Эпидемиологические аспекты распространения ТТ-вируса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.30, кандидат биологических наук Кюрегян, Карен Каренович

• Кюрегян, Карен Каренович
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кюрегян, Карен Каренович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Характеристика ТТ вируса и методы его выявления.

1.1.Физико-химическая характеристика ТТ вируса. Геном. Таксономия.

1.2. Тропизм ТТ вируса.

1.3. Методы выявления TTV.

2. Эпидемиологические закономерности распространения TTV.

2.1. Распространение TTV.

2.2. Механизмы и пути передачи TTV.

2.2.1. Парентеральный путь пфедач^ТЩ,.,.

2.2.2. Вертикальный путь передачи TTV !.

2.2.3. Половой путь передачи TTV.

2.2.4. Фекально-оральный механизм передачи TTV.

3. Патогенность TTV.

Глава II. Собственные исследования.

4. Материалы и методы.

5. Распространение TTV среди первичных доноров крови в различных регионах России.

6. Пути передачи TTV.

6.1. Анализ интенсивности реализации парентерального пути передачи TTV среди пациентов отделения программного гемодиализа.

6.2. Половой путь передачи TTV.

7. Факторы передачи TTV.

8. Распространение TTV среди сельскохозяйственных животных и лиц находящихся с ними в контакте.

9. Изучение связи между инфицированием TTV и повышением уровней активности сывороточных трансаминаз.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эпидемиологические аспекты распространения ТТ-вируса»

Актуальность темы.

В ряде случаев у пациентов с хроническим гепатитом и циррозом печени не обнаруживаются сывороточные маркёры HBV или HCV инфекции. Такие случаи классифицируются как «криптогенные», то есть этиология их не ясна. Развитие фульминантного гепатита у части пациентов не связано с вирусами A,B,C,D или Е. Эти данные указывают на возможное существование других вирусных агентов, вызывающих гепатит. В связи с этим расшифровка этиологии криптогенных гепатитов является важной задачей здравоохранения, при этом особое значение приобретает поиск новых вирусов, способных вызывать заболевание печени.

В 1997 году японский исследователь Т. Nishizawa с соавт., применяя репрезентативный дифференциальный анализ нуклеотидных последовательностей, выделил из сыворотки пациента с посттрансфузионным гепатитом ни-А ни-G клон, оказавшийся при последующем изучении фрагментом ДНК нового гепатотропного вируса, названного TTV. Первые исследования показали, что инфицирование этим вирусом может объяснять часть случаев криптогенного гепатита-ДНК TTV выявляли в сыворотках пациентов с острым гепатитом неясной этиологии, и титры вирусной ДНК коррелировали с уровнями активности сывороточных трансаминаз.

На момент начала исследований данные мировой литературы о распространении TTV, путях его передачи и связи с развитием заболевания печени носили отрывочный и зачастую противоречивый характер. Сведения по TTV на территории России отсутствовали.

По предварительным данным TTV является единственным гепатотропным вирусом, для которого доказана способность передаваться как парентерально, так и непарентерально, при этом значение каждого из путей передачи для распространения вируса не определено. Для исследования возможных путей передачи TTV необходимо было изучить возможность передачи вируса половым путем, данные о котором отсутствовали на момент начала наших исследований, а также, исходя из представлений о вероятности реализации фекально-орального механизма передачи TTV, выявить потенциальные источники инфицирования вирусом, расположенные во внешней среде - например, водные источники. Единственная на сегодняшний момент работа P. Leary с соавт. (1999), посвященная выявлению ДНК TTV в образцах сывороток крови сельскохозяйственных животных, определила целесообразность обследования сельскохозяйственных животных на наличие у них маркеров этого вируса.

Данные литературы о связи TTV с развитием заболевания печени носят противоречивый характер - японские исследователи подтверждают роль некоторых вариантов TTV в развитии гепатита, тогда как другие авторы высказывают сомнения относительно патогенного действия TTV. Существуют данные о единичных случаях заболевания гепатитом, ассоциированным с TTV, и о вспышке в Китае гепатита ни-А ни-Е, вызванного TTV. В связи этим представляется важным изучение влияния этого агента на функцию печени в разных группах пациентов.

Широкая распространенность TTV среди условно здорового населения объясняет необходимость изучения патогенности этого вируса и его роли в инфекционной патологии.

Цель работы: Изучить эпидемиологические аспекты распространения TTV на территории России.

Исходя из поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Определить распространение TTV среди населения в регионах России с различной интенсивностью циркуляции HBV, HCV и HAV на основании выявления ДНКТТ\/.

2. Изучить возможность реализации различных путей и факторов передачи TTV и их значение для распространения вируса.

3. Определить частоту выявления ДНК TTV среди лиц с различными уровнями активности сывороточных трансаминаз для установления возможной связи TTV с развитием заболевания печени.

4. Изучить распространение TTV среди сельскохозяйственных животных Научная новизна.

Впервые определена распространенность TTV в различных регионах России, характеризующихся различной интенсивностью циркуляции HBV, HCV и HAV. Было установлено, что TTV распространен равномерно на территории России, что позволило определить средний показатель распространенности TTV в России, и установить, исходя из этого показателя, что по распространению TTV Россия занимает промежуточное положение между Восточной Азией и странами Западной Европы и Северной Америки. На основании обнаружения ДНК TTV в половых секретах организма -вагинальном секрете, цервикальной слизи и спермальной жидкости, и выявления случаев передачи TTV в семейных очагах высказано предположение о возможности реализации полового пути передачи вируса.

Впервые выявлена ДНК TTV в образцах воды, полученных из источников системы водоснабжения, что позволяет рассматривать контаминированную TTV воду как возможный фактор передачи вируса.

Впервые в России установлено наличие ДНК TTV в сыворотках крови сельскохозяйственных животных, а также образцах молока, полученных от коров, позитивных по ДНК TTV в сыворотке крови.

