Функционирование митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала при различных физиологических и патологических состояниях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.02, кандидат биологических наук Шигаева, Мария Ивановна

• Шигаева, Мария Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шигаева, Мария Ивановна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Системы транспорта калия в митохондриях.

1.1. Митохондриальный цикл калия.

1.2. Система входа калия в митохондрии.

1.3. Система выхода калия из митохондрий.

1.4. Физиологическое значение транспорта К+ в митохондриях.

2. Биофизические свойства митоКдтф.

2.1. Проводимость одиночного митоКдтф канала и их кластеризация.

2.2. Селективность и потенциалзависимость митоКатф.

3. Структурная организация митохондриального и цитоплазма-тического КАТф каналов.

3.1. Структурная организация цитоКдтф.

3.2. Структурная организация митоКАТФ.

4. Регуляция митоКдтф канала.

4.1. Метаболические модуляторы митоКатф канала.

4.1.1. Регуляция дифосфонуклеотидами.

4.1.2. Гормонал ъная регуля ция м ит оКа тф.

4.1.3. Регуляция митоК^гФ жирными кислотами.

4.2. Фармакологические модуляторы митоКатф канала.

4.3. Регуляция Катф каналов редокс-агентами.

5. Роль митоКдтф в кардиопротекции.

5.1. Роль митоКАтфВ адаптации организма к гипоксии.

5.2. Возможные механизмы защиты сердца при гипоксии, опосредованные активацией митоКАТФ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Моделирование острой ишемии и ишемии-реперфузии миокарда.

1.1. Моделировние острой экспериментальной ишемии миокарда.

1.2. Анализ электрокардиограмм.

1.3. Внутривенное введение животным модуляторов митоК^тФ.-.

1.4. Моделирование ишемии-реперфузии миокарда.

1.5. Определение зоны риска и зоны некроза миокарда методом двойного окрашивания.

2. НРЬС-анализ содержания уридиновых и адениновых нуклеотидов в ткани миокарда.

2.1 Приготовление проб ткани миокарда для НРЬС.

2.2. НРЬС-анализ содержания в пробе уридиновых и адениновых нуклеотидов.

3. Определение показателей энергетического обмена в ткани миокарда.

3.1. Определение уровня креатинфосфата в ткани миокарда.

3.2. Определение уровня гликогена в ткани миокарда.

3.3. Определение уровня лактата в ткани миокарда.

4. Определение показателей перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты в ткани миокарда.

4.1. Определение уровня гидроперекисей липидов.

4.2. Определение активности супероксиддисмутазы.

4.3. Определение уровня восстановленного глутатиона.

5. Выделение митохондрий из ткани сердца.

6. Выделение митохондрий из ткани печени.

7. Выделение и очистка К+-транспортирующего белка м.м. -55 кДа из митохондрий печени крыс.

8. Денатурирующий электрофорез в полиакриламидном геле.

9. Нативный электрофорез и электроэлюция белка с геля.

10. Реконструкция К+-транспортирующего белка м.м. 55 кДа в БЛМ.

11. Вестерн-блот анализ.

12. Получение и очистка антител к митохондриальному ¡^-транспортирующему белку с м.м. 55 кДа.

12.1. Иммунизация животных.

12.2. Очистка антител.

13. Непрямой дот-анализ титра антител.

14. Полярографическое определение параметров дыхания митохондрий.

15. Изучение энергозависимого входа К+ в МХ методом спектрофотометрии.

16. Исследование АТФ-зависимого ДНФ-индуцированного выхода К+ из митохондрий при помощи К+-селективного электрода.

17. Определение количества К+ в митохондриях.

18. Тестирование устойчивости животных к гипоксии.

19. Определение времени жизни и времени потери позы у животных в экспериментах in vivo.

20. Статистический анализ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Изучение механизмов кардиопротекторного действия активации митохондриального АТФ - зависимого калиевого канала на модели острой ишемии и ишемии-реперфузии миокарда.

1.1. Изменение уровня уридиновых нуклеотидов в плазме крови и ткани миокарда в условиях нормоксии.и острой ишемии.

1.2. Энергетический баланс и окислительные процессы при острой ишемии миокарда и их коррекция в результате активации митоКдтф.

