Эпидемиологические характеристики и современная иммунодиагностика пневмоцистоза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.30, кандидат биологических наук Корниенко, Мария Николаевна

• Корниенко, Мария Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Корниенко, Мария Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПНЕВМОЦИСТНОЙ ИНФЕКЦИИ.

1.1. Этиология.

1.2. Эпидемиология.

1.3. Патогенез.

1.4. Клиника.

1.5. Лабораторная диагностика.

1.6. Профилактика.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы.

2.2. Методы

2.2.1. Эпидемиологические методы.

2.2.2. Паразитологические методы.

2.2.3. Иммунобиологические методы.

2.2.4. Электронно-микроскопические методы.

2.2.5. Статистические методы обработки результатов.

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА И УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПНЕВМОЦИСТОЗА

3.1. Разработка экспериментальной тест-системы на основе метода прямой . РИФ для диагностики пневмоцистоза.

3.1.1. Получение пневмоцистного антигена.

3.1.2. Иммунизация кроликов.

3.1.3. Приготовление флюоресцирующего реактива.

3.2. Применение компьютерной программы для учета результатов иммуно-ферментного анализа при выявлении специфических антител к P. jiroveci.

3.3. Сравнительная оценка эффективности тест-систем, используемых при выявлении пневмоцистной инфекции.

3.4. Обнаружение коронавируса при получении пневмоцистного антигена.

ГЛАВА 4. НЕКОТОЫЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПНЕВМОЦИСТОЗА

4.1. Сезонные колебания и цикличность пневмоцистной инфекции.

4.2. Пневмоцистоз у лиц с иммунодефицитными состояниями различной природы.

4.2.1. Пневмоцистная инфекция у больных ВИЧ-инфекцией на стадии вторичных заболеваний — туберкулез, пневмоцистоз и у больных активными формами туберкулеза.

4.2.2. Пневмоцистная инфекция у больных гемобластозами.

4.2.2.1. Пневмоцистная инфекция у взрослых больных гемобластозами и у детей с иммунными нейтропениями.

4.2.2.2. Эпидемиологический мониторинг за взрослыми больными гемобластозами, детьми с иммунными нейтропениями и их матерями.

4.3. Очаги пневмоцистной инфекции

4.3.1. Внутрисемейный очаг пневмоцистной инфекции.

4.3.2. Внутрибольничный очаг пневмоцистной пневмонии в крупном стационаре онкологического профиля.

4.4. Распространение пневмоцистной инфекции среди медицинских работников в стационарах различного профиля.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эпидемиологические характеристики и современная иммунодиагностика пневмоцистоза»

Актуальность проблемы. В 21 веке отмечается значительный рост заболеваемости атипичными пневмониями, вызванными возбудителями оппортунистических инфекций, развивающихся у лиц с приобретенными иммуно-дефицитами разной этиологии. Число таких иммунокомпрометированных лиц за последние годы резко возросло во многих странах, в том числе и в России. На этом фоне могут происходить существенные изменения эпидемиологических закономерностей многих инфекционных заболеваний, в том числе и оппортунистических, включая пневмоцистоз.

Проблемой пневмоцистоза в нашей стране начали заниматься в конце 50-х, начале 60-х годов прошлого столетия. Первые сообщения касались изучения пневмоцистной пневмонии у детей (Вишневецкая Л.О., 1959; Жукова В.К., 1959; Бакланова В.Ф., 1965). В 1973 году Ковалева Е.П. с соавторами начали разрабатывать методы лабораторной диагностики пневмоцистоза. Именно с этого момента началось изучение широты распространения возбудителя инфекции, источников, механизмов, путей и факторов передачи возбудителя и профилактики пневмоцистоза, изучение сезонности и цикличности пневмоцистной инфекции (Рябцева В.А., 1973); впервые была сделана попытка изучить иммуноструктуру населения отдельных районов СССР (Ярашева Д.М., 1978) и продолжена в дальнейших исследованиях (Рыбалки-на Т.Н., 2000; Каражас Н.В., 2002). На достаточно ограниченном числе обследованных Рыбалкиной Т.Н. был впервые представлен анализ возрастной иммуноструктуры.

За последние десятилетия пневмоцистоз из проблемы детской патологии превратился в серьезную проблему "оппортунистических" инфекций (ОИ), которые вызываются условно-патогенными микроорганизмами и проявляют свои патогенные свойства только на фоне угнетения иммунной системы организма. Впервые распространение пневмоцистоза среди гематологических больных было показано в работе Ярашевой Д.М. (1982) у детей с различными формами гемобластозов и продолжено Каражас Н.В. (2002) при исследовании распространения пневмоцистоза среди взрослых гематологических больных. В 1991 году появилась работа Ковалевой Е.П. по выявлению пневмоцистной инфекции в детском туберкулезном стационаре и показана возможность внутрибольничного распространения пневмоцистоза.

Особый интерес к пневмоцистозу возник в связи с пандемией ВИЧ-инфекции. Попытки изучить частоту поражения пневмоцистозом ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом в России сделаны Лысенко А.Я. с соавторами (1996), Рыбалкиной Т.Н. (2000) и Ермак Т.Н. (2003). Позднее появились работы по изучению распространения пневмоцистоза среди ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом (Ермак Т.Н., 2008).

В настоящее время пневмоцистоз занимает существенное место в структуре инфекционной патологии человека, что подчеркивает серьезность и актуальность пневмоцистной инфекции. Пневмоцистоз по-прежнему остается официально не регистрируемой инфекцией. По данным сведений об инфекционной заболеваемости в РФ ежегодно выявляется всего от 1-го до 5-ти случаев пневмоцистоза. Такие низкие показатели свидетельствуют об очень ограниченном использовании методов лабораторной диагностики этой инфекции. Основой диагностики пневмоцистоза по-прежнему остается выявление характерных клинических симптомов, что более выражено при пневмониях, а при других более легких формах встречается достаточно редко. В настоящее время всего лишь две фирмы выпускают коммерческие тест-системы. Немецкая фирма «Медак» — для определения антигенов и французская «Био-рат» — для выявления антител. Из-за высокой рыночной стоимости эти тест-системы практически не доступны отечественному здравоохранению, что не только затрудняет своевременную и правильную диагностику этого заболевания, но и не позволяет проводить эпидемиологические исследования. Учитывая вышеизложенное, а также то обстоятельство, что культивирование пневмоцист на питательных средах ограничено и описано только в научной литературе, необходимо создание и внедрение в практику отечественных высокоэффективных лабораторных методов диагностики пневмоци-стоза.

Цель настоящей работы — изучение эпидемиологических характеристик пневмоцистной инфекции с использованием комплекса современных иммунобиологических методов диагностики.

Основные задачи исследования:

• разработать тест-систему для диагностики пневмоцистной инфекции на основе метода прямой реакции иммунофлюоресценции (РИФ);

• дать оценку эффективности различных методов диагностики пневмоци-стоза;

• изучить сезонность и цикличность пневмоцистной инфекции;

• определить значимость пневмоцистоза у больных с различными иммуно-дефицитными состояниями;

• изучить возможность формирования внутрисемейных и внутрибольнич-ных очагов пневмоцистной инфекции;

• определить распространенность пневмоцистоза среди медицинского персонала в стационарах различного профиля.

