Ферментативный синтез полианилина, катализируемый оксидоредуктазами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.15, кандидат химических наук Карамышев, Алексей Владимирович

• Карамышев, Алексей Владимирович
• кандидат химических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат химических наук Карамышев, Алексей Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. Современные представления о структуре и механизме действия лакказ

1.1. Классификация, общая характеристика и биохимические свойства лакказ

1.2. Строение активного центра лакказ

1.3. Каталитические свойства лакказ и механизм катализа

ГЛАВА 2. Современные представления о структуре и механизме действия пероксидаз растений

2.1. Классификация и общая характеристика растительных пероксидаз

2.2. Структура изофермента С пероксидазы хрена

2.3. Каталитический цикл пероксидазной реакции. Промежуточные соединения пероксидазы

2.4. Функциональная важность отдельных компонентов пероксидазы для катализа

2.5 Механизм химической инактивации пероксидазы пероксидом водорода

2.6 Субстратная специфичность пероксидаз

2.7 Применение пероксидаз растений

ГЛАВА 3. Полианилин

3.1 Общие представления о структуре полианилина

3.2 Синтез полианилинов

3.2.1 Химический способ получения полианилина.

3.2.2 Электрохимическая полимеризация анилина

3.3 Механизм полимеризации анилина

3.4 Допирование полианилина

3.5 Хиральность полианилина

3.6 Морфология полианилина

3.7 Ферментативная полимеризация как альтернативный способ получения полианилинов

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ГЛАВА 1. Ферментативный синтез полиэлектролитных комплексов на основе полианилина, катализируемый лакказой

1.1. Оптимизация условий ферментативной полимеризации анилина в присутствии лакказы

1.2. Характеристики полученных комплексов полианилина

ГЛАВА 2. Ферментативный синтез полиэлектролитных комплексов на основе полианилина, катализируемый пероксидазой

2.1 Оптимизация условий ферментативного синтеза полиэлектролитных комплексов на основе полианилина, катализаруемого пероксидазой пальмы

2.2 Характеристики полученных полиэлектролитных комплексов полианилина

ГЛАВА 3. Ферментативный синтез хирального полианилина на мицеллах, катализируемый пероксидазой

3.1. Оптимизация условий ферментативной полимеризации анилина на мицеллах додецилбензолсульфоновой кислоты в присутствии камфорсульфоновой кислоты с помощью пероксидазы пальмы. Характеристики полианилина

ВЫВОДЫ ИЗ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ферментативный синтез полианилина, катализируемый оксидоредуктазами»

В 2000-м году Нобелевская премия по химии была присуждена исследователям Хидеки Сиракава (Hideki Shirakawa, Япония), Алану МакДиармиду (Alan G. McDiarmid, США) и Алану Хигеру (Alan J. Heeger, США) за "открытие и развитие области электронопроводимых полимеров". Проводящие полимеры образовали новый класс "синтетических металлов", обладая исключительными свойствами в сравнении с низкомолекулярными полупроводниками. На настоящий момент они нашли широкое применение в различных областях науки и техники от микроэлектроники (батареи, оптические мониторы) до биоаналитики (сенсоры). Полианилин привлекает наибольшее внимание исследователей, благодаря своей высокой стабильности и хорошим проводящим характеристикам. Кроме того, обнаружено, что в присутствии хирального индуктора (например, энантиомеров камфорсульфоновой кислоты) он может образовывать оптически активные вторичные структуры [1]. Это свойство в дальнейшем может существенно расширить область применения полианилина. К сожалению, основные способы получения (химический и электрохимический) полианилина обладают определенными недостатками, что вызывает необходимость в разработке альтернативных методов.

В последние годы был опубликован ряд работ, посвященных использованию ферментов как катализаторов окислительной полимеризации, что привело к появлению термина "ферментная полимеризация" [2]. В частности была показана возможность получения проводящего полианилина при полимеризации анилина с помощью пероксидазы хрена [3, 4]. В то же время оказалось, что в условиях, необходимых для синтеза полианилина, а именно при кислых условиях, этот ферментный препарат быстро теряет свою активность. Таким образом, становится понятным интерес к поиску новых ферментов, пригодных для проведения синтеза полианилина.

