Физиологические механизмы иммунного гомеостаза под влиянием фукоидана тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Незговоров, Дмитрий Викторович

• Незговоров, Дмитрий Викторович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Незговоров, Дмитрий Викторович

СПИКОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Особенности иммунной реактивности у человека в условиях Севера.

1.2 Медико-биологические эффекты применения фукоидана.

1.3 Применение фукоидана при различных иммунных патологиях.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Характеристика обследованных.

2.2 Методы исследования.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ

ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Состояние иммунной системы у людей с хроническими воспалительными процессами до и после приема фукоидана.

3.2 Состояние иммунной системы у людей со злокачественными новообразованиями до и после приема фукоидана.

3.3 Состояние иммунной системы у людей со вторичными иммунодефицитами до и после приема фукоидана.

3.4 Определение механизма действия на клетки иммунной системы у беспородных белых мышей после внутрибрюшинного введения фукоидана.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиологические механизмы иммунного гомеостаза под влиянием фукоидана»

Актуальность исследования. В современных условиях техногенного загрязнения, на фоне ухудшающейся экологической обстановки, изменений социальной структуры населения, проблемы здоровья населения становятся особенно актуальными. Важнейшее влияние на здоровье человека оказывает состояние его иммунной системы.

Климат и условия жизни на Севере не являются комфортными для человека. Длительное проживание на Севере формирует дисбаланс иммунных механизмов, фоновое напряжение иммунной системы с последующим сокращением резервных возможностей регуляции иммунного гомеостаза [30].

В современной литературе достаточно часто обсуждаются вопросы эффективности иммунокоррекции и иммунореабилитации при различных патологических процессах без достаточно полного выяснения механизмов функционирования иммунной системы в условиях иммуностимуляции. В то же время, использование иммуностимулирующего фактора оправдано при достаточно четком знании объекта и спектра влияния препарата, прямо и косвенно обусловленных спектра влияния препарата, механизма его воздействия, прямо и косвенно обусловленных реакций. Кроме того, влияние иммуномодулятора предоставляет возможность выявления резервных реакций регуляции иммунного гомеостаза. Это особенно важно знать относительно населения, проживающего в дискомфортных северных условиях.

Иммуномодуляторы растительного и водорослевого происхождения более эффективны, когда они получены из местного сырья. Мало того, использование местного сырья для получения биологически активных ' веществ экономически выгодно.

Ламинария, Бурая водоросль (Laminaria) произрастает в Белом, Карском и Баренцевом морях и запасы её имеют промышленное значение. Фукоиданы, полученные из бурых водорослей, являются биологически активными веществами, достаточно подробно изучены их антикоагуляционные, антиатеросклеротические и противоишемические свойства; сведения об их иммуномодулирующей способности единичны и касаются эффективности использования для лечения онкологических заболеваний. Состав фукоиданов неоднороден и могут быть получены фракции, имеющие различную молекулярную массу и степень сульфатирования молекул, что существенно влияет на уровень биологической активности. Представляет интерес исследование иммуномодулирующих свойств фукоидана, полученного нами по оригинальной методике с применением экологически чистых способов выделения.

Цель и задачи исследования. Цель работы - установить особенности функционирования иммунной системы под влиянием фукоидана, выявить механизмы стимуляции и их взаимосвязь.

Для достижения поставленной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить активность фагоцитов in vitro и in vivo в присутствии и под влиянием фукоидана

2. Установить особенности миграции лимфоцитов, моноцитов, нейтрофилов под влиянием сульфатированного полисахарида.

3. Выявить реактивные сдвиги пролиферативной фазы иммунной реакции под влиянием испытуемой фракции полисахарида.

4. Определить изменение процессов дифференцировки иммуно-компетентных клеток под воздействием фукоидана.

5. Изучить влияние фукоидана на гуморальный механизм иммунитета.

Положения, выносимые на защиту. 1. Повышение активности и эффективности фагоцитарной защиты под воздействием фукоидана происходит за счет активизации процессов миграции, хемотаксиса нейтрофилов, моноцитов и макрофагов, а также увеличения захватывающей и переваривающей способности фагоцитов. 2. Фукоидан активирует процессы лимфопролиферации с развитием лимфопролиферации в иммунокомпетентных органах. 3. Под воздействием испытуемого препарата усиливается миграция нейтрофилов и моноцитов в место введения препарата. 4. Под воздействием испытуемого препарата выше уровень дифференцировки иммунокомпетентных клеток с увеличением содержания в периферической крови Т-хелперов, цитотоксических лимфоцитов и естественных киллеров. 5. Испытуемый полисахарид активирует экспрессию молекул СДЗ+, СД5+, СД25+, СД71+, НЬА на мембране лимфоцитов.

Научная новизна исследования. Впервые установлены механизмы стимулирующего влияния фукоидана на активность фагоцитоза (хемотаксис, захватывающую и переваривающую способность фагоцитов).

Впервые определены типы фагоцитов, которые активируются под воздействие испытуемого полисахарида;

Установлено, что сульфатированные полисахариды стимулируют пролиферацию лимфоцитов с увеличением концентрации моноцитов, нейтрофилов и лимфоцитов в периферической крови;

Определено, влияние фукоидана на дифференцировку иммунокомпетентных клеток - Т-хелперов, цитотоксических лимфоцитов, естественных киллеров и В-лимфоцитов;

Впервые установлено влияние фукоидана на повышение концентрации 1Ь-1Р и ЮТ-у.

Научно-практическая значимость исследования. Полученные в работе новые данные могут быть использованы в практическом здравоохранении при разработке схем применения фукоидана для лечения иммунодефицитных состояний при хронических процессах, злокачественных новообразованиях, а также для профилактики экологически зависимых иммунодефицитов; в научных исследованиях в области физиологии, иммунологии, онкологии; в учебных учреждениях при подготовке врачей, биологов, фармакологов.

Результаты исследования внедрены в практику работы врачей МК «БИОКОР» для лечения имунодефицитных состояний (акт внедрения от 14.03.2005), а также в научных исследованиях для стимуляции фагоцитоза и нагрузочных тестах (акт внедрения 15.03.2005).

Работа выполнена в Институте физиологии природных адаптаций Уральского отделения Российской Академии Наук (Архангельск) в соответствии с планом НИР (номер государственной регистрации 01.2.0010811).

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены на конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Москва, 2003), конгресса с международным участием «Современные проблемы аллерлгологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Москва, 2003) конференции с международным участием «Биологические аспекты экологии человека» (Архангельск, 2004), симпозиуме с международным участием «Проблемы адаптации человека к экологическим и социальным условиям Севера» (Сыктывкар, 2004), заседании областного отделения научного Общества Российской академии аллергологов и клинических иммунологов (Архангельск, 2004), всероссийском научном форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2004).

По результатам диссертации опубликовано 10 работ.

Структура и объем работы. Диссертации изложена на 114 страницах машинописного текста и состоит из введения, трех глав, заключения, выводов. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 8 рисунками. Библиография включает 80 отечественных и 112 зарубежных публикаций.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Незговоров, Дмитрий Викторович

ВЫВОДЫ

1. Сульфатированный полисахарид ламинарии сахаристой - фукоидан в дозе 5 мг/кг у людей и в условиях эксперимента (при внутрибрюшинном введении белым беспородным мышам) увеличивает активность и интенсивности фагоцитоза нейтрофильных лейкоцитов, и моноцитов крови и перитонеального экссудата.

2. Фукоидан вызывает миграцию нейтрофилов и моноцитов к месту его введения в перитонеальном экссудате в ранние сроки (соответственно с 24 и 72 часов), стимулирует развитие макрофагальной реакции через 96 часов и лимфо-пролиферацию с 7-го дня.

3. Однократное внутрибрюшинное введение фукоидана белым беспородным мышам обусловливает последовательно развивающиеся местные реактивные процессы нейтрофильной, моноцитарной, макрофагальной реакции и лимфопролиферации на протяжении 40 дней.

4. Инициальным механизмом иммуностимуляции фукоиданом является активизация моноцитов с повышением концентраций 1Ь-1 в крови.

5. Фукоидан в дозе 5мг/кг массы тела при приеме через рот в течение 4х недель обусловливает увеличение содержания в периферической крови у людей активированных лимфоцитов с рецепторами к 1Ь-2, трансферину и главному комплексу гистосовместимости класса II.

6. Испытуемый препарат стимулирует дифференцировку иммунокомпетентных клеток у людей с повышением содержания в крови Т- хелперов, цитотоксических лимфоцитов, естественных киллеров и ЮТ-у.

7. Пролонгированное иммуномодулирующее влияние фукоидана объясняется распространенностью лимфопролиферативной реакции не только в региональных к месту введения препарата лимфоидных образованиях, но и в селезенке, отдаленных лимфатических узлах и тимусе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное исследование по изучению механизма действия фукоидана на иммунную систему позволило получить следующие данные о действии препарата и механизмах влияния фукоидана на иммунную систему.

