Электрофоретическое определение нейротрансмиттеров в биологических объектах с использованием OFF-LINE и ON-LINE концентрирования тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Сидорова, Алла Анатольевна

• Сидорова, Алла Анатольевна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Сидорова, Алла Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ.

1.1. Общая характеристика нейротрансмиттеров.

1.2. Методы определения нейротрансмиттеров в биологических объектах.

1.2. 1. Иммунологические и радиохимические методы анализа.

1.2. 1. 1. Иммунологический анализ.

1.2. 1.2. Радиоферментный анализ.

1. 2. 2. Газовая хроматография.

1.2. 2. 1. Силилирование.

1. 2. 2. 2. Алкилирование.

1. 2. 2. 3. Ацилирование.

1.2.3. Определение биогенных аминов и аминокислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

1. 2. 3. 1. УФ- и флуориметрическое детектирование.

1. 2. 3. 2. Электрохимическое детектирование.

1.2.4. Метод высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ).

1.2.5. Метод капиллярного электрофореза (КЭ) при определении нейротрансмиттеров.

1. 2. 5. 1. Основы метода капиллярного электрофореза.

1. 2. 5. 2. Основные варианты капиллярного электрофореза (КЭ).

1. 2. 5. 2. 1. Капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ).

1.2.5.2.2. Мицеллярная электрокинетическая хроматография

МЭКХ).

1. 2. 5. 3. Методы детектирования в капиллярном электрофорезе.34 1. 2. 5. 3. 1. УФ-детектирование в капиллярном электрофорезе.

1. 2. 5. 3. 2. Флуоресцентное детектирование.

1. 2. 5. 3. 3. Электрохимическое детектирование.

1. 2. 5. 3. 4. Масс-спектрометрическое детектирование.

1. 2. 5. 4. Возможности on-line концентрирования в КЭ.

1.2.5.5. Эффективность, разрешение и селективность разделения в методе капиллярного электрофореза.

1.2.5.6. Характеристика макроциклических реагентов, используемых в капиллярном электрофорезе.

1.3. Пробоподготовка биологических объектов к электрофоретическому определению биогенных аминов и аминокислот.

1.3. 1. Твердофазная экстракция.

1. 3. 2. Жидкостная экстракция катехоламинов.

1. 3. 3. Жидкостная экстракция аминокислот.

ГЛАВА 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБЪЕКТОВ И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2. 1. Аппаратура.

2. 2. Реагенты.

2. 3. Методы исследования.

2 .3 .1. Метод капиллярного электрофореза с УФ-детектированием.

2. 3. 2. Метод капиллярного электрофореза с МС-детектированием.64 2.3.3. On-line концентрирование в режиме капиллярного электрофореза.

2. 3. 4. Метод высокоэффективной тонкослойной хроматографии.

2. 3. 5. Использование обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии с амперометрическим детектированием при определении катехоламинов.

2.3.6. Масс-спектрометрический анализ реальных объектов и индивидуальных нейротрансмиттеров.

2. 3. 7. Пробоподготовка биологических объектов к анализу.

ГЛАВА 3. ВЫЯВЛЕНИЕ ДОМИНИРУЮЩИХ ФАКТОРОВ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИХ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ НЕЙРОТРАНСМИТТЕРОВ.

3. 1. Нейротрансмиттеры. Задачи и проблемы их определения в биологических жидкостях.

3.2. Установление факторов, влияющих на электрофоретическое разделение биогенных аминов.

3.2. 1. Оптимизация электрофоретического разделения биогенных аминов методом капиллярного электрофореза с УФ-детектированием.

3.2.1.1. Оценка констант устойчивости комплексов биогенных аминов с 18-краун-6.

3.2.1.2. Сравнительные оценочные характеристики влияния макроциклов, ион-парного агента и органического растворителя на электрофоретическое разделение аналитов.

3.2.2. Влияние Р-циклодекстрина на электрофоретические характеристики нейротрансмиттерных ароматических кислот.

3.2.2.1. Оценка констант устойчивости комплексов ароматических кислот с p-циклодекстрином.

3.2.3. Определение ароматических кислот методом МЭКХ с УФдетектированием.

3. 2. 4. Выяснение возможностей электрофоретического определения алифатических аминокислот методом капиллярного электрофореза с УФ-детектированием без предварительной дериватизации и с использованием фенилтиокарбамоильных производных.

3.2.5. Изучение кинуренинового пути метаболизма триптофана методами капиллярного электрофореза.

3.2.6. Определение биогенных аминов методом капиллярного электрофореза с масс-спектрометрическим детектированием.

3.2.7. On-line концентрирование в режиме капиллярного электрофореза.

3.3. Хроматографическое определение нейротрансмиттеров.

3.3.1. Анализ катехоламинов методом ОФ ВЭЖХ с амперометрическим детектированием.

3.3.2. Определение триптофана и его метаболитов методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии.

3.4. Масс-спектрометрическое определение нейротрансмитгеров на приборе MALDI-TOF "Voyager DE".

