Ферментативный катализ синтеза душистых веществ класса сложных эфиров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.15, кандидат наук Джамай Матаз Дж Джамай

• Джамай Матаз Дж Джамай
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Джамай Матаз Дж Джамай

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Душистые вещества

1.2 Классификация душистых веществ

1.3 Получение сложных эфиров

1.4. Липазы. Свойства липаз, особенности каталитического действия

1.4.1. Липазы. Общая характеристика

1.4.2. Специфичность липаз

1.4.3. Источники липаз

1.4.4. Иммобилизация липаз

1.4.5. Неводные системы липолитического катализа

1.4.6. Липазы в реакциях этерификации и переэтерификации

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы

2.1.1 Ферментные препараты

2.1.2 Кислоты

2.1.3 Спирты

2.1.4 Растворители

2.2 Методы исследования

2.2.1 ИК-спектроскопия и рефрактометрия

2.2.2 Определение активности липазы (модифицированный метод Ота, Ямада)

2.2.3 Ферментативный катализ синтеза бутиратов сивушного масла в органических растворителях

2.2.4 Определение оптимальных условий ферментативного синтеза сложных эфиров алифатического ряда

2.2.5 Ферментативный катализ синтеза душистых веществ бутиратов алифатического ряда с помощью панкреатической липазы

2.2.6 Влияние ацил-доноров, алифатических кислот, на ферментативную

активность липазы Lipozyme CalB в процессах этерификации бутилового и бензилового спиртов

2.2.7 Сравнение этерифицирующей способности некоторых липаз

2.2.8 Исследование возможности рециклизации при применении ферментного

препарата панкреатической липазы в синтезе бутилбутирата

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

3.1 Ферментативный катализ синтеза бутиратов сивушного масла с использованием панкреатической липазы и липазы дрожжей Candida rugosa

3.2 Определение оптимальных условий энзиматического синтеза алифатических

сложных эфиров

3.2.1 Определение возможности рециклизации - многократного использования ферментного препарата панкреатической липазы в процессах синтеза бутилбутирата

3.3 Влияние спиртовых субстратов при ферментативном катализе синтеза алифатических сложных эфиров масляной кислоты

3.4 Влияние ацил-доноров на ферментативную активность липазы Lipozyme CalB в процессах этерификации

3.5 Сравнение этерифицирующей способности некоторых липаз

ГЛАВА 4. РАСЧЁТ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ РЕАКЦИИ ЭТЕРИФИКАЦИИ В СРЕДЕ ОРГАНИЧЕСКОГО РАСТВОРИТЕЛЯ ГЕКСАН

4.1 Анализ полученных констант скоростей реакций этерификации бутилового спирта алифатическими кислотами

4.2 Анализ констант скоростей реакций этерификации бензилового спирта алифатическими кислотами при участии ферментного препарата Lipozyme CalB

4.3 Расчёт кинетических данных при сравнении этерифицирующей способности ферментов, Novozym 435, Novozym 40086, Lipozyme TLIM

4.4 Расчет кинетических параметров ферментативного катализа синтеза бутиратов

сивушного масла

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

106

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ферментативный катализ синтеза душистых веществ класса сложных эфиров»

Актуальность работы.

В настоящее время в мире наблюдается тенденция замены химических катализаторов на ферментативные, поскольку они обладают рядом преимуществ: вы-

о

сокая специфичность ферментов, низкая температура процессов (обычно до 50 С), простота технологического оформления, практическое отсутствие побочных процессов. Это делает ферментативные методы не только высокоэкологичными и энергетически выгодными, но и позволяет получать продукты высокой чистоты, не требуя значительных затрат на их очистку. В Европе продукты, полученные с помощью таких биокатализаторов, стали относить к «зеленым» продуктам, т.е. идентичным природным, что естественно повысило к ним интерес и востребованность среди населения.

Среди недостатков ферментативного синтеза обычно указывают высокую цену ферментных препаратов и продолжительность процессов во времени.

Интенсивное исследование ферментов в последние годы и появление на рынке более дешевых ферментных препаратов делает перспективным их использование в промышленных масштабах. Кроме того, иммобилизация ферментов подразумевает их многократное использование (рециклизацию), что удешевляет их применение. Одними из наиболее привлекательных ферментов для широкой практической реализации процессов в органическом синтезе являются липазы.

В последние годы резко возрос интерес к ферментативному катализу с помощью липаз к получению сложных эфиров алифатических кислот и спиртов, многие из которых являются душистыми веществами. Они находят применение в парфюмерии, при создании отдушек для синтетических моющих средств, косметических продуктов, товаров бытовой химии и медицинских препаратов для наружного использования.

Степень разработанности темы исследования. В литературе отсутствуют данные о возможности использования ферментативного синтеза эфиров си-

вушных масел, что позволит получать душистые вещества для технических целей из отхода спиртового производства. В известных литературных данных по изучению влияния доноров и акцепторов ацильных групп на ферментативный процесс, не было проведено систематического исследования для использованных нами ферментных препаратов влияния этих групп (спиртовых и кислотных субстратов) при синтезе сложных эфиров алифатического ряда, что позволит в дальнейшем осознанно подходить к выбору необходимых субстратов. Известно много работ, посвященных изучению ферментативного синтеза в неводных средах, в том числе и синтез сложных эфиров, однако нами не было обнаружено кинетических моделей, показывающих, что в процессе ферментативного катализа этерификации в неводных средах одновременно протекают три процесса: эте-рификация, гидролиз образовавшегося эфира и автокатализ.

Цель работы: выявить кинетические закономерности ферментативных каталитических превращений с использованием промышленных липаз как альтернативы химическим катализаторам для процесса этерификации при синтезе душистых веществ из класса сложных эфиров алифатического ряда.

Для достижения цели поставлены следующие задачи:

1. Выяснить влияние органических растворителей и основных параметров процесса на ферментативный синтез бутиратов сивушного масла в присутствии панкреатической липазы и липазы из дрожжей Candida rugosa.

2. Определить оптимальные условия для проведения процесса этерификации алифатических производных в присутствии ферментов: Lipozyme TLIM, Novozym 40086, Novozym 435, на примере синтеза бутилбутирата и бутилпро-пионата.

3. Определить возможность повторного использования ферментного препарата панкреатической липазы (рециклизацию) в процессах синтеза бутилбути-рата.

4. Выяснить влияние спиртовых субстратов ряда: (С4) н-бутиловый, (изо-С4) изобутиловый, (С5) н-амиловый, (изо-С5) изоамиловый, (С7) н-гептиловый, (С8) н-октиловый, (Си) н-ундециловый, как акцепторов ацильных групп на фер-

ментативный синтез алифатических сложных эфиров масляной кислоты в присутствии фермента панкреатическая липаза .

