Электрофоретические и антигенные свойства полипептидов сальмонелл и идентификация их геномов полимеразной цепной реакцией тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Зайнуллин, Ленар Ильгизарович

• Зайнуллин, Ленар Ильгизарович
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Зайнуллин, Ленар Ильгизарович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Основные биологические свойства возбудителей сальмонеллеза.

1.2. Антигенная структура и химический состав сальмонелл.

1.3. Протеомный анализ и его значение.

1.4. Методы изучения генома. Современное состояние.

1.5. Лабораторная диагностика сальмонеллезов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы.

2.2. Результаты собственных исследований.

2.2.1. Анализ полипептидов различных штаммов сальмонелл методом диск-электрофореза в ПААГ-ДСН.

2.2.2. Изучение антигенных свойств белков различных штаммов сальмонелл методом иммуноблоттинга.

2.2.2.1. Изучение состава и свойств антигенных комплексов изолированных клеточных структур сальмонелл (жгутики, клеточная стенка).

2.2.3. Исследование геномов сальмонелл.

2.2.3.1. Разработка модифицированного способа выделения ДНК сальмонелл для молекулярно-генетических исследований.

2.2.3.2. Подбор праймеров для индикации представителей рода Salmonella методом ПЦР.

2.2.3.3. Выявление гипервариабельных областей генома сальмонелл методом ПЦР, с использованием произвольных праймеров.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Электрофоретические и антигенные свойства полипептидов сальмонелл и идентификация их геномов полимеразной цепной реакцией»

Актуальность темы. Инфекционные болезни наносят существенный экономический ущерб животноводству. Одной из наиболее распространенных является сальмонеллез, который вызывает заболевание и падеж молодняка сельскохозяйственных животных и представляет определенную опасность для здоровья людей [48, 62, 78, 90, 97,109, 117].

Сальмонеллы относятся к числу убикваторных микроорганизмов [81]. К заболеванию восприимчивы млекопитающие, птицы, холоднокровные и даже насекомые. Переболевшие животные и люди длительный период времени остаются носителями и выделителями сальмонелл.

Наличие широкого круга естественных носителей (млекопитающих, птиц, рептилий и человека), длительное пребывание в заражённом организме, высокая устойчивость против неблагоприятных условий внешней среды обусловлены большой пластичностью биологических свойств этих микроорганизмов.

Для возбудителей сальмонеллеза характерны выраженная вариабельность антигенной структуры и изменчивость [22].

Кроме того, из-за широкого применения живых вакцин возникает необходимость идентификации вакцинных и эпизоотических штаммов.

Дифференциацию и идентификацию сальмонелл осуществляют на основании культурально-биохимических, морфологических свойств и типоспеци-фическими сыворотками, биопробой на лабораторных животных, что является весьма трудоемким.

Распространенность, наносимый ущерб, угроза здоровью людей и сложность диагностики, определяет необходимость разработки более совершенных методов идентификации и дифференциации сальмонелл. В связи с этим представляет определенный интерес исследование генома возбудителей сальмонеллеза, отличающихся по антигенным и вирулентным свойствам, с использованием современных методов молекулярной биологии и иммунохимии.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение электро-форетических и антигенных свойств полипептидов сальмонелл, отличающихся по антигенным и вирулентным свойствам, индикация и идентификация их геномов полимеразной цепной реакцией. Для решения данной цели были выдвинуты следующие задачи:

1. Изучить полипептидный состав разных штаммов сальмонелл.

2. Определить антигенные свойства полипептидов сальмонелл, различных сероваров.

3. Провести геноидентификацию штаммов сальмонелл методами ПЦР и RAPD-ПЦР.

Научная новизна. Впервые методами диск-электрофореза в полиакрила-мидном геле в присутствии ДСН и иммуноблоттинга установлены сходства и различия в качественном и количественном составе полипептидов и выявлены специфические антигенно-активные фракции в зависимости от антигенных и вирулентных особенностей штаммов.

Разработан фенольно-детергентный метод выделения тотальной ДНК сальмонелл, позволяющий получать чистые, нативные и концентрированные препараты нуклеиновых кислот возбудителя, на который подана заявка на изобретение (приоритетная справка от 08.04.2002г. №2002109103/13 (009486)).

Создан ПЦР-диагностикум со специфичными праймерами, позволяющий проводить экспресс-индикацию сальмонелл.

Разработан эффективный вариант ПЦР с произвольными праймерами для геноидентификации представителей рода Salmonella.

Практическая ценность. Результаты проведенных исследований рекомендуется учитывать при индикации и дифференциации штаммов возбудителей сальмонеллеза. Выявленные антигенно-активные фракции могут быть использованы для получения высокоспецифичных антигенов и сывороток для создания более совершенных серологических тест-систем диагностики сальмонеллеза.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на:

- III съезде биохимического общества (Санкт-Петербург, 26 июня - 1 июля 2002).

- Научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002).

- Международной научно-практической конференции по актуальным проблемам болезней молодняка в современных условиях (Воронеж, 2002).

- IV Всероссийской научно-практической конференции "Генодиагностика инфекционных заболеваний" (Москва, 2002).

- Международной научно-производственной конференции по актуальным проблемам агропромышленного комплекса, посвященной 130-летию КГАВМ им. Н.Э. Баумана (Казань, 30-31 мая 2003).

- Международной научно-практической конференции по актуальным проблемам ветеринарной медицины, посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины УГСХА (Ульяновск, 25-26 сентября 2003)

- Ежегодных заседаниях ученого совета ВНИВИ при обсуждении отчетов о НИР (2002, 2003).

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 9 работ, в числе которых 2 статьи и 7 тезисов. Разработаны и утверждены директором ВНИВИ "Методические рекомендации по определению элек-трофоретических и антигенных свойств полипептидов сальмонелл методами диск-электрофореза в ПААГ-ДСН и иммуноблоттинга", "Методические рекомендации по индикации сальмонелл методом ПЦР".

Основные положения, выдвигаемые на защиту:

- Электрофоретические профили и антигенные свойства полипептидов сальмонелл варьируют в зависимости от их антигенных и вирулентных

- Фенольно-детергентный метод выделения хромосомальной ДНК сальмонелл позволяет получать нативные и чистые препараты нуклеиновых кислот возбудителей, пригодные для молекулярно-генетических исследований.

- Индикация и геноидентификация сальмонелл методом ПЦР со специфичными и произвольными праймерами.

Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 157 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, библиографический список использованной литературы (248 источников, в том числе 122 иностранных, 6 ссылок на сайты Internet) и приложения. Диссертация содержит 15 таблиц и 17 иллюстраций.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Зайнуллин, Ленар Ильгизарович

4. ВЫВОДЫ

1. Методом электрофореза в 10-20% градиентной концентрации ГТААГ в лизатах клеток сальмонелл обнаружены до 49 полипептидов, количественный и качественный состав которых варьировал в зависимости от серова-ра и штаммовой принадлежности. Для всех исследованных штаммов сальмонелл характерно наличие крупно- среднемолекулярных полипептидов с молекулярными массами 219,2-227,6 кД, 97,3-98,7 кД, 76,0-85,0 кД, 50,0-53,5 кД.

