Физиологические и фармакологические регуляторы активности АВС-транспортеров-маркеров множественной лекарственной резистентности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Конухова, Анна Валерьевна

• Конухова, Анна Валерьевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Конухова, Анна Валерьевна

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1.Множественная лекарственная резистентность и пути ее реализации в клетке

1.2. Pgp, MRP, BCRP - маркеры множественной лекарственной резистентности

1.3. Субстратная специфичность Pgp, MRP и BCRP по отношению к цитостатикам

1.4. Локализация ABC-транспортеров в клетке и их участие в перераспределении субстратов между ядром и цитоплазмой

1.5. Физиологическая функция Pgp, MRP и BCRP

1.6. Экспрессия Pgp и MRP в опухолях и соответствующих нормальных тканях человека

Глава 2. Материал и методы

2.1. Материал

2.2. Методы оценки функциональной активности АВС-транспортеров

Глава 3. Ингибирование функции АВС-транспортеров в клетках солидных опухолей и нормальных тканей человека при воздействии препаратов платины

3.1. Оценка действия препаратов платины на накопление доксорубицина в клетках солидных опухолей и нормальных тканей человека

3.1.1. Оценка действия препаратов платины на накопление доксорубицина в клетках немелкоклеточного рака легкого и нормальной ткани легкого

3.1.2. Оценка действия препаратов платины на накопление доксорубицина в клетках опухолей и слизистой толстой кишки

3.1.3. Оценка действия препаратов платины на накопление доксорубицина в клетках опухолей и слизистой желудка

3.1.4. Оценка действия препаратов платины на накопление доксорубицина в клетках опухолей и слизистой пищевода

3.1.5. Оценка действия цисплатина на накопление доксорубицина в клетках рака шейки матки

3.2. Исследование влияния различных концентраций цисплатина и карбоплатина на накопление доксорубицина в клетках солидных опухолей человека

Глава 4. К механизму увеличения внутриклеточного накопления доксорубицина после воздействия препаратов платины

4.1. Химическое взаимодействие цисплатина с доксорубицином

4.2. Влияние цисплатина на связывание доксорубицина с ДНК

4.3. Цисплатин как ингибитор функции ABC-транспортеров. Влияние цисплатина на внутриклеточное распределение доксорубицина

4.4. Влияние цисплатина на энергетический баланс клетки

Глава 5. Другие возможные пути преодоления множественной лекарственной резистентности, ассоциированной с функционированием АВС-транспортеров

5.1. Длительность инкубации клеток солидных опухолей человека с доксорубицином как модификатор множественной лекарственной резистентности, ассоциированной с функционированием АВС-транспортеров

5.2. Исследование влияния диоксидина на накопление доксорубицииа в клетках опухолей и слизистой мочевого пузыря

Глава 6. Заключение 126 Выводы 139 Список литературы

Список сокращений

Pgp - P-glycoprotein

MRP - multidrug resistance protein

LRP - lung resistance protein

BCRP - breast cancer resistance protein

MDR - multidrug resistance (множественная лекарственная резистентность) MDRabc - множественная лекарственная резистентность, ассоциированная с функционированием АВС-транспортеров

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиологические и фармакологические регуляторы активности АВС-транспортеров-маркеров множественной лекарственной резистентности»

Современная химиотерапия опухолей занимает важное место среди остальных методов лечения онкологических больных. В настоящее время увеличение эффективности химиотерапевтического лечения происходит за счет внедрения в клиническую практику новых лекарственных препаратов. В тоже время все чаще для выбора оптимального режима лечения прибегают к оценке факторов, позволяющих предсказать возможный ответ на химиотерапию.

Одним из существенных препятствий на пути лечения пациентов с солидными опухолями является их врожденная и приобретенная резистентность к цитостатикам, отличным по структуре и механизму действия. Такую лекарственную устойчивость называют множественной, а препараты называют препаратами из группы множественной лекарственной резистентности (MDR-препаратами). В группу MDR-препаратов относят антрациклины, винкаалколоиды, подофилотоксины, таксаны, актиномицин Д, митоксантрон, амсакрин, триметрексат, митрамицин, митомицин С, камптотецины, то есть большинство широко применяемых в клинике препаратов. В последнее время в эту группу включены и препараты платины.

Целью любого химиотерапевтического лечения является достижение противоопухолевым препаратом своей внутриклеточной мишени и ее повреждение, что, в свою очередь, должно привести клетку к гибели. Для реализации этой цели препарат должен: 1) проникнуть в клетку, 2) сохранить свою активность внутри клетки, 3) повредить внутриклеточную мишень и, что особенно важно, 4) повреждение внутриклеточной мишени препаратом должно привести к блоку клеточного цикла и/или к гибели клетки. Однако клетка со своей стороны может воспрепятствовать оказываемому на нее токсическому воздействию на любом из вышеперечисленных этапов. Так, на первом этапе клетка может препятствовать проникновению в нее цитостатиков путем увеличения экспрессии мембранных транспортных белков, принадлежащих к семейству ABC-транспортеров, выкачивающих токсические агенты из клеток и тем самым снижая внутирклеточную концентрацию цитостатиков. Процесс выкачивания ABC-транспортерами противоопухолевых перепаратов из клеток является энергетически зависимым и осуществляется за счет гидролиза молекул АТФ. К настоящему времени можно считать доказанным участие в выбросе противоопухолевых препаратов из клеток, то есть в регуляции выраженности повреждающего воздействия цитостатиков на клетки, трех ABC-транспортеров - Pgp, MRPHBCRP.

С точки зрения влияния этих транспортных белков на успех химиотерапевтического лечения, на наш взгляд можно с уверенностью утверждать, что перед назначением тех или иных химиотерапевтических режимов необходимо оценивать как функциональную активность, так и внутриклеточную локализацию АВС-транспортеров, которые могут не только препятствовать поступлению противоопухолевых препаратов в клетку, но и ограничивать доступность ядра для цитостатиков. Последнее особенно важно, если учесть, что успех химиотерапии достигается только в результате взаимодействия цитостатиков с их внутриклеточными мишенями, большинство из которых расположены в клеточном ядре.

