Фармакогностическое и фармакологическое изучение надземной части шалфея сухостепного Salvia tesquicola Klok. et Pobed тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Шешегова, Елена Викторовна

• Шешегова, Елена Викторовна
• кандидат фармацевтических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Шешегова, Елена Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Систематическое положение, ботаническая характеристика и распространение Salvia tesquicola Klok. et Pobed.

1.2. Химический состав видов рода Salvia L.

1.3. Биологическая активность видов рода Salvia L.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. Материалы и методы.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Определение ареала S. tesquicola и ресурсоведческая оценка вида.

2.2.2. Методы химического анализа.

2.2.3. Методы микроскопического анализа сырья.

2.2.4. Методы товароведческого анализа.

2.2.5. Методы фармакологического исследования.

2.2.5.1. Оценка острой токсичности.

2.2.5.2. Оценка противогипоксического действия.

2.2.5.3. Оценка противовоспалительного действия.

2.2.5.4. Оценка анальгезирующего действия.

2.2.5.5. Изучение иммунотропных свойств.

2.2.5.6. Оценка психофизиологического статуса.

2.2.5.7. Изучение влияния экстрактов на снотворный эффект гексенала.

2.2.5.8. Оценка муколитического действия.

2.2.5.9. Статистическая обработка данных.

2.2.6. Методы микробиологического исследования.

ГЛАВА 3. Изучение состава биологически активных соединений надземной части S. tesquicola.

3.1. Испытания на присутствие основных групп действующих веществ.

3.2. Изучение основных групп биологически активных веществ.

3.2.1. Флавоноиды.

3.2.2. Фенольные кислоты.

3.2.3. Аминокислотный состав.

3.2.4. Полисахариды.

ГЛАВА 4. Сравнительное изучение фармакологической и антимикробной активности сухих экстрактов из надземной части S. tesquicola и листьев S. officinalis.

4.1. Изучение острой токсичности.

4.2. Изучение противогипоксического действия.

4.3. Изучение противовоспалительного действия.

4.4. Изучение анальгезирующей активности экстрактов.

4.5. Изучение иммунотропных свойств экстрактов.

4.6. Оценка влияния исследуемых экстрактов на психофизиологический статус животных.

4.7. Изучение влияния экстрактов на снотворный эффект гексенала.

4.8. Оценка муколитического действия экстрактов.

4.9. Изучение антимикробной активности экстрактов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое и фармакологическое изучение надземной части шалфея сухостепного Salvia tesquicola Klok. et Pobed»

Актуальность темы. В современной медицине лекарственные растения продолжают оставаться одним из перспективных источников получения эффективных лекарственных препаратов. Препараты растительного происхождения обладают более мягким действием, менее токсичны и проявляют широкий спектр фармакологического действия (Соколов, Замотаев, 1990).

Различные виды рода шалфей Salvia L. флоры России используются в народной медицине при различных заболеваниях, а S. aethiopis L. и S. officinalis L являются официнальными растениями. Шалфей лекарственный в диком виде на территории России не произрастает, но культивируется в специализированных хозяйствах на юге европейской части страны. Потребности в сырье этого растения удовлетворяются не полностью. Поиск заменителя этого сырья во флоре России достаточно актуален. Изучаемый нами вид - шалфей сухостепной Salvia tesquicola Klok. et Pobed. — распространен в европейской части бывшего СССР, во всех районах Кавказа, в Западной Сибири и в северозападной части Средней Азии, что делает его перспективным в ресурсоведческом отношении.

Несмотря на популярность этого вида шалфея в народной медицине, анализ данных литературы показал, что сведения о химическом составе и биологических свойствах его ограничены. Поэтому фармакогностическое и фармакологическое изучение надземной части шалфея сухостепного представлялось актуальным.

Диссертационная работа выполнена на кафедрах фармакогнозии и фармакологии Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии в соответствии с научным направлением «Изыскание и изучение биологически активных веществ растительного, микробного и синтетического происхождения» и тематическим планом научно-исследовательских работ СПХФА по теме «Исследование лекарственных растений, перспективных для создания фитопрепаратов». Изучение антимикробного действия выполнено на кафедре микробиологии СПХФА под руководством заведующей Лаборатории биотехнологии к.б.н. Л.А. Коссиор, исследования с использованием методов газовой и высокоэффективной жидкостной хроматографии выполнены в лаборатории аналитических методов НИУ академии. Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является фармакогностическое и фармакологическое изучение надземной части шалфея сухостепного. В задачи исследования входило:

1. Проведение общего фитохимического анализа с целью выявления основных групп действующих веществ.

2. Изучение компонентного состава доминирующих групп биологически активных соединений.

3. Определение острой токсичности и фармакологических эффектов сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного в сравнении с экстрактами из листьев шалфея лекарственного.

4. Изучение антимикробной активности сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного в сравнении с экстрактами из листьев шалфея лекарственного.

5. Определение нормативов качества изученного сырья и разработка проекта нормативной документации (ФСП) на сырье.

6. Рекогносцировочная ресурсоведческая оценка данного вида. Научная новизна. Из надземной части б*. 1е8цшсо1а были впервые выделены и идентифицированы 4 флавоноидных соединения - гликозиды лютеолина и хризоэриола: цинарозид, сколимозид, 7-0-Б-глюкуронид лютеолина и 7-0-0-глюкуронид хризоэриола. Установлено присутствие в траве шалфея сухостепного водорастворимых полисахаридов, определено их содержание, а также изучен мономерный состав. Определены качественный состав, а также содержание фенольных кислот и аминокислот надземной части шалфея сухостепного. В экспериментах на животных установлено, что сухие водные и спиртовые экстракты из надземной части шалфея сухостепного обладают низкой токсичностью, выраженными антигипоксическим, противовоспалительным, ранозаживляющим, анальгезирующим и седативным эффектами. В сравнении с экстрактами из листьев шалфея лекарственного они показали более выраженный антиэкссудативный, иммуномодулирующий и муколитический эффекты. В результате сравнительного изучения антимикробной активности сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного и листьев шалфея лекарственного установлено сходство по бактерицидной и бактериостатической активности в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в траве шалфея сухостепного.