Научная новизна работы:

• впервые разработана и апробирована диагностическая тест-система на основе метода прямой реакции иммунофлюоресцении для детекции пневмо-цистного антигена;

• дана оценка эффективности различных методов диагностики пневмоцистной инфекции (РИФ, НРИФ, ИФА);

• с использованием разработанных методов лабораторной диагностики впервые выявлен ряд эпидемиологических характеристик пневмоцистоза:

- установлена сезонность пневмоцистной инфекции у детей до 18 лет, с пиком заболеваемости в августе и сентябре (на основании данных иммунобиологических методов исследований о частоте выявления маркеров пневмоцистоза);

- показано, что для пневмоцистной инфекции не характерна цикличность;

- выявлена высокая значимость пневмоцистоза у больных с различными иммунодефицитными состояниями;

- установлено, что в семейных очагах может происходить активная циркуляция возбудителя пневмоцистной инфекции;

- охарактеризована внутрибольничная вспышка пневмоцистной пневмонии среди пациентов и медицинских работников в крупном стационаре онкологического профиля;

- установлено, что продолжительность сохранения антител класса IgM составляет от одного до четырех месяцев;

- показано, что медицинский персонал стационаров различного профиля является одной из групп риска по заболеванию внутрибольнич-ной пневмоцистной инфекцией.

Практическая значимость работы. Разработана экспериментальная диагностическая тест-система на основе метода прямой РИФ, позволяющая выявлять пневмоцисты в различных биологических материалах.

Материалы диссертации включены: в «Методические рекомендации по диагностике пневмоцистной инфекции» (одобрены на Совете по внедрению научных достижений в практику ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Протокол №4 от 25 сентября 2008г); в «Методические рекомендации по применению компьютерной программы для расчета разведений сывороток дающих 50% насыщение сорбента антителами в иммуноферментном анализе» (одобрены на Совете по внедрению научных достижений в практику ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Протокол № 1 от 22 февраля 2007г).

Результаты диссертации могут быть использованы в клинических лабораториях и медицинских центрах, занимающихся диагностикой пневмоцистной инфекции, а также включены в учебный процесс при чтении курсов лекций по эпидемиологии на кафедре инфектологии последипломного образования Московской медицинской академии им. ИМ. Сеченова.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, из них 3 в центральной печати. Написано 2 методических рекомендаций.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: 2-й Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье», Рязань 2007г.; 9 Съезде научного общества специалистов клинической лабораторной диагностики, «Национальные дни лабораторной медицины», Москва 2007г.; II Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения», Санкт-Петербург 2007г.; семинаре для врачей-инфекционистов амбулаторно-поликлинической службы департамента здравоохранения г. Москвы, 2008г; Всероссийской научной конференции, посвященной 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» «Диагностика, лечение и профилактика опасных и особо опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология». Киров, 2008г; научной конференции отдела эпидемиологии, 2008г.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов и библиографического указателя, включающего ссылки на 76 отечественных и 80 зарубежных авторов, 2 приложений. Работа изложена на 147 страницах машинописного текста, иллюстрирована 25 рисунками и 20 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Эпидемиология», Корниенко, Мария Николаевна

выводы

1. Впервые в России для диагностики пневмоцистной инфекции разработана тест-система на основе метода прямой реакции иммунофлюоресце-нии (РИФ). Сравнительная эффективность применяемых методов диагностики пневмоцистоза (РИФ, НРИФ и ИФА) выявила наибольшую специфичность и чувствительность метода прямой РИФ. Показана необходимость использования комплекса методов, позволяющих выявлять, как антитела, так и антиген для установления конкретной стадии заболевания.

2. Выявлено практически равномерное распределение случаев заболевания пневмоцистозом в течение года среди взрослого населения. Установлена сезонность пневмоцистной инфекции у детей до 18 лет с пиком выявления острых форм заболевания в августе и сентябре (41,4% и 39,6%). Показано, что для пневмоцистной инфекции цикличность не характерна.

3. Показано увеличение с возрастом числа лиц с антителами, свидетельствующими об острой или недавно перенесенной инфекции, что отражает проявление эпидемического процесса пневмоцистоза среди населения, начиная с детского возраста.

4. Определена значимость пневмоцистоза у больных различными иммунодефицитными состояниями:

- доказана необходимость проведения диагностики пневмоцистоза у больных ВИЧ-инфекцией на стадии вторичных заболеваний и больных туберкулезом, т.к. он отягощает течение основного заболевания;

- установлено, что удельный вес гематологических больных с маркерами острой пневмоцистной инфекции был значительным как среди взрослых, так и детей (46,0% и 31,1%);

- показано, что наиболее высокий процент с маркерами острой инфекции среди взрослых гематологических больных был зарегистрирован у лиц с миеломной болезнью (43,3%).

5. Проведена расшифровка группового заболевания пневмоцистной пневмонией среди медицинских работников в крупном стационаре онкологического профиля, при этом маркеры острой инфекции выявлены у 27,6% обследованных. Показано, что медицинский персонал является одной из групп риска по заболеванию внутрибольничной пневмоцистной инфекцией.

6. Установлено, что продолжительность сохранения антител класса IgM составляет от одного до четырех месяцев.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Пневмоцистоз занимает значительное место среди часто встречающихся и труднодиагностируемых бронхолегочных инфекций. В последнее время пневмоцистная инфекция приобретает все большее значение вследствие того, что раньше она рассматривалась как заболевание преимущественно новорожденных и ослабленных детей первого года жизни, тогда как сейчас из проблемы детской патологии пневмоцистоз превратился в серьезную проблему ОИ.

Официальная регистрация пневмоцистной инфекции не осуществляется, а данные по инфекционной заболеваемости не отражают истинного положения вещей. Низкая регистрация заболеваемости свидетельствует об очень ограниченном использовании методов специфической диагностики пневмоцистоза. Основой диагностики инфекции является наличие выраженных клинических симптомов, что встречается достаточно редко. Учитывая вышеизложенное возникла необходимость создания и внедрения в практику высокоэффективных лабораторных методов диагностики пневмоцистной инфекции.

В связи с этим целью настоящей работы было изучение эпидемиологических характеристик пневмоцистной инфекции с использованием комплекса современных иммунобиологических методов диагностики.

Для совершенствования методов диагностики пневмоцистоза, а также проведения эпидемиологических исследований нами была разработана и апробирована тест-система на основе метода прямой реакции иммунофлюорес-ценции для детекции пневмоцист в различных биологических жидкостях. При сравнении предлагаемой прямой РИФ, с уже принятой в диагностике НРИФ, были показаны преимущества разработанной реакции, которые заключались в меньшей затрате времени на постановку, высокой специфичностью и чувствительностью данного метода.

Для учета результатов иммуноферментного анализа сотрудником лаборатории хламидиозов Навольневым С.О. была написана компьютерная программа «Применение компьютерной программы для расчета разведений сывороток дающих 50% насыщение сорбента антителами в иммуноферментном анализе». Нами впервые эта программа была введена в практику при определении титра специфических антител класса IgM и IgG к P. jiroveci в исследуемых образцах сыворотки крови человека, что позволило значительно сократить время расчетов и их трудоемкость.

