Иммунологические и молекулярно-биологические факторы персистирующего течения папилломавирусной инфекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат биологических наук Зотова, Мария Александровна

• Зотова, Мария Александровна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Зотова, Мария Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Современные представления о факторах персистенции вируса папилломы человека высокого риска в репродуктивном тракте женщины (обзор литературы).

1.1. Молекулярно-биологические факторы персистенции вируса папилломы человека высокого риска в репродуктивном тракте женщины.

1.2. Особенности иммунного ответа у женщин с папилломавирусной инфекцией.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Молекулярно-биологические методы исследования.

2.3. Иммунологические методы исследования.

2.4.Методы статистической обработки материала.

Глава 3. МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ У ЖЕНЩИН С ТРАНЗИТОРНЫМ И ПЕРСИСТИРУЮЩИМ ТЕЧЕНИЕМ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ.

3.1. Молекулярное генотипирование у женщин с транзиторным и персистирующим течением папилломавирусной инфекции.

3.1. Количественное определение вируса папилломы человека высокого риска у женщин с транзиторным и персистирующим течением папилломавирусной инфекции.

Глава 4. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ У ЖЕНЩИН С ТРАНЗИТОРНЫМ И ПЕРСИСТИРУЮЩИМ ТЕЧЕНИЕМ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ.

Глава 5. КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ВЗАИМОСВЯЗЕЙ ВИРУСНОЙ НАГРУЗКИ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО РИСКА И ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ У ЖЕНЩИН С ТРАНЗИТОРНЫМ И ПЕРСИСТИРУЮЩИМ ТЕЧЕНИЕМ

ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ.

Глава 6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ РИСКА РАЗВИТИЯ И ДЛИТЕЛЬНОСТИ ПЕРСИСТЕНЦИИ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА

ВЫСОКОГО РИСКА В РЕПРОДУКТИВНОМ ТРАКТЕ ЖЕНЩИНЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологические и молекулярно-биологические факторы персистирующего течения папилломавирусной инфекции»

Актуальность проблемы

Папилломавирусная инфекция (ПВИ) является одной из наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путем (Ш11Ш). По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) число инфицированных за последние десять лет увеличилось более чем в 10 раз, достигнув 23,5% [Белокриницкая Т.Е. и др., 2005; Козаченко В.П. и др., 2009; WHO, 2006]. Чрезвычайно важной представляется проблема ПВИ-в связи с онкогенным потенциалом вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска, который по данным ВОЗ признан этиологическим агентом рака шейки матки (РШМ)' [WHO, 2006]. Несмотря на высокую распространенность и онкогенный потенциал ВПЧ, высокий процент самопроизвольного регресса ПВИ свидетельствуют о том, что инфицирование является^ необходимым, но недостаточным условием для возникновения РШМ [Новик В.И., 2006]. По данным литературы, главным фактором риска развития неопластической патологии является персистенция онкогенных типов ВПЧ1 [Манухин И.Б., Минкина Г. Н., 2006; Вергейчик Г.И., 2008; Кузнецова Ю.Н. и др., 2009; Schiffinan M., Castle P.E., 2003; Einstein M.H., 2008; Manavi M. et al., 2008; Carcopino X. et al., 2011]. Считается, что канцерогенез является следствием "персистентных инфекций ВПЧ высокого риска" продолжительностью более 6 месяцев [Современные подходы., 2009; Вакцины для профилактики., 2011; Song S.H. et al., 2006; Woodman C.B. et al., 2007; Koshiol J. et al., 2008; Bhat P. et al., 2011]. Тем не менее, понятие "персистирующая инфекция" - это только условное определение и не включает никакого функционального или механистического критерия, который бы опирался на молекулярные события, необходимые для развития канцерогенеза, вызванного ВПЧ. И хотя в настоящее время данный термин широко используется, крайне необходимо дифференцировать точно клинически значимые фазы течения инфекций ВПЧ высокого риска на основе молекулярных показателей [Doeberitz М. К., 2009].

Большую важность приобретают исследования, направленные на поиск вирусологических маркеров, ответственных за развитие персистирующего течения ПВИ [Современные подходы., 2009]. В настоящее время, в качестве таких вирусологических факторов рассматриваются: инфекция, вызванная онкогенными типами ВИЧ, а таюке несколькими типами вируса одновременно; высокая вирусная нагрузка на момент инфицирования; повышенная экспрессия онкобелков Е6 и Е7 ВПЧ; сверхэкспрессия циклин-зависимых киназ pl6INK4a [Шипицына Е.В. и др., 2004; Кубанов A.A., 2005; Мынбаев O.A. и др., 2009; Комплексная борьба., 2010; Вакцины для профилактики., 2011].

Клинические наблюдения, а также данные экспериментальных исследований свидетельствуют о ведущей роли иммунной системы в контроле возникновения, течения и исхода ПВИ [Радионов В.Г. и др., 2002; Баткаев Э.А., Рюмин Д.В., 2003, Роговская С.И., 2005; Сергеева C.JI. и др., 2006; Кузнецова Ю.Н. и др., 2009; Stanley М., 2006]. Поскольку ВПЧ эпителиотропен, особо важное значение имеет состояние системы местной защиты органов репродуктивной системы. У здоровых женщин в результате нормальной работы иммунной системы и механизмов контроля над пролиферацией ВПЧ-инфекция часто имеет транзиторный характер, и вирус спонтанно элиминируется в течение 6-12 месяцев, не вызывая серьезных поражений эпителия. Стойкое угнетение местного иммунитета обусловливает способность ВПЧ к длительной персистенции, что, в свою очередь, может приводить к появлению и разрастанию участков пораженного эпителия по типу тяжелой дисплазии.

Несмотря на многочисленные исследования роли местного, иммунитета в защите от ВПЧ, недостаточно изучены механизмы действия клеточных и гуморальных компонентов мукозального иммунитета на формирование персистенции данного вируса. Учитывая тот факт, что персистенция ВПЧ высокого риска является ключевым событием в малигнизации клеток, необходимо установить факторы, инициирующие этот процесс, и, следовательно, способствующие реализации онкогенного потенциала ВПЧ.

Углубление знаний о природе ВПЧ и механизмах иммунного ответа против данного вируса позволят контролировать течение ПВИ и повысить эффективность лечения ВПЧ-индуцированных заболеваний шейки матки, а своевременное выявление персистирующего инфекционного процесса -повысить эффективность первичного скрининга РШМ.

Цель исследования

Установление иммунологических, молекулярно-биологических особенностей транзиторного и персистирующего течения папилломавирусной инфекции и выявление маркеров персистенции вируса папилломы человека высокого риска.

Задачи исследования

1. Установить типы вируса папилломы человека высокого риска, ассоциированные с транзиторным и персистирующим течением папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

2. Определить показатели вирусной нагрузки вируса папилломы человека высокого риска при транзиторном и персистирующем течении папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

3. Изучить иммунологические показатели цервикальной слизи при транзиторном и персистирующем течении папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

4. Определить взаимосвязи между молекулярно-биологическими и иммунологическими показателями цервикальной слизи при транзиторном и персистирующем течении папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

5. Установить маркеры персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

Научная новизна

Впервые установлен широкий спектр генотипов ВПЧ высокого риска при транзиторном и персистирующем течении ПВИ длительностью 6 и 12 месяцев. Показано преобладание ВПЧ 16 типа независимо от течения и длительности ПВИ. Впервые установлено, что транзиторное течение ПВИ ассоциировано с ВПЧ 52 типа и инфицированием 1 типом вируса. Персистирующее течение ПВИ характеризуется высокой частотой встречаемости микстинфекции ВПЧ высокого риска и моноинфекции ВПЧ 16 типа. Установлено, что при персистирующем течении ПВИ длительностью 121 месяцев- в> разном проценте случаев определяются 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы ВПЧ высокого риска, в то время как при транзиторном течении ПВИ не установлено случаев инфицирования 35 типом ВПЧ, при персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев -39 и 58 типами ВПЧ.

Впервые проведена оценка иммунологических факторов цервикальной слизи в зависимости от длительности персистенции ВПЧ высокого риска. Выявлены общие изменения факторов местного иммунитета, сопровождающие наличие ВПЧ высокого риска в цервикальном канале обследованных женщин: снижение активности, интенсивности фагоцитоза и фагоцитарного числа нейтрофилов, увеличение лизосомальной активности нейтрофильных гранулоцитов и уровня ИЛ-2. Установлено, что персистирующее течение ПВИ длительностью 6 месяцев характеризуется снижением лизосомальной активности нейтрофилов и повышением уровня в на фоне высоких уровней ИФН-а и ИФН-у в цервикальной слизи относительно транзиторного течения ПВИ. Персистирующее течение ПВИ длительностью 12 месяцев сопровождается снижением интенсивности фагоцитарных реакций нейтрофилов, дефицитом ИФН-а и повышенными концентрациями А, ^Аи^Мв цервикальной слизи.

Впервые получены данные по показателям вирусной нагрузки ВПЧ высокого риска в зависимости от длительности персистенции вируса. Установлено влияние вирусной нагрузки ВПЧ высокого риска на факторы локального иммунитета репродуктивного тракта женщины, определяющее развитие и длительность персистирующего течения ПВИ.

Впервые с помощью бинарной логистической регрессии определены маркеры, риска развития и длительности персистирующего течения ПВИ в репродуктивном тракте женщины.

Теоретическая и практическая значимость

Проведенные исследования молекулярно-биологических показателей и иммунологических факторов цервикальной слизи расширяют представление о роли генотипа, концентрации: ВПЧ высокого риска, факторов локальною иммунной системы, в частности, полиморфноядерных лейкоцитов, цитокиновой регуляции и иммуноглобулинов, в развитии и длительности персистирующего течения ПВИ в репродуктивном тракте женщины.

Установленные взаимосвязи между вирусной нагрузкой ВПЧ высокого риска и иммунологическими показателями цервикальной слизи отражают влияние количественного содержания вируса на работу иммунной системы.

На основании комплексного молекулярно-биологического и иммунологического исследования выделены основные маркеры, определяющие риск развития и длительность персистенции ВПЧ высокого риска в репродуктивном тракте женщины. Это позволяет сузить спектр необходимых иммунологических исследований при ведении женщин с ПВИ, а также дает возможность своевременно формировать группы риска по развитию персистирующего течения ПВИ, что, в свою очередь, будет способствовать предотвращению возникновения и прогрессирования пролиферативного процесса.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Транзиторное течение папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины ассоциировано с вирусом папилломы человека 52 типа и инфицированием 1 генотипом вируса, персистирующее течение папилломавирусной инфекции характеризуется высокой частотой встречаемости микстинфекции вируса папилломы человека высокого риска и моноинфекции вируса папиллома человека 16 типа. Персистирующее течение папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины сопровождается высокими концентрациями вируса папилломы человека высокого риска и преобладанием случаев вирусной нагрузки выше 5 1§ на 105 клеток человека.

2. Наличие вируса папилломы человека высокого риска в цервикальном эпителии характеризуется угнетением нейтрофильного звена местного иммунитета, в то время как развитие и длительность персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины определяется состоянием гуморального иммунитета и уровнем интерферонов в цервикальной слизи.

3. Развитие персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины сопровождается изменением не только показателей вирусной нагрузки и местного иммунитета, но и взаимосвязей между ними.