Практическая значимость. Определены характеристики подлинности, показатели качества и их нормативы для сырья шалфея сухостепного. Результаты исследования использованы при разработке проекта ФСП на новый вид лекарственного сырья «Шалфея сухостепного трава», который рекомендуется для внедрения в медицинскую практику в качестве противовоспалительного и антимикробного средства. Составлена карта ареала шалфея сухостепного и проведено определение урожайности в естественных условиях произрастания в Волгоградской области (Жирновский район). Полученная ресурсоведческая характеристика вида свидетельствует об обеспеченности его сырьевой базы.

Основные положения, выносимые на защиту. 1. Компонентный состав основных групп биологически активных соединений: флавоноидов, фенольных кислот, аминокислот и полисахаридов надземной части шалфея сухостепного, а также их количественная оценка.

2. Сравнительная характеристика острой токсичности и фармакологических эффектов сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного и листьев шалфея лекарственного.

3. Сравнительная характеристика антимикробной активности сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного и листьев шалфея лекарственного.

4. Обоснование методов стандартизации и нормативов качества сырья «Шалфея сухостепного трава».

Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены на:

• 67-ой научной сессии КГМО отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2002 г.);

• IX Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2002 г.).

• 60-ой Юбилейной открытой итоговой научной конференции студентов и молодых ученых Волгоградской медицинской академии: «Медицина в начале нового века: достижения и перспективы» (Волгоград, 2002).

• VI Международном Съезде «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» (Санкт-Петербург, 2002).

• VII Международном Съезде «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» ФИТОФАРМ 2003 (Санкт-Петербург - Пушкин, 2003).

Публикации. Основное содержание диссертации отражено в 10 научных статьях и тезисах.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 175 страницах машинописного текста, иллюстрирована 39 рисунками и 33 таблицами. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, характеризующей материалы и методы исследований; а также 3 глав

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Шешегова, Елена Викторовна

выводы

1. В результате общего фитохимического анализа установлены основные группы действующих веществ надземной части Salvia tesquicola Klok. et Pobed., к которым относятся флавоноиды, фенольные кислоты, аминокислоты и полисахариды.

2. Из надземной части S. tesquicola впервые выделены и идентифицированы 4 флавоноидных соединения: 7-0-Р-0-глюкозид лютеолина (цинарозид), 7-О-рутинозид лютеолина (сколимозид), 7-O-D-глюкуронид лютеолина и 7-0-0-глюкуронид хризоэриола. Содержание суммы флавоноидов в фазы бутонизации и цветения является максимальным и составляет более 3,7%.

3. В составе комплекса фенольных кислот надземной части S. tesquicola содержится 10 фенольных кислот, среди которых методами хроматографии на бумаге и ВЭЖХ идентифицировали галловую, гентизиновую, хлорогеновую, ванилиновую, кофейную, сиреневую, вератровую, салициловую, гс-кумаровую и гс-гидроксибензойную кислоты. Установлено, что основными кислотами являются сиреневая, хлорогеновая, кофейная, салициловая и гс-кумаровая кислоты. Общее содержание фенольных кислот составило 4,8 % в пересчете на абсолютно-сухое сырье.

4. Методами хроматографии на бумаге и ВЭЖХ-анализа идентифицированы 18 аминокислот: лейцин, фенилаланин, валин, метионин, тирозин, пролин, аланин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты, лизин, цистеин, серин, аргинин, треонин, глицин, изолейцин, триптофан и гистидин. Причем, доминирующими являются тирозин, гистидин, пролин и триптофан. Общее содержание аминокислот в надземной части шалфея сухостепного составило 0,12% в пересчете на абсолютно-сухое сырье.

5. На основании разработанного способа выделения полисахаридного комплекса из надземной части S. tesquicola установлено, что содержание полисахаридов составляет 1,97 %. При этом, по органам они распределены неравномерно, в листьях их содержится 3,12 %, в стеблях - 0,61 %, в цветках - 0,5 %. Основными мономерными единицами полисахаридного комплекса являются галактоза, рамноза, арабиноза, глюкоза и глюкуроновая кислота. Полисахариды шалфея сухостепного относятся к классу сложных галактанов, в составе которых присутствуют фрагменты, близкие по структуре к пектиновым веществам.

6. ДЦ5о сухих водных и спиртовых экстрактов из надземной части шалфея сухостепного при внутрибрюшинном введении составляет от 1630+100 до 2820+250 мг/кг, что позволяет считать их малотоксичными.

7. В экспериментах на животных установлено, что сухие водные и спиртовые экстракты из надземной части шалфея сухостепного обладают выраженными антигипоксическим, противовоспалительным, ранозаживляющим, анальгезирующим и седативным эффектами. В сравнении с экстрактами из листьев шалфея лекарственного экстракты из надземной части шалфея сухостепного обладают более выраженными антиэкссудативным, иммуномодулирующим и муколитическим эффектами.

8. Установлены минимальные концентрации сухих экстрактов из надземной части шалфея сухостепного и листьев шалфея лекарственного, оказывающие бактерицидное и/или бактериостатическое действие на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы при микробной нагрузке 2000 клеток/мл. Антифунгальная активность экстрактов в отношении Candida albicans не обнаружена.

9. Разработаны методики качественного и количественного анализа суммы флавоноидов травы шалфея сухостепного, установлены основные макро- и микроскопические признаки подлинности сырья, а также показатели качества и нормативы для сырья. Результаты исследования использованы при разработке проекта ФСП на сырье «Шалфея сухостепного трава».

10. На основании составленной карты ареала & {еядшсо1а на территории России и сопредельных государств бывшего СССР возможна организация ресурсоведческих исследований по выявлению потенциально продуктивных угодий для организации промышленных заготовок сырья. Урожайность надземной части шалфея сухостепного в естественных условиях произрастания в Жирновском районе Волгоградской области составила 2933,3+372 кг/га в пересчете на воздушно-сухое сырье, а выход воздушно-сухого сырья из свежесобранного составил 30%.

