Иммунобиологические свойства вируса ящура типа Азия-1, штамм ь 1987/амурский/2005, и усовершенствование диагностических тест - систем тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Фомина, Светлана Николаевна

• Фомина, Светлана Николаевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Фомина, Светлана Николаевна

1. Введение

2. Обзор литературы

2.1. Общие сведения о ящуре

2.2. Эпизоотическая ситуация по ящуру

2.3. Вирус ящура

2.4. Биологические особенности вируса ящура типа Азия-1.

2.5. Антигенная вариабельность и родство вируса ящура.

2.6. Основные методы лабораторной диагностики ящура.

2.7. Профилактика.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунобиологические свойства вируса ящура типа Азия-1, штамм ь 1987/амурский/2005, и усовершенствование диагностических тест - систем»

Актуальность темы. Эпизоотии ящура, вызванные вирусом типа Азия-1, наблюдались в странах Азии, Европы, Среднего и Ближнего Востока. Вирус этого типа и в настоящее время представляет угрозу для этих регионов, так как вспышки ящура периодически возникают в различных государствах, в том числе и граничащих с нашей страной. Следовательно, угроза возникновения болезни в России существует постоянно, в особенности в регионах на границе с Китаем, Монголией, странами Средней Азии и Закавказья (27, 28 ,63, 88, 106, 119, 128).

Принимая во внимание опасность возникновения ящура в нашей стране и возможность больших экономических потерь, особое значение приобретает проблема профилактики этой болезни. Согласно Международному ветеринарно-санитарному кодексу, ящур относится к особо опасным инфекционным болезням (43). Поэтому защита государства от ящура и разработка мер быстрой диагностики, ликвидации и профилактики является первостепенной задачей.

Возбудитель ящура по своим биологическим свойствам отличается высокой контагиозностью, широком кругом восприимчивых животных множеством типов и подтипов, длительной сохраняемостью в организме переболевших естественно восприимчивых животных и во внешней среде (8, 92, 130).

Вирус ящура обладает высокой антигенной вариабельностью. Такой уровень генетической вариабельности вируса в пределах одного генотипа приводит к возникновению новых изолятов, которые отличаются по степени вирулентности и иммуногенности от ранее выделенных штаммов вируса ящура (7, 45, 65,76, 96, 98, 112).

Опасность, которую представляет ящур, диктует необходимость постоянного усовершенствования методов и средств его диагностики, глубокого изучения свойств вновь выделенных в полевых условиях штаммов возбудителя, определения их эпизоотической опасности и степени соответствия производственным и ранее выделенным штаммам (111, 117). В настоящее время одним из основных методов профилактики ящура в нашей стране является систематическая иммунизация сельскохозяйственных животных инактивированными моно- и поливалентными вакцинами в зонах, угрожаемых по данной болезни (пограничные районы, регионы, где в последние годы регистрировали вспышки ящура, территории вокруг биопредприятий), а, в случае вспышки ящура - экстренная вакцинация всех восприимчивых к ящуру животных в неблагополучном очаге и в угрожаемой зоне (13,17, 18, 19).

Особую опасность представляют эпизоотии ящура, вызванные вирусом, отличающимся в антигеном отношении от производственных штаммов. Этот факт может свести на нет, или значительно снизить эффективность профилактических прививок моно - и поливалентными противоящурными препаратами (54,79, 83, 89).

Непременным условием противоэпизоотической эффективности противоящурных вакцин является соответствие антигенных свойств производственного (вакцинного) штамма вируса ящура эпизоотическому.

Следует отметить, что при отборе производственных штаммов вируса ящура учитывается широта их антигенного спектра (способность защищать привитых животных от заражения гетерологичными штаммами вируса того же типа), но не все производственные штаммы вируса ящура создают достаточно напряженный иммунитет против других вариантов того же типа (42, 50, 54, 72, 93,311,).

В особенности это относится к вирусу типа Азия-1. Вакцина, изготовленная из вируса производственного штамма Азия-1 №48, оказалась недостаточно эффективной при ее использовании против эпизоотических штаммов вируса ящура этого типа (14,52,89),

Это обуславливает необходимость постоянного изучения свойств выделенных штаммов вирусов.

Систематическое изучение эпизоотических штаммов необходимо не только для классификации вирусов, что имеет важное теоретическое значение, но и в плане сравнительного исследования антигенных свойств эпизоотических и производственных штаммов, из которых готовятся вакцины.

Систематическая угроза заноса и распространение ящура на территории Российской Федерации заставляют внимательно следить за эпизоотической обстановкой по ящуру в мире, а также своевременно проводить диагностику и изучение иммунобиологических свойств штаммов для выбора лучших, при изготовлении специфических препаратов (15, 41,42, 72, 102, 133).

Традиционными методами идентификации вируса ящура долгие годы были реакции связывания комплемента (7, 12, 34, 48, 77) и вируснейтрализации (77). В качестве биологического метода использовали выделение вируса на лабораторных тест-системах (34, 77). Включение этих методов в схему лабораторной диагностики ящура было обусловлено рядом важных преимуществ. Так РСК, при наличии соответствующих по специфичности диагностикумов, возможно в течение 1,5-2,5 часов идентификацию не только типовой, но и вариантной принадлежности возбудителей, вызывающих болезни, протекающие с везикулярным синдромом (ящур, везикулярный стоматит, везикулярная экзантема и везикулярная болезнь свиней) (8, 92). Однако на специфичность этой реакции могут оказывать влияние многие факторы. В этом отношении более специфичной можно считать реакцию нейтрализации, с помощью которой можно определять антитела, ответственные за иммунитет. Но для ее выполнения необходимы особые условия ветеринарно-санитарного порядка, наличие биологической тест-системы, а для получения информации требуется от 3 до 10 дней . Кроме того, имеются данные о том, что не всегда результаты серологических методов соответствуют биологическим. На этом основании предпринимались попытки разработать другие более объективные иммунохимические реакции. Однако большинство из этих методов оказались менее пригодны для лабораторной диагностики ящура из-за недостаточной чувствительности (реакция диффузной преципитации), или не способности дифференцирования типов возбудителя (метод флюоресцирующих антител, радиоиммунный анализ) (38, 92) и его вариантов (реакция пассивной гемагглютинации) (7).