При сравнительной оценке эффективности тест-систем используемых для выявления пневмоцистной инфекции было установлено, что метод прямой реакции иммунофлюоресценции оказался наиболее чувствительным для выявления пневмоцист в мокроте: у 46 детей с диагнозом пневмоцистоз маркеры острой инфекции были обнаружены методом НРИФ у 65,2% детей, ИФА — у 67,4% и методом РИФ — у 76,1%. Однако мы рекомендуем проводить комплексные исследования с использованием всех предложенных методов. Именно так можно достичь 100% выявления маркеров острой пневмоцистной инфекции.

Использование комплекса методов позволяет выявлять конкретную стадию заболевания. Основываясь на выявлении разнообразных маркеров можно констатировать встречу с возбудителем в прошлом, острую инфекцию, стадию реконвалисценции, латентную инфекцию, носительство или реактивацию инфекции.

При изучении микробного пейзажа в образцах легочной ткани были получены неожиданные результаты. В препаратах легкого мини-свиньи помимо пневмоцист были обнаружены еще и коронавирусы, которые плотно контактировали с наружной поверхностью клеточной стенки пневмоцист. В условиях роста заболеваемости атипичными пневмониями это открытие представляется очень важным и требует более глубокого изучения так как, течение инфекционного процесса у таких больных значительно тяжелее и протекает с большим полиморфизмом клинической симптоматики.

При исследовании эпидемиологических характеристик была определена сезонность и цикличность пневмоцистной инфекции.

До сегодняшнего дня не было четкого ответа на вопрос «характерна или нет сезонность для пневмоцистоза»? По мнению одних ученых пневмоцистная инфекция отмечается спородической заболеваемостью в течение всего года, другие авторы приводят данные о сезонном подъеме заболеваемости в зимне-весенний период, а вот по мнению румынских авторов пик заболеваемости приходится на август - сентябрь (Radulescu S, 1986).

Пятнадцатилетнее изучение сезонности показало, что наибольшее число заболеваний пневмоцистной инфекцией среди детей приходится на август и сентябрь (41,4% и 39,6%; t=2,45 и t=2,52). Это можно связать с возвращением детей после каникул в организованные детские коллективы и с усилением циркуляции пневмоцистной инфекции, обусловленной продолжительным совместным пребыванием детей в закрытых помещениях.

Однако изучение сезонности среди взрослого населения показало практически равномерное распределение случаев заболеваний по месяцам в течение года. Прежде всего, это связано с тем, что у взрослых пневмоцистоз преимущественно развивается среди лиц с иммунодефицитными состояниями.

Следующим этапом в изучении эпидемиологических характеристик стало определение цикличности.

Результаты показали, что за 1994 — 2008 годы наблюдалось 4 периода подъема и 4 периода спада выявления числа заболевших, но т.к. эпидемические циклы имели разную продолжительность, а периоды подъема и спада по времени не были упорядочены, можно сделать выводы о том, что для пневмоцистоза цикличность не характерна.

По данным инфекционной заболеваемости в РФ ежегодно выявляется всего от 1-го до 5-ти случаев пневмоцистоза, что не отражает истинного положения вещей. Поэтому нами было проведено изучение распространения пневмоцистной инфекции среди различных возрастных групп за период с 2003 по 2007 годы. Исследование показало, что с возрастом происходит увеличение числа лиц с антителами, свидетельствующими об острой или недавно перенесенной инфекции. Причем, в возрасте от года до 15 лет отмечается рост случаев заболевания пневмоцистозом, а во всех остальных возрастных группах их количество практически не меняется. Полученные данные свидетельствуют о проявлении эпидемического процесса, как среди детского, так и среди взрослого населения.

Пневмоцистоз, как оппортунистическая инфекция, часто развивается у лиц с иммунодефицитами. При этом он отяжеляет течение основного заболевания и зачастую является причиной смерти у этих больных. Поэтому изучение пневмоцистоза является актуальной проблемой.

По данным литературы известно, что пневмоцистоз широко распространен среди больных ВИЧ-инфекцией и больных туберкулезом. Но в нашем исследовании впервые показана роль P. jiroveci в возникновении вторичных осложнений среди ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом и больных туберкулезом с различными его формами.

Исследование показало, что общие маркеры к P. jiroveci в группе больных ВИЧ-инфекцией на стадии вторичных заболеваний и у больных туберкулезом выявлялись практически на том же уровне, что и в группе сравнения. В то время как маркеры острой инфекции определялись значительно чаще (45,0% и 46,0%) чем в группе сравнения (11,3%). Выявлено преобладание анамнестических титров антител класса IgG среди доноров (51,8%), что подтверждает широкое распространение этой инфекции и говорит лишь о встрече с возбудителем ранее.

Лабораторные исследования показывают, что как общие маркеры пневмоцистной инфекции, так и острой встречаются довольно часто при любых формах туберкулеза. При этом следует отметить, что наибольший процент лиц с маркерами пневмоцистной инфекции (76,2%) и маркерами острой и недавно перенесенной (61,9%) был выявлен у ВИЧ-инфицированных с ограниченными формами туберкулеза.

Анализ структуры выявленных маркеров пневмоцистной инфекции у ВИЧ-инфицированных на стадии вторичных заболеваний в зависимости от формы туберкулеза показал, что при диссеминированных и генерализованных формах клинически пневмоцистоз проявляется реже, чем при ограниченных формах. Однако обращает на себя внимание, что при стабилизации процесса диссеминированного и генерализованного туберкулеза пневмоцистная инфекция протекает активно.

При исследовании группы больных туберкулезом без ВИЧ-инфекции было установлено, что у лиц с генерализованным туберкулезом наиболее часто выявлялись общие маркеры пневмоцистной инфекции, но при этом показатели острой инфекции отмечались значительно реже и не превышали 34,4%. В, то время, как среди больных инфильтративным туберкулезом они выявлялись чаще и составили 56,3%.

Следующей группой лиц с иммунодефицитами были больные гемобластозами. В работе показано широкое распространение пневмоцистной инфекции среди гематологических больных, как детей, так и взрослых.

Изучалось распространение пневмоцистоза среди взрослых больных применительно к различным гематологическим заболеваниям.

Показано, что острая инфекция выявлялась во всех изучаемых группах, но наиболее подвержены развитию пневмоцистоза лица с миеломной болезнью (маркеры острой инфекции определялись у 43,3% обследованных). Это объясняется тем, что среди пациентов с миеломной болезнью преобладают люди пожилого возраста, у них возрастной иммунодефицит накладывается на иммунодефицит связанный с гематологическим заболеванием. В тоже время у больных с другими гематологическими заболеваниями количество случаев с острой пневмоцистной инфекцией несколько меньше и маркеры были зарегистрированы приблизительно на одном уровне. У больных лимфомой этот показатель составил 35,6%. У лиц с острым лейкозом маркеры острой инфекции определялись в 34,3% случаев, 33,3% острых случаев пневмоцистной инфекции было выявлено у больных анемией. Менее всего (27,3%) острая инфекция была характерна для больных хроническим лейкозом. Заболевание хроническим лейкозом достаточно вяло текущее и не сопровождается столь выраженным иммунодефицитом, поэтому и случаи пневмоцистоза у этих больных отмечаются реже.

С целью предотвращения внутрибольничного распространения пневмоцистоза, а также для предупреждения развития осложнений после курса лечения проводилось наблюдение за взрослыми гематологическими больными в динамике.

