IgG- и IgE-аутоантитела у больных атопическим дерматитом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Самойликов, Павел Владимирович

• Самойликов, Павел Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Самойликов, Павел Владимирович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

Глава 1. ВВЕДЕНИЕ.

Глава 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Аллергические реакции I типа в патогенезе атопического дерматита.

2.2. Аллергические реакции IV типа в патогенезе атопического дерматита.

2.3. Неаллергический атопический дерматит.

2.4. Аутоиммунные реакции в патогенезе атопического дерматита.19 I

2.4.1.Роль инфекционных агентов в развитии аутоиммунных реакций.

2.4.2. IgE-реактивные аутоантигены при атопическом дерматите.

2.4.3. Характеристика IgG-реактивных аутоантигенов.

2.4.4. IgE аутоиммунитет в патогенезе атопического дерматита.

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Материалы.

3.1.1. Сыворотки людей.

3.1.2. Реагенты для ИФА.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Биохимические методы исследования.

3.2.2. Иммунологические методы исследования.

3.2.3. Методы математической и статистической обработки результатов исследования.39 '

Глава 4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1. Клинико-иммунологическая характеристика групп больных атопическим дерматитом.

4.1.1. Данные иммунологического исследования.

4.1.2. Определение IgG-AT к вирусным антигенам вирусов группы Herpesviridae.

4.2. Разработка иммуноферментного метода количественного определения IgG- и IgE-антител к тканевым антигенам.

4.2.1. Определение нормальных значений уровня IgG-AT к тканевым антигенам у здоровых.

4.2.2. Определение нормальных значений уровня IgE-AT к тканевым антигенам у здоровых.54 |

4.3. IgG- и IgE-AT к тканевым антигенам у больных атопическим дерматитом.

4.3.1. Определение IgG-AT к тканевым антигенам у больных атопическим дерматитом.

4.3.2. Выявление IgE-AT к тканевым антигенам у больных атопическим дерматитом.

4.4. Определение IgG- и IgE-AT к тиреоглобулину в сыворотках больных атопическим дерматитом.

4.5. Взаимоотношения гуморального иммунного ответа на тканевые антигены с уровнем общего IgE у больных АД.

4.6. Выявления связи между гуморальным иммунным ответом на тканевые антигены и антигены герпесвирусов у больных атопическим дерматитом.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «IgG- и IgE-аутоантитела у больных атопическим дерматитом»

Актуальность проблемы. Широкая распространенность аллергических заболеваний, охвативших более 20% населения планеты, усиление тяжести клинического течения и резкое снижение качества жизни пациентов превратили проблему аллергии в глобальную медико-социальную проблему.

Среди аллергических заболеваний одно из ведущих мест занимает атопический дерматит (АД) - распространенный, упорно протекающий дерматоз, занимающий в структуре аллергических заболеваний 50%-60%.

Рост числа аллергических заболеваний в развитых сообществах связывают с факторами окружающей среды и с изменившимся типом инфекционного воздействия на человека. Хронические вирусные инфекции вызванные, в частности, вирусом простого герпеса, утяжеляют клиническое течение и характер АД [9].

Атопический дерматит сохраняет свои клинические признаки на протяжении многих лет и нередко трансформируется в бронхиальную астму с так называемым тяжелым атопическим синдромом [51]. Многолетние наблюдения за больными, страдающими АД, позволяют говорить о нем, как о системном заболевании с поражением не только кожи, но и внутренних органов и систем организма, таких как органы пищеварения (80-97% больных), JIOP-органы, дыхательная система, мочевыводящие пути.

Ведущим иммунопатологическим механизмом в развитии АД является изменение соотношения ТИ1/ТЬ2-лимфоцитов в пользу последних, приводящее к появлению характерного для IgE-реактивности цитокинового профиля и высокой продукции специфических IgE-антител к различным экзоаллергенам. В то же время имеются данные об участии клеточно-опосредованных аллергических реакций в иммунопатогенезе АД, особенно его хронических тяжелых форм. Основное значение в развитии таких реакций придают инфекционным агентам (S. aureus, С. albicans, микробно-вирусные ассоциации), колонизирующим не только кожу больного, но и слизистые оболочки ВДП и ЖКТ.

Кроме того, в последние годы указывается на возможное участие аутореактивности в патогенезе АД. Показано формирование у больных IgE-аутореактивности к человеческим белкам, содержащимся в клетках разных органов: кожа, легкие, ЖКТ, мышцы и мозг [106, 108]. Более того, обострение АД у определенных больных оказалось связанным с увеличением IgE-аутореактивности [108].

Одним из механизмов запуска аутоиммунного феномена может быть активация иммунной системы перекрестно-реактивными антигенами (аллергенами). Так, молекулярный анализ аллергенов с помощью ДНК-клонирования выявил поразительное сходство между некоторыми экзогенными аллергенами и человеческими белками [29; 104]. Показано также, что даже при низком уровне гомологии в структуре или при ее полном отсутствии экзоаллергены могут хорошо имитировать трехмерную структуру человеческих протеинов [31; 34].

В качестве одного из механизмов запуска аутоиммунной патологии при ряде аллергических заболеваний можно рассматривать также явление микробной мимикрии. Установлено наличие общих антигенов у P. mirabilis и кишечника, М. catarrhalis и легочной ткани, Y. enterocolitica и ткани щитовидной железы и мозга [7]. Оказалось, что IgG антитела к Р62 белку (синтетический пептид, соответствующий глицин/аланиновой последовательности ядерного антигена-1 вируса Эпштейна-Барр), реагируют с человеческим эпидермальным кератином, денатурированным коллагеном 2-го типа и актином [12, 30].

Таким образом, наряду с атопией в механизме формирования АД определенную роль могут играть аутоиммунные реакции, в том числе обусловленные наличием хронической-инфекции.

В связи с этим, выявление взаимосвязи между показателями аутореактивности, атопии и гуморального противовирусного ответа у больных АД может представлять определенный интерес в плане понимания патогенеза этого сложного хронического заболевания.

