Физико-химические методы в анализе водорастворимых витаминов (сравнительная оценка) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Ся, Юй .

• Ся, Юй .
• кандидат фармацевтических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Ся, Юй .

Список сокращений и обозначений.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. НОМЕНКЛАТУРА И СТРОЕНИЕ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ВИТАМИНОВ.

2. фармакопейный анализ лекарственных средств водорастворимых витаминов.

2.1 Источники информации.

2.2 Общая информация о фармакопейных водорастворимых витаминах.

2.3 Фармакопейные требования к качеству субстанций водорастворимых витаминов.

2.4 Фармакопейные требования к качеству препаратов водорастворимых витаминов.

3. НЕФАРМАКОПЕЙНЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ВИТАМИНОВ.

3.1 Химические реакции.

3.2 Физико-химические методы.

4. Современные физико-химические методы.

4.1 Инфракрасная спектроскопия.

4.2 Ближная инфракрасная спектроскопия.

4.3 Ультрафиолетовая спектроскопия.

4.4 Тонкослойная хроматография.

4.5 Высокоэффективная жидкостная храматография.

5. выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием

СОВРЕМЕННЫХ АНАЛИТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ.

5.1 Проблема фальсификации лекарственных средств.

5.2 Подходы к обнаружению фальсифицированных лекарственных средств. выводы по литературным данным.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

6. материалы и методы исследования.

6.1 Объекты исследования.

6.2 Оборудование и условия испытаний.

7. анализ лекарственных средств водорастворимых

ВИТАМИНОВ МЕТОДОМ ИК-СПЕКТРОСКОПИИ.

7.1 Задачи исследования.

7.2 Методика пробоподготовки.

7.3 Атлас стандартных ИК-спектров водорастворимых витаминов.

7.4 ИК-спектры лекарственных средств водорастворимых витаминов.

7.5 Выводы по главе.

8. Анализ лекарственных средств водорастворимых

ВИТАМИНОВ МЕТОДОМ БИК-СПЕКТРОСКОПИИ.

8.1 Задачи исследования.

8.2 Материалы исследования.

8.3 Методика анализа лекарственных средств водорастворимых витаминов.

8.4 Идентификация и дискриминация кислоты аскорбиновой с использованием метода БИК-спектроскопии.

8.5 Количественное определение кислоты аскорбиновой с использованием метода БИК-спектроскопии.

8.6 Выводы по главе.

9. анализ лекарственных средств водорастворимых витаминов методом уф-спектрофотометрии.

9.1 Задачи исследования.

9.2 Методика пробоподготовки.

9.3 Анализ полученных УФ-спектров.

9.4 Количественное определение водорастворимых витаминов с использованием метода УФ-спетрофотометрии.

9.5 Выводы по главе.

10. анализ лекарственных средств водорастворимых витаминов методом тсх.

10.1 Задачи исследования.

10.2 Пробоподготовка для анализа водорастворимых витаминов методом ТСХ.

10.3 Разработка условий хроматографирования.

10.4 Полученные результаты.

10.5 Выводы по главе.

11. Анализ лекарственных средств водорастворимых витаминов методом ВЭЖХ.

11.1 Задачи исследования.

11.2 Параметры пригодности хроматографической системы.

11.3 Методика пробоподготовки.

11.4 Определение основных хроматографических условий.

11.5 Разработка состава подвижной фазы.

11.6 Количественное определение водорастворимых витаминов с использованием метода ВЭЖХ.

11.7 Выводы по главе.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физико-химические методы в анализе водорастворимых витаминов (сравнительная оценка)»

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Возрастающие требования к безопасности, эффективности и качеству лекарственных средств обусловливают необходимость разрабатывать новые и совершенствовать существующие методы их анализа.

Витамины являются незаменимыми веществами, необходимыми для роста, развития и жизнедеятельности человека. Большинство витаминов в организме не синтезируется, источником их обычно является внешняя среда. Традиционно различают водорастворимые и жирорастворимые витамины.

