Фармако-токсикологическое обоснование применения препаратов ликопина в животноводстве и ветеринарии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.03, кандидат ветеринарных наук Соловьев, Валерий Сергеевич

• Соловьев, Валерий Сергеевич
• кандидат ветеринарных наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Соловьев, Валерий Сергеевич

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Каротиноиды и ликопин: распространение в природе, строение и биологические свойства

2.2. Биодоступность каротиноидов и ликопина для организма.

2.3. Эффективность применения препаратов ликопина.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. Получение и физико-химические свойства препаратов ликопина

4.2. Токсикологическая оценка препаратов ликопина

4.2.1. Острая токсичность.

4.2.2. Хроническая токсичность.

Патоморфологические и гистологические исследования при

4.2.3. применении препаратов ликопина.

4.2.4. Влияние на пищеварительный тракт и функцию почек

4.2.5. Местнораздражающее и аллергизирующее действие.

4.2.6. Эмбриотокические свойства.

4.2.7. Ветеринарно-санитарная оценка мяса.

4.3. Фармакология ликопина.g^

Разработка показаний к применению и лечебнопрофилактическая эффективность препаратов ликопина

Влияние ликоцинола на сохранность и прод>кгпвные каче

4.4.1. ства птицы.

4.4.2 Эффективность ликолина при гипотрофии поросят.

Профилактическая эффективность ликолина и ликоцинола

4.4.3. при послеродовых заболеваниях коров.

5. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармако-токсикологическое обоснование применения препаратов ликопина в животноводстве и ветеринарии»

актуальность темы. Промышленное ведение животноводства требует совершенствования системы мероприятий, направленных на улучшение условий содержания и кормления животных, а также внедрения новых методов и средств предупреждения и лечения их заболеваний, в том числе, с применением препаратов, обладающих разносторонней биологической активностью и безвредностью для организма.

Одним из перспективных направлений в этой области может служить использование каротиноидов как веществ, выполняющих в организме целый ряд специфических и жизненноважных функций.

Долгое время в исследованиях биологических свойств каротиноидов доминировала провитаминная теория, согласно которой их основная роль в организме человека и животных заключается в биоконверсии витамина А. В последние годы получены экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что эти вещества обладают антиоксидантными, адаптогенными, антиканцерогенными, радиопротекторными, антимутагенными и иммуномодули-рующими свойствами, не связанными с их провитаминной активностью (Плецитый К.Д., 1981; Карнаухов В.Н., 1986; Сергеев А.Г., 1986; Холодова Ю.Д., Чаяло П.П., 1990; Сергеев А.В. и др., 1992; Чиркин А.А, Казарян Р.В., 1995; Поддубный Н.П., 1996; Кузьминова Е.В., 1999; Капитанов А.Б., 1996; Кузьмич Р.П., 2000 Антипов В.А., 2007; Krinsky N., 1998; Charleux J.L., 1996; Takatsuka N. et all., 1998). И если самостоятельная роль бета-каротина в организме установлена и не вызывает сомнений, то сведения о биологической активности ликопина (каротиноида, не способного превращаться в ретинол) практически отсутствуют.

Ликопин (С4оН5б) - вещество из группы каротиноидов (содержится в красных плодах и овощах, включая помидоры, перец, арбузы, розовые грейпфруты, абрикосы и придает плодам красную окраску). Известно, что ликопин является мощным антиоксидантом (почти в три раза более активен, чем бета-каротин). Поэтому и интерес к этому каротиноиду в здравоохранении резко возрос в последнее десятилетие, после того как были продемонстрированы его свойства усиливать защитные функции организма, тормозить дегенеративные процессы в тканях, снижать риск инициации и развития онкологических, сердечно-сосудистых и других патологий (Обухова JT.K. и др, 1994; Нестерова О.А., 1997; Кузьминова Е.В., 2007; Клебанов Г.И. и др., 1998 Капитанов А.Б., 2004; Ngugen ML., Schwartz S.J., 1996; Heber D., 2002).

В настоящее время наиболее доступным источником ликопина является растительное сырье, а также мицелий гриба Blakeslea trispora. цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования является разработка, изучение фармако-токсикологических свойств и внедрение в практику ветеринарии новых отечественных препаратов ликопина (ликолин и ликоцинол) для лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных. Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

- изучить физико-химические свойства ликолина и ликоцинола;

- исследовать параметры общетоксического действия препаратов на организм;

- выявить основные фармакологические аспекты действия каротиноид-ных композиций;

- определить лечебно-профилактическую эффективность препаратов в различных показаниях;

- разработать нормативно-техническую документацию по изготовлению, контролю качества и применению ликоцинола в ветеринарии. научная новизна работы. В результате проведенных исследовании разработаны два новых отечественных препарата ликопина. Впервые определены их основные фармако-токсикологические параметры, изучена лечебная и профилактическая эффективность на крупном рогатом скоте, свиньях и птице, разработаны показания к применению и нормативно-техническая документация.

Практическая значимость работы. Для практической ветеринарии предложены новые оригинальные препараты ликопина (ликолин и ликоди-нол), обладающие высокой профилактической и лечебной эффективностью при гипотрофии свиней и акушерско-гинекологической патологии крупного рогатого скота.

Определены показания к применению этих препаратов животным различных видов, установлены оптимальные дозы, кратность и интервалы между введениями.

Разработана нормативная документация (технические условия и временная инструкция по применению), определяющая условия производства и применения ликоцинола, требования к качеству и методам контроля, утвержденная в установленном порядке вышестоящими структурами.

Освоено промышленное производство препаратов в ООО «КНИВИ-ФАРМ» (г. Краснодар).

Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, являющихся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены: на заседаниях Ученого совета Краснодарского НИВИ (2006-2010 гг.), на региональной научно-практической конференции молодых ученых Кубанского государственного аграрного университета (Краснодар, 2006), на научно - производственной конференции, посвященной 75-летию Вологодской НИВС (Вологда, 2007), на международной научно - практической конференции «Функциональные продукты питания» (Кубанский государственный аграрный университет, Краснодар, 2009), на II Сибирском ветеринарном конгрессе (Новосибирск, 2010), на XVIII Московском международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ (из них 2 - в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК РФ).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- состав и физико-химические свойства ликолина и ликоцинола;

- токсикологическая характеристика препаратов;

- фармакологические свойства;

-результаты применения ликопиновых препаратов в качестве лечебно-профилактических средств при различных патологиях у животных.

Объем и стуктура диссертации. Работа изложена на 171 страницах стандартного компьютерного набора и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений и приложения. Список использованной литературы включает 356 источников, в том числе иностранных - 231. Работа иллюстрирована 38 таблицами.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Каротиноиды: строение, распространение в природе и биологические свойства

Каротиноиды представляют собой наиболее многочисленную и широко распространенную группу пигментов, входящих в состав клеток микроорганизмов, высших растений и водорослей, а также животных и человека. Также существуют каротиноиды антропогенного происхождения, которые искусственно синтезированы человеком, с применением физико-химических методов (Гудвин Т.Б., 1954; Карнаухов В.Н., 1973; Феофилова Е.П., 1974; Кудрицкая С.Е., 1990; Vahlguist A., Peterson Р.А., 1972; Liaaen-Jensen S., 1978; Goodwin T.W., 1980).

Впервые каротин был обнаружен в 1831 году Вакенродером, который выделил ярко-красные плоские кристаллы пигмента из клеток моркови и желтой репы. От латинского имени первой - Daucus carota - он и получил свое название (Wackenroder Н., 1831). Несколько лет спустя, в 1837 году, Берцелиус из осенних листьев зеленых растений путем экстрагирования спиртом выделил желтое красящее вещество, которое предложил назвать ксантофиллом (Berzelius J., 1837),

С момента открытия каротиноидов прошло немало времени, и только русский ботаник М.С. Цвет в своем классическом учении по хромотографи-ческому разделению установил множественность каротиноидов и разделил их на 2 класса: каротины и ксантофиллы (Цвет М.С., 1910; Tswett M.S., 1911). На протяжении многих лет этот метод является одним из наиболее тонких в органическом анализе, а полученные пигменты служат объектом разносторонних исследований и представляют огромный интерес для науки.

Спустя сто лет после открытия каротина, 1930 году была установлена его структурная формула. В этот же период времени Карером была обнаружена симметричность молекул p-каротина, ликопина и зеаксантина. Он показал, что половина молекулы (3-каротина представляет собой витамин А, тем самым являясь его предшественником. Это фундаментальное открытие явилось основой «провитаминной концепции» некоторых каротиноидов и оказало огромное влияние на их дальнейшее исследование (Karrer P. et al., 1930; Karer P., Jucker E., 1948).

Появилась новая современная классификация, согласно которой все известные нам каротиновые красящие вещества по структурному признаку можно разделить на две основных группы: соединения с 40 углеродными атомами в молекуле и соединения с числом атомов углерода в молекуле меньшим 40. К первой группе принадлежат углеводороды (каротин, его изомеры и ликопин), оксисоединения - непрерывные спирты, получившие собирательное название "ксантофиллов", и оксосоединення (кегоны). Вторая группа каротиновых красящих веществ представлена карбоновыми и окси-карбоновыми кислотами. Так же, обнаружено еще несколько специфических каротиноидов, выделенных из органов животных, в молекуле которых число углеродных атомов достигает 80 (афаницин) и гликозидные каротиноиды, содержащие сахарный остаток.

Наибольшие успехи достигнуты в области изучения структуры и химии каротиноидов. Так количество каротиноидов с установленной структурой, увеличилось примерно с 50 (Гудвин Т.В., 1954) до 600 (Goodwin T.W., 1984). Однако и до сих пор понимание функций каротиноидов в живых клетках представляет собой разительный контраст по сравнению с глубиной знаний об их химии и структуре. Это означает, что существуют такие особенности соединений класса каротиноидов, которые, будучи непринятыми, во внимание, препятствуют созданию стройной и ясной теории их функционирования в клетках. Выявление этих особенностей каротиноидов, по-видимому, является необходимым этапом изучения их функций (Карнаухов В.Н., 1986).

Каротиноиды, по своей химической природе, относятся к классу терпе-ноидов, куда входят также стероиды, фитогормоны, сердечные гликозиды, эфирные масла, жирорастворимые витамины, углеводородная структура которых состоит из цепи двух или более молекул изопрена (С5-углеводородов). Каротиноиды - это тетратерпены, состоящие из длинных ветвящихся углеводородных цепей, содержащих несколько сопряженных двойных связей, заканчивающихся кольцевой циклической структурой - иононовым кольцом, на одном (у-каротин) или обоих концах ($-каротин) (Кретович B.JL, 1980; Davies D.D., Giovanelli J., Ар Rees Т., 1964).

Характерным отличием всех каротиноидов является хромофор, образованный длинной цепью сопряженных двойных связей, что позволяет отнести их к природным пигментам и отличить от других пигментных соединений. Каротиноиды, содержащие до 5 двойных связей (фитоин, фитофлюин) - не окрашены, с 7-15 конъюгированными двойными связями видятся человеческому глазу в цвете от желтого до красного. Так, нейроспорин, имеющий в своем составе 7 двойных связей, окрашен в желтый цвет, ликопин в интенсивный красный цвет, благодаря наличию 11 двойных связей, торулородин и торулин в фиолетовый - более 11 двойных связей. Также следует отметить влияние различных функциональных групп и других дополнительных двойных связей на р-электронные системы хроматофора каротиноидов, от которых зависит длинна волны света и следовательно цвет самих молекул (Steinberg-Yfrach G, 1997; ManigaN.I., 1999).

В зависимости от степени поглощения каротиноиды разделяются на две группы: каротины и ксантофиллы. Все незамещенные каротиноиды -каротины. Они не содержат атомов кислорода, являются чистыми углеводородами и обычно имеют оранжевый цвет. Наиболее известный представитель этой группы |3-каротин. Каротиноиды, окрашенные в цвета от желтого до красного характеризуются наличием кислородосодержащих функциональных групп и называются ксантофиллами. При помощи многочисленных двойных связей, обычно циклического окончания молекул и наличия ассиметричных атомов углерода каротиноиды имеют разнообразные конфигурации и стерео-изомеры с различными химическими и физическими свойствами. Большинство каротиноидов имеют цис- и транс- геометрические изомеры. Атом углеи рода с 4 различными заместителями обусловливает возможность оп тических R- или S-изомеров. Эти различия между молекулами одной и той же формулы оказывают заметное влияние на физические свойства и на эффективность каротиноидов (Никитюк, 1974).

Всем каротиноидам характерно такое свойство как изомеризация. В природе встречаются различные изомеры тех или иных каротиноидов, а также они под воздействием различных факторов и условий способны переходить из одной формы в другую. На протяжении долгого времени это препятствовало определению и становлению химической структуры многих каротиноидов, что вызывало споры и сомнения у многочисленных исследователей. Так каротиноид ликопин имеет структурные изомеры поли-цис-ликопины А, В, С, или каротин имеет а-, р- и у-изомер. Имея одинаковую эмпирическую формулу С4оН56, они отличаются один от другого рядом свойств - температурой плавления, способностью адсорбироваться на окисях металлов, спектральными характеристиками, а также способами идентификации и получения. Структурной причиной, обусловливающей эти изменения, является различное расположение двойных связей на одном из концов молекулы (Hengartner U. et all., 1992; Ronnekleiv M., Liaaen-Jensen S., 1992; Englert G. et all., 1993; Strand A., Liaaen-Jensen S., 1998).

В свою очередь природные структурные изомеры каротина, под влиянием естественных или специально созданных условий, способны изомсри-зоваться. При этом может быть получено большое количество, главным образом, стериоизомеров. На протяжении долгого времени принято было считать эти стериоизомеры каротина продуктами исключительно искусственного происхождения. Однако современные данные ряда исследователей свидетельствуют о наличии таких стериоизомеров в некоторых растениях (Бриттон Г., 1986; Hager A. et all, 1980; Goodwin T.W., 1984). Таким образом, разделение изомеров каротина на природные и искусственные становится уже до некоторой степени условным.

Изомеры каротина, так же как и каротиноиды, принадлежат к полиено-вым естественным красящим веществам. Их молекулы построены по аналогичному с каротином структурному принципу - циклы или псевдоциклы соединены алифатической группировкой из изопреновых остатков (Кретовнч В.Л., 1980).

Также следует отметить, что некоторые растительные продукты накапливают в себе, наряду с каротином, преимущественные количества какого-либо или нескольких каротиноидов (например, ликопин в томатах, крипток-сантин в желтой кукурузе и др.). Количество различных каротиноидов, образующихся в органах растений, может быть чрезвычайно разнообразным и насчитывает иногда несколько десятков отдельных представителей (Никитюк В.Г., 1999).

К характерным химическим свойствам общим для всех каротиноидов является не растворимость в воде (поскольку каротиноиды имеют неполярную природу, они не содержаться в клетке в растворимом состоянии, а обычно присутствуют в хроматофорах). Но возможно исключение, когда растворимость каротиноидов в воде в одних случаях обусловлена их эстерификаци-ей, т.е. разделением молекулы на изопреновые остатки путем разрыва двойных связей, а в других - их соединением с белкками (Кретович В.Л., 1966; Davies D.D., Giovanelli J., Ар Rees Т., 1964;).