При определении распространенности TTV среди доноров крови с повышенными уровнями активности сывороточных трансаминаз установлено отсутствие взаимосвязи между инфицированием TTV и подъемом трансаминаз, в отличие от HBV и HCV, инфицирование которыми обусловливало повышение печеночных ферментов. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии связи TTV с развитием заболевания печени у обследованных лиц.

Практическая значимость.

Результаты работы позволили впервые в России получить представления о широте распространения и путях передачи TTV и значении TTV как агента, способного в некоторых случаях вызывать поражение печени. Полученные результаты указывают на отсутствие целесообразности выявления TTV при скрининге доноров крови, но подтверждают необходимость выявления этого агента при расшифровке случаев криптогенного гепатита.

Внедрение полученных результатов.

Материалы диссертационной работы использованы при составлении методических указаний Министерства Здравоохранения Российской Федерации №2000/246 «Клинико-диагностические критерии и эпидемиологические особенности распространения вирусных гепатитов с парентеральной передачей возбудителя среди пациентов с инфекциями, передающимися половым путем».

Научные положения, выводы и методические указания, вытекающие из результатов диссертационной работы, используются при чтении лекций 9 и проведении практических занятий на кафедре инфектологии Московской Медицинской Академии им. И.М. Сеченова.

Результаты исследований внедрены в работу Гепатологического центра при Первой Московской Инфекционной больнице.

Апробация работы.

Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседании Московского Общества эпидемиологов (2000), на III и IV Научно-практических конференциях «Гепатит В, С и D - проблемы диагностики, лечения и профилактики» (Москва, 1999 и 2001), на 114 Фальк Симпозиуме (Базель, Швейцария, 1999), на 35 Ежегодной Встрече Европейской Ассоциации по изучению печени (Роттердам, Нидерланды, 2000), на X Международном Симпозиуме по вирусным гепатитам и заболеванию печени (Атланта, США, 2000).

Заключение диссертации по теме «Эпидемиология», Кюрегян, Карен Каренович

Выводы.

1. Впервые установлено, что TTV широко и равномерно распространен на территории России, распределение TTV на территории страны не зависит от интенсивности циркуляции HBV, HCV и HAV. Средний показатель распространения TTV на территории России, составил 24,2% при применении ПЦР-системы с праймерами к ORF1 и 51,9% при применении ПЦР-системы с праймерами к НТО.

2. Выявлена широкая и повсеместная распространенность TTV, обусловленная реализацией как парентерального, так и других путей передачи вируса. Показана зависимость распространения TTV от величины парентеральной нагрузки: частота выявления ДНК TTV среди пациентов отделения программного гемодиализа выше, чем среди первичных доноров крови (44,9% и 24,2% соответственно).

3. Впервые ДНК TTV была обнаружена в половых секретах организма (спермальная жидкость, вагинальный секрет, цервикальная слизь), что указывает на возможность реализации полового пути передачи TTV. Однако отсутствие достоверных различий по распространенности TTV среди лиц, относящихся к группе риска в отношении ИППП (проституток и больных сифилисом) и первичных доноров крови свидетельствуют о слабой интенсивности реализации этого пути передачи вируса.

4. Обнаружение ДНК TTV в 60% образцов слюны, полученных от серопозитивных лиц, позволяет предположить возможное ее значении как фактора передачи TTV.

132

5. Впервые установлено наличие ДНК TTV в образцах воды, полученных из открытых и закрытых водоемов системы водоснабжения, что указывает на возможность реализации водного пути передачи TTV.

6. Установлено наличие TTV среди сельскохозяйственных животных: коров (15,2%), свиней (18,3%), кур (16,7%).

7. Не выявлено достоверных различий в частоте выявления TTV среди лиц, контактирующих с сельскохозяйственными животными (животноводов, работников мясокомбината) и в группе сравнения.

8. Выявлено отсутствие связи между инфицированием TTV и уровнями активности сывороточных трансаминаз среди доноров крови с разными уровнями активности АЛТ.

Заключение.

Исследования распространенности TTV на территории России показали, что вирус широко и равномерно распространен среди здорового населения. Среди первичных доноров крови в регионах страны, различающихся по заболеваемости острыми вирусными гепатитами А, В и С, и по уровню носительства HBV и HCV, частота выявления ДНК TTV находилась на сходном уровне, то есть TTV распространен на территории России равномерно, не зависимо от интенсивности циркуляции HBV, HCV и HAV в обследованных регионах. Отсутствие различий между областями России по частоте выявления TTV позволило рассчитать средний показатель распространенности TTV на территории России - при исследованиях с применением ПЦР-системы II поколения с праймерами к ORFIoh составил 24,2% (126/521), при применении более чувствительного диагностикума III поколения с более универсальными праймерами к НТО TTV, этот показатель составил 51,9% (235/453). Распространенность TTV среди первичных доноров крови в России значительно (в 10-20 раз) превышает распространенность вирусов гепатита А, В и С, регистрируемую среди условно здорового населения России. Таким образом, более широкая распространенность TTV по сравнению с HBV, HCV и HAV, и отсутствие взаимосвязи с этими вирусами по распределению на территории страны предполагает различие закономерностей, определяющих распространение TTV и HBV, HCV и HAV. Возможность определения общего показателя распространенности TTV на территории России позволило провести сравнения с встречаемостью этого вируса в других регионах мира, определенной при помощи диагностических систем двух поколений - с праймерами к ORF 1 и к НТО TTV. Оказалось, что по распространению TTV Россия занимает среднее, промежуточное положение между странами, характеризующимися высокой встречаемостью TTV, и странами, где распространение вируса относительно ниже. При проведении анализа данных, полученных с помощью диагностикума II поколения, распространенность TTV в России ниже, чем в станах Дальневосточного региона (Китай, Монголия), Африки (Конго, Нигерия, Габон) и Латинской Америки (Бразилия), и выше, чем в Западной Европе и Северной Америке. Анализ данных, полученных при применении тест-систем III поколения, продемонстрировал, что распространенность TTV в России среди первичных доноров крови выше, чем в США, и ниже, чем в Японии и Франции. Результаты, полученные с более чувствительными тест-системами III поколения, позволяющими с более высокой точностью оценивать распространение TTV, отражают стремление этого показателя к 100% и к сглаживанию различий между разными регионами мира по распространенности TTV. Такое широкое и повсеместное распространение вируса среди условно здорового населения ставит два основных вопроса - какие пути передачи обеспечивают такую интенсивную циркуляцию TTV в человеческой популяции, и обладает ли патогенными свойствами агент, столь широко распространенный среди условно здорового населения?