5. Исследовать влияние природы алифатических кислот ряда: (С2) уксусная, (С3) н-пропионовая, (С4) н-масляная, (С5) н-валериановая, (С6) н-капроновая, (С8) н-каприловая, как доноров ацила на процесс ферментативной этерификации бутилового и бензилового спиртов в присутствии фермента Lipozyme CalB.

6. Сравнить этерифицирующую способность следующих липаз: Novozym 435, Novozym 40086, Lipozyme TLIM, Lipozyme CalB и панкреатическая липаза на примере синтеза эфиров бутилбутирата, бутилпропионата и бензилпропионата.

7. Провести расчет кинетических параметров исследуемых процессов методом моделирования с использованием модифицированного способа Рунге-Кутта-Мерсона.

Научная новизна работы.

1. Впервые установлено, что панкреатическая липаза и липаза из дрожжей Candida rugosa могут эффективно катализировать процесс синтеза сложных эфиров масляной кислоты со спиртами сивушных масел в среде органического растворителя - гексана.

2. Показано, что процесс ферментативной этерификации в присутствии фермента панкреатической липазы масляной кислоты алифатическими спиртами ряда:(С4) н-бутиловый, (изо-С4) изобутиловый, (С5) н-амиловый, (изо-С5) изо-амиловый, (С7) н-гептиловый, (С8) н-октиловый, (С11) н-ундециловый, затрудняется с увеличением длины и разветвленности углеводородного радикала спирта.

3. Найдено, что ацилирующая способность доноров ацила алифатических кислот ряда С2-С8 при ферментативной этерификации бензилового спирта с ферментным препаратом Lipozyme CalB снижается от уксусной до каприловой в соответствии с длиной углеводородной цепи. А при этерификации бутанола этими же алифатическими кислотами с ферментным препаратом Lipozyme CalB ацили-рующая способность кислот имеет более сложный характер и определяется не только длиной углеводородной цепи кислоты, но и другими факторами, в частно-

сти, возможно, величиной pКа кислот, их различной растворимостью в использованных средах, другим сродством фермента к субстрату.

4. Обнаружен эффект увеличения ферментативной активности панкреатической липазы при рециклах в синтезе бутилбутирата в гексане (количество рециклов 5-10). Увеличение конверсии субстрата зависит от первоначальной концентрации фермента в реакционной среде и составляет от 6 до 15 % при концентрации фермента 5 мг/мл, а при малых концентрациях фермента (2,6 мг/мл) в 1,8-1,5 раза по сравнению с исходной.

5. Построен ряд эффективности этерифицирующей способности липаз: Novozym 435, Novozym 40086, Lipozyme ^Ш, Lipozyme CalB на примере синтеза эфиров пропионовой и масляной кислот в равных условиях проведения процесса.

Теоретическая и практическая значимость работы. Применение метода моделирования для изучения кинетики ферментативного катализа взаимодействия алифатических кислот и спиртов в неводных средах показало, что все используемые липазы одновременно катализируют протекание трех процессов - прямая этерификация, обратная реакция гидролиза образовавшегося эфира и автокатализ, который обеспечивается ферментом, активированным водой, выделившейся в процессе первичной этерификации. Это открывает новый взгляд на процессы ферментативной этерификации в неводных средах, позволяющий объяснить, например, повышение активности фермента при его рециклизации.

Расширение области применения известных ферментов. Использование ферментативных методов получения душистых веществ в промышленных условиях позволяет повысить уровень технологического процесса, снижая экологические и экономические нагрузки, повышая чистоту целевых продуктов.

Проведенное сравнение этерифицирующей способности некоторых липаз может быть использовано при принятии решения о выборе ферментного препарата для получения сложных эфиров алифатического ряда, широко применяемых в качестве пищевых ароматизаторов и отдушек в производстве моющих средств.

Методы исследования и степень достоверности результатов. В работе использованы физико-химические методы исследования, в том числе хроматография, ИК-спектроскопия, рефрактометрия. Применены стандартные экспериментальные методы определения ферментативной активности и определение конверсии субстратов методом кислотно-основного титрования. Достоверность результатов обеспечивалась многократным повторением экспериментов и статистической обработкой полученных результатов с использованием программы «^аЙБЙса 6.0». Достоверность кинетического моделирования подтверждалась расчетом критерия Пирсона.

Апробация работы. Результаты работы были доложены на Международной научно-практической конференции «Биотехнологии в комплексном развитии регионов» (Москва, 17-20 марта 2016); на Международной научной конференции «Вопросы науки и практики МДК-2018» (Москва, 2018).

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Проведенное исследование соответствует формуле специальности 02.00.15 - Кинетика и катализ по пунктам 2 и 3.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 2 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК для размещения материалов диссертаций, 3 статьи в иностранных изданиях, 2 тезиса доклада на научных конференциях.

Объём и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения (4 главы), выводов и библиографического указателя (108 наименований источников). Работа изложена на 116 страницах машинописного текста, включает в себя 22 таблицы и 47 рисунков.

Личный вклад автора состоит в проведении экспериментальных исследований, интерпретации и обобщении полученных результатов, а также в формулировке выводов, оформлении статей и диссертационной работы.

Автор выражает глубокую благодарность доценту КНИТУ Воробьеву Е.С. за неоценимую помощь в проведении расчетов по моделированию.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Душистые вещества

Душистыми веществами называют летучие соединения, которые обладают приятным ароматом и используются в косметике, парфюмерии, при производстве моющих средств и продуктов питания [1].

В природе обнаружено около 10 000 летучих веществ, которые обладают приятным органолептическим воздействием, таким как фруктовый, цветочный, пряный, сливочный или ореховый, и придают его продуктам питания, напиткам, зубным пастам, ароматизаторам парфюмерных изделий [2].

Аромат и вкус натуральных пищевых продуктов обусловлен естественно присутствующими в них вкусоароматическими веществами. Аромат некоторых плодов образуется только при их повреждении, например, при разрезании, измельчении или разжевывании.

Вкусоароматические вещества, используемые при производстве ароматизаторов, представлены многими классами органических соединений. К ним относят также ряд неорганических соединений, таких как аммиак, сероводород, сульфид аммония и некоторые другие.

Значительное место среди душистых веществ занимают сложные эфиры карбоновых кислот.

Когда говорят о вкусе, обусловленном вкусоароматическими веществами, имеют в виду так называемые комплексные вкусы (фруктовые, мясные, ягодные, грибные, рыбные) и один из основных вкусов - горький.

Употребляя далее термин вкус и аромат или просто аромат пищевого продукта, подразумевается вкус, ощущаемый человеком при разжевывании пищевого продукта или при попадании в рот. Это соответствует англоязычному термину flavor (этот термин введен в российский стандарт) [3].