При первом обследовании количество лиц с пневмоцистозом составило 65,0%, при этом у 60,0% выявлены маркеры острой инфекции. Эти больные были изолированы в отдельные палаты и им проводилось этиотропное лечение. Повторное обследование, проведенное после химиотерапии, показало эффективность лечебно-профилактических мероприятий. Новых случаев заражения пневмоцистозом не выявлено, а больные с острой инфекцией перешли в стадию реконвалесценции. О чем свидетельствует отсутствие специфических антител к P. jiroveci классов IgM, IgM и IgG, уменьшение числа лиц с антителами класса IgG в высоком титре с 35,0% до 10,0% и увеличение количества пациентов с антителами класса IgG в средних и низких титрах на 20,0% и 5,0% соответственно.

Таким образом, показана необходимость динамического обследования гематологических больных на пневмоцистоз при поступлении в стационар и после курса химиотерапии. Именно так можно выявить и купировать острые формы пневмоцистной инфекции, а также препятствовать внутрибольничному распространению пневмоцистоза среди остальных больных и медицинских работников данного отделения.

Помимо взрослых пациентов впервые были обследованы и дети с диагнозом «иммунная нейтропения».

Как при первом, так и при втором обследовании маркеры острой инфекции выявлялись у 31,1%, но при этом показано увеличение числа лиц с антителами класса IgM на 6,7%. Данный факт свидетельствует о том, что дети с иммунной нейтропенией подвержены риску, как активации скрытой пневмоцистной инфекции, так и новому инфицированию.

Для выявления возможных источников заражения пневмоцистной инфекцией было обследовано 45 детей с иммунными нейтропениями и их матери.

Из результатов обследования следует, что преобладали пары (28,9%) у которых антитела определяли среди матерей, но дети были серонегативными. В данном случае дети находятся в группе риска, поэтому необходим постоянный контроль за ними, санация матерей и строгое соблюдение противоэпидемического режима, для предотвращения заражения.

У 6,7% обследованных пар антитела определяли только среди детей. В этой ситуации матери находятся в группе риска. Антитела и у матери и у ребенка определяли в 22,2%, но при этом у 4,4% антитела и у матери и у ребенка были в одинаковом титре, что говорит о внутрисемейной вспышке пневмоцистоза, но источник инфекции выявить не удалось. У 4,4% пар - преобладали антитела в высоких титрах среди детей, это свидетельствует о том, что первично пневмоцистозом заболели матери. В тоже время 13,4% матерей имели более высокие титры антител, чем дети, это указывает на свежее инфицирование матери и на то, что источником инфекции являлся ребенок.

Таким образом, результаты исследования показали, что внутри семьи идет активная циркуляция возбудителя пневмоцистной инфекции от матери к ребенку и от ребенка к матери, возникают внутрисемейные очаги пневмоцистной инфекции, что требует своевременного проведения противоэпидемических мероприятий.

На конкретном примере нами подтверждена возможность возникновения семейного очага, где источником инфекции может быть любой член семьи. Дано описание очага, выявлен источник и путь заражения.

Далее нами было проведено исследование группового заболевания пневмоцистозом в крупном онкологическом стационаре.

Было установлено, что первый случай пневмоцистоза у гематологического больного был заносным и привел к возникновению внутрибольничного очага, в который помимо больных был вовлечен и медицинский персонал. Из

29 обследованных медицинских работников маркеры острой инфекции и недавно перенесенной инфекции были обнаружены у 12 человек (41,4%).

Трехкратное обследование медицинского персонала показало циркуляцию возбудителя в коллективе, что диктует необходимость проведения динамических серологических обследований на пневмоцистоз по эпидемиологическим показаниям для предотвращения распространения внутрибольничной инфекции.

В доступных источниках литературы мы не нашли данных о длительности сохранения антител класса IgM у лиц переболевших пневмоцистозом. Наше исследование по расшифровке вспышки пневмоцистной инфекции в стационаре позволило установить продолжительность их формирования. Показано, что антитела класса IgM сохраняются в крови в течение одного-четырех месяцев.

Обследование персонала медицинских учреждений различных профилей показало, что маркеры острой и недавно перенесенной инфекции среди персонала всех медицинских учреждений определялись значительно чаще, чем в контрольной группе. Наименьшими эти показатели (34,3%) были в противотуберкулезном стационаре, так как персонал этого учреждения, имея дело с опасными инфекциями и соблюдая противоэпидемический режим, использует необходимые меры профилактики: медицинские шапочки, маски, перчатки. Наибольшие показатели (62,8%) были у медработников отделения респираторных инфекций ДБ, так как они постоянно имеют контакт с инфекциями, передающимися воздушно-капельным путем.

Таким образом, медицинский персонал является одной из групп риска внутрибольничных инфекций, но он, же может являться и источником пневмоцистоза. Поэтому для своевременного выявления заболевания и предотвращения возникновения и распространения внутрибольничной пневмоцистной инфекции целесообразно проводить обследование медицинских работников на пневмоцистоз по эпидемиологическим показаниям, и своевременно проводить санацию или лечение в зависимости от стадии выявленной инфекции.

Таким образом, с использованием комплекса современных методов диагностики были проведены широкие иммунобиологические и серо-эпидемиологические исследования и показаны следующие эпидемиологические характеристики пневмоцистоза:

- установлена сезонность пневмоцистной инфекции у детей до 18 лет, с пиком заболеваемости в августе и сентябре;

- показано, что для пневмоцистной инфекции не характерна цикличность;

- показано, проявление эпидемического процесса при пневмоцистозе, как среди детского, так и среди взрослого населения: в возрасте от года до 15 лет отмечается рост случаев заболеваний пневмоцистозом, а во всех остальных возрастных группах их количество практически не меняется;

- подтверждена высокая значимость пневмоцистоза у больных с различными иммунодефицитными состояниями;

- показана возможность формирования внутрисемейных и внутриболь-ничных очагов пневмоцистной инфекции;

- показана роль медицинских работников, как группы риска внутри-больничной инфекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Корниенко, Мария Николаевна, 2009 год

1. Алгоритм диагностики поражений легких при депрессиях кроветворения: Пособие для врачей / Гематологический научный центр Российской академии медицинских наук; сост. Г.М. Галстян, В.М. Городецкий, Л.Н. Готман, А.В. Гржимоловский и др. — М.: 2001. - 47 с.

2. Аравийский Р.А., Семенова Л.А. К вопросу о диагностике пневмоцистной пневмонии (применение реакции Бауэра для индикации Pneumocystis carinii в патологическом материале) // Лабораторное дело. — 1991.-№6.-С. 44^6.

3. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / Е.П. Пашков, А.В. Караулов, С.А. Быков, М.Я. Корн. Под редакцией А.С.Быкова, А.А. Воробьева, В.В. Зверева. -М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2008. 272 с.

4. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. 1962 г. Статистические методы микробиологических исследований. Л.: Медгиз, 1962. — 178с.

5. Бабаева И.Ю. Иммуноморфологические особенности у больных туберкулезом при ВИЧ-инфекции // Журн. микробиол. — 2008. — № 5. — С. 101-103.

6. Байоринене Д. Пневмоцистоз и его профилактика // Sveikatos apsauga. 1987.- № 3 - с. 14-16.

7. Бакланова В.Ф. К вопросу о рентгенологической диагностике пневмоцистной пневмонии у детей // Вестн. рентгенол. и радиол.- 1965.-№ 6. С. 20-25.

