Электрохимические ДНК-сенсоры на основе электрополимеризованных материалов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Порфирьева, Анна Вениаминовна

• Порфирьева, Анна Вениаминовна
• кандидат химических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат химических наук Порфирьева, Анна Вениаминовна

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЕ ДНК-СЕНСОРЫ (Литературный обзор).

1.1. Особенности строения нуклеиновых кислот, аптамеров и аутоиммунных антител к ДНК как элементов биосенсоров

1.1.1. Особенности строения нуклеиновых кислот.

1.1.2. Аптамеры.

1.1.3. Аутоиммунные антитела к ДНК.

1.2. Электрохимические ДНК-сенсоры.

1.2.1. Общая характеристика электрохимических ДНК-сенсоров.

1.2.2. Способы электрохимической регистрации ДНК и взаимодействий ДНК с низкомолекулярными соединениями.

1.2.2.1 "Прямая" электрохимия ДНК.

1.2.2.2. Регистрация сигнала ДНК с помощью электрохимически активных меток и маркеров.

1.2.3. Определение антител к ДНК.

1.3. Применение электрополимеризованных материалов в ДНК-сенсорах.

1.3.1. Получение и свойства полианилина.

1.3.2. Полипиррол в составе ДНК-сенсоров.

1.3.3. Полифенотиазины в составе электрохимических сенсоров.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Материалы и реагенты.

2.2. Приборы и оборудование.

2.3. Методы исследования.

2.3.1. Получение биочувствительного слоя биосенсоров.

2.3.1.1. Электрополимеризация.

2.3.1.2. Иммобилизация ДНК, аптамеров и олигомеров.

2.3.2. Измерение сигнала биосенсоров.

3. ДНК-СЕНСОРЫ НА ОСНОВЕ ЗОЛОТЫХ ЭЛЕКТРОДОВ, МОДИФИЦИРОВАННЫХ СОПОЛИМЕРОМ ТИР АМИНА И о-АМИНОФЕНОЛА

3.1. Электрохимическое поведение МЗ на золотых электродах.

3.2. Использование в качестве матрицы сополимеров тирамина и о-аминофенола.

4. АПТАСЕНСОРЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОМБИНА НА ОСНОВЕ

ЭЛЕКТРОПОЛИМЕРИЗОВАННЫХ МАТЕРИАЛОВ

4.1. Аптасенсоры на основе полимерных форм фенотиазиновых красителей

4.1.1. Определение тромбина методом пьезокварцевого микровзвешивания.

4.1.2. Потенциометрические аптасенсоры на тромбин.

4.2. Аптасенсор на основе полианилина.

4.2.1. Потенциометрический аптасенсор на основе полианилина.

4.2.2. Импедиметрические измерения.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АУТОИММУННЫХ АНТИТЕЛ К ДНК.

5.1. ДНК-сенсор на основе полианилина.

5.1.1. Потенциометрические измерения.

5.1.2. Импедиметрические измерения.

5.2. ДНК-сенсоры на основе электродов, модифицированных полифенотиазинами.

5.2.1. Потенциометрические ДНК-сенсоры.

5.2.2. Импедиметрические измерения.

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ БИБЛИОГРАФИЧЕСКИХ ИСТОЧНИКОВ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота; МЗ - метиленовый зеленый; MC - метиленовый синий; ПАНИ - полианилин поли(МЗ) - полимерная форма метиленового зеленого; поли(МС) - полимерная форма метиленового синего;

РНК - рибонуклеиновая кислота;

С - концентрация, нМ, мкМ и мМ;

Сит - предел обнаружения, М или мг/л;

СРЕ - постояннофазовый элемент (constant phase element);

Е - потенциал или сигнал ДНК-сенсора, мВ;

Ret - сопротивление переноса заряда; i - катодный или анодный ток, мкА.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Электрохимические ДНК-сенсоры на основе электрополимеризованных материалов»

Актуальность проблемы. Одним из актуальных направлений развития современной биоаналитической химии является создание ДНК-сенсоров, предназначенных для определения комплементарных нуклеотидных последовательностей, а также специфических белков и низкомолекулярных соединений биологического значения. Актуальность таких исследований обусловлена как высокой потребностью в ДНК-сенсорах, связанной с решением задач медицинской диагностики, экотоксикологии, фармакологии и молекулярной биологии, так и с уникальностью характеристик самих нуклеиновых кислот как природных молекулярных рецепторов с широкой пластичностью и специфичностью распознавания. ДНК-сенсоры уже находят практическое применение в решении реальных задач диагностики патогенных микроорганизмов и обнаружении дисфункций организма, связанных с нарушениями иммунитета. ДНК рассматриваются как универсальные шаблоны и составные элементы в синтезе молекулярных электронных устройств - проводящих нано-проволок, молекулярных логических элементов и транзисторов.

Благодаря высокой концентрации заряда и значительному числу активных функциональных групп нуклеиновые кислоты обеспечивают многоточечное нековалентное связывание широкого круга определяемых соединений. Поскольку главными условиями эффективности распознавания являются стерическая доступность функциональных групп ДНК и сохранение ее нативной структуры в составе биосенсоров, при конструировании ДНК-сенсоров особое внимание уделяется способам включения ДНК в состав биочувствительного слоя.

В связи с этим в последние годы большое внимание привлекают электрополимери-зуемые материалы, получаемые in situ непосредственно на поверхности преобразователя сигнала. К их достоинствам относятся простота получения, контроль состава и характеристик непосредственно на стадии синтеза, высокая адгезия к материалу электрода и возможности модификации характеристик, таких как заряд и электрохимическая активность, в зависимости от назначения и природы биологического компонента в составе биосенсора.

В настоящее время электрополимеризованные материалы начинают играть все возрастающую роль в развитии способов миниатюризации сенсоров, в том числе, при создании батарей сенсоров и при переходе к наноразмерным центрам распознавания молекулярных устройств. Помимо обеспечения связывания биологического компонента, они непосредственно участвуют в генерировании аналитического сигнала благодаря своим элек-трохромным свойствам, редокс-активности и способности к удерживанию низкомолекулярных компонентов - допантов.

Несмотря на быстрое развитие данного направления биосенсорики, применительно к ДНК-сенсорам примеров использования электрополимеризованных материалов относительно немного. Большинство из них связано с использованием полипиррола, который выполняет функцию матрицы для иммобилизации ДНК-зондов и свои особые свойства (электропроводность, удерживание допирующих компонентов) практически не проявляет. Применительно к полианилину ДНК используют как матрицу для получения линейных полимеров регулярного строения, другие электрополимеризованные материалы в составе ДНК-сенсоров практически не описаны.

Вышесказанное указывает на актуальность исследования, направленного на наиболее полную реализацию преимуществ, создаваемых электрополимеризованными материалами в составе ДНК-сенсоров как матрицы для иммобилизации и способа получения аналитического сигнала в отношении высоко- и низкомолекулярных соединений.