Фукоидан при внутрибрюшинном введении белым беспородным мышам в дозе 5 мг/кг увеличивает активность фагоцитоза нейтрофилов и моноцитов перитонеального экссудата и периферической крови. Через 1 час после введения % активных нейтрофильных лейкоцитов возрастает соответственно с 49,26±7,64 до 54,47±8,95% (р<0,05) и с 46,28±9,48 до 49,95±7,59%; моноциты с 39,61±7,81 до 41,48±7,81%; с 36,54±7,54 до 49,97±6,82%. Максимальное увеличение активности фагоцитоза нейтрофилами в перитонеальном экссудате и периферической крови регистрировали на 3 сутки, что составляет 91,08±6,48 и 87,26±8,56% (р<0,01), моноцитов на 4 сутки и составляет соответственно 87,83±6,95 и 85,76±8,77% (р<0,01). Повышенная активность фагоцитов сохраняется на протяжении 30 дней (р<0,05-0,01).

Интенсивность фагоцитоза нейрофильных лейкоцитов и моноцитов перитонеального экссудата и периферической крови усиливается через 1 час после введения препарата для нейтрофилов с 3,61±1,58 до 5,86 и с 3,57±0,58 до 6,84±0,67; фагоцитарное число моноцитов нарастает (с 1,23±0,84 до 3,38±0,62 и с 0,94±0,87 до 1,65±1,08). Максимум интенсивности фагоцитоза для нейтрофильных лейкоцитов установлен через 24 часа и на 3 сутки в крови (соответственно 9,26±0,68 и 9,85±0,59), для моноцитов на 4 и 7 сутки (соответственно 7,08±0,98 и 5,67±0,93). В следующие сроки происходит постепенного снижение интенсивности фагоцитоза нейтрофилов и моноцитов, и повышенная интенсивность сохраняется в течение 30 суток.

Спустя 4 недели после курса фукоидана функционально активных нейтрофилов в периферической крови у людей с хроническими воспалительными процессами увеличивается с 43,54±2,86 до 85,26± 13,21 % р<0,01). Повышение фагоцитарной активности наблюдается у 89,57 % обследованных. Следует отметить увеличение интенсивности фагоцитарной реакции с повышением фагоцитарного числа в среднем с 3,21 ±0,34 до 5,62±0,65% (р<0,05), интенсивность фагоцитарной защиты увеличивается у 87,53% людей. Подобные результаты установлены у больных, страдающих различными вариантами злокачественных новообразований (с 44,83±6,57 до 67,03±7,86 %; (р<0,05), фагоцитарное число увеличивается с 1,95±0,61 до 4,66±0,53% (р<0,001)) и у людей синдромом хронической усталости (с 34,06±11,52 до 72,10±7,45 %; р<0,01) фагоцитарное число также увеличивается (с 3,71±0,97 до 6,59±0,83%; р<0,01), различие заключается в том, что повышение активности фагоцитоза нейтрофильных лейкоцитов у лиц со злокачественными новообразованиями и у людей с синдромом хронической усталости менее выражены и регистрируются у меньшего числа лиц, чем у людей с хроническими воспалительными процессами.

При инкубации in vitro нейтрофилов и моноцитов без фукоидана в течение 30 мин. среднее значение фагоцитарной активности составляло нейтрофилов 39,81±7,42%, а фагоцитарное число - 3,20±0,83%, моноцитов 49,24±6,31%, фагоцитарное число 1,96±0,97%; в присутствии фукоидана 2 мкг/мл % активных фагоцитов возрос (нейтрофилов до 54,27±7,08%, моноцитов 55,31±4,86%) с заметным увеличением фагоцитарного числа 5,59±0,90% и 4,92±0,66%. При инкубации в течение 1 часа происходит дальнейшее увеличение процента активных нейтрофилов и моноцитов, а также интенсивности фагоцитоза (нейтрофилами 61,92±6,45%; (р<0,05), 4,53±0,86%; моноцитами 68,38±5,21; (р<0,05), 3,17±1,04%). Известно, что усиление переваривающей активности фагоцитов связано с увеличением выработки фагоцитами токсичных для микробов промежуточных форм восстановленного кислорода, супероксиданион, Н2О2, ОН" и N0 [164].

Испытуемый полисахарид в данных условиях опыта стимулирует миграцию нейтрофилов и моноцитов в перитонеальном экссудате в ранние сроки после введения, это отражается тем, что уже через 1 час происходит увеличение количества нейтрофилов (с 12,63±1,58 до 21,13±0,67%; р<0,01) с максимумом миграции на 1 сутки (24,60±0,96%; р<0,01) и моноцитов на 3 сутки (с 28,63±1,19 до 39,26±2,36%; р<0,05). Сравнение динамики изменения цитограммы и реакции, отражающей функционирование активных клеток, дает возможность считать, что нейтрофильная экссудация на 1 сутки совпадает с увеличением содержания тучных клеток (с 0,01 ±0,08 до 1,8±0,53%; р<0,001). Максимальное развитие моноцитарной экссудации на 3 сутки идет на фоне появления в экссудате лимфоретикулярных клеток (2,98±0,26%; р<0,001) и формирования розеток из лимфоцитов вокруг моноцита до 7,26±1,63% (р<0,01) и проявляется до конца исследования. В это же время происходит изменение содержания нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов периферической крови, при этом введение фукоидана обуславливало снижение уровня содержания нейтрофильных лейкоцитов с минимумом содержания на 3 сутки (с 15,38±1,35 до 9,77±0,96%; р<0,05). Снижение содержания нейтрофильных лейкоцитов наблюдалось на 1-е сутки с 47,31 ±1,29 до 41,36±0,64 %. Содержание моноцитов в 2 раза снижается через 72 часа с 12,17±0,86 до 6,41±1,23% (р<0,01), после введения фукоидана, что, возможно, связано с повышением миграционной активности данных клеток к месту введения полисахарида. Малозаметные изменения в структуре гемограммы побудили проанализировать данные изменения состава периферической крови в абсолютных единицах. При этом установлено: уменьшается общее содержание лейкоцитов в течение первых 3-х суток после введения фукоидана, происходит это за счет нейтрофильных лейкоцитов на 1 сутки (с 6,83±1,29х109кл/л палочкоядерных и 0,43±0,57 х109кл/л сегментоядерных нейтрофилов до 3,98±1,13 х109кл/л палочкояденых и 0,28±0,64 х109кл/л сегментоядерных нейтрофилов; р<0,05), а на 3-й день моноцитов (с 1,87±0,86 до 0,62±0,23 х109кл/л; р<0,01). Таким образом, периферическая кровь экспериментальных животных отражает последовательную миграцию нейтрофилов, а затем моноцитов по месту введения фукоидана. Изменение в составе моноцитограммы в периферической крови выявляется значительно позднее, и являются, следствием миграции моноцитов в место введения препарата, на 3-й сутки опыта. Увеличение содержания промоноцитов появляются через 72 часа, и держится до конца наблюдения. Пик этой реакции наблюдается на 20 день, когда содержание промоноцитов нарастает до 38,56±1,35 с 20,15±0,75% (р<0,01). В соответствии с этим, содержание полимофно-ядерных мало активных моноцитов снижается относительно исходного уровня практически на протяжении всего срока наблюдения с минимумом содержания на 20 сутки (с 34,76±0,62 до 19,25±0,68 %; р<0,01).

Лимфопролиферативная реакция в перитонеальном экссудате выявляется с максимумом выраженности на 7 сутки путем увеличения содержания средних лимфоцитов с 14,73±1,74 до 35,11±1,76 % (р<0,01) и держится на повышенном уровне в течение всего срока наблюдения. Увеличение содержания лимфобластов фиксируется на 20 сутки с 0,33±0,11 до 21,62±0,94 % (р<0,001). Плазмоклеточная реакция фиксируется на 20 день с увеличением содержания плазматических клеток с 0,07±0,18 до 2,74±0,19 % (р<0,001).

Иные закономерности выявлены в отношении экссудации лимфоцитов: увеличение содержания лимфоцитов наблюдали на 7 сутки; соразмерности с изменением содержания лимфоцитов в экссудате и крови не установлено. Увеличение содержания лимфоцитов в перитонеальном экссудате фиксируется на 7 сутки с 60,03±1,19 до 68,46±1,61 %, в то время и в крови также фиксируется увеличение содержания указанных клеток на 7 сутки с 40,52±0,85 до 41,17±1,09%. Это свидетельствует о том, что лимфоцитарная инфильтрация по месту введения фукоидана обеспечивается не транссудацией лимфоцитов из крови, а по лимфатической системе. Доказательством тому является динамика лимфопролиферативной реакции в региональном лимфатическом узле и селезенке. Так содержание лимфобластов и средних лимфоцитов в селезенке увеличивается на 7 сутки (с 18,24±1,09 до 25,26±0,67%. и 39,41±1,19 до 45,51±0,69 %), а в это же время в региональном лимфатическом узле происходит увеличение содержания средних лимфоцитов на 7 сутки с 34,41±1,19 до 39,51±0,69%, Как видно из представленных данных, содержание лимфобластов и средних лимфоцитов, отражающих в цитограме уровень пролиферации, заметно увеличивается на 7 сутки, т.е. в сроки наиболее высокого содержания лимфоцитов в экссудате.

