Фармакологическая характеристика экстракта донника лекарственного тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат биологических наук Локтева, Ольга Михайловна

• Локтева, Ольга Михайловна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Локтева, Ольга Михайловна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 .Обзор литературы

1.1 .Биологическое значение растительных полифенольных соединений

1.2.Состояние отечественного рынка лекарственных препаратов на основе лекарственного растительного сырья, содержащего полифенольные соединения

1.3.Современные подходы к технологии и стандартизации фитопрепаратов

1.4. Донник лекарственный как перспективный источник лекарственных препаратов полифенольной природы: распространение, химический состав, биологическая активность

1.4.1 .Использование донника лекарственного в медицине

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объект исследования

2.2.Материалы и методы фитохимических исследований

2.3.Материалы и методы фармакологических исследований 44 2.3.1. Оценка антигипоксического действия 4 5 2.3.2.Оценка противовоспалительных и ранозаживляющих свойств 47 2.3.3.Изучение влияния экстракта донника на некоторые показатели иммунитета 50 2.3.4.Определение обезболивающего действия

2.3.5.Метод оценки психофизиологического статуса животных

2.3.6.Биохимические методы исследования

2.3.7.Методы исследования безвредности

ГЛАВА 3. ФОТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСТРАКТА ДОННИКА

3.1 .Результаты определения физико-химических параметров экстракта донника

3.2.Результаты обнаружения основных групп БАВ в экстракте донника

3.3.Разработка методов стандартизации экстракта донника

3.3.1.Реакции подлинности

3.3.2.Количественное определение

3.4.Стандартизация препарата Мелилотин

ГЛАВА 4. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСТРАКТА ДОННИКА ЛЕКАРСТВЕННОГО

4.1.Изучение антигипоксического действия экстракта донника лекарственного

4.1.1.Исследование антигипоксической активности экстракта донника на модели острой гипобарической гипоксии

4.1.2.Исследование противогипоксической активности экстракта донника на модели гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме

4.1.3.Исследование антигипоксической активности экстракта донника на модели острой гистотоксической гипоксии

4.1.4.Изучение влияния экстракта донника на течение ишемии головного мозга у крыс

4.2.Изучение противовоспалительных свойств экстракта донника 76 4.2.1.Антиальтеративная активность экстракта донника на модели бутадионовой язвы желудка у крыс 76 4.2.2.Оценка антиэкссудативной активности экстракта донника на модели адреналинового отека легких у мышей

4.2.3.Оценка антипролиферативной активности экстракта донника на модели ватной гранулемы

4.2.4.Изучение ранозаживляющих свойств экстракта донника

4.2.5.Изучение капилляроукрепляющих свойств экстракта донника

4.3.Исследование анальгетической активности экстракта донника

4.3.1.Изучение обезболивающего действия на модели уксуснокислых корчей

4.3.2.Исследование обезболивающего действия экстракта донника по порогу вокализации при электростимуляции корня хвоста крыс и в тесте "tail-flick"

4.4.Изучение влияние экстракта донника на некоторые показатели иммунитета

ГЛАВА 5. ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ С ЭКСТРАКТОМ ДОННИКА

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ БЕЗВРЕДНОСТИ ЭКСТРАКТА ДОННИКА ЛЕКАРСТВЕННОГО

6.1 .Исследование острой токсичности экстракта донника

6.2.Исследование субхронической токсичности экстракта донника 92 6.3 .Исследование мутагенности экстракта донника

6.4.Влияние экстракта донника на основные органы и системы при длительном введении

6.4.1 .Оценка влияния экстракта донника на прирост массы тела 95 6.4.2.Оценка влияния экстракта донника на состояние сердечнососудистой системы 97 6.4.3.Оценка влияния экстракта донника на состояние выделительной системы

6.4.4. Оценка влияния экстракта донника на состояние ЦНС

6.4.5. Оценка влияния экстракта донника на морфологические и биохимические показатели крови крыс

6.4.6.Гистологические исследования органов животных, длительно получавших экстракт донника

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакологическая характеристика экстракта донника лекарственного»

Актуальность проблемы

В настоящее время на рынке лекарственных средств России широко представлены препараты растительного происхождения, содержащие полифенольные соединения. Известно, что полифенольные соединения обладают широким спектром биологических эффектов: антигипоксическим, антиоксидантным, капилляроукрепляющим, противовоспалительным и др. [7,18,67].

