Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей: эпизоотология и меры борьбы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Чичикин, Алексей Юрьевич

• Чичикин, Алексей Юрьевич
• кандидат ветеринарных наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Чичикин, Алексей Юрьевич

1. Введение.

1.1. Актуальность темы.

1.2. Цель и задачи исследования.

1.3. Научная новизна.

1.4. Практическая значимость и реализация результатов исследования.

1.5. Апробация работы.

1.6. Публикации.

1.7. Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на защиту.

2. Обзор литературы.

2.1. Краткая характеристика эпизоотической геморрагической болезни оленей.

2.2. Морфология и физико-химическая характеристика вируса ЭГБО.

2.3. Распространение ЭГБО в мире.

2.4. Другие еерогруппы рода Орбивирусов.

2.5. Методы диагностики, вирусологического и серологического мониторинга ЭГБО.

3. Собственные исследования.

3.1. Материалы.

3.1.1. Вирусы.

3.1.2. Животные.

3.1.3. Культуры клеток.

3.1.4. Питательные среды.

3.1.5. Сыворотки.

3.1.6. Реактивы, использованные в работе.

3.1.7. Оборудование.

3.2. Методы.

3.2.1. Инфицирование культур клеток, получение и титрование вируссодержащего материала.

3.2.2. Серологические методы исследования.

3.2.3. Искусственное заражение животных.

3.2.4. Электронная микроскопия.

3.2.5. Статистические методы исследования.

3.2.6. Метод эпизоотологического исследования.

3.3. Результаты собственных исследований.

3.3.1. Определение восприимчивости некоторых видов жвачных, обитающих на территории РФ, к заражению вирусом ЭГБО.

3.3.1.1. Изучение клинических особенностей течения ЭГБО у благородного оленя.

3.3.1.2. Изучение клинических особенностей течения ЭГБО у овец.

3.3.1.3. Изучение клинических особенностей течения ЭГБО у КРС.

3.3.2. Сравнительная оценка методов серологического и вирусологического мониторинга ЭГБО.

3.3.2.1. Сравнительная оценка чувствительности методов РДП, РСК, РН, ТФ ИФА и РЗГА для серологического мониторинга ЭГБО.

3.3.2.2. Сравнительная оценка эффективности вирусовыделения вируса ЭГБО на культуральных и биологических моделях.

3.3.3. Анализ и моделирование нозоареала ЭГБО.

3.3.3.1. Организация исходных данных.

3.3.3.2. Пространственная динамика и структура нозоареала

ЭГБО в мире.

3.3.3.3. Математико-картографическое моделирование действующего и потенциального нозоареала ЭГБО.

3.3.4. Серологический и вирусологический мониторинг ЭГБО на территории РФ.

3.3.4.1. Серологический мониторинг.

3.3.4.2. Вирусологический мониторинг.

3.3.5. Изучение иммунобиологических свойств выделенного изолята вируса ЭГБО.

3.3.5.1. Получение специфических к выделенному изоляту сывороток крови.

3.3.5.2. Изучение антигенного родства выделенного изолята и других представителей рода Орбивирусов.

3.3.5.3. Изучение генетического родства выделенного изолята с другими представителями рода Орбивирусов.

3.3.6. Разработка мероприятий по профилактике и ликвидации ЭГБО в РФ.

4. Обсуждение.

5. Выводы.

6. Практические предложения.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей: эпизоотология и меры борьбы»

1.1. Актуальность темы

Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей - вирусная, трансмиссивная болезнь парнокопытных жвачных, вызывающая нарушения в кровеносной системе. Вирус ЭГБО классифицируется как Орбивирус и антигенно родственен вирусу блютанга, также являющем ся Орбивирусом. Известно девять серотипов этого вируса, распространенных в мире. Два серотипа (Нью-Джерси и Альберта) были выделены от больных оленей, но впоследствии выделялись и от крупного рогатого скота, диких жвачных, а также от основного переносчика Culicoides variipennis (7, 13, 47, 50, 56, 60, 67, 68, 81).

У белохвостого оленя (Odokoileus virginianus) и антилоп ЭГБО обычно протекает в острой форме с признаками общего геморрагического диатеза, сопровождаемого отеками подкожной клетчатки. При вспышке болезни в период активного лета насекомых, на фоне высокой заболеваемости, смертность достигает 90%. У крупного рогатого скота, овец и коз болезнь протекает субклиниче-ски, с симптомами, аналогичными признакам заражения вирусом блютанга. Эффективным методом подтверждения клинического диагноза является обнаружение специфических антител в сыворотках крови. Экономические потери в результате ЭГБО у крупного рогатого скота, овец и коз складываются из ограничения на экспорт, а также от снижения привесов и удоя при клинической форме течения болезни. Возникновение ЭГБО в популяции диких или парковых оленей влечет за собой ограничение на спортивную охоту и туризм.

Болезнь широко распространена в странах Северной и Южной Америк, Австралии и Южной Африке, Океании. Вместе с тем, серодиагностика ЭГБО свидетельствует о более широком географическом распространении вируса (84, 96,97,99,113).

Наша страна граничит с со странами, многие из которых являются длительно неблагополучными по ЭГБО. Наибольшая вероятность заноса возбудителя этой болезни как в виде моноинфекции, так и в ассоциации с вирусом блю-танга, которая часто наблюдается за рубежом, исходит из Японии, Турции, Северной Америки, Монголии и Китая (10, 11, 13).