Каротиноиды хорошо растворяются в растительных маслах и органических растворителях - сероуглероде, хлороформе, бензоле, петролейном эфире, четыреххлористом водороде, при этом степень их растворимости различна. Растворы каротиноидов в органических растворителях при спектро-фотометрических исследованиях дают характерные полосы поглощения, в основном в видимой области спектра, а стереоизомеры показывают их также и в ультрафиолетовой области, что является наиболее точным показателем, используемым при их идентификации (Михайловина А.А., Савинов Б.Г. 1949; Карнаухов В.Н. 1973; Bartlett L., et al., 1969; Goodwin T.W., 1984; Brit-ton G., Liaaen-Jensen S., Pfander H., 1995;).

Характерной особенностью каротнноидов является способность избирательно абсорбироваться на минеральных и некоторых органических абсорбентах, что позволяет разделять их при помощи методов хроматографирова-ния (Никитюк В.Г., 1974).

Каротиноиды подвержены окислению, легко разрушаются при длительной сушке, хранении кормов, окисление ускоряется под действием свега, тепла и металлов (Dembinski Z., Bronicki М., 1994; Edge R., Land E.J., McGarvey D.J. et al., 1996; Kucukbay H. et al., 1997; Riso P., Porrini M., 1997; Omenn G.S., 1998; Woutersen R.A., Wolterbeek A.P., Appel M.J. et all., 1999; Abushita A.A., Daood H.G., Biacs P.A., 2000). Входя в состав различных природных комплексов (например, протеиновых), они проявляют наибольшую стабильность (Емелина Н.Т., 1970; Muto Y. et al., 1972; Вальдман А.Ф., 1977; Goodman D.S., 1984; Филипович Э.Г., 1985; Карнаухов В.Н., 1986; Krinsky N.I. et al., 1994; Erdman J.W., Bierer T.L., Gugger E.T.,1994; Faure H., Fayol V., Galabert C. et al., 1999).

Разнообразие каротиноидов и распространение в природе обуславливается как способностью организмов к их биосинтезу, так и способностью их абсорбировать и метаболизировать. Каротиноидные композиции у различных видов живых организмов не только отличаются по количественному содержанию, но и различны по качественному составу (Карнаухов В.Н., 1969, 1970, 1971).

В природе каротиноиды могут находиться в различных состояниях. В свободном виде они чаще встречаются в пластидах растений (Сапожников, 1957, 1964; Goodwin T.W., 1952), мышечной ткани рыб (Горбунов, 1975; Ми-кулин А.Е., 1998; Liaaen - Jensen, 1978), яйцах птиц (Пустовалова, 1999). В виде эфиров жирных кислот - в хроматофорах и эпидермальных структурах растений, в форме каротин-протеинов - в эпидермальных тканях животных и т.д. (Карнаухов В.Н., 1973, 1976; Goodwin T.W., 1980, 1984; Liaaen - Jensen, 1978).

В растительных тканях каротиноиды локализуются в пластидах и их фундаментальное значение связанно с процессом фотосинтеза. Каротиноиды поглощают свет в ином диапазоне, нежели хлорофиллы, поэтому они функционируют как световые рецепторы, дополняющие хлорофиллы и как свето-поглатители играют ключевую роль в энергетическом метаболизме высших растений (Сапожников Д.И., Крассовская Т.А., Маевская А.Н., 1957). Поглощая свет, они трансформируют захваченную световую энергию в реакционные центры пигментов, где она преобразуется в электрическую, а затем и в химическую в форме АТФ (Сапожников, 1972; Sapoznikov, 1973; Krinsky N.I., 1971).

Относительное содержание каротиноидов и хлорофиллов у различных видов растений заметно варьирует. Именно от их соотношения зависит окраска фотосинтезирующих клеток - от сине-зеленой у хвойной ели до красной и бурой у некоторых декоративных растений. Антенные комплексы растений способны поглощать свет в пределах всего видимого спектра, но особенно интенсивно они поглощают свет с длинами волн от 400 до 500 и от 600 до 700 нм (Щербаков, 1999).

Поскольку каротиноиды являются природными веществами, их биосинтез осуществляется растениями и некоторыми микроорганизмами. Но так как животные и человек не способны их синтезировать de novo, а при этом они выполняют в организме целый ряд жизненно-важных функций, то каротиноиды должны регулярно поступать с пищей (Никитюк, 1974; Карнаухов В.Н.,1988; Дадали В.А., 2001; Delgado-Vergas F. et al., 2000).

На протяжении долгого времени считалось, что их основная функция в животном организме заключается в биоконверсии в витамин А. Каротиноиды, способные к превращению в организме в витамин А, называются провитаминами. Из всего разнообразия каротиноидов, распространенных в природе, провитаминными свойствами обладают каротин, криптоксантин, мутато-хром, миксоксантин, афонин и др. (Островский Ю.М., 1979; Krinsky N.I. et al., 1993; Palan P.R. et al., 1996; Marchioli R., 1999; Margalith P.Z., 1999; Huang C. et al., 2000).

Наиболее хорошо изученным и широко распространенным карогинои-дом является (3-каротин - предшественник витамина А (Букин В.Н., 1940; Вальдман А.Ф., 1977; Foote C.F., Goodwin T.W., 1952; Moore, 1957; Denny R.W., 1968; Pitt G.A., 1971). Провитаминные свойства p-каротина и его окислительное преобразование в витамин А являются общими для всех животных. Под воздействием фермента каротиндиоксигеназы в слизистой оболоч-кке кишечника p-каротин превращается в витамин А. Молекула (3-каротина, которая теоретически должна образовывать две молекулы витамина А, уменьшается с одного конца цепи в результате последовательного окисления до ретиналя (С20-соединения) и образует одну молекулу витамина А (Вольдман А.Ф., 1977; Филипович Э.Г., 1985; Холодова Ю.Д., Чаяло П.П., 1990; Kolb Е., 1995; Erdman J.W., Bierer T.L., Gugger Е.Т.,1994; Faure Н. et all., 1999;). Другие каротины также могут проявлять А-витаминную акгивнос1ь, но в меньшей степени.

Конверсия (трансформация) каротиноидов в ретинол пропорциональна концентрации витамина А в организме и зависит от различных факторов и видовых особенностей (Minakovski К., 1993; Marshall J.R. et al., 1997; Mayne S.T. et al., 1998; Preziosi P. et al., 1998; Weiss E., Buchholz I., Schweigert F.J., 1998). Так, у крупного рогатого скота в витамин А трансформируется только часть бета-каротина, поэтому у этих животных его обнаруживают в крови, печени и молоке (Пивняк И.Г. и др, 1985; F.G. Schweigert, 1986; Shone F. et al., 1991; Jovanovic M.J. et al., 1992;). У коз, овец и свиней каротин всасываег-ся в пищеварительном тракте только в трансформированном в витамин А виде и в крови каротин не обнаруживают. Снижение уровня витамина А и каротина в сыворотке крови сельскохозяйственных животных свидетельствует о низкой доступности каротина или отсутствии его в корме, что приводит к снижению сохранности и продуктивности, ухудшению качества продукции и воспроизводительной функции животных (Врзгула Л., Ковач Г., 1986; Лизунков А.Ф. 1988; Пивняк И.Г. и др. 1989; Петенко А.И.,1992; Обербайль К., 1996; Антипов В.А. и др. 2001).

Как источник витамина А каротин, принимает участие в обмене веществ, протекающем в органах и тканях человека и животных (Букин В.Н., 1940; Филипович Э.Г., 1985; Врзгула Л., Ковач Г., 1986; Кондрахин И.П., 1991; Букин Ю.В., 1995; Bate C.J., 1995; Faure Н., et al., 1999).

Усвоение каротиноидов, как и других липидов, происходит в дуоденальной области тонкого кишечника (Harper M.J.et al., 1980). Под влиянием желудочно-кишечной среды (например, кислотности желудочного сока), наличия специфических рецепторов протеинов, каротиноиды могут разрушаться окислителями или энзимами (Розенберг Д.А., 1972; Lin Y.et al., 1998) пли метаболизировать, как, например (3-каротин в витамин А в слизистой (Еме-лина Н.Т., 1970; Врзгула Л., Ковач Г., 1986; Davies В.Н., 1985; Erdman J.W., Bierer T.L., Gugger E.T.,1994; Krinsky N.I et al., 1994; Weiss E., Buchholz I., Schweigert F .J., 1998;).

Также каротиноиды в неизменном виде могут быть перенесены в кровь и депонированы в жире, большинстве органов и тканей, включая кожу, в клетках слизистой ротовой полости, а также в красных и белых кровяных клетках и макрофагах минуя процесс трансформации в витамин A (Bjornson L.K. et al., 1956; Krinsky N.I., Cornwell D.G., Oncley J.I., 1958; Hollander D., Dadufalza V., 1990; Johnson E.J. et al., 1993; Van Vliet Т., Schreurs W.H., van den Berg H., 1995; Paetau I. et al., 1999;).

Каротинемия - видовой признак крупного рогатого скота. Уровень каротина в сыворотке крови крупного рогатого скота резко колеблется в зависимости от условий кормления и содержания животных (Антипов В.А., Ура-заев Д.Н., Кузьминова Е.В., 2001; Антипов В.А., Турченко А.Н., Кузьминова Е.В., Уразаев Д.Н., 2003). В летний период при пастбищном содержании животных уровень каротина в сыворотке крови высок 0,9 -2,0 мг% (Kolb Е. et al., 1991; Tsubono Y., Tsugane S., Gey K.F., 1999). В зимнее время при переводе животных на стойловое содержание количество каротина в сыворспсс крови уменьшается до 0,4 - 1,0 мг% (Шарабрин И.Г., 1965; Волгарев М.Н., Спиричев В.Б., 1984; Витаминное питание сельскохозяйственных животных: Рекомендации, 1989; Гарбузов А.В. и др. 1991; Петенко А.И., 1992; Самсонов М.А. и др., 1997; Антипов В.А., Турченко А.Н., Кузьминова Е.В. 2005; Evers A.M. et al. 1997; Gowda В. et al., 1997). В середине прошлого столетия на протяжении 30 лет проводились плановые обязательные определения каротина в сыворотке крови продуктивных коров. Гипокаротинемия выявлялась очень часто. Ее расценивали как косвенный показатель дефицита витамина А в организме, хотя и понимали, что прямого параллелилизма между уровнем каротина и ретинола в крови может и не быть (Kemmann Е., Pasquale S.A., Skaf R., 1983; OlmedillaB., Granado F., Blanco I., 1995).

В настоящее же время проведено множество исследований доказывающих, что каротиноиды обладают и другими ценными специфическими свойствами, не связанными с А-витаминноп активностью. В живых организмах они выступают в роли фотопротекторов и антиоксидантов, на клеточном и молекулярном уровне предотвращают трансформации, индуцированные окислителями, генотоксическими веществами, рентгеновским и УФ-излучением (Сергеев А.В. и др., 1992; Обухова JI.K. и др.,1994; Капитанов А.Б., 1996; Шашкина М.Я., Шашкин П.Н., Сергеев А.В., 1999; Дадали В.А., 2001). Поддерживают стабильность генома и резистентность организма к мутагенезу и канцерогенезу. Значительно увеличивают иммунокомпетентность и контактное взаимодействие клеток, принимают активное участие в регуляции экспрессии гена коннексина-43 (Бережная Н.М.1999; Zhang L.X. el al., 1992; Faure H. et all, 1999). Способствуют нормированному расходованию витаминов и ферментов, проявляют антистрессорные свойства. Влияют на иммунную систему и стабильность генетического материала. (Меерсоп Ф.З., 1984; Сергеев А.В. и др. 1992; 1995, Lee В.М. et al., 1998).

Выявлено, что каротиноиды влияют на эндокринную систему, особенно это касается полового развития и созревания, оплодотворения и прохождения репродуктивных процессов. Они могут косвенно поддерживать водный баланс организма, способствовать работе обонятельных рецепторов и хемо-рецепторов. Также каротиноиды (ксантофилы) используются как запас кислорода в нейрональной дыхательной цепочке и поэтому необходимы в кислородных клетках и тканях.

В организме каротиноиды могут проявлять себя как иммуностимуляторы. Например, рыбы с высоким содержанием каротиноидов более устойчивы к инфекционным и грибковым заболеваниям; цыплята - устойчивы к энцефалопатии и т. д. Также они увеличивают цитостатическую активность клеток-киллеров, замедляют рост опухоли и ускоряют ранозаживление.

Считается, что каротиноиды используются как запас кислорода в нейрональной дыхательной цепочке. Связываясь с белком, они образуют комплекс, где играют роль аллостерических эффекторов, изменяя агрегационное состояние протеинов, тем самым, стабилизируя их протеиновую и энзимовую активность.

Важной функцией каротиноидов, проявляющейся внешне, являемся их способность обеспечивать яркую окраску организмов, которая может выполнять сигнальную функцию или нести информацию. Так цветооповещающие реакции могут действовать как приманка, предупреждение или защита, выражение настроения. Помимо этого, они могут служить сигналом для определенного комплексного внутривидового поведения (Никитюк В.Г., 1974).

Мембраностабилизирующая функция каротиноидов является одной из важнейших в организме животных и человека. Как показано на экспериментальных моделях фосфолипидных липосом, ориентация молекулы внутри биослоя мембраны зависит от структуры самих каротиноидов. Они пронизывают мембрану своей протяженной полиеновой цепью, тем самым, влияя на толщину и прочность мембраны как барьера. Располагаясь во внутренней гидрофобной части мембраны, бета-каротин и ликопин оказывают активное влияние на ее физические свойства, а именно на проницаемость и ригидность, поддерживая ее полноценность (Bisby R.H., ParkerA.W., 1995; Gabriel-ska J., Gruszecki W.I., 1996; Strand A., Shivaji S., Liaaen-Jensen S. 1997;

Gruszecki W.I., 1999; Gruszecki W.I. et all, 1999; Sujak A, et all 1999; Rapp L.M., Maple S.S., Choi J.H., 2000; Socaciu C., Jessel R., Diehl H.A., 2000; Yemelyanov A.Y., KatzN.B., Bernstein P.S., 2001; Schroeder F., et all 2001).

Некоторые исследователи приходят к выводу, что каротиноиды играют большую роль в транспорте кальция через мембраны (Bondi A., Sklan D., 1984).

Каротиноиды присутствуют в эпидермисе и роговом слое кожи человека (считается, что, реализуя свои антиоксидантные свойства, они защищают кожу от воздействия ультрафиолетового излучения) (Le Francois P., 1989; Mi-cozzi M.S. et all, 1988; Prince MR, Frisoli JK., 1993).