3. 5. Пробоподготовка биологических жидкостей к анализу.

3.5. 1. Оптимизация условий пробоподготовки биологических объектов для масс-спектрометрического анализа.

3.5.2. Пробоподготовка биологических жидкостей для электрофоретического и хроматографического определения.

3.5.2.1. Твердофазная экстракция катехоламинов на активированном оксиде алюминия.

3. 5. 2. 2. Твердофазная экстракция катехоламинов на силикагеле.

3.5.2.3. Твердофазная экстракция катехоламинов на модифицированном С18.

ГЛАВА 4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРИЛОЖЕНИЯ.

4.1. Определение лекарственного препарата «Алкеран».

4. 1. 1. Определение мелфалана в режиме капиллярного зонного электрофореза.

4.2. Определение 3-гидроксикинуренина в структурах мозга Дрозофил.

4. 2. 1. Кинурениновый путь метаболизма триптофана.

4. 2. 2. Оптимизация условий определения и разделения метаболитов кинуренинового пути триптофана в режиме капиллярного электрофореза.

4. 2. 3. Определение 3-гидроксикинуренина, кинуренина и триптофана в реальном образце методом капиллярного электрофореза.

4.3. Определение катехоламинов в биологических жидкостях при сердечно-сосудистых заболеваниях.:.

ВЫВОДЫ.

ПРИМЕЧАНИЯ.

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Электрофоретическое определение нейротрансмиттеров в биологических объектах с использованием OFF-LINE и ON-LINE концентрирования»

Актуальность проблемы. Нейротрансмиттеры (катехоламины и их метаболиты, нейротрансмиттерные гидрокси- и аминокислоты) играют важную роль в регуляции деятельности сердечно-сосудистой и эндокринной систем, процессах обучения и памяти [1]. Измерение их содержания в биологических образцах имеет важное практическое значение для клинической диагностики различных заболеваний (болезнь Паркинсона, Альцгеймера, феохромоцитома, нейробластома и др.) [2].

Поскольку концентрации биогенных аминов и аминокислот в биологических жидкостях находятся на уровне нанограммовых количеств, требуются высокочувствительные и селективные методы их определения [3].

Традиционно используют иммунологические методы и высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) с УФ-, флуоресцентным и электрохимическим детектированием [3]. При этом иммунологические методы позволяют с высокой специфичностью определять только один компонент в ходе анализа, а для ВЭЖХ часто требуется проведение дериватизации. Основные методы анализа нейротрансмиттеров без перевода в производные - ОФ ВЭЖХ с амперометрическим детектированием [4] и капиллярный электрофорез, характеризующийся высокой эффективностью и обеспечивающий разделение ионных и нейтральных аналитов [5-7].

Цель диссертационного исследования. Разработка стратегии электрофоретического разделения и определения биогенных аминов и их метаболитов в биологических объектах с использованием off-line и on-line концентрирования.

Научная новизна. Выявлены факторы (состав, рН и концентрация рабочего буфера, органические растворители и комплексообразователи в составе электролита, условия ввода пробы), определяющие закономерности % электрофоретического разделения нейротрансмиттеров различной природы и позволяющие прогнозировать пути оптимизации анализа сложных смесей.

Обнаружен эффект влияния макроциклов (18-краун-6, 4,13-диаза-18-краун-6, p-циклодекстрина) и ион-парного реагента (додецилсульфата натрия) на эффективность и селективность электрофоретического разделения нейротрансмиттеров.

Определены возможности off-line и on-line концентрирования (стэкинга) нейротрансмиттеров из биологических объектов для снижения предела обнаружения аналитов в режиме КЭ.

Практическая значимость работы. Разработан метод электрофоретического определения (КЗЭ и МЭКХ) нейротрансмиттеров в плазме крови, моче, структурах мозга, слезной жидкости с УФ-детектированием.

Предложены пути снижения пределов обнаружения при электрофоретическом определении биогенных аминов и их метаболитов в 10 - 1000 раз с использованием твердофазной экстракции (оксид алюминия и С18, модифицированный додецилсульфатом натрия) и on-line концентрирования.

Показана возможность выявления и контроля различных патологий, связанных с сердечно-сосудистыми и онкологическими заболеваниями, посредством электрофоретического анализа биологических жидкостей (моча, плазма и сыворотка крови).

Разработан вариант капиллярного зонного электрофореза (КЗЭ) и мицеллярной электрокинетической хроматографии (МЭКХ) для количественного анализа смесей триптофана и его метаболитов (кинуренин, 3-гидроксикинуренин, кинуреновая кислота) в биологических образцах.

Положения, выносимые на защиту

1. Результаты исследования влияния концентрации и рН буферного электролита, органических модификаторов и комплексообразователей в составе рабочего буфера на электрофоретическое разделение нейротрансмиттеров в режиме КЗЭ и МЭКХ.

2. Влияние макроциклов как компонентов буферных систем (18-краун-6, 4,13-диаза-18-краун-6, p-циклодекстрина) на эффективность и селективность электрофоретического разделения катехоламинов и их метаболитов и количественная оценка комплексообразования в системе «макроцикл-субстрат».

