Флуоресцентный лантанидный иммуноанализ гормона тироксина с использованием европиевых меток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Жердева, Виктория Вячеславовна

• Жердева, Виктория Вячеславовна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Жердева, Виктория Вячеславовна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Флуоресцентный анализ и его применение в биоаналитических исследованиях

1.1. Флуоресцентный анализ. Флуоресцентные метки: свойства, принцип выбора.

1.2. Основные группы флуорофоров и их характеристика. Проблема фоновой флуоресценции.

1.3. Техники флуоресцентного анализа и их применение.

1.3.1. Поляризация флуоресценции.

1.3.2. Флуоресцентная корреляционная спектроскопия.

1.3.3. Флуоресцентный резонансный перенос энергии.

Глава 2. Лантанидные метки. Технологии лантанидного анализа и их применение. основные тенденции развития.

2.1. Лантанидные метки.

2.1.1. Координационные свойства лантанидов.

2.1.2. Классификация комплексных соединений лантанидов.

2.1.3. Свойства хелатов РЗЭ с р-дикетонами.

2.1.4. Механизм возбуждения флуоресценции лантанидов.

2.1.5. Основные требования, предъявляемые к лантанидной метке.

2.2. Технологии лантанидного флуоресцентного анализа.

2.2.1. Принцип регистрации флуоресценции ФИАВР.

2.2.2. Диссоциативно-усиленный лантанидный флуоресцентный иммуноанализ (DELFIA).

2.2.3. FIAgen (CYBERFLUOR®) и аналогичные недиссоциативные системы.

2.2.4. Ферментативно-усиленный лантанидный иммуноанализ (EALL)

2.2.5. Гомогенный анализ, основанный на времяразрешенном флуоресцентном резонансном переносе энергии. TRACE технология

2.3. Люминесцентные частицы.

2.4. Основные тенденции развития биоанализа. Высокоэффективный скрининг и биологические микрочипы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

Глава 3. Материалы и методы.

3.1. Материалы.

3.2. Приборы и оборудование.

3.3. Синтез и характеристика конъюгатов.

3.3.1. Получение конъюгатов тироксина с белковыми носителями.

3.3.2. Синтез конъюгата мАт-ДТПА-Eu.

3.3.3.Получение конъюгата тироксина с европием.

3.3.4. Синтез конъюгата мАт-ИТЦ-ДТТА-Eu.

3.3.5. Синтез конъюгатов БСА и мАт с N-ГСИЭ-ДТПА-АБТФА.

3.3.6. Синтез мАт-биотин.

3.3.7. Получение конъюгата стрептавидина с наночастицами.

3.4. Получение моноклональных антител их очистка.

3.4.1. Иммунизация мышей.

3.4.2. Слияние, отбор, клонирование.

3.4.3. Очистка и характеристика моноклональных антител.

3.5. Проведение иммуноферментного анализа.

3.5.1. Подготовка иммуносорбента для анализа Т4.

3.5.2. Проведение твердофазного иммуноферментного анализа.

3.6. Проведение иммунофлуоресцентного анализа с временным разрешением.

3.6.1. Проведение твердофазного ФИАВР с Т4-ДТПА-Еи.

3.6.2. Приготовления контрольных и калибровочных проб Т 4 в сухих пятнах крови.

3.6.3. Проведение твердофазного ФИАВР с мАт-ИТЦ-ДТТА-Eu.

3.6.4. Недиссоциативный ФИАВР с мАт - ДТПА-АБТФА-Eu.

3.6.5. Проведение ФИАВР с наночастицами.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 4. Получение и характеристика моноклональных антител к тироксину.

4.1. Тироксин. Врожденный гипотиреоз. Неонатальный скрининг.

4.2. Тироксин как низкомолекулярный гаптен. Получение и характеристика конъюгатов тироксина с белком.

4.4. Характеристика моноклональных антител.

Глава 5. Диссоциативный ФИАВР для определения тироксина в сухих пятнах крови.

5.1. Выбор схемы анализа.

5.2. Оптимизация состава буфера для определения тироксина.

5.4. Определение тироксина в сухих пятнах крови.

Глава 6. Новые лантанидные метки для определения тироксина в недиссоциативном ФИАВР.

6.1. Диссоциативный ФИАВР с использованием мАТ-ИТЦ-ДТТА-Eu.

6.2. Новый хелат на основе ДТПА и АБТФА для недиссоциативного ФИАВР.

6.2.1. Принцип выбора метода.

6.2.2. Синтез и характеристика конъюгатов.

6.2.3. Конкурентный недиссоциативный ФИАВР.

6.3. ФИАВР с использованием наночастиц, содержащих Ей - (3дикетонатные комплексы.

6.3.1. Метки-частицы в лантанидном анализе.

6.3.2.Неспецифическое связывание.

6.3.3. Иммунофлуоресцентный анализ со StAv-NP. для определения Т4.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Флуоресцентный лантанидный иммуноанализ гормона тироксина с использованием европиевых меток»

На протяжении многих лет методы иммунохимического анализа, основанные на специфическом связывании определяемого антигена антителами, занимают прочное положение среди наиболее важных биохимических методов исследования. Они нашли широкое применение в медицинской практике для диагностики инфекционных, опухолевых заболеваний, аутоиммунных и эндокринных расстройств; в лекарственном, санитарно-эпидемиологическом, экологическом мониторинге; в изучении структуры, биосинтеза и механизма действия антител, в клеточном типировании и т.д.

Среди методов иммуноанализа, различающихся системой детекции, наряду с иммуноферментным и радиоиммунным, широко используется иммунофлуоресцентный метод. Иммунофлуоресцентный метод отличает богатство и разнообразие меток, стабильных в течение длительного времени. Применение флуоресцентных меток не ограничивается только иммунофлуоресцентным анализом. Многие флуоресцентные красители в литературе и в каталогах фирм-производителей выступают под названием «molecular probes» («молекулярные зонды»). Подобное название подразумевает, что данные маркеры являются тонким инструментом для изучения огромного количества процессов in vivo и ex vivo в клеточной и молекулярной биологии, обладают высокой информативностью и чувствительностью вплоть до детектирования одиночной молекулы или единичного процесса. Приложение флуоресцентных зондов и маркеров в различных областях исследований огромно. По данным фирмы «Invitrogen» существует порядка 50 ООО литературных ссылок только на использование коммерческих зондов во флуоресцентном анализе.

До середины 80-ых годов флуоресцентные маркеры значительно уступали радиоактивным и ферментативным меткам по чувствительности. Это объяснялось значительной фоновой флуоресценцией биологического образца в области свечения наиболее широко распространенных флуоресцеиновых и родаминовых меток. Данная проблема была решена с появлением в 80-ые годы люминесцентных меток, базирующихся на принципе временного разрешения детекции флуоресцентного сигнала. Сам метод получил название метода флуоресцентного иммуноанализа с временным разрешением (ФИАВР). Принцип его заключается в том, что фоновое свечение, характеризующееся коротким временем жизни в возбужденном состоянии (наносекунды-микросекунды), затухает к моменту отсроченной регистрации люминесцентного сигнала образца.

