Фармакогностическое изучение северокавказских видов сем. бурачниковых (Boraginaceae) как источников шиконина и разработка лекарственных средств на их основе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Дайронас, Жанна Владимировна

• Дайронас, Жанна Владимировна
• кандидат фармацевтических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Дайронас, Жанна Владимировна

Введение.

Сокращения.

Глава 1 Современное состояние исследований по распространению в растительном мире, методам анализа, изучению биологической активности и использованию в медицине нафтохинонов (обзор литературы).

1.1 Характеристика нафтохинонов как класса соединений.

1.1.1 Классификация, строение и физические свойства хинонов.

1.1.2 Распространение нафтохинонов в природе.

1.1.3 Биосинтез нафтохинонов.

1.1.4 Современные методы выделения, идентификации и количественного определения шиконина и его эфиров.

1.1.5 Биологическая и фармакологическая активность шиконина и его производных.

1.1.6 Использование шиконина и его производных в промышленности и медицине.

1.2 Ботаническая характеристика сем. Boraginaceae и его видов во флоре России и сопредельных государств.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение северокавказских видов сем. бурачниковых (Boraginaceae) как источников шиконина и разработка лекарственных средств на их основе»

Актуальность темы

Во многих странах мира в XX веке возрос интерес исследователей к хиноидным пигментам. К этому классу природных биологически активных соединений относятся и нафтохиноны, которые вырабатываются бактериями, грибами, морскими иглокожими, лишайниками и растениями. В настоящее время они обнаружены более чем в 20 семействах цветковых растений, в том числе Juglandaceae, Plumbaginaceae, Boraginaceae, Urticaceac, Droseraceae и др. Сырьё, содержащее нафтохиноны, широко используется в традиционной медицине Китая, Тибета, Кореи и Японии для получения жаропонижающих, противоожоговых, ранозаживляющих, противоопухолевых лекарственных средств. Из корней дальневосточного вида воробейника краснокорневого (Lithospermum erythrorhizon Siebold et Zucc.) сем. бурачниковых (Boraginaceae) был выделен нафтохинон шиконин, который проявил себя как эффективный растительный антибиотик, оказывающий противоопухолевое, антибактериальное, противовирусное, амёбоцидное, противовоспалительное и регенерирующее действие.

Шиконин и его эфиры используются в традиционной и научной медицине многих стран, благодаря своему широкому спектру биологической активности. Однако лекарственных средств на его основе за рубежом очень мало, а в России вообще нет. Отечественная продукция, содержащая шиконин и его производные, ограничивается только косметическими или перевязочными средствами. Основная причина такого положения — недостаточная промышленная сырьевая база и отсутствие доступных методов стандартизации. Фармакогностические исследования воробейника краснокорневого, проводимые в 70-е годы XX в., показали бесперспективность заготовки сырья как от дикорастущих, так и от культивируемых образцов этого вида. Фотохимический анализ других представителей сем. бурачниковых выявил, что количество видов, содержащих шиконин достаточно велико. Однако поиск сырьевых источников шиконина был прекращён в 80-х годах XX в., уступив место биотехнологии. Широкие исследования в этой области, проводимые в Японии и России, позволили разработать способы промышленного получения шиконина, используемые в настоящее время. Несмотря на полученные положительные результаты, биотехнологический способ производства шиконина остаётся достаточно дорогостоящим из-за сложного технологического процесса и его высокой наукоёмкости.

Таким образом, расширение растительной сырьевой базы источников шиконина и его производных за счет изучения малоизученных видов сем. Во-raginaceae, произрастающих на Северном Кавказе, является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследования

Цель настоящей работы - поиск нового перспективного сырьевого источника шиконина среди малоизученных видов сем. бурачниковых флоры Северного Кавказа, разработка методов стандартизации сырья и получение лекарственных средств на основе суммы нафтохинонов.

Для достижения этой цели необходимо решить следующие задачи:

1. Провести качественный и количественный анализ образцов сырья некоторых северокавказских видов сем. бурачниковых, выявить среди них наиболее перспективный сырьевой источник шиконина.

2. Определить оптимальные условия извлечения шиконина и его производных и разработать методики для стандартизации этого вида сырья.

3. Провести предварительные ресурсные и интродукционные исследования выбранного вида на территории Ставропольского края.

4. Изучить динамику накопления нафтохинонов в зависимости от фазы вегетации и установить оптимальные сроки заготовки сырья.

5. Определить основные морфолого-анатомические диагностические признаки и числовые показатели сырья выбранного вида.

6. Разработать проект фармакопейной статьи предприятия на сырьё предлагаемого вида.