Экстракционные препараты из лекарственного полифенолсодержащего растительного сырья являются перспективными для коррекции состояний, сопровождающихся гипоксией, ишемией. Однако большинство из них производятся за рубежом. Поэтому создание эффективных лекарственных средств растительного происхождения на основе полифенолсодержащего растительного сырья является актуальной задачей отечественной медицины.

В Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии на протяжении ряда лет ведутся исследования лекарственного растительного сырья, богатого фенольными соединениями. Одним из наиболее перспективных видов является донник лекарственный - Melilotus officinalis (L). Desr., семейство бобовые. При фитохимическом исследовании надземной части растения были выявлены кумарины, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, сапонины, полисахариды, микроэлементы.

В предварительных фармакологических экспериментах у различных извлечений из травы донника были установлены антигипоксическая, противовоспалительная [63], иммуномодулирующая [92] и др. виды активности.

Настоящее исследование является продолжением работ, проводимых в Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии по изучению экстракта донника лекарственного.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования являлось фитохимическое и фармакологическое изучение сухого водорастворимого экстракта донника лекарственного.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1.Провести оценку качества экстракта донника и разработать основные параметры его стандартизации.

2.Оценить спектр антигипоксических свойств экстракта донника на основных моделях гипоксических состояний.

3 .Исследовать защитное действие экстракта донника на модели ишемии головного мозга крыс.

4.Изучить противовоспалительное, ранозаживляющее, обезболивающее, капилляроукрепляющее, иммуномодулирующее действие экстракта донника.

5.Оценить острую, хроническую токсичность экстракта донника. б.Провести предварительные фармакологические исследования новых лекарственных форм с экстрактом донника.

Научная новизна

Впервые проведена оценка качества и стандартизация экстракта донника по основным действующим веществам - кумарину и сумме флавоноидов. Установлено, что экстракт обладает низкой токсичностью. Впервые изучен спектр антигипоксических свойств сухого водорастворимого экстракта донника лекарственного. Доказано, что он в широком диапазоне доз повышает переносимость животными острой гипобарической гипоксии, острой гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме, гистотоксической гипоксии и превосходит по эффекту эталонные антигипоксанты. Установлена связь нейропротекторного и антиоксидантного эффектов экстракта донника в условиях циркуляторной гипоксии головного мозга. Выявлен широкий спектр фармакологических эффектов экстракта, включающий обезболивающие, противовоспалительные, капилляроукрепляющие и иммуномодулирующие свойства.

Впервые разработаны методы стандартизации и проведена фармакологическая оценка препарата «Мелилотин» (экстракт донника по 0,01 в таблетках).

Проведены скрининговые фармакологические исследования мягких лекарственных форм с экстрактом донника.

Научно-практическое значение работы

Результаты проведенной работы позволили определить основные направления в создании лекарственных форм на основе экстракта донника -таблеток для приема внутрь, мягких лекарственных форм. Новые сведения о спектре действия извлечений из донника лекарственного расширяют общие представления о возможных областях применения препаратов на его основе, в частности использование в качестве антигипоксантов с ранозаживляющими и иммуномодулирующими свойствами.

Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую работу кафедр фармакологии и технологии лекарств и фитопрепаратов СПХФА и использованы при создании препаратов «Экстракт донника сухой» и «Мелилотин».

Материалы диссертации легли в основу отчетов о доклинических испытаниях экстракта донника и препарата «Мелилотин» и использованы при создании проектов ВФС на сухой экстракт донника и таблетки «Мелилотин», представленные в Фармакологический и Фармакопейный Государственные Комитеты МЗ РФ, а также лабораторные регламенты на получение экстракта донника и таблетки «Мелилотин».

Положения, выносимые на защиту

1.Экстракт донника обладает выраженным антигипоксическим действием на основных моделях гипоксических состояний.

2.Экстракт донника проявляет антиоксидантный и нейропротекторный эффекты при экспериментальной ишемии головного мозга у крыс.

3.Экстракт донника оказывает обезболивающий, противовоспалительный, иммуномодулируюгций, капилляроукрепляющий эффекты, не токсичен и перспективен для создания на его основе лекарственных препаратов.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на научно-практической конференции «Современные перспективы научных исследований в области фармации» (Самара, 1996), Всероссийской конференции «Актуальные проблемы создания лекарственных средств» (Санк-Петербург, 1996), Международной конференции «Фармация в XXI веке: инновации и традиции» (Санкт-Петербург, 1999), VI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 1999).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ.