Наиболее актуальными современными задачами современных биоаналитических систем являются миниатюризация формата и мультианалитные исследования с выходом на высокоэффективный скрининг. В связи с этим, развитие флуоресцентного анализа по настоящее время происходит в основном в следующих направлениях: поиск новых способов (технологий) проведения иммунохимических реакций и разделения их компонентов, разработка новых методов детекции и обработки флуоресцентного сигнала, поиск новых высокочувствительных маркеров, в том числе на основе лантанидных хелатов, и увеличение чувствительности существующих.

ЦЕЛЬЮ настоящей работы явилась разработка лантанидного иммунофлуоресцентного анализа для определения гормона тироксина с использованием моноклональных антител к тироксину и европиевых меток, сопоставление разных меток в выбранной схеме иммуноанализа.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи: □ получить моноклональные антитела к тироксину с высокой степенью аффинности и специфичности, охарактеризовать полученные мАт; выбрать наиболее чувствительную схему диссоциативного лантанидного иммуноанализа для определения общего тироксина (Т4) в сухих пятнах крови; изучить свойства новой флуоресцентной метки (конъюгата N-гидроксисукцинимидного эфира диэтилентриаминпентауксусной кислоты (ДТПА) и аминобензоилтритфторацетона (АБТФА)) и разработать недиссоциативный метод анализа с ее использованием для определения Т4; разработать недиссоциативный метод анализа тироксина с использованием латексных наночастиц, содержащих европий -дикетонатный комплекс.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Жердева, Виктория Вячеславовна

ВЫВОДЫ

1) Получены моноклональные антитела к тироксину. Для разработки анализа выбраны мАт 6Е6Е5 с константой связывания 108 М"1, сохраняющие свои иммунологические свойства на протяжении длительного времени.

2) На основе полученных моноклональных антител и тироксина, меченного ДА ДТПА, разработан метод определения тироксина в сухих пятнах крови. Данный метод позволяет определять общий тироксин с пределом детекции 10 нМ и коэффициентом вариации не более 15 %.

3) Разработан трифункциональный хелат, по чувствительности не уступающий бифункциональным хелатам, используемым в диссоциативных схемах. Разработаны методы получения коньюгатов с новой флуоресцентной меткой на основе N-гидроксисукцинимидного эфира ДТПА и АБТФА и изучены их флуоресцентные свойства.

4) Впервые показано использование нового трифункционального хелата в иммунофлуоресцентном твердофазном гетерогенном анализе тироксина в схеме с мечеными антителами и иммобилизованным антигеном. Предел детекции тироксина составил 7 нМ с коэффициентом вариации не более 10%, что соответствует чувствительности диссоциативного ФИАВР для определения тироксина в той же схеме.

5) Использование нового трифункционального комплексона сокращает время анализа, который проводится в одну стадию, исключает использование усиливающего раствора, снимает проблему загрязнения иммуноаналитической системы солями лантанидов и тяжелыми металлами.

6) Впервые продемонстрировано использование европиевых наночастиц в конкурентном анализе гаптенов, в частности, для определения тироксина. Данный анализ позволяет определять тироксин в концентрации 0.1 нМ и демонстрирует 70-кратное увеличение чувствительности по сравнению с диссоциативным флуоресцентным иммуноанализом в схеме с иммобилизованным антигеном.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Жердева, Виктория Вячеславовна, 2007 год

1. Чард Т. Радиоиммунологические методы. М.: Мир, 1981, с.246.

2. Дзантиев Б.Б., Осипов А.П. Классификация и характеристика методов иммуноферментного анализа. В сб.: Неизотопные методы иммуноанализа. Итоги науки и техники, сер. Биотехнология, 1987, т.З.с.57-116.

3. Hage D.S. Immunoassays. Anal. Chem., 1995, v.67, p.455 - 462.

4. Kricka, L. J. Selected strategies for improving assay sensitivity and reliability of immunoassays. Clin. Chem., 1994, v.40, p.347 - 357.

5. Kabir J.S. Detection of Helicobacter pylori in faeces by culture, PCR and enzyme immunoassay. J. Med. Microbiol., 2001, v.50, p. 1021-1029.

6. Black C.M. Current methods of laboratory diagnosis of Chlamydia trachomatis infections. Clin. Microbiol. Rev., 1997, v. 10, p. 160- 184.

7. Soini E., Hemmila I. Fluoroimmunoassay: present status and key problems. -Clin. Biochem., 1979, v.25, p.353-361.

8. Hemmila, I., Dakubu, S., Mukkala, V.-M., Siitari, H., and Lovgren, T. Europium as a label in time-resolved immunofluorometric assays. Anal. Biochem., 1984, v. 137, p. 335 - 343.

9. Савицкий А.П. Флуоресцентный анализ: иммуноанализ, гибридные ДНК, биосенсоры. Успехи биол. химии, 1990, t.XXXI, с.209-241.

10. И. Савицкий А.П. Флуоресцентный иммуноанализ. Итоги науки и техники. М.: ВИНИТИ, 1987, т.З, с.117-166.

11. Diamandis E.P. Immunoassays with time-resolved fluorescence spectroscopy: principles and applications. Clin. Biochem., 1988, v.21, p.139-150.

12. Turconi S., Bingham R., Haupts U., Pope A. Developments in fluorescence lifetime-based analysis for ultra-HTS. Drug Discovery Today, 2001, v.6, №12 (Suppl.), p.S27-39.

13. Цыпленков П.В., Морозов В.П., Рогозкин В.А. Флуоресцентный иммуноанализ белков. Биоорг. хим., 1987, т.13, № 12, с.1605 - 1618.

14. Durkop A. Fluorescent markers, probes and labels. In: 4th European Short Course on Principles & Applications of Time-Resolved Fluorescence Spectroscopy. - Berlin, October 30 - November 3, 2006, http://www.picoquant.com/trfcourse.htm

15. Dandliker W.B., Ksu M.L., Levin J., Rao B.R. Fluorescence polarisation in immunochemistry. Meth. Enzymol., 1981, v.74, p.3-28.

16. Karolin J., et al. Fluorescence and Absorption Spectroscopic Properties of Dipyrrometheneboron Difluoride (BODIPY) Derivatives in Liquids, Lipid Membranes, and Proteins. J.Am.Chem.Soc., 1994, v.l 16, p.7801.

17. Buschmann V., Weston K.D., Sauer M. Spectroscopic study and evaluation of red-absorbing fluorescent dyes. Bioconjug. Chem., 2003, v. 14, p.195-204.

18. Song L., Hennink E.J., Young I.T., Tanke H.J. Photobleaching kinetics of fluorescein in quantitative fluorescence microscopy. Biophys. J., 1995, v.68, p.2588-2600.

19. Sjoback R., Nygren J., Kubista M. Absorption and Fluorescence Properties of Fluorescein. Spectrochim. Acta A 51, 1995, v.7, p.20.

20. Wolfbeis O.S., Koller E., Hochmuth P. The unusually strong effect of 4-cyano group upon electronic spectra and dissociation constants of 3-substituted 7-hydroxycoumarins. Bull. Chem. Soc. Jap., 1985, v.58, N2, p.731-734.

