Физиолого-эмбриологические аспекты биоинженерных технологий получения животных с заданными признаками тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор биологических наук Рябых, Владимир Павлович

• Рябых, Владимир Павлович
• доктор биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации доктор биологических наук Рябых, Владимир Павлович

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Фолликулогенез у крупного рогатого скота

1.1.1. Фолликулогенез у крупного рогатого скота в тече- 16 ние повторяющихся эстральных циклов

1.1.1.1. Регуляция набора волны фолликулов и доминант- 24 ность

1.1.1.2. Связывание гонадотропных гормонов клетками фолликулов

1.1.1.3. Синтез фолликулами стероидных гормонов

1.1.2. Фолликулогенез в яичниках крупного рогатого ско- 3 8 та в связи с вызыванием суперовуляции

1.1.2.1. Влияние генетических факторов на популяцию фолликулов и показатель овуляций

1.1.2.2. Влияние экзогенных гонадотропинов на динамику 42 популяции фолликулов в яичниках крупного рогатого скота.

1.2. Состояние и перспективы разработки техноло- 51 гии получения трансгенных животных

1.2.1. Основные направления использования технологии трансгеноза

1.2.1.1. Повышение продуктивности

1.2.1.2. Повышение устойчивости животных к инфекцион- 57 ным заболеваниям

1.2.1.3. Получение трансгенных животных, продуцирую- 58 щих лекарственные биологически активные вещества с молоком

1.2.1.4. Изменение качества животноводческой продукции

1.2.1.5. Создание трансгенных животных доноров органов и 65 тканей для ксенотрансплантации

1.2.2. Методы введения чужеродных генов в эмбрионы 66 животных

1.2.2.1. Микроинъекционный метод введения генно- 66 инженерных конструкций в пронуклеусы зигот

1.2.2.2. Использование ретровирусных векторов

1.2.2.3. Перенос генов с помощью ядер трансформирован- 71 ных клеток

1.2.2.4. Использование сперматозоидов для переноса генно- 73 инженерных конструкций

1.2.3. Основные факторы, влияющие на эффективность 75 технологии получения трансгенных животных

1.2.3.1. Вызывание суперовуляции у свиней

1.2.3.1. Визуализация пронуклеусов в зиготах сельскохозяйственных животных

1.2.3.3. Введение генно-инженерных конструкций в про- 80 нуклеусы зигот

1.2.3.4. Факторы, влияющие на частоту интеграции генно- 84 инженерных конструкций в геном эмбрионов и потомства

1.2.3.5. Трансплантация микроинъецированных зигот жи- 88 вотным-реципиентам

1.2.3.6. Определение интеграции чужеродных генов в геном 90 животных на стадии эмбрионов

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

II. Объекты и методы исследований

III. Результаты исследований

3.1. Регулирование процесса фолликулогенеза у крупного рогатого скота в связи с вызыванием суперовуляции

3.1.1. Регулирование фолликулогенеза у коров и тёлок в 100 середине лютеалъной фазы полового цикла

3.1.1.1. Изучение возможности регулирования фолликуло- 101 генеза и повышения эффективности суперовуляции у коров за счёт увеличения дозы вводимых гонадо-тропинов

3.1.1.2. Состояние популяции антральных фолликулов в 104 яичниках коров в середине лютеалъной фазы полового цикла

3.1.1.3. Влияние предварительной гормональной обработки 111 коров в середине лютеальной фазы полового цикла на процесс фолликулогенеза

3.1.1.4. Влияние остаточных количеств гонадотропинов 117 СЖК на процесс фолликулогенеза при вызывании суперовуляции у коров-доноров

3.1.1.5. Регулирование фолликулогенеза препаратами ФСГ 123 разной степени очистки при вызывании суперовуляции у коров-доноров

3.1.2. Изучение динамики половых гормонов и разработка 128 способа прогнозирования суперовуляции у крупного рогатого скота

3.1.3 Регулирование фолликулогенеза у коров и тёлок путём предварительной обработки гонадотроп-ными гормонами в начальный период лютеальной фазы полового цикла

3.1.3.1. Регулирование фолликулогенеза у коров путём предобработки их препаратом ГСЖК в начальный период лютеальной фазы полового цикла с последующей лютеинизацией крупных фолликулов хо-рионическим гонадотропином человека

3.1.3.2. Вызывание лютеинизации фолликулов с помощью 149 хорионического гонадотропина человека в середине лютеальной фазы полового цикла

3.1.3.3. Регулирование фолликулогенеза у коров-доноров 157 путём предварительного введения гонадотропинов на 3-й и 5-й день полового цикла

3.1.4. Регулирование фолликулогенеза и вызывание суперовуляции у коров в начальный период лютеальной фазы полового цикла

3.1.4.1. Состояние популяции антральных фолликулов в 165 яичниках коров в начале и середине лютеальной фазы полового цикла

3.1.4.2. Вызывание суперовуляции у коров в начальный пе- 169 риод лютеальной фазы полового цикла

3.1.4.3. Фолликулогенез в яичниках коров в период вызы- 175 вания суперовуляции

3.2. Совершенствование эмбриоинженерных этапов технологии получения трансгенных животных

3.2.1. Выяснение причин, лимитирующих получение зи- 196 гот у свиней-доноров, и разработка способа вызывания синхронизированной суперовуляции

3.2.2. Анализ зависимости частоты интеграции трансгена 209 в геном животных от фазы клеточного цикла зиготы.

3.2.3. Анализ факторов, влияющих на приживляемость зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями, у животных-реципиентов

3.2.3.1. Изучение факторов, влияющих на приживляемость зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями, у свиней-реципиентов и совершенствование способов её повышения

3.2.3.2. Анализ факторов, влияющих на эффективность получения потомства у крольчих-реципиентов из зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями

3.2.4. Разработка способа определения интеграции чужеродной ДНК в геном животных на стадии эмбриона.

3.2.5. Использование генов соматотропинового каскада для получения трансгенных свиней Выводы.

Практические предложения. Список использованной литературы.

277 282 284

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиолого-эмбриологические аспекты биоинженерных технологий получения животных с заданными признаками»

Одним из основных факторов, необходимых для увеличения производства высококачественных продуктов животноводства, наряду с улучшением кормовой базы, является повышение генетического потенциала стада сельскохозяйственных животных, призванного обеспечить более эффективное использование кормов и резкое повышение продуктивности. Однако, для повышения генетического потенциала животных методами классической селекции требуется не одно десятилетие.

Успехи, достигнутые в последние годы в области эмбриоинженерии и генетической инженерии, свидетельствуют о принципиальной возможности генетического улучшения животных путем прямого переноса дополнительных генов в их геном. Разработка эффективной технологии переноса генов открывает огромные перспективы для генетического совершенствования животных, с помощью которой за одно поколение жизни животных можно будет достичь большего генетического совершенствования, чем методами классической селекции за десятилетия.

Преимуществами биоинженерных технологий, основанных на прямом переносе дополнительных генов в геном животных, с целью генетического совершенствования животных являются: возможность получения селекционного эффекта по отдельным признакам в несколько раз быстрее, чем при обычной селекции; возможность создавать генетические варианты, которые ранее не существовали у животных данного вида (продукция лекарственных веществ с молоком), или достигать изменения признаков, которые до последнего времени не поддавались селекции (устойчивость к инфекциям); возможность внедрения определенного гена в популяцию не манипулируя, как при естественном скрещивании, множеством неизвестных и часто нежелательных генов, а вводя в геном животного отдельный ген или группу генов, определяющих конкретный признак. В настоящее время основным методом получения трансгенных млекопитающих является микроинъекция генно-инженерных конструкций в пронуклеусы зигот. Несмотря на широкое использование техники микроинъекции, эффективность переноса генов остается на достаточно низком уровне, что является серьезной проблемой в получении трансгенных сельскохозяйственных животных. По современным представлениям низкая эффективность получения трансгенных сельскохозяйственных животных связана, во-первых, с низкой частотой интеграции рекомбинантных генов в геном животных, во-вторых, с пониженной выживаемостью зигот инъецированных генно-инженерными конструкциями в организме животных-реципиентов.

Исходя из этого, для повышения эффективности технологии получения трансгенных животных необходимо изучение факторов влияющих на частоту интеграции трансгена в геном хозяина и на жизнеспособность эмбрионов на разных этапах технологии получения трансгенных животных и на основе полученных знаний совершенствование физиолого-эмбриологических этапов этой технологии.

Основой для развития новых более сложных биоинженерных технологий получения животных с заданными признаками (трансгеноз и клонирование) послужила технология трансплантации эмбрионов. К началу 80-х годов, в принципе, были осуществлены основные этапы технологии трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота. Однако внедрение этой биотехнологии в широкую практику ведения животноводства до сих пор сдерживается несовершенством отдельных этапов этой технологии.

Одной из важнейших проблем в технологии трансплантации эмбрионов является получение достаточного количества полноценных эмбрионов. Известные методы вызывания суперовуляции у коров позволяют получать в среднем 2-4 полноценных эмбриона на одну гормональную обработку. Различия в реакции яичников коров на одну и ту же дозу гонадотропина обусловлены разным состоянием популяции ан-тральных фолликулов в момент введения гонадотропинов. Ещё в 70-80-х годах появились статьи под заглавием: « Суперовуляция - предел для трансплантации?» (Saumande L. et al., 1977), «Внутрияичниковый контроль фолликулогенеза предел для суперовуляции» (Moor R. et al. 1984). В 1999 году вышла проблемная статья того же Мура с соавторами (Webb R. et al., 1999 ), в которой анализируются причины отсутствия прогресса в повышении выхода полноценных эмбрионов при вызывании суперовуляции у коров.

Основной причиной высокой вариабельности суперовуляции и низкого выхода полноценных эмбрионов, исходя из имеющихся знаний, является большое разнообразие популяции антральных фолликулов в яичниках коров-доноров на момент начала стимуляции их экзогенными го-надотропинами с целью вызывания суперовуляции. Поэтому исследования, направленные на повышение эффективности суперовуляции, должны быть сосредоточены на разработке способов регулирования процесса фолликулогенеза, позволяющих создавать в яичниках коров-доноров к моменту гормональной обработки более многочисленную и однородную популяцию поверхностных антральных фолликулов. Только в этом случае может появиться возможность повысить эффективность суперовуляции.

Цель и задачи исследований. Целью исследований являлось изучение механизмов фолликулогенеза у крупного рогатого скота и свиней и выяснение физиолого-эмбриологических факторов, лимитирующих приживляемость зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями и интеграцию трансгена в геном животных; на основе проведенных исследований усовершенствовать способы регулирования процессом фолликулогенеза для повышения эффективности вызывания суперовуляции и основные физиолого-эмбриологические этапы технологии получения трансгенных животных.

Для выполнения поставленной цели считали необходимым решить следующие задачи:

-изучить состояние популяции антральных фолликулов в яичниках коров в середине лютеальной фазы полового цикла;

- изучить возможность регулирования фолликулогенеза в середине лютеальной фазы полового цикла и повышения эффективности суперовуляции у коров-доноров;

- изучить гормон синтезирующую функцию яичников коров в середине лютеальной фазы полового цикла и на этой основе разработать способ прогнозирования реакции суперовуляции;

- изучить состояние популяции антральных фолликулов в начальный период лютеальной фазы полового цикла и разработать способы регулирования фолликулогенеза в этот период;

- изучить возможность вызывания суперовуляции у коров в начальный период лютеальной фазы полового цикла;

- выяснить причины лимитирующие получение зигот у свиней-доноров и разработать способ вызывания суперовуляции, повышающий выход эмбрионов на стадии зиготы;

- изучить возможную зависимость частоты интеграции трансгена в геном животных от фазы клеточного цикла зиготы, во время которой в пронуклеусы вводится генно-инженерная конструкция;

- изучить факторы, влияющие на приживляемость зигот, микро-инъецированных генно-инженерными конструкциями, у свиней и кроликов реципиентов и усовершенствовать способы её повышения; разработать способ определения интеграции трансгена в геном животных на стадии эмбриона.

Научная новизна исследований. Впервые выяснена судьба всех категорий поверхностных антральных фолликулов в яичниках коров в процессе вызывания суперовуляции и установлено, что популяция антральных фолликулов в яичниках коров в начале лютеальной фазы полового цикла в большей степени подходит для вызывания суперовуляции, чем в середине лютеальной фазы цикла. Показана принципиальная возможность вызывания суперовуляции у коров в начальный период лютеальной фазы полового цикла.

Впервые установлено, что динамика уровня эстрадиола-17(3 в крови коров является объективным показателем степени будущей суперовуляции. На основание этого факта разработан способ прогнозирования реакции суперовуляции у коров-доноров в конкретный половой цикл.

Впервые выявлены причины низкого выхода эмбрионов на стадии зиготы при вызывании суперовуляции у свиней и на основе этих знаний разработан способ вызывания высокосинхронизированной суперовуляции, позволяющий получать до 85-90% зигот от общего числа извлечённых эмбрионов.

Впервые получены трансгенные животные (мыши) с интегрированной в их геном генно-инженерной конструкцией, включающей нуклео-тидные последовательности гена человеческого гранулоцит-колониестимулирующего фактора под промотером гена as 1 -казеина крупного рогатого скота. Полученные трансгенные мыши являются моделью животных, продуцирующих с молоком биологически активные вещества фармакологического назначения. На животных с точно фиксированным временем оплодотворения установлена зависимость между фазой клеточного цикла зигот, на которой в пронуклеус вводится генно-инженерная конструкция и интеграцией трансгена в геном эмбрионов и потомства, родившегося из микроинъецированных зигот.

Впервые на основании выявленной зависимости приживляемости эмбрионов от числа трансплантированных зигот разработан способ повышения приживляемости эмбрионов у свиней-реципиентов при трансплантации зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией. Установлены пределы синхронности половых циклов у свиней-реципиентов и доноров при трансплантации им эмбрионов разных стадий развития, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией и определены условия использования реципиентов с индуцированной и спонтанной охотой. Показано влияние физиолого-эмбриологических факторов на жизнеспособность кроличьих зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями и на их приживляемость у крольчих-реципиентов.

Впервые разработан способ определения истинной интеграции трансгена в геном животных на стадии эмбриона, позволяющий трансплантировать животным-реципиентам только эмбрионы с точно установленной интеграцией введённого чужеродного гена.

Научная новизна этих исследований подтверждена четырьмя Авторскими свидетельствами, двумя Патентами и одним положительным решениям на изобретения.