В этом отношении совершенно уникальными возможностями обладают некоторые новые методы, такие как, иммуноферментный анализ (22, 34, 35, 98, 116, 117, 140). Для него характерна высокая чувствительность, простота постановки и быстрота получения результата. По специфичности его результаты коррелируют с общепринятыми вирусологическими и серологическими методами, а по чувствительности имеют явные преимущества. Они позволяют получить больше информации об антигенной структуре и происхождении вирусов по сравнению с традиционными серологическими реакциями. Недостаточная типоспецифичность ИФА на начальном этапе использования успешно преодолевается с помощью двойного сандвич-варианта (152). Благодаря этому открылись перспективы совершенствования схемы лабораторной диагностики ящура за счет применения ИФА не только для типирования, но и субтипирования эпизоотических штаммов возбудителя (102, 110).

В связи с появлением на территории России вируса ящура типа Азия-1, возникла необходимость изучения свойств данного вируса.

Цель и задачи исследований. Главной целью наших исследований было изучение иммунобиологических свойств вируса ящура Азчя-1 №1987/Амурский/2005 и усовершенствование диагностического набора для выявления и идентификации вируса ящура методом иммуноферментного анализа.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить иммунобиологические свойства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005, выделенного на территории Российской Федерации в 2005 г.;

- подготовить предложения по использованию штамма вируса ящура №1987/Амурский/2005 для изготовления диагностических и вакцинных препаратов;

- получить диагностические препараты на актуальные эпизоотические штаммы вируса ящура для иммуноферментного анализа;

- усовершенствовать набор для идентификации в ИФА производственных и эпизоотических штаммов вируса ящура типов А, О, Азия-1.

Научная новизна.

Научная новизна состоит в том, что в результате проведенных исследований:

Изучены иммунобиологические свойства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005, выделенного на территории Российской Федерации f 2005 году, который отличается от вакцинных и ранее изученных эпизоотических штаммов вируса ящура типа Азия-1 (R% от 13 до 42);

Изучены основные биологические свойства антигена вируса ящура типа Азия-1 №1987/Амурский/2005, используемого для изготовления экспериментальной вакцины;

Показаны антигенные взаимоотношения между производственными и эпизоотическими штаммами вируса ящура типа Азия-1;

Получены штаммоспецифические компоненты для иммуноферментного анализа и реакции связывания комплемента на штамм вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005;

Усовершенствован диагностический набор для определения антигена вируса ящура типов А, О, Азия-1;

Определены оптимальные варианты постановки ИФА при выявлении и идентификации штаммов вируса ящура;

Практическая ценность работы. Изученный штамм вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 депонирован в коллекции микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» и рекомендован для изготовления диагностических препаратов и противоящурной вакцины против этого типа вируса ящура.

Получены диагностические препараты на основании изученного штамма Азия-1 № 1987/Амурский/2005.

Усовершенствован и внедрен в производство набор для выявления антигена вируса ящура иммуноферментным анализом, ТУ 9388-138-004955272005 от 30.06.2006 г.

Основные положения, выносимые на защиту.

- Адаптационные свойства эпизоотического штамма вируса ящура типа Азия-1 №1987/Амурский/2005.

- Результаты комплексного изучения антигенного родства штамма вируса ящура Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Получение штаммоспецифических диагностических препаратов на основе штамма Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Результаты практического применения эпизоотического штамма вируса ящура типа Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Диагностический набор для определения антигена вируса ящура методом иммуноферментного анализа и его практическое применение.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 1 работа в издании, рекомендованной ВАК РФ для публикации материалов кандидатской диссертации.

Апробация работы. Результаты исследований по теме диссертации апробированы на научных конференциях: «Золотое кольцо России» - 4 региональной конференции посвященной проблеме профилактики и лечения домашних животных и птицы. - Владимир, 2001; международной научной конференции, посвященной 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ» «Актуальные проблемы инфекционной патологии животных» г. Владимир, 2003г.; 2-й международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы зоотехннической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных», г. Ставрополь, 2003г.; 6-ом международном конгрессе ветеринарной вирусологии «Эволюция и персистенция вируса» прошедшем в Сант-Мало, Франция в 2003 году; международной научной конференции молодых ученых «Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных» г. Владимир, 2004.

Набор для выявления антигена вируса ящура в пробах материала иммуноферментным анализом» был представлен на выставке продукции ФГУ ВНИИЗЖ, при проведении Всероссийского научно-практического семинара-совещания ветеринарных специалистов «Эпизоотологический мониторинг, профилактика и меры борьбы с болезнями КРС и свиней» 26-30 сентября 2005г., г. Владимир.

Основные положения диссертации были изложены на заседаниях ученого совета ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных».

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах, включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, список использованной литературы, практические предложения и приложения. Список литературы включает 156 источников, из них 63 источника иностранных авторов. Работа иллюстрирована 20 таблицами, 3 рисунками. В приложении к диссертации имеется 4 документа, подтверждающих результаты исследований и их внедрение.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Фомина, Светлана Николаевна

6.ВЫВОДЫ

1. Изучены иммунобиологические свойства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005, выделенного на территории Российской Федерации в 2005 году, который отличается от вакцинных и ранее изученных эпизоотических штаммов вируса ящура типа Азия-1 (R% от 13 до 42), что необходимо учитывать при разработке мер профилактики ящура в России.

