Экспрессия маркеров клеток-предшественников и факторов ангиогенеза стромальными клетками жировой ткани тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Трактуев, Дмитрий Олегович

• Трактуев, Дмитрий Олегович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Трактуев, Дмитрий Олегович

Список сокращений.

Введение.

Обзор литературы.

Концепция роста и развития сосудистой сети.

Васкулогенез. Предшественники эндотелиальных клеток.

Гипоксия - механизм запуска ангиогенеза.

Ангиогенез. Стабилизация стенки сосуда.

Артериогенез. Ремоделирование стенки сосуда.

Лейкоциты и тромбоциты в ангиогенезе.

Протеазы в ангиогенезе и артериогенезе.

Генная терапия.

Генетические векторы.

Факторы, используемые для стимуляции ангиогенеза.

Клетки организма как основа клеточной терапии.

Представление о терапевтическом воздействии клеток.

Эмбриональные стволовые клетки.

Моноядерные клетки костного мозга.

Мезенхимальные стволовые клетки.

Предшественнники эндотелиальных клеток.

Миобласты.

Зрелые дифференцированные клетки взрослого организма.

Стромальные клетки жировой ткани.

Нейрональная дифференциация.

Дифференциация СКЖТ в клетки соединительной ткани.

Дифференциация СКЖТ в жировую ткань.

Дифференциация СКЖТ в костную ткань.

Дифференциация СКЖТ в хрящевую ткань.

Дифференциация СКЖТ в миогенную ткань.

Дифференциация СКЖТ в кардиомиоциты.

Клональный анализ клеток СКЖТ.

СКЖТ и гематопоэз.

Материал и методы исследования.

Эксперименты с культурами клеток.

Выделение стромальных клеток жировой ткани.

Выделение клеток из жировой ткани человека.

Выделение клеток из жирового отложения мыши.

Культивирование СКЖТ.

Анализ экспрессии антигенов на поверхности клеток.

Культивирование СКЖТ человека в условиях гипоксии.

Анализ способности СКЖТ человека к адипоцитарной дифференциации.

Молекулярные и биохимические эксперименты.

Анализ накопления факторов, секретируемых СКЖТ человека, в среде культивирования.

Определение активности бета-галактозидазы.

Анализ экспрессии мРНК СКЖТ человека.

Выделение РНК.

Реакция обратной транскрипции и полимеразно-цепная реакция в реальном времени.

Анализ влияния среды культивирования СКЖТ человека на рост ЭК.

Трансфекция СКЖТ человека.

Плазмидная трансфекция клеток.

Трансфекция клеток аденовирусом.

Трансфекция клеток лентивирусом.

Эксперименты на животных.

Имплантация чСКЖТ в матригеле.

Оценка выживаемости и миграции клеток.

Модель ишемии нижней конечности мыши и трансплантация СКЖТ.

Измерение кровотока.

Иммуногистохимический анализ.

Подготовка тканей.

Детектирование антигена мыши СЭ31 на срезах мышц и матригелей.

Детектирование антигенов человека СЭЗ1 и СЭ34 на срезах жировой ткани и щитовидной железы.

Подсчет капилляров.

Статистическая обработка данных.

Результаты исследования.

Выделение и культивирование СКЖТ человека.

Выделение и культивирование СКЖТ мыши.

Экспрессия антигенов на поверхности СКЖТ человека.

Экспрессия антигенов на поверхности СКЖТ мыши.

Влияние среды культивирования СКЖТ человека на способность клеток к адипоцитарной дифференциации.

Экспрессия факторов роста СКЖТ человека.

Влияние среды культивирования СКЖТ человека на пролиферацию эндотелиальных клеток.

Развитие сосудистой сети в клеточном имплантате.

Влияние системного введения СКЖТ человека на ангиогенез и восстановление кровотока в конечности мыши.

Анализ эффективности трансфекции СКЖТ человека.

Оценка выживания и миграции в мышечной ткани локально введенных чСКЖТ

Анализ влияния высокалорийной диеты на аккумуляцию СКЖТ в жировой ткани мыши.

Обсуждение результатов.

СКЖТ: анализ антигенов.

Влияние диеты на аккумуляцию СКЖТ.

Терапевтический потенциал СКЖТ.

Повышение терапевтического эффекта СКЖТ.

Возможные побочные эффекты использования СКЖТ.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия маркеров клеток-предшественников и факторов ангиогенеза стромальными клетками жировой ткани»

Сердечно-сосудистые заболевания являются наиболее частой причиной смертности во всем мире. Традиционные методы лечения данных заболеваний - медикаментозная терапия и хирургическое вмешательство (ангиопластика и аортокоронарное шунтирование). Каждый из этих подходов имеет свои недостатки: медикаментозное лечение - низкую эффективность, ангиопластика - необходимость повторения процедуры каждые три-пять лет, аортокоронарное шунтирование - необходимость проведения операции на открытом сердце. Кроме того, перечисленные методы лечения являются весьма дорогостоящими.

Одними из наиболее приоритетных направлений современной биомедицины и биотехнологии являются клеточная и тканевая трансплантологии. Огромное значение для пластической и восстановительной хирургии имеет аутологическая трансплантация клеток и тканей. Они всё шире применяются для восстановления тканей после удаления раковых образований, для замещения костных и хрящевых дефектов, а также для восстановления кожного покрова после ожогов. Исследования последних лет показали огромный потенциал клеточной трансплантологии для восстановления повреждений тканей сердца и мозга, вызванных инфарктами, инсультами и дегенеративными заболеваниями, а также при лечении ишемических болезней нижних конечностей и восстановлении функций печени и стимуляции кроветворения.

С точки зрения лабораторных и клинических испытаний в клеточной терапии наиболее изученными на данный момент являются эмбриональные стволовые клетки [13], скелетные миобласты [4-6], мезенхимальные клетки костного мозга (МККМ) [7, 8] и культивированные предшественники эндотелиальных клеток [7, 9, 10].

Несмотря на наличие терапевтического эффекта для многих типов клеток, сложность их получения в достаточном количестве и невозможность рутинного использования по этическим причинам (в случае эмбриональных стволовых клеток), а также болезненность процедуры получения клеток у пациентов (например, скелетных миобластов и МККМ), приводят к необходимости поиска других источников мультипотентных клеток.

Недавно было обнаружено, что в жировой ткани человека сконцентрирована популяция С034-позитивных (СЭ34+) клеток [11]. Экспрессия антигена С034 характерна для гематопоэтических клеток-предшественников [12-14], субпопуляций эндотелиальных клеток мелких сосудов [15-17], а также для субпопуляций стомальных клеток и их предшественников в костном мозге и ряде других органов [18-20]. Ранее было показано, что С034+ клетки способны дифференцироваться в эндотелиальные [21, 22] игладкомышечные клетки [22], а также в эпителиальные и нейрональные клетки [23]. Весьма вероятно, что клетки, полученные при обработке жировой ткани, представляют собой мультипотентные клетки стромы, принимающие участие в формировании жирового отложения [24].

Одним из наиболее важных преимуществ стромальных клеток жировой ткани при возможном их использовании в терапевтических целях является относительная легкость их выделения из ткани в значительном количестве. В результате ферментативной обработки коллагеназой образцов жировой ткани, полученной в результате косметической липосакции или в ходе хирургического удаления жирового отложения, выделяется суспензия отдельных клеток. Последующее центрифугирование полученной суспензии приводит к формированию осадочной фракции клеток, содержащей высокий процент СБ34+ клеток [25, 26].

Работы, проведенные группами иследователей в США, Германии, Франции и Японии, продемонстрировали, что популяция клеток, выделенная с помощью коллагеназной обработки жировой ткани, обладает способностью дифференцироваться в различные типы клеток. При культивировании в специально подобранных условиях клетки, относящиеся к стромальной, а не к адипоцитарной фракции жировой ткани, были способны дифференцироваться в адипоциты, хондроциты, в клетки костной ткани и другие типы клеток [27, 28].