Практическая значимость работы. Результаты исследований, полученные при изучении процесса фолликулогенеза в яичниках коров, могут быть использованы для разработки способов регулирования фолликулогенеза и повышения эффективности вызывания суперовуляции.

Разработанные: способ прогнозирования суперовуляции у коров-доноров, способ нехирургического извлечения эмбрионов и импланта-тор для пересадки эмбрионов могут быть использованы в практической работе по трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота.

Результаты исследований, направленных на совершенствование основных этапов технологии получения потомства кроликов из зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией в пронуклеусы зигот, могут быть использованы в работах по получению трансгенных кроликов, что позволит значительно повысить эффективность технологии получения трансгенных кроликов, продуцирующих с молоком биологически активные вещества фармакологического назначения.

Разработанный способ определения на стадии эмбриона истинной интеграции трансгена в геном млекопитающих животных может быть использован в технологиях получения трансгенных животных всех видов, что позволит существенно сократить число используемых животных-реципиентов и расходы на их приобретение и содержание, что особенно важно в работах на малоплодных животных (крупный рогатый скот, козы и овцы).

Результаты исследований, направленных на установление пределов синхронности половых циклов у свиней-реципиентов и доноров при трансплантации им эмбрионов разных стадий развития, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией; на определение условий использования реципиентов с индуцированной и спонтанной охотой; на выяснение оптимального числа зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, необходимого для трансплантации свиньям-реципиентам и разработанный способ повышения приживляемости эмбрионов у свиней-реципиентов при трансплантации зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, могут быть использованы как в практической работе по получению трансгенных свиней, так и для дальнейшего совершенствования технологии трансгеноза.

Разработанный вариант отечественной технологии получения потомства свиней из зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями, включающий несколько усовершенствованных фи-зиолого-эмбриологических этапов, может быть использован для получения трансгенных свиней.

Положения, выносимые на защиту

1. Реакция суперовуляции у коров обусловлена состоянием популяции поверхностных антральных фолликулов в яичниках на момент начала гормональной обработки экзогенными гонадотропинами.

2. Под влиянием экзогенных гонадотропинов до предовуляторного состояния развиваются и овулируют фолликулы, имевшие на момент введения гонадотропных препаратов диаметр более 3-4мм и достигшие к моменту предовуляторного выброса ЛГ диаметра не менее 7мм.

3. С морфологической точки зрения популяция антральных фолликулов в яичниках коров в начальный период лютеальной фазы полового цикла в большей степени подходит для вызывания суперовуляции, чем в середине лютеальной фазы.

4. Динамика уровня эстрадиола 17-Р в крови коров-доноров в период с 5-го по 8-й день полового цикла является объективным показателем степени будущей суперовуляции у этих животных при вызывании её в данный половой цикл.

5. Хорионический гонадотропин человека, введённый коровам перед обработкой их гонадотропными гормонами как в начале, так и середине лютеальной фазы полового цикла, вызывает увеличение количества лю-теинизирующих и атретических фолликулов средних и крупных размеров и снижает эффективность суперовуляции.

6. Регрессия жёлтого тела, индуцированная в период с 12 по 15-й день полового цикла свиней, приводит к синхронизации процесса фолликуло-генеза в их яичниках.

7. Наибольшая частота интеграции трансгена в геном рождённого потомства происходит при микроинъекции генно-инженерной конструкции в пронуклеусы зигот, находящихся в фазе G1 клеточного цикла.

8. С увеличением числа зигот, трансплантированных свиньям реципиентам, увеличивается число супоросных реципиентов, однако приживляемость эмбрионов при этом снижается. Трансплантация свиньям-реципиентам зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, равномерно в оба яйцевода, повышает процент супоросности и приживляемости эмбрионов, по сравнению с пересадкой в один яйцевод.

9. Фракционирование тотальной ДНК бластомеров, позволяет отделить чужеродную ДНК интегрированную в хромосомную ДНК хозяина от не интегрированной и методом ПЦР определить истинную интеграцию трансгена в геном животных на стадии эмбриона.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на ежегодных отчётных сессиях ВНИИФБиП в период с 1978 по 2000г., а также на:

- Съездах (физиологическом-1987; генетиков-1994; биохимическом-1997);

- международных конференциях ( Боровск-1995; 2000; Дубровицы -2001);

- международных симпозиумах (Варна-1978; С.-П. Пушкин- 1994);

- республиканских конференциях ( Таллин-1986; Жодино-1989; Львов-1990; Горки-1991; Видово-1995; Москва-1996);

- всесоюзных симпозиумах (Москва-1980; 1981; 1989; Загорск-1991);

- семинарах Агропрома СССР по трансплантации эмбрионов (19841989).

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Рябых, Владимир Павлович

ВЫВОДЫ

1. Реакция суперовуляции у коров обусловлена состоянием популяции антральных фолликулов в яичниках на момент начала гормональной обработки экзогенными гонадотропинами. При вызывании суперовуляции у коров до предовуляторного состояния развиваются и овулируют фолликулы, имевшие на момент введения экзогенных гонадотропинов диаметр более 3-4мм и достигшие к моменту предовуляторного выброса ЛГ диаметра не менее 7мм.

2. Увеличение дозы гонадотропинов, вводимой коровам-донорам, не увеличивает количества овулирующих фолликулов и полученных эмбрионов при вызывании суперовуляции у животных, как с низкой, так и с высокой степенью суперовуляции, но усиливает рост мелких фолликулов и переход их в разряд неовулировавших фолликулов.

3. В середине лютеальной фазы полового цикла на фоне активно функционирующего жёлтого тела и повышенного уровня прогестерона мелкие антральные фолликулы (диаметром 1-2мм) не успевают развиться до предовуляторного состояния под влиянием экзогенных гонадотропинов за короткий срок гормональной обработки и овули-ровать под влиянием предовуляторного выброса ЛГ. Однако, продолжая развиваться под действием остаточных количеств гонадотропинов СЖК, они создают популяцию крупных неовулировавших фолликулов, которые обнаруживаются в яичниках коров-доноров на 7-10 дни после вызывания суперовуляции.

4. В начальный период лютеальной фазы полового цикла (2-3-й день) в яичниках коров содержится достоверно больше нормальных фолликулов всех размеров чем на 10-й день - (24,5±0,4 против 14,1 ±0,5) в том числе и фолликулов диаметром 4-10мм (15,8±0,4 против 9,2±0,3),т.е. с морфологической точки зрения популяция фолликулов на 3-й день полового цикла в большей степени, чем на 10-й день подходит для вызывания суперовуляции. В этот период на фоне низкого уровня прогестерона и отсутствия доминирующего фолликула экзогенные гонадотропины вызывают в яичниках коров быстрый рост популяции мелких антральных фолликулов до состояния средних размеров за 4-5 дней. Вызывание суперовуляции у коров в начальный период лютеальной фазы полового цикла с помощью го-надотропинов СЖК по эффективности превосходит общепринятый способ вызывания её в середине лютеальной фазы.

5. Снижение уровня эстрадиола 17-(3 в крови коров-доноров в 1,5-4,5 раза с 6-го на 7-й день полового цикла является объективным показателем высокой степени суперовуляции у этих животных при вызывании её в данный половой цикл. Уровень эстрадиола 17-J3 в крови коров на 6-й день цикла ниже 2,3 пг/мл свидетельствует о малочисленности популяции антральных фолликулов в их яичниках и о низкой степени суперовуляции, вызванной в этот половой цикл.

6. Высоко очищенный препарат ФСГ-супер с низким содержанием примеси ЛГ достоверно повышает выход полноценных эмбрионов, по сравнению с обычными коммерческими препаратами, при вызывании суперовуляции у постоянных коров-доноров (8,1 ±1,4 про-тив3.8±0,8) и существенно увеличивает выход полноценных эмбрионов у коров при одноразовом использовании их в после отельный период ( 5,0±0,6 против 3,6±0,5).

7. Хорионический гонадотропин человека, введённый коровам перед обработкой их гонадотропинами как в начале, так и середине лютеальной фазы полового цикла вызывает увеличение количества лю-теинизирующих и атретических фолликулов средних и крупных размеров и снижает эффективность суперовуляции.

8. Разработан способ вызывания высокосинхронизированной суперовуляции у половозрелых свиней, позволяющий в 2-3 раза повысить выход эмбрионов на стадии зиготы, по сравнению с существующими способами. Установлено, что для вызывания суперовуляции у свиней может быть использована жидкая нативная СЖК без снижения эффективности и без признаков анафилаксии.

9. Частота интеграции трансгена, определённая в эмбрионах, находящихся на стадии бластоцисты, снижалась с 18-20 до 11-16 % при введении генно-инженерной конструкции в пронуклеусы зигот в период от начала фазы G1 до окончания фазы S клеточного цикла. Наибольшая частота интеграции трансгена в геном рождённого потомства наблюдалась при микроинъекции генно-инженерной конструкции в пронуклеусы зигот, находившихся в начале и середине фазы G1 клеточного цикла.

10. Синхронность половых циклов доноров и реципиентов 0 или -1 день не оказывает существенного влияния на супоросность свиней-реципиентов при трансплантации им зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, тогда как при трансплантации 2-клеточных эмбрионов синхронность -1 день резко снижает процент супоросных реципиентов.

11. При нормальных условиях кормления использование в качестве реципиентов свиней со спонтанной охотой не ухудшает показателей супоросности и приживляемости эмбрионов, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, по сравнению с реципиентами, обработанными гонадотропинами. Однако при недостаточном и неполноценном кормлении свиней-реципиентов происходит снижение процента супоросности, поэтому в таких условиях использовать в качестве реципиентов свиней со спонтанной охотой нецелесообразно.

12. С увеличением числа зигот, трансплантированных свиньям реципиентам, с 10 до 40 увеличивается число супоросных реципиентов с 20 до 43% , однако приживляемость эмбрионов при этом снижается с 33 до 13%. При получении потомства свиней из зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, наибольшая эффективность достигается при трансплантации животным- реципиентам 15-20 зигот. Супоросность у свиней-реципиентов увеличивается с 45,5 до 66,6%, при трансплантации им зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, равномерно в оба яйцевода, а приживляемость эмбрионов - с 3,4 до 10,1% (в пересчёте на всех реципиентов), по сравнению с пересадкой в один яйцевод.

13. Из пяти пород кроликов, наиболее распространённых в центральной зоне, суперовуляцией на гормональную обработку лучше реагируют крольчихи пород шиншилла (36,0+2,2 овуляций), калифорнийский (40,0+5,4) и серебристый( 39,0+3,4), по сравнению с крольчихами пород белый великан (31,0+2,6) и черный аборигенный (20,0+7,3). При этом отмечено, что лучше суперовуляцией реагируют крольчихи всех пород в возрасте до полутора лет.

14. Приживляемость зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией как в расчете на всех использованных реципиентов, так и на одного сукрольного реципиента была наиболее высокой у крольчих-реципиентов калифорнийской породы (14,3 и 29%) и шиншилла (8,2 и 19,0%). С увеличением числа трансплантированных зигот с 14-20 до 31-40 процент сукрольных реципиентов увеличивается с 26,6 до 66,6%. С увеличением возраста реципиентов с 1 до 3-х лет снижалась как сукрольность (с 58,0 до 17%), так и приживляемость эмбрионов (с 10,2 до 5,9%). Лучшей приживляемостью обладали микроинъецированные зиготы, полученные от крольчих-доноров породы шиншилла (54,3 против 33,3% для остальных исследуемых пород).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В работах по трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота использовать способ прогнозирования суперовуляции у коров-доноров, что позволит в 4-5 раз повысить общую эффективность вызывания суперовуляции.

2. Использовать в работах по трансплантации эмбрионов для вызывания суперовуляции у коров высокоочищенный препарат ФСГ-супер, что позволит в 2-2,5 раза повысить выход полноценных эмбрионов у постоянных коров-доноров и в 1,5 раза у коров, без установленной эм-бриопродуктивности при однократном использовании их в после-отельный период.

3. В работах по получению трансгенных свиней использовать способ вызывания высокосинхронизированной суперовуляции, что позволяет в 2-3 раза повысить выход эмбрионов на стадии зиготы.

4. Для вызывания суперовуляции у свиней может быть использована более дешёвая нативная СЖК без снижения эффективности и без признаков анафилаксии.

5. В работах по трансгенозу генно-инженерные конструкции целесообразно микроинъецировать в пронуклеусы зигот, находящихся в фазе G1 клеточного цикла.

6. При недостаточном и неполноценном кормлении использовать в качестве реципиентов свиней со спонтанной охотой не целесообразно.

7. Трансплантировать свиньям-реципиентам зиготы, микроинъецированные генно-инженерной конструкцией, равномерно в оба яйцевода, что позволит увеличить супоросность и приживляемость эмбрионов.

8. В работах по трансгенозу на малоплодных животных проводить в эмбрионах определение интеграции трансгена с использованием метода ПЦР с предварительным микрофракционированием тотальной

283

ДНК бластомеров на высокомолекулярную и низкомолекулярную фракции, что позволит трансплантировать животным -реципиентам только эмбрионы с установленной интеграцией трансгена и значительно сократить затраты на приобретение и содержание большого числа реципиентов.

9. Использовать в работах по получению трансгенных свиней, разработанный отечественный вариант технологии получения потомства свиней из зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследованиями, направленными на совершенствование эмбрио-инженерных этапов технологии получения трансгенных свиней, установлены пределы синхронности половых циклов у свиней-реципиентов и доноров при трансплантации им эмбрионов разных стадий развития, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией; определены условия использования реципиентов с индуцированной и спонтанной охотой; определено оптимальное число зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, необходимое для трансплантации свиньям-реципиентам позволяющее получать наибольшее число потомков. Предложен способ повышения приживляемости микроинъецированных эмбрионов у свиней-реципиентов.

Таким образом, в результате проведенных исследований разработан отечественный вариант технологии получения потомства свиней из зигот, микроинъецированных генно-инженерными конструкциями. Технология включает несколько усовершенствованных этапов, повышающих её эффективность: разработан способ вызывания синхронизированной суперовуляции у свиней, позволяющий получать до 85-90% эмбрионов на стадии зиготы (Патент на изобретение); установлена возможность использования нативной СЖК для вызывания суперовуляции у свиней без снижения эффективности и без признаков анафилаксии; установлены пределы синхронности половых циклов у свиней-реципиентов и доноров при трансплантации им эмбрионов разных стадий развития, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией; определены условия использования реципиентов с индуцированной и спонтанной охотой; определено оптимальное число зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией, необходимое для трансплантации свиньям-реципиентам позволяющее получать наибольшее число потомков; разработан способ повышения приживляемости эмбрионов у свиней-реципиентов при трансплантации зигот, микроинъецированных генно-инженерной конструкцией (положительное решение на патент); разработан способ определения истинной интеграции трансгена в геном животных на стадии эмбриона, позволяющий трансплантировать животным реципиентам только эмбрионы с установленной трансгенностью ( Патент на изобретение); определены стадии клеточного цикла зигот, на которых введение генно-инженерных конструкций в пронуклеусы зигот обеспечивает наибольшую частоту интеграции трансгена в геном эмбрионов и рождённого потомства.