4. Выявленные особенности молекулярно-биологических факторов и иммунологических показателей цервикальной слизи позволяют определить маркеры риска развития и длительности персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследований внедрены в клиническую практику женской консультации, МУЗ ГКБ №2 г.Челябинска, в лабораторную диагностику НИИ иммунологии ГОУ ВПО ЧелГМА Росздрава, в педагогическую практику кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностики, кафедры акушерства и гинекологии №2 ГОУ ВПО ЧелГМА Росздрава.

Апробация работы и публикации

Основные положения диссертации доложены, обсуждены и опубликованы на:. VI Всероссийской научно-практической конференции «Генодиагностика инфекционных заболеваний» (Москва, 2007); VII-итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии (Челябинск, 2009); VII Российской конференции иммунологов Урала (Архангельск, 2009); Российской научной конференции «Персистенция микроорганизмов» (Оренбург, 2009); VIII Всероссийском форуме «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге - 2009» (Санкт-Петербург, 2009); II-ом Ежегодном конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2010); VIII Российской конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010), на межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии — междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010); VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика - 2010» (Москва,

2010); 4-ой Всероссийской конференции «Иммунология репродукции» (Пермь, 2010).

По теме диссертации опубликовано 24 научные работы, в том числе 9 из перечня изданий, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 4-х глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы, включающего работы 155 отечественных и 77 иностранных авторов. Диссертация изложена на 145 страницах компьютерного текста и включает 12 таблиц, 4 рисунка.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Зотова, Мария Александровна

выводы

У женщин с транзиторным и персистирующим течением папилломавирусной инфекции установлена высокая частота встречаемости вируса папилломы человека 16 типа. На втором месте при транзиторном течении папилломавирусной инфекции находится вирус папилломы человека 52 типа и вообще не определяется вирус папилломы человека 35 типа. При персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 6 месяцев наравне с вирусом папилломы человека 16 типа определяется вирус папилломы человека 52 типа, второе место занимают 31 и 51 типы вируса папилломы человека и не обнаруживаются вообще 39 и 58 типы вируса папилломы человека. При персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 12 месяцев вторым по частоте встречаемости является вирус папилломы человека 31 типа, и в разном проценте случаев выявляются все 12 определяемых типов вируса папилломы человека высокого риска.

У женщин с персистирующим течением папилломавирусной инфекции установлена высокая частота инфицирования двумя и более типами вируса папилломы человека высокого риска: при персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 6 месяцев - 50% случаев, при персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 12 месяцев -57,7% случаев.

У пациенток с транзиторным и персистирующим течением папилломавирусной инфекции имеются однонаправленные изменения факторов местного иммунитета, заключающиеся в снижении активности, интенсивности: фагоцитоза и фагоцитарного числа нейтрофилов, увеличении лизосомальной активности этих клеток и уровня ИЛ-2.

4. У женщин: с персистирутощим течением, папилломавирусной инфекции длительностью 6 месяцев отличительными особенностями являются снижение лизосомальной активности полиморфноядерных лейкоцитов и повышение уровней ИФН-сц ИФН-у, О в цервикальной слизи.

5. У женщин с персистирующим течением папилломавирусной инфекции . длительностью 12 месяцев установлено; снижение интенсивности фагоцитоза нейтрофилов, дефицит ИФН-а и повышение концентраций А, ^ А и ^ М в цервикальной слизи.

6. Персистирующее течение папилломавирусной; инфекции в репродуктивном-" тракте женщины ассоциировано? с клинически значимыми показателями вирусной- нагрузки; вируса; папилломы человека высокого риска: при персистирующем течении папилломавирусной)инфекции длительностью 6 месяцев - 5,64±0,22 1§ вируса папилломы человека на 105 клеток человека; при персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 12 месяцев - 4,28±0,33 ^ вируса папилломы человека на 105 клеток человека.

7. Выявлены корреляционные связи между вирусной нагрузкой; вируса папилломы человека высокого риска и- иммунологическими показателями; цервикальной слизи: при транзиторном- течении папилломавирусной инфекции - положительная взаимосвязь вирусной нагрузки вируса папилломы человека высокого риска с А и отрицательная — с ИФН-у, при персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 6 месяцев положительные связи между вирусной нагрузкой вируса папилломы человека высокого риска и активностью индуцированного НСТ-теста нейтрофилов, ИЛ-2, ИФН-у и 1§ М, отрицательные связи - между вирусной нагрузкой вируса папилломы человека высокого риска и лизосомальной активностью нейтрофилов, общим количеством лейкоцитов и абсолютным содержанием жизнеспособных нейтрофилов, при персистирующем течении папилломавирусной инфекции длительностью 12 месяцев - между вирусной нагрузкой вируса папилломы человека высокого риска и А цервикальной слизи.

8. Маркерами риска развития персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины ^ длительностью 6 месяцев являются вирусная нагрузка вируса папилломы человека высокого риска и уровень ИФН-а цервикальной слизи. Маркерами риска развития персистирующего течения папилломавирусной инфекции в репродуктивном тракте женщины длительностью 12 месяцев являются уровни ^ А и ИФН-а цервикальной слизи.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Инфицирование ВПЧ ассоциировано со спектром эпителиальных пролиферативных заболеваний урогенитального тракта, способных прогрессировать до инвазивного рака, заболеваемость и смертность от которого продолжает оставаться стабильно высокой в мире [Stanley М., 2003; Muñoz N. et al., 2004; Tong S.Y. et al., 2007]. Тем не менее, РШМ является поздним и редким осложнением ПВИ и возникает на фоне цепи взаимосвязанных процессов, протекающих в течение многих лет. В ходе многочисленных исследований было показано, что в качестве серьезной предпосылки для развития РШМ выступает персистенция ВПЧ высокого риска в цервикальных эпителиоцитах [Song S.H. et al., 2006; KoshioLJ. et al4., 2008; Bhat P. et al., 2011]. В настоящее время нет четкой определенности в отношении факторов, обуславливающих возможность и различные темпы прогрессирования ПВИ [Современные подходы., 2009]. Продолжаются поиски надежных маркеров, как вирусологических, так и иммунологических, позволяющих прогнозировать исход ПВИ.

На основании вышеизложенного, целью нашей работы стало установление иммунологических, молекулярно-биологических особенностей транзиторного и персистирующего течения папилломавирусной инфекции и выявление маркеров персистенции вируса папилломы человека высокого риска.

Для решения поставленных задач было проведено обследование 152 женщин, у которых с помощью молекулярно-биологических методов исследования в соскобе из цервикального канала был обнаружен ВПЧ высокого риска. Для установления факта персистенции ВПЧ высокого риска всем женщинам проводили ВПЧ-тестирование через 6 и 12 месяцев после первичного обнаружения вируса.

При повторном обследовании через 6 месяцев после первичного обнаружения ВПЧ высокого риска у 84 женщин (55,3%) вновь определялась ДНК ВПЧ высокого риска в цервикальном канале шейки матки, через 12 месяцев - у 52 женщин (34,2%). Наши данные совпадают с исследованиями других авторов, в которых показано, что в 70% случаев ПВИ заканчивается спонтанным выздоровлением в течение 1 года [Кулаков В.И. и др., 2005; Роговская С.И., 2005; Прилепская В.Н. и др., 2007; Логунов О.В. и др., 2008; Мынбаев O.A. и др., 2009; Bosh F.X. et al., 2008; Rapóse A., 2009].

На основании полученных данных для выполнения поставленных цели и задач исследования ретроспективно все пациентки с ПВИ были разделены на 3 группы: I группу составили 68 пациенток с отрицательными результатами ВПЧ-тестирования через 6 и 12 месяцев после первичного выявления-ВПЧ высокого риска (транзиторное течение ПВИ), II группу - 32 женщины с персистирующим течением ПВИ, у которых вирус выявлялся только через 6 месяцев после первичного обследования и не выявлялся через 12 месяцев (персистирующее течение ПВИ длительностью 6 месяцев), в III группу вошли 52 женщины с положительным ВПЧ-тестом через 6 и 12 месяцев после первичного обследования (персистирующее течение ПВИ длительностью 12 месяцев). Контрольную группу составили 32 женщины без ВПЧ высокого риска, клинико-морфлогических изменений на шейке матки и иной гинекологической патологии.

Всем ВПЧ-позитивным женщинам было проведено молекулярное генотипирование - дифференциация 12 типов ВПЧ высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы) и количественное определение ДНК вируса методом ПЦР в режиме реального времени. Для оценки состояния местного иммунитета всем пациенткам было проведено иммунологическое исследование цервикальной слизи.

Анализ частоты встречаемости генотипов ВПЧ высокого риска показал преобладание ВПЧ 16 типа как в группе с транзиторным течением ПВИ, так и в группах с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 и 12 месяцев. Полученные нами результаты согласуются с данными мировых исследований о высокой распространенности ВПЧ 16 типа в популяции [Александрова Ю.Н. и др., 2000; Катханова О.А., 2003; Кубанов А.А., 2005; Евстигнеева Н.П., 2007; Видяева И.Г. и др., 2008, 2009; Никитина Е.Г. и др., 2009; Современные подходы., 2009; Munoz N. et al., 2004; de Sanjose S. et al., 2007; Bosh F.X. et al., 2008]. При персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев наравне с ВПЧ 16 типа выявлялся ВПЧ 52 типа.

На втором месте при транзиторном течении ПВИ находился ВПЧ 52 типа, при персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев - ВПЧ 31 и 51 типов, при персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев — ВПЧ 31 типа. Характерной особенностью персистирующего течения ПВИ длительностью 12 месяцев было снижение частоты встречаемости ВПЧ1 52 типа относительно как группы с транзиторным течением ПВИ, так и группы с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев. Аналогичные результаты получены в работе Е.А. Золотоверхой и соавт. (2007), в которой не было обнаружено персистенции ВПЧ 52 типа [Золотоверхая Е.А. и др., 2007]. Вероятно, инфицирование 52 типом ВПЧ ассоциировано с элиминацией, либо с краткосрочной персистенцией ВПЧ высокого риска.

У женщин с персистирующим течением ПВИ длительностью 12 месяцев в разном проценте случаев встречались все 12 определяемых типов ВПЧ высокого риска, тогда как при транзиторном течении ПВИ не выявлялся ВПЧ 35 типа, при персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев - ВПЧ 39 и 58 типов.

Характеризуя частоту встречаемости количества типов ВПЧ высокого риска в исследуемых группах необходимо отметить, что при транзиторном течении ПВИ в 70,6% случаев выявлено инфицирование 1 типом ВПЧ. Особенностью персистирующего течения ПВИ длительностью 6 месяцев была одинаковая частота встречаемости моно- и микстинфекции. В то время как персистирующее течение ПВИ длительностью 12 месяцев было ассоциировано с инфицированием 2 и более типами ВПЧ и встречалось в 57,7% случаев. Сочетание различных генотипов ВПЧ высокого риска снижает скорость элиминации и способствует персистенции вируса. Наши данные согласуются с результатами других исследователей, которые в своих работах пришли к выводу, что инфицирование несколькими типами ВПЧ обеспечивает менее благоприятный прогноз течения ПВИ [Евстигнеева Н.П., 2009; Евстигнеева Н.П., Кузнецова Ю.Н., 2009; Современные подходы., 2009].