7. Разработать технологию экстракта и мази, содержащих шиконин и его производные, а также методики, пригодные для стандартизации полученных лекарственных препаратов.

8. Провести предварительные фармакологические исследования разработанных лекарственных препаратов по выявлению специфической микробиологической и фармакологической активности.

Научная новизна исследования

На основании скрининговых фитохимических исследований некоторых видов сем. бурачниковых установлено, что шиконин и его производные содержатся только в корнях синяка русского, синяка обыкновенного, оносмы кавказской, воробейника краснокорневого. Сумма нафтохинонов в корнях различных видов колеблется от 0,1 до 1,9%. Наибольшее количество нафтохинонов накапливается в корнях синяка русского (1,9%). Методом. ТСХ установлено, что в корнях синяка русского наряду с описанным в литературе шиконином впервые идентифицированы ацетилшиконин, изобутирилшико-нин, (3-оксоизовалерилшиконин и дезоксишиконин.

Установлена локализация нафтохинонов в клетках феллодермы корней синяка русского, что позволяет определять специфику заготовки сырья. Впервые выявлены закономерности изменчивости содержания нафтохинонов в корнях синяка русского в зависимости от фазы вегетации, на основании чего установлены сроки заготовки этого вида сырья.

Определены оптимальные условия извлечения суммы нафтохинонов из корней синяка русского. Изучена возможность препаративного хроматогра-фического разделения нафтохинонов и разработан способ получения вещества-стандарта (ГСО шиконина), позволившего обосновать метод стандартизации сырья.

Разработана технология масляного экстракта корней синяка русского и мази, содержащей полученный экстракт.

Изучена антимикробная активность липофильного комплекса корней синяка русского и установлено, что минимальная ингибирующая концентрация составляет в отношении к Staphylococcus aureus 6,25 мкг/мл, в отношении Bacillus subtilis - 12,5 мкг/мл (посевная доза 10 КОЕ/мл). Установлено, что противоожоговое действие разработанных лекарственных препаратов более выражено при низких концентрациях суммы нафтохинонов, антимикробное — при высоких.

Практическая значимость работы и внедрение результатов в практику

Установлены характерные морфолого-анатомические диагностические признаки нового вида лекарственного растительного сырья (синяка русского корни), нормы его качества и разработаны методики определения в нём суммы нафтохинонов. Разработаны методики выделения шиконина из корней синяка русского и его качественного и количественного анализа. Разработаны проекты фармакопейных статей предприятия «Синяка русского корни» и «Шиконин. Государственный стандартный образец», которые приняты ЗАО «Вифитех» г. Москва (акты от 09.04.07). Установлена динамика накопления шиконина и его производных в зависимости от фаз вегетации, определены сроки заготовки корней синяка русского, которые отражены в «Инструкции по сбору и сушке корней синяка русского», утверждённой ООО НПО «Фи-тоЧ» г. Ставрополь (акт внедрения от 12.04.07). Разработана технология производства и методики стандартизации экстракта корней синяка русского масляного и мази, его содержащей, с рабочим названием «Эхион». Апробированы технология производства и методики анализа мази «Эхион» в условиях ЗАО «Центрально-Европейская фармацевтическая компания» г. Москва, о чём получены соответствующие акты от 16.11.06.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№ госрегистрации 01.200.112164).

Положения, выдвигаемые на защиту:

1. Результаты фитохимического скрининга по содержанию шиконина и его производных в некоторых видах сем. бурачниковых флоры Северного Кавказа.

2. Результаты экспериментальных исследований по разработке методик выделения и количественного определения суммы нафтохинонов в корнях синяка русского.

3. Способ получения стандартного образца шиконина, разработка методик его анализа с использованием различных физико-химических методов.

4. Результаты ресурсных и интродукционных исследований сырья синяка русского на территории Ставропольского края.

5. Результаты морфолого-анатомического диагностического изучения сырья синяка русского.

6. Результаты изучения состава и изменчивости содержания нафтохинонов корней синяка русского по фазам развития растения. .

7. Обоснование технологии масляного экстракта корней синяка русского и мази, его содержащей.

8. Результаты изучения антимикробной активности выделенного из корней синяка русского липофильного комплекса, содержащего сумму нафтохинонов, а также ранозаживляющего и антимикробного действия разработанных лекарственных средств.