8. Бакланова В.Ф. Пневмоцистная пневмония и ее рентгенологическая диагностика // Труды Тадж. Мед. Ин-та,- Душанбе, 1969. — Т. 93. — Вып. 2. С. 87-90.

9. Бакланова В.Ф., Владыкина В.И. Руководство по рентгенодиагностике болезней органов дыхания у детей. Л.: Медицина, 1978.

10. Ю.Быковский А.Ф. Актуальные вопросы проблемы смешанных инфекций. Сб. научн.тр. НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи. Смешанные инфекции. 1986, Москва, с. 3-7.

11. П.Васильева В.И., Каражас Н.В., Плюхин Д.Ю., Савицкий И.Г. /Способ получения биомассы Pneumocystis carini // Авторское свидетельство № 1685991.-Россия, 1991.

12. ВИЧ-инфекция и СПИД-ассоциируемые заболевания / А.Я. Лысенко, М.К. Турьянов, М.В. Ладовская, В.М. Подольский. М.: ТОО «Ра-рогъ», 1996.-624 с.

13. ВИЧ-инфекция как системное заболевание с преимущественным поражением центральной нервной системы, легких и быстро прогрессирующей кахексией / Н. Мухин, Б. Корнев, С. Моисеев и др. // Врач. -2004.-№6.-С. 16-21.

14. Вишневецкая Л.О., Войт Е.Б., Катышева А.В. К вопросу о морфологических изменениях в легких при пневмоцистной пневмонии // Педиатрия. 1959. - № 9. - С. 31-32.

15. Вспышка пневмоцистоза в детском коллективе / Е.П. Ковалева, Т.Н. Дорофеева, Г.Н. Кабановская и др. // Мед. паразитология и паразитарные болезни. М., 1973. - с. 4.

16. Громова Р.В., Лавдовская М.В. О частоте пневмоцистоза у детей младшего возраста (по данным лабораторных и патологоанатомиче-ских исследований) // Паразитарные поражения легких.- Владивосток, 1990.- 107-108 с.

17. Диденко Л.В. Ультраструктурный анализ как метод изучения бактериемии при инфекционных заболеваниях // Вестн. РАМН. 2001. -№11.-С. 29-34.

18. Ермак Т.Н. Лечение пневмоцистной пневмонии при ВИЧ-инфекции // Фарматека. 2003. - № 13 (76). - С.17-22.

19. Ермак Т.Н., Перегудова А.Б., Груздев Б.М. // Терапевтический архив — 2006. -№ 11.-С. 80-82.

20. Ермак Т.Н., Ревкова Т.М., Скворцов П.А. Клиническая диагностика пневмоцистной пневмонии у больных ВИЧ-инфекцией // Эпидемиол. и инфекц. бол. 2004. - №4. - С. 52-54.

21. Ермак Т.Н., Самитова Э.Р., Кравченко А.В. и др. // Тезисы 7-го Российского съезда инфекционистов, Н. Новгород, 26-27 окт. 2006. — Н. Новгород, 2006. С. 35.

22. Иваненко И.П. К эпидемиологическим аспектам пневмоцистоза // Акт. вопросы изучения адаптационных реакций организма в эксперименте и клинике. М.: ЦОЛИУВ, 1986. - Т. 265. - С. 39-40.

23. Иваненко И.П. Особенности эпидемиологии пневмоцистоза как внутрибольничной инфекции: Автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.30 / МЗ РСФСР. МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского. М., 1986. - 22 с.

24. Иваненко И.П. Применение реакции иммунофлюоресценции и эффективных методов сбора материала из дыхательных путей для совершенствования диагностики пневмоцистоза // Лабораторное дело. — 1987. №12. - С. 939-942.

25. Иммунофлюоресценция / Под ред. Ю.Ф. Кубица. М.: Медицина, 1968.-256 с.

26. Инфекции дыхательных путей (аспирационные антропонозы). Эпидемиология и профилактика. Е.В. Русакова, А.А. Шапошников, В.И. Баранов, Н.Г. Политова Учебное пособие для врачей. — М.: ЗАО «МП Гигиена», 2008. - 368 с.

27. К этиологии острых пневмоний у новорожденных детей / Задворняк П.В., Ярашева Д.М., Негмалулина Н.Н., Умарова А.А. // Профилактика, диагностика и лечение острых пневмоний у детей. — М.: 1978. — С. 49-50.

28. Каражас Н.В. // Эпидемиологическая характеристика цитомегалови-русной инфекции и пневмоцистоза как оппортунистических инфекций. Авторская дис. докт. биол. наук. -М., 2002. 187 с.

29. Каражас Н.В. Пневмоцистоз // Врач. 1998. - № 3. - С. 10-11.

30. Каражас Н.В., Дехнич А.В. Пневмоцистная пневмония: клинические и микробиологические аспекты // Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия. 1999. - Том 1, NI. - С. 12—2.

31. Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н. Способ выделения пневмоцист. Патент РФ на изобретение № 2186390 от 27 июля 2002.

32. Лавдовская М.В. Медико-экологические параллели двух оппортунистических инфекций, криптоспоридиоза и пневмоцистоза // Дисс. канд. мед. наук, 1994. 153 с.

33. Лыснеко А.Я„ Авдюхина Т.И., Лавдовская М.В. Пневмоцистоз // Уч. пособие. -М.: ЦОЛИУВ, 1992. 52 с.

34. Люминесцирующие антитела / Е.Н. Левина, Р.Б. Гольдин, Ф.С. Носков и др. М.: Медицина, 1972. - 142 с.

35. Маринин В., Фомина И. Изменения легких при первичных иммуно-дефицитных состояниях // Врач. — 2003. № 8. — С. 15-19.

36. Меймарян М.А. Серологическая диагностика пневмоцистоза у населения Республики Армения // Мед. паразитология. 2005. — № 2. — С. 27-28.

37. Парулава Ц.И. Пневмоцистоз у детей. Клиника, диагностика, лечение // Автореферат дисс. канд. мед. наук. 1988. — 27 с.

38. Петрухина М.И., Старостина Н.В. Статистические методы в эпидемиологическом анализе. — М.: «Петит-А», 2003. — 94с.

39. Пневмоцистная пневмония в сочетании с туберкулезом как первые клинические проявления на поздних стадиях ВИЧ-инфекции (заметка из практики) / Т.Н. Ермак, Н.Г. Литвинова, Э.Р. Самитова и др. // Терапевтический архив. 2005. - № 11. — С. 21-23.

40. Пневмоцистная пневмония у детей / Куренная С.С., Хлоров В.Г., Ми-рович Д.Ю., Демина Т.Н. // Педиатрия. 1986. - № 7. - С. 72-73.

41. Пневмоцистная пневмония, туберкулез легких и их сочетание у больных ВИЧ-инфекцией / Т.Н. Ермак, Э.Р. Самитова, А.К. Токмалаев и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 2008. — №3. — С. 3438.

42. Пневмоцистоз — эпидемиология, клиника, диагностика и лечение: Методические рекомендации. / Ком. Зравоохранения правительства Москвы; сост.: Н.В. Каражас, Н.А. Малышев, К.З. Смагулов. — Москва, 1999.- 17с.

43. Пневмоцистоз (распространение, источник и пути передачи) / В.А. Рябцева, Е.П. Ковалева, М.Ф. Долгополова и др. // Педиатрия. — 1974. -№6, с. 30-35.