Витаминные препараты широко используютсят для стимуляции и регуляции физиологических процессов, профилактики и лечения ряда заболеваний при гипо- и авитаминозах, повышения общей устойчивости организма к экзогенным и эндогенным неблагоприятным факторам.

На сегодняшний день рынок переполнен витаминными препаратами, они имеют различные составные элементы и выпускаются в разных лекарственных формах. На фармацевтическом рынке существует большое количество дженериков или многоисточниковых препаратов, содержащих витамины.

Качество препаратов-дженериков обеспечивается комплексом аналитических методов, позволяющих подтвердить их подлинность, определить чистоту и количественное содержание действующего вещества. Используемые для этого методы и методики нуждаются в постоянном совершенствовании. Необходимо также учитывать сохраняющуюся проблему фальсификации лекарственных средств. Учитывая вышеизложенное, актуальной является проблеме сравнительного изучения физико-химических методов, используемых для анализа лекарственных средств водорастворимых витаминов.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью исследования являлось сравнительное изучение современных физико-химических методов анализа лекарственных средств водорастворимых витаминов.

Для достижения поставленной цели решали следующие задачи: провести анализ состояния методов стандартизации и контроля качества лекарственных средств, включая международные программы и зарубежные фармакопеи; разработать унифицированную методику анализа субстанций и препаратов водорастворимых витаминов методом ИК-спектроскопии в средней области и составить атлас ИК-спектров; разработать методики установления подлинности и количественного опреде-ления субстанций и , препаратов г водорастворимых витаминов методами ИК-спектроскопии в ближней областях; разработать методики установления подлинности и количественного опреде-ления лекарственных средств водорастворимых витаминов методами УФ-спектроскопии; изучить хроматографические характеристики и разработать унифицированную методику установления подлинности водорастворимых витаминов методом ТСХ; изучить хроматографические характеристики и разработать методику установления подлинности и количественного определения витаминов группы В методом ВЭЖХ.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

Составлен атлас ИК-спектров субстанций и лекарственных препаратов водорастворимых витаминов различных производителей в вазелиновом масле. Изучены спектральные характеристики лекарственных средств кислоты аскорбиновой в средней и ближней инфракрасных областях.

Показана возможность использования метода БИК-спектроскопии для установления подлинности субстанций и препаратов кислоты аскорбиновой.

Построены модели для таблеток кислоты аскорбиновой, позволяющие идентифицировать производителя субстанции или препарата методом БИК-спектроскопии.

Впервые построена калибровочная модель, позволяющая определять процентное содержание кислоты аскорбиновой в таблетках методом БИК-спектроскопии. Установлено, что при идентификации и количественном определении таблеток кислоты аскорбиновой методом БИК-спектроскопии, содержащие действующего вещества в них должно составлять не менее 25%.

Впервые разработаны унифицированные методики установления подлинности тиамина гидрохлорида, рибофлавина, пиридоксина гидрохлорида, никотинамида и фолиевой кислоты методами ТСХ и ВЭЖХ.

Разработаны методики пробоподготовки субстанций и лекарственных препаратов водорастворимых витаминов для анализа методами ТСХ и ВЭЖХ. Изучено влияние подвижных фаз различного состава на хроматографические характеристики водорастворимых витаминов при их анализе данными методами.

Предложены новые условия подтверждения подлинности водорастворимых витаминов в субстанциях и лекарственных препаратах с использованием российских пластин «Сорбфил» для высокоэффективной тонкослойной хроматографии.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Полученные РЖ-спектры в средней и ближней областях и

УФ-спектры могут быть использованы при стандартизции и контроле качества по разделу «подлинность» соответствующей НД на субстанции и лекарственные препараты водорастворимых витаминов.