Апробация работы и публикации

Основные положения диссертационной работы доложены на 60-й, 61-й и 62-й межрегиональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2005-2007 гг.), IV научно-практической конференции молодых учёных и студентов Краснодарского края (Анапа, 2006 г.), научной конференции «Актуальные проблемы фармации» (Владикавказ, 2007 г.). По материалам диссертации опубликовано 12 работ, в том числе 2 статьи - в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 155 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, общих выводов, списка цитируемой литературы, включающего 154 источника, из которых 68 на иностранном языке, и приложения. Диссертация иллюстрирована 46 рисунками и 42 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Дайронас, Жанна Владимировна

Общие выводы

1. Результаты фотохимического скрининга 8 видов из 7 родов сем. бурачниковых показали, что из изученных дикорастущих видов флоры Северного Кавказа наиболее перспективным источником шиконина и его производных являются корни синяка русского.

2. Впервые в корнях синяка русского были идентифицированы ацетилшиконин, изобутирилшиконин, Р-оксоизовалерилшиконин и дезоксишиконин.

3. Разработаны методики выделения и анализа шиконина как государственного стандартного образца.

4. Разработаны методики количественного определения суммы нафтохинонов в сырье, отличающиеся доступностью и простотой исполнения.

5. Установлена урожайность корней синяка русского, заготовленных от дикорастущих растений (5,72±0,25 г/м~). Установлено, что при интродукции синяка русского в климатических условиях КМВ растения проходят все фазы вегетации в те же сроки, что и дикорастущие. Урожайность корней синяка русского, заготовленных от культивируемых растений, составляет 53,23±3,93 г/м2.

6. Изучена динамика накопления нафтохинонов по фазам вегетации. Наибольшее количество производных шиконина накапливается, начиная с фа- \ зы цветения дикорастущих и с фазы плодоношения культивируемых растений. Максимум содержания суммы нафтохинонов наблюдается в фазу цветения.

7. Установлены характерные морфолого-анатомические диагностические признаки для корня синяка русского, позволяющие определять подлинность его сырья.

8. Определены числовые показатели корней синяка русского, которые вошли в проект ФСП «Синяка русского корни»: нафтохинонов в пересчёте на шиконин не менее 1,0%; потеря в массе при высушивании не более 10%; золы общей не более 10%; золы, нерастворимой в растворе кислоты хлористоводородной 10%, не более 1,5%; органической примеси не более 3,0%; минеральной примеси не более 1,0%; других частей синяка русского не более 0,5%.

9. Разработаны технология экстракта корней синяка русского масляного и мази с экстрактом, а также методики их анализа. Проведена оценка качества разработанных лекарственных препаратов по содержанию суммы нафтохинонов.

10.Установлено, что антимикробное действие экстракта корней синяка русского более выражено, чем мази, его содержащей, а ранозаживляющее -более выражено для мази, чем для экстракта, что связано с различием концентрации шиконина в лекарственных средствах. По ранозаживляю-щей эффективности разработанная мазь не уступает препарату сравнения «Левомеколь».

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Дайронас, Жанна Владимировна, 2008 год

1. Адамян, А.А. Современные перевязочные средства для местного лечения ран / А.А. Адамян, С.В. Добыш // Новая аптека. Аптеч. ассортимент. -2005.-№ 10.-С. 43-47.

2. Адамян, А.А. Современные подходы к выбору средств местного лечения ран / А.А. Адамян // Вестн. спорт, медицины России. 1996. - № 1-2. -С. 46-47.

3. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский и др.. М.: Химия, 1993.-464 с.

4. Антимикробная активность препаратов шиконина / Т.Б. Карягина и др. // Хим.-фармац. журн. 2001. - Т. 35, № 8. - С. 30-31.

5. Арзамасцев, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Фармация. 2006. - № 4. - С. 8-12.

6. Биосинтез производных шиконина в каллусной культуре Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc. / M.M. Козыренко и др. // Раст. ресурсы. -1991.-№4.-С. 78-81.

7. Блатун, JI.A. Флегмоны и абсцессы современные возможности лечения / Л.А. Блатун // Леч. врач. - 2002. - № 1-2. - С. 30.

8. Бриттон, Г. Биохимия природных пигментов: пер. с англ. / Г. Бриттон. -М.: Мир, 1986.-422 с.

9. Влияние жасмоновой кислоты и 12-оксофитодиеновой кислоты на биосинтез шиконина в культуре клеток Arnebia euchroma / Т.П. Бычкова и др. // Биоорганич. химия. 1993. — Т. 19, № 10.-С. 1008-1012.

10. Ю.Галушко, А.И. Флора Северного Кавказа: определитель / А.И. Галушко. -Ростов-н/Д: Изд-во Ростовск. ун-та, 1980. Т. 2. - 352 с.11 .Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа / МЗ СССР. -11 изд. М.: Медицина, 1987. - Вып. 1. - 336 с.

11. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырьё / МЗ СССР. 11 изд. - М.: Медицина, 1990-Вып. 2. - 398 с.

12. Гроссгейм, А.А. Флора Кавказа / А.А. Гроссгейм. Л.: Наука, 1967. -Т. 7. - 894 с.

13. Гудвин, Т. Введение в биохимию растений: в 2-х т.: пер. с англ. / Т. Гуд-вин, Э. Мерсер. -М.: Мир, 1986. Т. 2. - 312 с.

14. Дайронас, Ж.В. Разработка методики количественного определения нафтохинонов в корнях синяка русского / Ж.В. Дайронас // Изв. высших учеб. заведений. Северо-Кавказ. регион. Естественные науки. Спецвып. — 2006. -С. 47-48.

15. Дайронас, Ж.В. Разработка норм качества лекарственных форм, содержащих сумму нафтохинонов синяка русского / Ж.В. Дайронас // От производителя до аптеки и потребителя: тез. докл. аптечного форума. — М., 2007. — С. 69-70.

16. Дайронас, Ж.В. Стандартизация корней синяка русского (Echium russicum) / Ж.В. Дайронас // Вестн. Воронеж, гос. ун-та. Сер.: Химия. Биология. Фармация. 2006. - № 2. - С. 240-242.

17. Дёрффель, К. Статистика в аналитической химии: пер. с нем. / К. Дёрф-фель. М.: Мир, 1994. - 267 с.

18. Дикорастущие полезные растения России / под ред. А.Л. Буданцева, Е.Е. Лесиовской. СПб.: Изд-во СПХФА, 2001. - 663 с.

19. Жизнь растений: в 6 т. Цветковые растения / под ред. А.Л. Тахтаджяна. -М.: Просвещение, 1981.-Т. 5,4.2.-511 с.

20. Иванов, А.Л. Конспект флоры Ставрополья / А.Л. Иванов. Ставрополь: Изд-во СГУ, 2001.-200 с.

21. Исследование химического состава хиноидных пигментов из клеточной культуры ВК-39 Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc. / C.A. Федореев и др. // Хим.-фармац. журн. 1993. - Т. 27, № 6. - С. 33-37.

22. Козыренко, М.М. Биосинтез производных шиконина в каллусной культуре Lithospermum erythrorhizon / М.М. Козыренко, В.П. Булгаков, Ю.Н. Журавлев // Раст. ресурсы. 1991. - № 4. - С. 78-81.

23. Козыренко, М.М. Регуляция биосинтеза эфиров шиконина в клеточной культуре воробейника краснокорневого: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 03.00.12 / М.М. Козыренко. Владивосток, 1993. - 23 с.

24. Королюк, Е.А. Красильные растения Алтая и сопредельных территорий / Е.А. Королюк // Химия раст. сырья. 2003. -№ 1.-С. 101-135

25. Культура клеток Arnebia euchroma (Royle) Jonst. новый источник получения шиконина / В.Н. Давыденков и др. // Хим.-фармац. журн. - 1991. -Т. 25, № 1.-С. 53-55.

26. Максимов, О.Б. Полифенолы дальневосточных растений / О.Б. Максимов, Н.И. Кулеш, П.Г. Горовой. Владивосток: Дальнаука, 2002. - 332 с.

27. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М.Д. Машковский. -М.: Новая Волна, 2000. Т. 2. - 608 с.

28. Методика исследований при интродукции лекарственных растений / Н.И. Майсурадзе и др. // Лекарственное растениеводство: обзорная информация. М., 1984. - Вып. 3. - 33 с.

29. Методика определения запасов лекарственных растений / А.И. Шретер и др.. — М., 1986.-51 с.

30. Нафтохиноны Lithospermum erythrorhizon / О.Е. Кривощёкова и др. // Химия природ, соединений. 1976. - № 6. - С. 726-730.

31. ОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. Введ. 01 -03-2000. - М., 2000. - 34 с.

32. Пат. 93030737 Российская Федерация МПК А61К7/16 Способ получения красящего шампуня / А.Г. Демин и др. (РФ). № 93030737/14; заявл. 15.06.93; опубл. 20.11.95 [Электронный ресурс]. - Электрон, дан. - Режим доступа: http://www.fips.ru. - Загл. с экрана.

33. Перспективы поиска антимикробных средств среди хинонов растительного происхождения / С.А. Вичканова и др. // Раст. ресурсы. 1979. -№2.-С. 167-177.

34. Пименова, М.Е. Изменчивость содержания шиконина в подземных органах макротомии красящей / М.Е. Пименова, Н.В. Тареева // Раст. ресурсы. 1980. - Т. 16, вып. 1. - С. 82-86.