Объем и структура диссертации

Материалы диссертации изложены на 127 страницах машинописного текста. Работа иллюстрирована 25 таблицами, 14 рисунками и состоит из введения, 6 глав, обсуждения результатов, выводов и научно-практических рекомендаций, приложения и указателя литературы, включающего 146 источников, из них 23 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Локтева, Ольга Михайловна

выводы

1.Проведена стандартизация экстракта донника по основным действующим веществам: сумме флавоноидов - не менее 4,0% и кумарину - не менее 0,15%. Эти параметры включены в проект ВФС на экстракт донника и лабораторный регламент на его производство.

2.Экстракт донника проявляет выраженный антигипоксический эффект на всех основных моделях гипоксии.

3.Выявлено защитное действие экстракта донника на модели ишемии головного мозга у крыс.

4.Выявлена связь между нейропротекторной и антиоксидантной активностью экстракта донника в условиях экспериментальной ишемии мозга.

5.Установлено, что экстракт донника обладает противовоспалительными капилляроукрепляющими, ранозаживляющими и иммуномодулирующими свойствами, оказывает благоприятное влияние на течение всех фаз воспалительного процесса.

6.Изученный экстракт проявляет обезболивающую активность

7.В опытах по оценке острой, хронической и субхронической токсичности доказана низкая токсичность экстракта донника.

8.Разработан состав, технология, стандартизация таблеток «Мелилотин», а также их фармакологическая активность. Результаты исследования включены в проект ВФС на таблетки «Мелилотин» и лабораторный регламент на их производство. Проведены скрининговые фармакологические исследования и доказана перспективность разработки мягких лекарственных форм с экстрактом донника.

112

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

На основании проведенного исследования рекомендовано использовать экстракт донника для создания новых лекарственных растительных препаратов. Целесообразно продолжить фармакологические испытания новых лекарственных форм с экстрактом донника: мази на гидрофильной основе - в качестве венотонизируюгцего и капилляроукрепляюгцего средства; мази на гидрофобной основе для заживления ран; суппозиториев для лечения трещин заднего прохода и геморроя (ректальные) и для лечения вагинитов (вагинальные).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Локтева, Ольга Михайловна, 1999 год

1. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные вещества. JL: Наука, 1985. - 229 с.

2. Андреенко Г.В. Дикумарин и его применение в качестве антикоагулянта крови. // Успехи современной биологии. 1951. - Т. XXI, вып. 1. - С. 89100.

3. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений. М., 1976, - С.79.

4. Балынина Е.С., Березовская И.В. Сравнительная оценка методов ориентировочной оценки крыс в токсикологическом эксперименте.// Фармакол. и токсикол. 1976. - .№5. - С.636-638.

5. Бандюкова В.А., Лигай Л.В. Изучение кинетики экстракции флавоноидов из растительного сырья. // Химия природных соединений. 1987. - №5. -С.665-667.

6. Барабой В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений. Киев: Наукова думка, 1976. - 260 с.

7. Барнаулов О.Д., Лимаренко А.Ю., Маничева О.А. Первичная оценка Р-витаминной активности галеновых препаратов некоторых видов Polyponum и их влияние на образование экспериментальных дистрофий желудка. // Растит, ресурсы. 1980. - №4. - С.586-594.

8. Беликов В.В. Аналитические исследования природных фенольных соединений и разработка методов их количественного определения. //

9. Автореф. дисс. . докт.мед.наук. Харьков, 1990. - 36 с.

10. Биохимия фенольных соединений. // Под ред Дж. Харборна. М.: Мир, 1968,- С.368.

11. Блажей А., Шутый JT. Фенольные соединения растительного происхождения. М.: Мир, 1977. -239 с.

12. Блинова К.Ф., Вандышев В.В., Комарова М.Н. Растения для нас. СПб.: Учебная книга, 1996. - 654 с.

13. З.Бобров Е.Г. Дикорастущие донники СССР. // Сов.ботаника. 1939. - № 1. -С.41-53.

14. Бубенчикова В.Н., Королев В.А. Динамика накопления флавоноидов в траве донников лекарственного, ароматного и белого. // Акт. вопросы мед. науки. Курск, 1997. - С.599-600.