На сегодняшний день TTV является единственным гепатотропным вирусом, для которого доказана возможность эффективно передаваться как парентерально, так и фекально-орально. Первоначально TTV был описан, как вирус, передающийся при переливаниях крови, однако высокая частота выявления вируса среди лиц, никогда не подвергавшихся парентеральным манипуляциям, заставила подвергнуть сомнению важность парентерального пути передачи для распространения TTV. Результаты, полученные при анализе частоты выявления TTV среди пациентов, находящихся на программном гемодиализе, продемонстрировали более широкую распространенность TTV по сравнению с первичными донорами криви и показали возрастание распространенности TTV с увеличением стажа пребывания на гемодиализе. Однако зависимость от длительности пребывания на гемодиализе, и как следствие, от величины степени риска приобретения инфекций с парентеральной передачей возбудителя, для TTV не была такой же четкой, как для HBV и HCV. Таким образом, парентеральная передача TTV обуславливает широкую распространенность вируса среди пациентов, находящихся на гемодиализе, и реализация парентерального пути передачи среди этих пациентов происходит интенсивнее, чем среди первичных доноров крови, однако не только парентеральный путь передачи определяет распространенность TTV как среди пациентов гемодиализа, так и в генеральной популяции.

Изучение возможности реализации полового пути передачи TTV показало, что вирус может передаваться при половых контактах, поскольку ДНК TTV была обнаружена в половых секретах организма (спермальной жидкости, вагинальном секрете и цервикальной слизи), но интенсивность половой передачи вируса не высока, так как распространенность TTV среди лиц, относящихся к группам риска по приобретению инфекций, передающихся половым путем (проститутки, пациенты с сифилисом), находится приблизительно на одинаковом уровне с распространением вируса среди первичных доноров крови. Таким образом, несмотря на возможность существования полового пути передачи TTV, вклад этого пути передачи в распространение вируса не представляется значительным. Интересным фактом представляется высокая частота выявления ДНК TTV в образцах слюны, полученных от лиц, позитивных по ДНК TTV в сыворотке - 60,0%. Совместно с данными X. Deng с соавт. (2000), показавшими, что титры ДНК TTV во многих случаях равны или превышают титры вирусной ДНК в соответствующих образцах сывороток, полученные результаты указывают на важность слюны как фактора передачи TTV и на возможность интенсивной бытовой передачи вируса через предметы, контаминированные слюной инфицированного TTV человека.

Обнаружение ДНК TTV в образцах стула и желчи, полученных от пациентов, позитивных по ДНК TTV сыворотке (Н. Okamoto et al., 1999), и широкая распространенность вируса среди лиц, не подвергавшихся парентеральным манипуляциям, указывают на существование фекально-орального механизма передачи TTV. Реплицируясь в гепатоцитах, TTV выводится из печени через желчь и попадает во внешнюю среду через кишечный тракт. Поскольку у вирусной частицы TTV отсутствует липопротеиновая оболочка, которая могла бы разрушаться желчными кислотами, вирионы TTV попадают во внешнюю среду, не теряя своих инфекционных свойств. Обнаружение нами ДНК TTV в пробах воды из водоемов, в том числе и водоемов, используемых в качестве источников питьевой воды, предполагает роль контаминированной TTV воды в передаче вируса. Таким образом TTV способен передаваться различными путями, как парентерально, так и непарентерально, и по-видимому, именно фекально-оральный механизм передачи обуславливает крайне широкую распространенность TTV среди условно здорового населения.

Помимо человека и других приматов, TTV обнаружен у различных сельскохозяйственных животных. С помощью диагностикумов с праймерами к НТО TTV, позволяющих выявлять практически все известные варианты вируса, ДНК TTV удается обнаружить в сыворотках крови коров, свиней, овец и кур. Кроме того, ДНК TTV присутствует в молоке коров, позитивных по ДНК TTV в сыворотке крови. Эти данные позволяют предполагать, что сельскохозяйственные животные могут быть источником инфицирования TTV для человека. Сходная частота выявления ДНК TTV среди первичных доноров крови и среди животноводов и работников мясокомбината, то есть лиц, постоянно контактирующих с животными или их кровью, указывает на то, что сельскохозяйственные животные не являются основным источником TTV для человека. Кроме того, в образцах сывороток крови сельскохозяйственных животных удавалось выявлять ДНК TTV только при применении ПЦР системы с праймерами к НТО, консервативной среди всех изолятов TTV, и не удавалось при применении ПЦР системы с праймерами к кодирующей области ORF1. Это может означать, что изоляты TTV, выделенные от человека и животных, значительно различаются между собой, и перекрестное инфицирование не возможно. С другой стороны, анализ нуклеотидных последовательностей амплифицированных фрагментов ДНК TTV, выделенной от сельскохозяйственных животных и человека, показал значительную степень их сходства между собой и с известными последовательностями TTV, депонированными в GeneBank (степень гомологии составляла 76% - 100%), и отсутствие распределения последовательностей на два кластера - изоляты, полученные от человека и изоляты, полученные от сельскохозяйственных животных, то есть все изучавшиеся последовательности НТО TTV составляли одну группу не зависимо от происхождения изолята. Таким образом, TTV способен инфицировать различных сельскохозяйственных животных, но не установлено, могут ли эти животные или пищевые продукты, приготовленные из них и не подвергнутые достаточной для инактивации вируса термической обработке, являться источником инфицирования TTV для человека. Если такая передача вируса и существует, сходная с первичными донорами крови распространенность TTV среди животноводов и работников мясокомбината указывает на слабую интенсивность передачи TTV от сельскохозяйственных животных человеку.

