Ферментация высокобелковой растительной массы с интродукцией молочнокислых бактерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Шурхно, Равиля Абдулловна

• Шурхно, Равиля Абдулловна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шурхно, Равиля Абдулловна

ВВЕДЕНИЕ 4 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ФИЛО - И РИЗОСФЕРА БОБОВЫХ ТРАВ И ПРИСУЩИЕ 9 ЕЙ МОЛОЧНОКИСЛЫЕ БАКТЕРИИ

1.1. Эпифитная микрофлора

1.2. Ризосферные микроорганизмы

ГЛАВА 2. МОЛОЧНОКИСЛЫЕ БАКТЕРИИ И ВЫЗЫВАЕМОЕ ИМИ 16 БРОЖЕНИЕ

2.1. Метаболизм молочнокислых бактерий

2.2. Физиолого-биохимическая характеристика бактерий

2.3. Аэро- и ацидотолерантность молочнокислых бактерий

ГЛАВА 3. ПРОЦЕСС СИЛОСОВАНИЯ

3.1. Силосные растительные культуры

3.2. Микробиологические процессы силосования <

3.3. Химический состав и питательность корма

ГЛАВА 4. ПРИМЕНЕНИЕ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ

4.1. Молочнокислые бактерии в составе стартовых культур

4.2. Пробиотические свойства молочнокислых бактерий 39 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Объекты исследования

2. Микроорганизмы, методы их культивирования и количественного учета

3. Определение биологических активностей

4. Сбраживание растительных соков

5. Опытное силосование в полупроизводственных условиях

6. Химические методы

7. Статистическая обработка результатов

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 1. МИКРОФЛОРА ФИЛО - И РИЗОСФЕРЫ

МНОГОЛЕТНИХ БОБОВЫХ ТРАВ

1.1. Микрофлора филосферы бобовых растений

1.2. Ризосферное микробное сообщество бобовых трав

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА МЕСТНЫХ ИЗОЛЯТОВ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ

2.1. Осмотолерантность местных штаммов молочнокислых бактерий

2.2. Протеолитическая активность молочнокислых бактерий

ГЛАВА 3. МОДЕЛИРОВАНИЕ МОЛОЧНОКИСЛОГО СБРАЖИВАНИЯ СОКОВ БОБОВЫХ РАСТЕНИЙ

3.1. Углеводный состав растительных соков

3.2. Динамика численности молочнокислых бактерий в модельном опыте

3.3. Изменение рН среды в ходе модельного опыта

3.4. Продукты брожения

3.5. Содержание витаминов А и Е

ГЛАВА 4. СИЛОСОВАНИЕ БОБОВЫХ ТРАВ С ИНТРОДУКЦИЕЙ МЕСТНЫХ ШТАММОВ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ

4.1. Химический состав растительной массы

4.2. Численность основных групп микроорганизмов в ходе ферментации сырья

4.3. Сдвиги рН в ходе силосования

4.4. Анализ продуктов брожения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ферментация высокобелковой растительной массы с интродукцией молочнокислых бактерий»

Актуальность работы. Силосование следует рассматривать как приоритетный способ консервирования растительной массы, так как его основным преимуществом является сохранение питательности и биологических свойств зеленых растений, повышение энергетической ценности готового корма в сравнении с исходным материалом (Квасников с соавт., 1975; McDonald et al., 1991). Среди качественных и доступных кормов силос отличается низкой себестоимостью (Зубрилин, 1964; Чуканов с соавт., 1986).

Биохимический смысл силосования кормовых культур заключается в том, что в результате частичной потери питательных веществ, главным образом Сахаров, и превращения некоторых из них в органические низкомолекулярные кислоты сохраняются остальные компоненты исходной растительной массы, особенно кормовой белок (Таранов с соавт., 1987). Использование белка растительного происхождения в кормопроизводстве снижает его дефицит в рационах, чем определяется роль бобовых культур, в которых содержание белка в 1,5-3 раза выше, чем в злаковых. Кроме того, белок бобовых трав более полноценен по аминокислотному составу и содержит больше незаменимых аминокислот (Жеруков с соавт., 2003).

Ведущее положение среди традиционных кормовых культур занимают высокобелковые травы: клевер луговой, люцерна посевная, некоторые сорта эспарцета и других бобовых растений (Бондарев, 2003). В число реально используемых в практике кормопроизводства в республике Татарстан, кроме разных сортов клевера лугового (Зарипова с соавт., 1999), входит новая перспективная бобовая культура - козлятник восточный. По кормовым достоинствам он не уступает клеверу и люцерне, значительно превосходя их по продуктивному долголетию и скорости весеннего отрастания. Имеющийся опыт интродукции козлятника восточного в некоторых регионах страны свидетельствует о высокой биологической пластичности и больших потенциальных возможностях данной культуры (Жеруков с соавт., 2003).