Кроме того, было показано, что ароматические вещества обладают не только сенсорными свойствами, но и другими желательными свойствами, такими как:

- противомикробные (ванилин, компоненты эфирного масла),

- противогрибковые и противовирусные (некоторые алканолиды),

- антиоксидантные (эвгенол, ванилин),

- снижающие количество соматических жиров (нооткатон),

- регулирующие артериальное давление ( 2-[Е]-гексанал),

- противовоспалительные (1,8-цинеол).

Это ставит некоторые душистые вещества рядом с фармацевтическими препаратами в класс активных веществ, хорошо зарекомендовавших себя в биопроцессах [2].

В последние десятилетия душистые композиции приобрели ещё одну функцию, получившую название ароматерапевтической. Основа самой этой функции заключается в том, что большое число индивидуальных душистых веществ, а также эфирных растительных масел, которые имеют сложный химический состав, обладает биологической активностью разнообразного характера. Многочисленные ранние попытки использования обонятельных ощущений для профилактики и лечения заболеваний человека оформились в новое современное направление - ароматерапию, которая по своим методам и приёмам лечения заболеваний пока занимает промежуточное место между народной и официальной медициной.

Источниками душистых веществ изначально были природные продукты. Использовались, в основном, методы экстракции из растений.

В начале XVII в. в Европе эфирные масла из растений выделяли методом перегонки с водяным паром. Но лишь в середине XVIII в. в городе Кельн впервые был получен душистый одеколон - главное изделие спиртовой парфюмерии.

Вплоть до XX в. парфюмерные изделия готовили только на основе природных эфирных масел.

В начале XX в. появились первые чисто синтетические душистые вещества. Начиная с 1930-х годов возникла новая отрасль - промышленность синтетических душистых веществ, бурное развитие которой привело к их массовому производству, как по ассортименту, так и по масштабам. В первую четверть века был создан ряд популярных духов. Духи отличаются от одеколонов, туалетной воды и других душистых освежающих средств сложностью своего запаха и композиции. Чем проще запах парфюмерной композиции, тем она дальше от названия «духи»

[3].

За весь прошлый век удалось синтезировать не только все важнейшие душистые компоненты натуральных масел, но и получить множество ценных душистых веществ. Синтезы подобных индивидуальных веществ позволяют не только удовлетворять потребность широких кругов населения, но так же решить и экологические проблемы, одной из важнейшей которых является сохранение от полного исчезновения редких растений и животных, которые ранее истреблялись при заготовлении ценных для парфюмерии и косметики пахучих веществ [4].

К душистым веществам предъявляются многочисленные и жёсткие требования.

1. Душистое вещество должно обладать выраженным функциональным свойством - иметь сильный и стабильный приятный запах.

2. Поскольку душистое вещество имеет контакт с кожей человека и поступает в его организм через дыхательные пути, то следующим очень важным требованием является нетоксичность для человека душистого соединения.

3. Душистые вещества должны иметь достаточно высокую стабильность при их хранении.

4. Вещества, используемые в качестве душистых добавок, должны иметь низкую себестоимость и быть доступными на рынке. Производство должно отличаться простотой, малой трудоемкостью и энергозатратами.

В настоящее время для создания, производства и внедрения новой марки духов расходуется до 50 млн. долларов. На себестоимость многих духов влияет использование фиксаторов запахов, которые уменьшают испарение душистых

компонентов. Это позволило снизить употребление духов каждым индивидуумом и в то же время продлить сохранность благовонного запаха.

Рынок душистых парфюмерно-косметических изделий оценивался в 2003 году суммой продаж почти 200 млрд. долларов. Прогнозируемый ежегодный рост на последующие годы составляет почти 5 %. Стоит также отметить, что в настоящее время одна треть мировой парфюмерной продукции производится во Франции [1].

1.2 Классификация душистых веществ

Душистые вещества можно классифицировать по четырём признакам:

- по источнику получения;

- по химическому строению;

- по запаху;

- по направлению использования.

Строгой научной классификации душистых веществ не существует, и для их описания используют различную терминологию. Тем не менее, для идентификации летучих органических соединений созданы приборы, названные «электронным носом».

При отнесении конкретного запаха к определённой группе присутствует фактор субъективности.

Оказалось, что по запаху душистые вещества классифицировать достаточно трудно. Поскольку часто запах одного и того же вещества может меняться в зависимости от его концентрации.

В конце 19 века предложили следующую классификацию запахов:

1) эфирные (ацетоновые);

2) пряные (камфарные, хвойные, гвоздичные, ментольные, цитрусовые, лавандовые, коричные);

3) благовонные (фиалковые, жасминовые, ванильные);

4) амброво-мускусные;

5) чесночные;

6) горелые;

7) козлиные (каприловые, запахи сыра, мочи, пота, спермы);

8) отталкивающие;

9) зловонные (фекалии, гнильё).

В 1916 году для классификации запахов была создана система, представленная в виде пятигранной призмы. В вершинах призмы располагаются шесть базовых запахов, а в точках, лежащих на гранях, на рёбрах и внутри призмы, -запахи, составленные из двух, трёх, четырёх и шести основных запахов соответственно.

Существуют классификации ароматов чисто «парфюмерные». Так, классификация парфюмерного комитета Франции, созданная в 1999 году, включает 7 групп и ряд подгрупп запаховых композиций [3]:

1. Цитрусовые (пять подгрупп — цветочные, пряные, древесные и т.д., например цитрусово-шипро-цветочные духи «Eau Sauvage» Кристиана Диора).

2. Цветочные (девять подгрупп - моно- и полицветочные лавандовые, альдегидные, фруктовые, зелени, морские, древесные и т.д., например цветочный букет «Lairdu Temps» Нины Риччи).

3. Фужерные или папоротниковые (пять подгрупп - амбровые, цветочные, пряные, фруктовые, ароматические и т.д., например «Enigme» Пьера Кардена).

4. Шипровые (семь подгрупп - цветочные, фруктовые, альдегидные, ароматические, кожаные, зелени и т.д., например шипрово-зелёный «Ветивер» фабрики «Свобода» и шипрово-цветочные «Donna Trussardi» Труссарди).

5. Древесные (восемь подгрупп - цитрусовые, хвойные, амбровые, пряные, ароматические, кожаные, морские, фруктовые, например древесные «Santalde Myscorc» Шисейдо).

6. Амбровые (шесть подгрупп - цветочные, пряные, древесные, цитрусовые, фруктовые, например цветочно-фруктово-амбровые - «Красная Москва» фабрики «Свобода», «Fou d'Elle» Лапидуса).

7. Кожаные (три подгруппы - цветочные, табачные и т.д., например «Derby» Герлена).

По направлению использования душистые вещества подразделяют на

- вещества парфюмерного назначения,

- вещества косметического назначения,

- вещества-отдушки,

- вещества, фиксирующие запахи.

По источнику получения душистые вещества делят на природные (ментол, ванилин, кумарин), синтетические и полусинтетические (получаемые модификацией природных веществ).