3. Оптимизированный регламент пробоподготовки биологических жидкостей с использованием твердофазной и жидкостной экстракции.

4. Способы on-line концентрирования (электростэкинг; стэкинг с большим вводом пробы; стэкинг с усилением поля) для увеличения УФ-чувствительности электрофоретического определения биогенных аминов.

5. Обоснование возможности и преимуществ электрофоретического определения нейротрансмиттеров в биологических объектах.

6. Практические приложения выявленных закономерностей:

- определение биогенных аминов методом КЗЭ в сыворотке крови и моче;

- определение триптофана и его метаболитов в структурах мозга.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Сидорова, Алла Анатольевна

выводы

1. Установлены закономерности электрофоретического разделения катехоламинов и их метаболитов и выявлены доминирующие факторы: модификатор поверхности кварцевого капилляра (диэтиламин, триэтаноламин), комплексообразователи (18-краун-6, 4,13-диаза-18-краун-6, p-циклодекстрина, додецилсульфата натрия (ДЦСН)) и органические растворители (ацетонитрил, диметилсульфоксид) в составе рабочего электролита.

2. Установлено влияние макроциклов (18-краун-6, 4,13-диаза-18-краун-6, p-циклодекстрина) и ион-парного реагента (ДЦСН) на эффективность и селективность электрофоретического разделения катехоламинов и их кислотных и основных метаболитов в режиме капиллярного зонного электрофореза и мицеллярной электрокинетической хроматографии. Проведена количественная оценка комплексообразования в системе «макроцикл-аналит».

3. Разработан унифицированный регламент пробоподготовки биологических объектов (моча, плазма и сыворотка крови, структуры мозга) для электрофоретического анализа, основанный на различных вариантах жидкостной (этилацетатом) и твердофазной экстракции (А120з; силикагель, модифицированный 18-краун-6; С18 с использованием додецилсульфата натрия в составе анализируемой пробы).

4. Выявлены возможности различных вариантов on-line концентрирования (электростэкинг, стэкинг с большим вводом пробы, стэкинг с усилением поля) и показано, что стэкинг с большим вводом пробы позволяет снизить предел обнаружения биогенных аминов до 50 мкг/л, что обеспечивает возможность анализа биологических жидкостей методом капиллярного электрофореза.

Предложена схема электрофоретического анализа реальных объектов: (плазма и сыворотка крови, моча и структуры мозга)

- определение норадреналина и дофамина в плазме крови и моче методом КЗЭ,

- определение триптофана и его метаболитов в структурах мозга и слезной жидкости методом КЗЭ и МЭКХ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Сидорова, Алла Анатольевна, 2006 год

1. Розен В.Б. Основы эндокринологии / М. 1994. 384 с.

2. D.-C. Chen, D.-Z. Zhan, C.-W. Cheng, A.-C. Liu, C.-H. Chen. Determination of urine catecholamines by capillary electrophoresis with dual-electrode amperometric detection // J. Chrom. B. 2001. V.750. P.33-39.

3. R.P.H. Nikolajsen, A.M.Hansen. Analytical methods for determining urinary catecholamines in healthy subjects // Analytica Chimica Acta. 2001. V.449. P. 1-15

4. J.Lange, K. Thomas, C. Wittmann. Comparison of a capillary electrophoresis method with high-performance liquid chromatography for the determination of biogenic amines in various food samples // J. Chrom. B. 2002. V. 779. P. 229-239

5. J.Bergquist, A. Sciubisz, A. Kaczor, J. Silberring. Catecholamines and methods for their identification and quantitation in biological tissues and fluids // J. Neuroscience Methods. 2002. V. 113. P. 1-13

6. Эндокринология / под ред. H. Лавина. 1999. 1128 с.

7. Руководство по лабораторной клинической диагностике / под ред. В.В. Меньшикова. М., Медицина. 1982. 576 с.

8. В. К. Glod, К. I. Stanczak. Application of RP-HPLC-ED assay to analysis of the blood of Parkinson's disease patients // Acta Chromatographica. 2005. №15. P. 276-288

9. С. Rodier, R. Sternberg, F. Raulin, C. Vidal-Madjar. Chemical derivatization of amino acids for in situ analysis of Martian samples by gas chromatography. // J. Chrom. A. 2001. V. 915. P. 199-207

10. Shulin Zhao, Yangzheng Feng, Michael H. LeBlanc, John E. Piletz, Yi-Ming Liu. Quantitation of agmatine by liquid chromatography with laser-induced fluorescence detection. // Anal. Chim. Acta. 2002. V.470. P. 155161

11. A. Namera, M. Yashiki, M. Nishida, T. Kojima. Direct extract derivatization for determination of amino acids in human urine by gas chromatography and mass spectrometry // J. Chrom. A. 2002. V. 776. P. 49-55.

12. K. Vuoresola, H. Siren. Determination of urinary catecholamines with capillary electrophoresis after solid-phase extraction. // J. Chrom. A. 2000. V. 895. P. 317-327.