44. Пневмоцистоз в детском туберкулезном стационаре / Ковалева Е.П., Борисова Н.К., Иваненко И.П. // Антибиотики и химиотерапия. -1991. -Т. 36. -№ 1.-С. 8-9.

45. Пневмоцистоз в отделении ВИЧ инфекции / Ермак Т.Н. и др. // Вестник РАМН. - 1992. - № 9-10. - С. 28-30.

46. Пневмоцистоз и СПИД: Методические рекомендации / МЗ РСФСР. Лен. ГидуВ; Сост.: Рахманова А.Г. и др. Ленинград, 1991. — 63 с.

47. Покровский В.В., Ермак Т.Н., Беляева В.В., Юрин О.Г. ВИЧ-инфекция: Клиника, диагностика и лечение. — М.: 2003

48. Покровский В.И., Малеев В.В., Киселев О.И. Информационный экспресс бюллетень Коронавирус SARS — возбудитель атипичной пневмонии (временные метод, реком.) СПб, М., 2003.

49. Применение метода иммунофлюоресценции для серодиагностики пневмоцистоза / Рябцева В.А., Войт Е.Б., Дорофеева Т.Н., Ильченко Т.П. // Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1974. - № 2.- С. 149-154.

50. Разработка и применение программы для автоматического расчёта титра сывороток, дающих 50% насыщение сорбента / С.О. Навольнев, Т.Н. Рыбалкина, Н.В. Каражас, Р.Е. Бошьян // Клиническая лабораторная диагностика. — 2005. № 10. - С. 27.

51. Рахманова А.Г., Неверов В.А., Пригожина В.К., Инфекционные болезни. С.П.: Питер, 2001. - 384 с.

52. Редфилд P.P., Берке Д.С. Клиническая картина инфекции вирусом СПИДа. // В мире науки. 1988. - №2. - с. 60-69.

53. Рекалова Е.М. Пневмоцистоз в пульмонологии // Укр. пульмон. журн. -2001.-№2.-С. 58-64.

54. Румель Н.Б., Шилова Е.Р., Мурадян А .Я. Коронавирусная инфекция у иммунодефицитных больных с гемобластозами и депрессиями кроветворения. Журн. микробиол., эпидемиол., иммунобиол.- 2004, № 5, с.89-93.

55. Рыбалкина Т.Н. Иммунодиагностика пневмоцистоза и его современные эпидемиологические закономерности // Авторская дис. канд. мед. наук. — М., 2000.- 141 с.

56. Рябцева В.А. Эпидемиология пневмоцистоза: Автореф. дисс. канд. мед. наук: 14.00.30 / МЗ РСФСР. МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского. -М., 1973.-24 с.

57. Рябцева В.А., Ковалева Е.П. Иммунофлюоресцентный метод диагностики пневмоцистоза // Лаб. дело. 1978. - № 10. - С. 630-633.

58. Савицкая Н.А. Диагностика и характеристика оппортунистических инфекций у часто болеющих детей при острых респираторных заболеваниях и в периоде ремиссии // Автореферат дисс. канд. мед. наук. 2007. - 24 с.

59. Способ моделирования пневмоцистоза / М.В. Лавдовская, Ф.П. Коваленко, А.Я. Лысенко, М.В. Стрелкова, Ю.В. Чернов, Т.Е. Буланова // Патент № 2040042. 1995.

60. Способ получения Pneumocystis carinii для иммунологических диагностических тест-систем / Н.В. Каражас, Т.Н. Рыбалкина // Патент № 2009105608. приор, от 19.02.2009.

61. Структура вторичных заболеваний у больных ВИЧ-инфекцией в России. / Т.Н. Ермак, А.В. Кравченко, О.Г. Юрин, В.В. Покровский // ЖМЭИ. 1999. — №1. — с. 80-82.

62. Сывороточные антитела к возбудителям оппортунистических инфекций у больных гемобластозами, осложненными пневмонией / Р.Е. Бошьян, Т.Н. Рыбалкина, Н.В. Каражас и др. // Журн. микробиол. — 2006.-№2.-С. 53-57.

63. Уварова В.И., Шаматава Н.Ж. Биологическая характеристика Pneumocystis carinii // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1991.-№12. - С. 66-69.

64. Халифян А.А. Современные статистические методы медицинских исследований. М.: Издательство ЛКИ, 2008. - 320 с.

65. Цинзерлинг А.В., Неженцев М.В. О пневмоцистозе легких детей раннего возраста // Арх. патол. 1970. - Т. 32. - № 11. — 21—26 с.

66. Этиологическая диагностика и этиотропная терапия острых пневмоний. / В.И. Покровский, С.В. Прозоровский, В.В. Малеев, И.С. Тарта-ковский. М.: Медицина, 1995. - 272 с.

67. Этиология острых пневмоний в организованном коллективе / Васильева В.И., Прозоровский Е.В., Русакова Е.В. и др. // Ж. микробиол. -1987.-№4.-С. 44-47.

68. Ярашева Д.М. // Эпидемиология и лабораторная диагностика пневмоцистоза у детей. Авторская диссерт. кандидата мед. наук. М., 1982. 145 с.

69. A cluster of Pneumocystis carinii pneumonia in adults without predisposing illnesses / J.L. Jacobs, D.M. Libby, R.A. Winters et al. // N. Engl. J. Med. 1991. - Vol. 324. - P. 246-250.

70. A New Name (Pneumocystis jiroveci) for Pneumocystis from Humans / J.R. Stringer, C.B. Beard, R.F. Miller, A.E. Wakefield // Emerg. Infect. Dis. 2002. - Vol. 8, N. 9. - P. 641-651.

71. Aerosol pentamidine for secondary prophylaxis of AIDS-related Pneumocystis carinii pneumonia / JSG Montaner, L.M. Lawson, A. Gervais et al. // Ann. Intern. Med. 1991. - Vol. 114. - P. 948-53.

72. Alveolar Damage in AIDS-Related Pneumocystis carinii Pneumonia / T.Benfield, P. Prent, J.Junge et al. // Chest. 1997. - Vol. 111, N 5. - P. 1193-1199.

73. Alveolar response to experimental Pneumocystis carinii pneumonia in the rat / P.N. Lanken, M. Minda, G.G. Pietra, A.P. Fishman // Am. J. Pathol. -1980. Vol. 99. - P. 561-588.

74. Amin M.B, Mezger E., Zarbo R.J. Detection of Pneumocystis carinii comparative study of monoclonal antibody and silver staining // AJCP, july. Clinic. Microb. and Inf. Diseases. 1992. - Vol. 98. -N 1. - P. 13-18.

75. Beck J.M., Rosen M.J., Peavy H.H. Pulmonary complications of HIV infection report of the fourt NHLBI workhop // Am. J. Respir. Crit. Care Med.-Vol. 164, N 11.-P. 2120-2126.

76. Botha W.S., van Rensburg I.B. Pneumocystosis: a chronic respiratory distress syndrome in dog // J. S. Afr. Vet. Assoc. 1979. - Vol. 50, N 3. - P. 173-9.

77. Burgess J.W., Kottom T.J., Limper A.H. Pneumocystis carinii Exhibits a Conserved Meiotic Control Pathway 11 Infect. Immun. 2008. - Vol. 76, N 1.-P. 417-425.

