сохранении беременности, активации пролиферации клеток и глубокой инвазии клеток

трофобласта, ингибировании цитотоксической активности натуральных киллерных клеток (NK) и ^2-ответа (IL-4, IL-5, IL-10 и др.) (Левкович М.А., 2016; Нефедова Д.Д., 2016; Тетруашвили Н.К., 2017). Однако ранние этапы имплантации эмбриона при нормальном развитии беременности требуют усиленного Th1 -иммунного ответа (IL-1, TNF-a, IFN-y, IL-12, IL-18 и т.д.) с формированием в системе «мать-плацента-плод» провоспалительного микроокружения, необходимого для стимуляции ангиогенеза и успешной эмбриональной имплантации (Газиева И.А., 2014; Машкина Е.В., 2014; Chatterjee P., 2014; Нефедова Д.Д., 2016; Song Z.-H., 2016; Ma J., 2017). При этом в I триместре беременности происходит трансэндотелиальная миграция в эпителий матки, в значительной степени NK и больших гранулярных лимфоцитов, что определяет подготовку эндометрия к имплантации бластоцисты и физиологическое развитие системы «мать-плацента-плод» (Баженов Д.О., 2015; Song Z.-H., 2016; Курлович И.В., 2017). Патологические процессы отторжения плода в ранние сроки беременности реализуются теми же эффекторными клетками - нейтрофилами и натуральными киллерами (Shobeiri S.S., 2015; Тетруашвили Н.К., 2017; Azargoon А., 2019).

Значительная часть работ по исследованию генетических причин осложнений гестации направлена на изучение роли полиморфизмов (SNPs - single nucleotide polymorphisms) генов фолатного цикла (Газиева И.А., 2014; Тверская А.В., 2014; Адамян Л.В., 2016; Калимагамбетов А.М., 2016), тогда как трансформация базовой воспалительной реакции, запускаемая основными медиаторами воспаления «первой волны», может быть определяющей в нарушении межклеточных взаимодействий в эндометрии с последующим развитием плацентарной недостаточности, внутриутробного страдания плода, спонтанных абортов (Лигидова А.Т., 2011; Сахаутдинова И.В., 2014; Машкина Е.В., 2014; Нефедова Д.Д., 2016; Гордеева Л.А., 2017).

Для выбора генетических маркеров репродуктивных потерь, предупреждения перинатальной смертности и повышения рождаемости необходимо учитывать региональные популяционные различия и выраженную этническую специфику,

особенно для такого многонационального субъекта Российской Федерации (РФ), как Республика Адыгея (РА). В международных электронных базах (NCBI, Springer, Science Research Portal, Google Scholar, ^берЛенинка, HuGe Navigator, PubMed) данные по ассоциации с угрозой выкидыша на ранних сроках беременности немногочисленны, а по РА практически не представлены, что и определило спектр исследованных SNPs генов в квалификационном исследовании.

Предмет исследования: частоты полиморфизмов генов фолатного цикла (MTHFR C677T, rslS0ll33; MTHFR Â129SC, rslS0ll3l; MTR â2756G, rslS050S7; MTRR â66G, rslS0l394; SLC19Â1 GSOÂ, rsl05l266), цитокинов воспаления (IL-1ß C511T, rs16944; IL-17Â G197Â, rs22759l3; IL-12B Â11SSC, rs32l2227; TNF-a G30SÂ, rslS00629; IL-4 C5S9T, rs2243250), специфичностей HLÂ DRB1, особенности клеточной продукции медиаторов иммунной системы и цитототоксической активности MÏÏK и НФ периферической крови, ассоциированных с угрозой ранних репродуктивных потерь.

Цель работы: Выявить триггерные иммуногенетические механизмы развития угрожающего выкидыша в I триместре беременности у жительниц Республики Адыгея.

Задачи:

1. Определить SNPs генов фолатного цикла MTHFR (C677T), MTHFR (Â129SC), MTR (Â2756G), MTRR (Â66G) и гена транспортёра фолатов SLC19Â1 (GS0Â), ассоциированные у жительниц Республики Адыгея с угрозой прерывания беременности в I триместре.

2. Типировать аллельные варианты генов цитокинов IL-1ß (C511T), TNF-a (G30SÂ), IL-17Â (G197Â), IL-4 (C5S9T), IL-12B (Â11SSC), специфичности HLÂ DRB1 у жительниц Республики Адыгея при симптомокомплексе угрожающего выкидыша на ранних сроках гестации.

3. Обосновать роль медиаторов воспаления «первой волны» IL-1ß, TNF-a, IL-17Â в развитии угрозы ранних выкидышей на основе анализа соотношений сывороточных концентраций и уровней спонтанной и стимулированной in vitro продукции цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови

беременных женщин.

4. Исследовать влияние генотипов промоторных регионов генов IL-1fi (C511T), TNF-a (G308A), IL-17A (G197A) на уровни продукции и соотношение медиаторов воспаления, участвующих в формировании фетоплацентарного комплекса, для определения генетических предикторов угрозы ранних гравидарных потерь.

5. Сравнить in vitro цитотоксические эффекты мононуклеарных клеток и нейтрофилов периферической крови беременных женщин для подтверждения их связи с риском развитии осложнённого течения беременности.

Научная новизна работы. Впервые:

1. Получены новые данные о прогностической значимости полиморфных вариантов SLC19A1 (A80G), IL-1fi (C511T), IL-12B (А1188С) в развитии угрозы раннего самопроизвольного прерывания беременности.

2. Проанализирована цитотоксическая активность интактных и стимулированных in vitro МНК и НФ периферической крови женщин с угрозой выкидыша в I триместре в сравнении с женщинами в межгестационном периоде и с физиологической беременностью.

3. Полученные данные о прогностической значимости снижения стимулированной in vitro ФГА продукции TNF-a (р<0,05) МНК периферической крови женщин с проявлениями симптомокомплекса угрожающего аборта в I триместре беременности расширяют представления о патогенезе ранних гестационных нарушений.

Для жительниц Республики Адыгея впервые:

4. Исследовано частотное распределение аллелей и генотипов SNPs генов цитокинов (IL-1P C511T, TNF-a G308A, IL-17A G197A, IL-4 C589T, IL-12B A1188C), фолатного цикла (MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTR A2756G, MTRR A66G, SLC19A1 G80A) и специфичностей гена HLA DRB1 в группах женщин с физиологической беременностью и с угрозой ранних репродуктивных потерь в двух этнических группах (русские, адыгейки).

5. Сравнение уровней сывороточной, спонтанной и стимулированной in vitro ФГА продукции цитокинов МНК периферической крови при угрозе выкидыша и

неосложнённом течении гестационного процесса в I триместре показало, что более перспективным направлением является изучение уровней стимулированной митогенами продукции цитокинов.

6. Установлены особенности влияния SNPs промоторных регионов генов на продукцию медиаторов в исследованных группах женщин.

Научно-практическая значимость:

На основании экспериментальных данных показано, что с развитием симптомокомплекса угрожающего выкидыша у жительниц РА ассоциированы -511T аллель, C511T и T511T генотипы основного провоспалительного IL- 1fî; «мутантная» аллель -1188C гена IL-12B; для славянского населения РА - G80A генотип гена транспортёра фолатов SLC19A1. Обоснованы перспективы для экспериментальной доклинической апробации и фармакологической коррекции, так как для прегравидарной подготовки целесообразнее рекомендовать исследование SNP G80A гена транспортёра фолатов SLC19A1 и стимулированной in vitro продукции цитокинов медиаторов воспаления «первой волны» вместо используемых в клинической диагностике MTHFR (C677T), MTHFR (A1298C), MTR (A2756G), MTRR (A66G) и сывороточных концентраций неспецифических факторов иммунной системы в качестве предикторов ранних гравидарных потерь. Доказано влияние гетерозиготных генотипов С511Т гена IL-1fi и G308A гена TNF-а на стимулированную in vitro продукцию медиаторов воспаления «первой волны». При сравнении цитотоксической активности интактных и стимулированных МНК и НФ периферической крови женщин установлено повышение значений ЦТА при угрозе выкидыша в I триместре (Км:Кэф 1:2), поэтому для успешного пролонгирования беременности целесообразно использовать комплекс мер, понижающих цитотоксическую активность клеток периферической крови.

Положения, выносимые на защиту:

1. Носительство G80A генотипа гена транспортёра фолатов SLC19A1, -511T аллели, гетерозиготного C511T и гомозиготного T511T генотипов гена IL-1fî, «мутантной» аллели -1188C гена IL-12B является неблагоприятным генетическим фактором в развитии угрозы прерывания в I триместре беременности.

Полиморфизмы генов MTHFR C677T, MTHFR A1298C, MTR A2756G, MTRR A66G, IL-17A G197A, TNF-a G308A, специфичности HLA DRB1, используемые в мировой практике в качестве генетических предикторов гравидарных потерь, у жительниц РА не ассоциированы с угрозой выкидыша на ранних сроках гестации.

2. Низкие/недектируемые сывороточные концентрации IL-ip, TNF-a, IL-17A не могут быть использованы в прогнозе репродуктивных потерь. Более информативны уровни спонтанной и стимулированной продукции медиаторов воспаления, отражающих функциональную активность и резервные возможности мононуклеарных клеток. С риском развития угрозы ранних выкидышей ассоциировано изменение соотношений (р<0,05) медиаторов воспаления «первой волны» с повышением продукции IL-ip и снижением концентрации TNF-a в супернатантах стимулированных in vitro МНК периферической крови беременных женщин.

3. Генотип С511Т гена IL-ifi повышает стимулированную in vitro продукцию медиатора острого воспаления IL-ip, а гомозиготный «нормальный» генотип G308G гена TNF-a достоверно снижает стимулированную in vitro продукцию плейотропного цитокина TNF-a мононуклеарными клетками при угрожающем раннем выкидыше.

4. Повышение цитотоксической активности нейтрофильных гранулоцитов служит дополнительным фактором риска осложнения течения гестации в I триместре.

5. Триггерные иммуногенетические механизмы риска развития раннего угрожающего выкидыша у жительниц РА связаны с SNPs промоторных регионов генов - транспортёра фолатов SLC19A1 (G80A генотипа), медиаторов воспаления IL-ifi (-511T аллели, гетерозиготного C511T и гомозиготного T511T генотипов гена IL-ifl) и IL-12B («мутантной» аллели -1188C), с резервными возможностями мононуклеарных клеток продуцировать медиаторы воспаления и цитотоксической активностью нейтрофилов периферической крови.

Методология и методы диссертационного исследования.

