Иммунобиологическая характеристика вакцинных и вирулентных штаммов вирусов оспы овец и оспы коз тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Кукушкина, Мария Сергеевна
- Специальность ВАК РФ03.00.06
- Количество страниц 157
Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кукушкина, Мария Сергеевна
1. ВВЕДЕНИЕ.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Историческая справка.
2.2. Характеристика вирусов оспы овец и коз.
2.2.1. Морфология.
2.2.2. Устойчивость возбудителя к факторам внешней среды.
2.2.3. Организация генома, структура основных белков и репликация вируса
2.3. Эпизоотические особенности оспы овец и оспы коз.
2.4. Культивирование вирусов оспы овец и оспы коз.
2.5. Средства и методы диагностики оспы овец и коз.
2.5.1. Электронная микроскопия.
2.5.2. Серологические методы диагностики.
2.5.3. Иммуноферментный метод диагностики.
2.5.4. Биологическая проба.
2.5.5. Молекулярные методы диагностики оспы овец и оспы коз.
2.5.6. Методы дифференциальной диагностики оспы овец и оспы коз.
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Вирусология», 03.00.06 шифр ВАК
Изучение иммунобиологических свойств вакцин против оспы овец и оспы коз2007 год, кандидат ветеринарных наук Гарькин, Алексей Викторович
Иммунобиологические свойства возбудителей парвовирусного энтерита и чумы плотоядных, используемых для изготовления биопрепаратов2008 год, кандидат ветеринарных наук Галкина, Татьяна Сергеевна
Оптимизация условий культивирования вируса чумы мелких жвачных для получения диагностических и вакцинных препаратов2008 год, кандидат ветеринарных наук Капускин, Егор Вадимович
Антигенные свойства возбудителей чумы крупного рогатого скота и плотоядных, диагностика и специфическая профилактика инфекций1999 год, доктор ветеринарных наук Никитин, Евгений Борисович
Биологические свойства эпизоотических изолятов вируса ящура типов А, О и Азия-12008 год, кандидат ветеринарных наук Жильцова, Милена Владимировна
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунобиологическая характеристика вакцинных и вирулентных штаммов вирусов оспы овец и оспы коз»
Актуальность темы. Оспу овец и оспу коз относят к особо опасным болезням животных, способным вызвать эпизоотии и наносить большой экономический ущерб. По классификации МЭБ до 2004 года они относились к списку «А», а в соответствии с новой классификацией они включены в список болезней МЭБ, подлежащих обязательному уведомлению, в категорию «Болезни овец и коз» [110,134139]. В последние годы оспу овец и оспу коз стали рассматривать как две самостоятельные болезни. По современной классификации, возбудители этих болезней ДНК - содержащие вирусы sheeppoxvirus и goatpoxvirus входят в род Capripoxvirus семейства Poxviridae. Считают, что возбудители оспы овец и оспы коз состоят в близком генетическом, антигенном и серологическом родстве, но по патогенности обладают строгой видовой специфичностью и являются отдельными таксономическими видами [12].
Оспа овец и оспа коз эндемичны на Ближнем Востоке, в Центральной и Южной Азии, Китае, а также в Центральной и Северной Африке. По данным Международного эпизоотического бюро, в 1996-2007 гг. неблагополучными по этим заболеваниям были 55 стран, в том числе семь стран СНГ; в России оспа мелких жвачных регистрировалась в 1994-2000 гг. и 2002-2003гг. [12,21,70,77,78,110,134-139].
Несмотря на то, что каприпоксвирусы преимущественно поражают свой вид животных-хозяев, жестко детерминированной хозяйской специфичностью они не обладают и способны инфицировать гетерологичные виды животных. Описана способность штаммов BOO и ВОК в экспериментальных условиях вызывать заболевание как у овец, так и у коз [12,19,96,120,124].
Способность каприпоксвирусов относительно легко преодолевать межвидовые барьеры и сходство клинических признаков вызываемых ими заболеваний у мелких жвачных животных делают недостаточной диагностику оспы овец, оспы коз и нодулярного дерматита КРС (бугорчатки) на основании только клинических данных и вызывают необходимость разработки лабораторных методов видовой дифференциации вирусов.
Как показали недавние исследования, идентичность полных нуклеотидных последовательностей генома каприпоксвирусов составляет 97% [11,44,45,82]. Чрезвычайно близкое родство не позволяет различать каприпоксвирусы вирусологическими и серологическими методами. Видовую дифференциацию каприпоксвирусов до недавнего времени удавалось проводить только рестрикционным картированием, в ПЦР или секвенированием геномной ДНК [44,45,82,84]. В то же время эпизо-отологические наблюдения показали, что оспа возникала неоднократно среди коз, привитых против оспы овец, в то время как заболевания среди вакцинированных овец не регистрировали [46].
В связи с этим изучение иммунобиологических характеристик вакцинных и вирулентных штаммов вирусов оспы овец и оспы коз, имеет как научное, так и практическое значение.
Цели и задачи исследования. Основная цель данных исследований заключалась в сравнительном изучении иммунобиологических характеристик вакцинных, вирулентных штаммов и полевых изолятов вирусов оспы овец и оспы коз.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- дать сравнительную характеристику иммунобиологических свойств штаммов вирусов оспы овец и оспы коз, хранящихся в музее ФГУ «ВНИИЗЖ»;
- выделить и изучить иммунобиологические свойства полевых изолятов вирусов оспы овец и оспы коз при возникновении оспы мелких жвачных на территории Российской Федерации и стран СНГ;
- изучить особенности репродукции вирусов оспы овец и оспы коз в первичных и перевиваемых культурах клеток и провести поиск наиболее технологичных и производительных систем культивирования этих вирусов;
- разработать методы получения препаратов для диагностики оспы овец и оспы коз, а также выявления антител в крови животных;
- изучить на восприимчивых животных и в серологических реакциях степень антигенного родства между каприпоксвирусами - вирусами оспы овец, оспы коз и нодулярного дерматита КРС, а также с вирусами оспы крупного рогатого скота, свиней, лошадей и верблюдов;
- определить уровень поствакцинальных и постинфекционных антител в крови овец против вирусов оспы овец и оспы коз;
- изучить устойчивость вакцинированных и не вакцинированных овец и коз к перекрестному заражению.