При помощи сопряженных двойных связей, каротиноиды могут связывать синглетный кислород и ингибировать образование свободных радикалов, предупреждая их негативное действие на организм. Антиоксидантные свойства каротиноидов свидетельствуют об их возможном участии во многих внутриклеточных процессах, в основе которых лежит их высокая неспецифическая реакционная способность за счет тропности к соединениям с неспа-ренным электронам - свободным радикалам (Капитанов А.Б., 1996; Нестерова О.А.,1997; Клебанов Г.И., Капитанов А.Б., Теселкин Ю.О. и др., 1998; Клебанов Г.И., Олферьев A.M., Ильина М.В. и др., 2001; Ames B.N., Shi-genaga М.К., Hagen T.M.,1993; Krinsky N.I.,1989).

Механизм антиоксидантного действия связан с образованием малоактивных углерод-центрированных резонансных радикалов в изопреноидной цепи при взаимодействии с активными радикалами образующихся органических гидропероксидов (Лапкпн В.З. и др., 1999; Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б., 2001; Burton G.W., Ingold K.U., 1984). Так биологически активные молекулы бета-каротина нейтрализуют разнообразные свободные радикалы, присоединяя их в местах разрыва двойных связей. В конечном итоге молекулы бета-каротина распадаются на неактивные фрагменты и выводятся из организма (Букин Ю.В., 1995; Поддубный FT.TT., Сампиев A.M.,

2000; Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б., 2001; Block G., Langseth L., 1997).

На протяжении последних 10-20 лет изучению антиоксидантых свойств каротиноидов посвящено значительное количество исследований (Гуревич ГЛ., 1982; Холодова Ю.Д., Чаяло П.П., 1990; Чиркин А.А., Казарян Р.В., Поддубный Н.П., 1996; Кулагина Т.П. и др. 1998; Ланкин В.З. и др., 1999; Кузьминова Е.В., Антипов В.А., 2007; Dingfelber J.K., 1981; Burton G.W., In-gold K.U., 1984; Tolonen M. et all., 1988; Bertram J.S., 1995; Lane J.R., Webb L.W., Acuff R.V., 1997; Lee B.M., et al.,1998; Adams A.K., et al., 1999; Lee I.M., et al., 1999).

Так, бета-каротин как антиоксидант с успехом был применен при лечении больных прогрессирующей стенокардией воздействием гелий-неонового лазера (Меерсон Ф.З., 1984; Киселева Н.Г., Метельская В.А., Перова Н.В., 1998; Кривощеков С.Г., 1998; Белоусов С.С., Зиньковская Т.М., Голубев А.Д., 1999;). При параллельном применении с другими антиоксидантами бета-каротин понижает кровяное давление (Polifka J.E. et all, 1996). В основе антиканцерогенного действия бета-каротина лежит способность гасить свободные радикалы и нейтрализовать агрессивные формы кислорода и, тем самым, защищать организм от многих канцерогенных воздействий. (Пивнятс И.Г. и др., 1989; Драудин-Крыленко В.А., 1992; Белоголовская Е.Г. и др., 2000; Коло-мийцева И.К. и др., 2000; Marthews-Koth М.М., 1981; Marschang F., 1983; Cerutti P.A.,1985; Charleux J.L., 1996; Martin K.R., et al., 1996; Sharma P.K., Hall D.O., 1996; Kramer T.R., Burri В .J., 1997; Mortensen A. et al., 1997; Poulsen H.E. et al., 1998; Swinburn B.A. et al, 1999; Gerber M. et al, 2000; Zhang Z.W. et al., 2000).

Существуют данные, подтверждающие, что при добавлении бета-каротина и ликопина в рацион людей снижается риск сердечно-сосудистых заболеваний (Поддубный Н.П., Иванова Н.В., 1995; Тихадзе А.К., Т.Г. Коновалова, В.З. Ланкин 1999; Колесников В.В. и др., 2000; Ильина М.В. 2002; Олферьев A.M., и др., 2003; Leidl W., Porzig R., Stolla R., 1987; Block G.,

Langseth L, 1997; Green A. et al., 1999). Также отмечено положительное действие каротиноидов при атеросклерозе, нарушение функции легких, поражениях кожи и других заболеваниях (Капитанов А.Б., Пименов A.M., Нестерова О.А., Сергиенко В.И., 1993; Иванова Н.В., 1995; Меркешкин Б.А., Маховская Т.Г., Черных Е.Г., 1999; Ильина М.В. 2002; Олферьев A.M., и др., 2003; Рапе L. et al., 1996; Rwangabwoba J.M., et al., 1998; Fuchs J., 1998; Watson J.P. et al., 1999).

Заключение диссертации по теме «Звероводство и охотоведение», Соловьев, Валерий Сергеевич

7. ВЫВОДЫ

1. Ликолин и ликоцинол являются новыми препаратами ликопина (полученного из биомассы культуры гриба Blakeslea trispora и из растительного сырья). Содержание в них ликопина составляет от 0,2 до 0,3%. Контроль качественных показателей препаратов осуществляется в соответствии с утвержденными техническими условиями по органолептическим и физико-химическим показателям, характеризующим их внешний вид, запах и вкус, массовую долю действующих веществ, стерильность п безвредность.

2. Ликолин и ликоцинол не обладают острой токсичностью, не вызывая выраженного токсикоза в дозировках до 24 г/кг массы тела и по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относятся к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества). Длительное применение препаратов в дозах, равной терапевтической и превышающих ее в 3 и 5 раз, не оказывает негативного влияния состояние животных и другие показатели их клинического статуса, не проявляет вредного местного действия, не влияет отрицательно на морфо-биохимические показатели крови, не нарушает функции и структуру жизненно важных систем, органов и тканей, не изменяет вкусовых и других качеств мяса. При нанесении на кожу и слизистые оболочки препараты не действует раздражающе, а также они не имеют аллергизирующих и эм-бриотоксических свойств.

3. Фармакодинамика ликопиновых препаратов характеризуется стимуляцией основных видов обмена веществ, в том числе, белкового - за счет повышения уровня общего белка на 17,1-30% и оптимизации его фракционного состава, углеводного (увеличение концентрации глюкозы до 25,4%), витаминного (повышение уровней каротиноидов, витаминов А и Е), минерального (при возрастании концентрации цинка на - 8,2-16,4%), а также стимуляции эритро- и гемопоэза за счет увеличения гемоглобина на15,7% и эритроцитов на 27,7%.

Препараты способствуют увеличению антиоксидантного потенциала организма за счет увеличения активности ферментов (глутатионпероксидазы на 4,6%; глутатионредуктазы на 4%; супероксиддисмутазы на 4,5-6,6% и каталазы на 2,8-4,8%) при достоверном снижении продуктов липопероксида-ции (ДК на 18,5% и МДА на 19,8%).

4. Применение ликолина и ликоцинола оказывает влияние на продуктивность животных и птицы, позволяя достигнуть преимущество в приросте массы тела телят на 6,1-9,5%), поросят на 18,9%, цыплят на 5,9-9,9%, при этом увеличивается их сохранность до 91-99%.

5. Введение ликопиновых препаратов в состав комбикорма для кур улучшает качество мясной и яичной продукции, а также обеспечивает ее интенсивную пигментацию и витаминизацию. Использование ликопина увеличивает интенсивность яйцекладки на 4,8-7,4%, выводимость цыплят на 6,1%, пигментацию желтка на 2 балла, также в желтке возрастают концентрации каротиноидов (на 45,2%) и витамина А (на 31,1%).

6. Ликолин и ликоцинол эффективны с целью лечения и профилактики гипотрофии свиней. Применение ликопиновой композиции свиноматкам снижает количество поросят, родившихся с признаками гипотрофии на 50%, при этом среднесуточный прирост ртнтенсифицируется на 48,7%, При использовании ликоцинола при постнатальной гипотрофии свиней улучшение состояния здоровья опытных животных наступает уже на 7-10 дни от начала лечения, возрастает прирост массы тела на 35,3% и сохранность на 16,622,2%. В морфо-биохимическом профиле крови поросят-гипотрофиков увеличивается содержание эритроцитов на 42%, гемоглобина на 8,7%, глюкозы на 70,4%, общего белка на 30% и у-глобулиновой фракции на 58,7%.

7. Введение препаратов ликопина с профилактической целью позволяет снизить случаи задержания последа - на 15-25%, эндометрита - на 20-25%, гипофункции яичников - на 15-25%, период бесплодия сокращается -на 15-20 дней.

Применение ликоцинола увеличивает молочную продуктивность коров на 7,3%, а сохранность потомства - на 6,7%.

8. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании полученных результатов разработаны показания к применению и схемы использования ликолина и ликоцинола в животноводстве.

Для практической ветеринарии рекомендуются препараты ликопина, предназначенные для нормализации обменных процессов, в качестве росто-стимулирующих средств, для лечения гипотрофии свиней и профилактики послеродовой патологии крупного рогатого скота в соответствии с инструкцией по применению.

Результаты исследований нашли отражение в документах, утвержденных: ликоцинол - Технические условия № 9283-005-00670232-09; Инструкция по применению препарата в ветеринарии; ликолин - Технические условия № 9283-029-05766117-01;

Промышленное производство препаратов налажено в ООО «КНИВИ-ФАРМ» (г. Краснодар).

137

6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Долгое время в исследованиях биологической функции каротиноидов доминировала провитаминная теория, согласно которой основная роль каротиноидов в организме человека заключается в биоконверсии витамина А. В последние годы получены новые экспериментальные данные, что эти вещества обладают антиоксидантными, адаптогенными, антиканцерогенными, радиопротекторными, антимутагенными и иммуномодулирующими свойствами, не связанными с их провитаминной активностью. И если самостоятельная биологическая роль бета-каротина в организме установлена и не вызывает сомнений, сведения же о биологической активности ликопина (каротиноида, не способного превращаться в ретинол) практически отсутствуют.

Ликопин - вещество из группы каротиноидов. Ликопин придает плодам томата красную окраску. В ходе тщательного и всестороннего исследования этого вещества выяснилось, что среди многочисленной группы каротиноидов именно ликопин обладает наиболее высокой антиокислительной активностью, он почти в три раза более активен, чем бета-каротин и при этом обладает отсутствием токсического действия, даже в высоких дозах. Концентррфуясь в клеточных мембранах, ликопин защищает их от повреждающего действия активных форм кислорода и окиси азота (Miki S., et all, 1988; Faure H. et all, 1999; Matos H. et al., 2000; Stahl W. et all,, 2000; Marchioli R. et all, 2001; Heber D., Lu Q., 2002; Mayne S., 2003).

В лаборатории фармакологии Краснодарского НИВИ были разработаны новые отечественные каротиноидные препараты на основе ликопина (ли-колин и ликоцинол). Основной целью настоящего исследования явилась разработка, изучение фармако-токсикологических свойств и внедрение в практику ветеринарии этих для лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.

Препараты ликопина, взятые нами для исследований, представляют собой природные соединения, полученные путем микробиологического синтеза и экстрагированием отходов томатного производства.

Перечень препаратов природного ликопина, предназначенных для изучения, были подобраны с учетом основных направлений их получения и способов применения в зооветеринарной науке и практике.

В основу технологии получения ликопина микробиологическим синтезом положена культивация биомассы гриба Blakeslea trispora (это гетеротал-личный гриб, относящийся к порядку Mucorales) с последующей экстракцией ликопина растительным маслом.

Ликопин из растительного сырья выделяли по методике С.Е. Кудриц-кой из томатной пасты путем экстрагирования. Далее проводили идентификацию каротиноидов и определение содержания их отдельных форм в растительном сырье.

На основе полученных субстанций ликопина были разработаны новые препараты.

Ликолин представляет собой раствор ликопина (полученного из биомассы культуры гриба Blakeslea trispora) в рафинированных и дезодорированных маслах (кукурузном, соевом, подсолнечном) с массовой долей ликопина от 0,2 до 0,3%.

Ликоцинол представляет собой раствор ликопина (полученного из растительного сырья) в рафинированных и дезодорированных маслах (кукурузном, соевом, подсолнечном) с массовой долей ликопина от 0,2 до 0,3%.

Для этих препаратов были определены их основные фармако-токсикологические параметры, изучена лечебная и профилактическая эффективность на крупном рогатом скоте, свиньях и птице, разрабо 1аны показания к применению и нормативно-техническая документация. Научная новизна исследований подтверждается положительным решением на выдачу патента РФ.

В Технических условиях каждого препарата регламентированы методы контроля содержания действующих веществ, безвредности, органолепти-ческих показателей. Разработанные нами Технические условия способствуют повышению стандартности производства указанных препаратов и повышают их качество.

Проведенное нами согласно общепринятым стандартам изучение токсикологических свойств новых ликопинсодержащих препаратов на указанных выше животных не позволило нам установить их среднесмертельную дозу и дозу, вызывающую появление признаков токсичности. Препараты ликопина в дозах, превышающих терапевтические в несколько раз, при их введении в желудок лабораторным животным не вызывали клинической картины заболевания и токсикоза.

При изучении острой токсичности препаратов состояние всех лабораторных животных (крысы и цыплята) оставалось удовлетворительным. Животные были подвижны, рефлексы у них были сохранены, аппетит не нарушен.

Отсутствие токсического влияния препарата при однократном внутри-желудочном введении на организм опытных животных подтверждалось восстановлением их подвижности, появлением аппетита (через 5,5 часов во всех группах), отсутствием нарушений координации движений, сохранностью рефлексов, а также физиологическими параметрами сердечного и дыхательного ритмов. В период проведения опыта ректальная температура находилась в пределах физиологической нормы без значительных колебаний. Различий в поведении животные опытной и контрольной групп за период наблюдений отмечено не было.

За время проведения опыта гибели животных не зарегистрировано, клинических признаков интоксикации и нарушения пищеварения не наблюдалось. Общее состояние, поведение, рефлексы и аппетит сохранились неизменными.

Таким образом, препараты, содержащие ликопин, не обладают токсичностью при внутрижелудочном применении. В максимально допустимых дозах они не вызывали гибели и острой интоксикации у подопытных животных и по степени токсичности относятся к IV классу опасности — «малоопасные вещества» (ГОСТ 12.1.007-76).

При изучении хронической токсичности препаратов ликопина установлено, что их введение хорошо переносится испытуемыми животными. Так, за время проведения опыта явлений интоксикации не наблюдали, гибели животных не регистрировали.

Животные сохраняли двигательную активность, отсутствовали признаки повышенной возбудимости, физиологические параметры оставались в пределах нормы. Крысы спокойно перемещались по клетке, сон не нарушался. Как контрольные, так и опытные животные адекватно реагировали на звуковые и световые раздражители. Аппетит оставался в норме. Состояние кожного и шерстного покровов, а также видимые слизистые оболочки на протяжении всего опыта оставались неизменны, за исключением групп, получавших максимальную дозировку препаратов, где слизистые имели более насыщенный желтый цвет.

При этом установлено, что интенсивность роста животных в опытных группах к концу эксперимента превосходила контроль под влиянием ликолина на 1,5 - 7,2%, а ликоцинола на 3,3 - 8,5%, что свидетельствует о ростости-мулирующем действии препаратов на организм.

При оценке остояния центральной нервной системы методом "открытого поля" по всем учитываемым показателям статистически значимых различий между контрольными и опытными животными не зарегистрировано.