4.10. Заключение

Сравнительное фармакологическое изучение сухих экстрактов (водных и спиртовых) из надземной части шалфея сухостепного S. tesquicola и из листьев шалфея лекарственного S. officinalis позволяют отметить следующее. Все изучаемые экстракты обладали низкой токсичностью, выраженными антигипоксическим, противовоспалительным, ранозаживляющим, анальгезирующим и седативным эффектами. В сравнении с сухими экстрактами из листьев шалфея лекарственного сухие экстракты из надземной части шалфея сухостепного обладали более выраженными антиэкссудативным, иммуномодулирующим и муколитическим эффектами. Сравнительное изучение антимикробной активности сухих экстрактов, полученных на основе водных и спиртовых (70%-ный этанол) извлечений, из надземной части S. tesquicola и из листьев S. officinalis в отношении Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli не выявило у них значительных различий. Не обнаружена бактерицидная активность в отношении Р. aeruginosa у сухого экстракта (водного) из надземной части S. tesquicola. Исследованные сухие экстракты не проявляли антифунгальной активности в отношении тест-культуры Candida albicans. Перспективно дальнейшее изучение экстрактов из надземной части шалфея сухостепного в качестве заменителя препаратов из листьев шалфея лекарственного.

ГЛАВА 5. Разработка методов стандартизации «Шалфея сухостепного трава», составление карты ареала и определение урожайности шалфея сухостепного

5.1. Разработка методов стандартизации сырья При разработке проекта ФСП на новый вид сырья «Шалфея сухостепного трава» по разделам «Внешние признаки цельного сырья», «Внешние признаки измельченного сырья» и «Микроскопия» проведен макро- и микроскопический анализ и выделены диагностические признаки сырья. Для установления нормативов качества сырья по разделу «Числовые показатели» разработана методика количественного определения суммы флавоноидов и определены основных товароведческие показатели.

5.1.1. Морфологические диагностические признаки сырья При анализе образцов сырья шалфея сухостепного, собранных в фазу цветения на территории Волгоградской и Ростовской областей, установлены следующие внешние признаки сырья:

Цельное сырье. Сырье представлено цельными и частично измельченными облиственными цветущими цветоносными стеблями длиной до 40 см, а также листьями, стеблями, цветками и бутонами. Стебель четырехгранный, опушенный. Листья простые, яйцевидно-продолговатые, 3-7 см длиной и 1-3 см шириной, морщинистые, густо опушенные; верхние стеблевые нередко очень широкие, округлые, длинно заостренные на верхушке и крупно острозубчатые по краям. Нижняя поверхность листа мелкоячеистая из-за густой сети мелких жилок, среди которых выделяют 3-4 крупные боковые жилки. Прицветные листья длинно заостренные, но нередко встречаются округлые, с коротким заострением, по краям длинно белореснитчатые, длиннее чашечки, фиолетовые, редко нижние зеленые. Соцветия прямые, с короткими или длинными ветвями, часто доходящие до верхушки, состоящие из мутовок

14 - 30). Цветки на белоопушенных цветоножках. Чашечка двугубая, рассечена на 1/2 или 1/3 длины, опушена длинными волосками; нижняя губа длиннее верхней, ворсинчато опушенная, верхняя губа округлая, с тремя сближенными зубчиками, средним более коротким, нижняя с двумя продолговатыми, заостренными, прямо торчащими зубцами; венчик — 8-12 мм длиной, двугубый; верхняя губа слабо серповидно изогнутая, с короткими белыми волосками на спинке и на верхушке; средняя лопасть нижней губы венчика округлая, слабо чашевидно углубленная; столбик немного выдается из верхней губы, лопасти рыльца почти одинаковые; тычинки 2, передние. Сверху листья светло-зеленого цвета, снизу -серовато-зеленого, окраска стеблей серовато-зеленая; чашечка - светло-зеленого, а венчик - сине-фиолетового цвета. Запах слабо ароматный. Вкус горьковато-пряный.

Измельченное сырье. Кусочки листьев, стеблей, цветков, цветоносов и бутонов, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Окраска серовато-зеленая с вкраплениями сине-фиолетового цвета. Запах ароматный. Вкус горьковато-пряный.

5.1.2. Анатомические диагностические признаки сырья При рассмотрении листа с поверхности видны клетки эпидермиса верхней стороны - многоугольные и прямостенные (рис. 24), нижней стороны - более вытянутые (рис. 25). Устьица диацитного и аномоцитного типов, более многочисленные на нижнем эпидермисе.

Рис. 25. Эпидермис нижней стороны листа

Примечание. 1 - простые волоски, 2 - устьица, 3 - эфиромасличные железки, 4 - головчатые волоски, 5 - клетки эпидермиса.

На обеих сторонах листа характерно наличие трихом. Встречаются простые волоски одноклеточные с утолщенными стенками и многоклеточные, толстостенные двух-трехклеточные волоски с бородавчатой поверхностью, часто изогнутые. Простые волоски в основании не имеют розетки. Головчатые волоски состоят из одно-трехклеточной ножки и шаровидной одно-двухклеточной головки, лучше заметны по краю и по жилкам листа. Эфиромасличные железки с восьмиклеточной головкой, крупные, типичного строения для яснотковых.

Клетки эпидермиса стебля имеют вытянутую форму с прямыми стенками. Встречаются в основном короткие двухклеточные простые волоски и головчатые волоски с одноклеточной головкой на короткой одноклеточной ножке (рис. 26).

Примечание. 1 - простые волоски, 2 - головчатые волоски, 3 - клетки эпидермиса.

На поперечном срезе стебля в его верхней и средней частях обнаружено, что он имеет пучковое строение (рис. 27). Пучки открытые коллатеральные, располагаются по кругу. В ребрах стебля — пучки больших размеров. В основании (на расстоянии 3 см от земли) стебель имеет непучковое строение (рис. 28). Уголковая колленхима в ребрах стебля ярко выражена, состоит из нескольких рядов клеток. Первичная кора имеет трехслойное строение (состоит из экзодермы, мезодермы и эндодермы). Под эндодермой расположена склеренхима перициклического происхождения, которая окрашивается реактивом на одревеснение (флороглюцином). Лубяная часть представлена ситовидными трубками с клетками-спутницами и клетками лубяной паренхимы. Камбий имеет четкую линию клеток, вытянутых в тангентальном направлении. Сосудистые элементы древесины располагаются правильными рядами, чередуясь с рядами клеток либриформа. Сердцевина состоит из крупных живых паренхимных клеток и занимает 2/3 объема поперечного среза стебля.

Рис. 27. Поперечный срез верхней и средней части стебля Примечание. 1 - уголковая колленхима, 2 — эндодерма, 3 - склеренхима, 4 -пучки, 5 - флоэма, 6 - камбий, 7 - ксилема, 8 - сердцевина. 2 3 4 5

Рис, 28. Поперечный срез основания стебля

Примечание. 1 - уголковая колленхима, 2 - эндодерма, 3 - склеренхима, 4 флоэма, 5 - камбий. 6 - ксилема, 7 - сердцевина.