Цель исследования:

Цель - выявить в сыворотке крови IgG- и IgE-AT к некоторым тканевым антигенам и оценить их взаимоотношение с уровнем IgG-ответа к антигенам вирусов семейства Herpesviridae у больных атопическим дерматитом.

Задачи исследования:

1. Сформировать группы больных АД разной возрастной категории, длительностью течения и тяжестью заболевания и определить некоторые иммунологические показатели: уровень общего IgE, IgE-AT к инфекционным и неинфекционным аллергенам и IgG-ответ к антигенам вирусов семейства Herpesviridae.

2. Создать многокомпонентную иммуноферментную тест-систему для количественного определения IgG - и IgE-AT к тканевым антигенам и определить нормальные значения этих антител у здоровых.

3. Определить содержание IgG- и IgE-AT к тканевым антигенам у больных АД в зависимости от тяжести заболевания.

4. Выявить взаимоотношение между аутоиммунными, атопическими реакциями и гуморальным ответом на вирусы герпетической группы у больных АД.

Научная новизна:

1. Создана многокомпонентная иммуноферментная тест-система для количественного определения IgG- и IgE-антител к 7 тканевым антигенам и впервые определены среднестатистические значения содержания этих антител в сыворотке крови здоровых лиц разного возраста.

2. Впервые у больных АД, детей и взрослых, выявлено повышенное содержание IgG- и IgE-аутоантител к широкому спектру тканевых антигенов, особенно высокое к коллагену III и VI типа, кератину и миозину, при этом установлена прямая корреляция между уровнем этих антител, уровнем общего IgE и степенью тяжести заболевания.

3. Впервые у больных АД легкой и средней степени тяжести установлена прямая коррелятивная связь между содержанием IgG-AT к некоторым тканевым антигенам и уровнем IgG-антител к вирусам семейства Herpesviridae,

4. Впервые показано, что у детей с АД уровень IgG-AT к вирусам семейства Herpesviridae коррелирует с общим IgE.

Практическая значимость:

Созданная тест система для количественного определения IgE - и IgG-AT к тканевым АГ может быть использована в качестве дополнительного иммунологического метода диагностики АД.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Многокомпонентная иммуноферментная тест-система позволяет определить количественное содержание IgG- и IgE-AT к 7 тканевым антигенам (кератин, коллаген VI и III типа, эластин, антиген ткани легкого, миозин, ОБМ) в сыворотке крови человека, в том числе установить их «нормальные» значения.

2. Атопический дерматит у детей и взрослых сопровождается образованием повышенного содержания IgG- и IgE-аутоантител к антигенам, которые представлены в органах-мишенях атопии. Повышенное содержание и частота выявления этих аутоантител зависят от тяжести течения заболевания.

3. Установленная прямая корреляция между повышенным уровнем IgG- и IgE-AT к некоторым тканевым антигенам (АГ ткани легкого, коллаген VI типа, тиреоглобулин) и содержанием общего IgE, повышенным уровнем IgG-AT к AT ткани легкого, эластина и уровнем IgG-AT к ВПГ, а также повышенным уровнем IgG-AT к ВПГ и уровнем общего IgE может свидетельствовать об участии ауторективности и хронической вирусной инфекции в патогенезе АД.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Самойликов, Павел Владимирович

ВЫВОДЫ.

1. Создана многокомпонентная иммуноферментная тест-система для количественного определения IgG- и IgE-антител к 7 тканевым антигенам (кератин, коллаген VI и III типа, эластин, антиген ткани легкого, миозин, ОБМ), которая обладает высокой специфичностью и чувствительностью и позволяет оценить аутоиммунный ответ у лиц разного возраста.

2. У больных АД, детей и взрослых, с полисенсибилизацией к пищевым, бытовым аллергенам и аллергенам условно-патогенных микроорганизмов установлено наличие повышенного и высокого (>1000 kE/л) уровня общего IgE в 54%-89% и 12,9%-31,8% случаев, соответственно, а также выраженный гуморальный ответ к вирусам семейства Herpesviridae, опосредованный IgG-AT. У детей больных АД выявлена достоверная корреляция между уровнями общего IgE и IgG-антител к вирусу простого герпеса.

3. В сыворотке крови всех больных АД обнаружены IgG-аутоантитела ко всем исследованным тканевым антигенам с наибольшей частотой выявления к кератину, коллагену VI и III типов у детей школьного возраста в 75%, 83% и 58,3% случаев, а у взрослых больных в 50%, 68% и 81,8%) случаев, соответственно.

4. У больных АД в сыворотке крови обнаружено высокое содержание IgE-аутоантител ко всем исследуемым тканевым антигенам, включая тиреоглобулин, с наибольшей частотой выявления к кератину, эластину, коллагену VI типа, миозину и микросомальному антигену из ткани легкого (61,4%-77,8%).

5. Установлено, что у взрослых и детей с АД частота выявления IgG-и IgE-аутоантител к тканевым АГ при среднетяжелом течении заболевания выше, чем при легком его течении (р<0,05).

6. Выявлена значимая прямая корреляция между уровнями IgG-AT к ВПГ и IgG-AT к антигенам ткани легкого и эластина у детей дошкольного возраста, а также достоверная обратная корреляция между уровнем IgG-AT к коллагену VI типа и уровнем IgG-AT к ВЭБ у детей дошкольного возраста и к ВПГ и ВЭБ у взрослых больных АД.

7. У детей с АД дошкольного возраста выявлена значимая прямая корреляция между содержанием общего IgE и уровнями IgG-AT к антигену ткани легкого и IgE-AT к коллагену VI типа и тиреоглобулину.