По строению душистые вещества классифицируют на органические, органические природные соединения (натуральные душистые вещества, входящие в состав эфирных масел), синтетические производные алифатического, алицикличе-ского, ароматического и гетероциклического рядов [1].

Для пищевой промышленности предложен способ классификации не по химическим классам, а по вкусоароматическим характеристикам душистых веществ. Эта классификация в виде «колеса ароматов» приведена на рисунке 1 [3] и иллюстрирует некоторые основные взаимосвязи органолептических показателей вкусоароматических соединений.

В центре изображена матрица ароматизатора, которая включает ингредиенты, необходимые для оптимального проявления свойств вкусоароматических веществ, входящих в его состав. Причем, вкусоароматические вещества обычно в чистом виде не применяются в качестве пищевых ароматизаторов. Ароматизаторов, которые являются индивидуальными химическими соединениями, совсем немного. Это ванилин, этилванилин, ацетоин, диацетил и ментол. Сюда же можно отнести мальтол (Е636) и этилмальтол (Е637), которые применяются как пищевые добавки - усилители вкуса и аромата, а также хинин, добавляемый в напитки тоники. В странах Евросоюза мальтол и этилмальтол рассматриваются как ароматизаторы и не относятся к пищевым добавкам (пищевых добавок с кодами Е636 и Е637 в странах ЕС нет; мальтол и этилмальтол в соответствии с

международной классификацией пищевых добавок имеют коды INS 636 и INS 637 соответственно).

Вокруг матрицы ароматизатора располагаются 16 сегментов, соответствующих отдельным вкусоароматическим тонам, каждый из которых описывается несколькими типичными примерами, рисунок 1.

Рисунок 1 - Колесо ароматов

Расположение сегментов таково, что смежные сегменты соответствуют по характеристикам вкусоароматическим тонам. Восприятие аромата может быть условно подразделено на ряд «чистых» тонов, а затем восстановлено путем компоновки этих тонов в нужной пропорции в подходящей матрице ароматизатора.

Корректное описание профиля ароматизатора является по существу рецептом его реконструкции. «Колесо ароматов» позволяет получить некоторое представление о наиболее важных вкусоароматических тонах и химических соединениях [3].

Среди ароматизаторов большое место занимают сложные эфиры кислот и спиртов. В регистр ароматизаторов в европейских странах входит 793 сложных эфира, в российский регистр входит только 666 ароматизаторов этого класса [3].

Сложные эфиры кислот и спиртов широко распространены в природе. В состав большинства эфирных масел, применяющихся в косметической, парфюмерной и пищевой промышленности, входят эфиры низших кислот.

Ароматные запахи пахучих растений - листьев, цветов, ягод, плодов и коры - обычно создаются целым «букетом» веществ [6]. В состав подобного «букета» могут входить десятки, а иногда и сотни соединений. Изредка основной тон аромата определяется одним-двумя веществами. Некоторые легколетучие эфиры применяют также в качестве растворителей [7].

1.3 Получение сложных эфиров

Получают сложные эфиры главным образом этерификацией.

Этерификация - это реакция образования сложных эфиров при взаимодействии кислот и спиртов:

О О II 1 II К-С-ОН + К-ОН --К-С-О + Н2О

-Н2О

Этерификации сопутствует обратный процесс - гидролиз сложных эфи-ров. Он состоит в том, что при взаимодействии сложного эфира с водой образуется кислота и спирт. Поэтому при получении эфиров из реакционной смеси необходимо удалять воду. В ряде случаев химическое равновесие можно сдвинуть вправо иным способом, например, путем использования большего избытка одного из реагентов. Так, применяя большой избыток кислоты, можно заставить полностью прореагировать весь спирт, и, напротив, применяя избыток спирта,

полностью использовать всю кислоту. Реакция этерификации протекает при действии катализаторов [8]. В качестве катализаторов обычно используют кислоты - серную, соляную (или газообразный хлористый водород), арилсульфо-кислоты, сульфокатиониты, трифторид бора и другие.

Важным методом синтеза тех эфиров, которые затруднительно получить прямой этерификацией, является переэтерификация, где в качестве катализаторов применяют обычно основания. Переэтерификация может протекать при взаимодействии сложных эфиров с другими сложными эфирами, карбоновыми кислотами или спиртами:

0

1 И 2 3

R-C-OR2 + R3—OH O O

1 I 2 3 II

R-C-OR +R-C-OH O O

1 II 2 3 II

R-C-OR +R-C-OR

O

II 3 2

R-C-OR3 + HO-R2

00

3 II 2 1 II

R-C-OR + R-C-OH OO

1 I 3 II 2

R-C-OR + R-C-OR

Все эти процессы обратимы.

Используют также и другие подходы: действие на спирты ангидридами и хлорангидридами карбоновых кислот (в присутствии оснований); взаимодействие карбоновых кислот с олефинами (повышенное давление, кислый катализ); карбонилирование спиртов в присутствии олефинов (катализ карбонилами кобальта и рения) [1, 9-11].

Однако в последние годы рынок начали завоевывать биотехнологические ароматизаторы и среди них важное место занимают сложные эфиры карбоновых кислот. Преимущества биокатализа перед химическим синтезом или экстракцией, очевидны - простота технологии, экологичность, снижение энергетических затрат, чистота целевого продукта. В Европе, учитывая стремление потребителей к «естественным» натуральным продуктам, многие ароматизаторы маркируются этикеткой «естественный». Европейское регулирование ароматизаторов (ЕЕС №1334/2008) определяет в статье 3 (2) с): «Природный ароматизатор -

вкусовое вещество, полученное с помощью соответствующих физических, ферментативных или микробиологических процессов из материала растительного, животного или микробиологического происхождения в неочищенном состоянии, либо после обработки для потребления человеком одним или несколькими традиционными процессами приготовления пищи» [2].

Наиболее подходящими ферментными препаратами для реализации процесса этерификации являются липазы.

1.4 Липазы. Свойства липаз, особенности каталитического действия

Липазы являются одним из наиболее востребованных ферментов. Они катализируют гидролиз триглицеридов до ди- и моноглицеридов, жирных кислот и глицерина; катализируют этерификацию глицерина жирными кислотами и ряд других реакций в системах с низкой активностью воды.

В отличие от многих ферментов липазы обладают чрезвычайно широкой субстратной специфичностью и способностью воспринимать широкий спектр структурно разнообразных субстратов. Вследствие этого липазы имеют разнообразные области практического применения в промышленности, фармацевтики, биохимии и биотехнологии [12-18].

1.4.1 Липазы общая характеристика

Липазы более других представителей класса гидролаз обладают способностью катализировать различные типы реакций. Эти типы следующие [19]:

1. Гидролиз эфиров

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Джамай Матаз Дж Джамай, 2019 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Солдатенков, А.Т. Основы органической химии душистых веществ для прикладной эстетики и ароматерапии: уч. пособие для вузов / А.Т. Солдатенков, Н.М. Колядина, Ле Туан Ань и др. — М.: Академкнига, 2006. - 240 с.

