Флуоресцентные методы исследования опухолей век и конъюнктивы на основе эндогенных и экзогенных флуорофоров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.08, кандидат медицинских наук Осипова, Екатерина Александровна

• Осипова, Екатерина Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Осипова, Екатерина Александровна

ГЛАВА 1. Введение

Обзор литературы

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика больных

2.2. Методы исследования

2.2.1. Биомикроскопия

2.2.2. Гистологическое исследование

2.2.3. Локальная лазерная спектроскопия и спектрометрия флуоресценции

Препараты

2.2.4. Колориметрический анализ аутофлуоресцентных изображений опухоли

2.3. Оценка результатов исследования

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА 3.

3.1. Динамика и особенности накопления препарата «Фотосенс» в веках и конъюнктиве, а также опухолях и псевдоопухолевых новообразованиях, локализующихся в этих тканях

ГЛАВА

4.1. Исследование динамики и особенностей накопления 5-АЛК индуцированного эндогенного протопорфирина IX в коже век, конъюнктиве и слезном мясце.

4.2. Изучение возможности проведения дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей век и конъюнктивы с использованием спектрометрии 5-АЛК индуцированной флуоресценции протопорфирина IX.

4.3. Особенности локальной лазерной спектроскопии и спектрометрии 5-АЛК индуцированной флуоресценции протопорфирина IX при ряде опухолей век и конъюнктивы

ГЛАВА 5.

5.1. Анализ интенсивности и особенностей флуоресценции эндогенного протопорфирина IX на флуоресцентных изображениях новообразований кожи век и конъюнктивы.

5.2. Исследование эффективности использования люминесцентных изображений злокачественных опухолей кожи век и конъюнктивы в визуализации и определении границ новообразований.

5.3 Данные анализа изображений аутофлуоресценции опухоли при ряде новообразований век и конъюнктивы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Флуоресцентные методы исследования опухолей век и конъюнктивы на основе эндогенных и экзогенных флуорофоров»

Актуальность проблемы.

Ежегодная заболеваемость опухолями органа зрения составляет 100-120 на 1 млн. населения. Среди первичных опухолей первое место по частоте занимают опухоли придаточного аппарата глаза (от 8.7 до 15 человек на 100 тыс. населения) (Бровкина А. Ф. 2002). В связи с широким распространением опухолей придаточного аппарата глаза актуальным остается вопрос ранней и точной диагностики новообразований указанной локализации.

Диагностика новообразований кожи век и конъюнктивы базируется, в основном, на клинической картине и морфологическом исследовании. Гистологическое исследование краев раны после хирургического удаления базально-клеточного рака у 1039 больных показало, что при узловой и поверхностной формах наблюдалось отсутствие опухолевых клеток по краю разреза соответственно у 93.6 и 96.4% больных. При инфильтративной и мультицентричной формах эти показатели составили соответственно 18.6 и 33.3% (Sexton М. 1990).

В последние годы предпринимаются активные попытки создания неинвазивных оптических методов диагностики злокачественных опухолей, позволяющих, не травмируя объект исследования, получить о нем необходимую достоверную информацию (Bigio I. J. 1997, Wagnieres G. 1998, Hewett J. 2000, Scott M. A. 2000). Флуоресцентная диагностика (ФД) является наиболее перспективной и высоко чувствительной технологией обнаружения опухолей, локализующихся в поверхностных слоях кожи и слизистых оболочках (S. Andersson-Engels 1992). Методика основана на обнаружении эндогенных люминофоров, таких как коллаген, никотинамид аденин динуклеатид, составляющих основную часть спектра аутофлуоросценции в сине-зеленом диапазоне (Chwirot В. W. 1998, Hewett J. 2000), а также порфиринов и экзогенных фотосенсибилизаторов.

В настоящее время разработаны новые методы оптической диагностики, успешно применяемые при опухолях различной локализации: кожи, слизистых оболочек полости рта, пищевода, бронхов, мочевого пузыря и других органов. В литературе есть единичные описания применения этих методов диагностики при опухолях кожи век и конъюнктивы. Вместе с тем не выделены четкие диагностические критерии, не обоснованы основные принципы дифференциальной диагностики.

Цель исследования.

Изучить возможности использования эндогенных и экзогенных флуорофоров в исследовании опухолей век и конъюнктивы и выработать оптимальный подход к дифференциальной диагностике и определению границ доброкачественных и злокачественных опухолей указанной локализации с использованием флуоресцентных методов анализа.

Задачи исследования.

1. Отработать методику флуоресцентной спектроскопии и получения флуоресцентных изображений опухолей век и конъюнктивы.

2. Оценить роль спектроскопического исследования 5-AJIK индуцированной флуоресценции протопорфирина IX и флуоресценции экзогенного фотосенсибилизатора «Фотосенс» в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных опухолей век и конъюнктивы.

3. Разработать собственный подход к дифференциальной диагностике и объективному определению границ доброкачественных и злокачественных опухолей век и конъюнктивы на основе флуоресцентных методов исследования без использования экзогенных фотосенсибилизаторов и препаратов, усиливающих аутофлуоресценцию.

4. Сопоставить результаты флуоресцентных методов исследования опухолей век и конъюнктивы с использованием различных флуорофоров с клиническими диагнозами и гистологическими заключениями.

5. Разработать и внедрить в клиническую работу практические рекомендации по проведения флуоресцентных методов исследования опухолей век и конъюнктивы.

Научная новизна.