35. Питомник «Меристема»: официальный сайт Электронный ресурс. -Электрон, дан. СПб, 2007. - Режим доступа: http://www.meristema.ru. -Загл. с экрана.

36. Племенков, В.В. Введение в химию природных соединений / В.В. Пле-менков. Казань, 2001. - 376 с.

37. Поликахина, Г.В. Раневое покрытие «Гешиспон» / Г.В. Поликахина // Мед.-фармац. вестн. 1996. - № 11 -12. - С. 11 -15.

38. Получение, ранозаживляющее и противоязвенное действие комплекса хи-тозана с родием III / Н.Г. Афзалетдинова и др. // Хим.-фармац. журн. -2000. Т. 34, № 5. - С. 26-27.

39. Пономарёв, В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья / В.Д. Пономарёв. М.: Медицина, 1976. - 201 с.

40. Поронник, О.О. Биосинтез нафтохиноновых пигментов в растениях семейства Boraginaceae в природе и в культуре in vitro / О.О. Поронник, В.А. Кунах // Украин. биохим. журн. 2005. - № 2. - С. 21-25.

41. Растительные нафтохиноны ингибиторы дрожжей, молочнокислых и уксуснокислых бактерий / JI.P. Щербановский и др. // Раст. ресурсы. -1972. - Т. 8, вып. 1. - С. 112-115.

42. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Caprifoliaceae-Plantaginaceae. JI: Наука, 1990. - 328 с.

43. Самылина, И.А. Фармакогнозия. Атлас: учебное пособие: в 2-х т. / И.А. Самылина, О.Г. Аносова. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - Т. 1. - 192 с.

44. СанПиН 2.3.2.1078-01. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. — М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора МЗ РФ, 2001. 248 с.

45. СанПиН 2.3.2.1293-03. Гигиенические требования по применению пищевых добавок. М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора МЗ РФ, 2003. -225 с.

46. Сборник методических рекомендаций по стандартизации лекарственных средств. М.: Пеликан, 2006. - 392 с.

47. Соха, В.И. Источники шиконина в культуре тканей: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / В.И. Соха. СПб., 1996. - 23 с.

48. Старченко, В.М. О содержании нафтохинонов у дальневосточных представителей сем. Boraginaceae / В.М. Старченко, О.Е. Кривощёкова // Раст. ресурсы. 1978. -№ 3. - С. 393-396.

49. Тареева Н.В. Химическое изучение нафтохинонов некоторых видов сем. бурачниковых: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / Н.В. Тареева-М., 1971.- 19 с.

50. Тареева, Н.В. О нахождении шиконина в растениях сем. Boraginaceae / Н.В. Тареева, А.С. Романова, А.И. Баньковский // Поиски новых источников биологически активных веществ: сб. науч. тр. М., 1970. — Вып. 1. -С. 175-181.

51. Тареева, Н.В. Фотоколориметрическое определение шиконина / Н.В. Та-реева, А.С.Романова, А.И. Баньковский // Фармация. 1969. - № 6. -С. 48-51.

52. Тахтаджян, A.JI. Система магнолиофитов / A.J1. Тахтаджян. Л.: Наука, 1987.-439 с.

53. Тенцова, А.И. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств / А.И. Тенцова, И.С. Ажгихин. М.: Медицина, 1974. - 336 с.

54. Фисенко, В.П. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / В.П. Фисенко. М., 2000.-С. 114-119.

55. Флора европейской части СССР: в 7 т. / под ред. А.А. Фёдорова. Л.: Наука, 1981.-Т. 5.-380 с.

56. Хиноидные пигменты дальневосточных представителей сем. Boraginaceae / С.А. Федореев и др. // Химия природ, соединений. 1979. — №5. — С. 625-630. ,

57. Черепанов, С.К. Сосудистые растения России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) / С.К. Черепанов. СПб: Мир и семья, 1995. -992 с.

58. Шиков, А.Н. Растительные масла и масляные экстракты: технология, стандартизация, свойства / А.Н. Шиков, В.Г. Макаров, В.Е. Рыженков. -М.: Рус. врач, 2004. 264 с.

59. Шиконин из Macrotomia echioides, Onosma livanovii, Onosma sericeum, Onosma setosum / A.C. Романова и др. // Химия природ, соединений. -1981.-№ 1.-С. 96.

60. Щербак, Ф.И. Почвенно-мелиоративные и климатические условия ботанического сада института / Ф.И. Щербак // Учёные записки Пятигорского фамац. ин-та. Ставрополь, 1959. - Т. 4. - С. 284-291.