21. Sun W.C., Gee K.R., Haugland R.P. Synthesis of novel fluorinated coumarins: excellent UV-light excitable fluorescent dyes. Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, v.8, p. 3107 - 3110.

22. Hemmila I. Fluoroimmunoassay and immunofluorometric assay. Clin. Chem., 1985, v.31, N 3, p.359-370.

23. Diwu Z., Zhang C., Klaubert D.H., Haugland R.P. Fluorescent Molecular Probes VI: The Spectral Properties and Potential Biological Applications of Water-Soluble Dapoxyl™ Sulfonic Acid. J. Photochem. Photobiol. A 131, 2000, v.95, p.785-789.

24. Yguerabide J., Talavera E., Alvarez J.M., Afkir M. Pyrene-labeled DNA probes for homogeneous detection of complementary DNA sequences: poly(C) model system. Anal. Biochem , 1996, v. 241, p. 238-247.

25. Савицкий А.П., Папковский Д.Б., Пономарев T.B., Березин И.В. Фосфоресцентный иммуноанализ. Металлопорфирины альтернатива редкоземельным флуоресцентным меткам. - Докл. АН СССС, 1989, т.304, N 4, с. 1005-1008.

26. Савицкий А.П., Папковский Д.Б., Флуоресцентный иммуноанализ. Порфирины новый тип меток для иммуноанализа. - Докл. АН СССР, 1987, т.293, №3, с.744-745.

27. Kronick M.N. The use of phycobiliproteins as fluorescent labelsin immunoassays. J. Immunol. Methods, 1986, v.92, p.1-13.

28. Chudakov D.M., Lukyanov S., Lukyanov K.A. Fluorescent proteins as a toolkit for in vivo imaging. Trends Biotechnol., 2005, v.23, N12, p.605-613.

29. Benjamin D., Colombi M., Stoecklin G., Moro C.A. GFP-based assay for monitoring post-transcriptional regulation of AREmRNA turnover. Mol. BioSyst., 2006, v.2, p.561-567.

30. Chan W.C.W. and Nie S. Quantum dot bioconjugates for ultrasensitive nonisotopic detection. Anal. Science, 1998, v.281, p.2016-2018.

31. Bruchez M.Jr., Moronne M., Gin P., Weiss S., Alivisatos A.P. Semiconductor nanocrystals as fluorescent biological labels. Science, 1998, v.281, p.2013.

32. Lentz B.R. Use of fluorescent probes to monitor molecular order and motions within liposome bilayers. Chem. Phys/ Lipids , 1993, v.64, p.99-116.

33. Jameson D.M., Seifried S.E. Quantification of protein-protein interactions using fluorescence polarization. Methods, 1999, v. 19, p.222-233.

34. Jameson D.M., Sawyer W.H. Fluorescence anisotropy applied to biomolecular interactions. Methods Enzymol., 1995, v. 246, p. 283-300.

35. Dandliker W.B., De Saussure V.A. Fluorescence polarization in immunochemistry. Immunochemistry, 1970, v.7, p.799-828.

36. Dandliker W.B., Kelly R.J., Dandliker J., Farquahar J., Levin J. Fluorescence polarization immunoassay. Theory and experimental method. -Immunochemistry, 1973, v. 10, p.219-227.

37. Eremin S. A., Smith D.S. Fluorescence polarization immunoassays for pesticides. Comb. Chem. High Throuput Screen., 2003, v.6, N.3, p. 257266.

38. Owicki J.C. Fluorescence polarization and anisotropy in high throughput screening: perspectives and primer. J. Biomol. Screen., 2000, v.5, p.297-306.

39. Tota M.R., Daniel S., Sirotina A., Mazina K.E., Fong T.M., Longmore J., Strader C.D. Characterization of a fluorescent substance P analog. -Biochemistry, 1994, v.33, p.13079-13086.

40. Parker G.J., Law T.L., Lenoch F.J., Bolger R.E. Development of high throughput screening assays using fluorescence polarization: nuclear receptor-ligand-binding and kinase/phosphatase assays. J. Biomol. Screen., 2000, v.5, p.77-88.

41. Rozema D.B., Poulter C.D. Yeast protein farnesyltransferase. pKas of peptide substrates bound as zinc thiolates. Biochemistry, 1999, v.38, p. 13138-13146.

42. Zhao G., Meier T.I., Kahl S.D., Gee K.R., Blaszczak L.C. BOCILLIN FL, a sensitive and commercially available reagent for detection of penicillin-binding proteins. Antimicrob. Agents Chemother., 1999, v. 43, p.l 1241128.

43. Schade S.Z., Jolley M.E., Sarauer B.J., Simonson L.G. BODIPY-alpha-casein, a pH-independent protein substrate for protease assays using fluorescence polarization. Anal. Biochem., 1996, v.243, p. 1-7.

44. Kido C., Murano S., Tsuruoka M. Rapid and simple detection of PCR product DNA: a comparison between Southern hybridization and fluorescence polarization analysis. Gene, 2000, v.259, p.123-127.

45. Singh K.K., Rucker Т., Hanne A., Parwaresch R., Krupp G. Fluorescence polarization for monitoring ribozyme reactions in real time. -Biotechniques, 2000, v.29, p.344-348.

46. Chen X., Levine L., Kwok P.Y. Fluorescence polarization in homogeneous nucleic acid analysis. Genome Res., 1999, v.9, p.492-498.

47. Rusinova E., Tretyachenko-Ladokhina V., Vele O., Senear D., Ross A. Alexa and Oregon Green dyes as fluorescence anisotropy probes for measuring protein-protein and protein-nucleic acid interactions. J. Anal. Biochem., 2002, v.308, N18, p.369-375

48. Krikounova V.S., Abuknesha R., Eremin S.A. Express detection of pentachlorphenol as dioxins precursor in natural water. Scientific World J., 2002, v.27, N2, p.l 132-1137.

49. Thompson N.L. Fluorescence Correlation Spectroscopy Topics in Fluorescence Spectroscopy, Lakowicz J.R., Ed. 1: Techniques, 1991, p.337-378.

50. Hess S.T., Huang S., Heikal A.A., Webb W.W. Biological and chemical applications of fluorescence correlation spectroscopy: a review. -Biochemistry, 2002, v.41, p.697-705.

51. Moore K.J., Turconi S., Ashman S., Ruediger M., Haupts U., Emerick V., Pope A.J. Single Molecule Detection Technologies in Miniaturized High Throughput Screening: Fluorescence Correlation Spectroscopy. J. Biomol. Screen., 1999, v.4, p.335-354.

52. Kinjo M, Rigler R. Detection of asymmetric PCR products in homogeneous solution by fluorescence correlation spectroscopy. Nucleic Acids Res., 1995, v.23, p.l795-1799.

53. Kinjo M. Ultrasensitive hybridization analysis using fluorescence correlation spectroscopy.- Biotechniques, 1998, v.25, p.706-712.

54. Van Craenenbroeck E, Engelborghs Y. Quantitative characterization of the binding of fluorescently labeled colchicine to tubulin in vitro using fluorescence correlation spectroscopy. Biochemistry, 1999, v.38, p.5082-5088.