Научная новизна исследований. В результате проведенных исследований:
- изучены иммунобиологические свойства выделенных в 2003 году штаммов «Приморский 2003» и «ВНИИЗЖ 2003» вируса оспы коз;
- дана сравнительная характеристика иммунобиологических свойств штаммов вирусов оспы овец и коз;
- изучены особенности репродукции вирусов оспы овец и оспы коз в первичных и перевиваемых культурах клеток и отработана технология получения их в культурах клеток гонад козы (КГ-91), трофоварианте культуры клеток гонад козы (ГК), производственной линии клеток ВНК-21 стационарным, роллерным и суспензионным методами;
- изучены на восприимчивых животных и в серологических реакциях степень антигенного родства между вирусами оспы овец, оспы коз и нодулярного дерматита КРС, а также с вирусами оспы КРС, свиней, лошадей и верблюдов;
- экспериментально оценена устойчивость вакцинированных и непривитых овец и коз к перекрестному заражению вирусами оспы овец и оспы коз;
- определено влияние длительного хранения на биологическую активность вирусов оспы овец и оспы коз.
Практическая значимость исследований. Практическое значение работы состоит в том, что производственный вакцинный штамм «ВНИИЗЖ 2003» вируса оспы коз после изучения иммунобиологических свойств был депонирован во Всероссийской государственной коллекции культур микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (справка о депонировании от 14.06.2006г.); - контрольный штамм «Приморский 2003» вируса оспы коз после изучения был депонирован во Всероссийской государственной коллекции культур микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (справка о депонировании от 14.06.2006г.).
Разработаны, одобрены ученым советом и утверждены директором ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» методические рекомендации:
- «Методические указания по получению гипериммунной сыворотки крови для диагностики оспы коз», 2006 г.;
- «Методические указания по диагностике оспы коз методом постановки реакции длительного связывания комплемента», 2006 г.;
- «Методические рекомендации по стационарному и роллерному культивированию атгенуированного штамма «ВНИИЗЖ» вируса оспы коз», 2006 г.;
- «Методические рекомендации по оценке иммуногенной активности вирус-вакцины против оспы коз из штамма «ВНИИЗЖ 2003» и ассоциированной вакцины против оспы овец из штамма «ВНИИЗЖ» и оспы коз из штамма «ВНИИЗЖ 2003», 2006 г.
Результаты научных исследований вошли в следующие нормативные документы:
- СТО «Вирусвакцина ассоциированная против оспы овец и оспы коз культураль-ная сухая» утвержденный заместителем руководителя Россельхознадзора 07.08.2007 г.;
- СТО «Набор для диагностики оспы овец иммуноферментным методом», утвержденный заместителем руководителя Россельхознадзора 21.04.2008 г.;
- СТО «Набор препаратов для диагностики оспы овец в реакциях длительного связывания комплемента и диффузионной преципитации», утвержденный заместителем руководителя Россельхознадзора 21.04.2008 г.
Основные положения, выносимые на защиту:
- иммунобиологические свойства штаммов вирусов оспы овец и коз;
- иммунобиологические свойства выделенных в 2003 году вирулентного «Приморский 2003» и вакцинного «ВНИИЗЖ 2003» штаммов вируса оспы коз;
- особенности репродукции вирусов оспы овец и оспы коз в первичных и перевиваемых культурах клеток стационарным, роллерным и суспензионным методами;
- устойчивость вакцинированных животных к перекрестному заражению вирусами оспы овец и коз;
- антигенное родство между вирусами оспы овец, оспы коз, нодулярного дерматита КРС и оспы других видов животных.
Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, в т.ч. 1 работа в издании по перечню ВАК.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и опубликованы на научных конференциях «Роль ветеринарной науки в развитии животноводства»
Алматы,2000), «Актуальные проблемы патологии свиней, крупного и мелкого рогатого скота» (ФГУ ВНИИЗЖ,2002), «ВУЗ и АПК: задачи, проблемы и пути решения» (Махачкала,2002), «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях» (Душанбе,2003), а также доложены на заседаниях ученого совета ФГУ «ВНИИЗЖ» в 2000-2007гг.
Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Отдельные этапы выполнены совместно с к.б.н. Т.И. Корпусовой, к.в.н. Д.К. Басовой, Г.А. Блотовой, к.в.н. Н.В. Мороз, за что автор выражает им сердечную благодарность.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 157 страницах компьютерного текста и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и приложения. Список литературы включает 164 источника, в том числе 71 на русском языке. Работа иллюстрирована 8 рисунками и 41 таблицей.
Похожие диссертационные работы по специальности «Вирусология», 03.00.06 шифр ВАК
Эффективность методов выявления возбудителя ящура и антител в продуктах убоя и патологическом материале2006 год, кандидат ветеринарных наук Никифоров, Виктор Викторович
Разработка средств специфической профилактики репродуктивно-респираторного синдрома свиней2008 год, доктор ветеринарных наук Кукушкин, Сергей Анатольевич
Антигенные и иммуногенные свойства штаммов вируса болезни Марека при создании эффективных экспериментальных и производственных вакцин2005 год, доктор биологических наук Ярыгина, Елена Игоревна
Эпизоотологический мониторинг и разработка средств диагностики бешенства, болезни Ауески и бруцеллеза2013 год, доктор биологических наук Чернов, Альберт Николаевич
Совершенствование методов диагностики оспы овец и оспы коз2007 год, кандидат биологических наук Орлова, Елена Сергеевна
Заключение диссертации по теме «Вирусология», Кукушкина, Мария Сергеевна
5. ВЫВОДЫ
1. Оспа овец и оспа коз широко распространены в мире, в т.ч. и в странах СНГ. По официальным данным МЭБ, с 1996 по 2006гг неблагополучными по этим заболеваниям являлись 60 стран: 27 азиатских, 27 африканских и 6 европейских. В последние годы вспышки оспы коз, как самостоятельного заболевания зарегистрированы в странах Азии и в России.