На территории РФ, наряду с домашними животными, у которых зарегистрирована циркуляция вируса ЭГБО за рубежом, обитает ряд диких парнокопытных, в систематическом отношении близких американскому белохвостому оленю. Это - благородный олень (Cervus eiaphus) - более 150 тыс. особей, пятнистый олень (C.nippon) - более 10 тыс., лань (С. dama), северный олень (Rangifer tarandus) - 1,2 млн. Кроме того, более 100 тыс. содержится в олене-пантовых хозяйствах. Эти виды оленей являются источником не только диетического мяса и высококачественной кожи, но и сырья для производства пантокрина. Помимо этого оленевые играют огромную роль в поддержании экологического равновесия биосферы. В национальных парках, заповедниках, заказниках они являются как объектом эстетического восприятия,так и объектом спортивной охоты.

Из 132 видов мокрецов, обитающих на территории РФ, около 90% способны быть переносчиками вируса ЭГБО и имеют широкое распространение. Географические границы России охватывают обширную территорию Евразии, включая все природно-климатические зоны с соответствующими эколого-фаунистическими комплексами,, аналогичными таковым в местах регистрации ЭГБО за рубежом.

В юго-восточных и юго-западных регионах России, с высокой плотностью потенциально восприимчивых к заражению вирусом ЭГБО животных, широким распространением специфических переносчиков, гео-климатическими условиями, сходными с таковыми в странах,стационарно неблагополучных по ЭГБО, существует высокая вероятность возникновения этой болезни. В связи с вышеизложенным, проведение научных исследований по изучению эпизоотологии ЭГБО является актуальным.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Чичикин, Алексей Юрьевич

5. Выводы

1. В результате сравнительной оценки средств и методов серологического мониторинга эпизоотической геморрагической болезни оленей установлено, что наиболее приемлемым методом, позволяющим выявить максимальное количество серопозитивных животных является экспресс метод реакции нейтрализации.

2. Установлено, что благородный и пятнистый олени, обитающие на территории РФ, восприимчивы к вирусу эпизоотической геморрагической болезни оленей. Благородный олень, при искусственном заражении, переболевает в подострой форме и способен быть источником инфекции в течение трех недель.

3. На основании результатов эпизоотологического моделирования приграничные районы Приморского края, Амурской и Читинской областей, Бурятии, Тывы и Алтая отнесены к зонам высокого риска возникновения эпизоотической геморрагической болезни оленей.

5. При проведении серологического мониторинга эпизоотической геморрагической болезни оленей на территориях, определенных нами как зоны высокого риска возникновения болезни, установлена циркуляция вируса эпизоотической геморрагической болезни оленей среди восприимчивого поголовья оленей - до 7%, КРС и коз - до 2 %, овец - до 4%. Не выявлено серопозитивных животных среди яков, лошадей, верблюдов, что свидетельствует о незначительной их роли в эпизоотическом процессе при эпизоотической геморрагической болезни оленей.

6. В результате проведенного вирусологического мониторинга от пятнистого оленя выделен изолят вируса эпизоотической геморрагической болезни оленей (Приморский-91), отнесенный ко 2 серотипу, что свидетельствует о циркуляции данного вируса на поголовье оленевых в Приморском крае. в. Практические предложения

1. В результате проведенных экспериментальных исследований получены данные, позволяющие оценить степень риска возникновения ЭГБО в РФ.

2. Разработанные "Методические указания по выявлению РНК вируса ЭГБО методом полимеразной цепной реакции", утвержденные директором

ВНИИВВиМ 17.01.2002, рекомендованы для использования при идентификации указанного возбудителя и его дифференциации от генетически родственных вирусов семейства Орбивирусов.

3. Для использования ветеринарной службой в охотничьих и олене-пантовых хозяйствах, заповедниках и пограничных ветеринарных пунктах разработаны и предложены «Ветеринарные правила по профилактике и ликвидации ЭГБО» рассмотренные ученым советом ВНИИВВиМ и представленные на утверждение в Департамент ветеринарии МСХ РФ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Чичикин, Алексей Юрьевич, 2002 год

1. Алехин P.M., Бакулов И.А., Ведерников В.А. и др. Руководство по общей эпизоотологии. -М.: Колос, -1979. -324с.

2. Аллаярова Г.М., Василенко Н.Э., Сергеев В.А. Изучение бляшкообразующей способности вируса катаральной лихорадки овец // Сб. трудов ВНИИВВиМ. -Покров, 1971. -С.180-185.

3. Вилисов Г.М., Иванов, В.Ф., Хижинский П.Г. Распространение опасных и малоизученных заболеваний животных в пограничных районах Средней Азии // Материалы научной конференции. -НИСХИ, -1988. -т.1, -с. 99-100.

4. Дзантиев Б.Б., Осипов А.П. Классификация и характеристика методов иммуноферментного анализа.// Итоги науки и техники. Биотехнология. -М.: -1987. -№3. -С. 56-117.

5. Леви М.И., Басова Н.Н., Сучков Ю.Г. Оптимальные условия РСК при некоторых инфекциях. // Акта вирологика, -1960. -№6. -С. 348.