В этой связи, целью данной работы явилось создание электрохимических ДНК-сенсоров, предназначенных для решения задач клинической диагностики, в основе которых лежит взаимодействие ДНК с полиэлектролитными электрохимически активными материалами, получаемыми путем электрополимеризации.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- изучить условия электрополимеризации фенотиазиновых красителей и анилина на поверхности золотых и стеклоуглеродных электродов в зависимости от назначения ДНК-сенсора и способа генерирования аналитического сигнала;

- разработать новые способы нанесения биологических компонентов - ДНК-зондов, на-тивной и денатурированной ДНК и аптамеров на а-тромбин - поверх электрополимери-зованных материалов с учетом требований чувствительности регистрации взаимодействий с определяемыми соединениями и формата измерения аналитического сигнала;

- изучить возможности регистрации гибридизации комплементарных ДНК-зонду олиго-нуклеотидных последовательностей с помощью диффузионно свободных маркеров на поверхности сенсоров, модифицированных электрополимеризованными материалами;

- провести сравнительную характеристику пьезометрического и потенциометрического определения а-тромбина с помощью аптасенсоров на основе комплексов аптамеров с электрополимеризованными анилином, метиленовым синим и метиленовым зеленым;

- разработать новый способ обнаружения аутоиммунных антител к ДНК в сыворотке крови больных аутоиммунными заболеваниями с помощью потенциометрических сенсоров на основе полиэлектролитных комплексов ДНК с электрополимеризованными материалами и изучить механизм формирования сигнала с привлечением данных импедиметри-ческих исследований переноса заряда на границе модифицирующий слой - электрод.

Научная новизна работы заключается в том, что:

- обосновано использование в составе ДНК-сенсоров продуктов электрополимеризации фенотиазиновых красителей (метиленового синего и метиленового зеленого) и анилина, обеспечивающих улучшенные характеристики иммобилизации и аналитического сигнала для пьезометрического и потенциометрического определения взаимодействия ДНК (аптамер) - белок;

- показана возможность использования ДНК-сенсора на основе планарных золотых электродов, модифицированных сополимером тирамина и о-аминофенола, для регистрации комплементарных олигонуклеотидных последовательностей по сигналу диффузионно свободных маркеров.

- предложены и реализованы на примере определения а-тромбина и аутоиммунных антител к ДНК различной этиологии новые способы регистрации взаимодействий ДНК-белок, основанные на измерении потенциала ДНК-сенсора до и после его контакта с определяемыми компонентами;

- обоснован механизм формирования сигнала потенциометрического ДНК-сенсора на основе полиэлектролитных комплексов ДНК - полианилин (полифенотиазиновый краситель), связанный с изменением редокс-активности и допирующей способности полимеров в зависимости от рН и присутствия специфически связывающегося белка в составе поверхностного слоя;

- разработаны пьезометрические сенсоры для определения а-тромбина с улучшенными характеристиками связывания и чувствительности определения, достигнутыми за счет использования электрополимеризованных полифенотиазинов в качестве матрицы биологических компонентов.

Практическая значимость работы состоит в том, что:

- предложены простые и удобные в использовании способы модификации золотых и стеклоуглеродных электродов полиэлектролитными комплексами ДНК (аптамер) - полианилин (полифенотиазиновый краситель), обеспечивающие возможность регистрации специфических взаимодействий с участием ДНК и высокочувствительного определения биологических компонентов диагностического значения;

- разработаны методики тестирования сывороток крови для установления присутствия в них аутоиммунных антител к ДНК, предложены диагностические критерии сигнала

ДНК-сенсоров для больных аутоиммунным тиреоидитом и системной красной волчанкой;

- предложен новый формат изготовления пленочных золотых одноразовых сенсоров на основе пластин компакт-диска для записи и разборная ячейка для их использования.

На защиту выносятся:

- результаты изучения электрохимического поведения фенотиазиновых красителей и анилина на различных электродах и выводы о влиянии условий электрополимеризации на генерирование аналитического сигнала и возможность регистрации гибридизации комплементарных олигонуклеотидных последовательностей и специфических взаимодействий ДНК - белок (аптамер - белок);

- оценка влияния природы маркеров на сигнал ДНК-сенсора на основе планарных золотых электродов, модифицированных ДНК-зондами и сополимером тирамина и о-аминофенола и вывод о возможности регистрации взаимодействий с участием ДНК и олигонуклеотидов по электрохимическим характеристикам маркеров;

- результаты пьезометрического и импедиметрического изучения аптасенсоров на основе электродов, модифицированных полифенотиазинами или полианилином и аптамером на а-тромбин и выводы о влиянии природы матрицы на чувствительность определения а-тромбина и селективность сигнала в присутствии сывороточного альбумина человека;

- новый способ регистрации аффинных взаимодействий ДНК (аптамер) - белок по изменению потенциала стеклоуглеродного электрода, модифицированного полиэлектролитным комплексом ДНК - полимер, до и после его контакта с белком, измеренного при различных рН и выводы о возможном механизме формирования сигнала для различных электрополимеризованных материалов.

Апробация работы. Результаты исследований докладывались на 17 Международном симпозиуме по биоэлектрохимии и биоэнергетике (Флоренция, 2003), Международном симпозиуме "Новые тенденции развития биосенсоров на основе нуклеиновых кислот"

Флоренция, 2003), Всероссийской конференции с международным участием "Электро-аналитика-2005" (Екатеринбург, 2005), V научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра КГУ «Материалы и технологии XXI века» (Казань, 2005), Итоговой научной конференции Казанского государственного университета (Казань, 2005); Международной конференции "Химия, химическая технология и биотехнология" (Томск, 2006), Международном конгрессе по аналитической химии 1СА8-2006 (Москва, 2006), VI Республиканской школе студентов и аспирантов "Жить в XXI веке" (Казань, 2006), XVIII Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Москва, 2007), II Всероссийской конференции с международным участием "Аналитика России" (Краснодар - Туапсе, 2007), III Международном симпозиуме "Биосенсоры в обеспечении пищевой безопасности и экологическом мониторинге" (Фес, 2007).

Основные результаты изложены в 3 статьях и 10 тезисах докладов. Получено положительное решение по заявке на патент РФ.

