Электрохимические сенсоры для определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Деденева, Светлана Сергеевна

• Деденева, Светлана Сергеевна
• кандидат химических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат химических наук Деденева, Светлана Сергеевна

Сокращения.

Введение.

Глава 1. Литературный обзор.

1.1. Методы определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях.

1.1.1. Оптические методы определения мочевины и креатинина в лабораторной диагностике.

1.1.2. Электрохимические методы определения мочевины и креатинина.

1.2. Катализаторы электрохимического окисления органических соединений на основе соединений никеля (II).

1.3. Полимеры с молекулярными отпечатками. Синтез и применение в анализе органических соединений.

1.3.1. Технология получения полимеров с молекулярными отпечатками.

1.3.2 Применение полимеров с молекулярными отпечатками в сенсорных устройствах.

1.3.3. Полимеры с молекулярными отпечатками и рецепторы креатинина и мочевины.

1.4. Постановка задачи.

Глава 2 Аппаратура и техника эксперимента.

2.1. Оборудование и средства измерений.

2.2. Реактивы и приготовление растворов.

2.3.Методика эксперимента.

Глава 3. Исследование каталитической активности наночастиц NiO.

3.1 Выбор метода синтеза наночастиц NiO.

3.2 Электронно-микроскопические и энергодисперсионные исследования наночастиц NiO.

3.2.1 Электронно-микроскопические исследования наночастиц NiO, синтезированных с использованием ЦТАБ в качестве ПАВ.

3.2.2 Электронно-микроскопические исследования наночастиц NiO, синтезированных с использованием АОТ в качестве ПАВ.

3.2.3 Энергодисперсионный и рентгенофазовый анализ наночастиц NiO.

3.2.4 Растровая электронная микроскопия наночастиц NiO, нанесенных на рабочую поверхность ТУЭ.

3.3 Каталитические и сенсорные свойства наночастиц NiO при электрохимическом окислении мочевины.

Глава 4 Органические катализаторы электрохимического окисления мочевины и креатинина.

4.1. Выбор материала толстопленочного электрода.

4.2. Выбор способа иммобилизации катализатора.

4.3. Выбор каталитической системы для электрохимического окисления мочевины и/или креатинина.

4.3.1 Комплексы никеля (II) с фторированными кетонами (группа 1).

4.3.2 Комплексы никеля (II) с производными 3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)-з-тетразина (группа 2).

4.3.3 Комплексы никеля (II) с производными вициналъных диаминов (группа 3)

4.3.4 Комплексы никеля (II) с производными порфирина (группа 4).

4.4. Кинетика каталитического электрохимического окисления мочевины и креатинина.

4.5. Определение мочевины и креатинина с использованием модифицированных толстопленочных углеродсодержащих электродов.

Глава 5. Селективное определение мочевины и/или креатинина в модельных растворах.

5.1. Селективное определение мочевины с использованием анионообменной колонки.

5.2 Селективное определение креатинина с использованием ПМО.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Электрохимические сенсоры для определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях»

Актуальность темы. Решения, связанные с охраной здоровья населения и ранней диагностикой заболеваний требуют развития новых и эффективных методов определения компонентов биологических жидкостей — маркеров функционирования органов и систем человеческого организма.

При ряде заболеваний, сопровождающихся нарушением работы почек, может возникнуть острая почечная недостаточность, ранняя диагностика которой способствует своевременному оказанию медицинской помощи и уменьшает риск развития хронической или тяжелой форм заболевания. Общепризнанными диагностическими показателями функциональной способности почек являются содержание креатинина и мочевины в сыворотке крови и в моче, так как именно в почках происходит выделение азотистых компонентов крови.

В современной лабораторной диагностике для мониторинга заболеваний почек используются фотометрические приборные методы, в которых в качестве распознающего элемента чаще всего применяются ферменты.

Для определения мочевины используют прямые фотометрические методы, основанные на реакции мочевины с диацетилмонооксимом или каталитической реакции с уреазой. Фотометрическое определение креатинина, как правило, основано на реакции Яффе или, крайне редко, на реакции ферментативного гидролиза под действием креатинингидролазы с использованием автоанализаторов. Чувствительность используемых методов зависит от устойчивости окраски анализируемых комплексов, собственной окраски исследуемого образца, устойчивости ферментов при хранении и эксплуатации, действия высоких и низких температур, бактериальных загрязнений и т.д. Как следствие, сложность методики анализа, а также высокая стоимость оборудования и расходных материалов исключают повсеместное проведение лабораторной диагностики почечной недостаточности, в частности в небольших клиниках.

Для решения проблемы требуется создание новых экспрессных, чувствительных и селективных методов и сенсоров для диагностики почечной недостаточности, исключающих применение ферментов.

Высокая чувствительность и селективность, оперативность получения результата, возможность работы в полевых условиях, относительная простота и доступность аппаратурного оформления позволяют предложить для определения мочевины и креатинина электрохимические методы анализа.