2. Установлено, что вирус ящура Азия-1 штамм №1987/Амурский/2005 адаптируется к культуре клеток ВНК-21, IB-RS-2 и ПСГК-30 в течение трех пассажей. Наибольшее накопление вируса происходит в культуре клеток IB-RS-2, в титре 7,66 lg ТЦД50/см3 (в количестве 1 мкг/см3146S +75S компонентов).

3. В опытах на морских свинках установлено, что в прививной дозе инактивированной вакцины из штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 содержится 42,5 ПД50 к гомологичному возбудителю и 8,69 ПД50 к вирусу Азия-1 №48 и Азия-1 Иран 58/99, а к Азия-1 /Шамир 3/89 - 37,04 ПД50. В прививной дозе препарата из вируса Азия-1 Иран 58/99 содержалось 37,04 ПД5о к гомологичному и 20,41 ПД50 к Азия-1 № 1987/Амурский/2005.

4. В опытах на КРС установлено, что в прививной дозе коммерческой инактивированной сорбированной вакцины против ящура типов А22, Оь Азия-1 №48 содержалось 10,56 ПД5о против гомологичного возбудителя и 3,5 ПД50 к вирусу Азия-1 №1987/Амурский/2005.

5. Штамм Азия-1 №1987/Амурский/2005 депонирован в коллекции микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» и рекомендован для изготовления диагностических и вакцинных препаратов, как отличающийся по антигенным, иммуногенным и протективным свойствам от производственных и ранее выделенных эпизоотических штаммов.

6. Получены диагностические препараты (антиген, гипериммунные сыворотки, улавливающие и детекторные антитела) для РСК и ИФА на вирус ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005.

7. Оптимизированы параметры постановки ИФА с целью использования его при выявлении и идентификации вируса ящура в патологическом материале, полученном от больных животных.

8. Усовершенствован диагностический набор, основанный на иммуноферментном анализе, для выявления и идентификации антигена вируса ящура в афтозном материале и суспензиях патологического материала.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для практического использования предлагаются следующие материалы, полученные при выполнении диссертационной работы:

1. Штамм вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 пригодный для получения диагностикумов и вакцин, депонированный в ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов».

2. Специфические диагностические поликлональные антитела против вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 для использования в РСК и ИФА

3. Набор для выявления антигена вируса ящура иммуноферментным методом (ТУ 0388-138-00495527-2005 от 30.06.2006г.)

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Фомина, Светлана Николаевна, 2007 год

1. Антитела. Методы. / под ред. Д. Кэтти. М.: Мир, 1991. - 382 с.

2. Апалькин, В. А. Эпизоотическая ситуация в России в 2005 году / В. А. Апалькин // Вет. жизнь. 2006. - № 2. - С. 3.

3. Ашмарин, И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И. П. Ашмарин, Т. J1. Воробьев. JL: Медгиз, 1962.-180 с.

4. Батлер, Дж.Е. Амплификационный фермент-зависимый иммуносорбентный анализ / Дж.Е Батлер, Дж.Х Петерман, Т.Е. Кертдж // Иммуноферментный анализ. -М., 1988. С. 210-242.

5. Биологические свойства вируса ящура типа 0/1685/ «Московский», выделенного у свиней / А.А.Гусев, В.М Захаров, Т.А. Фомина и др. // Сучасш ветеринары та технолопчш аспекта свинарства: матер, конф. Киев, 2002. - С. 910.

6. Бойко, А. А. Создание иммуноферментных препаратов / А. А. Бойко // Науч основы технологии пром. производства вет. биол. препаратов: тез. докл. третьей Всесоюз. конф. М., 1987. - С. 201-202.

7. Бойко, А.А. Ящур. Биолого-экологический аспект проблемы / А.А. Бойко, Ф.С. Шуляк//М., 1971.-352 с.

8. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А .Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев и др. // М.: ВНИТИБП, 1998. С. 532-548.

9. Влияние метода подготовки вирусных антигенов на результаты серологических реакций / Ж. А. Шажко, В. А. Мищенко, И. В. Овчеренко и др. // Актуальн. вопр. вет. вирусол.: тез. докл. Казань, 1980, С. 34-35.

10. Влияние некоторых факторов на показатели антигенного родства между штаммами вируса ящура при постановке РСК / Ж. А. Шажко, Н. С. Масалова, В. А. Мищенко и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол. Владимир, 1988. - С.18.20.

11. ГОСТ25384-82. Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики ящура. М.: Изд-во стандартов, 1982. - 8с.

12. Дзантиев, Б.Б. Классификация и характеристика иммуноферментного анализа / Б.Б. Дзантиев, А.П. Осипов // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология М., 1987. -Т.З - С. 56-116.

13. Дудников, А. И. Альтернативная стратегия ликвидации ящура / А. И. Дудников, В. М. Захаров, С. А. Дудников // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. Владимир, 2005. - Т. 3. - С. 34-48.

14. Дудников, А. И. Иммунологическая, профилактическая и противоэпизоотическая эффективность противоящурных вакцин / А. И. Дудников, С. А. Дудников, О. Н. Поляков // Ветеринарная наука производству. -Минск,2005.-Т. 38.-С. 189-195.

15. Дудников, А. И. Перспективы противоящурной защиты высокопродуктивных животных / А. И. Дудников, В. А. Мищенко, В. М. Захаров // Современная вет. защита коров высокопродуктивных пород. Воронеж, 2005. -С. 20-22.

