Фотонная корреляционная спектроскопия молекулярного рассеяния света в белковых растворах при воздействии различных внешних факторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 01.04.05, кандидат физико-математических наук Чжан Сяолэй

• Чжан Сяолэй
• кандидат физико-математических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат физико-математических наук Чжан Сяолэй

Введение

Глава 1 Основные свойства белковых молекул

1.1. Общее представление о белковых молекулах

1.2. Поведение белковых молекул в растворе

Теория Дебая - Хюккеля

1.3. Основные виды взаимодействий молекул

Глава 2 Молекулярное рассеяние света в растворах белковых молекул

2.1. Основные положения теории рассеяния света

2.2. Теория Рэлея - Дебая. Определение молекулярного веса и межмолекулярного взаимодействия

Глава 3 Метод фотонной корреляционной спектроскопии

3.1. Спектральная плотность тепловых молекулярных флуктуаций

3.2. Временные корреляционные функции и пространственно временная корреляционная функция Ван-Хова

3.3. Связь корреляционных функции с оптическим спектром. Соотношение Зинерта

3.4. Определение коэффициента трансляционной диффузии с помощью корреляционных функции

3.5. Время корреляции. Метод измерений спектра автокорреляционной функции рассеянного света. Гомодинный и гетеродинный метод

3.6. Связь между коэффициентом трансляционной диффузии и статическими параметрами

3.7. Теория Джеймса - Эванса

Глава 4 Трехкомпонентные лиотропные системы (обзор)

4.1. Поведение коэффициента межмолекулярного взаимодействия в трехкомпонентных растворах

4.2. Изучение статических параметров в водных растворах, содержащих малые ионы металлов

4.3. Изучение образования молекулярных комплексов в водных растворах различных белков, содержащих водорастворимые синтетические полимеры

Глава 5 Экспериментальное исследование водных белковых растворов методом фотонной корреляционной спектроскопии

5.1. Материалы исследования и процедура подготовки образцов для измерений

5.2. Описание экспериментальной установки

5.3. Эксперименты и обсуждения

5.3.1. Исследование водных растворов молекул коллагена

5.3.1.1. Экспериментальные результаты

5.3.1.2. Обсуждение результатов

5.3.2. исследование водных растворов молекул пепсина

5.3.2.1. Экспериментальные результаты

5.3.2.2. Обсуждение результатов

5.3.3. Исследование водных растворов молекул сывороточного альбумина

5.3.3.1. Экспериментальные результаты

5.3.3.2. Обсуждение результатов 105 Заключение 112 Литература

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фотонная корреляционная спектроскопия молекулярного рассеяния света в белковых растворах при воздействии различных внешних факторов»

У , I.

Белковые макромолекулы играют чрезвычайно важную роль в функционировании различных биосистем, поэтому изучение физических параметров этих макромолекул в водных растворах с помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии является весьма интересной задачей молекулярной оптики.

Поверхность биологических макромолекул содержит многочисленные заряженные группы, причем величину заряда можно изменять в широких пределах путем изменения рН раствора [1]. Кроме того, размер и масса строго определена для каждого вида биополимеров. . '( ■ Электростатическое взаимодействие между молекулами полярного растворителя и заряженными группами биологических макромолекул оказывает существенное влияние на характер броуновской динамики молекул. С точки зрения экологии и медицины представляет интерес изучение влияния ионов металлов на растворы биологических макромолекул.

Актуальность темы исследования связана с изучением особенностей молекулярной подвижности и межмолекулярного взаимодействия в лиотропных биологических системах, такими являются \ , растворы биологических макромолекул.

Металлы являются одним из необходимых элементов для участия в жизнедеятельности биосистем. Однако некоторые металлы с точки зрения безопасности считаются токсичными для организма. При попадании даже в небольших дозах в питьевую воду, кровь, и другие биологические жидкости они способны нарушить нормальное состояние физиологических процессов. Особенно нужно отметить, что в последние годы большое V • \ ;. количество химических средств, содержащих различные ионы металлов, используется для медицины.

В последнее время было обнаружено, что при наличии ионов металлов, особенно тяжелых, в водных растворах молекулы белков способны к образованию кластеров [2-5]. Причем физико-химические свойства растворов влияют на размеры и молекулярную подвижность этих белковых кластеров. Этот процесс с точки зрения медицины часто является признаком многих заболеваний в организме человека.