Задачей настоящей диссертационной работы является:

S Исследование возможности использования лакказы Coriolus hirsitus и пероксидазы из листьев Королевской пальмы в качестве биокатализаторов для проведения ферментативного синтеза полианилина

S Оптимизация методик ферментативного синтеза проводящих полиэлектролитных комплексов полианилина с сульфополистиролом и поли(2-акриламидо-2-метил-1 -пропан)сульфокислой Изучение ферментативного синтеза хирального полианилина, катализируемого пероксидазой пальмы, на мицеллах додецилбензолсульфоновой кислоты

S Определение физико-химических свойств и структуры полианилина, полученного ферментативным путем.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Катализ», Карамышев, Алексей Владимирович

выводы

1. Разработан ферментативный экологически чистый метод полимеризации анилина в присутствии водорастворимого полимера (сульфополистирола и поли(2-акриламидо-2-метил-1-пропан)сульфокислоты (ПАМПС)) для получения полиэлектролитных комплексов электропроводящего полианилина. В качестве биокатализаторов применены кислотостабильные препараты грибной лакказы (Coriolus hirsitus) и пероксидазы пальмы. Варьируя концентрации реагирующих веществ и кислотность реакционной среды, оптимизированы условия ферментативного синтеза комплексов полианилина. Исследована кинетика синтеза полианилина, катализируемого обоими ферментами.

2. Используя спектральные методы, охарактеризованы препараты ферментативно синтезированного полианилина. Показано, что электронные спектры в УФ-, видимой и ближнем ИК- областях и спектры ЭПР химически и ферментативного синтезированных комплексов полианилина практически идентичны. Найдено, что степень допированности зарегистрирована выше для препаратов полианилина, полученного при синтезе, катализируемом пероксидазой пальмы, чем при катализе лакказой.

3. Методом атомно-силовой микроскопии исследована морфология полиэлектролитных комплексов полианилина/ПАМПС. Размер наночастиц полианилина зависит от исходной концентрации полимерной матрицы: при высоком содержании ПАМПС (при молярном соотношении ПАМПС/анилин - 1:1) размер частиц составляет порядка 10-15 нм, в то время как при низком содержании ПАМПС (1:10) размер наночастиц полианилина был несколько выше (-25 нм). Показано, что с увеличением содержания ПАМПС в комплексах полианилина происходит также снижение его электропроводимости. Сравнение значений электропроводимости полиэлектролитных комплексов полианилина, полученных различными методами, показало преимущество разработанного нами пероксидазного метода синтеза.

4. Разработан и оптимизирован оригинальный ферментативный метод получения оптически активного полианилина в мицеллах додецилбензолсульфокислоты, где как биокатализатор была использована пероксидаза пальмы. В качестве индуктора хиральности на стадии синтеза были применены энантиомеры камфорсульфоновой кислоты. С помощью метода кругового дихроизма продемонстрировано, что высокохиральный полианилин может быть получен как в присутствии, так и отсутствие камфорсульфоновой кислоты.

5. Методами трансмиссионной и электронной микроскопии определена морфология полианилина, синтезированного в мицеллах додецилбензолсульфокислоты. Найдено, что агрегаты полианилина представляют из себя пористые рисоподобные наночастицы, длина и ширина которых равны 140 - 180 нм и 70-100 нм соответственно.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Карамышев, Алексей Владимирович, 2007 год

1. Majidi,M.R., Kane-Maguire,L.A.P., Wallace,G.G. (1994) Enantioselective Electropolymerisation of Aniline in the Presence of (+) or (-) Camphorsulfonate Ion: A Facile Route to Conducting Polymers with One-Screw-Sense Helicity. Polymer, 35 (14), 3113-3115.