При микроскопическом исследовании внешней и внутренней поверхности чашелистиков обнаружено, что клетки эпидермиса имеют извилистые стенки. Встречаются короткие одноклеточные и многоклеточные простые и головчатые волоски, эфиромасличные железки, подобные элементам листа, а также сосочковидные волоски. В мезофилле заметны мелкие призматические кристаллы оксалата кальция (рис. 29).

Ж-- 1

Рис. 29. Эпидермис зубца чашечки

Примечание. 1 - простые волоски, 2 - головчатые волоски, 3 - клетки эпидермиса, 4 - сосочковидные волоски, 5 - эфиромасличные железки, 6 -призматические кристаллы оксалата кальция.

Клетки верхнего и нижнего эпидермиса венчика имеют сходное строение, они - многоугольные, с извилистыми стенками. Встречаются многоклеточные гладкие простые волоски, головчатые волоски, состоящие из одно-трехклеточной ножки и шаровидной одно-двухклеточной головки, мелкие сосочковидные волоски и эфиромасличные железки (рис. 30).

Рис. 30. Эпидермис венчика

Примечание. 1 - простые волоски, 2 - эфиромасличные железки, 3 - клетки эпидермиса, 4 - головчатые волоски, 5 - сосочковидные волоски.

Таким образом, для идентификации сырья травы шалфея сухостепного диагностическое значение имеют следующие анатомические признаки: клетки эпидермиса верхней стороны листа - многоугольные и прямостенные, нижней стороны - более вытянутые; устьица диацитного и аномоцитного типов, в большем количестве на нижней стороне листа; волоски простые одноклеточные и многоклеточные, гладкие и с бородавчатой поверхностью, в основании не имеют розетки; головчатые волоски из короткой одно-трехклеточной ножки и шаровидной одно-двухклеточной головки; эфиромасличные железки с восьмиклеточной головкой, крупные, типичного строения для яснотковых; для элементов цветка характерны многоугольные клетки эпидермиса с извилистыми стенками; волоски и эфиромасличные железки, подобные элементам листа; сосочковидные волоски, а также мелкие призматические кристаллы оксалата кальция в мезофилле чашечки.

5.1.3. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в надземной части S. tesquicola

По результатам фитохимического анализа установлено, что одной из основных групп биологически активных веществ в надземной части шалфея сухостепного являются флавоноиды. Они переходят в полиэкстракты, для которых выявлена фармакологическая активность. Кроме того, эта группа соединений удобна для стандартизации сырья.

Для количественного определения флавоноидов нами был использован метод дифференциальной спектрофотометрии, который в настоящее время чаще всего применяется при анализе флавоноидсодержащего сырья (Государственная Фармакопея СССР., 1989). Присутствие в надземной части шалфея сухостепного производных флавона, среди которых идентифицирован 7-0-(3-D- глюкозид лютеолина (цинарозид), дало основание при разработке методики определения содержания суммы флавоноидов в сырье использовать ГСО этого соединения (Фармакопейная., 1995).

На первом этапе было проведено сравнительное изучение спектров поглощения водного и спирто-водных извлечений из надземной части шалфея сухостепного, а также спиртового раствора ГСО цинарозида в УФ и видимой областях с добавками хлорида алюминия. Растворами сравнения служили исходные извлечения. Продукты реакции водного, 40%, 70%) и 95% спиртовых извлечений с хлоридом алюминия имели максимумы поглощения при 425, 440, 455 и 400 нм соответственно. Спиртовой раствор комплекса стандартного образца цинарозида с хлоридом алюминия имел максимум поглощения при 425 нм (рис. 31). В качестве рабочей была выбрана длина волны 425 нм.

360 375 390 405 420 435 450 465 480 495 510 525

Длина волны, нм

-♦-1 -л-2 -*-3 4 —5 Рис. 31. Дифференциальные УФ-спектры различных извлечений из надземной части Salvia tesquicola и раствора ГСО цинарозида

1 - спектр раствора ГСО цинарозида в 95% этаноле,

2 - спектр водного извлечения,

3 -спектр 40% спиртового извлечения,

4 - спектр 70% спиртового извлечения,

5 — спектр 95% спиртового извлечения.

Определение концентрации суммы флавоноидов в сырье проводили по калибровочной кривой, построенной с использованием стандартного образца цинарозида в концентрации от 1 до 20 мкг/мл (рис. 32).

1,0 2,5 5,0 7,5 10,0 12,5 15,0 17,5 концентрация ГСО цинарозида, мкг/мл

20,0

Рис. 32. Калибровочный график для определения концентрации флавоноидов в пересчете на цинарозид методом дифференциальной спектрофотометрии.

Построение калибровочного графика. 0,025 г (точная навеска) ГСО цинарозида, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 100-105 °С, помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяли в небольшом количестве 40% этанола и доводили до метки тем же растворителем - раствор А. 5 мл раствора А переносили в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводили 40% этанолом до метки — раствор Б. Отбирали по 1; 2,5; 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 17,5; 20 мл раствора Б в мерные колбы вместимостью по 25 мл, прибавляли по 0,5 мл 2% раствора хлорида алюминия в 95% спирте и доводили до метки 40% этанолом. Смеси выдерживали при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего определяли оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 425 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали 40% этиловый спирт.

При подборе условий экстракции суммы флавоноидов из травы шалфея сухостепного определяли значения следующих параметров:

- экстрагент (вода, 40% этиловый спирт, 70% этиловый спирт, 95% этиловый спирт);

- измельченность сырья (1, 2, 3, 5, 7 мм);

- соотношение сырья и экстрагента (гидромодуль) (1:10, 1:20, 1:30, 1:50, 1:100);

- температурный режим (20 °С, 40°С, кипящая водяная баня);

- время экстракции (15, 30, 45, 60, 90, 120 минут);

- кратность экстракции (одно-, двух-, трех-, четырехкратная);

Результаты экспериментов по подбору параметров экстракции проведены в трехкратной повторности и представлены на рисунках 33-38 и в таблицах 25-30.

При экстрагировании травы шалфея сухостепного различными растворителями максимальное содержание суммы флавоноидов отмечали при использовании в качестве экстрагента 40% этилового спирта, минимальный - при экстракции 96% этиловым спиртом (табл. 25, рис. 33).

