Фармако-токсикологическая характеристика препарата "Эмидонол" и оценка эффективности его применения при выращивании поросят тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.03, кандидат наук Легоцкая, Татьяна Николаевна

• Легоцкая, Татьяна Николаевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Легоцкая, Татьяна Николаевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Оксиданты

1.1.2. Активные формы кислорода и эндогенные источники их образования

1.1.3. Активные формы азота и эндогенные источники их образования

1.1.4. Оксиданты и экзогенные источники их образования

1.2. Антиоксиданты

1.2.1. Ферментные антиоксиданты

1.2.2. Неферментные антиоксиданты

1.3. Прооксиданты

1.4. Окислительный стресс

1.4.1. Повреждение ДНК

1.4.2. Повреждение белков

1.4.3. Повреждение липидов

1.5. Маркеры окислительного стресса

1.6. Антиоксидантны для ветеринарного применения в РФ

1.6.1. Патофизиологическое обоснование применения антиоксидантов для профилактики стрессов в животноводстве

1.6.2. Применение антиоксидантов для профилактики промышленного стресса и повышения иммунного ответа

1.6.3. Применение антиоксидантов для профилактики промышленного стресса и повышения продуктивности

1.6.4. Применение антиоксидантов для фармакокоррекции различных заболеваний

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.2. Материалы исследования

2.3. Методы исследования

2.3.1. Фармако-токсикологические исследования

2.3.2. Лабораторные исследования

2.3.3. Статистический анализ данных

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Токсикологическая характеристика Эмидонола

3.1.1. Острая токсичность

3.1.2. Кумулятивные свойства

3.1.3. Местно-раздражающее действие

3.1.4. Влияние на процессы перекисного окисления липидов

3.1.5. Генотоксические свойства

3.2. Фармакологические свойства Эмидонола

3.2.1. Влияние на организм поросят при отъеме

3.2.2. Влияние на организм поросят при вакцинации

3.3. Экономическая эффективность применения Эмидонола

4. ВЫВОДЫ

5. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

7. ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармако-токсикологическая характеристика препарата "Эмидонол" и оценка эффективности его применения при выращивании поросят»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

В последние годы приоритетными задачами животноводства являются: улучшение технологических процессов воспроизводства, выращивания и использования, повышение качества кормов, улучшение физиологического состояния животных и профилактика инфекционных и инвазионных болезней. Это позволяет повысить продуктивность сельскохозяйственных животных и обеспечить санитарно-эпидемиологическое благополучие населения (Постановление Правительства РФ от 14.07.2012 N 717 "О Государственной программе развития сельского хозяйства и регулирования рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия на 2013 - 2020 годы"; OIE. Animal Welfare: Global Issues, Trends and Challenges. Scientific and Technical Review, 2007; OIE. Animal Welfare: Focusing on the Future. Scientific and Technical Review, 2015). В связи с тем, что в современных и постоянно развивающихся условиях промышленного животноводства трудно соблюдать соответствующие высоким стандартам нормативные технологические требования, животные подвергаются стрессовым нагрузкам. Это приводит к снижению сопротивляемости организма и, как следствие, к возрастанию заболеваемости и снижению продуктивности (Устинов Д.А. Стресс-факторы в промышленном животноводстве. М. : Россельхозиздат, 1976; Grandin T. Assessment of stress during handling and transport. Journal of Animal Science, 1997; Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983). Поэтому в настоящее время поиск альтернатив для улучшения здоровья животных и повышения их продуктивности является актуальной задачей ветеринарии.

В связи с тем, что стрессовые нагрузки на организм животных неизбежно сопровождаются процессами перекисного окисления липидов, в ветеринарной практике широко применяют препараты, обладающие антиоксидантными, антигипоксантными и мембранопротекторными свойствами, как одно из составляющих комплексного подхода (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И.

Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972; Thomas C.E., Kalyanaraman B. Oxygen Radicals and the Disease Process. CRC Press, 1997). Поскольку естественные антиоксиданты не достаточно эффективны и во многих случаях теряют свою активность, не обеспечивая должного терапевтического действия, является актуальным применение синтетических антиоксидантов.

В настоящее время (по состоянию на четвертый квартал 2016) в государственном реестре лекарственных средств для ветеринарного применения зарегистрированы синтетические препараты, обладающие антиоксидантными свойствами. Однако большинство из них являются комбинированными кормовыми добавками, обладающими общеукрепляющими, общетонизирующими и слабыми антиоксидантными свойствами. Лишь небольшая часть препаратов относится к лекарственным средствам, обладающим ярко выраженными антиоксидантными, антигипоксантными и мембранопротекторными свойствами, и большинство из них не предназначены для применения продуктивным животным (по данным Государственного реестра лекарственных средств для ветеринарного применения). В связи с этим, всестороннее изучение фармако-токсикологических свойств новых антиоксидантных препаратов для применения продуктивным животным является актуальной и своевременной задачей ветеринарной фармакологии и токсикологии.

Степень разработанности темы

Фундаментальными трудами в области окислительного стресса являются работы Р. Гершман (1954) и Д. Харман (1956), в которых было показано токсическое воздействие кислорода в целом и отдельные оксидативные эффекты на различные компоненты живых систем. Дальнейшее развитие этой области пришлось на 60-е годы, когда И. Фридович и Д. Маккорд (1969) показали механизм утилизации свободных радикалов под действием супероксиддисмутазы. В связи с активным развитием инструментальных методов анализа на последующие два десятилетия пришлись масштабные исследования механизмов

воздействия активных форм кислорода на основные типы молекул живых организмов, в основном, липидов. Как следствие, были описаны природные системы антиоксидантной защиты Н. Портером (1980), Б. Вебером (1981), Ю.А. Владимировым (1970), А.И. Арчаковым (1971).

Изучением окислительного стресса, возникающего в результате стрессовых нагрузок и воздействием факторов внешней среды и сопровождающегося патологическими состояниями, занимались C.E. Thomas (1997), H. Sies (1997), B. Halliwell (2007) и другие ученые. Изучением развития стрессовых реакций организма занимались H. Selye (1955), Д.А. Устинов (1976), Д. Эверли (1985), T. Grandin (1997) и другие ученые.

Долгое время антиоксидантная терапия животных ограничивалась использованием витаминов, обладающих антиоксидантным эффектом. Со временем появились лекарственные ветеринарные препараты, однако большинство из них не предназначены для применения продуктивным животным.

Цели и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось изучение фармако-токсикологических свойств препарата Эмидонола и оценка эффективности его применения при выращивании поросят.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1. Изучить токсикологические свойства Эмидонола.

2. Установить влияние Эмидонола на процессы перекисного окисления липидов.

3. Оценить фармакологические эффекты Эмидонола при выращивании поросят в период технологического стресса.

4. Определить экономическую эффективность применения Эмидонола в условиях промышленного свиноводства.

Научная новизна

Изучены фармако-токсикологические свойства препарата Эмидонол. Впервые изучено влияние препарата на процессы липопероксидации и проведена оценка генотоксического действия на соматические клетки лабораторных животных. Установлена эффективность применения Эмидонола при выращивании поросят в период технологического стресса и показана его экономическая эффективность.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные результаты исследований расширяют и углубляют имеющиеся данные о влиянии процессов перекисного окисления липидов на организм животных. На основании результатов исследований доказана обоснованность применения препарата Эмидонол при выращивании поросят для профилактики технологического стресса и повышения поствакцинального иммунного ответа. Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре физиологии, фармакологии и токсикологии им. А.Н. Голикова и И.Е. Мозгова ФГБОУ ВО МГАВМиБ-МВА им. К.И.Скрябина.

Методология и методы исследования

Методологической основой работы явились труды отечественных и зарубежных специалистов в области изучения процессов перекисного окисления липидов, их вовлечения в патогенез болезней животных, а также влияние как природных, так и синтетических антиоксидантных препаратов на эти процессы в in vitro и in vivo условиях. Методология исследования определила целесообразность использования анализа и синтеза, как комплексного научного подхода, включающего изучение фармакологических и токсикологических свойств препарата на лабораторных и целевых видах животных, а также оценку информации, выявленной на различных стадиях анализа. Для выполнения поставленных задач определены токсические и рекомендуемые дозы препарата,

длительность его применения, проведена оценка безопасности применения. Объектом исследования были клинически здоровые лабораторные и целевые сельскохозяйственные животные. Предметом исследования было определение фармакологических и токсикологических свойств препарата «Эмидонол 5%», а также изучение эффективности его применения в ветеринарии.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

о Токсикологическая характеристика препарата Эмидонол; о Степень безвредности препарата Эмидонол;

о Фармакологические свойства препарата Эмидонол при выращивании поросят в период технологического стресса;

о Экономическая эффективность применения препарата Эмидонол при выращивании поросят в период технологического стресса.

Апробация результатов и степень достоверности

Область исследования соответствует научному направлению паспорта специальности классификации ВАК шифра специальности 06.02.03 -ветеринарная фармакология с токсикологией. Все исследования выполнены согласно нормативным актам, регламентирующим исследование безопасности и эффективности лекарственных средств в Российской Федерации. Система исследований лекарственного препарата включала в себя набор методов, комбинация которых является максимально информативной и соответствует единым требованиям по исследованию и регистрации ветеринарных препаратов в России. Лабораторные исследования проведены в сертифицированных ветеринарных лабораториях и федеральных государственных учреждениях, компетентных в области поставленных задач. Достоверность полученных результатов подтверждается согласованностью теоретических положений и

экспериментальных исследований. В работе использованы современные методы исследований и статистической обработки биологических данных.

Основные положения диссертации доложены, обсуждены и получили положительную оценку на международных научно-практических конференциях «Проблемы и пути развития ветеринарии высокотехнологичного животноводства» (Воронеж, 2015), «Фармакологические препараты в профилактике и лечении болезней животных» (Москва, 2016); на IV Международном конгрессе ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2016).