Таким образом, ликолин и ликоцинол не оказывают не возбуждающего, не угнетающего действия на центральную нервную систему.

При анализе морфо-биохимических показателей сыворотки крови крыс опытных групп в хроническом токсическом эксперименте наблюдалась тенденция к увеличению гемоглобина (на 19,2% максимально) и общего белка в среднем на 17% в сравнении с контролем. Система кроветворения и основные метаболические процессы в организме подопытных животных находились в пределах физиологической нормы и практически не отличались от контроля. Таким образом, длительное применение препаратов ликопина не влияет отрицательно на состояние белкового, углеводного, липидиого обменов и трансаминазную активность печени.

Влияние ликоцинола на детоксицирующую функцию печени изучали на модели гексеналового сна. Средняя продолжительность гексеналового сна контрольных и опытных крыс различалась незначительно, и это различие не имело статистической значимости.

С целью определения влияния ликолина и ликоцинола на выделительную функцию почек ежемесячно проводили контрольный учет диуреза подопытных крыс и лабораторный анализ мочи. В результате проведенных исследований не обнаружено каких-либо значимых изменений ни в контрольной, ни в опытных группах.

Анализируя данные хронического токсикологического исследования на телятах, в котором определяли влияние препаратов ликопина на функцию почек и пищеварительного тракта, получены данные, указывающие на то, что физико-химические показатели мочи и фекалий на протяжении всего опыта находились в пределах физиологических норм.

При патоморфологическом и гистологическом исследовании органов и тканей подопытных животных отклонений не обнаружено

Испытуемые препараты ликопина, нанесенные на поверхность кожи животных, не вызывали местного раздражающего и аллергизирующего действия и общей реакции организма. В течение эксперимента по изучению местного действия ликолина и ликоцинола не обусловили каких-либо заметных изменений на местах нанесения у подопытных животных. Таким образом, новые препараты можно охарактеризовать как не проявляющие местпо-раздражающего и аллергизирующего действия.

При анализе проведенных нами эмбриотоксическпх исследований установлено, что новые препараты, содержащие ликопин, не обладают эмбрио-токсическим действием.

В связи с этим применение ликопинсодержащих препаратов исключает опасность возникновения осложнений аллергизирующего, местно-раздражающего, эмбриотоксического характера, что открывает возможности назначения препаратов перорально без специальных режимов в рацион племенных животных.

На основании полученных нами результатов исследований можно сделать вывод о безвредности изучаемых препаратов и о возможности их использования в животноводстве и ветеринарии для фармакостимуляции роста и развития, для профилактики и лечения заболеваний животных.

При оценке фармакодинамических свойств препаратов ликопина установлено разностороннее и многоуровневое воздействие на организм.

Анализируя полученные данные по определению влияния препаратов ликопина на обмен веществ птицы следует отметить, что применение ликолина и ликоцинола способствовало увеличению показателей глюкозы и общего белка. При оценке уровня антител против болезни Ньюкасла (НБ) и инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ) установлено, что у птицы получавших каротиноидные препараты формирование иммунитета против данных инфекций происходит более активно.

При исследовании интенсивности окраски яиц установлено, что желтки яиц полученных от птицы получавшей ликоцинол имели более интенсивную окраску (6 баллов), тогда как в контроле только на 4 балла. Также применение ликоцинола стимулировало накоплению витаминов в желтке (каротиноидов на 45,2%, ретинола на 31,1 % и токоферола на 22,4% по отношению к контролю), что сказалось на результатах инкубации (выводимость яиц по отношению к контролю выше на 6,1 %).

Таким образом, проведенные нами исследования указывают на то, что продуктивные качества птицы и качественные показатели яиц и их выводимость напрямую зависит от концентрации каротиноидов в организме кур-несушек.

В целом ряде исследований было доказано, что отложение и накопление каротиноидов в яйцах представляет собой характерное зародышевое приспособление птиц или ценогенз. Каротиноиды оказывают позитивное влияние на развитие и биохимические показатели временных эмбриональных органов - амниона и аллантоиса, на углеводный и жировой обмены эмбриона, на потерю яиц в весе при инкубации и на конечные результаты инкубации.

При проведении опытов по определению влияния ликоцинола на обменные процессы организма телят черно-пестрой породы установлено, что препарат ликоцинол обладает выраженной фармакологической активностью, так как его введение оказало ростостимулирующее действие (разница по отношению к контрольной группе и составила 6,1, 9,5 и 8,6%).

При анализе биохимической картины отмечена тенденция к повышению уровня гемоглобина и эритроцитов. Концентрация общего белка достоверно возросла на 3,4-11,8%. При анализе протеинограммы следует отметить повышение у-глобулинов в пределах нормы. Увеличилась концентрация глюкозы по группам на 10,5%), 47%, 25,4% по отношению к контролю, что можно связать с оптимизацией углеводного обмена.

Повысился витаминный статус крови, так показатели каротина стали выше в два раза по отношению к контролю. Вместе с тем, витамин А преимущественно поднялся на 41,6% в группе получавшей дозировку ликоцинола 20мл.

Таким образом, добавление в рацион ликоцинола активизирует белковый и углеводный обмен, увеличивает витаминный статус крови, тем самым оказывает активное ростстимулирующее действие на развитие животных данного вида.

При изучении адаптогенного действия ликоцинола и ликолина на птице установлено, что введение ликопина оказывает потенцирующее действие на ферментативное звено антиокеидантной системы. Это связано с тем, что, усиливая неферментативную защиту, каротиноиды способствуют более экономному расходованию антиоксидантных ферментов в целом, так как наиболее выраженного влияния на какой-то определенный фермент нами не было установлено. Препараты увеличивают активность супероксиддисмутазы на 4,5 -6,6%, каталазы на 2,8 - 4,8%, глутатионпероксидазы, в среднем, на 4,6% и глутатионредуктазы на 4%. Повышая антиоксидантный статус организма, ликопин снижает уровень в организме продуктов перекисного окисления липидов, что нашло отражение в результатах опыта - под влиянием препаратов в крови снизились концентрации малонового диальдегида и оснований Шиффа.

Таким образом, исходя из полученных результатов, следует, что применение препаратов ликопина стабилизирует процессы ПОЛ в организме животных и птицы, активизирует ферментативное и неферментативное звенья системы антиокеидантной защиты, тем самым создает более благоприятные условия для процессов детоксикации, регенерации и репарации в организме.

При определении антитоксического действия препарата по концентрацию среднемолекулярных пептидов телят установлено, что при применении препарата ликопина происходит снижение концентрации среднемолекулярных пептидов (16,6-40% по отношению к контролю).

Следовательно, ликоцинол обладает выраженной антитоксической активностью на организм животных.

Таким образом, фармакодинамика препаратов ликопина характеризуется разносторонним фармакологическим действием, выражающимся в положительном влиянии на обмен веществ в организме, в частности, оптимизации белкового, углеводного, витаминного обменов, стимуляции гемопоэза, повышении неспецифической резистентности организма и поствакцинального антителогенеза, а также выраженным антитоксическим и антиоксидант-ным действием. Последнее особенно важно, так как управление врачебнобиологическими приемами, направленными на сохранение гомеостаза системы ПОЛ-АОЗ, перспективно при стремлении сохранить здоровье на фоне неблагоприятных условий внешней среды.

В экспериментах по изучению эффективности ликоцинола при антенатальной гипотрофии поросят выявлено положительное влияние на качество и количество полученного приплода, развитие поросят в подсосный период, и на прирост массы тела поросят. Так, по количеству мертворожденных поросят различия между группами были незначительными и недостоверными, а по количеству поросят, родившихся с признаками гипотрофии, разница составила 8% в опыте к 16,7% в контроле.

Антенатальные гипотрофики контрольной группы на протяжении всего опыта имели очень малую массу. Так, среднесуточный прирост этих поросят по отношению к опытным поросятам оказался ниже на 46 г (к гипотрофикам) и 158 г (к нормотрофикам) соответственно.

Следует отметить, что за время опыта в контрольной группе два поросенка пало, тогда как в опытной группе все животные выжили. Клинические наблюдения за поросятами опытной группы показали, что их активность повысилась, они лучше реагировали на окружающую среду, лучше сосали свиноматку.

При определяли воздействия ликоцинола на постнатальных гипотро- ' фиков выявлено, что препарат способствует нормализации обменных процессов, повышению прироста массы тела и улучшению здоровья опытных поросят. При этом было установлено, что поросята, получавшие с кормом ликоцинол, росли более интенсивно (среднесуточный прирост массы тела составил 178,5 г против 120,0 в контрольной группе, что на 48,7% выше, чем у животных, не получавших ликоцинол).

Вместе с тем, ликопин оказывает положительное влияние и на сохранность поросят - гипотрофиков. Так, за время опыта, из числа контрольных животных пало три поросенка, что составило 25% от общего количества животных в группе, а в опытной группе этот показатель был ниже на 16,6% и составил 8,4%. Это говорит о том, что назначение ликоцинола нормализует клиническое состояние организма поросят и обеспечивает сохранность животных.

Под влиянием ликоцинола происходит улучшение морфо-биохимического профиля крови. Так, количество эритроцитов и содержание гемоглобина к концу опытного периода у поросят второй группы возрастает, что, по-видимому, связано с уменьшением интоксикации организма поросят продуктами метаболизма и улучшением функции кроветворения.

Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что ликоцинол обладает выраженными профилактическим и терапевтическим эффектами при гипотрофии свиней.

В опытах по определению профилактической эффективности ликолина и ликоцинола при послеродовых заболеваниях коров установлен максимальный эффект при использовании дозы 40 мл на животное, что является оптимальной профилактической дозой.

Так, при применении ликолина задержание последа регистрировалось реже на 15-20,0%), мастит и гипофункция яичников на 10-20%.

Послеродовой эндометрит отмечался реже на 10-20%), что позволило у животных опытной группы сократить продолжительность бесплодия на 19,6; 25,3 и 24,9 дней в сравнении с коровами контрольной группы.

При применении ликоцинола задержание последа регистрировалось реже на 20-25%, а при дозировке 40 мл на животное отсутствовало вовсе. Мастит встречался реже на 15-25%) и на столько же меньше было коров с гипофункцией яичников.

При проведении опытов по определению профилактической эффективности ликоцинола при послеродовых заболеваниях у коров и повышению жизнеспособности телят установлено, что задержание последа в опытной группе зарегистрировано только у 1 коровы (20,0% случаев), в контрольной группе - у 5 (46,7%>). Использование добавки ликоцинола позитивно отразилось на послеродовом состоянии коров. В опытной группе эндометрит выявлен у 4 коров (26,6%), при этом в контрольной группе - у 9 (60 %).

При применении ликоцинола увеличилось молочная продуктивность коров на 7,3%о по отношению к контролю, а также наблюдалось меньшее количество послеродовых осложнений и отход телят.

Таким образом, на основании результатов проведенных исследований можно сделать вывод о том, что применение ликоцинола коровам в период сухостоя и после родов обеспечивает нормализацию их воспроизводительной функции и получение жизнеспособного приплода.

В сравнительном опыте по предупреждению послеродовых заболеваний у коров было определено влияние ликоцинола, каролина и витамина А на организм животных.

Установлено, что коровы получавшие препараты реже болели послеродовыми заболеваниями и переносили их легче, чем животные контрольной группы. Так в контрольной группе были выбракованы 2 коровы одна с выпадением матки вторая с послеродовым парезом. Задержание последа у животных контрольной группы было на 15%) больше, чем в группах, где давали Каролин и лрткоцинол, и на 10% при применении витамина А. Гнойно-катаральный эндометрит регистрировался на 20-25%) реже чем в контрольной группе. Возникновение персистентного желтого тела зафиксировано у 10% животных 1 и 3 группы, 15% во второй, и 20% в контрольной группе.

Телята от коров которым, вводили исследуемые препараты, реже болели диспепсией на 25-35% и бронхопневмонией на 15 - 20%. При этом наилучший результат получен в группе, где применяли ликоцинол.

Таким образом, проведенные экспериментальные исследования, характеризующие специфическую активность препаратов ликопина, показали, что они являются высокоэффективными средствами профилактики задержания последа, эндометрита и мастита у коров, их применение сокращает гипо-функциональные расстройства яичников, а также уменьшает количество дней бесплодия у коров.

Объединяя результаты проведенных лечебно-профилактических исследований по изучению влияния ликопина на организм животных и птиц, можно указывать на то, что назначение препарата больным и здоровым животным с целью профилактики и лечения заболеваний способствовало улучшению их общего состояния и аппетита, быстрому исчезновению клинических признаков заболеваний, нормализации функций пораженных систем и органов, снижению процента заболеваемости и отхода, лучшему росту и развитию животных, активации жизненно-важных процессов в организме и повышению резистентности к различным негативным факторам. Также под действием ликопина происходит увеличение массы тела животных, повышается процент жизнеспособности организма животных и полученного от них потомства, отмечается положительное влияние на протекание процесса беременности, родов, восстановление организма животных в послеродовой период и на дальнейшее использование животных в ветеринарно-зоотехнических целях.

134

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Соловьев, Валерий Сергеевич, 2010 год

1. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский, В.В. Бражников,

2. С.А. Волков и др.. М., 1993. - 464 с.

3. Антипов В.А., Уразаев Д.Н., Кузьминова Е.В. Использование препаратовбета-каротина в животноводстве и ветеринарии. Краснодар: Кубанский агроуниверситет, 2001.- 118 с.

4. Антипов В.А., Турченко А.Н., Кузьминова Е.В. Применение препаратовкаротина в ветеринарии и животноводство //Методические рекомендации: Москва 2005.- 16 с.

5. Антипов В.А., Турченко А.Н., Кузьминова Е.В., Уразаев Д.Н. Применение препаратов каротина в ветеринарии и животноводстве //Методические рекомендации: Краснодар 2003.-16 с.

6. Антипов В.А., Турченко А.И., Чащин А.В., Кузьминова Е.В., Уразаев

7. Д.Н. Влияние каротина микробиологического на воспроизводительную функцию коров. //Материалы науч.-практ. конф. «Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии»: Краснодар 2001. - Т.2 - С. 8-9.

8. Белоголовская Е.Г. и др. Влияние бета-каротина и аспартама на кластогенную активность циклофосфамида и диоксидина у мышей/ Белоголовская Е.Г., Орещенко А.В., Дурнев А.Д. и др.//Бюл.эксп.биол.мед., 2000.-130 (11).-С.570-573.

9. Белоусов С.С., Зиньковская Т.М., Голубев А.Д. Сравнительная лечебнаяэффективность гелий-неоновой терапии больных ИБС /Лазерная и магнитная терапия в экспериментальных и клинических исследованиях. // Тез.докл. Обнинск, 1999.-МРНЦ РАМН. - С.74-75.

10. Бережная Н.М. Иммунореабилитация и злокачественный рост: надеждаи реальность.// Int. J. Immunorad . 1999. - 11. - Р.27-33.

11. Бриттон Г. Биохимия природных пигментов: Пер. с англ М1. Мир, 1986.-422с.

12. Букин В.Н. Витамины, изд.2-е (Ред. В.А. Энгельгардт)- Ленинград: Пищепромиздат, 1940. С.28-59.