У представителей S. choleraesuis специфичной особенностью является наличие 13 идентичных полипептидных фракций и они отличаются от S. enteritidis 418 и S. typhimurium 371 присутствием высокомолекулярного полипептида с массой 149 кД. Отличительной особенностью S. enteritidis 418 от других культур является присутствие двух высокомолекулярных фракций (133,1 и 227,6 кД), а у S. typhimurium 371 обнаруживается полипептид с молекулярной массой 99,2 кД. Метод импрегнации электрофореграмм азотнокислым серебром в отличие от окраски Кумасси R-250 выявляет дополнительно от 8 до 16 полипептидных фракций.

2. Методом иммуноблоттинга установлены серологически активные полипептиды и антигенные различия у разных сероваров и штаммов сальмонелл. С гипериммунной кроличьей антисывороткой на штамм S. enteritidis 418 в иммуноблоттинге у всех исследованных представителей рода Salmonella взаимодействовали фракции с молекулярными массами 76, 58-60, 51-53, 48-50, 4142 и 37 кД. У представителей S. choleraesuis с сывороткой, полученной на штамм S. choleraesuis 370, выявлялась высокоактивная фракция с молекулярной массой 53 кД и вирулентный штамм 370 отличался от вакцинного (ТС-177) наличием антигенно-активного компонента с молекулярной массой 60 кД.

3. Механической дезинтеграцией с последующим ультрацентрифугированием получены клеточные стенки и жгутиковые фракции сальмонелл и методом иммуноблоттинга изучена серологическая активность их полипептидов. С гомологичной гипериммунной сывороткой наиболее высокую серологическую активность проявляли полипептиды жгутиковых структур сальмонелл, тогда как в клеточных стенках выявлялись более разнообразные в антигенном отношении полипептиды.

4. С праймерами "NK1" и "NK2" оптимизированы условия проведения ПЦР (температура отжига праймеров 55°С; концентрация MgCb 2,5 мМ, КС1 25 мМ) и продемонстрировано, что они являются родоспецифическими и фланкируют участок гена invA сальмонелл длиной 2000 п.н., обеспечивая экспресс-индикацию представителей рода Salmonella с чувствительностью > 440 fg ДНК (~ 26 микробных клеток сальмонелл) в различных объектах ветеринарного надзора (патологический материал, корма, продукты животноводства).

5. Проведением ПП-ПЦР с произвольными олигонуклеотидами, состоящими из 10, 18 и 19 нуклеотидных оснований, показано, что праймер VI вызывает образование у всех исследуемых штаммов одного ампликона, состоящего из 1200 пар оснований. При амплификации ДНК сальмонелл в ПЦР с произвольным праймером V3 выявлялись 9-11 фрагментов ДНК, состоящих из 376.2019 п.н., количество и длина которых обеспечивают дифференциацию сероваров.

При использовании произвольного праймера #129 в ПЦР выявлялись 4-5 фрагментов ДНК с длиной 339.1635 п.н., и их количество и размеры позволяют проводить идентификацию сальмонелл по штаммовой принадлежности.

6. Разработанный фенольно-детергентный метод выделения ДНК обеспечивает получение препаратов дезоксирибонуклеиновых кислот сальмонелл высокой степени чистоты и нативности, пригодных для молекулярно-генетических исследований.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании проведенных исследований внесены следующие практические предложения:

1. Штаммовую дифференциацию сальмонелл рекомендуется осуществлять с использованием "Методических рекомендаций по определению электрофоретических и антигенных свойств полипептидов сальмонелл методами диск-электрофореза в ПААГ-ДСН и иммуноблоттинга", одобренные научно-методическим советом и утвержденные директором ВНИВИ (г. Казань), протокол №3 от 4 октября 2002 года.

2. Экспресс-индикацию представителей рода Salmonella в объектах ветеринарного надзора целесообразно проводить методом ПЦР с оли-гонуклеотидными праймерами NK1 и NK2 по разработанным нами методическим рекомендациям "Индикация сальмонелл методом ПЦР", одобренные научно-методическим советом и утвержденные директором ВНИВИ (г. Казань), протокол №4 от 3 ноября 2003 года.

3. Для ускоренной идентификации сальмонелл рекомендуется использовать RAPD-ПЦР с произвольным праймером V3, а для дифференциации на уровне штаммов праймер #129.

4. Фенольно-детергентный метод выделения ДНК микроорганизмов целесообразно использовать для получения препаратов нуклеиновых кислот сальмонелл высокой степени чистоты и нативности, пригодных для молекулярно-генетических исследований.

Заканчивая работу, выражаю благодарность дирекции Всероссийского научно-исследовательского института (г. Казань) за предоставленную возможность проведения экспериментов при выполнении диссертации.

Приношу искреннюю благодарность моим научным руководителям - Заслуженному деятелю науки РТ, доктору ветеринарных наук, профессору Азату Миргасимовичу Алимову и доктору ветеринарных наук Тагиру Хадиевичу Фаизову за повседневное руководство и помощь при работе над диссертацией.

Выражаю признательность сотрудникам лаборатории биохимического и молекулярного анализа биологических средств в объектах ветеринарного надзора и других подразделений ВНИВИ, а также д.б.н. В.П. Коксину, к.в.н. P.M. Ахмадееву за чуткое отношение, помощь и ценные замечания при выполнении экспериментальной части работы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Зайнуллин, Ленар Ильгизарович, 2003 год

1. Алимов A.M. Оценка методом иммунопереноса серологической активности белков Бруцелла абортус // Вопросы инфекционной патологии животных. Межвузовский сборник научных трудов. — Казань, 1994. — С. 18-21.

2. Алимов A.M., Фаизов Т.Х. Молекулярная ДНК/ДНК гибридизация для идентификации возбудителей зоонозов // Тез. докл. Республиканской научно-производственной конференции Казань. - 1992. - С. 7.

3. Алимов A.M., Фаизов Т.Х. Молекулярно-гибридизационные тест-системы для идентификации возбудителей инфекционных болезней // Мат. научно-произв. конф. по вопросам ветеринарии и животноводства. -Казань, 1994.-С. 15.

4. Аскарова А.Н. ПЦР в анализе генома. Казань, 2000. - С. 17-33.

5. Атарова Г.Т. Сравнительное изучение протеинограмм вибрионов и близкородственных организмов методом диск-электрофореза в полиак-риламидном геле // ЖМЭИ. 1976. - №6. - С. 89-94.

6. Ахмедов A.M. Сальмонеллезы молодняка. М.: Колос. - 1983. - С. 3, 810,16-21,37.

7. Бадашкеева А.А., Кнорре Д.Г. Олиго- и полинукпеотидные зонды. Метод молекулярной гибридизации // Молекулярная биология. 1991. - Т. 25, вып. 2.-С. 309-324.