61. Щербановский, Л.Р. Бензо-, нафто- и антрахиноны цветковых растений как антимикробные вещества / Л.Р. Щербановский, Л.С. Шубина // Раст. ресурсы. 1975. - Т. 11, вып. 3. - С. 445-454.

62. Щербановский, JT.Р. Нафтохиноны высших растений / Л.Р. Щербановский, Л.С. Шубина, Ф.Р. Щербановская // Раст. ресурсы. 1971. - Т. 7, вып. 4. -С. 606-615.

63. Щербановский, Л.Р. Шиконин из Echium lycopsis / Л.Р. Щербановский, Ю.А. Луке // Химия природ, соединений. 1974. - № 4. - С. 513-514.

64. Щербановский, Л.Р. Шиконин из Onosma polyphyllum / Л.Р. Щербановский // Химия природ, соединений. 1972. — № 5. - С. 666.

65. Щербановский, Л.Р. Шиконин из Onosma tauricum / Л.Р. Щербановский // Химия природ, соединений. 1972. — № 2. — С. 238.

66. Эксперимент с компьютерной поддержкой: учеб. пособие / М.Ф. Артамонов и др.. — Иркутск: Редакционно-издательский отдел ИГУ, 2000. — 64 с.

67. Элементы экспериментальной фармакологии / под ред. Л.Н. Сернова, В.В Гацура. М., 2000. - 351с.

68. Щербашвський, Л.Р. Наявшсть шикошну в деяких видах родини шорст-колистих i його вплив на молочнокисл! бактерй' / Л.Р. Щербашвський // у УкраТнс. бот. журн. 1971. - № 4. - С. 504-508.

69. А new efficient route for multigram asymmetric synthesis of alkannin and shikonin / E.A. Couladouros et al. // Chemistry. 2002. - № 8. - P. 17951803.

70. A Novel Dark-Inducible Protein, LeDI-2, and Its Involvement in Root-Specific Secondary Metabolism in Lithospermum erythrorhizon / K. Yazaki et al. // Plant Physiol. 2001. - Vol. 125. - P. 1831-1841.

71. Afzal, M. Shikonin derivatives: Chemical investigations of Arnebia decumbens / M. Afzal, G. Al-Oriquat // Agr. and Biol. Chem. 1986. - Vol. 50, № 6. - P. 1651-1652.

72. Alkannin and shikonin: effect on free radical processes and on inflammation a preliminary pharmacochemical investigation / A.P. Kourounakis et al. // Arch. Pharm. (Weinheim). - 2002. - Vol. 335, № 6. - P. 262-266.

73. Anti-inflammatory activity of shikonin derivatives from Arnebia hispidissima / B. Singh et al. // Phytomedicine. 2003. - Vol. 10 № 5. - P. 375-380.

74. Antimicrobial activities of naphthazarins from Arnebia euchroma / C.C. Shen et al. // J. Nat. Prod. 2002. - Vol. 65, № 12. - P. 1857-1862.

75. Assimopoulou, A.N. Study on the enantiomeric ratio of the pharmaceutical substances alkannin and shikonin / A.N. Assimopoulou, V.P. Papageorgiou // Bio-med Chromatogr. 2004. - Vol. 18, № 10. - P. 791-799.

76. Ballantine, J.A. The isolation of two esters of the naphthaquinone alcohol, shikonin, from the shrub Jatropha glandulifera / J.A. Ballantine // Phytochemistry. 1969. - Vol. 8, № 8. - P. 1587-1590.

77. Beta-hydroxyisovalerylshikonin is a novel and potent inhibitor of protein tyrosine kinases / S. Hashimoto et al. // Jpn J Cancer Res. 2002. - Vol. 93, № 8. -P. 944-951.

78. Biological activity of some naturally occurring resins, gums and pigments against in vitro LDL oxidation / N.K. Andrikopoulos et al. // Phytother Res. -2003. Vol. 17, № 5. - P. 501-507.

79. Cellular pharmacology studies of shikonin derivatives / X. Chen et al. // Phytother. Res. 2002. - Vol. 16, № 3. - P. 199-209.

80. Chiltern seeds Электронный ресурс. Электрон, дан. - 2007. - Режим доступа: http://www.edirectory.co.uk/chilternseeds. - Загл с экрана.

81. Direct reaction between shikonin and thiols induces apoptosis in HL60 cells / D. Gao et al. // Biol Pharm Bull. 2002. - Vol. 25, № 7. - P. 827-832.

82. Enhancement of wound healing by shikonin analogue 93/637 in normal and impaired healing / H. Mani et al. // Skin Pharmacol. Physiol. 2004. - Vol. 17, № 1. - P. 49-56.