15. Бубенчикова В.Н., Королев В.А., Кочкарев В.И. Фитохимическое исследование некоторых представителей родов донник, буквица, копытень.// Современные аспекты изучения лекарственных растений. М., 1995.-Т. XXXIV.-С. 147-151.

16. Бубенчикова В.Н., Королев В.А., Бубенчиков Р.А., Кочкарев В.И. Определение суммы флавоноидов в траве донника лекарственного и чистеца болотного. // Акт. проблемы фармацевтической химии: научн. тр. ВНИИФ. М., 1996. - Т.35. - С.175-179.

17. Вавилова Н.М. Гомеопатическая фармакодинамика. Смоленск-М.: Гомеопатический центр-Эверест, 1994. -ч.1. - С.318-321.

18. Видаль. Лекарственные препараты в России. М.: АстраФармСервис, 1997.

19. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. М.: Медицина, 1971.- 269 с.

20. Гаммерман А.Ф., Шасс Е.Ю. Карты распространения важнейших лекарственных растений СССР. M.-JL, 1954. - С.35-37.

21. Георгиевский В.П., Кадарешов Н.А., Карргыев М.О. Физико-химические методы анализа БАВ растительного происхождения. Ашхабад: Ылым, 1976. - 32 с.

22. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф, Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества. Новосибирск: Наука, 1990. - 333 с.

23. Государственная фармакопея СССР. XI изд. М.: Медицина, 1987. -вып.1. - 334 с.

24. Гракович Р.И., Ветвин В.В., Линде В.А. Введение в гомотоксикологию. -СПб, 1993.-20 с.

25. Гримова Т.А., Бубенчикова В.Н., Королев В.А. Особенности антифлогистического действия лекарственных форм донника лекарственного и белого. // Акт. проблемы патофизиологии. Материалы межвузовской научной конференции. СПб, 1995. - С. 124.

26. Гулагин Д.А., Федоров В.К. Исследование эмоциональности у крыс Вистар и Крушинского-Молодкиной методом "открытого поля". // Генетика поведения. Л., 1969. - С.35-42.

27. Гусынин И.А. Токсикология ядовитых растений. М., 1962. - С.482-485.

28. Дамулин И.В., Захаров В.В., Елкин М.Н., Яхно Н.Н. Танакан при дисциркуляторной энцефалопатии. // Клин. Геронтология. 1996. - №4. -С.51-56.

29. Дранник Г.Н., Гриневич Ю.А., Дизик Г.М. Иммунотропные препараты. -Киев: Здоров'я, 1994. С.215.

30. Дюмаев К.М., Воронина Т. А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС. М.: Изд-во института биомедиц. химии РАМН, 1995. - С.8-19.

31. Журавлев А.И. Биоантиокислители в животном организме. // Биоантиокислители. М.: Наука, 1975. - Т.52. - С.15-29.

32. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н. Тарусова о роли идей цепных процессов в биологии. // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982. - Т. 57. - С.3-37.

33. Ибн-Сина Абу-Али (Авиценна). Канон врачебной науки. Ташкент, 1954. -Кн. 1-4.

34. Иванов JI.B., Хаджай Я.И., Кошелева Л.П., Чуева И.Н., Шеремет И.П., Ваееловекий В.Ю. Сродство к биомембранам и некоторые особенности фармакокинетики соединений флавоноидной природы. // Хим.-фарм. журнал. 1992. - Т.26, №2. - С.20-23.

35. Игнатов Ю.Д., Михайлович В.А. Болевой синдром. Д.: Медицина, 1990. -С.95.

36. Казанцев А.П. Применение биофлавоноидов в клинике. // В кн.: Фенольные соединения и их биологические функции. М.: Наука, 1968. -С.331-338.

37. Карташова Г.С., Судос Л.В. Количественное определение флавоноидов в надземной части репешка волосистого. // Хим.-фарм. журнал. 1997. - № 9. С. 41-44.

38. Кашинский И. Русский лечебный травник, содержащий описание отечественных врачебных растений, качествами своими заменяючих иноземные. СПб, 1817. - ч.1. - С.52-55.

39. Колчин Ю.Н. Исследование роли мелооксигеназных продуктов метаболизма арахидоновой кислоты в патогенезе. острой ишемии и инфаркта миокарда. // Автореф. дис. докт. мед. наук. Киев, 1991. - С. 40.

40. Коваленко Н.Я., Мациевский Д.Д. Различия в кровоснабжении мозга и печени при острой кровопотере у крыс с различной устойчивостью к циркуляторной гипоксии. // Бюлл. эспер. биол. и мед. 1997. - Т.123, №3. - С.253-257.