1.2.1. Влияние активации митоКАТФ на энергетический статус ткани миокарда в условиях нормоксии и острой ишемии.

1.2.2. Влияние активации митоКАТФ канала на показатели системы антиокислительной защиты организма и перекисного окисления липидов при острой ишемии миокарда.

1.3. Антиишемический эффект активации митоКдтф на модели ишемии-репепрфузии миокарда.

1.4. Предполагаемый механизм антиишемического действия УМФ.

Глава 2. Адаптогенная роль митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала в формировании долгосрочной устойчивости организма к гипоксии.

2.1. Активация митоКАТФ в суспензии митохондрий печени и сердца флавоноидсодержащими препаратами, обладающими антигипоксическими свойсвами.

2.2. Исследование роли митоКдтф канала в формировании резистентности организма к гипоксии в условиях in vivo.

Глава 3. Функционирование митохондриальной системы транспорта калия при старении организма.

3.1. Возрастные изменения дыхания митохондрий.

3.1.1. Возрастные изменения дыхания митохондрий печени.

3.1.2. Возрастные изменения дыхания митохондрий сердца.

3.2. Возрастные изменения количества и скорости транспорта К+ в митохондриях печени и сердца.

3.3. Регуляция системы АТФ-зависимого входа К+ в митохондриях животных разного возраста.

3.3. Полуколичественный анализ белка, являющегося канальной субъединицей митоКдтф, в митохондриях печени и сердца крыс разного возраста.

Глава 4. Функционирование митоКдтф канала у гибернирующих животных в различных физиологических состояниях (спячка, пробуждение, летняя активность).

4.1. Параметры дыхания митохондрий печени и сердца сусликов, находящихся в различных физиологических состояниях.

4.1.1. Изменение дыхания митохондрий печени при смене метаболического состояния.

4.1.2. Изменение дыхания митохондрий сердца при смене метаболического состояния.

4.2. Изменение скорости АТФ-зависимого транспорта калия и его количества в митохондриях сердца и печени при смене метаболических состояний животного.

4.3. Регуляция митохондриального транспорта калия при помощи АТФ у животных, находящихся в различных метаболических состояниях.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функционирование митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала при различных физиологических и патологических состояниях»

Митохондриальный АТФ-зависимый калиевый канал (митоКдгф), осуществляющий вход калия в митохондрии, был обнаружен относительно недавно методом пэтч-кламп во внутренней мембране митохондрий [Inoue et al., 1991]. Однако, еще в 1981 г. в лаборатории проф. Мироновой из внутренней мембраны митохондрий был выделен белок м.м. ~60 кДа, обладающий свойствами данного канала [Миронова и др., 1981], и при реконструкции в БЛМ ингибируемый физиологическими концентрациями АТФ [Paucek et al., 1992; Миронова и др., 1996

I)]

В настоящее время к этому каналу привлечено внимание большого числа исследователей, как в области биоэнергетики, так и медицины, поскольку почти сразу после его обнаружения в клетке было установлено, что он играет ключевую роль в защите миокарда при ишемии [McCullough et al., 1991; Gross G. et al., 1992; Grover et al., 1994; Garlid et al., 1997; Vanden Hoek, 2000]. В частности, было показано, что введение животным фармакологических активаторов митоКатф непосредственно перед продолжительной ишемией оказывает эффект, подобный ишемическому прекондиционированию, т.е. приводит к положительным экспериментальным и клиническим результатам, таким как сокращение зоны инфаркта и восстановление ритма сердца, тогда как введение ингибитора канала предотвращало ишемическую прекондицию [Gross et al., 1992; Liu et al., 1998; Tsai et al., 2002; Krylova et al, 2006]. Однако, механизм такой кардиопротекции до сих пор не вполне понятен и требует изучения.