Методики установления подлинности и количественного определения методами УФ- и БИК-спектрофотометрии, методика установления подлинности водорастворимых витаминов методами ТСХ и ВЭЖХ предлагаются для стандартизации и контроля качества субстанций и лекарственных препаратов данной группы лекарственных средств с последующим их включением в соответствующие разделы НД.

СВЯЗЬ ЗАДАЧ ИССЛЕДОВАНИЯ С ПРОБЛЕМНЫМ ПЛАНОМ

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

Диссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии Первого МГМУ им. И.М. Сеченова «Совершенствование контроля качества лекарственных средств» (№ гос. регистрации 01.200.110545).

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на XVII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2010 г.). Апробация работы проведена на научно-практическом заседании кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии фармацевтического факультета Первого МГМУ имени И.М.Сеченова 14 июня 2010 года.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Ся, Юй .

выводы

1. Разработана унифицированная методика анализа субстанций и лекарственных препаратов водорастворимых витаминов методом ИК-спектроскопии и составлен атлас соответствующих ИК-спектров в вазелиновом масле, которые предлагаются для использования в качестве стандартных при анализе по разделу нормативной документации «подлинность» и для выявления фальсификатов, не содержащих указанное на упаковке действующее вещество.

2. Показано, что метод ближней ИК-спектроскопии в сочетании с дискриминатным анализом может быть использован для подтверждения подлинности субстанций кислоты аскорбиновой и идентификации их производителя.

Установлено, что возможна идентификация таблеток кислоты аскорбиновой с определением их производителя при содержании кислоты аскобиновой в препарате от 25% и выше. Построена калибровочная модель, позволяющая определять процентное содержание кислоты аскорбиновой в таблетках. Количественный анализ рекомендуется проводить при содержании данного действующего вещества в таблетках на уровне не менее 25%.

3. Разработаны методики анализа субстанций и препаратов водорастворимых витаминов методом УФ-спектрофотометрии, которые можно использовать в разделах нормативной документации «подлинность» и «количественное определение». Относительная погрешность количественного определения тиамина гидрохлорида — 2,19%, рибофлавина — 1,19%, пиридоксина гидрохлорида — 1,27% и кислоты аскорбиновой — 2,26%.

4. Разработаны условия метода ТСХ и методики пробоподготовки субстанций и препаратов водорастворимых витаминов. Подобраны оптимальные составы подвижных фаз: для тиамина гидрохлорида — этилацетат-метанол-раствор аммиака 25% (10:2:3); для рибофлавина бутанол-метанол-бензол-вода (25:10:10:8); для пиридоксина гидрохлорида — пропанол-бутанол-вода-раствор аммиака 25% (10:7:1:2) и для кислоты аскорбиновой — метиленхлорид-этилацетат-этанол-муравьиная кислота (5:2:2:1). Разработан унифицированный состав подвижной фазы для комплексных водорастворимых витаминов группы В бутанол-ацетон-вода (25:5:9), позволяющий одновременно анализировать тиамин, рибофлавин, пиридоксин, никотинамид и фолиевую кислоту.

Разработанные методики могут использоваться для выявления фальсифицированных препаратов, не содержащие указанные на упаковке лекарственные вещества, и для анализа лекарственных витаминных препаратов по разделу нормативной документации «подлинность».

5. Установлено, что одновременный анализ лекарственных средств водорастворимых витаминов (рибофлавина, пиридоксина гидрохлорида и никотинамида) методом обращенно-фазовой ВЭЖХ возможен в подвижной фазе — вода: метанол: кислота уксусная ледяная (725: 270: 5) с добавлением гептансульфаната натрия 2 ммоль/л.