В связи с этим становится понятным, что важной задачей в направлении преодоления множественной лекарственной устойчивости, ассоциированный с функционированием ABC-транспортеров, становится поиск ингибиторов транспортных белков. Во всем мире поиск ингибиторов множественной лекарственной резистентности осуществляется среди непротивоопухолевых лекарств. Примером могут служить специфические ингибиторы Pgp - верапамил, циклоспорин А и их производные, некоторые стероидные гормоны и антиэстрогены. Выявлена высокая ингибирующая активность всей системы обратного транспорта при воздействии препарата лонидамина, эффективность которого для преодоления множественной лекарственной резистентности подтверждена и при клинических испытаниях.

При этом совершенно неизученным остается вопрос о возможном ингибирующем воздействии на ABC-транспортеры противоопухолевых препаратов. Ранее в нашей лаборатории было показано, что такие противоопухолевые препараты как таксол, таксотер или 5-фторурацил могут ингибировать функцию АВС-транспортеров в клетках солидных опухолей человека (Богуш Т.А. и др., 2003; Богуш Е.А. и др., 2003; Гришанина и др., 2005). Из данных литературы также известно, что такие противоопухолевые препараты как митомицин С, винкаалкалоиды или СРТ-11 (иринотекан) могут ингибировать функцию ABC-транспортеров в культурах клеток (Maitra etal., 2001; Pereira etal, 1998; Chanvier et al., 2002).

С другой стороны, мы обратили внимание на известный факт, что комбинации препаратов платины (цисплатина и карбоплатина) с некоторыми MDR-препаратами, например, с антрациклинами и таксанами, являются наиболее эффективными при лечении опухолей с фенотипом врожденной или приобретенной лекарственной резистентности. Примером может служить немелкоклеточный рак легкого (Lilenbaum et al., 2002; Jensen et al, 2002; Gatzemeier et al., 1998).

Эти клинические наблюдения позволили предположить, что наряду с собственно противоопухолевой активностью, препараты платины, возможно, способны ингибировать функцию ABC-транспортеров, выбрасывающих MDR-препараты из клеток, и, таким образом, являться так называемыми MDR-модификаторами, позволяющими преодолеть множественную лекарственную резистентность к цитостатикам, используемым в комбинации с ними.

Второй важный аспект в разработке подходов к преодолению множественной лекарственной резистентности, который не описан в литературе и на котором мы остановили свое внимание - это попытка преодолеть фенотип множественной лекарственной резистентности путем увеличения поступления препарата в клетку за счет использования высокотоксичного агента, который оказывал бы грубое повреждающее действие на клетку, в том числе нарушал целостность цитоплазматической мембраны опухолевых клеток. При этом в качестве модели для исследования был выбран поверхностный рак мочевого пузыря, поскольку слизистая мочевого пузыря является физиологически очень устойчивой к действию токсических веществ.

И, наконец, третий аспект, на котором мы остановили свое внимание - это возможность преодоления множественной лекарственной резистентности солидных опухолей человека с помощью физиологических регуляторов активности АВС-транспортеров. Так, в клинике широко применяется инфузионная химиотерапия, которая хорошо себя зарекомендовала как с точки зрения более низкой общей токсичности для пациента по сравнению со струйным введением препаратов, так и с точки зрения эффективности. В ряде случаев высокая эффективность длительной внутривенной инфузии наблюдается даже при клинически регистрируемой устойчивости на предшествующую химиотерапию. Мы предположили, что одним из возможных объяснений этого клинического феномена может быть то, что при увеличении длительности контакта опухолевых клеток с MDR-препаратом, последний может ингибировать функцию ABC-транспортеров, выбрасывающих цитостатики из клеток, и, таким образом, оказывать модифицирующий эффект.

Все вышесказанное обуславливает актуальность, цели и задачи данного исследования.

Целыо настоящей работы явился поиск и изучение физиологических и фармакологических регуляторов активности ЛВС-транспортеров.

Задачи исследования

1. Оценить влияние цисплатина и карбоплатина на фенотип множественной лекарственной резистентности в клетках немелкоклеточного рака легкого и нормальной ткани легкого.

2. Определить является ли модифицирующий эффект препаратов платины специфичным в отношении клеток немелкоклеточного рака и нормальной ткани легкого, или же будет также наблюдаться в клетках рака толстой кишки, желудка, пищевода и шейки матки и в клетках соответствующих нормальных тканей.

3. Изучить механизм ингибирования фенотипа множественной лекарственной резистентности при воздействии препаратов платины в экспериментах ex vivo и in vitro.

4. Оценить влияние длительности инкубации клеток солидных опухолей с доксорубицином на внутриклеточное накопление и перераспределение антрациклина.

5. Изучить механизм ингибирования фенотипа множественной лекарственной резистентности при увеличении длительности контакта клеток с доксорубицином.

6. Оценить влияние диоксидина (антисептика с широким спектром действия, повреждающего целостность клеточных мембран) на внутриклеточное накопление доксорубицина в клетках опухолей и слизистой мочевого пузыря.

7. Изучить механизм увеличения внутриклеточного накопления доксорубицина в клетках опухолей и слизистой мочевого пузыря при воздействии диоксидина.

Научная новизна и практическая значимость

В данной диссертационной работе найдены новые подходы к преодолению фенотипа множественной лекарственной резистентности солидных опухолей за счет использования фармакологических и физиологических регуляторов активности АВС-транспортеров.