Личный вклад соискателя

Диссертационная работа выполнена непосредственно соискателем. Постановка целей и задач, исследования по изучению токсикологических и фармакологических свойств препарата «Эмидонол 5%», обработка полученных данных, определение выводов и их апробация на съездах и конференциях различного уровня выполнены автором самостоятельно.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 3 представлены в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ.

Объем и структура работы

Материалы диссертации изложены на 127 страницах машинописного текста и включают: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, выводы, список сокращений, приложения. Работа иллюстрирована 18 таблицами и 28 рисунками. Библиографический указатель содержит 215 источников литературы (83 отечественных и 132 зарубежных).

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Повреждающее действие реактивных форм кислорода (РФК), более распространённое название «активные формы кислорода» (АФК), на клетки организма животных и человека было отмечено в 50-х годах ХХ века, также было установлено их образование как в процессе нормального метаболизма кислорода [112, 199], так и в результате действия повреждающих агентов - ионизирующего излучения в присутствии кислорода [101, 105]. Однако механизмы токсического воздействия кислорода были неясны до публикации наблюдений Р. Гершман в 1954 году, в которой говорится о токсичности кислорода при высоком парциальном давлении, обусловленной частично восстановленными формами кислорода [128].

Большое количество исследований в области воздействия реактивных форм кислорода на биологические системы началось после публикации свободнорадикальной теории старения, предложенной Д. Харманом в 1950-х годах. Он предположил, что основным фактором, вызывающим повреждения клеточных и молекулярных структур, ведущих к патологическому изменению функционирования систем органов и организма в целом, могут быть свободные радикалы (СР) кислорода, которые постоянно образуются в клетках человека и животных при окислительных процессах энергетического обмена [140]. Дальнейший интерес к исследованиям вызвало открытие ферментативной активности супероксиддисмутазы (СОД) И. Фридовичем и Д. МакКордом в 1960-х годах [165], а также другие открытия, подтверждающие, что живые организмы не только адаптировались к воздействию свободных радикалов, но и развили многообразные механизмы их эффективного использования в различных физиологических функциях.

В низких и умеренных концентрациях свободные радикалы участвуют в биохимических и физиологических процессах организма, например: в клеточной противомикробной защите во время фагоцитоза и нетоза [114, 103], в клеточной сигнальной трансдукции [122], в поддержании клеточного гомеостаза во время

апоптоза [107] и во многих других процессах. Однако чрезмерное образование может приводить к дисбалансу между их выработкой и разрушением, вызывая окислительный [192] или нитрозирующий стресс [194]. Для поддержания гомеостаза в организме развита система защиты от окислительного и нитрозирующего стрессов - это соединения, обладающие антиоксидантной активностью, инактивирующие чрезмерно выработанные свободные радикалы. Но при интенсивном образовании СР, антиоксидантная система организма не справляется с предотвращением стресса. Это приводит к повреждению структур биологически важных клеточных макромолекул (нуклеиновых кислот, белков и липидов) и, как следствие, к повреждению или разрушению клеток и дальнейшему развитию патологических процессов [173].

1.1. Оксиданты

В биологических системах к оксидантам (или реактивным формам химических веществ) относят свободные радикальные и нерадикальные формы кислорода, азота, хлора, брома и липидов, ионы тяжелых металлов, пероксиды органического и неорганического происхождения и другие химические вещества, обладающие реакционной способностью окисления биологических структур [11, 136] (таблица 1). Выделяют эндогенные и экзогенные источники их образования.

Наиболее распространенными оксидантами в живых организмах являются СР. Свободными радикалами называют молекулы или молекулярные фрагменты, способные к независимому существованию и содержащие один или несколько неспаренных электронов на внешней электронной оболочке, что усиливает их реакционную способность [137]. К нерадикальным формам относят молекулы, ионы и производные азота, хлора и брома, способные окислять биологические структуры [136].

Таблица 1 - Некоторые оксиданты, образующиеся в живых системах

Свободные радикалы Не радикалы

Формула Название Формула Название

Активные формы тслорода (АФК)

О2" Супероксид анион Н2О2 Пероксид водорода

НО- Гидроксил радикал О21 Синглетный кислород

ноо- Гидропероксильный радикал ЯООН Гидроперекись алкилов

RO• Алкоксильный радикал 0Ш0С02~ Нитрозопероксикарбонат

Я02- Алкилдиоксил радикал Н0С1 а Гипохлорная кислота

СОэ" Карбонат анион радикал

Активные формы азота (АФА)

N0- Оксид азота N02+ Нитрил катион

N02 • Диоксид азота HN02 Азотистая кислота

N03 • Нитратный радикал N203 Азотистый ангидрид

0Ш0" Пероксинитрит

0Ш0Н Пероксиазотистая кислота

R00N0 Алкил пероксинитрит

Другие оксиданты

R• Алкильный радикал N02C1 а Хлорид нитрила

Тиильный радикал 0СГ а Гипохлорит анион

Семихинон радикал Н0Бг б Бромноватистая кислота

L•, L0•, L00• Липидные радикалы БгС1 а Хлорид брома

Примечание - а Часто относят к активным формам хлора; б часто относят к активным формам брома

1.1.2. Активные формы кислорода и эндогенные источники их образования

В аэробные организмы поступает молекулярный кислород. Кислород имеет два неспаренных электрона и является хорошим акцептором электронов и сильным окислителем, в результате чего способен окислять большинство органических молекул. Также участвовать в реакциях окисления способны метаболиты кислорода - АФК, образующиеся в результате неполного восстановления кислорода.

Оксиданты имеют непродолжительный период жизни, который, в основном, зависит от окислительно-восстановительного статуса клетки и рН среды. Но,

несмотря на короткий период полураспада, они способны вызывать серьезные повреждения и даже разрушения биологически важных макромолекул. Степень активности АФК и их токсический эффект зависят от продолжительности жизни, химического строения и от свойств среды, в которой происходит их взаимодействие с организмом (например от концентрации вещества, длительности экспозиции и пр.) [182].

Существует множество типов реактивных форм кислорода в живых системах. Наибольшее физиологическое значение в развитии окислительного стресса оказывают: супероксид анион (О2 ), пероксид водорода (Н2О2) и гидроксил радикал (НО^) [26].

а) Супероксид анион радикал. Его эндогенное образование происходит в органеллах и цитоплазме клеток в процессе многих ферментативных и неферментативных реакций. О2 имеет короткий период полураспада и малоактивен в водных растворах (около 10-6 секунд), однако, вырабатываясь в больших количествах, способен инициировать образование других реактивных форм кислорода [97].

Главным эндогенным источником образования О2 является дыхательная цепь переноса электронов (ЭТЦ), локализованная у эукариот на внутренней мембране митохондрий. В ходе окислительно-восстановительных реакций при переносе электронов через дыхательную цепь высвобождается энергия, используемая для синтеза аденозинтрифосфата (АТФ) [35]. Конечным акцептором электронов является молекулярный кислород, который восстанавливается до воды (Рисунок 1). Однако во время преобразования энергии около 1-3% электронов преждевременно высвобождаются из системы, подвергая кислород восстановлению с образованием соединений, имеющих неспаренный электрон. В результате молекулярный кислород восстанавливается в свободный радикал супероксид анион [157].

НАДФН + 2 02 О НАДФ+ + 2 О2-" + Н+ НАДН + Н+ О НАД+ + 2 Н+ + 2 ё

(а)

02'~ + 2 Н+ + 2 ё -> Н20 «— (б)

Рисунок 1 - Реакции образования АФК в дыхательной цепи переноса электронов; в окислительно-восстановительных реакциях восстановленный НАДН является донором электронов для дыхательной цепи переноса электронов, конечным акцептором которых является кислород (а); высвободившиеся электроны в присутствии НАДФН-оксидазы образуют супероксид анион радикал (б).

Также большое количество реактивных форм образуется на мембранах макрофагов и нейтрофилов для осуществления клеточной противомикробной защиты во время фагоцитоза и нетоза [103, 114]. Во время воспалительного процесса макрофаги и нейтрофилы мигрируют в очаг воспаления и вырабатывают многочисленные соединения, участвующие в бактериолизе. Во время фагоцитоза также активируется НАДФН-оксидаза, инициирующая образование большого количества супероксид анион радикала. Он вырабатывается в качестве сигнального вещества, чтобы под действием супероксиддисмутазы инициировать образование пероксида водорода и других РФК (Рисунок 2).

2 02'~ + 2 Н+ -> 02 + Н202

Рисунок 2 - Реакция образования пероксида водорода во время фагоцитоза под действием СОД.

б) Пероксид водорода. H2O2 является наиболее стабильной (период

-5

полураспада около 10- секунды) и менее реакционной формой, в сравнении с супероксид анион радикалом [182]. Является важной сигнальной молекулой в регуляции самых разнообразных биологических процессов. После его выработки на мембранах фагоцитов свободно диффундирует через плазматическую мембрану в цитоплазму клетки и используется при внутриклеточном кислород-зависимом фагоцитозе для синтеза АФК, обладающих высокой бактерицидной активностью [206].

Так, в активированных нейтрофилах пероксид используется в миелопероксидазной (МПО) реакции для образования гипохлорной и бромноватистой кислот (Рисунок 3) [201]. Хлорид считается основным галогенид-ионом, используемым МПО, бромид привлекает меньше внимания, поскольку его внеклеточная концентрация во много раз меньше. Однако как Н0С1, так и Н0Бг являются сильными окислителями и играют большую роль в фагоцитозе, они также способны взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами, белками и липидами макроорганизма, модифицируя и повреждая их структуру [127].

Н202 + СГ + Н+ ^ НОС1 + Н20 (а) Н202 + Вг" + Н+ -> НОВг + Н20 (б)

Рисунок 3 - Реакции образования из пероксида водорода и галогенидов гипохлорной кислоты (а) и бромноватистой кислоты (б), катализируемые МПО.