Анализ частоты встречаемости типов ВПЧ высокого риска при моноинфекции показал преобладание ВПЧ 16 типа в группах с транзиторным и персистирующим течением ПВИ длительностью 12 месяцев. Лидирующую позицию при персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев занимал ВПЧ 51 типа, частота встречаемости которого в этой группе была выше по сравнению с транзиторным течением ПВИ. При персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев отмечена наиболее высокая частота инфицированности моноинфекцией ВПЧ 16 типа относительно остальных исследуемых групп. По данным литературы, моноинфекция ВПЧ, в особенности высокоагрессивного 16 типа, является неблагоприятным прогностическим фактором течения инфекционного процесса [Коломиец Л.А. и др., 2004; Yamada Т. et al., 1997]. Отраженное в некоторых работах предположение о повышенном риске развития персистенции в случае инфицирования ВПЧ 16 типа [Nielsen А. et al., 2010] нашло подтверждение в нашей работе.

Интересно отметить, что при персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев в виде моноинфекции выявлялось только 4 типа ВПЧ - 16, 31,33 и58 типы. Учитывая, что большая часть определяемых нами генотипов ВПЧ персистировало в кооперации, можно предположить, что способность к персистенции одного типа должна определяться его наиболее мощными функциональными особенностями, позволяющими выработать высокую степень адаптации к иммунной системе организма-хозяина.

Характеризуя типовой состав микстинфекции ВПЧ высокого риска, установлено, что в группах с транзиторным и персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев наиболее часто был идентифицирован ВПЧ 52 типа, в группе с персистирующим течением ПВИ длительностью 12 месяцев - ВПЧ 31 типа. Микстинфекция при персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев характеризовалась низкой частотой встречаемости ВПЧ 52 типа по сравнению с остальными исследуемыми группами. У женщин всех исследуемых групп ВПЧ 18 типа встречался только в виде микстинфекции.

Изучение биологических особенностей транзиторного и персистирующего течения ПВИ в нашем исследовании показало, что лидирующую позицию независимо от исхода ПВИ занимал ВПЧ 16 типа. При этом транзиторное течение было ассоциировано с ВПЧ 52 типа и инфицированием 1 генотипом вируса, в то время как персистирующее течение ПВИ характеризовалось высокой частотой встречаемости микстинфекции ВПЧ высокого риска и моноинфекции ВПЧ 16 типа. В то же время, в большинстве случаев, как при транзиторном, так и при персистирующем течении ПВИ определялись одни и те же генотипы вируса, а при персистирующем течении ПВИ были выявлены все 12 исследуемых типов. Вероятно, для понимания этого факта необходимо более детальное изучение каждого генотипа вируса, так как в некоторых исследованиях показано, что разные внутритиповые варианты ВИЧ, определяемые на основании генетического полиморфизма, различаются* по своей способности вызывать персистирующую инфекцию [Евстигнеева Н.П., Кузнецова Ю.Н., 2009; Xi L.F. et al., 1995; Villa L.L. et al.,,2000; Gagnon S. et al., 2004; Wyant P.S. etal.,2011].

Таким образом, молекулярное генотипирование ВЕЧ высокого риска является эффективным методом установления факта персистенции вируса, что имеет большое практическое значение для своевременного предотвращения прогрессирования патологических изменений цервикального эпителия и развития необратимой неопластической трансформации.

Тем не менее, только тип вируса не является определяющим в развитии персистенции, существуют и другие факторы, влияющие на исход ПВИ. В качестве одного них рассматривается вирусная нагрузка ВПЧ высокого риска [Stanley М., 2003; Song S.H. et al., 2006]. На. сегодняшний день установлено, что количество ВПЧ высокого риска может отражать тяжесть и прогноз течения папилломавирусной инфекции. При правильном и стандартизированном заборе клинического материала вирусная нагрузка менее 105 геномных эквивалентов (ГЭ) ВПЧ высокого риска в соскобе или

3 5

10 ГЭ, приходящихся на 10 клеток человека, считается клинически малозначимой, так как практически не встречается при тяжелой дисплазии и РШМ, а так же ассоциирована с минимальным риском их развития. Напротив, количество вируса более 105 ГЭ, приходящихся на 105 клеток, при установленном факте персистирующего течения инфекции обозначается, как повышенная нагрузка ВПЧ, которая ассоциирована с повышенным риском развития тяжелой дисплазии и чаще встречается при РШМ [Snijders J., 2003].

В нашем исследовании результаты полученных концентраций ДНК ВПЧ высокого риска выражались в 1§ (ВПЧ на 105 клеток человека) и трактовались следующим образом: менее 3 ^ - малозначимая, от 3 до 5 ^ - значимая и более 5 ^ — повышенная вирусная нагрузка.

Исследование показателей и распределения малозначимой, значимой и повышенной вирусной нагрузки ВПЧ высокого рискае в изучаемых группах женщин показало, что средняя концентрация вируса при транзиторном течении ПВИ была 3,26±0,32 ^ ВПЧ на 105 клеток, что- сочеталось с преобладанием в этой группе случаев малозначимой нагрузки (41,2%).

У женщин с персистирующимс течением ПВИ длительностью 6 месяцев средний показатель вирусной нагрузки был достоверно^ выше (5,64±0,22 ВПЧ на 105 клеток), а повышенная вирусная нагрузка встречалась чаще (65,6%), чем в группе с транзиторным течением ПВИ. При этом малозначимая вирусная нагрузка в-данной группе не обнаружена.

При персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев средняя концентрация вирусной ДНК определялась на уровне 4,28±0,33 ^ ВПЧ на 105 клеток, что выше по сравнению с группой транзиторного течения ПВИ, но ниже относительно персистирующего течения ПВИ длительностью 6 месяцев. При этом преобладала значимая1 вирусная- нагрузка, а частота встречаемости повышенной снижалась по сравнению с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что высокая вирусная нагрузка может способствовать персистенции вируса, но не всегда является признаком неблагоприятного исхода ПВИ. В нашем исследовании в группе с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев, несмотря на повышенную вирусную нагрузку у пациенток в итоге.произошла элиминация ВПЧ высокого риска, но для этого потребовалось больше времени по сравнению с группой транзиторного течения ПВИ.

Интраэпителиальный жизненный цикл ВПЧ, отсутствие виремии и продукция вирусных частиц в поверхностных клетках слизистой, расположенных далеко от кровеносного и лимфатического русла, определяют ведущую роль факторов локального иммунитета в процессах инфицирования и, самое главное, вероятности последующего развития заболевания (элиминация или персистенция ВПЧ) [Современные подходы., 2009; Stanley М., 2009; Bhat P. et al., 2011]. Нами было проведена оценка клеточных и гуморальных факторов, уровней цитокинов цервикальной слизи у женщин с транзиторным и персистирующим течением ПВИ длительностью 6 и 12 месяцев.

Полученные результаты показали, что в цервикальной слизи женщин как с транзиторным, так и с персистирующим течением ПВИ установлены однонаправленные изменения* показателей местного иммунитета, характеризующиеся достоверным снижением активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов, их фагоцитарного числа, увеличением лизосомальной активности нейтрофилов и уровня ИЛ-2.

Нейтрофилы являются« важными функциональными элементами компонентов врожденного иммунитета. Именно они осуществляют первую встречу с патогеном и являются мощными эффекторами воспаления [Олиферук Н.С., 2005; Пинегин Б.В., Маянский А.Н., 2007]. Выявленные нами изменения фагоцитарной реакции нейтрофилов отражают нарушение поглотительной и переваривающей способностей, а также неэффективность их внутриклеточной киллерной функции при ПВИ. В то же время; высокое содержание лизосомальных энзимов свидетельствует об активности и способности нейтрофилов к реагированию на внешние воздействия, посредством реализации кислороднезависимой биоцидности, направленной на уничтожение ВПЧ [Цыганкова О.В., 2009].

Во всех исследуемых группах зарегистрировано повышение уровня

ИЛ-2, который является мощным эндогенным индуктором пролиферации эффекторных клеток, что обеспечивает восстановление их количества при борьбе с инфекцией, и биорегулятором, имеющим определяющее значение для повышения цитотоксичности специфических и естественных киллеров [Ярилин A.A., 1999; Кубанов A.A., 2005; Олина A.A., Падруль В.М., 2006; Кетлинский С.С., Симбирцев A.C., 2008; Новиков Д.К., Новиков П.Д., 2009]. Следовательно, выявленные изменения* свидетельствуют об активации иммунекомпетентных клеток в ответ на присутствие антигенов ВПЧ высокого риска.

В группах с транзиторным и персистирующим течением ПВИ длительностью 12 месяцев установлено повышение общего количества лейкоцитов и абсолютного содержания жизнеспособных нейтрофилов относительно группы контроля. В группе с персистирующим течением ПВИ* длительностью 6 месяцев эти изменения были на уровне тенденции. Вероятно, полученные данные отражают активацию воспалительного процесса при ПВИ, так как ключевым этапом в защите организма от внедрения антигена является выход нейтрофилов из- кровяного русла по направлению к месту инвазии микроорганизма, где они решают свои эффекторные задачи либо с помощью фагоцитоза, либо путем выделения биологических активных веществ и ДНК в окружающую среду [Тотолян A.A., Фрейдлин И.С., 2000; Долгушин И.И и др., 2009]. Однако при персистирующем течении ПВИ длительностью 6 и 12 месяцев эта активация была менее выражена, о чем свидетельствует снижение абсолютного количества жизнеспособных нейтрофилов в этих группах по сравнению с транзиторным течением ПВИ.

При изучении цитокинового профиля цервикальной слизи установлены однонаправленные изменения, которые заключались в повышении уровней ИФН-а и ИФН-у при транзиторном и персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев. Как известно, интерферонам принадлежит ключевая роль в защите от вирусных инфекций. При этом, противовирусные свойства наиболее выражены у ИФН I типа, в частности ИФН-а, который способен ингибировать практически любую стадию вирусного цикла [Плехова Н.Г., Сомова Л.М., 2010]. Иммуномодулирующее действие ИФН-а проявляется в активации CD-8+ цитотоксических Т-лимфоцитов, NK-клеток, усилении дифференцировки B-лимфоцитов и продукции ими антител со сменой» их изотипа и повышением аффинности, активацией моноцитарно-макрофагальной системы и фагоцитоза, а также- усилении экспрессии молекул MHC-I, что способствует, в первую очередь, амплификации клеточно-опосредованных реакций иммунной системы, которые играют основную роль в противовирусной и противоопухолевой защите организма [Кетлинский С.С., Симбирцев A.C., 2008]. Удельная противовирусная активность ИФН-у ниже, чем у ИФ№а. Несмотря на.то, что ИФН-у обладает прямой антивирусной активностью, основные его- свойства связаны с активацией и регуляцией клеточного иммунитета: являясь продуктом Thl-клеток, он стимулирует активность макрофагов, включает секрецию ими цитокинов, опосредующих развитие воспаления. Следовательно, повышенная экспрессия ИФН-а в группах с транзиторным и персистирующим течение ПВИ длительностью 6 месяцев свидетельствует о работе противовирусных механизмов, а ИФН-^у, выступая в качестве провоспалительного цитокина обеспечивает запуск цитокинового каскада, направленного на формирование очага воспаления с привлечением эффекторных клеток.