Во-первых, выявлена способность препаратов платины (цисплатина и карбоплатина) увеличивать накопление модельного MDR-препарата доксорубицина в клетках немелкоклеточного рака легкого, рака толстой кишки, желудка, пищевода и шейки матки, экспрессирующих фенотип множественной лекарственной резистентности. При этом показана принципиальная возможность препаратов платины не просто увеличивать внутриклеточное накопление доксорубицина, но и влиять на его перераспределение между цитоплазмой и ядром в сторону последнего. Это особенно важно, поскольку мишенями большинства противоопухолевых препаратов являются

ДНК и ядерные ферменты. Показано, что причиной выявлено эффекта является ингибирование активности АВС-транспортеров при воздействии препаратов платины. Полученные результаты явились предпосылкой к рекомендации для клинического использования цисплатина и карбоплатина: последовательность введения "препарат платины -» MDR-препарат" следует признать оптимальной.

Второй, освещенный в работе, способ преодоления фенотипа множественной лекарственной резистентности посредством использования фармакологических регуляторов базируется на увеличении поступления цитостатиков в опухолевую клетку через нарушение целостности мембран. На клетках опухолей и слизистой мочевого пузыря показано, что диоксидин способен избирательно повышать накопление доксорубицина в клетках опухолей и при этом не влиять на накопление антрациклина в клетках слизистой мочевого пузыря. Выявлено, что эффект диоксидина на клетки реализуется за счет его способности как ингибировать функцию АВС-транспортеров, так и оказывать повреждающее воздействие на мембраны опухолевых клеток. Поскольку диоксидин является официнальным препаратом и разрешен для применения у онкологических больных, на основании полученных результатов сделано заключение о возможной эффективности внутри пузырного введения раствора диоксидина на 20-30 минут перед введением доксорубицина. Более того, на основании полученных убедительных доказательств способности диоксидина оказывать повреждающее воздействие на мембраны опухолевых клеток сделано предположение, что таким образом можно повысить эффективность внутрипузырной химиотерапии не только MDR-препаратами, но и другими цитостатиками, которые применяются при лечении поверхностных опухолей мочевого пузыря, например, таких как тиотэф и митомицин С. Доступность слизистой мочевого пузыря для противоопухолевых препаратов, а следовательно и их токсичность, должны при этом сохраниться на прежнем уровне. В то же время, предварительное воздействия диоксидина должно привести к увеличению поступления препаратов в опухоль а, следовательно, и к увеличению их цитотоксичности и эффективности. Полученные результаты являются рекомендацией для проведения клинической оценки эффективности местного применения раствора диоксидина при химиотерапии поверхностных опухолей мочевого пузыря.

И, наконец, в работе описан новый механизм ингибирования фенотипа множественной лекарственной резистентности в клетках опухолей за счет физиологической регуляции активности АВС-транспортеров. В работе найдено объяснение клинического феномена большей эффективности инфузионного введения противоопухолевых препаратов по сравнению со струйным введением: при увеличении длительности контакта клеток опухолей с модельным MDR-препаратом доксорубицином, последний может ингибировать активность АВС-транспортеров, расположенных на ядерной мембране клеток, в результате чего увеличивается поступление цитостатика в ядро клеток и его связывание с ДНК. Это особенно важно, так как мишени большинства противоопухолевых препаратов расположены именно в ядре клеток. Полученные данные послужили предпосылкой для клинической рекомендации о целесообразности тестирования, наряду с оценкой функции АВС-транспортеров в клетках опухолей, реакции клеток на накопление цитостатиков при увеличении длительности контакта с ними.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Конухова, Анна Валерьевна

Выводы

1. Цисплатин и карбоплатин являются ингибиторами фенотипа множественной лекарственной резистентности и увеличивают накопление противоопухолевых препаратов, в том числе и в ядре, в клетках солидных опухолей разных локализаций.

2. Подавление функции АВС-транспортеров является основной причиной преодоления фенотипа множественной лекарственной резистентности при воздействии препаратов платины.

3. Ингибирующее воздействие цисплатина и карбоплатина на функцию АВС-транспортеров позволяет признать последовательность введения "препарат платины -» MDR-препарат" оптимальной.

4. Длительность инкубации опухолевых клеток с цитостатиками является физиологическим регулятором активности АВС-транспортеров и модификатором фенотипа множественной лекарственной резистентности.

5. Ингибирование функции АВС-транспортеров является одной из причин преодоления фенотипа множественной лекарственной резистентности при увеличении длительности контакта опухолевых клеток с цитостатиками.

6. Диоксидин увеличивает накопление доксорубицина в клетках поверхностного рака мочевого пузыря в результате подавления функции АВС-транспортеров и повреждения цитоплазматической мембраны.

7. Избирательность воздействия диоксидина на клетки поверхностного рака мочевого пузыря позволяет рекомендовать его для внутрипузырного применения с целью повышения эффективности внутрипузырной химиотерапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Конухова, Анна Валерьевна, 2007 год

1. Богуш Е.А., Богуш Т.А., Шишкин Ю.В., Каменский А.А. Функциональная активность АВС-транспортеров в солидных опухолях человека. // Вестник Московского университета. - 2003. - №2. - С. 3-14.

2. Богуш Т.А., Шубина И.Ж., Смирнова Г.Б. и др. Прижизненная количественная оценка внутриклеточного распределения доксорубицина в опухолевых клетках. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1995. - №11.- С. 518-521.

3. Бычков М.Б. Химиотерапия немелкоклеточного рака легкого (по материалам конгресса ASCO 2000 в Нью-Орлеане и ASCO 2001 в Сан-Франциско). // Русский медицинский журнал. Онкология. 2001. - Т. 9, № 22 (141). - С. 978-982.

4. Гришанина А.Н., Богуш Т.А., Конухова А.В. и др. Ингибирование фенотипа множественной лекарственной резистентности рака толстой кишки при применении 5-фторурацила. // Российский биотерапевтический журнал. 2005. - №1. - С. 53.