Еще одним источником продукции пероксида водорода являются пероксисомы клеток печени и почек. Они содержат оксидазы, использующие молекулярный кислород для отщепления атомов водорода от органических субстратов с образованием пероксида. Пероксид водорода является наиболее стабильной формой и ферменты пероксисом в его присутствии окисляют и обезвреживают многие токсические вещества, попадающие в кровоток [100]. Пероксисомы содержат каталазу, под действием которой Н202 разлагается на воду и молекулярный кислород (Рисунок 15), регулируя тем самым окислительно-восстановительное равновесие внутри клетки и концентрацию активных форм кислорода [136]. Однако при избыточном образовании, пероксид накапливается в клетке и окисляет SH-группы белков и ненасыщенные жирные кислоты (НЖК), повреждая их структуру.

Пероксид водорода участвует в образовании других РФК, например: гипохлорит аниона (0С1 ), синглетного кислорода (О21), гидроксил радикала (НО-) (Рисунок 4, 5) [137]. В результате подобных цепных реакций образования активных форм кислорода и их взаимодействия с биологическими структурами,

происходят множественные нарушениям мембран, гибель клеток и развитие патологических процессов.

H2O2 + Cl" ^ OCl" + H2O (а)

OCl" + H2O2 ^ Cl" + H2O + О21 (б)

H202 + 02'~ -> 02 + НО- + НО" (в)

Рисунок 4 - Реакции образования из пероксида водорода гипохлорит аниона (а) и синглетного кислорода (б), катализируемые МПО; и гидроксил радикала в реакции Габера-Вейса (в).

в) Гидроксил радикал. Практически не участвует в образовании других РФК, но обладает крайне высокой реактивной активностью. Имеет короткий период полураспада in vivo (около 10-9 секунды), поэтому мгновенно реагирует с любыми окисляемыми соединениями, находящимися в непосредственной близости к местам его образования [178]. Способен окислять полиненасыщенные мембранные липиды, образуя липидные гидроперекиси и индуцируя перекисное окисление липидов, что приводит к изменению свойств мембран клеток. Способен также повреждать нуклеиновые кислоты, инициируя разрыв связей в молекуле ДНК, вызывая повреждения генетического аппарата клетки. Окисляет белки, модифицируя их структуру, что приводит к изменению их свойств и функционирования.

Образуется при фагоцитозе, а также в цитоплазме клетки при взаимодействии пероксида водорода или супероксида анион радикала с ионами металлов переменной валентности (Fe2+, Cu2+). В организме железо транспортируется и депонируется в связанном с белками состоянии. Однако при развитии патологических процессов и окислительного стресса, избыток супероксид аниона, пероксида водорода и других окислителей приводит к разрушению железосодержащих белков и высвобождению железа, которое может участвовать в образовании АФК [139]. Так, в реакции Фентона ионы двухвалентных металлов окисляются пероксидом водорода до ионов

трехвалентных металлов с образованием гидроксил радикала. Далее, в реакции Габера-Вейса, образовавшиеся ионы трехвалентных металлов восстанавливаются супероксид анион радикалом до двухвалентных с образованием гидроксил радикала (Рисунок 5) [135, 149].

Me2+ + H2O2 ^ Me3+ + НО- + HO" (а)

Me3+ + О2-" ^ Me2+ + О2

(б)

Рисунок 5 - Реакция образования гидроксил радикала на примере двухвалентных металлов в процессе реакции Фентона (а), в процессе реакции Габера-Вейса (б).

Супероксид анион, пероксид водорода и гидроксил радикал являются продуктами последовательного одноэлектронного восстановления молекулярного кислорода (Рисунок 6). Образуются в организме в качестве сигнальных молекул для регуляции биологических процессов, а при развитии патологических состояний способны повреждать компоненты клеточных структур. Несмотря на то, что их концентрация в клетках мала, они играют важную роль в физиологических процессах организма.

со о

Молекулярный кислород

- 1/2

Супероксид анион радикал

О;

CV"

-1 -1 -2

Пероксид Гидроксил Вода

водорода радикал

Н202 НО- Н20

этц

НАДФН-оксидаза

Полиненасыщенные жирные кислоты

СОД Реакция

Фентона

Каталаза, Глутатиан пероксидаза

Н20

Вода

Рисунок 6 - Последовательное восстановление молекулярного кислорода до воды с промежуточным образованием активных форм кислорода ^.Р. Biemet в модификации, 97]. СО - степень окисления кислорода; ЭТЦ - цепь переноса электронов; СОД - супероксиддисмутаза.

1.1.3. Активные формы азота и эндогенные источники их образования

Азот является жизненно необходимым для животных и растений элементом. Соединения, в состав которых входит азот, наряду с АФК также участвуют в реакциях окисления биологических структур. Поэтому, помимо активных форм кислорода большое внимание уделяется и активным формам азота. АФА также вырабатываются в качестве сигнальных веществ, участвуют в биохимических и физиологических процессах организма в нормальных и патологических условия. Биологический и медицинский интерес представляют несколько форм АФА: оксид азота (N0-), пероксинитрит ^N00 ) и диоксид азота С^^) [106].

а) Оксид азота (II). Содержит один неспаренный электрон на внешней электронной оболочке, участвуя в химических реакциях как в роли донора, так и в роли акцептора, являясь высокореактивным СР [156]. Обладает относительно продолжительным периодом жизни (около нескольких секунд) и легко проходит через биологические мембраны.

Образуется в организме с помощью изоферментов NO-синтаз, которые катализируют окисление L-аргинина с образованием оксида азота [155]. Нейрональная и эндотелиальная NO-синтазы вырабатывают в низких концентрациях NO в качестве вторичного посредника передачи сигналов; он активирует фермент гуанилатциклазу, влияющий на регуляцию кровяного давления, нейротрансмиссию, реализацию иммунного ответа. Индуцируемая NO-синтаза образует оксид азота в высоких концентрациях, обладающий антимикробным и цитотоксическим эффектом, вырабатываясь фагоцитирующими клетками [95, 196]. Способен ингибировать утилизацию H2O2, повышая активность макрофагов [151]. Поэтому баланс между защитным и токсическим воздействием оксида азота зависит от его концентрации и наличия других свободных радикалов, способных с ним реагировать.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Легоцкая, Татьяна Николаевна, 2017 год

6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Аджиев Д.Д. Исследование продуктов перекисного окисления липидов, неферментативной и ферментативной антиоксидантной системы в возрастной динамике самцов кроликов // Вестник ВОГиС. 2010. Т. 14, № 4. С. 674-684.

2 Азарнова Т.О. [и др.]. Профилактика промышленных стрессов и критических периодов развития зародышей кур яичных и мясоячных кроссов // Ветеринария. 2014. Т. 11. С. 50-53.

3 Азарнова Т.О. [и др.]. Селен-актив для профилактики оксидативного стресса у эмбрионов и молодняка кур // Ветеринария. 2016.Т. 6. С. 56-59.

4 Альбертс Б. [и др.]. Молекулярная биолгия клетки. В 3-х томах. Том 3. Перевод с английского. М.: Мир, 1994. 504 с.

5 Аношина О.Г. Клинико-фармокологический анализ ветеринарного фармацевтического рынка сердечно-сосудистых лекарственных средств и перспективы его развития // Международный научно-исследовательский журнал. 2014. Vol. 22, № 3-4. P. 122-124.

6 Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами. Воронеж: Издательство Воронежского Государственного Университета. 2000. 296 с.

7 Бекиш В.Я., Дурнев А.Д. Генотоксическое и цитотоксическое воздействия метаболитов личинок токсокар на соматические и генеративные клетки хозяина // Вестник ВГМУ. 2004. Т. 3, № 4. С. 85-89.

8 Беспятых О.Ю. Реакция лисиц разных генотипов на введение per os антиоксиданта янтарной кислоты // Вестник ВОГиС. 2009. Т. 13, № 3. С. 639-646.

9 Бойко Т.В. [и др.]. Антигипоксанты в ветеринарии: характеристика и перспективы применения // Концепт. Современные научные исследования. 2015. № 3. С. 1-6.

10 Бякова О.В., Пилип Л.В. Перекисное окисление липидов лошадей при

кишечных нематодозах // Вестник ветеринарии. 2012. Т. 63, № 4. С. 28-31.

11 Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252 с.

12 Внутренние болезни животных. Учебник для вузов // Под общ. ред. Г.Г. Щербакова и А.В. Коробова, Спб.:Лань, 2002. 736 с.

13 Воронина Т.А. Мексидол: спектр фармокологических эффектов // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2012. Т. 112, № 12. С. 86-90.

14 Востроилова Г.А. [и др]. Биохимический и иммунный статус поросят при отъемном стрессе и его фармакокоррекция аминоселетоном // Ветеринарная патология. 2015. Т. 1, № 51. С. 69-75.

15 Геворгян А.Ш. Перекисное окисление липидов в печени и легких животных при эхиинококкозе // Российский паразитологический журнал. 2012. Т. 3. С. 74-79.

16 Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика, 1998. 459 с.

17 Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983. 240 с.

18 Данилевская Н.В. Влияние антиоксиданта «Эмидонол» на биохимические показатели сыворотки крови при нарушениях метаболизма у кошек // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2014. № 2. С. 19-23.

19 Дегтярев Д.В. [и др.]. Влияние органических и неорганических соединений селена на привесы и показатели антиоксидантной защиты у телят // Ветеринарная патология. 2003. Т. 3. С. 70-71.

20 Дельцов А.А. Актуальность применения антиоксидантов на фоне ферротерапии // Материалы IV съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России: Актуальные вопросы ветеринарной фармакологии, токсикологии и фармации. Воронеж: Истоки, 2013. С. 188-191.

21 Дементьева Е.С. Физиолого-биохимический статус у коров с задержанием

последа при использовании в лечении антиоксидантна "Эмицидин" // Вестник Орловского государственного аграрного университета. 2011. Т. 28, № 1. С. 63-66.

22 Дементьева Т.А. Динамика активности а-амилазы в крови свиней // Успехи современного естествознания. 2004. Т. 1. С. 65-66.

23 Дерюгина А.В. [и др]. Методы изучения стрессовых и адаптационных реакций организма по показателям системы крови. Нижний Новгород: Издательство Нижегородского госуниверситета, 2010. 25 с.