Генотипирование полиморфизмов генов проведено методом полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией результатов и в режиме реального времени (PCR «Real-Time»). Содержание цитокинов в биологических средах определены в твёрдофазном ИФА (ELISA). Образцы протестированы в триплетах, в расчётах использованы средние значения оптической плотности. МНК выделены по методу Boyum А., 1968 г., НФ на 3% растворе стерильного желатина в PBS. Цитотоксическая активность МНК и НФ протестирована в MTT-тесте (на NK-чувствительной линии эритромиелоидного лейкоза человека К-562). Статистические расчёты проведены с использованием пакета прикладных программ SPSS Statistics 17.0 (Inc., Chicago, USA) и Office Excel 2016 (Microsoft). Cравнение частот аллельных вариантов/генотипов SNPs проводили с использованием критерия %2 (хи-квадрата с поправкой Йейтеса), OR, 95% CI и уровне значимости р<0,05. Достоверность различий частот изучаемых признаков для малых выборок оценивали с помощью точного критерия Фишера и критерия Манна-Уитни. Ассоциированность специфичностей HLA генов с репродуктивными осложнениями в I триместре беременности определяли по формуле B.Woolf с поправкой Бонферрони.

Степень достоверности. Достоверность результатов исследования подтверждается объёмом проведённых исследований, репрезентативной выборкой обследованных лиц, применением современных технологий SNP-типирования (PCR «Real-Time» и др.), иммуноферментного анализа, иммунологических методов оценки функциональной активности клеток периферической крови, цитотоксического теста и использованием методов статистической обработки данных, соответствующих поставленным задачам.

Апробация результатов диссертации. Материалы диссертации доложены на научных конференциях: «XXXVI неделя науки МГТУ» (Майкоп, 2014 г.; 2018 г.); «Механизмы функционирования нервной, эндокринной и висцеральной систем в процессе онтогенеза» (Майкоп, 2015 г.); «Дни иммунологии в СПБ 2015» (Санкт-Петербург, 2015 г.); XXI Международная медико-биологическая конференция

молодых исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина — человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2018 г.).

Публикации. Основные результаты работы изложены в 4 печатных работах, включающих 3 статьи в научных журналах, которые входят в перечень научных периодических изданий, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Внедрение результатов исследования. Работа выполнена в иммуногенетической лаборатории ФГБОУ ВО «Адыгейский государственный университет». Материалы диссертации внедрены в учебный процесс ФГБОУ ВО «Адыгейский государственный университет» и лечебного факультета ФГБОУ ВО «Майкопский государственный технологический университет» в рамках медицинских и биологических дисциплин: клиническая иммунология и медицинская генетика для подготовки врачей общей практики, педиатров, стоматологов и биологов.

Объём и структура диссертации. Диссертация представлена на 153 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 11 рисунками, содержит 45 таблиц, 5 приложений. Состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, приложений, списка сокращений и библиографического указателя используемой литературы, включающего 111 зарубежных и 93 отечественных источников.

Глава I Обзор литературы. Ранние репродуктивные потери как проблема современного акушерства 1.1. Факторы риска прерывания беременности и нарушения функционирования фетоплацентарного комплекса как отправная точка неблагоприятных исходов гестационного процесса

Угроза прерывания беременности в I триместре осложняет нормальное течение гестации, поскольку в этот период происходит эмбриогенез, формирование плаценты и установление сложных взаимоотношений между матерью и плодом (Лигидова А.Т., 2011; Breeze C., 2016). Распространённость угрожающего выкидыша занимает 16-25%, а по некоторым данным - до 50% от числа всех беременностей (Сахаутдинова И.В., 2014; Дмитриенко Г.В., 2015; Невзорова И.А., 2015; Нефедова Д.Д., 2016; Шевцова Е.П., 2017; Курлович И.В., 2017; Нигматова Г.М., 2017; Xu Q., 2017). Лечение сопровождается выжидательной тактикой (т.к. отсутствуют показатели для прогнозирования гестации с кровотечением в течение I триместра), при этом постельный режим и использование прогестагенов не улучшают состояние беременных женщин (Boza A., 2016; Chan D.M., 2016; Hendriks E., 2019), что свидетельствует о недостаточной изученности этиологических факторов и патогенетических механизмов прерывания беременности (Пустотина О.А., 2016; Xu Q., 2017; Киселева А.Н., 2017; Артемьева К.А., 2017).

Угрожающий выкидыш сопровождается тянущими болями внизу живота и в поясничной области, скудными кровянистыми выделениями из половых путей. Тонус матки повышен, шейка матки не укорочена, внутренний зев закрыт, тело матки соответствует сроку беременности. При ультразвуковом исследовании (УЗИ) могут регистрироваться признаки отслойки плодного яйца с формированием ретроамниальной или ретрохориальной гематомы. При начавшемся выкидыше боли и кровянистые выделения из влагалища более выражены, цервикальный канал приоткрыт (Адамян Л.В., 2016; Нефедова Д.Д., 2016; Кузнецова И.В., 2016; Андриевская И.А., 2017; Нигматова Г.М., 2017; Волков В.Г., 2017; Трубникова

Л.И., 2018; Mouri M.I., 2018). Угроза выкидыша в I триместре часто осложняет нормальное течение процессов имплантации, что может приводить к развитию плацентарной недостаточности, преэклампсии, гипоксии и аномалиям развития плода, а в дальнейшем - к привычному невынашиванию беременности (ПНБ) или очень ранним преждевременным родам (Лигидова А.Т., 2011; Андриевская И.А., 2017; Xu Q., 2017; Николаева А.Е., 2018; Батырева Н.В., 2018).

В первом триместре беременности критические сроки приходятся на 6-8 и 1012 недели гестации, в период активации инвазии трофобласта, децидуальных изменений, трансформации спиральных артерий матки в маточно-плацентарные сосуды и установления взаимодействий в системе «мать-плацента-плод» (Невзорова И.А., 2015; Андриевская И.А., 2017; Утробин М.В., 2017; Тетруашвили Н.К., 2017). В большинстве случаев угроза выкидыша регистрируется в течение первых 8-12 недель беременности (Xu Q., 2017). Гибель эмбриона в ранние сроки беременности возникает вследствие целого ряда факторов, в том числе: генетических и хромосомных дефектов, эндокринных и иммунных нарушений, инфекционных заболеваний женской половой сферы и т.д. (Адамян Л.В., 2016; Нефедова Д.Д., 2016; Кузнецова И.В., 2016; Пустотина О.А., 2016; Тетруашвили Н.К., 2017; Утробин М.В., 2017; Трубникова Л.И., 2018; Mouri M.I., 2018) (приложение 4).

В клинической практике не удаётся установить истинную причину развития осложнений беременности у 45-50% соматически здоровых женщин (Газиева И.А., 2014; Невзорова И.А., 2015; Пустотина О.А., 2016; Ma J., 2017; Тетруашвили Н.К., 2017; Артемьева К.А., 2017). Около 50-80% всех необъяснимых репродуктивных потерь (после исключения генетических, анатомических, гормональных причин) связано с иммунологическими нарушениями в организме женщины, которые являются наиболее значимыми в генезе невынашивания (Батрак Н.В., 2014; Нефедова Д.Д., 2016; Zhang C., 2016; Тетруашвили Н.К., 2017; Агнаева А.О., 2017). Взаимодействие инвазирующегося цитотрофобласта и клеток врождённого иммунитета необходимо для реализации регуляторных и эффекторных функций материнского иммунного ответа, развития плаценты и дальнейшего

прогрессирования беременности (Сельков С.А., 2012; Айрапетов Д.Ю., 2013; Газиева И.А., 2013; Сотникова Н.Ю., 2013; Кузнецова И.В., 2016; Нигматова Г.М., 2017). На ранних сроках беременности начальным этапом развития патологического процесса являются нарушения локальных взаимодействий в эндометрии, функций формирующейся плаценты и маточно-плацентарной гемодинамики, при которых изменяется продукция биологически активных субстанций и лимитируется обмен веществ между матерью и плодом под воздействием иммуноцитов и воспалительных факторов (Лигидова А.Т., 2011; Газиева И.А., 2014; Каптильный В.А., 2015; Утробин М.В., 2017).

Таким образом, необходимость решения значимой медико-социальной проблемы снижения перинатальных осложнений и смертности на ранних сроках диктует необходимость поиска способов прогнозирования угрозы прерывания беременности, профилактики, своевременной диагностики и эффективной терапии гестационных осложнений (Соловова Л.Д., 2014; Невзорова И.А., 2015; Югина А.А., 2016; Артемьева К.А., 2017). При этом необходимо учитывать, что беременность является триггером реализации патологических состояний. Развитие патологии на поздних сроках происходит вследствие нарушения на этапе имплантации и плацентации в течение первых 12 недель гестации. Осложнения гестации на разных этапах развития системы «мать-плацента-плод» необходимо рассматривать с иммунологических позиций, цитокинового каскада на системном и локальном уровнях, цитотоксической активности ЫК, а также сбалансированной регуляции процессов апоптоза материнских и плодовых клеток (Лигидова А.Т., 2011; Газиева И.А., 2014; Каптильный В.А., 2015; Утробин М.В., 2017).

1.2. Роль полиморфизмов генов фолатного цикла в раннем самопроизвольном прерывании беременности

Фолатный цикл представляет собой сложный каскад ферментативных процессов, многочисленных генов и путей, компоненты которого действуют как субстрат или кофактор таких биологических реакций, как метаболизм аминокислот, синтез ДНК, трансметилирование, транссульфирование и др.

Фолиевая кислота и её производные (ди-, три-, полиглутаматы) объединены названием «фолаты». Восстановленные полиглутаматы пищи должны быть гидролизованы с помощью фермента птероилполиглутамат-гидролазы до моноглутамата, чтобы абсорбироваться в проксимальном отделе тонкого кишечника и восстановиться до активной формы - тетрагидрофолата (THF). В клетки фолаты попадают с помощью специальных переносчиков — транспортёра PCFT (SLC46A1) и анионообменника RFC1 (SLC19A1). В энтероцитах кишечника фолаты после метилирования поступают в кровь в виде 5-метилтетрагидрофолата (Cao Y., 2014; Тверская А.В., 2014; Кох Н.В., 2015; Демченко Н.С., 2015; Кузнецова И.В., 2015; Wang W., 2016; Адамян Л.В., 2016; Калимагамбетов А.М., 2016; Киселева А.Н., 2017).

Ключевым этапом фолатного метаболизма является синтез метионина из гомоцистеина. Происходит восстановление 5,10-метилентетрагидрофолата до 5-метилтетрагидрофолата, несущего метильную группу, необходимую для превращения гомоцистеина в метионин. Источниками метильных групп, поступающих в обмен фолатов, кроме метионина также могут являться некоторые аминокислоты - серин, глицин, гистидин, производные холина (бетаин, саркозин и диметилглицин) (Дмитренко Д.В., 2014; Тверская А.В., 2014; Калимагамбетов А.М., 2016; Баймурадова С.М., 2018). В клетке 5-метилтетрагидрофолат является донором метильных групп и основным источником тетрагидрофолата, который выступает в качестве акцептора большого числа одноуглеродных фрагментов, превращаясь в разные виды фолатов (5,10-метилентетрагидрофолат; 10-формилтетрагидрофолат). Последние служат специфическими коферментами во внутриклеточных реакциях, в частности, при синтезе пуринов и пиримидинового основания тимина (Дмитренко Д.В., 2014; Shiny V., 2015; Кузнецова И.В., 2015; Wang W., 2016; Калимагамбетов А.М., 2016) (приложение 5).