8. Белокрысенко С.С., Домбровский A.M. Электрофорез бактериальных белков в полиакриламидном геле как метод идентификации бактерий кишечной группы // Тр. 2-го Моск. мед. ин-та. 1974. - 32. - №2. - С. 16-18.

9. Белокрысенко С.С., Домбровский A.M. Сравнительное изучение гидрофобных белков бактерий кишечных // В кн.: Кишечные инфекции. Сер. инф. бюл.-М., 1976.-Т. VI.-Вып. 7.-С. 13-15.

10. Белохвостов А.С. Полимеразная цепная реакция и лигазные реакции, принципы, традиционные методики и нововведения // Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. 1995. - №2. - С. 21-25.

11. Биргер М.О. Справочник по микробиологическим методам исследования. М.: Медицина. - 1973. - 453 с.

12. Бошнаков Р.Х., Романова Ю.М., Зигангирова Н.А. и др. Дифференциальная экспрессия генов в культивируемых и некультивируемых формах Salmonella typhimurium // Молекул, генетика, микробиол. и вирусол.2001. -№3.- С. 8-12.

13. Буерова С.В. Усовершенствование средств диагностики и идентификации возбудителя сибирской язвы: Дис. . канд. биол. наук. Казань,2002.-168 с.

14. Булат С.А., Кабоев O.K., Мироненко Н.В., Ибатуллин Ф.М., Лучкина Л.А., Суслов А.В. ПЦР с универсальными праймерами для изучения геномов // Генетика. 1992. - №5. - С. 19-28.

15. Волина Е.Г. Сальмонеллезная пищевая токсикоинфекция: Учебно-методическое пособие. М.: Изд-во РУДН, 1999. - 27 с.

16. Волчкевич Ж.А. Белковые спектры рода Pseudomonas в таксономическом аспекте: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1990. - С. 28.

17. Гааль Э., Медьеши Г., Верецки JI. Электрофорез в разделении биологических макромолекул: Пер. с англ. / Под ред. Розенгарта В.И. М.: Мир, 1982. - С. 74-113, 212-217, 266.

18. Гинцбург A.JL, Романова Ю.М. Полимеразная цепная реакция в диагностике и контроле лечения инфекционных заболеваний // Клин. лаб. ди-агн. 1998. - №2. - С. 35-39.

19. Гинцбург Ф.Л., Романова Ю.Л., Алексеева Н.В. и др. Механизм действия и природа факторов, индуцирующих образование некультивируе-мых форм у Salmonella typhimurium // ЖМЭИ. 1999. -№6. - С. 3-8.

20. Говорун В.М. Новые направления в ДНК-диагностике / ПЦР в диагностике и контроле лечения инфекционных заболеваний // Сб. тр. II Все-рос. научно-практ. конф. -М., 1998. - С. 12-13.

21. Голубева И.В., Килессо В.А., Киселева Б.С. и др. Энтеробактерии: (Руководство для врачей). М.: Медицина, 1985. - С. 121-136, 148-155, 160-164.

22. ГОСТ Р 50455-92. (ИСО 3565-75) Мясо и мясные продукты. Обнаружение сальмонелл (арбитражный метод). М.: Изд-во стандартов, 1993. -18 с.

23. Гребиножко Э.И., Николаенко А.И., Иванов Ф.П. Простой метод обнаружения белков в полиакриламидном геле с помощью импрегнации их серебром // Укр. биохим. журнал — 1986 Т. 58. - №5. - С. 62-65.

24. Гренкова Е.П. Применение поверхностно-активных веществ для экстракции бактериальных антигенов (Обзор) // Науч. тр. Моск. НИИ эпидемиологии и микробиологии. 1978. - 20. - С. 150-155.

25. Григорьева Г.И., Дегтева Г.К. Изучение мембранных белковых спектров стафилококков в сравнительно-физиологическом аспекте // ЖМЭИ. -1979.-№4.-С. 71-75.

26. Григорьева Г.И., Дегтева Г.К. Характеристика белков сальмонелл тифи-муриум различного происхождения // В кн.: Сальмонеллезы. Горький. -1981.-С. 67-70.

27. Громов Б.В. Строение бактерий: Учебное пособие. JI.: Изд-во Ле-нингр. ун-та, 1985. - С. 4-53.

28. Дацюк И.М., Коструба М.Ф. Электрофоретическое исследование про-пионовокислых бактерий при разных условиях культивирования // Мик-робиол. журнал. 1975. - №6. - С. 668-692.

29. Дегтева Г.К., Беляев Е.И., Калина А.П. Некоторые данные сравнительно-физиологического изучения стафилококков различного происхождения с использованием характеристик их белковых спектров // ЖМЭИ. -1971.- №8. -С. 112-116.

30. Дегтева Г.К., Блохина И.Н. Белковые системы клетки бактерий в таксономическом аспекте // Успехи микробиологии: Сб. статей. Москва: «Наука», 1984. - Вып. 19. - С. 3-24.

31. Дегтева Г.К., Носова Т.В., Казанская Г.М. Расследование пищевых ток-сикоинфекций стафилококковой этиологии с использованием сопоставления спектра внеклеточных белков выделенных возбудителей // ЖМЭИ. 1990. - №3. - С. 31-34.

32. Дегтева Г.К., Прейс Г.И., Голубева С.А. Сопоставление белковых спектров типичных и атипичных микобактерии методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле // ЖМЭИ. 1975. - №3. - С. 23-26.

33. Дегтева Г.К., Пылаева С.И., Мусонова И.В. и др. Наблюдение за циркуляцией госпитальной микрофлоры в ожоговом стационаре с помощью электрофоретического анализа белков // ЖМЭИ. 1994. - №6 - С. 11-12.

34. Дегтева Г.К., Урюпина Н.В., Никитина Г.П. Сравнительное изучение белковых спектров вибрионов методом диск-электрофореза в полиакри-ламидном геле // Пробл. особо опасных инфекций. 1974. - Вып. 1(35). -С. 60-63.

35. Домарадская Т.Н., Езепчук Ю.В. Пептидные термостабильные токсины энтеробактерий (генетический контроль, структура, механизм действия, тестирование) // Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. 1993. - №1. -С. 3-8.

36. Дыхно М.М., Фадеева Н.И., Першин Г.Н., Сарычева И.М. Характеристика белковых спектров отдельных представителей микобактерий // ЖМЭИ. 1975. - №1. - С. 108-113.

37. Жукова Г.И. Сравнительная характеристика общеклеточных белков гонококков как возможный эпидемиологический маркер: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Киев, 1988. - 26 с.

38. Зайцева Г.И., Белозерский А.Н. Электрофоретическое изучение белковых компонентов азотобактера в зависимости от вида, возраста культуры и источника азотистого питания // Биохимия. — 1959. Т. 24. - №1. — С. 133-143.

39. Звягинцева И.С., Быкова С.А., Гальченко В.Ф. Таксономическая структура галоархей, выявленная методом гель-электрофореза клеточных белков // Микробиология. 1998. - Т. 68. - №2. - С. 283-288.

40. Иванов А.В., Сметанин М.А. Ветеринария на службе человека. Казань, 2000.-С. 53.

