Фитохимическое исследование плодов черемухи обыкновенной (Padus avium Mill.). Совершенствование оценки показателей качества тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Бекетов, Егор Владимирович

• Бекетов, Егор Владимирович
• кандидат фармацевтических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Бекетов, Егор Владимирович

Введение.

Глава 1 Обзор литературы.

1.1. Фармакогностическое описание. Химический состав черёмухи обыкновенной (Padus avium Mill.).

1.2. Методы анализа и перспективы использования в стандартизации плодов черёмухи обыкновенной растительных масел и различных групп биологически активных веществ гидрофобной природы.

1.3. Методы идентификации и количественного определения действующих веществ гидрофильной природы в плодах черёмухи обыкновенной.

1.4. Факторы влияющие на процесс экстракции.

Глава 2 Материалы и методы.

2.1. Материалы исследования.

2.1.1. Изучаемые объекты.

2.1.2. Вспомогательные материалы.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Подготовка плодов черёмухи обыкновенной к исследованию.

2.2.2. Методы, применяемые для разработки характеристик подлинности и показателей качества.

2.2.3. Методы применяемые для стандартизации липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной.

2.2.3.1. Экстракция липидного комплекса плодов черёмухи.

2.2.3.2. Определение физико-химических показателей качества липидного комплекса плодов черёмухи.

2.2.3.3. Определение состава жирных кислот.

2.2.3.4. Идентификация и количественное определение токоферолов.

2.2.3.5. Разделение и количественное определение фосфолипидов.

2.2.3.6. Идентификация и количественное определение каротиноидов

2.2.4. Методы применяемые для стандартизации водно-спиртового извлечения.

2.2.4.1. Получение водно-спиртовых извлечений.

2.2.4.2. Идентификация и количественное определение флавоноидов

2.2.4.3. Определение антиоксидантного потенциала.

2.2.5. Оптимизация и моделирование процесса экстрагирования с использованием ультразвука математико-статисти-ческими методами.

2.2.6. Методы" математической и статистической обработки экспериментальных данных.

Глава 3 Фармакогностическое изучение и разработка показателей качества измельчённых плодов черёмухи обыкновенной.

3.1. Макроскопический анализ.

3.1.1. Определение влажности.

3.1.2. Определение содержания золы общей и нерастворимой в 10% соляной кислоте.

3.1.3. Изучение термических характеристик исследуемого сырья, а также показателей влагосодержания и золы общей методом дериватографии.

3.2. Микроскопическое изучение измелчённых плодов черёмухи обыкновенной.

3.3. Определение содержания липидного комплекса.

Глава 4 Разработка и определение показателей качества липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной.

4.1. Определение физико-химических характеристик липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной.

4.2. Определение состава жирных кислот липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной.

4.3. Идентификация и количественное определение каротиноидов

4.4. Идентификация и количественная оценка токоферолов.

4.5. Качественный и количественный анализ фосфолипидов.

Глава 5 Разработка и определение показателей качества водноспиртовой фракции плодов черёмухи обыкновенной.

5.1. Ориентировочная фотохимическая оценка плодов черёмухи обыкновенной на присутствие основных классов биологически активных веществ.

5.2. Хроматографическое определение фенольных соединений в тонком слое сорбента.

5.3. Изучение фенольного комплекса плодов черёмухи обыкновенной методом ВЭЖХ.

5.3. Подбор условий и разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в плодах черёмухи обыкновенной.

5.4. Отработка условий фотометрической реакции комплексо-образования суммы флавоноидов плодов черёмухи обыкновенной со спиртовым раствором А1С1з.

5.5. Определения антиоксидантной активности водно-спиртового извлечения из плодов черёмухи обыкновенной.

Глава 6 Совершенствование процесса экстракции суммы флавоноидов из плодов черёмухи обыкновенной.

6.1. Изучение влияния ультразвука на выход, суммы флавоноидов из плодов черёмухи обыкновенной.

6.1.1. Влияние ультразвука на стабильность флавоноидов.

6.1.2. Разработка математической модели процесса ультразвуковой экстракции из плодов черёмухи обыкновенной.

6.1.3. Оптимизация процесса экстракции плодов черёмухи обыкновенной с использованием ультразвука.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фитохимическое исследование плодов черемухи обыкновенной (Padus avium Mill.). Совершенствование оценки показателей качества»

Актуальность темы

В настоящее время происходит расширения фармацевтического рынка за счёт использования лекарственного растительного сырья в различных потребительских формах в том числе и измельчённого. Наряду с поиском новых лекарственных растений, проводится углублённое изучение сырья, издавна применяемого в медицине. Эти исследования направлены, прежде всего, на определение структуры биологически активных веществ и разработку объективных методик стандартизации растительного сырья. Предложения по использованию новых растений в фармацевтической и пищевой промышленности часто связаны с трудностями по обеспечению сырьевой базы. Проблема сертификации требует совершенствования методик стандартизации, т.к. на многие виды лекарственного растительного сырья отсутствуют необходимые разделы "Качественные реакции" и "Количественное определение" не только на измельчённое, но и на цельное сырьё. В связи с этим остро встаёт проблема совершенствования методов стандартизации и контроля качества измельчённого лекарственного растительного сырья и необходимость в пересмотре существующей нормативной документации.

