Эритроцитарные и тромбоцитарные показатели периферической крови испытуемых в условиях, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат медицинских наук Чаниева, Марем Исропиловна

• Чаниева, Марем Исропиловна
• кандидат медицинских наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Чаниева, Марем Исропиловна

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Характеристика групп обследованных.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Взятие периферической крови.

2.2.2. Количественные методы.

2.2.3. Приготовление и окраска цитоцентрифугатов.

2.2.4. Приготовление и окраска мазков периферической крови для определения полисахаридов (гликоген) в тромбоцитах.

2.2.5. Анализ клеточного изображения.

2.2.6. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Обсуждение собственных результатов.

3.1. Анализ изображения клеток (эритроцитов) в стандартных препаратах крови с применением прибора «АСГ1ЕК».

3.2. Изучение геометрии клеток (эритроцитов) венозной крови на предметных.стеклах.

3.3. Методология исследования фракции незрелых тромбоцитов периферической крови.

3.4. Исследование показателей периферической крови испытуемых отборочного теста (велоэргометрия).

3.5. Показатели красной крови и тромбоцитарные параметры периферической крови испытуемых в условиях модельных экспериментов.

3.5.1. 21-часовая антиортостатическая гипокинезия как модель микрогравитации космического полета в экспериментах па земле.

3.5.2. Изучение показателей красной крови, количества тромбоцитов у участников в динамике 105 суточного эксперимента.

3.5.3. Исследование эритроцитарных и тромбоцигарных параметров периферической крови испытуемых в динамике 520-суточного эксперимента.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эритроцитарные и тромбоцитарные показатели периферической крови испытуемых в условиях, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию»

Для оценки состояния здоровья космонавтов, совершающих длительные космические полеты, значительный интерес представляет исследование крови, как системы, объединяющей работу всех функциональных систем.

Длительные исследования морфологической картины крови в условиях космических полетов и после них свидетельствуют о наличии некоторых отклонений в системе красной крови. Эти отклонения проявляются в уменьшении количества эритроцитов, ретикулоцитов, гемоглобина и величины гематокрита, изменении морфологических и морфометрических характеристик эритроцитов, восстановление которых после полета зависит от продолжительности космического полета.

Установленные закономерности «реагирования» на невесомость оказались настолько устойчивыми, что позволили в 1981 году ввести понятие «Адаптационный эритроцитопенический синдром невесомости» [46]. В зарубежной литературе синдром известен как «Космическая анемия» [103]. Этиология снижения количества эритроцитов в организме многофакторна. Если причиной «Адаптационного эритроцитопепического синдрома невесомости» («Космической анемии») является невесомость, то его развитие может быть результатом увеличенной гибели эритроцитов, или результатом уменьшения их продукции.

Проведение экспериментов с моделированием физиологических эффектов невесомости на земле несовершенно. Однако в экспериментах можно моделировать отдельные эффекты невесомости (оргостатическая неустойчивость, снижение физической работоспособности, уменьшение потока информации, общения и др.). Проведенные модельные эксперименты и исследования в космосе демонстрируют, что анемия в условиях невесомости, скорее всего, возникает вследствие сниженной продукции эритроцитов костным мозгом космонавтов. Сверхчувствительные радиоиммунные методы определяют низкий уровень секреции эритропоэтина уже к 24 часу полета в космосе [36, 41]. Утрата гормональной стимуляции влечет за собой снижение пролиферативной активности в эритроне, гибели клеток и соответственно к редукции эритропоэза. В периферической крови космонавтов появляются эритроциты измененной формы - эхиноциты, сфероциты, мишеневидные эритроциты [40, 44, 63].

Недавние исследования А1&еу и его исследовательской группы [2000г.] показали, что снижение количества эритроцитов при космической анемии происходит не только из-за уменьшения продукции эритроцитов, но также из-за повышенной деструкции молодых представителей этих клеток -неоцитолиза.

Считается, что гормональные факторы регуляции эритро- и тромбоцитопоэза - эритро- и тромбопоэтин, имеют сходную структуру. Однако, неизвестно, сопровождается ли адаптационный эритроцитопенический синдром невесомости изменениями тромбоцитов. Следует отметить, что работ посвященных изучению тромбоцитов в модельных экспериментах и при проведении тренировок при профессиональной подготовке космонавтов к космическому полету к настоящему времени немного. А данные о динамике тромбоцитарных параметров во время полетов отсутствуют, что связано с трудностью проведения исследований на борту космических станций. Все это делает актуальным продолжение изучения количественного и качественного состояния показателей красной крови, а также тромбоцитарных параметров периферической крови при подготовке космонавтов к длительным межпланетным перелетам и позволяет обозначить цель и задачи настоящего исследования.

Цель работы - определить особенности эритроцитов и тромбоцитов периферической крови у испытуемых в условиях, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию.

Задачи исследования;

1. Оценить морфологические особенности эритроцитов, циркулирующих в периферической крови испытуемых, используя стандартную пробоподготовку и анализатор клеточного изображения.

2. На основе геометрических параметров клеток создать эритроцитограмму - современную систему учета нормальных и дегенеративных форм эритроцитов.

3. Провести сравнительный анализ гематологических показателей испытуемых на приборе БУБМЕХ ХЕ 2100 в динамике модельных экспериментов.

4. Уточнить место тромбоцитарных параметров в комплексной оценке влияния микрогравитации и гипокинезии на организм испытуемых в модельных экспериментах.

Научная новизна работы

Получены новые данные о вкладе изменений в периферическом отделе эритрона (количественная характеристика показателей красной крови, объективная оценка морфологии эритроцитов) и впервые изучены тромбоцитарпые параметры периферической крови испытуемых в ходе модельных экспериментов, моделирующих условия микрогравитации и гипокинезии и в периоде реадаптации.

Во всех моделирующих микрогравитацию и гипокинезию экспериментах показано, что параметры эритроцитов и тромбоцитов периферической крови испытуемых не выходят за пределы нормальных значений, а их изменения отражая устойчивость гемопоэза в условиях имитации космического полета, носят адаптационный характер.

Научно-практическая ценность работы

Результаты настоящего исследования могут быть использованы для разработки мер профилактики и коррекции функциональных сдвигов, развивающихся в организме во время космического полета.