6. Литвинова В.П. Реакция диффузионной преципитации в диагностике катаральной лихорадки овец.// Сб. трудов ВНИИВВиМ. -Покров. -1976. -Т. 2., -С. 213-215.

7. Луницин А.В. Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей (Обзор литературы) // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Материалы научн. конф. -ВНИИВВиМ. -Покров, -1990. -с.48-49.

8. Метелёва Р.И., Олейник Л.Я. Изучение катаральной лихорадки овец. Обнаружение комплементфжсирующего антигена в тканях инфицированных овец//Сб. трудов ВНИИВВиМ. Покров, -1971. -С. 250-252.

9. Парыгина М.М., Логинова Н.В. Диагностические возможности ТФ ИФА для выявления антигенов и антител к РНК-содержащим вирусам// МРЖ, -1988. -разд. 1. -С. 22-23.

10. Сергеев В.А. Катаральная лихорадка овец. В кн.: Карантинные и малоизученные болезни животных. -М.: Колос, -1983. -С. 63-71.

11. Сергеев В.А. Болезнь Ибараки. В кн: Карантинные и малоизученные болезни животных. -М.: Колос, -1983. -С. 93-95.

12. Харитоненков И.Г., Христова М.Л. Использование иммуноферментных методов в вирусологии //Молек. генет. микробиол. и вирусол. 1985. - №6. -с.3-15.

13. Чичикин А.Ю., Луницин А.В., Книзе А.В. Эпизоотическая ситуация по эпизоотической геморрагической болезни оленей.// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Материалы научн. конф. -ВНИИВВиМ. -Покров, -1992. -с.259-260

14. Abu Elzein Е.М.Е. Bluetongue in the Sudan.// Rev.Sci.et Tech. Off. Internac. des Epizoot.-1985.-v.4, N4- p.795-801.

15. Afshar A., Thomas F.C., Wright P.F. Comparison of competitive ELISA, indirect ELISA and standart AGID tests for detecting bluetongue vims antibodies in cattle and sheep.//Vet.Res.-1989.-v. 124,N6-p. 136-141.

16. Appleton J.A., Letchworth G.J. Monoclonal antibody analysis of serotype-restricted and unrestricted bluetongue virus antigenic determi-nants.//Virology.-1983.-v,124, N2- p.286-299.

17. Bando B.M. Isolation of bluetongue and epizootic hemorrhagic disease viruses in cell culture.// Proc. Amer. Assoc. Lab. Diagn.-1975,-p. 163-174.

18. Bando B.M., Jones R.H. A microassays system to isolate bluetongue and epizootic hamorrhagic disease viruses from the bitting guat, Culicoides variipennis. // J. Simp. Internac. Lab. Diagn., Guanaynat.Mexico-1977.-v.2- p.361-375.

19. Barber T.L., Jochim M.M. Serotyping bluetongue and epizootic haemor-rhagic disease virus strain. // Proc. 18th Ann. Meet. Am. Assoc. Vet. Lab. Diagn., 1975., p.352-359.

20. Bodkin D.K., Knudson D.L. Genetic relatedness of Palyam serogroup viruses by RNA-RNA blot hibridisation // J. Gen. Virol., 1986., 67: 683691.

21. Boorman J., Gibbs E.P.J. Multiplication of the virus of Epizootic Haemoirrhagic Disease of Deer in Cuilcoides species (Diptera, Cera-topogonide).// Arch. ges. Virusforseh.-1973.-V.41,N3- p.259-266.

22. Borden E.C., Shope R.E., Murphy F.A. Physicochemical and morphologic relationships of some arthropod-borne viruses to bluetongue vi-rus-a new toxonomic group: phisicochemical and serologic studies.//! Gen. Virol.-l 971. -v.13 p.261-271.

23. Boulanger P., Frank J. Serological methods in the diagnosis of Bluetongue. //Austral. Vet. J. -1975. -v.51,N4-p.185-189.

24. Bowne J.G., Jochim M.M., Luedke A.J. Recent advances in bluetongue disease research in the United States. // In. XIX congreco mundial de mediciuna veterinaria ny zootechnia. Mexico, -1971.-v.l-p.344-347.

25. Bowne J.G., Luedke A. J., Jochim M.M., MetcalfH.E. Bluetongue disease in cattle // J.Am. Vet.Med.Assoc. 1968., 153: 662-668.

26. Breckon R.D., Foster N.M. Bluetongue vims association with fibrils and macrotubules in cultured cells. // 38th Annu. Meet. Electron Microsc. Soc. Amer., San Francisco, 1980. - p.478-479.

27. Breckon R.D., Foster N.M. Fibrils, tubules, and crystals in cells infected with epizootic hemorrhagic disease virus. // 38th Annu. Meet. Electron Microsc. Soc. Amer., San Francisco, Calif., Aug. 4-8., -1980., Proc., Baton Rouge, La-1980.- p.480-481.

28. Brown S.E., Morrison H.G., Buckley S.M. Genetic relatedness of the Kemerovo serogroup virus: I. RNA-RNA blot gibridization // Acta Virol., 1988., 32: 369-378.

29. Campbell C.H., Barber T.L., Jochim M.M. Antigenic relationship of Iba-raki, bluetongue and epizootic haemorrhagic disease viruses. // Vet. Microbiol. -1978. -v.3. -p. 15-22.