В российских климатических условиях заготовка качественного силоса во многом может решить проблему дефицита кормов. По статистике, хозяйства России ежегодно теряют до 30% консервированных кормов из-за несоблюдения технологии их приготовления (Лаптев с соавт., 2002). Более того, за последние десять лет общий уровень производства кормов в России снизился на 105т кормовых единиц и качественный состав их значительно ухудшился. В этой связи актуальны исследования, направленные на поиск и выделение из различных экологических ниш молочнокислых бактерий для повышения эффективности ферментации высокобелковых культур и получения качественного продукта.

Одно из перспективных направлений интенсификации силосования и повышения качества кормов основано на применении индивидуальных штаммов или ассоциаций молочнокислых бактерий (Зубрилин, 1964; Квасников с соавт., 1975; Чуканов с соавт., 1986; McDonald et al., 1991).

При инокуляции L. plantarum райграса итальянского и ежи сборной получали хорошо сохранившийся силос с высоким содержанием молочной кислоты. Этот прием оказывал благоприятное влияние также на предотвращение брожения клостридиального типа (McDonald et al., 1991; Cai et al., 1999; Nadeau et al., 2000; Winters et al., 2000).

Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы - выделить из фило- и ризосферы культивируемых в Татарстане бобовых трав и образцов силоса активные штаммы молочнокислых бактерий и охарактеризовать их физиолого-биохимический потенциал с точки зрения возможности использования этих бактерий для сбраживания трудносилосуемых растений: клевера лугового (Trifolium pratense) и козлятника восточного (Galega orientalis).

Были поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать фило- и ризосферу бобовых трав как природное местообитание молочнокислых бактерий в сопоставлении с распределением основных физиологических групп микроорганизмов.

2. Выделить из различных источников местные штаммы молочнокислых бактерий с повышенной биохимической активностью в отношении сбраживания высокобелковых культур.

3. Оценить в условиях модельного опыта физиолого-биохимический потенциал изолятов молочнокислых бактерий с точки зрения возможности их интродукции для повышения эффективности сбраживания растительных субстратов.

4. Осуществить экспериментальное силосование с использованием наиболее активных местных штаммов молочнокислых бактерий и оценить эффективность ферментации и динамику этого процесса на основе мониторинга с использованием основных микробиологических и биохимических параметров, а также оценить качество кормового продукта.

Научная новизна работы. Фило- и ризосфера бобовых культур -традиционной для Татарстана (клевера лугового) и новой (козлятника восточного) охарактеризована с точки зрения количественного распределения молочнокислых бактерий на фоне основных физиологических групп микроорганизмов: аэробных гетеротрофных бактерий, дрожжей, микроскопических грибов, аммонифицирующих бактерий и бактерий группы кишечной папочки. На основе скрининга природных биоценозов фило- и ризосферы бобовых трав осуществлено выделение и сравнительное изучение широкого спектра местных штаммов молочнокислых бактерий (более 40 изолятов), что позволило провести отбор штаммов с повышенной биохимической активностью и технологически важными свойствами.

Впервые на примере системы с использованием растительных соков бобовых трав продемонстрирована принципиальная возможность моделирования их молочнокислого сбраживания в регламентируемых условиях лабораторного эксперимента.

Экспериментальное силосование высокобелковых бобовых трав -клевера лугового и козлятника восточного в полупроизводственных условиях с инокуляцией силосуемой массы наиболее активными из выделенных лактобацилл выявило преимущества этого процесса с его направленной регуляцией популяционной структуры микрофлоры - как с точки зрения активизации брожения, так и качества кормового продукта. Работа выявила интересный феномен активизации продукции каротиноидов при силосовании с интродукцией активных местных штаммов молочнокислых бактерий.

Практическое значение работы. Главный практический аспект данной работы связан с решением проблем увеличения масштабов заготовки кормов для животноводства и улучшения его качества, а именно повышения эффективности молочнокислого сбраживания трудносилосуемых бобовых трав, культивируемых в Татарстане. Проведенное исследование состояния микрофлоры ризосферы в условиях трехлетнего культивирования многолетних бобовых трав свидетельствует о положительном воздействии данного приема как с точки зрения состава и численности основных физиолого-таксономических групп микроорганизмов, так и с позиций влияния возделывания данных культур на восстановление плодородия почвы и снижение ее утомляемости.