2. Kobayashi,S., Shoda,S., Uyama,H. (1995) Enzymatic Polymerization and Oligomerization. Adv Polym Sci, 121, 1-30.

3. Lui,W., Cholli,A.L., Nagarajan,R., Kumar,J., Tripathy,S., Bruno,F.F. and Samuelson,L. (1999) The role of template in the enzymatic synthesis of conducing polyaniline. J Am Chem Soc, 121, 11345-11355.

4. Lui,W., Kumar,J., Tripathy,S., Senecal,K.J. and Samuelson,L. (1999) Enzymatically synthesized conducting polyaniline. J Am Chem Soc, 121, 71-78.

5. Yaropolov,A.I., Skorobogat'ko,O.V., Vartanov,S.S., Varfolomeev,S.D. (1994) Laccase: properties, catalytic mechanism, and applicability. Appl Biochem Biotechnolm, 49, 257-280.

6. Lee,S.-K., George,S.D., Antholine,W.E., Hedman,B., Hodgson,K.O., Solomon,E.I. (2002) Nature of the intermediate formed in the reduction of 02 to H202 at the trinuclear copper cluster active site in native laccase. J Am Chem Soc, 124 (21), 6180-6193.

7. Baldrian,P. (2006) Fungal laccases occurrence and properties. FEMS Microbiol Rev, 30 (2), 215-242.

8. Колобова,A.B., Аскадский,А.А., КондращенкоДИ., Рабинович,M.JI. (2002) Теоретические основы биотехнологии древесных композитов. Кн. II: Ферменты, модели, процессы М.: Наука, 343с.

9. Mayer,A.M. and Staples,R.C. (2002) Laccase: new functions for an old enzyme. Phytochemistry, 60 (6), 551-565.

10. Thurston,C.F. (1994) The structure and function of fungal laccase. Microbiology, 140 (1), 19-26.

11. Ko,E.-M., Leem,Y.-E., Choi,H.T. (2001) Purification and characterization of laccase isozymes from the white-rot basidiomycete Ganoderma lucidum. Appl Microbiol Biotechnol, 57 (1), 98-102.

12. Yoshitake,A., Katayama,Y., Nakamura,M., Iimura,Y., Kawai,S., Morohoshi,N. (1993) N-Linked carbohydrate chains protect laccase-III from proteolysis in Coriolus versicolor. J Gen Microbiol, 139, 179-185.

13. Malmstrom,B.G. (1982) Enzymology of Oxygen. Annu Rev Biochem, 51, 21-59.

14. Reinhammar,B.R., Vanngard,T.I. (1971) The electron-accepting sites in Rhus vernicifera laccase as studied by anaerobic oxidation-reduction titrations. Eur J Biochem, 18 (4), 463-468.

15. Solomon,E.I., Sundaram,U.M., Machonkin,T.E. (1996) Multicopper Oxidases and Oxygenases. Chem Rev, 96 (7), 2563-2606.

16. Larrabee J.A. and Spiro T.G. (1979) Cobaltll substitution in the type 1 site of the multi-copper oxidase Rhus laccase. Biochem Biophys Res Commun, 88 (3), 753-760.

17. Morie-Bebel,M.M., Morris,M.C., Menzie,J.L., McMillin,D.R. (1984) A mixed-metal derivative of laccase containing mercury (II) in the type 1 binding site. J Am Chem Soc, 106 (12), 3677-3678.

18. Malkin,R., Malmstrom,B.G., Vanngard,T.I. (1969) The reversible removal of one specific copper (II) from fungal laccase, Eur J Biochem, 7 (2), 253-259.

19. Allendorf,M.D., Spira,D.J., Solomon,E.I. (1985) Low-temperature magnetic circular dichroism studies of native laccase: Spectroscopic evidence for exogenous ligand bridging at a trinuclear copper active site. Proc Nat Acad Sci USA, 82 (10), 30633067.

