Функциональные полистирольные и полиглицидилметакрилатные микросферы, получение, модификация и свойства для создания диагностических тест-систем тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат наук Сиваев Андрей Александрович

• Сиваев Андрей Александрович
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Сиваев Андрей Александрович

ВВЕДЕНИЕ.................................................................Error! Bookmark not defined.

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Теории формирования полимерно-мономерных частиц при гетерофазной полимеризации мономеров различной природы

1.1.1.Эмульсионная полимеризация

1.1.2.Безэмульгаторная полимеризация

1.1.3. Затравочная полимеризация

1.1.4. Суспензионная полимеризация

1.1.5. Дисперсионная полимеризация

1.1.6. Факторы, определяющие устойчивость синтетических латексов

1.2. Реакция латексной агглютинации

1.2.1. Полуколичественные методы анализа

1.2.2. Количественные методы анализа с участием полимерных микросфер

1.2.3. Комплексные методы анализа с участием полимерных микросфер

1.2.4. Полимерные микросферы для количественного определения нейтрофильных внеклеточных ловушек

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Исходные вещества

2.2. Методы исследования

2.2.1. Определение размера частиц полимерных суспензий

2.2.2. Электронная сканирующая микроскопия

2.2.3. Световая микроскопия

2.2.4. Определение скорости седиментации полимерных микросфер

2.2.5. Проведение реакции Майяра между аминогруппами полимерных микросфер и сахаридами: глюкозой, декстранами с молекулярной массой 15000 Да, 60000 Да, 500000 Да

2.2.6. Проведение реакции Майяра между аминокислотой - глицином и сахаридами: глюкозой, декстраном 15000, декстраном 60000 и декстраном

2.2.7. Исследование диффузии молекул флуоресцентных производных декстранов и глюкозы в порах полимерных микросфер

2.2.8. Подготовка образцов для конфокальной микроскопии

2.2.9. Измерение размеров нейтрофильных внеклеточных ловушек

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.1. Дисперсионная полимеризация стирола в среде спирт/вода при регулировании температуры на начальной стадии процесса

3.1.2. Затравочная сополимеризация стирола с дивинилбензолом

3.1.3. Модификация полистирол-дивинилбензольных частиц

3.1.4. Сополимерные стирол-дивинилбензольные микросферы в качестве носителей биолигандов

3.1.5. Синтез полимерных микросфер со средним диаметром частиц

мкм

3.2. Синтез сополимерных полиглицидилметакрилатных(ПГМА)-полиэтиленгликольдиметакрилатных (ПЭГДМА) суспензий и их модификация

3.3. Исследование структуры полимерных микросфер

3.4. Окрашивание полимерных микросфер

3.5. Создание тест-систем для определения нейтрофильных внеклеточных ловушек

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение

Широкое распространение эритроцитарных диагностикумов связано с высокой чувствительностью и специфичностью, простотой постановки реакции латексной агглютинации (РЛА), невысокой стоимостью проводимого анализа. Однако существенными недостатками таких тест -систем является антигенная специфичность эритроцитов, обуславливающая протекание неспецифических реакций, что приводит к ложноположительным результатам и в ряде случаев требует постановки специальных контролей, содержание животных, из крови которых получают эритроциты, трудоемко и дорогостояще, зависимость свойств эритроцитов от источника и способа их выделения (клетки одних и тех же животных не дают постоянный титр), зависимость степени агглютинации от длительности хранения диагностикума.

Указанные недостатки создают заметные трудности для внедрения эритроцитарных диагностикумов в широкую практику, поэтому вместо эритроцитов было предложено использовать другие носители биолигандов: микробные клетки, сефадекс, коллоидное золото, полимерные частицы. Выбор носителя во многом определяет такие характеристики серологических реакций как чувствительность, специфичность и воспроизводимость.

Полимерные микросферы с узким распределением частиц по размерам и функциональными группами на поверхности представляют большой интерес для использования в качестве носителей биолигандов вместо эритроцитов.

Однородность частиц по размерам позволяет достаточно точно

определить площадь поверхности носителя и установить степень ее

покрытия биолигандом, кроме того, она обусловливает сходный характер их

поведения во время агглютинации, что облегчает "прочтение" результатов

реакции латекс-агглютинации. Впервые, для создания диагностических тест-

систем были использованы полистирольные микросферы. Было показано, что

полистирол, благодаря своей оптической прозрачности, высокой

4

адсорбционной способности, прочности и хорошей воспроизводимости свойств, особенно перспективен в качестве носителя биолигандов.

Для замены эритроцитов, полимерные микросферы должны обладать определенными свойствами: скорость седиментации 3 - 8 мм/час, диаметр частиц порядка 5 мкм, агрегативная устойчивость в воде и буферных растворах высокой ионной силы, наличие в поверхностном слое функциональных групп, доступных для ковалентного связывания с функциональными группами белков, узкое РЧР.

Особое внимание при этом уделяется свойствам поверхности микросфер, от которых существенно зависит иммобилизация биолигандов, устойчивость полимерных микросфер и т.д.

Свойства частиц полимерной суспензии определяются способом получения. Полимерные суспензии, частицы которых могут быть использованы в качестве носителей биолигандов, получают методом гетерофазной полимеризации. К гетерофазной относятся эмульсионная, суспензионная, осадительная, дисперсионная, затравочная полимеризации и др. Различаются они способами проведения процесса, типами используемых ПАВ и размерами образующихся частиц. Методом эмульсионной полимеризации получают полимерные суспензии с диаметрами частиц 0,030,2 мкм, суспензионной - 0,3 мкм до 1 мм, осадительной - 1-100 мкм, дисперсионной - 1-15 мкм и затравочной - 1-10 мкм. Типичные значения коэффициента вариации (мера отклонения диаметров частиц от среднего значения) составляют 1-3% (для частиц с диаметром в интервале 0,1-10мкм) 10-30% (для частиц с диаметром в интервалах менее 0,06 и более 10мкм).

К настоящему времени широко проводятся работы по синтезу

полимерных микросфер различной природы в широком интервале диаметров

частиц с узким распределением по размерам. Многие из них апробированы с

положительным заключением в качестве носителей биолигандов в реакциях

РЛА, однако выпуска их в промышленном масштабе нет. Кроме того,

остается актуальным вопрос о чувствительности тест-систем и их

5

устойчивости при хранении. Это делает все исследования, направленные на повышение чувствительности РЛА, актуальными. Помимо этого, возникают новые задачи по применению полимерных микросфер для решения других актуальных проблем, например, созданию тест-систем для количественного определения нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) в крови.

НВЛ с одной стороны функционируют как эффективный противомикробный барьер, а с другой стороны, их избыток ведет к развитию воспалительных процессов и осложнению протекания различных патологических состояний. По этой причине актуальным остается поиск способов обнаружения НВЛ и подсчета их числа. Для решения этой проблемы предложено использовать полимерные микросферы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональные полистирольные и полиглицидилметакрилатные микросферы, получение, модификация и свойства для создания диагностических тест-систем»

Актуальность темы

В настоящее время полимерные микросферы широко используются в различных областях науки и техники, в том числе приходят на замену материалам природного происхождения.

Например, в медицине широко используются гемагглютинационные диагностические тест-системы, основанные на протекании реакции антиген -антитело, в которых в качестве носителей биолигандов выступают эритроциты. Аналог таких систем - полимерные носители с иммобилизованными на их поверхности биолигандами. Синтетические носители биолигандов, полимерные микросферы, предлагаемые вместо эритроцитов, имеют как достоинства, так и недостатки. К основным преимуществам можно отнести простоту получения и длительные сроки хранения. Недостаток - более низкая чувствительность тест-систем в сравнении с эритроцитарнымидиагностикумами, поэтому актуальны исследования, направленные на повышение чувствительности тест-систем с использованием полимерных микросфер.