Плоды черёмухи обыкновенной (Padus avium Mill.) давно известны как ценное пищевое и лекарственное средство. Наличие огромной сырьевой базы на территории РФ ставит черёмуху в ряд самых перспективных объектов для изучения. Несмотря на это, сырьё черёмухи практически не изучалось с конца 50-х годов, хотя постоянно повышающиеся требования к качеству растительного сырья показывают необходимость количественной оценки содержания основных действующих веществ, а использование современных методов анализа позволяет проводить её с максимальной точностью и надёжностью.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью диссертационной работы явилось изучение фармакогностических и физико-химических характеристик плодов черёмухи обыкновенной с целью обоснования методов контроля и показателей качества нормируемых при стандартизации.

Для реализации поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

• Провести фармакогностический анализ измельчённых плодов черёмухи обыкновенной, как перспективного источника липидного комплекса с целью расширения ассортимента промышленного масличного сырья, богатого ненасыщенными жирными кислотами, токоферолами, каротиноидами, фосфолипидами, что позволит рассматривать его в качестве источника получения этих веществ и создании на их основе лекарственных препаратов.

• Определить оптимальные условия экстрагирования, позволяющие добиться максимального выхода липидного комплекса из плодов черёмухи обыкновенной и провести сравнительный анализ физико-химических характеристик и числовых показателей липидных комплексов из плодов черёмухи обыкновенной, полученных с использованием различных экстрагентов.

• Определить в липидных комплексах, полученных с использованием различных экстрагентов, наличие и количественное содержание биологически активных веществ (БАБ) с известной фармакологической активностью (жирных кислот, токоферолов, каротиноидов и фосфолипидов). На основании полученных данных обосновать необходимые показатели и методы их стандартизации для исходного сырья (плоды черёмухи) и продуктов его переработки (липидный комплекс).

• Провести качественный анализ водно-спиртового извлечения из плодов черёмухи обыкновенной на наличие основных групп БАВ, обладающих антиоксидантной активностью, и определить их количественное содержание.

• Исследовать возможность повышения качества водно-спиртовых извлечений из плодов черёмухи обыкновенной за счёт совершенствования процесс экстракции.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Проведено микроскопическое исследование и определены основные диагностические признаки порошка плодов черёмухи обыкновенной, разработаны показатели качества плодов.

На основании результатов оценки масличности по методам Сокслета, Фолча и Блая предложен показатель количественного содержания липидного комплекса. Разработаны оптимальные условия получения липидного комплекса с использованием различных условий экстрагирования и различных экстрагентов.

Методом ГЖХ установлен жирнокислотный состав липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной и проведена его количественная оценка.

Проведен сравнительный анализ физико-химических характеристик и числовых показателей липидных комплексов, полученных различными методами экстрагирования, а также идентификация и количественное определение токоферолов, каротиноидов и фосфолипидов.

Разработаны оптимальные условия экстрагирования водно-спиртового извлечения из плодов черёмухи обыкновенной, проведён его качественный анализ и определено значение антиоксидантной активности. Проведено изучение качественного состава водно-спиртового извлечения методом ВЭЖХ. На базе полученных данных разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в плодах черёмухи обыкновенной методом дифференциальной спектрофотометрии.

Проведена оценка влияния ультразвука на качественный и количественный выход БАВ из плодов черёмухи обыкновенной с последующей разработкой математической модели процесса ультразвукового экстрагирования суммы флавоноидов из исследуемого сырья.

На основании данных исследования качественного и количественного состава водно-спиртовой фракции плодов черёмухи обыкновенной рекомендовано включение водно-спиртового экстракта из данного сырья в комплексное профилактическое средство применяемое в стоматологической практике при заболеваниях пародонта, принятое на рассмотрение ВНИИГПЭ (заявка на изобретение №110.390 от 07.04.04)

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Разработан опытно-промышленный регламент на производство липидного комплекса черёмухи обыкновенной, утверждённый АО «Фармхим», г. Воронеж, (6 октября 2004 г.).

Разработаны показатели качества порошка плодов черёмухи обыкновенной, включённые в проект ТУ для использования в качестве сырьевого источника при производстве эликсира зубного.

Результаты исследований внедрены в процесс контроля качества измельчённых плодов черёмухи в производстве фирмы «Фито-ЭМ» (10.10.2004)

Разработанные методики микроскопического анализа плодов черёмухи обыкновенной и количественного определения суммы фенольных соединений апробированы в ОКК ОАО «Красногорсклексредства».

Проведено внедрение способа «Получение водно-спиртового экстракта плодов черёмухи обыкновенной с использование ультразвука» в ГУЗ г.Москвы «Центр сертификации и контроля качества лекарств Департамента здравоохранения г. Москвы» (15.12.2004)

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ ВЫДВИГАЕМЫЕ НА ЗАЩИТУ

• Результаты микроскопического определения основных диагностических признаков порошка плодов черёмухи обыкновенной.

• Данные по составу высших жирных кислот, токоферолов, каротиноидов, фосфолипидов в липидном комплексе плодов черёмухи обыкновенной.

• Данные по качественному составу водно-спиртового извлечения плодов черёмухи обыкновенной. - - .

• Методика количественного определения суммы флавоноидов.

• Результаты исследования влияния ультразвука на выход суммы флавоноидов из плодов черёмухи обыкновенной.