Впервые, с помощью спектроскопии изучены особенности 5- AJIK индуцированной флуоресценции и флуоресценции фотосенсибилизатора «Фотосенс» в коже век и конъюнктиве, а также новообразованиях, локализующихся в этих тканях.

Разработан подход к флуоресцентному исследованию опухолей век и конъюнктивы, основанный на колориметрическом анализе аутофлуоресцентных изображений опухоли. Доказана эффективность его использования в дифференциальной диагностике и определении флуоресцентных границ доброкачественных и злокачественных опухолей век и конъюнктивы.

Практическая значимость работы.

В результате научного исследования разработана диагностическая методика, основанная на определении концентрации эндогенных люминофоров в ткани опухоли. Стал доступен подсчет интенсивности флуоресценции эндогенного протопорфирина IX без использования препаратов 5-аминолевулиновой кислоты, усиливающих его флуоресценцию; а также, возможность визуализации распределения эндогенного ПП IX в опухоли и в окружающих ее тканях. Разработаны и запатентованы устройство для получения аутофлуоресцентных изображений и программное обеспечение для их обработки, позволяющее реализовать методику на доступной аппаратуре.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Флуоресцентные методы исследования являются надежным, безопасным неинвазивным методом диффенциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей век и конъюнктивы.

2. Анализ аутофлуоресцентных изображений новообразований век и конъюнктивы позволяет проводить дифференциальную диагностику опухолей указанной локализации и определять их флуоресцентные границы без использования экзогенных фотосенсибилизаторов и препаратов, индуцирующих аутофлуоресценцию.

Основные положения работы доложены на:

1. Конференции молодых ученых «Клинические исследования в офтальмологии» г. Москва, Россия, 24 апреля 2006

2. Всероссийской научно-практической конференции «Отечественные противоопухолевые препараты» г. Москва, Россия, 24-26 марта 2007 г.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, из них 2 в печатных изданиях, рецензируемых ВАК. Приоритетность исследований подтверждена одним патентом на изобретение, одним патентом на полезную модель, получено одно положительное решение на выдачу патента.

Внедрение результатов работы в практику.

Разработанные практические рекомендации внедрены в научно-клиническую практику НИИ глазных болезней РАМН и учитываются при проведении флуоресцентных исследований у пациентов с опухолями век и конъюнктивы. На базе НИИ глазных болезней РАМН продолжаются клинические испытания эффективности флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии новообразований кожи век и конъюнктивы с препаратами «Аласенс» и «Фотосенс».

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 121 странице машинописного текста и состоит из введения, описания материалов и методов исследований, 3 глав, отражающих результаты собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы, включающего 50 отечественных и 119 зарубежных источника. Работа иллюстрирована 28 рисунками, 13 графиками, 8 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Глазные болезни», Осипова, Екатерина Александровна

выводы.

1. Впервые на достаточном клиническом материале (106 пациентов) изучены различные флуоресцентные методы исследования опухолей век и конъюнктивы, включающие в себя лазерную спектроскопию флуоресценции, индуцированной 5-аминолевулиновой кислотой (5-AJIK), и флуоресценции экзогенного фотосенсибилизатора «Фотосенс», а также анализ изображений.

2. У 30 пациентов с различными новообразованиями кожи век и конъюнктивы были выявлены особенности флуоресценции экзогенного фотосенсибилизатора «Фотосенс» в коже век и конъюнктиве, а также новообразованиях, локализующихся в этих тканях, проанализирована динамика накопления препарата, определены возможности флуоресцентной диагностики.

3. У 98-и пациентов с опухолевыми и псевдоопухолевыми заболеваниями кожи век и конъюнктивы произведен сравнительный анализ результатов флуоресцентной диагностики, основанной на аутофлуоресценции и 5-АЛК индуцированной флуоресценции опухоли.

4. При спектроскопическом анализе 5-АЛК индуцированной флуоресценции протопорфирина IX выявлены статистически значимые различия (р<0.05) в результатах флуоресцентной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей кожи век. Определена чувствительность методики, которая составили 76%.

5. Разработан собственный подход к получению и обработке люминесцентных изображений, позволяющий осуществлять подсчет интенсивности аутофлуоресценции протопорфирина IX с построением карты его распределения на флуоресцентных изображениях опухоли и окружающих ее тканей. При сопоставлении результатов анализа флуоресцентных изображений злокачественных и доброкачественных опухолей кожи век и конъюнктивы с данными их гистологического исследования выявлена высокая чувствительность разработанной методики, равная 80% для опухолей кожи век и 95% для опухолей конъюнктивы.

6. Доказано предпочтительное использование разработанной нами методики при проведении дифференциальной диагностики опухолей кожи век и конъюнктивы, что объясняется ее более высокой чувствительностью, возможностью визуализации флуоресцентных границ опухоли и отсутствием необходимости медикаментозной нагрузки на пациента.

7. Разработаны и внедрены в клиническую работу алгоритм и практические рекомендации по проведению флуоресцентной диагностики опухолей век и конъюнктивы.

ПРАКТИЧЕКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. При проведении дифференциальной диагностики между доброкачественными и злокачественными опухолями кожи век и конъюнктивы целесообразно использовать флуоресцентные изображения опухоли и окружающих тканей, полученные без применения препаратов 5-АЛК и экзогенных фотосенсибилизаторов.

2. Для обработки полученных аутофлуоресцентных изображений рекомендуется использовать оригинальное программное обеспечение CancerPlot, позволяющее осуществлять подсчет и получать карту распределения интенсивности флуоресценции ПП IX в опухоли и окружающих тканях.