Значительное влияние на чувствительность и специфичность диагност

икумов оказывает количество молекул биолиганда (плотность),

иммобилизованного на поверхность полимерных микросфер. Расчеты

6

плотности расположения молекул биолигандов на поверхности микросфер не всегда совпадают с экспериментальными данными. Это может быть обусловлено тем, что при их иммобилизации может происходить изменение конформации биолиганда и, как следствие этого, изменение его аффинности по отношению к молекулам определяемого вещества. Кроме того, возможно, что некоторая часть молекул биолиганда проникает внутрь частиц полимерного носителя, что может значительно занижать реальную плотность его расположения на поверхности микросфер, и тем самым снижать чувствительность реакции латексной агглютинации.

В этом случае могут играть роль такие свойства полимерных микросфер, как их пористость, т.е. размеры пор как на поверхности, так и в объеме полимерных частиц. В данном исследовании впервые предлагается метод изучения пористости полимерных микросфер и их размера методом конфокальной микроскопии с применением в качестве меток флуоресцентных производных сахаридов. В основе их получения впервые использована реакция Майяра между аминогруппами, расположенными на поверхности полимерных микросфер, и альдегидными группами декстранов разной молекулярной массы.

Чувствительность при визуализации РЛА можно также повысить путем

окрашивания полимерных частиц. Самым простым вариантом окрашивания

частиц является введение в мономерную фазу гидрофобных красителей при

проведении гетерофазной полимеризации. В данной работе будут

рассмотрены новые подходы к окрашиванию полимерных суспензий.

Полимерные микросферы, предлагаемые для использования в биотехнологии

и в иммунохимических исследованиях, должны иметь узкое распределение

по размерам и строго сферическую форму. При синтезе полимерных

микросфер с такими свойствами в первую очередь необходимо

контролировать начальную стадию полимеризации, на которой формируются

частицы. В работе рассмотрено влияние температурного режима процесса

синтеза на начальной стадии на формирование частиц и их распределение по

7

размерам для выявления условий полимеризации, при которых образуются полимерные суспензии с узким распределением частиц по размерам.

Очень важным показателем, влияющим на протекание РЛА, и в первую очередь на чувствительность реакции, является образование агрегатов частиц, заметно влияющих на формирование осадка в процессе реакции агглютинации. В работе предложены пути повышения устойчивости частиц в процессе их синтеза, за счет проведения дополнительной затравочной полимеризации стирола при его низкой концентрации в присутствии поливинилового спирта.

Другое актуальное и важное направление основано на создании модифицированных гепарином полимерных микросферах, где последние выступают в качестве своеобразных сорбентов нейтрофильных внеклеточных ловушек. Это особые сетевидные структуры, выбрасываемые во внеклеточное пространство нейтрофильными лейкоцитами при активации, способные электростатически взаимодействовать с гепарином, иммобилизованным на поверхности частиц.

При некоторых заболеваниях (сахарный диабет, ревматоидный артрит, онкологические заболевания) происходит образование большого количества нейтрофильных внеклеточных ловушек в потоке крови, что приводит к развитию тяжелых осложнений. В связи с этим чрезвычайно актуальной является проблема определения их количества и методов удаления их из крови. В данной работе предлагается эти проблемы решить с применением полимерных микросфер.

Цель

синтез полистирольных и полиглицидилметакрилатных микросфер с узким распределением по размерам и их модификация (хлорметилирование, аминирование, иммобилизация декстрана) для создания новых высокочувствительных диагностических тест-систем, для оценки активации нейтрофильных лейкоцитов, для количественного определения

нейтрофильных внеклеточных ловушек в крови и повышения чувствительности реакции латексной агглютинации.

Для достижения поставленной цели необходимо:

1. Оценить роль регулирования температуры реакционной среды на начальной стадии дисперсионной полимеризации стирола и глицидилметакрилата в формировании распределения полимерных частиц по размерам и их среднего диаметра;

2. Синтезировать полистирольные микросферы с диаметрами 0,20,4 мкм с узким распределением по размерам методом гетерофазной полимеризации в микрокаплях мономера;

3. Изучить набухание мономера в затравочных частицах разного размера и определить оптимальное массовое соотношение мономер/полимер для проведения затравочной полимеризации;

4. Разработать способ контролируемой модификации полистирольных микросфер методом хлорметилирования;

5. Провести аминированиехлорметилированных полистирольных и полиглицидилметакрилатных микросфер первичными аминами, этилендиамином и гексаметилендиамином, и оценить влияние этой модификации на физико-химические свойства полимерных микросфер;

6. Изучить метод определения пористости в полимерных микросферах с помощью флуоресцентных производных, продуктов реакции Майяра, между аминогруппами полимерных частиц и альдегидными группами декстранов разной молекулярной массы;

7. Повысить чувствительность реакции латексной агглютинации за счет использования полимерных суспензий, не содержащих агрегаты полимерных микросфер;

8. Синтезировать методом затравочной полимеризации полистирольные микросферы с диаметром 100 -140 мкм, провести их хлорметилирование и аминирование для использования в качестве сорбента

для извлечения нейтрофильных внеклеточных ловушек из крови и тест-систем для оценки активации нейтрофильных лейкоцитов. Научная новизна

-впервые разработана методология получения полистирольных и

полиглицидилметакрилатных микросфер с различными диаметрами,

модифицированных путем хлорметилирования, аминирования и

иммобилизации декстрана, которые рекомендованы для создания

высокочувствительных диагностических тест-систем (титр 1:6400), для

оценки активации нейтрофильных лейкоцитов и в качестве сорбентов для

извлечения нейтрофильных внеклеточных ловушек из крови;

-установлено, что на формирование узкого распределения частиц по

размерам и на кинетику роста диаметра частиц влияет регулирование

температуры на начальной стадии дисперсионной полимеризации в

определенном интервале времени и значений;

-впервые показано влияние природы аминирующего агента

(этилендиамина и гексаметилендиамина) и среды аминирования (воды, н-

пропанола) на физико-химические свойства поверхности частиц

(гидрофильность поверхности, ^-потенциал, скорость седиментации,

содержание функциональных (амино)групп) и показано, что полимерные

частицы, модифицированные ЭДА, во всех случаях седиментируют с

образованием рыхлого осадка из-за гидратации поверхностных аминогрупп и

групп, находящихся в поверхностном и приповерхностном слоях. При

аминировании полимерных микросфер гексаметилендиамином уменьшается

концентрация первичных аминогрупп в поверхностном слое полимерных

микросфер, увеличивается угол смачивания и при седиментации частиц

образуется плотный осадок;

-разработан метод определения диаметров пор в полимерных

микросферах в диапазоне от 1 нм до нескольких десятков нанометров с

помощью флуоресцентных производных, продуктов реакции Майяра, между

аминогруппами полимерных микросфер и альдегидными группами

10

декстранов разной молекулярной массы. Показано, что эта реакция протекает во всем объеме полимерных микросфер, тем самым диаметр пор в полимерных микросферах составляет величину порядка 30 нм;

-разработан метод синтеза полимерных микросфер с диаметрами 100 мкм и узким распределением по размерам затравочной полимеризацией стирола с четвертичными аминогруппами на поверхности, проведена их модификация хлорметилированием и аминированием, изучено их взаимодействие с компонентами крови и разработана тест-система для оценки активации нейтрофильных лейкоцитов;