Макрофагальная реакция под воздействием фукоидана развивается в перитонеальном экссудате и достигает максимума через 96 часов, увеличение содержания макрофагов происходит с 0,33±0,61 до 16,30±1,67 % (р<0,001) и остается на повышенном уровне до 35 дня. Развитие макрофагальной реакции, проходит без существенных изменений промоноцитов и полиморфо-ядерных моноцитов в перитонеальном экссудате.

Лимфопролиферативная реакция в эксперименте под влиянием фукоидана включает в себя увеличение содержания лимфобластов, средних лимфоцитов и появления плазмоклеточной реакции. Наиболее рано она развивается в региональном к месту введения лимфатическом узле (перитонеальном лимфатическом узле). Происходит увеличение процентного содержания лимфобластов через 1 час после введения фукоидана с 48,50±2,56 до 55,64±0,68% (р<0,05), через 72 часа наблюдается снижение лимфобластов до 42,65±1,39 (р<0,05). Повторное увеличение относительного содержания лимфобластов происходит на 4 сутки (52,08±1,22%; р<0,05). Третий пик увеличения содержания лимфобластов в составе цитограммы регионального лимфатического узла отмечается на 20 и 30 дней 54,06±1,26 и 60,35±1,19%(р<0,01).

Увеличение содержания плазматических клеток в составе цитограммы регионального лимфатического узла регистрируется через 1 час (с 2,67±0,67 до 10,21 ±0,95%; р<0,01) с пиком повышенного содержания уже на 1-е сутки 13,67±1,13% (р<0,01). Второй пик плазмоклеточной реакции выявляется через 20 дней 16,11±1,34% (р<0,01).

Реактивные изменения в составе цитограммы селезенки выявляются на 7 сутки с увеличением содержания лимфобластов с 18,24±1,09 до 25,26±0,67 (р<0,05) и плазмоклеточной реакции на 1 сутки с 2,72±1,41 до 6,78±1,83 % (р<0,01).

Наиболее поздно лимфопролиферативная реакция развивается в тимусе и отдаленных лимфатических узлах. В тимусе увеличение относительного содержания лимфобластов наблюдается на 13 день (с 10,32±1,84 до 28,39±1,23%; р<0,01) и отличается тем, что сохраняется до 20 дня наблюдения (22,45±1,16%; р<0,01).

В отдаленных лимфатических узлах через час содержание лимфобластов увеличивается с 36,55±1,55 до 46,80±0,68% (р<0,01). Повышенная концентрация лимфобластов наблюдается до 4 суток (48,31±2,39%; р<0,05). Плазмоклеточная реакция выявляется через 1 сутки и 72 часа с 2,00±0,48 до 5,83±1,24 и 7,11±1,19% (р<0,001-0,01), а также на 20 день 10,04±0,49% (р<0,001).

Различие в динамике развития лимфопролиферативной реакции заключается в том, что в региональном лимфатическом узле и селезенке она сохраняется до конца наблюдения, т.е. в течение 40 дней (р<0,05), в то время как в тимусе и отдаленном лимфатическом узле она наблюдается до 20 дня. Кроме того, в региональном лимфатическом узле и селезенке развиваются несколько пиков лимфопролиферативной реакции с подъемом ее выраженности на 7 и 20 сутки, а также и в поздние сроки (р<0,05). Таким образом, фукоидан обусловливает лимфопролиферацию в иммунокомпетентных органах, наиболее выраженную и продолжительную в региональном к месту введения препарата лимфатическом образовании и селезенке. Особенностью данной лимфопролиферации является ее раннее развитие (в первые часы после введения препарата). Такое быстрое развитие реакции исключает влияние фукоидана как антигена. Возможно, в дальнейшем реактивные изменения в иммунокомпетентных органах и обусловлены антигенными свойствами фукоидана, но в первые часы после введения влияние его неспецифично. Скорее всего, фукоидан определяет поликлональную неспецифическую реакцию, чем и объясняется его иммуномодулирующий эффект.

Пролонгированное влияние фукоидана объясняется распространенностью лимфопролиферативной реакции в селезенке, региональных и отдаленных лимфатических узлах и даже в тимусе. Как видно из выше представленных данных, развитие лимфопролиферативной реакции в иммунокомпетентных органах выявляется в ранние сроки после введения фукоидана, и сохраняются до конца наблюдения.

Курс иммунокоррекции фукоиданом в течение 4-х недель обуславливает увеличение содержания Т-клеток с рецепторами СДЗ+ и СД5+ при лечении больных с хроническими воспалительными процессами, злокачественными новообразованиями и синдромом хронической усталости. Увеличение экспрессии указанных рецепторов наблюдали у всех групп обследованных. Так особенно заметные изменения фиксировались у людей с синдромом хронической усталости (с 0,98±0,18 до 1,30±0,06 х109 кл/л (р<0,05) и с 1,06±0,15 до 1,53±0,13 х109 кл/л (р<0,05) у 57,14 и 52,36%). Подобные результаты получены у людей с хроническими воспалительными процессами (соответственно с 1,16±0,18 до 1,23±0,21 и с 1,18±0,27 до 1,28±0,19 х109 кл/л у 46,21 и 43,95 %) и онкопатологией (соответственно с 0,96±0,14 до 1,21±0,12 х109 (р<0,05) и с 1,02±0,09 до 1,20±0,08 х109 у 49,34 и 51,06%).

Установлено влияние фукоидана на процесс активизации иммунокомпетентных клеток. После курса приема фукоидана наблюдали увеличение содержания Т-лимофоцитов с рецептором к интерлейкину-2 (СД25+) с рецептором к антигенам 2 класса гистосовместимости (НЬА Ог+), и особенно резко увеличивается содержание Т-клеток с рецептором к трансферрину (СД71+). Наиболее ясно этот процесс наблюдается при хронических воспалительных заболеваниях, происходит увеличение концентрации СД25+ (с 0,82±0,0,17 до 1,28±0,13х109 кл/л (р<0,05) у 59,45%), при онкопатологии и синдроме хронической усталости (соответственно с

0,66±0,13 до 0,87±0,12 и с 0,63±0,18 до 0,84±0,07 х109 кл/л у 56,23% и 36,85% обследованных).

1,5 1 с; х

0,5 0 хронический процесс ■ онкопатологии * □ СХУ

Рис. 7. Изменение содержания активированных клеток до и после приема фукоидана (1 - до приема, 2 - после приема; * - р<0,05; ** - р<0,01).

Учитывая, что трансферрин стимулирует пролиферативную активность посредством насыщения клеток железом, более высокие уровни Т-лимфоцитов с рецептором к трансферрину следует рассматривать как компенсаторный механизм, который наиболее выражен у людей с хроническими воспалительными процессами (с 0,65±0,12 до 1,24±0,23 х109 кл/л (р<0,05) у 61,76%), а также увеличение фиксируется у лиц с онкопатологией и синдромом хронической усталости (соответственно с 0,49±0,06 до 1,19±0,33 (р<0,01) и с 0,58±0,13 до 0,73±0,17 хЮ9 кл/л (р<0,05) у 55,24% и 79,67%). Повышение содержания НЬА фиксируется у людей с хроническими воспалительными процессами и онкопатологией (соответственно с 0,72±0,12 до 0,87±0,11 хЮ9 кл/л (р<0,05) и с 0,56±0,14 до 0,84±0,15 хЮ9 кл/л у 39,68% и 54,89% лиц), в то время как у лиц с синдромом хронической усталости происходит снижение содержания НЬА ЭШ- (с 0,82±0,15 до 0,61±0,15 хЮ9 кл/л у 46,87% обследованных людей). Таким образом, при иммунологическом обследовании людей было установлено, что фукоидан вызывает увеличение концентрации активированных иммунокомпетентных клеток через антигены гистосовместимости класса 2, трансферрин и интерлейкин -2.