К настоящему времени стромальные клетки жировой ткани (СКЖТ) были выделены из таких биологических видов, как человек [28], свинья [29], крыса [30, 31] и мышь [32]. Все популяции клеток, выделенные из разных видов, хотя и отличаются по набору основных маркеров, представленных на их мембранах, тем не менее содержат высокий процент клеток, обладающих схожей способностью дифференцироваться в различные типы клеток.

Цель данной работы заключалась в изучении проангиогенных свойств стромальных клеток жировой ткани и возможности их использования для стимуляции ангиогенеза при ишемии тканей в экспериментах на животных.

Для достижения этой цели необходимо было решить следующие экспериментальные задачи:• подобрать оптимальную методику выделения и культивирования СКЖТ человека и мыши;• проанализировать уровень экспрессии маркерных антигенов клеток-предшественников и эндотелиальных клеток на поверхности СКЖТ человека имыши, а также динамику экспрессии этих антигенов в процессе культивирования с помощью метода иммунофлюоресценции;• оценить экспрессию и секрецию СКЖТ ряда ангиогенных факторов роста в условиях нормоксии и гипоксии с помощью ПЦР в реальном времени и ИФА;• исследовать влияние культуральной среды СКЖТ, культивировавшихся в условиях нормоксии и гипоксии, на жизнеспособность и пролиферацию эндотелиальных клеток;• подобрать оптимальный метод трансфекции СКЖТ генетическими векторами различных типов и оценить динамику экспрессии трансгенов после различных методов трансфекции;• изучить способность СКЖТ стимулировать ангиогенез на моделях подкожного имплантанта и ишемии задней конечности мыши;• изучить влияние высококалорийной диеты на аккумуляцию мультипотентных клеток в жировой ткани.

В ходе данной работы впервые было показано, что гетерогенная популяция свежевыделенных СКЖТ содержит высокий процент клеток, экспрессирующих антигены клеток-предшественников (СБ34 для человека и 8са-1 для мыши); проведен анализ динамики экспрессии маркеров клеток-предшественников в процессе культивирования СКЖТ и показано обогащение популяции СКЖТ человека клетками, несущими маркеры мезенхимальных клеток костного мозга и уменьшение клеток, экспрессирующих антиген СЭ34.

Установлено, что СКЖТ человека секретируют в значительном количестве такие ангиогенные факторы, как УБвР, НОР, ЪРСР и др.; экспрессия и секреция этих факторов усиливается в 2-5 раз при культивировании клеток в условиях гипоксии.

Показано, что продукты секреции СКЖТ человека способствуют выживанию и пролиферации эндотелиальных клеток, а также стимулируют развитие сосудистой сети в подкожных имплантантах матригеля у мыши. Внутривенное введение иммунодефицитным мышам СКЖТ человека способствует восстановлению кровотока и предотвращению развития некроза стопы в ишемизированной конечности мыши.

Установлено, что СКЖТ человека поддаются трансфекции с высокой эффективностью вне зависимости от используемого вектора (плазмида, адено- или лентивирус). Показано, что высококалорийная диета вызывает аккумуляцию СКЖТ мыши в жировом отложении.

Результаты данной работы могут служить основой для разработки новых технологий использования стромальных клеток жировой ткани для аутологической клеточной трансплантации с целью стимуляции ангиогенеза при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, связанных с нарушением кровоснабжения тканей, а также для их использования в качестве переносчиков терапевтических генов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Трактуев, Дмитрий Олегович

выводы

1. Отработана методика выделения и культивирования стромальных клеток жировой ткани человека и мыши.

2. Популяции свежевыделенных СКЖТ гетерогенны и характеризуются высоким содержанием клеток, экспрессирующих антигены низкодифференцированных клеток-предшественников — СБ34 в случае клеток человека и 8са-1 — в случае мыши. По мере культивирования СКЖТ человека наблюдается обогащение популяции клетками, несущими маркеры мезен-химальных клеток костного мозга (>90%), и снижение доли С034-позитивных клеток. Продолжительное культивирование СКЖТ мыши приводит к обогащению популяции 8са-1 позитивными клетками, вплоть до 98%.

3. Стромальные клетки жировой ткани человека секретируют широкий набор проангиогенных факторов, таких как УЕСР, ЬРвР, РЮР и др., экспрессия которых усиливается в условиях гипоксии.

4. Гипоксия стимулирует пролиферацию СКЖТ человека, а среда культивирования СКЖТ обеспечивает выживаемость эндотелиальных клеток и стимулирует их пролиферацию в обедненной ростовыми факторами среде.

5. Имплантация СКЖТ человека в матригеле под кожу иммунодефицитным мышам стимулирует развитие капиллярной сети в имплантате, а внутривенное введение этих клеток мышам с ишемией задней конечности стимулирует ангиогенез в ишемизированных скелетных мышцах, что приводит к восстановлению кровотока в конечности.

6. При введении СКЖТ человека в мышцы задней конечности иммунодефицитных мышей до 20% клеток выживают в течение первой недели и мигрируют из области введения.

7. Стромальные клетки жировой ткани человека поддаются плазмидной, адено- и лентивирусным трансфекциям с высокой эффективностью, сохраняют высокую экспрессию трансгена до 14 - 30 дней. СКЖТ, трансфицированные плазмидой, кодирующей УЕвР, секретируют в среду культивирования в 20 раз больше УЕвР, чем интактные клетки.

8. Высококалорийная диета, приводящая к развитию жирового отложения, повышает общее количество выделяемых СКЖТ, но не оказывает значительного влияния на соотношение популяций клеток в выделяемых образцах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Трактуев, Дмитрий Олегович, 2005 год

1. Klug MG, Soonpaa MH, Koh GY, Field LJ: Genetically selected cardiomyocytes from differentiating embronic stem cells form stable intracardiac grafts. J Clin Invest 1996;98:216-224.

2. Smith AG: Embryo-derived stem cells: of mice and men. Annu Rev Cell Dev Biol 2001;17:435-462.

3. Yamashita J, Itoh H, Hirashima M, Ogawa M, Nishikawa S, Yurugi T, Naito M, Nakao K: Flkl-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. Nature 2000;408:92-96.

4. Menasche P: Skeletal muscle satellite cell transplantation. Cardiovasc Res 2003;58:351357.

5. Kawamoto A, Gwon HC, Iwaguro H, Yamaguchi JI, Uchida S, Masuda H, Silver M, Ma H, Kearney M, Isner JM, Asahara T: Therapeutic potential of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for myocardial ischemia. Circulation 2001;103:634-637.

6. Masuda H, Kalka C, Asahara T: Endothelial progenitor cells for regeneration. Hum Cell 2000; 13:153-160.

7. Stashower M, Smith K, Williams J, Skelton H: Stromal progenitor cells present within liposuction and reduction abdominoplasty fat for autologous transfer to aged skin. Dermatol Surg 1999;25:945-949.

8. Andrews RG, Singer JW, Bernstein ID: Monoclonal antibody 12-8 recognizes a115.kd molecule present on both unipotent and multipotent hematopoietic colony-forming cells and their precursors. Blood 1986;67:842-845.

9. Civin CI, Strauss LC, Brovall C, Fackler MJ, Schwartz JF, Shaper JH: Antigenic analysis of hematopoiesis. III. A hematopoietic progenitor cell surface antigen defined by a monoclonal antibody raised against KG-la cells. J Immunol 1984;133:157-165.

10. Katz FE, Tindle R, Sutherland DR, Greaves MF: Identification of a membrane glycoprotein associated with haemopoietic progenitor cells. Leuk Res 1985;9:191-198.

11. Baumheter S, Singer MS, Henzel W, Hemmerich S, Renz M, Rosen SD, Lasky LA: Binding of L-selectin to the vascular sialomucin CD34. Science 1993;262:436-438.

12. Delia D, Lampugnani MG, Resnati M, Dejana E, Aiello A, Fontanella E, Soligo D, Pierotti MA, Greaves MF: CD34 expression is regulated reciprocally with adhesion molecules in vascular endothelial cells in vitro. Blood 1993;81:1001-1008.