2. Наиболее чувствительными клетками для репродукции вирусов оспы овец и оспы коз являются первичная культура клеток почки овцы, перевиваемая культура клеток гонад козы КГ-91, ее трофовариант и производственная линия клеток ВНКо
21, в которых титр вируса достигал значений 5,5 lg, 7,0 lg, 7,5 lg, 4,5 lg ТЦД50/см , соответственно. Наибольшее накопление вирусов отмечается при роллерном методе культивирования.
3. Экспериментально установлено, что у овец и коз после внутрикожной инокуляции вирулентного гомологичного вируса оспы (штамм «Афганский» вируса оспы овец и штаммы «Pellor» и «Приморский 2003» вируса оспы коз) регистрируется генерализация оспенного процесса и гибель большинства зараженных животных. После инфицирования гетерологичным вирусом отмечается только непродолжительная гипертермия и местная реакция в виде гиперемии.
4. В целях диагностики оспы овец и оспы коз использованы серологические методы: РДСК, РДП, ИФА, для постановки которых разработаны методы получения концентрированного антигена и гипериммунных сывороток крови к вирусу оспы коз на кроликах и козах, активность которых составила в РДСК 1:120-1:160, в РДП 1:16-1:32 и в ИФА- 1:1000-1:4000.
5. Установлены существенные антигенные отличия между вирусами оспы овец и оспы коз с вирусами оспы КРС, свиней, лошадей и верблюдов по данным, полученным в РДСК. Уровень родства составлял от 13% с вирусом оспы КРС до 27% с вирусом оспы свиней.
6. Вирусы оспы овец и оспы коз в лиофилизированном состоянии при хранении при температуре 4±2°С не снижают биологической активности в течение 24 месяцев.
7. Крупный рогатый скот, иммунизированный вирусвакциной против оспы овец, частично защищен от контрольного заражения вирусом нодулярного дерматита
КРС, что подтверждает наличие антигенного родства между этими каприпоксвиру-сами.
8. Показано, что ассоциированная вакцина, приготовленная из вирусов оспы овец и оспы коз, защищает иммунизированных животных от прямого заражения вирулентными вирусами. Установлена зависимость эффективности от соотношения в ассоциированной вакцине антигенов вирусов оспы овец и оспы коз.
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Для практического использования предлагаются:
- производственный вакцинный штамм «ВНИИЗЖ 2003» вируса оспы коз, который депонирован во Всероссийской государственной коллекции культур микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (справка о депонировании от 14.06.2006г.);
- контрольный штамм «Приморский 2003» вируса оспы коз, который депонирован во Всероссийской государственной коллекции культур микроорганизмов ФГУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (справка о депонировании от 14.06.2006г.).
2. Разработаны, одобрены ученым советом и утверждены директором ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» следующие методические документы:
Методические указания по получению гипериммунной сыворотки крови для диагностики оспы коз», 2006 г.;
Методические указания по диагностике оспы коз методом постановки реакции длительного связывания комплемента», 2006 г.;
Методические рекомендации по стационарному и роллерному культивированию атгенуированного штамма «ВНИИЗЖ» вируса оспы коз», 2006 г.;
Методические рекомендации по оценке иммуногенной активности вирус-вакцины против оспы коз из штамма «ВНИИЗЖ 2003» и ассоциированной вакцины против оспы овец из штамма «ВНИИЗЖ» и оспы коз из штамма «ВНИИЗЖ 2003», 2006 г.
3. Результаты исследований вошли в следующие нормативные документы:
- СТО «Вирусвакцина ассоциированная против оспы овец и оспы коз культураль-ная сухая» утвержденный заместителем руководителя Россельхознадзора 07.08.2007 г.;
- СТО «Набор для диагностики оспы овец иммуноферментным методом», утвержденный заместителем руководителя Россельхознадзора 21.04.2008 г.;
- СТО «Набор препаратов для диагностики оспы овец в реакциях длительного связывания комплемента и диффузионной преципитации», утвержденный заместителем Россельхознадзора 21.04.2008 г.
Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кукушкина, Мария Сергеевна, 2008 год
1. Абдураимов, Е.О. Изучение свойств вируса оспы коз в клеточных культурах / Е.О. Абдураимов, М. Мамбеталиев, Л.Б. Кутумбетов // Актуал. пробл. С.-х. биотехнологии: матер. конф.-1998.-С.9-11.
2. Антитела: Методы. Т.2: пер. с англ./Под ред. Д.Кэтти.-М.:Мир, 1991.-382с.
3. Ашмарин, И.П. Быстрые методы статистической обработки и планирование экспериментов / И.П. Ашмарин, И.П. Васильев, В.А. Амбросов.-Л.: Изд-во Лс-нингр. ун-та, 1974.-76с.
4. Басова, Д.К. Получение антигена и гипериммунной сыворотки для диагностики оспы свиней / Д.К. Басова, В.И. Диев // Пробл. патологии, санитарии и бесплодия в жив-ве: Междунар. научно-практ. конф.-Минск,1998.-С.49-50.
5. Басова, Д.К. Совершенствование технологии изготовления средств диагностики и специфической профилактики оспы овец: автореф. дис. канд. вет. наук / Басова Дарья Константинова.-Владимир,2001.-25с.
6. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец /
7. B.Н. Иванющенков, О.А. Кореба, В.Т. Кекух и др. // Ветеринария.-1990.-№8.1. C.22-24.
8. Болезни овец и коз / сост. М.В. Загороднов.-М.:Колос,1973.-415с.
9. Борисович, Ю.Ф. О распространении оспы овец и мерах борьбы с нею в некоторых странах / Ю.Ф. Борисович // Тр. ГНКИ.-1964.-Т.12.-С.24-31.
10. Борисович, Ю.Ф. Об иммунобиологических свойствах эмбрион-вирусвакцины оспы овец / Ю.Ф. Борисович // Тр. ГНКИ.-1962.-Т.10.-С.105-109.
11. Видовая и штаммовая дифференциация каприпоксвирусов методом полиме-разной цепной реакции / Е.С. Орлова, А.В. Щербаков, В.И. Диев, В.М. Захаров // Молекулярная биология.-2006.-Т.40,№1.-С. 158-164.
12. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина.-М. :ВНИТИБП, 1998.-928с.
13. Вишняков, И.Ф. Диагностика вирусных болезней животных: состояние и перспективы / И.Ф. Вишняков // Вопр. вет. вирусол., микробиол. и эпизоотол.: матер. науч. конф. ВНИИВВиМ.-Покров,1992.-Ч.2.-С.221-230.
14. Волкова, А.А. Профилактика и меры борьбы при инфекционных болезнях овец / А.А. Волкова // Профилактика болезней с.-х. животных в пром. жив-ве.-МД975.- С.221-230.
15. Гарькин, А.В. Изучение иммунобиологических свойств вакцин против оспы овец и оспы коз: автореф. дис. . канд. вет. наук / Гарькин Алексей Викторович.-Владимир,2007.-25с.
16. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц: пер. с апгл.-М.:Практика,1999.-459с.
17. Горькавский, Ю.А. Использование препарата «Абактан» при вакцинации овец против оспы / Ю.А. Горькавский, В.М. Балышев// Науч. основы произ-ва вет. биол. препаратов: матер. Междунар. науч.-практ. конф,- Щелково,2005.-С. 195-197.
18. Грачев, Д.В. Адаптация вируса оспы коз к первичным и перевиваемым культурам клеток / Д.В. Грачев // Проблемы мониторинга и генодиагностики болезней животных: Матер. Междунар. конф. молодых ученых.-Владимир,2004.-С.97-99.
19. Грачев, Д.В. Иммунобиологические свойства вируса оспы коз, выделенного в Республике Таджикистан: автореф. дис. канд. вет. наук / Грачев Дмитрий Вик-торович.-Покров,2006.-27с.
20. Гуненков, В.В. Сухая живая вакцина против оспы овец из штамма С113/86 / В.В. Гуненков, В.П. Черняк, Г.Д. Кузнецов // Ветеринария.-1993.-№11/12.-С.23-24.
21. Диев, В.И. Оспа овец и коз: мониторинг распространения и профилактика / В.И. Диев, В.М. Захаров, A.M. Рахманов // Мониторинг распространения и предотвращения особо опасных болезней жив-х: сб.матер.конф.-Самарканд,2004.-С.63-65.
22. Дифференциация вакцинных и эпизоотических штаммов вируса оспы овец / Е.С. Орлова, А.В. Щербаков, В.И. Диев, В.М. Захаров // Тр. Федерального центра охраны здоровья жив-х.-Владимир,2005.-Т.З.-С. 160-170.
23. Зайцева, Т.И. Очистка оспенной вакцины центрифугированием в градиенте плотности сахарозы / Т.И. Зайцева // Вакцины и сыворотки: республ. межвед. сб. -1974. Вып.8.-С.42-47.
24. Зайцева, Т.И. Очистка оспенной вакцины центрифугированием в градиенте плотности глицерина / Т.И. Зайцева // Вакцины и вирусные заболевания: республ. межвед. сб.-1976, Вып.4.-С.89-90.
25. Иммуногенная активность пылевидной вирусвакцины против оспы овец / С.М. Мамадалиев, Е.Н. Троицкий, К.Р. Кульбаева и др. // Биотехнология теория и практика.-1998.-Т. 1-2,№5-6.-С. 133-134.
26. Инфекционная патология животных в 2 т.-T.l. / под ред. А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьева, Е.А. Непоклонова, Е.С. Воронина.-М.Академкнига,2006.-1911с.
27. Инфекционные болезни овец / Р.А. Кадымов, А.А. Кунаков, В.А. Седов и др. //М.: Агропромиздат,1987.-С.303.
28. Кадыров, У.Г. Оспа животных / У.Г. Кадыров, Ю.Ф. Борисович.-М.:Колос, 1981.-168с.
29. Кекух, И.Г. Роль сайгаков в распространении оспы овец / И.Г. Кекух, А.П. Демченко, А.И. Быков // Биолого-эколог. Проблемы заразных болезней диких жив-х и их роль в патологии с.-х. жив-х и людей: матер. Междунар. науч.-практ. конф. -Покров,2002.-С. 123.
30. Керембекова, У.Ж. Совершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец: автореф. дис. . канд. вет. наук/ Керембекова У.Ж.-Алматы.-1994.
31. Лихачев Н.В. Активная иммунизация против оспы овец: дис. д-ра вет. наук / Лихачев Н.В.- МД948.-С.272.
32. Лихачев, Н.В. Аттенуированный штамм вируса оспы овец / Н.В. Лихачев, Л.А. Жидкова // Тез. докл. науч. конф. ВГНКИ.-М.,-1974.-С.1-2.
33. Лихачев, Н.В. Изыскание методов получения авирулентной формол-депо-вакцины против оспы овец / Н.В. Лихачев // Тр. ГНКИ.-1952.-Т.З.-С.133-136.
34. Лярски, 3. Диагностика вирусных болезней животных / 3. Лярски; пер. с польск. Т.Г. Орловой, Я.С. Лянсберг.-М.:Колос,1980-400с.
35. Машнин, А.В. Диагностика оспы овец и оспы коз / А.В. Машнин // Вестн. РАСХН.-2003.-№3.-С.66-69.
36. Машнин, А.В. Получение гипериммунных сывороток для диагностики оспы овец и коз / А.В. Машнин // Докл. РАСХН.-2003.-№5.-С.57-59.
37. Машнин, А.В. Разработка и усовершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец и оспы коз: автореф. дис. канд. вет. наук / Машнин Александр Валентинович.-Покров,2001.-24с.
38. Общая вирусология: пер. с англ. / С. Лурия, Дж. Дарнелл, Д. Балтимор, Э. Кэмпбелл.-М. :Мир, 1981 .-С.464-471.
39. Орлова Е.С. Совершенствование методов диагностики оспы овец и оспы коз: автореф. дис. канд. вет. наук / Орлова Елена Сергеевна.-Владимир,2007.-23с.