2. Berger, R.G. Biotechnology of flavors - the next generation / R.G. Berger // Biotechnol Lett. - 2009. - № 31. - Р. 1651-1659.

3. Смирнов, Е.В. Пищевые ароматизаторы. Справочник. / Е.В. Смирнов — СПб.: «Профессия», 2008. - 736 с.

4. Хейфиц, Л.А. Душистые вещества и другие продукты для парфюмерии / Л.А. Хейфиц, В.М. Дашунин. - М.: Химия, 1994. - 226 с.

5. Welsh, F.W. Microbiological and enzymatic production of flavour and fragrance chemicals / F.W. Welsh, W.D. Muray, R.E. Williams // Critical Reviews in Biotechnology. -1989. - V. 9. - Р. 105-169.

6. Kwon, D.Y. Enantiomeric synthesis of (S)-2- methylbutanoic acid methyl ester, apple flavor, using lipases in organic solvent / D.Y. Kwon, Y.J. Hong, S.H.Yoon // J Agr Food Chem. - 2000. - V. 48, № 2. - Р. 524-530.

7. Gatfield, I.L. Enzymatic and microbial generation of flavours / I.L. Gatfield // Perfumer and Flavorist. -1995. - V. 20, № 5. - Р. 5-14.

8. Реутов, О.А. Органическая химия / О.А. Реутов, А.Л. Курц, К.П. Бутин. - М: Лаборатория знаний, 2017. - Т. 4. -726 с.

9. О'Брайен, Р. Жиры и масла. Производство, состав и свойства, применение / Р. О'Брайен. - СПб.: Профессия, 2007. -752 с.

10. Тюковкина, Н.А. Биоорганическая химия / Н. . Тюковкина, Ю.И. Бау-ков, С.Э. Зурабян. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2016. - 416 с.

11. Экспертиза масел и жиров и продуктов их переработки. Качество и безопасность / Под ред. В.М. Поздняковского / Е. П. Корнена [и др.]. - Новосибирск, 2009. - 384 с.

12. Hasan, F. Industrial applications of microbial lipases / F. Hasan, A.A. Shah, A. Hameed // Enzyme Microb. Tech. - 2006. - № 39. - Р. 235-251.

13. Gotor-Fernandez, V. Lipases: Uself biocatalysts for the preparation of pharmaceutical / V. Gotor-Fernandez, R. Brieva, V. Gotor // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2006. - № 40. - Р. 111-120.

14. Sharma, R. Production, purification, characterization and application of lipases / R. Sharma, Y. Christi, U.C. Banerjee // Biotechnol. Adv. - 2001.- 19. -Р. 627-662.

15. Jaeger, K. Lipases for biotechnology / K. Jaeger, T. Eggert // Curr. Opin. Biotech. - 2002. - № 13. - Р. 17-19.

16. Kapoor, M. Lipase promiscuity and its biochemical applications / M. Kapoor, M.N. Gupta // Process Biochem. - 2012. - № 47. - Р. 555-569.

17. Rodrigues, R.C. Lipase from Rhizomucor miehei as an industrial biocatalyst in chemical process / R.C. Rodrigues, R. Fernandez-Lafuente // J. Mol. Catal. B-Enzym. - 2010. - № 64. - Р. 1-22.

18. Divacar, S. Use of lipases in the industrial production of esters, in: J. Polaina, A.P. MacCabe (Eds.) / S. Divacar, B. Manohar // Industrial Enzymes. Structure, Function and Applications. - 2007. - Р. 283-300.

19. Кислухина, О.В. Биотехнологические основы переработки растительного сырья / О.В. Кислухина, И. Кюдулас. - Каунас: Технология, 1997.- 183 с.

20. Варфоломеев, С.Д. Каталитические центры гидролаз: структура и каталитический цикл / С.Д. Варфоломеев, И.А. Гариев, И.В. Упоров // Успехи химии. - 2005. - Т. 74, № 1. - С. 68-83.

21. Варфоломеев, С.Д. Активные центры гидролаз: основные типы структур и механизм катализа / С.Д. Варфоломеев, А.Е. Пожитков // Вестн. Моск. Унта. Сер. 2. Химия. - 2000. - Т. 41, № 3. - С. 147-156.

22. Amperometric biosensor based on Prussian Blue-modified screen-printed electrode for lipase activity and triacylglycerol determination / I.B. Rejeb [et al.] // Analytica Chimica Acta. - 2007. - № 5. - Р. 1-8.

23. Singh, M. Transesterification of primary and secondary alcohols using Pseudomonas aeruginosa lipase / M. Singh [et al.] // Bioresource Technology. - 2008. - V. 99, I. 7. - P. 2116-2120. - https://doi.org/10.1016/j.biortech.2007.05.041

24. Безбородов, А.М. Липазы в реакциях катализа в органическом синтезе /

A.М. Безбородов, Н.А. Загустина // Прикладная биохимия и микробиология. -2014. - Т. 50, №4. - С. 347-373.

25. Holmquist, M. Alpha/Beta-hydrolase fold enzymes: structures, functions and mechanisms / M. Holmquist // Curr.Protein Pept.Sci. - 2000. - V. 1. - P. 209-235.

26. Brady, L. A serine protease triad forms the catalytic centre of a triacylglyc-erol lipase / L. Brady [et al.] // Nature. - 1990. - V. 343. - P. 767-770.

27. Овчинников, Ю.А. Биоорганическая химия: учеб. пособие / Ю.А. Овчинников. - М.: Просвещение, 1987. - 803 с.

28. Гамаюрова, В.С. Ферменты: Лабораторный практикум /

B.С. Гамаюрова, М.Е. Зиновьева. - СПб: Проспект Науки, 2011. - 256 с.

29. Kosugi, J. Continious hydrolysis of oil by immobilized lipase in a counter-current reactor / J. Kosugi, H. Tanaka, N. Tomizuka // Biotechnol Bioend. - 1990. -V. 36, № 6. - P. 617-622.

30. Yang, H. A new kind of immobilized lipase in organic solvent and its structural model / H. Yang, S. Cao, Z. Ding et al. // Biochem. Biophys. Res. Commum. -1994. - V. 200, № 1. - P. 83-88.

31. Ковалева, Т.А. Иммобилизация гидролитических ферментов на анио-нитах / Т.А. Ковалева, О.М. Кожокина, О.П. Багно, О.Д. Трофимова, А.С. Беле-нова // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2008. - Т. 8, В. 6. - С. 1035-1041.