3. Использование препарата 5-аминолевулиновой кислоты «Аласенс» и экзогенного фотосенсибилизатора «Фотосенс» целесообразно в случае совмещения ФД с сеансом ФДТ для спектроскопического определения уровня накопления фотосенсибилизатора в опухоли и окружающих тканях и мониторинга эффективности ФДТ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Осипова, Екатерина Александровна, 2009 год

1. Балаян М. Л. Радиоволновая хирургия в лечении опухолевых и псевдоопухолевых образований кожи век, конъюнктивы и роговицы. Автореф. дис. канд. мед. наук. М.,-2005.- 25 с.

2. Барабаш Р.Д., Петухова М.И., Норманнский В.Е. Сравнительные свойства порфириновых фотосенсибилизаторов, применяемых для лазерной фотодинамической терапии опухолей. Тез. докл. Лазеры в народном хозяйстве. М.- 1989.- С. 100.

3. Барабаш Р.Д., Литвин Р.Д., Андреева К.П. и др. Фармакокинетика флуоресциина, гематопорфирина и его производного при развитии гранулемы. //Фармакология и токсикология.- 1990.- т. 53.-С. 45-50

4. Барабаш Р.Д., Скобелкин O.K., Петухов М.И. и др. Фармакокинетика гематопорфирина и его производного, флуоресциина при развитии карциносаркомы.// Фармакология и токсикология.- 1990.-№3.-С. 24-26.

5. Бахтияров О.Р., Садыков Р.А. Порфирины и лазерное излучение в диагностике злокачественных опухолей. //Сов. Мед.- 1991.-№11.-С.35-37.

6. Беликов А.В., Скрипник А.В. Лазерные биомедицинские технологии (часть 1). //Учебное пособие. СПб: ИТМО.- 2008- С.25.

7. Беренбейн Б.А., Теодор И. Л., Шатохина С.Н., Шуймай Н.И., Коган М.Г., Кусов В.В. Цитоморфологический метод диагностики эпителиальных новообразований кожи. //Метод. Реком. МЗ РСФС.-М.-1989.-С.13.

8. Бирбраер В.М. и др. Дифференциальная цитологическая диагностика при меланоме кожи. Клиника и лечение меланом кожи. Тезисы всесоюз. симпоз. -М.- 1990.-С. 11

9. Бровкина А.Ф. Офтальмоонкология. Руководство для врачей. М: Медицина.- 2002.-421 с.

10. Бровкина А.Ф., Зарубей Г.Д., Вальский В.В. Концепция развития офтальмоонкологии. //Вестник офтальмологии. -2000.-№5.- С. 16-18.

11. Быкова В.П. Макролюминисцентный анализ патологических процессов в легких (рак легких и хроническое нагноение) в аспекте гистологического контроля // Арх. патол. 1961.- т. 23.- № 10.- с. 21-24,

12. Вагнер Р.И., Анисимов В.В., Барчук А.С. Меланома кожи.- Ч.1.- СПб: Наука.- 1995.- с. 23.

13. Владимиров Ю.А., Потапенко А.Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов. М: Высш. шк.-1989.-189 с.

14. Ганина К.П., Налескина Л.А. Злокачественная меланома и предшествующие изменения кожи. Киев: Наука Думка.- 1991.-е. 18-22.

15. Горенков Р.В., Карпов В.Н, Рогаткин Д.А., Шумский В.И. Хроническая гипоксия как один из факторов повышенной флуоресценции эндогенных порфиринов в живых биологических тканях // Биофизика,-т.52.- № 4.-2007. с.711-717.

16. Гуринович Г.П., Севченко А.Н., Соловьев К.Н. Спектроскопия порфиринов.//Успехи физических наук.- 1963.- февраль,- T.LXXIX.- вып.2.-159 с.

17. Девятков Н.Д., Зубкова С.М., Лапурин И.В., Макеева Н.С. Физико-химические механизмы биологического действия лазерного излучения. //Успехи совр. биол. -1987.- № 1. -с. 31-43.

18. Дронова О.Б., Третьяков А.А., Мищенко А.Н., Булгакова Н.Н. Исследование возможностей лазер-индуцированной аутофлуоресценции в диагностике пищевода Баррета.//Сиб. онкол. журнал.- 2008.-№ 4.- с. 11-12.

19. Ежова М.Н., Третьякова Е.И. Клинико-морфологические особенности базально-клеточного рака кожи у жителей Московской области и результаты его лечения.//Рос. журнал кожных и вен.бол.-1998.-№4.-с. 17-21.

20. Захаров И.А., Тимофеев В.Н. Люминесцентные методы анализа. — Л., 1978. — 95 с.

21. Каган И.И. Канюков В.Н. Клиническая анатомия органа зрения. СПб: 1999.-е. 11.

22. Кузин Н.М., Харнас С.С., Мерзляков А.Е. Флуоресцентная эндоскопия в диагностике рака желудка. //Хирургия.- 1997.-№ 6.- с. 7071.

23. Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии. — М.: Мир.- 1986. 496 с.

24. Лихванцева В.Г. Анурова О.А. Опухоли век: клиника, диагностика, лечение. М: Гэотар-Медиа.- 2007.-447 с.

25. Миронов А.Ф., Нокель А.Ю. Фармакологическое средство Фотогем для фотодинамической терапии. Опис. изобр. к патенту РФ. 1999.