Разработанная методика ВЭЖХ предлагается для стандартизации и котроля качества субстанций и препаратов водорастворимых витаминов (рибофлавина, пиридоксина гидрохлорида и никотинамида) в лекарственной форме «таблетки» по разделам «подлинность» и «количественное определение». Относительная погрешность количественного определения рибофлавина — 1,79%, пиридоксина гидрохлорида — 9,46% и никотинамида - 4,61%.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Ся, Юй ., 2010 год

1. Андеосон А.А. Жидкостная хроматография аминосоединений. -Рига: Зинатие, 1984. 295 с.

2. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Титова А.В. Современное состояние проблемы применения ИК-спектроскопии в фавмацевтическом анализе лекарственных средств // Химико-фармацевтической журнал. 2008. - № 8. - С. 26-30.

3. Арзамасцев А.П., Яскина Д.С. Ультрафиолетовые и инфракрасные спектры лекарственных веществ: Вып. Т. М.: Медицина. — 1975. — 151 с.

4. Васильев А.В., Гриненко Е.В., Щукин А.О., Федулина Т.Г. Инфракрасная спектроскопия органических и природных соединений: Учебное пособие. СПб.:СПбГЛТА. - 2007. - 54 с.

5. Витамины и микроэлементы в клинической фармакологии // Под ред. В.А.Тутельяна. М.: Палея. - М, 2001.

6. Выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.А. Коновалов и др. // Химико-фармацевтический журнал. 2004. - № 3. — С. 48-51.

7. Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии (планареая хроматография): Т. 1,2. Пер. С англ. -М., 1999.

8. Гончаров А.И., Корнилов М.Ю. Справочник по химии. Киев: Вища школа, 1977. - 304 с.

9. Государственный реестр лекарственных средств. Электронная база данных «Гарант».

10. Государственная фармакопея РФ XII издания, 2007.

11. Гордон А., Форд Р. Спутник химика: Пер. С англ. — М: Мир, 1976.544 с.

12. Гороновский И.Т., Назаренко Ю.П., Некряч Е.Ф. Краткий справочник по химии. — Киев: Наукова Думка, 1974. — 992 с.

13. Громова О.А. Школа по витаминам и микроэлементам // Практика педиатра. — М., 2004.

14. Зинченко В. БИК-анализ в определении качества // ООО Люмэкс.

15. Карелин А.О., Ерунова Н.В. Витамины. -М., 2001.

16. Матасова С.А., Рыжова Г.Л., Дычко К.А. Химический состав сухого водного экстракта из шрота шиповника // Ж: «Химия растительного сырья». М., 1997. - Т.1. - № 2. - С.28-31.

17. Панков С.А., Борзенко А.Г. Использование ближней инфракрасной спектроскопии для анализа зерна пшеницы // Вестник Московского Университета. Серия 2: Химия. 2006. - № 3. - С. 174-176.

18. Родионова О.Е. Хемометрический подход к исследованию больших массивов химических данных // Россиский химический журнал. — 2006.-№2.-С. 128-144.

19. Сазонов Ю.Г., Панкратова К.Г., Щелоков В.И. Перспективы метода спектроскопии в ближней инфракрасной области для анализа сельскохозяйственных объектов // Сборник «30 лет ЦИНАО». — Москва, -1999.

20. Сафонова Е.Ф. Выбор оптимальных параметров разделения фосфолипидов в тонком слое сорбента / Е.Ф. Сафонова и др. // Химико-фармацевтический журн. 2002. - № 4. - С.41-43.

21. Смит А. Прикладная ИК-спектроскопия. Основы, техника, аналитическое применение. — М.: Мир, 1982.

22. Схунмакерс П. Оптимизация селективности в хроматографии: Пер. С англ. М.: Мир, 1989. - 399 с.

23. Ся Юй, Дорофеев B.JI. Анализ аскорбиновой кислоты методом ближней инфракрасной спекироскопии // Фармация. — 2010. — № 3, -С.9-12.

24. Харитонов Ю.Я. Аналитическая химия (аналитика). В 2 кн. — М.: Высш. шк., 2001. — 615 с.