32. Hsu, A. Immobilized lipase-catalyzed production of alkyl esters of restaurant grease as biodisel / A. Hsu, K. Jones, T. Foglia // Biotechnol Appl Biochem. -2002. - V. 36, № 3. - P. 181-186.

33. Liu, Y. Integration of purification with immobilization of Candida rugosa lipase for kinetic resolution of racemic ketoprofen / Y. Liu, J. Xu, H. Wu // Biotechnol. - 2004. - V. 110, № 2. - P. 209-217.

34. Gomes, F. Immobilization of lipase on chitin and its use in nonconventional biocatalysis / F. Gomes, E. Pereira, H. de Castro // Biomacromolecules. - 2004. - V. 5, № 1. - P. 17-23.

35. Soares, C. Studies on immobilized lipase in hydrophobic sol-gel / C. Soares, O. Dos Santos, H. De Castro // Appl Biochem Biotechnol. - 2004. - V. 113, №1-3. -P. 307-320.

36. Silva, J. Evaluation of the catalytic activity of lipases immobilized on chrys-otile for esterification / J. Silva, P. Jesus // An Acad Bras Cienc. - 2003. - V. 75, № 2. - P. 157-162.

37. Pereira, E. Kinetic studies of lipase from Candida rugosa: a comparative study between free and immobilized enzyme onto porous chitosan beads / E. Pereira, H. De Castro, F. De Moraes // Appl Biochem Biotechnol. - 2001. - V. 91-93. - P. 739-752.

38. Шеламова, С.А. Адсорбция липазы на гидрофобном носителе / С.А. Шеламова и др. // Биотехнология. - 2007. - № 3. - С. 52-75.

39. Шеламова, С.А. Механизмы гидролиза, синтеза и переэтерификации в пищевой биотехнологии: монография / С.А. Шеламова, Ю.А. Тырсин. - Воронеж, Научная книга, 2012. - 124 с.

40. Янышева, Н.В. Выделение, иммобилизация и практическое использование липолитического комплекса Rhizopus oryzae 1403: дис.... канд. хим. наук / Н.В. Янышева. - Москва, 2005. - 203 с.

41. Nakamura, K. Effect of solvent on lipase-catalyzed transesterification in organic media / K. Nakamura, M. Kinoshita, A. Ohno // Tetrahedron. - 1994. - V. 50. -P. 4681-4690.

42. Li, L. Lipase-catalyzed transesterification of rapeseed oils for biodiesel production with a novel organic solvent as the reaction medium / L. Li, W. Du, D. Liu, L. Wang, Z. Li // J. Mol. Catal. B-Enzym. - 2006. - №43. - P. 58-62.

43. Sharma, S. Organic solvent tolerant lipases and applications / S. Sharma, S.S. Kanwar // Sci. World J. - 2014. - P. 91-119.

44. Doukyu, N. Organic solvent-tolerant enzymes / N. Doukyu, H. Ogino // Biochem. Eng. J. - 2010. - № 48. - P. 270-282.

45. Ogino, H. Enzymes which are stable in the presence of organic solvents / H. Ogino, H. Ishikawa // J. Biosci. Bioeng. - 2001. - № 91. - P. 109-116.

46. Wang, Z. Study on Lipozyme TL IM-catalyzed esterification of oleic acid and glycerol for 1,3-diolein preparation / Z. Wang, Wei Du, L. Dai, D. Liu // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2016. - № 127. - Р. 11-17.

47. Шнайдер, К.Л. Ферментативный гидролиз растительных масел с использованием неводных сред: дис. ... канд. хим. наук / К.Л. Шнайдер. - Казань, 2009. - 136 с.

48. Kotogan, A. Characterization of transesterification reaction by Mucormycotina lipases in non-aqueous media / A. Kotogan, A. Kecskemeti, A. Szekeres, T. Papp, M. Chandrasekaran, S. Kadaikunnan, N. Alharbi, Cs. Vagvolgyi, M. Tako // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2016. - № 127. - Р. 47-55.

49. Dumont, T. Continuous synthesis of ethyl myristate by enzymatic-reaction in supercritical carbon dioxide / T. Dumont, D. Barth, M. Perrut // J. Supercrit. Fluids. - 1993. - № 6. - Р. 85-89.

50. Varma, M.N. Effect of chain length of alcohol on the lipase-catalyzed esterification of propionic acid in supercritical carbon dioxide / M.N. Varma, G. Madras // Appl. Biochem. Biotechnol. - 2010. - № 160.- Р. 2342-2354.

51. Aaltonen, O. Biocatalysis in supercritical CO2 / O. Aaltonen, M. Rantakyla // Chemtech. - 1991. - № 21. - Р. 240-248.

52. Hernandez, C.E. Direct lipase-catalyzed lipophilization of chlorogenic acid from coffee pulp in supercritical carbon dioxide / C.E. Hernandez, H.H. Chen, C.I. Chang, T.C. Huang // Ind. Crops Prod. - 2009. - № 30. - Р. 359-365.

53. Kondo, M. On-line extraction-reaction of canola oil with ethanol by immobilized in SC-CO2 / M. Kondo, K. Rezaei, F. Termelli, M. Goto // Ind. Eng. Chem. Res. - 2002. - № 41.- Р. 5770-5774.

54. Ramsey, E. Mini-Review. Green sustainable processes using supercritical fluid carbon dioxid / E. Ramsey, Q.B. Sun, Z.Q. Zhang, C.M. Zhang, W. Gou // J. Env. Sci. Chin. - 2009. - № 21. - Р. 720-726.

55. Escandell, J. Enzymatic synthesis of butyl acetate in packed bed reactor under liquid and supercritical conditions / J. Escandell, D.J. Wurm, M.P. Belleville, J. Sanchez, M. Harasek, D. Paolucci-Jeanjean // Catalysis Today. - 2015. - № 01. - Р. 1-7.

56. Humeau, C. Enzymatic synthesis of fatty acid ascorbyl esters / C. Humeau, M. Girardin, B. Rovel, A. Miclo // J. Mol. Catal. B. Enzym .- 1998. - № 5. - Р. 19-23.

57. Гамаюрова, В. С. Ферментативный синтез душистых веществ / В. С. Га-маюрова, М.Е. Зиновьева, Е.В. Елизарова // Вестник КГТУ. - 2005. -№ 1. - С. 239-241.

58. Елизарова, Е.В. Ферментативная этерификация органических кислот алифатическими спиртами / Е.В. Елизарова, М.Е. Зиновьева, В.С. Гамаюрова // Вестник КГТУ. - 2006. - № 6. - С. 69-72.

59. Knezevic-Jugovic, Z. Lipase catalyzed synthesis of flavor esters in nonaqueous media: Optimization of the yield of pentyl 2-methylpropanoate by statistical analysis / Z. Knezevic-Jugovic, D. Bezbradica, Z. Jakovljevic, S. Brankovic-Dimitrijevic, D. Mijin // J. Serb. Chem. Soc. - 2008. - № 73, V.12. - Р. 1139-1151.