Предложена эритроцитограмма для включения в число отборочных тестов модельных экспериментов невесомости и гипокинезии и оценки реакции реадаптации.

Оценены тромбоцитарные параметры, в том числе фракция незрелых тромбоцитов (1РР), причем последняя, как показатель активности тромбоцитопоэза, может быть предложена для мониторинга снижения количества тромбоцитов у космонавтов при подготовке к космическому полету.

Положения, выносимые на защиту

1. В динамике экспериментов, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию, уменьшается количество нормоцитов, при этом появляется морфологически измененные формы эритроцитов (микроциты, стоматоциты, мишеневидные).

2. Значения показателей периферического звена эритрона у испытуемых в условиях, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию, снижаются.

3. При снижении общего количества тромбоцитов у испытуемых при имитации космического полета параллельно происходит увеличение процента незрелых и крупных форм тромбоцитов.

4. Наблюдаемые изменения эритроцитарных и тромбоцитарных параметров в условиях экспериментов, моделирующие полет на Марс, носят адаптационный характер.

Публикации

По материалам диссертации опубликовало 10 печатных работ, в том числе 2 в зарубежных изданиях.

Материалы работы представлены па научно-практической конференции «Лабораторная диагностика-2009» (Москва, 30-31 марта 2009г.), II Московской региональной научно-практической конференции (с международным участием) «Цитоморфометрия в медицине и биологии: фундаментальные и прикладные аспекты» (Москва, 28-29 мая 2009г.), научно-практической конференции «Достижения в гематологии и трансфузиологии» (Москва, 18 ноября 2009г), XV научно-практической конференции с международным участием «Лабораторное обеспечение стандартов медицинской помощи» (Москва, 29-30 марта 2010г.), III Всероссийской научно-практической конференции «Цитоморфометрия в медицине и биологии: фундаментальные и прикладные аспекты» (Москва 1314 мая 2010г.), XXXVIII Общественно-научных чтениях, посвященных памяти Ю.А. Гагарина (г. Гагарин, 9-12 марта 2011г.), III съезде физиологов СНГ. Физиология и здоровье человека (Ялта, 1-6 октября 2011г.), международном научном симпозиуме Марс-500. Питание и метаболизм в условиях длительной изоляции (Москва, 23-25 апреля 2012г.).

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Чаниева, Марем Исропиловна

ВЫВОДЫ

1. Изменения параметров эритроцитов и тромбоцитов периферической крови испытуемых во всех экспериментах, моделирующих микрогравитацию и гипокинезию, не выходят за пределы нормальных значений и, отражая устойчивость гемопоэза в условиях имитации космического полета, носят адаптационный характер.

2. Методология компьютерного распознавания и классификации эритроцитов в стандартных препаратах крови является средством описания изображений клеток с помощью формальных признаков, по набору которых система автоматически принимает решение об их принадлежности к тому или иному классу, т.е. формирует эритроцитограмму.

3. При анализе эритроцитограмм практически здоровых людей и больных анемиями различного генеза показано, что, утрачивая форму двояковогнутого диска и превращаясь за счет изменения геометрии торообразующих областей в пойкилоциты, эритроциты могут или истончаться или разбухать вплоть до образования сферы.

4. Результаты сравнительной оценки содержания незрелых тромбоцитов доноров позволяют рассматривать их выход в периферическую кровь как свидетельство регенераторного ответа костного мозга, способного компенсировать изъятые тромбоциты.

5. Анализ микроскопических изображений (площадь и форма клеток) окрашенных эритроцитов периферической крови испытуемых при моделировании микрогравитации выявил преобладание (57,3±10,9 %) нормоцитов; тенденция к анизоцитозу (микроциты) или пойкилоцитозу (сфероциты, мишеневидные эритроциты) недостоверна.

6. Во всех сериях экспериментов моделируемой микрогравитации и перераспределения жидкости (антиортостатическая гипокинезия) эритроцитарные параметры (количество эритроцитов, концентрация гемоглобина, гематокритная величина и средняя площадь эритроцитов) испытуемых варьировали в пределах нормальных значений.

7. Увеличение числа незрелых тромбоцитов вследствие снижения количества тромбоцитов у испытуемых как при физической нагрузке (велоэргометрия) и моделировании невесомости, так и при гипокинезии в ходе выполнения 105-ти и 520-ти суточного эксперимента («Марс-500») представляет собой адаптацию системы крови человека к измененным условиям среды.

ГЛАВА 4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Пребывание человека в околоземном космическом пространстве в настоящее время является необходимой действительностью в развитии современного человечества. В связи с этим увеличивается и необходимость оценки воздействия факторов космического полета и ведущего из них -невесомости.

Многолетние исследования показали, что невесомость оказывает определенное воздействие на эритрон, приводящее к функциональным изменениям, выражающимся в адаптационном торможении эритропоэза, соответствующем снижении значений показателей периферической крови. Эффект воздействия прежде всего зависит от длительности космического полета. Проведение экспериментов с моделированием физиологических эффектов невесомости на земле несовершенно. Однако в экспериментах можно моделировать отдельные эффекты невесомости (перераспределение жидких сред организма, ортостатическая неустойчивость, снижение физической работоспособности, уменьшение потока информации, общения и др.). Становится актуальным продолжение изучения количественного и качественного состояния показателей красной крови, а также тромбоцитарных параметров периферической крови при подготовке космонавтов к длительным межпланетным перелетам.

В настоящей работе для выполнения поставленных задач наряду с изучением клеточного состава периферического звена эритрона и тромбоцитарных показателей периферической крови проводилось изучение морфологических особенностей эритроцитов и тромбоцитов методом компьютерной морфометрии. Для этого, прежде всего, использовалась стандартная пробоподготовка, в дальнейшем объективно оценивалась геометрия нормальных и измененных эритроцитов и определялась их частота у испытуемых на анализаторе клеточного изображения.

В результате проведенных исследований микроскопических изображений эритроцитов периферической крови здоровых людей и больных анемией были получены геометрические параметры нормоцитов, анизо- и пойкилоцитов, которые послужили основой формирования эритроцитограммы.