5. Матвеев Б.П., Фигурин К.М., Корякин О.Б. Рак мочевого пузыря. М.: Вердана. -2001.-244 с.11 .Машковский М.Д. Лекарственные средства. 13-е изд. - Харьков: Торсинг - 1998. -Т. 2. - 592 с.

6. Падейская Е.Н., Тюрин B.C., Першин Т.Н. и др. Субмикроскопические изменения в клетках кишечной палочки и стафилококка под влиянием диоксидина. // Фармакология и токсикология. 1974. - Т. 37, №1. - с.80-85.

7. Рудзит Э.А., Ермаченко В.А., Куцемако Р.Т. и др. Действие диоксидина на мембранный аппарат бактериальной клетки. // Прикл. биохим. и микробиол. 1983. -Т. 19, №5.-С. 603-609.

8. Фадеева Н.И., Дегтярева И.Н., Фоминова А.Н. и др. Действие диоксидина на внеклеточные белки и ферменты Staphylococcus aureus. II Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т.35., №8. - С. 17-20.

9. Фигурин К.М. Иммунотерапия поверхностного рака мочевого пузыря. // Матвеев Б.П., Фигурин К.М., Карякин О.Б. Рак мочевого пузыря. М.: Вердана. - 2001. - 244 с.

10. Allikmets R., Schriml L.M., Hutchinson A. et al. A human placenta-specific ATP-binding cassette gene (ABCP) on chromosome 4q22 that is involved in multidrug resistance. // Cancer Res. 1998. - Vol. 58, № 23. - P. 5337 - 5339.

11. Ambudkar S.V., Dey S., Hrycyna C.A. et al. Biochemical, cellular, and pharmacological aspects of the multidrug transporter. // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 1999. Vol. 39. - P. 361-98.

12. Baker J., AjaniJ.A., Ho L. et al. CPT-11 plus cisplatin as second line therapy of advanced gastric or GE junction adenocarcinoma. // Proc. ASCO. 2001. - Vol. 20, № 647.

13. Barrand M.A., Bagrij Т., Neo S.Y. Multidrug resistance-associated protein: a protein distinct from P-glycoprotein involved in cytotoxic drug expulsion. // Gen Pharmacol. -1997. Vol. 28, № 5. - P. 639-645.

14. Barrand M.A., Robertson K.J., Neo S.Y. et al. Localisation of the multidrug resistance-associated protein, MRP, in resistant large-cell lung tumour cells. // Biochem Pharmacol. -1995.-Vol. 50, № 10.-P. 1725-1729.

15. Beck W.T., Grogan T.M., Willman C.L. et al. Methods to detect P-glycoprotein-associated multidrug resistance in patients' tumors: consensus recommendations. // Cancer Research. 1996.-Vol. 56.-P. 3010-3020.

16. Begley D.J. ABC transporters and the blood-brain barrier. // Curr Pharm Des. 2004. -Vol. 10, № 12.-P. 1295-1312.

17. Biedler J.L., Riehm H. Cellular resistance to actinomycin D in Chinese hamster cells in vitro: cross-resistance, radioautographic and cytogenetic studies. // Cancer Res. 1970. -Vol. 30.-P. 1174-1184.

18. Boote D.J., Dennis I.F., Twenty man P.R. et al. Phase I study of etoposide with SDZ PSC 833 as a modulator of multidrug resistance in patients with cancer // J.Clin.Oncol. 1996. -Vol. 14, №2.-P. 610-618.

19. Borst P., Evers R., Kool M. et al. A family of drug transporters: the multidrug resistance-associated proteins. // J Natl Cancer Inst. 2000. - Vol. 92, № 16 - P. 1295-1302.

20. Borst P., Evers R., Kool M. et al. The multidrug resistance protein family.// Biochim Biophys Acta. 1999. - Vol. 1461, № 2. - P. 347-357.

21. Briusov P.G., Inoiatov I.M., Perekhodov S.N. et al. Prevention of incompetence of sigmoid-rectal anastomosis after frontal resection of rectum in the treatment of cancer.// Khirurgiia (Mosk). 1994. - № 10. - P. 29-32.

22. Bunn P.A. Chemotherapy for advanced non-small-cell lung cancer: who, what, when, why? // J Clin Oncol. -2002. Vol. 20, 18 Suppl. - P. 23S-33S.

23. Burns H.A., Eckardt J., Fields S. et al. Phase II trials of Taxotere in patients with non-small cell lung cancer.//Proc ASCO. -1993. V. 12-P. 335.

24. Calabresi F., Marolla P., Di Lauro L. et al. Lonidamine as a potentiating agent of the FAC regimen in the treatment of advanced breast cancer. Results of multicentric randomized clinical study // Int. J. Oncol. 1994. Vol. 4. - 753-760.

25. Chauvier D., Kegelaer G., Morjani H. et al. Manfait M. Reversal of multidrug resistance-associated protein-mediated daunorubicin resistance by camptothecin. // J Pharm Sci. -2002.-Vol. 91, №8.-P. 1765-1775.

26. Chauvier D., Morjani #., Manfait M. Homocamptothecin-daunorubicin association overcomes multidrug-resistance in breast cancer MCF7 cells. // Breast Cancer Res Treat. 2002.-Vol. 73,№2.-P. 113-125.

27. Chen Z, Zhang Y., Zhang X. et al. Expression of multidrug-associated protein, P-glycoprotein, P53 and Bcl-2 proteins in bladder cancer and clinical implication. // J Tongji Med Univ. 2001. - Vol. 21, № 1. p. 56-58.

28. Cheng G., Zhu H., Sun L. The expression of multiple drug resistance associated genes in ovarian cancer. // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 2000. - Vol. 35, № 2. - P. 87-90.

29. Chevillard S, Pouillart P, Beldjord С et al. Sequential assessment of multidrug resistance phenotype and measurement of S-phase fraction as predictive markers of breast cancer response to neoadjuvant chemotherapy. // Cancer. 1996. -№ 77. - P. 292-300.