Влияние фукоидана на активацию Т- клеточного звена сказывается на процессе дифференцировки иммунокомпетентных клеток. Фукоидан стимулирует у людей увеличение содержания Т-хелперов, особенно у лиц с синдромом хронической усталости (с 0,52±0,25 до 1,66±0,21 х109 кл/л; р<0,01), в то время как у людей с хроническими воспалительными процессами и злокачественными новообразованиями происходит незначительное снижение концентрации Т-хелперов (соответственно с 0,72±0,18 до 0,55±0,15 х109 кл/л и с 0,58±0,08 до 0,55±0,09 х109 кл/л). Изменение в сторону увеличения концентрации цитотоксических лимфоцитов происходит у лиц со злокачественными новообразованиями (с 0,33±0,12 до 0,56±0,11 х109 кл/л; р<0,05), нет заметных изменений данного параметра у людей с хроническими воспалительными процессами и синдромом хронической усталости (с 0,68±0,13 до 0,67±0,19 х109 кл/л и с 0,74±0,11 до 0,73±0,11 х109 кл/л). Отмечается увеличение содержания естественных киллеров у людей с хроническим воспалительными процессами и со злокачественными новообразованиями (соответственно с 0,48±0,11 до 0,69±0,14 х109 кл/л (р<0,05) и с 0,48±0,09 до 0,72±0,11 (р<0,05), у 43,59 и 62,36%), за исключением лиц с синдромом хронической усталости, где концентрация клеток с рецептором СД16+ снижается (с 1,02±0,17 до 0,79±0,15 х109 кл/л (р<0,05) у 63,62%).

Фукоидан оказывает влияние на содержание провоспалительных цитокинов 1ЫР-у и 1Ь-1р, стимулирующих активацию иммунокомпетентных клеток. Особенно это заметно при увеличении концентрации ЮТ-у у людей с хроническими воспалительными процессами (с 3,32±0,61 до 9,83±0,76 пг/мл (р<0,001)), повышение фиксируется у 91,37%, а также у людей с онкопатологией и синдромом хронической усталости (соответственно с 1,34±0,34 до 2,92±0,23 пг/мл (р<0,01) и с 0,98±0,37 до 1,76±0,64 пг/мл (р<0,05) у 86,55 и 35,89%). и С

12

10 8 6 4 2 0 кВ1 Ш

ШР-а

1Ь-1(3

И воспалительный процесс В онкопатология □ СХУ

Рис. 8. Изменение содержания цитокинов до и после приема фукоидана (1 - до приема, 2 - после приема; * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001)

Повышение концентрации 1Ь-1(3 фиксируется у людей с хроническими воспалительными процессами и онкопатологией (с 0,46±0,07 до 0,88±0,09 пг/мл (р<0,01) и с 0,26±0,08 до 0,58±0,06 пг/мл (р<0,01) у 61,52 и 53,56%). Повышение концентрации объясняет механизм активации фагоцитоза, поскольку известно, что ШР-у и 1Ь-1(3 обладают комплексным влиянием, и являются сильными стимуляторами хемотаксиса, и усиливают переваривающую способность фагоцитов [32].

Итак, сульфатированный полисахарид ламинарии фукоидан в значительной степени изменяет некоторые механизмы функционирования иммунной системы. Установлено усиление процессов миграции и трансудации иммунокомпетентных клеток (лимфоцитов, моноцитов, нейтрофилов) к месту введения препарата. Выявлено лимфопролиферативное влияние, проявляющееся в увеличении содержания в иммунокомпетентных органах, периферической крови и экссудате, лимфобластов, больших и средних лимфоцитов.

Получены данные об активирующем влиянии фукоидана с увеличением активированных лимфоцитов с рецепторами к 1Ь-2, трансферрину и главному комплексу гистосовместимости класса 2.

Фукоидан стимулирует дифференцировку иммунокомпетентных клеток у обследуемых лиц с повышением содержания в крови Т- хелперов, цитотоксических лимфоцитов и естественных киллеров. Механизм стимуляции иммунных реакций фукоиданом заключается повышении концентраций 1ЫР-у и 1Ь-1р в крови. Пролонгированное влияние фукоидана объясняется распространенностью лимфопролиферативной реакции в селезенке, отдаленных лимфатических узлах и даже тимусе.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Незговоров, Дмитрий Викторович, 2005 год

1. Авцын А.П. Введение в географическую патологию /А.П.Авцын.-М.: Медицина, 1972. с. 328.

2. Агаджанян H.A. Социальные, возрастные и экологофизические аспекты адаптации человека /H.A.Агаджанян //Возрастные особенности физиологических систем детей и подростков. М.,1985. - С.7-9.

3. Агаджанян H.A. Адаптация и биоритмы /H.A.Агаджанян, И.Г.Власова, А.И.Алкатов//Адаптация человека и животных к экстремальным условиям внешней среды. М.,1985. — С.138-184.

4. Аленова А.Х. Влияние атмосферных загрязнений на клинико-иммунологические показатели /Н.И.Буравлева, С.И.Болгова, Г.Г.Деревянко//Материалы III Закавказской научной сессии патофмзиологов.-Тбилиси, 1992.- С. 54-25.

5. Аленова А.Х. Влияние атмосферных загрязнений на клинико-иммунологические показатели /Н.И.Буравлева, С.И.Болгова, Г.Г.Деревянко // Здравоохранение Казахстана. 1992. - №8. - с. 718-719.

6. Аленова А.Х. Влияние атмосферных загрязнений на клинико-иммунологические показатели/А.Х.Аленова//Здравоохранение Казахстана, 1992.-N8.- С. 18-19.

7. Банникова Р.В. Динамика заболеваемости населения в регионе северной климато-географической и экологической экстремальности /Р.В.Банникова//Экология человека, 1994.-N1-С. 138-142.

8. Банникова Р.В. Роль контингентов часто и длительно болеющих в формировании временной нетрудоспособности/Р.В.Банникова//В. сб. иммунологическая реактивность человека на Севере.- Архангельск, 1993.-С. 86-92.

9. Банникова Р.В.Изменения в характере патологии, выявленной у народностей Севера/Р.В.Банникова, М.В.Дубченко//Социальноэкологические проблемы Европейского Севера.-Архангельск, 1991.- С. 226-233.

10. Бастрон A.C. Регионарные особенности состояния иммунной системы населения южного Урала /А.С.Бастрон //Иммунология Урала: Тезисы докладов I конференции иммунологов Урала, декабрь 2001. -Екатеринбург: Изд-во «Здравоохранение Урала»,2001. С.33.

11. Бережная Н.М. JIAK-феномен (фенотип клеток, механизм действия и условия его реализации) /Н.М.Бережная, Е.В.Ковальчук// Иммунология.- 1995.N12.- С. 12-16.

12. Бережная Н.М. Система интерлейкинов и рак /Н.М.Бережная, В.Ф. Чехун.- Киев: ДИА, 2000. 224 с.

13. Виноградова Е.Г. Показатели репродуктивной системы женщин в оценке экологической ситуации в регионе /Е.Г.Виноградова//Автореф.дисс. .канд.мед.наук. -СПб., 1995. 22 с.

14. Вязьмин А.М. Развитие здравоохранения Европейского Севера России в экстремальных социально-экологических условиях.// Автореферат дисс. док. мед. Наук /А.М.Вязьмин; Архангельск, 1996.- 25 с.

15. Гун Г.Е. Медико-экологические проблемы экстремальной среды обитания человека на Кольском полуострове.// Автореферат дисс. док. мед. Наук /Г.Е.Гунн; Архангельск, 1996.- 27 с.

16. Гущин И.С. Индукция регуляции синтеза ^Е/И.С.Гущин//2-й национальный конгресс клинических аллергологов и иммунологов. М., 1998.-с. 81-102.

17. Гущин И.С. Клеточная организация аллергического воспаления.// Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии /И.С.Гущин//Сб. науч.трудов. М., Ин-т иммунологии МЗ России, 1997. - с. 15-21.

18. Данилова Р.И. Стратегия адаптивных реакций женского организма в экстремальных условиях жизнедеятельности: Дис. . д-ра биол. Наук /Р.И.Данилова; Архангельск, 1996. -387с.

19. Данишевский Г.М. Патология человека и профилактика заболеваний на Севере /Г.М.Данишевский.- М.: Медицина, 1968. с. 412.

20. Дидковский H.A. Наследственные факторы и местная защита при неспецифических заболеваниях легких /Н.А.Дидковский, Л.И.Дворецкий М., 1990. - 89 с.

21. Добродеева Л.К. Грипп и ОРЗ, иммунологическая реактивность коренного и пришлого населения Севера Европейской территории СССР: Автореф. дисс. .докт.мед.наук /Л.К. Добродеева Архангельск, 1989. -26 с.

22. Добродеева Л.К. Иммунологическое районирование Архангельской области /Л.К. Добродеева- Архагельск., 1997. с. 68.

23. Добродеева Л.К. Экологическая зависимость иммунологической реактивности/Л.К.Добродеева//Сыктывкар, 1995.- 20 с. (Научные доклады/ Коми научн. центр УрО Российской Академии наук, Вып. 366).

24. Добродеева Л.К. Экологическая зависимость иммунологической реактивности /Л.К.Добродеева- Сыктывкар, 1995. с. 17. (Науч. Докл./ Коми научный центр УрО Российской АН; Вып.336).