16. Дудников, А. И. Стратегия вакцинации при ликвидации ящура / А. И Дудников // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. Владимир 2006.-Т. 4.-С. 81-90.

17. Дудников, А. И. Эпизоотический процесс и искоренение ящура / А. И Дудников, В. М. Захаров, С. А. Дудников // Вет. медицина 2004: м!жвщ. тем наук. сб. - Харюв, 2004. - Вип. 84. - С. 302-306.

18. Дудникова, Е. К. Разработка и применение иммуноферментного анализе для выявления противоящурных антител в сыворотке крови животных: автсреф дис. канд. вет. наук / Е. К. Дудникова // Владимир, 1997. - 25 с.

19. Дудников, С.А. Количественная эпизоотология: основы прикладной эпидемиологии и биостатистики / С.А. Дудников // Владимир: Демиург, 2005. -460 с.

20. Захаров, В. М. Разработка программы по борьбе с ящуром в странах СНГ / В. М. Захаров, А. М. Рахманов // Актуальн. пробл. инфекц. патологии животных: матер. Междунар. конф., посвященной 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». Владимир, 2003.-С. 14-18.

21. Захаров, В. М. Ящур /В. М. Захаров // Вет. газета. 2002. - №16. - С. 2.

22. Захаров, В. М. Ящур типа Азия-1 в Китае / В. М. Захаров, Д. Г. Мусиев // Ветеринария. 2005. - №9. - С. 8-9.

23. Захаров, В. М. Ящур: новые концепции борьбы и профилактики / В. М. Захаров // Актуальн. пробл. инфекц. патологии животных: матер. Междунар. конф., посвященной 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». Владимир, 2003. - С. 11-14.

24. Изучение диагностической ценности иммуноферментного метода флюорогенными субстратами щелочной фосфотазы и D-галоктозидазы / В.А. Мищенко, М.А Базаров, А.Б Смирнов, Т.В. Конюшкина // Актуальн пробл вет вирусол. Владимир, 1988. - С.61.

25. Иммунобиологические свойства противоящурной поливалентной вакцины нового поколения / В. В. Михалишин, А. И. Дудников, Н. А. Улупов, Н. С. Мамков // Вирусные и микробные болезни животных. Владимир, 1995. - С. 217222.

26. Количественная оценка иммуногенной активности противоящурной вакцины Азия-1 на крупном рогатом скоте и морских свинках / Б.А Глушко, И.В Овчаренко, В.В. Головнин и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол. -Владимир, 1987.-4.1.-С. 54-55.

27. Методические указания по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура: утв. Департаментом ветеринарии МСХ РФ 10. 11. 2002г. -Владимир, 2002. 31 с.

28. Методические указания по индикации генома вируса ящура с помощью полимеразной цепной реакции на основе амплификации консервативной области 3D гена: утв. Департаментом Ветеринарии МСХ РФ 21.02.1997. Владимир, 1997.

29. Методические указания по оценке на морских свинках иммуногенной активности моновалентной вакцины из вируса ящура типа Азия-1: Утв. ГУВ Госагропрома СССР 22.07.87. Владимир, 1987

30. Мищенко, В. А. Зависимость штаммовой специфичности ящурных сывороток от особенностей доноров / В. А. Мищенко, Ж. А Шажко // Актурльн вопр. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф. ВНИИЯИ. Владимир, 1987. - Ч. 2. - С. 133-135.

31. Мищенко, В.А. Изучение диагностической ценности иммунофлюорисцентного метода при ящуре / В.А. Мищенко, А.Б. Смирнов // Актуальн. пробл. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф., посвящ. 30-летию ВНИЯИ. Владимир, 1988. - Ч. 1. - С. 60-61.

32. Мищенко, В.А. Иммуноферментный метод определения вируса ящура с использованием конъюгата лактамозы с вирусспецифическими антителами / А.В. Мищенко, М.А. Базаров, Т.Б. Конюшкина // Антибиотики и химиотерапия, 1989. - Т. 34, № 10. - С. 739-741.

33. Мусиев, Д.Г. Иммунобиологичекие особенности эпизоотических штаммов вируса и методы ретроспективной диагностики ящура / Д.Г. Мусиев // Автореф. дис. д-ра вет. наук. Ставрополь, 2005. - 48 с.

34. Мусиев, Д.Г. Определение антигеного родства между штаммами вируса ящура серологическими и иммунологическими методами / Д. Г. Мусиев, Ж. А. Шажко, Н. И. Кожеватова // Актуальн. пробл. вет. вирусол. Владимир, 1986. -С. 136-139.

35. МЭБ. Санитарный кодекс наземных животных. 14 изд. - Париж, 2005. - С. 114-126.

36. Нейтрализующая активность сыворотки крови КРС, переболевшего ящуром типа Азия-1 / В. М. Гневашев, В. Ю. Кулаков, О. В. Прунтова и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол. Владимир, 1988. -Ч. 1. - С. 41-42.

37. Некоторые характеристики эпизоотических штаммов вируса ящура, изолированных в СССР / Ж.А. Шажко, Т.А. Фомина, Н.С. Масалова и др. // Матер. Междунар. научн. конф.: Ящур (к новой стратегии борьбы с ящуром). -Владимир, 1992. С.82-96.

38. Неспецифические вируснейтрализующие ингибиторы сыворотки крови крупного рогатого скота и поствакцинальный иммунитет при ящуре / Ж.А. Шажко, В.П. Онуфриев, Л.Ф. Шажко, М.А. Оковытая // Сельскохозяйственная биология. 1978. Т. 13, № 2. - С. 277-280.

39. О некоторых факторах, влияющих на иммуногенность ящурного антигена /А.В. Чепуркин, М.М. Лядский, Н.Н. Дрягалин и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф. ВНИЯИ. Владимир, 1987. - 4.2. -С. 12-14.