Создана коллекция молочнокислых бактерий из рода Lactobacillus, ассоциированных с культивируемыми бобовыми травами Татарстана. В качестве ключевых критериев для создания такой коллекции были использованы соотношение продуцируемой молочной кислоты и гомологов жирных кислот, темпы ацидогенеза, осмотолерантность и протеолитическая активность.

Обоснованные в работе приемы создания специализированного банка местных штаммов молочнокислых бактерий с адекватными физиолого-биохимическими и технологическими свойствами могут служить методической базой для решения подобных проблем применительно к консервированию других растительных ресурсов и к другим регионам. Для этой же цели результаты работы позволяют рекомендовать моделирование сбраживания растительных соков растений, которое дает возможность одновременного сопоставления как интересующих исследователей наборов штаммов, так и испытуемых растений, сокращая трудоемкий процесс опытного силосования с сезонной привязкой.

С использованием наиболее активных местных штаммов молочнокислых бактерий осуществлено опытное силосование бобовых растений - клевера лугового и козлятника восточного, которое продемонстрировало эффективность направленной инокуляции растительного сырья с точки зрения динамики процесса (структуры микрофлоры, рН, продуктов брожения) и общих показателей качества полученного кормового продукта. Результаты работы позволили рекомендовать клевер луговой в качестве основной силосуемой культуры.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Шурхно, Равиля Абдулловна

выводы

1. Молочнокислые бактерии не относятся к числу мажорных групп микроорганимов в фило- и ризосфере бобовых растений (клевера лугового, козлятника восточного и люцерны посевной), культивируемых на серых лесных почвах Татарстана. При этом их численность в ризосфере низка (на уровне 103- 104 КОЕ/г) по сравнению с их количеством в составе эпифитной микрофлоры, где содержание молочнокислых бактерий почти на два порядка больше. В то же время количество ризосферных молочнокислых бактерий на порядок выше, чем в почве в отсутствие растений.

2. Из фило- и ризосферы районированных сортов бобовых растений в селективных условиях выделены молочнокислые бактерии из рода Lactobacillus, обладающие повышенной способностью к продукции молочной кислоты и скоростью кислотообразования, умеренной протеолитической активностью и устойчивостью к повышенному осмотическому напряжению среды.

3. По данным мониторинга микробиологических и биохимических показателей в условиях моделирования молочнокислого сбраживания растительных соков наибольшую активность при брожении клеверного сока проявили местные штаммы Lactobacillus sp. RSI, Lactobacillus sp. RS2, Lactobacillus sp. RS3, Lactobacillus sp. RS4 и коллекционный штамм L. plantarum BS933, а в случае для сока козлятника - Lactobacillus sp. RS2, Lactobacillus sp. RS3, Lactobacillus sp. RS4, L. plantarum BS933.

4. С интродукцией молочнокислых бактерий, отобранных по совокупности технологически важных свойств, в опытных условиях осуществлено силосование высокобелковых бобовых растений (клевера лугового и козлятника восточного). Полученные данные свидетельствуют о том, что по ключевым критериям (скорости и масштабам ацидогенеза, соотношению молочной кислоты и гомологов жирных кислот, популяционной структуре и динамике микрофлоры) интродукция с использованием местных штаммов гомоферментативных молочнокислых бактерий Lactobacillus sp. RS3 и

Lactobacillus sp. RS4, а также коллекционного штамма Lactobacillus plantarum BS933 способствует активизации процесса силосования.

5. Уровни содержания белковых компонентов и остаточных Сахаров, высокая кислотность, характер микробиоценоза, а также повышенное содержание каротина в силосах на основе клевера лугового и козлятника восточного, полученных с интродукцией активных местных штаммов молочнокислых бактерий, свидетельствуют о высоких кормовых качествах полученного продукта.

6. Разработана эффективная схема создания банка активных местных штаммов молочнокислых бактерий, для силосования включающая их выделение из фило- и ризосферы растений, лабораторное моделирование молочнокислого сбраживания соков конкретных растений и экспериментальное силосование растительной массы в полупроизводственных условиях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шурхно, Равиля Абдулловна, 2004 год

1. Березовский А А. Зоотехническая оценка химических консервантов и силоса с пониженной влажностью в сравнении с обычным силосом / А.А. Березовский // Вестник сельскохоз. науки. - 1970. - №1. -С.79-86.

2. Богданов Г.А. Сенаж и силос / Г.А. Богданов, О.Е. Привало. М.: Изд-во Колос, 1983.-319с.