Настоящая диссертационная работа посвящена развитию новых подходов к созданию бесферментных амперометрических сенсоров для определения мочевины и креатинина с использованием в качестве чувствительного элемента наночастиц NiO или макроциклических комплексов никеля (И). В качестве селективного элемента сенсорного устройства используются либо анионообменная колонка (в случае мочевины), либо полимеры с молекулярными отпечатками (в случае креатинина). Разработанный сенсор не уступает по чувствительности и селективности ферментсодержащим биосенсорам и лишен недостатков последних.

Актуальность представленной работы определяется как изложенными выше соображениями, так и ожидаемым упрощением и удешевлением методики и аппаратурного обеспечения в диагностике почечной дисфункции.

Работа является частью исследований, проводимых на кафедре химии и, с сентября 2008 г., кафедре физики и химии Уральского государственного экономического университета по следующим направлениям: РФФИ-офи «Молекулярный дизайн металлсодержащих рецепторов биогенных аминов на основе макрогетероциклических систем, модифицированных азагетероциклами и создание на их основе бесферментных сенсоров» (20062007 гг.), РФФИ-Урал «Электродные процессы в системах: электродметаллсодержащий рецептор биогенных аминов — определяемый амин» (2007-2009 гг.), в рамках заданий Министерства промышленности и науки Свердловской области «Нанотехнологии в био- и химических сенсорах для мониторинга окружающей среды и здоровья человека» (2008-2010 гг.)

Цель работы. Разработка бесферментных амперометрических сенсоров для прямого и селективного определения мочевины и креатинина на основе наночастиц NiO и хелатных комплексов никеля (II) как каталитических систем электрохимического окисления указанных аналитов, а также полимеров с молекулярными отпечатками (ПМО) креатинина, определяющих селективность определения.

Для достижения указанной цели необходимо решить следующие задачи: выбрать оптимальный метод синтеза наночастиц NiO и исследовать влияние размера и способа иммобилизации полученных наночастиц на поверхности толстопленочного углеродсодержащего электрода на каталитическую активность электрохимического окисления мочевины и/или креатинина; выбрать материал толстопленочного электрода и способ иммобилизации каталитической системы на основе органических комплексов никеля (II) на рабочую поверхность толстопленочного электрода; изучить каталитические системы на основе органических комплексов никеля (II), способных генерировать воспроизводимый аналитический отклик в присутствии определяемого аналита; исследовать кинетику электрохимического каталитического окисления мочевины и креатинина в присутствии каталитической системы; охарактеризовать рабочие условия регистрации аналитического сигнала в присутствии определяемого аналита; исследовать способность полимеров с молекулярными отпечатками креатинина к селективной сорбции молекул креатинина из модельных растворов разработать новые сенсоры для хроноамперометрического определения мочевины и креатинина с высокими аналитическими и метрологическими характеристиками.

Научная новизна.

Методом обратных микроэмульсий синтезированы наночастицы NiO сферической формы, средний диаметр которых составляет порядка 20 нм. Наиболее выраженная электрокаталитическая активность в электрохимическом окислении мочевины наблюдается при использовании образца наночастиц NiO, синтезированных при 45°С с использованием цетилтриметиламмония бромида (ЦТАБ) в качестве ПАВ.

Установлен рост каталитической активности наночастиц NiO в электрохимическом окислении мочевины при увеличении содержания наночастиц в модифицирующей суспензии до 0,5 г/л (в пересчете на содержание Ni (И)). Выше этого значения наблюдается снижение каталитической активности из-за ускорения процессов агломериции наночастиц и фазовых изменений. Получена линейная зависимость тока, регистрируемого при заданном потенциале, от концентрации мочевины в диапазоне концентраций аналита от 1-Ю"3 М до 8-10"3 М при использовании толстопленочных электродов, модифицированных наночастицами NiO; в качестве каталитических систем в электрохимическом окислении мочевины и креатинина использованы органические комплексы никеля (И), способные к дополнительной координации с молекулами аналита, что позволило увеличить чувствительность определения указанных аналитов. Из 16-ти исследованных органических комплексных соединений никеля (И) лучшие аналитические характеристики при электрохимическом определении мочевины и креатинина были получены для пяти органических комплексов Ni (II): 1,1,1,7,7,7-гексафторгептан-2,4,6-трикетоната диникеля (И) тетрагидрата (II); 4,4,5,5,6,6,7,7,7-нонафтор-1 -фенилгептан-1,3 -дикетоната никеля (И) (III); [(3,5-диметилпиразол-1-ил)-6-(бензотиазол-2-иламино)-з-тетразинато](ацетилацетонато) никеля (II) (V); 4-тетрапиразинпорфиразина никеля (II) (XI) и 2,9,16,23-тетра(4-гептилфенил) тетрапиразинпорфиразина никеля (И) (XII); показано, что процесс электрохимического окисления мочевины или креатинина на модифицированных органическими комплексами толстопленочных углеродсодержащих электродах (ТУЭ) является каталитическим и лимитируется процессом диффузии аналита к поверхности ТУЭ; сопоставлены каталитические и метрологические характеристики ТУЭ, модифицированных наночастицами NiO или комплексами никеля (II). Определено, что на каталитическую активность модификаторов влияют: природа лиганда и растворителя, а также содержание Ni (II) в модифицирующих суспензиях или растворах; изучена возможность селективного определения мочевины в реальных образцах с использованием анионообменной колонки и креатинина в модельных растворах с использованием синтезированых ПМО креатинина;

Практическая ценность работы.