20. Spira-Solomon,D.J., Allendorf,M.D., Solomon,E.I. (1986) Low-temperature magnetic circular dichroism studies of native laccase: confirmation of a trinuclear copper active site. J Am Chem Soc, 108 (17), 5318-5328.

21. Cole,J.L., Tan,G.O., Yang,E.K., Keith,O., Hodgson,O., Solomon,E.I. (1990) Reactivity of the laccase trinuclear copper active site with dioxygen: an X-ray absorption edge study. J Am Chem Soc, 112 (6), 2243-2249.

22. Palmer,A.E., Lee,S.K., Solomon,E.I. (2001) Decay of the peroxide intermediate in laccase: reductive cleavage of the 0-0 bond. J Am Chem Soc, 123 (27), 6591-6599.

23. Messerschmidt,A. and Huber,R. (1990) The blue oxidases, ascorbate oxidase, laccase and ceruloplasmin. Modelling and structural relationships. Eur J Biochem, 187 (2), 341-352.

24. Kumar,S.V.S., Phale,P.S., Durani,S., Wangikar,P.P. (2003) Combined sequence and structure analysis of the fungal laccase family. Biotechnol Bioeng, 83 (4), 386-394.

25. Reinhammar,D. (1984) Laccase. In: Copper Proteins and CopperEnzymes, (Lontie R., Ed.) CRC Press: Boca Raton, Fla, 3, 1-35

26. Shleev,S., Reimann,C.T., Serezhenkov,V., Burbaev,D., Yaropolov,A.I., Gorton,L., Ruzgas,T. (2006) Autoreduction and aggregation of fungal laccase in solution phase: Possible correlation with a resting form of laccase. Biochimie, 88 (9), 1275-1285.

27. Kumari,H.L. and Sirsi,M. 1972 Purification and properties of laccase from Ganoderma lucidum. Arch Microbiol, 84 (4), 350-357.

28. Xu,F. (1996) Oxidation of phenols, anilines, and benzenethiols by fungal laccases: correlation between activity and redox potentials as well as halide inhibition. Biochemistry, 35 (23), 7608-7614.

29. Slomczynski,D., Nakas,J.P. and Tanenbaum,S.W. (1995) Production and Characterization of Laccase from Botrytis cinerea. Appl Microbiol Biotechnol, 61 (3), 907-912.

30. Johannes,C., Majcherczyk,A. (2000) Natural mediators in the oxidation of polycyclic aromatic hydrocarbons by laccase mediator systems. Appl Environ Microbiol, 66 (2), 524-528.

31. Huddleston,S., Robertson,S., Dobson,C., KwongJF., Chamralambous.B. (1995) Structural and functional stability of horseradish peroxidase. Biochem Soc Trans, 23, 108.

32. Veitch,N., Smith,T. (2001) Horseradish peroxidase. Advances in inorganic chemistry, 51, 107-162.

33. Sontum,S.F., Case,D.A. (1985) Electronic structures of active site models for compounds I and II of peroxidase. J Am Chem Soc, 107, 4013-4015.

34. Dunford,H.B. (1982) Peroxidases, In Advances in Inorganic Biochemistry. Eichhorn, G. L., Marzilli, L. G., eds. Elsevier Biomedical: Amsterdam, 41-68.

35. Dunford,H.B., StilIman,J.S. (1976) On the function and. mechanism of action of peroxidases. Coord Chem Review, 19, 187-251.

36. Du,P., Axe,F.U., Loew,G.H., Canuto, S., Zerner,M.C. (1991) Theoretical study on the electric spectral of model compound II complexes of peroxidases. J Am Chem Soc, 113, 8614-8621.

37. Dunford,H.B. (1992) In Peroxidase in chemistry and biology, J.Everse, K.E.Everse, M.B.Grisham, eds. CRC Press: Boca Raton: Florida, 1-24.

38. Kim,B.B., Pisarev,V.V., Egorov,A.M. (1991) A comparative study of peroxidase from horseradish and Arthromyces ramosus as labels in luminol mediated chemiluminescent assay. Anal Biochem, 199, 1-6.