Глава 5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Нами было проведено исследование сывороток больных с диагнозом АД и выявлены особенности гуморального иммунного ответа при воздействии внешних антигенов (аллергенов), а также внутренних (тканевых) антигенов. Выбор данного направления научной работы был связан, прежде всего, с двумя причинами - это, во-первых, широкая распространенность, тяжелое течение и наличие осложнений при АД, а также появление новых данных о возможном влиянии аутоиммунных реакций на патогенез данного заболевания. В настоящее время атопический дерматит активно изучается вследствие возрастающего воздействия на организм человека бытовых и инфекционных факторов, нарушений экологического баланса, что, несомненно, лежит в основе этиологии не только АД, но и других аллергических заболеваний. Кроме того, дискуссионным остается вопрос и о классификации АД. Ряд авторов предлагают новые типы - неаллергический АД и/или аутоиммунный АД [87, 113]. Рассмотренные выше причины побудили нас провести собственное исследование по выявлению взаимоотношения между атопическими и аутоиммунными реакциями на экзо- и аутоаллергены при АД.

Для достижения поставленной цели нами было проведено комплексное исследование сывороток больных АД, которое включало определение уровня общего и специфических IgE-AT к бытовым, пищевым аллергенам и аллергенам бактерий и грибов, в том числе исследован гуморальный иммунный ответ на вирусы семейства Herpesviridae. Разработан метод ИФА оценки аутоиммунных реакций на тканевые АГ. Проведен анализ взаимосвязи выявленных показателей гуморального противовирусного иммунного ответа, аутоиммунного и атопического процессов при АД.

Нами были исследованы сыворотки больных разных возрастных групп с установленным диагнозом атопический дерматит разной степени тяжести заболевания на основании критериев изложенных в рекомендации для практических врачей [15].

При иммунологическом исследовании сывороток больных были выявлены существенные отличия между больными АД разных возрастных групп, разной степени тяжести заболевания, а также между больными АД и группой контроля (здоровые люди). Средние значения общего IgE, наиболее высокие уровни и частота его выявления отмечены у больных детей АД дошкольного возраста и у больных с более тяжелым течением заболевания. Анализ определения специфических IgE-AT в сыворотках больных АД показал, что ранее всего у них выявляется сенсибилизация к пищевым аллергенам, к которой в последствии присоединяется IgE-ответ к бытовым аллергенам и аллергенам бактерий и грибов. В группе контроля уровень общего IgE и специфических IgE-AT к исследуемым аллергенам у большинства людей был в пределах нормы. В работах отечественных и зарубежных авторов [2, 6] также показано, что у детей с АД в раннем возрасте часто имеется непереносимость пищевых продуктов, а у взрослых чаще выявляется сенсибилизация к домашней пыли, в меньшей степени к микробным аллергенам и к грибам [116]. Кроме того, отмечено, что пищевая аллергия у детей является триггером развития АД [14]. Таким образом, мы можем говорить, что сенсибилизация ко всем исследуемым аллергенам начинается у детей дошкольного возраста и достигает максимума у детей школьного возраста, а у взрослых спектр сенсибилизирующих аллергенов снижается вплоть до нулевого уровня за счет IgE-AT к пищевым аллергенам.

Мы попытались найти связь между гуморальным иммунным ответом к вирусным антигенам семейства Herpesviridae и формированием атопии. Для этого определяли в сыворотке крови больных АД и здоровых IgG-AT к антигенам ВПГ, ЦМВ и ВЭБ. Оказалось, что во всех группах обследованных, в том числе и в группе контроля, определяется повышенный уровень IgG-AT ко всем вирусам семейства Herpesviridae, причем уровень IgG-AT к ВПГ и ЦМВ увеличивался с возрастом как у больных АД, так и в группе контроля. Была выявлена также достоверная корреляция (г = 42, р<0,05) между повышенным уровнем IgG-AT к ВПГ и повышенным уровнем общего IgE у детей с АД.

Наши данные о наличии коррелятивной связи между уровнем антител к ВПГ и уровнем общего IgE у детей с АД согласуются с результатами других авторов, показавших, что инфицирование вирусом простого герпеса ассоциировано с достоверно более высоким уровнем общего IgE в сыворотке крови, расширением спектра атопических заболеваний и увеличением числа больных среди детей и взрослых [9]. Возможно, персистенция герпесвирусной инфекции вызывает изменения в иммунной системе, сопровождающиеся снижением содержания Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров, что, в свою очередь, приводит к усилению пролиферации В-лимфоцитов, увеличению выработки иммуноглобулинов и потенцированию развития аллергических заболеваний [3].

Для решения дальнейшей задачи, а именно, выявления аутоиммунного ответа у больных АД, нам необходимо было разработать иммуноферментную тест-систему количественного определения антител к тканевым антигенам. Прежде всего, мы определили спектр тканевых антигенов, к которым необходимо определить антитела в сыворотках больных АД и здоровых. При выборе антигенов исходили из того, что при

АД IgE-аутореактивность направлена на цитоплазматические антигены следующих тканей и органов: кожа, ЖКТ, легкое, мозг, щитовидная железа и мышцы [106]. В этой связи мы использовали для разработки метода ИФА 6 коммерческих белков (коллаген III и VI типа, эластин, кератин, ОБМ, миозин) и один экспериментальный препарат - экстракт ткани | легкого. А для определения AT к тиреоглобулину мы применили методы ИФА, разработанные в лаборатории иммунологической диагностики эндокринных заболеваний НИИВС им. И. И. Мечникова РАМН.