24 Енгашев С.В. [и др.]. Методические положения по лечению и профилактике смешанных инвазий свиней в товарных, фермерских, индивидуальных хозяйствах // Российский паразитологический журнал. 2014. Т. 2. С. 121-125.

25 Енгашева Е.С. [и др.]. Материалы V Международной научно-практической конференции. Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения // Острая и субхроническая токсичность препарата Эмидонол 10%. 2013. С. 57-61.

26 Жалдыбин В.В., Прудников В.С. Показатели неспецифического иммунитета у свиней, вакцинированных против классической чумы в условиях применения иммуностимулятора // Ветеринарная патология. 2003. Т. 5, № 2. С. 69-70.

27 Журавель Н.А., Журавель В.В. Показатели обмена веществ в организме поросят на фоне действия стресс-факторов // Ученые записки Казанской Государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана. 2011. Т. 206. С. 63-67.

28 Зиновьева В.Н., Островский О.В. Свободно-радикальное окисление ДНК и его биомаркер окисленный гуанозин (8-oxodG) // Вопросы медицинской химии. 2002. Т. 48, № 5. С. 419-431.

29 Зулев Г.С. Изменение концентрации общих липидов в крови телят под влиянием разных доз препарата "Эмицидин" // Вестник Орловского государственного аграрного университета. 2010. Т. 23, № 2. С. 28-30.

30 Измеров Н.В., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии

промышленных ядов при однократном воздействии. М.: Медицина, 1977. 240 с.

31 Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике. В 2 томах. Том 1. Минск, Беларусь, 2002. 494 с.

32 Касанова Н.Р. Влияние антиоксиданта Эндокс на санитарно-химическое качество кормосмеси и продуктивность молодняка норок // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2010. Т. 202. С. 101-105.

33 Катанаев В.Л. Внутриклеточная передача сигнала при хемотаксисе нейтрофилов // Биохимия. 2001. Т. 66, № 4. С. 437-456.

34 Клечковский М. [и др.]. Зависимость между острофазовым ответом, оксидативным статусом и маститом у коров // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2012. Т. 3. С. 46-51.

35 Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная Биохимия / М.: Мир. 2009. 472 с.

36 Кочиш И.И. [и др.]. Адаптогенный свойства глицината цинка при вакцинальных стрессах у цыплят // Материалы XVII Международной конференции ВНАП: Инновационные разработки и их освоение в промышленном птицеводстве. г. Сергиев Посад, 2012. С. 538-540.

37 Кочиш И.И., Определенкова Н.П., Курмакаева Т.В. Перспективы использования Эмидонола при выращивании цыплят-бройлеров // Материалы XVIII Международной конференции ВНАП: Инновационное обеспечение яичного и мясного птицеводства России. г. Сергиев Посад, 2015. С. 472-474.

38 Кузнецов Ю.Е., Никонова Э.Б., Новиков Д.Д. Дегельминтизация песцов и енотовидных собак на фоне антиоксидантна Эминол // Теория и практика паразитарных болезней животных. 2013. Т. 14. С. 193-196.

39 Кузьмин В.А., Соколова Л.Н., Сонин П.Ф. Эпизоотология с микробиологией. 1-е изд. М: Академия, 2005. 432 с.

40 Кукес В.Г., Сычев Д.А. Клиническая фармакология: Учебник. 5-е изд.. испр.

и доп. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2015. 1024 с.

41 Лазоренко Д.С. Влияние условий содержания на продуктивность качества коров // Материалы международной научно-практической конференции: Разработка и внедрение новых технологий получения и переработки продукции животноводства. 2014. С. 92-96.

42 Ласло П. Логика органического синтеза. В 2-х томах. Т. 2. Пер. с франц. М.: Мир, 1998. 200 с.

43 Лекарственные средства для медицинского применения. Исследование генотоксичности и интерпретация полученных данных. ГОСТ Р 57130-2016. Утвержден и введен в действие 10.10.2016. Стандартинформ, 2016.

44 Липатова О.А. Пути повышения резистентности организма поросят с использованием биологически активных препаратов // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2013. Т. 44, № 6. С. 83-85.

45 Любин Н.А., Любина Е.Н. Взаимосвязь между интенсивностью процессов перекисного окисления липидов, активностью антиоксидантной системы защиты и иммунным статусом организма поросят на фоне применения препаратов бета-каротина // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной акадении. 2014. Т. 4, № 28. С. 59-63.

46 Максимов Г.В., Ленкова Н.В. Система антиоксидантной защиты организма в зависимости от стресс-реакции, возраста и породы свиней // Ветеринарная патология. 2010. Т. 35, № 4. С. 59-61.

47 Машковский М.Д. Лекарственные средства. 16-е издан., перераб., испр. и доп. М.: Новая волна, 2012. 1216 с.

48 Медведева М.А. Клиническая ветеринарная лабораторная диагностика: Справочник для ветеринарных врачей. М.: Аквариум-Принт, 2008. 416 с.

49 Медведь Л.И., Каган Ю.С., Спыну Е.И. Пестициды и проблемы здравоохранения // Журнал ВХО им. Д.И. Менделеева. 1968. Т. 13, № 3. С. 263-270.

50 Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий, утв. министерством сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации. Составители: Шатохин Ю.Е. [и др.] // М.: МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 1997. С. 36.

51 Мифтахутдинов А.В. Экспериментальные подходы к диагностике стрессов в птицеводстве // Сельскохозяйственная биология. 2014. № 2. С. 20-30.

52 Наследов А.Д. Математические методы психологического исследования. Анализ и интерпретация данных. Учебное пособие. Спб.: Речь, 2004. 392 с.

53 Некрасов Э.В. Методы анализа перекисного окисления липидов в медико-биологических исследованиях // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2012. Т. 46. С. 98-108.

54 Никитин И.Н., Апалькин В.А. Организация и экономика ветеринарного дела: Учебник. 5-е изд., перераб. и доп. М.: КолосС, 2006. 368 с.

55 Пахмутов И.А., Осокин О.А., Скворцов В.Н. Коррекция окислительного стресса и эндогенной интоксикации при комплексной химиотерапии дизентерии свиней // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2010. Т. 201. С. 306-311.

56 Постановление Правительства РФ от 14.07.2012 N 717 О Государственной программе развития сельского хозяйства и регулирования рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия на 2013 - 2020 годы.

57 Приказ Минздрава СССР № 755 "О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных" СССР, 1977.

58 Пронина Н.В. [и др.]. Коррекция окислительного стресса у клеточных пушных зверей // Современные проблемы природопользования, охотоведения и звероводства. 2012. Т. 1. С. 323-324.

59 Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.

60 Смирнов А.М., Дорожкин В.И. Научно-методологические аспекты исследования токсических свойств фармакологических лекарственных средств для животных. М., 2008. 120 с.

61 Степанова И. Методы выявления окислительного стресса у крупного рогатого скота // Главный зоотехник. 2009. Т. 2. С. 55-58.

62 Сурай П., Фисинин В.И. Природные антиоксиданты в эмбриогенезе кур и защита от стрессов в постнатальном развитии // Сельскохозяйственная биология. 2013. Т. 2. С. 3-18.

63 Тарасова Е.Ю., Коростелева В.П., ЯмашевТ.А. Теоретическое обоснование применения антиоксиданта "Мексидол" в качестве средства лечения микотоксикоза // Вестник Казанского технологиечского университета. 2014. Т. 17, № 2. С. 215-216.

64 Тарасова Е.Ю., Тремасов М.Я. Применение антиоксиданта, энтеросорбента и иммуномодулятора при микотоксикозах свиней // Вестник ветеринарии. 2012. Т. 63, № 4. С. 2.

65 Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов: МУ 1.2.2520-09 // Бюллетень нормативных и методических документов Госсанэпиднадзора. Т. 38 № 4. 2009 С. 117-143.

66 Трошина Т.А. [и др.]. Антиоксиданты - в рационы пушных зверей // Материалы Всероссийской научно-практической конференции: Научный потенциал - современному АПК. Ижевск, 2009. С. 147-149.

67 Тухфатова Р.Ф. Применение антиоксидантного препарата в комплексной терапии диспепсии телят // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2013. Т. 4. С. 25-26.

68 Тюркина О.В. Сравнительная эффективность применения антиоксидантов в яичном птицеводстве // Зоотехния. 2008. Т. 10. С. 20-23.

69 Тян Е.А. Биохимический статус крупной белой породы Западной Сибири // Успехи современного естествознания. 2004. Т. 6. С. 21-24.

70 Устинов Д.А. Методические рекомендации по определению возникновения

и развития стрессов у поросят с помощью эозиофильного теста. Дубровицы: ВИЖ, 1978. 25 с.

71 Устинов Д.А. Стресс-факторы в промышленном животноводстве. М.: Россельхозиздат, 1976. 166 с.

72 Учасов Д.С. [и др.]. Профилактика нарушений в оксидантно-антиоксидантной системе у сельскохозяйственных животных // Фундаментальные исследования. 2013. № 10. С. 584-588.

73 Федеральный закон от 12.04.2010 Ш1-ФЗ "Об обращении лекарственных средств"

74 Фисинин В.И., Сурай П. Иммунитет в современном животноводстве и птицеводстве: от теории к практике иммуномодуляции // Птицеводство. 2013. № 5. С. 4-10.

75 Фисинин В.И., Сурай П. Современные методы борьбы со стрессами в птицеводстве: от антиоксидантов к витагенам // Сельскохозяйственная биология. 2012. Т. 4. С. 3-13.

76 Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под общей редакцией Р.У. Хабриева. 2-изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 2005. 829 с.

77 Харкевич Д.А. Фармакология. 10-е изд. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010. 908 с.

78 Черепахина Л.А. Санация вымени сухостойных коров и профилактика диарейного синдрома новорожденных телят // Вестник Орловского государственного аграрного университета. 2011. Т. 28, № 1. С. 61-63.

79 Шатилов А.В. Терапевтическая эффективность эмицидина при лечении лошадей с хроническими заболеваниями легких // Ветеринарная патология. 2008. Т. 2. С. 117-119.