Разработанные бесферментные амперометрические сенсоры на основе толстопленочных электродов, модифицированных соединениями никеля (II), и анионообменной колонки или ПМО креатинина, позволяют ускорить и удешевить определение мочевины и/или креатинина в биологических объектах (сыворотке крови) при диагностике почечной дисфункции по сравнению с используемыми в клинической диагностике методами.

Автор выносит на защиту следующие положения. Результаты исследования влияния условий синтеза наночастиц NiO на их каталитические свойства в электроокислении мочевины и креатинина

Способы получения сенсоров на основе углеродсодержащих чернил или графитэпоксидной композиции с иммобилизованными органическими комплексами Ni (II). Информацию о факторах, влияющих на вольтамперные характеристики модифицированных толстопленочных электродов

Результаты исследования электрохимического поведения катализаторов (наночастиц NiO и органических комплексов никеля (II)), иммобилизованных на поверхности толстопленочных электродов. Информацию о факторах, влияющих на вольтамперные характеристики катализаторов и генерируемый ими аналитический сигнал.

Выбор каталитической системы для электрохимического окисления мочевины и креатинина. Оптимальные условия регистрации максимального каталитического эффекта. Результаты исследования способности полимеров с молекулярными отпечатками креатинина к специфическому связыванию указанного аналита.

Методики определения мочевины и креатинина на разработанных сенсорах.

Апробация работы.

Результаты исследований представлены на Международном конгрессе по аналитическим наукам ICAS-2006 (Москва, Россия, 2006 г.); на 7 Семинаре «Биосенсоры и биоаналитические (^-технологии в анализе окружающей среды и клинических анализах» (Кашадаси, Турция, 2006 г.); на Всероссийской научной конференции «Природные макроциклические соединения и их синтетические аналоги» (Сыктывкар, Республика Коми, 2007 г.); на Научно-практической конференции «Электрохимические методы анализа в контроле и производстве» (Томск, Россия, 2007 г.); на VII Всероссийской конференции по электрохимическим методам анализа с международным участием «ЭМА-2008» (Уфа, Башкортостан, 2008 г.); на третьей всероссийской конференции по наноматериалам «НАНО-2009» (Екатеринбург, Россия, 2009 г); на III Всероссийской конференции с международным участием «Аналитика России» (Краснодар, Россия, 2009 г.)

Основное содержание работы представлено в виде 1 статьи в журнале, рекомендованном ВАК, и тезисов 7 докладов на международных и всероссийских конференциях

Выражаю искреннюю благодарность: научному руководителю д.х.н., профессору Брайниной Х.З.; научному консультанту к.х.н., доценту кафедры аналитической химии Уральского федерального университета имени первого Президента России Б.Н. Ельцина Козициной А.Н.; директору института органического синтеза УрО РАН, зав. лаборатории гетероциклических соединений (ГС), академику РАН Чарушину В.Н.; научному руководителю лаборатории ГС, академику РАН Чупахину О.Н.; сотрудникам лаборатории ГС: д.х.н., в.н.с. Филяковой В.И.; к.х.н., в.н.с. Русинову Г.Л.; к.х.н., н.с. Болтачевой Н.С.; к.х.н., н.с. Вербицкому Е.В; м.н.с. Толщиной С.Г., м.н.с. Игнатенко Н.К.; к.х.н., с.н.с. Ишметовой Р.И.; к.х.н., н.с. Плеханову П.В.; К.Х.Н., с.н.с. ЧижовуД.Л. за предоставление органических комплексов никеля (II) и образцов ПМО креатинина; к.т.н., м.н.с. лаборатории структурного анализа и свойств материалов и наноматериалов при кафедре термообработки и физики металлов Уральского федерального университета имени первого Президента России Б.Н. Ельцина Юровских А.С. за проведение ПЭМ, РЭМ и энергодисперсионных исследований наночастиц NiO; зав. лабораторным отделением ГУЗ СО «Клинико-диагностического центра «Кардиология» г. Екатеринбурга, к.м.н. Ослиной В.П. за предоставление образцов сывороток крови и данных биохимического анализа.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Деденева, Светлана Сергеевна

Выводы

1. Методом обратных микроэмульсий синтезированы наночастицы NiO сферической формы, средний диаметр которых составляет порядка 20 нм. Лучшие вольтамперные характеристики и наиболее выраженная электрокаталитическая активность в электрохимическом окислении мочевины наблюдается при использовании образца наночастиц NiO, синтезированных при 45°С с использованием ЦТАБ в качестве ПАВ. Получена линейная корреляция хроноамперометрического сигнала с концентрацией мочевины ( R=0,9847, I = 0,011><С + 0,012; в случае ТУЭ-Ni0(0,10) и R= 0,9531,1 = 0,929хС + 1,472; в случае ТУЭ-№0(0,50)).