26. Пальцев М.А., Потекаев Н.Н., Казанцева И.А., Лысенко А.И., Червонная Л.В. Клинико-морфологичекая диагностика заболеваний кожи. М: Медицина.- 2006.-С.123-126.

27. Панова И.Е., Важенин А.В., Усова Р.А., Войтаник Г.Ф., Куренков Е.Л. Эпидемиология, клинико-морфологическая характеристика, дифференциальная диагностика базально-клеточного рака кожи век. //Уч. пособие. Чел:2003.-25с.

28. Патока Е.Ю, Харнас С.С., Заводнов В.Я. и др. Исследование спектров флюоресценции ALA-индуцированного РР IX периферических опухолей in vivo. // Электронный журнал «Исследовано в России» http://zhurnal.ane.relarn.ru/articles/2003/129.pdf 1422

29. Пачес А.И., Бровкина А.Ф., Зиангирова Г.Г. Клиническая онкология органа зрения. —М.: Медицина, 1980.-е. 398.

30. Петров С.Ю. Анатомия глаза и его придаточного аппарата ГЭОТАР-МЕД.- 2003. -с. 25

31. Полсачев В.И., Потемкина Е.В., Дзамбровский Н.Н. и др. //Сов. Мед. 1989.- № 4.- с. 121-122.

32. Рогаткин Д.А., Лапаева Л.Г. «Перспективы развития неинвазивной спектрофотометрической диагностики в медицине» // Медицинская техника.- 2003.-№4. с.31-36.

33. Синичкин Ю.П., Уте С.P. In vivo отражательная и флуоресцентная спектроскопия кожи человека.- Саратов: Изд-во Сарат. ун-та.- 2001.- с. 16.

34. Смирнова З.С., Кубасова И.Ю., Макарова О.А., Полозкова А. П., Орлова O.JL и др. Доклиническое изучение эффективности липосомальной лекарственной формы Фотосенса для фотодинамической терапии. //Росс. Биотерапевт. Журнал.- 2003.- Т.2.- №4.- стр.40-44.

35. Соколов В.В., Странадко Е.Ф. Якубовская Р.И. и др. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей основной локализации с препаратом Фотогем и Фотосенс. //Вопросы онкологии.-1995.-т.41.- с.134-138.

36. Сомов Е.Е. Клиническая анатомия органа зрения человека.-СПб: МедПресс Информ 2005.-136 с.

37. Странадко В.В. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей основных локализаций с препаратами фотогем и фотосенс (результаты трёхлетних наблюдений. //Вопр. онкологии. 1995. — Т. 41, № 1.-С. 134-138.

38. Трушин А.И. и др. «Способ диагностики областей пролиферации и устройство для его осуществления», Патент на изобретение РФ № 2169922, приор, от 12.02.1999 г.

39. Тучин В.В. Лазеры и волоконная оптика в биомедицинских исследованиях.- Саратов.: Изд-во Сарат. ун-та.- 1998.-384с.

40. Филоненко Е.В. Флуоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия в онкологии, дис. на соиск. учен. степ, д-ра мед. наук, код спец. 14.00.14 2006.

41. Физика и биофизика. Под редакцией В. Ф. Антонова. М: ГЭОТАР-Медиа, 2009. е.- 480

42. Хаппе В. Офтальмология. Спр. Практ. Врача. М.:-МедПресс.-2005.- 352 с.

43. Черемисина О.В., Вусик М.В., Солдатов А.Н., Рейнер И.В. Современные возможности эндоскопических лазерных технологий в клинической онкологии. //Сиб. онкол. журнал. -2007.- №4.- вып.24.- с. 511.

44. Черницкий Е.А., Слобожанина Е.И. Спектральный анализ в медицине. Минск: Наука и техника. -1980.- с. 141.

45. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В. Современные возможности и перспективы эндоскопической хиркргии и фотодинамической терапии злокачественных опухолей. //Росс. Онк. журн.- 1998.-№4. -с.4-12.

46. Чиссов В.И., Соколов В.В., Булгакова Н.Н., Филоненко Е.В. Флуоресцентная эндоскопия, дерматоскопия, спектрофотометрия в диагностике злокачественных опухолей основных локализаций. //Росс. Биотер. Журнал.- 2003.- Т.2.- №4.- стр. 42-56.

47. Adler DC, Zhou С, Tsai ТН, Schmitt J, Huang Q, Mashimo H, Fujimoto JG. Three-dimensional endomicroscopy of the human colon using optical coherence tomography. //Opt Express. 2009 Jan 19;17(2):784-96.

48. Alkalay R, Alcalay J, Maly A, Ingber A, Fritsch C, Ruzicka T, Enk CD Fluorescence imaging for the demarcation of basal cell carcinoma tumor borders. //J Drugs Dermatol. 2008 Nov;7(ll): 1033-7.

49. American academy of ophthalmology BCSC section 7 orbit, eyelids, and lacrimal system. LEO. 2006-2007. p. 139,

50. Andersen W. K., David N., Silvers M. D. Melanoma? It cant be melanoma!// J. A. M. A.- 1991.-, Vol. 266.- P. 3463-3465.

51. Anderson R. R., Pamsh J. A. The optics of the human skin. //J. Invest. Dermatol. -1981.- Vol. 77.- pp. 13-19.

52. Andersson-Engels S. and Wilson B.C., In vivo fluorescence in clinical oncology: Fundamental and practical issues, //J. Cell Pharmacol. -1992.-3.- 48-61 .