41. Илларионов Э.Ф., Самойлов П.М. Электрофоретическое различие белков у видов Pseudomonas aeruginosa и Pseudomonas denitrificans, способных к окислению н-алканов // Микробиология. — 1978. 47. - №6. - С. 1020-1023.

42. Карпов А.В., Скрипаль И.Г., Малиновская Л.П. Электрофорез белков как средство таксономического анализа фитопатогенных микоплазм // Вирусные болезни сельскохозяйственных культур. 1980. - С. 50-56.

43. Кирилов Н.К. Характеристика химического состава отдельных клеточных компонентов некоторых штаммов бруцелл в зависимости от их вирулентности // Уч. записки КГВИ. Казань, 1978. - Т. 129. - С. 44-47.

44. Кириллов Н.К. Электрофорез белков клеточных фракций бруцелл в ПААГ как метод дифференциации бруцелл различной вирулентности. Методы проф. и леч. инф. забол. с.-х. жив-х в Нечерноземье. — Горький, 1984.-С. 18-20.

45. Климова Н.Е., Златкин И.В., Никитин Д.И. Таксономическая характеристика олиготрофных бактерий на основании изучения белкового компонента мембран // Микробиология. 1993. - Т. 62. - Вып. 2. - С. 276-282.

46. Кодаченко В.Д., Сокол М.Г. Простой способ ускоренной идентификации энтеробактерий // Лаб. дело, 1983. - №8. - С. 51-53.

47. Колупаев В.Е. Преимущества метода ПЦР в реальном времени (Real Time PCR) // IV Всерос. научно-практ. конф. "Генодиагностика инфекционных заболеваний": Сб. тезисов 22-24 октября 2002 г. Москва, -2002.-С. 182-184.

48. Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология. Омск.: Издат. - ОМГАУ, - 1996. - С. 355-362.

49. Кононенко А.Б., Бритова С.В. Применение полимеразной цепной реакции для обнаружения сальмонелл в кормах и продуктах животноводства // Материалы научно-производственной конференции. Калининград, -1998.-С. 97-98.

50. Кривошеин Ю.С., Ромаскевич Л.И., Сарачан Т.А. и др. Изучение растворимых белков различных штаммов Е. coli методом изоэлектрическо-го фокусирования и электрофореза в геле полиакриламида // Тр. Крым, мед. ин-та. 1975. - 66. - №1. - С. 22-23.

51. Кулаков Ю.К., Желудков М.М., Лаврова В.А. и др. Сравнительный анализ антигенов различных видов Brucella методом иммуноблота с антисыворотками иммунизированных кроликов // Микробиология. 1998. -С. 7-17.

52. Куликовский А.В. Актуальность проблемы сальмонеллеза // Вопр. питания. 1991. - Т. 2. - С. 75-76.

53. Лабораторные исследования в ветеринарии / Под ред. В.Я. Антонова. -М.: Агропромиздат, 1986.-С. 177-188, 192-209.

54. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высшая школа, 1990. - С. 111-128, 323.

55. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. — М.: Мир, 1984. С. 157-180.

56. Маракуша Б.И., Рожнова С.Ш., Христюхина О.А. и др. Биологические свойства штаммов Salmonella enteritidis, выделенных из различных источников в период с 1969 по 1989 г. // ЖМЭИ. 1995. - №3. - С. 65-70.

57. Маурер Г. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в по-лиакриламидном геле: Пер. с нем. М.: Мир, 1971. - С. 40-43.

58. Нго Т.Т., Ленхофф Г. Электрофоретический перенос в сочетании с им-муноферментным анализом // В кн.: Иммуноферментный анализ. — М.: «Наука». 1987. - С. 341-350.

59. Норкина О.В., Куличенко А.Н., Шоводаева Г.А. и др. Конструирование видоспецифичного для Yersenia pestis хромосомального ДНК-зонда // Генетика. 1993. - Т. 29. - №3. - С. 1732-1736.

60. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крита, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. Пер. с англ. М.: Мир, 1997. -Т. 1.-С. 192-193.

61. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. -М.: «Наука», 1983.- С. 20-25.

62. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. М.: «Наука», 1981. — С. 114-119.

63. Панин А.Н., Обухов И.Л., Шипулин Г.А., Груздев К.Н. Правила проведения работ в диагностических лабораториях, использующих метод по-лимеразной цепной реакции // Ветеринария. 1997. - №7. - С. 19-21.

64. Першина М.Ю., Шагинян И.А., Ананьина Ю.В., Прозоровский С.В. Анализ геномного полиморфизма лептоспир в полимеразной цепной реакции с произвольными праймерами // Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. 1998. - №1. - С. 29-32.

65. Покровский В.И., Ющук Н.Д. Сальмонеллез. Руководство по инфекционным болезням. -М.: "Медицина", 1986. -462 с.

66. Простяков А.П., Лутошников А.Г. Фракционирование очищенных препаратов вируса ящура методами гельфильтрации и электрофореза // Ящур. Владимир, 1970. - Т. 1. - С. 40-45.

67. Прунтова О.В., Манвелян Г.С., Мудрак Н.С. и др. Получение сальмо-неллезных жгутиковых антигенов // Пробл. инфекц. патологии с.-х. животных: Тез. докл. конф., посвящ. 100-летию открытия вируса ящура 2731 октября 1997 г. Владимир, 1997. - С. 191.

68. Пухлякова Г.Л. Экология сальмонелл на объектах ветеринарно-санитарного надзора // Проблемы ветеринарной санитарии и экологии: Сб. научн. трудов Всерос. НИИ вет. санитарии, гигиены и экологии. -Москва, 1994. Т. 93. - ч. И. - С. 48-51.

69. Романова Л.В., Мишанкин Б.Н. Анализ ДНК штаммов Brucella с помощью ПЦР с использованием универсальных праймеров // Биотехнология -№4.-1994.-С. 8-9.

70. Романова Ю.М., Алексеева Н.В., Гинцбург A.JI. Некультивируемое состояние у патогенных бактерий на модели Salmonella typhimurium: феномен и генетический контроль // ЖМЭИ. 1997. - №4. - С. 35-41.

71. Ромаскевич А.И., Штепа О.С. Изучение растворимых белков клеточных гомогенатов коринебактерий методом диск-электрофореза // Тр. Крым, мед. ин-та. 1974. - С. 32-34.

72. Рысков А.П., Джинчарадзе А.Г., Просняк М.И., Иванов П.Л., Лимбер-ская С.А. Геномная «дактилоскопия» организмов различных таксономических групп: использование в качестве гибридизационной пробы ДНК фага М13 // Генетика. 1988. - Т. 24. - №2. - С. 102-109.

73. Рысков А.П., Фаизов Т.Х., Алимов A.M., Романова Е.А. Геномная дактилоскопия: новые возможности в определении видовой принадлежности бруцелл // Генетика. 1990. - Т. 26. - №1. - С. 130-132.

74. Садриев А.Р. Иммунохимический анализ и геноидентификация хлами-дий: Дис. . канд. биол. наук. Казань, 1999. - 137с.