83. Evans, W.C. Trease and Evans' pharmacognosy, 15th ed. / W.C. Evans. -Philadelphia: W.B. Saunders, 2002. 600 p.

84. Fu Sh. Analysis of naphthaquinone pigments in some Chinese medicinal «li cao» / Sh. Fu, T. Shang, P. Xiao // Chem. Abstrs. 1985. - Vol. 103, № 11307. -P. 102.

85. Hisamichi, S. Studies on the shikonin: Structures of new minor pigments and isolation of two isomers of shikonin derivatives from Lithospermumerythrorhizon Sieb. et Zucc. / S. Hisamichi, P. Voshizaki // Chem. Abstrs. — 1982.-Vol. 97, №178739.-P. 78.

86. Hu, L. Production of shikonin by cell cultures of Lithospermum erythrorhizon / L. Hu // Zhong Yao Cai. 2004. - Vol. 27, № 5. - 313-314.

87. Hyatt, R. Chinese Herbal Medicine Ancient Art and Modern Science / R. Hyatt, R. Feldman. New York: Schocken Books, 1978. - P. 17-28.

88. Immunomodulatory effect of shikonin derivatives isolated from Lithospermum canescens on cellular and humoral immunity in Balb/c mice / A. Piet-rosiuk et al. // Pharmazie. 2004 - Vol. 59, № 8. - P. 640-642.

89. Impairment of vascular function of rat thoracic aorta in an endothelium-dependent manner by shikonin/alkannin and derivatives isolated from roots of Macrotomia euchroma / C.M. Hu et al. // Planta Med. 2004. - Vol. 70, № 1. - P. 23-28.

90. Inhibition of Topoisomerase I by Naphthoquinone Derivatives / Z.F. Plyta et al. // Bioorg. Med. Chem. Let. 1998. - № 8. - P. 3385-3390. •

91. Involvement of reactive oxygen species, but not mitochondrial permeability transition in the apoptotic induction of human SK-Hep-1 hepatoma cells by shikonin / C.H. Chen et al. // Planta Med. 2003. - Vol. 69, № 12. - P. 11191124.

92. Ki, Z. Determination of alkannin in zicao (radix arnebiae or lithospermi) / Z. Ki, M. Zhang, L. Guo // Chem. Abstrs. 1986. - Vol. 104, № 165410. - P. 86.

93. Leung, A.Y. Encyclopedia of Common Natural Ingredients / A.Y. Leung, S. Foster. Wiley, New York, 1996. - P. 19-20.

94. Lu F. Studies on the chemical constituents of Arnebia guttata Bunge / F. Lu, Q. Xiang, F. Zhu // Chem. Abstrs. -1984. Vol. 100, № 99960. - P. 67.

95. Lu, H.T. Preparative high-speed counter-current chromatography for purification of shikonin from the Chinese medicinal plant Lithospermum erythrorhizon / H.T. Lu, Y. Jiang, F. Chen // J. Chromatogr A. 2004. - Vol. 1023, № l.-P. 159-163.

96. Пат. 4282250 USA, A61K 031/22. Remedy for skin injuries and diseases / V.P. Papageorgiou (GR). No. 867532; filed 06.01.78; priority 04.08.81. Электронный ресурс. - Электрон. дан. - Режим доступа: http://uspto.gov/patft/index.html. - Загл. с экрана.

97. Пат. 5626868 USA, А61К 009/127. Cosmetic and/or pharmaceutical composition containing a dispersion of lipid vesicles, process for the preparation of the said dispersion and dispersion of lipid vesicles / J.-L. Morancais, A. Lety,

98. G. Vanlerberghe (FR). No. 385552; filed 08.02.95; priority 06.05.97. Электронный ресурс. - Электрон. дан. - Режим доступа: http://uspto.gov/patft/index.html. — Загл. с экрана.

99. Пат. 6248343 USA, А61К 031/14. Therapeutic antimicrobial compositions /

100. H.В. Jampani, J.L. Newman, T. Ellis (NJ). No. 460031; filed 13.12.99; priority 19.06.01. Электронный ресурс. Электрон, дан. - Режим доступа: http://uspto.gov/patft/index.html. - Загл. с экрана.

101. Пат. 6924410 USA, A61F 013/00. Ultraviolet-screening patch / К. Tsuruda, Y. Ikeura (JP). No. 221848; filed 13.03.01; priority 02.08.05. Электронный ресурс. - Электрон, дан. - Режим доступа: http://uspto.gov/patft/index.html. — Загл. с экрана.