Ключевой молекулой, обусловливающей патофизиологическое проявление аллельных вариантов генов фолатного цикла (MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1), является неметилированный гомоцистеин, токсичный для материнского организма и клеток плода. Гипергомоцистеинемия может зависеть от многих факторов,

включая возраст, пол, диету, гормональный фон, наличие хронического воспаления, воздействие неблагоприятных средовых влияний (курение), но в основном от SNPs генов фолатного цикла. Гипергомоцистеинемия, сопровождаемая развитием десинхронизации процессов фибринолиза и фибринообразования, вазоконстрикцией, способствует нарушению инвазии трофобласта и плацентации, что обусловливает развитие акушерской патологии (Shiny V., 2015; Беспалова О.Н., 2015; Иванов А.В., 2016; Калимагамбетов А.М., 2016; Киселева А.Н., 2017). Так как распространённость мутаций генов фолатного цикла не отличается между группами женщин и их партнёров-мужчин, целесообразно использовать для анализа рисков угрозы прерывания беременности результаты скрининга только матери (Madjunkova S., 2012; Guo Q.N., 2012).

1.2.1. Полиморфизмы гена МТИГЯ, ассоциированные с репродуктивными потерями

Метилентетрагидрофолатредуктаза, кодируемая геном МТИГЯ, определяет баланс производных фолиевой кислоты и гомоцистеина/метионина. Фермент 5,10-MTHFR восстанавливает 5,10-метилентетрагидрофолат до 5-метилтетрагидрофолата, содержащего метильную группу, необходимую для реметилирования гомоцистеина. Ген МТИГЯ имеет несколько аллельных вариантов (к4846052, га1801131, га6541003, га2066462, га1801133, га2274976 и др.) и расположен в коротком плече первой хромосомы - 1р36.22 (Беспалова О.Н., 2009; Трифонова Е.А., 2012; база данных КСБ! и ОеиеСагёБ, 2018) (рис. 1).

Рис. 1. Картирование генаMTHFR (база данных GeneCards, 2018).

С патологией беременности часто связывают миссенс-мутацию (С677Т; га1801133) и транзицию (А1298С; га1801131) гена МТИГЯ. Замены цитозина на тимин в 677 позиции молекулы ДНК (677 С^Т) и, соответственно, аланина на

валин в каталитическом домене фермента (p.Ala222Val) изменяют свойства белкового продукта. Белковый продукт «мутантной» -677Т аллели отличается высокой термолабильностью и сниженной активностью (Трифонова Е.А., 2012; Алиева Т.Д., 2013; Yang Y., 2016; Киселева А.Н., 2017).

Соотношение С677/677Т полиморфизмов гена MTHFR (rs1801133) для мировых популяций в среднем составляет 0,755:0,245 с преобладанием частот «нормальной» С677- аллели. От среднемирового уровня отличаются популяции Америки и Европы, для которых характерна более высокая частота «мутантного» -677Т аллельного варианта гена MTHFR (табл. 1).

Таблица 1.

Частотное распределение аллелей С677/677Т и генотипов полиморфизма гена MTHFR в мировых популяциях.*

SNP Аллели/ генотипы Общая частота Африка Америка Восточная Азия Европа Южная Азия

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Татаркова Елена Анатольевна, 2019 год

Список литературы

1. Абакушина Е.В. Основные свойства и функции NK-клеток человека / Е.В. Абакушина, Е.Г. Кузьмина, Е.И. Коваленко // Иммунология. - 2012. - Т. 33, № 4. -C. 220-224.

2. Агнаева А.О. Роль естественных киллеров (NK-клеток) в репродуктивных потерях / А.О. Агнаева, О.Н. Беспалова, Д.И. Соколов // Журнал акушерства и женских болезней. - 2017. - Т. LXVI, № 3. - C. 143-156.

3. Адамян Л.В. Выкидыш в ранние сроки беременности: диагностика и тактика ведения. Клинические рекомендации (протокол лечения) / Л.В. Адамян, Н.В. Артымук, Т.Е. Белокриницкая - М., 2016. - 32 с.

4. Айламазян Э.К. Клетки иммунной системы матери и клетки трофобласта: «конструктивное сотрудничество» ради достижения совместной цели / Э.К. Айламазян, О.И. Степанова, С.А. Сельков, Д.И. Соколов // Вестник РАМН. - 2013. № 11. - C. 12-21.

5. Айрапетов Д.Ю. Иммуногенетические причины ранних репродуктивных потерь / Д.Ю. Айрапетов, И.М. Ордиянц // Журнал Вестник Мордовского университета. - 2013. - С. 95-98.

6. Алиева Т.Д. Изучение роли ассоциации полиморфизмов генов фолатного цикла и хромосомного полиморфизма у матери в формировании репродуктивных потерь / Т.Д. Алиева // Вюник проблем бюлоги i медицини. - 2013. - Т. 1, № 104. -С. 78-84.

7. Амирова Ж.С. Система цитокинов у беременных с персистирующей и рецидивирующей угрозой прерывания беременности / Ж.С. Амирова // Вестник новых медицинских технологий. - 2006. - Т. 13, №4. - С. 66-67.

8. Андриевская И.А. Плацентарная недостаточность: учеб. пособие [Текст] / И.А. Андриевская, Н.А. Ишутина, И.В. Довжикова. - Благовещенск: ДНЦ ФПД, 2017. - 27 с.

9. Анохова Л. И. Полиморфизм генов провоспалительных цитокинов у женщин с преждевременными родами / Л.И. Анохова, Т.Е. Белокриницкая, Н.Н. Страмбовская // Siberian Medical Review. - 2018. - № 2. - С. 52-55.

10. Артемьева К.А. Морфофункциональные изменения органов иммунной системы и плаценты при спонтанных и мурамилдипептид-индуцированных абортах у мышей: дис. ... канд. мед. наук: 03.03.04 / К.А. Артемьева. - М., 2017. -152 с.

11. Баженов Д.О. Анализ экспрессии поверхностных маркеров nk-клеток при их трансмиграции через клетки трофобласта линии Jeg-3 в присутствии цитокинов и факторов роста / Д.О. Баженов, Л.П. Вязьмина, Л.С. Окорокова, Д.И. Соколов, С.А. Сельков // Иммунология репродукции «Дни иммунологии в СПб 2015». -2015. - Т. 17. - С. 173.

12. Баженов Д.О. Цитотоксическая активность NK-клеток в отношении клеток трофобласта в присутствии провоспалительных цитокинов / Д.О. Баженов, В.А. Михайлова //Журнал акушерства и женских болезней. - 2017. - Т. 66. - С. 99.

13. Баймурадова С.М. Невынашивание беременности и" критериальная" тромбофилия. современный взгляд на проблему / С.М. Баймурадова, Е.В. Слуханчук // Современные проблемы здравоохранения и медицинской статистики. - 2018. - №. 2. - С. 94-102.

14. Бакшеев С. NK клетки в повседневной практике акушера-гинеколога / С. Бакшеев, Т. Попова, В. Петропавловская - 2012. - URL: http://sm.znaimo.com.ua/docs/59/index-143439.html (дата обращения: 12.05.2018).

15. Батрак Н.В. Роль различных факторов в генезе угрожающего выкидыша ранних сроков у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе / Н.В. Батрак, А.И. Малышкина, Н.Ю. Сотникова, Н.В. Крошкина // Актуальные вопросы современной фундаментальной и клинической медицины. Научный медицинский вестник Югры. - 2014. - № 1-2. - С.20-22.

16. Батырева Н.В. Факторы риска очень ранних преждевременных родов / Н.В. Батырева, С.С. Синицына, Е.Н. Кравченко, Л.В. Куклина, И.А. Бойко // Мать и дитя в Кузбассе. - 2018. - Т. 1, № 72. - С. 57-61.

17. Бескоровайная Т.С. Влияние аллелей полиморфных генов системы HLA II класса, фолатного обмена, гемостаза и детоксикации на репродукцию человека: автореф. дис. ... канд. мед. наук / Бескоровайная Т.С. - М., 2005. - 92 с.

18. Беспалова О.Н. Генетические факторы риска невынашивания беременности: автореф. дис. ... доктор мед. наук / Беспалова О.Н. - СПб, 2009. - 40 с.

19. Беспалова О.Н. Гипергомоцистеинемия при невынашивании беременности: биохимические и генетические аспекты / О.Н. Беспалова // Журнал акушерства и женских болезней. - 2015. - Т. 64, №. 5. - С. 22-31.

20. Белякова К.Л. Влияние NK-клеток на ангиогенез в присутствии фактора роста эндотелия сосудов и основного фактора роста фибробластов / К.Л. Белякова, А.Р. Шевелева //Журнал акушерства и женских болезней. - 2017. - Т. 66 - С. 99100.

21. Болдырева, М.Н. HLA (класс II) и естественный отбор. «Функциональный» генотип, гипотеза преимущества «функциональной» гетерозиготности: дис. ... д-ра мед. наук: 14.00.36 / М.Н. Болдырева. - М., 2007. - 224 с.

22. Буштырева И.О. Роль генетических полиморфизмов, ассоциированных с нарушением фолатного цикла и риском развития тромбофилии, в генезе ретрохориальной гематомы в I триместре беременности / И.О. Буштырева, Н.Б. Кузнецова, Е.И. Пелогеина // Клиническая медицина. - 2015. - Т. 7, № 3. - С. 84-89.

23. Вайнер А.С. Метаболизм фолатов и врожденные аномалии развития / А.С. Вайнер, Д.А. Жечев // Мать и дитя в Кузбассе. - 2011. - № 2. - С. 3-10.

24. Веропотвелян Н.П. Генетические причины ранних репродуктивных потерь: анализ свыше 1800 наблюдений / Н.П. Веропотвелян, Л.А. Кодунов, Ю.С. Погуляй // Репродуктивная медицина. - 2016. - Т. 3, №28 - С. 31-36.

25. Веропотвелян Н.П. Особенности распределения полиморфних генов системы HLA II класса, фолатного обмена, факторов свертываемости крови у супружеских пар с привычным невынашиванием беременности / Н.П. Веропотвелян, Ю.С. Погуляй, Л.А. Кодунов // Неонатолопя, хiрургiя та перинатальна медицина. - 2011. - Т. I, №1. - С. 82-85.

26. Волков В.Г. Структура невынашивания беременности ранних сроков / В.Г. Волков, Л.В. Пичугина // Research'n Practical Medicine Journal. II Национальный

конгресс «Онкология репродуктивных органов: от профилактики и раннего выявления к эффективному лечению». - 2017. - С. 37.