Вклад автора в работы, выполненные в соавторстве и включенные в диссертацию, состоял в постановке и решении основных задач, проведении основных экспериментальных исследований в области создания ДНК-сенсоров и изучении их характеристик, интерпретации, анализе и систематизации полученных результатов.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 167 страницах машинописного текста, включает 69 рисунков и 8 таблиц. Состоит из введения, 5 глав, выводов и списка использованных библиографических источников, включающего 203 ссылки на отечественные и зарубежные работы.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Порфирьева, Анна Вениаминовна

1. Модификация золотых и стеклоуглеродных электродов электрополимеризованными ма териалами улучшает условия иммобилизации ДНК, олигонуклеотидов и аптамеров и позво ляет получить потенциометрический и пьезометрический сигнал об их взаимодействии со специфически связывающимися белками (антитела к ДНК, а-тромбин) или комплементар ными олигонуклеотидами.2. Иммобилизация ДНК-зонда на тонкопленочных золотых электродах, покрытых сополи мером тирамина и о-аминофенола, позволяет проводить определение до nxlO"1 моль ком плементарных олигонуклеотидов по току окисления маркера - гидрохинона, скорость пере носа которого меняется в зависимости от состава поверхностного слоя и комплементарно сти зонда мишени.3. Разработаны аптасенсоры на а-тромбин на основе пьезокварцевых резонаторов с золо тыми электродами, модифицированными полимерными формами метиленового синего и метиленового зеленого, авидином и биотинированным аптамером на а-тромбин, позво ляющие определять до 5 нМ а-тромбина. Применение полимерных матриц позволило сни зить предел обнаружения и повысить селективность сигнала в присутствии неспецифиче ских белков (на примере альбумина) по сравнению с традиционными методами иммобили зации.4. Показана возможность потенциометрического и импедиметрического определения а тромбина на стеклоуглеродных электродах, модифицированных полианилином и по лифенотиазинами, по влиянию определяемого белка на рН-зависимость потенциала поли мерного слоя и его проницаемость для носителей заряда.4. Предложен новый способ детектирования аутоиммунных антител к ДНК в сыворотке крови больных различной этиологии по изменению электрохимических характеристик по лиэлектролитных комплексов ДНК с электрополимеризованными материалами (потенциал сенсора, сопротивление переноса заряда и емкость поверхностного слоя), измеряемых до и после контакта биосенсора с тестируемой сывороткой. В случае полианилина изменение потенциала обусловлено влиянием процессов допирования на электрохимические свойства полимера при изменении рН раствора. Для полифенотиазинов сигнал биосенсора связан с влиянием белков на рН-зависимость окислительно-восстановительного потенциала поли мерных форм красителей. Разработаны диагностические критерии для антител к ДНК в сы воротках крови больных системной красной волчанкой и аутоиммунным тиреоидитом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Порфирьева, Анна Вениаминовна, 2008 год

1. Scheller, F.W. Research and development in biosensors Text. / F.W.Scheller, U.Wollenberger, A.Warsinke, F.Lisdat // Current Opinion in Biotechnology.- 2001.- V.12.-P.35-40.

2. Евтюгин, Г.А. Основы биосенсорики Текст. / Г.А.Евтгогин, Г.К.Будников, Е.Е.Стойкова // Казань: Казанский государственный университет им.В.И. Ульянова - Ленина- 2007.- 82 с.

3. Овчинников, Ю.А. Основы биоорганической химии Текст. / Ю.А. Овчинников // М.: Просвещение.- 1987.- 815.

4. Tombelli, S. Analytical applications of aptamers Text. / S.Tombelli, M.Minunni, M.Mascini // Biosensors and Bioelectronics.- 2005.- V.20.- P.2424-2434.

5. Neidle, S. Nucleic acid structure and recognition Text. / S.Neidle // Oxford: Oxford University Press.- 2002.- 272 p.

6. Кольман, Я. Наглядная биохимия Текст. /Я.Кольман, К.-Г.Рем //М.: Мир.- 2000.- 469 с.

7. Франк-Каменецкий, М.Д. Век ДНК Текст. / М.Д.Франк-Каменецкий // М.: Книжный дом университет.- 2004.- 240 с.

8. Евдокимов, Ю.М. Нуклеиновые кислоты как основа для создания биосенсоров Текст. / Ю.М.Евдокимов, Г.Скуридин, В.И.Салянов, А.С.Семейкин, М.Палумбо // Молекулярная биология.- 1989.- Т.23, № 6.- 1581-1588.

9. Elington A. D. Selection in vitro of an RNA enzyme that specifically cleaves single-stranded DNA Text. / A. D. Elington, J. Szostak//Nature.- 1990,- V.344.- P. 467-468.

10. Deisingh, A.K. Aptamer-based biosensors: biomedical applications Text. / A.K. Deisingh // HEP.- 2006.- V.173.- P.341-357.

11. Tasset, D.M. Oligonucleotide inhibitors of human thrombin that bind distinct epitopes Text. / D.M.Tasset, M.F.Kubik, W.Steiner // J. Mol. Biol.- 1997.- V.272.- P.688-698.

12. Stubbs, M.T. The clot thickens: clues provided by thrombin structure Text. / M.T.Stubbs, W.Bode //Trends Biochem. Sci.- 1995.- V.20.- P.23-28.

13. Kubik, M.F. High-affinity RNA ligands to human a-thrombin Text. / M.F.Kubik, A.W. Stephens, D.Schneider, RA.Marlar, D.Tasset//Nucl. Acids Res.- 1994.- V.22.- P.2619-2626.

14. Bock, L.C. Selection of single - stranded DNA molecules that bind and inhibit human thrombin Text. / L.C.Bock, L.C.Griffin, J.A.Latham, E.H.Vermass, J.J.Toole //Nature.- 1992.-V.355.-P.564-566.

15. Tsiang, M. Selection of a suppressor mutation that restores affinity of an oligonucleotide inhibitor for thrombin using in vitro genetics Text. / M.Tsiang, C.S.Griffin, K.E.Dunn, L.K.Leung //J.Biol. Chem.- 1995.- V.270.-P. 19370-19376.

16. Macaya, R.F. Thrombin-binding DNA aptamer forms a unimolecular quadruplex structure in solution Text. / R.F.Macaya, P.Schultze, F.W.Smith, J.A.Roe, J.Feigon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1993.- V.90.- P. 3745-3749.

17. Wang, K.Y. A tertiary structure of a DNA aptamer which binds to and inhibits thrombin determines activity Text. / K.Y.Wang, S.H.Krawczyx, N.Bischofberger, S.Swaminathan, P.H.Bolton // Biochemistry.- 1993.- V.32.- P. 11285-11292.

18. Wang, K.Y. A DNA aptamer which binds to and inhibits thrombin exhibits a new structural motif for DNA Text. / K.Y.Wang, S.McCurdy, R.G.Shea, S.Swaminathan, P.H.Bolton // Biochemistry,- 1993.-V.32.- P.1899-1904.

19. Bigazzi, P.E. Autoimmunity caused by xenobiotics Text. / P.E.Bigazzi // Toxicology.- 1997.-V.119.-P.1-21.

20. Ройт, А. Основы иммунологии/А.Ройт//М.: Мир.- 1991.- 327c.

21. Vonherrath, M.G. Virus-induced autoimmune disease. Text. / M.G.Vonherrath, M.B.A.01dstone // Current Opinion in Immunology - 1996.- V.8.- P.878-885.

22. Невинский, Г.А. Природные каталитически активные антитела (абзимы) в норме и при патологии (обзор) Текст. / Г.А.Невинский, Т.Г.Канышкова, В.Н.Бунева // Биохимия.-Т.65,№11.-С.1473-1487.

23. Напп, В.Н. Antibodies to DNA Text. / B.H.Hann // The New England Journal of Medicine.- 1998.-V.338.-P.1359-1368.

24. Cerchia, L. Nucleic acid aptamers in cancer medicine Text. / L.Cerchia, J.Hamm, D.Libric, B.Tavitiand, V.Franciscisa // FEBS Letters.- 2002.- V.528.- P.12-16.