30. Campbell C.H., George T.D. A preliminary report of a comparizon of epizootic haemorrhagic disease viruses from Australia with oter from Nors America, Japan and Nigeria // Aust. Vet. J., 1986., 63: 233.

31. Clarke D.H., Casals J. Techniques for hemagglutination and hemagglu-tination-ingibition with arthropod-borne viruses. // Amer. J. Trop. Med. Hyg. -1958. -v.7-p. 561-573.

32. Della-Porta A.J., McPhee D.A., Parsonson I.M. Biochemical and serological comparisons of Australian orbiviruses: Do we med subgenera? // In: R.W. Compans and D.H.L. Bishop, (Eds), Double-stranded RNA viruses, Elsevier, New Jork. -1983. -p.343-352.

33. Drolet B.S., Mills K.W., Belden E.L., Mecham J.O. Development and application of an enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) for the detection of antibody to bluetongue virus. // U.S.Ann.Healt Ass.Ann.Meet.-1988.-v.92- p. 113-122.

34. Engvall E., Perlmann P. Enzime-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G. // Immunochemistry. -1971.-v.8.- p. 871-874.

35. Foster M.M., Metcalf H.E., Barber T.L. Bluetongue and epizootic hemorrhagic disease virus isolations from vertebrate and invertebrate hostat a common geographie. // J. Amer. Vet. Assoc. -1980. v. 176, N2,- p. 126129.

36. Fulton R.W., Burge L.J., Cummins J.M. Neutralizing antibody responses to bluetongue and epizootic hemorrhagic disease virus serotypes in beef cattle. // Am. J. Veter. Res. -1989 -V.50, N5. p.651-654.

37. Gard G.P., Marshall I.D., Woodroofe G.M. Annually recurrent epidemic polyarthritis and Ross River virus activity in a coastal area of New South Wales // Am. J. Trap. Med. Hig., 1973., 22: 551-560.

38. Gard G.P., Metville L.F., Shorthase J.E. Investigations of bluetongue and other arboviruses in the blood and semen of naturally infected bulls. // Vet. Microbiol. -1989. -V.-20, N4. -p.315-322.

39. Gibbs E.P.J. Serological survey of ruminants in Some Caribbean and

40. South American conntries for type-specific antibody to bluetongue and epizootic haemorrhagic disease viruses. //Vet.Res.-1984.-v. 114,N26- p.635-638.

41. Gonzales H.A., Knudson D.L. Intra-and Inter-Serogroup Genetic Re-latedness of Orbiviruses. I Blot-Hybridization of Viruses of Australian Serogroups.// J. Gen. Virol. -1988. -v.69, N1, -p. 125-134.

42. Gorman B.M. On the evolution of orbiviruses // Intervirology. 1983., 20: 169-180.

43. Gorman B.M. Speciation in orbiviruses // Prog.Clin. Biol. Res., 1985., 178., Alan Liss., New-york, pp. 275-278.

44. Gorman B.M., Taylor J., Walker P.J. Orbiviruses // The reoviridae., 1983., Plenum, New-york, pp. 287-357.

45. Hoff G.L. Observations on bluetongue and epizootic haemorrhagic disease viruses in white-tailed. // J.Wilde dis. -1974. -v. 10, -p.25-31.

46. Hoff G.L., Hoff D.M. Bluetongue and epizootic haemorrhagic disease: a review of these diseases in nondomestic artiodactyles. // J. Zoo Animal. -1976. -v.l, N2, -p.26-30.

47. Hoff G.L., Trainer D.O. Bluetongue and epizootic haemorrhagic disease viruses: their relationship to wildlife species. // Adv. in Veter. Sci. camp. Med. New Jorke.a. -1978. -V.22, p.111-132

48. Homan E.J., Taylor W.R., Lorbacher de Ruis H., Vuill T.M. Bluetonguevirus and epizootic haemorrhagic disease of deer vims serotypes in northern Colombian cattle. // J. Hyg. Camb.-1985.-v.95,Nl- p. 165-172.

49. Howerth E.W. Studies on the pathogenesis of bluetongue virus infection in white-tailed deer (Odocoileus virginianus). // Diss. Abstr. Inter., b. -1986. -v.47, N4. p. 1497-1498.

50. Howerth E.W., Tyler D.E. Experimentally induced bluetongue vims infection in white-tailed deer: ultrastructural findings. // Amer. J. of Vet. Res. -1988. -v.49, N11, -p. 1914-1922.

51. Hugh-Jones M.E., Nooehouse P.D., Fulton P.W. Retrospective serological in a Louisiana herd. // Trop. Anim. Health and Prod. -1985. -V.17, N3, -p. 180-182.

52. Huismans H., Bremer C.W., Barber T.L. The nucleic acid and proteins of epizootic haemorrhagic disease virus // Ondesteport J.Vet. Res., 1979., 46: 95-104.

53. Huismans H., Cloete M., Roux A. The genetic relatedness of a number of individual cognate of vimses in the bluetongue and closely related sero-groups.//Virol.-1987. -v. 161, N2,-p.421-428.

54. Huismans H., Erasmus B.J. Identification of the serotypspecific and group-specific antigens of bluetongue vims. // Onderstepoort J. Vet. Res. -1981. -V.48, -p.51-58.