13. Fina L, Molgaard HV, Robertson D, Bradley NJ, Monaghan P, Delia D, Sutherland DR, Baker MA, Greaves MF: Expression of the CD34 gene in vascular endothelial cells. Blood 1990;75:2417-2426.

14. Garcia-Pacheco JM, Oliver C, Kimatrai M, Blanco FJ, Olivares EG: Human decidual stromal cells express CD34 and STRO-1 and are related to bone marrow stromal precursors. Mol Hum Reprod 2001 ;7:1151-1157.

15. Kuroda N, Nakayama H, Miyazaki E, Hayashi Y, Toi M, Hiroi M, Enzan H: Distribution and role of CD34-positive stromal cells and myofibroblasts in human normal testicular stroma. Histol Histopathol 2004;19:743-751.

16. Simmons PJ, Torok-Storb B: CD34 expression by stromal precursors in normal human adult bone marrow. Blood 1991;78:2848-2853.

17. Wijelath ES, Rahman S, Murray J, Patel Y, Savidge G, Sobel M: Fibronectin promotes VEGF-induced CD34 cell differentiation into endothelial cells. J Vase Surg 2004;39:655-660.

18. Yeh ET, Zhang S, Wu HD, Korbling M, Willerson JT, Estrov Z: Transdifferentiation of human peripheral blood CD34+-enriched cell population into cardiomyocytes, endothelial cells, and smooth muscle cells in vivo. Circulation 2003; 108:20702073.

19. Zhao Y, Glesne D, Huberman E: A human peripheral blood monocyte-derived subset acts as pluripotent stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A 2003;100:2426-2431.

20. Ailhaud G, Grimaldi P, Negrel R: Cellular and molecular aspects of adipose tissue development. Annu Rev Nutr 1992;12:207-233.

21. Rehman J, Traktuev D, Li J, Merfeld-Clauss S, Temm-Grove CJ, Bovenkerk JE, Pell CL, Johnstone BH, Considine RV, March KL: Secretion of angiogenic and antiapoptotic factors by human adipose stromal cells. Circulation 2004;109:1292-1298.

22. Zuk PA, Zhu M, Ashjian P, De Ugarte DA, Huang JI, Mizuno H, Alfonso ZC, Fraser JK, Benhaim P, Hedrick MH: Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol Biol Cell 2002;13:4279-4295.

23. Gronthos S, Franklin DM, Leddy HA, Robey PG, Storms RW, Gimble JM: Surface protein characterization of human adipose tissue-derived stromal cells. J Cell Physiol 2001;189:54-63.

24. Tchoukalova YD, Hausman DB, Angelova K, Hausman GJ: Tumor necrosis factor-alpha binding in porcine primary stromal-vascular cell cultures. In Vitro Cell Dev Biol Anim 2001;37:303-309.

25. Huang JI, Beanes SR, Zhu M, Lorenz HP, Hedrick MH, Benhaim P: Rat extramedullary adipose tissue as a source of osteochondrogenic progenitor cells. Plast Reconstr Surg 2002;109:1033-1041; discussion 1042-1033.

26. Tholpady SS, Katz AJ, Ogle RC: Mesenchymal stem cells from rat visceral fat exhibit multipotential differentiation in vitro. Anat Rec 2003;272A:398-402.

27. Cousin B, Andre M, Arnaud E, Penicaud L, Casteilla L: Reconstitution of lethally irradiated mice by cells isolated from adipose tissue. Biochem Biophys Res Commun 2003;301:1016-1022.

28. Noden DM: Embryonic origins and assembly of blood vessels. Am Rev Respir Dis 1989;140:1097-1103.

29. Asahara T, Takahashi T, Masuda H, Kalka C, Chen D, Iwaguro H, Inai Y, Silver M, Isner JM: VEGF contributes to postnatal neovascularization by mobilizing bone marrow-derived endothelial progenitor cells. Embo J 1999;18:3964-3972.

30. Rafii S: Circulating endothelial precursors: mystery, reality, and promise. J Clin Invest 2000;105:17-19.

31. Lin Y, Weisdorf DJ, Solovey A, Hebbel RP: Origins of circulating endothelial cells and endothelial outgrowth from blood. J Clin Invest 2000;105:71-77.

32. McBride JL, Ruiz JC: Ephrin-Al is expressed at sites of vascular development in the mouse. Mech Dev 1998;77:201-204.

33. Takahashi T, Kalka C, Masuda H, Chen D, Silver M, Kearney M, Magner M, Isner JM, Asahara T: Ischemia- and cytokine-induced mobilization of bone marrow-derived endothelial progenitor cells for neovascularization. Nat Med 1999;5:434-438.

34. Asahara T, Isner JM: Endothelial progenitor cells for vascular regeneration. J Hematother Stem Cell Res 2002; 11:171-178.

35. Murayama T, Asahara T: Bone marrow-derived endothelial progenitor cells for vascular regeneration. Curr Opin Mol Ther 2002;4:395-402.

36. Reyes M, Dudek A, Jahagirdar B, Koodie L, Marker PH, Verfaillie CM: Origin of endothelial progenitors in human postnatal bone marrow. J Clin Invest 2002;109:337-346.

37. Ferrara N: Role of vascular endothelial growth factor in the regulation of angiogenesis. Kidney Int 1999;56:794-814.

38. Ferrara N, Carver-Moore K, Chen H, Dowd M, Lu L, O'Shea KS, Powell-Braxton L, Hillan KJ, Moore MW: Heterozygous embryonic lethality induced by targeted inactivation of the VEGF gene. Nature 1996;380:439-442.

39. Shalaby F, Ho J, Stanford WL, Fischer KD, Schuh AC, Schwartz L, Bernstein A, Rossant J: A requirement for Flkl in primitive and definitive hematopoiesis and vasculogenesis. Cell 1997;89:981-990.

40. Fong GH, Zhang L, Bryce DM, Peng J: Increased hemangioblast commitment, not vascular disorganization, is the primary defect in flt-1 knock-out mice. Development 1999;126:3015-3025.

41. Rehman J, Li J, Orschell CM, March KL: Peripheral blood "endothelial progenitor cells" are derived from monocyte/macrophages and secrete angiogenic growth factors. Circulation 2003;107:1164-1169.

42. Mikkola HK, Orkin SH: The search for the hemangioblast. J Hematother Stem Cell Res 2002;11:9-17.

43. Suda T, Takakura N, Oike Y: Hematopoiesis and angiogenesis. Int J Hematol 2000;71:99-107.

44. Takakura N, Watanabe T, Suenobu S, Yamada Y, Nöda T, Ito Y, Satake M, Suda T: A role for hematopoietic stem cells in promoting angiogenesis. Cell 2000;102:199-209.

45. Salven P, Hattori K, Heissig B, Rafii S: Interleukin-1 alpha promotes angiogenesis in vivo via VEGFR-2 pathway by inducing inflammatory cell VEGF synthesis and secretion. Faseb J 2002;16:1471-1473.

46. Banai S, Shweiki D, Pinson A, Chandra M, Lazarovici G, Keshet E: Upregulation of vascular endothelial growth factor expression induced by myocardial ischaemia: implications for coronary angiogenesis. Cardiovasc Res 1994;28:1176-1179.

47. Jiang BH, Rue E, Wang GL, Roe R, Semenza GL: Dimerization, DNA binding, and transactivation properties of hypoxia-inducible factor 1. J Biol Chem 1996;271:17771-17778.

48. Semenza GL: HIF-1 and human disease: one highly involved factor. Genes Dev 2000;14:1983-1991.

49. Cormier-Regard S, Nguyen SV, Claycomb WC: Adrenomedullin gene expression is developmentally regulated and induced by hypoxia in rat ventricular cardiac myocytes. J Biol Chem 1998;273:17787-17792.

50. Feldser D, Agani F, Iyer NV, Pak B, Ferreira G, Semenza GL: Reciprocal positive regulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha and insulin-like growth factor 2. Cancer Res 1999;59:3915-3918.