40. Орлова, Е.С. Видовая дифференциация каприпоксвирусов методом мультиплексной ПЦР / Е.С. Орлова, А.В. Щербаков // Тр. Федерального центра охраны здоровья жив-х.-Владимир,2005.-Т.З.-С. 151 -159.
41. Оспа коз в Таджикистане / И.Т. Сатгоров, И.Ю. Хухоров, С.П. Болтаев и др. // Ветеринария.-2003.-№6.-С.12-14.
42. Очистка вирусов оспы овец и оспы коз / А.П. Простяков, Е.И. Скалинский, Ю.Ф. Борисович и др. // Тр. ВГНКИ вет. препаратов. 1977.-Т.24-25. - С.156-160.
43. Пальгов, А.А. Иммуногенные свойства производственных штаммов вируса оспы овец / А.А. Пальгов // Тр. ГНКИ.-1964.-Т.12.-С.32-35.
44. Петри, А. Наглядная статистика в медицине / А. Петри, К. Сэбин; пер. с англ. В.П. Леонова М.: ГЭОТАР-МЕД,2003.-144с.
45. Платонов, А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов.-М.: Изд-во РАМН,2000.-52с.
46. Получение диагностических препаратов для серологических реакций при оспе овец / У.Ж. Керембекова, Ю.М. Гононов, JI.H. Пасечников и др. // Вестн. с.-х. науки Казахстана.-1992.-№3.-С. 122-123.
47. Поляков, И.О. Практическое пособие по медицинской статистике / И.О. Поляков. -JL: Медицина, 1975.-150с.
48. Пономарев, А.П. Электронная микроскопия вирусов животных и некоторых условно-патогенных микроорганизмов / А.П. Пономарев, В. А. Мищенко.-Владимир:Фолиант,2005.- 158с.
49. Разработка микромодификации РСК для диагностики оспы овец / У.Ж. Керембекова, JI.H. Пасечников, Е.Б. Никитин и др. // Вестн. с.-х. науки Казахстана.-1994,№2.-С.45-48.
50. Романенко, В.Ф. Изучение биологических свойств культуральных вариантов вируса оспы овец / В.Ф. Романенко, В.Н. Сюрин // Вопр.вирусол.-1963.-№2.-С.224-229.
51. Романенко, В.Ф. Размножение и цитопатогенное действие вируса оспы овец в культуре ткани / В.Ф. Романенко // Тр. ВИЭВ.-1961 .-Т.27.-С.51-56.
52. Скалинский, Е.И. Лабораторная диагностика оспы животных / Е.И. Скалин-ский, Ю.Ф. Борисович // Ветеринария.-1986.-№ 11.-С.67-69.
53. Скалинский, Е.И. Структура и морфогенез вируса оспы коз / Е.И. Скалинский, Ю.Ф. Борисович // Ветеринария.-1975.-№7 С.39-41.
54. Скалинский, Е.И. Цитопатические изменения клеток культуры тканей, зараженных вирусом оспы овец / Е.И. Скалинский // Тр. ГНКИ.-1967.-Т.10.-С.110-117.
55. Скалинский, Е.И. Электронная микроскопия вируса оспы овец / Е.И. Скалинский // Тр. ГНКИ.-1962.-Т.11.-С.40-42.
56. Сосов, Р.Ф. Методические указания по применению статистических методов в эпизоотологии / Р.Ф. Сосов, А.А. Глушков.-М.;1974.-67с.
57. Теория и практика иммупоферментного анализа / A.M. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дхантиев, Е.М. Гаврилова.-М.: Высшая школа, 1991.-288с.
58. Троценко, Н.И. Размножение вируса оспы овец на культурах тканей / Н.И. Троценко // Тр. ГИКИ.-1961 .-Т.9.-С.24-33.
59. Частная вирусология: Руководство. Т.2 / под ред. В.М. Жданова, С.Я. Гайда-мович,- М.:Медицина,1982.-С.340-374.
60. Черняк, Е.П. Биологические свойства производственных штаммов вируса оспы овец / Е.П. Черняк, Г.Д. Кузнецова, В.В. Гупенков // Ветеринария.-1991.-№3.-С.24-26.
61. Эпизоотическая ситуация по оспе овец и коз и ее профилактика в России / В.М. Захаров, В.И. Диев, A.M. Рахманов, Н.А. Яременко // Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов: тр. Междунар. науч.-практ. конф.-Покров,2003.1. C.345-354.
62. Эффективность сухой культуральной вирусвакцины из штамма НИСХИ против оспы овец / Ф.П. Курченко, В.Н. Иванющенков, К.П. Уфимцев и др. // Вете-ринария.-1991.-№10.-С.21-23.
63. A capripoxvirus detection PCR and antibody ELISA based on the major antigen P32, the homolog of the vaccinia virus H3L gene / H.G. Heine, M.P. Stevens, A.J. Foord,
64. D.B. Boyle // J. Immunol. Metods.-1999.-Vol.227.-P.187-196.
65. A classical live attenuated vaccine for sheep pox / V. Bhanuprakash, B.K. Indrani, R. Hegde et al. // Mol. Cell Probes.-2007.-Vol.21.-№4.-P.276-281.
66. A duplex PCR assay for simultaneous detection and differentiation of Capripoxvirus and Orf virus / M. Zheng, Q. Liu, N. Jin et al. // Trop. Anim. Health Prod.-2004.-Vol.36.-№4.-P.307-320.
67. Absence of lumpy skin disease virus in semen of vaccinated bulls following vaccination and subsequent experimental infection / U.I. Osuagwuh, V. Bagla, E.H. Venter et al. // Vaccine.-2007.-Vol.25.-N12.-P.2238-2243.
68. Altinel, C. Studies on the productin of a prototype sheep and goat pox vaccine in lamb testes cell culture / C. Altinel, F. Ozyoruk, F. Uyanik // Pendik Vet. Mikrob. Der-gisi.-1993.-Vol.24.-№l.-P.47-55.