55. Inaba Y. Ibaraki disease and its relationship to bluetongue. // Austral. Vet. J. -1975.-V.51,-p.l78-184.

56. Jochim M.M. An overview of dignostics for bluetongue.//In: Barber T.L., Jochim M.M. (eds) "Bluetongue and related orbivims. Progress in clinical and biological research". -1985. -p.255-266.

57. Jochim M.M., Jones S.C. Enhancement of bluetongue and epizootic hemorrhagic disease virae neutarlisation with anti-gammaglobulin. // Proc. Amer. Assoc. Vet. Lab. Diagn. -1977. -V.20- p.255-271.

58. Jochim M.M., Jones S.C. Identification of ВТ and EHD viruses by immunofluorescence with monoclonal antibodie. // 26 Ann. Meet, of Amer. Assoc. Vet. Lab. Diagn., Las Vegas, Nevada, 17-18.10.1983. -1984. -p.277-286.

59. Jochim M.M., Jones S.C. Plague neutralisation of bluetongue virus and epizootic hemorrhagic disease virus m BHK-21 cells. // Amer. J. Vet. Res. -1976. -V.37, N11, p. 1345-1347.

60. Jochim M.M., Suzzane С J. Identification of ВТ and EHD viruses by immunofluorescence with monoclonal antibodies. //Am. Assoc. Vet. Lab. Diagnost.; 26th Annu. Proc. 1983. - p.277-286.

61. Jones R.H., Schmidtmann E.T., Foster N.M. Vector-competence studies for bluetongue and epizootic hemorrhagic disease viruses wirh Culicoides venustus (Ceratopogonidae). // Mosguito News. -1983. -v.43, N2, -p. 184-186.

62. Kamitz C.L. Immunodiffusion tests for bluetongue and epizootic haem-orrhagic disease: a rapid, simple method for preparing soluble antigens. // Proc. Amer. Assoc. Vet. Lab. Diagn. -1977. -v.20, p.291-302.

63. Karabatsos N. International catalogue of arboviruses including certain other viruses of vertebrates // Am. Sos. Trop. Med. Hyg., 1985., San Antonio.

64. Kistner T.P., Reynolds G.E. Clinical and serological findings on distribution of bluetongue and epizootic haemorrhagic disease viruses in Oregon. // Proc. 18th Ann. Meet. Assoc. Vet. Lab. Diagn. Portland, Oregon.-1975.-p. 135-148.

65. Knudson D., Monatr T.P. Orbiviryses // In: Fields B.N., Knipe D.M. Virology, 2nd ed. Raven, New York., 1990., pp 1405-1433.

66. Knudson D.L., Tesh R.B., Main A.J. Characterization of the Palyam se-rogroup viruses // Intervirology., 1984., 22: 41-49.

67. Kohler G., Milstein C. Derivation of specific antibody producing tissue culture and tumor lines by cell fusion // Eur. J. Immunol.- 1976,- Vol.6, N.7.- P.511-519.

68. Lee V.H. Isolation of viruses from field population of Culicoides in Nigeria // J. Med. Entomol., 1979., 16: 67-79.

69. Lee V.H., Causey O.R., Moore D.L. Bluetongue and related viruses in Ibadan, Nigeria: isolation and preliminary identification of viruses // Am. J. Vet. Res., 1974., 35: 1105-1108.

70. Lunt R.A., White J.R., Della-Porta A.J. A sensetive and specific ELISA for the serodiagnosis of bluetongue and epizootic haemorrhagic disease of deer.// Vet. Microbiol. -1987. -V.16, -p.323-338.

71. Lunt R.A., White J.R., Della-Porta A.J. Studies with enzymelinked immunosorbent assays for the serodiagnosis of bluetongue and epizootic haemorrhagic disease of deer. // Vet. Microbiol. -1988. -V.16,N4- p.323-338.

72. Mattos C.C.P.de, Mattos C.A.de, OsbumB.I., JanconescuM., Kaufman R. Evidence of genome segment 5 reassortment in bluetongue virus field isolates//Amer. J. Vet. Res. -1991. -V.52, N11, -p.1794-1798.

73. Mecham J.O., Dean V.C., Jochim M.M. Correlation of serotype specificity and protein structure of the five U.S. serotypes of bluetongue virus.//J. Gen. Virol.-1986.-V.67.-p. 1255-1262.

74. Mettler N.E., MacNamara L.G., Shope R.E. The propagation of the virus of epizootic hemorragic disease of deer in newborn mice and HeLa cells //J. Exp.Med., 1962., 116: 665-678.

75. Mohamed M.E.H. Epidemiological studies on some Sudanese arboviruses. // Diss. Abstr. Internac., B.(Sci. and Engineering), -1988. -V.2. -p.311.

76. Moore D.L. Bluetongue and related viruses in Ibadan, Nigeria: serologic comparison of bluetongue, epizootic haemorrhagic disease of deer and Abadina (Palyam) virae isolates. //Amer. J. Vet. Res. -1974. -V.35, N8,-p.l 109-1113.

77. Moore D.L., Lee V.H. Antigenic relationship between the virus of epizootic haemorrhagic disease of deer and bluetongue virus. // Archiv des virusforsch. -1972. -V.3, N7, -p.282-284.