25. Keusgen, M. Biosensors: new approaches in drug discovery Text. / M.Keusgen // Naturwis- senschaften.- 2002.- V.89.- P.433-444.

26. Mascini, M. DNA electrochemical biosensors Text. / M.Mascini, I.Palchetti, G.Marrazza // Fresenius J.Anal.Chem.- 2001.- V.369.- P. 15-22.

27. Dai, L. DNA-Sensors Text. / L. Dai // Intelligent macromolecules for smart devices. From material synthesis to device applications. London-Berlin: Springer.- 2004.- P.446-460.

28. Fojta, M. Electrochemical sensors for DNA interactions and damage Text. / M.Fojta // Elec- troanalysis.- 2002.- V.14.- P. 1449-1463.

29. Sun W. Direct electrochemistry of single-stranded DNA on an ionic liquid modified carbon paste electrode Text. / W.Sun, Y.Li, M.Yang, S.Liu, K.Jiao // Electrochem.Commun. 2008.-V.10.-P. 298-301..

30. Wang, J. Amplified label-free electrical detection of DNA hybridization Text. / J.Wang, A.- N.Kawde//Analyst.- 2002.- V.127.- P.383-386.

31. Gooding, J.J. Electrochemical DNA hybridization biosensors. Text. / J.J.Gooding // Electro- analysis.- 2002.- V.14.- P. 1149-1156.

32. Erdem, A. Electrochemical DNA biosensors based on DNA-drug interactions Text. / A.Erdem, M.Ozsoz // Electroanalysis.- 2002.- V.14.- P.965-974.

33. Marrazza, G. Disposable DNA electrochemical biosensors for environmental monitoring Text. / G.Marrazza, I.Chianella, M.Mascini //Anal.Chim.Acta.- 1999.- V.387.- P.297-307.

34. Nakayama, M. DNA sensors using ferrocene-oligonucleotide conjugate Text. / M.Nakayama, T.Ihara, K.Nakano, M.Maeda // Talanta.- 2002.- V.56.- P.857-866.

35. He, F. Detection of P.aeruginosa using nano-structured electrode-separated piezoelectric DNA biosensor Text. / F. He, S. Liu // Talanta -2004.- V.62.- P. 271-277.

36. Yao, G. Molecular-beacon-based array for sensitive DNA analysis Text. / G.Yao, W.Tan // Anal.Biochem.- 2004.- V.33L- P.216-223.

37. Liu, J. PNA-DNA hybridization study using labeled streptavidin by voltammetry and surface plasmon fluorescence spectroscopy Text. / J.Liu, L.Tiefenauer, S.Tian, P.E.Nielsen, W.Knoll // Anal. Chem.- 2006.- V.78.- P. 470-476.

38. J.G.Bruno, J.L.Kiel In vitro selection of DNA aptamers to anthrax spores with electro- chemiluminescence detection Text. / J.G.Bruno, J.L.Kiel // Biosens. Bioelectron.- 1999.- V.14.-P.457-464.

39. Vo-Dinh, T. Biosensors and biochips: advances in biological and medical diagnostics Text. / T.Vo-Dinh, B.Cullum // Fresenius J. Anal. Chem.- 2000.- V.366.- P.540-551.

40. Minunni, M. Biosensors as new analytical tool for detection of genetically modified organ isms (GMOs) Text. / M. Minunni, S. Tombelli, E. Mariotti, M. Mascini // Fresenius J. Anal. Chem.- 2001.- V.369.- P.589-593.

41. Lucarelli, F. Electrochemical DNA biosensor as a screening tool for the detection of toxi cants in water and wastewater samples Text. / F.Lucarelli, I.Palchetti, G.Marazza, M.Macini // Talanta.- 2002.- V.56.- P.949-957.

42. Marazza, G. Detection of human lipoprotein E genotypes by DNA biosensors coupled with PCR Text. / G.Marazza, S.Tombelli, M.Mascini, A.Manzoni // Clin.Chim.Acta.- 2001.- V.307.-P.241-248.

43. Hianik, T. The study of the binding of globular proteins to DNA using mass detection and electrochemical indicator methods Text. / T.Hianik, V.Ostatn, Z.Zajacov // J. Electroanal. Chem.- 2004.- V.564.- P. 19-24.

44. Chang, T. Ultrasensitive electrical detection of protein using nanogap electrodes and nanoparticle-based DNA amplification Text. / T.Chang, C.Tsai, C.Sun, C.Chen, L.Kuo, P.Chen //Biosens.Bioelectron.- 2007.- V.22.- P.3139-3145.

45. Lu, Y. New highly sensitive and selective catalytic DNA biosensors for metal ions Text. / Y. Lu, J. Liu, J. Li, P. J. Bruesehoff, C. M.-B. Pavot, A. K. Brown // Biosens. Bioelectron.-20003.- V.8.- P.529-540.

46. Fojta, M. Electrode potential controlled DNA damage in the presence of copper ions and their complexes Text. / M.Fojta, L.Havran, T.Kubikarova, E.Palecek // Bioelectrochemistry.-2002.- V.56.- P.25-27.

47. Bagni, G. DNA biosensor for rapid detection of genotoxic compounds in soil samples Text. / G. Bagni, S.Hernandez, M.Mascini, E.Sturchio, P.Boccia, S.Marconi // Sensors 5 (2005) 394-410.

48. Rusling, J.F. Sensors for toxicity of chemicals and oxidative stress based on electrochemical catalytic DNA oxidation Text. / J.F.Rusling // Biosens. Bioelectron.- 2004.- V.20.- P. 1022-1028.

49. Tarun, M. Genotoxicity screening using biocatalyst/DNA films and capillary LC-MS/MS Text. / M.Tarun, B.Bajrami, J.F.Rusling // Anal. Chem.- 2006.- V.78.- P.624-627.

50. Wu, S. Electrodeposition of silver-DNA hybrid nanoparticles for electrochemical sensing of hydrogen peroxide and glucose Text. / S.Wu, H.Zhao, H.Ju, C.Shi, J.Zhao // Electrochem. Commun.- 2006.- V.8.- P. 1197-1203.

51. Oliveira-Brett, A.M. Electrochemical oxidation mechanism of guanine and adenine using a glassy carbon microelectrode Text. / A.M.Oliveira-Brett, V.Diculescu, J.A.P.Piedale // Bioelec-trochemistry.- 2002.- V.56.- P.61-62.

52. Meric, B. Indicator-free electrochemical DNA biosensor based on adenine and guanine sig nals Text. / B. Meric, K. Kerman, D. Ozkan, P. Kara, M. Ozsoz // Electroanalysis.- 2002.-V.14.-P.1245-1250.

53. Wang, J. Scanning electrochemical microscopic imaging of surface-confined DNA probes and their hybridization via guanine oxidation Text. / J.Wang, F.Zhou // J.Electroanal. Chem.-2002.-V.537.-P.95-102.