53. Andersson-Engels S, af Klinteberg C, Svanberg K, Svanberg S. In vivo fluorescence imaging for tissue diagnostics. //Phys Med Biol.- 1997.-42.-815-24.

54. Arifler D., Pavlova I., Gillenwater A., Richards-Kortum R. Light Scattering from Collagen Fiber Networks: Micro-Optical Properties of Normal and Neoplastic Stroma //Biophys J. -2007 May 1.- 92(9).- 3260-3274.

55. Auler H., Banzer G. Untersuchung uber die Rolle der Porphyrine bei geschwulstkranken Menschen und Tieren // Z. Krebsforsch. 1942. - Bd. 53. - 65-68.

56. Bandieramonte C. Marchesini, Melloni E. et al. Laser phototherapy following HpD administration in superficial neoplastic lesions. //Tumori.-1984.- Vol. 70.- P. 327-334.

57. Bays R., Wagnieres G., Robert D., Mizeret J. et al Clinical measurements of tissue optical properties in the esophagus //SPIE Proceedings. -1995,-Vol. 2324.- P. 39-45.

58. Bellini MH, Coutinho EL, Courrol LC, Rodrigues de Oliveira Silva F, Vieira Junior ND, Schor N.Correlation between autofluorescence intensity and tumor area in mice bearing renal cell carcinoma. //J Fluoresc. -2008 No.-18(6).-1163-8.

59. Benson R. C. Jr., Kinsey J. H., Cortese D. A., Farrow G. M., Utz D. C. Treatment of transitional cell carcinoma of the bladder with hematoporphyrin derivative phototherapy. //J. Urol.- 1983.-130.-1090-1094.

60. Betz CS, Stepp H, Janda P, Arbogast S, Grevers G, Baumgartner R, Leunig A. A comparative study of normal inspection, autofluorescence and 5-ALA-induced PPIX fluorescence for oral cancer diagnosis. //Int J Cancer.-2002 Jan 10.-97(2).-245-52.

61. Bigio I. J., Schneckenburger H., Slavik J., Svanberg K., Viollet P. M. SPIE Proceedings of conference on progress in biomedical optics, optical biopsies and microscope techniques II.- 1997: 3197.

62. Bourre L, Giuntini F, Eggleston IM, Wilson M, MacRobert AJ. 5-Aminolaevulinic acid peptide prodrugs enhance photosensitization for photodynamic therapy. //Mol Cancer Ther. -2008 Jun.-7(6).-1720-9.

63. Chang CL, You C, Chen HM, Chiang CP, Chen CT, Wang CY. Autofluorescence lifetime measurement on oral carcinogenesis. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. -2004.-4.-2349-51.

64. Carruth J. A. S. Photodinamic therapy in the treatment of diseases of the skin// J. Laser in Medical Science.- 1990.- Vol. 5.- P 199-201.

65. Champe PC., Harvey RA., Ferrier DR. Biochemistry. Edition: 4, illustrated. Lippincott Williams & Wilkins.- 2007.- p.278.

66. Chang CJ, Yu JS, Wei FC. In vitro and in vivo photosensitizing applications of Photofrin in malignant melanoma cells. //Chang Gung Med J.-2008 May-Jun.-31(3).-60-67.

67. Chin WW, Thong PS, Bhuvaneswari R, Soo КС, Heng PW, Olivo M. In-vivo optical detection of cancer using chlorin e6—polyvinylpyrrolidone induced fluorescence imaging and spectroscopy. //BMC Med Imaging. -2009 Jan 8.-9.-1.

68. Chwirot B. W., Chwirot S., Redzinski and Michniewicz Z. Detection of melanomas by digital imaging of spectrally resolved ultraviolet light-induced autofluorescence of human skin. //European Journal of Cancer.-1998.- Vol. 34.- 1730-1734.

69. Chwilkowska A, Saczko J, Modrzycka T, Marcinkowska A, Malarska A, Bielewicz J, Patalas D, Banas T. Uptake of photofrin II, a photosensitizer used in photodynamic therapy, by tumour cells in vitro. //Acta Biochim Pol.- 2003.-50(2).-509-13.

70. Collaud S, Juzeniene A, Moan J, Lange N. On the selectivity of 5-aminolevulinic acid-induced protoporphyrin IX formation. //Curr Med Chem Anticancer Agents. -2004 May.-4(3).-301-16.

71. Dake, H. and DeMent, J. Fluorescent chemicals and their applications. Chemical Publishing Brooklyn N .Y . -1942.- 67- 91.

72. De Beule PA, Dunsby C, Galletly NP, Stamp GW, Chu AC, Anand U, Anand P, Benham CD, Naylor A, French PM. A hyperspectral fluorescence lifetime probe for skin cancer diagnosis. //Rev Sci Instrum. -2007 Dec.-78(12).- 121-123.

73. Dougherty T. J., Kaufman J. E., Goldfarb A. et al. Photoradiation therapy for the treatment of malignant tumors. //Cancer Res.- 1978.- Vol. 33.-P. 2628-2635.

74. Dougherty T. J., Lowrence G., Kaufman J. E. et al. Photoradiation therapy for the treatment of recurrent breast carcinoma. //J. Natl. Cancer. Inst.-1979.-Vol. 62.- P. 231.

75. Dougherty T. J., Potter W. R., Weishaupt K. The structure of the active component of hematoporphyrin derivative. In: Porphyrins in tumor phototherapy. Ed. Andreoni A. and Cubeddy R. Plenum Press. N.-Y. -1984. -P. 23-36.