В качестве примера, молекулы гадотериновой кислоты и гадодиамида обладают гадолиний-содержащими хелатными структурами, которые используются при магнитно-резонансной томографии. [6]. За последние два десятилетия, они считались безопасными и эффективными для медицинской визуализации. Но современные результаты свидетельствуют о наличии гадолиния в коже и мягких тканях у больных с почечной недостаточностью, даже с текущим гемодиализом [7]. Нефрогенный системный фиброз (НСФ), который был описан в 1997 г, является недавно открытым редким заболеванием неизвестной этиологии, которое поражает пациентов с почечной недостаточностью. Развитие НСФ стали непосредственно связывать с воздействием гадолиний-содержащих магнитно-резонансных контрастных средств в 2006 г. [8].

Учитывая вышеперечисленные факты, с точки зрения экспериментальной молекулярной оптики и спектроскопии, актуальность данной работы связана с изучением характера молекулярного движения и межмолекулярного взаимодействия в водных растворах биологических макромолекул при воздействии различных внешних факторов (рН, концентрация макромолекул, температура, ионы металлов, гадолиний-содержащие хелатные комплексы).

Для исследования молекулярной подвижности дисперсных частиц в водных растворах широко используется информативный оптический метод - фотонная корреляционная спектроскопия молекулярного рассеяния света, который также называют динамическим рассеянием света (ДРС) [9].

Основной целью данной работы было исследование оптических свойств и молекулярно-динамических процессов, проходящих в растворах биологических макромолекул при воздействии различных внешних 1 у параметров среды (рН, температура, концентрация биологических макромолекул, ионная сила) методом фотонной корреляционной спектроскопии.

Исходя из общей цели, в диссертации с помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии ставился ряд практических задач:

1. Сравнение особенностей молекулярной подвижности макромолекул коллагена и пепсина в чистом водном растворе при изменении рН;

2. Исследование экспериментального явления возникновения белковых 11 > кластеров в растворах коллагена и пепсина, содержащих различные ионы металлов: калий, кобальт, свинец, цинк, цезий и рубидий;

3. Исследование изменений молекулярной подвижности макромолекул пепсина в чистом водном растворе в зависимости от температур при различных концентрациях;

4. Изучение изменений динамических параметров сывороточного альбумина при воздействии гадолиний-содержащих хелатных комплексов (гадотериновая кислота и гадодиамид);

11 у 1

5. Наблюдение динамических процессов разрушения дипольных кластеров сывороточного альбумина при нагревании.

Научная новизна диссертации определяется рядом | ^ Л экспериментальных результатов, полученных в данной работе с помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии:

1. Методом фотонной корреляционной спектроскопии проведено исследование оптических свойств водных растворов коллагена и пепсина при изменении ряда параметров среды, таких как концентрация макромолекул, рН, и температура.

2. Впервые определена изоэлектрическая точка макромолекул пепсина - р1 1,6 методом фотонной корреляционной спектроскопии. Для определения изоэлектрической точки пепсина исследовалась 11 < • зависимость коэффициента межмолекулярного взаимодействия от рН раствора. Экстремум этой зависимости наблюдается при значении рН 1,6, где суммарный заряд на поверхности пепсина имеет нулевое значение.

3. Впервые оптическим методом (ДРС) обнаружено и детально исследовано образование дипольных кластеров молекул пепсина при воздействии различных ионов металлов (калия, кобальта, свинца, цинка, цезия и рубидия).

1 V .

I.

4. Впервые выявлен физический механизм токсического воздействия ионов гадолиния, входящего в хелатную структуру гадотериновой кислоты и гадодиамида, на сывороточный альбумин.

5. Впервые обнаружено разрушение дипольных кластеров сывороточного альбумина, образовавшихся в водных растворах, содержащихся ионы цезия при воздействии температуры (от 303 до 323 К).

1 V . , .

Защищаемые положения

1. На основании данных работ по методу фотонной корреляционной спектроскопии молекулярного рассеяния света было получено, что У коэффициент межмолекулярного взаимодействия имеет * 1 • минимальное значение при рН 1,6 в чистом водном растворе пепсина; причем эффективная масса пепсина (МЭфф=35 ООО Да) от рН не зависит. Впервые была определена изоэлектрическая точка пепсина р! 1,6 по зависимости коэффициента межмолекулярного взаимодействия от показателя раствора рН.