25. Химическая энциклопедия: В 5 т. М: Сов. энцикл./ Большая Российская энцикл., 1988- 1998.

26. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: Пер. Со словацкого. — М.: Мир, 1980.

27. Шталь Э. Хроматография в тонких слоях: Пер. С нем. М.: Мир,1965.-508 с.

28. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. Фторхинолоны и цефалоспорины / А.П. Арзамасцев, B.JI. Дорофеев, А.А. Коновалов и др. М.: Издательский дом Русский врач. - 2003.- 132 с.

29. Aburjai Т. et al. Second derivative ultraviolet spectrophotometry and HPTLC for the simultaneous determination of vitamin С and dipyrone //J.132i i

30. Pharmazie. 2000. - № 55. - P. 751-755.

31. Albarra'n et al. Radiolysis of pyridoxine (vitamin B6) in aqueous solution under different conditions // Radiation Physics and Chemistry. 2008. -№77.-P. 605-611.

32. Ana Paula S. Paim et al. Automatic potentiometric flow titration procedure for ascorbic acid determination in pharmaceutical formulations // J. Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2002. — № 28.-P. 1221-1225.

33. Andrew E.R., Glowinkowski S. Molecular Dynamics in Solid Riboflavin as Studied by 1H NMR // Solid State Nuclear Magnetic Resonance. -2000.-№ 18.-P. 89-96.

34. Basic Tests for Drugs: Pharmaceutical substances, medical plant material and dosage forms. Geneva: WHO, 1998. - iv + 92 p.

35. Basic Tests for Pharmaceutical Dosage forms. Geneva: WHO, 1991. -iv+ 130 p.

36. Basic Tests for Pharmaceutical Substances. — Geneva: WHO, 1986. — iv + 206 p.

37. Bernard Fried, Joseph Sherma Practical Thin-layer Chromatography: A Multidisciplinary Approach. // CRC Press. 1996. - 275 c.L

38. Bernard Fried, Joseph Sherma Thin-layer Chromatography 4 edition // CRC Press. 1999. - 499 c. - P. 371-396.

39. British Pharmacopoeia 2007.

40. Budinova G., Dominak I., Strothe T. Quantification of Vitamin С Using FT-NIR Spectroscopy // Thermo Scientific. 2008.

41. Cataldi T.R.I, et al. Assessment of riboflavin and flavin content in common food samples by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection // Food Chemistry. 2003. - № 82. - P. 309-314.

42. Chen G, Ding X., Cao Z., J. Ye Determination of melatonin and pyridoxine in pharmaceutical preparations for health-caring purposes by capillaiy electrophoresis with electrochemical detection // Analytica133

43. Chimica Acta. 2000. - № 408. - P. 249-256.

44. Chen P., Ozcan M., Wolf W. R. Contents of selected В vitamins in NIST SRM 3280 multivitamin/multielement tablets by liquid chromatography isotope dilution mass spectrometry. // Anal. Bioanal. Chem. — 2007. № 389.-P. 343-347.

45. Chen. Z et al. High-performance liquid chromatography/electrospray ionization-mass spectrometry for simultaneous determination of taurine and 10 water-soluble vitamins in multivitamin tablets // Analytica. Chimica. Acta. 2006. - № 569. - P. 169-175.

46. Chienthavorna O. et al. Superheated water chromatography-nuclear magnetic resonance spectroscopy and mass spectrometry of vitamins // J. Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2004. - № 36. - P. 477-482.

47. Christopher J. Blake Analytical procedures for water-soluble vitamins in foods and dietary supplements: a review. // Anal. Bioanal. Chem. — 2007. -№389. -P. 63-76.

48. Concise Quality Control Guide on Essential Drugs, Vol. I: Colour Reactions / R.W.O. Jahnke, H. J. Kallmayer, C. Breyer et al. — Frankfurt: German Pharma Health Fund, 1998.