3. Бондарев В.А. Приемы повышения качества кормов / В.А. Бондарев // Кормопроизводство. 1996. - №1. - С.33-37.

4. Бондарев В.А. Качественный корм из многолетних трав / В.А. Бондарев // Животноводство России. 2001. - №10,12. - С.34-37.

5. Бондарев В.А. Запасаем корма по новым технологиям / В.А. Бондарев // Животноводство России. 2003. - №1. - С.36-37.

6. Буряко И.А. Выделение бактерий рода Lactobacillus активных кислообразователей из растительных источников / И.А. Буряко, Е.А.Шыбеко, Л.И. Стефанович, В.Л. Беликова // Микробиология. - 1997. - №4. - С.527-531.

7. Буряко И.А. Изменение жизнеспособности лактобацилл в процессе хранения биопрепарата силактим / И.А. Буряко, Л.И.Стефанович, Е.П. Полещук, С.И. Дубатовка // Микробиология и биотехнология на рубеже 21 столетия: Мат. междунар. конф. Минск. 2000. - С.32-33.

8. Владимиров В.Б. Стратегия кормопроизводства России / В. Б. Владимиров, В.А. Щеглов // Животноводство России. 2001. - №12. - С.8-11.

9. Гардер Л.А., Балин Е.И., Богданова А.А., Макарова М.М. // Труды Всес. Ин-та с.-х. микробиол., 1935. 100с.

10. Гусев М.В. Микробиология / М.В. Гусев, Л.А. Минеева. М.: Изд-во МГУ, 1985. - 375с.

11. И. Гусев М.В. Микробиология / М.В. Гусев, Л.А. Минеева. М.: Изд-во МГУ, 3-е изд. 1993. - С. 142-183.

12. Досон Р. Порфирины и родственные соединения. В кн.: Справочник биохимика / Р. Досон., Д. Эллиот, У. Элиот, К. Джонс. М.: Мир, 1991. С. 174-194.

13. Егоров Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Н.С. Егоров. М.: Изд-во МГУ, 1995. - 217с.

14. Емцев В.Т. Микробиология / В.Т. Емцев, Е.Н. Мишустин. М.: Колос, 1993.-383с.

15. Жеруков Б.Х. Биологический азот как источник белка / Б.Х. Жеруков, К.Г. Магомедов, Н.В. Бербекова, З.М. Карданова // Вестник РАСХН. 2003-№2. - С.51-52.

16. Зарипова Л.П. Как повысить питательность кормов / Л.П. Зарипова, У.Х. Валиуллин, Ш.К. Шакиров. Казань: Тат.книжное изд-во, 1981. - 111с.

17. Звягинцев Д.Г. Биологическая активность почв и шкалы для оценки некоторых ее показателей / Д.Г. Звягинцев // Почвоведение. 1978. - №6. - С. 14-18.

18. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы / Д.Г. Звягинцев. М.: Изд-во: МГУ, 1987.-256с.

19. Зенова Г.М. Практикум по микробиологии почв / Г.М. Зенова, А.Л. Степанов, А.А. Лихачева, Н.А. Манучарова. М.: Изд-во МГУ, 2002. - 120с.

20. Зоотехнический анализ кормов / Е.А. Петухова, Р.Ф. Бессарабова, Л.Д. Халенева и др. М.: Агропромиздат, 1989. - 239с.

21. Зубрилин А.А. Силосование и технология кормов / А.А. Зубрилин. -М.: Изд-во Колос, 1964. 448с.

22. Ивановский А.А. Пробиотик бактоцеллолактин / А.А. Ивановский, О.Н. Лагунова, В.В. Зимирема // Тез. докл. IV Всесоюзной науч. конф. «Микробиология в сельском хозяйстве». Пущино, 1992. С.90-91.

23. Каверзнева Е.Д. Стандартный метод определения протеолитической активности для комплексных препаратов протеиназ / Е.Д. Каверзнева // Прикладная биохимия и микробиология. 1971. - № 2. - С.225-228.

24. Квасников Е.И. / Е.И. Квасников, И.Ф. Щелокова, С.С. Нагорна // Мжробюлог. 1971. -№1. -С.33.

25. Квасников Е.И. Молочнокислые бактерии и пути их использования / Е.И. Квасников, О.А. Нестеренко. М.: Изд-во: Наука, 1975. - 384с.

26. Квасников Е. И. Место и значение молочнокислых бактерий в биосфере / Е.И. Квасников // Микробиологический журнал. 1992. - №5. -С.3-10.