80 Шебанин П.А. Влияние технологических факторов на формирование мясной продуктивности свиней // Сборник материалов XXII Международной научно-практической конференции: Научный фактор в стратегии инновационного развития свиноводства. Гродно: ГГАУ, 2015. С. 453-457.

81 Шейко И.П., Смирнов B.C. Свиноводство: Учебник. Минск: Новое знание, 2005. 384 с.

82 Эверли Д.С., Розенфельд Р. Стресс: природа и лечение. Пер с англ. М.: Медицина, 1985. 224 с.

83 Ярован Н.И. [и др.]. Профилактика нарушений физиолго-биохимического статуса у высокопрдуктивных коров в условиях промышленного содержания // Вестник Орловского государственного аграрного университета. 2012. Т. 34, № 1. С. 98-101.

84 Anderson R. The immunostimulatory, antiinflammatory and anti-allergic properties of ascorbate. // Adv. Nutr. Res. 1984. Vol. 6. P. 19-45.

85 Andreadis A. [et al]. Oxidative and nitrosative events in asthma // Free Radic. Biol. Med. 2003. Vol. 35, № 3. P. 213-225.

86 Arthur J.R. The glutathione peroxidases. // Cell. Mol. Life Sci. 2000. Vol. 57, № 13-14. P. 1825-1835.

87 Asami S. Cigarette smoking induces an increase in oxidative DNA damage, 8-hydroxydeoxyguanosine, in a central site of the human lung // Carcinogenesis. 1997. Vol. 18, № 9. P. 1763-1766.

88 Augustyniak A. [et al]. Natural and synthetic antioxidants: An updated overview // Free Radic. Res. 2010. Vol. 44, № 10. P. 1216-1262.

89 Avellini L., Chiaradia E., Gaiti A. Effect of exercise training, selenium and vitamin E on some free radical scavengers in horses (Equus caballus) // Comp. Biochem. Physiol. Part B Biochem. Mol. Biol. 1999. Vol. 123, № 2. P. 147-154.

90 Bajpayee M. [et al]. Comet assay responses in human lymphocytes are not influenced by the menstrual cycle: a study in healthy Indian females // Mutat. Res. Toxicol. Environ. Mutagen. 2005. Vol. 565, № 2. P. 163-172.

91 Barbe F., Sacy A., Chevaux E. Effect of antioxidant supplementation to the sows at peripartum on piglets survival at birth // 23rd International Pig Veterinary Society Congress IPVS. Cancun, Mexico, 2014. P. 200.

92 Bast A., Haenen G.R.M.M. Ten misconceptions about antioxidants // Trends

Pharmacol. Sci. Elsevier Ltd, 2013. Vol. 34, № 8. P. 430-436.

93 Bast A., Haenen G.R.M.M., Doelman C.J.A. Oxidants and antioxidants: State of the art // Am. J. Med. 1991. Vol. 91, № 3. P. S2-S13.

94 Beckman J.S., Koppenol W.H. Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the good, the bad, and ugly. // Am. J. Physiol. 1996. Vol. 271, № 5 Pt 1. P. C1424-C1437.

95 Bergendi L. et al. Chemistry, physiology and pathology of free radicals // Life Sci. 1999. Vol. 65, № 18-19. P. 1865-1874.

96 Biaglow J.E., Mitchell J.B., Held K. The importance of peroxide and superoxide in the X-ray response // Int. J. Radiat. Oncol. 1992. Vol. 22, № 4. P. 665-669.

97 Bienert G.P., Schjoerring J.K., Jahn T.P. Membrane transport of hydrogen peroxide // Biochim. Biophys. Acta. 2006. Vol. 1758, № 8. P. 994-1003.

98 Birben E. [et al]. Oxidative Stress and Antioxidant Defense // World Allergy Organ. J. 2012. Vol. 5, № 1. P. 9-19.

99 Blalock J.E. A molecular basis for bidirectional communication between the immune and neuroendocrine systems // Physiol. Rev. 1989. Vol. 69, № 1. P. 1-32.

100 Bonekamp N.A. et al. Reactive oxygen species and peroxisomes: Struggling for balance // BioFactors. 2009. Vol. 35, № 4. P. 346-355.

101 Bonet-Maury P. Hydrogen Peroxide Formation in Water Exposed to Ionizing Radiations // Br. J. Radiol. 1951. Vol. 24, № 284. P. 422-428.

102 Brambilla D. [et al]. The role of antioxidant supplement in immune system, neoplastic, and neurodegenerative disorders: a point of view for an assessment of the risk/benefit profile // Nutr. J. 2008. Vol. 7, № 1. P. 9.

103 Brinkmann V. Neutrophil Extracellular Traps Kill Bacteria // Science. 2004. Vol. 303, № 5663. P. 1532-1535.

104 Bunn H.F., Poyton R.O. Oxygen sensing and molecular adaptation to hypoxia. // Physiol. Rev. 1996. Vol. 76, № 3. P. 839-885.

105 Burton M. Elementary Processes in the Radiation Chemistry of Water and

Implications for Radiobiology // Br. J. Radiol. 1951. Vol. 24, № 284. P. 416-422.

106 Carr A.C., McCall M.R., Frei B. Oxidation of LDL by myeloperoxidase and reactive nitrogen species: reaction pathways and antioxidant protection // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2000. Vol. 20, № 7. P. 1716-1723.

107 Casares C. et al. Reactive oxygen species in apoptosis induced by cisplatin: review of physiopathological mechanisms in animal models // Eur. Arch. Oto-Rhino-Laryngology. 2012. Vol. 269, № 12. P. 2455-2459.

108 Center S.A. Antioxidants in Liver Disease: A focus on thiol supplementation // Proceedings of the Wsava Congress. Prague, Czech Republic, 2006. P. 423-426.

109 Champlain J. [et al]. Oxidative Stress in Hypertension // Clin. Exp. Hypertens. 2004. Vol. 26, № 7-8. P. 593-601.

110 Comhair S.A.A., Thomassen M.J., Erzurum S.C. Differential Induction of Extracellular Glutathione Peroxidase and Nitric Oxide Synthase 2 in Airways of Healthy Individuals Exposed to 100% O 2 or Cigarette Smoke // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2000. Vol. 23, № 3. P. 350-354.

111 Council Directive on the approximation of laws, regulations and administrative provisions of the Member States regarding the protection of animals used for experimental and other scientific purposes (86/609/EEC). 1986.

112 Daniels M., Scholes G., Weiss J. "After-effect" in Aqueous Solutions of Deoxyribonucleic Acid irradiated with X-Rays // Nature. 1953. Vol. 171, № 4365. P. 1153-1154.

113 Di Mascio P., Murphy M.E., Sies H. Antioxidant defense systems: The role of carotenoids, tocopherols, and thiols // American Journal of Clinical Nutrition. 1991. Vol. 53, № 1 SUPPL.

114 Dröge W. Free Radicals in the Physiological Control of Cell Function // Physiol. Rev. 2002. Vol. 82, № 1. P. 47-95.

115 Duarte T.L., Lunec J. Part of the Series: From Dietary Antioxidants to Regulators in Cellular Signalling and Gene Expression Review: When is an antioxidant not an antioxidant? A review of novel actions and reactions of vitamin C // Free

Radic. Res. 2005. Vol. 39, № 7. P. 671-686.

116 Duez P. [et al]. Statistics of the Comet assay: a key to discriminate between genotoxic effects // Mutagenesis. 2003. Vol. 18, № 2. P. 159-166.

117 Dündar Y., Asian R. Antioxidative Stress // East. J. Med. 2000. Vol. 5, № 2. P. 45-47.

118 Esterbauer H., Cheeseman K.H. Oxygen Radicals in Biological Systems Part B: Oxygen Radicals and Antioxidants // Methods Enzymol. 1990. Vol. 186, № 1989. P. 407-421.

119 Etchichury M., Gobesso A.A.O. Effects of intravenous supplementation with vitamin E and selenium in clinic, hematic and serum parametres of endurance horses // 9th International Congress of World Equine Veterinary Association. Marrakech, Morocco, 2006. P. 309-310.

120 European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes // European Treaty Series. European Union, 1986.

121 Evans M.D., Dizdaroglu M., Cooke M.S. Oxidative DNA damage and disease: induction, repair and significance // Mutat. Res. Mutat. Res. 2004. Vol. 567, № 1. P. 1-61.

122 Finkel T. Oxygen radicals and signaling // Curr. Opin. Cell Biol. 1998. Vol. 10, № 2. P. 248-253.

123 Foltea G. [et al]. Determination of drug toxicity in animals // Experimental model in rodents:From concepts to troubleshooting / ed. Dimofte G., Lliescu R. "Gr.T.Popa," 2013. P. 231-260.

124 Fontaine M. [et al]. Studies on vitamin E and selenium deficiency in young pigs // Can. J. Vet. Res. 1977. Vol. 41, № 1. P. 41-51.

125 Galaris D. [et al]. Mechanisms of reoxygenation injury in myocardial infarction: Implications of a myoglobin redox cycle // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. Vol. 160, № 3. P. 1162-1168.

126 Games P.A., Keselman H.J., Clinch J.J. Tests for homogeneity of variance in

factorial designs // Psychol. Bull. 1979. Vol. 86, № 5. P. 978-984.

127 Gaut J.P. et al. Neutrophils employ the myeloperoxidase system to generate antimicrobial brominating and chlorinating oxidants during sepsis // Proc. Natl. Acad. Sci. 2001. Vol. 98, № 21. P. 11961-11966.

128 Gerschman R. et al. Oxygen Poisoning and X-irradiation: A Mechanism in Common // Science. 1954. Vol. 119, № 3097. P. 623-626.

129 Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS). New York and Geneva: United nations, 2013.

130 Godyn D. [et al]. Diagnostics of iron deficiency anaemia in piglets in the early postnatal period - a review // Anim. Sci. Pap. Reports. 2016. Vol. 34, № 4. P. 307318.