75. Семина И.Э., Янкина З.К. Использование метода иммуноблотинга для идентификации индивидуальных белков в антигенных комплексах коклюшного микроба // ЖМЭИ. 1989. - №3. - С. 79-81.

76. Сибгатуллин Ф.С., Сафин М.А., Хисамутдинов А.Г. Болезни животных передающиеся от животных человеку. Казань.: Татарское книжное издательство. - 1994, - 107 с.

77. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б. Определитель зоопато-генных микроорганизмов. М.: Колос, 1995. - С. 201-204.

78. Смирнова Т.Д., Ягужинская О.Е., Левина Г.Ф. и др. Использование анализа суммарных белков в полиакриламидном геле как одного из критериев таксономической диффореницации микоплазм и L-форм бактерий // Вести. АМН СССР. 1976. 5. - С. 52-59.

79. Соловьева Т.Ф., Оводов Ю.С. Липополисахаридно-белковые комплексы внешней мембраны грамотрицательных бактерий // Биоорганическая химия. 1983. - Т. 9. - №6. - С. 725-735.

80. Станиславский Е.С. Бактериальные структуры и их антигенность. М.: "Медицина", 1971.-С. 47, 56, 64-67,101-138.

81. Станиславский Е.С., Жванецкая М.И. Антигенные свойства клеточных структур E.coli // ЖМЭИ. 1963. - №1. - С. 32-38.

82. Тихоненко Т.И. Получение и характеристика высокополимерных дезок-сирибонуклеиновых кислот из бактериофагов // Биохимия. — 1962. Т. 27.-вып. 6.-С. 1015-1022.

83. Токаревич К.Н. Важнейшие инфекционные болезни, общие для животных и человека. Л.: Медицина, 1979. - С. 219.

84. Тукшаитов Р.Х. Основы динамической метрологии и анализа результатов статистической обработки. Казань: «Мастер Лайн», 2001. - 284 с.

85. Фадеева Н.И., Першин Г.Н., Дыхно М.М. и др. Изучение внутриклеточного белкового комплекса микобактерий туберкулеза // Тр. ЦНИИ туберкулеза. 1977. - 21. - С. 133-135.

86. Фаизов Т.Х., Гришкевич Н.М., Алимов A.M. Произвольные праймеры: новые возможности идентификации бактерий // Материалы междунар. науч. конф., посвященной 125-летию КГАВМ (28-30 мая 1998 г.). Казань. - 1998. - С. 90-91.

87. Фаизов Т.Х., Равилов Р.Х., Гришкевич Н.М., Староверов С.А. ДНК-зонды, полимеразная цепная реакция для выявления зооантропонозов // Мат. Респ. научно-произв. конф. по акт. проблемам ветер, и зоотехнии. -Казань, 1996.-С. 49.

88. Финеан Д, Колмэн Р., Митчел Р. Мембраны и их функции в клетке. -М.: Мир, 1977.-С. 224.

89. Хазипов Н.З. Достижения молекулярной биологии в животноводстве и ветеринарии (учебное пособие). Казань, 1997. - С. 45-53.

90. Хазипов Н.З., Аскарова А.Н. Молекулярная генодиагностика в ветеринарии: Монография. Казань: КГАВМ, 2002. - С. 79-97.

91. Хмеляускайте В.Г., Маурицас М.М., Бумялис В.В. Быстрый метод детекции бактерий рода Salmonella // ЖМЭИ. 1995. - №6. - С. 74-75.

92. Хмеляускайте В.Г., Маурицас М.М., Бумялис В.В. Экспресс-метод определения видовой принадлежности бактерий рода Salmonella с использованием полимеразной цепной реакции и рестрикционного анализа // ЖМЭИ. 1995. - №6. - С. 78-79.

93. Храповицкий А.Н. Проблема сальмонеллезов сегодня // Сб. науч. тр. -Ленингр. вет. ин-т. 1990. - Т. 107. - С. 122-125.

94. Хусаинова Г.И. Электрофоретические и антигенные свойства полипептидов различных штаммов бруцелл: Дис. . канд. биол. наук. Казань,2001.-153 с.

95. Цыбанова В.А., Котляров В.М. Современные методы типирования патогенных сальмонелл // Научные основы технологии производства ветеринарных биопрепаратов: Сб. докладов междунар. конф. молодых ученых 5-6 декабря 2002 г. Щелково, - 2002. - С. 80-84.

96. Чемерис А.В., Ахунов Э.Д., Вахитов В.А. Секвенирование ДНК. М.: Наука, 1999.-С. 339-345.

97. Шагинян И.А., Першина М.Ю. Генетические маркеры в эпидемиологии бактериальных инфекций И ЖМЭИ. 1997. - №4. - С. 54-59.

98. Шустер Б.Ю. Сальмонеллезы у животных // В кн.: Инфекционные болезни животных. Справочник. М.: ВО "Агропромиздат", - 1987. - С. 195.

99. Ягужинская О.Е., Раковская И.В., Смирнова T.JI. и др. Идентификация микоплазм и L-форм бактерий методом электрофореза в полиакрила-мидном геле // ЖМЭИ. 1974. - №4. - С. 85-91.

100. Яцышина С.Б. Выявление и типирование возбудителей сальмонеллеза молекулярно-генетическими методами: Автореф. дис. . канд. биол. наук. -М, 2003.-С. 24.

101. Яцышина С.Б., Обухов И.Д., Малахов Ю.А., Ленев С.В. Генетические причины проявления фенотипа Rif и Smr у бактерий рода Salmonella // Сб. научн. трудов ВГНКИ. Москва, - 2001. - Т. 62. - С. 57-64.

102. Amavisit P., Browning G., Lightfoot D. et al. Rapid PCR detection of Salmonella in horse faecal samples // Vet. Microbiol. 2001. - V.79. - N 1. - P. 63-74.

103. Ames G., Nikaido H. Two-dimensional gel electrophoresis of membrane proteins // Biochemistry. 1976. - N 3. - P. 616-623.

104. Aubertin A., Tondre L., Lopez C. et al. Sodium dodecyl sulfate-mediated transfer of electrophoretically separated DNA-binding proteins // Anal. Biochem.-1983.-V.131.-P. 127-134.

105. Bennasar A., de Luna G., Cabrer B. et al. Rapid identification of Salmonella typhimurium, S. enteritidis and S. virchow isolates by polymerase chain reaction based fingerprinting methods // Int. Microbiol. 2000. - V.3. — N 1. — P. 31-38.

106. Bergh D., Pattyn S. Comparison of proteins from Mycobacterium fortuctum, M. nonchromogenicum and Mycobacterium terrae using flat bed electrhoresis // J. Gen. microbial. 1979. - N 2. - P. 283-291.

107. Birnboim H., Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA // Nucleic Acids Res. 1979. - V.7. - P.1513.

108. Bittner M., Kupferer P., Morris C. Electrophoretic transfer of proteins and nucleic acids from slab gels to diazobenzyloxymethyl cellulose or nitrocellulose sheets // Anal. Biochem. 1980. - V.102. - P. 127-134.