13. J1. А. Карцова, Д. Б. Гладилович, И. О. Захарова. Взаимодействие о-фталевого диальдегида с первичными аминами в присутствии нуклеофильных агентов // Журн. Общ. Химии. 1993. Вып. 9. Т. 63. С. 2117-2125

14. J1. А. Карцова, И. Н. Краснова, А. И. Пименов. Анализ нейротрансмиттерных аминокислот и биогенных аминов методом ВЭЖХ в присутствии краун эфиров в подвижной фазе // Журн. Аналит. Химии. 1996. Т. 51. № ю. С. 1068-1073

15. J1. А. Карцова, И. Н. Краснова, И. В. Колмакова. Анализ нейромедиаторных аминокислот и биогенных аминов в спинномозговой жидкости методом обращено-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии // Журн. Аналит. Химии. 1997. Т. 52. № 7. С. 767-772

16. И. Н. Краснова, J1. А. Карцова, Ю. В. Черкас, Т. В. Димисенко. Количественный анализ аминокислот в сыворотке крови методом обращено-фазной ВЭЖХ // Журн. Клинич. Лаборат. Диагност. 1999. №7. С. 11-14

17. JL А. Карцова, И. Н. Краснова, Ю. В. Черкас. Определение аминокислот в сыворотке крови человека методом обращено-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии в режиме изократического элюирования // Журн. Аналит. Химии. 2000. Т. 55. № 1.С. 66-74

18. Y.V. Tcherkas, L.A. Kartsova, I.N. Krasnova. Analysis of amino acids in human serum by isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Chrom. A. 2001. V. 913. P. 303-308

19. Y. Ohkura, М. Kai, Н. Nohta. Fluorigenic reactions for biomedical chromatography. // J.Chrom. B. 1994. V. 659. P. 85-107.

20. H. Todoriki, T. Hayashi, H. Naruse, A. Y. Hirakawa. Sensitive high-performance liquid chromatographic determination of catecholamines in rat brain using a laser fluorimetric detection system. // J. Chrom. B. 1983. V. 276. P. 45-54.

21. M.E. Bovingdon, R.A. Webster. Derivatization reactions for neurotransmitters and their automation. // J.Chrom. B. 1994. V. 659. P. 157183.

22. H.A. Bardelmeijer, J.C.M. Waterval, H. Lingeman, R. van't Hof, A. Bult, W.J.M. Underberg. Pre-, on- and post-column derivatization in capillary electrophoresis. //Electrophoresis. 1997. V.18. P. 2214-2227.

23. T. Okumura, Y. Nakajima, M. Matsuoka, T.Takamatsu. Study of salivary catecholamines using fully automated column-switching high-performance liquid chromatography // J. Chrom. B, 1997. V. 694. P. 305-316

24. M. Yamaguchi, Y. Ishida, M. Yoshimura. Simultaneous determination of urinary catecholamines and 5- hydroxyindolamines by high- performance liquid chromatography with fluorescence detection // Analyst. 1998. V.123. P.307- 311

25. S. Honda, M. Takahashi, Y. Araki, K. Kakehi. Postcolumn derivatization of catecholamines with 2- cyanoacetamide for fluorimetric monitoring in high-performance liquid chromatography. // J.Chrom. B. 1983. V. 274. P. 45-52.

26. Ф. E. Романцев, В. H. Прозоровский. Синтез фенилтиокарбамильных производных аминокислот и их определение методом обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. // Журнал Аналитической Химии. 1988. С. 1100-1104.

27. T. Iwata, H. Mitoma, M. Yamaguchi. Fluorescence derivatization of amino acids with 4-(5',6'-dimethoxybenzothiazolyl)phenylisothiocyanate in liquid chromatography. // Anal. Chim. Acta. 2000. V. 416. P. 69-75.

28. R. Gatti, M.G. Gioia, A.M. Di Pietra. Phanquinone: a useful fluorescent pre-chromatographic derivatization reagent for liquid chromatographic analyses of amino acid dosage forms. // Anal. Chim. Acta. 2002. V. 474. P. 11-20.

29. Hui-Min Ma, Zhi-Hua Wang, Mei-Hong Su. New triazine spectroscopic reagent for the separation of DL-amino acids by micellar electrokinetic chromatography. // J. Chrom. A. 2002. V. 955. P. 125-131.

30. Shen Hu, Paul C.H. Li. Micellar electrokinetic capillary chromatographic separation and fluorescent detection of amino acids derivatized with 4-fluoro-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole. // J. Chrom. A. 2000. V. 876. P. 183191.,

31. M. Peter. A. Peter, F. Fulop. Application of (1S,2S)- and (1R,2R)-1,3-diacetoxy-l-(4-nitrophenyl)-2-propylisothiocyanate to the indirect enantioseparation of racemic proteinogenic amino acids. // J. Chrom. A. 2000. V. 871. P. 115-126.

32. М. Ummadi, B.C. Weimer. Use of capillary electrophoresis and laser-induced fluorescence for attomole detection of amino acids. // J. Chrom. A. 2002. V. 964. P. 243-253.