25. Добродеева Л.К. Экологическая реактивность человека на Севере /Л.К.Добродеева//Сборник научн. трудов. Под ред. проф. Л.К.Добродеевой.- Архангельск, 1993.- 128 с.

26. Добродеева Л.К. Иммунологическая интерпретация гемограмм /Л.К.Добродеева, В.П. Белозеров.-Архангельск, 1996. 126 с.

27. Добродеева Л.К. Экологически зависимые изменения иммунитета на Севере /Л.К. Добродеева, Л.В.Сенькова, Н.Б.Московская// Тр. Коми науч. центра УрО РАН; №1521997. с. 97-116.

28. Добродеева Л.К. Антитела у практически здоровых людей/Л.К.Добродеева, Г.А.Суслонова // Иммунология. 1990. - Т. 2. - с. 52-55.

29. Добродеева Л.К. Иммунологические особенности у работающих на Шпицберген /Л.К.Добродеева, А.В.Ткачев, Е.В.Типисова,

30. С.Л.Кашутин//Российский акушерский журнал. 1997.-Т.87.-№1-2.- с.111-132.

31. Добродеева Л.К. Взаимосвязи в системе иммунитета /Л.К.Добродеева, Л.С.Щеголева, Л.Е.Сенькова//Медицинская иммунология. 2000. - Т.2. - №2. - с. 127.

32. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии /В.Т.Долгих- М.: Медицинская книга, Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2000. 204с.

33. Долгушин И,И. Нейтрофилы и гомеостаз /И.И.Долгушин, О.В.Бухарин//Екатеринбург: УрО РАН. 2001. - С.278.

34. Дранник Г.Н. Иммунотропные препараты /Г.Н.Дранник, Ю.А.Гриневич, Г.М.Дизик.- Киев.: Здоровья, 1994.- 288с.

35. Дюжикова Е.М. Физиологические особенности иммунологической регуляции человека на Севере: Автореф.дис. канд. мед. Наук /Е.М. Дюжикова- Архангельск, 1994. -22 с.

36. Казначеев В.П. Современные аспекты адаптации /В.П.Казначеев-Новосибирск. -1981. С. 192.

37. Келлер A.A. Руководство по медицинской географии /А.А.Келлер, О.П. Щепин, A.B. Чаклин.- СПб: Гиппократ, 1993,- 352 с. 62.

38. Кетлинский С. А. Эндогенные иммуномодуляторы /С.А.Кетлинский, А.С.Симбирцев, А.А.Воробьев.- СПб: Гиппократ,-1992.- 256 с.

39. Клауса Дж. Лимфоциты: Методы/Дж. Клауса. М: Мир. - 1990. -С. 392.

40. Комаров Г.А. Экологическое районирование /Г.А.Комаров, К.С.Салтыков//Экология человека.- 1994.- №1.- с. 9-15.

41. Кононов Е.И. Формирование предрасположенности к развитию атеросклероза у молодых северян /Е.И.Кононов, В.П.Будяк, Т.А.Башмакова, А.А.Пиликин, E.H. Синицкая//Экология человека(Приложение №2).- 1995. с. 68.

42. Коробицын A.A. Экология здоровья трудоспособного населения Архангельской области /А.А.Коробицын, П.И.Сидоров, Ю.Р.Теддер. -Архангельск, 1996.-205с.

43. Кудрин A.B. Иммуннофармакология микроэлементов /А.В.Кудрин, A.B.Скальный, А.А.Жаворонков, М.Г.Скальная, О.А.Гранова. Москва, 2000. - 408с.

44. Кузнецов B.C. Оценка экологической обстановки в Архангельской области /В.С.Кузнецов//Межвуз. Сб. науч. Трудов.-Архангельск: Изд-во Поморского ун-та, 1992.- с.82-89.

45. Кузнецова В.Н. Особенности развития инфекционного иммунного ответа, аутоиммунных реакций и гиперчувствительности замедленного типа в экстремальных условиях Севера.// Автореф.дисс. .канд.мед.наук /В.Н.Кузнецова-Архангельск, 1995. 17 с.

46. Куликов В.Ю. Функции внешнего дыхания, показатели красной крови и проницаемости капилляров у жителей Крайнего Севера /В.Ю.Куликов, Л.Б.Ким, Н.Г.Колосова//Клинические аспекты полярной медицины. -М.:Медицина,1986. 168с.

47. Маслаков Д.А. Билогическая активность некоторых полисахаридов и их применение в клинике (обзор литературы и собственные данные.) /Д.А.Маслаков, К.А.Эйсмонт// Здравоохранение Белоруссии. 1974. - №.12. - с. 35 - 38.

48. Меерсон Ф.З. Общий механизм, адаптация и профилактика /Ф.З. Меерсон М.: Наука, 1973,- 360 с.

49. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и роль в нем стресс-реакций, основные стадии процесса /Ф.З.Меерсон//Физиология адаптированных процессов.М.: Наука, 1986.- С. 77-119.

50. Миррахимов М.М. Иммунный гомеостаз в экстремальных природных условиях /М.М.Миррахимов, Н.В.Васильев, М.И.Китаева. -Фрунзе, 1985.-273 с.

51. Миррахимов М.М. Иммунитет в условиях высокогорья /М.М.Миррахимов, М.И.Китаев, Б.И.Тулу беков// Иммунный гомеостаз в экстремальных природных условиях.-Фрунзе, 1985,-С. 188-242.

52. Московская Н.Б. Оценка значимости индивидуальной магнитной чувствительности в характеристике иммунного статуса: Автореф. дисс. канд . мед. Наук / Н.Б.Московская. Архангельск, 1994. - с. 20.

53. Московская Н.Б. Имунологическая реактивность здоровых жителей г. Архангельска в зависимости от генетических маркеров крови /Н.Б.Московская, И.В.Евсеева// Сборник научн. трудов под ред. проф. Л.К. Добродеевой.- Архангельск, 1993.С. 25.

54. Панин Л.Е. Медицинские научные проблемы освоения Крайнего Севера/Л.Е.Панин// Вестн. РАМН. 1993. - Вып. 8. - с. 9-13.

55. Пастухов В.В. Иммунорективность и экология /В.В.Пастухов// Омск, 1994.-с. 48-49.

56. Пастухов В.В. Иммунореактивность жителей Западной Сибири / В.В.Пастухов. Т.Ф.Соколова, Ю.В.Редькин. Омск: Изд. мед.ин-та, 1992. -с. 89.

57. Петров З.В. Донозологисеская диагностика нарушений иммунной системы /З.В.Петров, Р.М.Хаитов, Б.В.Пинегин, А.Д.Черноусов// Иммунология. 1995.- N2.- С. 4-5.

58. Потапов В.Н. Некоторые особенности иммунного статуса жителей Приморья /В.Н.Потапов// Вестн. Дальневосточного отделения РАН. 1992. - №3-4. - с. 39-43.

59. Рогозин А.И. Иммунологическая реактивность человека на Севере /А.И.Рогозин, А.А.Зенишин, С.К.Дьячков//Сборник научных трудов,-Архангельск.,1993. с.75-80.

60. Розкин М.Я. Изучение механизма антикоагуляционного действия фукоиданов /М.Я.Розкин, А.И.Левина, Н.С.Каменева, А.И.Усов, В.С.Ефимов// Фармокология и токсикология. 1989. - Т.52. №.3 - с. 48 -51.

61. Розкин М.Я. Сравнительное исследование антикоагуляторной активности сульфатированных полисахаридов бурых морских водорослей /М.Я.Розкин, А.И.Левина. А.И.Усов, В.С.Ефимов// Фармокология и токсикология. 1988. - №.4 - с. 63 - 68.

62. Ройт А. Иммунология /А.Ройт, Дж.Бростофф, Д.Мейл//Пер. с англ. М.: Мир, 2000. - 592 е., ил.

63. Семенов A.B. Сульфатированные полисахариды как ингибиторы рецептурной активности Р-селектина и Р-селектинзависимого воспаления /А.В.Семенов, А.В.Мазуров, М.Е.Преоброженская// Вопросы Медицинской Химии. Том 44 (2) — с. 12-17.

64. Сенькова Л.В. Уровень аутосенсибилизации у практически здоровых людей /Л.В.Сенькова, Л.К.Добродеева, К.Г.Добродеев//Медицинская иммунология. 2001. - Т.З. - №2. - с.299.

65. Смирнов B.C. Иммунодефицитные состояния /В.С.Смирнов, И.С.Фрейдлин. СПб: "Фолиант", 2000 - 568 с.

66. Соловьева Д.В. Коррекция возрастных нарушений иммунитета у женщин пожилого и старческого возраста тималином и эпиталамином /Д.В.Соловьева, В.Х.Хавинсон//Медицинская иммунология. 2000. - Т.2. - №2. - с.235.