55. Lakowicz J.R., Gryczynski I., Gryczynski Z. High Throughput Screening with Multiphoton Excitation. J. Biomol.Screen., 1999, v.4, p.355-362 .

56. Schwille P., Korlach J., Webb W.W. Fluorescence correlation spectroscopy with single-molecule sensitivity on cell and model membranes. -Cytometry, 1999, v.36, p. 176-182.

57. Tjernberg L.O., Pramanik A., Bjorling S., Thyberg P., Thyberg J., Nordstedt C., Berndt K.D., Terenius L., Rigler R. Amyloid beta-peptide polymerization studied using fluorescence correlation spectroscopy. -Chem. Biol., 1999, v. 6, p.53-62 .

58. Schuler J., Frank J., Trier U., Schafer-Korting M., Saenger W. Interaction kinetics of tetramethylrhodamine transferrin with human transferrin receptor studied by fluorescence correlation spectroscopy. Biochemistry, 1999, v.38, p.8402-8408.

59. Widengren J., Mets U., Rigler R. Fluorescence correlation spectroscopy of triplet states in solution: a theoretical and experimental study. J. Phys. Chem., 1995, v.99, p. 13368.

60. Selvin P.R. Principles and biophysical applications of lanthanide based probes Review. Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct., 2002, v.31, p.275-302.

61. Selvin PR. The renaissance of fluorescence resonance energy transfer Review. Nat. Struct. Biol., 2000, v.7, p.730 - 734.

62. Lakowicz, J. R. 1999. Energy transfer. In Principles of Fluorescence Spectroscopy, 2nd ed. Plenum, New York. 367-394

63. Selvin PR. Fluorescence resonance energy transfer. Methods Enzymol., 1995, v.246, p.300-334.

64. Wu P, Brand L. Resonance energy transfer: methods and applications. -Anal. Biochem., 1994, v.218, p.1-13.

65. Berney C, Danuser G. FRET or No FRET: A quantitative comparison. -Biophys J., 2003, v.84, p.3992-4010.

66. Gordon G.W., Berry G., Liang X.H., Levine В., Herman B. Quantitative fluorescence resonance energy transfer measurements using fluorescence microscopy. Biophys. J., 1998, v.74, p.2702-2713.

67. Matayoshi E.D., Wang G.T., Krafft G.A., Erickson. Novel fluorogenic substrates for assaying retroviral proteases by resonance energy transfer. J. Science, 1990,v.247, p.954-958.

68. Marras S.A., Kramer F.R., Tyagi S. Efficiencies of fluorescence resonance energy transfer and contact-mediated quenching in oligonucleotide probes. -Nucleic Acids Res., 2002, v.30, p. 122.

69. Tyagi S. Kramer F.R. Molecular beacons: probes that fluoresce upon hybridization. Nat. Biotechnol., 1996, v.14, p.303-308.

70. Morrison L.E. Time-resolved detection of energy transfer: theory and application to immunoassays. Anal. Biochem., 1988, v. 174, p. 101 - 120.

71. Thelwell N., Millington S., Solinas A., Booth J., Brown T. Mode of action and application of Scorpion primers to mutation detection. Nucleic Acids Res., 2000, v.28, p.3752-3761.

72. Cardullo R.A., Agrawal S., Flores C., Zamecnik P.C., Wolf D.E. Detection of nucleic acid hybridization by nonradiative fluorescence resonance energy transfer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, v.85, p.8790-8794.

73. Chen X., Zehnbauer В., Gnirke A., Kwok P.Y. Fluorescence energy transfer detection as a homogeneous DNA diagnostic method. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, v.94, p.10756-10761.

74. Gulnik S.V., Suvorov L.I., Majer P., Collins J., Kane B.P., Johnson D.G., Erickson J.W. Design of sensitive fluorogenic substrates for human cathepsin D. FEBS Lett., 1997, v.413, p.379-384.

75. Sammes P.G., Yahioglu G. Modern bioassays using metal chelates as luminescent probes. Nat. Prod. Rep., 1996, v. 13, N1, p. 1-28.

76. Frederick R.S. Terbium(III) and europium(III) ions as luminescent probes and stains for biomolecular systems. Chem. Rev., 1982, v.8, N5; p.541-552.

77. Полуэктов Н.С., Кононенко Л.И. Спектрофотометрические методы разделения индивидуальных РЗЭ. Киев: Наукова думка, 1968, 170 с.

78. Костромина Н.А. Комплексонаты РЗЭ. М.: Наука, 1980, 220 с.

79. Пришибл Р. Комплексоны в химическом анализе. М.: ИЛ, 1960,225 с.

80. Дятлова Н.М., Темкина В.Я., Колпакова И.Д. Комплексоны. М.: Химия, 1970,461 с.91. (3 -Дикетонаты металлов. М.: Наука, 1980,217 с.

81. Полуэктов И.С., Безлуцкая И.В., Закономерности образования разнолигандных комплексов на основе (3-дикетонатов редкоземельных элементов. В кн.: Теоретическая и прикладная химия Р-дикетонатов металлов. - М.: Наука, 1985, с. 135-142.

82. Пилипенко А.Т., Тананайко М.М. Разнолигандные и разнометальные комплексы и их применение в аналитической химии. М.: Химия, 1963,223 с.

83. Полуэктов Н.С. Смешанные комплексы редкоземельных элементов. -Хим. и хим. технология, 1973, т.5, с. 104-105.

84. Taketatsu Т. Complex formation of europium with thenoiltriflueroacetone and tri-n-octylphosphine oxide in micellar solution of nonionic surfactant. -Chem. Lett., 1981, v.107, p.1057-1058.

85. Taketatsu T. Spectrofotofluorometric determination of terbium, europium and sumarium with pivaloytriflueroacetone and TOPO. Talanta, 1982, v.29, p.397-400.

86. Ефимов И.П. Исследование процесса комплексообразования некоторых РЗЭ с b-дикетонами методом распределения. М.: Наука, 1965, с. 180.

87. Светлова И.Е., Добрынина Н.А. Смирнова Н.С. Мартыненко Л.И., Евсеев A.M., Савицкий А.П. Разнолигандное комплексообразование европия с комплексонами и дикетонами в мицеллярных растворах. -Журн. неорг. химии, 1989, т.34. с.52-59.

88. Bhaumik M.L., Telk C.L. Fluorescence quantum efficiency of rare earth chelates. J. Opt. Soc. Am., 1964, v.54, N10, p.1211-1213.

89. Тищенко M.A., Аланаева Jl.А., Полуэктов H.C. Люминесцентное определение тербия и диспрозия с помощью этилендиаминтетра ацетата и ДБСК. Укр. хим. журн., 1973, т.39, № 5, с.482 - 485.

90. Dagnell R.M., Smith R., West T.S. A specific spectrofluorometric determination of terbium as its EDTA-Sulphosalicylic acid complex. -Analist, 1967, v.92, p.358-362.

91. Серебренников В.В. Химия редкоземельных элементов. Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1959 (1), 1961 (11), 801 с.