27. Вязьмина Л.П. Влияние цитокинов на функциональную активность клеток в системе трофобласт - естественный киллер / Л.П. Вязьмина, Д.О. Баженов, Л.С. Окорокова, К.Л Белякова., С.А. Сельков, Д.И. Соколов // Медицинская иммунология. - 2015. - Т. 17. - С. 261.

28. Газазян М.Г. Выраженность синдрома системного воспалительного ответа в I триместре как маркер поздних осложнений беременности / М.Г. Газазян, Н.А. Пономарева, И.Н. Мазенкина, О.Ю. Иванова, И.В. Степаненко // Вестник РУДН, сер. Медицина. Акушерство и гинекология. - 2011. - №5. - С. 60-66.

29. Газиева И.А. Иммунопатогенетические механизмы формирования плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь: дис. ... д-ра биол. Наук / И.А. Газиева. - Екатеринбург, 2014. - 319 с.

30. Газиева И.А. Роль нарушений продукции цитокинов в генезе плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь / И.А. Газиева, Г.Н. Чистякова, И.И. Ремизова // Медицинская иммунология. - 2014. - Т. 16, № 6. - С. 539-550.

31. Газиева И.А. Спонтанная и митогениндуцированная продукция цитокинов в ранние сроки беременности в зависимости от её исходов / И.А. Газиева, Г.Н. Чистякова, И.И. Ремизова // Иммунология. - 2013. - Т. 34. № 4. - С. 193-198.

32. Гордеева Л.А. Ассоциации полиморфизма генов цитокинов с невынашиванием беременности / Л.А. Гордеева, О.С. Оскорбина, Е.Н. Воронина, Е.А. Соколова, И.В. Шаталина, Р.В. Оленникова, С.Л. Нерсесян, М.Л. Филипенко, А.Н. Глушков // Медицинская иммунология. - 2017. - Т. 19, № 5. - С. 585-596.

33. Гордеева Л.А. Ассоциация HLA-DRB1* с репродуктивной патологией у женщин / Л.А. Гордеева, А.В. Шабалдин, А.Н. Глушков, О.А. Глушкова, О.С. Макарченко, Т.А. Симонова, И.В. Ветрова, Е.А. Шерина, Н.К. Жилинская, В.И. Минина // Медицинская Иммунология. - 2007. - Т. 9, № 6. - С. 643-648.

34. Демченко Н.С. Оценка роли полиморфизма генов фолатного цикла и ангиогенеза при неразвивающейся беременности: автореф. дис. ... канд.мед. наук / Н.С. Демченко. Екатеринбург, 2015. - 23 с.

35. Дмитренко Д,В. Профилактика врожденных пороков развития у плода с учётом фармакогенетических особенностей метаболизма антиэпилептических препаратов и наследственных нарушений фолатного цикла / Д,В. Дмитренко // Клинические наблюдения. - 2014. - С.31-38.

36. Дмитриенко Г.В. Показатели врожденного иммунитета как критерий раннего прогнозирования течения гестационного процесса: автореф. дис. ... канд. мед. наук / Г.В. Дмитриенко. - Волгоград, 2015. - 25 с.

37. Долгушин И.И. Роль прогестерона и нейтрофильных гранулоцитов в защите слизистой оболочки репродуктивного тракта / И.И. Долгушин, Т.Г. Смирнова // Российский иммунологический журнал. - 2012. - Т. 6. № 2. - С. 53.

38. Друккер Н.А. Влияние дисбаланса клеточных регуляторов на формирование плацентарной недостаточности у женщин с угрозой прерывания беременности в I триместре / Н.А. Друккер, В.А. Линде, А.С. Дегтярева, Т.Н. Погорелова, З.С. Крымшокалова // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - № 4. - С. 69-72.

39. Дубровина С.О. Патогенетические аспекты невынашивания ранних сроков беременности / С.О. Дубровина, А.М. Маклюк, В.А. Линде, И.В. Маркарьян // Медицинский вестник Юга России. - 2011. - № 2. - С. 63-68.

40. Иванов А.В. Выбор оптимальной панели исследования одиночных нуклеотидных полиморфизмов перед ЭКО / А.В. Иванов, А.Г. Ткачук, Э.В. Комличенко, Ю.Н. Федотов // Акушерство и гинекология Санкт-Петербурга. -2016. - № 1. - С. 56-69.

41. Калимагамбетов А.М. Исследование полиморфизма генов фолатного цикла у женщин казахской этнической группы с осложнениями беременности / А.М. Калимагамбетов // Лабораторная медицина. - 2016. - Т. 16, № 1. - С. 24-29.

42. Каптильный В.А. Прогностическое значение изолированного нарушения маточно-плацентарной перфузии при беременности / В.А. Каптильный // Архив акушерства и гинекологии им. В. Ф. Снегирева. - 2015. - № 2. - С. 19-25.

43. Каштальян О.А. Оценка цитокинового профиля у беременных женщин / О.А. Каштальян, М.С. Пристром // Цитокины и воспаление. - 2008. - Т. 7, № 4. - С. 33-36.

44. КиберЛенинка [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://cyberleninka.ru/article/ (дата обращения: 6.10.2017).

45. Киселева А.Н. Ассоциация полиморфизма генов F2, F5, F7, F13, FGB, ITGA2, ITGB3, PAI-1, MTHFR, MTR, MTRR с нарушениями репродуктивной функции у женщин / А.Н. Киселева, Е.В. Бутина, Г.А. Зайцева, В.В. Овчинников, С.В. Игнатьев, Д.Н. Ярыгин, И.В. Парамонов // Вятский медицинский вестник. -2017. - Т. 54, №2. - С. 24-29.

46. Кох Н.В. Фолатный цикл: обзор и практические рекомендации по интерпретации генетических тестов / Н.В. Кох, А.А. Слепухина, Г.И. Лифшиц // Медицинская генетика. - 2015. - № 11. - С. 3-8.

47. Кузнецова И.В. Внутриматочные гематомы как причина осложненного течения беременности / И.В. Кузнецова // Медицинский совет. - 2016. - №17. - С. 114-118.

48. Кузнецова И.В. Применение фолиевой кислоты в процессе прегравидарной подготовки и во время беременности / И.В. Кузнецова, В.А. Коновалов //Российский вестник акушера-гинеколога. - 2015. - Т. 15, №1. - С. 2431.

49. Кулиш О.Н. Роль 80G/A полиморфизма гена, кодирующего транспортер восстановленных фолатов (RFC1), в развитии врожденных дефектов невральной трубки плода: материалы VII Междунар. Пироговской науч. мед. конф. студентов и молодых ученых / О.Н. Кулиш // Вестник РГМУ. - 2012. - № 1. - С. 548.

50. Курлович И.В. Предполагаемые механизмы невынашивания беременности ранних сроков / И.В. Курлович, М.В. Белуга, Е.Т. Зубовская, И.В. Митрошенко, Т.Ю. Юркевич, Р.Н. Демидова, Е.М. Самуйленок // Современные перинатальные медицинские технологии в решении проблем демографической безопасности. -2017. - С.51-58.

51. Курченко А.И., Калинин А.Б., Бисюк Ю.А. Децидуальные НК-клетки: уникальный фенотип и функциональные свойства (обзор) / А.И. Курченко, А.Б. Калинин, Ю.А. Бисюк // Акушерство. Пнеколопя. Генетика. - 2015. - №1. - C. 7378.

52. Лаптина Т.А. Иммуногенетика и репродукция человека / Т.А. Лаптина. -Ростов-на-Дону, 2013. - 79 с.

53. Левкович М.А. Иммунологические аспекты проблемы невынашивания беременности / М.А. Левкович, Д.Д. Нефедова, Л.Д. Цатурян // Современные проблемы науки и образования. - 2016. - №3. - С. 186.

54. Левкович М.А. Иммунопатогенетические механизмы угрозы прерывания беременности: автореф. дис. ... доктора мед. наук / М.А. Левкович. - Ростов-на-Дону, 2009. - 43 с.

55. Лигидова А.Т. Роль нарушенной продукции цитокинов в патогенезе угрозы прерывания беременности в I триместре / А.Т. Лигидова, Н.А. Друккер, З.С. Крымшокалова // Известия вузов. Северо-кавказский регион. - 2011. - № 4. - С. 112115.

56. Лифанов А.Д. Ассоциация полиморфизмов генов MTHFR, MTR и MTRR с развитием гипергомоцистеинемии у спортсменов / А.Д. Лифанов // Ученые записки университета им. П.Ф. Лесгафта. - 2013. - Т. 102, № 8. - С. 98-101.

57. Макарков А.И. Особенности Т-клеточной иммунорегуляции при невынашивании беременности: эволюция парадигмы / А.И. Макарков // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2012. - №12 - C. 10-16.

58. Малиновская В.В. Иммунотерапевтическое действие препарата виферон в комбинированной терапии смешанных урогенитальных инфекций у беременных / В.В. Малиновская, Е.В. Дмитриева // Российский иммунологический журнал. -2012. - Т. 6, № 2. - C. 112-114.

59. Малышкина А.И. Особенности реакций врождённого иммунитета у женщин с угрозой прерывания беременности на ранних сроках / А.И. Малышкина, Т.А. Можаева, Д.Н. Воронин // Российский иммунологический журнал. - 2010. - Т. 4, № 4. - C. 407-408.

60. Машкина Е.В. Исследование ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов с ранними эмбриональными потерями / Е.В. Машкина, К. А. Коваленко,

H.В. Фомина, Т. П. Шкурат // Экологическая генетика человека. - 2014. - Т. XII, №

I. - С.19-27.

61. Машкина Е.В. Молекулярно-генетические предикторы репродуктивных потерь: автореф. дис. ... доктора биол. наук / Е.В. Машкина. - Белгород, 2014. - 36 с.

62. Михайлин Е.С. Роль полиморфных вариантов гена HLA-G плода в развитии гестоза у матери / Е.С. Михайлин, Т.Э. Иващенко, Э.К. Айламазян // Журнал акушерства и женских болезней. - 2009. - №2. - С. 4-11.

63. Муругин В.В. Применение мультипараметрической проточной цитометрии для одновременной оценки функции и фенотипа NK-клеток / В.В. Муругин, М.В. Пащенков, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 2012. - Т. 33, №3. - С. 128-133.

64. Невзорова И.А. Клиническая значимость клеточных маркеров эндотелиальной дисфункции при отслойке хориона у женщин с ранними репродуктивными потерями: дис. ... канд. мед. наук: 14.01.01 / И.А. Невзорова. -Иркутск, 2015. - 117 с.

65. Нестерова И.В. Новый взгляд на нейтрофильные гранулоциты: переосмысление старых догм. Часть 1. / И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова, Г.А. Чудилова, Л.В. Ломтатидзе, С.В. Ковалева, А.А. Евглевский, Т.З.Л. Нгуен // Инфекция и иммунитет. - 2017. - Т. 7, № 3. - С. 219—230.