131 Graham J.E., Christian L.M., Kiecolt-Glaser J.K. Stress, Age, and Immune Function: Toward a Lifespan Approach // J. Behav. Med. 2006. Vol. 29, № 4. P. 389-400.

132 Grandin T. Assessment of stress during handling and transport // J. Anim. Sci. 1997. Vol. 75, № 1. P. 249-257.

133 Gueraud F. [et al]. Chemistry and biochemistry of lipid peroxidation products // Free Radic. Res. 2010. Vol. 44, № 10. P. 1098-1124.

134 Guidelines for the testing of chemicals: Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents // Drug and chemical toxicology. OECD Publishing, 2008. Vol. 34, № 1. P. 13.

135 Haber F., Weiss J. The Catalytic Decomposition of Hydrogen Peroxide by Iron Salts // Proc. R. Soc. A Math. Phys. Eng. Sci. 1934. Vol. 147, № 861. P. 332-351.

136 Halliwell B. Reactive Species and Antioxidants. Redox Biology Is a Fundamental Theme of Aerobic Life // Plant Physiol. 2006. Vol. 141, № 2. P. 312-322.

137 Halliwell B., Gutteridge J. Free Radicals in Biology and Medicine. 4th ed. Oxford University Press, 2007. 888 p.

138 Handelman G.J. The evolving role of carotenoids in human biochemistry //

Nutrition. 2001. Vol. 17, № 10. P. 818-822.

139 Harel S., Salan M.A., Kanner J. Iron Release from Metmyoglobin, Methaemoglobin and Cytochrome C by A System Generating Hydrogen Peroxide // Free Radic. Res. Commun. 1988. Vol. 5, № 1. P. 11-19.

140 Harman D. Aging: A Theory Based on Free Radical and Radiation Chemistry // J. Gerontol. 1956. Vol. 11, № 3. P. 298-300.

141 Hayes J.D., McLellan L.I. Glutathione and glutathione-dependent enzymes represent a co-ordinately regulated defence against oxidative stress // Free Radic. Res. 1999. Vol. 31, № 4. P. 273-300.

142 Hiltermann J.T.N. [et al]. Ozone-induced inflammation assessed in sputum and bronchial lavage fluid from asthmatics: A new noninvasive tool in epidemiologic studies on air pollution and asthma // Free Radic. Biol. Med. 1999. Vol. 27, № 1112. P. 1448-1454.

143 Jackson P.G.G., Cockcroft P.D. Appendix 2: Laboratory Reference Values: Haematology // Clinical Examination of Farm Animals / Oxford, UK: Blackwell Science Ltd., 2002. P. 302-302.

144 Jackson P.G.G., Cockcroft P.D. Appendix 3: Laboratory Reference Values: Biochemistry // Clinical Examination of Farm Animals. Oxford, UK: Blackwell Science Ltd., 2002. P. 303-305.

145 Janeen Junaid. Animal Welfare: Focusing on the Future. Scientific and Technical Review, 33 (1). 2015. Canadian Veterinary Journal. 2015. Vol. 56, № 10. P. 1048.

146 Johnson E.O. [et al]. Mechanisms of stress: A dynamic overview of hormonal and behavioral homeostasis // Neurosci. Biobehav. Rev. 1992. Vol. 16, № 2. P. 115130.

147 Jose Lopez. Animal Welfare: Global Issues, Trends and Challenges. Scientific and Technical Review, Vol. 24 (2). Canadian Veterinary Journal. 2007. Vol. 48, № 11. P. 1163-1164.

148 Kanfer S., Turro N.J. Reactive Forms of Oxygen // Oxygen and Living Processes / ed. Gilbert L.D. New York: Springer, 1981. P. 47-64.

149 Kehrer J.P. The Haber-Weiss reaction and mechanisms of toxicity // Toxicology. 2000. Vol. 149, № 1. P. 43-50.

150 Kelly F.J., Mudway I.S. Protein oxidation at the air-lung interface // Amino Acids. 2003. Vol. 25, № 3-4. P. 375-396.

151 Kim Y.S., Han S. Superoxide Reactivates Nitric Oxide-Inhibited Catalase // Biol. Chem. 2000. Vol. 381, № 12. P. 1269-1271.

152 Kim-Shapiro D.B. Unraveling the Reactions of Nitric Oxide, Nitrite, and Hemoglobin in Physiology and Therapeutics // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2006. Vol. 26, № 4. P. 697-705.

153 Kiremidjian-Schumacher L. [et al]. Supplementation with selenium and human immune cell functions. II. Effect on cytotoxic lymphocytes and natural killer cells. // Biol. Trace Elem. Res. Vol. 41, № 1-2. P. 115-127.

154 Knight J.A. Review: Free radicals, antioxidants, and the immune system // Ann. Clin. Lab. Sci. 2000. Vol. 30, № 2. P. 145-158.

155 Knowles R.G., Moncada S. Nitric oxide synthases in mammals // Biochem. J. 1994. Vol. 298, № 2. P. 249-258.

156 Koshland D. The molecule of the year // Science. 1992. Vol. 258, № 5090. P. 1861.

157 Kovacic P. [et al]. Mechanism of Mitochondrial Uncouplers, Inhibitors, and Toxins: Focus on Electron Transfer, Free Radicals and Structure-Activity Relationships // Current Medicinal Chemistry. Bentham Science, 2005. P. 26012623.

158 Lessard M. [et al]. Humoral and cellular immune responses of piglets after castration at different ages // Can. J. Anim. Sci. 2002. Vol. 82, № 4. P. 519-526.

159 Levene H. Robust tests for equality of variances // Contributions to Probability and Statistics: Essays in Honor of Harold Hotelling / ed. Olkin I. et al. Stanford University Press, 1960. P. 278-292.

160 Lindinger M.I., Pearson W. Ergogenics & supplements for performance horses: recent innovations // European equine health & nutrition congress. Bruges,

Belgium, 2015. P. 93-109.

161 Lorenzo Y. [et al]. The comet assay, DNA damage, DNA repair and cytotoxicity: hedgehogs are not always dead // Mutagenesis. 2013. Vol. 28, № 4. P. 427-432.

162 Lovell D.P., Omori T. Statistical issues in the use of the comet assay // Mutagenesis. 2008. Vol. 23, № 3. P. 171-182.

163 Masur H., Murray H.W., Jones T.C. Effect of hydrocortisone on macrophage response to lymphokine // Infect. Immun. 1982. Vol. 35, № 2. P. 709-714.

164 Matsui T. Vitamin C Nutrition in Cattle // Asian-Australasian J. Anim. Sci. 2012. Vol. 25, № 5. P. 597-605.

165 McCord J.M., Fridovich I. Superoxide dismutase. An enzymic function for erythrocuprein (hemocuprein). // J. Biol. Chem. 1969. Vol. 244, № 22. P. 60496055.

166 Merenyi G., Lind J. Free Radical Formation in the Peroxynitrous Acid (ONOOH)/Peroxynitrite (ONOO - ) System // Chem. Res. Toxicol. 1998. Vol. 11, № 4. P. 243-246.

167 Miller D. Transition metals as catalysts of "autoxidation" reactions // Free Radic. Biol. Med. 1990. Vol. 8, № 1. P. 95-108.

168 Monti G.E.[ et al]. Evaluation of a new antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of bovine leukemia virus infection in dairy cattle. // J. Vet. Diagn. Invest. 2005. Vol. 17, № 5. P. 451-457.

169 Morton D.B. Vaccines and animal welfare. // Rev. Sci. Tech. 2007. Vol. 26, № 1. P. 157-163.

170 Muller F. The nature and mechanism of superoxide production by the electron transport chain: Its relevance to aging // AGE J. Am. Aging Assoc. 2000. Vol. 23, № 4. P. 227-253.

171 Nackerdien Z. [et al]. Chemical nature of DNA-protein cross-links produced in mammalian chromatin by hydrogen peroxide in the presence of iron or copper ions // Biochemistry. 1991. Vol. 30, № 20. P. 4873-4879.

172 Nakabeppu Y. [et al]. Mutagenesis and carcinogenesis caused by the oxidation of nucleic acids // Biol. Chem. 2006. Vol. 387, № 4. P. 373-379.

173 Negre-Salvayre A. [et al]. Pathological aspects of lipid peroxidation // Free Radic. Res. 2010. Vol. 44, № 10. P. 1125-1171.

174 Niki E. Role of vitamin E as a lipid-soluble peroxyl radical scavenger: in vitro and in vivo evidence // Free Radic. Biol. Med. Elsevier, 2014. Vol. 66. P. 3-12.

175 Noori S. An Overview of Oxidative Stress and Antioxidant Defensive System // J. Clin. Cell. Immunol. 2012. Vol. 01, № 08. P. 1-9.

176 Olive P.L. et al. Heterogeneity in Radiation-Induced DNA Damage and Repair in Tumor and Normal Cells Measured Using the "Comet" Assay // Radiat. Res. 1990. Vol. 122, № 1. P. 86.

177 Pacher P., Beckman J.S., Liaudet L. Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease. // Physiol. Rev. 2007. Vol. 87, № 1. P. 315-424.

178 Pastor N. et al. A detailed interpretation of OH radical footprints in a TBP-DNA complex reveals the role of dynamics in the mechanism of sequence-specific binding // J. Mol. Biol. 2000. Vol. 304, № 1. P. 55-68.

179 Poljsak B., Milisav I. The Neglected Significance of "Antioxidative Stress" // Oxid. Med. Cell. Longev. 2012. Vol. 2012. P. 1-12.

180 Puertollano A.M. [et al]. Dietary Antioxidants: Immunity and Host Defense // Curr. Top. Med. Chem. 2011. Vol. 11, № 14. P. 1752-1766.

181 Razali N.M., Wah Y.B. Power comparisons of Shapiro-Wilk , Kolmogorov-Smirnov , Lilliefors and Anderson-Darling tests // J. Stat. Model. Anal. 2011. Vol. 2, № 1. P. 21-33.

182 Reth M. Hydrogen peroxide as second messenger in lymphocyte activation // Nat. Immunol. 2002. Vol. 3, № 12. P. 1129-1134.