Поэтому в последующей серии экспериментов в качестве экстрагента был выбран 40% этанол.

При исследовании степени измельченности сырья наибольшее содержание флавоноидов в извлечениях установлено при размере частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм (табл. 26, рис. 34). Исходя из этого, для количественного определения суммы флавоноидов выбран именно этот размер частиц сырья.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Шешегова, Елена Викторовна, 2004 год

1. Азизова У .Я. Материалы к изучению народных лекарственных растений Крыма. М., 1940. 24 с.

2. Акопов И.Э. Кровоостанавливающие растения. Ташкент, 1977, 267с.

3. Алимходжаева И.З. Фармакогностическое изучение 3 видов шалфея, произрастающих в Узбекистане: Автореф. дис. канд. фармац. наук. Львов, 1974. 17 с.

4. Анели Дж. Н., Анели Н. А. Представители губоцветных в Месхет-Джавахетии // Биологически активные вещества флоры Грузии. Тбилиси, 1979. С. 159—174.

5. Балынина В.А., Березовская И.В. Сравнительная оценка методов ориентировочной реакции крыс в токсикологическом эксперименте // Фармакол. токсикол. 1976. Вып. 11. №5. С. 635-638.

6. Бандюкова В.А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге // Растительные ресурсы, 1965. Т. I, вып. 1.С. 591-596.

7. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963. 152 с.

8. Белодубровская Г. А., Жохова Е.В. Номенклатура лекарственныхрастений, используемых в гомеопатии: Методическое пособие. СПб.: СПХФА, 1998. - 59 с.

9. Березина B.C. Фармакогностическое изучение видов рода Lamium L. s.l. Автореф. дисс.канд.фармац. наук. Санкт-петербург 2003.

10. Биохимические методы анализа растений. М., 1960. 360 с. Блехер Л.Б., Колосова Т.И., Лечебное применение лекарственных растений СПб.,, 1992.

11. Бодруг М.В. Дикорастущие эфирномасличные растения Молдавии. Кишинев, 1981.- 144 с.

12. Болевой синдром / Под ред. Ю.Д. Игнатова, В.А. Михайловича. JL,1990.

13. Буданцев A.JL, Харитонова Н.П. Ресурсоведение лекарственных растений: Методическое пособие к производственной практике для студентов фармацевтического факультета / Под ред. Г.П. Яковлева. СПб., 1999.-87 с.

14. Варданян С.А. Лекарственные растения гормонального и антитоксического действия в средневековой армянской фитотерапии // Биол. журн. Армении. 1986. Т. 39, № 7. С. 624—633.

15. Вичканова С.А. и др. Антимикробная активность экстрактов из корней растений p. Salvia L. / С. А. Вичканова, М. А. Рубинчик, В. В. Адгина, С. Б. Изосимова, Л. В. Макарова, А. В. Патудин, Д. А. Пакалн // Растит, ресурсы. 1974. Т. 10, вып. 3. С. 389—395.

16. Вичканова С. А., Макарова Л.В., Гордейкина Н.И. Туберкулостатическая активность препаратов из растений // Фитонциды: Результаты, перспективы и задачи исследований. Киев, 1972. С. 90—94.

17. Вовк И. Ф. Экстракт мускатного шалфея в терапии больных псориазом // Здравоохранение. Кишинев, 1961. № 4. С. 47—50.

18. Волкинд И.В., Гуревич И.Я. Урюпов О.Ю. Рецептурный справочник для врачей и фармацевтов. Л., 1976. 647 с.

19. Воллосович А.Г. Материалы к изучению народной медицины Брянской области //Вопросы фармакогнозии. Л., 1965. Вып. 3. С. 179—184.

20. Выделение и анализ природных биологически активных веществ. Томск, 1987. 185 с.

21. Гаммерман А.Ф. Обзор лекарственных растений Туркмении // Тр. Туркм. фил. / АН СССР. Ашхабад, 1942. Вып. 2. С. 55—92.

22. Гелла Э.В., Прокошева Л.И. К изучению флавоноидов Salvia nutans //Химия природных соединений, 1970, №2, с.270-271.

23. Герсамия B.C. Новые лекарственные средства из растительного сырья ГССР и их терапевтическое значение. Тбилиси, 1957. 152 с.

24. Гомеопатический метод лечения и практическое здравоохранение (Сборник нормативных документов и информационных материалов). М: МЗ МП РФ. — 1996. (Приложение к приказу Минздравмедпрома России от 29 ноября 1995 года № 335).

25. Государственный Реестр лекарственных средств: Официальное издание (по состоянию на 1 января 2000 г). М. 2000. - 1202 с. -(Министерство Здравоохранения).

26. Государственная фармакопея СССР. XI изд. М., 1987. Вып.2.

27. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа / МЗ СССР. 11-е издание, дополненное. М., 1987. 336 с.

28. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е издание, дополненное. М., 1989. -400 с.

29. Гринцевич О.М. Лекарственные растения Западной области // Лекарственные растения Западной области. Смоленск, 1933. Вып. 3. С. 19-127.

30. Гроссгейм A.A. Флора Кавказа. Т. 3. 1932, 405 с.

31. Дадобоева О. Словарь научных и местных названий лекарственных растений Северного Таджикистана. Душанбе, 1972, 130 с.

32. Данилевский Н.Ф., Зинченко Т.В., Кодола H.A. Фитотерапия в стоматологии. Киев, 1984. 183 с.

33. Джумаев К. Дикорастущие эфирно-масличные растения Сурхан-Шерабадской долины: Автореф. дис. канд. биол. наук. Ташкент, 1974. 39 с.

34. Дикорастущие полезные растения России /Отв. ред. А. Л. Буданцев, Е. Е. Лесиовская. СПб., 2001.

35. Дмитриев A.B. Оценка спектра активности болеутоляющих средств с помощью многофакторного регрессионного анализа // Нейрофармакологическая регуляция болевой чувствительности. Л., 1984. С. 34—56.

36. Дран и к Л.И. О фенольных соединениях некоторых растений семейства Сложноцветных. Артишок (Cynara scolymus L.) // Материалы 1 -го Всесоюзного симпозиума по фенольным соединениям, 1968.

37. Завражнов В.И., Китаева Р.И., Хмелев К.Ф. Лекарственные растения Центрального Черноземья. 3-е изд. Воронеж, 1977. 447 с.