2. Сравнение ТУЭ и ТГЭ показало, что наилучшие результаты определения мочевины наблюдаются при использовании ТУЭ, на поверхность которого капельным способом нанесен органический комплекс Ni (II).

3. Выбраны оптимальные синтетические органические катализаторы на основе фторированных ди- и трикетонов, а также макрогетероциклических систем, модифицированных азагетероциклами: 1,1,1,7,7,7-гексафторгептан-2,4,6-трикетонат диникеля (II) тетрагидрат (И); 4,4,5,5,6,6,7,7,7-нонафтор-1-фенилгептан-1,3-дикетонат никеля (II) (III); [(3,5-диметилпиразол-1-ил)-6-(бензотиазол-2-иламино)-з-тетразинто](ацетилацетонато) никель (II) (V); 4-тетрапиразинпорфиразин никеля (II) (XI) и 2,9,16,23-тетра(4-гептилфенил) тетрапиразинпорфиразин никеля (И) (XII). Найдена оптимальная концентрация никеля (И) на поверхности толстопленочного электрода для выбранных катализаторов (в пересчете на содержание Ni (II)): 8,56 г/л (ДМСО) в случае комплекса II; 14,88 г/л (ДМФА) в случае комплекса III; 2,93 г/л (ДМФА) в случае комлекса V, 2,02 г/л в случае комплекса XI и 0,81 г/л (ДМФА) в случае комплекса XII,

4. Электрокаталитическое окисление мочевины и креатинина происходит через стадию образования каталитически активных оксо-гидроксо-частиц Ni (III), которые являются сильными окислителями. Лимитирующей стадией электрокаталитического окисления указанных аминов является диффузия аналита к рабочей поверхности модифицированного ТУЭ.

5. ТУЭ, модифицированные выбранными органическими комплексами Ni (II), использованы для хроноамперометрического определения мочевины и креатинина. Линейная зависимость аналитического сигнала от концентрации аналита наблюдается в широком интервале концентраций: от 1x10"2 до 1x10"5 М для мочевины и от 1><10"3 до ЗхЮ"5 М для креатинина. В случае модифицированных ТУЭ получены точные и воспроизводимые результаты, а также низкий предел обнаружения (8,7x10"6 М для мочевины и 2,7хЮ"5М для креатинина)

6. Разработан способ применения ПМО креатинина, позволяющий выделить не менее 70% креатинина из модельных растворов в режиме твердофазной экстракции.

7. Разработаны и успешно использованы бесферментные амперометрические сенсоры и методики определения мочевины в сыворотке крови и креатинина в модельных растворах, основанные на электрокаталитическом окислении соответствующих аналитов. Разработанные сенсоры не требуют особых условий хранения, обеспечивают устойчивость сигнала в течение длительного времени, просты и доступны в использовании. Хорошие аналитические и метрологические характеристики ТУЭ, модифицированных органическими комплексами Ni (II), позволяют применять указанные сенсоры и методики вместо используемых в клинической диагностике ферментативных методов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Деденева, Светлана Сергеевна, 2010 год

1. В.Г. Кобл, B.C. Камышников. Клиническая биохимия. / Пособие для врачей-лаборантов. .Изд.: «Беларусь».— 1976. 312 с.

2. В.В. Слепышева, М.Д. Балябина, А.В. Козлов. Методы определения мочевины. // Terra Medica Nova. 2007. Т. 16. № 4 URL http://www.terramedica. spb.ru (дата обращения: 18.01.2010)

3. Schurman S.J. Plasma creatinine results derived from an endpoint modification of the Jaffe method. / S.J. Schurman, Sh.A. Perlman, W. Chamizo. //Pediatr. Nephrol. 1998. V. 12. - p. 414-416

4. А.Я. Любина, JI.П. Ильичева, Т.В. Катасонова, С.А. Петросова. Клинические лабораторные исследования. М.: Медицина. — 1984, 288 с.