39. Nagano,S., Tanaka,M., Watanabe,Y. and Morishima,I. (1995) Putative hydrogen bond network in the heme distal site of horseradish peroxidase. Biochem Biophys Res Commun, 207,417-423.

40. Nagano,S., Tanaka,M., Ishimori,K., Watanabe,Y. and Morishima,I. (1996) Catalytic roles of the distal site asparagine-histidine couple in peroxidases. Biochemistry, 35, 14251-14258.

41. Tams,J.W., Welinder,K.G. (1991) In Biochemical, molecular and physiological aspects of plant peroxidases. Lobarzewski,J., ed. Imprimerie Nationale: Geneve, 111114.

42. Arnao,M.B., Acosta,M., delRio,J.A. and arcia-Canovas,F. (1990) Inactivation of peroxidase by hudrogen peroxide and its protection by a reductant agent. Biochim Biophys Acta, 1038, 85-89.

43. Hernandez-ruiz,J., Arnao,M.B., Hiner,A.N.P., Garcia-Canovas,F., Acosta,J.A. (2001) Catalase-like activity of horseradish peroxidase: relationship to enzyme inactivation by H202. Biochem J, 354, 107-114.

44. Arnao,M.B., Acosta,M., del Rio,J.A., Varon,R. and Garcia-Canovas,F. (1990) A kinetic study on the suicide inactivation of peroxidase by hydrogen peroxide. Biochim Biophys Acta, 1041, 43-47.

45. Frew,J.E., Jones,P.L. (1984) Structure and functional properties of peroxidases, and catalases. Adv Inorg Bioinorg Mech, 3, 176-212.

46. Acosta,J.A., Arnao,M.B., delRio,J.A., Garcia-Canovas,F. (1989) Kinetic characterization of the inactivation process of two peroxidase isoenzymes in the oxidation of indolyl-3-acetic acid. Biochim Biophys Acta, 996, 7-12.

47. Arnao,M.B., Sanchez-Bravo,J., Acosta,J.A. (1993) In Plant peroxidases Biochemistry and Physiology, Welinder,K.G., ed. University of Geneva: Geneva, 181-184.

48. Ator,M.A., DeMentellano,P.R.O. (1990) In The Enzymes, Sigman,D.S., Boyer,P.D., eds. Academic Press: San Diega, 213-282.

49. Uyama,H., Kobayashi,S. (1999) Enzymatic polymerization yields useful polyphenols. ChemTech , 29 (10), 22-28.

50. Akkara,J.A., Ayyagari,M.S.R., Bruno,F.F. (1999) Enzimatic synthesis and modificat ion of polymers in nonaqueous solvents. TIBTech, 17, 67-73.

51. Bruno,F.F., Nagarajan,R., Stenhouse,P., Yang,K., Kumar,J., Tripathy,S.K., Samuelson,L.A. (2001) Polymerization of water-soluble conductive polyphenol using horseradish peroxidase. J Macromol Sci, A38, 1417-1426.

52. Jin,Z., Su,Y., Duan,Y. (2001) A novel method of polyaniline synthesis with the immobilized horseradish peroxidase enzyme. Synth Met, 122, 237-242.

53. Mejias,L., Reihmann,M.H., Sepulveda-Boza,S., Ritter,H. (2002) Horseradish or Soybean Peroxidase. Macromol Biosci, 2,24-32.

54. Sakharov,I.Y,, Vesga,M.K, Galaev,I.Y., Sakharova,I.V., Pletjushkina,O.Y. (2001) Peroxidase from leaves of royal palm tree Roystonea regia: purification and some properties. Plant Sci, 161, 853-860.

55. Alpeeval.S., Niculescu-NistorM., LeonJ.C. (2005) Palm tree peroxidase-based biosensor with unique characteristics for hydrogen peroxide monitoring. Biosensors and Bioelectronics, 21 (5), 742-748/

56. Shirakawa,H., Louis,E.J., McDiarmid,A.G., Chiang,C.K., Heeger,A.J. (1977) Synthesis of electrically conducting organic polymers halogen derivatives of polyacetylene (CH)X. J Chem Soc, Chemical Community, 16, 578-580.