51. Liu Y, Cox SR, Morita T, Kourembanas S: Hypoxia regulates vascular endothelial growth factor gene expression in endothelial cells. Identification of a 5' enhancer. Circ Res 1995;77:638-643.

52. Maxwell PH, Wiesener MS, Chang GW, Clifford SC, Vaux EC, Cockman ME, Wykoff CC, Pugh CW, Mäher ER, Ratcliffe PJ: The tumour suppressor protein VHL targets hypoxia-inducible factors for oxygen-dependent proteolysis. Nature 1999;399:271-275.

53. Iyer NV, Kotch LE, Agani F, Leung SW, Laughner E, Wenger RH, Gassmann M, Gearhart JD, Lawler AM, Yu AY, Semenza GL: Cellular and developmental control of 02 homeostasis by hypoxia-inducible factor 1 alpha. Genes Dev 1998;12:149-162.

54. Palmer LA, Semenza GL, Stoler MH, Johns RA: Hypoxia induces type II NOS gene expression in pulmonary artery endothelial cells via HIF-1. Am J Physiol 1998;274:L212-219.

55. Six I, Kureishi Y, Luo Z, Walsh K: Akt signaling mediates VEGF/VPF vascular permeability in vivo. FEBS Lett 2002;532:67-69.

56. Eliceiri BP, Paul R, Schwartzberg PL, Hood JD, Leng J, Cheresh DA: Selective requirement for Src kinases during VEGF-induced angiogenesis and vascular permeability. Mol Cell 1999;4:915-924.

57. Gale NW, Yancopoulos GD: Growth factors acting via endothelial cell-specific receptor tyrosine kinases: VEGFs, angiopoietins, and ephrins in vascular development. Genes Dev 1999;13:1055-1066.

58. Flaumenhaft R, Rifkin DB: The extracellular regulation of growth factor action. Mol Biol Cell 1992;3:1057-1065.

59. Houck KA, Leung DW, Rowland AM, Winer J, Ferrara N: Dual regulation of vascular endothelial growth factor bioavailability by genetic and proteolytic mechanisms. J Biol Chem 1992;267:26031-26037.

60. Naldini L, Vigna E, Bardelli A, Follenzi A, Galimi F, Comoglio PM: Biological activation of pro-HGF (hepatocyte growth factor) by urokinase is controlled by a stoichiometric reaction. J Biol Chem 1995;270:603-611.

61. Carmeliet P: Fibroblast growth factor-1 stimulates branching and survival of myocardial arteries: a goal for therapeutic angiogenesis? Circ Res 2000;87:176-178.

62. Suri C, Jones PF, Patan S, Bartunkova S, Maisonpierre PC, Davis S, Sato TN, Yancopoulos GD: Requisite role of angiopoietin-1, a ligand for the TIE2 receptor, during embryonic angiogenesis. Cell 1996;87:1171-1180.

63. Holash J, Maisonpierre PC, Compton D, Boland P, Alexander CR, Zagzag D, Yancopoulos GD, Wiegand SJ: Vessel cooption, regression, and growth in tumors mediated by angiopoietins and VEGF. Science 1999;284:1994-1998.

64. Papapetropoulos A, Fulton D, Mahboubi K, Kalb RG, O'Connor DS, Li F, Altieri DC, Sessa WC: Angiopoietin-1 inhibits endothelial cell apoptosis via the Akt/survivin pathway. J Biol Chem 2000;275:9102-9105.

65. Suri C, McClain J, Thurston G, McDonald DM, Zhou H, Oldmixon EH, Sato TN, Yancopoulos GD: Increased vascularization in mice overexpressing angiopoietin-1. Science 1998;282:468-471.

66. Ilan N, Mahooti S, Rimra DL, Madri JA: PEC AM-1 (CD31) functions as a reservoir for and a modulator of tyrosine-phosphorylated beta-catenin. J Cell Sei 1999; 112 Pt 18:3005-3014.

67. Huynh-Do U, Stein E, Lane AA, Liu H, Cerretti DP, Daniel TO: Surface densities of ephrin-Bl determine EphB 1-coupled activation of cell attachment through alphavbeta3 and alpha5betal integrins. Embo J 1999;18:2165-2173.

68. Shima DT, Mailhos C: Vascular developmental biology: getting nervous. Curr Opin Genet Dev 2000;10:536-542.

69. Wilkinson DG: Eph receptors and ephrins: regulators of guidance and assembly. Int Rev Cytol 2000;196:177-244.

70. Knudsen KA, Frankowski C, Johnson KR, Wheelock MJ: A role for Cadherins in cellular signaling and differentiation. J Cell Biochem Suppl 1998;30-31:168-176.

71. Brooks PC, Clark RA, Cheresh DA: Requirement of vascular integrin alpha v beta 3 for angiogenesis. Science 1994;264:569-571.

72. Brooks PC, Montgomery AM, Rosenfeld M, Reisfeld RA, Hu T, Klier G, Cheresh DA: Integrin alpha v beta 3 antagonists promote tumor regression by inducing apoptosis of angiogenic blood vessels. Cell 1994;79:1157-1164.

73. Sottile J: Regulation of angiogenesis by extracellular matrix. Biochim Biophys Acta 2004;1654:13-22.

74. Benjamin LE, Hemo I, Keshet E: A plasticity window for blood vessel remodelling is defined by pericyte coverage of the preformed endothelial network and is regulated by PDGF-B and VEGF. Development 1998;125:1591-1598.

75. Jain RK: Molecular regulation of vessel maturation. Nat Med 2003;9:685-693.

76. Lindahl P, Bostrom H, Karlsson L, Hellstrom M, Kaien M, Betsholtz C: Role of platelet-derived growth factors in angiogenesis and alveogenesis. Curr Top Pathol 1999;93:27-33.

77. Carmeliet P: Developmental biology. One cell, two fates. Nature 2000;408:43, 45.

78. Dettman RW, Denetclaw W, Jr., Ordahl CP, Bristow J: Common epicardial origin of coronary vascular smooth muscle, perivascular fibroblasts, and intermyocardial fibroblasts in the avian heart. Dev Biol 1998;193:169-181.

79. Carmeliet P: Mechanisms of angiogenesis and arteriogenesis. Nat Med 2000;6:389-395.

80. Carmeliet P, Jain RK: Angiogenesis in cancer and other diseases. Nature 2000;407:249-257.

81. O'Reilly MS, Boehm T, Shing Y, Fukai N, Vasios G, Lane WS, Flynn E, Birkhead JR, Olsen BR, Folkman J: Endostatin: an endogenous inhibitor of angiogenesis and tumor growth. Cell 1997;88:277-285.

82. O'Reilly MS, Holmgren L, Shing Y, Chen C, Rosenthal RA, Moses M, Lane WS, Cao Y, Sage EH, Folkman J: Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma. Cell 1994;79:315-328.

83. Hellstrom M, Gerhardt H, Kaien M, Li X, Eriksson U, Wo Iburg H, Betsholtz C: Lack of pericytes leads to endothelial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis. J Cell Biol 2001;153:543-553.

84. Lindahl P, Hellstrom M, Kaien M, Betsholtz C: Endothelial-perivascular cell signaling in vascular development: lessons from knockout mice. Curr Opin Lipidol 1998;9:407-411.

85. Gohongi T, Fukumura D, Boucher Y, Yun CO, Soff GA, Compton C, Todoroki T, Jain RK: Tumor-host interactions in the gallbladder suppress distal angiogenesis and tumor growth: involvement of transforming growth factor betal. Nat Med 1999;5:1203-1208.

86. Kamiya A, Togawa T: Adaptive regulation of wall shear stress to flow change in the canine carotid artery. Am J Physiol 1980;239:H14-21.

87. Zarins CK, Zatina MA, Giddens DP, Ku DN, Glagov S: Shear stress regulation of artery lumen diameter in experimental atherogenesis. J Vase Surg 1987;5:413-420.