-разработана диагностическая тест-система для количественного определения нейтрофильных внеклеточных ловушек в крови с использованием модифицированных полимерных микросфер;

-в разработанных методах создания новых диагностических тест-систем сохранены все этапы ранее принятой технологии для их получения, т.е. не требуется обучения персонала;

-выбран способ окрашивания полимерных микросфер азофенолметакрилатом как наиболее эффективный и обеспечивающий стабильную окраску частиц;

-предложены и испытаны пути повышения чувствительности при визуализации РЛА: окрашивание полимерных суспензий, дополнительная стадия затравочной полимеризации, приводящая к изменению ГЛБ поверхности частиц и отсутствию агрегатов частиц; Практическая значимость работы

Созданы рецептуры синтеза и модификации микросфер различной

полимерной природы со свойствами, позволяющими использовать их в

биотехнологии (латекс-агглютинация, оценка активации и количественного

определения нейтрофильных лейкоцитов). Разработанные диагностические

тест-системы с использованием модифицированных полимерных микросфер

в качестве носителей биолигандов были апробированы с положительным

результатом для определения уровня антител к дифтерийному анатоксину в

11

сыворотках крови человека, а также в качестве сорбентов нейтрофильных внеклеточных ловушек в крови и для оценки активации нейтрофильных ловушек.

Автор защищает:

-Усовершенствование методологии синтеза полимерных микросфер, позволяющее исключить агрегацию частиц в полимерных суспензиях и увеличить чувствительность тест-системы, улучшить визуализацию результатов постановки теста;

-Метод окрашивания полимерных микросфер сополимеризацией стирола и глицидилметакрилата с мономерами, содержащими хромофорные группы;

-Методологию синтеза монодисперсных полимерных микросфер с диаметрами 140 мкм и их модификацию;

-Создание способа количественной оценки содержания нейтрофильных внеклеточных ловушек с использованием полимерных микросфер в качестве сорбентов;

-Рецептуры синтеза полимерных микросфер для использования их в качестве сорбентов нейтрофильных лейкоцитов;

Глава 1. Литературный обзор.

1.1. Теории формирования полимерно-мономерных частиц при гетерофазной полимеризации мономеров различной природы.

Гетерофазная полимеризация в настоящее время продолжает привлекать внимание ученых в связи с тем, что возможности этого интересного, удобного и экономически выгодного способа получения полимеров и латексов далеко не исчерпаны.

Полимеризация протекает в гетерофазной системе с высоко развитой межфазной поверхностью, образующейся в результате эмульгирования мономеров в волной фазе. Значительное увеличение общей скорости процесса по сравнению со скоростью в гомогенных системах может быть осуществлено не только обычными приемами (изменением концентрации реагирующих веществ и температуры), но и изменением природы и концентрации эмульгаторов. Число и распределение образующихся полимерно-мономерных частиц по размерам определяется механизмом их формирования.

Последние годы монодисперсные суспензии с различным диаметром полимерных микросфер приобрели большое значение для различных как научных, так и практических целей [1-8]. Их используют в качестве калибровочных эталонов в электронной и оптической микроскопии, светорассеянии, ультрацентрифугировании, при счете аэрозольных частиц и малоугловой дифракции рентгеновских лучей; для медицинских целей -диагностики различных заболеваний [2]; определения размеров пор фильтров и биологических мембран; для стимуляции роста антител и их очистки; как модельные коллоиды при изучении их реологического поведения, устойчивости, флокуляции частиц и т.д [5-8].

Для применения полимерных микросфер в этих целях важна не только однородность частиц по размерам, но и другие характеристики, такие как

природа поверхности частиц, природа и концентрация поверхностных функциональных групп, устойчивость по отношению к различным воздействиям, например, к электролитам, температуре и др.

Концентрация мономера, инициатора, ионная сила раствора, а также концентрация и природа эмульгатора и температура полимеризации являются важными факторами при получении монодисперсных латексов.

В настоящее время не существует общих принципов синтеза монодисперсных латексов. В литературе описано значительное число методов получения монодисперсных, главным образом полистирольных латексов с размерами менее микрона и более 30 мкм, которые , однако, не всегда воспроизводимы [9-19].

Нерешенной практической задачей является и получение устойчивых монодисперсных частиц с размерами 1-5 мкм.

Образование в процессе полимеризации монодисперсных латексных частиц в значительной степени зависит от механизма формирования полимерно-мономерных частиц, ПМЧ: |

Единой точки зрения на механизм формирования ПМЧ в настоящее время не существует, поэтому представляется целесообразным рассмотреть современные теории образования ПМЧ при гетерофазной полимеризации и факторы, определяющие их устойчивость.

1.1.1. Эмульсионная полимеризация.

Качественная схема образования полимерно-мономерных частиц при

эмульсионной полимеризации была предложена Хархинсом и Юрженко [1 -4], для полимеризации тидрофобных мономеров, инициированной персульфатом калия, в присутствии анионактивных эмульгаторов.

Согласно этой схеме исходная система представляет собой лиспергированные в водной фазе капли эмульсий мономера размером 2-50 мкм, стабилизированиые эмульгатором. Большая часть эмульгатора находится в виде мицелл.

Общее количество мицелл в растворе эмульгатора довольно велико, например, в1 см3 1-2%-ного алкилсульфоната натрия содержится около 1018 мицелл [1-6]. Несмотря на наличие в системе большого числа мицелл эмульгатора суммарное количество мицеллярно-растворенного мономера относительно невелико (1 мицелла может вобрать в себя лить около100 молекул мономера). Остальной мономер существует в виде капель эмульсии, стабилизированной поверхностно-активными веществами, число которых в 1 см3составляет 1011.

Согласно схеме, рост полимерных цепей начинается в небольшой части мицелл (0,1 %), присутствующих в системе. По мере протекания полимеризации мицеллы растут, пополняясь мономером из капель мономера путем диффузии через водную фазу. Постепенно мицеллы эмульгатора превращаются в полимерно-мономерные частицы, ПМЧ, в которых соотношение компонентов (полимер/мономер) определяется их взаимной растворимостью (примерно 1:1 при хорошей растворимости полимера в мономере). Содержащие радикал ПМЧ увеличиваются в размерах и все больше адсорбируют на свою поверхность эмульгатор сначала из раствора, а затем из мицелл эмульгатора, в которых не происходит образование полимера. Продолжающийся с постоянной скоростью распад инициатора приводит к образованию новых ПМЧ, причем с уменьшением числа мицелл эмульгатора вероятность попадания свободных радикалов в ПМЧ повышается.

В результате практически мгновенных реакций обрыва цепи, рост полимерной цепи в ПМЧ прекращается, и на некоторое время они становятся неактивными до попадания нового радикала в них. Принимают, что при 20 -30 %-ной конверсии мономера мицеллы эмульгатора исчезают, образование новых ПМЧ становится невозможным, и их число достигает определенного предельного значения.

Представления Харкинса-Юрженко были положены в основу

количественной теории Смита-Эварта [5-6].

15

При исследовании эмульсионной полимеризации стирола в условиях, когда ПМЧ формируется только из мицелл эмульгатора (при очень низких концентрациях мономера в системе), было показано, что образование ПМЧ протекает с постоянной, скоростью. Образующаяся полимерная суспензия характеризуется широким распределением частиц по размерам: диаметр частиц изменяется от размера, равного диаметру мицелл, 0,05 мкм, до размера диаметра латексных частиц, равного 0,2 мкм [7,8,9]. Такую полимерную суспензию называют латексом.