30. Chevrollier A., Loiseau D., Stepien G. What is the specific role of ANT2 in cancer cells? // Med Sci (Paris). 2005. - Vol. 21, № 2. - P. 156-61.

31. Chou K.M., Paul Krapcho A., Hacker M.P. Impact of the basic amine on the biological activity and intracellular distribution of an aza-anthrapyrazole: BBR 3422. // Biochem Pharmacol.-2001.-Vol. 62, № 10.-P. 1337-1343.

32. Chun H., Puccio C„ Olson C. et al. Cisplatin plus concurrent continuous infusion of 5-fluorouracil and paclitaxel: active regimen for adenocarcinoma of the stomach and gastroesophageal junction.//Proc. ASCO. -2000. -abs. 1058.

33. Clifford S.C., Neal D.E., Lunec J. High level expression of the multidrug resistance (MDR1) gene in the normal bladder urothelium: a potential involvement in protection against carcinogens? //Carcinogenesis. 1996. - Vol. 17, № 3. - P. 601-4.

34. Cole S.P., Sparks K.E., Fraser K. et al. Pharmacological characterization of multidrug resistant MRP-transfected. human tumor cells. Cancer Research. - 1994. - Vol.54. - P. 5902-5910.

35. Crino L., Cappuzzo F. Present and future treatment of advanced non-small cell lung cancer. // Semin Oncol. 2002. - Vol. 29, № 3 Suppl 9. - P. 9-16.

36. DantzigA.H., Law K.L., Cao J. et al. Starling JJ. Reversal of multidrug resistance by the P-glycoprotein modulator, LY335979, from the bench to the clinic. // Curr Med Chem.-2001.-Vol. 8, № 1.-P. 39-50.

37. Dean M., Rzhetsky A., Allikmets R. The human ATP-binding cassette (ABC) transporter superfamily.// Genome Res. -2001. -Vol. 11, №7.-P. 1156-1166.

38. Degtiareva I.N., Fadeeva N.I., Dudanova L.I. et al. Study of the effect of dioxidine on the subcellular fractions of microbial cells. // Farmakol Toksikol. 1981. - Vol. 44, № 3. - P. 330-334.

39. Dmitrieva N.V. The use of clindamycin in the prevention and treatment of infectious complications in the cancer clinic. // Antibiot Khimioter. 1994. - Vol. 39, № 2-3. - P. 52-56.

40. Doyle L.A., Yang W., Abruzzo L.V. et al. A multidrug resistance transporter from human MCF-7 breast cancer cells. // Proc Natl Acad Sci USA. 1998. - Vol. 95, № 26. - 15665 -15670.

41. Eid H., Mingfang L., Institoris E. et al. MRP expression of testicular cancers and its clinical relevance. // Anticancer Res. 2000. - Vol. 20, № 5C. - P. 4019-4022.

42. Endo K., Maehara Y., Kusumoto T. et al. Expression of multidrug-resistance-associated protein (MRP) and chemosensitivity in human gastric cancer. // Int J Cancer. 1996. -Vol. 68, №3.-P. 372-377.

43. Fanciulli M., Bruno 71, Giovannelli A. et al. Energy Metabolism of Human LoVo Colon Carcinoma Cells: Correlation to Drug Resistance and Influence of Lonidamine // Clin. Cancer Res. 2000. - Vol. 6, № 4. - P. 1590-1597.

44. Fardel O., Payen L., CourtoisA. et al. Regulation of biliary drug efflux pump expression by hormones and xenobiotics. // Toxicology. 2001. - Vol. 167, № 1. - P. 37-46.

45. Fields A., Hochster H., Runowicz C. et al. PSC833: initial clinical results in refractory ovarian cancer patients//Curr. Opin. Oncol. 1998.-Vol. 10, Suppl. l.-P. S21.

46. Filipits M., Malayeri R., Suchomel R.W. et al. Expression of the multidrug resistance protein (MRP1) in breast cancer. // Anticancer Res. 1999. - Vol. 19, № 6B. - P. 50435049.

47. Gatzemeier U., Von Pavel J., Gottfried M. et al. Phase III comparative study high-doze cisplatin versus a combination of paclitaxel and cisplatin in patients with advanced NSCLC. //Proc. ASCO. 1998. Vol. 17. - P. 454a, abs. 1748.

48. Gervias R, Ducolone A.M.D., Breton J.I. et al. Randomized phase III trial of docetaxel (taxotere) 75 mg/m2 q3w versus 40 mg/m2 weekly in patients with pretreated NSCLC. // Proc. ASCO. 2002. - Vol. 21. - P. 310a, abs. 1238.

49. Goff B.A., Paley P.J., Greer B.E. et al. Evaluation of chemoresistance markers in women with epithelial ovarian carcinoma. // Gynecol Oncol. 2001. - Vol. 81, № 1. - P. 18-24.

50. Gong Y., Wang Y., Chen F. et al. Altered subcellular distribution of daunorubicin in the non-P-glycoprotein-mediated multidrug-resistant cell line HL-60/ADR. // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2000. - Vol. 21, № 6. P. 309-311.

51. Gong Y., Wang Y., Chen F. et al. Identification of the subcellular localization of daunorubicin in multidrug-resistant K562 cell line. // Leuk Res. 2000. - Vol. 24, № 9. -P. 769-774.

52. Gonzalez V.M., Fuertes M.A., Alonso C. et al. Is cisplatin-induced cell death always produced by apoptosis? // Mol Pharmacol. 2001. - Vol. 59, № 4. - P. 657-663.

53. Gottesman M.M., Pastan I. Modulation of the multidrug resistance phenotype. // Cell Pharm.- 1993.-Vol. 1,-P. SI 11-2.

54. Han В., Liao M., Su J. et al. The relationship between drug sensitivity and expression of drug resistance gene mutations in non-small cell lung cancer. // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. 2002. - Vol. 25, № 12. - P. 727-731.