67. Сотникова Н.Ю. Иммуномодуляция и иммунорегуляция на системном и локальном уровне при беременности /Н.Ю.Сотникова, Ю.С.Анциферова, Н.В.Крошкина, A.B. Кудряшова//Медицинская иммунология. 2001. - Т.З. - №2. - с.259.

68. Старостина Т.А. Циркулирующие иммунные комплексы и иммуноглобулины А, М, G в системе мать-плод при физилогической беременности и гестозе /Т.А.Старостина, Д.В.Белокриницкий, Н.М.Кудряшова// Акуш. и гин. 1992 -№1. - с. 19-22.

69. Тотолян A.A. Клетки иммунной системы /А.А.Тотолян, И.С. Фрейдлин. СПб.: Наука, 2000. - 231с.

70. Усынин М.В. Физиологические особенности иммунногостатуса беременных и родильниц в условиях Европейского Севера и прогнозирование некоторых состояний послеродового периода// Автореф.дисс. . канд.мед.наук /М.В. Усынин- Архангельск, 1,998. 23с.

71. Фазлеева JI.K. Циркулирующие иммунные комплексы в системе мать-плод /Л.К.Фазлеева// Акуш. и гин. 1984 -№6. - с. 66-67.

72. Фогел П.И. Клеточные факторы иммунитета при физиологическом течении беременности и невынашивании /П.И.Фогел// Акуш. и гин. 1982. - №12.- с.28-30.

73. Фрейдлин И.С. Иммуная система и ее дефекты /И.С.Фрейдлин -СПб., 1998.-с. 111.

74. Черешнев В. А. Физиология иммунной системы и экология /В.А.Черешнев, Н.Н.Кеворков, Б.А.Бахметьев, С.В.Ширшев и др//Иммунология. 2001. - №3. - С. 12-16.

75. Чернышов В.П. Иммунологические аспекты репродуктивного здоровья /В.П.Чернышов, С.В.Теличкун//Под ред. Гриффин Н.Д., Сухих Г.Т.-М., 1992.-С. 163-169.

76. Шитова О.В. Особенности иммунологического статуса лиц, занятых в химическом производстве /О.В.Шитова, А.Н.Сочнев// Методы,организация и итоги при массовых иммунологических обследованиях: Всесоюзная конференция. Ангарск, 1987. - с. 113-114.

77. Щеголева JI.C. Автореф.дисс. . канд.мед.наук /Л.С.Щеголева-Архангельск, 1996. 23с.

78. Ярилин А.А. Молекулярные основы межклеточной кооперации при иммунном ответе /А.А.Ярилин// 2-й националиный конгресс клинических аллергологов и иммунологов. М., 1998. - с.59-80.

79. Abergel С. A strong propensity toward loop formation characterizes the expressed reading frames of the D segments at the Jg H and T cell receptor loci. Eur/С.Abergel, J. M.Claveri// J. Immunol.- 1991.- N12.p.5.

80. Altschul S.F. A protein alighment scoring system sensinive at all evolutionfry distances/S.F. Altschul// J. Mjl. Evol.-1993.-p.21.

81. Anderson P. Morimoto C. et al/P. Anderson, M.- L. Blue// J. Immunol. 1987.- Vol. 139.- P. 678-682.

82. Angstwurm K. Fucoidin, a polysaccharide inhibiting leukocyte rolling, attenuates inflammatory responses in experimental pneumococcal meningitis in rats /К.Angstwurm, J.R.Weber, A.Segert// Neurosci. Lett. 1995. -May, Vol. 191. - P. 1-4.

83. Behr C. Antibodies and reactive T cells against the malaria heat-shock protein Pf 72/Hsp 70-1 and derived peptides in individuals continuouslu exposed to Plasmodium falciparum /C.Behr, J.L.Sarthou, C.Rogier//J. Immunjl.- 1992.-N10.-p.12.

84. Beress A. A new procedure for the isolation of anti-HIV compounds (polysaccharides and polyphenols) from the marine alga Fucus vesiculosus /A.Beress, O.Wassermann, S.Tahhan, T.Bruhn, L.Beress, E.N.Kraiselburd,

85. V.Gonzalez, G.E. de Motta, P.I.Chavez// J. Nat. Prod. 1993. - Apr,Vol 56. -P. 478-488.

86. The ontogeni and functional characteristics of human B-l (CD 5+B) cells /M.Bhat Neelema, B.Kantor Aaron, M.Blerber Marcia, M.Stall Alan, A.Her-Lenderg Leonore, N.H.Teng Nelsjn// Int. Immunjl.1992.- 4, N2.-P. 243-252.

87. Burks A.W. Selektive Jg A deficiencyA.W.Burks, R.W.Steel// Ann. Allergy.- 1986.- Vol. 57.- N1,- P. 3-12.

88. Campos M.M. The role of migrating leukocytes in IL-1 beta-induced up-regulation of kinin B(l) receptors in rats /M.M.Campos, G.E.de Souza, N.D.Ricci, J.L.Pesquero, M.M.Teixeira, J.B.Calixto// Br. J. Pharmacol. 2002. -Mar,Vol. 135.- 1107-1114.

89. CatayeeG. Effects of a polysaccharide extracted from a red alga (Bonnemaisonales) on mononucleate phagocytes in several rodents /G.Catayee, M.Chalet, J.Teste, L.Codomier//Bull. Assoc. Anat. (Nancy). 1980. - Jun,Vol 64.-P. 217-223.

90. Chalupny N.J. Aruffo A. T-cell activation molecule 4-IBB binds to extracellular matrix proteins /N.J.Chalupny, R.Peach, D.Hollenbaugh, J.A.Ledbetter, A.G.Farr// Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1992. - Nov,Vol. 89(21).-P. 10360-10364.

91. Church F.C. Antithrombin activity of fucoidan. The interaction of fucoidan with heparin cofactor II, antithrombin III, and thrombin / F.C.Church, J.B.Meade, R.E.Treanor, H.C.Whinna// J. Biol. Chem. 1989. - Jun.Vol. 264. -p. 3618-3623.

92. Conell E.B. Oral contraception in the woman over 35 /E.B. Conell//The femal patient 3. 1993. - P.25-28.

93. Corley Ronald B. Convergence of different activation pathways leading to B cell differentiation /Ronald B Corley, Troy D. Randall, W.Jostph// J. Cell. Biochem.- 1995.- Suppl. 18 d.- P. 372.

94. Crance J.M. Inhibition of sandfly fever Sicilian virus (Phlebovirus) replication in vitro by antiviral compounds /J.M.Crance, D.Gratier, J.Guimet, A.Jouan//Res. Virol. 1997. - Sep-Oct,Vol 148. - P. 353-365.

95. De VrieseA.S. L" immunoglobulline E: D' une cible cellulare unique a une multiplicité de cibles et de fonctions /A.S.De Vriese, M.Labalette, A.Capron//Rev. fr. allergol. Et immunjl. clin.- 1993.-Nl.P. 111.

96. Di Monaca C. Interleucin sistema Jg E/C. Di Monaca, O.Tancilli, F.Guldo, M.F.Cossu, A.Amoroso// Riv. eur. sci med. farmacol.- 1992. 14.N5.-P. 297-303.

97. DiirigJ. Anticoagulant fucoidan fractions from Fucus vesiculosus induce platelet activation in vitro /J.Diïrig, T.Bruhn, K.H.Zurborn, K.Gutensohn, H.D.Bruhn, L.Béress// Thromb. Res. 1997. - Mar,Vol. 85. - P. 479-491.

98. Epperson Diane E. Antigen-pressing function of human endotelial cells: Direct activation of restng CD 8 T cells /Diane E. Epperson, Jordan S.Pober//J. Immunol.- 1994.- 153. N12.- P. 5402-5412.

99. GanL. Effect of leukocytes on corneal cellular proliferation and wound healing /L.Gan, P.Fagerholm, H.J.Kim// Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1999. Mar,Vol 40. - P.575-581.

100. Gilhus N.E. Development and distribution of HLA-DR antigens and rcy receptors in the human thymus /N.E.Gilhus, R.Matre//Acta path, microbiol. scand., Sect., 1983.-Vol. 91, Nl.-P. 35.

101. Giraux J.L. Modulation of human endothelial cell proliferation and migration by fucoidan and heparin /J.L.Giraux, S.Matou, A.Bros, J.Tapon-retaudiere, D.Letourneur, A.M.Fischer// Eur. J. Cell. Biol. 1998. - Dec,Vol. 77.-P. 352-359.

102. Giraux J.L. Fucoidan, as heparin, induces tissue factor pathway inhibitor release from cultured human endothelial cells /J.L.Giraux, J.Tapon-retaudiere, S.Matou, A.M.Fischer// Thromb. Haemost. 1998. - Oct,Vol.80. -P. 692-695.