102. Plant Delights Nursery Inc. Электронный ресурс. Электрон, дан. -2007. - Режим доступа: http://www.plantdelights.com. - Загл. с экрана.

103. Regulation of lithospermic acid В and shikonin production in Lithospermum erythrorhizon cell suspension cultures / H. Yamamoto et al. // Chem. Pharm. Bull. 2002. - Vol. 50, № 8. - P. 1086-1090.

104. Regulatory role of microsomal 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase for shikonin biosynthesis in Lithospermum erythrorhizon cell suspension cultures / B. Markus Lange et al. // Planta January. 1998. - Vol. 204, №2-P. 234-241.

105. Sasaki, K. In vitro antifungal activity of naphthoquinone derivatives / K. Sasaki , H. Abe, F. Yoshizaki // Biol. Pharm. Bull. 2002. - Vol. 25, № 5. -P. 669-670.

106. Shikonin derivatives: synthesis and inhibition of human telomerase / Q. Lu et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002. - Vol. 12, № 10. - P. 1375-1378.

107. Shikonin inhibits the growth and N-acetylation of 2-aminofluorene in Helicobacter pylori from ulcer patients / H.M. Kuo et al. // Anticancer Res. -2004. Vol. 24, № 3a. - P. 1587-1592.

108. Shikonin modulates cell proliferation by inhibiting epidermal growth factor receptor signaling in human epidermoid carcinoma cells / F. Singh et al. // Cancer Let. 2003. - Vol. 200, № 2. - P. 115-121.

109. Shikonin regulates HeLa cell death via caspase-3 activation and blockage of DNA synthesis / Z. Wu et al. // Asian Nat. Prod. Res. 2004. - № 3. - P. 5566.

110. Shikonin stimulates glucose uptake in 3T3-L1 adipocytes via an insulin-independent tyrosine kinase pathway / R. Kamei et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol. 292, № 3. - P. 642-51.

111. Shikonin, a Component of Chinese Herbal Medicine, Inhibits Chemokine Receptor Function and Suppresses Human Immunodeficiency Virus Type 1 / Xin Chen et al. // Antimicrobial agents and chemotherapy. 2003. - № 9. - P. 2810-2816.

112. Shikonins, phytocompounds from Lithospermum erythrorhizon, inhibit the transcriptional activation of human tumor necrosis factor alpha promoter in vivo / V. Staniforth et al. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol. 279, № 7. - P. 58775885.

113. Structure of arnebifuranone new monoterpenylbenzoquinone from Arnebia euchroma / X.-Sh. Yao et al. // Tetrahedron Lett. 1984. - Vol. 25, № 48. -P. 5541-5542.

114. Studies on the anti-inflammatory effect of chemical principle of zicao (Arnebia euchroma (Royle.) Johnst) / Sh.B. Lin et al. // Chem. Abstrs. 1980. Vol. 93,№ 140038.-P. 112.

115. Sung C.-W. Survey on resourse of Lithospermum erythrorhizon and related herb in China / C.-W. Sung, K.-Sh. Liu, N.-W. Li // Chem. Abstrs. 1981. -Vol. 94, No 71295. - P. 78.

116. The Chemistry and Biology of Alkannin, Shikonin, and Related Naphthaza-rin Natural Products / V.P. Papageorgiou et al. // Angew. Chem. 1999. -№111.-p. 280-311

117. The inhibition of N-acetyltransferase activity and gene expression in human bladder cancer cells (T24) by shikonin / C.C. Yeh et al. // In Vivo. 2004. -Vol. 18, № 1. - P. 21-31.

118. Thompson & Morgan Seedsmen Inc (220 Faraday Ave, Jackson, New Jersey USA Электронный ресурс. Электрон, дан. - New Jersey, 2005. - Режим доступа: http://seeds.thompson-morgan.com/us/en/index. - Загл. с экрана.

119. Volak, J. Plantes medicinales / J. Volak, J. Stodola Paris: Grund, 1995 -317 p.

120. Weigle, P. Ancient Dyes for Modern Weavers / P. Weigle. New York: Watson-Guptil, 1974. - P. 50-52.

121. Wichtl, M. Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals: A Handbook for Practice on a Scientific Basis / M. Wichtl. Stuttgart: Medpharm, 1994. - P. 55-56.

122. Wren, R.C. Potters New Cyclopaedia of Botanical Drugs and Preparations / R.C. Wren. Devon: Health, 1975. - P. 11-12.

123. Zhu F. Isolation of shikonin and its derivatives by HPLC / F. Zhu, F. Lu, Q.Xiang //Chem. Abstrs. 1985. - Vol. 103, № 59142. - P. 121.