Все вышеприведенные разработки позволяют существенно повысить эффективность технологии получения трансгенных свиней.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Рябых, Владимир Павлович, 2002 год

1. Амиров А.Р., Шайхаев Г.О., Рябых В.П. -Способ определения интеграции чужеродной ДНК в геном животных на стадии эмбриона. // Патент на изобретение №217864 ,2002г.

2. Андреева JI.E., Хайдарова Н.В., Солодухина ЛИ. и др. Микроинъекция гена релизинг-фактора гормона роста человека в зиготы и эмбрионы мышей./Доклады ВАСХНИЛ. -М. 1990, N7,c.46-51.

3. Башкеев Е.Д. Разработка и совершенствование гормональных методов регуляции и стимуляции воспроизводительной функции свиноматок в условиях промышленной технологии. //Автореф.дис. док.биол.наук.-Дубровицы,-1982, с. 43.

4. Башкеев Е.Д., Красикова З.С. Влияние СЖК разного биологическогокачества в сочетании с хориогонином на синхронизацию овуляции у свиней. // Гормоны в животноводстве, 1981, 43-44.

5. Белевич В.П., Алиев А.А., Прокофьев М.И., Рябых В.П. и др. Способвымывания зигот у крупного рогатого скота. //Авторское свидетельство № 743675 опубликов. 30.06.80 г. Бюллетень № 24.

6. Белевич В.П., Рябых В.П., Черных В .Я. и др. Извлечение и пересадкаэмбрионов у крупного рогатого скота нехирургическими способами. // В кн. «Эндокринология и трансплантация эмбрионов», ред. Клинский Ю.Д., стр. 53-70.

7. Брем Г., Эрнст Л. К., Андропов Л. А., Васильева Э. Г., Акольников В.

8. Е., Королева И. JI. Трансгенные свиньи (MT-'l/hGRF): оценка качества туш и химического состава мяса при убое животных. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 41-47.

9. Брем Г., Эрнст JI. К., Васильева Э. Г., Акольников; В. Е. Оценка роста и развития первого поколения трансгенных свиней (МТ-1/hGRF) в процессе онтогенеза. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 26-33.

10. Ю.Букреев Ю.М. Содержание половых гормонов в фолликулярной жидкости у спонтанно циклирующих и суперовулирующих коров. // Состояние и развитие сельскохозяйственной биотехнологии, Ленинград, 1986, 180-181.

11. Гольдман И.Л., Семенова В.А., Базылев С.Е., Гоголевский П.А. Чер-нышова М.А. Трансплантация зигот кроликов, микроинъецированных рекомбинантными ДНК. // Доклады ВАСХНИЛ, Дубровицы, 1, 51-54.

12. Дыбан А.П. Трансгенные млекопитающие в биологии разви-тия./Онтогенез. М. 1989, Т. 20, N 6, с. 577-592.

13. Н.Ефремова М.Н. Суперовуляция и получение эмбрионов у кроликов.

14. Трансплантация эмбрионов в молочной скотоводстве и овцеводстве, Дубровицы, 1985, 37-39.

15. Зиновьева Н., Безенфельдер У., Брем Г. Получение яйцеклеток и пересадка микроинъецированных зигот у кроликов. // Онтогенез, т.27, №3,214-217.

16. Зиновьева Н., Брем Г. Определение пола предимплантационных яб-рионов крупного рогатого скота путем аллель-специфической амплификации генов ZFX и ZFY. //Биотехнология. М. 1995, N1-2, с. 50-53.

17. Исабеков Б., Конюхов Б. В. Анализ факторов, влияющих на эффективность получения трансгенных мышей./Онтогенез. -1989, т. 20, с. 28-31.

18. Кузин Б.А., Васильев И.М., Слезингер М.С. и др. Микроманипуляции с ранними эмбрионами свиней./ Доклады ВАСХНИЛ. М. 1988, N 10, с. 29-31.

19. Кузнецов А. В., Кузнецова И. В. Попытки получения трансгенных животных с помощью подвижных векторов. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1,173-180.

20. Кузнецова И.В., Кузнецов А.В., Сигаева В.А., Шит И.Ю. Использование сперматозоидов кролика в качестве вектора для чужеродной ПС./Биотехнология . М. 1993, N 11-12, с. 2-5.

21. Лапшин С. А., Эрнст Л. К., Матяев В. И. Особенности жирнокис22.лотного состава тканей трансгенных свиней. //Сб. научных трудов

22. Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 58-61.

23. Манухина ЛИ, Фофана Н.В, Рябых В.П. Влияние экспрессии трансгена чРГ-СТГ на морфофункциональное состояние свиней. // Проблемы физиологии, биохимии, биотехнологии с/х животных. Отчет за 1994 г, Боровск, 1994 г, стр. 155-156.

24. Некрасов А.А. Технология получения антисыворотки при гормональном вызывании полиовуляции. // Трансплантация эмбрионов в молочной скотоводстве и овцеводстве, Дубровицы, 1985, 19-21.

25. Некрасов А.А, В.П. Семеняченко. Техника извлечения пересадки одновдневных зародышей свиней. // Биотехнология в животноводстве, Дубровицы, 1987, 24-26.

26. Прокофьев М.И, Рябых В.П, Бахитов К.И. и др.- Эндокринная реакция у коров при различных способах вызывания суперовуляции. //Сельскохозяйственная биология 1980 г., т. XV, № 2, стр. 302-306.

27. Прокофьев М.И., Рябых В.П., Бахитов К.И. и др. Вызывание суперовуляции у крупного рогатого скота с целью получения эмбрионов для трансплантации. // В кн. «Эндокринология и трансплантация эмбрионов», ред. Клинский Ю.Д., стр. 42-53.

28. Прокофьев М.И., Рябых В.П., Малышев B.C. и др. Гормональный способ вызывания суперовуляции у коров и телок. // Доклады ВАСХНИЛ. 1979, № 8,17-24.

29. Прокофьев М.И., Рябых В.П., Малышев B.C. и др. Способ вызывания суперовуляции у коров и телок. //Авторское свидетельство № 704622 опубликованное 25.12.79 г. Бюллетень № 47.

30. Рябых В.П. Стратегия использования генов соматотропинового каскада для получения трансгенных свиней. // Актуальные проблемы биологии в животноводстве. Материалы второй Международной конференции 5-8 сентября 1995 г., Боровск, 1997 г., с. 241-256.

31. Рябых В.П. Физиологические аспекты повышения эффективности суперовуляции у коров-доноров. //Тезисы докладов т.1, XV съезд Всесоюзного физиологического общества им. И.П. Павлова, Кишинев 1987 г., т.1, с.284-285.

32. Рябых В.П. Эндокринологические аспекты регулирования процессов фолликулогенеза и суперовуляции у крупного рогатого скота. //Сб. трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота. Жо-дино, 1989 г., стр. 82-84.

33. Рябых В.П., Белевич В.П., Прокофьев М.И. и др. Устройство для имплантации зигот. // Авторское свидетельство № 725665 опубликованное 8.04.80 г. Бюллетень № 13.

34. Рябых В.П., Логинов А.Г., Кордюков А.П. и др. Способ прогнозирования реакции суперовуляции у животных. //Авторское свидетельство № 1304182, 1986г.

35. Рябых В.П., Никитина В.Н., Стрельников А.И. Половые гормоны в крови животных-доноров и реципиентов в связи с трансплантацией эмбрионов. // Научные труды ВНИИФБиП, 1983 г., т. XXVII, стр. 22-34.

36. Рябых В.П., Прокофьев М.И. Радиоиммунологический метод определения ЛГ в крови КРС. // II Всесоюзный симпозиум по иммунологии воспроизводств. 16-18 декабря 1980 г.

37. Рябых В.П., Прокофьев М.И., Никитина В.Н. Специфичность антисывороток к ЛГ крупного рогатого скота при различных способах иммунизации. //Тезисы докладов IV Международногосимпозиума по иммунологии воспроизводств. Варна, 1978, 1922 сентября

38. Рябых В.П., Сапунова Е.Г., Буралхиев Б. и др. Способ вызывания синхронизированной суперовуляции у половозрелых свиней. // Патент на изобретение, 1997.

39. Рябых В.П., Сапунова Е.Г., Бурков И.А. и др. Визуализация пронуклеусов в зиготах и ядер в бластомерах./Ютчет о научно-исследовательской работе за 1989 г.,Боровск, 1989 г., стр. 107108.

40. Сергеев Н.И., Байбеков Ф.Р. Теорретические и практические основы микроманипуляции с эмбрионами животных./Бюлл. науч. работ ВАСХНИЛ НИИ животноводства. -1991, N 104, с. 43-48.

41. Сергеев Н.И., Смыслова Н.И., Смирнов А.О. Влияние некоторых факторов на уровень суперовуляции и качества эмбрионов у коров-доноров. // Биотехнология в животноводстве, Дубровицы, 1987, 38-40.

42. Смирнова Т.А., Галиева Л.Д., Завертяев Б.П. Количественное соотношение нормальных и атретических антральных фолликулов в яичниках коров. // Бюль. науч. работ, Ленинград, 1991, 129, 910.

43. Смыслова Н.И. Влияние возраста скота и сезона года на уровень суперовуляции и качества эмбрионов. // Трансплантация эмбрионов в молочной скотоводстве и овцеводстве, Дубровицы, 1985, 13-15.

44. Сураева Н. М., Трухан Р. С. Некоторые методологические приемы введения чужеродного гена в зиготы животных. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1,227-243.

45. Черемсинов Г.А. Закономерности генеративной функции яичников и гормональные методы повышения плодовитости живот-ных.//Вестник с.-х наук 1984, N 6, с. 102-114.

46. Шейкин В.Н. Фолликулогенез в яичниках коров в различные фазы полового цикла. // Биотехнология размножения сельскохозяйственных животных, Дубровицы, 1989, 95, 18-21.

47. Шихов И. Я., Эрнст J1. К., Некрасов А. А., Кущ А. А., Семеняченко В. П., Васильев И. М., Гращук М. А. Получение трансгенных свиней. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 85-92.

48. Шихов И.Я. Разработка методов подготовки доноров и реципиентов к трансплантации зародышей у крупного рогатого скота. // Гормоны в животноводстве, Дубровицы, 1981, 36-42.

49. Шихов И.Я., Некрасов А.А., Семеняченко В.П., Васильев И.М. Применение гонадотропинов СЖК при получении однодневных зародышей у свиней-доноров. // Бюль. науч. работ. ВИЖ, 1990, 99, 30-33.

50. Шихов И.Я., Некрасов А.А., Семеняченко В.П., Кауффольд М. и др. Методические рекомендации по получению микроинъекции и трансплантации ранних зародышей свиней. // ВИЖ, 1990, 19.

51. Эрнст J1. К., Брем Г., Махаев Е. А. Результаты выращивания и изучения обмена веществ трансгенных по гену рилизинг-фактора гормона роста свиней 1 поколения . //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 48-53.

52. Эрнст J1. К., Брем Г., Устин В. В. Зоотехническая и физиолого-биохимическая оценка трансгенных свиней с геном рилизинг фактора соматотропного гормона. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 17-25.

53. Эрнст JI. К., Прокофьев М. И., Захарченко В. И., Сураева Н. М., Мирошниченко С. И., Бондарук В. В., Лагутина И. С., Меэина М.

54. Н. Получение трансгенных кроликов инъекцией генов в зиготы. //Сб. научных трудов "Генноинженерные сельсохозяйственные животные", М., 1995, выпуск 1, 111-126.

55. Эрнст JI.K., Гольдман И.Л., Семенова В.А. и др. Трансгенные овцы: по лучение и использование.//Овцеводство. М. 1991, N 5, с. 14-16.

56. Эрнст Л.К., Гольдман И .Л., Зиновьева Н.А. и др.-Получение овец трансгенных по генной конструкции а^-казеин/химозин. // Доклады РАН, 1995, т. 345, №4, 555-558.

57. Эрнст Л.К.,Гольдман И.Л., Сергеев Н.И., Живалев И.К. Цитогенети-ческий метод определения пола эмбрионов крупного рогатого скота. //Доклады ВАСХНИЛ. М. 1981, N 8, с.28-30.

58. Эрнст Л.К., Полтавцева Р.А.- Биологические и продуктивные качества трансгенных свиней. М., 2001, с. 132.

59. Эрнст Л.К., Чабан И.М. -Влияние трансгенеза на биологические и хозяйственно-полезные признаки свиней. М., 2001, с. 141.

60. Эрнст Л.К., Шатайло В.Н. -Влияние интеграции чужеродных генов на фенотип свиней. М., 2001, с. 160.

61. Abraham GE, Odell WD, Swerdloff RS, et al. Simultaneous radioimmunoassays of plasma FSH, LH, progesterone, 17-hydroxyprogesterone, and estradiol-17(3 during the menstrual cycle. //J Clin Endocrinol Metab, 1972, 34, 312-318.

62. Adams GP, Matter RL, Kastelic JP, et al. Association between surges of follicle-stimulating hormone and the emergence of follicular waves in heifers. // J Reprod Fertil, 1992, 94, 177-188.

63. Adams, C. P., Evans, A. C. 0. and Rawlings, N. C. Follicular waves and circulating gonadotropins in 8-month old prepubertal heifers. //

64. Journal of Reproduction and Fertility, 1994, 100, 27-33

65. Adams, G. P, Matteri, R. L, Kastelic, J. P, et al. Association between surges of follicle-stimulating hormone and the emergence of follicular waves in heifers. // Journal of Reproduction and Fertility, 1992, 94, 177-188

66. Adashi, E. Y. and Rohan, R. M. Intraovanan regulation Peptidergic signalling systems. // Trends in Endocrinology and Metabolism, 1992, 3, 243-248

67. Alpizar, E. and Spicer, L. J. Effects of interleukin-6 on proliferation and follicle-stimulating hormone-induced estradiol production by bovine granulosa cells in vitro dependence on size of follicle. // Biology of Reproduction, 1993, 49, 38-43

68. Anderson, G.B,. Embryonic stem cells in agricultural species. In: Murray, J.D, Anderson, G.B.Oberbauer, A.M., McGloughlin, M.M. (Eds.), Transgenic Animals in Agriculture. CABI Publ. New York,US A, 1999,pp. 57-66.