Биофизические свойства данного канала и его физиологическая роль в настоящее время достаточно хорошо исследованы [Inoue et al., 1991; Миронова и др., 1996 (I, И); Garlid et al., 1997; Grigoriev et al., 1999; Mironova et al., 1999; 2004]. Найден целый ряд синтетических активаторов митоКдтф, являющихся потенциальными кардиопротекторами [Gross et al., 1992; Liu et al., 1998; Sato et al., 1998; Tsai et al., 2002]. Показано, что ряд гормонов могут активировать этот канал [Tsai et al., 2002; Er et al., 2004; Nishida et al., 2009]. Ведется поиск других эффективных метаболических активаторов митоКЛГФ, которые имеют ряд преимуществ по сравнению с их синтетическими аналогами, поскольку их концентрацию в клетке можно регулировать, и они не обладают отрицательными побочными эффектами. Недавно в нашей лаборатории был обнаружен эффективный природный метаболический активатор митоКдтф - уридин-5'-дифосфат (УДФ) [Mironova et al., 2004] и показано эффективное антиишемическое и антиаритмическое действие его предшественников - уридина и уридин-5 монофосфата (УМФ) на модели острого инфаркта миокарда у крыс [Krylova et al., 2006]. Известно, что уридин, в отличие от самого УДФ, проникает в клетку [Matsushita et at., 1970]. Кроме того, в нашей же лаборатории было обнаружено, что при стимуляции работы митоКдтф активируется и система выхода калия из митохондрий в обмен на протон [Mironova 2007]. На основании выше указанных данных, было сделано предположение, что результатом активации рециклизации калия в митохондриях может быть снижение интенсивности окислительного стресса и, как следствие, восстановление энергетического баланса в ишемизированном миокарде.

По данным ряда исследователей [Ferranti R. et al, 2003; Garlid et al., 2003], митоКАТФ может регулировать продукцию активных форм кислорода, генерация которых существенно возрастает как при ишемии, так и в процессе старения организма. Поскольку при старении увеличивается риск возникновения ишемических повреждений тканей, можно предположить наличие возрастных изменений в функционировании митоКдтф канала. Выявление этих изменений позволит осуществить коррекцию используемых методов кардиопротекции, а также предложить новые пути лечения сердечно-сосудистых заболеваний и ишемических повреждение различных тканей.

Ранее было показано, что усиление процесса транспорта катионов и, в частности, калия в митохондриях имеет первостепенное значение для поддержания теплообразования в некоторых тканях гибернирующих животных, обеспечивая интенсивный несократительный термогенез при пробуждении в условиях неактивной митохондриальной АТФ-синтетазы при низких температурах тела (2-25°С) [Миронова и др., 1986]. Изучение особенностей АТФ-зависимого транспорта К+ у гибернирующих животных, находящихся в различных физиологических состояниях, начатое ранее в нашей лаборатории Федотчевой Н.И. [Fedotcheva et al., 1985], позволит лучше понять механизмы несократительного термогенеза при разогреве зимоспящих животных от критически низких температур до температуры тела.

В связи с вышеуказанным, в настоящей работе был исследован механизм кардиопротекторного действия физиологического активатора канала - уридин-5'-дифосфата при ишемии миокарда. Также изучены особенности функционирования митоКатф при некоторых физиологических и метаболических состояниях организма и его роль в повышении общей долгосрочной толерантности организма к гипоксическим условиям и процессе терморегуляции.

Цель работы: изучить механизм кардиопротекторного действия активаторов митоКатф при ишемии, а также функциональную роль канала при ряде патологических и физиологических состояний организма, в частности при старении и в терморегуляции организма.

В соответствии с целью работе были поставлены и решены следующие задачи:

1) Изучить влияние активатора митоКЛТф канала на энергетический обмен миокарда и систему антиоксидантной защиты в условиях нормоксии и острой ишемии на модели острой ишемии миокарда;

2) На модели «ишемия-реперфузия» миокарда исследовать, влияние активатора митоКатф на снижение зоны инфаркта, подобрав при этом оптимальную схему его введения;

3) В экспериментах in vitro и in vivo показать адаптогенный эффект активации митоКдтф в формировании долгосрочной устойчивости организма к гипоксическим условиям;

4) Выявить изменения функционирования митоКатф канала при старении организма;

5) На модели гибернирующих сусликов исследовать роль митоКатф канала в механизме несократительного термогенеза.