78. Murphy F.A. (e.a.) Phisicochemical and morphological relationships of some arthropod borne viruses to bluetongue virus. // J. of Cen. Virol. -1971. -V.13, N2, -p. 173-288.

79. Nunamaker R.A., Mecham J.O. Immunodetection of bluetongue virus and epizootic hemorrhagic disease virus in Culicoides Variipennis (Diptera: Ceratopogonidae). // J.of Medical Entomology, -1989. -V.26, N4. -p.256-259.

80. Odiawa G., Blue I.L., Tyler D.E., Shotts E.B. Bluetongue and epizootic haemorrhagic disease in ruminants in Georgia:survey by serotest and vi-rologic isolation. //Amer. J. Vet. Res. -1985. -V.46, N10- p.2193- 2196.

81. Parsonson I.M., Snowdon W.A. Bluetongue, epizootic haemorrhagic disease of deer and related viruses: Current situation in Australia.//In:

82. Bluetongue and Related Orbiviruses" (Eds Barber T.L. and Jochim M.M.) -1985. -p.27-35.

83. Pearson J.E., Carbrey E.A., Gustafson G.A. Bluetongue and related orbiviruses the Unuted States. // In: Barber T.L., Jochim M.M. eds. "Bluetongue and related orbiviruses", New Jork; Alan R. Liss Inc.,- 1985,-p.469-475.

84. Pearson J.E., Jochim M.M. Protocol for the immunodiffusion tests for bluetongue. // Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Vet. Lab. Diagn., -1979. -v,22, -p.531-544.

85. Purdy M., Retre J., Roy P. Cloning of the bluetongue virus L3 gene. // J. Virol.,-1984. -V.51, N3, -p.254-350.

86. Ritter D.G., Roy P. Genetic relationships of bluetongue virus serotypes isolated from different parts of the world.//Virus Res.-1988. -v. 11, N1- p.33-47.

87. Roy R., Ritter G.D., Akashi H., Collisson E., Inaba Y. A genetic probe for identifying bluetongue virus infections in vivo and in vitro.// J. Gen. Virol.-1985.-v.66, N7- p. 1613-1619.

88. Sellers R.F. Bluetongue in Africa,the Mediterraneon region and Near East disease, virus and vectors. // Prev. Veter. Med. -1984. -V.2. -p.l-4.

89. Sellers R.F. Bluetongue and related diseases. // In: Gibbs E.P.J, eds "Vims diseases of food animals:,v.II,New Jork: Academic Press Inc. -1981. -p.567-584.

90. Shope R.E., MacNamara L.G., Mangold R. A virus-induced epizootic hemorragic disease of Virginia White-tailed deer // J.Exp. Med., I960., 111:155-170.

91. Simpson V. Bluetongue antibody in botswana's domestic and game animals. // Trop. Anim. Helth. Prod. -1979. -V. 11, N1, -p.43-49.

92. Standfast H.A., Dyce A.L., St. George T.D., Mullre M.J. Isolation arboviruses from insects collected at Beatrise Hill, Nothern Territory of Australia 1974-1976//Aust. J. Biol. Sci. 1984., 37: 351-366.

93. St. George T.-D. The search for bluetongue viruses in Australia.//In: Barber T.L., Jochim M.M. eds "Bluetongue and related orbiviruses", New Jork: Alan R.Liss Inc. -1985. -p.295-305.

94. St. George T.-D., Cybinski D.N., Della-Porta A.J. The isolation of two bluetongue viruses from healthy cattle in Australia // Aust. Vet. J., 1980., 56: 562-563.

95. Stott J.L. Bluetongue virus: diagnosis, epidemiology and control.//Diss. Abstr. Internac.-1983.- v.43, N10- p.31-46.

96. Stott J.L., Osburn B.J. Simple procedure for preparation of bluetongue virus and epizootic haemorrhagic disease virus antigens for agar gel immunodifusion.// J. Clinical. Microbiol.-1983,-v.18, N6- p.1310-1313.

97. Sugiyama M., Hirayama N., Sasaki H.(e.a.) Antigenic relationship among strains of ibaraki vims and epizootic haemorrhagic disease virus studied with monoclonal antibodies. // Res. in Veter. Sci. -1989. -V.46, N2, -p.283-285.

98. Taylor J. A study of genetic reassortment amoung Australian orbiviruses // M. Sc. Thesis, Univ of Queensland., 1984.

99. Taylor W.P., Gumm J.D. Is the AGID test group specific for epizootic haemorrhagic disease virus? // In: Barber T.L. and Jochim M.M. (Edotors) "Bluetongue and Related Orbiviruses" -1985. -p.513-514.

100. Tesh R.B., Peleg J., Samina I. Biological and antigenic characterisation of Netivot virus, an unusual new orbivirus recovered from moscuitoes in Israel //Am. J. Trap, Med. Hig., 1986., 35: 418-428.

101. Theil-KW; McCloskey-CM; Walton-TE (ed.); Osburn-BI Rabbit syncytium virus is an orbivirus. // Bluetongue, African horse sickness, and related orbiviruses: Proceedings of the Second International Symposium. 1992,835-839.

102. Thomas F.С., Miller J.A. A comparasion of bleutongue virus and EHD vims: electronmicroscopy and serology. 11 Can. J. Сотр. Med. -1971. -V.35, N1, -p.22-27.