69. Arbones, MX. Austin, H.A, Capon, D.J, Greenburg, G, 1994. Gene targeting in normal somatic cells: inactivation of the interferon-gamma receptor in myoblasts. Nat. Genet. 6, 90-97.

70. Archibald, A. L, McClenaghan, M, Hornsey, V, Simons, J. P. and dark, A. J. High level expression of biologically active human ar antitrypsin in the milk of transgenic mice. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA,1990, 87:5178-5182.

71. Arezzo F. Sea urchin sperm as a vector of foreign genetic information. //Cell Biology International Reports, 1989, 13, 391-404.

72. Armstrong D.T, A. Michalska R.J, Ashman E. et al. Gene transfer in goats: Methodologies and potential applications. //Proc. Int. Conference on Goats, Brazil, 1987.

73. Armstrong, D. G. and Webb, R. Ovarian follicular dominance novelmechanisms and protein factors. // Reviews a Reproduction, 1997, 2, 139-146

74. Ashworth, C. J. Nutritional factors related to embryonic mortality in the domestic species. // In Embryonic mortality in domestic species (ed M T Zavy and R D Geisert), 1994, 179-194 CRC Press

75. Badinga L, Driancourt MA, Savio JD, et al. Endocrine and ovarian responses associated with the first-wave dominant follicle in cattle. // Biol Reprod, 1992, 47, 871-883.

76. Baguisi, A., Behboodi, E., Melican, D.,et al.,. Production of goats by somatic cell nuclear transfer. Nat. Biotechnol. 1999, 17, 456-461.

77. Baird, D. Т., Campbell, В. K., Mann, et al. Inhibin and oestradiol in the control of FSH secretion in the sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, Supplement, 1991, 43, 125-138

78. Bao, B. and Garverick, H. A. Expression of steroidogenic enzyme andgonadotropin receptor genes in bovine follicles during ovarian follicular waves a review. // Journal of Animal Science, 1998, 76, 1903-1921

79. Barinaga M. Gene-transfer method fails test. //Science, 1989, 246, 446.

80. Bawden, W. S., Passey, R. J. and Mackinlay, A. G. The genes encoding the major milk specific proteins and their use in transgenic studies and protein engineering.//Biotech.Gen.Eng. Rev., 1994, 12,:89-137.

81. Berg U., G. Brem. In vitro production of bovine blastocysts by in vitromaturation and fertilization of oocytes and subsequent in vitro culture.//Zuchthyg. 1989, 24, 134-139.

82. Biery K.A., K.R. Bondioli ,F.J. de Mayo et al., Gene transfer by pronuclear injection in the bovine.// Theriogenology. 1988,29, 224228.

83. Bigelow, K. L. and Fortune, J. E. Characteristics of prolonged dominant versus control follicles follicle cell numbers, steroidogenic capabilities and messenger ribonucleic acid for steroidogenic enzymes. // Biology of Reproduction, 1998, 58, 1241-1249

84. Bleck, G. T. and Bremel, R. D. Variation in expression of a bovine a-lactalbumin transgene in milk of transgenic mice. //J. Dairy Sci., 1993,77:1897-1904.

85. Boland M. P., Murphy, M. G. and Roche, F. The use of ultrasound to monitor ovarian function in farm animals. // Agriculture, Biotechnology News and Information, 1990, 2, 841-844

86. Boquest, A.C., Day, B.N., Prather, R.S., Flow cytometric cell cycleanalysis of cultured porcine fetal fibroblast cells.// Biol. Reprod. 1999,60, 1013-1019.

87. Bosselman R.A., R.A. Hsu Т., Boggs S. Germline transmission ofexogenous genes in the chicken following microinjection of embryos with a non-replicating retrovirus vector //Transgenic Models in Medicine and Agriculture, WIey-Liss. N.Y., 1990,pp. 21-32.

88. Bowen, R.A, Reed, M.L., Schnieke, A., et al.Transgenic cattle resulting from biopsied embryos.// Biol. Reprod. 1994, 50, 664-668.

89. Brackett B.G., W. Baranska, et al. Uptake of heterologous genome bymammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization. //Proc. Natl. Acad. Sci., 1971,68, 353-357.

90. Brem G. Micromanipulation an Rinderembryonen und deren

91. Anwendungs-moglichkeiten in der Tierzucht F. Enke. // Stuttgart, 1986.

92. Brem G., E. Baunack, M. Muller, et al. Transgenic offspring bytranscaryotic implantation of transgenic ovaries into normal mice. //Mol. Reprod. Dev., 1990, 25, 42-44.

93. Brem G., P. Hartl. High-level expression of prochymosin in the milk oftransgenic rabbits. // Frontiers of Biotechnology in Agriculture 1991, Sea of Galilee, Irael, 1991,1.-4. 8.

94. Brem G., U. Weidle . Production of proteins with antibody activity intransgenie mammals. // Fronties of Biotechnology in Agriculture ,1991, Sea ofFalilee, Israel, 1991,1.-4. 8.

95. Brem G., K. Springmann, E. Maier, et al. Factors in the success oftransgenic pig programms. // Transgenic Models in Medicine and Agriculture (Robert. B, Church, ed.). Wiley. Liss, Inc., New York, 1990, pp. 61-72.

96. Brem, G., Hartl, P., Besenfelder, U., Wolf, E., Zinovieva, N. and Pfaller, R. Expression of synthetic cDNA sequences encoding human insulin-like growth factor-1 (IGF-1) in the mammary gland of transgenic rabbits. //Gene, 1994,149:351-355.

97. Brem, G. Besenfelder, U, Aigner, B.et al. YAC transgenesisin farmanimals: rescue of albinism in rabbits.// Mol. Reprod. Dev., 1996, 44, 56-62.

98. Brenig B, G. Brem. Marker-directed diagnosis of MH-susceptibility inpigs//. Neurol. Sci, 1990, 98, 136.

99. Brenig В, M. Muller, G. Brem. A fast detection protocol for screeninglarge numbers of transgenic animals. //Nucl. Acids Res, 1989, 17, 6422.

100. Brinster R.L. Making transgenic mice: is it really that easy? // Science,1989, 590-591.

101. Brinster R.L. The effect of cells transferred into the mouse blastocyston subaequent development. // J. Exp. Med. 140, 1974, 1049-1056.

102. Brinster R.L, E.P. Sandgren et al. No simple solution for makingtransgenic mice. //Cell, 1989,59, 239-241.

103. Brinster R.L, H.Y. Chen et al. Factors affecting the efficience ofintroducing foreign DNA into mice by microinjecting eggs. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 4438-4442.

104. Brinster R.L, J.M. Alien et al. Introns increase transcriptionalefficiency in transgenic mice. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 1988, 836-840.

105. Brinster R.L, R.D. Palmiter at al Introduction of genes into the germline of animals. // Harvey Lect. 80, 1986,1-38.

106. Buccione, R, Vanderhyden, В. C, Caron, P. J. et al. FSH-induced expansion of the mouse cumulusoophorus in vitro is dependent upon a specific fasecreted by the oocyte. // Developmental Biology, 1990, 138, 16-25

107. Buhler. T. A, Bruyere, T, Went, D. F, Stranzinger, G. and Burki, K.

108. Rabbit (3-casein promoter directs secretion of human interleukin-2into the milk of transgenic rabbits. //Bio/Technology, 1990, 8:140143.

109. Bunz, F., Dutriaux. A., Lengauer, C., et al.,. Requirement for p53 andp21 to sustain G2 arrest after DNA damage. //Science, 1998, 282,1497-1501.

110. Burki K, A.U.Urich. Transplantation of the human insulin gene intofertilized mouse egg. // EMBO 1, 1982, 127-131.

111. Byskov A. G. Differentiation of the mamma embryonic gonad. //

112. Physiological Reviews, 1986, 66, 71-117

113. Cahill L. P. and Mauleon, P. Influence of season cycle and breed onfollicular growth rates in sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, 1981,68, 321-328

114. Cahill L. P. and Mauleon, P. The populatior primordial and small follicles in the sheep. // Journal Reproduction and fertility, 1980, 61, 201-206

115. Campbell В. K., Scaramuzzi R. J. and Webb R. Control of antral follicle development and selection sheep and cattle. // Journal of Reproduction and Fertil. Supplement 49: 335-350

116. Campbell, В. K., Baird, D. T. and Webb, R. Effect dose of LH on androgen production and luteinization ovine theca cells cultured in a serum-free system. // Journal Reproduction and Fertility, 1998, 112, 69-77

117. Campbell, В. K., Gordon, В. M., Dobson H. et al. Insulin-like growthfactors stimulate oestradiol production both in vivo and in vitro. // Journal of Reproduction and Fertility, Abstract Series, 1993, 12 (abstr)

118. Campbell, В. K., Picton, H. M., Mann, G. E., et al. Effect of steroidand inhibin free ovine follicular fluid on ovarian follicles and oval hormone secretion. // Journal of Reproduction and Fertility, 1991,81.96

119. Campbell, K.H., McWhir, J., Ritchie, W.A., Wilmut, I.,. Sheep clonedby nuclear transfer from a cultured cell line. //Nature, 1996, 380. 64-66.

120. Carlsson, A., Bjorck, L. and Persson, K. Lactoferrin and lysozyme inmilk during acute mastitis and their inhibitory effect in Delvotest P. //J. Dairy Sci., 1989, 72:3166-3175.

121. Carson, R. S., Findlay, J. K., Clarke, I. J. et al. Estradiol, testosteroneand androstenedione in follicular fluid during growth and atresia of ovarial follicles. // Biology of Reproduction, 1981, 24, 105-113

122. Castilla, J., Ointado, В., Sola, I., Sanchez-Morgado, J.M., Enjuanes,1.,. Engineering passive immunity in transgenic mice secreting virus-neutralizing antibodies in milk.// Nat. Biotechnol., 1998, 16, 349-354.

123. Chan, A.W.S., Homan, E.J., Ballou, L.U., Burns, J.C., Bremel, R.D.,.

124. Transgenic cattle produced by reverse-transcribed gene transfer in oocytes.// Prod. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1998, 95, 14028-14033.

125. Chang, S. S. Antimicrobial proteins of maternal and cord sera and human milk in relation to maternal nutritional studies. //Am. J. Clin. Nutr., 1990, 51:183-187.

126. Charlton, H. M., Parry, D., Halpin, D. M. G. and Webb, R. Distribution of '"I-labelled follicle-stimulating hormone and human chorionic gonadotrophs in the gonads of hypogonadal (hpg) mice. // Journal of Endocrinology, 1982, 93, 247-252

127. Chase Jr, С. C, Kirby, C. , Hammond, A. C., et al. Patterns of ovariangrowth and development in cattle with a growth hormone receptor deficiency. // Journal of Animal Science, 1998, 76, 212 219

128. Church R.B. (1986). Embryo Manipulation and gene Transfer indomestic animals. // Tibtech 5, 13-19.

129. Cibelli, J.B., Stice, S.L., Golueke. P.L., et al. Cloned calves producedfrom nonquiescent fetal fibroblasts. //Science, 1998b, 280, 12561258.

130. Cibelli. J.B., Stice. S.L., Golueke, P.L.et al. Transgenic bovine chimeric offspring produced from somatic cell-derived stem like cells. //Nat.Biotechnol., 1998, 16, 642-646.

131. Clark, A. J. Prospects for the genetic engineering of milk. J. Cell Biochem., 1992, 49:121-127.

132. Clarke, R. A, Sokol, D., Rigby, N., Ward, K., Murray, I. D. and

133. Mackinlay, A. G. Mammary gland specific expression of bovine a,i-casein derived transgenes in mice.// Transgenics, 1994, 1:313319.

134. Costantini F., E. Lacy. Introduction of a rabbit P-globin gene into themouse germ line. //Nature 294, 1981,92-94.

135. Cozzi, E., White, D.J.G.,. The generation of transgenic pigs as potentialorgan donors for humans. //Nat.Med., 1995, 1,964-966.

136. Crittenden L.B., D.W. Salter. Expression and mobility of retroviralinserts in the chichen germ line. In Transgenic Models in Medicine and Agriculture (Church, R.B., ed.)// Wiley-Liss, N.Y., 1990, pp. 73-88.

137. Damak, S., Jay, N.P., Barrell, G.K., Bullock, D.W.,. Targeting geneexpression to the wool follicle intransgenic sheep. //Biotechnology, 1996 14, 181-184.

138. Diaz, Т., Schmitt, E. J.-P., de la Sola, R. L., et al. Human chorionicgonadotrophin-induced alterations in ovarian follicular dynamics during the estrous cycle of heifers. // Journal of Animal Science, 1998, 76, 1929-1936

139. DiTullio, P., Cheng, S. H., Marshall, J., Gregory, R. J., Ebert, К. M.,

140. Dobson H. Plasma gonadotrophins and oestradiol during oestrus in thecow. // J Reprod Fert, 1978, 52, 51-53.

141. Donaldson, L. E. and Perry, B. Embryo production by repeated superovulation of commercial donor cows. // Theriogenology, 1983, 20, 163-168

142. Dong, J., Albertini, D. F., Nishimori, K., et al. Growth differentiationfactor-9 is required during early ovarian folliculogenesis. // Nature, 1996,383,531-535

143. Dott, H. M., Hay, M. F., Cran, D. G. et al. Effect of exogenous gonadotropin (PMSG) on the antral follicle population in the sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, 1979, 56, 683-689

144. Dougherty J.P., H.M. Temin. A promoterless retroviral vector indicatesthat there are sequences in U3 required for 3'RNA processing. // Proc. Natl. Acad. Sci, USA, 1987, 84, 1197-1201.