49. Concise Quality Control Guide on Essential Drugs, Vol. II: Thin-Layer Chromatography / R.W.O. Jahnke, P. Pachaly, N.P. Gobona et al. — Frankfurt: German Pharma Health Fund, 1998.

50. Counterfeit Drugs: Guidelines for the development of measures to combat counterfeit drugs. Geneva: WHO, 1999. — 60 p.

51. Counterfeit Drugs: Report of a Join WHO/IFPMA Workshop, 1992.

52. Counterfeit Drugs: Threat to Public Health: 55th World Health Assembly. Geneva: WHO, 2002.

53. Delgado-Zamarreno M.M. et al. Separation and simultaneous determination of water-soluble and fat-soluble vitamins by electrokinetic capillaiy chromatography // J. Chromatography A. 2002. - № 953. - P. 257-262.

54. Dietary Reference Intakes (DRIs): Recommended Intakes for Individuals, Vitamins. Food and Nutrition Board, Institute of Medicine, National Academies, 2004.

55. European Agency for the Evaluation of Medical Product's note.th

56. European Pharmacopoeia, 5 edition, 2005.

57. FIP Statement of Policy on Counterfeit Medicines // International Pharmacy Journal. 2003. Vol.17. - № 2. - P. 11-12.

58. Gatti R., Gioia M.G. Liquid chromatographic determination with fluorescence detection of B6 vitamers and riboflavin in milk and pharmaceuticals // Analytica. Chimica. Acta. — 2005. — № 538. — P. 135-141.

59. Gindy A. E. et al. HPLC and chemometric methods for the simultaneous determination of cyproheptadine hydrochloride, multivitamins, and sorbic acid // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. — 2004. -№35.-P. 703-713.

60. Gomis D.B., Gonzalez L.L.,Alvarez D.G Micellar electrokinetic capillary chromatography analysis of water-soluble vitamins // Analytica Chimica Acta. 1999. - № 396. - P. 55-60;

61. Guo Min, Lu Jianzhong Determination of vitamins В1: A review // J. Shizhen Guoyiguoyao. 2006. - № 17-7. - P. 1309-1311.

62. Heudi O. et al. Separation of water-soluble vitamins by reversed-phase high performance liquid chromatography with ultra-violet detection: Application to polyvitaminated premixes // J. Chromatogr. A. — 2005. — № 1070.-P. 49-56.

63. International Nonproprietary Names (INN) for Pharmaceutical Substances. List 1-90 of Proposed INN and list 1-51 of Recommended1351.

64. Iwase H. Use of an amino acid in the mobile phase for the determination of ascorbic acid in food by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Chromatogr. A. 2000. - № 881. - P. 317-326.j

65. Jack Cazes Encyclopedia of Chromatography 2 edition 2 Volume Set (Hardcover) // CRC Press. - 2005. - V. 1928. - P. 800-802.

66. Jahnke R.W.O. Counterfeit Medicines and the GPHF-Minilab for Rapid Drugs Quality Verification // Pharm. Ind. 2004. - № 10. - P. 1187-1193.

67. Jahnke R.W.O., Kiisters G., Fleischer K. Low Cost Quality Assurance of Medicines Using the GPHF-Minilab // Drug Inf. J. 2001. - P. 35-941.

68. Joseph Sherma, Bernard Fried Handbook of Thin-layer. Chromatography // CRC Press. 2003. - V.1016. - P. 589-606:

69. Jyh-Myng Zen et al. Amperometric determination of ascorbic acid at a ferricyanide-doped Tosflex-modified electrode // Electrochemistry Communications. 2000. - № 2. - P. 782-785.

70. Kenyon A.S. A Compendium of Unoffical Methods for Rapid Screening of Pharmaceuticals by Thin-Layer Chromatography. — St. Louis, MO: FDA, 1999.