57. McDiarmid,A.G., Chiang,C.K., Halpern,M., Huang,W.S., Mu,S.L., Somasiri,N.L.D., Wu,W., Yaniger,S.I. (1985) Polyaniline: Interconversion of Metallic and. Insulating Forms. Mol Cryst Liq Cryst, 121, 173.

58. Anand,J., Sathyanara,D.N., Palaniappan,S. (1998) Conducting polyaniline blends and composites. Prog Polym Sci, 23, 993-1018.

59. Nicolas-Debarnot,D., Poncin-Epaillard,F. (2003) Polyaniline as a new sensitive layer for gas sensors. Anal Chim Acta, 475, 1-15.

60. Tawde,S., Mukesh,D., Yakhmi,J.V. (2002) Redox behavior of polyaniline as influenced by aromatic sulphonate anions: cyclic voltammetry and molecular modeling. Synth Met, 125, 401-413.

61. Malinauskas,A. (2001) Chemical deposition of conducting polymers. Polymer, 42, 3957-3972.

62. Syed,A.A., Dinesan,M.K. (1991) Polyaniline-A novel polymeric material. Talanta, 38,815-837.

63. Abrantes,L.M., Correia,J.P., Savic,M., Jin,G. (2001) Structural modifications during conducting polymer formation: an ellipsometric study. Electrochim Acta, 46, 31813187.

64. Pron,A. and Rannou,P. (2002) Processible conjugated polymers: from organic semiconductors to organic metals and superconductors. Prog Polym Sci, 27, 135-190.

65. Heeger,A.J. (2002) Semiconducting and metallic polymers: the fourth generation of polymeric materials. Synth Met, 125, 23-42.

66. Kim,B.-J., Oh,S.-G., Han,M.-G. and Im,S.-S. (2001) Synthesis and characterization of polyaniline nanoparticles in SDS micellar solutions. Synth Met, 122, 297-304.

67. Yue,J., Wang,J.H., Cromark,K.R., Epstein,J.A. and MacDiamid,A.G. (1991) Effect of sulfonic acid group on polyaniline backbone. J Am Chem Soc, 113, 2665-2671.

68. Haba,Y., Segal,E., Narkis,M., Titelman,G.I. and Siegmann,A. (1999) Polymerization of aniline in the presence of DBSA in a aqueous dispersion. Synth met, 106, 59-66.

69. Hopkins,A.R., Rasmussen,P.G. (1996) Characterization of Solution and Solid State Properties of Undoped and Doped Polyanilines Processed from Hexafluoro-2-propanol. Macromol, 29, 7838-7846.

70. Krinichnyi,V.I., Konkin,A.L., DevasagayamJP., Monkman,A.P. (2001) Multifrequency EPR study of charge transport in doped polyaniline. Synth Met, 119, 281-282.

71. Rao,P.S., Anand,J., Palaniappan,S., Sathyanarayana,D.N. (2000) Effect of sulphuric acid on the properties of polyaniline-HCl salt and its base. Eur Polymer J, 36, 915921.

72. Hatchett,D.V., Josowicz,M., Janata,J. (1999) Acid Doping of Polyaniline: Spectroscopic and Electrochemical Studies. J Phys Chem, 103, 10992-10998.

73. Hu,H., Saniger,J.M., Banuelos,J.G. (1999) Thin films of polyaniline-polyacrylic acid composite by chemical bath deposition. Thin Solid Films, 347, 241-247.

74. Ryu,K.S., Moon,B.W., Joo,J., Chang,S.H. (2001) Characterization of highly conducting lithium salt doped polyaniline films prepared from polymer solution. Polymer, 42, 9355-9360.

75. Han,M.G., Lee,Y.J., Byun,S.W., Im,S.S. (2001) Physical properties and thermal transition of polyaniline film. Synth Met, 124, 337-343.