• Математическая модель ультразвуковой экстракции водно-спиртового извлечения из плодов черёмухи обыкновенной.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Основные результаты исследования доложены на:

• IX, X Российских национальных конгрессах "Человек и лекарство" (Москва, апрель 2002, май 2003 г.);

• VI съезде Международном съезде "Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения" г. Санкт-Петербург. -2003;

• Межкафедральная конференция ММА им. И.М.Сеченова 2004 г. Москва;

• Совместного заседания секции по поиску, разработке и технологии фитопрепаратов Учёного Совета ВИЛАР и кафедры общей химии стоматологического факультета Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова 2005 г. Москва.

ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, в том числе 5 статей, 2 тезиса, 1 патент.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста и состоит из: введения, обзора литературы (Глава 1), описания материалов и методов, 4 глав собственных исследований, выводов, библиографического указателя и приложений. Работа содержит 43 таблицы и 17 рисунков. Библиографический указатель включает 177 источников, из них 44 на иностранном языке.

Во введении сформулированы актуальность темы, цель и задачи исследования, научная новизна и практическая значимость работы.

В первой главе изложены ботанико-фармакогностическое описание сырья черёмухи обыкновенной, сведения о биологически активных веществах, фармакологическом действии, применении в официальной, народной медицине, а также приводятся сведения о современных методиках идентификации и количественного определения основных действующих веществ черёмухи обыкновенной, в том числе о путях повышения качества извлечений из лекарственного растительного сырья.

Во второй главе приведены объекты исследования и методы их изучения.

Третья глава включает фармакогностическое изучение и вопросы стандартизации измельчённых плодов черёмухи обыкновенной.

В четвёртой главе приводятся данные по получению липидного комплекса плодов черёмухи обыкновенной и изучению его качественного и количественного состава.

Пятая глава посвящена качественному и количественному определению основных действующих веществ водно-спиртового извлечения плодов черёмухи обыкновенной.

В шестой главе изложены результаты изучения влияния ультразвука на повышение качества водно-спиртового извлечения плодов черёмухи обыкновенной. Приводятся данные по разработке математической модели процесса экстракции суммы флавоноидов с использованием ультразвука методами математического планирования эксперимента.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Бекетов, Егор Владимирович

Общие выводы:

1. Проведено фармакогностическое изучение и разработаны характеристики подлинности, показатели качества и их нормы для измельчённых плодов черёмухи обыкновенной.

2. Предложена методика контроля качества и определено содержание липидного комплекса в составе плодов черёмухи обыкновенной. Относительная ошибка методики составляет +6%. Установлено, что плоды черёмухи можно отнести к высокомасличному сырью (содержание липидного комплекса не менее 13,0%).

3. Изучены физико-химические характеристики и разработаны показатели качества липидных комплексов плодов черёмухи обыкновенной в соответствии с требованиями общей статьи ГФ X "Масла жирные".

4. Проведена идентификация и количественная оценка каротиноидов, токоферолов и фосфолипидов в липидных комплексах плодов черёмухи обыкновенной полученных экстракцией различными экстр агентами Подготовлен проект промышленного регламента на производство «Масла плодов черёмухи» и утверждён ООО «Фармхим» г. Воронеж (06.10.2004).

5. Проведена качественная оценка содержания основных групп БАВ в гидрофильной фракции плодов черёмухи обыкновенной. Обнаружены флавоноиды, антоцианы, фенолкарбоновые кислоты.

6. Разработана методика количественно определения суммы флавоноидов. Предложен показатель содержания суммы флавоноидов не менее 2,1%. Проведена оценка антиоксидантного потенциала водно-спиртового извлечения из плодов черёмухи обыкновенной. Разработанные методики идентификации и количественного определения суммы флавоноидов включены в проект ТУ «Порошок плодов черёмухи обыкновенной» для использования в качестве сырьевого источника при производстве эликсира

--------зубного.------ - --------------------- ------------------- - ------

7. С помощью методов математико-статистического планирования эксперимента изучено воздействие ультразвука на процесс извлечения суммы флавоноидов из плодов черёмухи обыкновенной. Составлена математическая модель процесса экстракции водно-спиртового извлечения с использованием ультразвука. Методом крутого восхождения проведена оптимизация технологии экстракции позволившая повысить выход суммы флавоноидов на 40% при существенном уменьшении времени экстрагирования (в 3 раза) по сравнению с традиционной методикой экстракции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Бекетов, Егор Владимирович, 2005 год

1. Абрамзон А.А. Поверхностно-активные вещества, свойства и применение. -JI.-1975.-c. 120-144.

2. Адлер Ю.П., Маркова Е.В., Грановский Ю.В. Планирование эксперимента при поиске оптимальных условий // М. Наука.-1971.-283 с.

3. Аналитическая хроматография / Под ред. Сакодынского К.И. -М.: Химия, 1993. 63 с.

4. Анциферов А.В. Плоды черемухи как сырье для пищевой промышленности // Науч.обеспечение соврем.технологий пр-ва, хранения и перераб.плодов и ягод в России и странах СНГ.-М.-2002.-С.248-251

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертизы и госконтроля лекарственных средств. МЗРФ. -2001. -№1. -с. 28-29.

6. Аррутюнян Н.С. Фосфолипиды растительных масел / Арупонян Н.С., Корнена Е.П. М.: Агропромиздат. - 1986. - 256 с.

7. Ауэрман Л.Я. Исследование поверхностно-активных свойств фосфатидного концентрата / Пучкова Л.И., Прокушенкова Л.И. // Известия вузов. Сер. Пищевая технология. -1990. ~-№Г5~ с. 75-79.

8. Багирова В.Л. О стандартизации лекарственных средств на современном этапе / Багирова В.Л., Садчикова Н.П., Ковалева Е.А. // Химико-фармацевтический журнал. -2000. -№1. -с. 46-48.