69. Animal health yearbook 1996 / FAO-WHO-OIE.-Rome,1997.-284p.
70. Animal health yearbook 1997 / FAO-WHO-OIE.-Rome,1998.-290p.
71. Application of ELISA in the detection of goat pox antigen and antibodies / B. Sharma, B.S. Negi, M.P. Yadav et al. // Acta Virol.-1988.-Vol.32.-№l.-P.65-69.
72. Bafra, S.K. Adaptability of capripox virus in continuous cell line of ovine origin / S.K. Bafra, S.K. Kalra // Indian. J.Microbiol.-1990.-Vol.30.-№l.-P.85-88.
73. Bana, A.S.A1. Purification, physical and chemical analysis of sheep pox virus and the response of sheep and goats to infection with sheep and goat pox viruses / A.S.A1. Bana: Ph.D.Thesis, Control University-1978.-P.194.
74. Bhat, P.P. A comparison of genomes of sheep pox virus isolates / P.P. Bhat // Indian J. Exp. Biol.-1998.-Vol.27.-№8.-P.714-717.
75. Bhat, P.P. Identification and size variation of terminal fragments of sheep pox virus genome / P.P. Bhat, B.P. Mishra, P.N. Bhat // Indian J. Exp. Biol.-1991.-Vol.29.-N5.-P.434-436.
76. Black, D.N. Genomic relationship between capripox viruses / D.N. Black, J.M. Hammond, R.P. Kitching // Virus Res.-1986.-Vol.5.-P.277-292.
77. Cao, J.X. Sequence analysis of Hindlll Q2 fragment of capripoxvirus reveals a putative gene encoding a G-protein-coupled chemokine receptor homologue / J.X. Cao, P.D. Gershon, D.N. Black // Virology.-1995.-Vol.209.-Nl.-P.207-212.
78. Cam, V.M. An antigen trapping ELISA for the detection of capripox virus in tis-siue culture supernatan and biopsy samples / V.M. Cam // J. Virol. Methods.-1995.-Vol.51.-P.95-102.
79. Cam, V.M. Control of capripox virus infections / V.M. Cam // Vaccine.-1993.-Vol.ll.-№13.-P.1275-1279.
80. Chand, P. Molecular and immunological characterization of a major envelope protein of capripoxvirus: Ph.D Thesis, University of Surrey, 1992.
81. Counter-immunoelectrophoresis for rapid diagnosis of sheep pox / P. Chand, V.D. Rao, S.K. Garg, I.P. Singh, R. Chandra//Br. Vet. J.-1985.-Vol.l41.-N2.-P.124-128.
82. Crowther, J.R. ELISA. Theory and practice / J.R. Crowther // Methods in Molecular Biology.-Totowa, New Jersey, 1995.
83. Dardari, A.H. Sheep and goats pox / A.H. Dardari // Indian Forein Anim. Dis. Comm. Unit. St. Anim. Hlth. Assoc. Publ.-1984.-P.309-316.
84. Das, S.K. Effect of some physicochemicals characters of sheep pox virus strains after passage in lamb testicular cells / S.K. Das, B.B. Mallick // Indian. J. Anim. Sci.-1985.-Vol.55.-№3.-P.155-159.
85. Das, S.K. Evolving of live modified sheep pox viral strains: modification of indigenous viral strains / S.K. Das, B.B. Mallick// Indian J. Exp. Biol.-1986.-Vol.24.-N5.-P.282-286.
86. Das, S.K. Susceptibility of various cell culture systems to sheep pox virus strains / S.K. Das, B.B. Mallick // Indian J. Exp. Biol.-1984.-Vol.22.-№4.-P.205-208.
87. Davies, F.G. Characteristies of a virus cansing a pox disease in sheep and goats in Kenia with observation on the epidemiology and control / F.G. Davies // J.Hyg.Camb.-1976.-Vol.76.-№2-P.163-171.
88. Davies, F.G. Relationship of capripox viruses found in Kenia with two Middie Eastern strains and other orthopox viruses / F.G. Davies, C. Otema // Res.Vet.Sci.-1981.-Vol.31.-P.253-355.
89. Davies, F.G. The alterations in pathogenicity and immunogenicity of a Kenya sheep and goat pox virus on serial passage in bovine foetal muscle cell cultures / F.G. Davies, G. Mbugwa// J. Сотр. Path.-1985.-Vol.95.-№4.-P.565-572.
90. Davies, F.G. The antibody response in sheep infected with a Kenyan sheep and goat pox virus / F.G. Davies, C. Otema//J. Сотр. Path.-1978.-Vol.88.-№2.-P.205-210.
91. Differentiation of sheep pox and goat poxviruses by sequence analysis and PCR-RFLP of P32 gene / M. Hosamani, B. Mondal, P.A. Tembhurne et al. // Virus Genes.-2004.-Vol.29.-№1 .-P.73-80.
92. Douglas, H.W. Micro-electrophoresis of pox viruses in molar sucrose / H.W. Douglas // J. Gen. Virol. -1969.-Vol.5.-№3.-P.391-396.
93. Dubey, S.C. Propagation of goat-pox virus in monolayer cultures of embryonic caprine lung / S.C. Dubey, A.N. Sawhney // Indian J. Exp. Biol.-1975.-Vol.l3.-№3.-P.304-305.
94. El-Awar, F. Characterization of sheep pox virus attenuated in cell culture / F. El-Awar, A. El-Zelin // J. Vet. Med.-1986.-Vol.33.-№8.-P.601-608.
95. Epidemiology of sheep pox / L.M. Belwal, A.E. Nivsarkar, P.B. Mathur, R.M. Singh // Trop. Anim. Health. Prod.-1982.-№14.-P.229-233.
96. Evaluation of immunocapture ELISA for diagnosis of goat pox / T.V. Rao, P. Malik, S. Nandi, B.S. Negi // Acta Virol.-1997.-Vol.41.-№6.-P.345-348.
97. Evaluation of latex agglutination test for rapid detection of goat poxvirus antigen and antibodies / T.V. Rao, B.S. Negi, P. Dhar, D. Asgola // Acta Virol.-1996.-Vol.40.-№2.-P.95-97.