В разработанной нами многокомпонентной количественной иммуноферментной тест-системе мы использовали референс-реагенты dr. Fooke (Германия) и спектр тканевых антигенов, который позволил определять IgG- и IgE- антитела в сыворотках и оценивать степень аутоиммунного ответа у больных АД в сравнении с нормальными значениями этих аутоантител у здоровых людей разных возрастных групп. j

При исследовании сывороток больных АД были выявлены повышенные уровни IgG-AT от 46,8 до 75% случаев к кератину, от 43,5 до 83% к коллагену VI типа и от 27,4% до 81,8% к коллагену III типа. Согласно полученным данным во всех возрастных группах выявлялся повышенный уровень IgG-AT к тканевым антигенам. При этом установлено достоверное различие между средними значениями уровня IgG-AT к тканевым антигенам у больных АД и здоровых. У больных этот показатель в 1,5 и более раз превышал таковые значения у здоровых людей. Частота выявления повышенного уровня IgG-AT к ОБМ была | минимальна и не зависела от возраста. Процент выявления IgG-AT к коллагену VI типа и коллагену III типа был максимален во всех группах больных АД. Кроме того, у больных детей АД старшей возрастной группы отмечалось увеличение числа случаев повышенного уровня аутоантител, тогда как у взрослых больных процент выявляемых аутоантител был ниже, чем у школьного возраста.

Кроме того, мы провели сравнительный анализ данных и выяснили, что у больных АД средней степени тяжести уровень IgG-AT к тканевым антигенам выше, чем у больных АД легкого течения заболевания. Причем достоверные различия по этим показателям были обнаружены у детей дошкольного возраста к миозину, у детей школьного возраста к АГ ткани легкого и коллагену III типа и у взрослых с АД к коллагену III и VI типа, АГ ткани легкого и ОБМ.

Полученные данные позволяют говорить о наличии у больных АД аутоиммунных реакций, обусловленных IgG-AT. Причем наличие аутоантител не зависит от возраста больного, но их уровень и частота выявления были больше у больных со среднетяжелым течением заболевания. При этом с наибольшей частотой определялся гуморальный ответ к коллагенам III и VI типов (81,8% и 83%, соответственно).

При исследовании IgE-AT к тем же тканевым антигенам оказалось, что повышенные содержания этих антител были выявлены во всех группах больных, частота их выявления была выше у детей по сравнению с взрослыми больными, тогда как обнаружение IgE-AT к ОБМ было минимальным (от 38,9% до 47,7%) независимо от возраста больных. Процент выявления IgE-AT к миозину и кератину оказался максимальным (72,7% и 77,8%, соответственно).

Далее мы проанализировали, как наличие IgE-AT ассоциируется со степенью тяжести течения АД. Для этого мы сравнили их средние значения у больных легкой и средней степени тяжести заболевания. Оказалось, что в каждой группе больных достоверное различие по среднему уровню IgE-AT к тому или иному АГ отличалось. Так, в группе детей дошкольного возраста уровень IgE-AT был достоверно выше к кератину, АГ ткани легкого, эластину и ОБМ; в группе детей школьного возраста с более тяжелым течением заболевания - к коллагену VI типа и миозину, а у взрослых больных АД достоверно выше был уровень IgE-AT к коллагену III типа.

Таким образом, наши данные позволяют говорить, что наряду с общей картиной аутоиммунного ответа, обусловленного IgG- и IgE-AT к тем или иным тканевым антигенам, аутоиммунные реакции, обусловленные IgG-AT прежде всего направлены на коллаген III и VI типа, то есть на АГ хорошо представленный в дерме и паренхиматозных органах, в то время как аутоиммунные реакции, обусловленные IgE-AT, направлены на миозин и кератин, которые входят в состав миофибрил и эпидермиса. Кроме того, IgE-аутоантитела выявляются чаще у больных с более тяжелым течением заболевания, что может говорить об определенном вкладе этих антител в патогенез АД.

Поскольку в литературе уже сообщалось о наличии антител к антигенам щитовидной железы у больных АД [106], мы сочли необходимым исследовать сыворотки больных на наличие IgG- и IgE - AT к тиреоглобулину. При этом показатели IgG-AT к тиреоглобулину у больных АД оказались в пределах возрастной нормы, за исключением сыворотки 1 больного 15 лет. Не исключено, что именно у этого больного имелась сочетанная патология в виде аутоиммунного тиреоидита и АД.

При определении IgE-AT к тиреоглобулину в сыворотках больных всех возрастных групп было обнаружено повышенное содержание этих антител, причем средние значения IgE-AT к тиреоглобулину во всех возрастных группах отличались незначительно и частота их выявления была невысокой в целом по группам больных (31,3; 28,6; 33,3 %). Однако у больных АД средней степени тяжести частота выявления повышенных уровней IgE-AT к тиреоглобулину оказалась выше по сравнению с больными, у которых отмечалось легкое течение заболевания («50% и 20% соответственно).

Одним из основных механизмов патогенеза АД является IgE-обусловленная аллергия, или повышенная чувствительность к различным экзоаллергенам. Особо тяжелые формы АД протекают на фоне высокого уровня общего IgE в сыворотке. Также показано, что при утяжелении течения АД в сыворотке крови больных обнаруживаются аутоантитела к различным тканевым антигенам, уровень которых при ремиссии АД снижается [49, 68, 89].

Исходя из этих данных мы попытались выяснить, в каких взаимоотношениях находятся аутоантитела и уровень общего IgE у больных АД.

С этой целью мы провели корреляционный анализ уровней IgE-AT к тканевым антигенам и уровня общего IgE в сыворотках больных. Коэффициент корреляции между этими двумя показателями выявил прямую достоверную взаимосвязь между изменением уровня IgE-AT к коллагену VI типа и общим IgE у больных АД в возрасте до 7 лет, а также между изменением уровня IgE-AT к тиреоглобулину и общим IgE у больных АД школьного возраста. Значимой корреляции у взрослых больных выявить не удалось.

Корреляционный анализ уровня IgG-AT к тканевым антигенам и общим IgE показал, что достоверная корреляция выявляется между повышением уровня IgG-AT к АГ ткани легкого и общим IgE у детей дошкольного возраста, но в других возрастных группах больных АД обнаруженная корреляция оказалась недостоверной.

Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что в развитии аллергических реакций при АД определенную роль играют аутоантитела класса иммуноглобулинов Е и G. Причем, как показали наши данные, лишь IgE-AT к коллагену VI типа и к тиреоглобулину, а также IgG-AT к АГ ткани легкого коррелируют с повышенным уровнем общего IgE. Взаимосвязь между аутоиммунитетом и атопией реализуется, повидимому, следующим образом: IgE-аутоантигены являются причиной высвобождения гистамина из базофилов и тучных клеток и вызывают немедленный тип кожных реакций [103, 29, 60, 19], что ведет к повреждению ткани шокового органа и утяжелению атопии. Кроме того, возможно IgE-аутоантигены могут активировать аутореактивные Т-клетки и тем самым вносить вклад в развитие заболевания. С одной стороны, аутореактивные Т-клетки могут активироваться через IgE-антителоопосредованную презентацию аутоаллергенов дендритными клетками или моноцитами. С другой, возможно, что IgE аутоантигены активируют Т-клетки через не IgE зависимые механизмы. Присутствие Т-клеток, распознающих IgE аутоантигены уже показано у атопических больных [64].

Представляло также интерес выяснить, каким образом аутоиммунитет может утяжелять течение АД и что способствует возникновению аутоиммунных реакций у больных АД. С этой целью мы попытались провести анализ полученных данных и выявить, могут ли хронические вирусные инфекции, обусловленные семейством вирусов Herpesviridae, провоцировать появление аутоантител.

Нами была выявлена достоверная корреляция между повышением уровня IgG-AT к герпесвирусным инфекциям и уровнем аутоантител только класса IgG. В частности, была выявлена достоверная корреляция между уровнем IgG-AT к ВПГ и уровнем IgG-AT к антигену ткани легкого (г = 0,42, р<0,05), а также к эластину у детей до 7 лет (г = 0,29, р<0,05). Поэтому, исходя из наших данных, мы можем сказать, что герпесвирусные инфекции могут влиять на аутоиммунитет и увеличивать уровень IgG-AT к тканевым АГ.

Такое влияние вирусов простого герпеса возможно связано с явлением эпитопной мимикрии. Постулируется, что у инфекционного агента (паразиты, бактерии, дрожжи или вирусы) есть эпитопы, иммунологически сходные с АГ детерминантами хозяина, благодаря чему антигенные различия между ними минимальны. Иммунный ответ, вызванный эпитопами патогена, способен нарушить толерантность к эпитопам хозяина. В результате перекрестного реагирования Т- и В-клеток возникает патогенный аутоиммунный ответ, ведущий к развитию АИЗ [76]. Кроме того, известно, что вирусы способны поражать Т-клетки, встраиваться в их геном и тем самым изменять Т-клеточный контроль над аутореактивными Т-клетками.

С другой стороны, известно, что вирусы семейства Herpesviridae обладают иммунодепрессивными свойствами [16]. Вирусные белки обладают прямым сродством к молекулам МНС клеток человека и, «залипая» на молекулах МНС, препятствуют распознаванию антигена Т-лимфоцитами. Кроме того, известно, что ВЭБ подавляет продукцию цитокинов активированными Т-лимфоцитами, и иммунный ответ не развивается. Показано также, что ЦМВ способен инфицировать дендритные клетки через их CD209 лектиновый рецептор. При этом инфицированная дендритная клетка теряет способность презентировать антиген Т-клетке [Halary F. 2005].

Мы выявили отрицательную корреляцию между уровнем IgG-AT к ВПГ и ВЭБ и уровнем IgG-AT к коллагену VI типа у взрослых больных АД. Возможно, это связано с длительной персистенцией вируса в организме и развитием вторичного иммунодефицита, который обуславливает развитие аутоиммунитета у взрослых больных. У детей с

АД дошкольного возраста были установлены прямые коррелятивные связи между иммунным ответом на вирус простого герпеса и аутоантителами к ткани легкого и эластина. В то же время у детей школьного возраста каких-либо корреляций между показателями противовирусного иммунитета и аутоантителами выявить не удалось.

Таким образом, при помощи разработанной нами количественной тест-системы были определены IgG- и IgE-AT в сыворотках группы здоровых лиц и найдены показатели нормальных уровней аутоантител к 7 тканевым АГ, что позволило выявить широкий спектр повышенного содержания IgG- и IgE-аутоантител в сыворотках крови больных АД. Нам удалось выявить тенденцию увеличения частоты обнаружения аутоантител в зависимости от тяжести заболевания, определить преимущественный иммунный ответ к тем или иным тканевым антигенам, среди которых по степени убывания можно отметить коллаген VI типа, кератин, коллаген III типа и миозин. Все это говорит о возможном использовании данного метода ИФА в диагностике аллергических заболеваний.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Самойликов, Павел Владимирович, 2005 год

1. Арион В. Я., Айзикович JI. А., и др. Клинико-иммунологические особенности атопического дерматита у детей, ассоциированного с герпесвирусами./ Мед. иммунология. 2003. - Т. 5, №3-4. - С. 226.

2. Балаболкин И.И., Гребенюк В.Н. Атопический дерматит у детей./ М., Медицина, 1999. с. 56-68.

3. Бикбулатова А.Н., Нигматуллина Г.Н., Еникеева Е.Г. Вирусиндуцированные заболевания органов дыхания./ Тезисы «13 Национального конгресса по болезням органов дыхания», Санкт-Петербург, 2003, №2, с.32-33.

4. Гервазиева В.Б., Воробьева H.JL, Сверановская В.В. Иммуноферментный метод количественного определения IgG-антител к основному белку миелина./ Иммунология 2000, №2, с. 52-56.

5. Караулов А.В. Сидоренко И.В., Захаржевская Т.В. и др. Пищевая аллергия и ее влияние на развитие и течение атопического дерматита у детей./ Успехи клин иммунол. 2001 Т.2 с. 97-108.

6. Маркина О. А. Особенности гуморального иммунитета больных криптогенным (идиопатическим) фиброзирующим альвеолитом./ Автореферат канд. дисс., 2003.