Согласно теории Смита-Эварта скорость эмульсионной полимеризации определяется числом частиц, которое в свою очередь зависит от исходных концентраций эмульгатора и инициатора и описывается уравнением: N=K[S]0,6[I]0,4

где S - концентрация эмульгатора, I - концентрация инициатора.

Полимеризация протекает в объеме ПМЧ в три стадии: 1 - зарождение ПМЧ из мицелл эмульгатора; 2 - стадия роста части (полимеризация протекает с постоянной скоростью) и 3 - стадия полимеризации мономера, содержащегося в объеме ПМЧ.

Принимая качественные представления Харкинса-Юрженко о формировании ПМЧ, на основании обширного экспериментального материала по изучению кинетических закономерностей эмульсионной полимеризации гидрофобных мономеров в присутствии эмульгаторов и инициаторов различной природы Медведев и сотр. [10-12] постулировали, что главной зоной инициирования и протекания полимеризации является поверхность адсорбционных слоев эмульгатора. При этом скорость полимеризации не зависит от перехода эмульгатора из мицелл на поверхность ПМЧ, а конверсия, при которой исчезают мицеллы, тем выше, чем ниже степень набухания поли- мера в мономере. Носле исчезновения мицелл общее количество частиц может понижаться вследствие их агломерации, однако, общая поверхность раздела остается постоянной,

Качественная модель Харкинса-Юрженко, положенная в основу единственной количественной теории Смита-Эварта, и используемая многими исследователями для интерпретации полученных ими экспериментальных данных, несмотря на свою наглядность и стройность, не всегда согласуется с экспериментальными данными. Для получения удовлетворительного согласования между теорией и экспериментальными дани и вводят дополнения, часто недостаточно обоснованные [14-16].

Последующее развитие теории эмульсионной полимеризации показало, что необходимо учитнвать и другие возможные механизмы формирования ПМЧ.

Зарождение полимерных частиц из капель мономера рассматривается в работах Угельстада с сотрудниками [17-25] на примере полимеризации стирола и винилхлорида в присутствии ионогенных эмульгаторов в сочетании с добавками высших спиртов или парафинов. Авторы получали высокодисперсные эмульсии мономеров в присутствии ионогенного эмульгатора (лаурилсульфата натрия) и длинноцепочного жирного спирта (цетилового спирта). Жирный спирт растворяли в углеводороде и добавляли к водному раствору эмульгатора. Для того, чтобы этим методом при обычном перемешивании получить высокодисперсные эмульсии, нужно было использовать относительно большие количества спирта, порядка 20% в расчете на общее количество углеводорода.

Угельстад нашел, что если смешать жирный спирт с эмульгатором в воде до добавления углеводорода, то можно получить очень тонкодисперсную эмульсию при обычном перемешивании с гораздо менышим количеством спирта (1%).

Впоследствии авторы показали, что жирный спирт можно заменить гексадеканом или другим, веществом, обладающим очень низкой растворимостью в воде [19, 24].

Полученные результаты авторы объясняют с точки зрения теории

диффузного разрушения эмульсий [26, 27]. Разрушение эмульсии может быть

17

предотвращено присутствием в каплях углеводорода водонерастворимого соединения. Авторы считают, что, если в системе присутствует малое количество гораздо более водонерастворимого соединения, чем углеводород, скорость расслаивания эмульсии будет ограничиваться скоростью диффузии водонерастворимого компонента. При этом Угельстад рассматривает капли как полупроницаемую мембрану, разрешающую диффузию водонерастворимого компонента и совершенно предотвращающую диффузию водонерастворимой добавки.

В вышеприведенных работах бнло показано, что в таких системах происходит эффективное дробление капель мономера (до 3-7 мкм) и они начинают конкурировать с набухшими мономером мицеллами эмульгатора в захвате радикалов. Вследствие этого полученные этим способом латексы характеризуются бимодальным распределением частиц по размерам: присутствуют частицы с размерами 0,8-1,2 мкм и — 0,2 мкм. Появление высокодисперсной фракции частиц объясняется образованием части ПМЧ по ми целлярному механизму. Если средний диаметр капель снижается до значений, находящихся нихе 0,7 мкм, то зарождение латексных частиц, по мнению авторов, осуществляется исключительно в углеводородной фазе. .

Аналогичные результаты были получены и при использовании смесей катионактивных эмульгаторов с высшими спиртами [22].

Образование устойчивых высокодисперснных эмульсий и генерирование ПМЧ в мономерных каплях также наблюдалось при введении гидрофобных добавок (парафинов, хлоралканов), в мономер препятствующих диффузионному разрушению эмульсий, в сочетании с интенсивной механической гомогенизацией исходной эмульсионной системы [25].

Авторы указывают, что особенностью полимеризации мономера в

каплях большого размера является изменение распределения их по размерам

в ходе полимеризации. Оказалось, что распределение конечных частиц много

уже распределения капель эмульсии в исходной системе. Полученные

18

результаты объясняются тем, что при среднем числе радикалов в ПМЧ, равном 0,5, скорость полимеризации во всех частицах одинакова только в начале процесса. По мере превращения мономера в полимер изменяется соотношение мономер/полимер в частицах малого и большого размеров, поскольку концентрация мономера в них различна. Возникает градиент концентрации мономера в частицах и начинается перераспределение его между ПМЧ посредством диффузии через водную фазу. В результате к концу полимеризации распределение частиц по размерам становится практически монодисперсеным.

В работах Дурбина с сотр. [28] и Елисеевой с сотр. [29-30] показано, что при использовании интенсивного гидродинамического воздействия при эмульгировании мономера в воде дисперсность капель мономера и вероятность превращения их в ПМЧ тоже значительно возрастают.

Образование ПМЧ из микрокапель мономера рассмотрено в работах, Таубмана, Никитиной [31], Медведева, Грицковой и др. [32-35], исходя из представлений о квазислонтанном эмульгировании.

Авторы считают, что в результате того, что содержание эмульгатора в водной и углеводородной фазах не соответствует их растворимости, имеет место его перераспределение в системе, причем интенсивность массопереноса возрастает с увеличением растворимости компонента в фазе, в направлении которой осуществляется его перенос. В результате образуется микроэмульсия, микрокапли в зависимости от природы эмульгатора, имеют размеры в интервале от 0,04 до 0,2 мкм.

Основным фактором, определяющим скорость микроэмульгирования, авторы считают дробление макрокапель в приводящее к резкому увеличению межфазной поверхности [36-48]. Наиболее эффективно дробление макрокапель мономера происходит в присутствии неионных эмульгаторов, оксиэтилированных спиртов, аминов, алкилфенолов в

полипропиленгликолей. Дисперсность макрокапель, полученных в

присутствии водорастворимых алифатических сульфатов, сульфонатов и мыл

19

карбоновых кислот невелика, однако, ионогенные эмульгаторы, сравнительно хорошо растворимые в углеводородах (некаль, сульфонол и др.), вызывают интенсивное дробление мономерной фазы.

При формировании ПМЧ преимущественно из микрокапель мономера, распределение латексных частиц по размерам заметно сужается. Анализ литературных данных показывает, что формирование ПМЧ преимущественно из микрокапель мономера наблюдается при: использовании смесей ионогенных и неионных ПАВ [38]; использовании смесей мицеллообразующих и неколлоидных ПАВ (со ПАВ) [39-43, 48].

использование интенсивных гипродинамических воздействий для приготовления исходной эмульсии мономеров [29, 30];

при введении эмульгатора или со ПАВ в фазу, в которой они менее растворимы [48].