54. Oliveira-Brett, A.M. Voltammetric determination of all DNA nucleotides Text. / A.M. Oliveira-Brett, J.A.P. Piedade, L.A. Silva, V.C. Diculescu // Anal.Biochem.- 2004.- V.332.-P.321-329.

55. Palecek, E. Past, present and future of nucleic acids electrochemistry Text. / E. Palecek // Talanta.- 2002.- V.56.- P.809-819.

56. Pivodi, M.I. Electrochemical genosensor design: immobilisation of oligonucleotides onto transducer surface and detection methods Text. / M.I. Pivodi, A. Merkoci, S. Alegret // Biosens. Bioelectron.- 2000.- V.15.- P.291-303.

57. Wang, J. Indicator-free electrochemical DNA hybridization biosensor Text. / J. Wang, G. Rivas, J.R. Fernandes, J.L.L. Paz, M. Jiang, R. Waymire // Anal.Chim.Acta.- 1998.- V.75.-P. 197-203.

58. Wang, J. Carbon-nanotube-modified glassy carbon electrodes for amplified label-free electrochemical detection of DNA hybridization Text. / J. Wang, A.-N. Kawde, M. Musameh // Analyst.- 2003.- V.128.- P.912-916.

59. Koehne, J. Ultrasensitive label-free DNA analysis using an electronic chip based on carbon nanotube nanoelectrode arrays Text. / J.Koehne, H.Chen, J.Li, A.MCassell, Q. Ye , H.Tee Ng, J. Han, M Meyyappan //Nanotechnology.- 2003.- V.14.- P.1239-1245.

60. Zhu, N. Electrochemical DNA biosensors based on platinum nanoparticles combined carbon nanotubes Text. / N.Zhu, Z.Chang, P.He, Y.Fang // Anal.Chim.Acta.- 2005.- V.545.- P.21-26.

61. Xu, С Electrochemical detection of sequence-specific DNA using a DNA probe labeled with aminoferrocene and chitosan modified electrode immobilized with ssDNA Text. / С Xu, H. Cai, P. He, Y. Fang // Analyst- 2001.- V.126.- P.62-65.

62. Wang, J. Carbon-nanotube-modified electrodes for amplified enzyme-based electrical detection of DNA hybridization Text. / J.Wang, A.-N.Kawde, M.R.Jan // Biosens.Bioelectron.-2004.-V.20.-P.995-1000.

63. Wang, J. Dual enzyme electrochemical coding for detecting DNA hybridization Text. / J. Wang, A.-N. Kawde, M. Musameh, G. Rivas // Analyst.- 2002.- V.127.- P.1279-1282.

64. Carpini, G. Oligonucleotide-modified screen-printed gold electrodes for enzyme-amplified sensing of nucleic acids Text. / G.Carpini, F.Lucarelli, G.Marrazza, M.Mascini // Biosens. Bio-electron.-2004.-V.20.-P. 167-175.

65. Palecek, E. Electrochemical enzyme-linked immunoassay in a DNA hybridization sensor Text. / E. Palecek, R.Kizek, L.Havran, S.Billova, M.Fojta // Anal.Chim.Acta.- 2002.- V.469.-P.73-83.

66. Lai, R.Y. Rapid, sequence-specific detection of unpurified PCR amplicons via a reusable electrochemical sensor Text. / R.Y. Lai, E.T. Lagally, S. Lee, H.T. Soh, K.W. Plaxco, A.J. Hee-ger// Proc. Nath. Acad. Sci.- 2006.- V.103.- P.4017-4021.

67. Radi, A.-E. Reagentless, reusable, ultrasensitive electrochemical molecular beacon aptasen- sor Text. / A.-E.Radi, J.L.A.Sanchez, E.Baldrich, C.K.O'Sullivan // J.Am.Chem.Soc- 2006.-V.128.-P.117-124.

68. Yang, M. Genosensor technology and the detection of interfacial nucleic acid chemistry Text. / M. Yang, M. McGovern, M. Thompson // Anal.Chim.Acta.- 1997.- V.346.- P.259-275.

69. Bardea, A. Amplified electronic transduction of oligonucleotide interactions: novel routes for Tay-Sachs biosensors Text. / A.Bardea, A.Dagan, I.Willner // Anal.Chim.Acta.- 1999.- V.385.-P.33-43.

70. Xie, H. Highly sensitive amperometric detection of genomic DNA in animal tissues Text. / H. Xie, Y.H. Yu, P. Mao, Z. Gao //Nucleic Acids Research.- 2004.- V.326 №2.-P.el- el5. DOI: 10.1093/nar/gnh016.

71. Oliveira-Brett, A.M. Electrochemical detection of in situ adriamycin oxidative damage to DNA Text./ A.M.Oliveira-Brett, M.Vivan, I.M.Fernandez, J.A.P.Piedade // Talanta.- 2002.-V..56.- P. 959-970.

72. Ibrahim, M.S. Voltammetric studies of interaction of nogalamycin antitumor drug with DNA Text. / M.S. Ibrahim // AnaI.Chim.Acta.- 2001.- V.443.- P.63-72.

73. Zhong, J. Sensing phenothiazine drugs at a gold electrode co-modified with DNA and gold nanoparticles Text. / J.Zhong, Z.Qi, H.Dai, C.Fan, G.Li, N.Matsuda // Anal.Sci.- 2003.- V.19.-P.653-657.

74. Kara, P. Electrochemical genosensor for the detection of interaction between methylene blue and DNA Text. / P.Kara, K.Kerman, D.Ozkan, B.Meric, A.Erdem, Z.Ozkan, M.Ozsoz // Elec-trochem.Commun.- 2002.- V.4.- P.705-709.

75. Rohs, R. Methylene Blue binding to DNA with alternating AT base sequence: minor groove binding is favored over intercalation Text. / R.Rohs, H.Sklenar // J. Biomolecular Structure Dynamics.- 2004.- V.21, № 5.- P.699-711.

76. Tani, A. Methylene blue as an electrochemical discriminator of single and double-stranded oligonucleotides immobilised on gold substrates Text. / A. Tani, A.J. Thomson, J.N. Butt // Analyst-2001.-V.126.-P.1756-1759.

77. Gu, J. DNA sensor for recognition of native yeast DNA sequence with methylene blue as an electrochemical hybridization indicator Text. / J. Gu, X. Lu, H. Ju // Electroanalysis.- 2002.-V.14.-P.949-954.

78. Fojta, M. Voltammetric microanalysis of DNA adducts with osmium tetroxide,2,2'bipyridine using a pyrolitic graphite electrode Text. / M. Fojta, L. Havran, R. Kizek, S. Billova // Talanta.-2002.- V.56.- P.867-874.

79. Thorp, H.H. Cutting out the middleman: DNA biosensors based on electrochemical oxidation Text. / H.H. Thorp // Trends in Biotechnol.-1998.- V. 16.- P. 117-121.

80. El-Maali, N.A. Tris(2,2'-bipyridil)dichloro-ruthenium(III) modified carbon paste electrodes for electrocatalytic detection of DNA Text. / N.A. El-Maali, J. Wang // Sensors Actuators B.-2000.-V.76.-P.211-214.