При оценке изображений тромбоцитов периферической крови от 21 здоровых людей получены данные, свидетельствующие о гетерогенности популяции тромбоцитов. По нашим данным среднее значение площади тромбоцитов общей популяции составило 5,36±3,79 (1,6-9,0), причем незрелые тромбоциты, содержащие более трех гранул ШИК-положительного материала [74], выявленные методом цитохимической реакцией преобладали 9,5±3,6 (7,6-13,7) как общую популяцию клеток, так и зрелых ШИК-негативных (до 2 гранул) клеток - 3,9±1,3 (3,1-4,4) р < 0,001.

Полученные данные у первичных доноров выявили зависимость параметра «фракции незрелых тромбоцитов» от общего количества тромбоцитов, при уменьшении которого данный параметр увеличивался.

Значительно больше сведений об изучаемых в данной работе особенностях эритроцитов и тромбоцитов накоплено в результате наземных экспериментов, имитирующих действие на организм отдельных факторов космического полета. Наземное моделирование может быть ценным источником сведений о функционировании системы крови во время космических экспедиций, так как позволяет оценивать не только динамику изменений во время эксперимента, но и дифференцировать действие различных факторов на организм.

Дана оценка эритроцитарным и тромбоцитарным параметрам периферической крови 24 испытуемых при воздействии физической нагрузки на испытуемого в положении лежа на велоэргометре под углом наклона головы -3°.

В некоторых исследованиях показано, что физические упражнения повышают плотность крови из-за изменения деформабельности эритроцитов, их агрегации, скорости фильтрации и гематокрита [95]. Наблюдаемое во время физических нагрузок уменьшение объема плазмы объясняется потерей жидкости, которая пропорциональна рабочей нагрузке.

Авторы отмечают, что упражнения вызывают значительное повышение агрегации эритроцитов, степень которой зависит от уровня фибриногена перед началом упражнений [132]. Другие исследователи в своих экспериментах отмечают, что физические упражнения приводят к сокращению жизни эритроцитов и появлению молодых клеток. Под влиянием катехоламинов при физических упражнениях селезенка выбрасывает в кровоток депонированные эритроциты [121, 88].

По мнению других авторов увеличение гематокрита, деформабельности эритроцитов и вязкости крови - физиологические адаптационные изменения, которые происходят при многих видах упражнений и сами по себе не угрожают здоровью организма [87].

В нашей работе при сравнительном анализе эритроцитарных показателей 24 испытуемых в ходе проведения отборочного теста (пробы с дозированной физической нагрузкой) было показано повышение концентрации гемоглобина и величины гематокрита после нагрузки. Количество эритроцитов, ретикулоцитов и их незрелых форм не изменялось.

При оценке тромбоцитарных параметров в этой группе испытуемых отмечено увеличение (р<0,05) фракции незрелых тромбоцитов у 13 (54,2%) испытуемых, причем у одного выше контрольных значений, у 6 (25%) -недостоверно снизилась, у 5 (20,8%) этот показатель практически не изменился. Эти результаты характеризуют период адаптации системы крови к физической нагрузке, что можно рассмотреть как положительная реакция организма на измененные условия.

Несмотря на то, что влияние физических упражнений, выполняемых человеком, на тромбоциты интенсивно изучается, полученные до сих пор результаты остаются слишком вариабельными [106]. Предполагается, что и длительные, и краткосрочные напряженные физические упражнения временно повышают количество тромбоцитов, а также индуцированную агонистами агрегацию тромбоцитов, адгезивность и секреторную активность этих клеток in vivo.

Возможно, физическая нагрузка способствует выходу из депо в циркуляцию молодых тромбоцитов, которые функционально активные (способность к агрегации) и больше содержат энергетического материала, чем зрелые [84].

Проведено изучение показателей красной крови: содержание гемоглобина и величины гематокрита у испытуемых в динамике 21-часовой АНОГ под углом наклона -15°. Полученные результаты после введения мочегонного препарата показали, что практически у всех испытуемых, содержание гемоглобина увеличилось на 3% от исходного уровня (140±10г/л) во всех трех сериях эксперимента. Величина гематокрита практически не изменилась, снижение гематокрита отмечено у одного обследуемого. Возмещение потерь жидкости путем инфузии коллоидного и кристаллоидного растворов привело к достоверному (р=0,05) снижению указанных параметров. Возможно, наблюдаемые эффекты после инфузии растворов обусловлены разбавлением периферической крови (относительная гемодилюция) а также изменением гемодинамических характеристик крови.

В этом же эксперименте проведено исследование морфологии эритроцитов и распределение их по значениям площади и формы. Данное исследование показало, что внутривенное введение лазикса приводило к незначительному увеличению частоты некоторых морфологически измененных форм эритроцитов в периферической крови: сфероцитов, макросфероцитов. Отмечено увеличение доли микроцитов. Увеличение нормоцитов и уменьшение пойкилоцитов выявлено после введения инфузионных сред. Вышеперечисленные изменения лежат в пределах нормальных значений и, учитывая относительно небольшую продолжительность воздействия, особенности схемы эксперимента результаты данного исследования характеризуют лишь период острой адаптации к измененным условиям.

В динамике 105-суточного эксперимента с изоляцией в гермообъеме исследовались показатели красной крови и количество тромбоцитов. На 70 сутки зарегистрировано недостоверное снижение количества эритроцитов (с А

5,2±0,3х10/мкл до 3,8±0,4х10/мкл), содержания гемоглобина (с 152±9,7г/л до 139±9,2г/л), однако уровень гематокрита (исходно 45,7+2,9%) снизился достоверно (р=0,0002) до 34,4±4%. Количество тромбоцитов снизилось достоверно с 190,1±23,7x10 /мкл до 160,8±32,5x10 /мкл. К 105 суткам эксперимента данные показатели крови вернулись к фоновым значениям. Сниженное содержание гемоглобина сохранялось на протяжении эксперимента. Указанные изменения, возможно, связаны с замедлением эритропоэза, что подтверждается низким уровнем эритропоэтина в крови этих же испытуемых на 70 и 105 сутки эксперимента в работе других исследователей [23]. Следует отметить, что снижение уровня эритропоэтина клинически незначимо и соответственно испытуемые терапии эритропоэтином не нуждаются. Однако накоплен большой опыт, позволяющий сделать вывод о том, что терапия эритропоэтином является успешной в лечении больных хронической почечной недостаточностью и находящихся на гемодиализе [73].