92. Weissman S.I. Intramolecular Energy Transfer The Fluorescence of Complexes of Europium. J. Chem. Phys., 1942, v. 10, p.214 - 217.

93. Balzani V. Photochemistry and luminescence of coordination compounds. -J. Photochem. Photobiol. A: Chemistry, 1990, v.51, p.55-62

94. Hemilla I., Dakubu S. //US patent 4,565,790. 1986.

95. Pietraszkiewicz, M., Karpuik, J., Pietraszkiewicz, O. Luminescent lanthanide complexes with macrocyclic N-oxides. Spectrochimica Acta. Part A, 1998, v.54, p.2229 - 2236.

96. Mathis, G. Probing molecular interactions with homogeneous techniques based on rare earth cryptates and fluorescence energy transfer. Clin. Chem., 1995, v.41,p.l391 - 1397.

97. Chen J. and Selvin P.R . Thiol-reactive luminescent chelates of terbium and europium. Bioconjugate Chem., 1999, v. 10, p.311 -315.

98. Ci Y-X., Yang X.-D., Chang W.-B. Fluorescence labeling with europium chelate of (3-diketones and application in time-resolved fluoroimmunoassays (TR-FIA). J. Immunol. Methods, 1995, v. 179, p.233 - 241.

99. Yuan J., Wang G., Kimura H., and Matsumoto K. Highly sensitive detection of bensulfiiron-methyl by time-resolved fluoroimmunoassay using atetradentate P-diketonate europium chelate as a label. Anal. Sciences, 1999, v.15, p.125 - 128.

100. Diamandis P., Morton R.C. Time-resolved fluorescence using a europium chelate of 4,7-bis(chlorosulfodiphenyl)-1,10-phenanthroline-2,9-dicarboxylic acid (BCPDA). J. Immunol.Methods, 1988, v.l 12, p.43 - 52.

101. Wu F.B., Han S.Q., Zhang C., He Y.F. Synthesis of a highly fluorescent beta-diketone-europium chelate and its utility in time-resolved fluoroimmunoassay of serum total thyroxine. Anal. Chem., 2002, v.74 N22, p.5882-5889.

102. Mukkala V.M., Helenius M., Hemmila I., Kankare J., Takalo H. Development of luminescent europium(III) and terbium(III) chelates of 2,2':6',2"-terpyridine derivatives for protein labelling. Helv. Chim. Acta, 1993, v.76, p.l361 - 1378.

103. Dakubu S., Ekins R.P. The fluorometric determination of europium ion concentration as used in time-resolved fluoroimmunoassay. Anal. Biochem., 1985, v.144, N1, p.20-26.

104. Papanastasiou-Diamandi A., Christopoulos Т.К. and Diamandis E.P. Ultrasensitive thyrotropin immunoassay based on enzymatically amplified time-resolved fluorescence with a terbium chelate. Clin. Chem., 1992, v.38, N4, p.545 - 548.

105. Alpha-Bazin В., Bazin H., Boissy L., Mathis G. Europium cryptate-tethered ribonucleotide for the labeling of RNA and its detection by time-resolved amplification of cryptate emission. Anal. Biochem., 2000, v.286, p. 17-25.

106. Yoshikawa K., Yuan J., Matsumoto K., Kimura H. Time-resolved fluorometric detection of DNA using a tetradentate P -diketonate europium chelate as a label. Anal. Sciences, 1999, v. 15, p. 121 -124.

107. Soini E., Lovgren T. Time-resolved fluorescence of lanthanide probes and application in biotechnology. Anal. Chem., 1987, v. 18, N2, p. 105-154.

108. Hemmila I. Time-resolved fluorometric determination of terbium in aqueus solution. Anal. Chem., 1985, v.57, p. 1676- 1681.

109. Hemmila I. Lanthanides as probes for time-resolved fluorometric immunoassays. Scand. J. Clin. Invest., 1988, v.48, p.389-400.

110. Soini E., Kojola H. Time-resolved fluorometer for lanthanide chelates a new generation of nonisotopic immunoassays. - Clin. Chem., 1983, v.29, N1, p.65-68.

111. Lovgren Т., Hemmila I., Petterson H., Eskola I.U., Bertoft E. Determination of hormones by time-resolved fluoroimmunoassay. Talanta, 1984, v.31, N108, p.909-916.

112. Toivonen E., Hemmila I., Marnieni I., Lorgenson P.N., Zeuthen I., Lovgren T. Tow-site time-resolved immunofluorometric assay of human insulin. -Clin. Chem., 1986, v.32, N4, p.637- 640.

113. Suonpaa M., Markela E., Stahlberg Т., Hemmila I. Europium-labelled streptavidin as a highly sensitive universal label. Indirect time-resolved immunofluorometry of FSH and TSH. J. Immunol. Methods, 1992, v.149, N2, p.247-53.

114. Hekim C., Alfthan H., Leinonen J. Т., and Stenman U.-H. Effect of incubation time on recognition of various forms of prolactin in serum by the DELFIA assay. Clin. Chem., 2002, v.48, N12, p.2253 - 2256.

115. Fernandes L.C., Kim S.B., Matos D. Cytokeratins and carcinoembryonic antigen in diagnosis, staging and prognosis of colorectal adenocarcinoma. -World J. Gastroenterol., 2005, v.l 1, N5, p.645-648.

116. Vihko P., Kurkela R., Ramberg I., Pelkonen I., Vihko R. Time- resolved immunofluorometric assay of human prostate specific antigen. Clin. Chem., 1990, v.36, N1, p.92-96.

117. Becker C., Piironen Т., Kiviniemi J., Lilja H., Pettersson K. Sensitive and Specific Immunodetection of HumanGlandular Kallikrein 2 in Serum. -Clin. Chem., 2000, v.46, N2, p. 198-206.

118. Suonpaa M., Lavi J., Hemilla I., Lovgren T. A new sensitive assay of human alpha-fetoprotein using time-resolved fluorescence and monoclonal antibodies. Clin. Chim. Acta, 1985, v. 145, p.341-348.

119. Chan U.A., Bellen A.C., Diamandis E.P. Time-resolved immunofluorometric assay of alfa-fetoprotein in serum and amniotic fluid, with a novel detection system. Clin. Chem., 1987, v.33, N11, p.2000-2003.

120. Maple P.A.C., Jones C.S. and Andrews N.J. Time resolved fluorometric immunoassay, using europium labelled antihuman IgG, for the detection of human tetanus antitoxin in serum. Clin. Pathol., 2001, v.54, p.812-815.

121. Meurmann O., Hemilla I., Lovgren Т., Halonen P. Time-resolved fluoroimmunoassay: a new test for Rubella antibodies. J. Clin. Microbiol., 1982, v. 16, N5, p. 920-925.

122. Siitari H., Hemilla I., Soini E., Lovgren T. Detection of hepatitis В surface antigen using time-reolved fluoroimmunoassay. Nature, 1983, v.301, p.258-260.

123. Helsingius P., Hemmila I., Lovgren T. Solid-phase immunoassay for digoxin using time-resolved fluorescence. Clin. Chem., 1986, v.32, p. 17671769.