Отличительными особенностями группы с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев стало снижение лизосомальной активности полиморфноядерных лейкоцитов и повышение уровня Ig G. Низкие показатели лизосомальных энзимов в цитоплазме нейтрофильных гранулоцитов, по нашему мнению, обусловлены массивной антигенной нагрузкой в этой группе, что приводит к истощению функциональных гранул нейтрофилов. В такой ситуации для успешной борьбы с инфекцией организм реагирует подключением гуморальных факторов иммунитета, что проявлялось в увеличении уровня в - важнейшего иммуноглобулина, определяющего завершенность и эффективность иммунного ответа [Семенов Д.М. и др., 2008] и, в итоге, будет способствовать элиминации ВПЧ из организма. Таким образом, угнетение нейтрофильного звена иммунитета цервикальной слизи в условиях повышенной вирусной нагрузки обуславливают персистирующее течение ПВИ в этой группе, но срок персистенции ВПЧ ограничивается, благодаря запуску 1§ в-иммунного ответа на фоне повышенной экспрессии ИФН-а и ИФН-у.

Персистирующее течение ПВИ длительностью 12 месяцев характеризовалось угнетением интенсивности фагоцитоза нейтрофилов, дефицитом ИФН-а и повышенными концентрациями А, ^ А и ^ М. На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что дефицит ИФН-а в цервикальной слизи, который может быть обусловлен как нарушениями в функционировании иммунной системы женщины, так и способностью ВПЧ высокого риска подавлять синтез интерферонов и работу интерферон-сигнальных путей, способствует длительному персистирующему течению ПВИ. Высокие уровни А, А, и М, обеспечивающие первую линию иммунной защиты слизистых оболочек [Евстигнеева В.П., Левчик Н.К., 2007; Карамов. Э.В. и др., 2008; Кишкун А.А., 2009], по нашему мнению, в данной ситуации, малоэффективны против инфекции и сопровождают вирусоносительство, маскируя вирусы и сдерживая их чрезмерную агрессивность [Маянский А.Н. и др., 1998; Чурина Е.Г. и др., 2009].

Таким образом, развитие персистирующего течения ПВИ сопровождается угнетением нейтрофильного звена иммунитета, а длительность персистенции ВПЧ высокого риска - дефицитом ИФН-а в цервикальной слизи.

Одной из существенных характеристик функционирования иммунной системы, помимо определения изменений количественных параметров, является баланс взаимосвязей ее компонентов [Кологривова E.H. и др., 2005; Петленко C.B. и др., 2010]. Картина таких взаимосвязей очень сложна и зависит от большого количества разнонаправленных влияний, следовательно, охарактеризовать всю сеть взаимодействий практически невозможно [Лебедев К.А., Понякина И.Д., 2003]. Учитывая, что ключевая роль в реализации процессов, пролиферации, дифференцировки и активации иммунокомпетентных клеток при включении противовирусного иммунитета принадлежит цитокин-рецепторной сети [Рязанцева Н.В. и др., 2006; Привалова М.А., 2008; Вакцины для профилактики., 2011], мы проанализировали взаимосвязи между уровнями цитокинов и другими иммунологическими показателями цервикальной слизи с помощью непараметрического корреляционного анализа по Спирману.

В ходе исследования установлено, что в группе с транзиторным течением ПВИ чаще всего во взаимосвязях был задействован ФНО-а, который является одним из ключевых цитокинов в реализации противовирусного иммунного ответа, а также в регуляции интенсивности воспаления и эффективности иммунной защиты [Ильина Н.И., Гудима Г.О., 2005; Кривожихина Л.В., Осиков М.В., 2005; Рязанцева Н.В. и др., 2006; Зима А.П. и др., 2007; Кетлинский С.С., Симбирцев A.C., 2008]. Среди связей, установленных для ФНО-а, обращают на себя внимание, с одной стороны, положительные связи ФНО-а - РАИЛ-1, ФНО-а - ИФН-у, с другой стороны . - отрицательные связи ФНО-а - ИФН-а, ФНО-а - ИЛ-4, что свидетельствует о сохранении баланса про- и противовоспалительных цитокинов у женщин данной группы. По данным литературы, ФНО-а может оказывать ингибирующий эффект на рост ВПЧ-инфицированных клеток, который усиливается действием интерферонов [Семенов Д.М. и др., 2008]. Следовательно, установленная положительная взаимосвязь ФНО-а - ИФН-у может свидетельствовать о сопряженности противовирусной активности данных цитокинов в ответ на ПВИ. Таким образом, в данной группе создаются благоприятные условия для реализации полноценного иммунного ответа, направленного на элиминацию ВПЧ высокого риска.

Персистирующее течение ПВИ длительностью 6 месяцев характеризовалось увеличением корреляционных связей по сравнению с транзиторным течением ПВИ. При этом отмечено снижение количества взаимосвязей с участием ФНО-а и увеличение корреляционных связей, установленных для ИЛ-1р. Обращает на себя внимание их положительная -направленность и отсутствие связей ИЛ-1Р с противовоспалительными цитокинами. К тому же, взаимосвязь ИЛ-8 - РАИЛ-1, которая прослеживается во всех трех группах обследованных женщин, в данном случае меняет свое направление и становится отрицательной. Установленные взаимосвязи отражают высокую степень функционального напряжения иммунной системы на фоне активного воспаления, что, по нашему мнению, может быть связано с повышенной вирусной нагрузкой в этой группе.

При персистирующем течении ПВИ длительностью 12 месяцев происходит исчезновение связей между ФНО-а и другими цитокинами и появление отрицательных связей между провоспалительными цитокинами (ИЛ-1р и ИЛ-8) и противовоспалительным ИЛ-10, для которого выявлено максимальное количество связей. Это свидетельствует об изменении баланса системы цитокинов ТЫ и ТЫ типов в пользу последних и угнетении клеточного иммунного ответа. По данным литературы, направленность цитокинового профиля в сторону формирования гуморального иммунного ответа при вирусных инфекциях является прогностически неблагоприятным признаком течения заболевания [Наследникова И.О. и др., 2007; Маркелова Е.В. и др., 2008; Сотниченко С.А. и др., 2009; Konya J., Dillner J., 2001; Stanley M., 2009]. Поэтому, установленные нами взаимосвязи можно рассматривать как патогенетический механизм, опосредующий формирование персистенции ВПЧ высокого риска у женщин этой группы.

Главный принцип функционирования иммунной системы, выработанный в ходе длительной эволюции, состоит в многообразии факторов иммунной защиты, действующих в синергизме или антагонизме друг с другом, обеспечивая два противоположных, но приемлемых исхода взаимоотношений с инфекционным агентом — его элиминацию или «мирное сосуществование», являющееся, по сути, состоянием персистенции. По данным литературы, активация и вовлечение в процесс тех или иных механизмов иммунного ответа, а,, следовательно, и исход инфекционного процесса, определяется-не только степенью патогенности возбудителя, но й зависит от его количества [Железникова Г.Ф., 2006; Наследникова И.О. и др., 2005, 2007; Новиков Д!К., Новиков П.Д., 2009; Devi P.U. et al., 2009; Faust H. et al., 2011]. В нашей работе исследуемые группы отличались по показателям вирусной нагрузки ВПЧ высокого риска. В связи с этим, для установления влияния количества ДНК ВПЧ на механизмы иммунного ответа нами1 был проведен корреляционный анализ между уровнем вирусной нагрузки ВПЧ высокого риска и показателями местного иммунитета в исследуемых группах.

В группе с транзиторным течением ПВИ вирусная нагрузка коррелировала с slg А и ИФН-у. В свою очередь, по результатам корреляционного анализа иммунологических показателей мы установили, что slg А и ИФН-у связаны с уровнем ФНО-а, что свидетельствует о вовлеченности вирусной нагрузки ВПЧ высокого риска в работу иммунных механизмов.

При персистирующем течении ПВИ длительностью 6 месяцев установлены положительные связи между вирусной нагрузкой ВПЧ высокого риска и активностью индуцированного НСТ-теста нейтрофилов, ИЛ-2, ИФН-у и^Ми отрицательные связи - с лизосомальной активностью нейтрофилов, общим количеством лейкоцитов и абсолютным содержанием жизнеспособных нейтрофилов. В свою очередь, ИЛ-2 и М коррелировали с уровнем ИЛ-1(3, а ИФН-у был связан с РАИЛ-1 и ИЛ-10. Интересно обратить внимание на взаимосвязь вирусной нагрузки с ИФН-у, которая была отрицательной, в группе с транзиторным течением ПВИ и стала положительной при персистирующем течении ПВИ. длительностью 6 месяцев. ИФН-у, обладая прямой противовирусной активностью и являясь важнейшим иммунорегулятором, усиливает синтез НЬА-антигенов клетками, что приводит к ускорению процессов распознавания, и переработки антигенов, активирует другие клетки иммунной системы, участвующие в элиминации патогена. Это позволяет сделать вывод об адекватной реакции иммунной системы в ответ на увеличение антигенной нагрузки в группе с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев. Учитывая, что вирусная нагрузка в группе с персистирующим течением ПВИ длительностью 6 месяцев была выше порога прогрессии (более 5 на 105 клеток человека), увеличение количества взаимосвязей отражает напряженность и согласованную работу факторов местного иммунитета в ответ на массивную антигенную атаку, что, в итоге, обуславливает элиминацию ВПЧ высокого риска, но в течение более длительного времени.

В группе с персистирующим течением ПВИ длительностью 12 месяцев установлено снижение количества взаимосвязей до одной с исчезновением связей, характерных для транзиторного и персистирующего течения ПВИ длительностью 6 месяцев, и появлением новой положительной взаимосвязи между вирусной нагрузкой ВПЧ высокого риска и А. Обращает на себя внимание тот факт, что влияние вирусной нагрузки на иммунологические показатели ограничивалось корреляциями с^Аи ИЛ-4 (через А). Это отражает практически полное отсутствие активации факторов местного иммунитета на выявленную в данной группе женщин дозу антигена (4,28±0,33 ^ ВПЧ на 105 клеток) и препятствует удалению вируса, поддерживая хроническое течение ПВИ.

Таким образом, корреляционный анализ взаимосвязей между уровнем вирусной нагрузки ВПЧ высокого- риска и иммунологическими показателями цервикальной слизи показал наличие существенных различий * в состоянии локальной иммунной системы женщин в зависимости от дозы антигена, что доказывает участие этого4 молекулярно-биологического маркера в иммунологических процессах, определяющих течение и исход ПВИ.

Учитывая, что персистенция ВПЧ высокого риска является основным фактором риска злокачественной трансформации цервикального эпителия, большое значение приобретает поиск прогностических маркеров, определяющих развитие и длительность персистирующего течения ПВИ. Установленные молекулярно-биологические и иммунологические особенности исследуемых групп были использованы для выявления предикторов персистенции ВПЧ высокого риска. Построение прогностических моделей проводилось с помощью метода бинарной логистической регрессии.

Обе модели для интересующих нас переходов содержат по два показателя, для каждого из которых приводится коэффициент регрессии. Для прогноза перехода из группы с транзиторным течением ПВИ в группу персистирующего течения ПВИ длительностью 6 месяцев этими показателями стали вирусная нагрузка ВПЧ высокого риска и ИФН-а цервикальной слизи. Полученная модель является статистически значимой л

X [2]=27,058, р<0,0001) и правильно классифицирует 85,71% случаев развития персистирующего течения ПВИ длительностью 6 месяцев.