183 Richter C., Park J.W., Ames B.N. Normal oxidative damage to mitochondrial and nuclear DNA is extensive. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1988. Vol. 85, № 17. P. 6465-6467.

184 Ritz C., Streibig J.C. Bioassay Analysis using R // J. Stat. Softw. 2005. Vol. 12, № 5. P. 1-22.

185 Sarada S.K.S. [et al]. Antioxidant effect of beta-carotene on hypoxia induced oxidative stress in male albino rats // J. Ethnopharmacol. 2002. Vol. 79, № 2. P. 149-153.

186 Sayre L., Smith M., Perry G. Chemistry and Biochemistry of Oxidative Stress in Neurodegenerative Disease // Curr. Med. Chem. 2001. Vol. 8, № 7. P. 721-738.

187 Seeberg E., Eide L., Bj0ras M. The base excision repair pathway // Trends Biochem. Sci. 1995. Vol. 20, № 10. P. 391-397.

188 Selye H. Stress and Disease // Science. 1955. Vol. 122, № 3171. P. 625-631.

189 Serfilippi L.M., Pallman D.R.S., Russell B. Serum clinical chemistry and hematology reference values in outbred stocks of albino mice from three commonly used vendors and two inbred strains of albino mice. // Contemp. Top. Lab. Anim. Sci. 2003. Vol. 42, № 3. P. 46-52.

190 Sevilla M.D., Becker D., Yan M. The Formation and Structure of the Sulfoxyl Radicals RSO% RSOO% RSO 2 •, and RSO 2 OO^ from the Reaction of Cysteine, Glutathione and Penicillamine Thiyl Radicals with Molecular Oxygen // Int. J. Radiat. Biol. 1990. Vol. 57, № 1. P. 65-81.

191 Shankar A.H., Prasad A.S. Zinc and immune function: the biological basis of altered resistance to infection // Am. J. Clin. Nutr. 1998. Vol. 68, № 2 Suppl. P. 447S - 463S.

192 Sies H. Oxidative stress: oxidants and antioxidants. // Exp. Physiol. 1997. Vol. 82, № 2. P. 291-295.

193 Stadtman E.R., Levine R.L. Protein Oxidation // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2006. Vol. 899, № 1. P. 191-208.

194 Stamler J., Singel D., Loscalzo J. Biochemistry of nitric oxide and its redox-activated forms // Science. 1992. Vol. 258, № 5090. P. 1898-1902.

195 Stamler J.S., Gow A.J. Reactions between nitric oxide and haemoglobin under physiological conditions // Nature. 1998. Vol. 391, № 6663. P. 169-173.

196 Stolz D. Peroxisomal localization of inducible nitric oxide synthase in hepatocytes // Hepatology. 2002. Vol. 36, № 1. P. 81-93.

197 Surai P.F. Natural Antioxidants in Poultry Nutrition: New developments // 16th European Symposium on Poultry Nutrition. Strasbourg, France, 2007. P. 669-676.

198 Svobodova A.R. et al. DNA damage after acute exposure of mice skin to physiological doses of UVB and UVA light // Arch. Dermatol. Res. 2012. Vol. 304, № 5. P. 407-412.

199 Swallow A.J. The radiation chemistry of ethanol and diphosphopyridine nucleotide and its bearing on dehydrogenase action // Biochem. J. 1953. Vol. 54, № 2. P. 253-257.

200 Thomas C.E., Kalyanaraman B. Oxygen Radicals and the Disease Process. CRC Press, 1997. P. 282.

201 Thomas E.L. Myeloperoxidase, hydrogen peroxide, chloride antimicrobial system: nitrogen-chlorine derivatives of bacterial components in bactericidal action against Escherichia coli. // Infect. Immun. 1979. Vol. 23, № 2. P. 522-531.

202 Traber M.G., Stevens J.F. Vitamins C and E: Beneficial effects from a mechanistic perspective // Free Radic. Biol. Med. Elsevier Inc., 2011. Vol. 51, № 5. P. 1000-1013.

203 Trepanier L.A. Antioxidant deficiencies in hospitalized dogs and cats // Proceedings of the 33rd World Small Animal Veterinary Congress. Dublin, Ireland, 2008. P. 576-578.

204 Valko M. [et al]. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2007. Vol. 39, № 1. P. 44-84.

205 Valko M., Morris H., Cronin M. Metals, Toxicity and Oxidative Stress // Curr. Med. Chem. 2005. Vol. 12, № 10. P. 1161-1208.

206 Veal E.A., Day A.M., Morgan B.A. Hydrogen Peroxide Sensing and Signaling // Mol. Cell. 2007. Vol. 26, № 1. P. 1-14.

207 Vertuani S., Angusti A., Manfredini S. The Antioxidants and Pro-Antioxidants Network: An Overview // Curr. Pharm. Des. 2004. Vol. 10, № 14. P. 1677-1694.

208 Wang D., Kreutzer D.A., Essigmann J.M. Mutagenicity and repair of oxidative DNA damage: insights from studies using defined lesions // Mutat. Res. Mol. Mech. Mutagen. 1998. Vol. 400, № 1-2. P. 99-115.

209 Watson J. [et al]. Molecular Biology of the Gene, 7th Edition. Pearson, 2014. 912 p.

210 Wright P.F. [et al]. Standardisation and validation of enzyme-linked immunosorbent assay techniques for the detection of antibody in infectious disease diagnosis. // Rev. Sci. Tech. 1993. Vol. 12, № 2. P. 435-450.

211 Yang E.V., Glaser R. Stress-induced immunomodulation: impact on immune defenses against infectious disease // Biomed. Pharmacother. 2000. Vol. 54, № 5. P. 245-250.

212 Yim M.B. [et al]. Pro-oxidant activity of Cu,Zn-superoxide dismutase // Age (Omaha). 1998. Vol. 21, № 2. P. 91-93.

213 Yoshida Y., Umeno A., Shichiri M. Lipid peroxidation biomarkers for evaluating oxidative stress and assessing antioxidant capacity in vivo. // J. Clin. Biochem. Nutr. 2013. Vol. 52, № 1. P. 9-16.

214 Zamocky M., Koller F. Understanding the structure and function of catalases: clues from molecular evolution and in vitro mutagenesis // Prog. Biophys. Mol. Biol. 1999. Vol. 72, № 1. P. 19-66.

215 Zelko I.N., Mariani T.J., Folz R.J. Superoxide dismutase multigene family: a comparison of the CuZn-SOD (SOD1), Mn-SOD (SOD2), and EC-SOD (SOD3) gene structures, evolution, and expression // Free Radic. Biol. Med. 2002. Vol. 33, № 3. P. 337-349.

7.ПРИЛОЖЕНИЯ Приложение А. Акт №1 о проведении исследований в

ООО «СПК «Машкино»

ООО "Скотопромышленный комплекс "МАШКИНО"

Адрес:

Московская обл., Коломенский р-н, п. Индустрия, 140474

Акт №1

Мы, нижеподписавшиеся, управляющий С.Н. Рябинкин, главный ветеринарный врач Е.П. Смирнова, ветеринарный врач H.A. Кожевникова, ООО «СПК «Машкино»; доцент Р.Ф. Тухфатова, соискатель Т.Н. Бантикова кафедры фармакологии, токсикологии и физиологии имени И.Е. Мозгова и А.Н. Голикова ФГБОУ ВПО «МГАВМиБ имени К.И. Скрябина», составили настоящий акт о том, что в период с 3 по 22 декабря 2015 года были проведены исследования по изучению эффективности антиоксидантного препарата «Эмидонол 5%» при профилактике технологического стресса у поросят-отъемышей, а также при комплексной профилактике инфекционных болезней поросят.

Препарат «Эмидонол 5%» в качестве действующего вещества содержит субстанцию эмидонол11 50 мг в 1 мл препарата и предоставлен в форме раствора для инъекций. Препарат обладает выраженными антигипоксическими, антиоксидантными и мембранопротекторными свойствами, оказывает лечебное и профилактическое действие при гипоксиях различной этиологии.

Влияние препарата на организм животных оценивали по их физиологическим параметрам (поведение, аппетит, динамика массы тела, частота дыхания и сердечных сокращений, гематологические показатели и биохимические показатели крови).

Схема исследования

Для исследования использовали 70 клинически здоровых помесных поросят-отъемышей (метисы ландрас и крупной белой пород свиней) обоего пола в возрасте 21 дня со средней живой массой 6,7 ± 0,6 кг (± стандартное отклонение). Было сформировано по принципу групп-аналогов 2 группы: экспериментальная и контрольная, по 35 голов в каждой. Перед началом исследования проводили внешний осмотр животных (оценивали кожный покров и видимые слизистые оболочки, чистоту естественных отверстий, частоту дыхания и сердечных сокращений) взвешивание, забор крови для анализа общеклинических и биохимических показателей крови. Поросятам экспериментальной группы в течение 7 дней с профилактической целью вводили внутримышечно препарат «Эмидонол 5%» (ООО «НВЦ Агроветзащита», Россия) в терапевтической дозе 10 мг/кг массы тела животного. Поросятам контрольной группы вводили воду для инъекций в эквивалентном объеме.

Все животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания, установленных в хозяйстве. Поросята содержались на гранулированном комбикорме

«Богатырь» (ООО «Провими», Россия). В возрасте 3-х дней всем животным введен внутримышечно препарат «Ферран» (ООО «Нита-Фарм», Россия).

На протяжении исследования ежедневно вели наблюдение за поросятами, оценивали их общее состояние, аппетит и потребление воды. На 8-й день от начала опыта животных взвешивали, оценивали их физиологические параметры и до кормления брали кровь из яремной вены для анализа гематологических и биохимических показателей. На 18-й день от начала опыта животных взвешивали и оценивали их физиологические параметры.

Результаты

Данные по влиянию препарата «Эмидонол 5%» на биохимические показатели сыворотки нрови представлены в таблице 1. Данные по влиянию препарата «Эмидонол 5%» на общеклинические показатели крови представлены в таблице 2. Влияние препарата «Эмидонол 5%» на прирост массы тела представлено в таблице 3.