103. Thomas F.C., Prestwood A.K. Plague neutralization test reactors to bluetongue and EHD viruses in the southeastern USA.// Wildlife Dis.-1976.-p.401-411.

104. Thomas F.C., Trainer D.O. Bluetongue virus: 1) in pregnant white-tailed deer, 2)a plague reduction neutralization test. // J. Wildlife Dis. -1970. -v.6, N4, -p.384-388.

105. Thomas F.C., Trainer D.O. Bluetongue virus: some relationships among North American isolates and comparisons with the vims of epizootic haemorrhagic disease of deer. // J. Amer. Vet. Med. Assoc. -1970. -V. 156,-p. 1247-1248.

106. Thomas F.C., Trainer D.O. Bluetongue vims in White-Tailed Deer. // Amer. J. Vet. Res. -1970. -V.12. -p.271-278.

107. Tomori O. Bluetongue and related vimses in Nigeria: experimental infection of West African dwart sheep with Nigeria strains of the vimses of epizootic haemorrhagic disease of deer and bluetongue. // Veter. Microbiol. -1980. -V.5, N3, -p. 177-185.

108. Tompson L.H., Mecham J.O., Hollbrook F.R. Isolation and characterization of epizootic hemorragic disease vims from sheep and cattle in Colorado //Am. J. Vet. Res., 1988., 49: 1050-1052.

109. Uren M.F. Clinical and pathological responses of sheep and cattle to experimental infection with different of the epizootic haemorrhagic disease of deer serogroup. // Austral. Vet. J. -1986. -V.63, N6, -p. 199201.

110. Uren M.F., Squire K.R.E. The clinico-pathological effect of bluetongue vims serotype 20 in sheep // Aust.Vet.J., 1982., 62: 11-15.

111. Van Weemen B.K., Schuurs A.H.W.N. Immunoassay using antigen98enzime conjugates. //FEBS letters. -1971. -v. 15. -p.232-236.

112. Van Weemen В., Schuurs A. Immunoassay using antibody-enzyme conjugates //FEBS lett. -1974, -V.43,N2, -p.215-218.

113. Verwoerd D.W., Huismans H., Erasmus B.J. Orbiviruses. // In: Comprehensive Virol. -1979. -V. 14, -p.285-345.

114. Voller A., Bidwell D.E., Bartlett A. The enzyme-linked immunosorbent assay // Nuffield Laboratories of Comparative Medicine The Zoological Society-London, 1979.

115. Vorde D.E., Sasse E.A., Teh Yn Wang et all. Competitive enzime-linked immunoassay with use of soluble enzim-antibody immuno-complexe for labelling. // J. Measurement of human choriogonadotropin. Clin. Chem. -1976. -N22, N8. -p.1372-1377.

116. Ward H.A. Immunoassays. // Pathol. -1979. -V 11, N3. -P. 341-345.

117. Willis N.G., Corey P.N. Campbell J.B. Development and statistical evaluation og plaque assay for the virus of epizootic haemorrhagic disease of deer.//Canad. J. Microbiol. -1971. -V 16. -P. 1293-1301.

118. РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

119. ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ ВИРУСОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ

120. УТВЕРЖДАЮ Директор ВНИИ ветеринарной )усологии и микробиолог1. Котляров 2002 г.1. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

121. ПО ВЫЯВЛЕНИЮ РНК ВИРУСА ЭГБО МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ1. РЕАКЦИИ1. Покров 2001 г.1. А к Ткомиссионных испытаний набора препаратов для выявления РНК вируса серогруппы ЭГБО методом полимеразной цепной реакции

122. ОСНОВАНИЕ: Выполнение НИР по темам "Г-10", "У-27", "01.01.03." и указание директора ВНИИВВиМ №14 от 27 августа 2001 г.

123. Комиссия в период с 26 ноября по 30 ноября 2001 г. провела проверку "Набора препаратов для выявления РНК вируса ЭГБО методом ПЦР" в соответствии с программой комиссионных испытаний, утвержденной директором ВНИИВВиМ от 27 августа 2001 г.

124. Комиссионные испытания проведены на базе лабораторий "Биофизики" и "Диагностики".

125. При амплификации РНК близкородственных Орбивирусов (вирусы Ибараки, блютанга, АЧЛ), а также вирус болезни Абакане и проб головного мозга незараженных контрольных мышей и интактных клеток ПС ПЦР продуктов не обнаружено.

126. Расчетная чувствительность "Набора препаратов." для обнаружения РНК вируса ЭГБО в пробах головного мозга мышей, зараженных вирусом ЭГБО 2 серотипа (шт. "Альберта") составила 100 МЛД5о/мл. •

127. Основные этапы исследований представлены в проекте "Методических указаний по выявлению РНК вируса вируса ЭГБО методом полимеразной цепной реакции"1. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

128. Предоставить акт комиссионных испытаний "Набора препаратов для выявления РНК вируса ЭГБО методом ПЦР" на рассмотрение Ученого совета ВНИИВВиМ и утверждение его директором института.

129. Провести межведомственные комиссионные испытания "Набора препаратов ." с целью определения его места в схеме диагностики ЭГБО.

130. Председатель Члены комиссии:1. ЛО^^^ин А.В. j Южук Т.Э.

131. Кривонос Г.И. Снетков К. А.