40. О стандартизации лабораторных методов дифференциальной диагностики ящура / Ж.А. Шажко, В.А. Мищенко, Н.С. Маслова и др. // Ветеринария. 1985, №1. - С. 31-32.

41. Об адаптационных и других свойствах вируса ящура типа Азия-1 / Л.Н. Соколов, В.А. Муравьева, Е.В. Андреев, Ф.Ф. Луцевич // Актуальн. вопр. вет. вирусол.: матер. 2-ой Всесоюз. вет. вирусол. конф. 24-27 января 1966г. М., 1966. - 4.1. - С. 153-154.

42. Определение антигенного родства между штаммами вируса ящура серологическими и иммунологическими методами / Д.Г. Мусиев, Ж.А. Шажко, Н.И. Кожеватова и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф. ВНИЯИ. Владимир, 1986. - С. 136-138.

43. Определение биологической активности штаммов вируса ящура / О.В. Бабенко, Ю.В. Кулаков, Ю.А. Черняев и др. / К новой стратегии борьбы с ящуром: матер. Междунар. науч. конф. Владимир, 1991. - С. 144.

44. Оптимизация схемы иммунизации морских свинок для получения ящурных диагностических сывороток / И.Ю. Литенкова, Ю.Ф. Швецов, Н.А. Матвеева, Т.В. Бондаренко // Актуальн. пробл. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф. ВНИЯИ. Владимир, 1980. - С. 97-98.

45. Основные требования к качеству противоящурных вакцин / А. И. Дудников В. В. Михалишин, С. А. Дудников, В. М. Захаров // Вет. медицина: м!жвщ. темат. наук. зб. Харюв, 2003. - Вип. 82. - С. 216-219.

46. Оценка чувствительности иммуноферментного метода при использовании различных субстратов пероксидазы / В.А. Мищенко, М.А. Базаров, Т.Б. Конюшкина и др. // С.-х. биология. 1900, - № 6. - С. 190-192.

47. Первичная структура гена белка вируса ящура серотипа Азия-1 / С.В. Сосновцев, A.M. Онищенко, Н.П. Петров и др. // Молек. генетика, микобиология и вирусология. 1989, - № 12. - С. 44-46.

48. Получение и характеристика моноклональных антител к вирусу ящура типа Азия-1 / С.П. Аминева, H.J1. Давыдова, Л.У. Маматкулова и др. // Биохимия. -1997.-Т. 62, №5. -С 550-555.

49. Пономарев, А.П Структура, биологические и физико-химические свойства / А.П. Пономарев, В.Л. Узюмов, К.Н. Груздев // Владимир: Фолиат, 2006.- 250 с.

50. Пономарев, А.П. Электронная микроскопия вирусов животных и некоторых условно-патогенных микроорганизмов / А.П. Пономарев, В.А. Мищенко // Владимир.: Фолиат, 2005. - С. 8-30.

51. Прунтова,О.В. Определение коэффициэнта изменчивости штаммов вируса ящура при пасировании / О.В. Прунтова, В.М Гневашев, Ю.А Черняев // Актуальн. пробл вет. вирусол. Владимир, 1988.- С. 18-20.

52. Рахманов, А. М. Патолоанатомические изменения у крупного рогатогс скота при экспериментальном заражении вирусом ящура Азия-1 / А. М. РахманоЕ // К новой стратегии борьбы с ящуром. Владимир, 1991. - С. 24 - 25.

53. Рахманов, А. М. Ящур типа Азия-1 в Иране и Турции / А. М. Рахманов// Ветеринария. 2000. - №4 - С. 58-59.

54. Ререр, X. Ящур / X. Ререр // М., 1971.432 с.

55. Родионов, В. И. Количественные методы изучения антигенных свойств эпизоотических штаммов вируса ящура.: автореферат дис. канд. вет. наук / В.И. Родионов //- Владимир, 1970. 19 с.

56. Салажов, Е. JI. Методика определения вариантной принадлежности v степени антигенного родства штаммов вируса ящура реакцией нейтраизации с использованием культур клеток / Е. Л. Салажов, В. С. Авилов // Бюл. ВИЭВ. -1976.-Вып. 24.-С. 31-35.

57. Салажов, E.JI. Расчет степени антигенного родства штаммов вируса ящура по данным РСК / Е.Л. Салажов // Тр. ВИЭВ, 1975. Т. 43. - С. 195-202.

58. Собко, А.И. Антигенное родство, различия и доминантность вирусов животных / А.И. Собко, В.А. Пискока//Ветеринария, 1985. № 3. - С. 28-31.

59. Сравнительная оценка различных вариантов твердофазного иммуноферментного метода / В.А. Мищенко, Ж.А. Шажко, М.А. Базаров и др. // Актуальн. пробл. вет. вирусол.: тез. докл. науч. конф. ВНИЯИ. -Владимир, 1987. 4.2. - С. 50-51.

60. Сюсюкин, А.А. Научно-методические подходы к паспортизации производственных штаммов вируса ящура, предназначенных для культивирования в суспезии клеток ВНК-21 // Актуальн. пробл веет, вирусол. -Владимир, 1987.-Ч. 1.-С. 12-13.

61. Теория и практика иммуноферментного анализа / A.M. Егоров, А.П Осипов, Б.Б Дзантиев, Е.М Гаврилова // М.: Высшая школа, 1991. - С. 257262.

62. Тюрина, Т. В. Разработка метода индикации вирусов в продуктах убоя животных: автореф. дис. канд. биол. наук / Т. В. Тюрина. Владимир, 1994.-20 с.