124. Dechand H., Bador R., Claustrat F., Desuringes G., Mallin R. A new approch to competetive lanthanide immunoassay: time- resolved fluoroimmunoassay of progesteron with labelled analite. Clin. Chem., 1988, v34, N3, p.501-504.

125. Peuralahti J., Suonpaa K., Blomberg K., Mukkala V.M., Hovinen J. Labeling of steroids on solid phase. Bioconjug. Chem., 2004, v. 15, N4, p.927-930.

126. Bertoft E., Eakala I.U., Nanto V., Lovgren T. Competitive so- lid-phase immunoassay of testosterone using time-resolved fluorescence. FEBS, 1984, v.173, N1, p.213-216.

127. Sander J. and Niehaus C. Screening for congenital hypothyroidism by timeresolved fluoroimmunoassay for thyrotropin. Clin.Chem., 1986, vol.32, N6, p. 1231.

128. Saedi S. Dean H., Dent W., Stock E., Cronin C. Screening for congenital adrenal hyperplasia: the Delfia screening test overestimates serum 17hydroxyprogesterone in preterm infants. Pediatrics, 1996, v:97, N1, p. 100102.

129. Grosskopf C., Farriaux J.P., Vidailhet M., Briard M.L., Navarro J., Roussel P. National neonatal screening program for cystic fibrosis: management and organization. Arch. Pediatr., 2003, v. 10, Suppl. 2, p.364s-369s.

130. Vieira N., Carvalho E., Fonseca A. Adaptation of alpha-fetoprotein and intact human chorionic gonadotropin fluoroimmunometric assays to dried blood spots. Clin. Chim. Acta., 2005, v. 360, p.151-159.

131. Diamandis E.P. Time-resolved fluorescence immunoassay system especially siuted for research applications. Clin. Chem., 1989, v.35, p.491-495.

132. Hemmila X., Holthinen S., Petterson V., Lovgren T. Double- label time-resolved immunofluorometry of lutropin and follitropin in serum. Clin. Chem., 1987, v.33, p.2281-2283.

133. Heinonen P., Iitia A., Torresani Т., Lo'Vgren T. Simple triple-label detection of seven cysticfibrosis mutations by time-resolved fluorometry. -Clin. Chem., 1997, v. 43, N 7, p.l 142-1150.

134. Kajander V., Sjoroos M., Hukkanen M., Rehan T. Time-resolved fluorometry PCR assay for rapid detection of herpes simplex virus in cerebrospinal fluid. J. Clin. Microbiol., 2000, p. 3214-3218.

135. Evangelista R.A., Polak A. European Patent, EP 0171978,1986.

136. Evangelista R.A., Pollak A., Allore В., Templeton E.F., Morton R.C., and Diamandis E.P. A new europium chelate for protein labelling and timeresolved fluorometric applications. Clin Biochem, 1988, v.21, N3, p.l73-178.

137. Khosravi M.I., Diamandis E.P. Immunofluorometry of choriogonadotropin by time-resolved fluorescence spectroscopy with a new europium chelate as label.-Clin. Chem., 1987, v.33, p.1994-1999.

138. Diamandis E.P., Bhayana V., Conway V., Reichstein E., Papanastasiou -Diamandis A. Time-resolved fluoroimmunoassay of Cortisol in serum with a europium as label. Clin. Chem., 1988, v.34, p.l 157-1159.

139. Kakabakos S. E., Christopoutos Т. K., and. Diamandis E.P. Multianalyte Iimunoassay based on spatially distinct fluorescent areas quantifiedby laser-excited solid- phase time- resolved fluorometry. Clin.Chem., 1992, v.38, N3, p.338-342.

140. Diamandis P., Morton R.C., Reichstein, Khosran M.I. Multiplefluorescent labeling with europeum chelators. Application to time resolved fluoroimmunoassay. Anal. Chem., 1989, v.61, N7, p.48-57.

141. Sundberg M.W., Meares C.F., Goodwin D.A., Diamandis C.I. Selective binding of metal ions to macromolecules using bifunctional analogs of EDTA. J. Med. Chem., 1974, v.17, p.1304-1307.

142. WilmottN.I., Miller I.N., Tyson I.F. Potential use of a terbium-transferric complex as a label in an immunoassay for gentamicin. The Analyst, 1985, v.109, p.343-345.

143. Kankare J. PCT World Patent, ЕР 0493745A1, 1991.

144. Kropf J., Gressner A.M. Two sensitive time-resolved fluoroimmunoassays for cellular fibronectin. Anal. Biochem., 1991, v. 197, p.258-265.

145. Yang X.-O., Ci Y.-X., and Chang W.-B. Time-resolved fluorescence immunoassay with measurement of a europium chelate in solution: dissociation conditions and application for determination of Cortisol Anal. Chem., 1994, v. 66, p.2590-2594.

146. Hegele A., Heidenreich A., Kropf J., Knobloch R., Varga Z., Hofmann R., Olbert P. Plasma levels of cellular fibronectin in patients with localized and metastatic renal cell carcinoma. Tumor Biology, 2004, v.25, p. 111-116.

147. Norman H.L., Christopoulos Т.К. and Peltier J. Sandwich-type deoxyribonucleic acid hybridization assays based on enzyme amplified time-resolved fluorometry. Analyst, 1998, v.123, p.1315-1319.

148. Diamandis E.P. Time-resolved fluorometry in nucleic acid hybridization and Western blotting techniques. Electroforesis, 1993, v. 14, p.866 - 875.

149. Evangelista R.A., Pollak A., Templeton EF. Enzyme amplified lanthanideluminescence for enzyme detection in bioanalytical assays. -Anal. Biochem., 1991, v. 197, p.213-224.

150. Papanastasiou-Diamandi A., Christopoulos Т.К., and Diamandis E.P. Ultrasensitive thyrotropin immunoassay based on enzymatically amplified time-resolved fluorescence with a terbium chelate. Clin.Chem., 1992, v. 38, N. 4, p.545-549.

151. Bathrellos L.M, Lianidou E.S., Ioanno P.C. A Highly sensitive enzyme-amplified lanthanide luminescence immunoassay for interleukin 6. Clin. Chem., 1998, v.44, N6, p.1351-1353.

152. Christopoulos Т. К and. Diamandis E.P. Enzymatically amplified time-resolved fluorescence immunoassay with terbium chelates. Anal.Chem., 1992, p.342-346.

153. Templeton E.F., Wong E., Evangelista R.A., Granger Т., Pollak A. Time-resolved fluorescence detection of enzyme-amplified lanthanide luminescence for nucleic acid hybridization assays. Clin.Chem., 1991, v.37, N 9, p.l506-1512.

154. Lim C.S., Miller J.N., Bridges J.W. Energy-transfer immunoassay: a study of the experimental parameters in an assay for human serum albumin. -Anal. Biochem., 1980, v. 108, p. 176-184.

155. Mathis G. Rare earth cryptates and homogeneous fluoroimmunoassays with human sera. Clin. Chem., 1993, v.39, p. 1953-1959.