88. Helisch A, Schaper W: Arteriogenesis: the development and growth of collateral arteries. Microcirculation 2003;10:83-97.

89. Scholz D, Ito W, Fleming I, Deindl E, Sauer A, Wiesnet M, Busse R, Schaper J, Schaper W: Ultrastructure and molecular histology of rabbit hind-limb collateral artery growth (arteriogenesis). Virchows Arch 2000;436:257-270.

90. Shyy YJ, Hsieh HJ, Usami S, Chien S: Fluid shear stress induces a biphasic response of human monocyte chemotactic protein 1 gene expression in vascular endothelium. Proc Natl Acad Sri U S A 1994;91:4678-4682.

91. Heil M, Ziegelhoeffer T, Pipp F, Kostin S, Martin S, Clauss M, Schaper W: Blood monocyte concentration is critical for enhancement of collateral artery growth. Am J Physiol Heart Circ Physiol 2002;283:H2411-2419.

92. Buschmann IR, Hoefer IE, van Royen N, Katzer E, Braun-Dulleaus R, Heil M, Kostin S, Bode C, Schaper W: GM-CSF: a strong arteriogenic factor acting by amplification of monocyte function. Atherosclerosis 2001; 159:343-356.

93. Voskuil M, van Royen N, Hoefer IE, Seidler R, Guth BD, Bode C, Schaper W, Piek JJ, Buschmann IR: Modulation of collateral artery growth in a porcine hindlimb ligation model using MCP-1. Am J Physiol Heart Circ Physiol 2003;284:H1422-1428.

94. Arras M, I to WD, Scholz D, Winkler B, Schaper J, Schaper W: Monocyte activation in angiogenesis and collateral growth in the rabbit hindlimb. J Clin Invest 1998;101:40-50.

95. Arras M, Strasser R, Mohri M, Doll R, Eckert P, Schaper W, Schaper J: Tumor necrosis factor-alpha is expressed by monocytes/macrophages following cardiac microembolization and is antagonized by cyclosporine. Basic Res Cardiol 1998;93:97-107.

96. Li DY, Brooke B, Davis EC, Mecham RP, Sorensen LK, Boak BB, Eichwald E, Keating MT: Elastin is an essential determinant of arterial morphogenesis. Nature 1998;393:276-280.

97. Pereira L, Andrikopoulos K, Tian J, Lee SY, Keene DR, Ono R, Reinhardt DP, Sakai LY, Biery NJ, Bunton T, Dietz HC, Ramirez F: Targetting of the gene encoding fibrillin-1 recapitulates the vascular aspect of Marfan syndrome. Nat Genet 1997;17:218-222.

98. Norrby K: Mast cells and angiogenesis. Apmis 2002;110:355-371.

99. Li XF, Charnock-Jones DS, Zhang E, Hiby S, Malik S, Day K, Licence D, Bowen JM, Gardner L, King A, Loke YW, Smith SK: Angiogenic growth factor messenger ribonucleic acids in uterine natural killer cells. J Clin Endocrinol Metab 2001;86:1823-1834.

100. Sica A, Saccani A, Mantovani A: Tumor-associated macrophages: a molecular perspective. Int Immunopharmacol 2002;2:1045-1054.

101. Coussens LM, Raymond WW, Bergers G, Laig-Webster M, Behrendtsen O, Werb Z, Caughey GH, Hanahan D: Inflammatory mast cells up-regulate angiogenesis during squamous epithelial carcinogenesis. Genes Dev 1999;13:1382-1397.

102. Banchereau J, Steinman RM: Dendritic cells and the control of immunity. Nature 1998;392:245-252.

103. Schmeisser A, Strasser RH: Phenotypic overlap between hematopoietic cells with suggested angioblastic potential and vascular endothelial cells. J Hematother Stem Cell Res 2002;11:69-79.

104. Carmeliet P: Biomedicine. Clotting factors build blood vessels. Science 2001;293:1602-1604.

105. Trikha M, Nakada MT: Platelets and cancer: implications for antiangiogenic therapy. Semin Thromb Hemost 2002;28:39-44.

106. Carmeliet P, Collen D: Development and disease in proteinase-deficient mice: role of the plasminogen, matrix metalloproteinase and coagulation system. Thromb Res 1998;91:255-285.

107. Jackson C: Matrix metalloproteinases and angiogenesis. Curr Opin Nephrol Hypertens 2002; 11:295-299.

108. Pepper MS: Role of the matrix metalloproteinase and plasminogen activator-plasmin systems in angiogenesis. Arterioscler Thromb Vase Biol 2001 ;21:1104-1117.

109. Pepper MS: Extracellular proteolysis and angiogenesis. Thromb Haemost 2001;86:346-355.

110. Luttun A, Dewerchin M, Collen D, Carmeliet P: The role of proteinases in angiogenesis, heart development, restenosis, atherosclerosis, myocardial ischemia, and stroke: insights from genetic studies. Curr Atheroscler Rep 2000;2:407-416.

111. Keyt BA, Berleau LT, Nguyen HV, Chen H, Heinsohn H, Vandlen R, Ferrara N: The carboxyl-terminal domain (111-165) of vascular endothelial growth factor is critical for its mitogenic potency. J Biol Chem 1996;271:7788-7795.

112. Plouet J, Moro F, Bertagnolli S, Coldeboeuf N, Mazarguil H, Clamens S, Bayard F: Extracellular cleavage of the vascular endothelial growth factor 189-amino acid form by urokinase is required for its mitogenic effect. J Biol Chem 1997;272:13390-13396.

113. Bajou K, Noel A, Gerard RD, Masson V, Brunner N, Holst-Hansen C, Skobe M, Fusenig NE, Carmeliet P, Collen D, Foidart JM: Absence of host plasminogen activator inhibitor 1 prevents cancer invasion and vascularization. Nat Med 1998;4:923-928.

114. Nelson AR, Fingleton B, Rothenberg ML, Matrisian LM: Matrix metalloproteinases: biologic activity and clinical implications. J Clin Oncol 2000;18:1135-1149.

115. Brew K, Dinakarpandian D, Nagase H: Tissue inhibitors of metalloproteinases: evolution, structure and function. Biochim Biophys Acta 2000;1477:267-283.

116. Pozzi A, Moberg PE, Miles LA, Wagner S, Soloway P, Gardner HA: Elevated matrix metalloprotease and angiostatin levels in integrin alpha 1 knockout mice cause reduced tumor vascularization. Proc Natl Acad Sci U S A 2000;97:2202-2207.

117. Bein K, Simons M: Thrombospondin type 1 repeats interact with matrix metalloproteinase 2. Regulation of metalloproteinase activity. J Biol Chem 2000;275:32167-32173.

118. Yla-Herttuala S, Martin JF: Cardiovascular gene therapy. Lancet 2000;355:213222.

119. Kootstra NA, Verma IM: Gene therapy with viral vectors. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2003;43:413-439.

120. Yang Y, Nunes FA, Berencsi K, Furth EE, Gonczol E, Wilson JM: Cellular immunity to viral antigens limits El-deleted adenoviruses for gene therapy. Proc Natl Acad Sci USA 1994;91:4407-4411.

121. Muruve DA, Barnes MJ, Stillman IE, Libermann TA: Adenoviral gene therapy leads to rapid induction of multiple chemokines and acute neutrophil-dependent hepatic injury in vivo. Hum Gene Ther 1999;10:965-976.

122. Zhang Y, Chirmule N, Gao GP, Qian R, Croyle M, Joshi B, Tazelaar J, Wilson JM: Acute cytokine response to systemic adenoviral vectors in mice is mediated by dendritic cells and macrophages. Mol Ther 2001;3:697-707.

123. Naldini L, Blomer U, Gallay P, Ory D, Mulligan R, Gage FH, Verma IM, Trono D: In vivo gene delivery and stable transduction of nondividing cells by a lentiviral vector. Science 1996;272:263-267.