55. Hooijberg J.H., Broxterman H.J., Kool M. et al. Antifolate resistance mediated by the multidrug resistance proteins MRP1 and MRP2. // Cancer Research. 1999. - Vol. 59. P. 2532-2535.

56. Horio M., Chin К. K, Currier S.J. et al. Transepithelial transport of drugs by the multidrug transporter in cultured Madin-Darby canine kidney cell epithelia. //J. Biol. Chem. 1989. -Vol. 264.-P. 14880-14884.

57. Horio M, Gottesman M.M., Pastanl. ATP-dependent transport of vinblastine in vesicles from human multi-drug-resistant cells. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol. 85. P. 3580-3584.

58. Ishikawa Т., Кио M.T., Furuta K. et al. The human multidrug resistance-associated protein (MRP) gene family: from biological function to drug molecular design. // Clin Chem Lab Med. 2000. - Vol. 38, № 9. - P. 893-897.

59. Jensen N.V. et al. Материалы конгресса ASCO 2002 (Орландо, США). abs. 1285.81 .Juliano R.L., Ling V. A surface glycoprotein modulating drug permeability in Chinese hamster ovary cell mutants. //Biochim. Biophys. Acta. 1976. - Vol. 455. - P. 152-162.

60. Sl.Kanzaki A., Toi M., Nakayama K. et al. Expression of multidrug resistance-relatcd transporters in human breast carcinoma. // Jpn J Cancer Res. 2001. - Vol. 92, № 4. - P. 452-458.

61. Kunitoh H., Koshiro W., Taisuke 0. et al. Phase II trials of docetaxel in previously untreated advanced non-small cell lung cancer: a Japanese cooperative study. // J Clin Oncol. -1996.-V. 14.-P. 1649-1655.

62. Lage H., Dietel M. Effect of the breast-cancer resistance protein on atypical multidrug resistance. //Lancet Oncol. -2000. Nov;l: - P. 169-175.

63. Larsen A.K., Escargueil A.E., Skladanowski A. Resistance mechanisms associated with altered intracellular distribution of anticancer agents. // Pharmacol Ther. 2000. - Vol. 85, №3.-P. 217-229.

64. Lilenbaum R.C. et al. Материалы конгресса ASCO 2002 (Орландо, США). abs. 2.

65. Ling V. Multidrug resistance: molecular mechanisms and clinical relevance. // Cancer Chemother Pharmacol. 1997. - V. 40. - Suppl:S3-8.

66. Linn S.C., Honkoop A.H., Hoekman K. et al. p53 and P-glycoprotein are often co-expressed and are associated with poor prognosis in breast cancer. // Br J Cancer. 1996. -Vol. 74, № i.p. 63-68.

67. Litman Т., Brangi M., Hudson E. et al. The multidrug-resistant phenotype associated with overexpression of the new ABC half-transporter, MXR (ABCG2). // J Cell Sci. 2000. -Vol. 113, № 11.-P. 2011-2021.

68. Lit mem Т., Druley Т.Е., Stein W.D. et al. From MDR to MXR: new understanding of multidrug resistance systems, their properties and clinical significance. // Cell Mol Life Sci. 2001. - Vol. 58, № 7. - P. 931 -959.

69. Lorico A., Rappa G., Flavell R.A. et al. Double knockout of the MRP gene leads to increased drug sensitivity in vitro. // Cancer Research. 1996. - Vol. 56. - P. 5351-5355.

70. Loscher W., Potschka H. Blood-brain barrier active efflux transporters: ATP-binding cassette gene family. // NeuroRx. 2005. - Vol. 2, № 1. - P. 86-98.

71. Maare C., Nielsen D., Skovsgaard T. Comparison of the accumulation of the epipodophyllotoxins VP-16 and VM-26 in a sensitive and a multidrug-resistant Ehrlich ascites tumour cell line detected by HPLC. // Cell Pharmacol. 1995. - Vol. 2. - P. 35-42.

72. Madahi J, Kiat H., Berman D.S. Myocardial perfusion imaging with technetium-99m-labeled agents. // American Journal of Cardiology. 1991. - Vol. 67. - P. 27-34.

73. Maitra R„ Halpin P.A., Karlson K.H. et al. Differential effects of mitomycin С and doxorubicin on P-glycoprotein expression. // Biochem J. 2001. - Vol. 355, № Pt 3. - P. 617-624.

74. Maliepaard M., Scheffer G.L., Faneyte I.F. et al. Subcellular localization and distribution of the breast cancer resistance protein transporter in normal human tissues. // Cancer Res. 2001. - Vol. 61, № 8. - P. 3458-3464.

75. Martin D.S., Spriggs D., Koutcher J.A. A concomitant ATP-depleting strategy markedly enhances anticancer agent activity. // Apoptosis. 2001. - Vol. 6, № 1-2. - P. 125-131.

76. Mechetner E., Kyshtoobayeva A., Zonis S. et al. Levels of multidrug resistance (MDR1) P-glycoprotein expression by human breast cancer correlate with in vitro resistance to taxol and doxorubicin. // Clin Cancer Res. 1998. - № 4. - P. 389-398.

77. Mechetner E. В., Schott В., Morse B. S. et al. P-glycoprotein function involves conformational transitions detectable by differential immun-oreactivity. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 12908-12913.

78. Miccoli L., Poirson-Bichat F., Sureau F. et al. Potentiation of lonidamine and diazepam, two agents acting on mitochondria, in human glioblastoma treatment. // J Natl Cancer Inst.- 1998.-Vol. 90, № 18.-P. 1400-1406.

79. Miyake K., Mickley L., hitman T. et al. Molecular cloning of cDNAs which are highly overexpressed in mitoxantrone-resistant cells: demonstration of homology to ABC transport genes. // Cancer Res. 1999. - Vol.59, № 1. - P. 8 -13.