156. Rodriguz-Ubis J.-C., Alpha В., Plancherel D., Lehn J.-M. Photoactive cryptands. Synthesis of the sodium cryptates of macrobicyclic ligands containing bipyridine and phenoanthroline groups. Helv.Chim.Acta, 1984, v. 67, p. 2264-2269.

157. Lehn J. M. and Sauvage J. P. Cryptates. XVI. 2.-Cryptates. Stability and selectivity of alkali and alkaline-earth macrobicyclic complexes. J. Am.Chem.Soc., 1975, v.91, p.6700 - 6707.

158. Sabbatini N., Guardigli M. Luminescent lanthanidecomplexes as photochemical supramolecular devices. J. Coord. Chem. Rev., 1993, v. 123, N1, p.201-228.

159. Prodi L., Maestri M., Ziessel R., Balzani V. Luminescent Eu, Tb, and Gd complexes of a branched-triazocyclonane ligand containing three 2,2-bypyridine units. Inorg.Chem., 1991, v.30, p.3798-3802.

160. Sabatini N., Guardini M., Mecati A., Balzani V., Ungaro R., Ghidini E., Casnati A., Pochini A. Encapsulation of lanthanide ions in calixarene receptors. A strongly luminescent terbium(III) complex. J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1990, p.878-879.

161. Sata N., Shinkai S. Energy-transfer luminescence of lanthanide ions encapsulated in sensitizer-modified calix4.arenes. J. Chem.Soc., Perkin Trans., 1993, v.2, p.621-624.

162. Lundin K., Blomberg K., Nordstrom Т., Lindqvist C. Development of a time-resolved fluorescence resonance energy transfer assay (cell TR-FRET) for protein detection on intact cells. Anal. Biochem., 2001, v.299, p.92-97.

163. Stenroos К., Hurskainen P., Eriksson S., Hemmila I., Blomberg K., Lindqvist C. Homogeneous time-resolved IL-2-IL-2R assay using fluorescence resonance energy transfer. - Cytokine, 1998, v. 10, p.495- 499.

164. Blomberg K., Hurskainen P., Hemmila I. Terbium and rhodamine as labels in a homogeneous time-resolved fluorometric energy transfer assay of the subunit of human chorionic gonadotropin in serum. Clin. Chem., 1999, v.45, p.855-861.

165. Heyduk E., Heyduk T. Thiol-reactive, luminescent europium chelates: luminescence probes for resonance energy transfer distance measurements in biomolecules. Anal.Biochem., 1997, v.248, p.216-227.

166. Kane S.A., Fleener C.A., Zhang Y.S., Davis L.J., Musselman A.L., Huang P.S. Development of a binding assay for p53/HDM2 by using.homogeneous time-resolved fluorescence. Anal. Biochem., 2000, v. 278, p. 29 - 38.

167. Lopez-Crapez E., Bazin H., Andre E., Noletti J., Greinier J. and Mathis G. A homogeneous europium cryptate-based assay for the diagnosis of mutations by time-resolved luminescence resonance energy transfer.-Nucleic Acids Res., 2001, v.29, p.l 10.

168. Alpha-Bazin В., Bazin H., Boissy L., Mathis G. Europium cryptate-tethered ribonucleotide for the labeling of RNA and its detection by time-resolved amplification of cryptate emission. Anal. Biochem., 2000, v.286, p. 17- 25.

169. Unger M., Kartalov E., Chiu C.-S., Lester H.A., Quake S.R. Single molecule fluorescence observed with mercury lamp illumination. Biotechniques, 1999, v.27, p. 1008-1014.

170. Weiss S. Fluorescence spectroscopy of single biomolecules. Science, 1999, v.283, p. 1676-1683.

171. Taylor J.R., Fang M.M., Nie S. Probing specific sequences of single DNA molecules with bioconjugated fluorescent nanoparticles. Anal.Chem.,2000, v.72, p.1979-1986.

172. Zijlmans H.J., Bonnet J., Burton J., Kardos K., Vail Т., Niedbala R.S., Тапке H J. Detection of cell and tissue surface antigens using up-converting phosphors: a new reporter technology. Anal. Biochem., 1999, v.267, p.30-36.

173. Soukka Т., Kuningas K., Rantanen Т., Haaslahti V. Lovgren T. Photochemical characterization of up-converting inorganic lanthanide phosphors as potential labels. J. of Fluorescence, 2005, v.15, N4, p.513-528.

174. Schultz S, Smith D.R., Mock J.J, Schultz D.A. Single-target molecule detection with nonbleaching multicolor optical immunolabels. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000, v 97, p.996-1001.

175. Harma H. Particle technologies in diagnostics. Technology Review, 2002, v.126.- Helsinki: TEKES, 35p.

176. Azzazy H., Mansour M., Kazmierczak S. Nanodiagnostics: A New Frontier for Clinical Laboratory Medicine. Clin. Chem., 2006, v.52, p.1238-1246.

177. Bruchez M., Moronne M., Gin P., Weiss S., Alivisatos A.P. Semiconductor nanocrystals as fluorescent biological labels. Science, 1998, v.281, p.2013-2015.

178. Chan W.C.W., Maxwell D.J, Gao X, Bailey R.E, Han M, Nie S. Luminescent quantum dots for multiplexed biological detection and imaging. Curr. Opin. Biotechnol, 2002, v. 13, p 40-46.

179. Pathak S, Choi S.K., Arnheim N, Thompson M.E. Hydroxylated quantum dots as luminescent probes for in situ hybridization. J. Am. Chem. Soc,2001, v.123, p.4103-4104.

180. Sukhanova A, Venteo L, Devy J, Artemyev M, Oleinikov V, Pluot M. Nabiev I. Highly stable fluorescent nanocrystals as a novel class of labels forimmunohistochemical analysis of paraffin-embedded tissue sections. Lab. Invest., 2002, v.82, p. 1259-1261.

181. Yeh H.-C., Ho Y.-P., Shih I.-M. and Wang T.-H. Homogeneous point mutation detection by quantum dot-mediated two-color fluorescence coincidence analysis. Nucleic Acids Research, 2006, v.34, N 5, p.2- 8.

182. Vashist S.K., Tewari R., Bajpai R.P., Bharadwaj L.M. and Raiteri R. Review of quantum dot technologies for cancer detection and treatment. J. of Nanotechnology Online, 2006, v.2, p. 1-14.

183. Ekins R.P., Chu F.W. Multianalyte microspot immunoassay -microanalytical"compact disk" of the future. Clin. Chem., 1991, v.37, p. 1955-1967.

184. Ekins R.P., Chu F. Developing multianalyte assays. Trends Biotechnol., 1994, v.12, p.89-94.

185. Wians F.H., Dev J., Powell M.M, Heald J.I. Evaluation of simultaneous measurement of lutropin and follitropin with the SimulTROPIN ™ radioixnmunoassay kit. Clin. Chem., 1986, v.32, p.87-90.

186. Gow S.M., Caldwell G., Toft A.D., Beckett G.J. SimulTRAC™ simultaneous radioimmunoassay of thyrotropin and free thyroxin evaluated. -Clin. Chem., 1986, v.32, p.2191-2194.