При исследовании морфологии эритроцитов показано, что на протяжении этого эксперимента количество нормоцитов снизилось до 41% (исходный уровень - 61,7%), в основном, за счет увеличения доли микроцитов с 11% (исходный уровень) до 33,4% и появления в незначительной степени некоторых необратимых пойкилоцитов (мишеневидные эритроциты, микросфероциты и др.).

Во время изоляции применялось дополнительное воздействие в виде комплекса физических нагрузок. Как известно, действие физической нагрузки значительно увеличивает скорость кровотока, при котором имеет место повреждение форменных элементов крови, повышение их агрегации, деформируемости [87], что возможно способствовало изменению клеточной мембраны и появлению измененных форм эритроцитов.

Таким образом, 105-суточная изоляция сопровождается замедлением эритропоэза на всем протяжении эксперимента, что подтверждается снижением показателей красной крови, выраженные изменения которых отмечены к концу эксперимента. Возможно, обнаруженные эффекты связаны с низкой продукцией эритропоэтина в ответ на пониженную потребность организма в кислороде за счет снижения интенсивности обменных процессов, а также изменение режима двигательной активности в условиях длительной гипокинезии.

Полученные результаты по эритроцитарным параметрам периферической крови участников 520-суточного эксперимента, имитирующего полет на Марс, показали, что с периода имитации трех высадок на Марс, т.е. когда моделировалось перераспределение жидкостных сред организма при моделировании воздействия микрогравитации, имелась тенденция к снижению показателей красной крови (количество эритроцитов, содержание гемоглобина, величина гематокрита). Однако в период реадаптации значения указанных параметров снизились значительно. Так, на 2-е сутки восстановления количество эритроцитов снизилось по сравнению с фоновыми данными (5,1 ±0,2 х106/мкл) до 4,7±0,2 (х106/мкл), содержание гемоглобина - с 156±9,8 г/л до 140±9,2 г/л, величина гематокрита - с 47±2,7 % до 40,6±1,9 %.

Кроме того, отмечено увеличение количества ретикулоцитов (р=0,007) на 60 сутки эксперимента, возможно, связанное с активацией эритропоэза под воздействием усиленных физических нагрузок на организм испытуемых в периоде 39-66 суток эксперимента, так как при интенсивной нагрузке уровень доставки кислорода к тканям значительно увеличен [95]. В то же время достоверно (р=0,04, 95% С1) установлено увеличение количества ретикулоцитов (10,9±3,8) после периода имитации высадки членов экипажей на поверхность Марса (на ЗООсутки эксперимента) по сравнению с фоновым значением (8,6±2,4).

В целом наблюдаемые изменения не расходятся с полученными ранее результатами в длительных космических полетах человека (до года). Снижение количества эритроцитов, гемоглобина в ранний период реадаптации (2-е сутки), последующее развитие ретикулоцитарной реакции (8-е сутки), как было аналогично отмечено при исследовании крови экипажей длительных космических полетов, косвенно свидетельствуют о возрастании скорости эритропоэза, обусловленного увеличенной потребностью организма в кислороде [15].

В «формуле» эритроцитов на протяжении эксперимента отмечалось снижение количества нормоцитов, при этом доля микроцитов увеличивалась, что можно объяснить адаптивным торможением эритропоэза [54]. Отмечается появление необратимых форм эритроцитов. В работах некоторых авторов отмечено отрицательное влияние условий космического полета на продолжительность жизненного цикла эритроцитов. Выявлены изменения их форм и размеров в условиях реальной и моделированной невесомости у человека и животных [46, 70], показателей внутриклеточного метаболизма и структурно-функционального состояния мембран [66, 69].

В то же время обнаруженное изменение формы эритроцитов может быть следствием удаления части эритроцитов из кровяного русла. Последнее может быть обусловлено сдвигами в метаболическом статусе и в состоянии клеточной мембраны эритроцитов, что приводит к изменению ее вязкости и способности деформируемости [70, 22, 24]. Нарушение поверхностной архитектоники клеток и увеличение числа патологических форм эритроцитов также отмечено при заболеваниях системы крови, например при эритремии. При анализе морфологии эритроцитов при эритремии было выявлено до лечения снижение количества дискоцитов (52,62±16%) при норме 85,05±10,1% (р<0,001), а также наличие 10-12% дегенеративных форм эритроцитов, количество которых увеличивалось в зависимости от длительности заболевания. Лечебный эффект при эритремии сопутствовал увеличением количества дискоцитов по сравнению с исходным, снижением уровня дегенеративных клеток [29].

При анализе тромбоцитарных параметров крови в ходе эксперимента были выявлены их некоторые изменения. У 5 из 6 испытуемых на протяжении эксперимента и в периоде реадаптации наблюдалась тенденция к снижению количества тромбоцитов периферической крови. Увеличение незрелых тромбоцитов отмечено на 60-е и 300-е сутки эксперимента у 4 из 6 участников. Однако при выходе из эксперимента, на 2-е сутки восстановления, в периферической крови всех участников было выявлено значительное увеличение с последующим, на 8-е сутки, снижением данного показателя. Аналогичные изменения отмечены при исследовании крупных тромбоцитов. Анализ полученных данных показал, что наблюдаемые изменения лежат в пределах общепринятой нормы.

Таким образом, наблюдаемые изменения эритроцитарных и тромбоцитарных параметров периферической крови у испытуемых в динамике экспериментов, моделирующие микрогравитацию и гипокинезию не выходили за пределы нормальных значений, и носят адаптационный характер, что еще раз подтверждает устойчивость гемопоэза в условиях имитации космического полета.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Чаниева, Марем Исропиловна, 2012 год

1. Агаджанян H.A., Радыш И.В., Северин А.Е. Экология, адаптация и биоритмы. // Авиакосмическая и экологическая медицина. 1995.-Т.29.-№3.-С.16-19.

2. Байдун Л.В., Кашпор С.А., Парпара A.A. и др. Автоматическая эритроцитометрия в роботизированном микроскопе МЕКОС-Ц1. // Клин, лаб. диагн. 2003. № 6. - С. 39-42.

3. Балабуткин В.А. Оптимизация аппаратно-программного обеспечения гематологических исследований. // Автореф. докт. мед. наук, 1999.