38. Зайцев A.A. Фармакологический анализ опиоид- и адренергических механизмов регуляции гемодинамических ноцицептивных реакций //Нейрофармакологическая регуляция болевой чувствительности.Л., 1984. С. 53-74.

39. Захарова И .Я., Косенко Л.В. Методы изучения микробных полисахаридов. Киев, 1982. 175 с.

40. Золотницкая С.Я. Лекарственные ресурсы флоры Армении: В 2 т. Ереван, 1965. Т. 2. 371 с.

41. Ибрагимов Ф.И., Ибрагимова B.C., 1962. Основные лекарственные средства китайской медицины. Медгиз, М., с. 106.

42. Ивашин Д.С. и др. Лекарственные растения Украины / Д.С. Ивашин, З.Ф. Катина, И.З. Рыбачук, B.c. Иванов, Л.Т. Бутенко. Киев, 1971. 351 с.

43. Изменение №2 к ст. Государственной фармакопеи СССР, XI издания "Методы микробиологического контроля лекарственных средств" (ГФ XI, вып.2, с 187) от 01.01.02 г.

44. Изменение №3 к ст. Государственной фармакопеи СССР, XI издания "Методы микробиологического контроля лекарственных средств" (ГФ XI, вып.2, с 187) от 19.03.03 г.

45. Каррыев М.О. и др. Содержание биологически активных соединений в полезных растениях флоры Туркмении / М.О. Каррыев, М.В. Артемьева, A.A. Мещеряков, Л.И. Рожкова // Изв. АН ТССР. Сер. биол.наук. 1981. №4. с.54-66.

46. Клоков М.В. Род Salvia L. В кн.: Флора УССР. Киев: Наукова думка, е. 9, 1960, с. 655-659.

47. Клышев Л.К., Бандюкова В.А., Алюкина Л.С. Флавоноиды растений (распространение, физико-химические свойства, методы исследования). Алма-Ата, 1978. 220 с.

48. Ковалева Н.Г. Лечение растениями. М., 1971.

49. Кожемякин Л.А., Королюк A.M., Морозов В.Г., Хавинсон В. X., Бондаренко И.Г. Оценка иммунного статуса организма в лечебных учреждениях Советской Армии и ВМФ. Методическое пособие. М., 1987.

50. Крылов П.Н. Флора Западной Сибири, 1929.

51. ЛавреноваГ.В. Фитотерапия Т.2. Санкт-Петербург, 1996, 480 с.

52. Левчук А.П. Сердечные и мочегонные средства растительного происхождения // Тр. Науч. хим.-фармац. ин-та. 1929. Вып. 21. с. 3-215.

53. Лесиовская Е.Е., Веселова И.Б. Усовершенствованный способ оценки психофизиологического профиля животных // Уд. на рац. предложение №337 от 15.11.1989 г. Л., ЛХФИ.

54. Махмедов A.M. Заметки о видах из рода Salvia L. из подрода Macrosphae Pobed. Новости систематики высших растений. Т. 21, 1984.

55. Махмедов A.M. Шалфей Средней Азии и Казахстана (Систематика, география и рациональное использование) Ташкент, 1984.

56. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 1997.

57. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 2000.

58. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств. М., 1990.

59. Методы химии углеводов. Пер. с англ. под ред. чл-корр. АН СССР Н.К. Кочеткова. Издательство "Мир", М., 1967, 512 с.

60. Муравьев И. А. Технология лекарств. 3-е изд., перераб. и доп. М., 1980. Т. 2.

61. Мухамедгалиев А.Г. и др. Фитохимическое изучение шалфея пустынного, произростающего в Алма-Атинской области/

62. A.Г. Мухамедгалиев, P.A. Журбаева, С.И. Алпысбаева, A.A. Искакова // 3-й съезд фармацевтов КазССР. Кустанай, 1987. с.346-347

63. ОСТ 91.500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. М., 2000. 65 с.

64. Пакалн Д.А. и др. Поиск флавоноидиых и иридоидных соединений в семействе губоцветных флоры Кавказа / Д.А. Пакалн, A.M. Захаров, О.И. Захарова, А.Е. Пакалн // Фармация. 1976. Т. 25, № 5. С. 36—41.

65. Пастушенков JI. В., Кобачный В. И., Линьков В. И. Коррекция гипоксии кортиева органа при звуковой нагрузке и действии аминогликозидных антибиотиков: Тез. докл. 6-го Всесоюз. съезда фармакологов. Ташкент, 1988. С. 282.

66. Пастушенков Л.В., Пастушенков А.Л., Пастушенков В.Л. Лекарственные растения: использование в народной медицине и быту. — Методическое пособие СПб., 1998г.

67. Паткина H.A., Звартау Э.Э. Поведение крыс в «открытом поле» при хроническом введении морфина// Фармакол. токсикол. 1978.№5.С.537-541.

68. Патудин A.B. и др. Поиски пектолинарина и ацетилпектолинарина в растениях рода Linaria Mill, и Salvia L./A.B. Патудин, Л.П. Смирнова,

69. B.И. Глызин, А.И. Баньковский// Растит.ресурсы.1975. Т.11, вып.2. С. 204210.

70. Пискунова С.З., Должиков А.П., Ерофеева JI.H. Влияние на транспортную функцию мерцательного эпителия различных форм лекарственных веществ, применяемых для лечения ринитов // Вест, оторингологии. 1983. С. 67—70.

71. Полезные и вредные растения Мордовской АССР. Саранск, 1966.93с.

72. Пономарева-Астраханцева JI.3. Метод экспериментального получения ран и язв // Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований. М., 1954.

73. Прокопенко С.А. Химическое исследование видов рода шалфей. Автореф. дисс. канд.фармац. наук. Харьков 1982.

74. Прокопенко С.А., Литвиненко В.Г Бюлопчно активш сполуки рослин роду шавл1я. // Фарм.журнал 1980. №6. С. 19-23.

75. Прокопенко С.А., Чушенко И.В. флавоноиды Salvia pratensis // Химия природных соединений, 1986, №2, с.242.

76. Растения для нас. Справочное издание / Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. СПб., 1996.

77. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hippuridaceae Lobeliaceae.- СПб: Наука, 1991.-200с.