7. Маркина О.А., Ястребова Н.Е., Ляшова В.Н. Перекрестные реакции между антигенами легочной ткани и некоторыми видами микроорганизмов./ Медицинская иммунология.2003, Т 4, №2, с. 205.

8. Огородова JI.M., Козина О.В. Роль инфекции, вызванной вирусом простого герпеса, и микст-инфекций при атопии./ Бюллетень сибирской медицины, 2002, №3, с. 30-39.

9. Ю.Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: Электрофорез и ультрацентрифугирование./ Практическое пособие. 1981, М., Наука, с. 288.

10. П.Ревякина В.А. Роль этиологически значимых аллергенов в развитии атопического дерматита у детей./ Аллергология. 1998, №4, с. 13-14.

11. Ройт А., Бростофф Д., Мейл Д. Иммунология./ М., Мир, 2000, с. 120140.

12. Сергеев А. Ю., Караулов А. В., Сергеев Ю. В. Иммунологические основы патогенеза главных воспалительных дерматозов человека./ Иммунопатология аллергология инфектология. 2003, №3, с. 21-27.

13. Сергеев Ю. В., Новиков Д. К., Караулов А. В., Сергеев А. Ю. Атопический дерматит: гетерогенность клинических форм и разнообразие механизмов патогенеза./ Иммунопатология аллергология инфектология. 2001, №3, с. 16-18.

14. Хаитов Р. М., Балаболкин И. И. и др. Атопический дерматит: Рекомендации для практических врачей. М., Фармарус Принт, 2002, с. 6.

15. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А. Иммунология. М., Медицина, 2000, с. 348-349.

16. Aalberse RC. IgG subclasses in atopic dermatitis. En: Ruzicka T, Ring J, Przybilla В ed. Handbook of atopic eczema./ Berlin: Springer-Verlag ED. 1991, p. 166-172.

17. Akdis C.A.; Akdis M. Immunological differences between intrinsic and extrinsic types of atopic dermatitis./ Clinical & Experimental Allergy, Vol. 33 (12), 2003, p. 1618-1621.

18. Appenzeller U, Meyer C, Menz G, et al. IgE-mediated reactions to autoantigens in allergic diseases./ Int Arch Allergy Clin Immunol 1999, Vol.120 (3) p. 193-196. I

19. Becker K.G. The common genetic hypothesis of autoimmune/inflammatory disease./ Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 2001, Vol. 1(5), p. 399-405.

20. Beniac D.R., Wood D.D., Palaniyar N. et al. Cryoelectron microscopy of protein-lipid complexes of human myelin basic protein charge isomers differing in degree of citrullination./ J Struct Biol. 2000, Vol.129 (1), '' p. 80-95;

21. Bos J, Wierenga E, Smith J, Van der Heijden FL, Kapsemberg ML, et al. Immune disrregulation in atopic eczema./ Arch Dermatol 1992, Vol.128, p. 1509-1512.

22. Cabon N, Ducombs G, et al. Contact allergy to aeroallergens in children with atopic dermatitis: comparison with allergic contact dermatitis./ Contact Dermatitis 1996, Vol.35, p. 27-32.

23. Coleman R, Trembath RC, Harper JI. Chromosome llql3 and atopy underling atopic eczema./ Lancet 1993, Vol.341, p. 1121-1122.

24. Coutinho A., Kazatchkine M.D., Avrameas S. Natural autoandibodies./ Curr. Opin. Immunol. 1995, Vol.7, p. 812-818.

25. Crameri R, Faith A, Hemmann S, et al. Humoral and cell-mediated autoimmunity in allergy to Aspergillus fumigatus./ J Exp Med 1996, Vol.184, p. 265-270.

26. Davies J.M. Molecular mimicry: Can epitope mimicry induce autoimmune disease?/ Immunol. Cell Biol. 1997, Vol.75, p. 113-126.

27. De Marino S, Morelli MAC, Fraternali F, et al. An immunoglobulin fold in a major plant allergen: the solution structure of Phi p 2 from timothy grass pollen./ Structure 1999, Vol.7, p. 943-952.

28. Docke W.D., Kiessling C., Worm M. et al. Subclinical activation of latent cytomegalovirus (CMV) infection and anti-CMV immune response in patients with atopic dermatitis./ Br. J. Dermatol 2003, Vol. 148(5), p. 954-963.

29. Dotterud LK, Kvammen B, Lund E, et al. Prevalence and some clinical aspects of atopic dermatitis in the community of Sor-Varanger./ Acta Derm Venereol (Stockh) 1995, Vol.75, p. 50-53

30. Fedorov AA, et al. Structure determination of yeast cofilin./ Nat Struct Biol 1997, Vol.4(5), p. 366-369.

31. Fluckiger S, Fijten H, Whitley P, Blaser K, Crameri R. Cyclophilins, a new family of cross-reactive allergens./ Eur J Immunol 2002, Vol.32(l), p. 10-17.

32. Ge H, Si Y, Roeder RG. Isolation of cDNAs encoding novel transcriptional coactivators p52 and p75 reveals an alternate regulatory mechanism of j transcriptional activation./ EMBO J 1998, Vol. 17, p. 6734-6729.

33. Granfors K., Toivanen A. IgA-anti-yersinia antibodies in yersinia triggered reactive arthritis./ Ann. Rheum. Dis. 1986, Vol.45, p. 561-565.

34. Grewe M, Bruijnzeel-Koomen CA, Schopf E, et al. A role for Thl and Th2 cells in the immunopathogenesis of atopic dermatitis./ Immunol Today 1998, Vol.19, p. 359-361.

35. Guldner H.H., Netter H.J., Szostecki C., Jaeger E., Will H. Human anti-p68 autoantibodies recognize a common epitope of U1 RNA containing small nuclear ribonucleoprotein and influenza В virus./ J Exp Med 1990, j Vol.l71(3), p. 819-829.

36. Hanifin J, Chan S, Cheng J. Type 4 phosphodiesterase inhibitors have clinical and in vitro anti-inflammatory effects in atopic dermatitis./ J Invest Dermatol 1996, Vol.107, p. 51-56.