9. Базыкина Н.И., Николаевский А.Н., Филиппенко Т.А., Калоерова В.Г. Оптимизация условий экстрагирования природных антиоксидантов из растительного сырья // Химико-фармацевтический журнал.-2002 том 36.-№2.-С.46-49.

10. Баукова Н.А. Белки и сапонины в липидном препарате, полученном при экстракции соевой муки /Баукова Н.А., Алексеева С.Г., Сорокоумова Г.М.// прикладная биохимия и микробиология.- 2002,- т. 38. №2. -с. 183-189.

11. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: в 2 частях. -Пятигорск. -2003. -720 с.

12. Беликов В.В., Точкова Т.В. Реакция комплексообразования в анализе флавоноидов. Фенольные соединения и их физиологические свойства. Алма-Ата, Наука, 1973. - С. 168-172.

13. Белобородое В.В. Основные процессы производства растительных масел.-М.: Пищевая промышленность. -1966. с. 220-302.

14. Бергельсон Л.Д. Препаративная биохимия липидов / Бергельсон Л.Д., Дятловицкая Ю.Г. -М.: Наука, 1981.-370 с.

15. Березкин В.Г. Количественная тонкослойная хроматография / Березкин В.Г., Бочков Н.С. -М.: Наука, 1980. -183 с.

16. Биогенез природных соединений. -М.: Мир, 1965. -с. 141-164.

17. Биология и фитоценотическая роль черемухи обыкновенной (Prunus padus L.) в разных частях ареала/ Буланая М.В//М.-1989.-17 с

18. Блажей А., Шутый Л., Фенольные соединения растительного происхождения: Пер. со словац. М.: Мир, 1977. - 240 с.

19. Буланая М;ВГБиология и фйтоценотическая роль черёмухи обыкновенной (PRUNUS PADUS L. ) в разных частях ареала // Автореф. дис.на соиск.учен. степ, канд.биол. Наук .-Моск. гос. пед. ин-т им. В. И. Ленина.-М.-1989

20. Василенко Н.А. Проблемы и перспективы производства фосфолипидов /

21. Василенко И.А., Краснопольский Ю.М., Степанов А.Е., Швец В.И. // Химико-фармацевтический журнал. -1998. -№ 5. -с.9-15.

22. Вишняков А.Б. Комплексная переработка пшеницы с получением биологически активных продуктов / Вишняков А.Б., Власов В.Н., Новицкий О.А., Бабенко П.П. // Хранение и переработка зерна. -2000. -№12. -с. 52-58.

23. Вишня и черемуха в Западной Сибири / Симагин B.C.// Новосибирск.-2000.- 66 с.

24. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии / под ред Хеншена А. -М: Мир, 1988. -688с.

25. Гааль Э. Электрофорез в разделении биологических макромолекул / Гааль Э., Медьерши Г., Верецки JL -М.: Химия, 1982. -с." 67-85.

26. Гаврилова Ж.О. Наследование биохимических особенностей плодов при гибридизации вишни с черемухой // Молодые ученые садоводству России.-М,-1995.-С.20-23

27. Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии: в 2 т. -М.: Мир. -2000.

28. Гельферих Ф. Иониты. Основы ионного обмена. -М.: Изд. Иностранной литературы. -1962. -490 с.

29. Георгиевский В.П., Казаринов Н.А., Казрыев М.О. Физико-химические методы анализа биологически-активных веществ растительного происхождения. -Ашхабад, Ылэм, 1976. С. 240-250.

30. Георгиевский В.П., Казаринов Н.А. Литвиненко А.Л. Хромато-оптические методы в анализе фитохимических препаратов растительного сырья// Рига.-1974

31. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений// Наука.-Новосибирск.-1990.-336 с.

32. Голдовский A.M. Теоретические основы производства растительных масел. -М.: Пищпромиздат, 1958. -л448 с.

33. Государственная фармакопея СССР. -М.: Медицина. -10-е изд. -1968.400 с.

34. Государственная фармакопея СССР. -М.: Медицина. -11-е изд. -1987. -336 с.

35. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5472-50. Масла растительные. Определение запаха, цвета и прозрачности. -1990. -с. 9-12.

36. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5474-66. Масла растительные. Метод определения золы. -1987. -с. 13-23.

37. Государственный Стандарт Российской Федерации. 50456-92. Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания влаги и летучих веществ.-1992.-с. 192-194.

38. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5475-69. Масла растительные. Определение йодного числа. -1987. -с. 20-23.

39. Государственный Стандарт Российской Федерации. 50457-92. Масла растительные. Методы определения кислотного числа. 1992. - с. 177180.

40. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5478-90. Масла растительные и натуральные жирные кислоты. Метод определения числа омыления. -1992. с. 39-41.

41. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5482-90. Масла растительные. Метод определения показателя преломления. -1992. -с. 5657.

42. Государственный Стандарт Российской Федерации. 5477-93. Масла растительные. Метод определения цветности. -1995. -с. 33-37.

43. Государственный Стандарт Российской "Федерации. 5479-64. Масла растительные и натураьные жирные кислоты. Определение неомыляемых веществ. -1995. -с. 42-44.

44. Государственный Стандарт Российской Федерации. 51487-99. Масларастительные. Метод измерения перекисного числа. -1999. -с. 89-93.