124. Trono D: Lentiviral vectors: turning a deadly foe into a therapeutic agent. Gene Ther 2000;7:20-23.

125. Monahan PE, Samulski RJ: AAV vectors: is clinical success on the horizon? Gene Ther 2000;7:24-30.

126. Springer ML, Chen AS, Kraft PE, Bednarski M, Blau HM: VEGF gene delivery to muscle: potential role for vasculogenesis in adults. Mol Cell 1998;2:549-558.

127. Marshall E: Gene therapy. Second child in French trial is found to have leukemia. Science 2003;299:320.

128. Silvestre JS, Tamarat R, Ebrahimian TG, Le-Roux A, Clergue M, Emmanuel F, Duriez M, Schwartz B, Branellec D, Levy BI: Vascular endothelial growth factor-B promotes in vivo angiogenesis. Circ Res 2003;93:114-123.

129. Park JE, Chen HH, Winer J, Houck KA, Ferrara N: Placenta growth factor. Potentiation of vascular endothelial growth factor bioactivity, in vitro and in vivo, and high affinity binding to Flt-1 but not to Flk-l/KDR. J Biol Chem 1994;269:25646-25654.

130. Davis S, Aldrich TH, Jones PF, Acheson A, Compton DL, Jain V, Ryan TE, Bruno J, Radziejewski C, Maisonpierre PC, Yancopoulos GD: Isolation of angiopoietin-1, a ligand for the TIE2 receptor, by secretion-trap expression cloning. Cell 1996;87:1161-1169.

131. Shyu KG, Manor O, Magner M, Yancopoulos GD, Isner JM: Direct intramuscular injection of plasmid DNA encoding angiopoietin-1 but not angiopoietin-2 augments revascularization in the rabbit ischemic hindlimb. Circulation 1998;98:2081-2087.

132. Arsic N, Zentilin L, Zacchigna S, Santoro D, Stanta G, Salvi A, Sinagra G, Giacca M: Induction of functional neovascularization by combined VEGF and angiopoietin-1 gene transfer using AAV vectors. Mol Ther 2003;7:450-459.

133. Chae JK, Kim I, Lim ST, Chung MJ, Kim WH, Kim HG, Ko JK, Koh GY: Coadministration of angiopoietin-1 and vascular endothelial growth factor enhances collateral vascularization. Arterioscler Thromb Vase Biol 2000;20:2573-2578.

134. Javerzat S, Auguste P, Bikfalvi A: The role of fibroblast growth factors in vascular development. Trends Mol Med 2002;8:483-489.

135. Galzie Z, Kinsella AR, Smith J A: Fibroblast growth factors and their receptors. Biochem Cell Biol 1997;75:669-685.

136. Grines CL, Watkins MW, Helmer G, Penny W, Brinker J, Marmur JD, West A, Rade JJ, Marrott P, Hammond HK, Engler RL: Angiogenic Gene Therapy (AGENT) trial in patients with stable angina pectoris. Circulation 2002;105:1291-1297.

137. Rosen EM, Grant DS, Kleinman HK, Goldberg ID, Bhargava MM, Nickoloff BJ, Kinsella JL, Polverini P: Scatter factor (hepatocyte growth factor) is a potent angiogenesis factor in vivo. Symp Soc Exp Biol 1993;47:227-234.

138. Camussi G, Montrucchio G, Lupia E, Soldi R, Comoglio PM, Bussolino F: Angiogenesis induced in vivo by hepatocyte growth factor is mediated by platelet-activating factor synthesis from macrophages. J Immunol 1997;158:1302-1309.

139. Sengupta S, Gherardi E, Sellers LA, Wood JM, Sasisekharan R, Fan TP: Hepatocyte growth factor/scatter factor can induce angiogenesis independently of vascular endothelial growth factor. Arterioscler Thromb Vase Biol 2003;23:69-75.

140. Zhang YW, Su Y, Volpert OV, Vande Woude GF: Hepatocyte growth factor/scatter factor mediates angiogenesis through positive VEGF and negative thrombospondin 1 regulation. Proc Natl Acad Sci U S A 2003;100:12718-12723.

141. Ito WD, Arras M, Winkler B, Scholz D, Schaper J, Schaper W: Monocyte chemotactic protein-1 increases collateral and peripheral conductance after femoral artery occlusion. Circ Res 1997;80:829-837.

142. Nabel EG: Stem cells combined with gene transfer for therapeutic vasculogenesis: magic bullets? Circulation 2002;105:672-674.

143. Iwaguro H, Yamaguchi J, Kalka C, Murasawa S, Masuda H, Hayashi S, Silver M, Li T, Isner JM, Asahara T: Endothelial progenitor cell vascular endothelial growth factor gene transfer for vascular regeneration. Circulation 2002;105:732-738.

144. Levenberg S, Golub JS, Amit M, Itskovitz-Eldor J, Langer R: Endothelial cells derived from human embryonic stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A 2002;99:4391-4396.

145. Shintani S, Murohara T, Ikeda H, Ueno T, Sasaki K, Duan J, Imaizumi T: Augmentation of postnatal neovascularization with autologous bone marrow transplantation. Circulation 2001 ; 103:897-903.

146. Tomita S, Li RK, Weisel RD, Mickle DA, Kim EJ, Sakai T, Jia ZQ: Autologous transplantation of bone marrow cells improves damaged heart function. Circulation 1999;100:11247-256.

147. Strauer BE, Brehm M, Zeus T, Kostering M, Hernandez A, Sorg RV, Kogler G, Wernet P: Repair of infarcted myocardium by autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in humans. Circulation 2002;106:1913-1918.

148. Conget PA, Minguell JJ: Phenotypical and functional properties of human bone marrow mesenchymal progenitor cells. J Cell Physiol 1999;181:67-73.

149. Minguell JJ, Erices A, Conget P: Mesenchymal stem cells. Exp Biol Med (Maywood) 2001;226:507-520.

150. Pittenger MF, Mackay AM, Beck SC, Jaiswal RK, Douglas R, Mosca JD, Moorman MA, Simonetti DW, Craig S, Marshak DR: Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science 1999;284:143-147.

151. Fukuda K: Development of regenerative cardiomyocytes from mesenchymal stem cells for cardiovascular tissue engineering. Artif Organs 2001;25:187-193.

152. Torna C, Pittenger MF, Cahill KS, Byrne BJ, Kessler PD: Human mesenchymal stem cells differentiate to a cardiomyocyte phenotype in the adult murine heart. Circulation 2002;105:93-98.

153. Asahara T, Murohara T, Sullivan A, Silver M, van der Zee R, Li T, Witzenbichler B, Schatteman G, Isner JM: Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science 1997;275:964-967.

154. Kalka C, Masuda H, Takahashi T, Kalka-Moll WM, Silver M, Kearney M, Li T, Isner JM, Asahara T: Transplantation of ex vivo expanded endothelial progenitor cells for therapeutic neovascularization. Proc Natl Acad Sei U S A 2000;97:3422-3427.

155. Kang HJ, Kim SC, Kim YJ, Kim CW, Kim JG, Ahn HS, Park SI, Jung MH, Choi BC, Kimm K: Short-term phytohaemagglutinin-activated mononuclear cells induce endothelial progenitor cells from cord blood CD34+ cells. Br J Haematol 2001 ;113:962-969.

156. Shi Q, Rafii S, Wu MH, Wijelath ES, Yu C, Ishida A, Fujita Y, Kothari S, Mohle R, Sauvage LR, Moore MA, Storb RF, Hammond WP: Evidence for circulating bone marrow-derived endothelial cells. Blood 1998;92:362-367.

157. Quirici N, Soligo D, Caneva L, Servida F, Bossolasco P, Deliliers GL: Differentiation and expansion of endothelial cells from human bone marrow CD133(+) cells. Br J Haematol 2001; 115:186-194.

158. Murohara T, Ikeda H, Duan J, Shintani S, Sasaki K, Eguchi H, Onitsuka I, Matsui K, Imaizumi T: Transplanted cord blood-derived endothelial precursor cells augment postnatal neovascularization. J Clin Invest 2000;105:1527-1536.