63. Филогенетический анализ российских изолятов вируса ящура Азия-1 / А.В Щербаков, A.M. Тимина, А.С. Яковлева //Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Владимир, 2006. - Т. 4. - С. 20-25.

64. Фомина, Т. А. Лабораторная диагностика ящура и других болезней , протекающих с везикулярным синдромом / Т. А. Фомина, Е. В. Гусева // -Владимир, 1995. 43 с.

65. Хубиев, X. JI. Эпизоотология и специфическая профилактика ящура в зоне Северного Кавказа: автореф. дис. канд. биол. наук / X. Л. Хубиев //- Владимир 1979.-25 с.

66. Хубиев, X. J1. Ящур у диких животных / X. JI. Хубиев // Актуальн. пробл вет. вирусол. Владимир, 1977. - С. 178-180.

67. Хухоров, В. М. Выделение вируса ящура из крови, молока, слюны и мочи коровы / В. М. Хухоров, И. И. Архангельский, Н. А. Пронина // Ящур: матер, науч. конф. (ВНИЯИ). Владимир, 1970. - С. 80-81.

68. Черняев, Ю. А. Принципы оценки производственных штаммов вируса ящура и определения стабильности их биологических свойств / Ю. А. Черняев // Актуальн. пробл. вет. вирусол. Владимир, 1988. - Ч. 2 - С. 16-17.

69. Черняев, Ю. А. Разработка методов оценки штаммов вируса ящура по комплексу лабораторных показателей с целью подготовки производственных штаммов: научн. отчет / Ю. А. Черняев, В. М. Гневашев //. Владимир, 1990. -108 с.

70. Шажко, Ж. А. Доминантность, как показатель гетерогенности популяций эпизоотического вируса ящура / Ж. А. Шажко // Пробл. инфекц. патологии с.-х. ж-ных: тез. докл. конф. Владимир, 1997. - С. 21-24.

71. Шажко, Ж. А. Получение специфических компонентов для ИФА при ящуре / Ж. А. Шажко, В. А. Мищенко, Н. Н. Шуть // Бюлл. ВИЭВ. 1985. - Вып. 58. - С. 41-44.

72. Экспресс-метод идентификации полевых изолятов вируса ящура / А. В, Щербаков, В. В. Дрыгин, Н. А. Перевозчикова и др. // Вирусн. болезни, с.-х. ж-ных: тез. докл. научн.-практ. конф. Владимир, - 1995. - С. 28.

73. Экспресс-метод идентификации полевых изолятов вируса ящура / А.В. Щербаков, В.В. Дрыгин, Н.А. Перевозчикова, А.А. Гусев // Вирусные болезни е.-х. ж-ных: Тезисы докл. Всероссийской науч.-практич. конф. 17-21 апреля 1995г. . -Владимир, 1995.-С. 28.

74. Эпизоотическая ситуация по ящуру типа Азия-1 в России в 2005 году и анализ мер борьбы / К. Н. Груздев, Т. 3. Байбиков, В. Н. Герасимов и др. // Тр,

75. Федерального центра охраны здоровья животных. Владимир, 2006. - Т. 4. - С. 319.

76. Эпизоотологический мониторинг по ящуру в Таджикистане / Д. М. Муминов, Н. Е. Камалова, А.И. Егорова и др. // Актуальн. пробл. инфекц. патологии жив.-х: матер. Междунар. науч. конф., посвящен. 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». Владимир, 2003. - С. 23-27.

77. Юсупов, Р.Х. Рациональная схема гипериммунизации при получении диагностических сывороток / P. X. Юсупов // Ветеринария 1984. - №2 - С. 34-37.

78. Ящур / А. Н. Бурдов, А. И. Дудников, П. В. Малярец, и др. // М.: Агропромиздат, 1990. 320 с.

79. Annual OIE/FAO FMD Reference Laboratory network report / J.F. Valarcher, N. Ferris, N.J. Knowles et al. Pirbrighht, 2005. - 32 p.

80. Brooksby, J.B. Portraits of viruses foot-and-mouth disease virus / J.B. Brooksby // Intern. Virol. 1982. - Vol.18, N1/2. - P. 1-23.

81. Brown, F. A brief history of foot-and-mouth disease and its casual agent / F. Brown // FMD: Control Strategies: Proc. Int Symp. 2-5 June 2002, Lyons, France. -Paris etc., 2003.-P. 13-21.

82. Brown, F. Antigenic structure of food and mouth disease virus / F. Brown // Immunichemistry of Viruses, 1985. P. 265-279.

83. Crowther, I.R. Application of the enzyme-linked immunosorbent assay to the detection and identification of foot-and-mouth disease viruses / I.R. Crowther, E.M.E. Abu-Eezein // J. Hyg. Camb., 1979. Vol. 83, N 3. - P. 513-519.

84. Development of foot-and-mouth disease virus strain characterization. A review / R. P. Kitching, N. J. Knowles, A. R. Samuel, A. J. Donaldson // Trop. Anim. Hilth Prod. - 1989. - Vol. 21. -N. 3. - P. 153-166.

85. Developments in diagnostic techniques for differentiating infection from vaccination in FMD / A. Clavijo, P. Wright, P. Kitching // Vet. J. 2004. - Vol. 167.-P. 9-22.

86. Doel, T.R. Foot-and-mouth disease: vaccine strains and field isolates / T.R. Doel // FMD: Control Strategies: Proc. Int. Symp. 2-5 June 2002, Lyons, France. -Paris, 2003.-P. 287-296.

87. Donaldson, A. J. Research and technological developments required for more rapid control and eradication of foot-and-mouth disease / A. J. Donaldson, U. Kihm // Rev. Sci. Techn. Off. Jut Epiz. 1996. V. 15, N 3. - P. 863 - 873.