2. Метод фотонной корреляционной спектроскопии молекулярного рассеяния света позволяет наблюдать образование белковых дипольных кластеров в водных растворах молекул пепсина,

1 V" , содержащих такие ионы металлов, как калий, кобальт, свинец, цинк, ' цезий и рубидий.

3. Обнаружено, что в области температур 298-320 К в чистом водном растворе молекул пепсина при нагревании наблюдается увеличение подвижности молекул с выходом на насыщение.

4. Впервые выявлен физический механизм токсического воздействия ионов гадолиния, входящих в хелатную структуру гадодиамида, на сывороточный альбумин.

5. Обнаружено, что нагревание растворов сывороточного альбумина, 1 '( / содержащих ионы цезия, приводит к разрушению дипольных кластеров в области температур 303-323 К И ,

Практическая ценность

Полученные с помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии результаты способствуют развитию представлений об оптических и молекулярно-динамических процессах, происходящих в белковых растворах, содержащих различные ионы металлов, а также вносят вклад в понимание природы межмолекулярных взаимодействий.

Изученное в работе поведение биологических макромолекул в растворах и их взаимодействие с ионами различных солей позволяет установить молекулярный механизм патологических изменений в биологических объектах, связанный с токсическим воздействием ионов металлов на живые объекты. Материалы диссертации могут быть использованы при разработках способов контроля качества органических жидкостей и оптических методов диагностики различных заболеваний, а также для создания диагностических приборов.

Заключение диссертации по теме «Оптика», Чжан Сяолэй

Основные результаты и выводы:

1. С помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии получено, что рН - зависимость коэффициента межмолекулярного взаимодействия В для водных растворов пепсина имеет экстремум при рН 1,6. Из этого следует, что изоэлектрическая точка данного типа пепсина равна 1,6.

2. Выявлено, что коэффициент трансляционной диффузии уменьшается вблизи изоэлектрической точки пепсина в водных растворах, содержащих ионы калия, кобальта, свинца, цинка, цезия и рубидия, с ростом ионной силы раствора. Наиболее заметное падение коэффициента трансляционной диффузии пепсина наблюдается вблизи изоэлектрической точки при добавлении ионов свинца, что связано с образованием белковых дипольных кластеров.

3. Впервые показано, что наиболее токсическое воздействие на макромолекулы пепсина оказывают ионы свинца.

4. Оптическим методом (ДРС) обнаружено, что в области температур 298-320 К в чистом водном растворе пепсина при нагревании наблюдается увеличение коэффициента трансляционной диффузии с выходом на

6 2 насыщение - максимальное значение Dt= 1,9 х 10" см /сек.

5. Оптическим методом (ДРС) обнаружено образование дипольных кластеров альбумина в водных растворах, содержащих гадолиний-содержащие хелатные комплексы гадодиамида. С ростом концентрации гадодиамида коэффициент трансляционной диффузии уменьшается. Это может быть связано с тем, что в растворе гадодиамида существуют определенное количество свободных ионов гадолиния.

6. Впервые показано, что использование гадодиамида для улучшения контраста визуализации при исследованиях с помощью МРТ не является безопасным для организма. Существует риск возникновения ряда заболеваний, что является важным выводом для медицины.

7. С помощью метода фотонной корреляционной спектроскопии получено,

112 что в водных растворах альбумина, содержащих ионы цезия, коэффициент трансляционной диффузии увеличивается при нагревании. Заметный рост коэффициента трансляционной диффузии наблюдается в диапазоне температур 303-323 К, что, вероятно, связано с разрушением дипольных белковых нанокластеров.

Список литературы диссертационного исследования кандидат физико-математических наук Чжан Сяолэй, 2012 год

1. Петрова Г.П. Оптические спектральные методы исследования жидкостей и растворов (часть 1). — М.: физ. Фак. МГУ, 2008, С. 29.

2. Petrova G.P., Petrusevich Yu.M., Evseevicheva A.N. // Gen. Physiol, and Biophys. 1998, 17, N2, P. 97.

3. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Евсеевичева A.H. // Вестн. Моск. Ун-та. Физ. Астрон. 1998, № 4, С. 71 (Moscow University Phys. Bull. 1998, № 4, P.01 41. Ji).

4. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Тен Д.И. «Образование дипольных комплексов в растворах белков с малой концентрацией ионов тяжелых металлов: диагностика методом лазерного светорассеяния» // Квант, электрод. 2002, 32, № 10, С. 897-901.

5. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Евсеевичева А.Н. и соавт. «Физичесике методы исследования воздействия ионов свинца на белки в растворах» // Вестн. Моск. Ун-та. Физ. Астрон. 2003, № 2, С. 42-46.

6. Зубарев А.В., Гажонова В.Е. «Диагностические возможности магнитно-резонансной, ультразвуковой и рентгеновской ангиографии при исследовании сосудов почек» // Мед визуализация. 2003, № 1, С. 106-121.

7. Cowper S.E., Robin H.S., Steinberg S.M., et al. " Scleromyxoedema-like cutaneous dieases in renal-dialysis patients" // Lancet. 2000, 356, P. 1000-1001.

8. Grobner T. "Gadolinium a specific trigger for the development of nephrogenic fibrosing dermopathy and nephrogenic systemic fibrosis?" // Nephrol Dial Transplant. 1745, 21, P. 1104-1108.

9. Камминса Г., Пайк Э.Р. Спектроскопия оптического смешения и корреляция фотонов. -М.: Наука, 1978.

10. Ю.Ленинджер А. Биохимия. М., 1974.

11. Страйер Л.Б. Биохимия. — М.: Мир, 1984.12.http://www.xumuk.ru/biochem/36.html.

12. Tanford Ch. "Physical Chemistry of Macromolecules" // Willey, New York, 1961.

13. Тенфорд Ч. Физическая химия полимеров. -M.: Изд. Химия, 1965.

14. Bier J. "Electrophoresis"//N.Y., 1968.

15. Мартин Р. Введение в биофизическую химию. М.: Мир, 1966.

16. Edsall J.T. et al. "Light Scattering in Solutions of Serum Albumin: effects of charge and ionic strength" // J. of American Chem. Soc., 1950, V.72, P. 464.

17. Steinhard J., Zaiser E.M. // Adv. Protein Chem., V. 10, P. 152.

18. Кнорре Д.Г., Крылова Л.Ф., Музыкантов B.C. Физическая химия. М.: высшая школа, 1981, С. 103.

19. Волькенштейн М.В. Молекулярная оптика. -М.: ГИТТЛ, 1951.

20. Фабелинский И.Л. Молекулярное рассеяние света. М.: Наука, 1965.22."Вредные вещества в промышленности. Справочник для химиков, инженеров и врачей. Неорганические и элементоорганические соединения" // 7-е изд. т.З, Л., Химия, 1977, С. 608.

21. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М. «Электростатические взаимодействия в растворах биополимеров по данным рэлеевского рассеяния света» // Вестник МГУ, Сер. Физ. Астр., 1994, Т.35, № 3, С. 45-50.

22. Долин П.А. Справочник по технике безопасности. М.: Энергоатомиздат, 1985, С. 824.

23. Cabannes J. "La diffusion moleculaire de la lumiere" // Paris, 1929.

24. Дебай П. Избранные труды. М., 1987, С. 363.

25. Цветков В.Н. и др. Структура макромолекул в растворах. — М., 1964.

26. Berne B.J., Harp G.D. // Advan. Chem. Phys. 1970, V. 17. P. 63-226.

27. Ревокатов О.П., Гангардт М.Г. Проблемы магнитного резонанса. М.: Наука, 1978, С. 147-165.

28. Ван Кампен Н.Г. Стохастические процессы в физике и химии. М.: Высшая школа, 1990.31 .Хорстхемке В., Лефевр Р. Индуцированные шумом переходы. М.: Мир, 1987.

29. Резибуа П., Ленер М.Де. Классическая теория жидкостей и газов. М.: Мир, 1987.

30. Климонтович Ю.Л. Статистическая физика. -М.: Наука, 1982.

31. Bart V.T., Sergey S. "Wave scattering in complex media: From theory to applications" // 2002, P. 170.

32. Redouane В., Robert P. "Soft-matter characterization" // 2008, P. 340.

33. Dhont J.K.G. "An introduction to dynamics of colloids" //2003, P. 134.

34. Cummins H.Z. "In photo correlation and L. B. spectroscopy" // Plenum Press, N.Y.-L. 1974.

35. Петрусевич Ю.М. Взаимодействие биополимеров в растворе. Докт дисс. М. 1992.