145. Downing, J. A. and Scaramuzzi, R. J. Nutrient effects on ovulation rate,ovarian function and the gonadotrophic and metabolic hormones in sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, Supplement, 1991, 43, 209 227

146. Downing, J. A., Scaramuzzi, R. J. and Joss, J. The direct effect of insulin on ovarian steroid secretion in ewes with an autotransplanted ovary. // Proceedings of the Australian Society of Reproductive Biology, 1993,25,54

147. Driancourt MA. Follicular dynamics in sheep and cattle. // Theriogenology, 1991, 35, 55-79.

148. Driancourt, M. A., Fry, R. C., Clarke, I. J. et al. Follicular growth andregression during the 8 days after hypophysectomy in sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, 1987, 79, 635 641

149. Driancourt, M. A., Philipon, P., Locatelli, A., et al. Are differences in

150. FSH concentrations involved in the control of ovulation rate in Romanov and lie-de-France ewes. // Journal of Reproduction and Fertility, 1988, 83, 509-516

151. Driancourt, M. A., Thatcher, W. W., Terqui, M. et al. Dynamics ofovarian follicular development in cattle during the estrous cycle, early pregnancy and in response to PMSG. // Domestic Animal Endocrinology, 1991a, 8, 209-221

152. Driancourt, M. A., Webb, R. and Fry, R. C. Does follicular dominanceoccur in ewes . // Journal of Reproduction and Fertility, 1991, 93, 63-70

153. Drohan, W. N., Zhang, D., Paleyanda, R. K., Chang, R., Wroble, M.,

154. Velander, W. and Lubon, H. Inefficient processing of human protein С in the mouse mammary gland. //Transgenic Res. ,1994, 3:355-364.

155. Dufour, J., Cahill, L. P. and Mauleon, P. Short- and long-term effectsof hypophysectomy and unilateral ovariectomy on ovarian follicular populations in sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, 1979, 57,301-309

156. Dufour, J., Whitmore, 0. J., Ginther, 0. J. et al. Identification of theovulatmg follicle by its size on different days of the estrous cycle in heifers. // Journal of Animal Science, 1972, 34, 85-87

157. Dunn, T. G. and Moss, G. E. Effects of nutrient deficiencies and excesses on reproductive efficiency of livestock. // Journal of Animal Science, 1992, 70, 1580-1593

158. Ebert K.M., M.J. Low, E.W. Overstrom .et al. A Moloney MLV-ratsomatotropin fusion gene produces biologically active somatotropin in a transgenic pig. //Molec. Endocrinol, 1988,1, 227-283.

159. Echternkamp, S. E., Spicer, L. J., Gregory, К. E., et al. Concentrationsof insulin-like growth factor-I in blood and ovarian follicular fluid of cattle selected for twins. // Biology of Reproduction, 1990, 43, 814

160. Ellison, R. T. and Giehl, T. J. Killing gram-negative bacteria by lactoferrin and lysozyme.// J. Clin. Invest, 1991, 88:1080-1091.

161. England, B. G, Dahmer, M. K. and Webb, R. Relationships betweenfollicular size and antral fluid steroid concentrations at three stages of the estrous cycle in the ewe. // Biology of Reproduction, 1981, 24, 1068-1075

162. Eppig, J. J. and Schroeder, A. C. Culture systems for mammalian oocyte development progress and prospects.// Theriogenol-ogy,1986,25, 97-106

163. Ernst L.K, V.I. Zakcharchenko et al. Transgenic rabbits with antisense

164. RNA gene targeted at adenovirus H5. // Theriogenology,1991, 35, 1257-1271,.

165. Evans M.J, M.H. Kaufman. Establishment in culture of pluripo-tentialcells from mouse embryos. // Nature, 1981,292, 154-156.

166. Evans M.J, E. Notaruanni, S. Laurie, R.M. Moor Derivation andpreliminary characterization of pluripotent cell lines form porcine and bovine blastocysts. //Theriogenology, 1990,33, 125-128,.

167. Evans, M.J, Kaufman, M.H. Establishment in culture of pluripotentialcells from mouse embryos.//Nature, 1981,292, 154-156.

168. Eyestone, W.H,. Production and breeding of transgenic cattle using invitro embryo production technology. //Theriogenology, 1999, 51, 509-517.

169. Fabricant J.D, L.C. Nuti et al. Gene transfers in goats. //

170. Theriogenology, 1987,27,229,.

171. Findlay JK, Doughton B. Robertson DM. Forage RG. Effects of immunization against recombinant bovine inhibin и subunit on circulating concentrations of gonadotrophins in ewes. J Endocrinol., 1989, 120, 59-65.

172. Findlay, J. K. An update on the roles of inhibin, activin, and follistatinas local regulators of folliculogenesis. // Biology of Reproduction, 1993, 48, 15-23

173. Findlay, J. K. Peripheral and local regulators of folliculogenesis. // Reproduction, Fertility and Development, 1994, 6, 127-139

174. Fischer, B. Growth factors as regulators of mammalian preimplantation development. // In Preimplantation embryo development (ed В D Bavister), 1993, 83-96 Springer-Verlag, New York

175. Fleming, J. S., Greenwood, P. J., Heath, D. A., et al. Expression of gonadotrophm subunit genes in sheep that were homozygous carriersоand non-carriers of the Booroola fecundity gene Fee . // Journal a Reproduction and Fertility, 1995, 103, 315-321

176. Fortune JE, Quirk SM. Regulation of steroidogenesis in bovinepreovulatory follicles. //J Anim Sci, 1988, 66(suppl. 2), 1-8.

177. Fortune JE, Sirois J, Quirk SM. The growth and differentiation ofovarian follicles during the bovine estrous cycle. // Theriogenol-ogy, 1988, 29, 95-109.

178. Fortune JE. Follicular dynamics during the bovine estrous cycle: alimiting factor in improvement of fertility? // Anim. Reprod Sci, 1993, 33, 111-125.

179. Fortune, J. E. Ovarian follicular growth and development in mammals.

180. Biology of Reproduction, 1994, 50, 225-232

181. Fortune, J. E., Sirois, J., Turzillo, A. M. et al. Follicle selection m domestic species. // Journal of Reproduction and Fertility, Supplement, 1991, 43, 187-198

182. Fox, M.W. Genetic engineering biotechnology: animal welfare andenvironmental concerns. //Appl. Anim. Behav. Sci. ,1988, 20, 8394.

183. Fry, R. C., Clarke, I. J., Cummins, J. Т., et al. Induction of ovulation mchronically hypophysectomized Booroola ewes. // Journal of Reproduction and Fertility, 1988, 82, 711-715

184. Fuj iwara, Y., Miwa, M., Takahashi, R., et al. High-level expressing

185. YAC vector for transgenic animal bioreactors. //Mol. Reprod. Dev., 1999. 52, 414-420.

186. Fulka, J. Jr., First, N.L., Loi. P., Moor, R.M.,. Cloning by somatic cellnuclear transfer.//Bioessays, 1998, 10,847-851.

187. Gandolfi F., M. Lavitrano,ET AL. The use of sperm-mediated genetransfer for the generation of transgenic pigs. //. Reprod. Pert., 1989 ,81, 23-28.

188. Gandolfi, F.,. Spermatozoa, DNA binding and transgenic animals.

189. Transgenic Res., 1998,7, 147-155.

190. Garrett, W. M. and Guthrie, H. D. Expression of androgen receptorsand steroidogemc enzymes m relation to follicular growth and atresia following ovulation in pigs. // Biology of Reproduction, 1996, 55, 949-955

191. Gazaryan K.G., L.E. Andreeva, I.A. Serova, ET AL. Production oftransgenic rabbits and mice containing the bovine growth hormone gene. //Mol. Genetics, Microbiology and Virology, 1988,10, 28-34.

192. Ginther OJ, Knopf L, Kastelic JP. Ovarian follicular dynamics in heifers during early pregnancy. // Biol Reprod, 1989, 41, 247-254.

193. Ginther, 0. J., Knopf, L. and Kaestilic, J. P. Temporal associationsamong ovarian events in cattle during the oestrous cycles with two and three follicular waves. // Journal of Reproduction and Fertility, 1989, 87, 223-230

194. Ginther, 0. J., Kot, K., Kulick, L. J., et al. Relationship between FSHand ovarian follicular waves during the last six months of pregnancy in cattle. // Journal of Reproduction and Fertility, 1996, 108, 271-279

195. Ginther, 0. J., Wiltbank, M. C., Fricke, P. M., et al. Selection of thedominant follicle in cattle. // Biology of Reproduction, 1996, 55, 1187-1194

196. Giudice, L. C. Insulin-like growth factors and ovarian follicular development. //Endocrine Reviews, 1992, 13, 641-669

197. Gong, J. G. and Webb, R. Control of ovarian follicle development indomestic ruminants its manipulation ti increase ovulation rate and improve reproductiv performance. // Animal Breeding Abstracts, 1996, 64, 195-204

198. Gong, J. G., Baxter, G., Bramley, T. A. et al. Enhancement of ovarianfollicle development in heifers by treatment with recombinant bovine somatotrophin a dose-response study. // Journal of Reproduction and Fertility, 1997, 110, 91-97

199. Gong, J. G., Bramley, T. A. and Webb, R. The effect of recombinantbovine somatotropin on ovarian follicular growth and development in heifers. // Journal of Reproduction and Fertility, 1993a, 97, 247254

200. Gong, J. G., Bramley, T. A., Wilmut, I. et al. The effect of recombinant bovine somatotropin on the superovulatory response to pregnant mare serum gonadotropin in heifers. // Biology of Reproduction, 1993b, 1141-1149

201. Gong, J. G., Bramley, T. and Webb, R. The effect of recombinant bovine somatotropin on ovarian function m heifers follicular populations and peripheral hormones. // Biology of Reproduction, 1991, 45,941-949

202. Goodman AL, Descaizi CD, Johnson DK, et al. Composite pattern ofcirculating LH, FSH, estradiol and progesterone during the menstrual cycle in cynomolgus monkeys. // Proc Soc Exp Biol Med, 1977, 155,479-481.

203. Gordon J.B., G.A. Scangos, ET AL. Genetic transformation of mouseembryos by microinjection of purified DNA. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980,77, 7380-7384.

204. Gordon J.W., R.H. Ruddle Integration and stable germ line transmission of genes injected into mouse pronuclei. //Science, 1981,214, 1244-1246.

205. Gosden, R. G. and Spears, N. Programmed cell deati in the reproductive system. // British Medical Bulletin, 1997, 52, 644-661

206. Gosden, R. G. and Telfer, E. E. Numbers of follicle and oocytes inmammalian ovaries and their allometn relationships. // Journal of Zoology, 1987, 111, 169-175

207. Gosden, R. G., Hunter, R. H. F., Telfer, E., et al. Physiological factorsunderlying the formation of follicular fluid. // Journal of Reproduction an Fertility, 1988, 82, 813-825

208. Gosden, R. G„ Krapez, J. and Briggs, D. The life history of the mammalian oocyte. //BioEssays, 1997, 19, 875-882

209. Gospodarowicz, D. and Ferrara, N. Fibroblast growth factor and thecontrol of pituitary and gonad development and function. // Journal of Steroid Biochemistry, 1989, 32, 183-191

210. Gossen. M., Freundlieb, S., Bender, G., Miiller, G., Hillen, W., Bujard,

211. H.,. Transcriptional activation by tetracyclines in mammalian cells. //Science, 1995,268. 1766-1769.

212. Grady RR, Charlesworth MC, Schwartz NB. Characterization of the

213. FSH-suppressing activity in follicular fluid. // Recent Prog Horm Res, 1982,38,409-447.

214. Graessmann M., A. Graessmann. Gene manipulation and gene transferinto culture cells. Molecular Genetics of Plants and Animals //Academic Press, N.Y., 1983, 395-414.

215. Grasso F., Guilbault L.A., Roy G.L., Lussier J.G. Ultrasonographicdetermination of ovarian follicular development in super-ovulated heifers pretreated with FSH-P at the beginning of the estrous cycle. Theriogenology, 1989, 31, 1209-1220.

216. Greenwald G.S., Terranova P.F. Follicular selection and its control. In:

217. Knobil E, NeillJ (eds.), The Physiology of Reproduction. New York: Raven Press; 1988, 387-445.

218. Greve, Т., Callesen, H., Hyttel, P., et al. The effects of exogenous gonadotropins on oocyte an embryo quality in cattle. // Theriogenology, 1995,43,41-50

219. Grimes, R. W., Matton, P. and Ireland, J. A comparison of histologicaland non-histological indices of atresia and follicular function. // Biology of Reproduction, 1987, 37, 82-88

220. Grinde, В. A lysozyme isolated from rainbow trout acts on mastitispathogens. //FEMS Micro. Letters, 1989,60:179-182.

221. Grobet. L. Martin. L.J, Poncelet, D,et al. A deletion in the bovinemyostatin gene causes the double-muscled phenotype in cattle. //Nat. Genet, 1997, 17, 71-74.

222. Guilbault, L. A, Grasso, F., Lussier, J. G, et al. Decreased superovulatory responses in heifers superovulated in the presence of a dominant follicle. // Journal a Reproduction and Fertility, 1991, 91, 8189

223. Guthrie, H. D, Garrett, W. M. and Cooper, B. S. Follicle-stimulatinghormone and insulin-like growth factor-1 attenuate apoptosis in cultured porcine granulosa cells. // Biology of Reproduction, 1998, 58, 390-396

224. Gutierrez, C. G, Oldham, J, Bramley, T. A, et al. The recruitment ofovarian follicles is enhanced by increased dietary intake in heifers. //Journal of Animal Science, 1997, 75, 1876-1884

225. Guzik, A, Niemann, H,. Superovulation and recovery of zygotes suitable for microinjection in different breeds of sheep. Anim. Reprod.1. Sci., 1995,40,215-227.

226. Hackett, A. J. and Hafs, H. D. Pituitary and hypothalamic endocrinechanges during the bovine estrous cycle. // Journal of Animal Science, 1969, 28, 531-536

227. Halpin, D. M. G., Charlton, H. M. and Faddy, M. J. Effects of gonadotrophin deficiency on follicular development in hypogonadal (hpg) mice. // Journal of Reproduction and Fertility, 1986, 78, 119125

228. Halter, R., Carnwath, J. Espanion, G., Herrmann, D., Lemme, E.

229. Niemann, H., Paul. D. Strategies to express factor VIII gene con-struchts in the ovine mammary gland. //Theriogenology,1993, 39, 137-149.

230. Hammer R.E., R.L. Brinster, andet al., Expression of human growthhormone releasing factor in transgenic mice results in increased somatic growth. //Nature, 1985 ,315, 413-416.

231. Hammer R.E., R.L. Brinster, R.D. Palmiter. Use of gene transfer toincrease animal growth. // Cold Spting Harb. Symp. Quant. Biol, 1985a, 50,379-387.

232. Hammer R.E., V.G. Pursel, C.E. Rexroad, ET AL . Genetic engineeringof mammalian embryos. J. Anim. Sci, 1986,63, 269-278.