Новизна исследования. Впервые обнаружено, что активация митоКатф его природным активатором в условиях ишемии миокарда способствует сохранению энергетического и антиокислительного статуса миокарда. Предположено, что эти свойства канала могут лежать в основе механизма, опосредующего кардиопротекторный эффект активации митоКдтф при инфаркте миокарда. Впервые установлено антиишемическое действие метаболической активации канала на модели ишемии-реперфузии миокарда, при этом подобрана наиболее эффективная схема введения препарата. В экспериментах как in vitro, так и in vivo, впервые показан адаптогенный эффект активации митоКАТФ растительным антигипоксическим препаратом флавоноидного ряда. В данной работе впервые обнаружено снижение функционирования митоКАТф канала в митохондриях печени и сердца крыс в процессе старения организма. Также впервые показана активация цикла калия в митохондриях сердца при выходе гибернирующих животных из спячки.

Научно-практическое значение работы. Предложенный в работе механизм защитного влияния активации митоКдтф при ишемии и ишемии-реперфузии может служить основой для разработки средств профилактики и лечения ишемических повреждений миокарда. Предшественники метаболического активатора митоКАТФ, использованные в работе - уридин и уридин-5'-монофосфат, могут быть использованы для создания новых эффективных антиишемических лекарственных препаратов, действие которых опосредуется активацией митоКАтФ. Показанный в работе адаптогенный эффект активатора канала растительного происхождения открывает перспективу его использования для формирования долгосрочной толерантности организма к гипоксическим условиям. Выявленное в работе снижение функционирования митоКдтф с возрастом также позволит более четко разработать методы профилактики и, возможно, лечения ишемических повреждений миокарда. Обнаруженные изменения в функционировании канала у гибернирующих животных, находящихся в различных физиологических состояниях, помогут лучше понять механизмы несократительного термогенеза у теплокровных животных.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Шигаева, Мария Ивановна

выводы.

1. Показано что УМФ крови может быть источником образования в клетках миокарда метаболического активатора митоКАТф канала -УДФ;

2. На модели острого инфаркта миокарда у крыс установлено, что внутривенное введение УМФ приводит к предупреждению распада макроэргических соединений (АТФ и креатинфосфата), а также гликогена в ишемизированном миокарде, за счёт активации митоКАТФ канала;

3. Показано, что активация митоКАТФ канала устраняет нарушения окислительно-восстановительных процессов в миокарде, наблюдаемые при ишемии, что лежит в основе предлагаемого в работе механизма кардиопротекторного действия активаторов канала;

4. На модели ишемия-реперфузия, также как и на модели острой ишемии, при активации митоКАТФ канала наблюдается выраженный кардиопротекторный эффект, заключающийся в снижении зоны некроза миокарда;

5. Обнаружено, что антигипоксический флавоноид-содержащий препарат растительного происхождения активирует митоКАТФ канал как в эксперименте in vitro, так и in vivo приводя, в условиях целого организма, к значительному повышению общей толерантности организма к гипоксии;

6. Установлено, что активность митоКАтФ канала значительно снижается по старения животных, что частично связано с нарушением регуляции и экспрессии белка-канала;

7. Показана значительная активация митоКАТФ канала при выходе животных из состояния спячки, частично связанная с изменением регуляции белка-канала в митохондриях, что может играть важную роль в повышении теплообразования в этом состоянии.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящей работе были исследованы особенности функционирования митоКдтф при разных метаболических (старение, гибернация) и патологических (острая ишемия, ишемия-реперфузия) состояниях организма.

Ранее в нашей лаборатории был обнаружен метаболический активатор митоКатф - уридин-5'-дифосфат (УДФ), который, однако, не способен транспортироваться в клетку через клеточную мембрану из плазмы крови. Из литературы было известно, что один из предшественников УДФ - уридин способен свободно проникать в клетку [Matsushita et al., 1970], однако в отношении УМФ такой способности ранее показано не было.

В данной работе показано увеличение пула уридиновых нуклеотидов в миокарде при внутривенном введении УМФ. В состоянии острой ишемии, по сравнению с состоянием нормоксии этот пул увеличивается, особенно за счет фракции УДФ, который, как сказано выше, является активатором митоКЛТФ. Активация же митоКЛТФ при введении УМФ, как было нами показано ранее [Krylova et al., 2006], имеет ярко выраженный кардиопротекторный эффект, который заключается в уменьшении индекса ишемической альтеррации миокарда и нормализации ритма. Однако механизм, посредством которого активация митоКЛТФ приводит к защите миокарда от ишемических повреждений, был не вполне понятен.