71. Kenyon A.S. Rapid Screening of ТВ Pharmaceutical by Thin-Layer Chromatography. St. Louis, MO: FDA, 1999.

72. Klaus Albert Liquid chromatography-nuclear magnetic resonance spectroscopy (a review) // J. Chromatography A. — 1996. — № 856. — P. 199-211.

73. Kouimtzis Th. A. and Papadoyannis I. N. Determination of vitamins A, Bl, B2, D3 and С by densitometry of thin-layer chromatograms // J. MicrochimicaActa Wien. 1979. -№ 71-2. - P. 145-149.

74. Kowalska Т., Sherma J. Preparative Layer Chromatography // CRC Press. 2006. - V.424. - P. 238-241.

75. Kramer U., Bitsch R., HotzelD. Diinnschichtchromatographische Bestimmung von Riboflavin im Harn // J. Molecular Med. 1977. — № 55.-P. 243-244.

76. Lange's Handbook of Chemistry, 15th edition.

77. Laszlo R. Treiber Quantitative Thin-Layer Chromatography and Its Industrial Applications (Chromatographic Science) // Marcel Dekker Inc.- 1987. 376 c. - P. 195-203.

78. Leenheer de A.P., Willy E. Lambert, Jan F. Van Bocxlaer Modern Chromatographic Analysis of Vitamins 3rd edition // CRC Press. 2000. -616 c.

79. Li H.B., Chen F. Simultaneous determination of nine water-soluble vitamins in pharmaceutical preparations by high performance liquid chromatography with diode array detection. // J. Sep. Sci. 2001. — № 24.-P. 271-274.

80. Luypaert J., Massart D.L., Vander Heyden Y. Near-infrared spectroscopy applications in pharmaceutical analysis // Talanta. 2007. — № 72-3. - P. 865-883.

81. Lynch P.L.M., Young I.S. Determination of thiamine by high-performance liquid chromatography (Review) // J. Chromatogr. A.- 2000. № 881. - P. 267-284.

82. Markopoulou C.K. et al. An optimized method for the simultaneous determination of vitamins Bl, B6, В12, in multivitamin tablets by high performance liquid chromatography // J. Pharm. Biomed. Anal. 2002. -№30.-P. 1403-1410.

83. McGregor A. Counterfeig Drugs Flood Developing World // Lancet.1997.-350, 1690.

84. Monferrer-Pons L. et al. Micellar liquid chromatography determination of В vitamins with direct injection and ultraviolet absorbance detection // J. Chromatogr. A. 2003. - № 984. - P. 223-231.

85. Mutlu §ahin et al. Determination of ascorbic acid by polypyrrole potentiometric detector in ion chromatography // Biosensors and Bioelectronics. 2009. - № 24. - P. 3492-3497.

86. Nalini В., Narayanan S.S. Amperometric determination of ascorbic acid based on electrocatalytic oxidation using a ruthenium (III) diphenyldithiocarbamate-modified carbon paste electrode // Analytica Chimica Acta. 2000. - № 405. - P. 1-2.

87. Nielsen P., Rauschenbach P., Bacher A. Phosphates of riboflavin and riboflavin analogs: A reinvestigation by high-performance liquid chromatography // Analytical. Biochemistry. 2003. — № 130-2. P 359-368.

88. Nien P.C., Chen P.Y., Ho K.C. On the amperometric detection andelectrocatalytic analysis of ascorbic acid and dopamine using a poly(acriflavine)-modified electrode // Sensors and Actuators B: Chemical. 2009. - № 140. - P. 58-64.

89. Nishi H. Methods (a review) // J.Chromatogr. A. 1997. - № 780. - P. 243-264.

90. Nunez-Vergara Luis J. et al. Simultaneous determination of melatonin and pyridoxine in tablets by gas chromatography-mass spectrometry // J. Pharmaceutical and Biomedical Analysis. — 2001. № 26-5. - P. 929-938.