5. Lee W.-Y. Sol-gel-derived thick-film conductometric biosensor for urea determination in serum. / W.-Y. Lee, S.-R. Kim, T.-H. Kim, K.Sh. Lee, M.-Ch. Shin, Je-K. Park. // Anal. Chim. Acta. 2000. V. 404. - p. 195-203

6. Lee W.-Y. Microfabricated conductometric urea biosensor based on sol-gel immobilized urease. / W.-Y. Lee, K.Sh. Lee, T.-H. Kim, M.-Ch. Shin, Je-K. Park. // Electroanalysis. 2000. V. 12. № 1. - p. 78-82

7. Streinschaden A. Miniaturized thin film conductometric biosensors with high dynamic range and high sensitivity. / A. Streinschaden, D. Adamovic, G. Jobst, R. Glatz, G. Urban. // Sens. Actuators. В 1997. V. 44. - p. 365-369

8. Walcerz J. Potentiometric enzyme electrode in flow injection system for the determination of urea in human serum samples. / J. Walcerz, S. Gl^b, R. Koncki. // Anal. Chim. Acta 1998. V. 369. - p. 129-137

9. Magalhaes J.M.C.S. Urea potentiometric biosensor based on urease immobilized on chitosan membranes. / J.M.C.S. Magalhaes, A.A.S.C. Machado. // Talanta 1998. V. 47. - p. 183-191

10. Wang J.-Qi. pH-Based potentiometrical flow injection biosensor for urea. / J.-Qi Wang, J.-Ch. Chou, T.-P. Sun, Sh.-K. Hsiung, G.-B. Hsiung. // Sens. Actuators. В 2003. V. 91. - p. 5-10

11. Eggenstein C. Potentiometric biosensor in double matrix membrane technology. / C. Eggenstein, M. Borchardt, Ch. Dumschat, B. Griindig, K. Cammann, M. Knoll, F. Spener, M. Knoll // Biosens. Bioelectronics. 1995. V. 10. - p. 595-600

12. Seki A. Biosensors based on light- addressable potentiometric sensors for urea, penicilline and glucose. / A. Seki, S.-I. Ikeda, I. Kubo, I. Karube. // Anal. Chim. Acta 1998. V. 373. - p. 9-13

13. Stred'ansky M. Amperometric pH-sensing biosensors for urea, penicillin and oxalacetate. / M. Stred'ansky, A. Pizzariello, S.Stred'anska, S. Miertus. // Anal. Chim. Acta 2000. V. 415. - p. 151-157

14. Bertocchi P. Amperometric ammonium ion and urea determination with enzyme-based probes. / P. Bertocchi, D. Compagnone, G. Palleschi. // Biosens. Bioelectronics. 1996. V. 11. №. 1/2. - p. 1-10

15. Osborne M.D. The liquid-liquid micro-interface for the amperometric detection of urea. / M.D. Osborne, H. Girault. // Electroanalysis 1995. V. 7. №8. -p. 714-721

16. Henze G. Determination of the phenylurea herbicidelinuron and its metabolites in environmental samples by HPLC with serial ultraviolet and amperometric detection. / G. Henze, A. Meyer, J. Hausen. // Fresenius J. Anal. Chem. 1993. V. 346. - p. 761-765

17. Vostiar I. Amperometric urea biosensor based on urease and electropolymerized toluidine blue dye as a pH-sensitive redox probe. / I. Vostiar, J. Tkac, E. Sturdik, P. Gemeiner. // Bioelectrochem. 2002. V. 56. -pp.113-115

18. A. Pizzariello. Urea biosensor based on amperometric pH-sensing with hematein as a pH-sensitive redox mediator. / A. Pizzariello, M. Stred'ansky, S. Stred'anska, S. Miertus. // Talanta 2001. V. 54. - p. 763-772

19. Yoneyama K. Amperometric sensing system for the detection of urea by a combination of the pH- state method and flow injection analysis. / K. Yoneyama, Yu. Fujino, T. Osaka, I. Satoh. // Sens. Actuators. В 2001. V. 76. -p. 152-157

20. Mizutani F. Voltammeric enzyme sensor for urea using mercaptohydroquinone modified gold electrode as the base transducer. / F. Mizutani, S. Yabuki, Yu. Sato. // Biosens. Bioelectronics. 1997. V. 12. № 4. -p. 321-328

21. Kazanskaya N. FET-based sensors with robust photosensitive polymer membranes for detection of ammonium ions and urea. / N. Kazanskaya, K. Kukhtin, M. Manenkova, N. Reshetilov, L. Yarisheva, O. Arzhakova, A.

22. Volynskii, N. Bakeyev. // Biosens. Bioelectronics. 1996. V. 11. № 3. - p. 253-261

23. Chen J.-Ch. Portable urea biosensor based on the extended-gate field effect transistor. / J.-Ch. Chen, J.-Ch. Chou, T.-P. Sun, Sh.-K. Hsuing. // Sens. Actuators. В 2003. V. 91. - p. 180-186

24. Rebriiev A.V. Enzymatic biosensor based on the ISFET and photopolymeric membrane for the determination of urea. / A.V. Rebriiev, N.F. Starodub. // Electroanalysis 2004. V. 16. № 22. - p. 1891-1895

25. Soldatkin A.P. A novel urea sensitive biosensor with extended dynamic range based on recombinant urease and ISFETs. / A.P. Soldatkin, J. Montoriol, W. Sant, C. Martelet, N. Jaffrezic-Renault. // Biosens. Bioelectronics. 2003. V. 19.-p. 131-135