33. M.A. Raggi, C. Sabbioni, G. Casamenti, G. Gerra, M. Calonghi, L. Masotti. Determination of catecholamines in human plasma by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Chrom. B. 1999. V. 730. P. 201-211

34. Y.V. Therkas, L.A. Karsova, I.N. Krasnova. Analysis of amino acids in human serum by isocratic reversed-phase high-perphormance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Chrom. A. 2001. V. 913. P. 303-308

35. M. Hay, P. Mormede. Determination of catecholamines and methoxycatecholamines excretion patterns in pig and rate urine by ion-exchange liquid chromatography with electrochemical detection. // J. Chrom. B. 1997. V. 703. P. 15-23.

36. Красиков В.Д. Современная планарная хроматография // Журнал Аналитической химии. 2003.Т.58. № 8. С. 792 8067.

37. Хираока М. Краун-соединения. / М.: Мир. 1986. С. 356

38. В. Д. Красиков. Основы планарной хроматографии / СПб.: Химиздат. 2005. С. 231

39. R.M. Linares, J. Н. Ayala. Effect of non-ionic surfactants as mobile phase additives on the fluorescence intensity of dansyl derivatives of biogenic amines in high-performance thin-layer chromatography // Analyst. 1998. V. 123. P. 725-729

40. JT. А. Карцова, О. В. Маркова. Молекулярное распознавание в хроматографии / СПб.: СПбГУ. 2004. С. 140

41. Y. Nagata, Т. Iida, М. Sakai. Enantiomeric resolution of amino acids by thin-layer chromatography // J. Molecular Catalysis B: Enzimatic. 2001. V. 12. P. 105-108

42. Baranowska, M. Kozlowska. TLC separation and derivative spectrophotometry of some amino acids // Talanta. 1995. V. 42. P. 15531557

43. R. Bhushan, V. Parshad. Thin-layer chromatographic separation of enantiomeric dansylamino asids using a macrocyclic antibiotic as a chiral selector// J. Chrom. A. 1996. V. 736. P. 235-238

44. S. Terabe, K. Otsuka, K. Ichikawa, A. Tsuchiya, T. Ando. Electrokinetic separations with micellar solutions and open-tubular capillaries // Anal. Chem. 1984. V. 56. P. 111-113

45. E.S. Ahuja, B.P. Preston, J.P. Foley. Anionic-zwitterionic mixed micelles in micellar electrokinetic chromatography: sodium dodecyl sulfat N-dodecyl-N,N-dimethylammonium-3-propane-1-sulfonic acid //J. Chrom. B. 1994. V. 657. P. 271-284

46. A.A. Mohammand, J.R. Peterson, M.G. Bissell. Micellar electrokinetic capillary chromatographic separation of steroids in urine by trioctylphosphine oxide and cationic surfactant // J. Chrom. B. 1995. V. 674. P. 31-38

47. Burgi D.S. //Analytical chemistry. 1993. V.65. 3776-3779

48. Nicole E. Baryla, Charles A. Lucy. pH-Independent large-volume sample stacking of positive or negative analytes in capillary electrophoresis // Electrophoresis. 2001. V. 22. P. 52-58

49. M. K. Shirao, S. Suzukia, J. Kobayashia, H. Nakazawab, E. Mochizuki. Analysis of creatinine, vanilmandelic acid, homovanillic acid and uric acid in urine by micellar electrokinetic chromatography // J.Chrom. B. 1997. V. 693. P. 463-467

50. Руководство по капиллярному электрофорезу. Под ред. А. М. Волощука. Москва. 1996

51. Chien R.L., Burgi D.S. On-column sample concentration using field amplified in CZE. // Analytical Chemistry. 1992. V. 64. P. 489

52. A.B. Wey, С.-Х. Zhang, W. Thormann. Head-column field-amplified sample stacking in binary system CE. Preparation of extracts for determination of opioids in microliter amount of body fluids. // J. Chrom. A. 1999. V. 853. P. 95-106.

53. G. McGrath, W.F. Smyth. Large-volume sample stacking of selected drugs of forensic significance by capillary electrophoresis // J. Chrom. 1996. V. 681. P. 125-131.

54. Ch.-E. Lin, H.-Ch. Huang, H.-W. Chen. A capillary electrophoresis study on the influence of b-cyclodextrin on the critical micelle concentration of sodium dodecyl sulfate //J.Chrom. A. 2001. V. 917. P. 297-310

55. Z. Liu, H. Zou, M. Ye, J. Ni, Y. Zhang. Effects of organic modifiers on retention mechanism and selectivity in micellar electrokinetic capillary chromatography studied by linear solvation energy relationships // J. Chrom. A. 1999. V. 863. P. 69-79

56. Система капиллярного электрофореза «Капель-ЮЗР». Руководство по эксплуатации. // ООО «Люмэкс». С.-Петербург. 2001

57. A. Mitsui, Н. Mohta, Y. Ohkura. High- performance liquid chromatography of plasma catecholamines using 1,2- diphenylethylenediamine as precolumn fluorescence derivatization reagent. //J.Chrom. B. 1985. V. 344. P. 61-70.