103. Goldshmidt O. Cell surface expression and secretion of heparanase markedly promote tumor angiogenesis and metastasis /O.Goldshmidt,

104. E.Zcharia, R.Abramovitch, S.Metzger, H.Aingorn, Y.Friedmann, V.Schirrmacher, E.Mitrani, I. lodavsky// Int. J. Cancer. 1998. - Oct ,Vol 83. -P. 24-31.

105. Granert C. The polysaccharide fucoidin inhibits the antibiotic-induced inflammatory cascade in experimental pneumococcal meningitis /C.Granert, J.Raud, L.Lindquist// Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998. -May,Vol. 5. -P.322-324.

106. Harada H. Selective antitumor activity in vitro from marine algae from Japan coasts /H.Harada, T.Noro, Y.Kamei// Biol. Pharm. Bull. 1997. -May,Vol. 20. -P. 541-546.

107. Heinzelmann M. Modulation of lipopolysaccharide-induced monocyte activation by heparin-binding protein and fucoidan /M.Heinzelmann, H.C.Polk,

108. F.N.Miller// Infect. Immun. 1998. - Dec,Vol. 66. - P. 5842-5847.

109. Hoffman R. Characterisation of a laminarin sulphate which inhibits basic fibroblast growth factor binding and endothelial cell proliferation

110. R.Hoffman, D.H.Paper, J.Donaldson, S.Alban, G.FranzII J. Cell Sci. 1995. -Nov,Vol 108(Pt 11).-P. 3591-3598.

111. Hoshino T. An antivirally active sulfated polysaccharide from Sargassum horneri (TURNER) C. AGARDH /T.Hoshino, T.Hayashi, K.Hayashi, J.Hamada, J.B.Lee, U.Sankawa// Biol. Pharm. Bull. 1998. -Jul,Vol. 21.-P. 730-734.

112. Iizima-Mizui N. Antitumor activity of polysaccharide fractions from the brown seaweed Sargassum kjellmanianum /N.Iizima-Mizui, M.Fujihara, J.Himeno, K.Komiyama, I.Umezawa, T.Nagumo// Kitasato. Arch. Exp. Med. -1985. Sep,Vol. 58. - P. 59-71.

113. Kabat E.A. Molecular Biology of Antialpha dextrans. Antibody Responses to a Single -site- fiiling Antigenic Determinant /E.A.Kabat//Fourth Chemical Congress of North America.-New York: Amtrican Chemical Socity, 1993.-P. 29-31.

114. Kaminski K. Natural cytotoxicity of CD 16+ lymphocytes in women with selected states of pregnancy pathology /K.Kaminsk, H.Wiktor, J.01eszczuk//Ginekol. Pol. 1995. - Apr;Vol.66(4). - P. 193-197.

115. Kan war S. An absolute requirement for P-selectin in ischemia/reperfusion-induced leukocyte recruitment in cremaster muscle /S.Kanwar, C.W.Smith, P.Kubes// Microcirculation. 1998. - Vol. 5. - P. 281287.

116. Kasahara M. Serologic dissection of HLA-D Sptcificities by the use of monoclonal antibodies /M.Kasahara, T.Takenuuchi, K.Ogasawara. et al//Immunogenetics, 1983. vol. 17, N16, P. 485.

117. Katira A. Inhibtion by glucocorticoid and stauropoune of IL-4-dependent CD40 production in B-limphocytes is reversed on engaging CD40

118. A.Katira, K.A.Knox, M.Finney, R.N.Michell, J.Gordon// Clin. And Txp. Immunol. 1993.- V. 92. - N2. - P. 347-352.

119. Kitas G.D. Inhibtion by glucocorticoid and stauropoune of ¡Independent/G.D.Kitas, M.Salmon, M.Furr et al.// Clin. exp. Immunol. 1988.-Vol. 73.-P. 480-487.

120. Kobeletz D. Gamma/delta-T-Zellen Eineneue Untergruppe menschlicher T-Lymphozyten/D.Kobeletz// Disch. Azztebl.-1993.- 90.N3.-P. 1236-1240.

121. Kubes P. Therapeutic potential of inhibiting leukocyte rolling in ischemi areperfusion /P.Kubes, M.Jutila, D.Payne// J. Clin. Invest. 1995. -Jun,Vol. 95.-P. 2510-2519.

122. Lederman S. Dextran sulfate and fucoidan interact with CD4 molecules to inhibit the binding of coat protein (gpl20) of HIV /S.Lederman, R.Gulick, L.Chess// J. Immunol. 1989. - Aug,Vol 143. - P. 1149-1154.

123. Leung D.Y. Mechanisms controlling the human immunoglobulin E response: new directions in the therapy of allergic diseases / D.Y.Leung.// Pediatr. Res. 1993. - V. 33.- P. 56-61.

124. Levine A.J. The effect of adhesion molecule blockade on pulmonary reperfusion injury /AJ.Levine, K.Parkes, S.J.Rooney, R.S.Bonser// Ann. Thorac. Surg. 2002. - Apr,Vol. 73. - P. 1101-1106.

125. Levy F. Role of IL-13 and CD4 T cell dependent IgE production in atopy /F.Levy, C.Kristofic, C.Heusser, V.Brinkmann// Int. Arch. Allergy Immunol.- 1997. V. 112.- P. 49-58.

126. LinkeR. Prevention of initial perfusion failure during xenogeneic ex vivo liver perfusion by selectin inhibition /R.Linke, F.Wagner, H.Terajima, J.Thiery, D.Teupser, R.Leiderer, C.Hammer// Transplantation. 1998. -Nov,Vol. 66.-P. 1265-1272.

127. Linnemann G. The effects of inhibiting leukocyte migration with fucoidin in a rat peritonitis model /G.Linnemann, K.Reinhart, U.Parade,

128. A.Philipp, W.Pfister, E.Straube, W.Karzai// Intensive. Care. Med. 2000. -Oct,Vol. 26. -P.1540-1546.

129. Mallett S. Calcium-dependent lectin activity with novel distribution on thymocyte subsets /S.Mallett, S.D.Rosen, W.Hyun// Eur. J. Immunol. -1996. Jan,Vol. 26. - P. 77-83.

130. Mayumi T. Immunological studies on lymphocytes in respiratori diseases /T.Mayumi // Buii. Chest. Dis.- 1977.- V.10.-P. 60-73.

131. McClure M.O. Investigations into the mechanism by which sulfated polysaccharides inhibit HIV infection in vitro /M.O.McClure, J.P.Moore, D.F.Blanc, et. al.// AIDS. Res. Hum. Retroviruses. 1992. - Jan,Vol. 8. - P. 19-26.

132. Miao H.Q. Inhibition of heparanase activity and tumor metastasis by laminarin sulfate and synthetic phosphorothioate oligodeoxynucleotides /H.Q.Miao, M.Elkin, E.Aingorn, R.Ishai-Michaeli, C.A.Stein// Int. J. Cancer. 1999.-Oct,Vol 83.- P. 424-431.

133. MiuraT. Blockade of selectin-mediated leukocyte adhesion improves postischemic function in lamb hearts /T.Miura, D.P.Nelson, M.L.Schermerhorn, T.Shin'oka// Ann. Thorac. Surg. 1996. - Nov,Vol.62. - P. 1295-1300.

134. Moxley G. Sexual dimorphism in innate immunity /G.Moxley, D.Posthuma, P.Carlson, E.Estrada, J.Han, L.L. Benson// Arthritis Rheum. -2002.- Jan;46(l). P.250-8.

135. Murphy-Ullrich J.E. Interactions of thrombospondin with endothelial cells: receptor-mediated binding and degradation /J.E.Murphy-Ullrich, D.F.Mosher// J. Cell. Biol. 1987. - Oct,Vol. 105. - P. 1603-1611.

136. Nagaoka M. Anti-ulcer effects and biological activities of polysaccharides from marine algae /M.Nagaoka, H.Shibata, I.Kimura-Takagi, S.Hashimoto// Biofactors. 2000. - №12.(1-4). - p. 267-274.

137. Narita M. Reconstitution of humoral immunity during pregnancy /M.Narita, S.Yamada, H.Kikuta, T.Togashi// Am. J. Reprod. Immunol. 2000. - Sep;№44(3). - P.148-152.

138. Nasu T. Fucoidin, a potent inhibitor of L-selectin function, reduces contact hypersensitivity reaction in mice /T.Nasu, Y.Fukuda, K.Nagahira, H.Kawashima, C.Noguchi// Immunol. Lett. 1997. - Oct,Vol 59. - P. 47-51.

139. Natali P.G. Differential tissue distribution and ontogemy of DC-1 and HLA-DR antigenes /P.G.Natali, O.Segatto, S.Ferrone et. al.// Immunogenetics, 1984.-Vol.19, N12.-P. 109.

140. Omata M. Protective effects of polysaccharide fucoidin on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats /M.Omata, N.Matsui, N.Inomata, T.Ohno// J. Cardiovasc. Pharmacol. 1997. - Dec,Vol. 30. - P. 717-724.