76. Langeveld-Voss,B.M.W., Janssen,R.A.J., Meijer,E.M. (2000) On the origin of optical activity in polythiophenes. J Mol Struct, 521, 285-301.

77. Stejskal,J., Sapurina,I., Trchova,M., Konyushenko,E.N., Holler,P. (2006) The genesis of polyaniline nanotubes. Polymer, 47, 8253-8262.

78. Li,D., Kaner,R.B. (2006) Shape and Aggregation Control of Nanoparticles: Not Shaken, Not Stirred. J Am Chem Soc, 128, 968-975.

79. Zhou,S., Wu,T., Kan,J. (2007) Effect of methanol on Morphology of Polyaniline. Eur Polym J, 43, 395-402.

80. Xing,Sh., Zhao,Ch., Jing,Sh., Wu,Y., Wang,Z. (2006) Morphology and gas-sensing behaviour of in situ polymerized nanostructered polyaniline films. Eur Polym J, 42, 2730-2735.

81. Thiyagarajan,M., Samuelson,L.A., Kumar,J., Cholli,A.L. (2003) Helical conformational specificity of enzymatically synthesized water-soluble conducting polyaniline nanocomposites. J Am Chem Soc, 125 (38), 11502-11503.

82. Chattopadhyay,K. and Mazumdar,S. (2000) Structural and conformational stability of horseradish peroxidase: effect of temperature and pH. Biochem, 39, 263-270.

83. Nagarajan,R., Tripathy,S., Kumar,J., Bruno,F.F. and Samuelson,L.A. (2000) An enzymatically synthesized conducting molecular complex of polyaniline and polyvinyl phosphonic acid). Macromol, 33, 9542-9547.

84. Feng,F. (1996) Oxidation of phenols, anilines and benzenethiols by fungal laccases: correlation between activity and redox potentials as well as halide inhibition. Biochem, 35, 7608-7614.

85. Rannou,P., Gawlicka,A., Berner,D., Pron,A. and Nechtschein,M. (1998) Spectroscopic, structural and transport properties of conductive polyaniline processed from fluorinated alcohols. Macromol, 31, 3007-3015.

86. Su,S.-S. and Kuramoto,N. (2000) Synthesis of processable polyaniline complexed with anionic surfactant and its conducting blends in aqueous and organic system. Synth Met, 108, 121-126.

87. Chen,S.-A. and Hwang,G.-W. (1996) Structure characterization of self-cid-doped sulfonic acid ring-substituted polyaniline in its aqueous solutions and as solid films. Macromol, 29,3950-3955.

88. Ghosh,P., Siddhanta,S.K. and Chakrabarti,A. (1999) Characterization of polyvinyl pyrrolidone) modified polyaniline prepared in stable aqueous medium. Eur Polym J, 35, 699-710.

89. Mav,I. and Zigon,M. (2001) Chemical copolymerization of aniline derivatives: preparation of fully substituted PANI. Synth Met, 119, 145- 146.

90. Yin,W. and Ruckenstein,E. Water-soluble self-doped conducting polyaniline copolymer. Macromol, 33, 1129-1131.

91. Varela,H., de Albuquerque Maranhao,S.L., Mello,R.M.Q., Ticianelli,E.A. and Toressi,R.M. (2001) Comparisons of compensate process in aqueous media of polyaniline and self-doped polyanilines. Synth Met, 122, 321-327.

92. Koul,S., Dhawan,S.K., Chandra,R. (2001) Compensated sulphonated polyaniline-correlation of processibility and crystalline structure. Synth Met, 124, 295-299.

93. Shreepathi,S., Holze,R. (2006) Spectroelectrochemistry and Preresonance Raman Spectroscopy of Polyaniline-Dodecylbenzenesulfonic Acid Colloidal Dispersions. Langmuir, 22, 5196-5204.

94. Allenmark,S. (2003) Induced circular dichroism by chiral molecular interaction Chirality, 15 (5), 409-422.