60. Singh, P. Synthesis of Food Flavors by Enzymatic Esterification Process / P. Singh, D.K.. Saxena, S.N. Naik // International Journal of Science and Research. -2014. - V. 3, I. 9. - Р. 2113-2116.

61. Xiao, Z. Enzymatic synthesis of aroma acetion fatty acid esters by immobilized Candida antarctica lipase B / Z. Xiao, X. Hou, X. Lyu, J. Zhao, L. Xi, J. Li, J.R. Lu // Biotechnol Lett. - 2015. - V. 37, I. 8. - Р. 1671-1677.

62. Matte, C.R. Synthesis of butyl butyrate in batch and continuous enzymatic reactors using Thermomyces lanuginosus lipase immobilized in Immobead 150 / C.R. Matte, C. Bordinhao, J.K. Poppe, R.C. Rodrigues, P.F. Hertz, A.Z. Ayub // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2016. - № 127. - Р. 67-75.

63. Melo, L.L.M.M. Optimized synthesis of citronellyl flavour esters using free and immobilized lipase from Rhizopus sp / L.L.M.M. Melo, G.M. Pastore, G.A. Macedo // Process Biochem. - 2005. - №40.- P. 3181-3185.

64. Xu, Y. Biosynthesis of ethyl esters of short-chain fatty acid using whole-cell lipase from Rhizopys chinesis CCTCC M201021 in non-aqueous phase / Y. Xu, D. Wang, X.Q. Mu, G.A. Zhao, K.C. Zhang // J. Mol. Catal. B: Enzym. - 2002. - № 18.

- P. 29-37.

65. Gubicza, L. Large-scale enzymatic production of natural flavour esters in organic solvent with continuous water removal / L. Gubicza, A. Kabiri-Badr, E. Keoves, K. Belafi-Bako // J. Biotechnol. - 2001. - № 84. - P. 193-196.

66. Longo, M.A. Production of food aroma compounds: microbial and enzymatic methodologies / M.A. Longo, M.A. Sanroman // Food Technol. Biotechnol. - 2006.

- № 44. - P. 335-353.

67. Romero, M.D. Enzymatic synthesis of isoamyl acetate with immobilized Candida antarctica lipase in n-hexane / M.D. Romero, L. Calvo, C. Alba, A. Daneshfar, H.S. Ghaziaskar // Enzyme Microb. Technol. - 2005.- № 37. - P. 42-48.

68. Berger, R. Biotechnology of flavours - the next generation / R. Berger // Biotechnol. Lett. - 2009. - № 31. - P. 1651-1659.

69. Martins, A.B. Comparison of the performance of commercial immobilized lipases in the synthesis of different flavor esters / A.B. Martins, A.M. da Silva, M.F. Schein, C. Garcia-Galan, M.A. Zachia Ayub, R. Fernandez-Lafuente, R.C. Rodrigues // J. Mol. Catal. B: Enzym. - 2014. - № 105. - P. 18-25.

70. Othman, S.S. Production of highly enantioselective(-) - menthyl butyrate using Candida rugosa lipase immobilized on epoxy-activated supports / S.S. Othman, M. Basri, M. Zobbir Hussein, M.B.A. Rahman, R.N.Z.Abd. Rahman, A.B. Salleh, H. Jasmani // Food Chemistry. - 2008. - V.106, I. 2. - P. 437-443.

71. Habulin, M. Lipase-catalyzed esterification of citronellol with lauric acid in supercritical carbon dioxide/co- solvent media / M. Habulin, S. Sabeder, M. Primozic, Z. Knez // The Journal of Supercritical Fluids. - 2007. - V. 43, I. 2. - P. 199-203.

72. Goto, M. Design of polymer brushes for immobilizing enzymes onto hollow fiber micropores in organic media reaction / M. Goto, T. Okubo, H. Kawakita, K. Uezu, S. Tsuneda, K. Saito, M. Goto, M. Tamada, T. Sugo // Biochemical Engineering Journal. - 2007. - V. 37, I. 2. - Р. 159-165.

73. Abdulmalek, E. Optimization and characterization of lipase catalysed synthesis of xylose caproate ester in organic solvents / E. Abdulmalek, N.F. Hamidon, M. B. Abdul Rahman // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2016. - № 132. - Р. 1-4.

74. Гамаюрова, В.С. Ферментативный синтез ложных эфиров полиэти-ленгликоля-400 / В.С. Гамаюрова, М.Е. Зиновьева, Н.В. Калачева, К.Л. Шнайдер // Катализ в промышленности. - 2015. - Т. 15, № 2. - С. 73-78.

75. Гамаюрова, В.С. Синтез эфиров цетилового спирта и высших жирных кислот в неводных средах с помощью панкреатической липазы / В.С. Гамаюрова, М.Е. Зиновьева, Е.В. Елизарова // Катализ в промышленности. - 2008. -№ 3. - С. 54-58.

76. Bi, Y. Biosynthesis of oleyl oleate in solvent-free system by Candida rugosa Lipase (CRL) immobilized in macroporous resin with cross-linking of alde-hyde-dextran / Y. Bi, M. Yu, H. Zhoy, P. Wei // J. Mol. Catal. B. Enzym. - 2016. - V. 133. - Р. 1-5.

77. Abbas, H. Aroma Synthesis by Immobilized Lipase from Mucor sp. / H. Abbas, L.Comeau // Enzyme and Microbial Technology. - 2003. -V. 32, № 5. -Р. 589-595.

78. Kotogan, A. Screening for extracellular lipase enzymes with transesterification capacity in Mucormycotina strains / A. Kotogan, B. Nemeth, Cs. Vagvolgyi, T. Papp, M. Tako // Food Technol. Biotechnol. - 2014. - № 52. - Р. 73-82.

79. Зайцева, Л.В. Энзимная и химическая переэтерификация: сравнительный анализ / Л.В. Зайцева // Пищевая промышленность. - 2011. - № 6. - С. 2-5.

80. Зайцева, Л.В. Энзимная переэтерификация - передовая технология модификации растительных масел / Л.В. Зайцева // Масло-жировая промышленность. - 2011. - № 4. - С. 2-5.

81. Зайцева, Л.В. Использование энзимной переэтерификации для модификации масел / Л.В. Зайцева, А.Ю. Юдин // Масло-жировая промышленность. -

2011. - № 2. - С. 26-29.

82. Зайцева, Л.В. Использование жиров, полученных методом энзимной переэтерификации, для повышения качества хлеба из пшеничной муки / Л.В. Зайцева, А.Ю. Юдин, Л.И. Валеева // Пищевая промышленность. - 2011.-№ 12.- С. 2-4.