37. Hanifin J, Rajka G. Diagnostic features of atopic dermatitis./ Acta Derm Venerol 1980, Vol.92, p. 44-47.

38. Hofer M.,Jirapongsananuruk О., Trumble A., Leung D. Upgerulation of B7.2, but not B7.1, on В cell from patients with allergic asthma./ J Allergy Clin Immunol 1998, Vol.101, p. 96-102.

39. Jirapongsananuruk O., Hofer M., Nrumble A., Norris D., Leung D. Enhanced expression of B7.2 (CD-86) in patients with atopic dermatitis: a potential role j in the modulation of IgE synthesis./ J Immunol 1998, Vol.160, p. 4622-4627.

40. Johansson SGO, Hourihane OB, Bousquet J, et al. A revised nomenclature for allergy. An EAACI position statement from the EAACI nomenclature task force./ Allergy. 2001, Vol. 56, p. 813-824.

41. Kawashima, Tomoko et al. Linkage and association of an interleukin 4 gene polymorphism with atopic dermatitis in Japanese families./ J Med. Genet 1998, Vol.35 (6), p.502-504.

42. Kinaciyan T, Natter S, Kraft D, et al. IgE autoantibodies monitored in a patient with atopic dermatitis under cyclosporin A treatment reflect tissue j damage./ J Allergy Clin Immunol 2002, Vol. 109, p. 717-719.

43. Kortekangas-Savolainen O, Peltonen S, Pummi K, et al. IgE-binding components of cultured human keratinocytes in atopic eczema/dermatitis syndrome and their crossreactivity with Malassezia furfur./ Allergy 2004, Vol.59, p.168-173.

44. Lawrence F. et al. Atopic Dermatitis and Asthma: Parallels in the Evolution of Treatment./ Pediatrics 2003, Vol. 111 (3), p. 608-616

45. Leung DY. Atopic Dermatitis An Update for the Next Millennium./ J Allergy Clin Immunol 1999, Vol.104, p. 99-108. j

46. Leung DY, Bieber T. Atopic dermatitis./ Lancet 2003, №36, p. 151-160.

47. Leung DY. Role of IgE in atopic dermatitis./ Curr Opin Immunol 1993, Vol.5, p. 956-962.

48. MacDonald SM, Rafner T, Langdon J, Lichtenstein LM. Molecular identification of an IgE-dependent histamine-releasing factor./ Science 1995, Vol.269, p. 688-690.

49. Marsh D, Neely J, Breazeale D, et al. Linkage analysis of IL4 and other chromosome 5q31.1 markers and total serum IgE concentrations./ Science 1994, Vol. 264, p.l 152-1156.

50. Matzinger P. Tolerance, danger and the extended family./ Ann. Rev. Immunol. 1994, Vol. 12, p.720-741.

51. Meyer AD, Postma DS, Panhuysen CIM, et al. Evidence for a locus regulation total serum IgE levels mapping to chromosome 5./ Genomics 1994, Vol. 23, p. 464-470.

52. Меуег C, Appenzeller U, Seelbach H, et al. Humoral and cell-mediated I autoimmune reactions to human acidic ribosomal P2 protein in individuals sensitized to Aspergillus fumigatus./ J Exp Med 1999, Vol. 189, p. 15071512.

53. Morita A., Werfel Т., Stege H., Ahrens C., Karmann K., et al. Evidence that singlet oxygen-induced human T helper cell apoptosis is the basic mechanism of ultraviolet-A radiation phototherapy./ J Exp Med 1997, Vol.186, 1763-1768.

54. Mittermanna I, et al. Autoimmunity and atopic dermatitis./ Curr Opin Allergy Clin Immunol 2004, Vol. 4, p.367-371. I

55. Мое G.R., Tan S., Granoff D.M. Molecular mimetics of polysaccharide epitopes as vaccine candidates for prevention of Neisseria meningitidisserogroup В disease./ FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1999, Vol. 26, p. 209-226. !

56. Mossabeb R, Seiberler S, Mittermann I, et al. Characterization of a novel isoform of a-nascent polypeptide-associated complex as IgE-defmed autoantigen./ J Invest Dermatol 2002, Vol. 119, p. 820-829.

57. Moran A.P., Prendergast M.M. Molecular mimicry in Campylobacter jejuni lipopolysaccharides and the development of Gullain-Barre syndrome letter; comment./J. Infect. Dis. 1998, Vol. 178, p.1549-1551.

58. Moreno J. C. Gimenez. Atopic dermatitis (review article)./ Alergol Inmunol Clin 2000, Vol. 15, p. 279-295.I

59. Natter S, Seiberler S, et al. Isolation of cDNA clones coding for IgE autoantigens with serum IgE from atopic dermatitis patients./ FASEB J 1998, Vol. 12(14), p. 1559-1569.

60. Norton W.T., Cammer W. Isolation and characterization of myelin. In: Myelin (Ed. Morell P.)./ Plenum Press, N-Y. 1984, p. 147-195;

61. Perl A. Role of endogenous retroviruses in autoimmune diseases./ Rheum. Dis. Clin. North. Am. 2003, Vol. 29 (1), p. 123-43.

62. Renz H, Jujo K, Bradley K, Domenico J, Gelfand EW, Leung I, et al. Enhanced IL-4 production and IL-4 receptor expression in atopic dermatitis and their modulation by interferon-gamma./ J Invest Dermatol 1992, Vol.99, p. 403-408.

63. Rose NR, Bona C. Defining (Witebsky's postulates revisited)./ Immunol Today 1993, p. 426-430.

64. Rosenwasser L., Klemm D., Dresback J., et al. Promoter polymorphisms in the chromosome 5 gene cluster in asthma and atopy./ Clin Exp Allergy 1995, Vol.25 (2), p.74-78.