141. Parish C.R. A polyanion binding site on the CD4 molecule. Proximity to the HIV-gpl20 binding region /C.R.Parish, L.Low, H.S.Warren, A.L.Cunningham//J. Immunol. 1990.-Aug, Vol 145.-P. 1188-1195.

142. Patel M.K. The antimitogenic action of the sulphated polysaccharide fucoidan differs from heparin in human vascular smooth muscle cells /M.K.Patel, B.Mulloy, K.L.Gallagher, L.O'Brien, A.D.Hughes// Thromb. Haemost.- 2002. Jan,Vol. 87. - P. 149-154.

143. Pearce-Pratt R. Sulfated polysaccharides inhibit lymphocyte-to-epithelial transmission of human immunodeficiency virus-1 /R.Pearce-Pratt, D.M. Phillips// Biol. Reprod. 1996. - Jan,Vool 54(1). - P. 173-182.

144. Peters J. H. Monoclonal Antibodies/J. H.Peters, H.Baumgarten. -Springer-Verlag, New York, N.4. 1992. p. 456.

145. Preeprame S. A novel antivirally active fucan sulfate derived from an edible brown alga, Sargassum horneri /S.Preeprame, K.Hayashi, J.B.Lee, U.Sankawa, T.Hayashi// Chem. Pharm. Bull. (Tokyo). 2001.-Apr,Vol 49. -P. 484-485.

146. ReligaP. Fucoidan inhibits smooth muscle cell proliferation and reduces mitogen-activated protein kinase activity /P.Religa, M.Kazi, J.Thyberg, Z.Gaciong, J.Swedenborg, U.Hedin // Eur. J. Vase. Endovasc. Surg. — 2000. -Nov,Vol 20.-P. 419-426.

147. RitterL.S. Fucoidin reduces coronary microvascular leukocyte accumulation early in reperfusion /L.S.Ritter, J.G.Copeland, P.F.McDonagh// Ann. Thorac. Surg. 1998. - Dec,Vol 66. - P. 2063-2071; discussion 2072.

148. Semenov A.V. Sulfated polysaccharides as inhibitors of receptor activity of P-selectin and P-selectin-dependent inflammation /A.V.Semenov, A.V.Mazurov, M.E.Preobrazhenskaia, N.A.Ushakova et. al// Vopr. Med. Khim. 1998. - Mar-Apr,Vol 44. - P. 135-144.

149. ShibataH. Properties of fucoidan from Cladosiphon okamuranus tokida in gastric mucosal protection /H.Shibata, I.Kimura-Takagi, M.Nagaoka, S.Hashimoto, T.Yokokura// Biofactors. 2000. - Vol. 11. - P. 235-245.

150. Soeda S. Fibrinolytic and anticoagulant activities of highly sulfated fucoidan /S.Soeda, S.Sakaguchi, H.Shimeno, A.Nagamatsu// Biochem. Pharmacol. 1992. - Apr,Vol 43. -P. 1853-1858.

151. Spangenberg P. The platelet glycoprotein Ilb/IIIa complex is involved in the adhesion of activated platelets to leukocytes /P.Spangenberg, H.Redlich, I.Bergmann, W.Losche, M.Gotzrath, B.Kehrel// Thromb. Haemost. -1993. Sep,Vol. 70. P.514-521.

152. Stomski F.C. Adhesion to thrombospondin by human embryonic fibroblasts is mediated by multiple receptors and includes a role for glycoprotein 88 (CD36) /F.C.Stomski, J.S.Gani, R.C.Bates, G.F.Burns// Exp. Cell. Res. 1992. - Jan,Vol. 198. - P. 85-92.

153. Su H.R. Heparin mediates binding of S-protein/vitronectin to the envelope glycoprotein of the human immunodeficiency virus and CD4 /H.R.Su, R.J.Boackle// Int. Arch. Allergy. Immunol. 1994. - Nov,Vol 105. - P. 238244.

154. SunX. P-selectin-deficient mice are protected from PAF-induced shock, intestinal injury, and lethality /X.Sun, R.A.Rozenfeld, X.Qu, W.Huang, F.Gonzalez-Crussi, W.Hsueh// Am. J. Physiol. 1997. - Jul,Vol. 273. - P. 5661.

155. Suzuki T. Soluble mannan and beta-glucan inhibit the uptake of Malassezia furfur by human monocytic cell line, THP-1 /T.Suzuki, N.Ohno, Y.Ohshima, T.Yadomae// FEMS. Immunol. Med. Microbiol. 1998. - Jul,Vol. 21.-P. 223-230.

156. Takami M. Maleylated human serum albumin inhibits HIV-1 infection in vitro /M.Takami, T.Sone, K.Mizumoto, K.Kino, H.Tsunoo// Biochim. Biophys. Acta. 1992. - Dec,Vol. 1180. - P. 180-186.

157. TeixeiraM.M. The effect of the selectin binding polysaccharide fucoidin on eosinophil recruitment in vivo /M.M.Teixeira, P.G.Hellewell// Br. J. Pharmacol. 1997. - Mar,Vol. 120. - P. 1059-1066.

158. TeixeiraM.M. Adhesion mechanisms involved in C5a-induced eosinophil homotypic aggregation /M.M.Teixeira, A.G.Rossi, P.G.Hellewell// J. Leukoc. Biol. 1996. - Mar,Vol.59. - P. 389-396.

159. Turner-Warwich M. Immunology of the respiratory tract.- Recept advances in medicine/Turner-Warwich M. Edinburgh-London, 1973.- P. 143-181.

160. Usov A.I. Algae polysaccharides. 55. Polysaccharide composition of some brown Kamchatka algae /A.I.Usov, G.P.Smirnova, N.G.Klochkova// Bioorg. Khim. -2001. Nov-Dec,Vol. 27. - P. 444-448.

161. VischerP. Different action of heparin and fucoidan on arterial smooth muscle cell proliferation and thrombospondin and fibronectin metabolism /P.Vischer, E.Buddecke// Eur. J. Cell. Biol. 1991. - Dec,Vol 56. - P. 407-414.

162. Walsh G.M. Binding of immunoglobin classes and subclasses to human neutrophils and eosinophils /G.M.Walsh, A.B.Kae// Clin, and Exp. Immunol., 1986. 63. - №2 - P. 466-472.

163. WaltherA. Leukocyte-independent plasma extravasation during endotoxemia /A.Walther, M.Weihrauch, W.Schmidt, M.M.Gebhard, E.Martin, H.Schmidt// Crit. Care. Med. 2000. - Aug,Vol. 28. - P. 2943-2948.

164. WaltherA. Role of platelet-activating factor in leukocyte-independent plasma extravasation and mast cell activation during endotoxemia /A.Walther, N.Yilmaz, W.Schmidt, A.Bach A, M.M.Gebhard// J. Surg. Res. 2000. -Oct,Vol. 93. - P. 265-271.

165. White D.J. Women with recurrent vaginal candidosis have normal peripheral blood B and T lymphocyte subset levels /D.J.White, M.Stevenson, M.Shahmanesh, T.Gentle// Genitourin Med. 1997. - Dec;73(6). - P.475-6.

166. WikstrômT. Leukocyte margination during hemorrhagic shock correlates to preshock margination and is reduced by fucoidin /T.Wikstrom, M.Braide U.Bagge, B.Risberg// Shock. 1995. - Jan,Vol. 3. - P.40-45.

167. Woith W. Herman M.D. Soluble activated lymphocytes in vitro /W.Woith, J.Niislein, C.Antoni, D.J.Dejica, T.N.Winkler// Clin and Exp. Immunol., 1993.- 92-. N3.- P. 537-542.

168. Woith W. Soluble from of the human transrerrum receptor is realeased by activated lymphocytes in vitro /W.Woith, J.Nisslein, C.Antoni, D.J.Dejica, T.N.Winkler// Clin.and Exp. Immunol. 1993. - V. 92. №3. - P. 537-542.

169. Wu T.T. Length distribution of CD RH 3 in antibodies /T.T.Wu, G.Johnson, E.A.Kabat// J. Proteins.- 1993.- P. 9-11.

170. Yochida T. The production of antigens pig lymphokine antibody /T.Yochida, P.E.Bigassi, S.Cohen// J.of Immunology. 1983. - V. 114. - P. 688-694.

171. Yoshizawa Y. Macrophage stimulation activity of the polysaccharide fraction from a marine alga (Porphyra yezoensis): structure-function relationships and improved solubility /A.Ametani, J.Tsunehiro, K.Nomura,

172. M.Itoh M et. al.// Biosci. Biotechnol. Biochem. 1995.- Oct,Vol 59. - P. 1933-1937

173. Zhang X.W. Inhibition of selectin function and leukocyte rolling protects against dextran sodium sulfate-induced murine colitis /X.W.Zhang, Q.Liu, H. Thorlacius// Scand. J. Gastroenterol. 2001. - Mar,Vol 36. - P. 270275.