76. Dognitz N, Salomon D, Zellweger M, Ballini JP, Gabrecht T, Lange N, van den Bergh H, Wagnieres G. Comparison of ALA- and ALA hexyl-ester-induced PpIX depth distribution in human skin carcinoma. //J Photochem Photobiol B. -2008 Dec 11.-93(3).-140-148.

77. Eden M., Haines В., Kahler H. The pH of rat tumors measured in vivo// J. Natl. Cancer Inst. -1995.- Vol.16.- P. 541-556.

78. Everett M.A., Yeargers E., Sayre R.M., Olson R.L. Penetration of epidermis by ultraviolet rays // Photochem Photobiol. — 1966.-5.-533—542.

79. Figge F.H.J., Weiland G.S., Manganiello O.J. Cancer detection and therapy. Affinity of neoplastic, embryonic, and traumatized tissues for porphyrins and metalloporphyrins // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1948. - Vol. 68. - P. 640-641.

80. Garcia JP Jr, Rosen RB. Anterior segment imaging: optical coherence tomography versus ultrasound biomicroscopy. //Ophthalmic Surg Lasers Imaging. -2008 Nov-Dec.-39(6).-476-84.

81. Georgakoudi I., Jacobson В. C., Muller M. G. Et al. NADP.H and collagen as in vivo quantitative fluorescenct biomarkers of epithelial precancerous changes //Cancer Res. -2002. -Vol. 62.- P. 682-687.

82. Gerveck L. E., Seetharaman K. Cellular pH gradient in tumor versus normal tissue: potential exploitation for the treatment of cancer//Cancer Res.-1996-Vol.56-P. 1194-1198.

83. Gottschlich S, Lippert BM, Schade W, Werner JA. Time-resolved fluorescence spectroscopy of a hematoporphyrin derivative used for photodynamic therapy of cancer. //Res Commun Mol Pathol Pharmacol. -1997 Nov.-98(2).-237-40.

84. Gray M. J., Lipson R. L., Maeck J. V. S., Parker L. And Romeyn D. Use of hematoporphyrin derivative in detection and management of cervical cancer. //Am. J. Obstet. Gynecol. -1967.-99.-766-771.

85. Gregorie 11. B. Jr., Horner E. O., Ward J. L., Green J. F., Richards Т., Robertson H. C. Jr., Stevenson Т. B. Hematoporphyrin derivative fluorescence in malignant neoplasms. //Ann. Surg. -1968.-167.-829.

86. Gupta N. Biosensors technologies: acousto-optic tunable filter-based hyperspectral and polarization imagers for fluorescence and spectroscopic imaging. //Methods Mol Biol. -2009.-503.-293-305.

87. Hamzavi I, Shiff N, Martinka M, Huang Z, McLean D, Zeng H, Lui H. Spectroscopic assessment of dermal melanin using blue vitiligo as an in vivo model. //Photodermatol Photoimmunol Photomed. -2006 Feb.-22(1).-46-51.

88. Hang J., Lam S., Le Riche//J. Lasers Surgery Med. -1992.-11.-99.

89. Harris F, Chatfield LK, Phoenix DA. Phenothiazinium based photosensitisers—photodynamic agents with a multiplicity of cellular targets and clinical applications. //Curr Drug Targets. -2005 Aug.-6(5).-615-27.

90. Hausmann W.H. Die sensibilisierende Wirkung des Hamatoporphyrins // Biochem Z. 1910. - Vol. 30. - P. 276-316.

91. Helmlinger G., Yuan F., Dellian M., Jain R. K. Interstitial pH and pO2 gradients in solid tumors in vivo: high resolution measurements revel a lack of correlation//Nat. Med.-1997.-Vol.3-P. 177-182.

92. Huang Z, Zeng H, Hamzavi I, Alajlan A, Tan E, McLean DI, Lui H. Cutaneous melanin exhibiting fluorescence emission under near-infrared light excitation. //J Biomed Opt. -2006 May-Jun.-l 1(3).-34010.

93. Huber RM, Gamarra F, Hautmann H, HauGinger K, Wagner S, Castro M, Baumgartner R. 5-Aminolaevulinic Acid ALA. for the Fluorescence Detection of Bronchial Tumors. //Diagn Ther Endosc.- 1999.-5(2).-113-118.

94. Hung D.W., Lam S., Le Riche. //J. Lasers urgery Med.- 1992. -Vol. 11. -P. 99.

95. Jeffes EW. Levulan: the first approved topical photosensitizer for the treatment of actinic keratosis. //J Dermatolog Treat.- 2002.-13.

96. Jerjes W, Upile T, Betz CS, El Maaytah M, Abbas S, Wright A, Hopper C. The application of photodynamic therapy in the head and neck. Dent Update. -2007 Oct.-34(8).-478-80.

97. Kaidbey K.H., Agin P.P., Sayre R.M., Kligman A.M. Photoprotection by melanin a comparison of black and Caucasian skin // J. Am Acad. Dermatol. — 1979 Sep.-1(3).- 249—260.

98. Kelty CJ, Brown NJ, Reed MW, Ackroyd R . The use of 5-aminolaevulinic acid as a photosensitiser in photodynamic therapy and photodiagnosis. //Photochem Photobiol Sci. -2002 Mar.-1(3).-158-68.

99. Kennedy J. HPD photoradiation therapy for cancer at Kingston and Hamilton. In: Porphyrin Photosensitization. N.-Y. Plenum Press.- 1983.- P. 53-62.