132. Государственная система ветеринарного нормирования1. Российской Федерации

133. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ Профилактика и борьба с заразными болезнями животных

134. Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей1. ЭГБО)

135. Ветеринарные правила ВП 13.4.1311 -961. Издание официальное

136. Минсельхозпрод России Москва 19991. Предисловие1. Разработаны

137. Всероссийским научно-исследовательским институтом ветеринарной ирусологии и микробиологии Россельхозакадемии (Стрижаков А.А., А.В. 1уницин, А.А. Коломыцев, А.Ю.Чичикин, А.И. Бузун)

138. Утверждены и введены в действие руководителем Департамента ветеринарии Минсельхозпрода России.

139. Закон Российской Федерации «О ветеринара»

140. УТВЕРЖДАЮ Руководитель Департамента ветеринарии

141. Минсельхозпрода России-лавный государственный ветеринарный инспектор Российской Федерации1. Кравчук»

142. Дата введения с момента опубликования

143. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ Профилактика и борьба с заразными болезнями животных

144. Эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей1. ЭГБО)

145. Ветеринарные правила ВП 13.4.1311-961. Область применения

146. НАСТОЯЩИЕ ПРАВИЛА НЕ МОГУТ БЫТЬ ПОЛНОСТЬЮ ИЛИ ЧАСТИЧНО ВОСПРОИЗВЕДЕНЫ, ТИРАЖИРОВАНЫ И РАСПРОСТРАНЕНЫ БЕЗ РАЗРЕШЕНИЯ МИНСЕЛЬХОЗПРОДА РОССИИ2. Нормативные ссылки

147. Закон Российской Федерации «О ветеринарии» (Москва, 14.05.1993 г.).

148. Методические рекомендации: «Лабораторная диагностика эпизоотической гморрагической болезни оленей».

149. Правила ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-анигарной экспертизы мяса и мясных продуктов (Москва, 1988 г.).

150. Ветеринарно-санитарные правила внутрихозяйственного убоя скота на мясо.

151. Инструкция по проведению ветеринарной дезинфекции объектов сивотноводства (Москва, 1988 г.).

152. Методические указания по борьбе с кровопаразитарными болезнями.

153. Методические указания по борьбе с гнусом и защите животных от его ;ападения.

154. Наставление по дезинфекции сырья животного происхождения и предприятий ю его заготовке, хранению и обработке.

155. Общие сведения о эпизоотической геморрагической болезни оленей

156. К возбудителю болезни восприимчивы олени, лоси, ламы, антилопы, овцы, рупный рогатый скот, в меньшей степени чувствительны другие дикие и домашние шачные животные.

157. Нагревание до 60° С инактивирует его за 5 минут; 3% раствор формалина за 8-72 часа, 3% раствор NaOH и 70% этиловый спирт - в течении 5 минут.

158. Передача вируса ЭГБО осуществляется трансмиссивно кровососущим асекомым (преимущественно мокрецами). Возможно внутриутробное заражение и [ередача вируса со спермой.

159. Диагноз на ЭГБО ставят на основании эпизоотологических, клинических анных, результатов патологоанатомического вскрытия и лабораторных методов [сследования.

160. При постановке диагноза следует исключить катаральную лихорадку овец блютанг), сибирскую язву, пастереллез, энтероксемию, ящур и чуму крупного огатого скота (оленей).

161. Лабораторная диагностика болезни основана на выделении и идентификации ируса и ретроспективно по обнаружению специфических антител в серологических еакциях.

162. СП3.1. 088-96 ВП 13.4.1311-96гзинфектантом и помещают в полиэтиленовом пакете в термос; опечатывают и аправляют с нарочным.

163. Профилактика эпизоотической геморрагической болезни оленей

164. Необходимо комплектовать хозяйства сельскохозяйственными и дикими кивотными, а также импортировать мясопродукты, сперму, яйцеклетки, кровь квачных и т.д. только из благополучных по ЭГБО стран.

165. Необходимо исключить ввоз (импорт) сельскохозяйственных и диких кивотных в РФ без его предварительного карантинирования в течение 40 дней.

166. Проводится регулярное информирование ветеринарных служб таможен и югранично-пропускных пунктов о текущей эпизоотической ситуации по ЭГБО в гранах-импортерах и сопредельных странах.

167. СПЗ. 1.088-96 ВП 13.4.1311-96

168. Необходимо проводить эпизоотологический мониторинг ЭГБО, включая эогнозирование развития ситуации в мире и сопредельных государствах, а также ;уществлять превентивные мероприятия в странах-партнерах.

169. В случае установления среди ввезенных животных ЭГБО, всю группу сивотных подвергают убою.

170. Мероприятия по борьбе с эпизоотической геморрагическойболезнью оленей

171. Вводить и ввозить, выводить и вывозить животных всех видов, включая птицу, а также продукты убоя, животноводческое сырье.

172. Заготавливать и вывозить мясо, шкуры, шерсть, голье, кости, рога, кровь, сперму и другие продукты животного происхождения.

173. Проводить мероприятия, связанные со скоплением на карантинируемой территории людей, животных и транспорта.

174. СПЗ. 1.088-96 ВП 13.4.1311-96животных, а также проведения всех ветеринарно-санитарных мероприятий, предусмотренных настоящей Инструкцией.