66. Нефедова Д.Д. Роль факторов врожденного и адаптивного иммунитета в генезе невынашивания беременности: дис. ... канд. мед. наук / Д.Д. Нефедова. -Ростов-на-Дону, 2016. -156 с.

67. Нигматова Г.М. Ранние сроки беременности: осложнения и прогнозирование перинатальных исходов / Г.М. Нигматова, Ю.М. Кузиева // Биология и интегративная медицина №2. - 2017. - С. 104-110.

68. Николаева А.Е. Ретрохориальная гематома как фактор риска возникновения гематологических осложнений беременности / А.Е. Николаева, Л.П.

Папаян, С.И. Капустин, Г.Ф. Кутушева, Ф.Р. Кутуева, Н.Н. Рухляда // Вестник гематологии. - Т. XIV, № 1. - 2018. - С. 22-27.

69. Павлов A.B. Особенности функционального состояния нейтрофилов периферической крови женщин с угрозой прерывания беременности в III триместре / A.B. Павлов, И.А. Панова, Н.Ю. Сотникова // Сборник научных трудов и материалов республиканской научно-практической «Современные перинатальные медицинские технологии в решении проблем демографической безопасности». -Минск, 2009. - С. 127-131.

70. Пустотина О.А. Прегравидарная подготовка женщин с невынашиванием беременности в анамнезе / О.А. Пустотина, А.Э. Ахмедова // Медицинский совет.

- 2016. - С. 130-136.

71. Рыбина И.В. Состояние адаптивного и врождённого иммунитета на ранних сроках физиологической и неразвивающейся беременности / И.В. Рыбина, Ю.Г. Лагерева // Российский иммунологический журнал. - 2014. - Т. 8, №3. - С. 460-463.

72. Сахаутдинова И.В. Иммуномодулирующая роль прогестерона в терапии угрозы прерывания беременности / И.В. Сахаутдинова, Л.Р. Ложкина // Медицинский вестник Башкортостана. - 2014. - Т. 9, № 4. - С. 96-99.

73. Сельков С.А. Регуляторные клетки в иммунологических процессах при беременности / С.А. Сельков, О.В. Павлов // Российский иммунологический журнал. - 2012. -Т. 6, №2. - С. 155.

74. Сельков С.А. Роль маточно-плацентарных макрофагов в репродуктивной патологии / С.А. Сельков, О.В. Павлов // Журнал акушерства и женских болезней.

- 2010. - Т. 59, №1. - С. 122-130.

75. Симбирцев А.С. Интерлейкин-1: от эксперимента в клинику / А.С. Симбирцев // Медицинская иммунология. - 2001. - Т.3, №3. - С.431-438.

76. Смирнова Т.Л. Иммунитет и беременность / Т.Л. Смирнова, Е.В. Портнова, В.Е. Сергеева // Вестник Чувашского университета - 2009. №2. - С.79-85.

77. Соловова Л.Д., Комплексный подход к лечению угрожающего прерывания беременности с ретрохориальными гематомами: автореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.01.01 / Л.Д. Соловова. - Самара, 2014. - 25 с.

78. Сотникова Н.Ю. Роль клеток врождённого иммунитета в обеспечении успеха беременности на ранних сроках гестации / Н.Ю. Сотникова, Ю.С. Анциферова, Н.В. Крошкина // Журнал акушерства и женских болезней. - 2013. -Т. 62, №2. - С. 151-159.

79. Сташкевич Д.С. Актуальные вопросы иммунологии: система цитокинов, биологическое значение, генетический полиморфизм, методы определения: учеб. пособие [Текст] / Д.С. Сташкевич, Ю.Ю. Филиппова, А.Л. Бурмистрова. — Челябинск: Цицеро. - 2016. — 82 с.

80. Степанова О.И. Влияние факторов, секретируемых тканью плаценты при физиологической беременности и при гестозе, на миграционную активность эндотелиальных клеток линии EA.HY926 / О.И. Степанова, Г.Р. Козонов, Т.У. Кузьминых // Российский иммунологический журнал. - 2012. - T., №2. - C. 162.

81. Судуткина Л.Н. Изменения содержания цитокинов крови у беременных 1 триместра с явлениями ограниченной формы атопического дерматита / Л.Н. Судуткина, Л.В. Матвеева, Л.М. Мосина // Фундаментальные исследования. - 2014. - № 2. - С. 168-171.

82. Тверская А.В. Изучение роли генов-кандидатов фолатного обмена в формировании преэклампсии: дис. ... канд. мед. наук / А.В. Тверская. - Белгород, 2014. - 129 с.

83. Тетруашвили Н.К. Привычный выкидыш / Н.К. Тетруашвили // Акушерство и гинекология: Новости. Мнения. Обучения. - 2017. - №. 4. - С. 70-87.

84. Трифонова Е.А. Генетическое разнообразие и структура неравновесия по сцеплению гена MTHFR в популяциях Северной Евразии / Е.А. Трифонова, Е.Р. Еремина // Acta naturae. - Vol. 4, no. 1. - 2012. - С. 55-71.

85. Тронина Т.И. Активность лимфоцитов специфичных к HLA плода и влияние на нее аутологичной сыворотки у женщин при нормальной беременности и угрозе прерывания беременности / Т.И. Тронина, Н.Н. Бушмелева, Т.В. Храмова, Р. Шайдуллина, Д.Р. Гумерова // Иммунология репродукции «Дни иммунологии в СПб 2015». - 2015. - Т. 17. - С. 188.

86. Трубникова Л.И. Актуальные вопросы диагностики и лечения акушерской патологии: учеб. пособие [Текст] / Л.И. Трубникова, Н.В. Вознесенская, В.Д. Таджиева. - Ульяновск: УлГУ, 2018. - 268 с.

87. Утробин М.В. Прогностическая ценность иммунологических и генетических исследований в I триместре беременности при формировании ретрохориальной гематомы / М.В. Утробин, С.Ю. Юрьев // Опухоли женской репродуктивной системы. - 2017. - Т. 13, №3 - С.57-62.

88. Хаитов Р.М. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин // М.: ГЭОТАР-Медиа; 2011. - 312 с.

89. Чистякова Г.Н. Оценка продукции цитокинов при беременности, осложненной угрозой прерывания в первом триместре / Г.Н. Чистякова, И.А. Газиева, И.И. Ремизова, Г.А. Черданцева // Фундаментальные исследования. -2005. - № 5 - С. 96-98.

90. Шевцова Е.П. Экспертиза качества медицинской помощи пациенткам с угрозой прерывания беременности / Е.П. Шевцова, Н.Д. Еремина, М.В. Андреева // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2017. - Т. 12, № 4. - С. 411-413.

91. Ширшев С.В. Значение гормонов репродукции в регуляции NK-клеток / С.В. Ширшев, И.В. Некрасова, О.Л. Горбунова // Вестник Пермского университета. - 2015. - №3. - С. 287-292.

92. Шмагель К.В., Черешнев В.А. Иммунитет беременной женщины женщины / К.В. Шмагель, В.А. Черешнев // М.: Медицинская книга; 2003. - 225 с.

93. Югина А.А. Оценка угрозы прерывания беременности по регуляторно-адаптивному статусу / А.А. Югина // Научный журнал КубГАУ. - 2016. - №115. -С. 1-11.

94. Alijotas-Reig J. Tumor Necrosis Factor-Alpha and Pregnancy: Focus on Biologics / J. Alijotas-Reig, E. Esteve-Valverde, R. Ferrer-Oliveras [et al.] // An Updated and Comprehensive Review. Clin Rev Allergy Immunol. - 2017. - Vol. 53, no. 1. - P. 40-53.

95. Azargoon A. The state of peripheral blood natural killer cells and cytotoxicity in women with recurrent pregnancy loss and unexplained infertility / A. Azargoon, Y.

Mirrasouli, M. Shokrollahi Barough [et al.] // Int J Fertil Steril. - 2019. - Vol. 13, no. 1.

- P. 12-17.

96. Bahadori M. IL-6, IL-10 and IL-17 gene polymorphisms in Iranian women with recurrent miscarriage / M. Bahadori, S. Zarei, A.H. Zarnani [et al.] // Iran J Immunol. -2014. - Vol. 11, no. 2. - P. 97-104.

97. Bombell S. Cytokine polymorphisms in women with recurrent pregnancy loss: meta-analisis / S. Bombell, W. McGuire // Aust NZJ Obstet Gynaecol. - 2008. - Vol. 48.

- P. 147-154.

98. Boza A. Is progestogen supplementation necessary to prevent abortion? / A. Boza, M. Api, S. Kayatas [et al.] // J Obstet Gynaecol. - 2016. - Vol. 36, no. 8. - P. 10761079.

99. Breeze C. Early pregnancy bleeding / C. Breeze // Medical educations - 2016.

- Vol. 45, no. 5. - P. 283-286.

100. Bueno O. Common polymorphisms that affect folate transport or metabolism modify the effect of the MTHFR 677C>T polymorphism on folate status / O. Bueno, A.M. Molloy // J Nutr. - 2016. - Vol. 146, no. 1. - P. 1-8.

101. Cai Y. Interleukin 23 regulates the functions of human decidual immune cells during early pregnancy / Y. Cai, M.-J. Li // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2016. - Vol. 469, no. 3: - P. 340-344.

102. Caligiuri M.A. Human natural killer cells / M.A. Caligiuri // Blood. - 2008.

- Vol. 112, no. 3. - P. 461-469.

103. Cao Y. Association study between methylenetetrahydrofolate reductase polymorphisms and unexplained recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / Y. Cao, J. Xu , Z. Zhang [et al.] // Gene. - 2013. - Vol. 514, no. 2. - P. 105-111.

104. Cao Y. The association of idiopathic recurrent early pregnancy loss with polymorphisms in folic acid metabolism-related genes / Y. Cao, Z. Zhang, Y. Zheng [et al.] // Genes Nutr. - 2014. - Vol. 9, no. 3. - P. 402.

105. Chan D.M. A randomized double-blind controlled trial of the use of dydrogesterone in women with threatened miscarriage in the first trimester: study

protocol for a randomized controlled trial / D.M. Chan, K.W. Cheung, S.S. Yung [et al.] // Trials. - 2016. - Vol. 17, no. 1. - P. 408.

106. Chatterjee P. Regulation of the anti-inflammatory cytokines interleukin-4 and interleukin-10 during pregnancy front / P. Chatterjee, V.L. Chiasson, K.R. Bounds, B.M. Mitchell // Immunol. - 2014. - No. 5. - P. 253.

107. Chen J. Association between interleukin-4 polymorphisms and risk of preeclampsia in a population of Chinese pregnant women / J. Chen, M. Zhong, Y.H. Yu // Genet Mol Res. - 2017. - Vol. 16, no. 2. - Р. 1-9.