13. Букин Ю.В. Бета-каротин фактор здоровья.- М., 1995. - 27 с.

14. Вадова В.К. Тезисы III-й Всесоюзной витаминной конференции, 1944.

15. Вальдман А.Ф. Витамины в животноводстве.- Рига: Знание, 1977.-145 с.

16. Витаминное питание сельскохозяйственных животных: Рекомендации /

17. Госагрпопром СССР. М.: Агропромиздат, 1989. - 71 с.

18. Волгарев М.Н., Спиричев В.Б. Обеспеченность организма человека витаминами и пути ее улучшения// Теоретические и клинические аспекты науки о питании.- М., 1984.-С.36-41.

19. Взгула Л., Ковач Г. Витамины в обмене веществ. Гиповитаминозы и авитаминозы// Профилактика нарушений обмена веществ у сельскохозяйственных животных. М.:Агропромиздат, 1986.- С.207-271.

20. Гарбузов А.В. и др. Препараты антибиотиков и витаминов для животноводства: Обзор. Информ./ Гарбузов А.В., Грешных К.П., Эдьбирт Г.М., Масловский К.С.// М-во мед.пром-сти СССР. ВНИИ систем упр., экон. исслед. и НТИ.- М., 1991. 50 с.

21. Геворкян Б.З., Арнотская Н.Е., Сергеев А.В. Определение содержаниякаротиноидов в плазме крови человека по спектрам комбинационного рассеяния света//Вопр.мед.хим, 1983.-29(6).-С.124-127.

22. Генис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции.//М., Мир1997 624с.

23. ГОСТ 13496.17 95 Методы определения каротина. Дата введения0101.1997г.

24. Горбунов М.П. -Журн. Общей биол., 1975, т. 36, №2, с. 173-188.

25. Горднев Т.Н., Ротфарб P.M. Докл. АН СССР, 147, 3-4, 1962.

26. Гудвин Т.В. Сравнительная биохимия каротиноидов / Т. Гудвин. М.:1. ИЛ, 1954.-395 с.

27. Гуревич Г.Л. Значение исследования показателей обмена липидов убольных с впервые выявленным туберкулезом легких/Автореф.дие. канд.мед.наук. Минск, 1982. - 17 с.

28. Дадали В.П. Минорные компоненты пищевых растений как регуляторыдитоксикационных и метаболических систем организма // Вестник Санкт-Петербургской Государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова,- 2001. №1. С.24-30.

29. Дорогокупла А.С. и др. Эффект каротина на развитие индуцированныхопухолей. //Дорогокупла А.С., Троицкая Е.С., Адильгериева Л.К. и др.//Здравоохранение Казахстана, 1973.- №10.-С. 32-34.

30. Драудин-Крыленко В.А. Воздействие бета-каротина на стадию промоции канцерогенеза// Каротиноиды в онкологии (Материалы Симпозиума 15-16 июня 1992, Москва), Онкологический научный центр РАМН, Москва, 1992- С.25-29.

31. Душейко А.А. Витамин А, обмен и функции.- Киев, 1989.- 53с.

32. Емелина Н.Т. Вигамины в кормлении сельскохозяйственных животных иптиц. М.:Колос -1970. - С.9-30.

33. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. // Окислительный процесс.

34. Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука/периодика». - 2001. - 343 с.

35. Иванова Н.В. Заключение о применении препарата "Каролин" у больныхс заболеваниями органов дыхания. Краснодар, 1995.-12 с.

36. Иванова Н.В. Заключение о результатах применения препарата "Каролин" у лиц, участвовавших в ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС. Краснодар, 1995.-11 с.

37. Игнатьев Б.А., Боок Ф.Н., Тр. 1-й Всесоюзной конференции по биологически активным веществам плодов и ягод, 1961.

38. Ильина М.В. Влияние ликопина на холестерин-транспортную системукрови и состояние системы гемостаза у женщин в постменопаузе с высоким риском ишемической болезни сердца//Канд. дисс., 2002.

39. Капитанов А.Б., Пименов A.M., Нестерова О.А., Сергиенко В.И. Способпрофилактики и лечения атеросклероза. Патент РФ 2095059 от 27.07.93

40. Капитанов А.Б. Каротиноиды как антиоксидантные модуляторы клеточного метаболизма / А.Б. Капитанов, A.M. Пименов // Успехи соврем, биологии. 1996. - Т. 116, вып. 2. - С. 183 - 186

41. Карнаухов В.Н. В кн.: Тезисы II Всес. биохим. съезда, секция 8. Ташкент: Изд-во ФАН, 1969 а, с. 30-31.

42. Карнаухов В.Н. — В сб.: Биофизика живой клетки, т. 1. Пущино, ОНТИ

43. НЦБИ АН СССР, 1970, с. 25-29.

44. Карнаухов В.Н. — В сб.: Биофизика живой клетки, т. 2. Пущино, ОНТИ

45. НЦБИ АН СССР, 1971, с. 68-83.

46. Карнаухов В.Н. В сб.: Структура и функции макромолекул и макромолекулярных систем. М.: Наука, 1969 б, с. 200-209.

47. Карнаухов В.Н. Цитология, 1973 б, т. 15, № 5, с. 538-542.

48. Карнаухов В.Н. Цитология, 1976, т. 18, № 4, с. 408-418.

49. Карнаухов В.Н. Каротиноиды: успехи, проблемы и перспективы / В.Н.

50. Карнаухов. Пущино, 1986. - 160 с.

51. Карнаухов В.Н. Функции каротиноидов в клетках животных / В.Н. Карнаухов. М.: Наука, 1973а. - 104с.

52. Капитанов А.Б. Каротиноиды как антиоксидантные модуляторы клеточного метаболизма / А.Б. Капитанов, A.M. Пименов // Успехи соврем, биологии. 1996.-Т. 116, вып. 2.-С. 183-186

53. Квартникова Е.Г., Дорожкин В.И., Уразаев Д.Н., Беловодский В.Л., Воробьев А.Н. Препарат «МИК-БАК» средство для повышения резистентности норок// Тез. Докл.1 Всерос. Конф. «Иммунодефицита с/х животных».-М, 1994.-С.42-43.

54. Квартникова Е.Г. Физиологическая потребность норок в основных витаминах и их нормирование/Афтореферат докт. дисс.-М., 1999.- 48с.

55. Киселева Н.Г., Метельская В.А., Перова Н.В. Обоснованность и тактикаприменения витаминов-антиоксидантов в профилактике атеросклероза // Кардиология, 1998. № 12. - С.77-81.

56. Клебанов Г.И., Капитанов А.Б., Теселкин Ю.О. и др., Антиоксидантныесвойства ликопина. Биол. мембраны, 1998, 15(2), 227 237.

57. Клебанов Г.И., Олферьев A.M., Ильина М.В. и др. Томатол новая пищевая добавка антиоксидантного действия Medicina Alyera., май 2001 (спец. выпуск), 13 -15.

58. Клейнбок я.И. Респираторные болезни телят и ягнят// Матер, научнопракт. конф. Алма-Ата: КотМар, 1960. - С. 15-19.

59. Колесников В.В. и др. Применение препарата "Каролин" в лечебных илечебно-профилактических целях // Колесников В.В., Ханферям Р.А. и др.- Ростов, 2000.- 78 с.

60. Колесников В.В., Поддубный Н.П., Иванова Н.В. Результаты применения препарата "Каролин" у больных с заболеваниями органов пищеварения// Тез.докладов 1-го Международного конгресса по натуротера-пии и реакреации. С-Петербург, 1995. - № 1-2. - С.25.

61. Кондрахин И.П. Болезни обмена веществ и эндокринных органов//

62. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. -М.: Агропромиздат, 1991. С.З95-478.

63. Кондрахин И.П. и др. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное пособие/ Кондрахин И.П., Курилов Н.В., Малахов А.Г. и др. М.: Агропромиздат, 1985. - 287 с.

64. Концентрационная инверсия антиоксидантного и прооксидантного действия бета-каротина в тканях in vivo./ Ланкин В.З.,Тихазе А.К., Коновалова Г.Г.,Козаченко А.И.//Бюл.эксп.биол.мед.-1999.-128, № 9.С.314-316.

65. Кравченко Л.В., Морозов С.В., Бикетова Н.А., Дерягина В.П., Авреньева

66. Л.И., Тутельян В.А, Антиоксидантный статус крыс, получавший разное количество ликопина // Бюллетень экспериментальной биологии и ме-дицины.2003. Т. 135, №4. С.414-418.

67. Кретович В.Л. Биохимия растений: Учебник для биол. Факультетов унтов. -М.: Высшая школа, 1980. -445с.

68. Кривощеков С.Г. Отчет по теме "Функциональное состояние сосудов ирегуляции сердечного ритма с помощью препарата "Каролин" Институт физиологии Сибирского отделения РАМН, 1998.

69. Кудрицкая С.Е., Каротиноиды плодов и ягод. Киев: «Высшая школа»,1990. 211с.

70. Кузьминова Е.В., Антипов В.А., Красюков Д.В. Эффективность витатонав свиноводстве //Материалы науч.-практ. конф. «Антиоксиданч ы в профилактике и терапии заболеваний животных»:- Воронеж 2004. -С.202 205.

71. Кулагина Т.П. и др. Влияние длительного гамма -облучения с низкоймощностью дозы и бета-каротина на метаболизм липидов ядер тимо-цитов крыс/ Кулагина Т.П., Шуруга С.А, Коломийцева И.К.,Вакулова Л.А.//Бюлл.эксп. биол. мед., 1998.-126 (9).-С.311-313.

72. Кущинская И.В., Шнайдман Л.С., Медицинская промышленность СССР,4,38, 1964.

73. Ланкин В.З. и др. Концентрационная инверсия антиоксидантного и прооксидантного действия бета-каротина в тканях in vivo/ Ланкин В.З., Тихазе А.К., Коновалова Г.Г., Козаченко А.И.//Бюл.эксп.биол.мед., 1999.-128( 9).-С.314-316.

74. Лебедев Н.И. Использование микродобавок для повышения продуктивности жвачных животных.- Л.:Агропромиздат, 1990.-С.35-46.

75. Лебедев П.Т., Усович А.Т. Методы исследования кормов, органов и тканей животных. М.:Россельхозиздат, 1969. - 476 с.

76. Лизунков А.Ф. Влияние бета-каротина на воспроизводительные функциибаранов// Овцеводство, 1988.-№ 4.-С.16-17.

77. Лутцева А.И., Маслов Л.Г. Методы контроля и стандартизации лекарственных препаратов, содержащих водорастворимые витамины(обзор)// Хим.фарм. журнал, 1999.-33(9).-С.-30-37.

78. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорньтх и ишемическихповреждений сердца. М., 1984.56 с.

79. Медико-биологические аспекты каротиноидов / А.В. Сергеев, Л.Л. Вакулова, М.Я. Шашкина, Т.А. Жидкова // Вопр. мед. химии. — 1992. -№6.-С. 8- 11.

80. Методические рекомендации по проведению научных исследований покормлению сельскохозяйственной птицы. М., 1988. - 15 с.

81. Методические указания по применению унифицированных методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях.- М.: МСХ СССР, ВАСХНИЛ, 1981. 85 с.

82. Микулин А.Е. Функциональное значение пигментов и пигментации вонтогенезе рыб: автореф. дис. д-ра биол. наук / А.Е. Микулин. М. 1998.-49 с.

83. Михайловина А.А., Савинов Б.Г. Растворимость бета-каротина в органических растворителях. Украинский химический журнал. 1949. вып. 16. -С.183-186.

84. Мозгов И.Е. Фармакология. М.: Колос, 1979. - 416 с.

85. Мохов О.И. Критерии научной достоверности при планировании и оценке результатов клинических испытаний//Клин. фармак. и терап, 1999-8(5).-С.75-80.

86. Наставление по применению веторона (бета-каротин водорастворимыйжидкий) в свиноводстве и птицеводстве//Свиноводство.-1994.-2.-С.31-32

87. Нестерова О.А. Антиоксидантные и гиполипидемические свойства ликопина. Канд. дисс., 1997.

88. Никитюк В.Г. Каротиноиды и их значение в живой природе и для человека. Государственный научный центр лекарственных средств.// Харьков. журнал «Провизор», 1999.

89. Никитюк В.Г. Каротиноиды и их значение в живой природе и для человека / В.Г. Никитюк. Харьков: Гос. научн. центр лекарств, средств, 1974.- 150 с.

90. Обербайль К. Витамины целители .-М.: Паридокс- 1996.- 114 с.

91. Обухова JI.K., Измайлов Д.М., Капитанов А.Б., Пименов A.M. Радиозащитная эффективность ликопина. Радиац. биология. Радиоэкология. 1994. 34, 439-445.

92. О нормах кормления лабораторных животных и продуцентов: Приказ по

93. Министерству здравоохранения СССР за №163 от 10 марта 1966 г. (Приложение №1- 21.- 33с.)

94. Околелова Т.М.,Кулаков А.В.,Молоскин С.А. Витаминно-минераль-ноепитание сельскохозяйственной птицы.-Москва, 2000.

95. Олферьев A.M., Ильина М.В., Александрович В. и др., Коррекция ликопином факторов риска развития атеротромбоза у женщин с сахарным диабетом 2-го типа. Вопросы питания, 2003, 3№

96. Определение витаминов А, Е и каротиноидов в кормах, препаратах ибиологических объектах. Методические указания. — Загорск, 1978. 22 с.

97. Островский Ю. М. Экспериментальная витаминология / Ю. М. Островский. Минск: Наука и техника, 1979. - 549 с.

98. Петенко А.И. Научное обоснование и практические решения эффективного использования витаминных ресурсов в животноводстве/ Авто-реф.дисс. д-ра с.-х. наук- Краснодар: Кубан.аграр.ун-т,- 1992. 46 с.

99. Пивняк И.Г. и др. Влияние (3-каротина микробного и химического сишеза на воспроизводство и продуктивность коров/ Пивняк И.Г., Будников В.А., Заболотский В.А., Рябкин А.В. // Зоотехния, 1989.- № 2.- С.46-47.

100. Пивняк И.Г. и др. Использование |3-каротина в рационах коров/ Пивняк

101. И.Г., Заболотский В., Будников В.И. и др. // Молоч. и мясн.скотоводство, 1985, -№ 2.- С.32.

102. Поддубный Н.П., Иванова Н.В. / Методические рекомендации. Краснодар, 1995.

103. Покровский А.А. Биохимические методы исследования / А.А. Покров ский.-М., 1969.-652 с.

104. Прозоровская JI.H. Сборник работ ВИРа, 2, 231, 1937.

105. Пустовалова JI.M. Практикум по биохимии. — Ростов-на-Допу: изд-во1. Феникс», 1999. 544 с.

106. Раецкий Ю.И. Методики зоотехнических и биохимических анализовкормов, животноводческой продукции и продуктов обмена / Ю.И. Раецкий, В.Н. Сухарев, В.Т. Самохин. Дубровицы, 1970. - 130 с.