Для прогноза перехода из группы с транзиторным течением ПВИ в группу персистирующего течения ПВИ длительностью 12 месяцев этими показателями стали ^Аи ИФН-а цервикальной слизи. Полученная модель л является статистически значимой (% [2]=22,707, р=0,0001) и правильно классифицирует 88,89% случаев развития персистирующего течения ПВИ длительностью 12 месяцев. О высоком качестве разработанных моделей свидетельствует площадь под ЯОС-кривой, равная 0,940±0,0463 для первой модели и 0,917 ± 0,0501 - для второй.

Зная коэффициенты регрессии для полученных показателей, рассчитывается Логит{Р) и далее — само значение Р: где Р — вероятность отнесения пациента к группе риска, а,- -коэффициенты регрессии, Х{ - значения вошедших в модель показателей.

Логит(Р) = Константа + а\Х\ + а2Х2 +. + апХ) п

1) р=

2) где е - константна, равная 2,718281828

При подстановке значений указанных показателей, полученных при обследовании каждой пациентки, вычисляется значение вероятности отнесения ее к группе риска. Если Р<0,5 пациента следует причислить к группе 0 - отсутствие риска, если Р>0,5 - к группе 1- наличие риска.

Полученные результаты дают возможность использовать показатели, вошедшие в данные модели, в качестве дополнительных лабораторных маркеров риска развития персистирующего течения ПВИ, а также прогнозировать длительность персистенции ВПЧ высокого риска в репродуктивном тракте женщины.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Зотова, Мария Александровна, 2011 год

1. Александрова, Ю.Н. Папилломавирусная инфекция у здоровых женщин Санкт-Петербурга / Ю.Н. Александрова, A.A. Лыщев, Н.Р. Сафронников и др. // Вопр. онкологии. 2000. - Т. 46, № 2. - С. 175- С. 179.

2. Аполихина, И.А. Папилломавирусная инфекция гениталий: актуальная проблема современной гинекологии и пути ее решения / И.А. Аполихина, Б.Д. Денисова // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. 2007. -Т.6,№6. - С.70-75.

3. Афанасьев, М. С. Вирусно-бактериальная природа дисплазии и рака шейки матки / М. С. Афанасьев. В.А. Алешкин, С. С. Афанасьев и др. // Вестн. РАМН. 2004. - №1. — С.35-40.

4. Ахматова, А.Н. Клинико-иммунологические критерии прогноза персистирующего течения папилломавирусной инфекцией у женщин с хроническим цервицитом: автореф. дис. . канд. мед. наук / А.Н. Ахматова. -Челябинск, 2010. 23с.

5. Баткаев, Э.А. Папилломавирусная инфекция / Э.А. Баткаев, Д.В. Рюмин // Вестн. последипломного образования. 2003.- №3-4. - С.10-18.

6. Башмакова, М.А. Папилломавирусная инфекция / М.А. Башмакова, A.M. Савичева. -М.; Ниж.Новгород: Мед.книга; Изд-во НГМА, 2002. 16 с.

7. Бебнева, Т.Н. Папилломавирусная инфекция и патология шейки матки / Т.Н. Бебнева, В.Н. Прилепская // Гинекология.- 2001. Т.З, № 3. - С.77-81.

8. Биткина, O.A. Заболевания, вызываемые вирусом папилломы человека: Учебное пособие для студентов и врачей / O.A. Биткина,.Р.Д.Овсянникова. -М.: Мед. книга, 2004. 40с.

9. Бойко, И.В: Клинические особенности хронического цервицита, ассоциированного -с ВПЧ-инфекцией / И.В .Бойко, O.G. Абрамовских, А.Н. Ахматова // Акушерство.- Гинекология. 2008.- № 2(42). - С.20-23.

10. Бойко, И.В. Клинико-иммунологические аспекты хронического цервицита, ассоциированного с папилломавирусной инфекцией: автореф. дис. . канд. мед. наук / И.В. Бойко. Челябинск, 2009. - 23 с.

11. Вакцины для профилактики рака шейки матки / под ред. П.Л.Стерна, Г.С. Китченера; пер. с англ. под общ. ред. Г.Т. Сухих, В.Н. Прилепской. М.: МЕДпресс-информ, 2011. - 192 с.

12. Вергейчик, Г.И. Роль генотипа вируса папилломы человека в развитии дисплазий и преинвазивного рака шейки матки у женщин республики Беларусь, / Г.И. Вергейчик // Акушерство и гинекология. 2008. - № 2. -С.44-46.

13. Видяева, И. Г. Частота выявления вируса папилломы человека высокого онкогенного риска у женщин репродуктивного возраста Республики Тыва / И. Г. Видяева, JI.H. Уразова, Л.Ф. Писарева и др. // Бюл. СО РАМН. Онкология. 2008 . - № 3 (131). - С. 13-17.

14. Видяева, И.Г. Детекция вирусов папилломы человека высокого онкогенного риска у женщин репродуктивного возраста с патологией шейки матки / И.Г. Видяева, Л.Н. Уразова, Е.Г. Никитина и др. // Онкология. — 2009. Т.4, №36. -С. 71-73.

15. Комплексная борьба с раком шейки матки: краткое практическое руководство. ВОЗ, Женева: 2010. - 278 с.

16. Гомберг, М.А. Рекомендации пациентам с папилломавирусной инфекцией при отсутствии ее клинических проявлений / М.А. Гомберг, А.М.Соловьев // Мед. совет. 2009. - Вып. 3.- С.12-18.

17. Гурцевич, В.Э. Онкогенные вирусы человека: от латентного вирусоносительства до возникновения опухоли / Bi Э. Гурцевич // Пробл. клинической медицины. 2008. - № 3. - С. 10-21.

18. Дмитриев, Г.А. Диагностика инфекций, передаваемых половым путем / Г.А.Дмитриев, И.И. Глазко. М.: БИНОМ, 2007. - 320с.

19. Долгополова, И.А. Папилломавирусная инфекция клиника, диагностика, лечение / И.А. Долгополова // Педиатрическая фармакология. - 2007. - Т.7, №1. - С.56-61.

20. Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В.Бухарин; УрОРАН. Екатеринбург, 2001. - 288с.

21. Долгушин, И.И. Нейтрофильные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов / И.И.Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю.Савочкина. М.: Изд-во РАМН, 2009. - 208 с.

22. Евстигнеева, Н.П. Уровень- Е7 при папилломавирусной инфекции / Н.П.Евстигнеева / Н.П.Евстигнеева // Рос. журн. кож. и венерол. болезней. -2006. №2. - С.4-6.

23. Золотоверхая;, Е. А. Маркеры папилломавирусной инфекции в скрининге рака шейки / Е. А.Золотоверхая, Е. В. Шипицына, Е. С. Юшманова, A. M. Савичева // Журн. акушерства и, женских болезней. — 2008. T.LYII, Вып. 4. — С.31-39.

24. Игнатов, П.Е. Инфекции и иммунитет / П.Е. Игнатов. Mi: Время, 2002. -352с.

25. Ильина, Н.И. Воспаление и иммунитет в общеклинической практике. Общая концепция / Н.И. Ильина, Г.О. Гудима // Цитокины и воспаление. 2005. — Т.4, № 3. - С.42-44'.

26. Иммунный ответ при вирусных инфекциях. Руководство для врачей / A.JT. Коваленко;, С.Ю. Голубев^ Ф.И. Ершов и др. СПб., 1998. -69с.

27. Иммунология и аллергология (цветной атлас): учебное пособие для студентов5 медицинских вузов / под ред. A.A. Воробьева, A.C. Быкова, A.B. Караулова. М.: Практич. медицина, 2006. - 288 с.

28. Использование циклоферона в терапии папилломавирусной инфекции: Рекомендации для врачей. / В. А. Исаков, Д. К. Ермоленко, Ф; Р. Кутуева и др. — Санкт-Петербург Великий Новгород, 2007. — 64 с.

29. Карамов, Э.В. Мукозный иммунитет и его особенности / Э.В Карамов, A.B. Гарманова, P.M. Хаитов // Иммунология. 2008. - №6. - С.377-384.

30. Каткявичене, Е.В. Клинико-эпидемиологические особенности папилломавирусной инфещии у пациентов дерматовенерологического профиля и система надзора за этой инфекцией: автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.В. Каткявичене. СПб., 2009. - 24 с.

31. Катханова, O.A. Кпинико-морфологические аспекты папилломавирусной инфекции: этиология, патогенез, клиника, диагностика: автореф. дис. . канд. мед. наук / O.A. Катханова. — М., 2003. 22 с.

32. Кетлинский, С.С. Цитокины / С.С. Кетлинский, A.C. Симбирцев. М.: Фолиант, 2008. - 552 с.

33. Кизей, И.Н. Современные представления об этиопатогенезе папилломавирусной инфекции / И.Н. Кизей, Г.А. Наумчик, Н.Б. Середа // Тихоокеанский мед. журн. 2010. - №3. - С.10-15.

34. Кинзикеева, Э.Р. Папилломавирусная инфекция. История открытия, эпидемиология, факторы риска / Э.Р. Кинзикеева, Д. Болис, К.А. Ливерани // Мед. вестн. Башкортостана. 2009. - Т.4, № 5. -С.64-69.

35. Кисина, В.И. Патологические процессы слизистой оболочки шейки матки, ассоциированные с вирусом папилломы человека / В.И. Кисина, A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии. 2005. - №4. - С. 29-32.

36. Киселев, В.И. Этиологическая роль вируса папилломы человека в развитии рака шейки матки: генетические и патогенетические механизмы / В.И. Киселев, О.И. Киселев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т.2, № 4. - С.31-35.

37. Киселев, Ф.Л. Генетические и эпигенетические факторы прогрессии опухолей шейки матки / Ф.Л. Киселев // Вестн. РМН. 2007. -№11.- С.25-32.

38. Кишкун, А. А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике / A.A. Кишкун. — М.: Мед. информ. агентство, 2009. 712 с.

39. Климов, Е.А. Интеграция вирусов папилломы человека в геном клетки хозяина и патогенез рака шейки матки / Е.А. Климов // Успехи современной биологии. 2010. - Т. 130, №4. - С.З 81 -3 89.

40. Козаченко, В.П. Иммунопрофилактика рака шейки матки / В.П. Козаченко, Г.З.Чкадуа, К.И. Жорданиа и др. // Опухоли женской репродуктивной системы. -2009.-№1-2.- С.112-115.

41. Коломиец, JI.A. Генитальная папилломавирусная инфекция и рак шейки матки / JI.A. Коломиец, JI.H. Уразова. Томск: Изд-во HTJI, 2002. - 100 с.

42. Коломиец, JLA. Роль папилломавирусной инфекции (HPV) при различной патологии шейки матки / JI.A. Коломиец, О.Н. Чуруксаева, JI.H. Уразова и др. // Вестн. Новосиб. гос. ун-та. Сер. «Биология. Клиническая медицина». -2004. Т.2, Вып. 2. - С.27-32.

43. Кривожихина, Л.В. Современные представления о регуляции неспецифической защиты в организме / Л.В. Кривожихина, М.В. Осиков // Вестн. ЮУрГУ. 2005. - №4. - С. 88-94.

44. Кубанов, A.A. Изучение физического статуса ДНК вируса папилломы человека / A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии — 2005.- №3. -С.50-54.