78. Романова A.C. и др. Качественная оценка на наличие хинонов видов Salvia L. флоры Советского Союза/ A.C. Романова, A.B. Патудин, Г.Ф. Власова, А.И. Баньковский // Растит, ресурсы. 1973. Т.9, вып. 2. с. 218222.

79. Рожкова Л.И., и др. Фитохимическое изучение растений родов Salvia L. и Euphorbia L./ Л.И. рожкова, A.C. Атаева, М.О. Каррыев, K.M. Мамедов, P.A. Сабирова // Материалы 2-го Всесоюзного съезда фармацевтов. Рига, 1974. С.250-251.

80. Роллов А.Х. Дикорастущие растения Кавказа, их распространение, свойства и применение. Тифлис, 1908, 599 с.

81. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. В. П. Фисенко. М., 2000.

82. Саар В.Г., Кузнецова C.B., Королева Е.М. Определение моносахаридов в физиологических жидкостях // Тезисы докладов Всероссийской конференции «Химический анализ веществ и материалов». М., 2000. С. 102.

83. Сепетлиев Д.В. Статистические методы в научных и медицинских исследованиях. М., 1968. С. 117.

84. Середин P.M., Кадаев Т.Н. Лекарственные растения, применяемые в народной медицине Карачаево-Черкесской автономной области // Вопросы фармакогнозии. Л., 1961. Вып. 1., с. 367-382.

85. Смирнова Л.П. и др. Ацетилпектолинарин из некоторых видов Salvia // Л.П. Смирнова, В.И. Глызин, A.B. Патудин, А.И. Баньковский// Химия природ. Соединений 1974. №2. С.249.

86. Смирнова Л.П. и др. Флавоны некоторых видов Salvia // Л.П. Смирнова, В.И. Глызин, A.B. Патудин, А.И. Баньковский// Химия природ. Соединений 1974. №5. С.668-669.

87. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. Руководство для врачей. М., 2000.

88. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. М., 1990.

89. Стоянов Н., Китанов Б. Диви полезни растения в България. София, 1960. 480 с.

90. Турова А.Д., Сапожникова Э.Н. Лекарственные растения СССР и их применение. 3-е изд. М., 1982. 304 с.

91. Фармакопейная статья 42-3150-95 лютеолин-7-глюкозид -стандартный образец, 3',4',5,7-тетрагидроксифлавон-7-Р-0-глюкопиранозид, цинарозид.

92. Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук JI.B. Руководство по нммуно-логнческим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях. М., 1993.

93. Федотовских H.H., Асеева Т.А., Хапкин И.С. Антигистаминное действие препаратов из растений, входящих в тибетские противовоспалительные прописи // Проблемы освоения лекарственных ресурсов Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск, 1983.

94. Фитохимический анализ лекарственного растительного сырья: Методические указания к лабораторным занятиям / Под ред. К.Ф. Блиновой. СПб, 1993-60 с.

95. Флора Европейской части СССР. Т. 3. Двудольные. Под ред. A.A. Федорова, 1978, 259 с.

96. Флора Крыма. Вульф Е.В. Т. 3. Москва, 1966, с. 173.

97. Флора СССР. Под ред. Б.К. Шишкина. М. 1954. JI. Т. 21.С.244.

98. Халматов Х.Х. Дикорастущие лекарственные растения Узбекистана. Ташкент, 1964. 278 с.

99. Химический анализ лекарственных растений. Учебное пособие для фармацевтических вузов / Ладыгина Е.Я., Сафронич Л.Н., Отряшенкова В.Э. и др. Под ред. Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н. М., 1983. 176 с.

100. Черепанов С.К. Сосудистые растения России и сопредельных государств. СПб, 1995. 992 с.

101. Чопик В.и., Дудченко Л.Г., Краснова А.Н. Дикорастущие полезные растения Украины. Киев, 1983. 398 с.

102. Шамсудинов С., Джумырко С.Ф., Симонян A.B. Полифенолы и тритерпены из Salvia limbata II Химия природных соединений, 1979, №1, с.95.

103. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учеб. пособие/ Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой, 2-е изд., испр. и доп. Спб., 2002, 407 с.

104. Abdalla, M.F., 1984. The flavonoids of some local Salvia species.Egyptian Journal of Chemistry 27, 827-829.

105. Asen, S., 1961. Anthocyanins in flowers of Salvia splendens cultivar Violet Flame. Proceedings of the American Society for Horticultural Science.

106. Berger F. Handbuch der Drogenkunde: Bd 1-2. Wien, 1959. Bd 1.401 S; 1950. Bd 2. 457 S.

107. Birkofer, L., Kaiser, C., Donike, M., Koch, W.Z., 1965. Acylierte Anthocyane III. Konstitution von Acyl-Anthocyanen. Zeitschrift fur Naturforschung 20b, 424-428.

108. Boissier E. Flora orientalis. Genera, V. 4, 1879, p. 590-636.

109. Brieskorn, C.H., Biechele, W., 1971. Flavones from Salvia officinalis. Compounds of Salvia officinalis. Archiv derPharmazie (Weinheim) 304,557-561.

110. Brieskorn, C.H., Kapadia, Z., 1979. Constituents of Salvia officinalis. XXIII: 5-Methoxysalvigenin in leaves of Salvia officinalis. Planta Medica 35, 376378.

111. British Herbal Pharmacopoeia. Vol. 1. - Bournemouth, 1990.

112. Camarasa, J., Canigueral, S., Iglesias, J., Martin, E., 1982. Flavonic aglycones from the leaves of Salvia verbenaca L. 5-hydroxy-4y,7-dimethoxyflavone, a new flavonoid in the genus Salvia. Plantes Medicinales et Phytotherapie 16, 192-196.

113. Chopra R.N., Nayar S.L., Chopra F.S., 1956. Glossary of Indian medicinal plants. New Delhi, p. 219.

114. Cornu A., Paynot M., 1969. Heredity and chromatographic analysis of the anthocyanin pigments in the flowers and bracts of Salvia horminum. Ann. Amelior. Plant 19, 5-13. (Chemical Abstracts 71, 57688a).

115. Cuvelier, M.E., Richard, H., Berset, C., 1996. Antioxidative activity and phenolic composition of pilot-plant and commercial extracts of sage and rosemary. Journal of the American Oil Chemists' Society 73, 645-652.