233. Hammer R.E., V.G. Pursel, C.E. Rexroad,ET AL. Production oftransgenic rabbits, sheep and pigs by microinjection. // Nature 1, 985c, 315, 680-683.

234. Hansson, L., Ediund, M., Ediund, A., Johansson, Т., Marklund, S. L.,

235. Fromm, S., Stromqvist, M. and Tornell, J. Expression and characterization of biologically active human extracellular superoxide dismutase in milk of transgenic mice.// J. Biol. Chem., 1994, 69:5358-5363.

236. Haskell, R.E., Bowen, R.A., Efficient production of transgenic cattle byretroviral infection of early embryos. //Mol. Reprod. Dev., 1995,40, 386-390.

237. Hay, M. F., Moor, R. M., Cran, D. G. et al. Regeneration of atreticsheep ovarian follicles in vitro. // Journal of Reproduction and Fertility, 1979, 55, 195-207

238. Hennart, P. F., Brasseur, D. J., Delogne-Desnoeck, J. В., Dramaix, M.

239. M. and Robyn, С. E. Lysozyme, lactoferrin, and secretory immunoglobulin A content in breast milk: Influence of duration of lactation, nutritional status, prolactin status, and parity of mother. //Am. J. Clin.Nutr., 1991,53:32-39.

240. Hillier, S. G., Whitelaw, P. F. and Smyth, C. D. Follicular oestrogensynthesis the two-cell, two-gonadotropins model revisited. // Molecular and Cellular Endocrinology, 1994, 100, 51-54

241. Hirshfield AN. Development of follicles in the mammalian ovary. //1.ternal. Rev. Cytol., 1991, 124, 43-101.

242. Hochi S., T. Ninomiya, A. Mizuno, M. Honma, and A. Yuki. Fate of

243. Exogenous DNA carried into Mouse Eggs by Spermatozoa. //Animal biontchnology, 1990,1, 21-31.

244. Hodgen GD, Kenigsburg D, Collins RL, et al. Selection of the dominant ovarian follicle and hormonal enhancement of the natural cycle. // In: Seppala M, Edwards RG (eds.), In Vitro Fertilization and Embryo Transfer. Ann NY Acad Sci, 1985, 442, 23-37.

245. Hofmeister B. Erstelling von transgenen Kaninchen mit gesaugespozifischer Expression und Aufbau von transgenen Linien. //Diss, med. vet, Munchen, 1989.

246. Hogan, В. Constantini. F., Lacy, E. Manipulating the Mouse Embryo:

247. A Laboratory Manual. Cold Spring Harbour Laboratory, Cold Spring Harbour Press, Plainview, NY., 1994

248. Holt, C. Structure and stability of bovine casein micelles. //Adv. in

249. Prot. Chem., 1992, 43:63-157.

250. Houdebine, L.-M. Production of pharmaceutical proteins from transgenic animals.//J. Biotechnol., 1994, 34, 269-287.

251. Hsueh, A. J. W., Billig, H. and Tsafrir, A. Ovarian follicle atresia ahormonally controlled apoptotic process.//Endocrine Rev., 1994, 15, 707-724

252. Hughey, V. L. and Johnson, E. A. Antimicrobial activity of lysozymeagainst bacteria involved in food spoilage and food borne disease. //Appl. Environ. Microbiol., 1987,53:2165-2170.

253. Huhtinen, M., Rainio, V., Aalto, J., et al. Increased ovarian responsesin the absence of a dominant follicle in superovulated cows. // The-riogenology, 1992, 37, 457-463

254. Hurwitz, D. R., Nathan, M., Barash, I., Ilan, N. and Shani, M. Specificcombinations of human serum albumin introns direct high level expression of albumin in transfected COS cells and in the milk of transgenic mice. //Transgenic Res., 1994, 3:365-375.

255. Huszar D., R. Balling,ET AL. Insertion of a bacterial gene into themouse germ line using an infection retrovirus vector. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1985, 82, 8587-8591.

256. Hyttinen, J.-M., Puera, Т., Tolvanen, M.,et al. Generation of transgenicdairy cattle from transgene-analyzed and sexed embryos produced in vitro. //Biotechnology, 1994, 12, 606-608.

257. Ikeno, M. Grimes, В., Okazaki, T.,et al. Construction of YAC-basedmammalian artificial chromosomes. //Nat. Biotechnol., 1998, 16. 431-439.

258. Ireland, J. J., Coulson, P. B. and Murphree, R. L. Follicular development during four stages of the estrous cycle of beef cattle. // Journal of Animal Science, 1979, 49, 1261-1269

259. Jaenisch R. Germ lines integration and Mendelian transmission of theexogenous Moloney leukemia virus. //Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1976,73, 1260.

260. Jaenisch R., B. Mintz . Simian virus 40 DNA sequances in DNA ofhealthy adult mice derived from preinplantation blastocysts injected with viral DNA. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1974a, 71, 12501254.

261. Jaenisch R., D. Jahner, ET AL. Chromosomal position and advance ofretroviral genomes inserted into the germ line of mice. //Cell, 1981,24, 519-529.

262. Jahner D., R. Jaenisch. Chromosomal position and specificemethylation in engancer sequences of germ-line transmitted retroviral genomes during mouse development//. Mol. Cell. Biol, 1985, 5,2212-2220.

263. Johnson, S. K. and Smith, M. F. Effects of charcoal-extracted, bovinefollicular fluid on gonadotropin concentrations, the onset of estrus and luteal function in heifers. // Journal of Animal Science, 1985, 61,203-209

264. Jolivet, G., Devinoy, E., Fontaine, M. L. and Houdebine, L. M. Structure of the gene encoding rabbit aSi-casein. //Gene, 1992,113:257262.

265. Jones K.A, K.R. Yamamoto, R. Tijan . Two distinct transcriptionfactors bind to the HSV thymidine kinase promotor in vitro. // Cell, 1985,42, 559-572.

266. Jones, J. I. and Clemmons, D. R. Insulin-like growth factors and theirbinding proteins biological actions. // Endocrine Reviews, 1995, 16, 3-34

267. Kambadur, R, Sharma, M, Smith, T.P, Bass, J.J. Mutations in myostatin (GDF8) in double-muscled Belgian Blue and Piedmontcse cattle. //Genome Res., 1997, 7. 910-916.

268. Kirby, C. J„ Smith, M. F, Keisler, D. H. et al. Follicular function inlactating dairy cows treated with sustained release bovine somatotropin. // Journal of Dairy Science, 1997, 80, 273-285

269. Knight, P. G. Roles of inhibins, activms, and follistatin in the femalereproductive system. // Frontiers in Neuro endocrinology, 1996, 17, 476-509

270. Kohram, H, Bousquet, D, Durocher, J. et al. Alterations of folliculardynamics and superovulatory responses by gonadotropin releasing hormone and follicular puncture in cattle a field trial. // Theriogenology, 1998,49, 1165-1174

271. Kruip Th. A. M. Macroscopic identification of follicles >2 mm in theovaries of cycling cows. // in: H. Karg and E. Schallenberger (Ed.) Factors Influencing Fertility in the Postpartum Cow., 1982, 95-101, Martinus-Nijhoff. Boston.

272. Kues, W.A., Anger, M., Carnwath, J.W., Paul, D. Motlik, J., Niemann,

273. H., Cell cycle synchronization of porcine fetal fibroblasts: effects of scrum deprivation and reversible cell cycle inhibitors.// Biol. Re-prod. 2000, 62,412-419.

274. Kuhn, R., Schwenk, Aguet. M., Rajewsky, K. Inducible gene targetingin mice. //Science, 1995, 269,1427-1429.

275. Kuiper, G. G. J. M., Enmark, E., Pelto-Huikko, M. et al. Cloning of anovel estrogen receptor expressed in the rat prostate and ovary. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1996, 93, 5925-5930

276. Lanneluc, I., Drinkwater, R. D., Elsen, J. M., et al. Genetic markers forthe Booroola fecundity (Fee) gene in sheep. // Mammalian Genome, 1994,5,26 33

277. Lavitrano M., A. Camaioni,ET AL. Sperm cells as vectors forintroducing foreign DNA into eggs: genetic transformation of mice.//Cell ,1989,57, 717-723.

278. Law, A. S., Baxter, G., Logue, D. N., et al. Evidence for the action of abovine follicular fluid factor(s) other than inhibm in suppressing follicular development and delaying oestrus in heifers. // Journal of

279. Reproduction and Fertility, 1992, 96, 603-616

280. Lee, K.-P., Atiee, S. H. and Rosen, J. M. Differential regulation of rat3.casein-chloramphenicol acetyltransferase fusion gene expression in transgenic mice. //Mol. Cell Biol., 1989, 9:560-565.

281. Leeuwenberg, B. R., Hudson, N. L., Moore, L. G., et al. Peripheral andovarian IGF-I concentrations during the ovine oestrous cycle. // Journal of Endocrinology, 1996, 148,281-289

282. Lemme, E., Eckert, J., Carnwath, J.W., Niemann. H. Expression of6WTK-LacZ gene construct in in vitro produced bovine embryos following microinjection into pronuclei or cytoplasm. //Theriogenology, 1994, 41, 236, (Abstr.).

283. Lin T.P. Microinjection of Mouse Eggs. // Science, 1966,151, 333-337.

284. Lobb, D. K. and Dorrington, J. Intraovarian regulation of folliclulardevelopment. // Animal Reproduction Science, 1992, 28, 343-354

285. Lockutoff N.M., B.R. Coren, ET AL. Gene microinjection in bovineembryos facilitated by centrifiigation. //Theriogenology 1986,24, 168.

286. Lohse J.K., J.M. Robi, N.L. First. Progress towards transgenic cattle.

287. Theriogenology, 1985,23, 205.

288. Luck, M. R., Rodgers, R. J. and Findlay, J. K. Secretion and gene expression of inhibm, oxytocin and steroid hormones during the in vitro differentiation of bovine granulosa cells. // Reproduction, Fertility and Development, 1990,2, 11-25

289. Lucy, M. C., Collier, R. J., Kitchell, M. J., et al. Immuno-histochemicaland nucleic acid analysis of somatotropin receptor populations in the bovine ovary. // Biology of Reproduction, 1993, 48, 1219-1227

290. Lussier J.G., Carruthers T.D. Endocrine and superovulatory responsesin heifers pretreated with FSH or bovine follicular fluid. Therioge-nology, 1989,31, 779-794.

291. Lussier, J. G., Matton, P. and Dufour, J. J. Growth rates of follicles inthe ovary of the cow. // Journal of Reproduction and Fertility, 1994, 81, 301-307

292. Maga, E. A., Anderson, G. В., Huang, M. C. and Murray, I. D. Expression of human lysozyme mRNA in the mammary gland of transgenic mice. //Transgenic Res., 1994, 3:36-42.

293. Mann R., R.C. Muffigan, D. Baltimire. Construction of a retro-viruspackaging mutant and its use to produce helperfree defective retrovirus// Cell, 1983, 33, 153-159.

294. Marion G.B., Gier H.T. Ovarian and uterine embryogenesis and morphology of the non-pregnant female mammal. // J Anim. Sci., 1971, 32(suppl. 1), 24-47.

295. Marshall, R. J. and Green, M. L. The effect of the chemical structure ofadditives on the coagulation of casein micelle suspensions by rennet. //J. Dairy Res., 1980, 47:359-369.

296. Massey J.M. Animal production industry in the year 2000. J. Reprod.//

297. Pert. Suppl. 41, 1990,199-208.

298. Matsui. Y., Zsebo, K., Hogan. B.L.,. Derivation of pluripotential embryonic stem cells from murine primordial germ cells in culture. Cell, 1992, 70. 841-847.

299. Matton, P., Adelakoun, V., Couture, Y. et al. Growth and replacementof the bovine ovanar follicles during the estrous cycle. // Journal of Animal Sciences, 1981, 52, 813-820

300. Matzuk, M. M., Kumar, T. R., Shou, W., et al. Transgenic models tostudy the roles of inhibms and activins on reproduction, oncogenesis and development. // Recent Progress in Hormone Research, 1996,51, 123-157

301. McEvoy T.G., M. Stack, T. Barry, B. Keane . Derect gene transfer bymicroinjection. //Theriogenology, 1987,27, 258.

302. McKnight S.L., R. Kingsburg. Transcription control signals of aeukaryotic proteincoding gene. //Science, 1982,217, 316-324.

303. McNatty, K. P., Hudson, N. L., Lun, S., et al. Gonadotropins-releasingоhormone and the control of ovulation rate by the Fee gene in Booroola ewes. // Journal of Reproduction and fertility, 1993, 98, 97-105

304. McNeilly, A. S. and Fraser, H. M. Effect of gonadotropins-releasinghormone agonist-induced suppression of LH and FSH on follicle growth and corpus luteum function in the ewe. // Journal of Endocrinology, 1987, 115,273-282

305. McPherron, A.C., Lawler, A.M., Lee, S.J.,. Regulation of skeletal muscle mass in mice by a new TGF-beta superfamily member.// Nature, 1997,387, 83-90.

306. McPherron, A.C., Lee, S.J. Double muscling in cattle due to mutationsin the myostatin gene. //Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1997, 94,12457-12461.

307. Meade, H.M., Eehelard, Y., Ziomek, C.A.,et al. Expression of recombinant proteins in the milk of transgenic animals. In: Fernandez, J.M. Hocffler, J.P, (Eds.), Gene Expression Systems. Academic Press, San Diego, USA, 1999, pp. 399-427.

308. Mercier, J. C. and Vilotte, J. L. Structure and function of milk proteingenes. //J. Dairy Sci., 1993, 76:3079-3098.

309. Mintz B. Teratocarcinoma cells as vehicles for mutant and foreigngenes. In: Genetic interaction and genes transfer, Brookhaven Symposia in Biology//1977,No. 29. ed. Anderson, C.W., p. 82, Upton, NY. Brookhaven National Labs.

310. Mliller. M., Brem, G. Transgenic strategies to increase disease resistance in livestock.// Reprod. Fertil. Dev., 1994, 6, 605-613.