58. R. M. Riggin, P. Т. Kissinger. Determination of catecholamines in urine by reverse-phase liquid chromatography with electrochemical detection. // Anal. Chem. 1977. V.49 (13). P. 2109-2111.

59. Z. Shen, Z. Sun, Liu Wu, Kui Wu, Siqin Sun, Z. Huang. Rapid method for the determination of amino acids in serum by capillary electrophoresis. // Journ. of Chromatogr. A. 2002. V. 979. P. 227-232.

60. C. В. Смирнова, И. И. Торочешникова, И. В. Плетнев. Экстракция аминокислот динонилнафталинсульфокислотой в присутствии дициклогексил-18-краун-6. // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 2000. Т. 41. №3. С. 186-188

61. Hong Wan, Lars G. Blomberg. Enantiomeric separation of small chiral peptides by capillary electrophoresis // J.Chrom. A. 1997. V. 792. P. 393400

62. C.-S. Chiou. J.-S. Shih. Application of crown ethers as modifiers for the separation of amines by capillary electrophoresis // Anal. Chim. Acta. 1998. V. 360. P.69-76

63. S.C. Su, S.S. Chou, P.C. Chang, D.F. Hwang. Determination of biogenic amines in fish implicated in food poisoning by micellar electrokinetic capillary chromatography//J.Chrom. B. 2000. V. 749. P. 163-169

64. Ch.-H.Wu, M.-Ch. Chen, A.-K. Su, P.-Y. Shu, Sh.-H. Chou, Ch.-H. Lin. Determination of corticosterone in mouse plasma by a sweeping technique using micellar electrokinetic chromatography // J. Chrom. B. 2003. V. 785. P. 317-325

65. P. Britz-McKibbin, A.R. Kranack, A. Paprica, D.D.Y. Chen. Analyst. 1998. V. 123. P. 1461.

66. Chien R.L., Burgi D.S. Sample stacking of an extremely large injection volume in high-performance capillary electrophoresis. // Analytical Chemistry. 1992. V. 64. P. 1046-1050

67. Z.Liu, P. Sam, S.R. Sirimanne, P.C. McClure, J. Grainger, D.G.Patterson.// J. Chrom. A. 1994. V. 673. P. 125-132

68. Quirino J.P., Terabe S. On-line concentration of neutral analytes for micellar electrokinetic chromatography. 5. Field-enhanced sample injection with reverse migrating micelles. // Anal. Chem. 1998.V. 70. P. 1893-1901

69. Quirino J.P., Terabe S. On-line concentration of analytes for micellar electrokinetic chromatography. I. Normal stacking mode. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 781. P. 119-128

70. Quirino J.P., Terabe S. On-line concentration of neutral analytes for micellar electrokinetic chromatograph. 3. Stacking with reverse migrating micelles. // Anal. Chem. 1998. V.70. P. 149-157.

71. P. Quirino, S. Terabe. Exceeding 5000-fold concentration of analytes in micellar electrokinetic chromatography. // Science. 1998. V. 282 (5388). P. 465-468

72. S. K. Poole and C. F. Poole. Characterization of surfactant selectivity in Micellar Electrokinetic Chromatography // Analyst. 1997. V. 122. P. 267274

73. A. V. Pirogov, A. V. Shpak, O. A. Shpigun. Application of polyelectrolyte complexes as novel pseudo-stationary phases in MEKC // Anal. Bioanal. Chem. 2003. V. 375. P. 1199-1203

74. P.G. Muijselaar, K. Otsuka, S. Terabe. Micelles as pseudo-stationary phases in micellar electrokinetic chromatography // J. Chrom. A. 1997. V. 780. P. 41-61

75. Y. He, H.K. Lee. Large-volume sample stacking in acidic buffer for analysis of small organic and inorganic anions by capillary electrophoresis. //Analytical Chemistry. 1999. V. 71. P. 995-1001

76. A. Kovacs, L. Simon-Sarkadi, K. Ganzler. Determination of biogenic amines by capillary electrophoresis // J. Chrom. A. 1999. V. 836. P. 305-313

77. X. Liu, L.-X. Yang, Y.-T. Lu. Determination of biogenic amines by 3-(2-furoyl)quinoline-2-carboxaldehyde and capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection // J. Crom. A. 2003. V. 998. P. 213-219

78. X. Li, W. Jin, Q. Weng. Separation and determination of homovanillic acid and vanillylmandelic acid by capillary electrophoresis with electrochemical detection // Anal. Chim. Acta. 2002. V. 461. P. 123-130

79. Wu A.H., Gornet T.G. Preparation of urine samples for liquid-chromatographic determination of catecholamines: bonded-phase phenylboronic acid, cation-exchange resin, and alumina adsorbents compared.//Clin. Chem. 1985. V. 31. N. 2. P. 298-302