27. Коваленко Н.К. Коррекция микрофлоры пищеварительного тракта поросят с помощью молочнокислых бактерий / Н.К. Коваленко, С.А. Касумова // Тез. докл. IV Всесоюзной науч. конф. «Микробиология в сельском хозяйстве». Пущино, 1992. С.92.

28. Корма Республики Татарстан / Л.П. Зарипова, Ш.К. Шакиров, Ш.А. Алиев Ш.А и др. Казань: Изд-во Фэн, 1999. - 208с.

29. Кравченко Л.В. Ризосфера область взаимодействия микроорганизмов и растений / Л.В. Кравченко // Тез. всерос. конф. Сельскохозяйственная микробиология в XIX-XXI веках. Санкт-П., 2001. - С.59.

30. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высш. школа, 1990. - 352с.

31. Лаптев Г.Ю. Теоретические разработки микробиологических препаратов для животноводства и кормпроизводства / Г.Ю. Лаптев // Тезисы всероссийской конференции «Сельскохозяйственная микробиология в 19-21 веках». С.-Петербург, 2001. - С.97.

32. Лаптев Г. Ю. Качественный силос с закваской «Биотроф» / Г.Ю. Лаптев, В.А. Солдатова, С.Н. Варакина, Н.В. Новикова // Животноводство России. - 2002. - №4. - С.40.

33. Льюин Б. Гены / Б. Льюин. М.: Мир, 1987. - 900с.

34. Мак-Дональд П. Биохимия силоса / П. Мак-Дональд. М.: Агропромиздат, 1985. - 272с.

35. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под ред. Д.Г. Звягинцева. М.: Изд-во МГУ, 1991. - 303с.

36. Мещерякова И.П. Изучение изменений углеводного комплекса при силосовании растений с разной влажностью: Автореф. дис. .канд. с/х наук / И.П. Мещерякова; Дубровицы, 1973. 30с.

37. Мишустин Е. Н. Научные основы силосования кормов / Е.И. Мишустин. М.-Л.: Сельхозгиз, 1933. - 191с.

38. Нагорна С.С. / С.С. Нагорна В сб. «Бюлопчш властивосп м1крооргашзм1в». Тезисы докл. I респ. конф. молодых ученых. Киев, 1972.

39. Зоотехнический анализ кормов / Е.А. Петухова, Р.Ф. Бессарабова, Л.Д. Халенева и др. М.: Агропромиздат, 1989. - 239с.

40. Пименова М.Н. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / М.Н. Пименова, Н.Н. Гречушкина, Л.Г. Азова. М.: МГУ, 1971.-221с.

41. Плохинский Н.А. Биометрия / Н.А. Плохинский. М.: Изд-во МГУ, 1970.-366с.

42. Победнов Ю.А. Эффективность препаратов молочнокислых бактерий при силосовании трав / Ю.А. Победнов, Ф. Вайсбах, Г. Палов // Аграрная наука. 1997. - № 4. - С.35-38.

43. Полевой В.В. Физиология растений / В.В. Полевой. М.: Мир, 1989. -464с.

44. Скурихин В.Н. Методы анализа витаминов А, Е, D и каротина в кормах, биологических объектах и продуктах животноводства / В.Н. Скурихин, С.В. Шабаев. М.: Химия, 1996. - 96с.

45. Спесивцева Н.А. Санитария кормов / Н.А. Спесивцева, Б.Н. Хмелевский. М.: Изд-во Колос, 1975. - 336с.

46. Таранов М.Т. Биохимия кормов / М.Т. Таранов, А.Х. Сабиров. М.: Агропромиздат, 1987. - 224с.

47. Теппер Е.З. Практикум по микробиологии / Е.З. Теппер, В.К. Шильникова, Г.И. Переверзева. М.: Колос, 1993. - 175с.

48. Уотсон С. Дж. Приготовление и использование сена и силоса / С.Дж. Уотсон, М.Дж. Нэш. М.: Изд-во Колос, 1964. - С. 191^20.

49. Хохрин С.Н. Корма и кормление животных / С.Н. Хохрин. Санкт-П.: Лань, 2002.-510с.

50. Чуканов Н.К. Микробиология консервирования трудносилосуемых растений / Н.К. Чуканов, А.К. Попенко. Алма-Ата: Изд-во Наука, 1986. -С.82-191.

51. Шлегель Г. Общая микробиология / Г. Шлегель. М.: Изд-во Мир, 1972. -С.240-278.