159. Campion DR: The muscle satellite cell: a review. Int Rev Cytol 1984;87:225-251.

160. Menasche P, Hagege AA, Scorsin M, Pouzet B, Desnos M, Duboc D, Schwartz K, Vilquin JT, Marolleau JP: Myoblast transplantation for heart failure. Lancet 2001;357:279-280.

161. Koh GY, Klug MG, Soonpaa MH, Field LJ: Differentiation and long-term survival of C2C12 myoblast grafts in heart. J Clin Invest 1993;92:1548-1554.

162. Murry CE, Wiseman RW, Schwartz SM, Hauschka SD: Skeletal myoblast transplantation for repair of myocardial necrosis. J Clin Invest 1996;98:2512-2523.

163. Atkins BZ, Lewis CW, Kraus WE, Hutcheson KA, Glower DD, Taylor DA: Intracardiac transplantation of skeletal myoblasts yields two populations of striated cells in situ. Ann Thorac Surg 1999;67:124-129.

164. Suzuki K, Murtuza B, Smolenski RT, Sammut IA, Suzuki N, Kaneda Y, Yacoub MH: Cell transplantation for the treatment of acute myocardial infarction using vascular endothelial growth factor-expressing skeletal myoblasts. Circulation 2001;104:1207-212.

165. Reinlib L, Field L: Cell transplantation as future therapy for cardiovascular disease? A workshop of the National Heart, Lurig, and Blood Institute. Circulation 2000; 101 :E182-187.

166. Koh GY, Soonpaa MH, Klug MG, Pride HP, Cooper BJ, Zipes DP, Field LJ: Stable fetal cardiomyocyte grafts in the hearts of dystrophic mice and dogs. J Clin Invest 1995;96:2034-2042.

167. Li RK, Jia ZQ, Weisel RD, Merante F, Mickle DA: Smooth muscle cell transplantation into myocardial scar tissue improves heart function. J Mol Cell Cardiol 1999;31:513-522.

168. Rajnoch C, Chachques JC, Berrebi A, Bruneval P, Benoit MO, Carpentier A: Cellular therapy reverses myocardial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg 2001;121:871-878.

169. Taylor DA, Atkins BZ, Hungspreugs P, Jones TR, Reedy MC, Hutcheson KA, Glower DD, Kraus WE: Regenerating functional myocardium: improved performance after skeletal myoblast transplantation. Nat Med 1998;4:929-933.

170. Zuk PA, Zhu M, Mizuno H, Huang J, Futrell JW, Katz AJ, Benhaim P, Lorenz HP, Hedrick MH: Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Eng 2001;7:211-228.

171. Wickham MQ, Erickson GR, Gimble JM, Vail TP, Guilak F: Multipotent stromal cells derived from the infrapatellar fat pad of the knee. Clin Orthop 2003:196-212.

172. Barry FP, Boynton RE, Haynesworth S, Murphy JM, Zaia J: The monoclonal antibody SH-2, raised against human mesenchymal stem cells, recognizes an epitope on endoglin (CD 105). Biochem Biophys Res Commun 1999;265:134-139.

173. Bruder SP, Kurth AA, Shea M, Hayes WC, Jaiswal N, Kadiyala S: Bone regeneration by implantation of purified, culture-expanded human mesenchymal stem cells. J Orthop Res 1998;16:155-162.

174. Haynesworth SE, Baber MA, Caplan AI: Cell surface antigens on human marrow-derived mesenchymal cells are detected by monoclonal antibodies. Bone 1992;13:69-80.

175. Kuznetsov SA, Friedenstein AJ, Robey PG: Factors required for bone marrow stromal fibroblast colony formation in vitro. Br J Haematol 1997;97:561-570.

176. Majumdar MK, Thiede MA, Mosca JD, Moorman M, Gerson SL: Phenotypic and functional comparison of cultures of marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) and stromal cells. J Cell Physiol 1998;176:57-66.

177. Safford KM, Hicok KC, Safford SD, Halvorsen YD, Wilkison WO, Gimble JM, Rice HE: Neurogenic differentiation of murine and human adipose-derived stromal cells. Biochem Biophys Res Commun 2002;294:371-379.

178. Kang SK, Jun ES, Bae YC, Jung JS: Interactions between human adipose stromal cells and mouse neural stem cells in vitro. Brain Res Dev Brain Res 2003;145:141-149.

179. Kang SK, Lee DH, Bae YC, Kim HK, Baik SY, Jung JS: Improvement of neurological deficits by intracerebral transplantation of human adipose tissue-derived stromal cells after cerebral ischemia in rats. Exp Neurol 2003;183:355-366.

180. Kawasaki H, Mizuseki K, Nishikawa S, Kaneko S, Kuwana Y, Nakanishi S, Nishikawa SI, Sasai Y: Induction of midbrain dopaminergic neurons from ES cells by stromal cell-derived inducing activity. Neuron 2000;28:31-40.

181. Chen X, Katakowski M, Li Y, Lu D, Wang L, Zhang L, Chen J, Xu Y, Gautam S, Mahmood A, Chopp M: Human bone marrow stromal cell cultures conditioned by traumatic brain tissue extracts: growth factor production. J Neurosci Res 2002;69:687-691.

182. Li Y, Chen J, Chen XG, Wang L, Gautam SC, Xu YX, Katakowski M, Zhang LJ, Lu M, Janakiraman N, Chopp M: Human marrow stromal cell therapy for stroke in rat: neurotrophins and functional recovery. Neurology 2002;59:514-523.

183. Jonasson L, Hansson GK, Bondjers G, Bengtsson G, Olivecrona T: Immunohistochemical localization of lipoprotein lipase in human adipose tissue. Atherosclerosis 1984;51:313-326.

184. Ducy P, Zhang R, Geoffroy V, Ridall AL, Karsenty G: Osf2/Cbfal: a transcriptional activator of osteoblast differentiation. Cell 1997;89:747-754.

185. Benson MD, Bargeon JL, Xiao G, Thomas PE, Kim A, Cui Y, Franceschi RT: Identification of a homeodomain binding element in the bone sialoprotein gene promoter that is required for its osteoblast-selective expression. J Biol Chem 2000;275:13907-13917.

186. Lieberman JR, Le LQ, Wu L, Finerman GA, Berk A, Witte ON, Stevenson S: Regional gene therapy with a BMP-2-producing murine stromal cell line induces heterotopic and orthotopic bone formation in rodents. J Orthop Res 1998;16:330-339.

187. Mizuno H, Zuk PA, Zhu M, Lorenz HP, Benhaim P, Hedrick MH: Myogenic differentiation by human processed lipoaspirate cells. Plast Reconstr Surg 2002;109:199-209; discussion 210-191.

188. Abderrahim-Ferkoune A, Bezy O, Astri-Roques S, Elabd C, Ailhaud G, Amri EZ: Transdifferentiation of preadipose cells into smooth muscle-like cells: role of aortic carboxypeptidase-like protein. Exp Cell Res 2004;293:219-228.

189. Pfeffer MA, Braunwald E: Ventricular remodeling after myocardial infarction. Experimental observations and clinical implications. Circulation 1990;81:1161-1172.

190. Orlic D: Adult bone marrow stem cells regenerate myocardium in ischemic heart disease. Ann N Y Acad Sei 2003;996:152-157.

191. Orlic D, Kajstura J, Chimenti S, Bodine DM, Leri A, Anversa P: Bone marrow stem cells regenerate infarcted myocardium. Pediatr Transplant 2003;7 Suppl 3:86-88.

192. Reffelmann T, Dow JS, Dai W, Hale SL, Simkhovich BZ, Kloner RA: Transplantation of neonatal cardiomyocytes after permanent coronary artery occlusion increases regional blood flow of infarcted myocardium. J Mol Cell Cardiol 2003;35:607-613.

193. Yao M, Dieterle T, Hale SL, Dow JS, Kedes LH, Peterson KL, Kloner RA: Long-term outcome of fetal cell transplantation on postinfarction ventricular remodeling and function. J Mol Cell Cardiol 2003;35:661-670.