80. Moraglio L., BremaF., Pastorino G. et al. Combination of epirubicin and lonidamine for treatment of advanced breast cancer//Tumori. 1995. - Vol. 81, № 2. - P. 107-111.

81. Narasaki F., Matsuo I., Ikuno N. et al. Multidrug resistance-associated protein (MRP) gene expression in human lung cancer. // Anticancer Res. 1996. - Vol. 16, № 4A. - P. 2079-2082.

82. Nazarov L.U., Akopian A.S., Agavelian A.M. et al. The efficacy of the combined antibacterial treatment of patients with colonic cancer complicated by perifocal inflammation. // Lik Sprava. 1993. - № 5-6. - P. 137-140.

83. Nezasa S., Fujihiro S., Deguchi T. et al. Analysis of induction of MDR1 gene expression by anticancer chemotherapy in bladder cancer. // Hinyokika Kiyo. 1997. -Vol. 43, № 9. - p. 629-636.

84. Nistico C., Garufi C., Milella M. Weekly epirubicin plus lonidamine in advanced breast carcinoma // Breast Cancer Res. Treat. 1999. - Vol. 56, № 3. - p. 233-237.

85. Nomura M., Matsunami Т., Kobayashi K. et al. Involvement of ABC transporters in chemosensitivity of human renal cell carcinoma, and regulation of MRP2 expression by conjugated bilirubin. // Anticancer Res. 2005. - Vol. 25, № 4. - P. 2729-2735.

86. Oshika Y., Nakamura M., Tokunaga T. et al. Multidrug resistance-associated protein and mutant p53 protein expression in non-small cell lung cancer. // Mod Pathol. 1998. -Vol. 11, № 11.-P. 1059-1063.

87. Parker B.W., Kaur G., Nieves-Neira W. et al. Early induction of apoptosis in hematopoietic cell lines after exposure to flavopiridol. // Blood. 1998. - Vol. 91, № 2. -P. 458 - 465.

88. Payen L., Sparfel L., Courtois A. et al. The drug efflux pump MRP2: regulation of expression in physiopathological situations and by endogenous and exogenous compounds. // Cell Biol Toxicol. 2002. - Vol. 18, № 4. - P. 221 -233.

89. Peng X., Feng F., Zhang W. Expression of multidrug resistance-associated protein (MRP) and lung resistance protein (LRP) in human rectal carcinomas and its clinical significance. // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 1999. - Vol. 21, № 3. - P. 193-195.

90. Peng X., Feng F., Zhang W. Expression of multidrug resistance-associated protein in human non-small cell lung cancer. // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. 1999. -Vol. 22, № П.-P. 655-658.

91. Pereira E„ Tarasiuk J., Garnier-Suillerot A. Kinetic analysis in living cells of the inhibition of the P-glycoprotein-mediated efflux of anthracyclines by vinca alkaloids.// Chem Biol Interact.- 1998.-Vol. 114,№ 1-2.-P. 61-76.

92. Ponomareva T.R., Malakhova V.A., Ana'nev V.S. Pharmacokinetics of dioxidine in oncological patients in the postoperative period. // Antibiot Khimioter. 1989. - Vol. 34, № 9. - 684-687.

93. Rabindran S.K., Ross D.D., Doyle L.A. et al. Fumitremorgin С reverses multidrug resistance in cells transfected with the breast cancer resistance protein. // Cancer Res. -2000.-Vol. 60, № 1.-P. 47-50.

94. Rajagopal A., Simon S.M. Subcellular localization and activity of multidrug resistance proteins. // Mol Biol Cell. 2003. -Vol. 14, № 8. - P. 3389-3399.

95. Reedijk J. New clues for platinum antitumor chemistry: kinetically controlled metal binding to DNA. // Proc Natl Acad Sci USA.- 2003. Vol. 100, № 7. - P. 3611-3616.

96. Robert J. Multidrug resistance: biology and modulation. // Oncology in Practice. -1998.-№1.-9-11.

97. Roninson I.B., Abelson H.T„ Housman D.E. et al. Amplification of specific DNA sequences correlates with multi-drug resistance in Chinese hamster cells. // Nature. -1984.-Vol. 309.-P. 626-628.

98. Ruetz S., Brault M., Kast C. et al. Functional expression of the multidrug resistance-associated protein in the yeast Saccharomyces cerevisiae. // Journal of Biological Chemistry. 1996. - Vol. 271. - P. 4154-4160.

99. Saito Т., Zhang Z.J., Ohlsubo T. et al. Homozygous disruption of the mdrla P-glycoprotein gene affects blood-nerve barrier function in mice administered with neurotoxic drugs.//Acta Otolaryngol.-2001.-Vol. 121, № 6.-P. 735-742.

100. Sandor V., Fojo Т., Bales S.E. Future perspectives for the development of P-glycoprotein modulators, in preparation // Drug Resistance Updates. 1998. - Vol. I. - P. 190-200.

101. Sandusky G.E., Mintze K.S., Pratt S.E. et al. Expression of multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2) in normal human tissues and carcinomas using tissue microarrays. // Histopathology. 2002. - Vol. 41, № 1. - P. 65-74.

102. Schinkel A.H., Arceci R.J., SmitJ.J. etal. Binding properties of monoclonal antibodies recognizing external epitopes of the human MDR1 P-glycoprotein. // Int. J. Cancer. -1993.-Vol. 55.-P. 478-484.

103. Schinkel A.H., Mayer U., Wagenaar E. et al. Normal viability and altered pharmacokinetics in mice lacking mdrl-type (drug-transporting) P-glycoproteins. // Proc Natl Acad Sci USA.- 1997. Vol. 94, № 8. - P. 4028-4033.