26. Sant W. Development of chemical field effect transistors for the detection of urea. / W. Sant, M.L. Pourciel, J. Launay, T. Do Conto, A. Martinez, P. Temple-Boyer. // Sens. Actuators. В 2003. V. 95. - p. 309-314

27. Pijanowska D.J. pH-ISFET based urea biosensor. / D.J. Pijanowska, W. Torbicz. // Sens. Actuators. В 1997. V. 44. - p. 370-376

28. Walcerz I. Enzyme biosensors for urea determination based on an ionophore free pH membrane electrode. / I. Walcerz, R. Koncki, E. Leszczynska, S. Glqb. // Anal. Chim. Acta 1995. V. 315. - p. 289-296

29. Kanungo M. Studies on polymerization of aniline in the presence of sodium dodecyl sulfate and its application in sensing urea. / M. Kanungo, A. Kumar, A.Q. Contractor. // J. Electroanal. Chem. 2002. V. 528. - p. 46-56

30. Osaka T. High-sensitivity urea sensor based on the composite film of electroinactive polypyrrole with polyion complex. / T. Osaka, Sh. Komaba, M. Seyama, K. Tanabe. // Sens. Actuators. В 1996. V. 35-36. - p. 463-469

31. Jimenez C. Use of photopolymerizable membranes based on polyacrylamide hydrogels for enzymatic microsensor constraction. / C. Jimenez, J. Bartrol, N.F. de Rooij, M. Koudelka-Hep. // Anal. Chim. Acta 1997. V. 351. - p. 169-176

32. Komaba Sh. Potentiometric biosensor for urea based on electropolymerized elecrtoinactive polypyrrole. / Sh. Komaba, M. Seyama, T. Momma, T. Osaka. // Electrochim. Acta 1997. V. 42. № 3. - p. 383-388

33. Adeloju S.B. Pulsed-amperometric detection of urea in blood samples on a conducting polypyrrole-urease biosensor. / S.B. Adeloju, S.J. Shaw, G.G. Wallace. // Anal. Chim. Acta 1997. V. 341. - p. 155-160

34. Tinkilic N. Glucose and urea biosensors based on all solid-state PVC-NH2 membrane electrodes. / N. Tinkilic, O. Cubuk, I. Isildak. // Anal. Chim. Acta -2002. V. 452. p. 29-34

35. Hamlaoui M.L. Development of urea biosensor based on a polymeric membrane including zeolite. / M.L. Hamlaoui, K. Reybier, M. Marrakchi, N. Jaffrezic-Renault, C. Martelet, R. Kherrat, A. Walcarius. // Anal. Chim. Acta -2002. V. 466. p. 39-45

36. Schneider J. Hydrogel matrix for three enzyme entrapment in creatine/creatinine amperometric biosensing. / J. Schneider, B. Griindig, R. Renneberg, K. Camman, M.B. Madaras, R.P. Buck, K.-D. Vorlop. // Anal. Chim. Acta 1996. V. 325. - p. 161-167

37. Erlenkotter A. Biosensors and flow-through system for the determination of creatinine in hemodialysate. / A. Erlenkotter, M. Fobker, G.-Ch. Chemnitius. // Anal. Bioanal. Chem. 2002. V. 372. - p. 284-292

38. Walsh D.A. Comparison of electrochemical, electrophoretic and spectrophotometric methods for creatinine determination in biological fluids. / D.A. Walsh, E. Dempsey. // Anal. Chim. Acta 2002. V. 459. - p. 187-198

39. Shih Y.-T. A creatinine deiminase modified polyaniline electrode for creatinine analysis. / Y.-T. Shih, H.-J. Huang. // Anal. Chim. Acta 1999. V. 392.-p. 143-150

40. Madaras M.B. Microfabricated amperometric creatine and creatinine biosensors. / M.B. Madaras, I.C. Popescu, S. Ufer, R.B. Buck. // Anal. Chim. Acta 1996. V. 319. - p. 335-345

41. Kim E.J. Disposable creatinine sensor based on thick-film hydrogen peroxide electrode system. / E.J. Kim, T. Haruyama, Ya. Yanagida, E. Kobatake, M. Aizawa. // Anal. Chim. Acta 1999. V. 394. - p. 225-231

42. Khan G.F. A highly sensitive amperometric creatinine sensor. / G.F. Khan, W. Wernet. //Anal. Chim. Acta 1997. V. 351. - p. 151-158

43. Яковлева Г.Е. Ферменты в клинической биохимии.—Новосибирск: «Вектор-Бест», 2005. — 44 с.

44. Sirko A. Plant ureases: Roles and regulations. / A. Sirko, R. Brodzik// Acta Biochim. Polonica. 2000. V. 47. № 4. - p. 1189-1195

45. Mobley H.L.T. Molecular biology of microbial ureases. / H.L.T. Mobley, M.D. Island, R.P. Hausinger // Microbiol. Rev. 1995. V. 59. № 3. -p. 451480

46. Beuth B. Crystal structure of creatininase from Pseudomonas putida: a novel fold and a case of convergent evolution. / B. Beuth, K. Niefind, D. Schomburg. // J. Mol. Biol. 2003. V. 332. № 1. - p. 287-301

47. Casella I.G. Amperometric determination of underivatized amino acids at a nickel-modified gold electrode by anion-exchange chromatography. / I.G.