81. Korbut, О. Damage to DNA indicated by an electrically heated DNA-modified carbon paste electrode Text. / 0. Korbut, M. Buckova, P. Tarapcek, J. Labuda, P. Grundler // J.Electroanal. Chem.- 2001.- V.506.- P. 143-148.

82. Yang, Z.-S. Electrochemically induced DNA cleavage by copper-bipyridyl complex Text. / Z.-S.Yang, Y.-L.Wang, Y.-Z.Zhang// Electrochem.Commun.- 2004.- V.6.- P.158-163.

83. Fojt, L. Sensitive determination of oligodeoxynucleotides by anodic adsorptive stripping voltammetry at surface-roughened glassy carbon electrode in the presence of copper Text. / L. Fojt, S.Hason // J.Electroanal.Chem.- 2006.- V.586.- P.136-143.

84. Ostatna, V. Electrochemical responses of thiolated oligodeoxynucleotides in cobalt- containing solutions Text. / V.Ostatna, F.Jelen, T.Hianik, E.Palecek // Electroanalysis.- 2005.-V.17.-P.1413-1420.

85. Berganza, J. DNA microdevice for electrochemical detection of Escherichia coli 0157:H7 molecular markers Text. / J. Berganza, G. Olabarria, R. Garcia, D. Verdoy, A. Rebollo, S. Arana // Biosens.Bioelectron.- 2007.- V.22.- P.2132-2137.

86. Katayama, Y. Bioaffinity sensor to antibodies using DNA modified Au electrode Text. / Y. Katayama, M. Nakayama, H. Irie, K. Nakano, M. Maeda // Chem. Lett.- 1998.- P. 1181-1182.

87. Babkina, S.S. Amperometric DNA biosensor for the determination of autoantibodies using DNA interaction with Pt(II) complex Text. / S.S Babkina, N.A. Ulakhovich, Yu.I. Zyavkina // Anal. Chim. Acta.- 2004.- V.502.- P.23-30.

88. Evtugyn, G. Affinity biosensors based on disposable screen-printed electrodes modified with DNA Text. / G. Evtugyn, A. Mingaleva, H. Budnikov, E. Stoikova, V. Vinter, S. Eremin // Anal. Chim.Acta .- 2003.- V.479.- P. 125-134.

89. Handbook of Organic Conductive Molecules and Polymers. V.2. (Ed. H.S.Nalwa), 1997. J.Wiley & Sons.

90. Erdem, E. The chemical synthesis of conductive polyanilinc doped with dicarboxylic acids Text. / E.Erdem, M. Karakisla, M. Sacak // Eur.Polymer J.- 2004.- V.40.- P.785-791.

91. Malinauskas, A. Self-doped polyanilines Text. / . A. Malinauskas // J. Power Sources.- 2004.-V.126.-P.214-220.

92. Mazeikiene, R. Deposition of polyaniline on glass and platinum by autocatalytic oxidation of aniline with dichromate Text. / R.Mazeikiene, A.Malinauskas // Synthetic Metals.- 2000.-V.108.-P.9-14.

93. MacDiarmid, A. G. Polyaniline: synthesis and characterization of the emeraldine oxidation state by elemental analysis Text. / A.G. MacDiarmid, J.C. Chian, A.F. Richter, N.L.D. Soma-siri, A.J. Epstein // Conducting Polymers.- 1987. - p. 105-120

94. MacDiarmid A. G. Polyanilines: a novel class of conducting polymers Text./ A. G. MacDiarmid, A. J. Epstein // Faraday Discuss. Chem. Soc. 1989. - V.88. - p. 317-332.

95. Genies E.M. Polyaniline: A historical survey Text./ E. M. Genies, A. Bogly, M. Lap- kowsky, С Tsintavis // Synth. Met. 1990. - V.36. - p. 139-182

96. Yang R. Large-area Chromogenics; Materials and Devices for Transmittance ControlText. / R. Yang, С M. Lampert, С G. Granqvist // SPIE Optical Engineering Press. 1990.- p. 335-365

97. MacDiarmid A. G. Conjugated Polymers and Related Materials: the Interconnection of Chemical and Electronic Structure Text./ A. G. MacDiarmid, W. R. Salaneck, I. Lundstrom // Oxford Scientific Press. 1992.

98. Prakash, R. Electrochemistry of polyaniline: study of the pH effect and electrochromism Text. / R. Prakash // J.Appl.Polymer Sci.- 2002.- V.83.- P.378-385.

99. Orata D. Determination of ion populations and solvent content as functions of redox state and pH in polyanilineText. / D. Orata, D.A. Buttry // J. Am. Chem. Soc- 1987. - V.109. - P. 3574-3581.

100. Kang, E.T. Polyaniline: A polymer with many interesting intrinsic redox states Text./ E.T. Kang, K.G. Neoh, K.L. Tan // Prog. Polym. Sci.- 1998.- V.23.- P. 277-324.

101. Park, S.M. Handbook of Organic Conductive Molecules and Polymer Text. / S.M. Park H.S. Nalwa // Wiley, New York.- 1997.- V.3.- 429 p. '

102. Cui, C.Q. Origin of the difference between potentiostatic and cyclic potential sweep deposi tions of polyaniline Text./ C.Q. Cui, L.H. Ong, T.C. Tan, J.Y. Lee // J. Electroanal. Chem. 1993.-V.346.-P. 477-482.

103. Cui, C.Q. Extent of incorporation of hydrolysis products in polyaniline films deposited by cyclic potential sweepText. / C.Q. Cui, L.H. Ong, T.C. Tan, J.Y. Lee // Electrochim. Acta 1993.-V.38.-P.1395-1404.

104. Yang, H. The application of fast scan cyclic voltammetry. Mechanistic study of the initial stage of electropolymerization of aniline in aqueous solutions Text./ H. Yang, A.J. Bard // J. Electroanal. Chem. 1992.- V.339.- P.423-443.

105. Mondal, S. K. Analysis of electrochemical impedance of polyaniline films prepared by gal- vanostatic, potentiostatic and potentiodynamic methods Text./ S.K. Mondal, K. Prasad, N. Mu-nichandraiah // Synthetic Metals 2005.- V.148.- P.275-286.

106. Wei, X. Synthesis of highly sulfonated polyaniline Text./ X. Wei and A.J. Epstein // Synth. Met. 1995.-V.74.- P.123-125.

107. Lin, H.K. Synthesis of new water-soluble self-doped polyaniline Text./ ILK. Lin, S.A. Chen // Macromolecules 2000.- V.33.- P. 8117-8118.

108. Karyakin, A.A. The influence of defects in polyaniline structure on its electroactivity: opti mization of 'self-doped' polyaniline synthesis Text./ A.A. Karyakin, LA. Maltsev, L.V. Lu-kachova // J. Electroanal. Chem. 1996.- V.402.- P.217-219.

109. Mazeikiene, R. Voltammetric study of the redox processes of self-doped sulfonated poly aniline Text./ R. Mazeikiene, G. Niaura, A. Malinauskas // Synth. Met. 2003.- V.139.- P. 89-94.