41. Комаров О.С. Состояние ферментных систем регуляции перекисного обмена консервированной почки. // Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1975.-20 с.

42. Королев В. А. Фармакогностическое изучение представителей рода донник. // Автореф. дис. . канд.фарм.наук. Пермь, 1996. - 26 с.

43. Косман В.М., Зенкевич И.Г., Комиссаренко Н.Ф. Информационное обеспечение для идентификации фенольных соединений растительного происхождения в обрагценно-фазовой ВЭЖХ. Природные кумарины и фурокумарины. // Растит, рес. 1997. - Т.ЗЗ, вып.З. - С.22-37.

44. Кузнецов В.А. Донник (Melilotus Adans). // Известия Гос. Института Опытной Агрономии. 1927. - Т. V, № 2-3. - С. 178-186.

45. Кузнецова Г.А. Природные кумарины и фурокумарины. Д.: Наука, 1967. -248 с.

46. Культурная флора СССР. М.-Л, 1950. - Т.13, вып.1. - С.345-503.

47. Куркин В.А, Запесочная Г.Г., Авдеева Е.В., Сенцова М.Ф. и др. Проблемы стандартизации некоторых видов лекарственного сырья, содержащего флавоноиды. // Акт. проблемы фармацевтической химии: Научн. тр. ВНИИФ. М., 1996. - Т.35. - С.134-138.

48. Курмачева Н.А., Киреев Р.А., Болотова Н.В., Иванова С.Б. Влияние препарата танакан на свободнорадикальные процессы у детей с сахарным диабетом. // Тез.докл VI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». М., 1999. - С.185-186.

49. Лазурьевский Г.В., Терентьева И.В., Шамигурин А.А. Практические работы по химии природных соединений. М.: Высш.шк., 1966. - 335 с.

50. Ларин И.В., Агабабян Ш.М., Работнов Г.А., Любская А.Ф., Ларина В.К., Касименко М.А. Кормовые растения сенокосов и пастбищ СССР. М.-Л., 1951. - Т.2. - С.611-623.

51. Левкова М.Я., Пономарева С.М., Рабинович A.M., Бузук Г.Н., Соколова С.М. Почему растения лечат. М.: Наука, 1989. - С.136-137.

52. Лекарственное растительное сырье. Цветы, листья, травы. М.: ИПК Издательство стандартов, 1995. - ч.1. - С. 102.

53. Лесиовская Е.Е. Повышение индивидуальной устойчивости организма к комплексу экстремальных воздействий с помощью новых фармакологических средств. // Автореф. дисс. . докт. мед. наук. СПб, 1993.-26 с.

54. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетическая гипоксия: понятие, механизмы и способы коррекции. // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1997. - Т. 124, №9. -С.244-253.

55. Лукьянова Л.Д. Механизм действия антигипоксантов. Антигипоксанты -новый класс фармакологических веществ. // Итоги науки и техники. Сер. Фармакология и химиотерапевтические средства. М., 1991. - Т.27. - С.5-25.

56. Лукьянчук В.Д., Савченкова Л.В. Антигипоксанты: состояние и перспективы. // Экспер. и клин, фармакология. 1998. - Т.61, №4. - С.72-79.

57. Маркель А.Л. К оценке основных характеристик поведения крыс в тесте открытого поля. // Журн.высш.нервн.деят. 1981. - Т.31. - С.301-307.

58. Маркель А.Л., Хусаинов Р.А. Метод комплексной регистрации поведенческих и вегетативных реакций у крыс при проведении тестаоткрытого поля. // Журн.высш.нервн.деят. 1976. - Т.26, №6. - С. 13141318.

59. Мелешко Н.А. Донник. М.: Сельхозгиз, 1934.

60. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. М.,1990. - 18 с.

61. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств (под.ред. Лукьяновой Л.Д.). М.:ФК МЗ СССР, 1990,- 18 с.

62. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антиангинальных средств. М., 1990. - С.-15.

63. Методические указания к изучению темы: кумарины. Методы выделения, очистки, разделения. Л., 1989. - С. 15-16.

64. Миронов Н.В., Шмырев В.И., Шестакова А.Г. Применение препарата гинкор форт у женщин инволюционного периода с венозной недостаточностью головного мозга. // Тез.докл VI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». М., 1999. - С. 101.