Известно, что одним из негативных последствий ишемии миокарда является существенное падение уровня макроэргов в клетке, в частности АТФ и креатинфосфата. В результате проведенных исследований было выяснено, что предварительное введение животным УМФ за 5 минут до окклюзии ЛКА, способствующего активации митоКАТФ, приводило к восстановлению количества креатинфосфата и АТФ в ишемизированном миокарде до уровня контроля. При введении препарата УМФ на фоне селективного ингибитора митоКдтф - 5-гидроксидеканоата уровень обоих макроэргов в миокарде снижался до величин, наблюдаемых в условиях острой ишемии. Следовательно, активация митоКатф в кардиомиоцитах в условиях ишемии оказывает выраженное энергосберегающее действие.

Одним из способов активации энергетического обмена в ишемизированной ткани является поддержание субстратного обеспечения гликолиза, который играет важную роль в образовании макроэргических соединений в кардиомиоцитах. В условиях ишемии запасы субстратов гликолиза (глюкозы и гликогена) быстро истощаются. Проведенные исследования показали, что при введении УМФ происходит нормализация содержания гликогена в миокарде, однако ингибитор митоКдтф - 5-ГД практически не обращает этот эффект, свидетельствуя об отсутствии влияния активации митоКАТФ канала на этот процесс. По всей видимости, это происходит за счет увеличения в клетке, при введении животным УМФ, УДФ-глюкозы, используемой для синтеза гликогена.

При ишемии, помимо снижения в миокарде количества макроэргов и субстратов гликолиза и окислительного фосфорилирования, увеличивается интенсивность окислительного стресса, которая выражается усилением перекисного окисления липидов, снижением активности глутатионовой системы и ферментов, утилизирующих образовавшиеся АФК. Профилактическое введение УМФ, приводящее к активации митоКдтф канала, снижало уровень ГПЛ до уровня контрольных животных, предотвращало падение.уровня ВГ в миокарде в условиях ишемии и способствовало сохранению на, прежнем уровне активности СОД. Эти положительные эффекты УМФ полностью устранялись ингибитором митоКАТФ 5-ГД, что свидетельствует о сохранении равновесия процессов ПОЛ и активности антиоксидантной системы именно на фоне активации митоКЛТФ.

Механизм действия' УМФ - предшественника активатора митоКАТФ (УДФ), может быть связан с активацией всего цикла калия в митохондриях, работа которого приводит к слабому разобщению и, как следствие, предупреждает образование в митохондриях АФК. Это, в свою очередь, может предупреждать увеличение ГПЛ, восстановление глутатиона и падение активности антиоксидантных ферментов, наблюдаемые при ишемии без введения препарата.

На модели ишемии-реперфузии также было показано, что УМФ обладает кардиопротекторным эффектом УМФ. Он заключается в снижении зоны некроза миокарда, наиболее выраженном при двукратном введении препаратов: за 30 мин до окклюзии ЛЕСА и за 5 мин до реперфузии. Этот эффект может быть связан с увеличением суммарной дозы препарата или с предварительной инициацией эндогенных защитных механизмов. При этом ведущую роль в реализации антиишемичеекого действия УМФ играют митоКдтф - каналы, о чем свидетельствует отсутствие эффекта препарата при их введении на фоне селективного ингибитора 5-ГД.

Полученные в работе данные о снижении интенсивности окислительного1 стресса в условиях ишемии и сохранении высокого уровня макроэргических соединений в клетке, свидетельствуют в пользу развиваемого в лаборатории представления о механизмах кардиопротекторного действия митоКдтф- Согласно нашим представлениям, введенный УМФ проникает через клеточную мембрану и фосфорилируется в клетке до УДФ, повышая его концентрацию. УДФ, будучи природным активатором митоКЛТФ [Mironova et al., 2004], приводит к его активации в миокарде. Активация! входа1 К+ в митохондрии сопровождается его выходом в обмен на Н+, то есть, активацией К+/Н+-обмена в митохондриях [Schonfeld et al., 2003; Schalbuyeva.et al., 2006; Mironova et al., 2010]! Активация же цикла K+ в митохондриях приводит к их разобщению,, что сопровождается снижением скорости образования, активных форм кислорода [Korshunov et' al., 1997]. Снижение генерации^ АФК предупреждает окисление белков И' липидов мембран, наблюдаемое при глубокой', гипоксии и, приводящее к некрозу ткани [Griffits & Halestrap 1995]; а также предупреждает образование в митохондриях митохондриальной. Са2+-активируемой GsA-чувствительной поры, открытие которой также ведет к некрозу ткани [Crompton 1999, Kowaltovsky et al., 1998, 2001].