45. Государственный Стандарт Российской Федерации. 51483-99. Масла растительные и жиры животные. Определение методом газовой хроматографии массовой доли метиловых эфиров индивидуальных жирных кислот к их сумме. 2001. - с. 153-160.

46. Государственный Стандарт Российской Федерации. 300623-98. Масла растительные. Метод определения массовой доли жирных кислот к сумме триглицеридов растительных масел. Приложение Б. -1998. -с. 123-129.

47. Гринкевич Н.И., Сафронович JI.H. и др. Химический анализ лекарственных растений. М„ 1983. - С.130-133

48. Грошова Н.А. Сравнительное изучение некоторых методов экстракции лекарственных растительных средств// Автореферат канд.фарм.наук.-1968

49. Джавадов А.К. Определение фосфолипидов методом ТСХ с последующей денситометрией// Лабораторное дело. -1989. №2. -с. 2831.

50. Еремин В.Н. Основы химической термодинамики. -М.: Высшая школа, 1974.-е. 142-145.

51. Еремин Г.В., Симагин B.C. Исследование систематического положения черемухи Маака Padus Maackii (Rupr.) Кот. в связи с ее селекционным использованием // Науч.-техн. бюл. ВИР.-1986.-С.44-49

52. Жуков А.В. О суммарном содержании полярных липидов в семенах сои / Жуков А.В., Верещагин А.Г. // Биохимия. 1975. -т. 40. -вып. 5. -с. 899908.

53. Землянухин А.А. Практикум по биохимии: Учебное пособие. -Воронеж: ВГУ,1993.-188с.

54. Золотов Ю.А. Основы аналитической хроматографии / Золотов Ю.А., Дорохова Е.Н., Фадеев В.И. : в 2 т. -М.: Высшая школа, 1996. -383 с.

55. Иванов Н.Н., Краснопольский Ю.М., Сенников Б.А., швец В.И. // Вопросы медицинской химии. -1984. -т.ЗО. -№ 2. -с.71-74.

56. Измайлов Н.А., Шрайбер М.С. // Фармация. -1938. -с. 1-7.

57. Ионообменные методы очистки веществ / Под ред. Г.А. Чикина, О.Н. Мягкого. -Воронеж: ВГУ, 1984. -372 с.

58. Инфракрасная спектроскопия полимеров / Дехант И, Данц Р., Киммер В. -М.: Химия, 1976. -471 с.

59. Казицина JI.A. Применение УФ-, ИК-, ЯМР- и масс-спектроскопии в органической химии / Казицина Л.А., Куплетская М.Б. -М.: МГУ, 1979. -238 с.

60. Кейтс М. Техника липидологии. -М.: Мир, 1975. 324 с.

61. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: в 2 т. -М.: Мир, 1981. -т. 1. -656 с.

62. Кожевников А.П., Петров А.П., Широбокова Е.Н. Черемуха виргинская новый перспективный вид для уральского садоводства Пущино // Второй междунар.симп. "Новые и нетрадиц.растения и перспективы их практ.использ.":Материалы докл.-1997.-С. 437-438

63. Количественный анализ хроматографическими методами / под ред. Кэц Э.-М.:Мир, 1990.-320 с.

64. Корнена Е.П. Ассоциация фосфолипидов в неполярных растворителях / Корнена Е.П., Пономарева Н.А., Арутюнын Н.С. // Масло-жировая промышленность. 1984. -№ 6. - с. 15-16.

65. Корнена Е.П. Характеристика жирных кислот и неомыляемых веществфосфолипидов растительных масел / Корнена-Е.П., Пономарева Н.А. //- -Известия вузов. Сер. Пищевая технология. -1984. -№ 2. - с. 19-21.

66. Куминов Е.П. Анциферов А.В. Оценка качества плодов черемухи // Состояние и перспективы развития нетрадиц.садовых культур.-Воронеж.-2003.-С. 171-177.

67. Куминов Е.П. Черемуха ценная садовая культура // IV Междунар.симп."Новые и нетрадиц.растения и перспективы их использ.":Тр.- М.- 2001.-С. 186-188

68. Кучеренко Н.Е. Липиды / Кучеренко Н.Е., Васильев А.Н. -Киев, 1985.

69. Кучеров Е.В. Сезонный ритм развития Padus avium Mill, в Башкирии// Раст.ресурсы.-1999.- С.67-73

70. Левгерова Н.С., Джигадло Е.Н. Использование вишне-черемуховых гибридов для продуктов переработки с повышенной пищевой безопасностью // Пробл.и перспективы отдален.гибридизации плодовых и ягод.культур.-Мичуринск.-2000.-С. 64-65

71. Либенсон Г.С. Физико-химические свойства карбоксильных катионитов. -М.: Химия, 1969.-112 с.

72. Литгл Л. Инфракрасная спектроскопия адсорбционных молекул. М.: Мир, 1969.-514 с.

73. Лобанов В.Г. Влияние природы адсорбента на качество масел. / Лобанов -В.Г., Каракай М.С., Щербакова Е.В. // Известия вузов. Пищевая технология. -2001. -№ 5-6. -с. 92-93.

74. Лопатин Б.И. Биологически активные эмульсии в эксперименте и клинике

75. Лопатин Б.И., Коростин Б.И. // Сб. науч. Тр. ЦНИИ гематологии и переливания крови. -М. -1983. -с. 179-185.

76. Магомедов И.М. Фотосинтез и органические кислоты. -Л.: ЛГУ, 1988. -203 с.