при образовании эмульгатора на границе раздела фаз [45-47]. Если исследования, связанные с зарождением латексных частиц в микрокаплях мономера, начали проводиться сравнительно недавно, в 70-х годах, то теория гомогенной нуклеации частиц развивалась одновременно с классической мицеллярной теорией.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Сиваев Андрей Александрович, 2019 год

Список литературы

1. Harkins W.D. General Theory of the mechanism of the Emulsion Polymerization. J. Amer. Chem. Soc.1947, 59, 6, 1428 - 1444.

2. Hansen F.K., Ofstad E.B., Ugelstad J. Emulsification of Styrene with Mixtures of Anionic Emulsifier and Long Chain Fatty Alcohols. Emulsion Polymerization with Initiation in Monomer Droplets. Theory and Practice Of Emulsion Technology. Ed. by Smith London, Acad. Press., 1975, 13-25.

3. Hansen F.K. Ugelad J. Particle Nucleation in Emulsion Polymerization. IV. Nucleation in Monomer Droplets. J. Polym. Sci.: Pt., А-1, 1979, 17, 10, 3069-3078.

4. Юрженко А.И., Колечкова М.С. О топографии полимеризации углеводородов в эмульсиях. Докл. АН СССР, 1945, 47, №5, с. 354-354.

5. Smith W.V. Kinetic of Emulsion Polymerization I. Chem. Phys. 1948-V.16-P. 592-599.

6. Smith W.V. The kinetic of Styrene Emulsion Polymerization I. Am. Chem. Soc. 1948, V70-P 3695-3702.

7. Хаддаж М. Изучение начальной стадии эмульсионной полимеризации. Дисс. канд.хим.наук. М., 182-152 с.

8. Хаддаж М. ,Литвиненко Г.И. Грицкова И.А.,Каменский В.А., Праведников А.Н. Эмульсионная полимеризация стирола при низком содержании мономера в системе. Высокомолек. соед. В., 1983, т. 25, №2, с.139-142. 9.

9. Яковлев Ю.М., Лебедев А.В., Фермор Н.А. Проблемы синтеза, исследования и переработки латексоб. Сб. докладов всесоюзной латексной конф., М., 1971, с. 148-158.

10. Шейнкер А.П., Медведев С.С. Исследование кинетики полимеризации изопрена в водных растворах эмульгатора и эмульсиях. Докл. АН СССР, Т95Т, т.97, № Т,с. 111-114.

11. Медведев С.С., Хомиковский П.М., Шейнкер А.П. ,Заболоцкая Е.В., Бережной Г.Д. Закономерности эмульсионной полимеризации. Проблемы физической химии, 1958, вып.1, с.5-12

12. Бережной Г.Д., Хомиковский П.М., Медведев С.С. Кинетика эмульсионной полимеризации. Высокомолек. соед. 1960, т.2, вып.1, с.141 -152.

13. Мелконян Л.Г. О закономерностях эмульсионной полимеризации. Дисс. докт.хим.наук, Ереван ,1967.

14. Письмен Л.М., Кучанов С.И. К эмульсионной полимеризации. Идеальная эмульсионная полимеризация. Высокомолекл. соед., А., 197Т, т.Г3, №5, с.1055-1065.

15. Кучанов С.И. Количественное описание эмульсионной полимеризации, В сб.: Итоги науки и техники, Сер.Химия и технология высокомолек. соед. М.: ВИНИТИ, т.7, с. 167-226.

16. Литвиненко Г.И. Математическое моделирование эмульсионной полимеризации малорастворимых в воде мономеров при различных условиях образования полимерно-мономерных частиц. Дисс. канд. хим.наук. М., 1983, 115 с.

17. Ugelstad J., Mork P.C., Aasen S.O. Kinetics of emulsion polymerization. J. Polym. Sci. A1, 1967, V. 5, №10, p. 2281-2288.

18. Ugelstad J., Mork P.C., Dahl P., Rangnes P.A. Kinetic investigation of the emulsion polymerization of vinyl chloride. J. Polym. Sci. C, 1969, V. 27, p. 4368.

19. Ugelstad J., Hansen F.K. Kinetics and mechanism of emulsion polymerization. Rubber Chem. and Technol, C, V. 49, №3, p. 539-603.

20. Ugelstad J. Model for kinetics of vinyl chloride polymerization. J. Macromol. Sci. A, 1977, V. 11, №7, p. 1281-1305.

21. Ugelstad J., Mork P.C. А kinetic study of the mechanism of the emulsion polymerization of vinyl chloride. British. Polym. J. C, 1970, V. 2, №1-2, p. 31-38.

22. Ugelstad J. Polymer Letters // Ugelstad J., El Aasser M.S., Vanderhoff J.W. - 1973. - P.11, 503.

23. Azad A.R.M., Ugelstad J, Fitch R.V., Hansen F.K. Emulsificatio and emulsion Polymerization of styrene using mixtures of cationic surfactant and long chain fatig aleohols. Amer. Chem. Soc., Symp. Ser., 1976, v 24, p. 1-23.

24. Hansen F.K. Ugelad J. Particle Nucleation in Emulsion Polymerization. IV. Nucleation in Monomer Droplets. J. Polym. Sci.: Pt., А-1, 1979, 17, 10, 3069-3078.

25. Hansen, F. K. Particle nucleation in emulsion polymerization. I. A theory for homogeneous nucleation / F. K. Hansen, J. Ugelstad // Journal of Polymer Science: Polymer Chemistry Edition. - 1978. - V. 16. - P. 1953-1979.

26. Higuchi W. J., Mistra J. Physical Degradation of Emulsion Via the molecular Diffusion Route and Possible Prevention Thereof. J. Pharm. Sci., 1962, v 51, №5, p. 459-466.

27. Кабальнов А.С. Закономерности переконденсации в высокодисперсных прямых эмульсиях. Дисс. канд. хим.наук.М., 1985.

28. Durbin D.P., El-Aasser M.S., Pochlein G.W., Vanderhoff J.W. Influence of monomer precmulcification on formation of particles from monomer drops in emulsion polymerization. J. Polym. Sci.: Pt., А-3, 1979, 24, p. 703-707.

29. Жуков И.Н., Павлов Н.В., Елисеева В.И. Влияние гидродинамического воздействия на кинетику эмульсионной полимеризации этилакрилата и коллоидную устойчивость латексов. Коллоидн, х., т.4Т, №4, с.654-660.

30. Елисеева В.И., Жуков И.Н. О влияние интенсивного гидродинамического воздействия на процесс эмульсионной полимеризации.Высокомолекл. соед. ,ТЭВТ, А.23, №7, с. 1540-1545.

31. Спиридонова В.А., Никитина С.А., Таубман Л.В. К механизму эмульсионной полимеризации винилацетата в присутствии неионных ПАВ. Докл. АН СССР ,1968, т. 182, № 3, с.640-647.

32. Медведев, С.С. Закономерности эмульсионной полимеризации / С.С. Медведев, П.М. Хомиковский, А.П. Шейнкер, Е.В. Заболотская, Г.Д. Бережной //Проблемы физической химии. - 1958. - Вып.1. - C. 5 - 17.

33. Грицкова И.А., Никитина С.А., Спиридонов В.А. Седакова Л.И., Малюкова Е.Б., Павлов А.В. О топохимических особенностях эмульсионной полимеризации стирола и хлорпролена в присутствии оксиэтилированных цетилов спиртов.- Высокомол. соед. ,1975, т.17, А. №3, с.582-585.

34. Грицкова И.А. , Никитина С.А., Спиридонова В.А., Седакова Л.И., Малюкова Е.Б. 0 топохимии полимеризации в присутствии неионогенных эмульгаторов. - Тезисы ХХШ Международного симпозиума по макромолекулярной химии. Мадрид, 1974, т.2, с.48.