36. Scatchard G.J., Batchelder А.С., Brown A. "Osmotic equilibrium in solution of serum albumin and sodium chloride" // J. Am. Chem. Soc. 1946, 68, P.2315-2323.

37. Scatchard G.J. "The attraction of protein for small molecules and ions" // Ann. N.Y. Acad. Sci., 1949, V. 51, P. 2315.

38. Edsall J.T. et al. "Light Scattering in Solutions of Serum Albumin: effects of charge and ionic strength" // J. of American Chem. Soc., 1950, V. 72, P. 4641.

39. Petrusevich Yu.M., Petrova G.P. "Electrostatic Interaction in Biopolymer Solutions Investigated by NMR and Laser Light Scattering" // SPIE, 1993, Vol. 1884, P. 70-76.

40. Петрова Т.П. Молекулярная подвижность и межмолекулярные взаимодействия в оптически анизотропных жидких системах. Докт. Дисс. М. 1999.

41. Petrova G.P., Petrusevich Yu.M., Evseevicheva A.N. "Molecular Clusters in Water Protein Solutions in The Presence of Heavy Metal Ions" // General Physiology and Biophysics, 1998, V. 17(2), P. 97-104.

42. Petrusevich Yu.M., Petrova G.P. "Electrostatic Interaction in Biopolymer Solutions Investigated by NMR and Laser Light Scattering" // SPIE, 1993, Vol. 1884, P. 70-76.

43. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Ширкова И.И., Ревокатов О.П. «Взаимодействие сывороточного альбумина с водой при различных концентрациях водородных ионов по данным рэлеевского рассеяния» // Вестник МГУ, Сер. Физ. Астр, 1987, Т. 28, № 2, С. 59-63.

44. Petrusevich Yu.M., Petrova G.P., Evseevicheva A.N. "Instability of Proteins in The Solution at The Presence of Toxic Heavy Metals" // Ecology of Cities. Int. Conf. Proceedings, Rhodes, Greece, 1998, P. 304-313.

45. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Евсеевичева A.H. «Физические методы мониторинга токсических тяжелых металлов» // II Всероссийская научная конференция: Физические проблемы экологии, Москва, 1999, Тезисы докладов, Т. 1.

46. Петрова Г.П., Петрусевич Ю.М., Гурова М.А., Перфильева И.А., Тихонова Т.Н., Федрова К.В., Чжан Сяолей «Физический механизм токсического воздействия тяжелых металлов на белки и ферменты» // Мед. Физика, 2010, №2 (46), С. 101-104.

47. Xia J., Paul L. Dubin "Dynamic and electrophretic light scattering of a water-soluble complex formed between pepsin and poly (ethylene glycol) " // Macromolecules, 1993, № 26, P. 6688-6690.

48. Shinji A., Atsushi Т., etc. "Formation of an intrapolymer complex from human serum albumin and poly (ethylene glycol)" // Langmuir, 1999, № 15, P. 940947.

49. Kazuyuoshi Ogawa, Atsushi Nakayama, Etsuo kokufuta " Electrophoretic behavior of ampholitic polymers and nanogels " // J. Phys. Chem. 2003, № 107, P. 8223-8227.

50. Toshiyuki Matsudo, Kazuyoshi Ogawa, Etsuo Kokufuta " intramolecular complex formation of poly (N-isopropylacrylamide) with human serum albumin " // Biomacromolecules, 2003, № 4, P. 728-735.

51. Etsuo Kokufuta, Hiroichi Nishimura "Complexation of pepsin poly (ethylene glycol)" // Polymer bulletin, 1991, № 26, P. 277-282.

52. Пилипенко A.T. «Натрий и калий» // Справочник по элементарной химии. -Киев: Наукова думка, 1978, С. 316—319.

53. Дроздов А. «Яростные металлы» // Энциклопедия для детей. — М.: Химия Аванта, 2002, С. 184—187.

54. Ахметов Н.С. Общая и неорганическая химия. — М.: Высшая школа, 2001.

55. Некрасов Б.В. Основы общей химии. — М.: Химия, 1974.