77. Мартовщук В.И. О межфазной активности и мицелообразовании лецитина в неполярных жидкостях / Мартовщук В.И., Мгебришвили Т.В., паукова А.В. // Масло-жировая промышленность. 1978. -№ 6. -с. 14-16.

78. Марцинович Р.В., Солдатов B.C., Даванков В.А. // Журнал физической химии. -1977. -т. 51. -№ 6. -с. 1565-1568.

79. Масло облепиховое. ФС 42-3873-99.

80. Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. -М.: ООО изд. Новая волна. 2002. 540.

81. Мгебрешвили Т.В. Влияние гидратируемых и негидратируемых фосфорсодержащих веществ на электропроводность подсолнечного масла / Мгебришвили Т.В., мартовщук В.И., Артюшков В.Н. // Масло-жировая промышленность. -1976. -№ 2.-е. 1-15.

82. Мелешко В.П. Инфракрасные спектры поглощения ионитов / Мелешко В.П., Углянская В.А., Завьялова Т.А. -Воронеж: ВГУ, 1972. -80 с.

83. Мецлер Д. Биохимия. -М.: Мир, 1980. -т. 3. =с. 320-404.

84. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. -М., 1978. -656 с.

85. Назарова А. А. Количественная оценка фосфолипидов методом ВЭТСХ с использованием компьютерного сканирования / Назарова А. А., Ковалева

86. Накамура С. Антиокислительные свойства токоферола // Ню фудоинвасуточи «New Food Ind.». -1980. -т.22. -с. 34-36.

87. Наканиси К. Инфракрасная спектроскопия и строение органических соединений. -М.: Мир. 1965. 216 с.

88. Нестерова О.В. Фармакогностическое изучение видов пищевогорастительного сырья с целью получения биологически активных веществ липидной природы: автореф. дис. док. фарм. наук. -М. -1997. 59 с.

89. Оборотова Н.А. Липосомные лекарственные формы в клинической онкологии // Успехи современной биологии. -2001. -т. 121. -№ 5. -с. 464474.

90. Общая органическая химия / Под ред. Бартона П., Оллиса У. -М.: Химия, -т. 11: Липиды, углеводы, белки. -1986. -с. 23-65.

91. Пахомов В.П., Копейкина А.В., Маркарян А. А. Определение In vitro фитоантиоксидантного потенциала лекарственных растений // Российский аптеки.-2003.-№5.-С. 64-66

92. Пахомов В.П., Яшин Я.И., Яшин А.Я. Аскорбиновая кислота как природный витамин антиоксидант и методы её определения // Перспективы традиционной медицины.-2004 №1.-С.26-31

93. Пиментел Д. Водородная связь / Пиментел Д., Мак-Клеплан О. -М.: Мир, 1964.-381 с.

94. Поверенный A.M. Влияние натуральных антител фосфолипидов на антитромбогенную активность стенки поверхностных сосудов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. -т. 129. - № 4.-е. 417-419.

95. Пономарева Н.А. Дипольные характеристики фосфолипидов растительных масел / Пономарева Н.А., Корнена Е.П., Арутюнян Н.С. // Известия вузов. Сер. Пищевая технология. -1982. -№ 4. -с. 106-108.

96. Практическая газовая и жидкостная хроматография: учебное пособие /----Столяров Б.В., Савинов A.F., Витенберг А.Е.- СПб.: СпбУ, 1998.-c.612.

97. Преображенский Н.А. Химия биологически активных соединений / Преображенский Н.А., Евстигнеева Р.П. М.: Наука. 1976. - с. 320-334.

98. Прозоровский А.С., Литвинова Т.П., Сиекольников Л.И., Ультразвук ивозможности его применения в фармацевтической практике, ММА им. И.М. Сеченова, Москва, 1966. -41с

99. Пчелкин В.П. Состав жирных кислот эпидермиса после его обработки препаратами масла облепихи и шиповника // Химико-фармацевтический журнал. -1999. -№8. -с.32-33.

100. Ребиндер П.А. Взаимосвязь поверхностных и объемных свойств растворов ПАВ // Сб. Успехи коллоидной химии. -М.: Наука, 1973. -98 с.

101. Рудаков О.Б. Количественная тонкослойная хроматография фосфолипидов / Рудаков О.Б., Селеменев В.Ф., Сафонова Е.Ф. // сорбционные и хроматографические процессы. -Воронеж: ВГУ. 2002. -т. 2. -вып. 2.

102. Руководство по современной тонкослойной хроматографии / Под ред. Ларионова О.Г. М. -1994. -311с.

103. Саморядова А.Б. Изучение химического состава масла кукурузных зародышей и разработка ветеринарного препарата- натрия селенита на его основе: автореф. дис. канд. фарм. наук. Пятигорск. -2003. -22 с.

104. Самсонов Г.В. Сорбционные и хроматографические методы физико-химической биотехнологии. -Л. -1986. -265 с.

105. Сафонова Е.Ф. Физико-химические основы хроматографического выделения фосфолипидов из растительных объектов / Сафонова Е.Ф., Селеменев В.Ф., Ермошевич О.Н. // Сорбционные и хроматографические процессы. -Воронеж: ВГУ, 2001. -т. 1. -вып. 3.

106. Селеменев В.Ф. Способ разделения фосфолипидов. Патент № 2169734 от 27 июня 2001 г.

107. Селеменев В.Ф. Физико-химические основы сорбционных и мембранных методов выделения и разделения аминокислот. -Воронеж; ВГУ.-2001.-300 с.