4. Береговой Г.Т., Богдашевский Р.Б. Космическая академия. Москва, 1993.-С.224.

5. Боев С.Ф., Сазонов В.В., Виноградов А.Г., Иванова И.А., Верденская Н.В., Погорелов В.М., Козинец Г.И. Способ анализа клеточного состава крови по мазку.- Патент 2147123 от 15.03.2000.

6. Бурковская Т.Е., Илюхин A.B., Жуков В.В., Лобачик В.И Эритроцитарный баланс при 182- суточной гипокинезии. // КБМ., 1980.-Т.14.-№5.-С.50-54.

7. Верденская Н.В., Виноградов А.Г., Иванова И.А., Погорелов В.М., Сазонов В.В., Козинец Г.И. Сегментация изображений в системе автоматического анализа клеточного состава периферической крови. // Клиническая лабораторная диагностика. 1999.-№10. С.25-26.

8. Генин A.M., Какурин Л.И. 30-суточный эксперимент с моделированием физиологических эффектов невесомости. // Косм, биолог, и медицина. 1972.-Т.-6.-№4.-С.26-28.

9. Гордиенко В.Г. Состояние некоторых защитно-адаптационных приспособлений при иммобилизации. // Дис. на соиск. уч. ст. д.м.н., Харьков, 1965г.

10. П.Григорьев А.И., Воложин А.И., Ступаков Г.П. Минеральный обмен у человека в условиях невесомости. // Проблемы косм. биол. М., Наука. 1994.-Т.74.- с.214.

11. Григорьев А.И., Егоров А.Д. Теория и практика медицинского контроля в длительных космических полетах. // Авиакосм.и эколог, мед. 1997.-Т.1.-С.14-25.

12. Гудим В.И., Москалева Г.П., Иванова B.C. Исследование уровня эритропоэтина у космонавтов при полетах различной продолжительности // Конференция «Космическая биология и авиакосмическая медицина».-М., Калуга.- 1982, часть 1.-С.29-30.

13. Гудим В.И., Сигалла П., Иванова B.C. и др. // Биол. экспериментальная биология.-1980.-№5.-С.592-594.

14. Давыдов Б.И., Коннова Н.И., Львова Т.О. Влияние некоторых факторов космического полета на клинико-гематологические показатели у животных.// Материалы X Всесоюз.физиол.общества им. И.П. Павлова. Москва, 1968.-Т.2.-№ 1 .-С.247.

15. Длусская И.Г., Виноградова Л.А., Носков В.Б., Балаховский И.С. Влияние гиподинамии и других факторов космического полета на экскрецию 17-оксикортикостероидов и альдостерона. // Косм. биол. и мед. 1973.-Т.7.-С.43-48.

16. Долгов В.В., Луговская С.А., Морозова В.Т. Лабораторная диагностика анемий // Пособие для врачей. Тверь, 2001. С. 88.

17. Желудкова Т.И. Влияние изменения газовой среды и адинамии в условиях изоляции на показатели периферической крови. // Человек в условиях адинамии и изоляции. 1961.-С.45-46.

18. Иванова С.М. Система крови в условиях космических полетов и после его завершения // Орбитальная станция «Мир». Москва,2002.-Т.2.- С. 159-196.

19. Иванова С.М., Маруков Б.В., Лабецкая О.И. Морфобиохимические исследования системы крови у членов экипажей основных экспедиций на Международную космическую станцию // Авиакосм, и экол. мед. 2006.-Т.40.-№3.-С.9-16.

20. Иванова С.М., Моруков Б.В., Ярлыкова Ю.В., Лабецкая О.М., Левина A.A. Морфофункциональные свойства клеток красной крови и интенсивность эритропоэза при 105-суточной изоляции. // Авиакосм, и экол. мед., 2010.-Т.44.-№4.-С.35-39.

21. Иванова С.М., Ярлыкова Ю.В., Лабецкая О.И., Шишканова З.Г., Барсель

22. B.А. Состояние красной крови. // Орбит, станция «Мир», Москва, 2002. -Т.2.-С.181-183.

23. Каландарова М.П., Поляков В.В., Гончаров И.Б. Гематологические показатели у космонавтов в условиях космического полета. // Авиакосм, мед., 1991.-Т.6.-С.11-14.

24. Киселев Р.К. Балаховский И.С., Вировец O.A. Изменение массы гемоглобина при длительной гипокинезии. // Косм. биол. и авиакосм, медицина.- 1975.- Т.9.- №5.- С.80-84.

25. Клиническое руководство по лабораторным тестам. // Под ред. Н.У. Тица.- М.,2003.-С. 128-131.

26. Ковалева Л.Г., Меликян А.Л. Морфофункциональная характеристика эритроцитов как критерий эффективности эксфузионного и цитостатического лечения эритремии. // Клин. лаб. диагностика. 1998.-№8.-С.20-21.

27. Коваленко Е. А., Туровский H.H. Гипокинезия. // М. Медицина. 1980.1. C.320.

28. Козинец Г.И., Гольдберг Е.Д. Кинетические аспекты гемопоэза. Томск, 1982.

29. Козинец Г.И., Каюмова Д.Ф., Погорелов В.М. Клетки периферической крови и экологические факторы внешней среды // Клин. лаб. диагн. 1993.-№1.-С. 14-20.

30. Козинец Г.И., Котельников В.М., Погорелов В.М. Применение компьютеров в гематологических цитологических исследованиях. // Клин, лаб. диагностика. 1990.- №10.- С.25-26.

31. Козинец Г.И., Макаров В.А. Исследование системы крови в клинической практике. Медицина, 1997.-С.60-71.

32. Козинец Г.И., Созонов В.В., Гусев A.A. и др. Опыт использования системы автоматической микроскопии периферической крови «АСПЕК» в лабораторной практике. // Клин. лаб. диагн. 2000. № 10. - С. 2.

33. Коржуев П.А. Проблема невесомости с точки зрения земной физиологии // Авиационная и космическая медицина. Москва, 1963.-С.284-287.

34. Коробова Ф.В. Компьютерная морфометрия тромбоцитов периферической крови здоровых людей. // Автореф. канд. дисс. Москва, 2001г.

35. Крымский Л.Д., Нестайко Г.В., Рыбалов А.Г. Растровая электронная микроскопия сосудов и крови.- М., Медицина, 1976.