Существования множественных путей передачи TTV (парентеральный путь, половой путь, фекально-оральный механизм передачи, и, возможно, алиментарный путь передачи) обусловливают широкое распространение вируса по всему миру среди различных групп населения, в том числе и среди условно здорового населения. В связи с этим вопрос о патогенности TTV представляется противоречивым. Доказано, что TTV является гепатотропным вирусом, способным помимо гепатоцитов реплицироваться и в клетках костного мозга (Н. Okamoto et al., 1998; Н. Okamoto et al., 2000). В большинстве работ, посвященных изучению патогенного влияния TTV, сообщается об отсутствии взаимосвязи между инфицированием TTV и развитием заболевания печени (S.Viazov et al., 1998; N.Takahashi et al.,1999). Маркером воспалительного процесса в печени является повышение уровней активности сывороточных трансаминаз - аланин аминотрансферазы (АЛТ) и аспартат аминотрансферазы (ACT). Известно, что в большинстве случаев при HBV- или HCV-инфекции у пациентов наблюдается подъем уровней активности АЛТ и ACT. Установлено, что среди доноров крови с повышенным уровнем активности АЛТ и ACT частота выявления HBsAg, anti-HCV, ДНК HBV и РНК HCV в несколько раз выше, чем у доноров с показателями активности трансаминаз в пределах нормы. Изучение распространенности TTV среди доноров крови с повышенными уровнями активности сывороточных АЛТ и доноров с уровнями АЛТ в пределах нормы продемонстрировало отсутствие достоверных различий по частоте выявления TTV в двух этих группах. В отличие от ДНК TTV, частота выявления маркеров инфицирования HBV и HCV значительно возрастала в группе доноров крови с повышенными АЛТ. Кроме того, инфицирование TTV не оказывало влияния на средние уровни АПТ у доноров крови с повышенными АЛТ. TTV-статус не оказывал влияния и на средние уровни трансаминаз и у пациентов, находящихся на программном гемодиализе. Таким образом, влияние TTV-инфекции на патологический процесс в печени представляется в обследованных группах пациентов минимальным.

Отмечена высокая распространенность TTV среди пациентов с хроническим гепатитом, в первую очередь с хроническим гепатитом С -до 92,9% при применении ПЦР-системы с праймерами к НТО TTV. Высокая частота коинфекции TTV и HCV обусловлена реализацией парентерального пути передачи возбудителя, общего для этих вирусов, среди изучавшихся пациентов с хроническим гепатитом. Несмотря на часто встречающуюся коинфекцию, TTV не оказывает влияния на клиникопатологическое течение хронического гепатита В и С и ответ на терапию интерфероном (Н. Hagiwara et al., 1999; J.H. Као et al., 2000; M. Mizokami et al., 2000). Данные, опубликованные в ранних работах японских исследователей, появившихся после описания TTV (Т. Nishizawa et al., 1997; Н. Okamoto et al., 1998), продемонстрировавшие этиологическую роль в развитии гепатита, дальнейшего подтверждения не нашли, хотя в иногда связь TTV-инфекции с развитием подъема уровней активности сывороточных трансаминаз удается установить (К.Х. Luo et al., 1999; К. Itoh et al., 1999). Способность TTV реплицироваться в клетках костного мозга позволяет исследователям искать взаимосвязь между TTV-инфекцией и развитием заболеваний гемопоэза. Данные К.

Kikuchi с соавт. (2000) и А.Р. Рейзис с соавт. (2001) подтверждают этиологическую роль TTV в возникновении апластической анемии, хотя есть работы, в которых эта роль не подтверждается (Y. Poovorawan et al., 1999; R. Safadi et al., 2000). Таким образом, несмотря на противоречивость данных о патогенности TTV нельзя отрицать возможность влияния TTV-инфекции на патогенез печени или системы кроветворения.

Для оценки возможной этиологической роли TTV и других вирусов, возможное открытие которых еще впереди, в развитии заболеваний, Н. Alter предложил ряд критериев, применение которых только частично подтверждает патогенные свойства некоторых вариантов TTV, в первую очередь, генотипа 1. Только в некоторых работах подтверждаются критерии, требующие присутствия предполагаемого патогена в большинстве случаев заболевания (для TTV это гепатит неясной этиологии или апластическая анемия), наличия последовательностей изучаемого агента только в органе-мишени и их отсутствия в других тканях и органах, существования корреляции между титрами копий патогена и появлением и силой симптомов заболевания. Вышеперечисленные критерии, при их применении к TTV, демонстрируют ограниченное патогенное влияние этого вируса, однако окончательно он не может быть отвергнуто, поскольку TTV, как всякий вирус, является паразитом клетки, и при определенных сочетаниях различных факторов организма хозяина, вируса и внешней среды, в которой находится организм-хозяин, может вызывать заболевание печени.

130 действие его ограничено - все это указывает на долгую совместную эволюцию TTV и человека, приведшую к развитию максимально успешного распространения вируса в популяции хозяина (человека) при минимально конфликтных отношениях вируса с организмом-хозяином.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кюрегян, Карен Каренович, 2001 год

1. Балаян М.С., Михайлов М.И. Энциклопедический словарь вирусные гепатитыю Изд. 2-е, переработанное и дополненное. М.: Амипресс, -304с.

2. Гущин А.Е.б Шипулин Г.А., Чуланов В.П. и др. Распространенность вируса ТТ среди здоровых лиц. Тезисы докладов IV Российской научно-практической конференции «Гепатит В, С, и D проблемы диагностики, лечения и профилактики». Москва, 2001.