100. Kennedy, J. C. and R. H. Pottier. Endogenous protoporphyrin IX, a clinically useful photosensitizer for photodynamic therapy. //J. Photochem. Photobiol В Biol.- 1992.- 14.- 275-292.

101. Kessel D. Proposed structure of the tumor localizing fraction of HpD. // Photochemestry and Photobiology.- 1986. -Vol. 44.- № 2.- P. 193-196.

102. Kessel D. Photodynamic therapy of neoplastic disease. CRC Press.- 1990,- p. 137.

103. Kobalter A., Roth A. Benign epithelial neoplasms//Mannis M., Macsai M. A. Eye and skin disease.-Philadelphia6Lippencott. Raven Publishers.- 1996.-p. 345-355

104. Kohno M, Takeda M, Niwano Y, Saito R, Emoto N, Tada M, Kanazawa T, Ohuchi N, Yamada R. Early diagnosis of cancer by detecting the chemiluminescence of hematoporphyrins in peripheral blood lymphocytes. //Tohoku J Exp Med.- 2008 Sep.-216(1).-47-52.

105. Konig K, Schenke-Layland K, Riemann I, Stock UA. Multiphoton autofluorescence imaging of intratissue elastic fibers. Biomaterials.- 2005 Feb.-26.(5).-495-500.

106. Krammer B, Plaetzer K. ALA and its clinical impact, from bench to bedside. //Photochem Photobiol Sci.- 2008 Mar.-7(3).-283-289.

107. Lam S., Mac. Aulay C., Le Riche J. Fluorescence imaging of early lung cancer. //SPIE. -1994.- Vol. 2324.- P. 2-7.

108. Lam S., MacAulay C., Le Riche J., Palcic B. Detection and localization of early lung cancer by fluorescence bronchoscopy. //Cancer.-2000.-89.-2468.

109. Li D, Zheng W, Qu JY Time-resolved spectroscopic imaging reveals the fundamentals of cellular NADH fluorescence. //Opt Lett. -2008 Oct 15.-33(20).-2365-7.

110. Li D, Zheng W, Qu JY.Two-photon autofluorescence microscopy of multicolor excitation. //Opt Lett.- 2009 Jan 15.-34(2).-202-4.

111. Lipson R.L., The photodynamic and fluorescence properties of a particular hematoporphyrin derivative and its use in tumor detection. Masters thesis. University of Minnesota. Minneapolia.- 1960.

112. Lipson R.L., Baldes E. J., Olsen A. M. Hematoporphyrin derivative: a new aid for endoscopic detection of malignant disease. //J. Thorac. Cardiovasc. Surg. -1961.-42.-623-629.

113. Lipson R.L., Baldes E. J., Olsen A. M. A further evalution of the use of hematoporphyrin derivative as a new aid for the endoscopuc detection of malignant diseases. //Dis. Chest. -1964,- 46.- 676-679.

114. Lipson R.L., Pratt J. H., Baldes E. J., Dockerty M. B. Hematoporphyrin derivative for the detection of cervical cancer. //Obstet. Gynecol.- 1964.-24.- 78-84.

115. Liutkeviciute-Navickiene J, Mordas A, Rutkovskiene L, Bloznelyte-Plesniene L.Skin and mucosal fluorescence diagnosis with different light sources. //Eur J Dermatol.- 2009 Mar-Apr.-19(2).-135-40.

116. Lohmann W., Poul E., Native fluorescence of unstained cryosections of the skin mith melanoma and naevi. Naturwissenschaften.-1989.- 76.- pp. 424-426

117. Lu S, Chen JY, Zhang Y, Ma J, Wang PN, Peng Q.Fluorescence detection of protoporphyrin IX in living cells: a comparative study on single-and two-photon excitation. /Я Biomed Opt.- 2008 Mar-Apr.-13(2).-024014.

118. Ly E, Piot O, Durlach A, Bernard P, Manfait M. Polarized Raman microspectroscopy can reveal structural changes of peritumoral dermis in basal cell carcinoma. //Appl Spectrosc.- 2008 Oct.-62(10).-1088-94.

119. Mathai S, Bird DK, Stylli SS, Smith ТА, Ghiggino KP. Two-photon absorption cross-sections and time-resolved fluorescence imaging using porphyrin photosensitisers. //Photochem Photobiol Sci. -2007 Sep.-6(9).-1019-26.

120. Messmann H, Endlicher E, Gelbmann CM, Scholmerich J. Fluorescence endoscopy and photodynamic therapy. //Dig Liver Dis.- 2002 Oct.-34(10).-754-61.

121. Moan J, Bech O, Peng Q, Berg K. Use of 5-aminolevulinic acid in photochemotherapy and fluorescence diagnostics. //Tidsskr Nor Laegeforen.-1998 Mar 20.-118(8):1206-11.

122. Morton С A. Methyl aminolevulinate: actinic keratoses and Bowen's disease. //Dermatol Clin.- 2007 Jan.-25(l).-81-7.

123. Murray RK., Granner DK., Mayes PA., Rodwell VW. Harper's Illustrated Biochemistry. McGraw-Hill Professional Edition: 27. McGraw-Hill Professional.- 2006.- pp. 279-283.

124. Patrice T. Photodynamic Therapy. Royal Society of Chemistry.-2004.- p.66-67.

125. Policard A. Etude sur les aspects offerts par des tumeurs experimentales examinees a la lumiere de Wood. // С R Soc Biol.- 1924.- Vol. 91.- 1423-1424.