36. Левин Г.Г., Козинец Г.И. Новые возможности оптической микроскопии при исследовании клеток системы крови. // Клип. лаб. диагностика. 1997.-№10.- С.14-16.

37. Легеньков В.И. Динамика показателей периферической крови у космонавтов в процессе профессиональной подготовки и в космическом полете. // Автореф. канд. дисс. 1975.

38. Легеньков В.И. Изменение состояния красной крови человека под влиянием невесомости. // Автореф. дис. док. мед. наук, М., 1993.

39. Легеньков В.И., Козинец Г.И. Гематология космических полетов. Москва, 2004,- С.128-132.

40. Легеньков В.И., Козинец Г.И. Гематология космических полетов. Москва, 2004.- С. 19-21.

41. Легеньков В.И., Киселев Р.К. Гематологические показатели периферической крови космонавтов. // Гематология и трансфузиология. Медицина, 1991.-№9.-С.30-32.

42. Легеньков В.И., Козинец Г.И., Андреева А.П. Результаты гематологических исследований у членов космических экипажей ЭО-2, ЭО-3 и ЭО-4. // Гематология и трансфузиология. Москва. 1990.-№7.-С.-24-27.

43. Легеньков В.И., Токарев Ю.Н., Береговкин A.B., Воронин Л.И. Адаптационный эритроцитопенический синдром невесомости. // Проблемы гематологии и переливания крови. 1981.- Т.26.-№12. -С. 21-26.

44. Лобовская Л.В. Поверхностная архитектоника и электрофоретическая подвижность интактных и консервированных тромбоцитов. // Канд. диссерт., Москва, 1985г.-182с.

45. Медовый B.C., Николаенко Д.С., Парпара А. А. и др. Автоматизация микроскопических анализов мазков крови и контроль качества с применением референсных виртуальных слайдов. // Клин. лаб. диагн. 2008.-№6.-С. 46-51.

46. Мясников В.И. Козеренко О.П., Богдашевский Р.Б. Психологическая надежность космонавта в полете. // Руковод. по физиологии.- Медицина, 1987.-С.88-102.51 .Николаенко Ю.Н. К регуляции гипоксического эритроцитоза. // Пробл. косм. мед. 1966.-С.288-289.

47. Новиков М.А., Лосев A.A. Психологический отбор и комплектование экипажей. Москва, Наука. 1986.- С.31-35.

48. Новицкий В.В., Козлов Ю.А., Лаврова B.C., Шевцова Н.М. Гемопоэз, гормоны, эволюция. Новосибирск, 1997.

49. Пестов И.Д., Тищенко М.И., Королев Б.А. Исследование ортостатической устойчивости после длительной гиподинамии. // Проблемы косм. биол. 1969.-Т.13.-С.230-240.

50. Погорелов В.М., Иванова И.А., Верденская Н.В., Виноградов А.Г., Гусев A.A., Сазонов В.В., Козинец Г.И. «Аспек» отечественная система автоматической микроскопии мазков периферической крови.// Лаб.1999.-№4.-С.16-17.

51. Погорелов В.М., Козинец Г.И., Ковалева Л.Г. Лабораторно-клиническая диагностика анемий. Москва, МИА, 2004.-С. 24-27.

52. Погорелов В.М., Краснова Л.С., Чаниева М.И., Красников A.B., Козинец Г.И. Геометрия прегемолитических пойкилоцитов в стандартных центрифугатах крови на предметных стеклах. // Гематол. и трансф. 2008.-Т.53.- №6.-С.22-26.

53. Погорелов В.М., Медовый B.C., Балабуткин В.А., Соколинский Б.З., Пятницкий A.M., Козинец Г.И. Методы компьютерной цитологии в гематологических исследованиях. // Клин. лаб. диагностика. 1997.- №11.-С. 40-44.

54. Погорелов В.М., Чаниева М.И., Иванова И.А., Верденская Н.В., Скедина М.А., Бескоровайнова В.Ю., Козинец Г.И. Автоматическое распознавание микроскопических изображений тромбоцитов на анализаторе АСПЕК. // Гематол. и трансф. 2010.-Т.55.-№5.-С.51-52.

55. Поляков В.В., Иванова С.М., Носков В.Б. Гематологические исследования в условиях длительных космических полетов // Авиакосм, и экол. мед. 1998.-Т.ЗЗ.-№2.-С.9-18.

56. Смирнова Л.А., Семенихин A.B., Костко H.A. Тромбоцитозы. // Медицинские новости.2005.-№9.-С.36-39.

57. Соколинский Б.З. Методика и применение автоматизированной эритроцитометрии. // Автореф. канд. мед. наук. 2001.- С.38.

58. Торховская Т.И. Активность Na К-АТФ-азы и содержание холестерина в мембранах эритроцитах больных коронарным атеросклерозом и при различных типах дислипопротеидемии. // Вопросы мед. химии, 1983.-№5.-С.69-73.

59. Тоцкая A.A. Кровяные пластинки в норме, тромбастении, тромбоцитопении (фазово-контрастная микроскопия). // Автореф. канд. диссер. 1967г.

60. Ужанский Я.Г. Опыт изучения механизма действия гипоксии на эритропоэз. //Патол. физиол. 1970.-Т.14.-С.З-8.

61. Ушаков A.C., Иванова С.М., Атауллаханов Ф.И. Особенности метаболизма эритроцитов человека в условиях длительного космического полета. //Косм. биол. и авиакосм, мед.- 1985.-№5.-С.19-24.

62. Ушаков A.C., Иванова С.М., Брантова С.С. Влияние космических полетов различной продолжительности на энергообмен в эритроцитах человека. // Косм. биол. и авиакосм, мед.- 1981.-№5.-С.23-27.

63. Ушаков A.C., Козинец Г.И., Иванова С.М. и соавт. Характеристика структурно-функциональных свойств и энергетического обмена эритроцитов при космических полетах различной продолжительности. // Косм. биол. и авиакосм, мед.- 1982.-№1.-С.34-37.

64. Чайка A.M., Балаховский И.О., Легеньков В.И., Киселев Р.К. Изменение объема плазмы, внеклеточной жидкости и массы плазматических белков в условиях АНОГ и иммерсии. // Космич. биол.- Москва, 1982.-№6.-С.22-28.