91. Okamoto H., Nakajima Т., Ito Y. Simultaneous determination of water-soluble vitamins in a vitamin enriched drink by an in-capillary enzyme reaction method // J. Chromatography A. — 2003. — № 983. P. 153-161.

92. Ollilainen V. et al. Certification of B-group vitamins (BI, B2, B6, and В12) in four food reference materials // J. Agric. Food Chem. 2001. -№49.-P. 315-321.

93. Panicker C.Y., Varghese H. Т., Philip D. FT-IR, FT-Raman and SERS spectra of Vitamin С // Spectrochimica Acta Part A. 2005. — № 65. — P. 802-804.

94. Pharmaceutical Analytics Science Group's guidelines.

95. Pharmacopoeia of The People's Republic of China 2010.

96. Postarie E. et al. Simultaneous determination of water-soluble vitamins by over-pressure layer-chromatography and photodenditometric detection // J. Pharmaceutical Sci. 1991. - № 80. - P. 368-370.

97. Ralf T. Otto et al. Lipase-catalyzed esterification of unusual substrates: Synthesis of glucuronic acid and ascorbic acid (vitamin C) esters // Biotechnology Letters. 1998. - № 20. - P. 1091-1094.

98. Ravi Bhushan, Vineeta Parshad Separation of vitamin В complex and folic acid using TLC plates impregnated with some transition metal ions // J. Biomed. Chromatogr. 1994. - № 8. - P. 196-204.

99. Ropte D., Zieloff K. Densitometric determination of nicotinamide in multivitamin preparations after thin layer chromatographic separation // J. Pharmazie. 1985 Nov;40(ll):793-4.

100. Sanchez J.M., Salvado V. Comparison of micellar and microemulsion electrokinetic chromatography for the analysis of water- and fat-soluble vitamins // J. Chromatography A. 2002. - № 950. - P. 241-247.

101. Tang. Y, Wu. M A quick method for the simultaneous determination of ascorbic acid and sorbic acid in fruit juices by capillary zone electrophoresis // Talanda. 2005. - № 65. - P. 794-798.139

102. The International Pharmacopeia, 4th edition. Vol. 5. Tests and general requirements for dosage forms, Quality specifications for pharmaceutical substances and tablets. — Geneva: WHO, 2008.

103. The Japanese Pharmacopoeia, 15th edition.

104. The United States Pharmacopoeia, 31л revision, 2008.

105. Vinas P. et al. Determination of vitamin B6 compounds in foods using liquid chromatography with post-column derivatization fluorescence detection // Chromatographic 2004. - № 59. - P. 381-386.

106. Vinas P. et al. Re versed-phase liquid chromatography on an amidestationary phase for the determination of the В group vitamins in baby foods // J. Chromatogr. A. 2003. - № 1007. - P. 77-84.

107. Wu Feng-wu, Ni Chun-lin, He Zhi-ke, Luo Qing-yao, Zeng Yun-e HPLC Determination of ascorbic acid using luminol-Cu (II) chemiluminescence-application to the analysis of juice beverage // Wuhan University J. Natural Sci. 2000. - № 5. - P. 339-341.

108. Wu Т., Guan Y., Ye J. Determination of flavonoids and ascorbic acid in grapefruit peel and juice by capillary electrophoresis with electrochemical detection // Food Chemistry. 2007. - № 100. - P. 1573-1579.

109. Yin C. et al. Rapid determination of water- and fat-soluble vitamins with microemulsion electrokinetic chromatography // J. Chromatography A.2008. -№ 1193.-P. 172-177.

110. Zeng W.J. et al. Identification With Significant Specificity of Vitamin B1 Tablets // J. Drug Standards of China. 2004. - № 5. - P. 25-26.1. БЛАГОДАРНОСТИ

111. От всего сердца выражаю благодарность своим научнымруководителям: Александру Павловичу Арзамасцеву. и Дорофееву Владимиру Львовичу, за неоценимую помощь и грамотное руководство моей работой.