52. Allen L.A., Harrisson J., Watson S.J., Ferguson W.S. // J. Agric. Sci. 1937. -V.27.-P. 271.

53. Archibald F.S. Manganese and defenses against oxygen toxicity in Lactobacillus plantarum / F.S. Archibald, I. Fridovich // J. Bacteriol. 1981. -V.145.-P. 442.

54. Atlas R.M. Microbial Ecology / R.M. Atlas, R.Bartha. Fundamentals and Applications. 4th ed,. 1998. - P. 99-103.

55. Axelsson L.T. Lactic Acid Bacteria: Classification and Physiology. In: Lactic Acid Bacteria. Microbiology and Functional Aspects / L.T. Axelsson. Ed. S. Salminen, A. Atte von Wright. N-Y. et al.: Marcel Dekker, 1993. - P. 1-63.

56. Axelsson L.T. Lactic Acid Bacteria: Classification and Physiology. In: Lactic Acid Bacteria. Microbiology and Functional Aspects / L.T. Axelsson. Ed. S. Salminen, A. Atte von Wright. N-Y. et al.: Marcel Dekker, 1998. - P. 1-72.

57. Bolsen K.K. Silage additives USA / K.K. Bolsen, J.L. Heidker. UK: Chalcombe Publications, 1985.

58. Bolsen K.K. Silage additives / K.K. Bolsen, G. Ashbell, J.M. Wilkinson. -Germany: Wallace and A.Chesson, 1995. P.33-54.

59. Bowen G.D. Microbiol colonization of plant roots / G.D. Bowen, A.D. Rovera // Annual Review of Phytopathlogy. 1976. - V.14. - P.121-144.

60. Brookes P.C. The use of microbial parameters in monitoring soil pollution by heave metals / P.C. Brookes // Biol. Fertil. Soils. 1995. - V. 19. - P.269-279.

61. Byrer D.E. Gram-type positive bacteria / D.E. Byrer, J. Wiegel // Encyclopedia of life sciences. 2001. - P. 1-11.

62. Cai Y. Effect of NaCI-tolerant lactic acid bacteria and NaCI on the fermentation characteristics and aerobic stability of silage / Y. Cai, S. Ohmomo, M. Ogawa, S. Kumai // J. Appl. Microbiol. 1997. - V.83. - P.307-313.

63. Cai Y. Influence of Lactobacillus spp. from an inoculant and of Weissella and Leuconostoc spp. from forage crops on silage fermentation / Y. Cai, Y. Benno, M. Ogawa, S. Ohmomo, S. Kumai, T. Nakase // Appl. Environ. Microbiol. 1998. - V.64.-P.2982-2987.

64. Cai Y. Characterization and identification of Pediococcus species isolated from forage crops and their application for silage preparation / Y. Cai, S. Kumai, M. Ogawa, Y. Benno, T. Nakase // Appl. Environ. Microbiol. 1999. - V.65. -P.2901-2906.

65. Campbell R. The study of the rhizosphere by scanning electron microscopy / R. Campbell, A.D. Rovera // Soil Biology and biochestry. 1973. - V.5. - P. 747-752.

66. Dellaglio F. Microbiological variations of silage of lucerne and Italian ryegrass with added lactic acid bacteria of formic acid / F. Dellaglio, S. Torriani // Microbiol. Aliments. Nutrition. 1985. - V.3. - P.273-282.

67. Driehuis F. The impact of the quality of silage on animal health and food safety: a review / F. Driehuis, S.J. Oude Elferink // Vet Q. 2000. - V.22. - P.212-216.

68. Engesser D.M. Non-heme catalase activity of lactic acid bacteria / D.M. Engesser, W.P. Hammes // Syst. Appl. Microbiol. 1994. - V.17. - P. 11-19.

69. Fitzsimons A. Assessment of Pediococcus acidilactici as a potential silage inoculant source / A. Fitzsimons, F. Duffiier, D. Curtin, G. Brophy, P. Okiely, M. O'Connell // Appl. Environ. Microbiol. 1992. - V.58. - P.3047-3052.

70. Flores H.E. Undergroud plant metabolism: the boisynthetic of roots. In: Plant Roots / H.E. Flores, C. Weber, J. Puffett. Ed. Y. Waisel, A. Eshel, U. Kafkafi. The Hidden Half. -N-Y.: Marcel Dekker, 1996. P.931-956.