3. Николаев А.Ю., Милованов Ю.С. Лечение почечной недостаточности: руководство для врачей. М.: Медицинское информационное агенство, 1999, 363с.

4. Abe К., Inami Т., Asano К. et al. ТТ virus infection is widespread in the general populations from different geographic regions. J Clin Microbiol. 1999 Aug;37(8):2703-5.

5. Abe K., Inami Т., Ishikawa K. et al. TT virus infection in nonhuman primates and characterization of the viral genome: identification of simian TT virus isolates. J Virol. 2000 Feb;74(3): 1549-53.

6. Biagini P., gallian P., Attoui H. et al. Comparison of systems performance for TT virus detection using PCR primer sets located in non-coding and coding regions of the viral genome. J Clin Virol. 2001 Aug;22(1):91-9.

7. Biagini P., Gallian P., Touinssi M. et al. High prevalence of TT virus infection in French blood donors revealed by the use of three PCR systems. Transfusion. 2000 May;40(5):590-5

8. Charlton M., Adjei P., poterucha J. et al. TT-virus infection in North American blood donors, patients with fulminant hepatic failure, and cryptogenic cirrhosis. Hepatology. 1998 Sep;28(3):839-42.

9. Chen B.P., Rumi M.G., Colombo M. et al. TT virus is present in a high frequency of Italian hemophilic patients transfused with plasma-derived clotting factor concentrates. Blood. 1999 Dec 15;94(12):4333-6.

10. Chen X., Li M., Wang H. Establishment of ELISA with TT virus(TTV) and its application to patients with hepatitis and healthy people., Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi. 2001 Jun;15(2):160-2. Chinese.

11. Christensen J.K., Eugen-Olsen J., Slensen M et al. Prevalence and prognostic significance of infection with TT virus in patients infected with human immunodeficiency virus. J Infect Dis. 2000 May; 181 (5): 1796-9.

12. Cleavenger P.J., Persing D.H., Li H. et al. Prevalence of TT virus infection in blood donors with elevated ALT in the absence of known hepatitis markers. Am J Gastroenterol. 2000 Mar;95(3):772-6.

13. Colombatto P., Brunetto M.R., Kansopon J. et al. High prevalence of G1 and G2 TT-virus infection in subjects with high and low blood exposure risk: identification of G4 isolates in Italy. J Hepatol. 1999 Dec;31(6):990-6.

14. Dai C.Y., Yu M.L., Chuang W.L. et al. The molecular epidemiology and clinical significance of TT virus (TTV) infection in healthy blood donors from southern Taiwan. Transfus Apheresis Sci. 2001 Feb;24(1):9-15.

15. Davidson F., McDonald D., Mokili J.L. et al. Early acquisition of TT virus (TTV) in an area endemic for TTV infection. J Infect Dis. 1999 May; 179(5): 1070-6.

16. Debiaggi M., Zara F., Sacchi P. et al. Transfusion-transmitted virus infection in HIV-1-seropositive patients. Clin Microbiol Infect. 2000 May;6(5):246-50.

17. Deng X., Terunuma H., Handema R. et al. Higher prevalence and viral load of TT virus in saliva than in the corresponding serum: another possible transmission route and replication site of TT virus. J Med Virol. 2000 Dec;62(4):531-7.

18. Fabris P., Biasin M.R., Infantolino D. et al. TTV infection in patients with acute hepatitis of defined aetiology and in acute non-A-E hepatitis. J Hepatol. 2000 Apr;32(4):661-5.

19. Fan L., Zhao X., Zhang D. et al. Detection of transfusion transmitted virus in hepatic and extra hepatic tissues using in situ hybridization., Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2000 Jun;8(3): 147-9. Chinese.

20. Gad A., tanaka E., Orii K. et al. Clinical significance of TT virus infection in patients with chronic liver disease and volunteer blood donors in Egypt. J Med Virol. 2000 Feb;60(2): 177-81.

21. Gallian P., berland Y., Olmer M. et al. TT virus infection in French hemodialysis patients: study of prevalence and risk factors. J Clin Microbiol.: 10405397

22. Gerner P., Oettinger R., Gerner W. et al. Mother-to-infant transmission of TT virus: prevalence, extent and mechanism of vertical transmission. Pediatr Infect Dis J. 2000 Nov; 19(11): 1074-7.

23. Halfon P., Bourlieree M., Feryn J.M. et al. Prevalence of transmitted transfusion virus (TTV) in populations at different risk for hepatitis virus: hemodialysis, chronic hepatitis С and cryptogenetic hepatitis patients. J Hepatol. 1999 Mar;30(3):552.

24. Handa A., Dickstein В., Young N.S. et al. Prevalence of the newly described human circovirus, TTV, in United States blood donors. Transfusion. 2000 Feb;40(2):245-51.

25. He C., Nomura F., Yukimasa N. et al. Transfusion-transmitted virus infection in China: prevalence in blood donors and in patients with liver diseases. J Gastroenterol Hepatol. 1999 Sep;14(9):899-903.

26. Hijikata M., Takahashi K., Mishiro S. et al. Complete circular DNA genome of a TT virus variant (isolate name SANBAN) and 44 partial ORF2 sequences implicating a great degree of diversity beyond genotypes. Virology. 1999 Jul 20;260(1): 17-22.

27. Hino K., Okuda M., Ishiko H. et al. Detection of TT virus in hemodialysis patients.

28. Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6):1413-6. Japanese.

29. Hohne M., Berg Т., Muller A.R. et al. Detection of sequences of TT virus, a novel DNA virus, in German patients. J Gen Virol. 1998 Nov;79 ( Pt 11):2761-4.

30. Huang Y.H., Wu J.С., Chiang T.Y. et al. Detection and viral nucleotide sequence analysis of transfusion-transmitted virus infection in acute fulminant and non-fulminant hepatitis. J Viral Hepat. 2000 Jan;7(1):56-63.