В экспериментах in vitro и in vivo, с использованием антигипоксических флавоноидсодержащих препаратов, было показано, что активация этими препаратами митоКдтф канала способствует увеличению долгосрочной общей толерантности организма к экстремальным гипоксическим условиям, что выражалось существенным увеличением времени потери позы и времени жизни животных на критической высоте. Таким образом, был сделан вывод, что активация канала в субкритических условиях оказывает адаптогенный эффект.

При исследовании возрастных изменений функционирования митоКдтф было показано значительное снижение активности канала по мере старения животных. В" совокупности с данными об уменьшении количества К+ в митохондриях печени и сердца старых животных это может свидетельствовать о снижении активности всего митохондриального цикла К+ при старении. Обусловлено это, как показано в работе, как некоторым снижением экспрессии митоКлтф в клетках при старении животных, так и изменениями его чувствительности к регуляторам. Транспорт К+ в митохондриях сердца при старении организма становится менее чувствительным к АТФ и, возможно, к другим регуляторам, по сравнению с митохондриями печени, что может иметь адаптивное значение в связи с необходимостью постоянной сократительной работы сердца, вне зависимости от внешних условий.

Усиление транспорта калия в митохондриях печени и сердца способствует активации термогенеза при выходе гибернирующих животных из состояния спячки, а величина активности митоКдтф коррелирует с изменениями температуры тела у гибернирующих животных. В состоянии глубокой спячки, когда все обменные процессы в организме заторможены, активность митоКдтф также очень низка, однако резко повышается во время пробуждения, когда необходим быстрый разогрев животного. Это может приводить к локальному падению- мембранного потенциала и в результате к легкому разобщению дыхательной цепи, что в свою очередь приводит к усилению теплообразования. Т.о., активация митоКдтф может являться основным механизмом, запускающим несократительный термогенез.

Таким образом, можно заключить, что активация митоКАТФ способствует защите сердца от гипоксии, предупреждает развитие ишемических повреждений миокарда, в том числе при старении, а также является важным звеном в прцессе несократительного термогенеза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шигаева, Мария Ивановна, 2010 год

1. Бакеева Л.Е., Брустовецкий H.H. Межмитохондриальные септированные контакты в клетках печени суслика Citelius undulates при зимней спячке.// Биол: Мембр. 1993, 13(1): 36-43.

2. Иванов К.П. Современная теория терморегуляции и зимняя спячка. // Эволюционные аспекты гипобиоза и зимней спячки. 1986, с. 49-54.

3. Качаева Е.В. Митохондриальный АТФ-чувствительный калиевый канал и его роль в адаптации организма к гипоксии. Кандидатская диссертация. Пущино, 2007.

4. Кондрашова М.Н., Ахмеров Р.Н., Григоренко Е.В., Федотчева Н.И., Миронова Г.Д. Торможение окисления янтарной кислоты как причина снижения теплопродукции при спячке. // Эволюционные аспекты гипобиоза и зимней спячки. 1986, с. 55-60.

5. Ленинджер А. Митохондрии. М., «Мир», 1966.

6. Ленинджер А. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функции клетки. М., «Мир», 1974.

7. Лукьянова Л.Д., Германова Э.Л., Лыско А.И. Энерготропное, антигипоксическое и антиоксидантное действие флавоноидов1. // Вестник РАМН. 2007. №2. С.55-62.

8. Методы биохимических исследований. Под ред. М.И.Прохоровой.- • Л.:Изд-во Ленингр.Университета, 1982.

9. Миронова Г.Д., Федотчева Н.И., Макаров П.Р., Проневич Л.А., Миронов Г.П. Белок из митохондрий сердца быка, инициирующий канальную калиевую проводимость бислойных липидных мембран. // Биофизика. 1981, 26(3): 451-457.