98. Fassi-Ferri, M. Etude experimentale de 1'immunite anticlaveleuse post-vaccinale / M. Fassi-Ferri, M. El-Harrak, D. Johnson // Ann. Rec. Vet.-1984.-Vol.l5.-№l-P.59-64.
99. Fenner, F. Poxviruses of laboratory animals / F. Fenner // Lab. Anim. Sci.-1990.-Vol.40.-№5.-P.469-480.
100. Gershon, P.O. A comparison of the genomes of capripoxvirus isolates of sheep, goats and cattle / P.O. Gershon, D.N. Black // Virology.-1988.-Vol.l64.-P.341-349.
101. House, J.A. Sheep and goats pox / J.A. House, A.E. Castro, W.P. Heuschele // Vet. Diagn. Virol.: A Pract. Guide. -St. Louis,USA,1992.- P.217-219.110. http://www.oie.int/wahid-prod/public.php?page=diseasetimelines&diseaseid:=10
102. Hunter, P. Lumpy skin disease in southern Africa: a review of the disease and aspects of control / P. Hunter, D. Wallace // J.S.Afr.Vet.Assoc.-2001.-Vol.72.-N2.-P.68-71.
103. Jadhav, K.M. Field observation on sheep pox tissue culture vaccine / K.M. Jadhav, A.K. Pandey, N.S. Radadia// Indian. Vet. J.-1989.-Vol.66.-№10.-P.908-912.
104. Jassim, F.A. Propagation of sheep pox virus in cell cultures / F.A. Jassim, B.T. Keshavamurthy // Acta Virol.-1982.-Vol.26.-№3.-P. 190-192.
105. Joklik, W.K. The preparation and characterization of highly purified radioactively labeled poxvirus / W.K. Joklik//Biochem. Biophis. Acta.-1962.-Vol.61.-№2.-P.290-301.
106. Joklik, W.K. The purification of four strains of poxvirus / W.K. Joklik // Virology.-1962.-Vol.18.-P.9-18.
107. Katiyar, M.C. Studies on adaptation of goats pox virus in goat kidney cell culture / M.C. Katiyar, J.P. Soman // Indian Vet. J.-1987.-Vol.64.-№4.-P.261-265.
108. Kirubaharan, J.J. Adaptation of sheep pox virus (Ranipet strain) to BHK-21 cell line / J.J. Kirubaharan, A.P. Sugitha, V.D. Padmanaban // Indian. Vet. J.-1993.-Vol.70.-№1.-P. 4-6.
109. Kirubaharan, J.J. Titration of sheep pox virus in BHK-21 cell line / J.J. Kirubaharan, A.P. Sugitha, V.D. Padmanaban//Indian. Vet. J.-1993.-Vol.70.-№ll.-P.1073-1074.
110. Kitching, P. Progress towards sheep and goat pox vaccines / P. Kitching // Vac-cine.-1983.-Vol.l.-№l.-P.4-9.
111. Kitching, R.P. Clinical and antigenic relationship between isolates of sheep and goats pox viruses / R.P. Kitching, W.P. Taylor // Trop. Anim. Health. Prod.-1985.-Vol.l7.-№2.-P.64-74.
112. Kitching, R.P. Comparison of the external dimensions of capripoxvirus isolates / R.P. Kitching, C. Smale // Res. Vet. Sci.-1986.-Vol.41.-№3.-P.425-427.
113. Kitching, R.P. Passive protection of sheep against capripoxvirus / R.P. Kitching // Res. Vet. Sci.-1986.-Vol.41.-№2.-P.247-250.
114. Kitching, R.P. Studies on the major common precipitating antigen of capripoxvirus / R.P. Kitching, J.M. Hammond, D.N. Black // J. Gen. Virol.-1986.-Vol.67.-N.l.-P.139-148.
115. Kitching, R.P. The characterisation of African strains of capripoxvirus / R.P. Kitching, P.P. Bhat, D.N. Black//Epidemiol. Infect.-1989.-Vol.l02.-№2.-P.335-343.
116. Kitching, R.P. The control of sheep and goats pox / R.P. Kitching // Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 1986.-V.5,№2.-P.503-511.
117. Kitching, R.P. Vaccines for lumpy skin disease, sheep pox and goat pox / R.P. Kitching//Dev. Biol. Standard.-2003.-V.114.-P.161-167.
118. Klotz, E.L. Somatic hypermutation of an artificial test substrate within an lg kappa transgene / E.L. Klotz, J. Jr. Hackett, U. Storb // J. Immunol.-1998.-V. 161,N2.-P.782-790.
119. Krishnan, R. Pathogenesis of sheep pox / R. Krishnan // Indian Vet. J.-1968.-V.45,№4.-P.297-302.
120. Lefevre, P.C. Sheep and goats pox / P.C. Lefevre // Ins. Elev. Med. Vet. Pays Trop. Prod.-1983.-P. 171.
121. Lumpy Skin disease / J.T. Timoney, J.H. Gillespie, F.W. Scott, J.E. Barlough // Hagan and Bruner's Microbiology and Infectious Diseases of Domestic Animals.-8th ed.-Comstock Publ. Assoc.-Ithaca; London, 1988.-P.577-579.
122. Mallick, B.B. Nonspecific immunostimulation against viruses. 2. Field use to prevent goat-pox virus infection / B.B. Mallick, S.K. Das // Indian J. Anim. Sci.-1989.-V.59,№32.-P.307-317.
123. Martin, W.B. Test in sheep of attenuated of sheep pox vaccines / W.B. Martin, H. Ergin, A. Koylii //Res. Vet. Sci.-1973.-V.14,№l.-P.53-61.
124. Murray, M. Experimental sheep pox. A histological and ultrastructural study / M. Murray, W.B. Martin, A. Koylu//Res. Vet. Sci.-1973.-V.15,№2.-P.201-208.