107. Разработка лекарственных средств на основе каротиноидов для коррекции иммунодефицитных состояний/ Сергеев А.В., Утешев БС , Королев СА/ 2 Рос. Нац.конгр. "Человек и лекарство"/ Москва, 10-15 апр.,1995 г. Тез.докл.-М.,1995.-С.143-144.

108. Рапопорт О.П. Веторон в рационе норок // Колиководство и звероводство, 1994.-№ 5.-С.10.

109. Розенберг Д.А. Исследования усвоения Р-каротина и метаболизма витамина А // Автореферат.- Рига, 1972- 25с.

110. Сапожников Д.И. Пигменты пластид зеленых растений и методы их исследования. M-JI: Наука, 1964, 106 с.

111. Сапожников Д.И., Красовская Т.А., Маевская А.Н. ДАН СССР, 1957, т. 113, №2, с. 465-467.

112. Сапожников Д.И., Попова И.А., Рыжова Е.Ф. ДАН СССР, 1972, т. 297, №6, с. 1490-1492.

113. Сергеев А.В., Вакулова J1.A., Шашкина М.Я. и др. Медико-биологические аспекты каротиноидов// Вопр. Мед.Химии. 1992. -№6.-С. 8-12.

114. Сергеев А.В. Иммунофармакология и механизм действия неспецифических противоопухолевых иммуномодуляторов. Дисс. докт. мед. наук. М.; 1986. С. 265-275.

115. Сергеев А.В. и др. Иммуно-фармакокинетика синтетического бета-каротина/ Сергеев А.В., Ананьев B.C., Вакулова JI.A. и др./ Вопр.мед.химии, 1992.-№38 .-С.27-29.

116. Скурихин В.Н., Шабаев С.В. Методы анализа витаминов А, Д, Е it каротина .-М., 1996.-35 с.

117. Смирнов М.И. Витамин А .- Москва. Медицина: 1974.

118. Тихадзе А.К., Коновалова Т.Г., Ланкин В.З Бета-каротин-содержащиепрепараты увеличивают антиоксидантный потенциал печени и миокар-да//Бюл.эксп.биол.мед., 1999.-128(9).-С.324-326.

119. Феофилова Е.П. Пигменты микроорганизмов / Е.П. Феофилова. М.: Наука, 1974.-218 с.

120. Филипович Э.Г. Витамины и жизнь животных М.: Агропромиздат, 1985- 206 с.

121. Холодова Ю.Д., Чаяло П.П. Липопротеины крови /Киев: Наукова думка, 1990. 208 с.

122. Хмельницкий Г.А., Локтионов В.Н., Полоз Д.Д. Ветеринарная токсикология.- М.: Агропромиздат, 1987.-319 с.

123. Цвет М.С. Хромолипиды в растительном и животном мире / М.С. Цвет. -Варшава, 1910.- 380с.

124. Чиркин А.А., Егоров К.Н. Отчет о выполнении темы "11рименение препарата "Каролин" в кардиологии при лечении больных прогрессирующей стенокардией". Витебск, 1995.-32 с.

125. Чиркин А.А, Казарян Р.В., Поддубный Н.П. Бета-каротин активный фактор в борьбе с экопатологией человека // Тез.докладов III национального конгресса "Человек и лекарство" - М.,1996.- С.295.

126. Шарабрин И.Г. Профилактика нарушений обмена веществ у молочных коров. М.:Колос, 1965. - 325 с.

127. Шашкина М.Я., Шашкин П.Н., Сергеев А.В. Биодоступность каротиноидов //Вопросы медицинской химии, 1999.-№2.- С.25-36.

128. Щербаков В.Г., Лобанов В.Г., Прудникова Т.Н., Федорова С.А., Биохимия растительного сырья. М.: Колос, 1999. 376 с.

129. Якушина Л.М., Малахова Э.Н., Шкарина Т.Н. и др. (1995). Вопр. мед. химии, 41(4), 36-41.

130. Abushita A.A., Daood H.G., Biacs P.A. Change in carotenoids and antioxidant vitamins in tomato as a function of varietal and technological factors//J Agric Food Chem., 2000- 48(6).-P.2075-2081.

131. Adams A.K., Wermuth E.O., McBride P.E. Antioxidant vitamins and the prevention of coronary heart disease 11 Am Fam Physician.- 1999 .- 60(3).-P.895-904.

132. Astrog P. et al. Food Lycopene inhibits the emergence of precancerous foci in rats induced by diethyl nitrosamine. Nutr.Cancer 29:60-68, 1997.

133. Ames B.N., Shigenaga M.K., Hagen T.M. Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90(17):7915-7922.

134. Bate C.J. Vitamin A//Lancet.- 1995-345.-P31-35.

135. Bartlett L, Klyne W, Mose WP, Scopes PM, Galasko G, Mallams AK, Wee-don BCL, Szabolcs J, To.th G. Optical rotatory dispersion of carotenoids. J Chem Soc С 1969; 2527-2544.

136. Bertram J.S. Cancer prevention by retinoids and carotenoids: proposed role of gap functional communnication In: Vitamins and Minerals in the Prevention and Treatment of Cancer (Jacobs M.M., ed).-1991. CRC Press, Boca Raton-P.31-50.

137. Bertram J.S. Report on Second International Conference "Antioxidant Vitamins and p-Carotene in Disease Prevention" (Berlin, 1994). -1995/ntioxidant Vitamins Newsletter-P.7.

138. Berzelius J. Ann. Chem. und Pharm., 1837, v. 21, p.257 - 262.

139. Bierer T.L., Merchen N.R., Nelson D.R., Erdman J.W. (1994). Ann. NY-Acad. Sci., 691,226-228.

140. Bisby R.H., Parker A.W. Reaction of ascorbate with the a-tocopherol radical in micellar and bilayer-membrane systems. Arch Biochem Biophys 1995. P. 170-178.

141. Bjornson L.K., Kayden H.J., Miller E., Moshell A.N. The transport of alpha-tocopherol and beta-carotene in human blood. J Lipid Res 1976; 17:343352.

142. Block G., Langseth L. Antioxidant Vitamins and Disease Prevention//Food technol.-1997-41 (7)-P. 80-84.

143. Boileau A.C., Merchen N.R., Wasson K., Atkinson C.A., Erdman J.W. Cis-lycopene is more bioavailable than trans-lycopene in vitro and in vivo in lymph-cannulated ferrets. JNutr 1999; 129:1176-1181.

144. Bowen P.E., Garg V., Stacewicz-Sapuntzakis M. et all. Ann. NY Acad. Sci. 1994. P. 241-243.

145. Britton G, Liaaen-Jensen S, Pfander H, eds. Carotenoids, Vol. 1A. Isolation and Analysis. Basel: Birkha.user, 1995.

146. Britton G, Liaaen-Jensen S, Pfander H, eds. Carotenoids, Vol. IB. Spectroscopy. Basel: Birkha.user, 1995.

147. Brown E.D., Micozzi M.S., Craft N.E. et al. Am. J. Clin. Nutr., 1989, P. 1258-1265.

148. Brown J., Byers Т., Thompson K., Eldridge В., Doyle C., Williams AM. Nutrition during and after cancer treatment: a guide for informed choices by cancer survivors. CA Cancer J Clin 2002; 153-187.

149. Burton G.W., Ingold K.U. (3-carotene: an unusual type of lipid antioxidant. //Science .-1984.-224.-P.569-573.

150. Cancer Facts and Figures 2002. Atlanta: American Cancer Society, 2002.

151. Careri M., Elviri L., Mangia A. Liquid chromatography-electrospray mass spectrometry of beta-carotene and xanthophylls. Validation of the analytical method//! Chromatogr A.- 1999.- 854(l-2).-P.233-244.

152. Carotenoids: 1.Metabolism and physiology/ Faure H; Fayol V; Galabert C; et all//Ann Biol Clin .-1999 .-57,N2. P. 169-183.

153. Carughi A., Hooper F. (1994). Ann. NY Acad. Sci., 691, 244-245.

154. Castenmiller J.M., West C.E. Bioavailability and bioconversion of carotenoids. Annu Rev Nutr 1998; 18:19-38.

155. Cerutti P.A. Prooxidant status and tumor promotion //Science .-1985.-227(4685).-P. 375-381.

156. Cerutti P.A. Trump B.F. Inflammation and oxidative stress in carcinogene-sis//Cancer Cells.-1991.-P. 1-7.

157. Charleux J.L. Beta-carotene, vitamin C, and vitamin E: the protective micro-nutrients//Nutr Rev. -1996 .-54(11).- Pt. 2.-S. 109-114.

158. Chase G.W., Eitenmiller R.R., Long A.R. Analysis of beta-carotene in medical food by liquid chromatography with matrix solid-phase dispersion//J. AOAC Int.- 1999.-82(3).-P.663-665.

159. Ching S., Ingram D., Hahnel R., Belby J., Rossi E. Serum levels of micronu-trients, antioxidants and total antioxidant status predict risk of breast cancer in a case control study. J Nutr 2002; 303-306

160. Chopra M., Fitzsimons P., Hopkins M., Thurnham D.I. Dialysis and gel filtration of isolated low density lipoproteins do not cause a significant loss of low density lipoprotein tocopherol and carotenoid concentration. Lipids 2001; 36:205-209.

161. Clinton S. Lycopene: chemistry, biology, and implications for human health and disease. Nutr Rev 1998; 218:140-143.

162. Clinton S., Emenhiser C., Schwartz S., et al. cis-trans lycopene isomers, ca-rotenoids, and retinol in the human prostate. Cancer Epidemiol Biomark Prev 1996; 823-833.

163. Cohen J., Kristal A., Stanford J. Fruit and vegetable intakes and prostate cancer risk. J Natl Cancer Inst 2000; 92:61-68.

164. Culter R.G., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, P. 7627-7631.

165. Davies B.H. Carotenoid metabolism in animals: a biochemist's view. Pure Appl Chem 1985; 57:679-684.

166. Davies D.D., Giovanelli J., Ap Rees T. Plant biochemistry. Botanical monographs. Blackwell Scientific Publications. Oxford. 1964. p.345-380.

167. Delgado-Vergas F. et al. Natural pigments: carotenoids, anthocyanins, and betalains characteristics, biosynthesis, processing, and stability // Crit Rev Food Sci. Nutr. - 2000. - vol. 40, № 3. - P. 173-289.

168. Dembinski Z., Bronicki M. Progesterone P-4 level in blood and the values of selected fertility indexes in cow fed various doses of carbotenes // Bull.Veter.Inst.in Pulawy. -1994.- 38( 2).- P. 115-118.

169. Dingfelber J.K. //Ammer J. Obstet.Gynec. 1981. - v. 140.-P. 874-879.

170. Dimitrov N.V., Meyer Ch., Ullrey D.E. et al. //. Am. J. Clin. Nutr., 1988. 48, P. 298-304.

171. Edge R. The reduction potential of the beta-carotene.+ beta-carotene couple in an aqueous micro-heterogeneous environment/ Edge R., Land E.J., McGarvey D.J. et al.//FEBS Lett.-1996-47l(2-3).-P. 125-127.

172. Enstrom J.E., Kamin L.E., Breslow L. The relationship bitween vitamin С intake, general health practices, and mortality in Alameda Country, California // Am.J. Pudlic Health. 1986. - v.76. - P.l 124-1130.

173. Englert G, Aakermann T, Liaaen-Jensen S. NMR studies on natural all-trans (90Z,116»Z)-(3R,3CS,5CR,6CR)-pyrrhoxanthin, an acetylenic C37-skeletal nor-carotenoid butenolide. Magn Reson Chem 1993; p.910-915.

174. Erdman J.W., Bierer T.L., Gugger E.T., Ann. NYAcad. Sci., 1994. P. 76-85.

175. Evers A.M. et al. Soil forming and plant density effects on carrot yield and internal quality/ Evers A.M., Tuuri H., Hagg M. et al.//Plant Foods Hum Nutr. -1997.-5 l(4).-P.283-294.

176. Faure H. et al. Carotenoids: 1.Metabolism and physiology/ Faure H., Fayol V., Galabert C. et al.//Ann Biol Clin .-1999 .-57(2).-P.169-183.

177. Franko M., Van de Bovenkamp P., Bicanic D. Determination of trans-beta-carotene and other carotenoids in blood plasma using high-performance liquid chromatography and thermal lens detection// J. Chromatogr В Biomed Sci Appl. .-1998 .-718(1).-P.47-54.

178. Freedman D.M. et al. The effect of beta-carotene supplementation on serum vitamin D metabolite concentrations/ Freedman D.M., Tangrea J.A., Vir-tamo J., Albanes D.// Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. -1999.- V.8.-N12.-P.1115-1116.

179. Fuller C.J., Huet B.A., Jialal I. Effects of increasing doses of alpha-tocopherol in providing protection of low-density lipoprotein from oxidation/Mm J Cardiol. -1998 .-81(2).-P.231-233.

180. Fuchs J. Potentials and limitations of the natural antioxidants RRR-alpha-tocopherol, L-ascorbic acid and beta-carotene in cutaneous photoprotection //Free Radic Biol Med-. 1998.-25(7).-P.848-873.

181. Foote C.F., Denny R.W. Chemistry of singlet oxygen Vll Quenching by p-carotene J.Am.Chem.Soc.-1968.- 90.- P.6233-6235.

182. Gabrielska J, Gruszecki WI. Zeaxanthin (dihydroxy-beta-carotene) but not betacarotene rigidifies lipid membranes: A H-l-NMR study of carotenoid-egg phosphatidylcholine liposomes. Biochim Biophys Acta Biomembranes 1996; P. 167-174.

183. Genta V.M., Kaufman D.G., Harris C.C., Smith J.M., Sporn M.B., Saffiotti U. Vitamin A deficiency enhances binding of benzo(a)pyrene to tracheal epithelial DNA.- Nature, 1974.- 247 (5435).-P. 48-49.

184. Gerster H. The potential role of lycopene in human health. J Am Coll Nutr 1997. P. 109-122.

185. Gerber M. et al. Beta-carotene: a miss for epidemiology /Gerber M., Grolier P., Saintot M., В ore I P. HI. Natl Cancer Inst. .-2000,-92( 12).-P. 1014-1016.

186. Giovannucci E. Tomatoes, tomato-based products, lycopene, and cancer: review of the epidemiologic literature. J Natl Cancer Inst 1999; 91:317-331.

187. Giovannucci E , Rimm E , Liu Y , Stampfer M , Willett W . A prospective study of tomato products, lycopene, and prostate cancer risk. J Natl Cancer Inst 2002; 94:391-398.

188. Giovannucci E, Ascherio A, Rimm E, Stampfer M, Colditz G, Willett W. Intake of carotenoids and retinol in relation to risk of prostate cancer. J Natl Cancer Institute 1995; 87:1767-1776.

189. Goodman D.S. (1984). J. Nat. Cancer Inst., 73(6), 1375-1379.

190. Goodwin T.W. Chemistry and Biochemistry of plant pigments / T.W. Goodwin // Department of biochemistiy, university of Liverpool. England, 1976.-V. 2.-P. 108-123.