108. Симагин B.C., Еремин Г.В. О разнообразии черемухи кистевой в Евразии // Флора и растительность Алтая.-1999.-С.76-85.

109. Симагин B.C., Кукушкина Т.А., Шевцова И.В. Химический состав плодов видов и межвидовых гибридов черемухи // V Междунар.симп."Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использование ":Материалы.-М.-2003.-С.335-337

110. Скороход Т.В., Родина С.Ф., Симагин B.C. Пищевая ценность плодов Padus avium Mill, и P.virginiana (L.) Mill, и продуктов их переработки в связи с перспективами культивирования // Раст.ресурсы.-1993.-С. 49-55

111. Сливкин А.И. Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств / Сливкин А.И., Селеменев В.Ф., Суховерхова Е.А. -Воронеж: ВГУ. -1999. -368 с.

112. Соколова Е.А. Значение признаков анатомического строения черешка для систематики родов Cerasus Mill, и Padus Mill. (Rosaceae) // Сб. науч. тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции ВИР.-1989.-С. 109-112

113. Стрельцина С.А., Царенко Н.А. Изучение фенольных соединений в плодах видов рода Padus Mill // Науч.-техн.бюл.ВИР.-1992.- С.74-77

114. Фадеева Н.В. Технология экстрактов из биомассы Padus avium mill // Дис.канд.техн. наук.- Красноярск.-2000

115. Фадеева Н.В., Рубчевская Л.П., Репях С.М. Комплексная технология переработки вегетативной части Padus avium Mill // Непрерыв.экол.образование.- Красноярск.- 1998.-С.80-81

116. Фадеева Н.В., Рубчевская Л.П., Репях С.М., Аминокислотный состав белковдревесной зелени Padusavium Mill, Химия раститёльного сырья, 1998г№2, С. ~ 49-51

117. Филиппович Ю.Б. Основы биохимии. М.: Наука, 1985. -с. 387-394.

118. Фомичева Е.А., Лякина М.Н., Костенникова З.П. Количественное определениефлавоноидов в гомеопатической настойке чистотела методом спепсрофотометрии (Сообщение 2) // М.-Фармация.-№5 2001.-С.13-15

119. Фролов Ю.Г. Курс коллоидной химии. Поверхностные явления и дисперсные системы. -М.: Химия, 1989. -463 с.

120. Хакимова Д.Р., Попов Д.М. Пути повышения качества препаратов боярышника // М.-Фармация.-1995 №3.-С.31-34

121. Хлонов Ю.П. Черемуха обыкновенная Padus avium Mill, в Сибири. -Ботан.исслед.Сибири и Казахстана.-1999.-С. 112-119

122. Хмелев В.Н., Попова О.В. Многофункциональные ультразвуковые аппараты и их применение в условиях малых производств, сельском и домашнем хозяйстве: научная монография/ Алт. Гос. Техн. Ун-т. им. И.И. Ползунова. Барнаул: изд. АлтГТУ, 1997. - 160 с

123. Хроматография в тонких слоях / Под ред. Шталя Э. Пер. с нем. под ред. Чмутова. -М.: Мир. 1965. -508 с.

124. Цюрупа М.П., Даванков В.А., Кривоносов Л.Г. // Прикладная биохимия и микробиология. -1995. -т. 21. -№ 3. -с. 72-77.

125. Цюрупа М.П., Ходченко Е.Л., Даванков В.А. // Коллоидный журнал. -1983. -т. 45. -№ 5. -с. 1016-1018.

126. Чибилиев Т.Х., Вайнштейн В.А., Сапожкова С.Н. //Химико-фармацевтический журнал. -1998. -т.32. -№ 2. -с.38-41.

127. Шаршунова М.И. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: в 2 ч. / Пер. со словацкого. Под ред. Березина В.Г., Соколова С.Д. -М.: Мир, 1980. -621 с.

128. Шехтёр Ю.Н. Маслорастворймые Поверхносто-активные вещества: -М.: Химия, 1970. -302 с.

129. Экспериментальные методы химической кинетики / под ред. Эммануэля а. -М.: Высшая школа, 1971.-171 с.

130. Эрнандес Е.И. Липидный барьер кожи и косметические средства / Эрнандес Е.И., марголина Л.А. // Косметика и медицина. -1998. -с. 176.

131. Это Канъити. Составы для лечения заболеваний слизистой полости рта. Япония. Патент № 59-178508 от 24 марта 1986 г.

132. Allen R.G.// Biochem. J. -1940. -v.34. -N 858.

133. Alving C.R. Pharmacol. Ther. -1983. -v. 3. -N 22. -p. 407-424.

134. Archarov A.I., Gukderman K.I. Phosphatidylcholin effects on cell membrans and transport of cholesterol, Verlag, Bingen, Rhein/ -1988.

135. Batlett G.R. // J. Biol. Chem. -1959. -v.234. -N 466.

136. Berrige M.J. Ann. Rev. Biochem. -1982. -N 56. -p. 159-193.

137. Briand R.L., Hard S., Blass K.G. //J. Chrom. -1981. -293. -p. 277-284.

138. Charles E., Langlcy С. Экстракция масла из растительного материала. Патент США № 5408924, А 950425 (9522) 1997.

139. Chen R.G., Weng S.A., Zhang D.S. // Acta Biochem. Biophys. Sinica. -1988. -v. 3. -N 20. -p. 343-370.

140. Chen S.S., Kow A.E. //J. Chrom. -1982. -v. 227. -p. 25-31.

141. Elworthy P.H. The Interection of water with Lecitin Micelles in Benzen // H. Phys. Chem. -1964. -v. 68. -N 12. -p. 3448-3452.144. Ёигореап Pharmacopoeia. 3 th Edition, 200Г Suppliment. Council of Europe: Strasbourg. -2001. -p. 46-51.