83. Зайцева, Л.В. Производство хлебобулочных изделий для здорового питания с использованием заменителя молочного жира энзимной переэтерифика-ции / Л.В. Зайцева, Т.А. Юдина, М.В. Клевец // Пищевая промышленность. -

2012.- № 5.- С. 70-72.

84. Зайцева, Л.В. Использование заменителя молочного жира энзимной переэтерификации для повышения качества хлеба / Л.В. Зайцева, Т.А. Юдина,

A.Ю. Юдин, М.В. Клевец // Хлебопродукты. - 2012.- № 6.- С. 60-62.

85. Грачева, И.М. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов / И.М. Грачева, Ю.П. Грачев, М.С. Мосичев, Е.Г. Борисенко. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. - 240 с.

86. Дикусар, Е.А. Применение простых и сложных эфиров: современные аспекты молекулярного дизайна от душистых веществ и биологически активных соединений до применения в медицинских нанотехнологиях / Е.А. Дикусар,

B.И. Поткин, Н.Г. Козлов, С.К. Петевич, Д.А. Рудаков // Химия растительного сырья. - 2014. - № 3. - С. 61-84.

87. Дикусар, Е.А. Простые и сложные эфиры - от душистых веществ и биологически активных соединений до применения в медицинских нанотехно-логиях / Е.А. Дикусар, С.К. Петкевич, Д.А. Рудаков, В.И. Поткин, Н.Г. Козлов,

C.Г. Степин // Вестник фармации. - 2014. - № 4. - С. 100-108.

88. Общая органическая химия. Т. 4. Карбоновые кислоты и их производные / Под ред. Д. Бартон, У.Д. Оллис, Н.К. Кочетков. - М.: Химия, 1983. - 728 с.

89. Козлов, Г.В. Биокатализ в промышленности. Способы получения био-топлив: учеб. пособие / Г.В. Козлов, М.А. Пушкарев. - СПб. - 2015. - 48 с.

90. Гамаюрова, В.С. Амилолитические ферменты в производстве батона / В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер, Э.З. Хусаинова // Вестник Технологического Университета. - 2016. - Т. 19, № 16. - С. 115-117.

91. Зиновьева, М.Е. Влияние мультиэнзимной композиции на качество батона из пшеничной муки / М.Е. Зиновьева, В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер // Вестник Технологического Университета. - 2016. - Т. 19, № 16. - С. 156-159.

92. Гамаюрова, В.С. Жирнокислотная специфичность липазы из дрожжей Candida rugosa при модификации льняного и рапсового масел / В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер, М. Е. Зиновьева // Вестник КГТУ. - 2015. - Т. 17, №24. - С. 175177.

93. Гамаюрова, В.С. Ферментативный катализ в неводных средах /

B.С. Гамаюрова, М.Е. Зиновьева // Бутлеровские сообщения. - 2011. - Т. 12, № 7. - С. 87-95.

94. Гамаюрова, В.С. Сравнение синтетазной активности двух видов липаз в неводных средах / В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер, М.Е. Зиновьева // Вестник КГТУ. - 2011. - № 6. - С. 211-218.

95. Зайцев, С.Ю. Нанопрепараты липолитических ферментов / С.Ю. Зайцев, Н.Л. Еремеев // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. - 2015. - № 4. -

C. 6-56.

96. Гамаюрова, В.С. Влияние строения спиртового остатка на ферментативную этерификацию масляной кислоты / В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер, М.Е. Зиновьева, Джамай Матаз Дж. Джамай // Международная научно-практическая конференция «Биотехнологии в комплексном развитии регионов»: тез.докл.- М.: РХТУ им. Д.И. Менделеева, 2016. - С. 82-83.

97. Гамаюрова, В.С Ферментативный синтез бутиратов сивушного масла / В.С. Гамаюрова, К.Л. Шнайдер, Матаз Дж. Джамай Джамай // Катализ в промышленности. - 2016. - Т. 16, № 3. - С. 64-68.

Gamayurova, V.S. Enzymatic synthesis of butirates of fusel oil / V.S. Gamayurova, K.L. Shnaider, M.J. Jamai // Catalysis of Industry. - 2017. - V.9.- Р. 85-90.

98. Gamayurova, V.S. Enzymatic Synthesis of Fatty Esters by Lipase from Porcine Pancreas / V.S. Gamayurova, K.L. Shnaider, S.K. Zaripova, M.J. Jamai // J Thermodyn Catal. - 2016. - V. 7, I. 1. - P. 161-162.

99. Войткевич, С.А. 865 душистых веществ для парфюмерии и бытовой химии / С.А. Войткевич. - М.: Пищевая промышленность, 1994. - 594 с.

100. Демьянцева, Е.Ю. Ферментативный катализ в ЦБП / Е.Ю. Демьянце-ва, Р.А. Копнина. - СПб, 2014. - 47 с.

101. Гамаюрова, В.С. Энзиматический синтез бутилпропионата / В.С. Га-маюрова, Н.И. Бильданова, Джамай М.Д. // Вестник технологического университета. - 2017. - Т. 20, № 10. - С. 136-137.

102. Gamayurova, V.S. Synthesis of aliphatic flavoring substances by lipase / V.S. Gamayurova, K.L. Shnaider, S.K. Zaripova, M.J. Jamai // J. Adv. Chem. Sci. -2016. - V.2, I. 2. - Р. 259-260.

103. Gamayurova, V.S. The Influence of Acyl Donators on The Enzymatic Activity of Lipase Lipozyme CalB in The Esterification Process / V.S. Gamayurova, M.J. Jamai, M.N. Chernykh, S.K. Zaripova // J. Adv. Chem. Sci. - 2017. - V. 3, I. 2. - P. 478 - 479.

104. Gamayurova, V.S. Comparison of Esterifying Ability of Some Lipases / V.S. Gamayurova, Mataz J. Jamai, S.K. Zaripova, K.L. Shnaider, N.I. Bil'danova, M.N. Chernykh // J. Adv. Chem. Sci. - 2018. - V. 4, I. 1. - P. 531-533.

105. Гамаюрова, В.С. Влияние ацил-доноров и спиртовых субстратов на синтез сложных эфиров в присутствии ферментных препаратов липаз / В.С. Га-маюрова, Джамай Матаз Дж. Джамай // Международная научная конференция «Вопросы науки и практики МДК-2018 (1 сессия)»: тез. докл. - Москва, 2018. -С. 9-10.

106. Справочник химика. Том IV. - М., 1965. - С. 823 - 893.

107. Воробьев, Е.С. Расчет скорости химических реакций в MS EXCEL / Е.С. Воробьев, Ю.В. Ерандаева, Ф.И. Воробьева // Вестник КГТУ. - 2011. -№ 11. - С. 88-91.

108. Коробов, В.И. Химическая кинетика: введение с Mathcad/Maple/MCS / В.И. Коробов, В.Ф. Очков. - M., 2009. - 384 с.