109. Bode L., Beutin L., Kohler H. Nitrocelluloseenzime-linked immunosorbent assay (NC-ELISA) a sensitive technique for the rapid visual detection of both viral antigens and antibodies // J. Virol. Meth. - 1984. - V. 8. - N 1-2. -P. 111-121.

110. Boiano S., Colantonio L., Viscardi M. et al. Caratterizzazione di otto sierotipi di salmonella mediante RAPD-PCR // Ann. Fac. Sc. Agr. Univ. Studi Napoli. -Portici. 1996. - V.30. - P. 97-110.

111. Chart H., Shaw D., Ishiguro E., Trust T. Structural and immunochemical homogeneity of Aeromonas salmonicida lipopolysaccharide // J. Bacterid. -1983.-V.158.-P. 16-22.

112. Chen H., Chang G. Simultaneous immunoblotting analysis with activity gel electrophoresis in a single polyacrylamide gel // Electrophoresis. — 2001. -V.22.-N 10.-P. 1894-1899.

113. Chen W., Martinez G., Mulchandani A. Molecular beacons: a real-time polymerase chain reaction assay for detecting Salmonella // Anal. Biochem.- 2000. V.10. - N 1. - P. 166-172.

114. Combe M., Lemeland J., Pestel-Caron M. et al. Multilocus enzyme analysis in aerobic and anaerobic bacteria using gel electrophoresis-nitrocellulose blotting // Microbiol. Lett. 2000. - V.185. - N 2. - P. 169-174.

115. Cousland G., Poxton I. Analysis of lipopolysaccharides of Bacteroides fragi-lis by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and elec-troblot transfer // FEMS Microbiol. Lett. 1983. - V.20. - P. 461-465.

116. DelVecchio V., Petroziello J., Gress M. et al. Molecular genotyping of methicillin-resistant Stahylococcus aureus via fluorophore-enhanced Repetitive-sequence PCR // J. Clin. Microbiol. 1995. - V.33. - P. 2141-2144.

117. Ebner P., Mathew A. Three molecular methods to identify Salmonella enter-ica serotype Typhimurium DT104: PCR fingerprinting, multiplex PCR and rapid PFGE // J. Microbiol. Lett. 2001. - V.27. - N 1. - P. 25-29.

118. Echeita M., Usera M. Rapid identification of Salmonella spp. phase 2 antigens of the HI antigenic complex using "multiplex PCR" // Res. Microbiol. -1998. V.149. - N 10. - P. 757-761.

119. Erlich H. PCR technology: principles and applications for DNA amplification- Academic Press. N.Y., 1989.

120. Feder I., Nietfeld J., Galland J. et al. Comparison of cultivation and PCR-hybridization for detection of Salmonella in porcine fecal and water samples // J. Clin. Microbiol. 2001. - V.39. - N 7. - P.2477-2484.

121. Ferretti R., Mannazzu I., Cocolin L. et al. Twelve-hour PCR-based method for detection of Salmonella spp. in food // Appl. Environ. Microbiol. 2001. -V.67.-N2.-P. 977-988.

122. Fitts R., Diamond M., Hamilton C. et al. DNA-DNA hubrydization assay for detection of Salmonell spp. in foods // Appl. and Envizon.Microbiol. 1983. -N5.-P. 1146-1151.

123. Gafford L., Randall C. // J. Molecular Biol. 1967. - N 26. - P. 303.

124. Gershoni J., Palade G. Electrophoretic transfer of proteins from sodium do-decyl-sulfate-polyacrylamide gels to a positively charged membrane filter // Anal. Biochem. 1982. - V.131. - P. 396-405.

125. Gershoni J., Palade G. Protein blotting Principles and application // Anal. Biochem. 1983. - V.l 15. - P. 219-224.

126. Glynn P., Gilbert H., Newcombe J. et al. Rapid analysis of immunoglobulin isoelectric focusing patterns with cellulose nitrate sheets and immunoperoxi-dase staining // J. Immunol. Methods. 1982. - V.51.-P. 251-257.

127. Goldfarb M. Analysis of casein using two-dimensional electrophoresis, western blot, and computer imaging // Adv. Exp. Med. Biol. — 2001. V.501. - P. 535-539.

128. Hadson В., Quan Т., Bailey R. Electrophoretic studies of geographic distribution of Iersinia pestis protein variants // Intern. J. System. Bacter. 1976. -V26.-N l.-P. 1-16.

129. Hawkes R. Identification of concanavalin-A binding proteins after SDS-gel electrophoresis and protein blotting // Anal. Biochem. 1982. - V.123. - P. 143-146.

130. Helenins A., Simons K. Solubilization of membranes by detergents // Bio-chim. Biophys. Acta. 1975. - V.415. - N 1. - P. 29-79.

131. Hilton A., Banks J., Penn C. Optimization of RAPD for fingerprinting Salmonella // Lett. Appl. Microbiol. 1997. - V.24. - N 4. - P. 243-248.

132. Hilton A., Penn C. Comparison of ribotyping and arbitrarily primed PCR for molecular typing of Salmonella enterica and relationships between strains on the basis of these molecular markers // J. Appl. Microbiol. 1998. - V.85. -N6.-P. 933-940.

133. Hoorfar J., Baggesen D., Porting P. A PCR-based strategy for simple and rapid identification of rough presumptive Salmonella isolates // J. Microbiol. Methods. 1999. - V.35. - N 1. - P. 77-84.

134. Hulton C., Higgins C., Sharp P. ERIC sequences: a novel family of Repetitive elements in the genomes of Escherichia coli, Salmonella typhimurium and other enterobacteria // Mol. Microbiol. 1991. - V.5. - P. 825-834.

135. Ikadai H., Kabamoto S., Xuan X. et al. Protein analysis of Babesia caballi merozoites by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis and western blotting // J. Vet. Med. Sci. 2000. - V.62. - N 3. - P. 323-327.

136. Jones M., Krutzsch H., Shu H. et al. Proteomic analysis and identification of new biomarkers and therapeutic targets for invasive ovarian cancer // Pro-teomics. 2002. - V.2. - N 1. - P. 76-84.

137. Kawasaki S., Kimura В., Fujii T. Comparison of TaqMan Salmonella amplification/detection kit with standard culture procedure for detection of Salmonella in meat samples // Shokuhin. Eiseigaku. Zasshi. 2001. - V.42. - N 1. -P. 33-39.

138. Khan A., Nawaz M., Khan S. et al. Detection of multidrug-resistant Salmonella typhimurium DT104 by multiplex polymerase chain reaction // Microbiol. Lett. 2000. - V.15. - N 2. - P. 355-360.

139. Knutsson R., Lofstrom C., Grage H. et al. Modeling of 5' nuclease real-time responses for optimization of a high-throughput enrichment PCR procedure for Salmonella enterica // J. Clin. Microbiol. 2002. - V.40. - N 1. - P. 5260.

140. Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage TU // Nature (London). 1970. - V.222. - P. 680-685.