65. Чернов В.М., Румянцев А.Г. Проблема использования внутривенных препаратов железа в клинической практике. Обзор. // Гематология и трансфузиология. 2001.-Т.46.-№6.-С.34-40.

66. Anderson IG, Schaumuller LF, Kramer HL. A preliminary study on the hematology of freshwater-reared Sea bass. // Barramundi, Lates calcarifer. Asian Fish Sei 1996.-Vol.9.-P. 101-107.

67. Akira Fuse, Yoichiro Aoki, Takeyuki Sato, Masakazu Kita, Toshiro Yamamoto, Kazuo Toriizuka, Masataka Sunohara, Hajime Takeoka. Effect of microgravity on thrombocytosis. // J. Gravit. Physiol. 2001.-Vol.8.-P.63-64.

68. Albertini M., Teodori L., Piatti E., Piacentini M., Accorsi A., Rocchi M. Automated analysis of morphometric parameters for accurate definition of erythrocyte cell shape. // Cytometry Part A. 2003.-Vol.52.-Suppl 1.-P. 12-18.

69. Alfrey C. P., Fishbane S. Implications of neocytolysis for optimal management of anaemia in chronic kidney disease. // Nephron Clin. Pract. 2007.-Vol.106.-№4.-P.49-56.

70. Alfrey C.P., Rice L., Moulds J. Hematologic changes in space. // White, ed. Gravity, Biology and Medicine: Insights through Space Research. Paris, Gordon.

71. Alfrey C.P., Udden M.M., Huntoon C.L., Driscoll T. Destruction of newly released red blood cells in space flight.- Med. 1996.-Vol 28.- №10.- P.42-44.

72. Alfrey C.R., Rice L., Udden M.M., Driscoll T.B. Neocytolysis: physiological down-regulator of red cell mass. // Lancet, 1997. Vol.349.-P.1389-1390.

73. Alfrey C.R., Udden M.M., Leach-Huntoon C., Driscoll T.B., Pickett M.H. Control of red blood cell mass in spaceflight. // J.Appl.Physiol. 1996.-Vol.81.-P.98-104.

74. Bacus J., Belanger M., Aggarwal R., Trobaugh J. Image processing for automated erythrocyte classification. // Journal of Histocemistry and Cytochemistry. 1976.-Vol.24.-Suppl 1 .-P. 195-201.

75. Bell A. Morphological evaluation of erythrocytes. // Clinical Hematology: principles, procedures, correlations. 1997.-Vol.8.-P.87-105.

76. Bessis M. Living Blood Cells and their Ultrastructure. Paris: Masson & Cie, 1972: 367-412; 555-673; 727-730.

77. Bessis M. Morphology of the erythron. // Hematology. 1985.-№4.- P.257-279.

78. Bessis M. Red cell shape: An illustrated classification and its rationale. // New York, 1973.-P.1-26.

79. Brun JF. Exercise hemorheology as a three acts play with metabolic actors: is it of clinical relevance? // Clin. Hemorheol. Microcirc. 2002.-Vol.26.-P.155-174.

80. Devi SA, Subramanyam MVV, Vani R. Adaptation of the antioxidant system in erythrocytes of trained adults rats: Impact of intermittent hypobaric-hypoxia at two altitudes. // Comp. Biochem. Physiol., 2005.-Vol.l40(l).-P.59-67.

81. Dunn C.D., Johnson P.C. Anemia of space flight // Blood. 1983.-Vol.6l.-№6.-P.1278-1279.

82. Dunn C.R., Johnson P.C., Leonard J.I. Erythropoetin effects of space flight relevaluatedy. //The Physiologiat, 1981.-Vol.24.- Suppl.6.- P.5-6.

83. Dunn C.R., Lange R.D., Kimzey S.L., Jonson P.C. Red blood cell mass and plasma volume changes in manned space flight.// J.American med. Association. 1967.-Vol.200.-P.549-583.

84. Fairbanks V. F. Is the peripheral blood film reliable for the diagnosis of iron deficiency anaemia. // American Journal of Clinical Pathology.1971.-Vol.55.-P.447-451.

85. Ferdinand P.M., Lobue J., Lutton J. et all. // Exp. Hematology. 1985.-Vol. 13.-Suppl.8.-P.719-721.

86. Grebe R., Schmid S.H. Tangent counting for objective assessment of erythrocyte shape changes. // Biorheology.l985.-Vol.22.-P.455-469.

87. Gurcan N., Erbas D., Ergen E., Bilgehan A., Dundar S., Aricioglu A., Dikmenoglu N. Changes in blood haemorheological parameters after submaximal exercise in trained and untrained subjects. // Physiological research, 1998.-Vol.47.-P. 23-27.

88. Hattori A. Scanning electron microscopy of human peripheral blood cells. // Acta haemat. Jap. 1972.-Vol.35.- №4.- P. 457-482.

89. Ingram M., Coopersmith A. Reticulated platelets following acute blood loss. // Br. J. Haematol. 1969.-Vol.l7.-P.225-229.

90. Ingram M., Preston Jr. K. Automatic analysis of blood cells. // Scientific American. 1970.-Vol.223.-Suppl.5.-P.72-82.

91. Javela K. Laboratory analyses for evaluation of platelet disorders and platelet concentrates. // Academic dissertation. Helsinki, 2006.-P.76.

92. Jessup G., Strader A., Gatlin. Human physiology in space. // Lane Press. Inc. 2002.-Vol 50.-№2.-P.172.

93. Johnson P.C. The erythropoietic effects of weightlessness. // Current Concepts in Erythropoiesis, Wiley.l983.-P.279-300(in press).

94. Kesheng Dai, Yuedan Wang, Rong Yan, Quanwei Shi, Zhicheng Wang, Yanhong Yuan, Hong Cheng, Suping Li, Yubo Fan, Fengyuan Zhuang. Effectsof microgravity and hypergravity on platelet functions. // Thromb Haemost. 2009.-Vol. 101.-P. 902-910.

95. Kimsey S. J., Burns L.S., Fisher C.L. Effects dynamic changes in red cell shape in response to the space flight. // Proceedings of Skylab Life Sciences Symp.-1974.- Vol.11.- P.93-118.