45. Кубанов, А. А. Результаты генотипирования вируса папилломы человека при скрининговом исследовании в Московском регионе / A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии. 2005.- №1.- С.51-55.

46. Кубанов, A.A. Содержание интерферона-у, фактора некроза опухоли-а, интерлейкинов-4 и -12 в цервикальном секрете у пациенток с папилломавирусной: инфекцией / A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии. 2005.- №2.- С.36-39.

47. Кубанов, A.A. Факторы риска инфицирования ВПЧ и молекулярные механизмы злокачественной трансформации инфицированных тканей / A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии. 2005. - №3. — С. 21-24.

48. Кубанов, А. А. Характеристика интерферонового и иммунного статуса у больных с папилломавирусной инфекцией / A.A. Кубанов // Вестн. дерматологии и венерологии. — 2005. №2. - С.9-14.

49. Куевда, Д.А. Диагностика папилломавирусной инфекции: количественный подход / Д.А. Куевда, О.Ю. Шипулина, Г.Н. Минкина // Международный конгресс «Практическая гинекология: от новых возможностей к новой стратегии». М., 2006.- С. 92-93.

50. Кузнецова, Ю.Н. Латентная инфекция мочеполовых органов женщин, обусловленная вирусом папилломы человека 16-го и 18-го типа / Ю.Н. Кузнецова, Н.М. Герасимова, Н.П. Евстигнеева и др: // Акушерство и гинекология. 2006. - №4. - С.61-63.

51. Кулаков, В.И. Современные подходы к диагностике папилломавирусной инфекции гениталий у женщин и их значение для скрининга рака шейки матки (обзор литературы) / В.И. Кулаков, И.А. Аполихина, В.Н. Прилепская и др. // Гинекология. 2005. - № 8. -С.41-46.

52. Лебедев, К.А. Иммунная недостаточность / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. -Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2003. 115 с.

53. Лебедева, М.И. Патогенетические аспекты применения иммуномодулирующей терапии в комплексном лечении цервицитов, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией / М.И. Лебедева // Инфекционные болезни. 2008. - Т.6,№4. - С.41-45.

54. Левин, Д.В. Лечение инфекции ВПЧ: настоящее и будущее (обзор зарубежной литературы) / Д.В. Левин // Инфекции, передаваемые половым путем. 2004. - № 4. - С. 25-29.

55. Логунов, О.В. Клинико-эпидемиологическая характеристика папилломавирусной инфекции /О.В. Логунов, Н.И. Брико, В.А. Алешкин и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2008. - № 4*. - С. 50-53.

56. Логунов, О.В. Папилломавирусная инфекция и ее вакцинопрофилактика / О.В. Логунов, Н.И. Брико, В.А. Алешкин // Вакцинация. Информационный бюллетень. 2008. - №1-2 (52) - С. 11-13.

57. Манухин, И.Б. Проблемы и перспективы цервикального скрининга / И.Б.Манухин, Г.Н. Минкина // Акушерство и гинекология. 2006. - С. 51-56. - Прил.

58. Маркелова, Е.В. Патогенетическая роль нарушений в системе цитокинов при инфекционно-воспалительных заболеваниях / Е.В. Маркелова, A.B. Костюшко, В.Е. Красников // Тихоокеанский мед. журн. 2008. - №3. - С.24-29.

59. Маянский, А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия: метод.рекомендации / А.Н. Маянский, M.K. Виксман. Казань, 1979: — 11 с.

60. Маянский, А.Н. Реактивность нейтрофила / А.Н. Маянский, А.Н Галиуллин.- Казань: Изд-во Казан, ун-та, 1984.- 158с.

61. Маянский, А.Н: Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н Маянский, Д.Н Маянский. Новосибирск: Наука, 1989. - 254 с.

62. Маянский, А.Н: Персистенция вирусов: иммунологические и патогенетические аспекты / А.Н. Маянский, А.Н. Бурков, Д.Г. Астафьев и др. // Клинич. медицина. 1998; - №12. - С.19-25.

63. Методы изучения/ местного иммунитета- репродуктивного тракта женщин: метод, рекомендации / сост. В;Ы. Долгушина, И.И. Долгушин, Л.Ф.Телешева и др.; Челяб.гос.мед.акад. Челябинск, 1999. - 22 с.

64. Минкевич, К.В. Подходы к диагностике и консервативному лечению, папилломавирусной инфекции / К.В. Минкевич, В :Е. Яковлев,, А.Н; Кучерявенко // Журн. акушерства и женских болезней. 2004. - T.LIII, Вып. 4. -С.62-68.

65. Михайленко, A.A. Роль корреляционных взаимосвязей в оценке корреляционных возможностей иммунной системы / A.A. Михайленко, Т.А. Федотова // Иммунология. 2000. - №6. -С. 59-6 Г.

66. Молочков, В.А. Папилломавирусная инфекция. Клиника, диагностика, лечение: пособие для врачей / В.А. Молочков, В.И.Киселев, ИВ. Рудых и.др.

67. М.: Издательский дом "Русский врач", 2004. 44 с.

68. Молочков, В.А. Генитальные вирусные инфекции / В.А. Молочков, Т.Б. Семенова, В.И. Киселев, A.B. Молочков. М;:: «Издательство БИНОМ», 2009.-208 с.

69. Доорбар и др. // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. 2009. -Т.8, №3. - С. 69-79.

70. Наследникова, И.О. Дизрегуляция клеточного звена иммунитета при хроническом вирусном гепатите / И.О. Наследникова, Н.В. Рязанцева, Е.В. Белобородова и др. // Бюл. СО РАМН. 2005. - № 4(118). - С.59-63.

71. Наследникова, И.О. Дисбаланс иммунорегуляторных Thl- и ТЬ2-цитокинов при персистентных вирусных инфекциях / И.О. Наследникова, Н.В.Рязанцева; В.В. Новицкий и др. // Мед. иммунология. — 2007. — Т.9,№1. — С.53-60.

72. Нестерова, И.В. Особенности функционирования противовирусного иммунитета / И.В. Нестерова // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 3. --С. 89-93.

73. Нестерова, И.В. Нейтрофильные гранулоциты ключевые клетки иммунной системы / И.В. Нестерова, И.Н. Швыдченко, Е.Ю. Быковская и др. // Аллергология и иммунология. - 2009. - Т.9, № 4. - С. 432-435.

74. Нестерова, И.В. Особенности фенотипа нейтрофильных гранулоцитов при неопластических процессах / И.В. Нестерова, C.B. Ковалева, Г.А. Чудилова и др. // Рос. иммунол. журн. 2010. -Т. 4 (13), № 4. - С. 374-380.

75. Никитина, Е.Г. Выявление вирусов папилломы человека высокого канцерогенного риска при патологиях шейки матки / Е.Г.Никитина, И.Г. Видяева, О.Н. Чуруксаева // Сибирский онкол. журн. 2009. - С. 143-144. -Прил. № 1.

76. Новик, В.И. Эпидемиология рака шейки матки, факторы риска, скрининг / В .И. Новик // Практическая онкология. 2002. - Т.З, № 3. -С.156-165.

77. Новик, В.И. Факторы эффективности цитологического скрининга рака шейки матки / В.И. Новик // Онкологический журнал. 2006. - №1. -С.47-49.

78. Новиков, Д.К. Противовирусный иммунитет / Д.К. Новиков // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2002. - № 1. -С.5-15.

79. Олиферук, Н.С. Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности нейтрофилов, макрофагов и незрелых дендритных клеток/ Н.С. Олиферук, А.Н. Ильинская, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2005. - Т.6, №1. - С. 10-11.

80. Папилломавирусная инфекция: пособие для врачей / под ред. В.М. Говоруна. -М., 2009.-63 с.

81. Петленко, C.B. Новый подход к интегральной оценке иммунной системы человека в условиях воздействия комплекса факторов химически опасных объектов / C.B. Петленко, М.Б. Иванов, С.П. Лось и др. // Токсикология, иммунология. 2010. - Т. 11. - С. 195-216.

82. ЮО.Пинегин, Б.В. Нейтрофилы: структура и функции / Б.В.Пинегин, А.Я. Маянский // Иммунология. 2007. - № 6. - С.347-382.

83. Папилломавирусная инфекция (клинико-патогенетические особенности, лечение, профилактика): учеб.-метод. пособие / Д.М. Семенов, С.Н. Занько, Т.И. Дмитраченко. 2008. — 73 с.

84. Плехова, Н.Г. Роль моноцитов / макрофагов в патогенезе вирусных инфекций / Н.Г. Плехова, Л.М. Сомова // Тихоокеанский мед. журн. 2010. - №3. - С.5-9.

85. Привалова, М.А. Изменения местного иммунитета при воспалительных заболеваниях женских половых органов / М.А.Привалова //Вестн. новых мед. технологий. 2008. - T.XV, № 2. - С. 55-56.

86. Прилепская, В.Н. Значение вируса папилломы человека в развитии диспластических процессов шейки матки / В.Н. Прилепская, Н.И. Кондриков, Т.Н. Бебнева // Гинекология.- 2000.- Т.2, № 3. С. 80-82.

87. Прилепская, В.Н. Эктопии и эрозии шейки матки / В.Н. Прилепская, Е.Б.

88. Рудакова, A.B. Кононов M.: МЕДпресс-информ, 2002.- 176с.

89. Юб.Прилепская, В.Н. Папилломавирусная инфекция: диагностика, лечение и профилактика / В.Н. Прилепская, С.И.Роговская, Н.И.Кондриков, Г.Т.Сухих. -М.: МЕДпресс-информ, 2007. 32 с.

90. Прилепская, В.Н. Профилактика рака шейки матки: методы ранней диагностики и новые скрининговые технологии: клинич. лекция / В.Н. Прилепская // Гинекология. 2007. - Т. 9, № 1. — С. 12-15.

91. Ю8.Радионов, В.Г. Применение Протефлазида в комплексной терапии папилломавирусной инфекции / В.Г. Радионов, C.B. Шведюк, Ю.В. Семиряд и др. // Укр. журн. дерматологии, венерологии и дерматологии. 2002. - № 4. -С.86-90.

92. Ракофф-Наум, С. Роль То11-подобных рецепторов в репарации тканей и канцерогенезе / С. Ракофф- Наум, Р. Меджитов // Биохимия. 2008. -Т.73,Вып.5. - С.690-698.

93. ПО.Реброва, О. Ю. статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. М.: МедиаСфера, 2002. - 312 с.

94. Ш.Роговская, С.И. Папилломавирусная инфекция гениталий: роль интерферонов в патогенезе и лечении / С.И. Роговская // Гинекология. — 2003. -Т. 5, №5.-С. 195-198.

95. Роговская, С.И. Профилактика папилломавирусной инфекции и рака шейки матки / С.И. Роговская, В.Н. Прилепская // Гинекология. 2005. - Т. 7, № 1. -С. 22-26.

96. Роговская, С.И. Папилломавирусная инфекция у женщин с патологией шейки матки: в помощь практикующему врачу / С.И. Роговская.- изд. 2-е, испр. и доп. М.:ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 192 с.

97. Рудакова, Е.Б. Возрастные особенности патологии шейки матки. / Е.Б.Рудакова, О.Ю. Панова, И.Р. Вотрина // Гинекология. 2004. - Т. 6, № 4. - С. 184-188.