141. Larson S., Bickhams Т., Buchanow T. Polyacrylamide gel electrophoresis of Corynebacterium diphtherica; a possible epidemiological aid // J. Appl. Microbiol. 1974. - V.22. - P. 885-890.

142. Legocki R., Verna D. Multiple immunoreplica technique: screening for specific proteins with a series of different antibodies using one polyacrylamide gel // Anal. Biochem. 1981. - V.l 11. - P. 385-392.

143. Lin J., Tsen H. Development and use of polymerase chain reaction for the specific detection of Salmonella Typhimurium in stool and food samples // J. Food Prot. 1999. - V.62. - N 10. - P. 1103-1110.

144. Lin W., Kasamatsu H. On the electrotransfer of polypeptides from gels to nitrocellulose membranes // Anal. Biochem. 1983. - V.128. - P. 302-311.

145. Lugtenberg R. Structure and function of outer membrane proteins // Entero-bact. Surface Antigens: Meth. Mol. Characterist. Amsterdam e.a. - 1985. -P. 3-16.

146. Makino S., Kurazono H., Chongsanguam M. et al. Establishment of the PCR system specific to Salmonella spp. and its application for the inspection of food and fecal samples // J. Vet. Med. Sci. 1999. - V.61. - N 11. - P. 12451257.

147. Mandrell R., Zollinger W. Use of a zwitterionic detergent for the restoration of the antibody-binding capacity of electroblotted meningococcal outer membrane proteins // J. Immunol. Methods. 1984. - V.67. - P. 1-11.

148. Manzano M., Cocolin L., Astori G. et al. Development of a PCR microplate-capture hybridization method for simple, fast and sensitive detection of Salmonella serovars in food // Mol. Cell Probes. 1998. - V.12. - N 4. - P. 227234.

149. Mark P., Ben R., Martin B. et al. Proteomic analysis of the Escherichia coli outer membrane // Eur. J. Biochem. 2000. - V.267. - P. 2871-2881.

150. Marmur J. A procedure for isolation of DNA from microorganisms // J. Mol. Biol. 1961. - V.3. - P. 208-218.

151. Marshall D., Heisler L., Lyamishev V. et al. Determination of hepatitis С virus genotype in the United States by cleavase fragment length polymorphism analysis // J. Clin. Microbiol. 1997. - V.35. - P. 3156-3162.

152. Matthews-Greer J., Gilleland H. Protective activity of Pseudomonas aeruginosa outer membrane proteins // J. Infect. Disease. 1987. - V.155. - N 6. -P. 1282-1291.

153. Mc Clelland M., Sanderson K., Spieth J. et al. Complete genome sequence of Salmonella enterica serovar Typhimurium LT2 // Nature. 2001. - V.413. -P. 852-856.

154. Molloy M., Phadke N., Maddock J. et al. Two-dimensional electrophoresis and peptide mass fingerprinting of bacterial outer membrane proteins // Electrophoresis. 2001. - V.22. - N 9. - P. 1686-1696.

155. Nastasi A., Mammina C., Mioni R. Detection of Salmonella spp. in food by a rapid PCR-hybridization procedure // New Microbiol. — 1999. V.22. - N 3. -P. 195-202.

156. Ng L., Martin I., Alfa M. et al. Multiplex PCR for the detection of tetracycline resistant genes // Mol. Cell Probes. 2001. - V.15. - N 4. - P. 209-215.

157. Nguyen A., Khan M., Lu Zhiqiang Amplification of Salmonella Chromosomal DNA Using the Polymerase Chain Reaction // Avian Diseases. 1994. -V.38.-N1.- P. 119-126.

158. Noah D., Holly L., Deeann E. et al. Genus-specific detection of salmonellae in equine feces by use of the polymerase chain reaction // Am. J. Vet. Res. — 1994. V.55. - N 8. - P. 1049-1054.

159. Nogva H., Lillehaug D. Detection and quantification of Salmonella in pure cultures using 5-nuclease polymerase chain reaction //Int. J. Food Microbiol. 1999.-V.51.-N 2-3. - P. 191-196.

160. Ochs D. Protein contaminants of sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels // Anal. Biochem. 1983. - V.135. - P. 470-474.

161. Olive D., Bean P. Principles and application of methods for DNA-based typing of microbial organisms // J. Clin. Microbiol. 1999. - V.37. - P. 16611669.

162. Ornstein L. Disck electroforetic I Barky round and theory. - Amm. N.Y. Acad. Sci., 1964. - V.121. - P. 321-349.

163. Pitarch A., Pardo M., Jimenez A. et al. Two-dimensional gel electrophoresis as analytical tool for identifying Candida albicans immunogenic proteins // Electrophoresis. 1999. - V.20. - N 4-5. - P. 1001-1010.

164. Popoff M., Bockemuhl J., Brenner F. Supplement 1999 (no. 43) to the Kauffmann-White scheme // Res. Microbiol. 2000. - V.151. - N 10. - P. 893-896.

165. Premkumar В., Purushothaman V., Venkatesan R. Comparison of molecular weight estimation techniques: Bacterial plasmid DNA // Indian J. Animal Sciences.-1993.-V.63.-N 11.-P. 1146-1151.

166. Pudjiatmoko, Hideto Fukushi, Yoshitsugu Ochiai et al. Diversity of feline Chlamydia psittaci revealed by random amplification of polymorphic DNA // J. Vet. Microbiol. 1997. - V.54. - P. 73-83.

167. Pyle S., Schill W. Rapid Serological Analysis of Bacterial Lipopolysaccha-rides by Electrotransfer to Nitrocellulose // J. Immunol. Methods. 1985. -V.85.-P. 371-382.

168. Raamsdonk W., Pool C., Heyting C. Detection of antigens and antibodies by an immuno-peroxidase method applied on thin longitudinal sections of SDS-polyacrilamide gels // J. Immunol. Methods. 1977. - V.62. - P. 15-22.

169. Rajashekara G., Wanduragala D., Halvorson D. et al. A rapid strip immu-noblot assay for the specific detection of Salmonella enteritidis infection in chickens // Int. J. Food Microbiol. 1999. - V.53. - N 1. - P. 53-60.

170. Ramirez P., Bonilla J.A., Moreno E. et al. Electrophoretic transfer of viral proteins to nitrocellulose sheets and detection with peroxidase-bound lectins and protein A // J. Immunol. Methods. 1983. - V.54. - P. 15-22.

171. Rappolee D. Optimizing the sensitivity of RT PCR // A forum for PCR users: Issue U.- 1990.-P. 23.

172. Reen D. New developments in immunoblotting and associated detections systems // J. «Biochem. Soc. Trans.». 1988. - V.16. - N 2. - P. 131-134.

173. Reiser J., Wardale J. Immunological detection of specific proteins on total cell extracts by fractionation on gels and transfer to diazophenylthioether paper// Eur. J. Biochem. 1981. - V.l 14. - P. 569-575.