80. K. Vuorensola, J. Kokkonen, H. Siren, R. A. Ketola. Optimization of capillary electrophoretic-electrospray ionization-mass spectrometric analysis of catecholamines // Electrophoresis. 2001. V. 22. P. 4347-4354

81. A. Martin-Girardeau, M.-F. Renou-Gonnord. Optimization of a capillary electrophoresis-electrospray mass spectrometry method for the quantitation of the 20 natural amino acids in children blood // J. Chrom. B. 2000. V. 742. P. 163-171

82. D. M. Osbourn, D. J. Weiss, С. E. Lunte. On-line preconcentration methods for capillary electrophoresis // Electrophoresis. 2000. V. 21. P. 2768-2779

83. P.Britz-McKibbin, D.D.Y. Chen. Selective focusing of catecholamines and weakly acidic compounds by capillary electrophoresis using a dynamic pH junction. Analytical Chemistry. 2000. V. 72. 1242-1252.

84. M. Krizek, T. Pelikanova. Determination of seven biogenic amines in foods by micellar electrokinetic capillary chromatography // J. Chrom. A. 1998. V. 815. P. 243-250

85. P.Britz-McKibbin, S, Terabe. On-line preconcentration strategies for trace analysis of metabolites by capillary electrophoresis. // J. Chrom. A. 2003. V. 1000. P. 917-934

86. J.-B. Kim, Y. Okamoto, S, Terabe. On-line sample preconcentration of cationic analytes by dynamic pH junction in capillary electrophoresis. // J. Chrom. A. 2003. V. 1018. P. 251-256

87. P.Britz-McKibbin, G.M. Bebault., D.D.Y. Chen. Velocity difference induced focusing of nucleotides in capillary electrophoresis with a dynamic pH-junction. // Analytical Chemistry. 2000. V. 72. № 8. P. 1729-1735.

88. Jl. H. Москвин, И. Г. Зенкевич, Jl. А. Карцова. Понятие «селективность» и его содержание в методах разделения веществ // Журн. Аналит. Химии. 2004. Т. 59. №7. С. 697-703

89. А. Ф. Пожарский. Супрамолекулярная химия. Часть I. Молекулярное распознавание // Соросовский образовательный журнал. 1997. № 9. с.32-39.

90. Yu Liu, Bin Li, Bao-Hang Han, Yu-Mei Li and Rong-Ti Chen. Enantioselective recognition of amino acids by p-cyclodextrin 6-0-monophosphates // J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1997. V. 2. P. 1275-1278

91. Y. Mori, K. Ueno, T. Umeda. Enantiomeric separations of primary amino compounds by non-aqueous capillary zone electrophoresis with a chiral crown ether // J. Chrom. A. 1997. V. 757. P. 328-332

92. Y. Tanaka, K. Otsuka, SH. Terabe. Separation of enantiomers by capillary electrophoresis-mass spectrometry employng a partial filling technique with a chiral crown ether// J. Chrom. A. 2000. V. 875. P. 323-330

93. T. Kitae, T. Nakayama and K. Kano. Chiral recognition of a-amino acids by charged cyclodextrins through cooperative effects of Coulomb interaction and inclusion // J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1998. V. 2. P. 207-212

94. К. В. Male, J. Н. Т. Luong. Derivatizayion, stabilization and detection of biogenic amines by cyclodextrin-modified capillary electrophoresis laser-induced fluorescence detection // J. Chrom. A. 2001. V. 926. P. 309-317

95. E.C.Y. Chan, P.Y. Wee, O.Y. Ho. HPLC assay for catecholamines and metanephrines using fluorimetric detection with pre-column 9-fluorenylmethyloxy-carbonyl chloride derivatization // J. Chrom. B. 2000. V. 749. P. 179-189.

96. VOYAGER Training Programs. The PerSeptive Biosystems Technical Center. // PerSeptive Biosystems.

97. JI.A. Карцова, А.А. Сидорова, В.А. Казаков, Е.А. Бессонова, А.Я. Яшин. Определение катехоламинов методами капиллярного электрофореза и обращенно-фазовой ВЭЖХ // Журнал аналитической химии, 2004, т.59, № 8, с.826 831.

98. JI.A. Карцова, Е.А. Бессонова, А.А.Сидорова, И.А. Тверьянович, В.А. Казаков, Л.И. Великанова. Определение адреналина, норадреналина, дофамина методом капиллярного электрофореза.// Журнал прикладной химии, 2004, т. 77, с. 1164 1169.

99. Л.А. Карцова, А.А. Сидорова, В.А. Казаков, Е.А. Бессонова, А.Я. Яшин. Определение катехоламинов методами КЭ и ОФ ВЭЖХ // Тезисы. Всероссийский симпозиум "Хроматография и хроматографические приборы", Москва, Клязьма, 2004, с. 169.

100. T.I.G. Wilson, К.К. Thomsen, R.O. Petersen, J.O.Duus, R.P. Oliver. Detection of 3-hydroxykynurenine in a plant pathogenic fungus // J. Biochem. 2003. V. 371. P. 783-788

101. Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС / М. 1995. 271 с.