56. Спицын В.И., Мартыненко Л.И. Неорганическая химия. —М.: МГУ, 1991, 1994.64.http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A5%D0%BB%D0%BE%Dl%80%D0%B8 %D0%B4%D 1 %86%D0%B5%D0%B7%D0%B8%D 1 %8F

57. Лидин Р.А., Андреева J1.JL, Молочко В.А. Константы неорганических веществ: справочник. — М.: Дрофа, 2006, С. 685.

58. Brewer А.К. "The high рН therapy for cancer tests on mice and humans " // Pharmacology Biochemistry & Behavior, 1984, T. 21, № 1, C. 1-5.

59. Low J.C., Wasan K.M., Fazli L., Eberding A., Adomat H., Guns E.S.

60. Assessing the therapeutic and toxicological effects of cesium chloridefollowing administration to nude mice bearing PC-3 or LNCaP prostate cancer xenografts " // Cancer Chemother Pharmacology, 2007, T. 60, № 6, C. 821-829.

61. Cesium Chloride. Complementary and Alternative Medicine: Herbs, Vitamins, and Minerals. American Cancer Society. Архивировано из первоисточника 18 августа 2011. Проверено 13 мая 2011.

62. Государственный реестр лекарственных средств. Министерство здравоохранения и социального развития РФ. Архивировано из первоисточника 18 августа 2011. Проверено 13 мая 2011.

63. Гончаров А.И., Корнилов М.Ю. Справочник по химии. Киев: Вища школа, 1977.

64. Перельман В.И. Краткий справочник химика. — М.: Химия, 1964.

65. Перельман. Ф.М. Рубидий и цезий. М.: АН УССР, 1960. С. 140.11980.http://ru.wikipedia.org/wiki/%D5%EB%EE%F0%E8%E4%E6%E5%EB%E5 %E7%E0(III)81 .http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%96%D0%B5%D0%BB%D0%B5%D0%B7 %D0%BE

66. Rajaram R.K., Mohana Rao J.K. " Crystal structure of lead acetate trihydrate " // Zeitschrift fur Kristallographie. Vol. 160, No. 3-4, P. 225-233.

67. Рипан P., Четяну И. Неорганическая химия. Химия металлов. М.: Мир, 1971, Т. 1.С. 561.84.http://ru.wikipedia.org/wiki/%C5%E2%F0%EE%EF%E8%E9

68. Eyre D.R. "Collagen: molecular diversity in the bodys protein scaffold" // Science. 1980, No. 207, P. 1315-1322.

69. Bornstein P., Traub W. " The chemistry and biology of collagen " // In: Neurath H. and Hill R. L. (eds.), Academic Press, The Protein (3rd ed), vol. 4, P. 411-632.

70. Ramachandran G.N., Reddi A.H. "Biochemistry of collagen" // Plenum, 1976.

71. Gross J. "Collagen biology: structure, degradation, and diease" // Harvey Lecture. 68, P. 351-432.

72. Patrickios C.S., Yamasaki E.N. "Analytical Biochem" // 1995, V. 231, P. 82-91.

73. Chaiyavat Chaiyasut, TaKao Tsuda. // Chromatography. 2001, V. 22, N 2.91 .Neurath H., Bailey K. " The Proteins " // 1954, V. 2. Part. A.92.http://www.sigmaaldrich.com/life-science/metabolomics/enzyme-explorer/analytical-enzymes/pepsin.html

74. Коротько Г.Ф. «Желудочное пишеворение в технологическом ракурсе» // Кубанский научный медицинский Вестник. 2006, № 7-8 (88-89), С. 17.

75. Эскин В.Е. Рассеяние света растворами полимеров. М.: Изд. Наука, 1973.

76. Tang J., Sepulveda P., Marciniszyn J. Jr., etc. // Proc Natl Acad Sei USA, 1973, 70, P. 3437.

77. Sepulveda P., Marciniszyn JJr., Liu D., Tang J. // J Biol Chem. 1975, 250, P. 5082.

78. Wright AK, Thompson MR. " Hydrodynamic structure of bovine serum albumin determined by transient electric birefringence" // J. biophys. 1975, 15, P. 137-141.

79. Нейрат Г., Бейли К. Белки. М.: ИЛ, 1958.

80. Уайт Л. и др. Основы биохимии. -М.: 1981, Т. 1.

81. High WA, Ayers RA, Chandler J, et al. "Gadolinium is detectable within the tissue of patients with nephrogenic systemic fibrosis" // J Am Acad Dermatol. 2007, 56.