98. Рудакова, Е.Б. Использование цитологического метода, качественного и количественного определения вируса папилломы человека в прогнозировании рака шейки матки / Е.Б. Рудакова, О.Ю. Цыганкова // Уральский мед. журн. — 2008. №2 (42). - С. 16-20.

99. Русакевич, П.С. Эктопии шейки матки (современное состояние проблемы) / П.С. Русакевич, Н.П. Фокина // Охрана материнства и детства. 2006. - №1-7. - С. 88-93.

100. Рязанцева, Н.В. Цитокины и противовирусный иммунитет / Н.В. Рязанцева,

101. B.В.Новицкий, В.В.Белоконь и др. // Успехи физиологических наук. 2006. -Т. 37, №4.- С.34-44.

102. Савочкина, А.Ю. Иммунологические показатели в диагностике хронического цервицита и при его сочетании с хроническим эндометритом: дис. . канд. мед. наук / А.Ю Савочкина. Челябинск, 2006.- 324 с.

103. Свердлова, Е.С. Этиопатогенетические подходы к диагностике заболеваний шейки матки у иммунокомпрометированных женщин / Е.С.Свердлова, Т.В. Дианова, С.С. Софьина и др. // Сибирский мед. журн. 2009. - № 7. - С.87-90.

104. Сельков, С.А. Ранняя диагностика и лечение предраковых состояний шейки матки / С.А.Сельков, C.B. Рищук, Д.Ф. Костючек и др. // Акушерство' и гинекология. 2005. - № 3. - С.17-20.

105. Семенов, Д.М. Иммунопатогенетические изменения у женщин, инфицированных вирусом папилломы человека / Д.М. Семенов, П.Д. Новиков,

106. C.Н. Занько, Т.И. Дмитраченко // Вестн. ВГМУ. 2008. - Т. 7, № 3. - С. 1-9.

107. Семенов, Д.М. Папилломавирусная инфекция (клинико-патогенетические особенности, лечение, профилактика): учеб.-метод. пособие / Д.М. Семенов, С.Н. Занько, Т.И. Дмитраченко. СПб.: Диалект, 2008. - 84 с.

108. Сергеева, C.JI. Иммуномодулирующая терапия при папилломавирусной инфекции шейки матки / С.Л.Сергеева, А.И.Конопля, А.Л. Локтионов и др. // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. 2006. - Т. 5, № 6. - С. 8588.

109. Серебренникова, С.Н. Роль цитокинов в воспалительном процессе (сообщение 1) / С.Н. Серебренникова, И.Ж. Семинский // Сибирский мед. журн. 2008. - № 6. - С. 5-8.

110. Серебренникова, С.Н. Роль цитокинов в воспалительном процессе (сообщение 2) / С.Н. Серебренникова, И.Ж. Семинский // Сибирский мед. журн. 2008. - № 8. - С. 5-8.

111. Современные подходы к организации специализированной медицинской помощи больным урогенитальными вирусными инфекциями / Н.В. Кунгуров, Н.П. Евстигнеева, Н.В. Зильберберг и др. Курган: Зауралье, 2009. - 260 с.

112. Соколовский, Е.В. Иммуномодулирующая терапия папилломавирусной инфекции / Е.В. Соколовский, A.B. Игнатовский // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. 2005. - Т.4,№4. - С. 27-30.

113. Сотниченко, С.А. ВИЧ-инфекция, сочетанная с туберкулезом, в приморском крае: выявление, клиническое течение, иммунные механизмы патогенеза / С.А. Сотниченко, Е.В. Маркелова, Л.Ф. Скляр // Тихоокеанский мед. журн. 2009. -№3.- С.133-136.

114. Сухих, Г.Т. Механизмы иммунной защиты при острых и хронических заболеваниях органов репродуктивной системы / Г.Т. Сухих, Л.В. Ванько // Акушерство и гинекология. 2006 - С. 17-24. - Прил.

115. Сухих, Г.Т. Применение препаратов интерферона при лечении плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки низкой степени / Г.Т. Сухих, В.Н. Прилепская, С.И. Роговская и др.// АГ- инфо. — 2008. № 3. - .С.3-11.

116. Телешева, Л.Ф. Механизмы противоинфекционной защиты репродуктивного тракта женщин / Л.Ф. Телешева, В.Ф. Долгушина, И.И. Долгушин // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1998. № 4. - С. 85-90.

117. Телешева, Л.Ф. Иммунологические факторы секретов репродуктивного тракта женщины: дис. . д-ра мед. наук / Л.Ф. Телешева. Челябинск, 2000324 с.

118. Тотолян, A.A. Клетки иммунной системы / A.A. Тотолян, И.С. Фрейдлин. — СПб.: Наука, 2000. 231с.

119. Трушина, О.И. Роль папилломавирусной инфекции в генезе рака шейки матки / О.И.Трушина, Е.Г. Новикова // Рос. онкол. журн. 2005. - №1. -С.45-51.

120. Тузанкина, И.А. Иммунологические параметры у пациенток с различными вариантами течения латентной папилломавирусной инфекцией шейки матки / И.А.Тузанкина, Ю.Н.Кузнецова, Н.М.Герасимова и др. // Иммунологи Урала. -2003.-№1(3).-С. 67-68.

121. Уразова, Л.Н. Рак шейки матки и вирусы папилломы: этиопатогенетические аспекты (обзор литературы) / Л.Н. Уразова, И.Г. Видяева // Сибирский онкол. журн. 2009. - №1(31). —С.64-71.

122. Факторный, дискриминантный и кластерный анализ: пер. с англ. / Дж.О. Ким, Ч.У. Мьюллер,,У.Р: Клекка и др.; под ред. И.С. Енюкова. М.: Финансы и статистика, 1989. - 215 с.

123. Фрейдлин, И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляции сети / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1995. - № 2. -С. 44-47.

124. Хансон, К.П. Современные представления о канцерогенезе рака шейки матки / К.П. Хансон, E.H. Имянитов // Практическая онкология. 2002. - Т. 3,№ 3. -С. 145-155.

125. Хитрик, Н.М. Функциональная активность фагоцитов у больных, синфекцией, вызванной вирусом простого герпеса: автореф. дис. канд. мед.наук. М., 2007. - 28 с.

126. Цур Хаузен, Г. Папилломавирусы: к вакцинации и далее: / Г. цур Хаузен // Биохимия. 2008.-ШЗ;Вып.5. -С.619-626. ,

127. Цыганкова, О.В. Лизосомальные ферменты. Новый взгляд на фундаментальные материи с позиций кардиолога / О .В. Цыганкова, Л.Л. Руяткина, З.Г. Бондарева // Цитокины и воспаление. — 2009. Т. 8, № 4. - С. 11-17.

128. Чикилева, И.О. Двойственная роль толлподобных рецепторов в регуляции противоопухолевого иммунитета / И.О. Чикилева, A.B. Караулов, Н.Ю. Анисимова, М:В. Киселевский // Иммунология. 2010. - №1. - С.52-55.

129. Чурина, Е.Г. Особенности иммуносупресии при вирусных инфекциях / Е.Г.Чурина, О.И.Уразова, В.В. Новицкий и др. //Бюл. сибирской медицины. -2009. №4. - С. 112-118.

130. Шипицына, Е.В. Папилломавирусная инфекция: факторы риска цервикальной неопластической прогрессии / Е.В .Шипицына, К.А.Бабкина, Е.А. Оржесковская и др. // Журн. акушерства и женских болезней. 2004'. -T.LIII, Вып. 3. - С. 34-41.

131. Шипицына, Е.В. Диагностика папилломавирусной инфекции в скрининге рака-шейки матки / Е.В. Шипицына, Е.А. Золотоверхая, Е.С. Юшманова и др. // Журн. акушерства и жен. болезней. 2007. - Т. 56. - С.72-75. - Спец. вып.

132. Шперлинг, Н.В. Опыт применения индинола при рецидивирующей папилломавирусной инфекции гениталий / Н.В. Шперлинг, А.И. Венгеровский, O.A. Персидская и др. // Клинич. дерматология и венерология. 2009. - № 2. -С.32-36.

133. Ярилин, A.A. Основы иммунологии: учебник / A.A. Ярилин. М.: Медицина, 1999. - 608 с. - (Учеб. лит. для студ. мед. вузов).

134. Baseman, J.G. The epidemiology of human papillomavirus infections / J.G. Baseman, L.A. Koutsky // J. of Clinical Virology. 2005. - Vol. 32, № 1. -P.16-24.

135. Bainton, D.F. Morphology of neutrophils, eosinophils and basophils / D.F. Bainton

136. Williams Hematology. 5th ed. - 1995. - P. 753-765.

137. Bekkers, R.L. Effects of HPV detection in population-based screening programmes for cervical cancer; a Dutch moment / R. L.Bekkers, C. J.Meijer, L. F. Massuger et al. II Gynecol. Oncol. 2006. - Vol; 100. - P. 451-454.

138. Bhatj P. Regulation of immune response to HPVinfection and during HPV-detected immunotherapy / P. Bhat // Immunological reviews. 2011. — Vol.239; — P.85-94.

139. Bosch, F.X. Epidemiology and natural history of humanipapillomavirus infections and type-specific implications in cervical neoplasia / F.X. Bosch, A.N. Burchell , S M. Chiffman et al. //Vaccine.- 2008.-Vol.26.- P. 1 -16. Suppl.10.

140. Castellsague, X. Natural history and epidemiology of HPV infection and cervical cancer / X. Castellsague // Gynecol. Oncol. 2008. - Vol. 100, № 3. - P.4-7. -Suppl. 2.

141. Clifford, G.M; Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal women in the International Agency for Research on Cancer HPV prevalence surveys: a pooled analysis / G.M. Clifford // Lancet. 2005. -Vol.366.-P.991-998.

142. Clifford, G.M. Human papillomavirus types among women infected: with human immunodeficiency virus: a meta-analysis / G.M. Clifford, M.A. Goncalves, S. Franceschi // AIDS. 2006. - Vol. 20: -P. 2337-2344.

143. Culp, T.D. Kinetics of in vitro adsorbtion and entry of papillomavirus virions / T.D. Culp,N.D. Christensen//Virology. -2004. — Vol.319. — P.152-161.

144. Cuschieri, K.S. Multiple high risk HPV infections are common in cervical neoplasia and young women in a cervical screening population / K.S. Cuschieri, H.A. Cubie, M.W. Whitley et al. // J. Clin. Pathol. 2004. -Vol. 57. - P. 68-72.

145. Devi, P. U. Correlation between viral load and immunity of HIV carriers An experimental study / P. U. Devi, N. K. Parameswari & S. Murugan // The Internet J. of Health. - 2009. Electronic resource. - Available at www.ispub.com

146. Doeberitz, M.K. pl6ink4a в качестве биомаркера для дифференциировки репликативных и трансформируемых инфекций впч высокого риска: теоретическая концепцияи ее потенциальное влияние на диагностику // HPV-Today.-2009.-P.7-8.

147. Doorbar, J. Molecular biology of human papillomavirus infection and cervical cancer / J. Doorbar // Clin.Sci(Lond). 2006. - Vol.100, № 5. - P.525-541.

148. Einstein, M.H. Acquired immune response to oncogenic human papillomavirus associated with prophylactic cervical cancer vaccines / M.H. Einstein //Cancer Immunol. Immunother. 2008. - Vol.57(4). - P.443-451.