191. Goodwin T.W. The Biochemistry of Carotenoids / T.W. Goodwin. // Chapman and Hall. 1980. - V.lP.377.

192. Goodwin T.W. The Biochemistry of Carotenoids / T.W. Goodwin. // Chapman and Hall. 1984. - V. 2. - P. 224.

193. Goodwin T.W. The Comparative Biochemistry of the Carotenoids. L.: Chapman and Hall, 1952, 500 p.

194. Gossage C. et al. Effect of beta-carotene supplementation and lactation on carotenoid metabolism and mitogenic T lymphocyte proliferation/ Gossage C., Deyhim M., Moser-Veillon P.B. et al.//Am J. Clin Nutr. -2000 .-71,N4.-P.950-955.

195. Gowda B. et al. Expression of c-myc in human colonic tissue in response to beta-carotene supplementation /Gowda В., Qin J., Mobarhan S., Frommel T.O.//Nutr Cancer.- 1997.-28(2).-P.135-139.

196. Green A. et al. Daily sunscreen application and betacarotene supplementation in prevention of basal-cell and squamous-cell carcinomas of the skin: a randomised controlled trial/Green A; Williams G; Neale R .et al// Lancet.-1999.-354(9).- P.723-729 .

197. Grolier P. et al. The bioavailability of alpha- and beta-carotene is affected by gut microflora in the rat/Grolier P., Borel P., Duszka C, Lory S. et al.//Br. J. Nutr-. 1998 ,-80(2).-P. 199-204.

198. Gruszecki W.I. Carotenoids in membranes. In: Frank A., Young A.J., Brit-ton G., Cogdell R.J., eds. The Photochemistry of Carotenoids, Dordrecht: Kluwer Academic, 1999. P. 223-234.

199. Guttenplan J., Chen M., Kosinska W., Thompson S., Zhao Z., Cohen L. Effects of a lycopene-rich diet on spontaneous and benzoa.pyrene-induced mutagenesis in prostate, colon and lungs of the lacZ mouse. Cancer Lett 2001; 164:1-6.

200. Hadley С., Clinton S., Schwartz S. The consumption of processed tomato products enhances plasma lycopene concentrations in association with a reduced lipoprotein sensitivity to oxidative damage. J Nutr 2003; 133:727732.

201. Hadley C., Miller E., Schwartz S., Clinton S. Tomatoes, lycopene and prostate cancer: progress and promise. Exp Biol Med 2002; 227:869-880.

202. Hager A. In: Pigments in Plants. F.C. Czygan (ed.). Stuttgard; N.Y.: Cus-tav Fischer Verlag, 1980, p. 57-79.

203. Harper M.J., Coons Z.W., Radicke D.F. et al.// Amer. J. Physiol. 1980. -V.238.-2.-P. 157- 166.

204. Heber D., Lu Q. Overview of mechanisms of action of lycopene. Exp. Biol. Med. 2002; 227:920-923.

205. Heinonen O.P., Albanes D. New Engl. J. Med., 1994, P. 1029-1035.

206. Hengartner U, Bernhard K, Mayer K, Englert G, Glinz E. Synthesis, isolation and NMR-spectroscopic characterization of fourteen (Z)-isomers of lycopene and of some acetylenic didehydro- and tetradehydrolycopenes. Helv Chim Acta 1992; p. 1848-1865.

207. Hollander D., Dadufalza V. Influence of aging on vitamin A transport into the lymphatic circulation. Exp Gerontol 1990; 25:61-65.

208. Huang C. et al. The bioavailability of beta-carotene in stir- or deep-fried vegetables in men determined by measuring the serum response to a single ingestion/Huang C., Tang Y.L., Chen C.Y. et al.//J Nutr.- 2000 .-130(3).-P.534-540.

209. International Agency for Research on Cancer. IARC Handbooks of Canc-Prevention. Vol. 2, Carotenoids. New York: Oxford University Press, 1998.

210. Jemal A, Thomas A, Murray T, Thun M. Cancer statistics, 2002. CA Cancer J Clin. 2002. P. 23-47.

211. Jovanovic M.J. et al. С oncentrations of beta-carotene and vitamin A in blood serum of cows depending on composition of feed rations/Jovanovic M.J., Secedi M., Damnjanovic Z. et al.//Veterinarsky Glasnik.- 1992.-46 ,N7-8 .-P. 383-391.

212. Kamimura S. et al. Supplementary effects of vitamin A on cows under different forage conditions/Kamimura S., Ohgi Т., Takahashi M., Tsukamoto T. //Bull. Fac. Agr. Kagoshima Univ. ICagoshima.- 1992. -N 42.- P.37-44.

213. Karnaukhov N.V. Exp. Cell Res., 1971, v. 64, p.301-306.

214. Karrer P., Helfenstein A., Wehrli H., Wettstein A., Helv. Chim. Acta 1930. p.-1094.

215. Karrer P., Jucker E. Carotenoide, Birkhauser, Basel, 1948, p. 636.

216. Kasper H., Hospach R. Der diagnostische Wert der Vinamin-A- und Ca-rotin-Bestimung im Serum bei Maldigestion und Malabsorbtion//Deutsche-Medicinische-Woshenschrift. -1974 .-99(5). -S.198 200.

217. Kazi N. et al. Immunomodulatory effect of beta-carotene on T lymphocyte subsets in patients with resected colonic polyps and cancer//Kazi N., Rad-vany R., Oldham T. et al.//Nutr Cancer.- 1997.-28(2).-P. 140-145.

218. Kawchak D.A. et al. Longitudinal analysis shows serum carotenoid concentrations are low in children with cystic fibrosis/ Kawchak D.A., Sowell A.L., Hofley P.M. et al.//J Am Diet Assoc-. 1999.- 99(12).-P. 1569-1572.

219. Kemmann E., Pasquale S.A., Skaf R. Amenorrhea associated with caro-tenemia. JAMA 1983; 249:926-929.

220. Klug E. et al. Einfluss von beta Carotinand vitamin A auf Geshlechtsfunk-tionen von Jungbullen/Klug E., Weiss R.R., Ahlswede L., Schulz G, //Zuchthygiene.- 1976.-1 l(2).-P.78-79.

221. Kobayashi T. et al. Effects of lycopene, a carotenoid in vnutritimusnuyu differentiation of cells and the ratio of peripheral SV4/SV8 in older mice SHN with a high risk of developing breast cancer. Anti-Cancer Drugs 7:195-198, 1996.

222. Kolb E. Die Bedeutung des Vitamins A fur das Immunsystem: Uber-sichtsref. Berl. u. munch, tieraztl. Wschr. -1995.- Bd.108. -Н.Ю.- S.385-390.

223. Kolonel L., Hankin J., Whittemore A., Wu A., Gallagher R., Wilkens L., John E., Howe G., Paffenbarger R. Vegetables, fruits, legumes and prostate cancer: a multiethnic case-control study. Cancer Epidemiol Biomark Prev 2000; 9:795-804.

224. Kramer T.R., Burri B.J. Modulated mitogenic proliferative responsiveness of lymphocytes in whole-blood cultures after a low-carotene diet and mixedcarotenoid supplementation in women//Am. J. Clin. Nutr.- 1997 .-65(3).-P.871-875.

225. Krinsky N.I., Cornwell D.G., Oncley J.I. The transport of vitamin A and carotenoids in human plasma. Arch Biochem Biophys 1958; 73:233-246.

226. Krinsky N.I. Effect of carotenoids in cellular and animal systems. //Am. J. Clin Nutr.- 1991.- 53 (Suppl).-P. 2385-2465.

227. Krinsky N.I. FreeRad. Biol /N.I. Krinsry. //Med. 1989. - V.7. - P.617.

228. Krinsky N.I. In: Carotenoids O.Isler (Ed.) Basei: Birkhauser Verlag, 1971, p. 669-720.

229. Krinsky N.I. Overview of lycopene, carotenoids, and disease prevention. Proc Soc Exp Biol Med 1998; 218:95-97.

230. Krinsky N.I. Retinoids: Progress in research and clinical application / N.I. Krinsky, X.D. Wang, G. Tang, R.M. Russel, (Eds. Livrea M.A., Parcer ЕЛ N.Y.: Marcel Dekker, Inc., 1993. -128 p.

231. Krinsky N.I. The antioxidant and biological properties of the carote-noids//Ann. N Y Acad Sci.- 1998.-854.-P.443-447.

232. Krinsky N.I., Wang X.D., Tang G., Russell R.M. (1994). Ann. NYAcad. Sci., 691, 167-175.

233. Kume S., Nichida Т., Kurihara M. Effect of hay level on vitamin A and (3-carotene contents of plasma and colostrum in dairy cows around parturition // Bull. Nat. Inst. Anim. Ind., Ibaraki, Japan. -1996.- N 57.- P. 15-22.

234. Kucukbay H. et al. Serum vitamin A and beta-carotene levels in children with recurrent acute respiratory infections and diarrhoea in Malatya/ Kucukbay H., Yakinci C., Kucukbay F.Z., Turgut M.// J. Trop. Pediatr-. 1997 .-43(6).-P.337-340.

235. Lange U. Einfluss des beta-Carotin und Vitamin A auf verschiedenesekreto-riche Organe beim Bullen// Tierarzliche Hoshule,Yannover.-1977.

236. Lee I.M. et al. Beta-carotene supplementation and incidence of cancer and cardiovascular disease: the Women's Health Study/ Lee I.M., Cook N.R., Manson J.E. et al.//J.Natl Cancer Inst. .-1999 .- 91 (24).-P.2102-2106.

237. Lee B.M., Lee S.K., Kim H.S. Inhibition of oxidative DNA damage, 8-OHdG, and carbonyl contents in smokers treated with antioxidants (vitamin E, vitamin C, beta-carotene and red ginseng)// Cancer Lett. -1998,- 132(1-2).-P.219-227.

238. Le Francois P. Carotenodermia. Am. J. Clin. Nutr. 1989; 49:1330-1331.

239. Levshin V., Drozhachikh V., Sergeev A., Shashkina M., Mkrtchjan T. (1997). Vesio chemoprofilaktika. Materials of the Conference. Vilnius, Lithuania, 22.

240. Levy J. et al. Lycopene a potent inhibitor of proliferation of human cancer cells than L-carotene or B-carotene. Nutr.Cancer 24:257-266, 1995.

241. Levy J., Regalado E., Navarrete S., Watkins R.H. Bixin and norbixin in human plasma: determination and study of the absorption of a single dose of Annatto food color. Analyst 1997; 122:977-980.

242. Liaaen-Jensen S. Stereochemical aspects of carotenoids. Pure Appl Chem 1997; P. 2027-2039.

243. Liaaen- Jensen S. In: marine natural products, Scheuer P.J. (Ed.) // Acad. Press. - 1978.-P. 1-73.

244. Lin Y. et al. Estimating the concentration of beta-carotene required for maximal protection of low-density lipoproteins in women/Lin Y., Burri B.J., Neidlinger Tr. et al.//Am J Clin Nutr.- 1998 .-67(5).-P.837-845.

245. Ludke H. Die Wirkung von beta-Carotin auf die Reproductionsleistung auf die Reproductionsleistung von Sauen // Monatshefte -fiir- Vetcrinanncdizin. 1992.- 47(6).-S. 325-328.

246. Luterotti S., Franko M., Bicanic D. Ultrasensitive determination of beta-carotene in fish oil-based supplementary drugs by HPLC-TLS.// J Pharm Biomed Anal. -1999.- 21(5).-P.901-909.

247. Maniga N1, Sumida JP, Stone S, Moore AL, Moore ТА, Gust D. Increasing the yield of photoinduced charge separation through parallel electron transfer pathways. J Porphyrins Phthalocyanines 1999.p.32-44.

248. Marchioli R. Antioxidant vitamins and prevention of cardiovascular disease: laboratory, epidemiological and clinical trial data // Pharmacol Res.- 1999 .-40(3).-P.227-238.

249. Marchioli R., Schweiger C., Levantesi G., Tavazzi L., Valagussa F. Antioxidant vitamins and prevention of cardiovascular disease: epidemiological and clinical trial data. Lipids 2001; 36 Suppl:S53-S63.

250. Margalith P.Z. Production of ketocarotenoids by microalgae.//Appl Microbiol Biotechnol.- 199 .-51(4).-P.431-438.

251. Marschang F. Beta-Carotin-ein Resistenzfaktor im Rinderbestand //Praktische-Tierarzt.- 1983.-64.-H.1 l.-S. 1020 1026 .

252. Marthews-Koth M.M. Carotenoinds in Medical Application. In: Carotenoids as Colorants and Vitamin A Precursor (Bauernfeind J.C.ed), Academic Press, New Yok, (1981) pp. 755-785.

253. Martin K.R., Failla M.L., Smith J.C. Jr. Beta-carotene and lutein protect HepG2 human liver cells against oxidant-induced damage// J. Nutr. 1996.-126(9).-P.2098-2106.

254. Masaki K., Doi Т., Ynge K. et al. (1994). Ann. NYAcad. Sci., 691, 290-292.

255. Matos H., Di Mascio P., Medeiros M. Protective effect of lycopene on lipid peroxidation and oxidative DNA damage in cell culture. Arch Biochem Bio-phys.2000; 383:56-59.

256. Maxwell S.R. Antioxidant vitamin supplements: update of their potential benefits and possible risks// Drug Saf.- 1999.-2 l(4).-P253-266.

257. Mayne S.T. Antioxidant nutrients and chronic disease: use of biomarkers of exposure and oxidative stress status in epidemiologic research. J Nutr 2003; 133:933S-940S.

258. Mayne S.T. et al. Effect of supplemental beta-carotene on plasma concentrations of carotenoids, retinol, and alpha-tocopherol in humans //Mayne S.T., Cartmcl В., Silva F. et al.//Am J Clin Nutr- 1998.-68(3).-P.642-647.

259. Michaud D., Feskanich D., Rimm E., Colditz G., Speizer F., Willett W. Intake of specific carotenoids and risk of lung cancer in 2 prospective US cohorts. Am J Clin Nutr 2000; 72:990-997.

260. Micozzi M.S., Brown E.D., Taylor P.R., Wolfe E. Carotenodermia in men with elevated carotenoid intake from foods and beta-carotene supplements. Am. J. Clin. Nutr. 1988; 48:1061-1064.

261. Minakovski R.// Zootechnica 01sztyn.-1993.-38,H73-4184.-P51-60

262. Miki S., Ashraf M., Salka S., Sperelakis N. Myocardial dysfunction and ul-trastructural alterations mediated by oxygeen metabolites. J Mol Cell Cardiol 1988; 20: 1009-1024.

263. Miller E.C., Giovannucci E., Erdman J.W., Bahnson R., Schwartz S.J., Clinton S.K. Tomato products, lycopene. and prostate cancer risk. Urol Clin North Am 2002; 29:83-93.

264. Molina J. A. et al. Serum levels of beta-carotene, alpha-carotene, and vitamin A in patients with amyotrophic lateral sclerosis/ Molina J.A., de Bustos F., Jimenez-Jimenez F.J. et al.//Acta Neurol Scand.- 1999.-99(5).-P.315-317.