1. Биохимический анализ сыворотки крови до исследования показал у всех поросят среднее количество общего белка и мочевины меньше нижней границы физиологической нормы. На фоне гипопротеинемии наблюдается повышенное значение альбумин-глобулинового коэффициента. У всех подопытных поросят установлена повышенная активность аминотрансфераз. Высокая активность аминотрансфераз наблюдается у поросят в возрасте 18-21 дня и уменьшается до физиологических норм у взрослых животных (Тян Е.А. Биохимический статус крупной белой породы Западной Сибири. Успехи современного естествознания, 2004).

После общеклинического анализа образцов крови поросят контрольной и экспериментальной групп, полученных перед началом исследования, наблюдались пониженные средние значения показателей: содержание гемоглобина, среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН), гематокрита и среднего объема эритроцита (МСУ), значения которых были меньше нижней границы физиологической нормы. Наблюдалась также эозинопения, а в мазках - повышенное содержание микроцитов.

2. Применение Эмидонола не оказало существенного влияния на среднее содержание общего белка и мочевины. У всех поросят произошло перераспределение белковых фракций: снижение альбумин-глобулинового коэффициента до физиологической нормы. Другие биохимические показатели сыворотки крови животных экспериментальной группы не имели значительной корреляции с контрольной группой на протяжении всего эксперимента и находились в пределах референтных значений, характерных для физиологической нормы данного вида животных.

Таблица 1. Влияние препарата «Эмидонол 5%» на биохимические показатели сыворотки крови поросят (р ± о).

Показатели Единица измерения Средний интервал для вида До исследования 8-й день исследования

К Э

Билирубин общий мкмоль/л 0-6,8 5,1 + 2,3 4,8 ± 0,5 5,2 ± 1,3

Билирубин прямой мкмоль/л 0-5,1 1,7 ± 1,5 1,4 ± 0,6 1,5 ± 0,6

Белок общий Г/л 55-86 48,8 ±3,1 52,8 ±4,4 52,5 ± 8,7

Альбумин Г/л 19-24 35,0 ± 1,5 29,7 ±2,3* 30,3 ± 3,0*

Глобулин г/л 13,8 ± 1,8 23,2 ±2,6* 22,2 ±6,5*

Альбумин / Глобулин расчетный показатель 1,2 - 2,0 2,6 ± 0,3 1,3 ±0,1* 1,4 ±0,4*

Глюкоза ммоль/л 3,6 - 5,3 5,8 ± 0,8 5,8 ±0,7 6,2 ±2,2

Мочевина ммоль/л 3-8,5 2,4 ± 0,6 2,4 ± 1,2 2,3 ±0,5

Креатинин мкмоль/л 40 -130 100,0 ± 7,3 82,5 ±41,2 63,2 ± 14,6*

Мочевина/ Креатинин расчетный показатель 10-20 12,4 + 2,7 16,9 ± 6,9 20,5 ± 9,8

Альфа-амилаза, общая Ед/л 43-88 1070,0 ± 461,2 1275±б80 1265±833

ЛДГ Ед/л 380-630 854,5 ±131,6 1542±338 1839±1103

ACT Ед/л 32-84 58,1 ±44,4 114,8±42,9 147,8±118,2

АЛТ Ед/л 31-58 36,4 ± 12,7 55,8 ±27,1 73,8 ±36,1

Примечание. Достоверное отличие по методу U-критерия Манна-Уитни от показателей, полученных до исследования, где: * р < 0,02. К - показатели контрольной группы; Э -показатели экспериментальной группы; ACT — аспартатаминотрансфераза; АЛТ -аланинаминотрансфераза; ЛДГ - лактатдегидрогеназа.

Применение Эмидонола не оказало существенного влияния гематологические показатели крови. На 8-й день эксперимента у поросят экспериментальной группы замечена тенденция к повышению уровня гемоглобина, среднего содержания гемоглобина в эритроците (МСН), гематокрита и среднего объема эритроцитов (MCV). У них также отмечено снижение содержания микроцитов в мазке крови, повышение среднего содержания эозинофилов с нулевого значения. У животных контрольной группы эти показатели не изменились.

Таблица 2. Влияние препарата «Эмидонол 5%» на общеклинические показатели крови поросят (ц ± о).

Показатели Единица измерения Средний интервал для вида До исследования 8-й день исследования

К Э

Гематокрит % 32-50 31,5 ±9,9 33,4 ±0,7 36,8 ± 0,0

Гемоглобин г/л 100-160 89,5 ±25,0 95 ± 1,4 106 ± 4,9

Эритроциты xlO12 /л 6,8-12,9 6,6 ± 0,7 6,9 ± 0,2 7,1 ±0,7

Властные клетки % 0 0 0 0

Миелоциты % 0 0 0 0

Метамиелоциты % 0 0 0 0

Палочкоядерные нейтрофилы % 2-4 0 0,5 ± 0,7 4,5 ± 6,4

Сегментоядерные нейтрофилы % 40-48 50,3 ± 16,2 42,0 ±11,3 60,5 ± 7,8

Эозинофилы % 0-4 0 0 1,5 ±0,7

Моноциты % 2-6 0,5 ±0,8 0,5 ± 0,7 0

Базофилы % 0 0 0 0

Лимфоциты % 40-50 49,2 ± 16,2 57,0 ± 11,3 33,5 ± 0,7

Тромбоциты xlO9 /л 320-520 536,3 ± 258,5 683 ± 52 572 ±266

СОЭ мм/ч 1-9 1,8 ± 1,6 3,5 ± 0,7 1,0 ± 0,0

Ядерные эритроциты (Нормобласты) на 100 лейкоцитов 0 1,2 ± 2,0 0 0

RDW % 18-25 28,2 ± 5,5 29,2 ± 3,9 26,6 ± 2,8

МСНС % 30-34 28,7 ± 1,6 28,5 ±0,2 28,7 ± 1,3

MCV мкм3 (фл) 50-68 47,3+11,7 48,2 ± 2,6 52,3 ± 5,6

мен пг 17-21 13,5 + 2,9 13,7 ±0,7 15,0 ±0,9

Скорректированные лейкоциты хЮ9/л 11-22 13,3 ±3,1 20,5 ± 0,1* 19,1±4,4*

NEUT band cells (ABS) xlO9 /л 0-0,1 0 0,1 ±0,1 1,0 ± 1,4

NEUT mature (ABS) хЮ8 /л 3,1-10,5 7,1 ±3,4 8,6 ±2,3 11,4 ± 1,2

EOS (ABS) хЮ9 /л 0,1-2,4 0 0 0,3±0,2**

BAS (ABS) хЮ9 /л 0 0 0 0

MON (ABS) хЮ9 /л 0,2-2,2 0,1 ±0,1 0,1 ±0,1 0

LYM (ABS) х109/л 4,3-13,0 6,2 + 1,1 11,6 ±2,3 6,4 ± 1,6

Микроциты (мазок) на 100 лейкоцитов 10-15 21,0 ±33,1 50,0 ± 0,0 37,5±17,7

Примечание. Достоверное отличие по методу ü-критерия Манна-Уитни от показателей,

полученных до исследования при * р < 0,09, ** р < 0,01. К - показатели контрольной

группы, Э - показатели экспериментальной группы, СОЭ - скорость оседания эритроцитов, RDW - показатель анизоцитоза эритроцитов, МСНС - средняя концентрация гемоглобина в эритроците, NEUT- нейтрофилы сегментоядерные, EOS - эозинофилы, BAS - базофилы, LVM - лимфоциты, ABS - абсолютное количество элементов.

3. В контрольной группе выбраковали трех поросят-заморышей: двух на 7-й день исследования и одного на 17-й день исследования; в экспериментальной группе все поросята соответствовали требованиям, обеспечивающим доращивание.

4. Результаты измерения живой массы поросят экспериментальной группы на 8-й день исследования не показали статистически значимой корреляции с контрольной группой: средний привес в контрольной группе составил 1,5 кг/гол, в экспериментальной группе 1,6 кг/гол. На 18-й день исследования масса поросят экспериментальной группы была статистически значимо больше на 1,6%, чем масса поросят контрольной группы: средний привес в контрольной группе составил 5,8 кг/гол, в экспериментальной группе 6,0 кг/гол.

Таблица 3. Влияние препарата «Эмидонол 5%» на динамику живой массы поросят.

Время наблюдения Контрольная группа Экспериментальная группа

Средняя Кол-во Общая масса, кг голов масса, кг , (й±о) _ Средняя Кол-во Общая масса, кг голов масса, кг , , , (ц±о)

1 день 35 235 6,7 ±0,6 35 234 6,7+0,6

8 день 33 272 8,2±0,2 35 292 8,3±0,3

18 день 32 401 12,5±0,3 35 445 12,7±0,4*

Примечание. Достоверное отличие по методу 11-критерия Манна-Уитни от показателя контрольной группы на 18 день исследования, где * р < 0,023.

Заключение

На основании совокупности данных, собранных и полученных до начала исследования и введения Эмидонола: гематологических показателей, физиологических и клинических признаков всех подопытных животных - проведена оценка общего состояния поросят. Такие признаки, как угнетенное состояние и вялость, малая подвижность, снижение аппетита, а также сдвиги в содержании лейкоцитов периферической крови позволяли диагностировать стрессовое состояние поросят.

В результате проведенных исследований не обнаружено токсического действия Эмидонола на организм животных. Применение препарата привело к общему улучшению состояния экспериментальных животных, нормализации физиолого-биохимических показателей, коррекции гипоксического состояния и оказало положительное влияние на прирост живой массы.

Лабораторные исследования проводили в сертифицированной ветеринарной лаборатории «Шанс-Био». Анализ полученных данных живой массы поросят, гематологических и биохимических исследований проводили с помощью программы SPSS Statistics для Windows, версия 17.0. Оценку гомогенности дисперсии проводили по тесту Левена, различия между группами оценивали с использованием U-критерия Манна-Уитни. Статистическая значимость различий между уровнями признака в группах принималась при р < 0,05.