78. Centers for Disease Control. Pneumocystis pneumonia Los Angeles // MMWR- 1981. - Vol. 30. - P. 250-252.

79. Centers for diseases control. Recommendations for prophylaxis against Pneumocystis carinii pneumonia for adults and adolescents infected with human immunodeficiency virus // MMWR. 1992. - Vol. 41, N. RR-4. -P. 001.

80. Centers for diseases control. Guidelines for prophylaxis against Pneumocystis carinii pneumonia for children infected with human immunodeficiency virus // JAMA. 1991. - Vol. 265. - P. 1637-44.

81. Chagas C. Nova tripanozomiaze humana // Mem. Inst. Oswaldo Cruz Rio J.-1909.-Vol. l.-P. 159-218.

82. Continuous axenic cultivation of Pneumocystis carinii / S. Merali, U. Fre-vert, J.H. Williams et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96, N5.-P. 2402-2407.

83. Current epidemiology of Pneumocystis pneumonia / A. Morris, J.D. Lundgren, H. Masur et al. // Emerg. Infect. Dis. 2004. - Vol. 10, N 10.

84. Cushion M.T. Taxonomy, genetic organization, and life cycle of Pneumocystis carinii // Semin. Respir. Infect. 1998. - Vol. 13, N 4. - P. 304-12.

85. Delanoe P., Mme Delanoe. Sur les rapports des kystes de Carinii des pou-mon des rats avec le Trypanosoma lewisi // C. R. Acad. Sci. Paris. — 1912. -Vol. 155,-P. 658-660.

86. Dube M.P., Sattler F.R. Pneumocystis // D. Armstrong, J. Chohen, eds. Infectious Diseases. 1999. - Vol. 8. - P. 301-306.

87. Epitope Mapping of a Protective Monoclonal Antibody against Pneumocystis carinii with Shared Reactivity to Streptococcus pneumoniae Surface

88. Antigen PspA / J. Wells, F. Gigliotti, P.J. Simpson-Haidaris, C.G. Haidaris // Infect. Immun. 2004. - Vol. 72, N 3. - P. 1548-1556.

89. Evaluation of staining methods for the rapid detection of Pneumocystis carinii inrespiratory specimens / Ng V., Virani N., McPaul L. et al. // Mod. Pathol. 1990.-N3.-P. 73.

90. Expression, structure, and location of epitopes of the major surface glycoprotein Pneumocystis carinii f. sp. carinii / M.J. Linke, S.M. Sunkin, R.P. Andrews et al. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998. - Vol. 5, N 1. -P. 50-57.

91. Extrapulmonary Pneumocystis carinii infection / Telak E. et al. // Rev. Inf. Dis. 1990. - Vol. 12, N 3. - P. 380-386.

92. Fishman J.A. Prevention of Infection Due to Pneumocystis carinii // Antimicrob. Agents Chemother. 1998. - Vol. 42, N 5. - P. 995-1004.

93. Gigliotti F., Haidaris C.G. Antigenic characterization of Pneumocystis carinii // Semin. Respir. Infect. 1998. - Vol. 13, N 4. - P. 313-22.

94. Hori S., Carvalho T. L., Demengeot J. CD25+ CD4+ regulatory T cells suppress CD4+ T cell-mediated pulmonary hyperinflammation driven by Pneumocystis carinii in immunodeficient mice // Eur. J. Immunol. — 2002. -Vol. 32.-P. 1282-1291.

95. Intensified therapy for infants with acute lymphoblastic leukemia: results from the Dana-Farber Cancer / Silverman L.B., McLean T.W., Gel-ber R.D. et al. // Institute Consortium Cancer. 1997. - Vol. 80. - P. 2285-2295.

96. Isolation and expression of the Pneumocystis carinii dihydrofolate reductase gene / J.C. Edman, U. Edman, M. Cao et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 8625-8629.

97. Isolation and expression of the Pneumocystis carinii trymidylate synthase gene / U. Edman, J.C. Edman, B. Lundgren, D. Santi // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 6503-6507.

98. Kutty G., Ma L., Kovacs J.A. Characterization of the expression site of the major surface glycoprotein of human-derived Pneumocystis carinii // Mol. Microbiol. 2001. - Vol. 42, N 1. - 183-193.

99. Mascarenchas P.A., Vasudeman V.P., Vaidya K.P. Pneumocystis carinii pneumonia: rare cause of hemoptytis // Chest. 1991. - Vol. 99. — P. 251-253.

100. Maternal-fetal transmission of Pneumocystis carinii in human immunodeficiency virus infection / E. Mortier, J. Pouchot, P. Bossi, V. Molinie // N. Engl. J. Med. 1995. - Vol. 332. - P. 825.

101. Matsumoto Y., Yoshida Y. Sporogony in Pneumocystis carinii: synap-tonemal complexes and meiotic nuclear divisions observed in precysts // J. Protozool. 1984. - Vol. 31. - P. 420-428.

102. Millard P.R., Heryet A.R. Observations favoring Pneumocystis carinii pneumonia as a primary infection: a monoclonal antibody study on paraffin sections // J. Pathol. 1988. - Vol. 154. - P. 365-370.

103. Molecular genetic distinction of Pneumocystis carinii from rats and humans / J.R. Stringer, S.L. Stringer, J. Zhang et al. // J. Eukariot. Microbiol. 1993.-Vol. 40.-P. 733-741.

104. Ng V.L., Yajko D.M., Hadley W.K. Extrapulmonary Pneumocystosis // Clin. Microbiol. Rev. 1997.-Vol. 10, N3.-P. 401-418.

105. Nowoslawski A., Brzosko WJ. Inderect immunofluorescence test for serodiagnosis of Pneumocystis carinii infection // Bull. acad. Polonsci. — 1964.-Vol. 12.-P. 143-147.

106. Nucleotide sequence variation in Pneumocystis carinii strains that infect humans / C.H. Lee, J.J. Lu, M.S. Bartlett et al. // J. Clinic. Microbiol. 1993. - Vol. 31.-P. 754-757.

107. Palmer E.L., Martin M.L. Electron Microscopy in Viral Diagnosis // CRS Press, Inc. Boca Raton, Florida. 1988. - P. 194.

108. Passive Intranasal Monoclonal Antibody Prophylaxis against Murine Pneumocystis carinii Pneumonia / F. Gigliotti, C.G. Haidaris, T.W. Wright, A.G. Harmsen // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70, N 3, - P. 1069-1074.

109. Perfomance of a PCR Assay for Pneumacystis carinii from Respiratory Specimens / A.M. Caiiendo, P.L. Hewitt, J.M. Allega et al. // Ibid. 1998. - Vol. 36, N 4. - P. 979-982.

110. Pneumocystic carinii shows DNA homology with the ustomycetous red yeast fungi / A.E. Wakefield, S.E. Peters, S. Banerji et al. // J. Mol. Microbiol. 1992. - Vol. 6. - P. 1903-1911.

111. Pneumocystis and Trypanosoma cruzi: nomenclature and typifications / S.A. Redhead, M.T. Cushion, J.K. Frenkel, J.R. Stringer // J. Eukaryot. Microbiol. 2006. - Vol. 53, N 1. - P. 2-11.

112. Pneumocystis carinii attachment to cultured lung cells by Pneumocystis gpl20, a fibronectin binding protein / S.T. Pottratz, J. Paulsrud, J.S. Smith, W.J. Martin // J. Clin. Invest. 1991. - Vol. 88. - P. 403-407.