108. Comba C. Role of inflammatory mediators in patients with recurrent pregnancy loss / C. Comba, E. Bastu, O. Dural [et al.] // Fertil Steril. - 2015. - Vol. 104, no. 6. - P. 1467-1474.

109. Creus M. Plasma homocysteine and vitamin B12 serum levels, red blood cell folate concentrations, C677T methylenetetrahydrofolate reductase gene mutation and risk of recurrent miscarriage: a case-control study in Spain / M. Creus, R. Deulofeu // Clin Chem Lab Med. - 2013. - Vol. 51, no. 3. - P. 693-699.

110. Darmochwal-Kolarz D. The role of interleukin-17, interleukin-23, and transforming growth factor-в in pregnancy complicated by placental insufficiency / D. Darmochwal-Kolarz, M. Michalak, B. Kolarz [et al.] // Biomed Res Int. - 2017. - P. 1-5.

111. Dosiou Ch. Natural killer cells in pregnancy and recurrent pregnancy loss: endocrine and immunological perspectives / Ch. Dosiou, L.G Giudice // Endocrine reviews. - 2005. - Vol.26, no. 1. - P. 44-62.

112. Dutra C.G. Lack of association between thrombophilic gene variants and recurrent pregnancy loss / C.G. Dutra, L.R. Fraga, A.P. Nacul [et al.] // Hum Fertil (Camb). - 2014. - Vol. 17, no. 2. - P. 99-105.

113. Emmery J. Maternal and fetal human leukocyte antigen class Ia and II alleles in severe preeclampsia and eclampsia / J. Emmery, R. Hachmon, C.W. Pyo [et al.] // Genes Immun. - 2016. - Vol. 17, no. 4. - P. 251-260.

114. Ensembl [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: http://www.ensembl.org/index.html (дата обращения: 17.12.2018).

115. Ferry B.L. Cytotoxic activity against trophoblast and choriocarcinoma cells of large granular lymphocytes from human early pregnancy decidua / B.L. Ferry, I.L. Sargent, P.M. Starkey // Cellular immunology. - 1991. - Vol. 132, no. 1. - P. 140-149.

116. Fu B. Th17 cells in human recurrent pregnancy loss and pre-eclampsia / B. Fu, Z. Tian, H. Wei // Cell Mol Immunol. - 2014. - Vol. 11, no. 6. - P. 564-570.

117. Fu X.-Q. Prednisone may induce immunologic tolerance by activating the functions of decidual immune cells in early pregnancy / X.-Q. Fu, J.-Y. Cai, Q.-Y. Huang [et al.] // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8, no. 60. - P. 102191-102198.

118. Fukui A. Expression of natural cytotoxicity receptors and cytokine production on endometrial natural killer cells in women with recurrent pregnancy loss or implantation failure, and the expression of natural cytotoxicity receptors on peripheral blood natural killer cells in pregnant women with a history of recurrent pregnancy loss / A. Fukui, A. Funamizu, R. Fukuhara [et al.] // J Obstet Gynaecol Res. - 2017. - Vol. 43, no. 11. - P. 1678-1686.

119. Galvao A.M. Luteolysis and the auto-, paracrine role of cytokines from Tumor necrosis factor a and Transforming growth factor в superfamilies. / A.M. Galvao, D. Skarzynski, G. Ferreira-Dias // Vitam Horm. - 2018. - no. 107. - P. 287-315.

120. GeneCards [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://www.genecards.org (дата обращения: 12.12.2018).

121. Gharesi-Fard B. The effect of HLA-DRB1 sharing between the couples with recurrent pregnancy loss on the pregnancy outcome after leukocyte therapy / B. Gharesi-Fard, R. Askarinejad-Behbahani, S. Behdin // Iran J Immunol. - 2014. - Vol. 11, no. 1. -P. 13-20.

122. Google Scholar [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://scholar.google.ru (дата обращения: 15.02.2018).

123. Guo Q.N. Association of methionine synthase reductase gene polymorphism with unexplained recurrent spontaneous abortion / Q.N. Guo, S.X. Liao, B. Kang [et al.] // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. - 2012. - Vol. 47, no. 10. - P. 742-746.

124. Gupta R. Association of CTLA-4 and TNF-a polymorphism with recurrent miscarriage among North Indian women / R. Gupta, S. Prakash, F. Parveen [et al.] // Cytokine. - 2012. - Vol. 60, no. 2. - P. 456-462.

125. He M. Association of polymorphisms of HLA-DRB1 gene with unexplained recurrent spontaneous abortion in ethnic Hans from Henan / M. He, B. Kang, S. Liao [et al.] // Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. - 2014. - Vol. 31, no. 4. - P. 504-507.

126. Hendriks E. First trimester bleeding: evaluation and management / E. Hendriks, H. Macnaughton, M.C. Mackenzie // Am Fam Physician. - 2019. - Vol. 99, no. 3. - P. 166-174.

127. Hoya M. Impact of Th1/Th2 cytokine polarity induced by invariant NKT cells on the incidence of pregnancy loss in mice / M. Hoya, T. Nagamatsu, T. Fujii [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2018. - Vol. 79, no. 3. - Р. e12813.

128. Hubacek J.A. Association of MTHFR genetic variants C677T and A1298C on predisposition to spontaneous abortion in Slavonic population. / J.A. Hubacek, J. Rynekrova, D. Kasparova [et al.] // Clin Chim Acta. - 2015. - no. 440. - Р. 104-107.

129. HuGe Navigator [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://phgkb.cdc.gov/PHGKB/startPagePubLit.action (15.01.2018).

130. Ichikawa T. a-Galactosylceramide-activated murine NK1.1+ invariant-NKT cells in the myometrium induce miscarriages in mice / T. Ichikawa, Y. Negishi, M. Shimizu [et al.] // Eur J Immunol. - 2016. - Vol. 46, no. 8. - P. 1867-1877.

131. Incebiyik A. Prevalence of thromogenic gene mutations in women with recurrent miscarriage: a retrospective study of 1,507 patients / A. Incebiyik, N.G. Hilali, A. Camuzcuoglu [et al.] // Obstet Gynecol Sci. - 2014. - Vol. 57, no. 6. - Р. 513-517.

132. Isaoglu U. The association between inherited thrombophilia and recurrent pregnancy loss in Turkish women / U. Isaoglu, P. Ulug, I.B. Delibas, [et al.] // Clin Exp Obstet Gynecol. - 2014. - Vol. 41, no. 2. - P. 177-181.

133. Jahromi A.S. Insulin resistance and serum levels of interleukin-17 and interleukin-18 in normal pregnancy / A.S. Jahromi, M. Shojaei, M.A. Ghobadifar // Immune Netw. - 2014. - Vol. 14, no. 3. - P. 149-155.

134. Kamali-Sarvestani E. Cytokine gene polymorphisms and susceptibility to recurrent pregnancy loss in Iranian women / E. Kamali-Sarvestani, J. Zolghadri, B. Gharesi-Fard [et al.] // J Reprod Immunol. - 2005. - Vol. 65, no. 2. - P. 171-178.

135. Kim J.O. Interleukin- 1beta -511 T>C genetic variant contributes to recurrent pregnancy loss risk and peripheral natural killer cell proportion / J.O. Kim, W.S. Lee, B.E. Lee [et al.] // Fertil Steril. - 2014. - Vol. 102, no. 1. - P. 206-212.

136. Kim S.Y. Association between MTHFR 1298A>C polymorphism and spontaneous abortion with fetal chromosomal aneuploidy / S.Y. Kim, S.Y. Park, J.W. Choi [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2011. - Vol. 66, no. 4. - P. 252-258.

137. King A. Early human decidual cells exhibit NK activity against the K562 cell line but not against first trimester trophoblast / A. King, C. Birkby, Y.W. Loke // Cellular immunology. - 1989. - Vol. 118, no. 2. - P. 337-344.

138. King A. Human trophoblast cell resistance to decidual NK lysis is due to lack of NK target structure / A. King, P. Kalra, Y.W. Loke // Cellular immunology. -1990. - Vol.127, no. 2. - P. 230-237.

139. Kolte A.M. Christiansen Inheritance of the 8.1 ancestral haplotype in recurrent pregnancy loss / A.M. Kolte, H.S. Nielsen, R. Steffensen [et al.] // Evol Med Public Health. - 2015. - no. 1. - P. 325-331.

140. Kruse C. A study of HLA-DR and -DQ alleles in 588 patients and 562 controls confirms that HLA-DRB1*03 is associated with recurrent miscarriage / C. Kruse, R. Steffensen, K. Varming [et al.] // Hum Reprod. - 2004. - Vol. 19, no. 5. - P. 1215-1221.

141. Li N. Women with recurrent spontaneous abortion have decreased 25(OH) vitamin D and VDR at the fetal-maternal interface / N. Li, H.M. Wu, F. Hang [et al.] // Braz J Med Biol Res. - 2017. - Vol. 50, no. 11. - P. e6527.

142. Lino F.L. Thrombophilic mutations and polymorphisms, alone or in combination, and recurrent spontaneous abortion / F.L. Lino, É. Traîna, J.A. Barreto [et al.] // Clin Appl Thromb Hemost. - 2015. - Vol. 21, no. 4. - P. 365-372.

143. Liu Ch. Association between -238 but not -308 polymorphism of Tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha) and unexplained recurrent spontaneous abortion

(URSA) in Chinese population / Ch. Liu, W. Jing, Zh. Sirui [et al.] // Reprod Biol Endocrinol. - 2010. - Vol. 8. - P. 114.

144. Lombardelli L. Interleukin-17-producing decidual CD4+ T cells are not deleterious for human pregnancy when they also produce interleukin-4 / L. Lombardelli, F. Logiodice, M. Aguerre-Girr [et al.] // Clin Mol Allergy. - 2016. - no. 14. - P. 1.

145. Luo L. Polymorphisms of genes involved in the folate metabolic pathway impact the occurrence of unexplained recurrent pregnancy loss / L. Luo // Reprod Sci. -2015. - Vol. 22, no. 7. - P. 845-851.

146. Ma J. Association between TNF, IL1B, IL6, IL10 and IFNG polymorphisms and recurrent miscarriage: a case control study / J. Ma, X. Zhang, G. He [et al.] // Reproductive Biology and Endocrinology. - 2017. - Vol. 15, no. 1. - P. 83.

147. Ma X. Association of IL-1ß and IL-6 gene polymorphisms with recurrent spontaneous abortion in a Chinese Han population / X. Ma, L.J. Xu, J. Wang [et al.] // Int J Immunogenet. - 2012. - Vol. 39, no. 1. - P. 15-19.

148. Madjunkova S. Detection of thrombophilic mutations related to spontaneous abortions by a multiplex SNaPshot method / S. Madjunkova, M. Volk, B. Peterlin [et al.] // Genet Test Mol Biomarkers. - 2012. - Vol. 16, no. 4. - P. 259-264.