31. Jiang X.L., Luo K.X., He H.T. et al. Intrahepatic transfusion-transmitted virus detected by in situ hybridization in patients with liver diseases. J Viral Hepat. 2000 Jul;7(4):292-6.

32. Kakinuma K., Yamauchi Т., Hikiji K. et al. Detection rate of TTV-DNA in healthy medical workers., Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6): 1421-3.

33. Kanda Y., Hirai H.TT virus in hematological disorders and bone marrow transplant recipients. Leuk Lymphoma. 2001 Feb;40(5-6):483-9.

34. Kangxian L., Weifang L., Lian Z. et al. Epidemiological survey and follow-up of transfusion-transmitted virus after an outbreak of enterically transmitted infection. J Viral Hepat. 2000 Jul;7(4):309-12.

35. Kao J.H., Chen W., Chen P.J. et al. TT virus infection in patients with chronic hepatitis В or C: influence on clinical, histological and virological features. J Med Virol. 2000 Apr;60(4):387-92.

36. Kato H., Mizokami M., Nakano T. et al. High prevalence and phylogenetic analysis of TT-virus infection in Mongolia. Virus Res. 1999 Apr;60(2):171-9.

37. Kato H., Mizokami M., Orito E. et al. Lack of association between TTV viral load and aminotransferase levels in patients with hepatitis С or non-B-C. Scand J Infect Dis. 2000;32(3):259-62.

38. Kazi A., Miyata H., Kurokawa K. et al. High frequency of postnatal transmission of TT virus in infancy. Arch Virol. 2000;145(3):535-40.

39. Khudyakov Y.E., Cong M.E., Nichols B. et al. Sequence heterogeneity of TT virus and closely related viruses. J Virol. 2000 Apr;74(7):2990-3000.

40. Kikuchi K., Miyakawa H., Abe K. et al. Indirect evidence of TTV replication in bone marrow cells, but not in hepatocytes, of a subacute hepatitis/aplastic anemia patient. J Med Virol. 2000 May;61(1): 165-70.

41. Lang Z., Jin R., Wang Y. et al. Significance of detection of transfusion transmitted virus in extrahepatic tissues. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2001 Apr;9(2):92-4.

42. Leary T.P., erker J.C., Chalmers M.L. et al. Improved detection systems for TT virus reveal high prevalence in humans, non-human primates and farm animals. J. Gen. Virol. (1999), 80, 2114-2120.

43. Lefrere J.J., Roudot-Thoraval F., Lefrere F. et al. Natural history of the TT virus infection through follow-up of TTV DNA-positive multiple-transfused patients. Blood. 2000 Jan 1;95(1):347-51.

44. Lin C.L., Kyono W., Tongson J. et al. Fecal excretion of a novel human circovirus, TT virus, in healthy children. Clin Diagn Lab Immunol. 2000 Nov;7(6):960-3.

45. Lopez-Alkorocho J.M., Barril G., Ortiz-Movilla N. et al. Prevalence of hepatitis B, hepatitis C, GB virus C/hepatitis G and TT viruses in predialysis and hemodialysis patients. J Med Virol. 2001 Feb;63(2): 103-7.

46. Love A., Stanzeit В., Li L. et al. TT virus infections among blood donors in Iceland: prevalence, genotypes, and lack of relationship to serum ALT levels. Transfusion. 2000 Mar;40(3):306-9.

47. Luo K., Liang W., He H. et al. Experimental infection of nonenveloped DNA virus (TTV) in rhesus monkey. J Med Virol. 2000 May;61(1): 159-64.

48. Luo K.X., zhang L., wang S.S. et al. An outbreak of enterically transmitted non-A, non-E viral hepatitis. J Viral Hepat. 1999 Jan;6(1):59-64.men.

49. J Infect Dis. 1999 Mar;179(3):686-9.

50. Maeda M., hamada H., Tsuda A. et al. High rate of TTV infection in multitransfused patients with pediatric malignancy and hematological disorders. Am J Hematol. 2000 Sep;65(1):41-4.

51. Matsubara H., Michitaka K., Horiike N. et al. Existence of TT virus DNA in extracellular body fluids from normal healthy Japanese subjects. Intervirology. 2000;43(1):16-9.

52. Miyamoto M., Takahashi H. Sakata I. et al. Hepatitis-associated aplastic anemia and transfusion-transmitted virus infection. Intern Med. 2000 Dec;39(12):1068-70.

53. Moriyama M., Matsumura H., Shimizu T. et al. Histopathologic impact of TT virus infection on the liver of type С chronic hepatitis and liver cirrhosis in Japan. J Med Virol. 2001 May;64(1):74-81.

54. Mulyanto M., Hijikata M., Matsushita M. et al. TT virus (TTV) genotypes in native and non-native prostitutes of Irian Jaya, Indonesia: implication for non-occupational transmission. Arch Virol. 2000; 145(1 ):63-72.

55. Mushahwar I.K., Erker J.C., Muerhoff A.S. et al. Molecular and biophysical characterization of TT virus: evidence for a new virus family infecting humans.

56. Proc Natl Acad Sci USA. 1999 Mar 16;96(6):3177-82.

57. Nakagawa N., Ikoma J., Ishihara T. et al. High prevalence of transfusion-transmitted virus among patients with non-B, non-C hepatocellular carcinoma. Cancer. 1999 Oct 15;86(8): 1437-40.

58. Nerurkar V.R., Woodward C.L., Lack of association between acquisition of TT virus and risk behavior for HIV and HCV infection in Vietnam. Int J Infect Dis. 1999 Summer;3(4):181-5.

59. Niitsuma H., Ishii M., Suzuki C. et al. Genoepidemiology and pathogenicity of TT virus in Japanese men with history of intravenous drug abuse and tattoo., Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6): 1424-6.

60. Nishiguchi S., Enomoto M., Shiomi S. et al. TT virus infection in patients with chronic liver disease of unknown etiology. J Med Virol. 2000 Nov;62(3):392-8.