125. OIE. Animal Health Status and Disease Control Methods in Member Countries in1997.-Paris, 1998.-Part.2.-162p.
126. OIE. Animal Health Status and Disease Control Methods in Member Countries in1998.-Paris, 1999.-Part.2.-187p.
127. OIE. Animal Health Status and Disease Control Methods in Member Countries in1999.-Paris,2000.-Part.2.-204p.
128. OIE. Animal Health Status and Disease Control Methods in Member Countries in2000.-Paris,2001 .-Part. 1-3.
129. OIE. World Animal Health in 2003.-V.2.-Paris,2004.-750p.
130. OIE. World Animal Health in 2004.-V.2.-Paris,2005.-380p.
131. Pandey, A.K. Adaptation and neutralization of sheep pox virus in cell culture / A.K. Pandey, P. Sarkar, S.P. Singh // Indian Vet. J.-1984.-Vol.61.-№6.-P.l 11-114.
132. Pandey, R. Soluble antigens of sheep pox and goat pox viruses as determined by immunodiffusion in agar gel / R. Pandey, I.P. Singh // Acta Virol.-1972.-Vol.l6.-№l.-P.41-46.
133. Parthiban, M. Usefulness of BHK-21 (Razi) cell line in evolving a cell-line adapted sheep-pox virus for vaccine production / M. Parthiban, K. Kumanan, V.D. Pad-manabair // Indian. J. Anim. Sci.-1993.-Vol.63.-№65.-P.515-517.
134. Plowright, W. The growth and cytopathogenicy of sheep pox virus in tissue culture / W. Plowright, R.D. Ferris // British J. of Exp. Path.-1956.-№36.-P.424-435. 4
135. Plowright, W. The pathogenesis of sheep pox in the skin of sheep / W. Plowright, W.G. Mac Leod, R.D. Ferris // J. Сотр. Path.-1959.-V.69.-P.400-413.
136. Protective immune responses induced by different recombinant vaccine regimes to Rift Valley fever / D.B. Wallace, C.E. Ellis, A. Espach et al. // Vaccine.-2006.-Vol.24.-N49-50.-P.7181-7189.
137. Ramyar, H. Isolation, cultivation and characterization of camel pox virus / H. Ramyar, M. Hessami // Zentralbl. Veterinarmed, (B).-1972.-Vol.l9.-№3.-P.182-189.
138. Ramyar, H. Propagation of goat pox virus on monolayer cell cultures / H. Ramyar //Zentralbl. Veterinarmed, (B).-1966.-Vol.l3.-№4.-P.334-337.
139. Rao, T.V. A comprehensive review of goat pox and sheep pox and their diagnosis / T.V. Rao, S.K. Bandyopadhyay // Anim. Health Res. Rev.-2000.-Vol.l.-№2.-P.127-136.
140. Rao, T.V. Evaluation of avidin-biotin ELISA for the detection of antibodies to goat poxvirus using noninfectious diagnostic reagent / T.V. Rao, P. Malik, D. Asgola // Acta Virol.-1999.-Vol.43.-№5.-P.297-301.
141. Rao, T.V. Evaluation of different serological tests for the diagnosis of goat pox using soluble antigens / T.V. Rao, B.S. Negi // Trop. Anim. Health Prod.-1997.-Vol.29.-№4.-P.23 5-239.
142. Reddy, Y.K. Outbreak of sheep pox a case report / Y.K. Reddy // Indian. Vet. Med. J.-1993.-Vol. 13.-№2.-P.86.
143. Renshaw, H.W. Serologic and cross-immunity studies with contagious ecthyma and goat pox virus isolates from the western United States / H.W. Renshaw, A.G. Dodd // Arch. Virol.-1978.-Vol.56.-№3.-P.201-210.
144. Romyar, H. Observations on the use of live-modified tissue culture vaccine against sheep pox//Bull. Off. Int. Epiz.-1974.-Vol.81.-P.881-887.
145. Sahu, S.P. Susceptibility of mink to certain viral animal diseases foreign to the United States / S.P. Sahu, A.H. Dardiri // J. Wildl. Dis.-1979.-Vol.l5.-№3.-P .489-494.
146. Sawhney, A.N. Goat-pox: an anthropozoonosis / A.N. Sawhney, A.K. Singh, B.S. Malik // Indian J. Med. Res .-1972.-Vol.60.-№5.-P.683-684.
147. Sen, K.C. Studies on goat pox virus. 2. Serological properties / K.C. Sen // Indian J. Med. Res.-1968.-Vol.56.-№8.-P.l 157-1163.
148. Sen, КС. Immunobiological relationship of goat pox and sheep pox viruses / КС. Sen //Indian J. MedRes.-1968.-Vol.56.-№8.-P.l 153-1156.
149. Sharma, P.S. Immunological responce of RM/65 sheep pox vaccine in lams / P.S. Sharma, S. Prasad, S.K. Kalra // Indian J. Anim. Sci.-1987.-Vol.57.-№9.-P.923-928.
150. Sheep poxvirus identification by PCR in cell cultures / O. Mangana-Vougiouka, P. Markoulatos, G. Koptopoulos et al. // J. Virol. Methods.-1999.-Vol.77.-№l.-P.75-79.
151. Sheep poxvirus identification from clinical speciements by PCR, cell culture immunofluorescence and agar gel immunoprecipitation assay / O. Mangana-Vougiouka, P. Markoulatos, P. Koptopoulos et al. // Mol. Cell. Probes.-2000.-Vol.l4.-№5.-P.305-310.
152. Spread of lumpy skin disease in Israeli dairy herds / I. Yeruham, O. Nir, Y. Braverman et al. // Vet. Rec.-1995.-Vol.l37.-N4.-P.91-93.
153. Structural proteins of sheep pox virus: analysis by polyacrylamide gel electrophoresis / A.K. Chakrabarty, R. Pandey, VK. Sharma // Indian J. Pathol. Microbiol.-1978.-Vol.21.-N4.-P.325-328.
154. Subba Rao, M.V. Cross-neutralization tests on sheep pox, goat pox and contagious pustular dermatitis viruses / M.V. Subba Rao, B.S. Malik // Acta Virol.-1979.-Vol.23.-№2.-P.165-167.
155. Use of a recombinant antigen in an indirect ELISA for detecting bovine antibody to capripoxvirus / V.M. Cam, R.P. Kitching, J.M. Hammond, P. Chand // J. Virol. Meth-ods.-1994.-Vol.49.-P.285-294.
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.