104. Schneider J., Efferth Т., MalternJ. et al. Immunohistochemical detection of the multi-drug-resistance marker P-glycoprotein in uterine cervical carcinomas and normal cervical tissue. // Am J Obstet Gynecol. 1992. - № 166. - P. 825-829.

105. Schrenk D., Baus P.R., Ermel N. et al. Up-regulation of transporters of the MRP family by drugs and toxins. // Toxicol Lett. 2001. - Vol. 120, № 1-3. - P. 51-57.

106. Shan G., Zhong H., Zhang F. Expression and prognostic significance of multidrug resistance associated protein (MRP) gene in non-small cell lung cancer by in situ hybridization. // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2000. - Vol. 22, № 1. - P. 27-29.

107. Shino Y, Itoh Y., Kubota T. et al. Role of poly(ADP-ribose)poIymerase in cisplatin-induced injury in LLC-PK1 cells. // Free Radic Biol Med. 2003. - Vol. 35, № 8. - P. 966-977.

108. Shiraishi Y, NagaiJ., Murakami T. et al. Effect of cisplatin on H+ transport by H+ -ATPase and Na+/H+ exchanger in rat renal brush-border membrane. // Life Sci.- 2000. -Vol. 67,№9.-P. 1047-1058.

109. Sugawara I., Yamada H., Nakamura H. et al. Preferential expression of the multidrug-resistance-associated protein (MRP) in adenocarcinoma of the lung. // Int J Cancer. -1995.- Vol. 64, №5.-P. 322-325.

110. Sugiyama S., Hayakawa M., Kato T. et al. Adverse effects of anti-tumor drug, cisplatin, on rat kidney mitochondria: disturbances in glutathione peroxidase activity.// Biochem Biophys ResCommun.- 1989.- Vol. 159, №3.-P. 1121-1127.

111. Sun I.L., Crane F.L. The antitumor drug, cis diamminedichloro-platinum, inhibits trans plasmalemma electron transport in HeLa cells. // Biochem Int. 1984. - Vol. 9, № 3. - P. 299-306.

112. Szachowicz-Petelska В., Figaszewski Z., Lewandowski W. Mechanisms of transport across cell membranes of complexes contained in antitumour drugs.// Int J Pharm. -2001. Vol. 222, № 2. - P. 169-182.

113. Tada Y., Wada M., Migita T. et al. Increased expression of multidrug resistance-associated proteins in bladder cancer during clinical course and drug resistance to doxorubicin. // Int J Cancer. 2002. - Vol. 98, № 4. - P. 630-635.

114. Tan В., Piwnica-Worms D., Ratner L. Multidrug resistance transporters and modulation. // Curr Opin Oncol. 2000. - Vol. 12, № 5. - P. 450-458.

115. Taylor С. W., Dalton W.S., Parrlsh P.R. et al. Different mechanisms of decreased drug accumulation in doxorubicin and mitoxantrone resistant variants of the MCF7 human breast cancer cell line. // Br. J. Cancer. 1991. - Vol. 63. - P. 923-929.

116. Thiebaut F., Tsuruo Т., Hamada H. et al. Cellular localization of the multidrug-resistance gene product P-glycoprotein in normal human tissues. // Proc Natl Acad Sci U S A. 1987. - Vol. 84, № 21. - P. 7735-8.

117. Vickers A.E., Rose K., Fisher R. et al. Saulnier M, Sahota P, Bentley P^ Kidney slices of human and rat to characterize cisplatin-induced injury on cellular pathways and morphology. //Toxicol Pathol. 2004. - Vol. 32, № 5. - P. 577-590.

118. Volk E.L., Farley K.M., Wu Y. et al. Overexpression of wild-type breast cancer resistance protein mediates methotrexate resistance. // Cancer Res. 2002. - Vol. 62, № 17.-P. 5035-5040.

119. Wang J., LiuX., Jiang W. Expression of LRP, MRP and MDR1 in non-small-cell lung cancer and its clinical significance. // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2000. - Vol. 22, № 4.-P. 304-307.

120. Wang Y, Wang A., Zhang W. The expression of MRP gene relates to the pathological features of lung cancer. //Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. 1999. - Vol. 22, № 9. - P. 545-547.

121. Wijnholds J., de Lange E.C., Scheffer G.L. et al. Multidrug resistance protein 1 protects the choroid plexus epithelium and contributes to the blood-cerebrospinal fluid barrier. // J Clin Invest. 2000. - Vol. 105, № 3. - P. 279-285.

122. Wright S.R, Boag A.H., Valdimarsson G. et al. Immunohistochemical detection of multidrug resistance protein in human lung cancer and normal lung. // Clin Cancer Res. -1998. Vol. 4, № 9. -P. 2279-2289.

123. Yang J.Y., Luo H.Y., Lin Q.Y. et al Subcellular daunorubicin distribution and its relation to multidrug resistance phenotype in drug-resistant cell line SMMC-7721/R.// World J Gastroenterol. 2002. - Vol. 8, № 4. - P. 644-649.

124. Yeh J.J., Hsu W.H., Wang J.J. et al. Predicting chemotherapy response to paclitaxel-based therapy in advanced non-small-cell lung cancer with P-glycoprotein expression.// Respiration. 2003. - Vol. 70, № 1. - P. 32-35.

125. Zaman G.J., Flens M.J., van Leusden M.R. et al. The human multidrug resistance-associated protein MRP is a plasma membrane drug-efflux pump. // PNAS. -1994.-Vol. 91.-P. 8822-8826.

126. Zhang L.J., Chen K.N., Xu G.W. et al. Congenital expression of mdr-1 gene in tissues of carcinoma and its relation with pathomorphology and prognosis. // World J Gastroenterol. 1999. - Vol. 5, № 1. - P. 53-56.

127. Zimmermann Т., Zeizinger M., Burda J.V. Cisplatin interaction with cysteine and methionine, a theoretical DFT study. // J Inorg Biochem. 2005. - Vol. 99, № 11. - P. 2184-2196.