35. Зуйков А.В., Грицкова И.А., Малюкова Е.К., Бедина| Н.А. Исследование влияния длины неионогенного эмульгатора на основные закономерности полимеризации стирола. Высокомолек. соед. ,1972, т. 146, № 4, с.252-254.

36. Грицкова И.А., Седакова Л.Н. ,Муралян Д.С., Праведников А.Н. О ТОПОХИМИЙ эмульсионной полимеризации. Докл. АН СССР, 1978, т.238, с.607-61Т0.

37. Грицкова И.А., Седакова Л.Н., Мурадян Д.С., Синекаев Б.М., Павлов А.В., Праведников А.Н. Топохимия и массоперенос при эмульсионной полимеризации. Докл. АН СССР ,1978,

38. Симакова Г. А., Каминский В.А., Грицкова И.А. ,Праведников А.Н. Микроэмульгирование в процессе эмульсионной полимеризации. Докл. АН СССР,1984, т.276, №Т, с. 151-153.

39. Яковлева И.М. Влияние условий приготовлений эмульсий на их устойчивость в исходных системах и В процессе полимеризации. Дисс. канд.хим. наук. - М., 1983 - 123 с,

40. Яковлева И.М., Симакова Г.А., Грицкова И.А. Микроэмульгирование на границе раздела двух фаз в присутствии спиртов

алифатического ряда. Тезисы докл. на 8 Всесоюзной конференции по коллоидной химии и физико-химической механике Ташкент, 1983, с.36-37.

41. Праведников А.Н. , Грицкова И.А. Механизм формирова- ния полимерно-мономерных частиц - Сб.: Каучуки эмульсионной полимеризации.Свойства и применение. М. , ЦНИИТЭнефтехим, 1983, с.82 -93. /270.

42. Яковлева И.М., Симакова Г.А., Грицкова И.А., Правед- ников А.М., Адсорбционные слои ПАВ на границе с мономером в присутствии добавок спиртов.Коллоидн. *., 1983, т.45, №6, с.1208-Т21Т. ,

43. Яковлева И.М., Симакова Г.А., Грицкова И.А.,Грицкова И.А. , Праведников А.Н. Коллоидно-химические свойства спиртов жирного ряда в связи с микроэмульгированием на межфазной границе раздела, Коллоидн. ж., Т.47, №Т, с. 193-196.

44. Грицкова И.А. ,Праведников А.Н., Тихомиров Г.С., Седакова Л.Н. Влияние условий формирования полимерно-мономерных частиц на свойства латексов.- В сб.: Получение синтетических латексов и их модифицирование ,В. , ЦНИИТЭнефтехим, 1985, с. 5-6.

45. Праведников А.Н., Симакова Г.А., Грицкова И.А,, Прокопов Н.И. Образование ПАВ на границе равдела фаз в процессе эмульсионной полимеризации. Коллоидн . *., 1985, т.47, №Т, с.192-194.

46. Праведников А.Н., Симакова Г.А., Грицкова И.А., Прокопов Н.И.Микроэмульгирование при химической реакции на гра- нице раздела фаз.Коллоидн. ж., 1985, т.47, № Т, с. 189-192.

47. Прокопов Н.И. Эмульсионная полимеризация диеновых й виниловых мономеров при образовании ионогенных поверхностно активных веществ на границе раздела фаз. Дисс. канд.хим. наук, М., 1986.

48. Праведников А.Н. Симакова Г.А.,Грицкова И.А. , Прокопов Н.И. Микроэмульгирование при химической реакции границе раздела фаз.Коллоидн. журн. Т, с. 189-191.

49. Priest, W.J. Particle growth in the aqueous polymerization of vinyl acetate / W.J. Priest // J Phys Chem. - 1952. - 56. - Р. 1077-1083.

50. Gardon J.L. Emulsion polymerization. Ш Theoretical prediction of the effects of slow termination rate within latex particles / J.L. Gardon //J Polym. Sci. Chem. - 1968, - V. 6, - P. 665-685.

51. Fitch, R.M. Polymer colloids: particle formation in nonmicellar systems theory / R.M. Fitch, Tsai C.H. // J. Polym. Sci., Polym.Chem.Ed. - 1970. - Pt. B, - V. 8. - P. 703-710.

52. Fitch, R.M. The homogeneous nucleation of polymer colloids / R.M. Fitch // Br Polym J. -1973. - 5. - P. 467 - 483.

53. Hansen, F.K. // Particle nucleation in emulsion polymerization. I. A theory for homogeneous nucleation / F.K.Hansen, J. Ugelstad / J. Polym. Sci. Polym. Chem. - 1978. - V. 16. - 1953-1953.

54. Hansen, F.K. Particle nucleation in emulsion polymerization. IV. Nucleation in monomer droplets. F.K. Hansen, J. Ugelstad // J. Polym. Sci.: Pt. -A-1. - 1979. - V.17. - 10. - P. 3069-3078.

55. Feeney, P. J. Surfactant-free emulsion polymerization: predictions of the coagulative nucleation theory / P.J. Feeney, D. H. Napper, R. G. Gilbert // Macromolecules. - 1987 - V. 20. - P. 2922-2930.

56. Feeney, P. J. Surfactant-free emulsion polymerization: predictions of the coagulative nucleation theory / P.J. Feeney, D. H. Napper, R. G. Gilbert // J. Colloid Interface Sci. - 1985 - V. 107. - P. 159-173.

57. O'Toole, J.T. Kinetics of emulsion polymerization / J.T. O'Toole // J Appl Polym Sci. - 1965. - 9. - P. 1291 - 1297.

58. Елисеева В.И. ,Зурабян К.М., Зайдес А.Л. 0 новом типе полимерных дисперсий. Докл. АН СССР, Т965, т.162, №5, с.1086-1088.

59. Roe, C.P. Surface chemistry aspects of emulsion polymerization / C.P. Roe // Ind Eng Chem. - 1968. - 60. - P. 20 - 33.

60. Fitch, R.M. Polymer colloids: particle formation in nonmicellar systems theory / R.M. Fitch, Tsai C.H. // J. Polym. Sci., Polym.Chem.Ed. - 1970. - Pt. B, - V. 8. - P. 703-710.

61. Елисеева В.И., Козлов Л.В., Дрезельс С.С. Поверхностно -активные сополимеры, образующиеся при эмульсионной полимеризации и их роль в этом процессе. - Докл. АН СССР, 1969, т. 186, №1, с.128-131.

62. El-Aasser, M.S. Interfacial Aspects of Microemulsion Polymers / M.S. El-Aasser, C.D. Lack, Y.T. Chou, T.I. Min, J.W. Vanderhoff, F.J. Fowkes // Coll. S. - 1984. - 12. - 1. - P. 79 - 97.

63. El-Aasser, M.S. Preparation of latexes using microemulsions, in Polymeric Dispersions — Principles and Applications, J. M. Asua (Ed.) / M.S. El-Aasser, C.M. Miller // - Kluwer, Dordrecht - 1997. - P. 109-126.

64. Елисеева В.И., Назарова И.В. Таубман 0.Б. О поверхностной активности полимеров. - Докл. АН СССР, 1967, т.Т75, №5, с. 1082-1083.

65. Едисеева В.И. ,Назарова И.В., Петрова С.А. Дифильность макромолекул как фактор стабильности безэмульгаторных латексов. -Коллоидн. ж., 1968, т.30, № 1, с.37—41.