311. Monget, P. and Monniaux, D. Growth factors and control of folliculogenesis. // Journal of Reproduction am Fertility, Supplement, 1995, 49,321-333

312. Monget, P., Monniaux, D., Pisselet, C. et al. Changes in insulin-likegrowth factor-I (IGF-I), IGF-II and their binding proteins during growth and atresia о ovine ovarian follicles. // Endocrinology, 1993, 132, 1438-1446

313. Monniaux, D., Chupin, D. and Saumande, J. Superovulatory responsesof cattle. //Theriogenology, 1983 , 19, 55-81

314. Monniaux, D., Mariana, J. C. and Gibson, W. R. Action of PMSG onfollicular populations in the heifer. // Journal of Reproduction and Fertility, 1984, 70,243-253

315. Monniaux, D., Monget, P., Besnard, N., et al. Growth factors and antral follicula development in domestic ruminants. // Theriogenol-ogy, 1997, 47,3-12

316. Montgomery, G. W., Crawford, A. M., Penty, J. M., et al. The ovineо

317. Booroola fecundity gene (Fee ) is linked to markers from a region of human chromosome 4q. //Nature Genetics, 1993, 4, 410-414

318. Moor, R. M., Cahill, L. P. and Stewart, F. Ovarian stimulation or eggproduction as a limiting factor of egg transfer //IXth international congress on animal reproduction and artificial insemination. Madrid,1980, 43-54

319. Moor, R. M., Kruip, Т. A. M. and Green, D. Intraovanan control ofnfolliculogenesis limits to superovulation . // Theriogenology, 1984,21,103-116

320. Moor, R. M., Lee, C., Dai, Y. F. et al. Antral follicles confer developmental competence on oocytes. // Zygote, 1996, 4, 289-293

321. Muller M.B. Brenig, E. -L. Winnacker, G. Brem. Effets of integrated

322. Mx-gene construct in transgenic pigs. In preparation multiple integratons without tandem insertions. // Mol. Cell. Biol, 1991,3, 1803-1814.

323. Murphy, M. G., Boland, M. P. and Roche, J. F. The effects of dose andduration of administration of pFSH during the first follicular wave on the ovulation rate of beef heifers. // Theriogenology, 1998, 49, 557-569

324. Murphy, M. G., Enright, W. J., Crowe, M. A., et al. Effect of dietaryintake on pattern of growth of dominant follicles during the oes-trous cycle in beef heifers. // Journal of Reproduction and Fertility, 1991, 92, 333-338

325. Murray, J.D. Genetic modification of animals in the next century.

326. Theriogenology ,1999, 51, 149-159.

327. Niemann, H, Halter, R, Carnwath, J.W, et al. Expression of humanblood clotting factor VIII in the mammary gland of transgenic sheep. //Transgenic Res, 1999, 8, 237-247.

328. Niemann, H, Halter, R, Paul, D. Gene transfer in cattle and sheep: asummary perspective.// In: Proc. 5th World Congress 'Genetics Applied to Livestock Production' Guelph (Canada), 1994, 21, pp. 339346.

329. Niemann, H, Kues, W. Herrmann, D, et al. Generation and characterization of pigs transgenic for human CD59 constructs. //Immunobiology, 1999, 200 (3-5), 492, (Abstr,).

330. Nottle, M.B, Nagashima. H„ Verma, P.J, et al. Developments intransgenic techniques in pigs. J. Reprod. Fertil, 1997, Suppl. 52. 237-244.

331. Odde KG. A review of synchronization of estrus in postpartum cattle.

332. J Anim Sci, 1990, 68, 817-830.

333. Orban, P.C, Chui, D, Marth, J.D,. Tissue- and site-specific DNA recombination in transgenic mice. //Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1992, 89, 6861-6865.

334. O'Shea, T, Hilliard, M. A, Anderson, T, et al. Inhibin immunizationfor increasing ovulation rate and superovulation. // Theriogenology, 1994,41, 317

335. Pache TD, WladimiroffJW, deJong FH, et al. Growth patterns of nondominant ovarian follicles during the normal menstrual cycle. // Fertil Steril, 1990, 54, 638-642.

336. Palmer E. Control of the oestrous cycle of the mare. // J Reprod Fertil,1978, 54, 495-505.

337. Palmiter R.D., G. Norstedt, Metallothionein-human GH fusion genesstimulate growth of mice. //Science, 1983,111, 809-814.

338. Palmiter R.D., R.L. Brinster. Germ line transformation of mice. // Ann.

339. Rev. Genet, 1986, 20, 465-499.

340. Pedersen, T. Follicle kinetics in the ovary of the cyclic mouse. // Acta

341. Endocrinologica, 1970, 64, 304-323

342. Pelletier, J., Sonenberg, N. Internal initiation of translation of eukaryotic mRNA directed by a sequence derived from poliovirus RNA. //Nature, 1988, 334, 320-325.

343. Perry, A.C.F., Wakayama, Т., Kishikawa, H.,et al. Mammalian transgenesis by intracytoplasmic sperm injection. Science ,1999,284. 1180-1183.

344. Perucho M., D. Hanahan, M. Wigler . Genetic and physical linkage ofexogenous sequences in transformed cells. // Cell, 1980,22, 209317.

345. Peters, H. Some aspects of early follicular development. // In Ovarianfollicular development and function (ed A R Midgley and W A

346. Sadler), 1979, 1-13 Raven Press, New York

347. Piedrahita. J.A., G.B. Anderson, ET AL. Isolation of embryonic stemscell-like colonies from porcine embryos. // Theriogenology, 1988, 29,286.

348. Piedrahita. J.A., Moore, K., Oetama, B. et al. Generation of transgenicporcine chimeras using primordial germ cell-derived colonies. //Biol. Reprod., 1998, 58, 1321-1329.

349. Pierson R.A., Ginther O.J. Follicular populations during the estrous cycle in heifers. 111. Time of selection of the ovulatorv follicle.// Anim. Reprod. Sci. 1988, 16, 81-95.

350. Pierson RA, Ginther OJ. Follicular population dynamics during theestrous cycle of the mare. // Anim Reprod Sci, 1987, 14, 219-231,

351. Pierson, R. A. and Ginther, 0. J. Ultrasonography of the bovine ovary.

352. Theriogenology, 1984, 21, 495-504

353. Pinkert C.A., V.G. Pursel, K.F. Miller, ET AL. Induced expression of abovine growth hormone construct in transgenic pigs. //Biotechnology in Growth Regulation, 1989, pp. 189-199. (R.B. Heap, C.G. Prosser, G.E. Lamming eds.) Butterworths, London.

354. Platenburg, G. J., Kootwijk, E. P. A., Kooiman, P. M., Woloshuk, S. L.,

355. Nuijens, J. H., Krimpenfort, P. J. A., Pieper, F. R., de Boer, H. A. and Strijker, R. Expression of human lactoferrin in milk of transgenic mice. //Transgenic Res., 1994, 3:99-108.

356. Piatt, J.L., Lin, S.S. The future promises of xenotransplantation. Fishman. J., Sachs, D., Shaikh. R.(Eds.), Xenotransplantation —

357. Scientific Frontiers and Public Policy. Ann. N. Y. Acad. Sci.,1998, 862, 5-18.

358. Prendiville, D. J., Enright, W. J., Crowe, M. A., et al. Immunization ofheifers against gonadotrophin-releasing hormone antibody titers, ovarian function, body growth, and carcass characteristics. // Journal of Animal Science, 1995, 73, 2382-2389

359. Price, C. A. and Webb, R. Steroid control of gonadotropin secretionand ovarian function in heifers. // Endocrinology, 1988, 122,:2222-2231

360. Price, C. A. and Webb, R. Ovarian response to hCG treatment duringthe oestrous cycle in heifers. // Journal of Reproduction and Fertility, 1989, 86, 303-308

361. Pursel V.G., C.A. Pinkert, K.F. Miller, ET AL. Insetion of growthhormone genes into pig embryos. // Biotechnology in Growth Regulation, 1989a, pp. 181-188. (R.B. Heap, C.G. Prosser, G.E. Lamming eds.) Butterworths, London.

362. Pursel V.G., C.A. Pinkert, K.F. Miller, ET AL. Genetic engineering oflivestock. // Science ,1989b,244, 1281-1288.

363. Pursel V.G., C.E. Rexroad, D.J. Bolt, K.F. Miller, ET AL. Progress ingene transfer in farm animals. // Vet. Immunol. Immonopathol, 1987,17, 303-312.

364. Pursel V.G., D.J. Bolt, K.F. Miller, ET AL. Expression andperformance in transgenic pigs. // Reprod. Fert, Suppl, 1990, 40, 235-245.

365. Pursel V.G., K.F. Miller, C.A. Pinkert, ET AL. Insertion of growthhormone genes into pig embryos. //Biotechnology in Growth Regulation. Butterwoth & Co. (LTD). London, 1989, pp. 181188.

366. Pursel V.G., R.G. Campbell, K.F. Miller, ET AL. Growth potential oftransgenic pigs expressing a bovine growth hormone gene. // J. Anim. Sci, 1988, 66, 267.

367. Pursel, V.G., Rexroad, C.E. Jr. Status of research with transgenic farmanimals.//J. Anim. Sci, 1993, 71, 10-19.

368. Rajakoski E. The ovarian follicular system in sexually mature heiferswith special reference to seasonal, cyclical and left-right variations. //Acta Endocrinol., 1960, 34(suppl. 52), 1-68.

369. Rajamahendran, R. and Taylor, C. Characterization of ovarian activityin postpartum dairy cows using ultrasound imaging and progesterone profiles. // Animal Reproduction Science, 1990, 22, 171-180

370. Rajamajendran R., Canseco R.S., Denbow C.J., et al. Effect of lowdose of FSH given at the beginning of the estrous cycle and subsequent superovulatory response in Holstein cows. Theriogenology, 1987, 28, 59-65.

371. Ralph, J. H., Wilmut, I. and Telfer, E. E. In vitro growth of bovinepreantral follicles and the influence of FSH on follicular and oocyte diameters. // Journal of Reproduction and Fertility, Abstract Series, 1995, 15,6 (abstr)

372. Ravindra, J. P., Rawlings, N. C., Evans, A. C. 0. et al. Ultrasonographic study of ovarian follicular dynamics in ewes during theoestrous cycle. // Journal of Reproduction and Fertility, 1994, 101, 501-509

373. Redmer, D. A. and Reynolds, L. P. Angiogenesis in the ovary. // Reviews of Reproduction, 1996, 1, 182-192

374. Resnick. J.L., Bixler. L.S., Cheng, L., Donovan, P.J. Long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture. Nature, 1992, 359, 550-551.

375. Rexroad C.E., R.A. Wall, Development of one-cell fertilized sheep ovafollowing microinjection into pronuclei. // Theriogenology ,1987,27, 611-619.

376. Rexroad C.E., R.E. Hammer, ET AL. . Insertion, expression andphysiology of growth-regulating genes in ruminants.// J. Reprod. Fert., Snppl ,1990,41, 119-124.

377. Rexroad C.E., R.E. Hammer,ET AL. Production of transgenic sheepwith growth regulating genes. //Molec. Reprod. Develop, 1989,1, 164-169.

378. Rexroad, C.E. Jr. Transgenic technology in animal agriculture. Anim.

379. Biotechnol., 1992, 3, 1-13.

380. Richards JS,Jahnsen T, Hedin L, et al. Ovarian follicular development:from physiology to molecular biology. // Recent Prog Horm Res, 1987, 43,231-276.

381. Richards JS. Gonadotropin-regulated gene expression in the ovary. //1.: Adashi EY, Leung PCK (eds.), The Ovary. New York: Raven Press; 1993, 93-112.

382. Richards, J. S. Hormonal control of gene expression in the ovary. //

383. Endocrine Reviews, 1994, 15, 725-751

384. Richards, J. S., Fitzpatrick, S. L., Clemens, J. W., et al. Ovarian celldifferentiation a cascade of multiple hormones, cellular signals and regulated genes. // Recent Progress in Hormone Research, 1995, 50,223.254

385. Roberson MS, Wolfe MW, Stumpf TT, et al. Luteinizing hormone secretion and corpus luteum function in cows receiving two levels of progesterone. // Biol Reprod, 1989, 41, 997-1003.

386. Roberts, A. J. and Skinner, M. K. Transforming growth factor-a and -Pdifferentially regulate growth and steroidogenesis of bovine thecal cells during antral follicle development. // Endocrinology, 1991, 129, 2041-2048

387. Roberts, A. R. and Echtemkamp, S. E. In vitro production of estradiolby bovine granulosa cells evaluation of culture condition, stage of follicular development, and location of cells within follicles. // Biology of Reproduction, 1994, 51, 273-282

388. Robertson E, A. Bradley, M. Kuehn, M. Evans Germ—line transmission of genes introduced into cultured pluripotential cells by retroviar vector. //Nature, 1986, 323, 445-448.

389. Robertson E.J. Pluripitential stem cell lines as a route into mousegerm line.// Trends in Genetics (TIG), 1986, 2, 9-13.

390. Roche, J. F. Control and regulation of folliculogenesis — a symposiumin perspective. // Reviews of Reproduction, 1996, 1, 19-27

391. Roschlau K, P. Rommel, ET AL. Microinjection of various vectorsinto pronuclei of bovine zygotes. // Proc. Intern. Congress Reprod. And Fertility, Dublin, 1988.

392. Ross K. Zur Erstellung transgener Kaninchen durch DNA

393. Mikroinjektion in Zygotenvorkeme. Diss. med. vet, Miinchen,1987.

394. Rouillier, P, Guilbault, L. A, Lussier, J. G. et al. Changes in morphological appearance and functional capacity of recruited follicles m cows treated with FSH in the presence or absence of a dominant follicle. //Theriogenology, 1996, 46, 1053-1061

395. Roy, S. K. and Greenwald, G. S. Hormonal requirements for thegrowth and differentiation of hamster preantral follicles in long-term culture. // Journal of Reproduction and Fertility, 1989, 87, 103-114

396. Rubenstein J.R. et al. Introduction of genes into preimplantationmouse embryos by use of a defective recombinant retrovirus. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1986,83, 330-368.

397. Salamonsen, L. A. Matrix metalloproteinases and their tissue inhibitorsin endocrinology. // Trends in Endocrinology, 1996, 7, 28-34

398. Salmons B, W.H. Gunzburg, J. Janka, ET AL . Gene insertion intothe chicken germ line by retroviruses. Poultry Sci. ,1986,65, 1445.

399. Salter S.W., E.J. Smith, ET AL. Transgenic chickens: insertionofretroviral genes into the chicken germ line. //Virology, 1987,157, 236.

400. Salter S.W., L.B Crittenden. Artificial insertion of a dominant genefor resistance to avian leukosis virus into the germ line of the chicken.//Theor. Appl. Genet, 1989 ,77, 457-461.

401. Saumande, J. Culture of bovine granulosa cells in a chemically definedserum-free medium the effect of insulin and fibronectin on the response to FSH. // Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology, 1991,38, 189-196

402. Savio JD, Boland MP, Roche JF. Development of dominant folliclesand length of ovarian cycles in post-panum dairy cows. // J Reprod Fertil, 1990, 88, 581-591.