65. Моисеев С.В. Хроническая венозная недостаточность эффективны ли венотропные средства? // Клин, фармакология и терапия. - 1998. - Т.7, №4. -С.75-79.

66. Морозова А.С. Нейрохимические механизмы антиноцицептивного эффекта, возникающего при стимуляции глубоких структур мозга. // Нейрофармакол.аспекты эмоц.стресса и лек.завис. Л., 1978. - С.48-56.

67. Народное здравие. СПб, 1907. - № 12. - С.374-376.

68. Никитин В.М. Справочник методов иммунологии. Кишинев: Штиинца, 1982.-283 с.

69. Носаль М.А., Носаль И.М. Лекарственные растения и способы их применения в народе. Л.: Научный центр проблем диалога, 1991. - С. 171.

70. Орджоникидзе Н.В., Гуртовой Б.Л. Клиническая эффективность препарата гинкор форт при варикозной болезни у беременных. // Тез.докл VI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». М., 1999. -С.212.

71. Оценка иммунного статуса организма в лечебных учреждениях Советской Армии и Военно-морского флота. // Методическое пособие. 1987. - 51 с.

72. Пастушенков Л.В., Кабачный В.И., Линьков В.И. и др. Коррекция гипоксии кортиева органа при звуковой нагрузке под действием аминогликозидных антибиотиков. // Тез. докл. 6-го Всесоюзного съезда фармакологов. Ташкент, 1988. - С.282.

73. Пастушенков Л.В., Лесиовская Е.Е. Растения-антигипоксанты (фитотерапия). СПб., 1991. - С.26.

74. Пастушенков Л.В., Лесиовская Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии. СПб, 1994. - ч.1. - 159 с.

75. Пастушенков Л.В., Пастушенков А.Л., Пастушенков В.Л. Лекарственные растения. Л.: Лениздат, 1990. - С. 75-76.

76. Петров В.Н., Пиотровский Л.Б., Григорьев И.А. Возбуждающиеаминокислоты (нейрохимия, фармакология и терапевтический потенциал ВАКергических средств). Волгоград, 1997. - С.86-87.

77. Петрусевич Ю.М. Антиокислительные свойства фенолов растительного и животного происхождения. // Биоантиокислители. М.: Наука, 1975. -Т.52. - С. 247-251.

78. Подколзин А.А., Донцов В.И., Сычев И.А., Кобелева Г.Ю., Харченко О.Н. Иммунокоррегирующее, антианемическое и адаптогенное действие полисахаридов из донника лекарственного. // Бюлл.эксп. биол. и мед. -1996. №6. - С.661-663.

79. Полный русский иллюстрированный словарь. СПб., 1898. - С.123-125.

80. Пономарев В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья. М., 1976. -245с.

81. Попова Э.Н., Яхин Ф.А. Морфология корковых структур при ишемии мозга и ее сочетании с аудиогенными припадками. // Бюлл эксп. биол. и мед. 1994. - Т.118, №9. - С.ЗЗ 1-334.

82. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки. // Фармакол. и токсикол. 1978. - №4. - С. 497-502.

83. Рокитский П.Ф. Биологическая статистика. Минск.: Вышейшая школа, 1973. - 319 с.

84. Руководящие методические материалы по экспериментальному и клиническому изучению новых лекарственных средств. М., 1986. - ч.б. -189 с.

85. Руленко И.П., Ручкин В.Е., Колесник Ю.А. и др. Анализ смеси флавоноидов бессмертника песчаного методом ВЭЖХ. // Тез. докл. 5 Всесоюзн. симпозиума по фенольным соединениям. Таллин, 1987. - С. 83-84.

86. Саканян Е.И. Разработка составов, технологии и методов анализалекарственных препаратов из растительного сырья. // Автореф. дисс. докт.фарм. н. СПб., 1996. - 48с.

87. Сараф А.С., Симонян А.В., Оганесян Э.Т. Поиск новых противоаллергических соединений в ряду производных кумарина и изучение механизмов действия. // Экспер. и клин, фармакол. 1993. - Т.56, №2. - С.47-50.

88. Смирнова Л.П., Первых JI.H. Количественное определение суммы флавоноидов в цветках бессмертника песчаного. // Хим.-фарм. журнал. -1996. -№ 6. С. 35-38.

89. Справочник: гомеопатические лекарственные средства, зарегистрированные в Российской Федерации (на 10.10.1997). // Гомеопатический ежегодник. М., 1997. - С. 96-138.