110. Lai, E.K.W. Electrochemical oxygen reduction at composite films of Nafion, polyaniline and Pt Text./ E.K.W. Lai, P.D. Beattie, F.P. Orfino, E. Simon, S. Holdcroft // Electrochim. Acta 1999.-V.44.-P. 2559-2569.

111. Xiao, Y. Electrocatalytic intercalator-induced winding of double-stranded DNA with poly- anilineText. / Y. Xiao, A.B. Kharitonov, F. Patolsky, Y. Weizmann, I. Willner // Chem. Com-mun.2003.-V.13.-P.1540-1541.

112. Tian, S. Polyaniline doped with modified gold nanoparticles and its electrochemical properties in neutral aqueous solution Text./ S. Tian, J. Liu, T. Zhu, W. Knoll // Chem. Commun. 2003.-V.21.-P.2738-2739.

113. Zhang, L. The electrocatalytic oxidation of ascorbic acid on polyaniline film synthesized in the presence of camphorsulfonic acid Text./ L. Zhang, S. Dong // J. Electroanal. Chem.- 2004.-V.568.-P.189-194.

114. Евтюгин, Г.А. Электрохимические биосенсоры на основе графитовых электродов, модифицированных полианилином, для определения фосфорорганических пестицидов Текст. / Г.А.Евтюгин, Г.К.Будников, А.Н.Иванов // Укр.хим.журн.- 2005.- Т.71, № 9.-С.51-59.

115. Strehlitz, В Sensor for amperometric determination of ammonia and ammonia-forming enzyme reactions Text./ B. Strehlitz, B. Grundig, H. Kopinke // Anal. Chim. Acta.- 2000.- V.403.-P. 11-23.

116. Shih, Y. A creatinine deiminase modified polaniline electrode for creatinine analysis Text./ Y. Shih, H. Huang//Anal. Chim. Acta.- 1999.- V.292.- P.143-150.

117. Luo, Y.-C. Urea biosensor based on PANi(urease)-Nafion®/Au composite electrode Text. / Y.-C.Luo, J.-S.Do // Biosens.Bioelectron.- 2004.- V.20.- P. 15-23.

118. Kanungo, M. Studies on electropolymerization of aniline in the presence of sodium dodecyl sulfate and its application in sensing urea Text. / M.Kanungo, A.Kumar, A.Q.Contractor // J.Electroanal.Chem.- 2002.- V.528.- P.46-56.

119. Kan, J. Polyaniline-uricase biosensor prepared with template process Text. / J.Kan, X.Pan, C.Chen //Biosens.Bioelectron.- 2004.- V.19.- P.1635-1640.

120. Zhou, H. Glucose biosensor based on platinum microparticles dispersed in nano-fibrous polyaniline Text. / H.Zhou, H.Chen, S.Luo, J.Chen, W.Wei, Y.Kuang // Biosens.Bioelectron.-2005.- V.20.- P.1305-1311.

121. Pan, X. Polyaniline glucose oxidase biosensor prepared with template process Text. / X.Pan, J.Kan, L.Yuan // Sensors Actuators В.- 2004.- V.102.- P.325-330.

122. Timur, S. Thick film sensors based on laccases from different sources immobilized in polyaniline matrix Text. / S.Timur, N.Pazarhoglu, R.Pilloton, A.Telefoncu.// Sensors Actuators B.-2004.-V.97.-P. 132-136.

123. Nickels,P. Polyaniline nanowire synthesis templated by DNA Text. / P.Nickels, W.U. Dittmer, S.Beyer, J.P.Kotthaus, F.C.Simmel //Nanotechnology.- 2004.- V.15.- P. 1524-1529.

124. Shi, L. Electrical contacting of glucose oxidase by DNA-templated polyaniline wires on surfaces Text. / L.Shi, Y.Xiao, I.Willner // Electrochem.Commun.- 2004.- V.6.- P. 1057-1060.

125. Gu, H. Conductive polymer-modified boron-doped diamond for DNA hybridization analysis Text. /H.Gu, X.Su, K.P.Loh // Chem.Phys.Letters.- 2004.- V.388.- P.483-487.

126. Wu, J. A biosensor monitoring DNA hybridization based on polyaniline intercalated graphite oxide nanocomposite Text. / J.Wu, Y.Zou, X.Li, H.Liu, G.Shen, R.Yu // Sensors Actuators B.-2005.-V.104.-P.43-49.

127. Zhu, N. Electrochemically fabricated polyaniline nanowire-modified electrode for voltam- metric detection of DNA hybridization Text. / N.Zhu, Z.Chang, P.He, Y.Fang // Electro-chim.Acta.- 2006.- V.5L- P.3758-3762.

128. Gamier, F. Toward intelligent polymers: DNA sensors based on oligonucleotide- functionalized polypyrroles Text. / F.Gamier, H.Korri-Yousouffi, P.Srivastava, B.Mandrand, TJDelair // Synth.Metals.-1999.- V.100.- P.89-94.

129. Gamier, F. Conjugated polymer-based DNA chip with real time access and femtomol detection threshold Text. / F.Gamier, B.Bouabdallaoui, P.Srivastava, B.Mandrand, C.Chaix // Sensors Actuators В.- 2007.- V.123.- P. 13-20.

130. Bidan, G. Conducting polymers as a link between biomolecules and microelectronics Text. / G.Bidan, M.Billon, T.Livache, G.Mathis, A.Roget, L.M.Torrez-Rodrigez // Synth.Metals.-1999.-V.102.-P.1363-1365.

131. Jiang, M. Recognition and detection of oligonucleotides in the presence of chromosomal DNA based on entrapment within conducting-polymer networks Text. / M.Jiang, J.Wang // J.Electroanal. Chem.- 2001.- V.500.- P.584-589.

132. Ramanaviciene, A. Pulsed amperometric detection of DNA with an ssDNA/polypyrroIe- modified electrode Text. / A.Ramanaviciene, A. Ramanavicius // Anal.Bioanal.Chem.- 2004.-V.379.- P.287-293.

133. Damos, F.S. Study of poIy(methylene blue) ultrathin films and its properties by electrochemical surface plasmon resonance Text. / F.S.Damos, R.C.S.Luz, L.T.Kubota // J.Electroanal.Chem.- 2005.- V.58L- P.231-240.

134. Liu, J. The electrochemical polymerization of methylene blue and properties of poly(methylene blue) Text. / J.Liu, S.Mu // Synthetic Metals.- 1999.- V.107.- P.159-165.

135. Brett, C.M.A. Poly(methylene blue) modified electrode sensor for haemoglobin Text. / C.M.A.Brett, G.Inzelt, V.Kertesz // Anal.Chim.Acta.- 1999.- V.385.- P.l 19-123.

136. Karyakin, A.A. Electropolymerized azines: a new group of electroactive polymers Text. / AA.Karyakin, E.E.Karyakina, H.-L.Schmidt // Electroanalysis.- 1999.- V.l 1.- P. 149-155.