403. Savio, J. D., Keenan, L., Boland, M. P. et al. Pattern of growth ofdominant follicles during the oestrous cycle of heifers. // Journal of Reproduction and Fertility, 1988,83, 663-671

404. Savio, J. D., Thatcher, W. W., Badinga, L., et al. Regulation of dominant follicle turnover during the oestrous cycle of cows. // Journal of Reproduction and Fertility, 1993, 97, 197-203

405. SavioJD, Keenan L, Boland MP, et al. Pattern of growth of dominantfollicles during the oestrous cycle of heifers. // J Reprod Fertil, 1988, 83,663-671.

406. Scaramuzzi R.J., Turnbull K.E., Nancarrow C.D. The growth of

407. Graafian follicles in cows following luteolysis induced by the prostaglandin F2a analogue, cloprostenol. // Aust. J. Biol. Sci., 1980, 33,63-69.

408. Schnieke, A.E., Kind, A.J„ Ritchie, W.A.,et al. Human factor IXtransgenic sheep produced by transfer of nuclei from transfected fetal fibroblasts. //Science, 1997, 278, 2130-2133.

409. Schrick FN, Surface RA, PritchardJY, et al. Ovarian structures duringthe estrous cycle and early pregnancy in ewes. // Biol Reprod, 1993, 49, 1133-1140.

410. Schuhman. Gene transfer to swine embryos using an avian retrovirus.//.

411. Cell. Biochem, Suppl, 1989,13b, 182.

412. Schultze, N. Burki, Y., Lang, Y., et al. Efficient control of gene expression by single step integration of the tetracycline system in transgenic mice. //Nat. Biotechnol., 1996,14, 499-503.

413. Seidel, G.E. Jr. Resource requirements for transgenic livestock research.// J. Anim. Sci., 1993, 71, 26-33.

414. Shani, M., Barash, I., Nathan, M., Ricca, G., Searfoss, G. H., Dekel, I.,

415. Faerman, A., Givol, D. and Hurwitz, D. R. Expression of human serum albumin in the milk of transgenic mice. //Transgenic Res., 1992, 1:195-208.

416. Sharp P.A, A.J. Berk, and S.M. Berget. Transcription maps of adenovirus.// Meth. Emymol, 1980,65, 750-768.

417. Shastry, B.S. Gene disruption in mice: models of development anddisease. //Mol. Cell Biochem., 1998, 181,163-179.

418. Shim, H., Gutierrez-Adan, A., Chen, L.R, et al. Isolation of pluripotentstem cells from cultured porcine primordial germ cells. //Biol. Reprod., 1997,57, 1089-1095.

419. Simons, J. P., McClenaghan, M. and dark, A. J. Alteration of the quality of milk by expression of sheep B-lactoglobulin in transgenic mice. //Nature, 1987, 328:530-532.

420. Sirois J, Ball BA, Fortune JE. Patterns of growth and regression ofovarian follicles during the oestrous cycle and after hemiovariec-tomy in mares. // Equine. Vet. J., 1989, Suppl, 8, 43-48.

421. Sirois J, Fortune JE. Lengthening the bovine estrous cycle with lowlevels of exogenous progesterone: a model for studying ovarian follicular dominance.//Endocrinology, 1990, 127,916-925.

422. Sirois J, Fortune JE. Ovarian follicular dynamics during the estrouscycle in heifers monitored by real-time ultrasonography. // Biol Reprod, 1988, 39,308-317.

423. Smeaton, Т. C. and Robertson, H. A. Studies on growth and atresia of

424. Graafian follicles in the ovary sheep. // Journal of Reproduction and Fertility, 1971,25, 243-252

425. Smith, J. F. Follicle populations in sheep. // Proceedi of the New Zealand Society of Animal Production, 1976, 56, 247-251

426. Soriano P., R.D. Cone, R.C. Mulligan, R. Jaenisch. Tissue-specific andectopic expression of genes introduced into transgenic mice by retroviruses.//Science, 1986,234, 1409-1413.

427. Southern E.M. Detection of specific sequences among DNA fragmentsseparated by gel electophoresis. //J. Mot. Biol., 1975, 98, 503-517.

428. Souza, C. J. H., Campbell, В. K. and Baird, D. T. Follicular dynamicsand ovarian steroid secretion in sheep during anoestrus. // Journal of Reproduction and Fertility, 101-106

429. Souza, C. J. H., Campbell, В. K. and Baird, D. T. Follicular dynamicsand ovarian steroid secretion in sheep during the follicular and early luteal phases of the estral cycle. // Biology of Reproduction, 56, 483-488

430. Squires, E.J., Status of sperm-mediated delivery methods for genetransfer. //In: Murray, J.D., Anderson, G.B., Oberbauer, A.M., McGloughlin, M.M. (Eds.), Transgenic Animals in Agriculture. CABI Publ., New York, USA, 1999, pp. 87-96.

431. Staigmiller, R. B. and England, B. G. Folliculogenesis in the bovine. //

432. Theriogenology, 1982, 17, 43-52

433. Staigmiller, R. В., Bellows, R. A., Anderson, G. В., et al. Superovulation of cattle with equine pituitary extract and porcine FSH. // Theriogenology, 1992, 37, 1091-1099

434. Staigmiller, R. В., England, B. G., Webb, R., et al. Estrogen secretionand gonadotropm binding by individual bovine follicles during es-trus. // Journal of Animal Science, 1982, 55, 1473-1482

435. Stevens L.C., D.S. Vamum. The development of teratomas fromparthenogenetically activated ovarian mouse eggs. // Developm. Biol., 1974,37,369-380.

436. Stewart C.L, M. Vanek, E.F. Wagner. Expression of foreign genes fromretroviral vectors in mouse teratocarcinoma chimaeras. // EMBO J., 1985,4, 3701-3709.

437. Stewart C.L., S. Schuetze, M. Vanek, E. Wagner. Expression ofretroviral vectors in transgenic mice obtained by embryo infection.// EMBO ,1987,6, 383-388.

438. Stock AE, Fortune JE. Ovarian follicular dominance in cattle: relationship between prolonged growth of the ovulatory follicle and endocrine parameters. //Endocrinology, 1993, 132, 1108-1114.

439. Storjek R.M., A.K. Voss, J. Hahn. Erstellung transgener Kaninchendurch Mikroinjektion eines Uteroglobin-CATOfusionsgens in befruchtete Kanincheneizellen.// Dtsch. tierantl. Wschr, 1987, 94, 441-496.

440. Stuart, J., Norrell, S. and Harrington, J. P. Kinetic effect of humanlactoferrin on the growth of Escherichia coli 0111. //Int. J. Bio-chem., 1984, 16:1043-1048.

441. Stuhlmann H., D. Jahner, R. Jaenisch . Infectivity and methylation ofretroviral genomes is correlated with expression in the animal. // Cell, 1981, 26, 221-232.

442. Sunderland, S. J., Crowe, M. A., Boland, M. P., et al. Selection, dominance and atresia of follicles during oestrous cycle of heifers. // Journal of Reproduction and fertility, 1994, 101, 547-555

443. Terqui, M., Wrathall, J. H. M., Driancourt, M. A. et al. Modulation ofovarian function by steroid and inhibin immunization. // Livestock Production Science, 1995, 42, 181-192

444. Thatcher, W. W., de la Sota, R. L., Schmitt, E. J.-P., et al. Control andmanagement of ovarian follicles in cattle to optimize fertility. // Reproduction, Fertility and Developments, 1996, 203-217

445. Theuring, F., Thunecke. M., Kosciessa, U., Tuem, J.D. Transgenicanimals as models of neurodegenerative disease in humans. //Trends Biotechnol., 1997,15, 320-325.

446. Tilly, J. L. Apoptosis and ovarian function. // Reviews of Reproduction, 1996, 1, 162-172

447. Touati K., Van Der Zwalnen, Eetors F.S. et al. Low doses of FSH earlyin estrous cycle enhances superovulatory response in heifers. Theriogenology, 1989, 31, 269 (Abstract).

448. Tsai, S.-J. and Wiltbank, M. C. Prostaglandm F2a regulates distinctphysiological changes in early and mid-cycle bovine corpora lutea. // Biology of Reproduction, 1998, 58, 346-352

449. Turzillo AK, Fortune JE. Estradiol production by dominant and subordinate follicles during the first wave of follicular development in cattle. // Proc., IX Ovarian Workshop, 1992, 63.

450. Turzillo AM, Fortune JE. Effects of suppressing plasma FSH on ovarian follicular dominance in cattle. // J Reprod Fert, 1993, 98, 113119.

451. Turzillo AM, Fortune JE. Suppression of the secondary FSH surgewith bovine follicular fluid is associated with delayed ovarian follicular development in heifers. // J Reprod Fertil, 1990, 89, 643653.

452. Van der Putten H., F.M. Botteri, A.D. Miller, ET AL. Efficientinsertion of genes into the mouse germ line via retroviral vectors. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1985,82, 6148-6152.

453. Vanderhyden, В. C. Species differences in the regulation of cumulusexpansion by an oocyte-secreted factor(s). // Journal of Reproduction and Fertility, 1993, 98, 219-227

454. Velander, W. H, Page, R. L, Morcol, T, Russell, C. G., Canseco, R,

455. Young, J. M, Drohan, W. N, Gwazdauskas, F. C, Wilkins, T. D. and Johnson, J. L. Production of biologically active protein С in the milk of transgenic mice. //Ann. N. Y. Acad. Sci, 1992, 665:391403.

456. Vernon, R. K. and Spicer, L. J. Effects of basic fibroblast growth factor and heparin on follicle-stimulating hormone-induced steroidogenesis by bovine granulosa cells. // Journal of Animal Science, 1994, 72, 2696-2702

457. Vize P.D. Expression of porcine growth hormone in bacteria andtransgenic animals. Ph. D. Thesis, University of Adelaide, 1987.

458. Vize P.D, A.E. Michalska, ET AL. Introduction of a porcine growthhormone fusion gene into transgenic pigs promotes growth. //. Cell Sci, 1988,90, 295-300.

459. Voss AK, Fortune JE. Oxytocin stimulates progesterone production bybovim granulosa cells isolated before, but not after, the luteinizing hormone surge. //Mol Cell Endocrinol, 1991, 78, 17-24.

460. Wagner E.F., L. Covarrubias, R.A. Stewart, B. Mintz . Prenatallethalities in mice homozygous for human growth hormone gene sequences integrated in the germ line. // Cell ,1983,35, 647-655.

461. Wagner T.E, P.C. Hoppe, ET AL. Mictroinjection of a rabbit p-globingene into zygotes and its subsequent expression in adult mice and their offspring. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1981,78, 6376-6380.

462. Wall R.J., V.G. Pursel, ET AL. Development of porcine ova that werecentrifuged to permit visualization of pronuclei and nuclei. // Biol. Reprod, 1985,32, 645-651.

463. Wall, R. J., Pursel, V. G., Shamay, A., McKnight, R. A., Pittius, C. W.and Hennighausen, L. High level synthesis of a heterologous milk protein in the mammary glands of transgenic swine. //Proc. Nail. Acad. Sci. USA, 1991, 88:1696-1700.

464. Wall, R.J. Transgenic livestock: progress and prospects for the future.

465. Theriogenology, 1996, 45. 57-68.

466. Wall. R.J., Hawk, H.W., Nel, N. Making transgenic livestock: geneticengineering on a large scale. //J.Cell. Biochem., 1992, 49. 113-120.

467. Walters DL, Schallenberger E. Pulsatile secretion of gonadotrophins,ovarian steroids and ovarian oxytocin during the periovulatory phase of the oestrous cycle in the cow. // J Reprod Fert, 1984, 71, 503-512.

468. Wandji, S. A., Eppig, J. J. and Fortune, J. E. FSH and growth factorsaffect the growth and endocrine function in vitro of granulosa cells of bovine preantral follicles. // Theriogenology, 1996, 45, 817-832

469. Ward K.A., I.R. Franklin, J.D. Murray, and ET AL. The direct transferof DNA by embryo microinjection. // Proc. 3rd World Congr. of Genetics applied to Livestock Production, Lincoln (Nebraska)

470. Whitelaw С. В. A., Archibald, A. L., Harris, S., McClenaghan, M.,

471. Simons, J. P. and dark, A. J. Targeting expression to the mammary gland: intronic sequences can enhance the efficiency of gene expression in transgenic mice. //Transgenic Res., 1991, 1:3-13.

472. Wilkie T.M., R.L. Brinster, R.D. Palmiter . Germline and somaticmosaicism in transgenic mice. //Devi. Biol., 1986 ,118, 9-18.

473. Wilmut, I., Archibald, A. L., McClenaghan, M., Simons, J. P.,

474. Whitelaw, С. B. A. and Clark, A. J. Production of pharmaceutical proteins in milk.//Experientia, 1991, 47:905-912.

475. Wilmut, I., Schnieke, A.E., McWhir, J., Kind, A.J., Campbell, K.H.,.

476. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells. //Nature, 1997,385, 810-813.

477. Wright, G., Carver, A., Cottom, D., Reeves, D., Scott. A., Simons, P.,

478. Wilmut, I., Garner, I. and Colman, A. High level expression of active human aj-antitrypsin in the milk of transgenic sheep. //Bio/Technology, 1991, 9:830-834.

479. Yom, H. G. and Bremel, R. D. Genetic engineering of milk composition: modification of milk components in lactating transgenic animals. //Am. J. Clin. Nutr., 1993, Suppl. 8:2995-3065.

480. Zawada, W.M., Cibelli, J.B., et al. Somatic cell cloned transgenic bovine neurons for transplantation in parkinson rats. //Nat. Med., 1998,4, 569-574.

481. Zeleznik AJ. Dynamics of primate follicular growth. A physiologicperspective. // In: Adashi EY, Leung PCK (eds.), The Ovary. New York: Raven Press; 1993, 41-55.

482. Ziomek, C.A. Commercialization of proteins produced in the mammary gland. //Theriogenology, 1998, 49, 139-144.

483. Bo G. A., Adams G. P., Pierson R. A. and Mapletoft R. J. Exogenouscontrol of follicular wave emergence in cattle. // Thenogenology, 1995,43, 31-40

484. Ко JCH, Kastelic JP, Del Campo MR, Ginther OJ. Effects of a dominant follicle on ovarian follicular dynamics during the oestrous cycle in heifers. // J Reprod Fert, 1991, 91, 511 -519.