149. Faust, H. Antibodies to merkel cell Polyomavirus correlate to presence of viral DNA in the skin / H. Faust, D.V. Pastrana, C.B. Buck et al. // J.Infect. Dis. 2011.

150. Vol. 203, № 8. P.1096-1100.

151. Ferlay, J. Globocan 2002: Cancer incidence, mortality and prevalence worldwide IARC CancerBase / J. Ferlay, F. Bray, P. Pisani et al. Lion: IARCPress, 2004. - 51. P

152. Franco, E.L. Epidemiology of acquisition and clearance of cervical human papillomavirus infection in women from a high-risk area for cervical cancer / E.L. Franco, L.L. Villa, J.P. Sobrinho et al. // J. Infect. Dis. 1999. - Vol.180. - P.1415-1423.

153. Frazer, I.H. The role of the immune system in anogenital human papillomavirus / I.H. Frazer // Austral. J. Dermatol. 1998. - Vol. 39, № 1. - P. 5-7.

154. Gagnon, S. Viral Polymorphism in Human Papillomavirus types 33 and 35 and persistent and transient infection in the genital tract of women / S. Gagnon, C. Hankins, P. Forest et al.- // J.I.D.- 2004. Vol.190. - P. 1575-1585.

155. Heard, I. Ano-genital lesions due to human-papillomavirus infection in women / I. Heard // Med. Mai. Infect. 2005. - Vol. 35(5). - P.302-305.

156. Herbeine, G. Tumor Necrosis Facor (TNF)-a and TNF-receptors in viral pathogenesis / G.Herbeine, W. O'brein //J.Exp.Biol.Med. 2000.- Vol.223. - P.241-254.

157. Hernandez, D. Association between high-risk human papillomavirus DNA load and precursor lesions of cervical cancer in Mexican women / D. M. Hernandez, L.Ornelas-Bernal, M. Guido-Jimenez et al. // Gynecol. Oncol. 2003. - Vol. 90. - P. 310-317.

158. Hildesheim, A. Persistence of type-specific human papillomavirus infection among cytologically normal women / A. Hildesheim, M.H. Schiffman, P.E. Gravitt et al. // J. Infect. Dis.- 1994. Vol.169. - P.235-240.

159. Ho, G.Y. Persistent, genital human papillomavirus infection as a risk factor for persistent cervical dysplasia / G.Y. Ho, R.D. Burk, S. Klein et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1995. - Vol.87. -P.1365-1371.

160. Jemal, A. Cancer statistics, 2006. CA cancer / A.Jemal, R. Siegel, E. Ward et al. // J. Clin. 2006. - Vol. 56. - P. 106-130.

161. Konya, J. Immunity to oncogenic human papillomaviruses / J. Konya, J. Dillner // Adv. Cancer Res. 2001. - Vol.82. - P.205-238.

162. Koshiol, J. Persistent Human Papillomavirus Infection and'Cervical Neoplasia: A Systematic Review and Meta-Analysis / J. Koshiol, L. Lindsay, M.J. Pimenta et al. // Am. J. of Epidemiology. 2008. - №168 (2). - P.123-137.

163. Krishnamurthy, V. Biochemical changes in neutrophils of cervical cancer patients treated with 60Co / V.Krishnamurthy et al. // Current Science. 2008. - Vol. 94, № 9. -P.l 195-1199.

164. Lehrer, R.I. Neutrophils and host defense / I.R. Lehrer, T. Ganz, M.E. Selsted et al. // Ann. Intern.Med. 1988. - Vol.109. - P. 127-142.

165. Manavi, M. Human papillomavirus DNA integration and messenger RNA transcription in cervical low- and high-risk / M. Manavi, G. Hudelist, A. Fink-Retter et al. //Int.Gynecol. Cancer. 2008. -№18. -P.285-294.

166. Munoz, N. Against which human papillomavirus types shall we vaccinate andscreen? The international perspective / N. Munoz, F. Xavier Bosch, X.Castellsagure et al. // Int.J. Cancer. 2004. -Vol. 111. - P. 278-285.

167. Nielsen, A. Persistence of high-risk human papillomavirus infection in a population-based cohort of Danish women / A. Nielsen, S.K. Kjaer, C.Munk et al. // J.Med. Virol. 2010. - Vol. 82, № 4. - P.616-623.

168. Parkin, D.M. The burden of HPV-related cancers / D.M.Parkin, F. Bray // Vaccine. 2006. - Vol.24. - P.l 1-25. - Suppl. 3.

169. Perovic, M.C. High-risk human papillomavirus (HPV) types in patients with squamous intraepithelial lesions (SIL) / M.C. Perovic, M.J. Berisavac, N. Kuljic-Kapulica, T. Jovanovic // Eur.J.Gynaecol.Oncol. 2003. - Vol.24. - P. 178-180.

170. Ramanakumar, A.V. Human papillomavirus (HPV) types 16, 18, 31, 45 DNA loads and HPV-16 integration in persistent and transient infections in young women / A.V. Ramanakumar, O. Goncalves, H. Richardson et al. // B.M.C Infect Dis. -2010.-Vol.10. P.326.

171. Rapose, A. Human papillomavirus and genital cancer / A. Rapose // Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol. 2009. - Vol.75, Issue 3. - P.236-244.

172. Roberts, J.N. Genital transmission of HPV in mouse model is potentiated'by nonoxynol-9 and inhibited by carrageenan /J.N. Roberts, C.B. Buck, C.D.Thompson et al. // Nat.Med. 2007. - Vol.13. - P.857-861.

173. Rolon, P.A. Human papillomavirus infection and invasive cervical cancer in Paraguay / P.A. Rolon, J.S.Smith, N.Munoz et al. // Int.J.Cancer. 2000. - Vol.85. -P.486-491.

174. Rousseau, M.C. Cervical Coinfection with Human Papillomavirus (HPV) Types asa Predictor of Acquisition and Persistence of HPV Infection / M.-C. Rousseau, J.S. Pereira, J. C. M. Prado et al. // J. of Infectious Diseases.- 2001. -Vol.184. P. 15081517.

175. Schiffman, M.H. Recent progress in defining the epidemiology of human papillomavirus infection1 and cervical neoplasia / M.H. Schiffman// J. Natl. Cancer Inst. 1992. - Vol.84. - P.394-398.

176. Schiffman; M. Human Papillomavirus. Epidemiology and Public Health / M. Schiffinan, P. E. Castle // Arch! Pathol. Lab. Med. 2003. - Vol.127. - P.930-934.

177. Snijders, J. The clinical relevance of human papillomavirus testing: relationship between analytical and clinical sensitivity / J. Snijders, A. van den Brule, C. Meijer // J. Pathol.-2003.-Vol. 201.-P. 1-6.

178. Song, S.H. Risk factors for the progression or persistence of untreated mild dysplasia of the uterine cervix / S.-H. Song, J.-K. Lee, M.-J. Oh et al. // Int. J. Gynecol. Cancer. 2006. - Vol.16. - P. 1608-1613.

179. Stanley, M. Genital Human Papillomavirus Infections—Current and Prospective

180. Therapies / M.Stanley // J. of the National Cancer Institute. 2003. - № 31. - P.l 17124

181. Stanley, M. Immune responses to human papillomavirus / M. Stanley // Vaccine. -2006.-Vol.24.-P. 16-22.

182. Stanley, M. A practitioner's guide to understanding immunity to human papillomaviruses / M. Stanley // US Obstetrics and gynecology. 2009. - Vol. 4, № 1. -P.10-15.

183. Stanley, M.A. HPV: from infection to cancer / M.A. Stanley, M.R. Pett, N.Coleman //Biochem. Soc. Trans. 2007 . - Vol. 35, Pt. 6. - P. 1456-1460.

184. Stanley, M.A. Immune responses to human papilloma viruses- / M.A. Stanley // Indian J. Med. Res. 2009. - Vol. 130, № 3. - P. 266-276.

185. Szoke, K. Moderate variation of the oncogenic potential among high-risk human papillomavirus types in gynecologic patients with cervical abnormalities / K.Szoke, T.Sapy, Z.Krasznai et al. // J. Med. Virol. — 2003. — Vol. 71. — P. 585-592.

186. Tong, S.Y. Human papillomavirus genotype as a prognostic factor in carcinoma of the uterine cervix / S.Y. Tong, Y.S. Lee, J.S. Park, S.E. Namkoong // Int. J. Gynecol. Cancer.- 2007.-Vol. 17.-P. 1307-1313.

187. Sellors, J.W. Incidence, clearance and predictors of human papillomavirus infection in women / J.W. Sellors, T.L. Karwalajtys, J. Kaczorowski et al. //ACMAJ. 2003. - Vol. 168, № 4. - P. 421-425.

188. Trottier, H. Human papillomavirus infection and reinfection in adult women: therole of sexual activity and natural immunity / H. Trottier, S.Ferreira, P. Thomann et al. // Cancer Res. -2010. Vol.70(21). - P. 8569-8577.

189. Wyant, P.S. Phylogeny and polymorphism in the long control region, E6, and LI of human papillomavirus types 53, 56, and 66 in Central Brazil / P.S. Wyant, D.M. Cerqueira, D.S. Moraes et al. //Int. J. Gynecol. Cancer. 2011. - Vol. 21(2). -P.222-229.

190. Wheeler, J.G. Micribial and pharmacological induction of neutrophil dysfunction /

191. J.G. Wheeler, J.S. Abramson // The neutrophil. Oxford, 1993. - P. 139-181.

192. Wu, R. Requirement of STAT3 activation for differentiation of mucosal stratified squamous epithelium / R. Wu, S. Sun, B.M. Steinberg // Molecular Medicine 2003. -Vol. 9, № 3/4. - P.77-84.

193. Weyn, C. Evidence of human papillomavirus in the placenta / C. Weyn, D. Thomas. J.M.Jani et al. // J. Infect. Dis. 2011. -Vol. 203, № 3. - P.341-343.

194. World Health Organization (WHO). Comprehensive cervical cancer control. A guide to essential practice. Geneva: WHO, 2006.

195. Woodman, C.B. Natural history of cervical human papillomavirus infection in young women: a longitudinal cohort study / C.B. Woodman, S.I. Collins, H. Winter et al. //Lancet. -2001. Vol. 357(9271). - P. 1831-1836.

196. Woodman, C.B. The natural history of cervical HPV infection: unresolved* issues

197. C.B. Woodman, S.I. Collins, L.S. Young // Nat. Rev. Cancer. 2007. - Vol.7. -P. 1122.

198. Durst, M. Интеграция ДНК ВПЧ в процессе цервикального обязательно ведет к увеличению онкогенов / М. Diirst, N. Hafner // HPV-today. 2009. - №18ю. - С 8-9.

199. Xi, L.F. Analisis of human papillomavirus type 16 variants indicates establishment of persistent infection / L.F. Xi, W. Demers, L.A. Koutsky et al. // J. Infect. Dis. 1995. - Vol.172. -P. 747-755.

200. Xi, L.F. Viral load in the natural history of human papillomavirus type 16 infection: A Nested Case-control Study. / L.F. Xi, J.P. Hughes, P.E. Castle et al. // J. Infect. Dis. 2011. - Vol. 203(10). - P. 1425-1433.

201. Yamada, T. Human papillomavirus type 16 sequence variation in cervical cancers: a worldwide perspective / T. Yamada, M.M. Manos, J. Peto et al. // J. Virol. 1997. -Vol. 71, № 3. - P. 2463-2472.