10. Миронова Г.Д. Катион-транспортирующие белки митохондриальной и цитоплазматической мембран. Диссертация доктора биологических наук. 1985, 270с.

11. Миронова Г.Д., Маслова Г.М., Федотчева Н.И., Миронов Г.П. Участие мтиохондриальных систем транспорта в термогенезе теплокровных животных. // В сб. Эволюционные аспекты гипобиоза и зимней спячки. Л.: Наука. 1986, с.64-68.

12. Миронова Г.Д., Федотчева Н.И., Скарга Ю.Ю., Кондрашова М.Н. Транспорт калия и дыхание митохондрий при выходе суслика из состояния зимней спячки. // Механизмы зимней спячки. Пущино, 1987, с. 39-47.

13. Миронова Г.Д., Федотчева Н.И., Скарга Ю.Ю., Копецки Я., Хоуштек И. Сравнительный анализ термогенных систем митохондрий печени и бурой жировой ткани. // Механизмы природных гипометаболических состояний. Пущино, 1991, с. 34-43.л

14. Миронова Г.Д., Скарга Ю.Ю., Григорьев С.М., Яров-Яровой В.М., Александров А.В., Коломыткин О.В. АТФ-зависимый калиевый канал митохондрий печени крысы. I. Выделение, очистка и реконструкция канала в БЛМ.//Биол. Мембр. 1996, т. 13, № 4, с.396-404.

15. Миронова Г.Д., Григорьев С.М., СкаргаЮ.Ю., Негода А.Е., Коломыткин О.В. АТФ-зависимый калиевый канал митохондрий печени крысы. II. Ингибиторный анализ, кластеризация канала. 1996, т. 13, № 5,с. 537-544.

16. Миронова Г.Д., Качаева Е.В., Копылов А.Т. Митохондриальный АТФ-зависимый калиевый канал I. Структура канала, механизмы его функционирования и регуляции. Вестник Российской АМН, 2007, №2, с 24-33.

17. Миронова Г.Д., Качаева Е.В., Балина М.И., Крылова И.Б., Родионова О.М., Евдокимова Н.Р., Сапронов Н.С. Митохондриальный АТФ -чувствительный калиевый канал. II. Роль канала в защите сердца от ишемии, Вестник Российской АМН, 2007, №2, с. 34-43;

18. Негода А.Е. Механизм функционирования и регуляция митохондриального КАТФ канала. // Диссертация кандидата биологических наук. 2001, 120с.

19. Негода А.Е., Качаева Е.В., Миронова Г.Д., Чайлахян Л.М. Механизм регуляции митохондриального АТФ-чувствительного калиевого канала адениновыми нуклеотидами. // Доклады Академии Наук, 2005, т.400, №1, с. 1-4.

20. Петрищев Н.Н., Шляхто Е.В., Власов Т.Д., Галагудза М.М. Ишемическая адаптация миокарда: патофизиологические механизмы и возможные перспективы практического применения. Российский Физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2001; 87(5): 688-705.

21. Скарга Ю.Ю. Система электрогенного транспорта ионов калия в митохондриях и ее участие в термогенезе бурой жировой ткани . // Дисс.Канд.биол.наук.1994, с. 101.

22. Федотчева Н.И., Мирзабеков Т.А., Миронов Г.П., Миронова Г.Д. Изменения транспорта калия в митохондриях печени сусликов при зимней спячке. // Укр.Биохим.Журн. 1984, 54(2): 190-193.

23. Федотчева Н.И. Система транспорта ионов К+ в митохондриях и ее функционирование в гипометаболических состояниях. Дисс.Канд.биол.наук.1989, с. 139.

24. Шортанова Т.Х., Шугалей В.С., Головина Т:Н. Особенности регуляции метаболизма у зимнеспящих. // Эволюционные аспекты гипобиоза и зимней спячки. 1986, с. 40-43.

25. Aguillar-Bryan L., Nichols С., Wechesler S., Clement J., Boyd A., Gonzales G., Herrera-Sosa H., Nguy K., Nelson D. Cloning of the b-cell high-affinity sulfonylurea receptor: a regulator of insulin secretion. // Science. 1995, 268: 423-426.28