66. Gilbert, R.G. Emulsion polymerization: a mechanistic approach / R. G. Gilbert // Academic Press. -London. - 1995.

67. Tauer K., Modeling particle formation in emulsion polymerization: An approach by means of the classical nucleation theory / K. Tauer, I. Kuhn // Macromolecules - 1996. - V 28. - P. 2236-2239.

68. Tauer, K.// Interfacial Energy Promotes Radical Heterophase Polymerization / K. Tauer, N. Oz // Macromolecules - 2004. - V. 37. - P. 58805888.

69. Pepard, B. Particle nucleation phenomena in emulsion polymerization of polystyrene / B. Pepard // - University Microfilms, - Ann Arbor, - 1974.

70. Tauer K., Modeling particle formation in emulsion polymerization: An approach by means of the classical nucleation theory / K. Tauer, I. Kuhn //

Macromolecules - 1996. - V 28. - P. 2236-2239.

165

71. Lovell P. A. and M. S. El - Aasser (Eds.), Emulsion Polymerization and Emulsion Polymers, John Wiley & Sons, West Sussex , 1997 .

72. Candau, F. in Encyclopedia of Polymer Science and Engineering , H. F. Mark , N.M. Bikales , C. G. Overberger , and G. Mengers (Eds.), Wiley-Interscience , - New York. - 1987, - P. 718 - 724 .

73. Hansen, F.K. // Particle nucleation in emulsion polymerization. II. Nucleation in Emul-sifier-free Systems Investigated by Seed Polymeriza-tion/ F.K.Hansen, J. Ugelstad / J. Polym. Sci. Polym. Chem. - 1978. - V. 16. - 30333046.

74. Hansen, F.K. Particle nucleation in emulsion polymerization. III. Investigation of Nucleation in Systems with Anionic Emul-sifier by Seeded and Unseeded Polymer-ization / F.K. Hansen, J. Ugelstad // J. Polym. Sci.: Pt. - A-1. -

1979. - V.17. - 10. - P. 3047-3068.

75. Poehlein, G. W. in Emulsion Polymerization, I. Piirma (Ed.). Academic Press. - New York. - 1982.

76. Song, Z. Kinetics of emulsifier free emulsion polymerization of styrene / Z. Song, G.W Poehlein // J. Polym. Sci.- 1990.- V. 28.- N 9.- P. 23592392.

77. Van der Hoff, B.M.E. On the mechanism of emulsion polymerization of styrene. III. Polymerization initiated by oil-soluble compounds / B.M.E. Van der Hoff // J. Polym. Sci. - 1960. - V.48. - P. 175 - 187.

78. Williams, D.J. Particle morphology in styrene emulsion polymerization / D.J. Williams // J. Polym. Sci. Polym. Chem. Ed. - 1973. - V.11.

- N 1 - P. 301 - 303.

79. Hawkett, B. S. Seeded emulsion polymerization of styrene / B. S. Hawkett, D. H. Napper , and R. G. Gilbert // J. Chem. Soc., Faraday Trans. 1 -

1980. - V. 76. - N 6 - P. 1323-1343.

80. Brooks, B.W. Mass transfer and thermodynamic effects in emulsion polymerization / B.W. Brooks // - British Polym. J. - 1970. - V. 2. - N 4 - P. 197

- 201.

81. Павлюченко, В.Н. Эмульсионная полимеризация неполярных мономеров (развитие представлений о кинетике и топохимии) / В.Н. Павлюченко, С.С. Иванчев // - Успехи химии - 1981. - Т. 50. - № 4. - С. 715745.

82. Pepard, B. Particle nucleation phenomena in emulsion polymerization of polystyrene / B. Pepard // - University Microfilms, - Ann Arbor, - 1974.

83. Goodal, A.R Formation of anomalous particles during the emulsifier-free polymerization f styrene / A.R. Goodal, M.C. Wilkinson, J. Hearn // J. Coll. Interface Sci. - 1975. - 53. - P. 327.

84. Hansen, F.K. Particle nucleation in emulsion polymerization. III. Investigation of Nucleation in Systems with Anionic Emul-sifier by Seeded and Unseeded Polymer-ization / F.K. Hansen, J. Ugelstad // J. Polym. Sci.: Pt. - A-1. -1979. - V.17. - 10. - P. 3047-3068.

85. Poehlein, G. W. in Emulsion Polymerization, I. Piirma (Ed.). Academic Press. - New York. - 1982 .

86. Грицкова И.А., Праведников А.Н. Новое в области эмульсионной полимеризации" Тезисы докл. ХХП Всес. конф. по высокомолек. соед. , с.З Алма - Ата, 1985.

87. Matheson, M.S. Rate constants in free radical polymerization. III. Styrene / M.S. Matheson, E.E. Auer, E.B. Bevilacqua, E.J. Hart // J. Amer. Chem. Soc. - 1951. - V. 73. - N 4. - C. 1700 - 1706.

88. Van der Hoff, B.M.E. The gel effect at low conversion in emulsion polymerization / B.M.E. Van der Hoff // J. Polym. Sci. - 1958. - V.33. - C. 487 -490.

89. Голубева А.В., Носаев Г.А., Усманова Н.Р. и др. Суспензионный метод получения полистирола с высоким молекулярным весом. Пластические массы, 1961, 1, с. 3-6.

90. Милицкова Е.А. К вопросу стабилизации размеров гранул суспензионных полимеров. Пластические массы 1961, 8, с. 6-8.

91. Van der Hoff, B.M.E. On the mechanism of emulsion polymerization of styrene. II. Polymerization in soap solution below and above CCM / B.M.E. Van der Hoff // J. Polym. Sci. - 1960. - V.44. - P. 241 - 259.

92. Gardon, J.L. Evidence for and against concentration gradients in polymerizing latex particles / J.L. Gardon // J. Polym. Sci. Polym. Chem. Ed. -1973. - V.11. - N 1 - P. 241 - 251.

93. Баррет К.Е. Дисперсионная полимеризация в органических средах Пер. с англ. — Л.: Химия, 1979. — 338 с.

94. Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Быков В.А. Полимерные микросферы в диагностике, Москва, 2004.

95. Yang-W.//Colloid and polym. Sci., 1999, vol.277, Iss.5, pp 446-451.

96. Begum Elmasa, Synthesis of uniform, fluorescent poly(glycidylmethacrylate) based particles and their characterization by confocal laser scanning microscopy.//Murvet Tuncelb, Serap Senela // Colloids and surface A: Physicochemical and engineering aspects, 2005, vol.269.

97. Danni Wang, Dispersion polymerization of n-butyl acrylate.// Dimonie V.L., David Sudol E// J. of Applied Polym. Sci., 2002, vol.84.

98. Chang ZQ, Liu G, Tian YC, Zhang ZC// Materials Letters, 2004, vol.12.

99. Wang WeiCai, Preparation of monodisperse, superparamagnetic, luminescent and multifunctional PGMA microspheres with amino-groups /Institute of Nanobiotechnology, School of material science & engineering, Tianjin university, Tianjin 300072, China.

100. Zu-Shun Xu, Monodisperse polystyrene microspheres prepared by dispersion polymerization with microwave irradiation.// Zi-Wei Deng, Xiao-Xi Hu // Coll. And Polym. Sci., 2001, vol.31.

101. Park, Kim, Suh.// Coll. And Polym. Sci., 2001, vol.31.

102. Лукашевич А.Д. Создание полимерных микросфер для

биотехнологии с функционально-модифицированной поверхностью в

широком интервале диаметров : дис. ... канд. хим. наук : 02.00.06 /

168

Лукашевич Андрей Дмитриевич ; МИТХТ ; науч. рук. Грицкова И.А. -Москва, 2015, 16 с.