88. Emergence in Asia of foot-and-mouth disease viruses with altered host rang: characterization of alteration in ЗА protein / N. J. Knowles, P.R. Davies, T. Henry et al. //. Virol. 2001. Vol. 75 N 3. - P. 1551-1556.

89. European Pharmacopoeia. Second ed. Monograph No. 63. - Strasbourg, France: Editions of the Council of Europe, 1993.

90. European Pharmacopoeia. Third ed. Section 5: 5.1.1. and 5.1.2. Strasbourg, France: - Editions of the Council of Europe. 1997.

91. Ferris, N.P. The World Reference Laboratory for Food and mouth disease: a review of thirty-three years of activity (1958-1991) / N.P. Ferris, A.I. Donaldson // Rev. sci. tech. Off. Int. epiz., 1992. V. 11. - N 3. - P. 657-684.

92. Genetic diversity in the VP1 gene of foot-and-mouth disease virus serotype Azia-1 / C.B. Gurumuthy, A. Sanyal, R. Venkataramanan et al. // Arch. Virol. 2002. - Vol. 147.-P. 85-102.

93. Graves, J. H. The differentiation of subtypes (variants) foot-and-mouth diseasevirus by serolical methods. 1. Complement fixation test // Amer J. Vet. Res. 1960. -Vol. 21, N 83.-P. 687-693.

94. Grubman, M.J. Development of novel strategies to control foot-and-mouth disease: marker vaccines and antivirals /M.J. Grubman // Biologicals. 2005. - Vol. 33, N4. - P. 227-234.

95. Grubman, M.J. Foot-and-mouth disease /M.J. Grubman, B. Baxt // 20 p.

96. Guideline for Regional and National Laboratories on assessment and of foot-and-mouth disease virus populations // OIE. Ad. Hoc. Group on Antigen and Vaccine Banks for foot-and-mouth disease, 2005. 20 p.

97. Haas, B. Development in diagnostic techniques for FMD // Europ. Comm. Control FMD. Sess. Res. Group Stand Techn. Comm.: report. United Kingdom, 14-18 Sept. 1998.-Rome, 1998.-P. 49-55.

98. Haas, B. Die Maul-und-Klauneseuche. Klinik, aktuelle Seuchenlage, Bekampfungsverfahren, Probennahme und Diagnostik // Tierarztl. Umschau. 2001. -Bd. 56, N 12.-S. 619-628.

99. Hamblin, C. A rapid enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of foot-and-mouth disease virus in epithelial tissues / C. Hamblin, R.M. Armstrong, R.S. Hedger//- Vet. Microbiol. 1984 - Vol. 9, N 5 - P. 435-443.

100. Have, P Essential features of detection and typing of FMD virus by ELISA // Rep. Sess. Res. Group Stand. Tech. Comm. Europ. Commiss. Control FMD. Pragut, Czechoslovakia, 20-23 Sept. 1983 Rome, 1988. - P. 79-81.

101. Have, P. New diagnostic developments: possible future trends // Europ. Comm. Control FMD. Session Res. Group Stand Techn. Comm.: report. United Kingdom, 1418 Sept. 1998.-Rome, 1998.-P. 144-147.

102. Hay don, D.T. The generation and persistence of genetic variation in foot-and-mouth disease virus / D.T. Haydon, A.D. Bastos, N.J. Knowles // Preventive Vet. Medicine, 2001. Vol. 51. - P. 111 -124.

103. Henderson, W.M. An historical review of control of foot-and-mouth disease / W.M. Henderson //-Brit. Vet. J. 1978. - Vol. 134, N 1 - P. 3-9.

104. Kalpravidh, W. Economic impact of foot-and-mouth disease in the Asian Region / W. Kalpravidh //21 st Conf. OIE Reg. Comm. for Asia, the Far East and Oceania. -Taipei, 1999.-P. 5-11.

105. King, A. M. Q. Epitopes of foot-and-mouth disease virus and their changeability / A. M. Q. King // FMD: Control Strategies: Proc. Int. Symp. 2-5 June 2002, Lyons, France. Paris, 2003. - P. 297-304.

106. Kitching, R. P. A recent history of foot-and-mouth disease / R. P.Kitching // J. Сотр. Pathol. 1998. - Vol. 118. - C. 89 - 108.

107. Kitching, R. P. Clinical variation in foot-and-mouth disease: cattle / R. P. Kitching // Rev. Sci. Techn. Off. Int Epiz. 2002. - Vol. 21, N 3. - P. 499-504.

108. Kitching, R. P. Clinical variation in foot-and-mouth disease: pigs / R. P. Kitching, S. Alexandersen // Rev. Sci. Techn. Off. Int Epiz. 2002. - Vol. 21,N3.-P. 513-518.

109. Kitching, R. P. Clinical variation in foot-and-mouth disease: sheep and goats / R. P. Kitching, G. J. Hughes // Rev. Sci. Techn. Off. Int Epiz. 2002. - Vol. 21, N 3. - P. 505-512.

110. Kitching, R. P. Epidemiology and control of FMD / R. P. Kitching // 40-th Ann. World Ref. Labor. FMD. Serrey, 1998. P.7.

111. Kitching, R. P. Foot-and-mouth disease // R. P. Kitching, D. K. Mackay // State Vet. J. 1995. - Vol. 5, N 3. - P. 4 - 8.

112. Kitching, R. P. Foot-and-mouth disease in the world today / R. P. Kitching //11-th Congr. Federat. Asian Vet. Assoc.: Proc. Taipei, 2000 - P. 265-271.

113. Kitching, R. P. Problems of diagnosis of foot-and-mouth disease in domestic animals / R. P. Kitching // FMD: Control Strategies: Proc. Int. Symp. 2-5 June 2002,1.ons, Franct. Paris, 2003. - P. 353-359.