137. Karyakin, A.A. Electropolymerized azines. P.H. In a search of the best electrocatalyst of NADH oxidation Text. / A.A.Karyakin, E.E.Karyakina, W.Schuhmann, H.-L.Schmidt // Electroanalysis.- 1999.- V.1L- P.553-557.

138. Cooper, J.A. Photoelectrochemical determination of ascorbic acid using methylene blue immobilized in a-zirconium phosphate Text. / J.A. Cooper, K.E.Woodhouse, A.M.Chippindale, R.G.Compton//Electroanalysis.- 1999.- V.ll.- P.1259-1265.

139. Hassan, S.S.M. Methylene blue potentiometric sensor for selective determination of sulfide ions Text. / S.S.M.Hassan, S.A.M.Marzouka, H.E.M.Sayour // Anal.Chim.Acta.- 2002.-V.466.- P.47-55.

140. Tan, L. Electrochemical determination of heparin using methylene blue probe and study on competition of Ba2+ with methylene blue for binding heparin Text. / L.Tan, S.Yao, Q.Xie // Ta-lanta.- 2007.- V.71.- P.827-832.

141. Zhou, D. The electrochemical polymerization of methylene green and its electrocatalysis for the oxidation of NADH Text. / D.Zhou, H.Fang, H.Chen, H.Ju, Y.Wang // Anal.Chim.Acta.-1996.-V.329.-P.41-48.

142. Ulyanova, Y.V. Poly(methylene green) employed as molecularly imprinted polymer matrix for electrochemical sensing Text. / Y.V.Ulyanova, A.E.Blackwell, S.D.Minteer // Analyst.-2006.-V.131.-P.257-261.

143. Liu, B. A reagentless amperometric biosensor based on the coimmobilisation of horseradish peroxidase and methylene green in a modified zeolite matrix Text. / B.Liu, F.Yan, J.Kong, J.Deng//Anal.Chim.Acta.- 1999.- V.386.- P.31-39.

144. Yang, R. A H2O2 biosensor based on immobilization of horseradish peroxidase in electro- polymerized methylene green film on GCE Text. / R. Yang, C.Ruan, J.Deng // J. Appl.EIectrochem.- 1998.- V.28.- P.1269-1275.

145. Wang, B. Sol-gel-derived amperometric biosensor for hydrogen peroxide based on methylene green incorporated in Nafion film Text. / B.Wang, S.Dong // Talanta.- 2000.- V.51.- P.565-572.

146. Gao, Q. Preparation of poly(thionine) modified screen-printed carbon electrode and its application to determine NADH in flow injection analysis system Text. / Q.Gao, X.Cui, F.Yang, Y.Ma, X.Yang // Biosens.Bioelectron.- 2003.- V.19.- P.277-282.

147. Bard, A.J. Electrochemical Methods. Fundamentals and Applications / A.J.Bard, 1..R.Foulkner, J.Wiley & Sons, New York. - 1980.- 718 p.

148. Situmorang, M. Immobilisation of enzyme throughout a polytyramine matrix: a versatile procedure for fabricating biosensors Text. / M.Situmorang, J.J.Gooding, D.B.Hibbert // Anal.Chim.Acta.- 1999.- V.394.- P.211-223.

149. Situmorang, M. Electrodeposited polytyramine as an immobilisation matrix for enzyme biosensors Text. / M.Situmorang, J.Gooding, D.B.Hibbett, D.Barnett // Biosens.Bioelectron.-1998.-V.13.-P.953-962.

150. Becker, R. C. Thrombin: structure, biochemistry, measurement, and status in clinical medicine Text. / R. С Becker, F. A. Spencer// J. Thrombosis Thrombolysis.- 1998.- P. 215-229.

151. Garden S. R. A fluorescent coagulation assay for thrombin using a fiber optic evanescent wave sensor Text. / S.R.Garden, G.J.Doellgast, K.S. Killham, N.J. Strachan // Biosens. Bioelec-tron.- 2004.- V.19.- P.737-734

152. Pavlov, V. Aptamer-functionalized Au nanoparticles for the amplified optical detection of thrombin Text. / V. Pavlov, Y. Xiao, B. Shlyahovsky, I. Willner // J. Am. Chem. Soc- 2004.-V.126.-P.11768-11769.

153. Tung, H. A novel near-infrared fluorescence sensor for detection of thrombin activation in blood Text. / C.H.Tung, R.E. Gerszten, F.A. Jaffer, R. Weissleder // Chem. Biochem.- 2002.-V.3.-P.207-211.

154. Bini, A. Analytical performances of aptamer-based sensing for thrombin detection Text. / A.Bini, M.Minunni, S.Tombelli, S.Centi, M.Mascini // Anal. Chem.- 2007.- V.79.- P.3016-3019.

155. Hianik T. Detection of aptamer-protein interactions using QCM and electrochemical indicator methods Text. / T.Hianik, V.Ostatnar, Z.Zajacovar, E.Stoikova, G.Evtugyn // Bioorg. Med. Chem. 1.etters.- 2005.- V.15.- P.291-295.

156. Scaly, J.M. Electrochemical impedance: analysis and interpretation Text. / J.M.Scaly, D.C.Silverman, M.W.Kendig (editors). ASTM, Philadelphia.- 1993.- 480 p.

157. Mondal, S.K. Analysis of electrochemical impedance of polyaniline films prepared by gal- vanostatic, potentiostatic and potentiodynamic methods Text. / S.K.Mondal, K.R.Prasad, N.Munichandraiah // Synthetic Metals.- 2005.- V.148.- P.275-286.

158. Takhistov, P. Electrochemical synthesis and impedance characterization of nano-patterned biosensor substrate Text. / P.Takhistov // Biosens.Bioelectron.- 2004.- V.l 9.- P. 1445-1456.

159. Randies, J. E. B. Kinetics of rapid electrode reactions Text. / J.E.B.Randles // Discussions Faraday Soc- 1947.- V.I.- P. 11-19.

160. Mondal, S.K. Analysis of electrochemical impedance of polyaniline films prepared by gal- vanostatic, potentiostatic and potentiodynamic methods Text. / S.K.Mondal, K.R.Prasad, N.Munichandraiah.// Synthetic Metals- 2005.- V.148.- P.275-286

161. Lubert, K-H. The influence of protons on the impedance of polyaniline films Text. / K- H-Lubert, L.Dunsch // Electrochim.Acta.- 1998.- V.43.- P.813-822.

162. Alberts, B. An introduction to the molecular biology of the cell Text. / B.Alberts, D.Bray, A.Johnson, J.Lewis,M.Raff, K.Roberts, P.Walter // Essential Cell Biology. New York: Garland Publishing. Inc.- 1998.- 340 p.

163. Moss, T. DNA-protein interactions: principles and protocols Text. / T. Moss (Ed.) // Meth ods in molecular biology. Humana Press. - 2001.- 656 p.

164. Hamdani, K. Polyaniline pH electrodes Text. / K.Hamdani, K.L. Cheng // Microchemical J.-1999.-V.61.-P.198-215.