126. Pottier RH, Krammer В., Baumgartner R., Stepp H. Photodynamic Therapy with ALA: A Clinical Handbook. Royal Society of Chemistry.-2006.- pp. 25.

127. Profio A.E., Doiron D.R. Laser fluorescence bronchoscope for localization of occult lung tumors. //Med. Phys.- 1979.- 6.- 523-525.

128. Rassmussen-Taxdal S, Ward GE, FiggeFHJ. Fluorescence of human lymphatic and cancer tissues following high doses of intravenous hematoporphyrin. //Cancer.- 1955.-8.-78-81.

129. Riley RS, Ben-Ezra JM, Massey D, Slyter RL, Romagnoli G. Digital photography: a primer for pathologists. //J Clin Lab Anal.- 2004.-18(2).-91-128.

130. Rotomskis R, Streckyte G. Fluorescence diagnostics of tumors. //Medicina (Kaunas).- 2004.-40(12).-1219-30.

131. Rotomskis R. Optical biopsy of cancer: nanotechnological aspects. //Tumori.- 2008 Mar-Apr.-94(2).-200-5.

132. Sandby-Moller J, Thieden E, Philipsen PA, Heydenreich J, Wulf HC. Skin autofluorescence as a biological UVR dosimeter. //Photodermatol Photoimmunol Photomed.- 2004 Feb.-20(1).-33-40.

133. Sexton M., Johnes D. В., Maloney M. E. Histolgic pattern analysis of basal cell carcinoma. Study of a series of 1039 consecutive neoplasms // J. Am. Acad. Dermatol. -1990- V. 23.- P. 1118-1126

134. Schwartz, S. К., K. Absolon and H. Vermund Some relationships of porphyrins, x-rays and tumors. Univ. Minn. Med. Bull. -1955.-27.- 7-8.

135. Smith PW. Fluorescence emission-based detection and diagnosis of malignancy. //J Cell Biochem Suppl.- 2002.-39.-54-9.

136. Sorensen R., Iani V., Moan J. Kinetics of photobleaching of protoporphirin IX in the skin of nude miceexposed to different fluence rates of red light. //Photochem. Photobiol. -1998.-68(6).-835-840.

137. Splinter R., Andrew Hooper B. An introduction to biomedical optics. CRC Press.- 2007.- p. 298

138. Stables G. I., Ash D. V. Photodinamic therapy. //Cancer Treatment Research.- 1995.- Vol 21.- 311-323.

139. Stepp H., Baumgartner R., Beyer W., Knuechel R. et al. Blader tissue diagnostics utilizing Protoporphyrin IX fluorescence detection.// SPIE Proceedings. 1995.-Vol. 2324.- P. 20-31.

140. Tang Gui-Chen, Yang Yuan-Long, Huang Zuo-Zhu, W. Hua F. Zhou, S. Cosloy, Robert R. Alfano. Spectroscopic properties of tryptophan and bacteria. //SPIE Proceedings.- 1995.- Vol. 2387.- P. 169-172

141. Tchernyi V.V., Rogatkin D.A., Bychenkov O.A., Polyakov P.Yu. Some results of multiwave in situ autofluorescence diagnostics // Proc. SPIE.-2005.-.vol. 5693.- pp. 336-343.

142. Thistlethwaite A. J., Leeper D. В., Moylan D., J. 3rd, Nerlinger R. E. pH distribution in human tumors, //nt. J. Radiat. Oncol. Phys.-1985.-Vol. 11.-P.1647-1652.

143. Thomas J.P., Girotti A. W. Glucose administration augments in vivo aptake and phototoxicity of the tumor localizing fraction of hematoporphyrin derivative. //Photochem. Photobiol.-1989.-Vol.49.-P.241-243

144. Thomsen S. and Tatman D., Physiological and pathological factors of human breast disease that can influence optical diagnosis. //Ann. N. Y. Acad. Sci. -1998.- 838.- 171-193.

145. Ueda Y, Kobayashi M. Spectroscopic studies of autofluorescence substances existing in human tissue: influences of lactic acid and porphyrins. //Appl Opt. -2004 Jul 10.-43(20).-3993-8.

146. Wagnieres G., Star W., Wilson В. C. In vivo fluorescence spectroscopy and imaging for oncological application. //Photochemestry and Photobiology.- 1998.-Vol. 68.- 603-632.

147. Wang HW, Gukassyan V, Chen CT, Wei YH, Guo HW, Yu JS, Kao FJ. Differentiation of apoptosis from necrosis by dynamic changes of reduced nicotinamide adenine dinucleotide fluorescence lifetime in live cells. //J Biomed Opt.- 2008 Sep-Oct.-13(5).- 054011

148. Zaidi S. I., Oieinick N. L., Zaim M. Т., Mukhtar H. Apoptosis during photodynamic terapy-induced ablation of RIF-1 tumors in C3H mice: electron microscopic, hystopatologic and biochemical evidence. //Photochem Photobiol.- 1993.- Vol. 58.- 771-776 .

149. Zellweger M. Fluorescence spectroscopy of exogenous, exogenously- induced and endogenous fluorofores for the photodetection and photodynamic therapy of cancer. Lausanne, Fevrier.- 2000.

150. Zhao J, Lui H, McLean DI, Zeng H. Real-time raman spectroscopy for non-invasive skin cancer detection preliminary results. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. -2008.-1.-3107-3109.