114. Kitching, R. P. Rapid correlation between field isolates and vaccine strains of foot-and-mouth disease virus / R.P. Kitching, R. Rendle, N.P. Ferris // Vaccine, 1988. Vol. 6.- P. 403-408.

115. Konzentrirung und Reinigung von Maul-und Klauenseuche Virus durch Polyathy-lenglikol / O. R. Kaaden, B. Dietzschold, H.D. Matheka, T. Tokui // Arch. Jes. Virusforsch. -1971, Bd35,N 1. S. 104-113.

116. Leforban, Y. Recent history and epidemiology of foot-and-mouth disease in Europe /Y. Leforban // FMD: Control Strategies: Proc. Int. Symp. 2-5 June 2002, Lyons, France.-Paris, 2003.-P. 153-171.

117. Lombard, M Titration of foot-and-mouth disease antibodes in cattle sera. Comparative stady of two methods: seroneutralisation on cells and ELISA / M. Lombard, R. Piroird // Res. Group Europ. Comm. Control FMD. Tubingen, Sept., 1981.-Rome, 1981.-P. 71.

118. Mandel, B. Interaction of viruses with neutralizing antibodies / B. Mandel // Compreh. Virol. NY; London, 1979, Vol. 15 P. 37-121.

119. Microneutralization test for subtyping of FMDV strains / M. M. Rweymamu, J. C. Booth, Morwen Head, T. W. F. Pay//J.Hyg. Camb. 1978. - Vol. 81.-P. 107-123.

120. Mohapatra, J. K. Sequence and phylogenetic analysis of the L and VP1 genes of foot-and-mouth disease virus serotype Asia 1 / J. K. Mohapatra, A. Sanual. D. Hemadri et al. // Virus Res.- 2002. Vol. 87. P. 107-118.

121. Montassier, H. Y. Application of solid enzyme-linked immunosorbent assay for the direct diagnosis of foot-and-mouth disease virus / H. J. Montassier, L. J. Richtzenhaik, S. I. Samara // Vet. Microbiol. 1987. Vol. 18, N 1 - P. 12-24.

122. OIE Ad Hoc Group on Antigen and Vaccine Banks for Foot and Mouth Disease

123. OIE. Manual of Standards for Diagnostik Test and Vaccines V: 1-2. 5th -Paris, 2004.

124. Pattnak, B. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for subtype analysis of FMDV isolates / B. Pattnak, R, Venkataramanan // Indian J. Animal Sci.,1989.-Vol. 59.-N 11.-P. 1363-1368.

125. Peculiarities in connectioniets with foot-and-mouth disease type Asia 1 and pathogenic action / H.C. Girard, P. Choonpieharik, P. Smitinondana et al. // Bull. Off. int. Epizoot, 1959. Vol. 51. -N 7-8. - P. 390-393.

126. Pereira, H.G. Sub-typing of FMD virus / H.G. Pereira // Develop. Biol. Standart, 1977.-Vol. 35.-P. 167-174.

127. Recent approaches to the characterization of strains of foot-and-mouth disease virus /С. Hamblin, Y.R. Growther, D. Baber et al. // Europ. Comm. Control FMD -Rio de Janeiro, Brazil, 15-18 Oct,1985. Rome, 1986. P. 91-104.

128. Rweyemamu, M.M. Antigenic variation in Foot-and-mouth disease: Studies based on the virus neutralization reaction / M. M. Rweyemamu // J. of Biological Standardization, 1984. Vol. 12. - P. 323-337.

129. Rweyemamu, M.M. Foot-and-mouth disease virus strain differentiation: analysis of the serological date / M.M. Rweyemamu, P.J. Hingley // J. of Biological Standardization, 1984. Vol. 12. - P. 225-229.

130. Selection of foot-and-mouth disease vaccine strains a review / D.J. Paton, J.-F. Valarcher, I. Bergmann et al. // Rev. sci. tech. Off. Int. epis., 2005. - V. 24. - N 3. - P. 981-993.

131. Selers, R. F. Diagnosis and detailed examination virus strains / R. F. Selers // Europ.Comm. Control FMD. Brescia, 26-28 June 1984, Rome. 1984. - P. 58-50.

132. Standardization of potency control method of FMDV on guinea pigs / F. E. Marcovechio, O. Zabal, M. V. Borca, S. Rivenson // Rev. Med. Vet. 1982. - Vol.63, N 6.-P. 414-425.

133. The differentiation of foot-and-mouth disease virus strains using an indirect sandwich ELISA saturation model / E.J. Ouldridge, P. Barnett, P.J. Hengley et al. // J. Biol. Stand, 1984. Vol. 12. - P. 365-377.

134. The Pathogenesis and Diagnosis of foot-and-mouth disease / S. Alexandersen, Z. Zhang, A. Donaldson, A. J. M. Garland // J. Сотр. Pathol. 2003. - Vol. 129. - P. 1-36.

135. The use of ELISA test in assaying FMDV present it tissues of infected animals / A. A. M. Moussa, L. Elshehaway, M.A. Shalaby, A. Azar // Egypt. J. Vet. Sci. 1985.1. Vol. 22, N1.-P. 107-114.

136. Traub, E. Untersuchungen uber immunologische varianten der Tupen A und В des VKS-Virus / E. Traub, H. Mohlmann // Berl. Munch. Tierarztl. Wschr., 1964. N 15. -S. 1-15.

137. Wagner, G.G. FMDV antibodies. Comparison of a tissue culture microneutralization test with the assay in suckling mice / G.G. Wagner, Mcvicar J.W. // Appl. Microbiol., 1970. Vol. 20 (6). - P. 995-997.