187. Мирзабеков А.Д. Биочипы в биологии и медицине XXI века. Вестник Российской Академии Наук, 2003, т.73, №5, с.412 - 425.

188. Khrapko К., Lysov Yu., Khorlin A. et al. An oligonucleotide hybridization approach to DNA sequencing. FEBS Letters, 1989, v. 256, p. 118-122.

189. Arenkov P., Kukhtin A., Gemmell A. et al. Protein microchips: Use for immunoassay and enzymatic reactions. Anal. Biochem., 2000, v.278, p.123-131.

190. Lou L.-Y., Diamandis E.P. Preliminary examination of time-resolved fluorometry for protein array applications. Luminiscence, 2000, v.15, p.409-413.

191. Nichkova M., Dosev D., Gee S.J., Hammock B.D., and Kennedy I.M. Microarray immunoassay for phenoxybenzoic acid using polymer-functionalized lanthanide oxide nanoparticles as fluorescent labels. -Proceedings of SPIE, v.6008, p.600815.

192. Wolcke J., Ulmann D. Miniaturized HTS technologies-uHTS. Drug Discovery Today, 2001, v.6, p.637 - 646.

193. Boisclair M.D., McClure C., Josiah S., Glass S., Bottomley S., Kamerkar S., et al. Development of a ubiquitin transfer assay for high throughput screening by fluorescence resonance energy transfer. J. Biomol. Screen., 2000, v.5,p.319-328.

194. Martens C., Bakker A., Rodriguez A., Mortensen R.B., Barrett R.W. A generic particle-based nonradioactivehomogenous multiplex method for highthroughputscreening using microvolume fluorimetry. Anal. Biochem. 1999, v.273, p.20-31.

195. Gabriel D., Vernier M., Pfeifer M.J., Dasen В., Tenaillon. L., Bouhelal R. High throughput screening technologies for direct cyclic AMP measurement. Assay Drug Dev. Technol., 2003, v.l, N2, p. 291-303.

196. Beasley J.R., McCoy P.M., Walker T.L., Dunn D.A. Miniaturized, ultrahigh throughput screening of tyrosine kinases using homogeneous, competitive fluorescence immunoassays. Assay Drug Dev Technol., 2004, v.2, N 2, p.141-151.

197. Bare L.A., Trinh L., Wu S., Devlin J.J. Identification of a seriesof potent telomerase inhibitors using a time-resolved fluorescence-based assay. Drug Development Research, v.43, N2,1998, p. 109-116.

198. Moore K.J. et al. A homogeneous 384-well high throughputscreen for novel tumour necrosis factor receptonligand interactions using time-resolved spectroscopy. J. Biomol. Screening, 1999, v.4, p.205-214.

199. Zhou G. et al. Nuclear hormone receptors have distinct affinities for coactivators; characterisation by fluorescence resonance energy transfer.- Mol. Endocrinol., 1999, v. 12, p. 1594—1604.

200. Zhang, J-H. et al. A high-throughput homogeneous assay for reverse transcriptase using generic reagents and time-resolved fluorescence detection. Anal. Biochem., 2000, v.281, p.182-186.

201. Friguet В., Chaffotte A.F., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. Measurements of the true affinity constant in solution of antigen-antibody complexes by enzyme-linked immunosorbent assay. J. Immunol. Methods, 1985, v.77, N2, p.305-319.

202. Ogilvy-Stuart A.L. Neonatal thyroid disorders. Arch. Dis. Child. Fetal. Neonatal., 2002, v.87, p.165-171.

203. LaFranchi S. Congenital hypothyroidism: etiologies, diagnosis, and management. Thyroid, 1999, v.9, N7, p.735-740.

204. Guthrie R. The origin о newborn screening. Screening, 1992, N.l, p.5-15.

205. Pollitt R. J Newborn mass screening versus selective investigation: Benefits and costs. J. Inherit. Metab. Dis., 2001, v. 24, p. 299-302.

206. Dussault J.H., Coulombe P., Laberge C., Letarte J., Guyda H., Khoury K. Preliminary report on a mass screening program for neonatal hypothyroidism.- J. Pediatr, 1975, v.86, p.670-674.

207. Врожденный гипотиреоз у детей (ранняя диагностика и лечение) Методические рекомендации. Под ред. Дедова И.И. М: МСЗН РФ, 1999, 23 с.

208. Папковский Д.Б., Стафеева О.А., Савицкий А.П. Получение антисывороток к тироксину с высокими титрами для целей иммунологического анализа. Пробл. эндокринол., 1988, т. 34, № 1, с. 57 - 60.

209. Пономарева И.В., Савицкий А.П., Шахнина K.JL, Щеголев А.А. Флюоресцентный иммуноанализ с временным разрешением. Использование различных производных поликарбоновых кислот дляполучения конъюгатов антител с европием. Иммунология, 1989, т. 4, с. 76-78.

210. Савицкий А.П., Грибкова Е.В., Чудинов А.В. Разработка иммунофлуоресцентного анализа с временным разрешением для определения тироксина. Аллергология, астма и клиническая иммунология, 1999, т. 9, с. 151 - 153.

211. Hemmilla I.A., Mikola H.J. New complexing agents for labeling of proteins with metals. Acta Radiologica Sup., 1990, v.374, p.53 - 55.

212. Wu F., Xu Y., Хао Т., Wang Y., Han S. Time-resolved fluorescence immunoassay of thyroxine in serum: immobilized antigen approach. -Analyt.Biochem., 1999, v.276, p. 171 -176.

213. Torresanl Т., Scherz R. Thyroid screening of neonates without use of radioactivity: evaluation of time-resolved fluoroimmunoassay of thyrotropin. Clin. Chem., 1986, v.32, N6, p.1013-1016.

214. Данилова Н.П., Крупина H.B., Мертц M.B., Василов Р.Г. Получение моноклональных анител к тироксину. Биоорганическая химия, 1993, т. 19, №7, с. 704-712.

215. Bellisario R., Colinas R. J., Pass К. A. Simultenious measurements of thyroxine and thyrotropin from newborn dried blood-spot specimens using multiplexed fluorescent microsphere immunoassay. Clin. Chem., 2000, v.46, N9, p. 1422-1424.

216. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б, Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М: Высшая школа, 1991, с. 226-236.

217. Savitsky A. P., Chudinov A. V., Krylova S. Novel fluorescent chelate for Eu. Advances in Luminescence Sensing Technology II, Proceedings of SPIE, 1995, v. 2388, p. 429 - 434.

218. Peters T. Serum albumin. In: Putnam F.W. Ed. The plasma proteins. -N.Y.: Academic Press, 1975, p.133-181.

219. Harma H., Soukka Т., and Lovgren T. Europium nanoparticles and time-resolved fluorescence for ultrasensitive detection of prostate-specific antigen. Clin. Chem., 2001, v.47, p.561-568.

220. Soukka Т., Paukkunen J., Harma H., Lonnberg S., Lindroos H., and Lovgren T. Supersensitive time-resolved immunofluorometric assay of free prostate-specific antigen with nanoparticle label technology. Clin. Chem., 2001, v.47, N7, p. 1269- 1278.