48. Casella, M. Gatta, T.R.I. Cataldi. // J. Chromatogr. A 2000. V. 878. - p. 5767

49. Fleischmann M. The oxidation of organic compounds at a nickel anode in alkaline solution. / M. Fleischmann, K. Korinek, D. Pletcher. // J. Electroanal. Chem. 1971. V. 31.-p. 39-49

50. El-Shafei A.A. Electrocatalytic oxidation of methanol at a nickel hydroxide/glassy carbon modified electrode in alkaline medium. / A.A. El-Shafei. // J. Electroanal. Chem. 1999. V. 471. - p. 89-95

51. Давлетшина JI.H. Анодная вольтамперометрия биологически активных веществ на электродах, модифицированных гексацианометаллатами: Автореф. дис. канд. хим. наук.— Казань, 2006. — 26 с.

52. Ciszewski A. Kinetics of electrocatalytic oxidation of formaldehyde on a nickel porphyrin-based glassy carbon electrode. / A. Ciszewski, G. Milczarek // J. Electroanal. Chem. 1999. V. 469. - p. 18-26

53. Ferrer S.J. Amperometric detection of urea in aqueous solution by poly (Ni-cyclam) film-modified glassy carbon electrode. / S.J. Ferrer, S.G. Granados, F. Bedioui, A.A. Ordaz. // Electroanalysis 2003. V. 15. № 1. - p. 70-73

54. Liu Y. Nonenzymatic glucose sensor based on renewable electrospun Ni nanoparticle-loaded carbon nanofiber paste electrode. / Y. Liu, H. Teng, H. Hou, T You. // Biosens. Bioelectron. 2009. V. 24. - p. 3329-3334

55. Noorbakhsh A. Amperometric detection of hydrogen peroxide at nano-nickel oxide/thionine and celestine blue nanocomposite-modified glassy carbon electrodes. / A. Noorbakhsh, A. Salimi // Electrochim. Acta 2009. V. 54. - p. 6312-6321

56. Salimi A. Direct electrochemistry and electrocatalytic activity of catalase immobilized onto electrodeposited nano-scale islands of nickel oxide. // A.

57. Salimi, E. Sharifi, A. Noorbakhsh, S. Soltanian // Biophys. Chem. 2007. V. 125.-p. 540-548

58. Salimi A. Immobilization of glucose oxidase on electrodeposited nickel oxide nanoparticles: Direct electron transfer and electrocatalytic activity. / A. Salimi, E. Sharifi, A. Noorbakhsh, S. Soltanian // Biosens. Bioelectron. -2007. V. 22.-p. 3146-3153

59. Дмитриенко С.Г. Использование полимеров с молекулярными отпечатками в процессах разделения и концентрирования органических соединений. / С.Г. Дмитриенко, В.В. Ирха, А.Ю. Кузнецова, Ю.А. Золотов. //Журн. анал. хим. 2004. Т. 59. № 9. - с. 902-912

60. Kugimiya A. Synthesis of castasterone selective polymers prepared by molecular imprinting. / A. Kugimiya, J. Matsui, H. Abe, M. Aburatani, T. Takeuchi. // Anal. Chim. Acta 1998. V. 365. - p. 75-79

61. Leung M.K.P. Molecular sensing of 3-chloro-1.2-propanediol by molecular imprinting. / M.K.P. Leung, B.K.W. Chiu, M.H.W. Lam. // Anal. Chim. Acta -2003. V. 491.-p. 15-25

62. Гендриксон О.Д. Молекулярно импринтированные полимеры и их применение в биохимическом анализе. / О.Д. Гендриксон, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев. // Успехи биол. хим. 2006. Т. 46. - с. 149-192

63. Г.В. Лисичкин. Материалы с молекулярными отпечатками: синтез, свойства, применение. / Г.В. Лисичкин, Ю.А. Крутяков // Успехи химии -2006. Т. 75. № 10. с. 998-1017

64. Andersson L.I. Molecular imprinting: developments and applications in the analytical chemistry field. // J. Chromatogr. В 2000. V. 745. - p. 3-13

65. Martin-Esteban A. Molecularly imprinted polymers: new molecular recognition materials for selective solid-phase extraction of organic compounds. //Fresenius J. Anal. Chem. 2001. V. 370. - p. 795-802

66. Yan H. Characteristic and synthetic approach of molecularly imprinted polymer. / H. Yan, K.H. Row. // Int. J. Mol. Sci. 2006. V. 7. - p. 155-178

67. Holthoff E.L. Molecularly templated materials in chemical sensing. / E.L. Holthoff, F.V. Bright. // Anal. Chim. Acta 2007. V. 594. - p. 147-161