102. Х. Sun, X. Yang, Е. Wang. Determination of biogenic amines by capillary electrophoresis with pulsed amperometric detection // J. Chrom. A. 2003. V. 1003. P. 189-195

103. S.C. Schucker, G. К. E. Scriba. Analysis of isomeric glutamyl peptides by capillary electrophoresis. Application to stability studies // J. Chrom. A. 2000. V. 888. P. 275-279

104. H. Siren, K. Luomanpera, T. Tyopponen, S. Rovio, P. Vastamaki, P. Savolahti. Process control and drug analysis with on-line capillary electrophoresis system // J. Biochem. Biophys. Methods. 2004. V. 60. P. 295-307.

105. H.M. Liebich, R. Lehmann, G. Xu, H.G. Wahl, H.-U. Haring. Application of capillary electrophoresis in clinical chemistry: the clinical value of urinary modified nucleosides // J. Chrom. B. 2000. V. 745. P. 189-196

106. H. Siren, U. Karjalainen. Study of catecholamines in patient urine samples by capillary electrophoresis // J. Chrom. A. 1999. V. 853. P. 527-533.

107. Izatt R.M., Pawlak K., Bradshaw J.S., Bruening R.L. Thermodinamic and kinetic data for macrocycle interaction with cations and anions // Chem. Rev. 1991. V. 91. P. 1721-2085

108. Куликов O.B., Терехова И.В. Термодинамика комплексообразования аминокислот и пептидов, содержащих неполярные боковые группы, с 18-краун-6 в воде // Коорд. Хим. 1998. Том 24. С. 395-399.

109. Larsen K.L., Endob Т., Uedab Н., Zimmermanna W. Inclusion complex formation constants of a-, P-, y-, 5-, е-, C,-, r|- and 0-cyclodextrins determined with capillary electrophoresis // Carbohydrate Res. 1998. V. 309. P. 153159.

110. Rekharsky M.V., Inoue Y. Complexation thermodynamics of cyclodextrins // Chem. Rev. 1998. V. 98. P. 1875-1917.

111. N.V. Komarova, J. S. Kamentsev, A. P. Solomonova, R. M. Anufrieva. Determination of amino acids in fodders and raw materials using capillary zone electrophoresis // J. Chrom. B. 2004. V. 800. P. 135-143

112. Brian D. Hood, Brett Garner, Roger J. W. Truscott. Human lens coloration and aging // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. № 46. P. 32547 32550

113. Sidorova A.A., Kartsova A.A., Alekseeva A. The study of kynurenine pathway by capillary electrophoresis // International conference "Analytical chemistry and chemical analysis". Thesis. Kiev, Ukraine. 2005. P. 150

114. Сидорова A.A., Карцова JI.A. Метод капиллярного электрофореза при изучении кинуренинового пути метаболизма триптофана // II Международный симпозиум «Разделение и концентрирование в аналитической и радиохимии». Тезисы. Краснодар. 2005. С. 258

115. С. К. Man Choy, P. Cho, W.-Y. Chung, I. F. F. Benzie. Water-Soluble » antioxidants in human tears: effect of the collection method // Invest.

116. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001. V. 42. P. 3130-3134

117. A. Garsia, М. Heinanen, L.M. Jimenez, С. Barbas. Direct measurement of homovanillic, vanillylmandelic and 5-hydroxyindolacetic acids in urine by capillary electrophoresis // J. Chrom. A. 2000. V. 871. P. 341-350

118. H. Wan, M. Ohman, L. G. Blomberg. Chemometric modeling of neurotransmitter amino acid separation in normal and reversed migration micellar electrokinetic chromatography // J. Chrom.A. 2001. V. 916. P. 255263

119. Preparative peptide purification by cation exchange and reversed-phase perfusion chromatography. // Biochemica Technica. 1996. № 4.

120. L. Yang, Z. Yuan. Comparison of enantioseparation of amino acid derivatives in aqueous and mixed aqueous-organic media by capillary zone electrophoresis // Fresenius J. Anal. Chem. 1999. V. 365. P. 541-544

121. E. Chernokalskaya, A. Dedeo, D. Brewster, P. Clark, M. Emerick, B. Kopaciewicz. Integrated sample preparation platform for in-gel protein digestion. // Millipore Corporation, Life Science Division, Danvers, MA, USA.

122. Н.Г. Лопатина, Л. А. Дмитриева, Е.Г. Чеснокова, В.В. Пономаренко. Роль кинуренинов в созревании функции нервной системы медоносной пчелы APIS MELLIFERA в онтогенезе // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 1994. Т. 30. №1. С. 156-157

123. И. Ф. Жимулев. Генетическая детерминированность поведения дрозофилы и человека // Соросовский образовательный журнал. 1997. №1. С. 22-25

124. Л.С. Колесниченко, В.И. Кулинский, A.C. Горина. Аминокислоты и их метаболиты в крови и моче при минимальной церебральной дисфункции у детей // Вопросы медицинской химии. 1999. Т. 45. №1. С. 25-30