116. DeCandoll A. Prodromus systematis naturalis regni vegetabilis. Parisiis, 1847. Vol. 12. P. 292.

117. Flora Europae. Cambridge. V. 3, 1972, p. 188-192.

118. Gupta H. C., Ayengar K.N.N., Rangaswami S., 1975. Structure andsynthesis of salvitin, anew flavon isolated from Salvia plebeia. Indian Journal of Chemistry 13, 215-217.

119. Hatam, N.A.R., Yousif, N.J., 1992. Flavonoids from Salvia syriaca. International Journal of Pharmacognosy 30, 109-111.

120. Jiang, Y., Luo, S., Zheng, M., 1987. Active principles of Salvia plebeia. Yiyao Gongye 18, 349-351. (Chemical Abstracts 107, 233142r).

121. Knecht R., Chang J.-Y. High sensitivity amino acid analysis using DABS-C1 precolumn derivatization method. Advanced methods in protein microsequence analysis. Ed. by B. Wittmann-Liebold et al. Berlin, Heidelberg, 1986. P. 56-61.

122. Kokkalou, E., Kapetanidis, I., 1988. Flavonoides et acides phenoli-ques de Salvia horminum L. (Lamiaceae). Pharmaceutica Acta Hel-vetiae 63, 90-92.

123. Kondo, T., Yoshikane, M., Yoshida, K., Goto, T., 1989. Structure of anthocyanins in scarlet, purple, and blue flowers of Salvia. Tetrahedron Letters 30, 6729-6732.

124. Kooiman P. «Acta bot. neerl.», 1970. Vol. 19, p. 423-430.1.debur C. Flora Rossica, 1847. Vol. 3. P. 365.1., Y., Foo, L.Y., 2000. Flavonoid and phenolic glycosides from Salvia officinalis. Phytochemistry 55, 263-267.

125. Masterova, I., Uhrin, D., Kettmann, V., Suchy, V., 1989. Phyto-chemical study of Salvia officinalis L. Chemical Papers 43, 797-803. (Chemical Abstracts 112, 731917v).

126. Nakao M., Fukushima T., 1934. Uber die chemische Zusammensetzung von Salvia miltiorhiza (chinensische Droge Tan-Shen). J. Pharmas. Soc. Japan, 54, p. 154.

127. Oshima, Y., Kawakami, Y., Kiso, Y., Hikino, H., Yang, L.L., Yen, K.Y., 1984. Liver protective drugs. 13. Antihepatotoxic principles of Salvia plebeia herbs. Shoyakugaku Zasshi 38, 201-202. (Chemical Abstracts 102, 56094a).

128. Sagdullaeva, N. Z., Khazanovich, R. L., 1972. Flavone substances of some Salvia species growing in Uzbekistan. Meditsinskii Zhurnal Uzbekistana 1719 (Chemical Abstracts 78, 94820c).

129. Saleh, M.R.I., Sabri, N.N., 1980. Phytochemical study of the herb, Salvia verbenaca. Journal of Drug Research 12, 131-137.

130. Savin K., Ivanic R. Wild Salvia species // Arh. Farm. 1973. Vol.23, №6. P. 313-316

131. Shibata, M., Uragami, S., Matsuura, K., 1966. Paper-chromato-graphic survey of anthocyanins in purple Salvia flowers. Botanical Magazine (Tokyo) 79, 537-543.

132. Soo' R. Species et combinationes novae flore Europae praecipue Hungariae. III. ActaBot. Acad. Sci. Hung. V. 11, fasc. 1-2, 1965, p. 235-251.

133. Soo' R. Species et combinationes novae flore Europae praecipue Hungariae. III. ActaBot. Acad. Sci. Hung. V. 12, fasc. 3-4, 1966, p. 355-367.

134. Stahl E. «Dtsch. Apoth. Z.», 1963. Bd. 93, S. 197.

135. The flavonoids: advances in research. Ed. by J.B. Harborn and T.J. Mabry. London; New York, 1982. 744 p.

136. Tomas-Barberan, F.A., Harborne, J.B., Self, R., 1987. Dimalonated anthocyanins from the flowers of Salvia splendens and S. coccinea. Phytochemistry 26, 2759-2760.

137. Trim A.R., Hill R. «Biochem. J.», 1952. V. 50, p. 310-319.

138. Ulubelen, A., Ayanoglu, E., 1975. Flavonoids of Salvia virgata. Lloy-dia 38, 446-447.

139. Ulubelen, A., Miski, M., Mabry, T.J., 1981. Further flavones and tri-terpenes and the new 6-hydroxyluteolin 5-(3-D-glucoside from Salvia tomentosa. Journal of Natural Products 44, 586-587.

140. Ulubelen, A., Miski, M., Neuman, P., Mabry, T.J., 1979. Flavonoids of Salvia tomentosa (Labiatae). Journal of Natural Products 42, 261-263.

141. Ulubelen, A., Topcu, G., 1984. Flavonoids and terpenoids from Salvia verticillata and Salvia pinnata. Journal of Natural Products 47, 1068.

142. Ulubelen, A., Uygur, I., 1976. Flavonoidal and other compounds of Salvia aethiopis. Planta Medica 29, 318-320.

143. Usov A.I., Bilan M.I., Klochkova N.G. Polysaccharides of algae. 48. Polysaccharide composition of several calcareous red algae: isolation of alginate from Corallinapilulitara II Bot. Marina. 1995. Vol. 38, N 3. P. 43-51.

144. Wang, M., Li, J., Rangarajan, M., Shao, Y., La Vote, E.J., Huang, T.-C., Ho, C.-T., 1998, Antioxidative phenolic compounds from sage {Salvia officinalis). Journal of Agricultural and Food Chemistry 46, 4869-4873.

145. Winter C. A. Nonsteroid antiinflammatory agents // Ann. Rev. Pharmacol. 1966. Vol. 6. P. 157-174.

146. Wollenweber, E., 1974. Flavones and flavonoids in exudate of Salvia glutinosa. Phytochemistry 13, 753.

147. Wollenweber, E., Don", M., Rustaiyan, A., Roitman, J.N., Graven, E.H., 1992. Exudate flavonoids of some Salvia and a Trichostema species. Zeitschrifit fur Naturforschung 47c, 782-784.

148. Yang, T.-H., Chen, K.-T., 1972. Constituents of Formosan Salvia plebeia. I. Flavonoid components of Salvia plebeia. Journal of Chinese Chemical Society 19, 131-141.176