142. Folch I. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues //J. Biol. Chem. -1957. -v. 226. -p. 497-505.

143. Gregoriadis S.G., Ann N.Y. Acad. Sci. -1978. -v. 308. -N 3. -p. 343-370.

144. Harborn J.B. The flavonoids. Advances in research science //London.-NY.-1980.-P.250

145. Hendrickson H.S. Stabilities metal complex of phospholipids / Hendrickson H.S., Fullington P.G. //Biochemistry. -1965. -v.4. -N 8. -p. 1599-1605.

146. Juliano R.L., Ann N.Y. // Acad. Sci. -1987. -v. 507. -364 p.

147. Jung HA, Kim AR, Chung HY, Choi JS. In vitro antioxidant activity of some selected Prunus species in Korea // Faculty of Food Science and Biotechnology, Pukyong National University.- Pusan.-P.608-737

148. Kader S.A., Proebsting E.L. Freezing behavior of Prunus,subgenus Padus,flower buds// J.Am.Soc.Hortic.Sc.-1992.-P. 955-960

149. Kaiser R.E. // J. High Resolut. Chromatogr. -1978. -v. 1. -N 3. -p. 164-168.

150. Kajimoto G. Влияние токоферола на пищевое качество термически окисленных масел / Kajimoto G., Yucadacu N. // J. Jap. Oil Chem. Sos. -1972. -v. 21. -N 6. -p. 307-313.

151. Kirby C.J., Whittle C.J., Rigby N. // Int. J. Food. Sci. Tech. -1991. -N 26. -p. 437-449.

152. Kohda H., Tanaca S., Yamaoca Y. // Chem. end Pharm. Bull. -1990. -v. 38. -N12.-C.3380-3383.

153. Kumarasamy Y, Cox PJ, Jaspars M, Nahar L, Sarker SD. Comparative studies on biological activities of Prunus padus and P. spinosa.// Phytopharmaceutical Research Laboratory, School of Pharmacy, The Robert Gordon University.-2004.-P.77-80

154. Lamer E., Bodalski T. // Disert. Pharmac. Pharmacol.-1986.-Vol.20.-№6.-P.623

155. Lederer M.ll J. Chrom. -1989. -v. 488. -N 1. -p.5-25.

156. Lee S, Wen J. A phylogenetic analysis of Prunus and the Amygdaloideae (Rosaceae) using ITS sequences of nuclear ribosomal DNA.// Department of Biology, Sungkyunkwan University.-2001 .-P. 150-160

157. Loper-Serestan. Antimicrob. Agents Chemother. -1987. -v. 31. -N 5. -p. 675-678.

158. Mangold H.K., Malins D.S. // Amaric. Oil Chem. Sos. -1960. -v. 37. -p. 382-383.

159. Mabry T.J., Markham K.R., Thomas M.B., The systematic identification of flavonoids, New-York, 1970. - 354 p.

160. Nanaeva MT, Zurdinov AZ, Sabirova TS, Atanaev ТВ, Kudaibergenova ТА. Use of an activated chemiluminescence method for studying the pharmacologic properties of medicinal substances // Vopr Med Khim.-1995.-P.48-50

161. Ostrowska B, Kowalewski Z. Flavonoid glycosides from the blossoms of Padus avium// Planta Med.-1971.-P.20

162. Sander J.R., Fasubo J.M., Pathin G.V. Lipid Res. -1988. -v. 29. -N 8. -p. 1195-1203.

163. Sharagin A.S., Sorokoumova D.M., Gusev D.V. // J. Liposom Res. -1994. -v. 4.-Nl.-p. 255-270.

164. Sherwin E.R., Antioxidants for vegetableois // J. Amarican Oil Chem. Sos. -1976. -v. 53. -N 6. -p. 430-436.

165. Stewart S.M. // Analyt. Biochem. -1980. -v. 104. -p. 10-14.

166. Swain Т., Hillis W.E., Phenolic constituents of Prunus domestica. Quantitative analysis of phenolic constituents //J. Sci. Food Agr.-1959.-V.10.-P.63-68

167. Tamas M., Fagarasan E., Topirceanu L., Tarnoveanu D. // Farmacia.-1987.-P.277-282

168. Tosh CR, Powell G, Hardie J. Decision making by generalist and specialist aphids with the same genotype.// Aphid Biology Group, Imperial College London, Department of Biological Sciences.-2003.-P.659-690

169. Turlan D. // Chimia.-1981.-Bd.35,№4.-P. 142-143

170. Venkataraman K. Methods for determination the structure of flavonoid compounds // The chemistry of flavonoid compounds / Ed. By T. A. Geisman.-NY: Pergamon Press.-1962.-P.70-106

171. Wagner H. Pharmazeutische Biologice. Drogen and ihre Inhaltsstoffe. // Gustav Fischer Verlag: Stuttgart-New York, 1993.-522 p.

172. Zheng L., Poulton J.E., Temporal and spatial expression of amygdalin hydrolase and (R)-(+)-mandelonitrile lyase in black cherry seeds // Plant Physiol.-1995.-P.31-39