149. Martínez-Varea A. The maternal cytokine and chemokine profile of naturally conceived gestations is mainly preserved during in vitro fertilization and egg donation pregnancies / A. Martínez-Varea, B. Pellicer, V. Serra [et al.] // J Immunol Res. - 2015. - P. 128616.

150. Matsubayashi H. Increased natural killer-cell activity is associated with infertile women / H. Matsubayashi, T. Suzuki, T. Arai // American Journal of Reproductive Immunology. - 2001. - Vol. 46, no. 5. - P. 318-322.

151. Meuleman T. HLA associations and HLA sharing in recurrent miscarriage: a systematic review and meta-analysis / T. Meuleman, L.E. Lashley, O.M. Dekkers [et al.] // Hum Immunol. - 2015. - Vol. 76, no. 5. - P. 362-373.

152. Mohtaram S. An association study of the SLC19A1 gene polymorphisms/haplotypes with idiopathic recurrent pregnancy loss in an Iranian Population / S. Mohtaram // Genet Test Mol Biomarkers. - 2016. - no. 20. - P. 235-240.

153. Mouri M.I. Threatened abortion / M.I. Mouri, T.J. Rupp // StatPearls [Internet]. Treasure Island (FL). - 2018. - Vol.44. - P. 2053-2058.

154. Nair R.R. Association of maternal and fetal MTHFR A1298C polymorphism with the risk of pregnancy loss: a study of an Indian population and a meta-analysis / R.R. Nair, A. Khanna // Fertil Steril. - 2013. - Vol. 99, no. 5. - P. 1311-1318.

155. Nair R.R. MTHFR C677T polymorphism and recurrent early pregnancy loss risk in north Indian population / R.R. Nair, A. Khanna, K. Singh // Reprod Sci. - 2012. -Vol. 19, no. 2. - P. 210-215.

156. Najafi S. Association of IL-17A and IL-17 F gene polymorphisms with recurrent pregnancy loss in Iranian women / S. Najafi, H. Hadinedoushan, G. Eslami [et al.] // J Assist Reprod Genet. - 2014. - Vol. 31, no. 11. - P. 1491-1496.

157. Nazki F.H. Folate: metabolism, genes, polymorphisms and associated diseases / F.H. Nazki // Gene. - 2011. - P. 11-20.

158. NCBI [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ (дата обращения:17.09.2018).

159. Negishi Y. Disruption of maternal immune balance maintained by innate DC subsets results in spontaneous pregnancy loss in mice / Y. Negishi, A. Wakabayashi, M. Shimizu [et al.] // Immunobiology. - 2012. - no. 217. - P. 951-961.

160. Ostojic S. Polymorphisms in the interleukin-12/18 genes and recurrent spontaneous abortion / S. Ostojic, M. Volk, I. Medica [et al.] // Am J Reprod Immunol. -2007. - Vol. 58, no. 5. - P. 403-408.

161. Ozdemirci S. Influence of threatened miscarriage on pregnancy and early postpartum period: a case-control report / S. Ozdemirci, E. Karahanoglu, D. Esinler [et al.] // J Matern Fetal Neonatal Med. - 2015. - Vol. 28, no. 10. - P. 1186-1189.

162. Ozkan Z.S. What is the impact of SOCS3, IL-35 and IL17 in immune pathogenesis of recurrent pregnancy loss? / Z.S. Ozkan, D. Deveci, M. Simsek [et al.] // J Matern Fetal Neonatal Med. - 2015. - Vol. 28, no. 3. - P. 324-328.

163. Parveen F. Polymorphisms in MTHFR, MTHFD, and PAI-1 and recurrent miscarriage among North Indian women / F. Parveen, M. Tuteja, S. Agrawal // Arch Gynecol Obstet. - 2013. - Vol. 288, no. 5. - P. 1171-1177.

164. Petriglia G. Threatened abortion and late-pregnancy complications: a case-control study and review of literature / G. Petriglia, I. Palaia, A. Musella [et al.] // Minerva Ginecol. - 2015. - Vol. 67, no. 6. - P. 491-497.

165. Pinnaduwage L. The sustained value of an early pregnancy assessment clinic in the management of early pregnancy complications: a 10-year retrospective study / L. Pinnaduwage, J. Honeyford, E. Lackie [et al.] // J Obstet Gynaecol Can. - 2018. - Vol. 40, no. 8. - P. 1017-1023.

166. Polese B. Accumulation of IL-17+ Vy6+ y5 T cells in pregnant mice is not associated with spontaneous abortion / B. Polese, V. Gridelet, Ch. Renard [et al.] // Clin Transl Immunology. - 2018. - Vol. 7, no. 1. - P. e1008.

167. Puri M. MTHFR C677T polymorphism, folate, vitamin B12 and homocysteine in recurrent pregnancy losses: a case control study among North Indian women / M. Puri, L. Kaur, G.K. Walia [et al.] // J Perinat Med. - 2013. - Vol. 41, no. 5. - P. 549-554.

168. Rah H. Solute Carrier Family 19, member 1 (SLC19A1) polymor-phisms (-43T>C, 80G>A, and 696C>T), and haplotypes in idiopathic recurrent spontaneous abortion in a Korean popu-lation / H. Rah // Reprod Sci. - 2012. - Vol. 19, no. 5. - P. 513519.

169. Rai V. Methylenetetrahydrofolate reductase gene A1298C polymorphism and susceptibility to recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / V. Rai // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). - 2014. - Vol. 60, no. 2. - P. 27-34.

170. Reactome [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://reactome.org/PathwayBrowser/#/R-HSA-196757&DTAB=ST (дата обращения: 10.01.2018).

171. Reina M. Effects of interleukin-12 administration during the pre- and periimplantation period on mouse embryofetal development / M. Reina, M.L. Broccia, E. Menegola [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2004. - Vol. 51, no. 5. - P. 345-351.

172. Saifi B. Th17 cells and related cytokines in unexplained recurrent spontaneous miscarriage at the implantation window / B. Saifi, S.A. Rezaee, N. Tajik [et al.] // Reprod Biomed Online. - 2014. - Vol. 29, no. 4. - P. 481-489.

173. Salazar Garciaa M.D. Early pregnancy immune biomarkers in peripheral blood may predict preeclampsia / M.D. Salazar Garciaa, Y. Mobleyb, J. Hensonc [et al.] // J Reprod Immunol. - 2018. - Vol. 125. - P. 25-31.

174. Science Research Portal [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: http://scienceresearch.com/scienceresearch/ (дата обращения: 10.01.2018).

175. Scroggins S.M. Elevated vasopressin in pregnant mice induces T-helper subset alterations consistent with human preeclampsia / S.M. Scroggins, D.A. Santillan, J.M. Lund [et al.] // Clin Sci (Lond). - 2018. - Vol. 132, no. 3. - P. 419-436.

176. Settin A. Methylenetetrahydrofolate reductase gene polymorphisms in Egyptian women with unexplained recurrent pregnancy loss / A. Settin, R. Elshazli, A. Salama [et al.] // Genet Test Mol Biomarkers. - 2011. - Vol. 15, no. 12. - P. 887-892.

177. Shiny V. Evidence of Paternal N5,N10-Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T gene polymorphism in couples with recurrent spontaneous abortions (RSAs) in Kolar District - a South West of India / V. Shiny, C.D. Dayanand, F.K. Pushpa [et al.] // Journal of Clinical and Diagnostic Research. - 2015. - Vol. 9, no. 2. - P. 15-18.

178. Shobeiri S.S. Uterine natural killer cell and human leukocyte antigen-G1 and human leukocyte antigen-G5 expression in vaginal discharge of threatened-abortion women: a case-control study / S.S. Shobeiri, Z. Rahmani, H. Hossein Nataj [et al.] // J Immunol Res. - 2015. - P. 692198.

179. Slezak R. The role of 1691G>A (Leiden) mutation in Factor V gene, 20210G>A in prothrombin gene and 677C>T in MTHFR gene in etiology of early pregnancy loss / R. Slezak, L. Laczmanski, P. Karpinski [et al.] // Ginekol Pol. - 2011. Vol. 82, no. 6. - P. 446-450.

180. Song Z.-H. Seminal plasma induces inflammation in the uterus through the yö T/IL-17 pathway / Z.-H. Song, Z.-Y. Li, D.-D. Li [et al.] // Sci Rep. - 2016. - no. 6. -P. 25118.

181. Springer [Электронный ресурс] - Режим доступа: URL: https://www.springer.com/gp (дата обращения: 17.12.2018).

182. Tabiasco J. Human decidual NK cells: unique phenotype and functional properties / J. Tabiasco, M. Rabota, M. Aguerre-Girr // Placenta. - 2006. - no 27. - P. 3439.

183. Tang A.W. Natural killer cells and pregnancy outcomes in women with recurrent miscarriage and infertility: a systematic review / A.W. Tang, Z. Alfirevic, S. Quenby // Hum Reprod. - 2011. - Vol. 26, no. 8. - P. 1971-1980.

184. Taylor B.D. First and second trimester immune biomarkers in preeclamptic and normotensive women / B.D. Taylor, R.B. Ness, M.A. Klebanoff [et al.] // Pregnancy Hypertens. - 2016. - Vol. 6, no. 4. - P. 388-393.

185. Wang W. MTR, MTRR and MTHFR gene polymorphisms and susceptibility to nonsyndromic cleft lip with or without cleft palate / W. Wang, X.-H. Jiao, X.-P. Wang [et al.] // Genet Test Mol Biomarkers. - 2016. - Vol. 20, no. 6. - P. 297-303.

186. Wang X. The Role of the IL-12 polymorphism rs3212227 in preeclampsia in Chinese Han Women / X. Wang, M. Guo, S. Li [et al.] // Clin Exp Hypertens. - 2016. - Vol. 38, no. 4. - P. 388-392.

187. Wang Z.C. T helper 1 -type immunity to trophoblast antigens in women with a history of recurrent pregnancy loss is associated with polymorphism of the IL1B promoter region / Z.C. Wang, E.J. Yunis, M.J. De los Santos [et al.] // Genes and Immunity. - 2002. -Vol. 3. - P. 38-42.

188. Warning, J.C. A balancing act: mechanisms by which the fetus avoids rejection by the maternal immune system / J.C. Warning, S.A. Mc Cracken, J.M. Morris // Reproduction. - 2011. - Vol. 141, no 6. - P. 715-724.

189. Wu H.-X. Decidual stromal cells recruit Th17 cells into decidua to promote proliferation and invasion of human trophoblast cells by secreting IL-17 / H.-X. Wu, L.-P. Jin, B. Xu [et al.] // Cell Mol Immunol. - 2014. - Vol. 11, no 3. - P. 253-262.