174. Renart J., Reiser J., Stark G. Transfer of proteins from gels to diazobensy-loxymethyl-paper and detection with antisera: A method for studying antibody specificity and antigen structure // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - V.76. — P. 3116-3120.

175. Russel R. Gasification of streptococcus mutants strains by SDS gel electrophoresis // FEMS Microbiol. Lett. 1976. - V.2. - N 5. - P. 55-59.

176. Rychlik I., Sisak F., Lany P. Differentiation of Salmonella enteritidis and S. typhimurium by plasmid profile analysis and restriction endonuclease analysis of chromosomal DNA // J. Vet. Med. -Czech. 1993. - V.38. - N 7. - P. 433-439.

177. Rychlik I., van Kesteren L., Cardova L. et al. Rapid detection of Salmonella in field samples by nested polymerase chain reaction // Lett. Appl. Microbiol. 1999. - V.29. - N 4. - P. 269-272.

178. Sandstrom G., Tarnvic A., Wolf-Watz H. Francisella tularensis outer membrane proteins // J. Clin. Microbiol. 1987. - V.25. - N 4. - P. 641-644.

179. Satheesh N., Thong K., Tikki P. et al. Characterization of Salmonella Sero-vars by PCR-Single-Strand Conformation Polymorphism Analysis // J. Clin. Microbiol. 2002. - V.40. - N 7. - P. 2346-2351.

180. Sato Т., Ito K., Yura T. Membrane proteins of E. coli K-12, two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis in inner and outer membrane // Europ. J. Biochem., 1977. - V.78. - N 2. - P. 557-567.

181. Savelkoul P., Aarts H., De Haas J. et al. Amplified-Fragment Length Polymorphism Analysis: the State of an Art // J. Clin. Microbiol. 1999. - V.37. -P. 3083-3091.

182. Scholz H., Arnold Т., Marg H. et al. Improvement of an invA-based PCR for the specific detection of Salmonella typhimurium in organs of pigs // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. 2001. - V.l 14. - N 9-10. - P. 401-403.

183. Schott K., Neunoff V., Potter U. et al. Staining of concanavalin A. Reactive glycoproteins on polyacrylamide gels with horseradish peroxidase A critical evaluation // Electrophoresis. - 1984. - V.5. - P. 77-83.

184. Sharma S., Mullenax J., Araujo F. et. al. Western blot analysis of the antigens of Toxoplasma gondii recognized by human IgG and IgM antibodies // J. Immunol. 1983. - V.131. - P. 977-983.

185. Soto S., Guerra В., Gonzalez-Hevia M. et al. Potential of three-Way randomly amplified polymorphic DNA analysis as a typing method for twelve Salmonella serotypes // Appl. Environ. Microbiol. 1999. - V.65. - N 11.-P. 4830-4836.

186. Soumet C., Ermel G., Rose V. et al. Identification by a multiplex PCR-based assay of Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis strains from environmental swabs of poultry houses // Lett. Appl. Microbiol. 1999. - V.29. -Nl.-P. 1-6.

187. Southern E. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis // J. Mol. Biol. 1975. - V.98. - P. 503-517.

188. Stanley J., Baquar N., Threlfale E. Genotypes and philogenetic relationships of Salmonella typhimurium are defined by molecular fingerprinting of IS200 and 16S rrn loci // J. Clin. Microbiol. 1993.-V. 139.-P. 1133-1140.

189. Stull Т., Li Puma J., Edling T. A broad-spectrum probe for molecular epidemiology of bacteria: ribosomal RNA // J. Infect. Dis. 1988. - V.157. - P. 280-286.

190. Sutton R., Wrigley C., Baldo B. Detection of Ig E- and Ig G-binding proteins after electrophoretic transfer from polyacrylamide gels // J. Immunol. Methods. 1982. - V.52. - P. 184-194.

191. Szabo E., Mackey B. Detection of Salmonella enteritidis by reverse tran-scription-polymerase chain reaction (PCR) // Int. J. Food Microbiol. -1999. V.51. - N 2-3. - P. 113-122.

192. Thedore Т., King J., Cole P. Identification of L-forms by polyaccrylamide gel electrophoresis // J. Bacterid. 1969. - V.97. - N 2. - P. 455-495.

193. Towbin H., Gordon J. Immunoblotting and dot immunobinding current status and outlook // J. Immunol. Methods. - 1984. - V.73. - P. 313-340.

194. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets. Procedure and some applications // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - V.76. - P. 4350-4354.

195. Troesch A., Nguyen H., Miyada C. et al. Mycobacterium species identification and rifampin resistance testing with high-density DNA probe arrays // J. Clin. Microbiol. 1999. - V.37. - P. 242-245.

196. Tsang V., Peralta J., Simons A. Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot techniques (EITB) for studying the specificities of antigens and antibodies separated by gel electrophoresis // Methods Enzymol. — 1983. V.92. - P. 377-391.

197. Udhayakumar V., Muthukkaruppan V. Immunogenic and protective properties of Salmonella typhimurium // Infect, and Immun. 1987. - V.55. - N 3. -P. 816-821.

198. Van Wyke K., Yewdell J., Reck L. et al. Antigenic characterization of influenza A virus matrix protein with monoclonal antibodies // J. Virol. 1984. — V.49.-P. 248-252.

199. Verma J., Gupta B. Auto- and non-auto transferable R-plasmids in some Salmonella strains // Indian J. of Animal Sciences. 1994. - V.64. - N 4. - P. 322-324.

200. Versalovic J., Kapur V., Koeuth T. et al. DNA fingerprinting of pathogenic bacteria by fluorophore-enhanced Repetitive sequence-based polymerase chain reaction // Arch. Pathol. Lab. Med. 1995. - V.l 19. - P. 23-29.

201. Wan J., King K., Craven H. et al. Probeliatrade mark PCR system for rapid detection of Salmonella in milk powder and ricotta cheese // Lett. Appl. Microbiol. 2000. - V.30. - N 4. - P. 267-271.

202. Watson J., Crick F. A structure for deoxyribose nucleic acid // Nature. -1953.-V.171.-P. 737-738.

203. Watson J., Crick F. Genetic implication of structure of deoxyribonucleic acid // Ibid. 1953. - V.171. - P. 964-967.

204. Weber K., Osborn M. The reliability of molecula weight determination by dodecylsulfatepolyacrylamide gel electrophoresis // J. Biol. Chem. 1969. -V.244. - N 16. - P. 4906-4912.

205. Wiedmann M., Wilson W., Crajka J. et al. // PCR Methods and Applications. 1994. - V.3. - N 4. - P. 551-564.

206. Wreghiit Т., Windsor G., Batter M. Flat gel polyacrylamide electrophoresis of porcine mycoplasmas // J. Appl. Microbiol. 1974. - V.28. - P. 530-533.

207. Yong-Ku Woo, Bang-Hun Hyun, Seuk-Chan Jung et al. Development of Rapid and Specific Diagnostic Methods for Detection of Salmonella Species Using Polymerase Chain Reaction (PCR) Method // RDA. J. Vet. Sci. 1997. -V.39.-N2.-P. 66-75.