194. Hutcheson KA, Atkins BZ, Hueman MT, Hopkins MB, Glower DD, Taylor DA: Comparison of benefits on myocardial performance of cellular cardiomyoplasty with skeletal myoblasts and fibroblasts. Cell Transplant 2000;9:359-368.

195. Dib N, Diethrich EB, Campbell A, Goodwin N, Robinson B, Gilbert J, Hobohm DW, Taylor DA: Endoventricular transplantation of allogenic skeletal myoblasts in a porcine model of myocardial infarction. J Endovasc Ther 2002;9:313-319.

196. Pouzet B, Vilquin JT, Hagege AA, Scorsin M, Messas E, Fiszman M, Schwartz K, Menasche P: Factors affecting functional outcome after autologous skeletal myoblast transplantation. Ann Thorac Surg 2001;71:844-850; discussion 850-841.

197. Planat-Benard V, Menard C, Andre M, Puceat M, Perez A, Garcia-Verdugo JM, Penicaud L, Casteilla L: Spontaneous cardiomyocyte differentiation from adipose tissue stroma cells. Circ Res 2004;94:223-229.

198. Ho IC, Kim JH, Rooney JW, Spiegelman BM, Glimcher LH: A potential role for the nuclear factor of activated T cells family of transcriptional regulatory proteins in adipogenesis. ProcNatl Acad Sei U S A 1998;95:15537-15541.

199. Moore KJ, Rosen ED, Fitzgerald ML, Randow F, Andersson LP, Altshuler D, Milstone DS, Mortensen RM, Spiegelman BM, Freeman MW: The role of PPAR-gamma in macrophage differentiation and cholesterol uptake. Nat Med 2001;7:41-47.

200. Pelton PD, Zhou L, Demarest KT, Burns TP: PPARgamma activation induces the expression of the adipocyte fatty acid binding protein gene in human monocytes. Biochem Biophys Res Commun 1999;261:456-458.

201. Cousin B, Munoz O, Andre M, Fontanilles AM, Dani C, Cousin JL, Laharrague P, Casteilla L, Penicaud L: A role for preadipocytes as macrophage-like cells. Faseb J 1999; 13:305312.

202. Gimble JM, Robinson CE, Wu X, Kelly KA: The function of adipocytes in the bone marrow stroma: an update. Bone 1996;19:421-428.

203. Lorenz E, Uphoff D, Reid TR, Shelton E: Modification of irradiation injury in mice and guinea pigs by bone marrow injections. J Natl Cancer Inst 1951;12:197-201.

204. Kodama HA, Amagai Y, Koyama H, Kasai S: A new preadipose cell line derived from newborn mouse calvaria can promote the proliferation of pluripotent hemopoietic stem cells in vitro. J Cell Physiol 1982;112:89-95.

205. Couffinhal T, Silver M, Zheng LP, Kearney M, Witzenbichler B, Isner JM: Mouse model of angiogenesis. Am J Pathol 1998;152:1667-1679.

206. Howell JC, Lee WH, Morrison P, Zhong J, Yoder MC, Srour EF: Pluripotent stem cells identified in multiple murine tissues. Ann N Y Acad Sci 2003;996:158-173.

207. Miranville A, Heeschen C, Sengenes C, Curat CA, Busse R, Bouloumie A: Improvement of postnatal neovascularization by human adipose tissue-derived stem cells. Circulation 2004; 110:349-355.

208. Majumdar MK, Banks V, Peluso DP, Morris EA: Isolation, characterization, and chondrogenic potential of human bone marrow-derived multipotential stromal cells. J Cell Physiol 2000;185:98-106.

209. Graham CH, Fitzpatrick TE, McCrae KR: Hypoxia stimulates urokinase receptor expression through a heme protein-dependent pathway. Blood 1998;91:3300-3307.

210. Young HE, Steele TA, Bray RA, Detmer K, Blake LW, Lucas PW, Black AC, Jr.: Human pluripotent and progenitor cells display cell surface cluster differentiation markers

211. CD 10, CD 13, CD56, and MHC class-I. Proc Soc Exp Biol Med 1999;221:63-71.

212. Majdic O, Stockl J, Pickl WF, Bohuslav J, Strobl H, Scheinecker C, Stockinger H, Knapp W: Signaling and induction of enhanced cytoadhesiveness via the hematopoietic progenitor cell surface molecule CD34. Blood 1994;83:1226-1234.

213. Levine JA, Jensen MD, Eberhardt NL, O'Brien T: Adipocyte macrophage colony-stimulating factor is a mediator of adipose tissue growth. J Clin Invest 1998;101:1557-1564.

214. Li J, Yu X, Pan W, Unger RH: Gene expression profile of rat adipose tissue at the onset of high-fat-diet obesity. Am J Physiol Endocrinol Metab 2002;282:E1334-1341.

215. Weisberg SP, McCann D, Desai M, Rosenbaum M, Leibel RL, Ferrante AW, Jr.: Obesity is associated with macrophage accumulation in adipose tissue. J Clin Invest 2003;112:1796-1808.

216. Curat CA, Miranville A, Sengenes C, Diehl M, Tonus C, Busse R, Bouloumie A: From blood monocytes to adipose tissue-resident macrophages: induction of diapedesis by human mature adipocytes. Diabetes 2004;53:1285-1292.

217. Morrison SJ, Wandycz AM, Hemmati HD, Wright DE, Weissman IL: Identification of a lineage of multipotent hematopoietic progenitors. Development 1997;124:1929-1939.

218. Okada S, Nakauchi H, Nagayoshi K, Nishikawa S, Miura Y, Suda T: In vivo and in vitro stem cell function of c-kit- and Sea-1-positive murine hematopoietic cells. Blood 1992;80:3044-3050.

219. Spangrude GJ, Heimfeld S, Weissman IL: Purification and characterization of mouse hematopoietic stem cells. Science 1988;241:58-62.

220. Huang H, Auerbach R: Identification and characterization of hematopoietic stem cells from the yolk sac of the early mouse embryo. Proc Natl Acad Sci U S A 1993;90:10110-10114.

221. Izon DJ, Oritani K, Hamel M, Calvo CR, Boyd RL, Kincade PW, Kruisbeek AM: Identification and functional analysis of Ly-6A/E as a thymic and bone marrow stromal antigen. J Immunol 1996;156:2391-2399.

222. Welm BE, Tepera SB, Venezia T, Graubert TA, Rosen JM, Goodell MA: Sca-l(pos) cells in the mouse mammary gland represent an enriched progenitor cell population. Dev Biol 2002;245:42-56.

223. Al-Khaldi A, Eliopoulos N, Martineau D, Lejeune L, Lachapelle K, Galipeau J: Postnatal bone marrow stromal cells elicit a potent VEGF-dependent neoangiogenic response in vivo. Gene Ther 2003;10:621-629.

224. Kinnaird T, Stabile E, Burnett MS, Shou M, Lee CW, Barr S, Fuchs S, Epstein SE: Local delivery of marrow-derived stromal cells augments collateral perfusion through paracrine mechanisms. Circulation 2004;109:1543-1549.

225. Orlic D, Kajstura J, Chimenti S, Bodine DM, Leri A, Anversa P: Transplanted adult bone marrow cells repair myocardial infarcts in mice. Ann N Y Acad Sci 2001;938:221-229; discussion 229-230.

226. Kern PA, Svoboda ME, Eckel RH, Van Wyk JJ: Insulinlike growth factor action and production in adipocytes and endothelial cells from human adipose tissue. Diabetes 1989;38:710-717.

227. Wilkison WO, Choy L, Spiegelman BM: Biosynthetic regulation of monobutyrin, an adipocyte-secreted lipid with angiogenic activity. J Biol Chem 1991;266:16886-16891.

228. Yoon YS, Park JS, Tkebuchava T, Luedeman C, Losordo DW: Unexpected severe calcification after transplantation of bone marrow cells in acute myocardial infarction. Circulation 2004;109:3154-3157.