65. Schafer T, Dockery D, et al. Experiences with the severity scoring of atopic dermatitis in a population of German pre-school children./ Br J Dermatol 1997, Vol.137, p. 558-562.

66. Schafer T, Heinrich J, et al. Association between severity of atopic eczema and degree of sensitization to aeroallergens in schoolchildren./ J Allergy Clin Immunol 1999, Vol.104, p. 1280-1284.

67. Schmid-Grendelmeier P, Simon D., Simon HU. et al. Epidemiology, clinical features, and immunology of the "intrinsic" (non-IgE-mediated) type of atopic dermatitis (constitutional dermatitis)./ Allergy 2001, Vol.56, p.841-9 .

68. Schroeder JT, Lichtenstein LM, MacDonald SM. An immunoglobulin Edependent recombinant histamine-releasing factor induces interleukin-4 secretion from human basophils./ J Exp Med 1996, Vol.183, p. 1265-1270.

69. Shegal VN, Jain S. Atopic dermatitis: Clinical criteria./ Int J Dermatol 1993, Vol.32, p. 628-637.

70. Shichijo S, Nakao M, Imai Y, et al. A gene encoding antigenic peptide of human squamous cell carcinoma recognized by cytotoxic T lymphocytes./ J Exp Med 1998, Vol.187, p. 277-288.

71. Shults C.W., Whitaker J.N., Wood J.G. Myelin basic protein microheterogeneity in subfractions of rat brain myelin./ J. Neurochem. 1978, Vol.30, p. 1543-1551.

72. Sidorchuk A., Lagarde F., Pershagen G. et al. Epstein-Barr virus infection is not associated with development of allergy in children./ Pediatr. Infect. Dis. J., 2003, Vol.22 (7), p. 642-647.

73. Singh DP, Fatma N, Kimura A, et al. LEDGF binds to heat shock and stressrelated element to activate the expression of stress-related genes./ Biochem Biophys Res Comm 2001, Vol.283, p. 943-955.

74. Singh DP, Ohguro N, Kikuchi T, et al. Lens epithelium-derived growth factor: effects on growth and survival of lens epithelial cells, keratinocytes, and fibroblasts./ Biochem Biophys Res Commun 2000, Vol.267, p. 373-381.

75. Sowden J, Powell R, Alnlen B. Selective activation of circulating CD4+ lymphocytes in severe adult atopic dermatitis./ Br J Dermatol 1992, Vol.127, p. 228-232.

76. Spitzauer S, Schweiger C, Sperr WR, et al. Molecular characterization of dog albumin as a cross-reactive allergen./ J Allergy Clin Immunol 1994, Vol.93, p. 614-627.

77. Srinivasappa J., Saegusa J., Prabhakar B.S., et al. Molecular mimicry: Frequency of reactivity of monoclonal antiviral antibodies with normal tissues./ J. Virol. 1986, Vol.57, p. 397-401.

78. Stingl G, Maurer D. IgE-mediated allergen presentation via Fc epsilon RI on antigen-presenting cells./ Int Arch Allergy Immunol. 1997 May-Jul; Vol.113 (3), p. 24-29.

79. Trautmann A., Akdis M., Kleemann D., et al. T cell-mediated Fas-induced keratinocyte apoptosis plays a lceypathogenetlc role in eczeinatous dermatitis./ Clin. Invest 2000, Vol.106 (1), p. 25-35.

80. Uehara M, Kimura C. Descendant family history of atopic dermatitis./ Acta Derm Venereol (Stockh) 1993, Vol.73, p. 62-63.

81. Valenta R, Duchene M, Pettenburger C, et al. Identification of profilin as a novel pollen allergen: IgE autoreactivity in sensitized individuals./ Science 1991, Vol.253, p. 557-560.

82. Valenta R, Duchene M, Vrtala S, Birkner T, Ebner C, Hirschwehr R, Breitenbach M, Rumpold H, Scheiner O, Kraft D Recombinant allergens for immunoblot diagnosis of tree-pollen allergy./ J Allergy Clin Immunol 1991, Vol.88, p. 889-894

83. Valenta R. et al Autoallergy: A pathogenetic factor in atopic dermatitis?/ J Allergy clin immunol. 2000, Vol.3, p. 20-23.

84. Valenta R, Maurer D, Steiner R, et al. Immunoglobulin E responses to human proteins in atopic patients./ J Invest Dermatol 1996, Vol.107, p. 203-207.

85. Valenta R, Natter S, et al. Molecular characterization of autoallergen hom s 1, identified by serum IgE from atopic dermatitis patients./ J Invest Dermatol 1998, Vol.111, p. 1778- 1783.

86. Valenta R., Natter S., Seiberler S. et al. Identification of a novel human IgE-autoantigen (ara 1); a link between atopy and autoimmunity./ J Invest Dermatol. 1997, Vol .108 (4), p. 591.

87. Van Bohemen C.G., Grumet F.C., Zanen H.C. Identification of HLA-B27M1 and -M2 cross-reactive antigens in Klebsiella, Shigella and Yersinia./ Immunology 1984, Vol. 52, p. 607-610.

88. Watanabe A, Kodera M, Sugiura K, et al. Anti-DFS70 antibodies in 597 healthy hospital workers./ Arthritis & Rheumatism 2004, №50, p. 892-900.

89. Wedi В., Raap :U., Lewrick H., Kapp A. Delayed eosinophil programmed cell death in vitro: a common feature of inhalant allergy and extrinsic and intrinsic atopic dermatitis./ J Allergy Clin Immunol 1997, Vol.100 (4), p. 536-543.

90. Wu X, Daniels T, Molinaro C, et al. Caspase cleavage of the nuclear autoantigen LEDGF/p75 abrogates its pro-survival function: implications for autoimmunity in atopic disorders./ Cell Death Differ 2002, Vol.9, p. 915— 925.

91. Yamada K, Senju S, Shinohara T, et al. Humoral immune response directed against LEDGF in patients with VKH./ Immunology Lett 2001, Vol.78, p. 161-168.