103. Щукин Е.Д., Перуов А.В., Амелина Е.А.Коллоидная химия, М.: МГУ, 1982.

104. Nomura, M. - in Emulsion Polymerization I. Piirma and J. L. Gardon (Eds.) / M. Nomura, M. Harada, W. Eguchi, S. Nagata // ACS Symposium Series. Washington D.C. - N. 24. - 1976. - P. 102 .

105. Ребиндер П.А., Фукс Г.М. Проблемы современной коллоидной химии. В кн.: Успехи коллоидной химии. М., 1973, с.5-8.

106. Таубман А.В., Никитина С.А. Структурно-механические свойства поверхностных слоев эмульгаторов и механизм стабилизации концентрированных эмульсий, Коллоидн. ж., 1968, т. 24, №5, с. 633-636.

107. Нейман Р.Э. Очерки коллоидной химии синтетических латексов. Воронеж, ВГУ, 1980, с.235.

108. Нейман Р.Э. Коагуляция синтетических латексов. Воронеж ВГУ, 1967, с.187.

109. Нейман Р.Э., Тарановская С.И. 0 тепловой коагуляции латекса, стабилизированного неионогенным эмульгатором. В кн.: Латексы и поверхностно-активные вещества, Воронеж, ВГУ, 1970, вып.Г, с.7-9; 1978-вып.2,с.36-38.

110. Min, K.W. On the mathematical modeling of emulsion polymerization reactors / K.W. Min, W.H. Ray // J. Macromol. Sci. - Revs Macromolec. Chem. Pt.C. - 1974. - V.11. - N 2. - P. 177-255.

111. Нейман Р.Э., Егоров А.К., О механической коагуляции интетических латексов.Коллоидн. к., 1969, т.ЗТ, № 2 с.629-630.

112. 140. Нейман Р.Э., Егоров А.К. 0 механической коагуляции латексов.В кн.: Латексы и поверхностно-активные вещества. Воронеж ВГУ, Г97Т, с.7-15.

113. Егоров А.К. Исследование закономерностей механической

коагуляции латексов. Дисс. кани.хим.наук. Воронеж, ВЕ Т97т.

169

114. Киселева О.Г., Куриленок А.Е., Лапшова А.В., Нейман Р.Э. К характеристике агрегации синтетических латексов при замораживании. Коллоидн, х.,1977, т.39, № <, с.364-368.

115. Киселева О.Г., Ланшова А.В., Нейман 0.9. К характеристике агрегации при хранении латексов, подвергавшихся заморажи-ванию.Коллоидн. ж.,1[977, т. 39, №5, с.960-964.

116. Киселева 0.Г., Лапшова А.В., Нейман Р.Э.,Касъянова 0.А. Исследование кинетических особенностей агрегации частиц и коагуляции латексов при замораживании. В кн.: Синтетические латексы и теоретические основы процессов латексной технологий, М., НИИРП, 1975, с.218-227.

117. Нейман Р.Э., Егоров А.К., Киселева О.Г. О взаимосвя- зи закономерностей коагуляции латексов различным методом. В кн.: Получение латексов и модификации их свойств. М., ЦНИИТЭ - нефтехим., 1977, с.107-113.

118. Нейман Р.Э., Ргоров А.К., Киселева 0.Г., Лебедева Н.Н. Закономерности коагуляции синтетических латексов различными методами. В кн.: Тезисы докладов УП Всесоюзной конференции по коллоидной химии и физико-химической механике. Минск, - 162 -с. 122-123.

119. 147.Нейман Р.Э.,Егоров А.К. Влияние электролитов на механическую коагуляцию синтетических латексов.Коллоидн.х., 1977, т.39, № 3, с.582--584.

120. Giannetti, E. Nucleation mechanisms and particle size distributions of polymer colloids / Giannetti E. // AIChE J. - 1993. - V. 39. - P. 1210—1227.

121. Воюцкий С. С. Коллоидная химия синтетических латексов Газлегпром, 1946, с.180

122. Ключников В.Р., Нейман Р.Э. О влияний температуры натолщину адсорбционного гидратного слоя и дзета-потенциал ла- тексных частиц, В кн.: Синтетические латексы, их модификация применение в народном хозяйстве. М., ЦНИИТЭнефтехим, ГЭВТ, С. 134-135.

123. Singer J.M, Plotz С. The latex fixation test. [.Application to the serologis diagnosis of rheumatoid arthritis. // Am. J.Med.-1956, - Vol.21 - P.888 -893.

124. И.А. Грицкова, Н.И. Прокопов, В.И. Быков Полимерные микросферы в диагностике, М. 2004, 130с.

125. Генералова А.Н. Получение биоаналитических реагентов на основе полимерных дисперсий. Дисс ... канд. хим. наук. -М.,2000.94 с.

126. М. Shahar, Н. Meshylam, S. Margel. J. Polym.Sci., Part A, Polym.Chem.Ed., 24,203 (1986).

127. Н.И. Прокопов, И .А. Грицкова, В.Р. Черкасов, А.Е. Чалых, Синтез функциональных монодисперсных полимерных микросфер для ]аммунодиагностических исследований, МИТХТ, Москва, (1995).

128. Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Станишевский Я.М. Биотест-системы на основе полимерных микросфер // Вестник МИТХТ. -2006. Том 1.-Вып.2.-С.5-20.

129. Demers M., Wagner D.D. Neutrophil extracellular traps. A new link to cancer-associated thrombosis and potential implications for tumor progression // Oncolmmunology. February 2013.

130. Нейтрофильные внеклеточные ловушки: механизмы образования, функции О.Л.Коротина, И.И.Генералов 2012, №4:23 -32.

131. ETosis: A Microbicidal Mechanism beyond Cell Death Anderson B. Guimaraes-Costa, Michelle T.C. Nascimento Amanda B. Wardini, Lucia H. Pinto-da-Silva, Elvira M. Saraiva, 2012.

132. Neutrophil biology: an update Yoshiro Kobayashi EXCLI Journal 2015;14:220-227 - ISSN 1611-2156 - 10.02.2015.

133. Роль нейтрофилов в патологии беременности О.В. Дядичкина, Л.Е. Радецкая «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет» Охрана материнства и детства, 2014, №1 (23), с. 84-88.

134. Hemodynamic force triggers rapid NETosis within sterile thrombotic occlusions X. Yu, J. Tan, S. L. Diamond, University of Pennsylvania, 2018 February; 16(2): 316-329.

135. Способ обнаружения нейтрофильных ловушек И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, 2010, RU 2 384 844 C2 G01N 33/48.

136. Способ твердофазной экстракции красителя толуидинового синего Гавриленко М.М., Гавриленко М.А., Газиева Е.А. ФГАОУ ВО "Национальный исследовательский Томский государственный университет" (ТГУ, НИ ТГУ) 2012-2019

137. Колориметрические сенсоры на гепарин с красителями толуидиновый синий и малахитовый зеленый Е.В. Сухорослова, О.Ю. Зуйкова, М.С. Полонский, Национальный исследовательский Томский политехнический университет, 2016, 126 с.

138. Demers M., Wagner D.D. Neutrophil extracellular traps. A new link to cancer-associated thrombosis and potential implications for tumor progression // Oncolmmunology. February 2013

139. Pruchniak M., Arazna M., Demkow U. Neutrophil extracellular traps in physiology and pathology // Centr Eur J Immunol 2014; 39 (1): P. 116-121

140. Воробьева Н.В., Пинегин Б.В. Нейтрофильные внеклеточные ловушки: механизмы образования, роль в норме и при патологии // Биохимия // 2014, том 79, вып. 12, 1580-1591 с.