265. Moore T. Vitamin A. Amsterdam: Elsevier Publ., 1957, 436 p.

266. Mortensen A. et al. Comparative mechanisms and rates of free radical scavenging by carotenoid antioxidants/Mortensen A., Skibsted L.H., Sampson J. et al./FEBS Lett. -1997,- 418(l-2).-P.91-97.

267. Nagasawa H. et al. Effects of lycopene on the development of spontaneous mammary tumors in SHN virgin mice. Anticancer Research, 15:1173-1178, 1995.

268. Ngugen M.L., Schwartz S.J. Lycopene: chemical and biological properties. Food Tech 53:38-45, 1996.

269. Olmedilla В., Granado F., Blanco I. Hyper-beta-carotenemia unrelated to diet: a case of brain tumor. Int J Vitam Nutr Res 1995; 65:21-23.

270. Olson J.A. // J. Nutr.,1989. 119, P. 105-108.

271. Omenn G.S .An assessment of the scientific basis for attempting to define the Dietary Reference Intake for beta carotene// J. Am. Diet Assoc.- 1998 .-98(12).-P. 1406-1409.

272. Paetau I., et al. Carotenoids in human buccal mucosa cells after 4 wk of supplementation with tomato juice or lycopene supplements/ Paetau I., Rao D., Wiley E.R., Brown E.D., Clevidence B.A.//. Am J Clin Nutr.- 1999.-70(4).-P.490-494.

273. Pane L. et al. The carotenoid pigments of a marine Bacillus firmus strain/ Pane L., Radin L., Franconi G., Carli A. // Bol.l Soc. Ital. Biol. Sper. -1996.-72(1 l)-12-P.303-308.

274. Pannewig К .Antioxidants—what is their value? Minerals, Vitamins & Co. Series, 6: Beta-carotene, vitamin С and E// Fortschr Med., 1998.-116(29).-P.61-62.

275. Parker R.S. et al. Assessing metabolism of beta-13C.carotene using high-precision isotope ratio mass spectrometry/Parker R.S., Brenna J.Т., Swanson J.E., Goodman K.J., Marmor B.//Methods Enzymol. -1997.-282.-P.130-140.

276. Parker R.S., Swanson J.E., Marmor B. et al. (1994). Ann. NYAcad. Sci., 691, 86-95.

277. Pauling L. Recent work on the configuration and electronic structure of molecules with some applications to natural products: isomerism and the structure of carotenoids. Fortschr Chem Org Naturstoffe 1939; 3:227-229.

278. Paulo M.G. et al. An isocratic LC method for the simultaneous determination of vitamins А, С, E and beta-carotene/ Paulo M.G., Marques H.M., Mo-rais J.A. et al.//J Pharm Biomed Anal. -1999.-2l(2).-P.399-406.

279. Pierce J.P., Faerber S., Wright F.A., Newman V., Flatt S.W., Kealey S., Rock C.L., Hryniuk W., Greenberg E.R. Feasibility of a randomized trial of a high-vegetable diet to prevent breast cancer recurrence. Nutr Cancer 1997; 282-288.

280. Pitt G.A. In: Carotenoids. O. Isler (Ed.) Basel; Birkhauser Verlag, 1971, p. 717-742.

281. Pool-Zobel B.L. et al. Consumption of vegetables reduces the damage to genes in humans: first results of the study the introduction of people to eat foods rich in carotenoids. Carcinogenesis 18:1847-1850? 1997. J. Nutr. 2001, 131 (5) .-1449-1451.

282. Polifka J.E. et al. Clinical teratology counseling and consultation report: high dose beta-carotene use during early pregnancy/ Polifka J.E., Dolan C.R., Donlan M.A., Friedman J.M. //Teratology. -1996.-54(2).-P.103-107.

283. Prince MR, Frisoli Ж. Beta-carotene accumulation in serum and skin. Am. J. Clin. Nutr. 1993; 57:175-181.

284. Rao M.N., Ghosh P., Lakshman M.R. Purification and partial characterization of a cellular carotenoid- binding protein from ferret liver. J Biol Chem 1997; 272:24455-24460.

285. Rapp L.M., Maple S.S., Choi J.H. Lutein and zeaxanthin concentrations in rod outer segment membranes from perifoveal and peripheral human retina. Invest Ophthalmol Vis Sci 2000. P. 1200-1209.

286. Rautalbanes D. et al. Beta-carotene did not work: Aftermath of the ATBC study./ Rautalbanes D., Virtamo J. Taylor P.R. et al.// CANCER LETTERS.- 1997.- 114(1-2).-P. 235-236.

287. Refvem T, Strand A, Kjeldstad B, Haugan JA, Liaaen-Jensen S. Stereoisom-erization of allenic carotenoids-kinetic, thermodynamic and mechanistic aspects. Acta Chem Scand 1999; P. 118-123.

288. Rettenmaier R. Carotene in milk, in:Beta-carotene Assay Methods by Manz U., Information service, animal nutrition Dept. F. Hoffmann-La Roche&Co Ltd, Switzerland, 1980.-P.17-19.

289. Ribaya-Mercado J.D., Lopez-Miranda J., Ordovas J.M. et al. (1994). Ann. N YAcad. Sci., 691,232-237.

290. Riso P., Porrini M. Determination of carotenoids in vegetable foods and plasma./Int J Vitam Nutr Res. -1997.-67,N1.-P.47-54.

291. Rohan Т.Е., Jain M., Howe G.R., Miller A.B., A cohort study of dietary carotenoids and lung cancer risk in women (Canada). Cancer Causes Control 2002; 231-237.

292. Ronnekleiv M, Liaaen-Jensen S. Bacterial carotenoids 52. C50-carotenoids 22. Naturally occurring geometrical isomers of bacterioruberin. Acta Chem Scand 1992. p. 1092-1095.

293. Rwangabwoba J.M. et al. Serum vitamin A levels during tuberculesis and immunodeficiency virus infection/ Rwangabwoba J.M., Fischman H.,Semba R.D.//Int.J. Tuberc.and Lung Dis.-1998.-2(9).-P.771-773.

294. Sapoznikov D.I. Pure and Appl. Chem., 1973, v. 35, p. 47-61.

295. Schweigert F.G. Beta-Carotin Stoffvvechsel des Rindes: Verteilung auf die Serumlihoproteine, Transfer in die Milch und in die Follikelflussigkeit sowie Function im Follikel.-Ludwig Mfximilians-Universtat Munchen.- 1986.

296. Sharma P.K., Hall D.O. .Effect of photoinhibition and temperature on carotenoids in sorghum Ieaves//Indian J. Biochem Biophys.- 1996 .-33(6).-P.471-477.

297. Sharoni Y., Giron E., Rise M., Levy J. Effects of lycopene-enriched tomato oleoresin on 7,12-dimethyl-benza.anthracene-induced rat mammary tumors. Cancer Detect Prev 1997; 21:118-123.

298. Shibata A., Sasaki R., Ito Y. et al. Int. J. Cancer, 1989, P. 48-52.

299. Shierle J, Bretzel W, Bu.hler I, Faccin N, Hess D, Steiner K, Schu.ep W. Content and isomeric ratio of lycopene in food and human blood plasma. Food Chem 1997, P. 459-465.

300. Smith A.H., Waller K.D. Am. J. Epidemiol. 1991. P. 661-671.

301. Socaciu C., Jessel R., Diehl H.A. Carotenoid incorporation into microsomes: yields, stability and membrane dynamics. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc 2000. P. 2799-2809.

302. Solomons N.W., Bulux J. (1994). Ann. NYAcad. Sci., 691, P. 96-109.

303. Stahelin H.B., Gey K.F., Eichholzer M., Ludin E. Am. J. Clin. Nutr., 1991, P. 265-269.

304. Stahl W., Schwartz W., Sies H. (1993). Int. Symp. on Antioxidants and Disease Prevention. Stockholm, Sweden; pp. 23-24.

305. Stahl W., von Laar J., Martin H., Emmerich Т., Sies FI. Stimulation of gap junctional communication: comparison of acyclo-retinoic acid and lycopene. Arch. Biochem. Biophys. 2000; 373:271-274.

306. Steinberg-Yfrach G, Liddell PA, Hung SC, Moore AL, Gust D, Moore ТА. Conversion of light energy to proton potential in liposomes by artificial pho-tosynthetic reaction centres. Nature 1997:385:239-241.

307. Stich H.F., Hornby A.P., Dunn B.P. Int. J. Cancer, 1986. P. 389-393.

308. Strand A, Liaaen-Jensen S. Application of diphenyldiselenide as a new catalyst for photochemical stereoisomerization of carotenoids. Acta Chem Scand 1998.p.1263-1269.

309. Strand A, Shivaji S, Liaaen-Jensen S. Bacterial carotenoids 55. C50-carotenoids 25.Revised structure of carotenoids associated with membranes in psychrotrophic Micrococcus roseus. Pure Appl Chem 1997. P. 20272038.

310. Sujak A, Gabrielska J, Grudzinski W, Bore R, Mazurek P, Gruszecki WI. Lutein and zeaxanthin as protectors of lipid membranes against oxidative damage: the structural aspects. Arch Biochem Biophys 1999. P. 301-307

311. Swinbum B.A. et al. Effects of reduced-fat diets consumed ad libitum on intake of nutrients, particularly antioxidant vitamins/ Swinburn B.A., Wool-lard G.A., Chang E.C., Wilson M.R. //J. Am Diet Assoc. -1999.- 99(11).-P.1400-1505.

312. Tang G., Blanco M.C., Fox J.G., Russell R.M. Supplementing ferrets with canthaxanthin affects the tissue distributions of canthaxanthin, other carote-noids, vitamin A and vitamin E. J Nutr 1995; 125:1945-1951.

313. Tangney Ch.C., Shekelle R.B., Raynor W. et al. Am. J. Clin. Nutr., 1987. P. 764-769.

314. Tavani A., La Vecchia C. Beta-carotene and risk of coronary heart disease. A review of observational and intervention studies// Biomed Pharmacother.-1999.-53(9).-P.409-416.

315. Tolonen M. et al. Anti-oxidant supplementation decreases ТВ A reactants in serum of elderly/Tolonen M., Sarna S., Halme M. //Biol Trace Elem Res.-1988. -17.-P 221-228.

316. Tsubono Y., Tsugane S., Gey K.F. Plasma antioxidant vitamins and carote-noids in five Japanese populations with varied mortality from gastric cancer//Nutr. Cancer. -1999.-34(1).-P.56-61.

317. Tswett M.S. Ber. Dtsch. Bot. Ges / M.S. Tswett. 1911. — V. 29. — P. 630-636.

318. Vainio H. Chemoprevention of cancer: lessons to be learned from beta-carotene trials. Toxicol Lett 2000; 513-517.

319. Vahlguist A., Peterson P.A., Biochemistry, 1972. p.4526-4532.

320. Van den Berg H., Van Vliet T. Effect of simultaneous, single oral doses of betacarotene with lutein or lycopene on the beta-carotene and retinvl ester responses in the triacylglycerol-rich lipoprotein fraction of men. Am J Clin Nutr 1998; 68:82-89.

321. Van Lieshout M, West CE, van Breemen RB. Tsotopic tracer techniques for studying the bioavailability and bioefficacy of dietary carotenoids, particularly betacarotene, in humans: a review. Am J Clin Nutr 2003; 77:12-28.

322. Wackenroder H. Geiger's Mag. Pharm., 1831, v.33, pl44-172.

323. Wang X.D. et al. Retinoid signaling and activator protein-1 expression in ferrets given beta-carotene supplements and exposed to tobacco smoke / Wang X.D., Liu C., Bronson R.T. et al. //J. Natlio Cancer Inst.- 1999 .-91(1).-P.60-66.

324. Wang X.D., Russell R.M. Procarcinogenic and anticarcinogenic effects of beta-carotene//Nutr Rev.-1999.-57(9).- Pt 1.-P263-272.

325. Watson J.P. et al. Case report: oral antioxidant therapy for the treatment of primary biliary cirrhosis: a pilot study/ Watson J.P., Jones D.E., James O.F. et al.//J. Gastroenterol Hepatol. -1999.-14,N10.-P. 1034-40.

326. Weiss E., Buchholz I., Schweigert F.J .Changes in the plasma concentration of vitamin A, vitamin E and beta-carotene in polytrauma patients and in patients with osteitis in relation to course of illness//Zentralbl Chir. .-1998.-123(11).-P.1277-1283.

327. West K.P. et al. Can Vitamin A be expected to improve child growth ?: Abstr. Annu. Meet. Prof. Res. Sci. «Exp. Biol.» New Orleans, La, Apr.6-9 ,1997 /West K.P., LeClerq S .C., Shu-fune L, Katz J., Khatry S. К.// FASEB J. -1997.-11(3).-P.140.

328. White W.S., Peck K.M., Ulman E.A., Erdman J.W. (1994). Ann. NYAcad. Sci., 691,229-231.

329. Woutersen R.A. et al. Safety evaluation of synthetic beta-carotene/ Wout-ersen R.A., Wolterbeek A.P., Appel M.J. et al.//Crit. Rev. Toxicol. -1999.-29(6).-P.515-42.

330. Yemelyanov A.Y., Katz N.B., Bernstein P.S. Ligand-binding characterization of xanthophyll carotenoids to solubilized membrane proteins derived from human retina. Exp Eye Res 2001. P. 381-392.

331. Yeum K.J., Russell R.M. Carotenoid bioavailability and bioconversion. Annu Rev Nutr 2002; 22:483-504.

332. Yuan JM, Ross RK, Chu XD, Gao YT, Yu MC. Prediagnostic levels of serum betacryptoxanthin and retinol predict smoking-related lung cancer risk in Shanghai, China. Cancer Epidemiol Biomark Prev 2001; P. 767-773.

333. Zhang Z.W. et al. Gastric alpha-tocopherol and beta-carotene concentrations in association with Helicobacter pylori infection/ Zhang Z.W., Patchett S.E., Perrett D. et al.//Eur J Gastroenterol Hepatol.- 2000.-12(5).-P.497-503.

334. Zhang L.X., Cooney R.V., Bertram J.S. Carotenoids increase intercellular communication and inhibit lipid peroxidation in S3N/IOT1/2 cells: their relation to the action himioprotektiv to cancer. Cancirogenesis, 12:2109-21 14, 1991.1701. А./

335. Zhang L.X., Cooney R.V., Bertram J.S. Carotenoids enhance the expression genes encoding connexin 43, irrespective of their provitamin A and antioxidant properties. Cancer Res., 52:5707-5712, 1992.

336. Zhang Z.W. et al. Gastric alpha-tocopherol and beta-carotene concentrations in association with Helicobacter pylori infection/ Zhang Z.W., Patchett S.E., Perrett D. et al.//Eur J Gastroenterol Hepatol.- 2000.-12(5).-P.497-503.

337. Urban T. et al. Oxidants and antioxidants. Biological effects and therapeutic perspectives/ Urban Т., Hurbain I., Urban M. et al.//Ann. Chir.-1995.-49(5).- P.427-434.