71. Gibson Т., Stirling A.C., Keddie R.M., Rosenberger R.F. // J. Gen. Microbiol. 1958. - V.19. - P.112.

72. Glaasker E. Physiological response of Lactobacillus plantarum to salt and nonelectrolyte stress / E. Glaasker, F.S. Tjan, P.F. Ter Steeg, W.N. Konings, B. Poolman // J. Bacteriol. 1998. - V.180. - P.4718^1723.

73. Gold R.S. Cloning and expression of the Zymomonas mobilis "Production of etanol" genes in Lactobacillus casei / R.S. Gold, Mm. Meagher, S. Tong, R.W. Hutkins, T. Conwey // Curr. Microbiol. 1996. - V.33. - P.256-260.

74. Gunawardena U. Roots: Contribution to the Rhizosphere / U. Gunawardena, X. Zhao, M.C. Hawes. Encyclopedia of life sciences, 2001. - P.l-5.

75. Hawes M.C. Function of root border cells in the rhizosphere / M.C. Hawes, L.A. Brigham, H. H. Woo, Y. Zhu // Annual Review of Phytopathology. 1998. -V. 36.-P.311-327. .

76. Hegazi F.Z. Proteolytic activity of crude cell-free extract of Lactobacillus casei and Lactobacillus plantarum / F.Z. Hegazi, I.G. Elnaga. Die Nahrung, 1987.-P.225.

77. Hinds M.A. Effect of molasses urea and bacterial inoculant additives on silage guality, dry matter for cattle / M.A. Hinds, K.K. Bolsen, J. Brethours // Animal Feeding Sci. Technol. 1985. - V.12. - P.205-214.

78. HofVendahl K. Factors affecting the fermentative lactic acid production from renewable resources / K. HofVendahl, B. Hahn-Hagerdal // Enzyme Microbiol. Technol. 2000. - V.26. - P.87-107.

79. Kandler O. Regular, non-sporing gram-positive rods. In: Bergley's Manual of Systematic Bacteriology / O. Kandler, N. Weiss. Ed. P.H.A. Sneath, N.S. Mair, M.E. Sharpe, J.G. Holt. Baltimore: Williams and Wilkins, 1986. - V.2. - P. 1208-1234.

80. Koch G. The influence of microorganisms of corn on the stability of silage / G. Koch, A. Morwarid, M. Kirchdessnev // Wirtschaftseigene Futter. 1973. -V.19. - P. 15-20.

81. Kozaki M. Experimental manual of lactic acid bacteria / M. Kozaki, T. Uchimura, S. Okada. Tokyo: Asakurasyoten, 1992. - P.34-37.

82. Kozlova E.V., Validov Sh.Z., Boronin A.M. Using Lactobacillus plantarum strains for ensilage and their monitoring in the silage microbial association // FEMS sixth Symp. on Lactic Acid Bacteria, Holland, 19-23 Sept. 1999. P.4.

83. Lynch J.M. Substrate flow in the rhizosphere. In: The rhizosphere and plant growth, dordrecht / J.M. Lynch, J.M. Whipps. Ed. Keister D.L., Cregan P.B. -Netherlands: Kluwer Academic Publishers, 1991. P. 15-24.

84. Man J.C. A medium for the cultivation of lactobacilli / J.C. Man, M. Rogosa, M.E. Sharpe // J. Appl. Bacteriol. 1960. - V. 23. - P. 130-135.

85. McDonald P. The biochemistry of silage 2nd ed. / P. McDonald, N. Henderson, S. Heron. Marlow, UK: Chalcombe Publications, 1991. - 249 p.

86. Merry R.J., Lowes K.F., Winters A. Current and future approaches to biocontrol in silage // In: V. Jambor, L. Klapil, P. Chromec, and P. Prochazka (ed). Proc. 8th Int. Symposium Forage Conservation, 1997. P. 17-27.

87. Morris C.E. Methods for observing microbial biofilms directly on leaf surfaces and recovering them for isolation of culturable microorganism / C.E. Morris, J.M. Monier, M.A. Jacgues // Appl. Environ. Microbiol. 1997. - V.63. -P. 1570-1576.

88. Morris C.E. Phyllosphere / C.E. Morris. Encyclopedia of life sciences, 2001.-P.1-8.

89. Nadeau E. Intake, digestibility, and composition of orchardgrass and alfalfa silages treated with cellulase, inoculant, and formic acid fed to lambs / E. Nadeau, J. Russell, D. Buxton // J. Anim. Sci. 2000. - V.78. - P.2980-2989.

90. Nilsson G., Nilsson P.E. // Arch. Microbiol. 1956. V.24. - P.412.

91. Ohmomo S. Analysis of organic acids in silage by high-performance liquid chromatography / S. Ohmomo, О. Tanaka, H. Kitamoto // Bull. Natl. Grassl. Res. Inst. 1993. - V.48. -P.51-56.