96. Lancaster M.C., Triebwasser J.H. The effect of total body exercise on the metabolic, hematologic and cardiovascular consequences of prolonged bed rest. // In: Hypogravic and hypodynamia environments, Washington. 1971, p. 225248.

97. Leach C. S. An overvien of the endocrine and metabolic changes in manned space flight. // Acta Astronaut. 1981.-Vol.8.- Suppl.9.- P.977-986.

98. Lee KW, Lip GYH. Effects of lifestyle on hemostasis, fibrinolis, and platelet reactivity. // Archives of Internal Medicine 2003.-Vol.l9.-P.2368-2399.

99. Lougster G.H., Buckley T., Sikorski J. Scanning electron microscope studies of red cell morphology. Vox Sang. 1972.-Vol.22.- P. 161-169.

100. Matsuzzaki Y., Mizuguchi T., Kosaka M. Int. J. Hematology. 1996.-Vol.63.-№l.-P.33-40.

101. Miller E. B., Singer K., Dameshek W. Experimental production of target cells by splenectomy and interference with splenic circulation. // Proc. Soc. Exper. Biol, and Med. 1942.-Vol.49.-P.42.

102. Miller P.B., Johnson R.L., Lamb I.E. Effects of four weeksof absolute bed rest on circulatory functions in man. // Aerosp. Med. 1964.-Vol.35.-№12.-P.l 194-1200.

103. Miller P.B., Johnson R.L., Lamb I.E. Effects of moderate physical exercise during four weeks of bed rest on circulatory functions in man. // Aerosp. Med. 1965 .-Vol.36.-№ 11 .-P. 1077-1082.

104. Mitchison J.M. Thickness and structure of the membrane of the human red cell ghost. //Nature, London.I950.-Vol. 166.

105. Mohandas N. Reticulocyte biology in red blood cell disorders. / In: New Perspective for Hematology. // Conference Proceedings, Bayer Diagnostics. 1993.-P.46-47.

106. Nakao M., Jinbu Y., Sato S., Ishigami Y., Nakato T., Ito Ueno E., Wake K. Structure and function of red cell cytoskeleton. // Biomed. Biochim. Acta. 1987.-Vol.46.-P.85-89.

107. Pace N., Meyer L.B., Vaughn B.E. Erythrolysis on return of altitude aeclimatized individuals to sea level. // J. Appl. Physiol. 1956.-Vol.9.- P. 141144.

108. Rice L., Alfrey C. P. Modulation of red cells mass by neocytolysis in space and on Earth. // Eur J Physiol. 2000.-Vol.44.-Suppl.l.-P.91-92.

109. Rice L., Alfrey C.P., Driscoll T., Whitley C.E., Hachey D.L., Suki W. Neocytolysis contributes to the anemia of renal disease. // Am. J. Kidney Dis.l999.-Vol.33.-P.59-62.

110. Rice L., Ruiz W., Driscoll T., Whitley C.E., Tapia R., Hachey D.L., Gonzales G.E., Alfrey C.P. Neocytolysis on descent from altitude: A newly recognized mechanism for the control of red cell mass. // Ann. Intern. Med. 2001.-Vol. 134.-P.652-656.

111. Risso A., Turello M., Biffoni F., Antonutto G. Red blood cell senescence and neocytolysis in humans after high altitude acclimatization. // Blood Cells Mol. Dis. 2007.-Vol.38.-P.83-92.

112. Ruberto D., Dempster A., Khan S., Jarra B. Analysis of infected blood cell images using morphological operators. // Image and vision computing. 2002,-Vol.20.-Suppl.2.-P.133-146.

113. Ruckman KS, Sherman AR. Effects of exercise on iron and copper metabolism in rats. // J. Nutr., 1981 .-Vol. 111 .-P. 1593-1601.

114. Sandhaus L.M., Osei E.S., Agrawal N.N., Dillman Ch. A. And Meyerson H.J. // Platelet counting by the Coulter LH 750, Sysmex XE 2100, and Advia 120. 2002.-Vol.l 18.- P.235-241.

115. Suh J., Kim D., Kim Y., Won D., Shin S. Changes in hemorheological deformability of human red cells exposed to oxidative stress. // Int. Jnl. Lab. Hematol. 2008.-Vol.30.-Suppl.l.- P.77-78.

116. Tavassoly B.M. Anemia of space flight. I I Blood. J. The American Society of Hematology. 1982.-Vol.60.- №5.- P.1059-1076.

117. Taylor H.L., Erickson L., Henschel A., Keys A. The effect of bed rest on the blood volum of normal young man. // Amer J. Physiol. 1945.-Vol.l44.-№2.-P.227-232.

118. Tolbot J.M., Ficher K.D. Influense of space flight on red blood cells. // Red. Proc. 1986.-Vol.45.-P.2285-2290.

119. Trial J., Rice L., Alfrey P. Erythropoietin withdrawal alters interactions between young red cells, splenic endothelial cells and macrophages: An in vitro model of neocytolysis. //J. Invest. Med. 2001.-Vol.49.-P.335-345.

120. Trial J., Rice L., Moulds J., Alfrey C.P. Erythropoietin receptors and responsiveness by splenic endothelial cells Abstract., Blood. 1999.-Vol.94,-Suppl 1.-P.405.

121. Turchetti V., Matteis C., Leoncini F., Trabalzini I., Guerrini M., Forconi S. Variations of erythrocyte morphology in different pathologies. // Clin. Hemorheol. Microcirc. 1997.-Vol. 17.-P.209-215.

122. Udden M.M., Driscoli T.B., Pickett M.N., Leach-Huntoon C.S., Alfrey C.P. Descreased production of red blood cells in human subjects exposed to microgravity. //J.Lab.Clin.Med. 1995. Vol.l25.P.442-449.

123. William H. Crosby Analytical Review: The pathogenesis of spherocytes and leptocytes (Target Cells). // Blood. 1952. Vol.7.-P.261-274.

124. Winterholtes K.H., Glothhaar B.Ser. Hematology. 1971.-Vol.4.-P.84.

125. Zubieta-Galleja G.R., Zubieta-Castillo G., Zubieta-Galleja L., Zubieta N. The increase in hematocrit during the high altitude adaptation process. // Wilderness Environ Med. (Abstract) 2006.-Vol.l7.-P.202-203.