190. Xu Q. Sex hormone metabolism and threatened abortion / Q. Xu, J. Chen, Z. Wei [et al.] // Med Sci Monit. - 2017. - no. 23. - P. 5041-5048.

191. Xu W.M. IL-17 induces fetal loss in a CBA/JxBALB/c mouse model, and an anti-IL-17 antibody prevents fetal loss in a CBA/JxDBA/2 mouse model / W.M. Xu,

Z.N. Xiao, X.B. Wang [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2016. - Vol. 75, no. 1. - P. 5158.

192. Yang K. Predictive value of HLA-DRB1 gene for the treatment of unexplained recurrent spontaneous abortion with paternal lymphocyte alloimmunization therapy in Henan Hans / K. Yang, B. Zhang, S. Liao [et al.] //Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. - 2014. - Vol. 31, no. 3. - P. 380-382.

193. Yang L. Differential expression of interferon-gamma, IL-4 and IL-10 in peripheral blood mononuclear cells during early pregnancy of the bovine / L. Yang, Y. Wang, S. Li [et al.] // Reprod Biol. - 2018. - Vol. 18, no. 3. - P. 312-315.

194. Yang M. Maternal gene polymorphisms involved in folate metabolism and the risk of having a Down syndrome offspring: a meta-analysis / M. Yang, T. Gong, X. Lin, L. Qi, Y. Guo, Z. Cao, M. Shen, Y. Du // Mutagenesis. - 2013. - Vol. 28, no. 6. - P. 661-671.

195. Yang Y. Association between maternal, fetal and paternal THFR gene C677T and A1298C polimorfisms and risk recurrent pregnancy loss: a comprehensive evaluation / Y. Yang, Yunyao L., Yuan J. // Archives of Ginecology and Obstetrics. -2016. - Vol. 293, no. 6. - P. 1197-1211.

196. Yasuda S. Placental folate transport during pregnancy / S. Yasuda // Biosci Biotechnol Biochem. - 2008. - Vol. 72, no. 9. - P. 2277-2284.

197. Yildiz G. Inherited thrombophilia with recurrent pregnancy loss in Turkish women--a real phenomenon? / G. Yildiz, A. Yavuzcan, P. Yildiz [et al.] // Ginekol Pol. -2012. - Vol. 83, no. 8. - P. 598-603.

198. Zenclussen A.C. Questioning the Th1/Th2 paradigm in reproduction: peripheral levels of IL-12 are down-regulated in miscarriage patients / A.C. Zenclussen, S. Fest, P. Busse [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2002. - Vol. 48, no. 4. - P. 245-251.

199. Zhang C. Association between serum TNF-a levels and recurrent spontaneous miscarriage: a meta-analysis / C. Zhang, X. Deng, X. Zhan [et al.] // Am J Reprod Immunol. - 2016. - Vol. 75, no. 2. - P. 86-93.

200. Zhang M. Association between genetic polymorphisms in interleukin genes and recurrent pregnancy loss - a systematic review and meta-analysis / M. Zhang, J. Xu, X. Bao [et al.] // PLoS One. - 2017. - Vol. 12, no. 1. - P. e0169891.

201. Zhang T. Genetic variants in the folate pathway and the risk of neural tube defects: a meta-analysis of the published literature / T. Zhang, J. Lou, R. Zhong [et al.] // PloS One. - 2013. - Vol. 8, no. 4. - P. e59570.

202. Zhang Y. Crosstalk between human endometrial stromal cells and decidual NK cells promotes decidualization in vitro by upregulating IL-25 / Y. Zhang, Y. Wang, X.-H. Wang [et al.] // Mol Med Rep. - 2018. - Vol. 17, no. 2. - P. 2869-2878.

203. Zidan H.E. Interleukin-17 and leptin genes polymorphisms and their levels in relation to recurrent pregnancy loss in Egyptian females / H.E. Zidan, N.A. Rezk, A.A. Alnemr [et al.] // Immunogenetics. - 2015. - Vol. 67, no. 11. - P. 665-673.

204. Ziganshina M.M. Time course of the cytokine profiles during the early period of normal pregnancy and in patients with a history of habitual miscarriage / M.M. Ziganshina, L.V. Krechetova, L.V. Vanko [et al.] // Bull Exp Biol Med. - 2013. - Vol. 154. - P. 385-387.

Приложение 1.

Основные осложнения гестационного процесса (база данных HuGE Literature Finder)*.

№ Заболевание Количество публикаций

1. Преэклампсия 612

2. Аборт, привычное невынашивание 486

3. Осложнения беременности 206

4. Диабет, гестационный 194

5. Преждевременные роды 175

6. Тромбофилия 175

7. Вес при рождении 174

8. Аборт, спонтанность 132

9. Осложнения беременности, гематологические 113

10. Грудные опухоли 98

11. Сахарный диабет 2 типа 86

12. Гипертензия, вызванная беременностью 84

13. Задержка роста плода 73

14. Волчья пасть 62

15. Повышенное кровяное давление 62

16. Осложнения беременности (сердечно-сосудистая система) 61

17. Осложнения беременности (инфекционные) 60

18. Ожирение 59

19. Заячья губа 58

20. Бесплодие у женщин 57

21. Тромбофлебит 57

22. Преждевременные роды 51

23. ВИЧ-инфекция 47

24. Болезни близнецов 44

25. Отслойка плаценты 41

26. Синдром Дауна 36

27. Преждевременный разрыв плодных оболочек 35

28. Холестаз, внутрипеченочный 34

29. Синдром HELLP 33

30. Пороки сердца, врожденные 33

31. Внутриутробная смерть плода 32

32. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью 30

33. Эмбриональные заболевания 30

34. Сахарный диабет 1 типа 28

35. Синдром поликистоза яичников 27

36. Удушье 26

37. Воспаление 26

38. Гипергомоцистеинемия 23

39. Прогрессирование заболевания 22

40. Тромбоэмболия 22

41. Когнитивные расстройства 21

42. Эклампсия 21

43. Бесплодие у мужчин 21

44. Хромосомные аберрации 19

45. Эмбриональные потери 19

46. Шизофрения 18

Продолжение приложения 1. Основные осложнения гестационного процесса (база данных HuGE Literature Finder)*.

Сердечно-сосудистые заболевания

17

48.

Антифосфолипидный синдром

15

49.

Кистозный фиброз

15

50.

Вагиноз, бактериальный

14

51.

Эндометриоз

13

52.

Дефицит фолиевой кислоты

13

53.

Хориоамнионит

12

54.

Гипергликемия

12

55.

Венозная тромбоэмболия

12

56.

Аутистическое расстройство

10

57.

Детский церебральный паралич

10

58.

Пузырный занос

10

Примечание: * - Указаны названия заболеваний, число публикаций по которым превышает 10 (n>10); Дата обращения: декабрь 2018. Поисковый запрос: Pregnancy [Беременность]. Найдено: 688 названий заболеваний.

https ://phgkb.cdc.gov/PHGKB/searchSumm ary.acti on

Приложение 2.

Основные гены, вовлеченные в патогенез выкидыша (база данных HuGE Literature Finder)*.

№ Ген Количество публикаций

1. MTHFR 116

2. F5 115

3. F2 96

4. SERPINE1 49

5. HLA-G 32

6. TNF 27

7. VEGFA 23

8. ACE 22

9. IL10 21

10. NOS3 16

11. ITGB3 15

12. F13A1 15

13. HLA-DQB1 14

14. APOE 14

15. TP53 13

16. IL1B 13

17. FGB 13

18. ANXA5 13

19. HLA-DQA1 12

20. HLA-DRB1 11

21. MTRR 8

22. MTR 5

23. IL4 4

24. RFC1 1

25. IL17A 3

26. SLC19A1 2

Примечание: * - Указаны названия генов, число публикаций по которым превышает 10 (n>10), а также те гены, которые были рассмотрены в диссертационной работе. Дата обращения: декабрь 2018. Поисковый запрос: Miscarriage [Выкидыш]. Найдено: 375 названий генов.

Приложение 3.

Основные гены, вовлеченные в патогенез развития осложнений беременности (база данных HuGE Literature Finder)*. _ ___

№ Ген Количество № Ген Количество

публикаций публикаций

1. MTHFR 429 78. CFTR 18

2. F5 306 79. FAS 18

3. F2 233 80. FMR1 18

4. TNF 135 81. IGF1 18

5. ACE 101 82. HLA-A 17

6. NOS3 93 83. HLA-B 17

7. SERPINE1 90 84. HLA-C 17

8. IL6 85 85. IL18 17

9. IL6 85 86. CYP17A1 17

10. GSTM1 83 87. SLC19A1 16

11. GSTT1 80 88. CTLA4 16

12. IL10 80 89. CYP2D6 16

13. CYP1A1 64 90. GNB3 16

14. HLA-G 63 91. IGF2 16

15. APOE 60 92. TLR2 16

16. IL1B 60 93. MAOA 16

17. VEGFA 58 94. CYP1A2 16

18. SLC6A4 57 95. ABCB4 15

19. COMT 54 96. CD14 15

20. HLA-DRB1 54 97. CRP 15

21. ESR1 53 98. MMP2 15

22. AGT 51 99. ADH1B 14

23. MTRR 47 100. BHMT 14

24. IL1RN 43 101. CCR5 14

25. PPARG 43 102. COL1A1 14

26. GSTP1 41 103. CYP3A4 14

27. HLA-DQB1 41 104. HFE 14

28. FTO 38 105. IGF2BP2 14

29. TGFB1 38 106. KCNJ11 14

30. INS 37 107. SOD2 14

31. ADRB2 36 108. OXTR 14

32. MTR 36 109. NQO1 14

33. TLR4 36 110. MC4R 14

34. MBL2 36 111. KCNQ1 14

35. PON1 35 112. KCNJ11 14

36. BRCA1 34 113. CDKN2A 13

37. IL4 33 114. CYP2E1 13

38. TCF7L2 33 115. DHFR 13

39. AGTR1 31 116. F7 13

40. BRCA2 30 117. HHEX 13

41. TP53 29 118. IL4R 13

42. LEP 29 119. IL6R 13

43. IL1A 28 120. NAT1 13

44. ITGB3 28 121. MMP1 13

Продолжение приложения 3.

Основные гены, вовлеченные в патогенез развития осложнений беременности (база данных HuGE Literature Finder)*.

№ Ген Количество № Ген Количество

публикаций публикаций

45. PGR 28 122. KIR2DL4 13

46. MMP9 28 123. ADRB3 12

47. HLA-DQA1 28 124. APOB 12

48. GCK 27 125. CDKN2B 12

49. EPHX1 26 126. FADS1 12

50. VDR 26 127. FOXP3 12

51. BDNF 25 128. NOD2 12

52. FSHR 25 129. IL1R1 12

53. MTHFD1 25 130. IL8 12

54. LEPR 25 131. IRS1 12

55. F13A1 24 132. TNFRSF1A 12

56. IFNG 24 133. SLC30A8 12