92. Ohmomo S. Screening of lactic acid bacteria suitable for silage-making in tropical regions / S. Ohmomo, N. Katayama, W. Potacharoen, O. Tanaka, S. Sirianuntapiboon, P. Atthasampunna // JARO: Jap. Agr. Res. Quart. 1995. -V.29.-P.251-256.

93. Oude Elferink S.J. Silage fermentation processes and their manipulation / S.J. Oude Elferink, F. Driehuis, J.c. Gottschal, S.F. Spoelstra // http: // www. fao. org. 2002.

94. Pahlow G., Muller T. Determination of epiphytic microorganisms on grass as influenced by harvesting and sample preparation // 9th UK Silage Conf., Newcastle-upon-Tyne, Engl. 1990. P.23.

95. Renaut P. Genetically modified lactic acid bacteria application to food or health and risk assessment / P. Renault // Biochimic. 2002.- V.84. - P. 10731087.

96. Rogosa M. A selective medium for isolation and enumeration of oral and fecal lactobacilli / M. Rogosa, J.A. Mitchell, R.F. Wiesman // J. Appl. Bacterid. -1951.-V. 62. P.132-133.

97. Rovera A.D. Scanning electron microscopy of microorganisms on roots of wheat / A.D. Rovera, R. Campbell // Microbial Ecology. 1974 - V.l. - P. 15-23.

98. Sharp R. Growth and survival of genetically manipulated Lactobacillus plantarum in silage / R. Sharp, A.G. O'Donnell, H.G. Gilbert, G.P. Hazlewood // Appl. Enveron. Microbiol. 1992. - V.58. - P.2517-2522.

99. Stark P., Sherman J.M. // J. Bacterid. 1975. - V.30. - P.639.

100. Stiles M.E. Biopreservation by lactic acid bacteria / M.E. Stiles // Antonie Van Leeuwenhoek. 1996. - V.70. - P.331-345.

101. Stirling A.C., Whittenbury R. // J. Appl. Bacteriol. 1963. - V.26. - P.86.

102. Tanaka O. Relationship between fermentation quality of silage and presence of phages for silage-making lactobacilli / O. Tanaka, S. Ohmomo, Y. Zong, K. Nishiyama, K. Doi, S. Ogata // Bull. Nat. Grassland Res. Inst. 1995. -P.31-39.

103. Tanaka O. Lactic acid productivity of the selected strains of the genus Lactobacillus in laboratory-scale silages / O. Tanaka, Ohmomo S. // Grassland Scien. 1998. - V.43. - P.374-379.

104. Thompson J.K. Mutations to antibiotic resistance occur during the stationary phase in Lactobacillus plantarum ATCC 8014 / J.K. Thompson, R.J. McConville, C. McReynolds, S. D. Moorhouse, M.A. Collins // J. Microbiol. -1997. V.143. - P. 1941-1949.

105. Van de Guchte M. Stress resposes in lactic acid bacteria / M. Van de Guchte, P. Serror, C. Chervaux, T. Smokvina, S.D. Ehrlich, E. Maguin // Antonie Van Leeuwenhoek. 2002. - V.82. - P.187-216.

106. Vescovo M. Basic characteristics, ecology and application of Lactobacillus plantarum: a review // M. Vescovo, S. Torriani, F. Dellaglio, V. Bottazzi // Ann. Microbiol. Enzimol. 1993. - V.43. - P.261-284.

107. Weinberg Z.G. New trends and opportunities in the development and use of inoculantsfor silage / Z. G. Weinberg, R.E. Muck // FEMS Microbiol. Rev. -1996.-V.19.-P.53-68.

108. Wells J.M. Lactic acid bacteria as vaccine delivery vehicles / J.M. Wells, K. Robinson, L.M. Chamberlain, K.M. Schofield, R.W. Le Page // Antonie van Leeuwenhoek. 1996. - V.70. - P.317-330.

109. Wilkinson J.M. Silage in Europe, a survey of 33 countries / J.M. Wilkinson, F. Wadephul, J. Hill. Chalcombe Publication, Welton UK . 1996.

110. Winters A.N. Effect of lactic acid bacteria in inoculants on changes in amino acid composition during ensilage of sterile and nonsterile ryegrass / Д-N. Winters, J.E. Cockburn, M.S. Dhanoa, R.J. Merry // J. Appl. Microbiol. 2000. -V.86. - P.442—451.