68. Poole C.F. New trends in solid-phase extraction. / C.F. Poole. // Trends in Anal. Chem. 2003. V. 22. № 6. - p. 362-373

69. Fuchiwaki Yu. 6-Chloro-N,N-diethyl-l,3,5-triazine-2,4-diamine (CAT) sensor based on biomimetic recognition utilizing a molecularly imprinted artificial receptor. / Yu. Fuchiwaki, A. Shimizu, I. Kubo. // Anal. Sci. 2007. V. 23. № l.-p. 49-53

70. Lai E.P.C. Molecularly imprinted solid phase extraction for rapid screening of cephalexin in human plasma and serum. / E.P.C. Lai, S.G. Wu. // Anal. Chim. Acta 2003. V. 481. - p. 165-174

71. Shiigi H. Highly selective molecularly imprinted overoxidized polypyrrole colloids: one-step preparation technique. / H. Shiigi, M. Kishimoto, H. Yakabe, Bh. Deore, T. Nagaoka. // Anal. Sci. 2002. V. 18. № 1. - p. 41-44

72. Lele B.S. Molecularly imprinted polymer mimics of chymotrypsin 1. Cooperative effects and substrate specificity. / B.S. Lele, M.G. Kulkarni, R.A. Mashelkar// React. Functional Polymers. 1999. V. 39. - p. 37-52

73. Meng Z. Enhancement of the catalytic activity of an artificial phosphotriesterase using a molecular imprinting technique. / Z. Meng, T. Yamazaki, K. Sode. // Biotechnol. Lett. 2003. V. 25. - p. 1075-1080

74. Piletsky S.A. Electrochemical sensors based. on molecularly imprinted polymers. / S.A. Piletsky, A.P.F. Turner. // Electroanalysis 2002. V. 14. № 5.-p. 317-323

75. Piletsky S.A. Molecularly imprinted polymers — tyrosinase mimics. / S.A. Piletsky, I.A. Nicholls, M.I. Rozhko, T.A. Sergeyeva, E.V. Piletska, A.V. El'skaya, I. Karube. // Укр. 6ioxiM. журн. 2005. Т. 77. № 6. - с. 63-67

76. Haupt К. Molecularly imprinted polymers: The next generation. / K. Haupt. // Anal. Chem. 2003. p. 377A-383A

77. Tan Y. A piezoelectric biomimetic sensor for aminopyrine with a molecularly j imprinted polymer coating. / Y. Tan, L. Nie, Shouzhuo Yao. //Analyst. 2001.1. V. 126. p. 664-668

78. Rao T. Prasada. Metal ion-imprinted polymers — Novel materials for selective recognition of inorganics. / T. Prasada Rao, R. Kala, S. Daniel. // Anal. Chim. Acta. 2006. V. 578. - p. 105-116

79. Chen J.-C. An enzymeless electrochemical sensor for the selective determination of creatinine in human urine. / J.-C. Chen, A.S. Kumar, H.-H. Chung, S.-H. Chien, M.-C. Kuo, J.-M. Zen // Sens. Actuators. В 2006. V. 115.-p. 473-480

80. Lakshmi Dh. Creatinine sensor based on a molecularly imprinted polymer' modified hanging mercury drop electrode. / Dh. Lakshmi, Bh. Bali Prasad, P.

81. Sindhu Sharma. // Talanta 2006. V. 70. - p. 272-280

82. Craw J.S. The structure and intermolecular interactions of a creatinine designed complex, studied by ab initio methods. / J.S. Craw, M.D. Cooper, I.H. Hillier. // J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1997. № 2. - p. 869-871

83. Bell T.W. Detection of creatinine by designed receptor. / T.W. Bell, Z. Hou, Y. Luo, M.G.B. Drew, E. Chapoteau, B.P. Czech, A. Kumar. // Science -1995. V. 269.-p. 671-674

84. Subad M. Synthetic creatinine receptor: imprinting of a Lewis acidic zinc(II)cyclen binding site to shape its molecular recognition selectivity. / M. Subad, A.S. Borovik, B. Konig. // J. Amer. Chem. Soc. 2004. V. 126. - p. 3185-3190

85. Ahmad T. Magnetic and electrochemical properties of nickel oxide nanoparticles obtained by the reverse-micellar route. / T. Ahmad, K.V.

86. Ramanujachary, S.E. Lofland, A.K. Ganguli // Solid State Sci. 2006. V. 8. -p. 425—430

87. Алфимов M.B. Имитационное моделирование процессов самоорганизации наночастиц / M.B. Алфимов, P.M. Кадушников, Н.А. Штуркин, В.М. Алиевский, П.В. Лебедев-Степанов // Российские нанотехнологии 2006. Т. 1. № 1-2. - с. 127-133.

88. Осетрова Н.В. Анодное окисление мочевины в нейтральных растворах / Н.В.Осетрова, A.M. Скундин // Электрохимия 1994. Т. 30 № 10. - с. 1257-1259