113. Pneumocystis carinii infection in germ-free rats: implications for human patients / L.L. Pifer, C.P. Lattuada, C.C. Edwards et al. // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 1984. - Vol. 2. - P. 23-26.

114. Pneumocystis carinii infection: evidence for high prevalence in normal and immunosuppressed children / L.L. Pifer, W.T. Hughes, S. Stago, D. Woods // Pediatrics. 1978. - Vol. 61. - P. 35-41.

115. Pneumocystis carinii pneumonia in four mammal species: histopathol-ogy and ultrastructure / C. Creusy, Capon J. Bahon-le, L. Fleurisse et al. // J. Eukaryot. Microbiol. 1996. - Vol. 43, N 5. P. 47-48.

116. Pneumocystis carinii uses a functional cdcl3 B-type cyclin complex during its life cycle / T. J. Kottom, C. F. Thomas, Jr., К. K. Mubarak et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2000. - Vol. 22. - P. 722-731.

117. Pneumocystis carinii: sequense from ribosomal RNA implies a close relationship with fungi / S.L. Stringer, J.R. Stringer, M.A. Blase et al. // Exp. Parasitol. 1989. - Vol. 68. - P. 450-461.

118. Pneumocystosis versus pulmonary Pneumocystis carinii colonization in HIV-negative and HIV-positive patients / G. Nevez, C. Raccurt, V. Jou-nieaux et al. // AIDS. 1999 Mar 11; 13(4) - P. 535-6.

119. Pottratz S. Т., Martin II W.J. Role of fibronectin in Pneumocystis carinii attachment to cultured lung cells // J. Clin. Investig. 1990. — Vol. 85. -P. 351-356.

120. Prevention of Pneumocystis carinii pneumonitis in AIDS patients with weekly dapsone / W.T. Hughes, W. Kennedy, M. Dugdale et al. // Lancet.- 1990. Vol. 336. - P. 1066.

121. Prospective study of etiologic agents of community-acquired pneumonia in patients with HIV infection / D. Rimland, T.R. Navin, J.L. Lennox et al. // AIDS. 2002. - Vol. 16. - P. 85-95.

122. Pulmonary pathological features in coronavirus associated severe acute respiratory syndrome (SARS) / G.M. Tse, K.F. To, P.K. Chan et al. // J. Clin. Pathol. 2004. - Vol. 57, N 3. - P. 260-264.

123. Real-Time PCR: Revolutionizing Detection and Expression Analysis of Genes / S.A. Deepak, K.R. Kottapalli, R. Rakwal et al. // Curr. Genomics.- 2007. Vol. 8, N 4. - P. 234-251.

124. Ribosomal RNA sequences shows Pneumocystis carinii to be member of the fungi / J.C. Edman, J. A. Kovacs, H. Masur et al. // Nature. 1988. — Vol. 332.-P. 519-522.

125. Ruffolo J.J., Cushion M.T., Waizer P.D. Ultrastructural observations on life cycle stages of Pneumocystis carinii // J. Protozool. — 1989. — Vol. 36. -P. 53S-54S.

126. Seibold H.R., Munnell J.F. Pneumocystis carinii in a pig // Vet. Path. -1977.-Vol. 14.-P. 89-91.

127. Sequence from ribosomal RNA of Pneumocystis carinii compared to those of four fimgi suggests an ascomycetous affinity / S.L. Stringer, K. Hudson, M.A. Blase et al. // J. Protozool. 1989. - Vol. 36. - P. 14S-16S.

128. Serologic responses to specific Pneumocystis carinii antigens in health and disease / S.L. Peglow, A.G. Smulian, M.J. Linke et al. // J. Infect. Dis. 1990.-Vol. 161.-P. 296-306.

129. Should prophylaxis for Pneumocystis carinii pneumonia in solid organ transplant recipients ever be discontinued? / S.M. Gordon, S.P. LaRosa, S. Kalmadi et al. // Clin. Infect. Dis. 1999. - Vol. 28, N. 2. - P. 240-6.

130. Site-directed bronchoalveolar lavage and transbronchial biopsy in HIV-infected patients with pneumonia / J.Cadranel, K. Gillet-Juvin , M. Antoine et al. // Amer. J. Resp. Crit. Care. Med. 1995. - Vol. 152, N 3. -P. 1103-6.

131. Stringer J.R., Cushion M.T. The genome of Pneumocystis carinii // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1998. - Vol. 22, N 1-2. - P. 15-26.

132. Successful chemoprophylaxis for Pneumocystis carinii pneumonitis / W.T. Hughes, S. Kuhn, S. Chaudhary et al. // N. Engl. J. Med. 1977. -Vol. 297.-P. 1419-26.

133. Swofford D.L., Olsen G.L. Phylogeny reconstruction, molecular sys-tematics // In D.M. Hillis, C. Moritz (ed.), Molecular Systematics. Sinauer Associated, Sunderland, Mass. 1991. - P. 411-501.

134. The p-tubuin gene from rat and human isolates of Pneumocystis carinii / T.D. Edlind, M.S. Bartlett, G.A. Weinberg et al. // Mol. Microbiol. -1992. Vol. 6. - P. 3365-3373.

135. Thomas C.F., Jr., Limper A.H. Current insights into the biology and pathogenesis of Pneumocystis pneumonia // Nat. Rev. Microbiol. — 2007. -Vol. 5.-P. 298-308.

136. Uptake of Pneumocystis carinii mediated by the macrophage mannose receptor / R.A.B. Ezekowitz, DJ. Williams, H. Koziel et al. // Nature. — 1991.-Vol. 351.-P. 155-158.

137. Valerie L. NG, Yajko D.M., Hadley W.K., Extrapulmonary Pneumocystosis // J. Clinic. Microb. 1997. - Vol. 10, N 3. - P. 401-418.

138. Vanek J., Jirovec O. Parasitic pneumonia: interstial plasma cell pneumonia of premature infants caused by Pneumocystis carinii // Zentralbl. Bakteriol.- 1952.-Vol. 158.-P. 120-127.

139. Wakefield A.E. DNA sequences identical to Pneumocystis carinii f. sp. carinii and Pneumocystis carinii f. sp. hominis in samples of air spora // J. Clin. Microbial. 1996. - Vol. 34. - P. 1754-1759.

140. Wakefield A.E., Pixley F.J., Banerji S. Detection of Pneumocystis carinii with DNA amplification // Lancet. 1990. - Vol. 336. - P. 451^53.

141. Weller R. Weitere untersuchungen uber experimente rattenpneumo-cystose in hiblick auf die interstittelle pneumonte der fruhgeborenen // Z. Kinderheilkit. 1956. - Vol. 78. - P. 166-176.

142. Weller R. Zur erzeugung von pneumocysro sen in tierversach // Z. Kinderheilkit. 1955. - Vol. 76. - P. 366-378.

143. Yoneda K., Walzer P.D. Interaction of Pneumocystis carinii with host lungs: an ultrastructural study // Infect. Immun. 1980. — Vol. 29. — P. 692-703.

144. Yoneda K., Walzer P.D. Attachment of Pneumocystis carinii to type I alveolar cells studied by freeze-fracture electron microscopy // Infect. Immun. 1983.-Vol. 40.-P. 812-815.