90. Субботин М.Я., Лагучев С.С., Оганесян Т.Г., Алексеева Н.М., Суханов А.Ф. Гистологическая техника. М.: Медгиз, 1954. - 164 с.

91. Суворов В.В. Донник. Л.-М.: Сельхозиздат, 1962.

92. Сычев И.А. Биологическая активность полисахаридов донника желтого. // Автореферат дисс. . канд.биол.наук. -М., 1995.

93. Требования к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ (Временные методические рекомендации). М.,1985.

94. Тюкавкина Н.А. Использование ВЭЖХ в области фенольных соединений. // Тез. докл. 5го Всесоюзн. симпозиума по фенольным соединениям. Таллин, 22-24 сентября 1987 г. Таллин, 1987. - С. 112-113.

95. Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук Л.В. Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях. М.: Промедэк, 1993. - С.273-274.

96. Флора СССР. М.-Л., 1945. T.XI. - С.180-181.

97. Френкель Л.Д. Гомеопатическое лекарствоведение. Харьков: Эмуш,1. Велес, 1993.-С. 224-225.

98. Хамидов Г. Донник лекарственный ценное медоносное и кормовое растение. // Узбекский биол. журн. - 1974. - №1. - С.38-40.

99. Химический анализ лекарственных растений. // Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

100. Шаткина Н.А., Звартау Э.Э. Поведение крыс в "открытом поле" при хроническом введении морфина. // Фармакол. и токсикол., 1978. №5. -С.537-541.

101. Шинкоренко АЛ., Бандюкова В.А., Казаков АЛ. Методы исследования природных флавоноидов. // Метод, рекоменд. для студентов студ. научн. общества. Пятигорск, 1977. - 71 с.

102. Штабский Б.М., Шатинская И.Г. Об оценке кумулятивных свойств вредных веществ по тесту субхронической токсичности. // Гигиена и санитария . 1985. - №3 (57). - С.57-60.

103. Шубин М.М. Перспективы использования донника в степных илесостепных районах Алтайского края. // Труды Алтайского сельскохозяйственного института. Барнаул, 1955. - вып. 2. - С.60-69.

104. Щербановский Л.Р., Нилов Т.И. Природные кумарины как антимикробные вещества. // Растит, рес. 1973. - T.IX, вып 2. - С.303-310.

105. Эмануэль Н.М. Физико-химические основы применения фенольных соединений в химии и биологии. // В кн.: Фенольные соединения и их биологические функции. М.: Наука, 1968. - С.311-331.

106. Юрженко Н.Н., Французова С.Б., Антоненко Л.П., Аришникова Л.И. Роль свободнорадикального окисления в патогенезе антиоксидантной недостаточности и пути его коррекции. // III Всес. конф. "Биоантиоксидант". М., 1989. - Т. 1. - С.75-76.

107. Bermejo Vicedo Т., Hidalgo Correas F.J. Antioxidants: the therapy of the future? //Nutr. Hosp. 1997. - Vol.12, №3. - P. 108-120.

108. Encyclopedic des plantes medicinales. Milan: Larousse, 1997.

109. Guo Q.,Zhao В., Li M., Shen S., Xin W. Studies on protective mechanisms of four components of green tea polyphenols against lipid peroxidation in synaptosomes. // Biochim. Biophys. Acta. 1996. - Vol.1304, №3. - P. 210220.

110. Halliwell B. Drug antioxidant effects. A basis for drug selection? // Drugs. -1991. Vol. 42(4).-P. 565-605.

111. Halliwell B. How to characterize a biological antioxidant. // Free Radic. Res. Commun.- 1990. -Vol.9, №1.- P. 1-32.

112. Halliwell B. Reactive oxygen species in living system: source, biochemistry, and role in human disease. // Am. J. Med. 1991. - Vol.91. - P. 148-228.

113. Halliwell B, Gulteridge J.M.C. Lipid peroxidation, oxygen radicals, cell damage and antioxidant therapy. //Lancet. 1984. - P. 1396-1398.

114. Herbal Drag and phytopharmaceuticals. Stuttgart, 1994. - C. 326-328.

115. Kese K, Dogan P, Ascioglu M, Ascioglu O. In vitro antioxidant effect of

116. Ginkgo biloba extract (EGb 761) on lipoperoxidation induced by hydrogen peroxide in erythrocytes of Behcet's patients. // Jpn. J. Pharmacol. 1997. -Vol. 75, №3,- P. 253-258.