61. Nishizawa Т., Okamoto H., Konishi K. et al. A novel DNA virus (TTV) associated with elevated transaminase levels in posttransfusion hepatitis of unknown etiology. Biochem Biophys Res Commun. 1997 Dec 8;241(1):92-7.

62. Nishizawa Т., Okamoto H., Tsuda F. et al. Quasispecies of TT virus (TTV) with sequence divergence in hypervariable regions of the capsid protein in chronic TTV infection. J Virol. 1999 Nov;73(11):9604-8.

63. Okamoto H., Fukuda M., Tawara A et al. Species-specific TT viruses and cross-species infection in nonhuman primates. J Virol. 2000 Feb;74(3): 1132-9.

64. Okamoto H., Kato N., lizuka H. et al. Distinct genotypes of a nonenveloped DNA virus associated with posttransfusion non-A to G hepatitis (TT virus) in plasma and peripheral blood mononuclear cells. J Med Virol. 1999 Mar;57(3):252-8.

65. Okamoto H., Nishizawa Т., Kato N. et al. Molecular cloning and characterization of a novel DNA virus (TTV) associated with posttransfusion hepatitis of unknown etiology. Hepatol Res 1998; 10: 1-16.

66. Okamoto H., Nishizawa Т., Tawara A. et al. TT virus mRNAs detected in the bone marrow cells from an infected individual. Biochem Biophys Res Commun. 2000 Dec 20;279(2):700-7.

67. Okamoto H., Nishizawa Т., Tawara A. et al. Species-specific TT viruses in humans and nonhuman primates and their phylogenetic relatedness. Virology. 2000 Nov 25;277(2):368-78.

68. Pinho J.R., takahashi D.A., Fava A.L. et al. Transfusion-transmitted virus (TTV) in Brazil. Preliminary report. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 1998 Sep-Oct;40(5):335-6.

69. Pisani G Cristiano K., Wirz K. et al. Prevalence of TT virus in plasma pools and blood products. Br J Haematol. 1999 Aug;106(2):431-5.

70. Poovorawan Y., theamboonlers A., Jantaradsamee P et al. TT virus infection in intravenous drug users. Asian Рас J Allergy Immunol. 1999 Jun;17(2):101-6.

71. Poovorawan Y., Theamboonlers A., Jantaradsamee P. et al. Hepatitis TT virus infection in high-risk groups. Infection. 1998 Nov-Dec;26(6):355-8.

72. Pooworawan Y., Theamboonlers A., Seksarn P. et al. Insufficient evidence of TT-viral etiology of post hepatitis aplastic anemia. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1999 Jun;30(2):385-7.

73. Prescott L.E., McDonald D.M., Davidson F. et al. Sequence diversity of TT virus in geographically dispersed human populations. J Gen Virol. 1999 Jul;80 ( Pt 7): 1751-8.

74. Rodriguez-lnigo E., Casqueiro M., Bartolome J. et al. Detection of TT virus DNA in liver biopsies by in situ hybridization. Am J Pathol. 2000 Apr; 156(4): 1227-34.

75. Ross R.S., Viazov S., Runde V. et al. Detection of TT virus DNA in specimens other than blood. J Clin Virol. 1999 Aug;13(3):181-4.

76. Saback F.L., Palmer Т.Е., Sabino R.R. et al. Infection with hepatitis A and TT viruses and socioeconomic status in Rio de Janeiro, Brazil.Scand J Infect Dis. 2001;33(2):121-5.

77. HO.Safadi R., Or R., Naparstek E. et al.Lack of known hepatitis virus in hepatitis-associated aplastic anemia and outcome after bone marrow transplantation. Bone Marrow Transplant. 2001 Jan;27(2): 183-90.

78. I.Sakamoto M., Akahane Y. TTV superinfection on acute hepatitis В. Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6):1326-9.

79. Schroter M., Polywka S., Zollner B. et al. Detection of TT virus DNA and GB virus type C/Hepatitis G virus RNA in serum and breast milk: determination of mother-to-child transmission. J Clin Microbiol. 2000 Feb;38(2):745-7.

80. Seemaer C.A., Viazov S., Neidhart M. et a. Prevalence of TTV DNA and GBV-C RNA in patients with systemic sclerosis, rheumatoid arthritis, and osteoarthritis does not differ from that in healthy blood donors. Ann Rheum Dis. 2001 Aug;60(8):806-9.

81. Shibayama Т., Masuda G., Ajisawa A. et al. Inverse relationship between the titre of TT virus DNA and the CD4 cell count in patients infected with HIV. AIDS. 2001 Mar 30;15(5):563-70.

82. Simmonds P., davidson F., Lycett C. et al. Detection of a novel DNA virus (TTV) in blood donors and blood products. Lancet. 1998 Jul 18;352(9123):191-5.

83. Skelton M., Kew M.C., Yu M.C. et al. Transfusion-transmissible virus and hepatocellular carcinoma: a case-control study. J Viral Hepat. 2000 May;7(3):230-4.

84. Stark K., Roggensee G., Hohne M. et al. Seroepidemiology of TT virus, GBC-C/HGV, and hepatitis viruses В, C, and E among women in a rural area of Tanzania. J Med Virol. 2000 Dec;62(4):524-30.

85. Sugiyama K., goto K., Ando T. et al. Highly diverse TTV population in infants and their mothers.

86. Virus Res. 2001 Mar;73(2): 183-8.

87. Sugiyama K., Goto K., Ando T. et al. Prevalence of TTV DNA among children with a history of transfusion or liver disease. J Med Virol. 2000 Feb;60(2): 172-6.

88. Sugiyama K., Goto K., Ando T. et al. Route of TT virus infection in children. J Med Virol. 1999 Oct;59(2):204-7.

89. Sugiyama K., Goto K., Ando T. et al. TT virus infection in Japanese children: isolates from genotype 1 are overrepresented in patients with hepatic dysfunction of unknown etiology.

90. Tohoku J Exp Med. 2000 Aug;191(4):233-9.

91. Sugiyama Т., Shimizu M., Yamauchi О. et al. Seroepidemiological survey of TT virus (TTV) infection in an endemic area for hepatitis С virus. Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6): 1402-5.

92. Tagger A., Donato F., Binelli G. et al. A case-control study on a novel DNA virus (TT virus) infection and hepatocellular carcinoma. The Brescia HCC Study. Hepatology. 1999 Jul;30(1):294-9.

93. Takahashi K., Hijikata M., Samokhvalov E.I. et al. Full or near full length nucleotide sequences of TT virus variants (Types SANBAN and YONBAN) and the TT virus-like mini virus. Intervirology. 2000;43(2):119-23.

94. Takahashi K., Isawa Y., Hijikata M. et al. Identification of a new human DNA virus (TTV-like mini virus, TLMV) intermediately related to TT virus and chicken anemia virus. Arch Virol. 2000;145(5):979-93.

95. Takayama S., Yamazaki S., Matsuo S. et al. Multiple infection of TT virus (TTV) with different genotypes in Japanese hemophiliacs. Biochem Biophys Res Commun. 1999 Mar 5;256(1 ):208-11.

96. Tanaka M., Nishiguchi S., Enomoto M. et al. Prevalence of TT virus in patients with fulminant hepatic failure in Japan., Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6):1335-8.

97. Tanaka Y., Hayashi J., Ariyama I. et al. Seroepidemiology of TT virus infection and relationship between genotype and liver damage. Dig Dis Sci. 2000 Nov;45(11 ):2214-20.

98. Tanaka Y., Primi D., Wang R.Y. et al. Genomic and molecular evolutionary analysis of a newly identified infectious agent (SEN virus) and its relationship to the TT virus family. J Infect Dis. 2001 Feb 1;183(3):359-367.

99. Tokita H., Murai S., Kamitsukasa H. et al. Influence of TT virus infection on the thrombocytopenia of patients with chronic liver disease. Hepatol Res. 2001 Jul;20(3):288-300.

100. Toyoda H., Naruse M., Yokozaki S. et al. Prevalence of infection with TT virus (TTV), a novel DNA virus, in healthy Japanese subjects, newborn infants, cord blood and breast milk. J Infect. 1999 May;38(3): 198-9.

101. Tsuda F., Okamoto H., Ukita M. et al. Determination of antibodies to TT virus (TTV) and application to blood donors and patients with posttransfusion non-A to G hepatitis in Japan. J Virol Methods. 1999 Feb;77(2): 199-206.

102. Tsuda F., Takahashi M., Nishizawa T. et al. IgM-class antibodies to TT virus (TTV) in patients with acute TTV infection. Hepatol Res. 2001 Jan 1; 19(1): 1 -11.

103. Tureri г., Perret J.L., Delaporte E. et al. Prevalence and genetic variants of hepatitis GB-C/HG and TT viruses in Gabon, equatorial Africa. Am J Trop Med Hyg. 2000 Sep-Oct;63(3-4): 192-8.

104. Tuveri R., Jaffredo F., Lunel F. et al. Impact of TT virus infection in acute and chronic, viral- and non viral-related liver diseases. J Hepatol. 2000 Jul;33(1): 121-7.

105. Ukita M., Okamoto H., Kato N. et al. Excretion into bile of a novel unenveloped DNA virus (TT virus) associated with acute and chronic non-A-G hepatitis. J Infect Dis. 1999 May; 179(5): 1245-8.

106. Umemura Т., tanaka E., Kiyosawa K. TT virus infection in an area of high-endemicity for hepatitis С. Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6): 1397-401.

107. Verschoor E.J., Langenhuijzen S., Heeney J.L. et al. TT viruses (TTV) of non-human primates and their relationship to the human TTV genotypes. J Gen Virol. 1999 Sep;80 ( Pt 9):2491-9.

108. Viazov S., Ross R.S., Varenholz C. et al. Lack of evidence for an association between TTV infection and severe liver disease. J Clin Virol. 1998 Dec; 11(3): 183-7.

109. Wang J.Т., Lee C.Z., Kao J.H. et al. Incidence and clinical presentation of posttransfusion TT virus infection in prospectively followed transfusion recipients: emphasis on its relevance to hepatitis. Transfusion. 2000 May;40(5):596-601.

110. Watanabe H., Saito Т., Kawamata O. et al. Clinical implications of TT virus superinfection in patients with chronic hepatitis C. Am J Gastroenterol. 2000 Jul;95(7): 1776-80.

111. Yamamoto Т., Kajino K., Hino O. Prevalence of TT virus infection and viral integration in human hepatocellular carcinoma. Nippon Rinsho. 1999 Jun;57(6):1370-4.152

112. Yokozaki S., Toyoda H., Nakano I. et al. Infection with TT virus, a novel transfusion-transmissible DNA virus, in haemophiliacs and in blood products. Br J Haematol. 1999 Jun; 105(4): 1114-9.

113. Yoshida H., Kato N., Shiratori Y. et al. Poor association of TT virus viremia with hepatocellular carcinoma. Liver. 2000 Jun;20(3):247-52.

114. Yuki N., Kato N., Masuzawa M. et al. Clinical implications of coinfection with a novel DNA virus (TTV) in hepatitis С virus carriers on maintenance hemodialysis. J Med Virol. 1999 Dec;59(4):431-6.

115. Zehender G., Manzin A., De Maddalena C. et al. Molecular epidemiology of TT virus in Italy and phylogenesis of viral isolates from subjects at different risk for parenteral exposure. J Med Virol. 2001 Jan;63(1):76-84.

116. Zein N.N., Arslan M., Li H. et al. Clinical significance of TT virus infection in patients with chronic hepatitis C. Am J Gastroenterol. 1999 Qct;94(10):3020-7.