117. Leanderson P., Faresje A.O., Tagesson C. Green tea poliphenols inhibit oxidant-induced DNA strand breakage in cultured lung cells. // Free Radic. Biol. Med. 1997. - Vol. 23, №2. - P. 235-242.

118. Majewska M.D., Strosznajder J. and Kazarewicz. Effect of ischemic anoxia and barbiturate anesthesia on free radical oxidation of mitochondrial phospholipids. // Brain. Reasearch. 1978. - Vol. 158. - P. 423-434.

119. Martin-Aragon S., Benedi J.M., Villar A.M. Effects of the antioxidant (6,7 -dihydroxycoumarin) esculetin on the Glutation system and lipid peroxidation in mice. // Gerontology. 1998. -Vol. 44, №1. - P. 21-25.

120. Maulik G., Maulik N., Bhandari V., Kagan V.E., Pakrashi S., Das D.K. Evaluation of antioxidant effectiveness of a few herbal plsnts. // Free Radic. Res. 1997. - Vol. 27, №2. - P. 221-228.

121. Pierre M., Lis M. Au bonheus des plantes. Le Pre' aux Clercs. -1992. P. 208.

122. Puschner В., Galev F.D., Holstege D.M., Palazoglu M. Sweet clover poisoning in dairy cattie in California. // J. Am.Vet. Med. Assoc. 1998. - Vol. 212, №6.-P. 857-859.

123. Rauma A.L., Rauto A., Pasanen M., Pelkonen O., Tuorruonen R., Mykkuanen H. Coumarin in 7-hydroxylation in long-term adherents of a strict uncooked vegan diet. // Eur. J. Clin. Pharmacol. 1996. - Vol.50, №1-2. - P. 133-7.

124. Robinson E.E., Maxwell S.R., Thorpe G.H. An investigation of the antioxidant activity of black tea using enhanced chemiluminescence. // Free Radic. Res. 1996. - Vol.26, №3. - P. 291-302.

125. Rodriguez Martinez M.A., Alonso M.J., Redondo J., Salaices M. and Marin127

126. J. Role of lipid peroxidation and the glutatione dependent antioxidant system in the impairment of endothelium - dependent relaxations with age. // Br.J.Pharmacol. - 1998. -Vol.123, №1,- P. 113-121.

127. Runcel M. Teotmeier M., Legrum W. Metabolic and analytical interactions of grapefruit juice and 1,2-benzopyrone (coumarin) in man. // Eur. J. Clin. Pharmacol. 1996.-Vol.50, №3.-P. 225-230.

128. Saija A., Scalese M., Lanza M., Marzullo D., Bonina F., Castelli F. Flavonoids as antioxidant agents: importance of their interaction with biomembranes. // Free Radic. Biol. Med. 1995. - Vol.19, №4. - P. 481-486.

129. Siesjo B.K., Agardh C.-D., Bengtsson F. Free radicals and brain damage. // Cerebrovasc.Brain. Metab. Rev. 1989. - Vol.1. - P. 165-211.

130. M.Uchiyma and M.Mihara. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test. // Anal.Biochem. 1978. - Vol.86, №1. -P.271-278.

131. Министерство здравоохранения Российской Федерации1. УТВЕРЖДАЮ

132. Начальник Инспекции государственного контроля лекарственных средств Минздрава России199 г.

133. ВРЕМЕННАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ на фармакологическое средство1. Extractum Meliloti ВФС 42siccum1. Экстракт донникасухой Вводится впервые1. Срок введения установлен199г.

134. Срок действия до " " 200 г.

135. Травы донника лекарственного обмолоченной Воды очищенной достаточное количество

136. Министерство здравоохранения Российской Федерации

137. УТВЕРЖДАЮ Начальник Инспекции государственного контроля лекарственных средств Минздрава России" 199 г.

138. ВРЕМЕННАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ1. Melilotinum ВФС 42

139. Tabulettae cum Extracti Meliloti 0,1

140. Мелилотин Вводится впервые

141. Таблетки с экстрактом донника 0,11. Срок введения установлен199г.

142. Срок действия до " " 200 г.

143. Настоящая временная фармакопейная статья распространяется на таблетки с экстрактом донника 0,1, применяемого в качестве лекарственного средства. (Препарат "Мелилотин ")